JP3538616B2 - 間質性肺炎治療薬および当該疾病の動物モデルの作成方法並びにそれを用いるスクリーニング方法 - Google Patents
間質性肺炎治療薬および当該疾病の動物モデルの作成方法並びにそれを用いるスクリーニング方法Info
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Description
技術分野
本発明は、インターロイキン18阻害剤および/または
インターロイキン２阻害剤の少なくとも1種または2種以
上を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬
に関する。 また、本発明は、間質性肺炎治療薬の動物モデルの作
成方法および当該動物モデルを用いる間質性肺炎治療薬
のスクリーニング方法に関する。 背景技術 間質性肺炎は、乾性咳嗽と息切れを主症状とし、とき
に発熱や関節痛などを伴う疾患であるが、全身性疾患に
合併する場合には、他の全身症状が認められる。 間質性肺炎には急性型と慢性型があり、急性型には、
ハンマン・リッチ症候群(Hamman-Rich syndrome)が知ら
れる。間質性肺炎の治療には、主としてステロイド剤が
用いられるが、一般に予後は不良で肺線維症へと移行す
るものが多く、肺線維症へ移行すれば重篤な経過を辿る
ため、間質性肺炎の治療ひいては肺線維症の予防・治療
のための新たな治療薬が求められている。 従来、ブレオマイシンやシリカをマウスに投与するこ
とによって肺線維症が誘導されることは知られていた
が、間質性肺炎の適当な動物モデルは知られていなかっ
た。 インターロイキン18（ＩＬ−１８）は、マクロファー
ジの産性するインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）誘導因
子として1995年に発見された最も新しいサイトカインで
ある[Nature 378,88-91(1995)]。ＩＬ−１８は、前駆体
（pro ＩＬ−１８）として合成された後、インターロイ
キン 1β変換酵素［カスパーゼ１(caspase-1)]等により
切断されて活性型（mature ＩＬ−１８）となる。マウ
スＩＬ−１８の前駆体は１９２個のアミノ酸よりなり、
その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。 また、ヒトＩＬ−１８の前駆体は１９３個のアミノ酸
よりなり、その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。 ＩＬ−１８の受容体は、ＩＬ−１受容体ファミリーに
属し、ＩＬ−１８ＲαとＩＬ−１８Ｒβとが知られてい
る。 ＩＬ−１８は、１型ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ１）やナチ
ュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）に作用してＩＦＮ−γの
産性を誘導するほか、細胞傷害性Ｔ細胞活性を増強させ
ることにより細胞傷害活性を増強することが知られてお
り、Ｔｈ１応答をもたらす炎症性サイトカインと考えら
れている。 これらのことからＴｈ１過剰反応が原因であるインシ
ュリン依存性糖尿病や多発性硬化症およびクローン病等
とＩＬ−１８との関連が注目されてきた。 しかしながら、これまで間質性肺炎とＩＬ−１８の関
連については全く知られていなかった。 インターロイキン2（ＩＬ−２)は、主としてＴ細胞
（ＣＤ４＋、ＣＤ８＋）が分泌するサイトカインで、１
３３個のアミノ酸よりなる。ＩＬ−２はT細胞増殖因子
（ＴＣＧＦ）とも呼ばれ、Ｔ細胞を増殖させるが、ＩＬ
−２はＴ細胞ばかりでなく、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロ
ファージ、好中球等にも作用を及ぼすことが知られてい
る。そして、これら細胞の細胞表面にはＩＬ−２受容体
が発現している。ＩＬ−２受容体は、α鎖、β鎖および
γ鎖のサブユニットからなる複合体であり、α鎖はTac
抗原とも呼ばれ、２５１個のアミノ酸よりなる。また、
γ鎖はＩＬ−４受容体、ＩＬ−７受容体およびＩＬ−９
受容体の第二のサブユニットであり、β鎖とγ鎖のサブ
ユニットはＩＬ-15受容体の第二および第三のサブユニ
ットである。 国際出願ＷＯ９９／５１５８０号公報には、ＩＬ−２
の産生を阻害するピラゾール誘導体が、免疫が介在する
疾患の治療に用いられることが開示されており、当該疾
患として、多数例示されている疾患のなかに肺線維症お
よび特発性間質性肺炎の記載も挙げられている。 しかしながら、例示されているいずれの疾患において
も、ＩＬ−２の産生を阻害することに基く治療効果につ
いては、何ら具体的な記載がない。 発明の開示 本発明の目的は、間質性肺炎の治療に用いられる新規
な間質性肺炎治療薬を提供することである。 また、本発明の目的は、間質性肺炎治療薬の動物モデ
ルの作成方法および当該動物モデルを用いた間質性肺炎
治療薬のスクリーニング方法を提供することである。 本発明者は、ＩＬ−１８の生体内での役割を明らかに
するために、マウスにＩＬ−２を投与してリンパ球を活
性化させた状態で、ＩＬ−１８を投与した際の変化を観
察した。 その結果、ＩＬ−１８の投与により間質性肺炎が惹起
されることを見い出し、間質性肺炎の病態形成にＩＬ−
１８が深く係っていることを見い出した。 本発明者は、ＩＬ−１８の過剰な作用発現を抑えるこ
とによって間質性肺炎の発症が抑えられると考え、この
仮説を実証するためにＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒ
α）ノックアウト・マウスを用いて検討した結果、ＩＬ
−１８の働きを抑えることによって間質性肺炎の発症が
抑えられることを確かめて本発明を完成させた。 また、上記において、間質性肺炎はリンパ球を活性化
させた状態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症するこ
とからＩＬ−２の作用を抑制することによっても間質性
肺炎の発症が抑制されることを見い出した。 本発明は、ＩＬ−１８阻害剤および/またはＩＬ−２
阻害剤の少なくとも1種または2種以上を有効成分とする
ことを特徴とする間質性肺炎治療薬に関する。 さらに、上記においてＩＬ−１８およびＩＬ−２をげ
っ歯類に投与することによって間質性肺炎の動物モデル
を作成し得ることが見い出されたことから、当該動物モ
デルを用いる間質性肺炎治療薬のスクリーニングが可能
となった。従って、本発明は、間質性肺炎治療薬の動物
モデルの作成方法および当該動物モデルを用いた間質性
肺炎治療薬のスクリーニング方法に関する。 以下、本発明を詳細に説明する。 図面の簡単な説明 図１は正常C57BL/6マウス（陰性対照群）の顕微鏡写
真を示す図である。 図２は正常C57BL/6マウス（ブレオマイシン投与群）
の顕微鏡写真を示す図である。 図３はＩＬ−１８ノックアウト・マウス（ブレオマイ
シン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。 図４はＩＬ−１８受容体αノックアウト・マウス（ブ
レオマイシン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。 発明を実施するための最良の形態 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、過剰
に発現したＩＬ−１８の働きを抑える物質であれば特に
限定されない。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、例え
ば、pro ＩＬ−１８からmature ＩＬ−１８への変換を
阻害する物質が挙げられる。当該物質の具体例として
は、システインプロテアーゼの阻害剤を挙げることがで
きる。システインプロテアーゼの阻害剤としてはインタ
ーロイキン1β変換酵素阻害剤（カスパーゼ１の阻害
剤）が好適に使用できる。 また、本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤として
は、ＩＬ−１８結合蛋白質、抗ＩＬ−１８抗体等のＩＬ
−１８の活性を中和する物質およびＩＬ−１８受容体へ
のＩＬ−１８の結合を阻害する物質等が挙げられる。更
に、ＩＬ−１８受容体結合後のシグナル伝達の阻害剤等
が挙げられる。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、特
に、ＩＬ−１８受容体へのＩＬ−１８の結合を阻害する
物質が好適に使用される。 本発明に用いられるインターロイキン1β変換酵素阻
害剤としては、種々の化合物が知られており、具体例と
して、例えば、公開特許公報平５−２５５２１８号公報
に記載のペプチド誘導体、公開特許公報平１１−１４７
８７３号公報に記載のスルホンアミド誘導体、公表特許
公報平１０−５０４２８５号公報に記載のペプチド誘導
体、公開特許公報平１１−１４７８９５号公報に記載の
グリシン誘導体および国際出願ＷＯ９７／２４３３９号
公報に記載のテトラゾール誘導体等が挙げられる。 ＩＬ−１８結合蛋白質は、文献[Immunity,10,127-136
(1999)]に記載の方法に準じて調整することができる。 ＩＬ−１８に特異的なモノクローナル抗体は、文献
[J.Immunol.Methods,217,97-102(1998)]に記載の方法に
準じて調製することができる。 ＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）へのＩＬ−１８
の結合を阻害する物質の具体例としては、例えば、ＩＬ
−１８受容体蛋白質およびＩＬ−１８の受容体に特異的
なモノクローナル抗体等を挙げることができる。 上記ＩＬ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗
体は、哺乳動物由来の抗体、キメラ抗体または擬人化抗
体のいずれであっても良い。 本発明に用いられるＩＬ−１８受容体蛋白質およびＩ
Ｌ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗体は、例
えば、特開平１１−１００４００号公報に記載の方法に
準じて調製することができる。 本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、過剰に
発現したＩＬ−２の働きを抑える物質であれば、特に限
定されない。 本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、例え
ば、抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物
質、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体（ＩＬ−２融合
蛋白）のようにＩＬ−２のアンタゴニストとして作用す
る物質およびＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害
する物質等が挙げられる。ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２
の結合を阻害する物質としては、ＩＬ−２受容体のα
鎖、β鎖および／またはγ鎖のサブユニットに結合する
抗体およびリガンドを挙げることができる。 抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物質
は、例えば、特開昭６０−２４６３２２号公報に記載さ
れている。 ＩＬ−２のアンタゴニストとして作用する物質は、例
えば、特公平６−９２３１８号公報に記載されている。
また、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体製剤は、T細
胞皮膚リンパ腫、乾癬等の治療薬として、DAB389 IL-2
およびオンターク（ONTAK）（商品名）等の開発が進め
られている。ONTAKは、T細胞皮膚リンパ腫の治療薬とし
て、すでに米国においては上市されている。 ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害する物質の
具体例としては、抗体ＩＬ−２受容体に特異的な抗体が
挙げられる。 抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体は、例えば、公開特
許公報昭６２−５６４４０号公報、特開平５−２４４９
８２号公報および公開特許公報平７−１６５７９５号公
報に開示されている。 抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体としては、モノクロ
ーナル抗体が好ましい。抗ＩＬ−２受容体に特異的なモ
ノクローナル抗体としては、例えば、抗ＩＬ−２受容体
ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化抗Tac抗体）が好適
に使用される。ヒト化抗Tac抗体は、米国特許５５３０
１０１号公報に開示されている。また、ヒト化抗Tac抗
体は、腎臓移植における拒絶反応抑止薬としてゼナパッ
クス（Zenapax）の商品名で既に米国等において上市さ
れている。 本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、経口投与用製
剤、注射剤または吸入剤等種々の製剤形態で患者に投与
することができる。 また、本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、ステロイ
ド剤等、間質性肺炎に用いられる他の薬剤と組み合わせ
て使用することもできる。更に、本発明に使用されるイ
ンターロイキン 1β変換酵素阻害剤、ＩＬ−１８結合蛋
白質、抗ＩＬ−１８抗体、ＩＬ−１８の受容体に特異的
なモノクローナル抗体、抗ＩＬ−２抗体、ＩＬ−２融合
蛋白およびＩＬ−２受容体に特異的なモノクローナル抗
体等を適宜2種以上組み合わせて使用することもでき
る。 本発明の間質性肺炎治療薬の各種製剤は、常法により
製造することができる。例えば、経口投与のための剤型
としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤および散
剤等があり、これらの製剤は、本発明に用いられるＩＬ
−１８阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくと
も1種または2種以上と、乳糖、コーンスターチ、結晶セ
ルロース、ステアリン酸マグネシウム、カルボキシメチ
ルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、タルク等の通常の医薬品添加物とを適宜混合し、常
法により製造される。 注射剤は、常法によって製造することができ、適宜、
マンニトール、塩化ナトリウム、グルコース、ソルビッ
ト、グリセロール、キシリトール、フルクトース、マル
トース、マンノース等の等張化剤、亜硫酸ナトリウム、
アルブミン等の安定化剤、ベンジルアルコール、パラヒ
ドロキシ安息香酸メチル等の保存剤等を製剤中に添加す
ることができる。 注射剤は、用時溶解用の凍結乾燥製剤とすることもで
きる。凍結乾燥製剤は、常法によって製造することがで
き、適宜、上記、等張化剤、安定化剤、保存剤等を製剤
中に添加することができる。 吸入剤は、常法によって製造することができ、本発明
に用いられるＩＬ−１８阻害剤および/またはＩＬ−２
阻害剤の少なくとも1種または2種を生理食塩液に溶解ま
たは懸濁させ、適宜、マンニトール、塩化ナトリウム、
グルコース、ソルビット、グリセロール、キシリトー
ル、フルクトース、マルトース、マンノース等の等張化
剤、亜硫酸ナトリウム、アルブミン等の安定化剤、ベン
ジルアルコール、パラヒドロキシ安息香酸メチル等の保
存剤等を添加して調製される。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤および/または
ＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種が、ＩＬ−１
８またはＩＬ−２の受容体に特異的なモノクローナル抗
体である場合には、本発明の間質性肺炎治療薬は、通常
注射剤もしくは吸入剤として用いられる。当該注射剤も
しくは吸入剤の製造も常法によって行うことができる。 本発明の間質性肺炎治療薬の投与量は、本発明に用い
られる阻害剤の種類、投与経路、患者の病態、年齢、体
重などによってもそれぞれ異なるが、通常、１日当たり
０．１ｍｇから１，０００ｍｇであり、これを１度にま
たは２〜３回に分けて適宜投与する。 本発明に包含される間質性肺炎治療薬の動物モデルに
使用されるげっ歯類としては、マウス、ラット等が挙げ
られるが、マウスが好ましい。 本発明の間質性肺炎の動物モデルは、ＩＬ−１８およ
びＩＬ−２を、例えば、後記試験例１に示すようにマウ
スに連続投与することによって容易に作成することがで
きる。 また、このようにして作成された間質性肺炎の動物モ
デルに、適宜、被検薬を投与し、被検薬の当該モデル動
物に対する効果（例えば、生存率等）を検討することに
よって、間質性肺炎治療薬のスクリーニングを行うこと
ができる。 本発明の効果は、以下の試験例１から試験例３の試験
結果から明らかである。 試験例１−（１） ＩＬ−２＋ＩＬ−１８投与による間質性肺炎発症の証明
（１）： (1)試験方法： C57BL/6およびBALB/cの２系統のマウスについて、そ
れぞれ以下の試験を行った。両系統のマウスは全て６週
令の雌を使用した。 マウス（１群５−10匹）を群分けし、１日１回連続１
０日間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１１
日目に回収された。 回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をヘマトキシ
リン−エオシン（ＨＥ）染色し、検鏡した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２ およびリコンビナント・マウ
スＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： C57BL/6 系統； 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）およびＩＬ−１８単独投与群（グループ３）では
全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−１８の量が0.04μｇの群（グループ４）では全てのマ
ウスが生存したが、0.1μｇ、0.5μｇ、1μｇ、2μｇの
群（グループ５−８）ではマウスの生存率は0-10%であ
り、ＩＬ−１８の量に依存してマウスの生存期間が短縮
した。 BALB/c系統； 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）およびＩＬ−１８単独投与群（グループ３）では
全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−１８の量が0.04μｇの群（グループ４）と0.1μｇの
群（グループ５）でのマウスの生存率は90-100%であっ
たが、0.5μｇ、1μｇ、2μｇの群（グループ６−８）
でのマウスの生存率は0-20%であり、ＩＬ−１８の量に
依存してマウスの生存期間が短縮した。 解剖したマウスのＨＥ染色では、肺のみに病変が認め
られ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には異
常は認められなかった。肺では、間質にリンパ球が湿潤
し、肺胞構造の一部が破壊される等、間質性肺炎の症状
が認められた。 なお、C57BL/6マウスに、ＩＬ−２（50,000IU）とＩ
Ｌ−１８（0.2μｇ）とを0.2mlPBSに懸濁し、１日１
回、14日間腹腔内に連続投与し15日以降に回収したマウ
スでは、肺の線維化が認められた。 以上の結果から、ＩＬ−２共存下において、ＩＬ−１
８の量に依存して間質性肺炎が発症し、呼吸不全により
死亡することが判った。即ち、ＩＬ−１８の作用発現を
抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが示唆
された。 試験例１−（２） ＩＬ−２＋ＩＬ−１８投与による間質性肺炎発症の証明
（２）： (1)試験方法： C57BL/6マウスについて、上記試験例１−（１）に引
き続いて以下の試験を行った。マウスは全て６週令の雌
を使用した。 マウス（１群10匹）を群分けし、１日１回連続１４日
間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１４日目
に回収された。 回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色
し、検鏡した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２およびリコンビナント・マウス
ＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）では全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−２の量が100IUの群（グループ３）および1,000IUの群
（グループ４）では全てのマウスが生存したが、10,000
IUの群（グループ５）ではマウスの生存率は60%であ
り、50,000IUの群（グループ６）および100,000IUの群
（グループ７）は全例死亡した。また、ＩＬ−２の量に
依存してマウスの生存期間が短縮した。 解剖したマウスのＨＥ染色では、ＩＬ−２とＩＬ−１
８を同時に投与した群では、肺のみに致死的な病変が認
められ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には
致死に至るほどの病理学的変化は認められなかった。肺
では、間質にリンパ球が急激にまた著明に浸潤し、肺胞
構造の一部が破壊される等、間質性肺炎患者の肺病理像
とほぼ同一の病理学的変化が認められた。 以上の結果から、ＩＬ−１８存在下においては、Ｉｌ
−２の過剰発現によって間質性肺炎が発症し、呼吸不全
により死亡することが判った。即ち、ＩＬ−２の作用発
現を抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが
示唆された。 上記試験例１−（1）および（2）の結果から、間質性
肺炎は、ＩＬ−２およびＩＬ−１８の少なくとも何れか
一方の作用発現を抑えることによって治療し得ることが
示唆された。 試験例２ ＩＬ−１８受容体ノックアウト・マウスによる間質性肺
炎発症機序の解明： (1)試験方法： 実験動物には、K.Hoshino等の方法[J.Immunol.,162,5
041-5044(1999)]で作成した129/SvJマウスのＩＬ−１８
受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト・マウス（１群
５匹、７週令の雌）と対照群として129Tcrのワイルド・
タイプ(wild type)（１群５匹、15週令の雌）を使用し
た。 両群のマウスに、ＩＬ−２(50,000IU)とＩＬ−１８(1
μg)とを0.2ml PBSに懸濁し、１日１回、17日間腹腔内
に連続投与した。全てのマウスを18日目に回収し、回収
されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色し、検鏡
した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２およびリコンビナント・マウス
ＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： 対照群の18日目における生存率が20%であったのに対
し、ＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト
・マウス群は、全て生存した。 解剖したすべてのワイルド・タイプマウスのＨＥ染色
では、肺のみに病変が認められ、肝臓、心臓、腎臓、消
化器等その他の臓器には異常は認められなかった。肺で
は、間質にリンパ球が浸潤し、肺胞構造の一部が破壊さ
れる等、間質性肺炎の症状が認められた。一方、すべて
のＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト・
マウス群では全く間質性肺炎の症状が認められなかっ
た。 上記の結果から、間質性肺炎発症の機序が、少なくと
もＩＬ−１８の過剰発現に依存することが明らかにされ
た。即ち、この過剰なＩＬ−１８の作用発現を抑えるこ
とによって間質性肺炎が治療し得ることが解明された。 試験例３： ＩＬ−１８ノックアウト・マウス、ＩＬ−１８受容体α
ノックアウト・マウスによるブレオマイシン肺炎の抑
制： (1)試験方法： ６週令雌の正常C57BL/6マウス（１群５匹、体重約20
ｇ）、ＩＬ−１８ノックアウト・マウス（１群５匹、体
重約20ｇ）、ＩＬ−１８受容体αノックアウト・マウス
（１群５匹、体重約20ｇ）にブレオマイシン2mgを含む
0.2mlのPBSを尾静脈により投与した。これら正常C57BL/
6マウス、ＩＬ−１８ノックアウト・マウスおよびＩＬ
−１８受容体αノックアウト・マウスを7日目に処分し
マウスの肺の組織を光学顕微鏡で観察した。なお、陰性
対照群として、正常C57BL/6マウスに溶媒（PBS 0.2ml）
のみを同様に投与した群を用いた。 (2)試験結果： 顕微鏡写真を図１から４に示した。ＩＬ−１８ノック
アウト・マウスおよびＩＬ−１８受容体αノックアウト
・マウスでは正常C57BL/6マウスと比べ肺間質部、血管
部へのリンパ球浸潤が抑制された。 これらの事実よりＩＬ−１８を抑制することでブレオ
マイシンによる肺炎（肺線維症）が抑制された。 以下に、実施例を挙げて、本発明をさらに具体的に説
明する。 実施例１ 注射剤： ヒトＩＬ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗
体が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅菌した後、
１アンプルに５ｍｌずつ分注することにより、ヒトＩＬ
−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗体を含有す
る注射剤(５ｍｇ／アンプル）が調製される。 実施例２ 注射剤： 抗ＩＬ−２受容体ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化
抗Tac抗体）が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅
菌した後、１アンプルに１００ｍｌずつ分注することに
より、ヒト化抗Tac抗体を含有する点滴用注射剤（１０
０ｍｇ／アンプル）が調製される。 産業上の利用可能性 本発明の間質性肺炎治療薬は、間質性肺炎の病態形成
に深く関与するＩＬ−１８の過剰な作用発現を抑えるこ
とによって治療効果をもたらす。また、本発明の間質性
肺炎治療薬は、間質性肺炎がリンパ球を活性化させた状
態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症することから、
当該ＩＬ−２の作用を抑制することによっても治療効果
をもたらす。 本発明の間質性肺炎治療薬によって、間質性肺炎から
肺線維症への移行が抑制されるため、本発明の間質性肺
炎治療薬は、肺線維症の予防・治療薬としても有用であ
る。 また、本発明に包含される間質性肺炎治療薬の動物モ
デルは、ヒトにおける間質性肺炎の臨床所見に非常に近
いことから、当該動物モデルを用いる間質性肺炎治療薬
のスクリーニング方法によって、臨床上の有効性が期待
し得る薬剤を的確にスクリーニングすることができる。
インターロイキン２阻害剤の少なくとも1種または2種以
上を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬
に関する。 また、本発明は、間質性肺炎治療薬の動物モデルの作
成方法および当該動物モデルを用いる間質性肺炎治療薬
のスクリーニング方法に関する。 背景技術 間質性肺炎は、乾性咳嗽と息切れを主症状とし、とき
に発熱や関節痛などを伴う疾患であるが、全身性疾患に
合併する場合には、他の全身症状が認められる。 間質性肺炎には急性型と慢性型があり、急性型には、
ハンマン・リッチ症候群(Hamman-Rich syndrome)が知ら
れる。間質性肺炎の治療には、主としてステロイド剤が
用いられるが、一般に予後は不良で肺線維症へと移行す
るものが多く、肺線維症へ移行すれば重篤な経過を辿る
ため、間質性肺炎の治療ひいては肺線維症の予防・治療
のための新たな治療薬が求められている。 従来、ブレオマイシンやシリカをマウスに投与するこ
とによって肺線維症が誘導されることは知られていた
が、間質性肺炎の適当な動物モデルは知られていなかっ
た。 インターロイキン18（ＩＬ−１８）は、マクロファー
ジの産性するインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）誘導因
子として1995年に発見された最も新しいサイトカインで
ある[Nature 378,88-91(1995)]。ＩＬ−１８は、前駆体
（pro ＩＬ−１８）として合成された後、インターロイ
キン 1β変換酵素［カスパーゼ１(caspase-1)]等により
切断されて活性型（mature ＩＬ−１８）となる。マウ
スＩＬ−１８の前駆体は１９２個のアミノ酸よりなり、
その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。 また、ヒトＩＬ−１８の前駆体は１９３個のアミノ酸
よりなり、その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。 ＩＬ−１８の受容体は、ＩＬ−１受容体ファミリーに
属し、ＩＬ−１８ＲαとＩＬ−１８Ｒβとが知られてい
る。 ＩＬ−１８は、１型ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ１）やナチ
ュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）に作用してＩＦＮ−γの
産性を誘導するほか、細胞傷害性Ｔ細胞活性を増強させ
ることにより細胞傷害活性を増強することが知られてお
り、Ｔｈ１応答をもたらす炎症性サイトカインと考えら
れている。 これらのことからＴｈ１過剰反応が原因であるインシ
ュリン依存性糖尿病や多発性硬化症およびクローン病等
とＩＬ−１８との関連が注目されてきた。 しかしながら、これまで間質性肺炎とＩＬ−１８の関
連については全く知られていなかった。 インターロイキン2（ＩＬ−２)は、主としてＴ細胞
（ＣＤ４＋、ＣＤ８＋）が分泌するサイトカインで、１
３３個のアミノ酸よりなる。ＩＬ−２はT細胞増殖因子
（ＴＣＧＦ）とも呼ばれ、Ｔ細胞を増殖させるが、ＩＬ
−２はＴ細胞ばかりでなく、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロ
ファージ、好中球等にも作用を及ぼすことが知られてい
る。そして、これら細胞の細胞表面にはＩＬ−２受容体
が発現している。ＩＬ−２受容体は、α鎖、β鎖および
γ鎖のサブユニットからなる複合体であり、α鎖はTac
抗原とも呼ばれ、２５１個のアミノ酸よりなる。また、
γ鎖はＩＬ−４受容体、ＩＬ−７受容体およびＩＬ−９
受容体の第二のサブユニットであり、β鎖とγ鎖のサブ
ユニットはＩＬ-15受容体の第二および第三のサブユニ
ットである。 国際出願ＷＯ９９／５１５８０号公報には、ＩＬ−２
の産生を阻害するピラゾール誘導体が、免疫が介在する
疾患の治療に用いられることが開示されており、当該疾
患として、多数例示されている疾患のなかに肺線維症お
よび特発性間質性肺炎の記載も挙げられている。 しかしながら、例示されているいずれの疾患において
も、ＩＬ−２の産生を阻害することに基く治療効果につ
いては、何ら具体的な記載がない。 発明の開示 本発明の目的は、間質性肺炎の治療に用いられる新規
な間質性肺炎治療薬を提供することである。 また、本発明の目的は、間質性肺炎治療薬の動物モデ
ルの作成方法および当該動物モデルを用いた間質性肺炎
治療薬のスクリーニング方法を提供することである。 本発明者は、ＩＬ−１８の生体内での役割を明らかに
するために、マウスにＩＬ−２を投与してリンパ球を活
性化させた状態で、ＩＬ−１８を投与した際の変化を観
察した。 その結果、ＩＬ−１８の投与により間質性肺炎が惹起
されることを見い出し、間質性肺炎の病態形成にＩＬ−
１８が深く係っていることを見い出した。 本発明者は、ＩＬ−１８の過剰な作用発現を抑えるこ
とによって間質性肺炎の発症が抑えられると考え、この
仮説を実証するためにＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒ
α）ノックアウト・マウスを用いて検討した結果、ＩＬ
−１８の働きを抑えることによって間質性肺炎の発症が
抑えられることを確かめて本発明を完成させた。 また、上記において、間質性肺炎はリンパ球を活性化
させた状態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症するこ
とからＩＬ−２の作用を抑制することによっても間質性
肺炎の発症が抑制されることを見い出した。 本発明は、ＩＬ−１８阻害剤および/またはＩＬ−２
阻害剤の少なくとも1種または2種以上を有効成分とする
ことを特徴とする間質性肺炎治療薬に関する。 さらに、上記においてＩＬ−１８およびＩＬ−２をげ
っ歯類に投与することによって間質性肺炎の動物モデル
を作成し得ることが見い出されたことから、当該動物モ
デルを用いる間質性肺炎治療薬のスクリーニングが可能
となった。従って、本発明は、間質性肺炎治療薬の動物
モデルの作成方法および当該動物モデルを用いた間質性
肺炎治療薬のスクリーニング方法に関する。 以下、本発明を詳細に説明する。 図面の簡単な説明 図１は正常C57BL/6マウス（陰性対照群）の顕微鏡写
真を示す図である。 図２は正常C57BL/6マウス（ブレオマイシン投与群）
の顕微鏡写真を示す図である。 図３はＩＬ−１８ノックアウト・マウス（ブレオマイ
シン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。 図４はＩＬ−１８受容体αノックアウト・マウス（ブ
レオマイシン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。 発明を実施するための最良の形態 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、過剰
に発現したＩＬ−１８の働きを抑える物質であれば特に
限定されない。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、例え
ば、pro ＩＬ−１８からmature ＩＬ−１８への変換を
阻害する物質が挙げられる。当該物質の具体例として
は、システインプロテアーゼの阻害剤を挙げることがで
きる。システインプロテアーゼの阻害剤としてはインタ
ーロイキン1β変換酵素阻害剤（カスパーゼ１の阻害
剤）が好適に使用できる。 また、本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤として
は、ＩＬ−１８結合蛋白質、抗ＩＬ−１８抗体等のＩＬ
−１８の活性を中和する物質およびＩＬ−１８受容体へ
のＩＬ−１８の結合を阻害する物質等が挙げられる。更
に、ＩＬ−１８受容体結合後のシグナル伝達の阻害剤等
が挙げられる。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤としては、特
に、ＩＬ−１８受容体へのＩＬ−１８の結合を阻害する
物質が好適に使用される。 本発明に用いられるインターロイキン1β変換酵素阻
害剤としては、種々の化合物が知られており、具体例と
して、例えば、公開特許公報平５−２５５２１８号公報
に記載のペプチド誘導体、公開特許公報平１１−１４７
８７３号公報に記載のスルホンアミド誘導体、公表特許
公報平１０−５０４２８５号公報に記載のペプチド誘導
体、公開特許公報平１１−１４７８９５号公報に記載の
グリシン誘導体および国際出願ＷＯ９７／２４３３９号
公報に記載のテトラゾール誘導体等が挙げられる。 ＩＬ−１８結合蛋白質は、文献[Immunity,10,127-136
(1999)]に記載の方法に準じて調整することができる。 ＩＬ−１８に特異的なモノクローナル抗体は、文献
[J.Immunol.Methods,217,97-102(1998)]に記載の方法に
準じて調製することができる。 ＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）へのＩＬ−１８
の結合を阻害する物質の具体例としては、例えば、ＩＬ
−１８受容体蛋白質およびＩＬ−１８の受容体に特異的
なモノクローナル抗体等を挙げることができる。 上記ＩＬ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗
体は、哺乳動物由来の抗体、キメラ抗体または擬人化抗
体のいずれであっても良い。 本発明に用いられるＩＬ−１８受容体蛋白質およびＩ
Ｌ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗体は、例
えば、特開平１１−１００４００号公報に記載の方法に
準じて調製することができる。 本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、過剰に
発現したＩＬ−２の働きを抑える物質であれば、特に限
定されない。 本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、例え
ば、抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物
質、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体（ＩＬ−２融合
蛋白）のようにＩＬ−２のアンタゴニストとして作用す
る物質およびＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害
する物質等が挙げられる。ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２
の結合を阻害する物質としては、ＩＬ−２受容体のα
鎖、β鎖および／またはγ鎖のサブユニットに結合する
抗体およびリガンドを挙げることができる。 抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物質
は、例えば、特開昭６０−２４６３２２号公報に記載さ
れている。 ＩＬ−２のアンタゴニストとして作用する物質は、例
えば、特公平６−９２３１８号公報に記載されている。
また、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体製剤は、T細
胞皮膚リンパ腫、乾癬等の治療薬として、DAB389 IL-2
およびオンターク（ONTAK）（商品名）等の開発が進め
られている。ONTAKは、T細胞皮膚リンパ腫の治療薬とし
て、すでに米国においては上市されている。 ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害する物質の
具体例としては、抗体ＩＬ−２受容体に特異的な抗体が
挙げられる。 抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体は、例えば、公開特
許公報昭６２−５６４４０号公報、特開平５−２４４９
８２号公報および公開特許公報平７−１６５７９５号公
報に開示されている。 抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体としては、モノクロ
ーナル抗体が好ましい。抗ＩＬ−２受容体に特異的なモ
ノクローナル抗体としては、例えば、抗ＩＬ−２受容体
ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化抗Tac抗体）が好適
に使用される。ヒト化抗Tac抗体は、米国特許５５３０
１０１号公報に開示されている。また、ヒト化抗Tac抗
体は、腎臓移植における拒絶反応抑止薬としてゼナパッ
クス（Zenapax）の商品名で既に米国等において上市さ
れている。 本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、経口投与用製
剤、注射剤または吸入剤等種々の製剤形態で患者に投与
することができる。 また、本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、ステロイ
ド剤等、間質性肺炎に用いられる他の薬剤と組み合わせ
て使用することもできる。更に、本発明に使用されるイ
ンターロイキン 1β変換酵素阻害剤、ＩＬ−１８結合蛋
白質、抗ＩＬ−１８抗体、ＩＬ−１８の受容体に特異的
なモノクローナル抗体、抗ＩＬ−２抗体、ＩＬ−２融合
蛋白およびＩＬ−２受容体に特異的なモノクローナル抗
体等を適宜2種以上組み合わせて使用することもでき
る。 本発明の間質性肺炎治療薬の各種製剤は、常法により
製造することができる。例えば、経口投与のための剤型
としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤および散
剤等があり、これらの製剤は、本発明に用いられるＩＬ
−１８阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくと
も1種または2種以上と、乳糖、コーンスターチ、結晶セ
ルロース、ステアリン酸マグネシウム、カルボキシメチ
ルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、タルク等の通常の医薬品添加物とを適宜混合し、常
法により製造される。 注射剤は、常法によって製造することができ、適宜、
マンニトール、塩化ナトリウム、グルコース、ソルビッ
ト、グリセロール、キシリトール、フルクトース、マル
トース、マンノース等の等張化剤、亜硫酸ナトリウム、
アルブミン等の安定化剤、ベンジルアルコール、パラヒ
ドロキシ安息香酸メチル等の保存剤等を製剤中に添加す
ることができる。 注射剤は、用時溶解用の凍結乾燥製剤とすることもで
きる。凍結乾燥製剤は、常法によって製造することがで
き、適宜、上記、等張化剤、安定化剤、保存剤等を製剤
中に添加することができる。 吸入剤は、常法によって製造することができ、本発明
に用いられるＩＬ−１８阻害剤および/またはＩＬ−２
阻害剤の少なくとも1種または2種を生理食塩液に溶解ま
たは懸濁させ、適宜、マンニトール、塩化ナトリウム、
グルコース、ソルビット、グリセロール、キシリトー
ル、フルクトース、マルトース、マンノース等の等張化
剤、亜硫酸ナトリウム、アルブミン等の安定化剤、ベン
ジルアルコール、パラヒドロキシ安息香酸メチル等の保
存剤等を添加して調製される。 本発明に用いられるＩＬ−１８阻害剤および/または
ＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種が、ＩＬ−１
８またはＩＬ−２の受容体に特異的なモノクローナル抗
体である場合には、本発明の間質性肺炎治療薬は、通常
注射剤もしくは吸入剤として用いられる。当該注射剤も
しくは吸入剤の製造も常法によって行うことができる。 本発明の間質性肺炎治療薬の投与量は、本発明に用い
られる阻害剤の種類、投与経路、患者の病態、年齢、体
重などによってもそれぞれ異なるが、通常、１日当たり
０．１ｍｇから１，０００ｍｇであり、これを１度にま
たは２〜３回に分けて適宜投与する。 本発明に包含される間質性肺炎治療薬の動物モデルに
使用されるげっ歯類としては、マウス、ラット等が挙げ
られるが、マウスが好ましい。 本発明の間質性肺炎の動物モデルは、ＩＬ−１８およ
びＩＬ−２を、例えば、後記試験例１に示すようにマウ
スに連続投与することによって容易に作成することがで
きる。 また、このようにして作成された間質性肺炎の動物モ
デルに、適宜、被検薬を投与し、被検薬の当該モデル動
物に対する効果（例えば、生存率等）を検討することに
よって、間質性肺炎治療薬のスクリーニングを行うこと
ができる。 本発明の効果は、以下の試験例１から試験例３の試験
結果から明らかである。 試験例１−（１） ＩＬ−２＋ＩＬ−１８投与による間質性肺炎発症の証明
（１）： (1)試験方法： C57BL/6およびBALB/cの２系統のマウスについて、そ
れぞれ以下の試験を行った。両系統のマウスは全て６週
令の雌を使用した。 マウス（１群５−10匹）を群分けし、１日１回連続１
０日間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１１
日目に回収された。 回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をヘマトキシ
リン−エオシン（ＨＥ）染色し、検鏡した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２ およびリコンビナント・マウ
スＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： C57BL/6 系統； 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）およびＩＬ−１８単独投与群（グループ３）では
全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−１８の量が0.04μｇの群（グループ４）では全てのマ
ウスが生存したが、0.1μｇ、0.5μｇ、1μｇ、2μｇの
群（グループ５−８）ではマウスの生存率は0-10%であ
り、ＩＬ−１８の量に依存してマウスの生存期間が短縮
した。 BALB/c系統； 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）およびＩＬ−１８単独投与群（グループ３）では
全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−１８の量が0.04μｇの群（グループ４）と0.1μｇの
群（グループ５）でのマウスの生存率は90-100%であっ
たが、0.5μｇ、1μｇ、2μｇの群（グループ６−８）
でのマウスの生存率は0-20%であり、ＩＬ−１８の量に
依存してマウスの生存期間が短縮した。 解剖したマウスのＨＥ染色では、肺のみに病変が認め
られ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には異
常は認められなかった。肺では、間質にリンパ球が湿潤
し、肺胞構造の一部が破壊される等、間質性肺炎の症状
が認められた。 なお、C57BL/6マウスに、ＩＬ−２（50,000IU）とＩ
Ｌ−１８（0.2μｇ）とを0.2mlPBSに懸濁し、１日１
回、14日間腹腔内に連続投与し15日以降に回収したマウ
スでは、肺の線維化が認められた。 以上の結果から、ＩＬ−２共存下において、ＩＬ−１
８の量に依存して間質性肺炎が発症し、呼吸不全により
死亡することが判った。即ち、ＩＬ−１８の作用発現を
抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが示唆
された。 試験例１−（２） ＩＬ−２＋ＩＬ−１８投与による間質性肺炎発症の証明
（２）： (1)試験方法： C57BL/6マウスについて、上記試験例１−（１）に引
き続いて以下の試験を行った。マウスは全て６週令の雌
を使用した。 マウス（１群10匹）を群分けし、１日１回連続１４日
間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１４日目
に回収された。 回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色
し、検鏡した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２およびリコンビナント・マウス
ＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： 対照群（グループ１）、ＩＬ−２単独投与群（グルー
プ２）では全てのマウスが生存した。 ＩＬ−２とＩＬ−１８を同時に投与した群では、ＩＬ
−２の量が100IUの群（グループ３）および1,000IUの群
（グループ４）では全てのマウスが生存したが、10,000
IUの群（グループ５）ではマウスの生存率は60%であ
り、50,000IUの群（グループ６）および100,000IUの群
（グループ７）は全例死亡した。また、ＩＬ−２の量に
依存してマウスの生存期間が短縮した。 解剖したマウスのＨＥ染色では、ＩＬ−２とＩＬ−１
８を同時に投与した群では、肺のみに致死的な病変が認
められ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には
致死に至るほどの病理学的変化は認められなかった。肺
では、間質にリンパ球が急激にまた著明に浸潤し、肺胞
構造の一部が破壊される等、間質性肺炎患者の肺病理像
とほぼ同一の病理学的変化が認められた。 以上の結果から、ＩＬ−１８存在下においては、Ｉｌ
−２の過剰発現によって間質性肺炎が発症し、呼吸不全
により死亡することが判った。即ち、ＩＬ−２の作用発
現を抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが
示唆された。 上記試験例１−（1）および（2）の結果から、間質性
肺炎は、ＩＬ−２およびＩＬ−１８の少なくとも何れか
一方の作用発現を抑えることによって治療し得ることが
示唆された。 試験例２ ＩＬ−１８受容体ノックアウト・マウスによる間質性肺
炎発症機序の解明： (1)試験方法： 実験動物には、K.Hoshino等の方法[J.Immunol.,162,5
041-5044(1999)]で作成した129/SvJマウスのＩＬ−１８
受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト・マウス（１群
５匹、７週令の雌）と対照群として129Tcrのワイルド・
タイプ(wild type)（１群５匹、15週令の雌）を使用し
た。 両群のマウスに、ＩＬ−２(50,000IU)とＩＬ−１８(1
μg)とを0.2ml PBSに懸濁し、１日１回、17日間腹腔内
に連続投与した。全てのマウスを18日目に回収し、回収
されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色し、検鏡
した。 ＩＬ−２およびＩＬ−１８は、何れも市販の、リコン
ビナント・ヒトＩＬ−２およびリコンビナント・マウス
ＩＬ−１８を使用した。 (2)試験結果： 対照群の18日目における生存率が20%であったのに対
し、ＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト
・マウス群は、全て生存した。 解剖したすべてのワイルド・タイプマウスのＨＥ染色
では、肺のみに病変が認められ、肝臓、心臓、腎臓、消
化器等その他の臓器には異常は認められなかった。肺で
は、間質にリンパ球が浸潤し、肺胞構造の一部が破壊さ
れる等、間質性肺炎の症状が認められた。一方、すべて
のＩＬ−１８受容体(ＩＬ−１８Ｒα）ノックアウト・
マウス群では全く間質性肺炎の症状が認められなかっ
た。 上記の結果から、間質性肺炎発症の機序が、少なくと
もＩＬ−１８の過剰発現に依存することが明らかにされ
た。即ち、この過剰なＩＬ−１８の作用発現を抑えるこ
とによって間質性肺炎が治療し得ることが解明された。 試験例３： ＩＬ−１８ノックアウト・マウス、ＩＬ−１８受容体α
ノックアウト・マウスによるブレオマイシン肺炎の抑
制： (1)試験方法： ６週令雌の正常C57BL/6マウス（１群５匹、体重約20
ｇ）、ＩＬ−１８ノックアウト・マウス（１群５匹、体
重約20ｇ）、ＩＬ−１８受容体αノックアウト・マウス
（１群５匹、体重約20ｇ）にブレオマイシン2mgを含む
0.2mlのPBSを尾静脈により投与した。これら正常C57BL/
6マウス、ＩＬ−１８ノックアウト・マウスおよびＩＬ
−１８受容体αノックアウト・マウスを7日目に処分し
マウスの肺の組織を光学顕微鏡で観察した。なお、陰性
対照群として、正常C57BL/6マウスに溶媒（PBS 0.2ml）
のみを同様に投与した群を用いた。 (2)試験結果： 顕微鏡写真を図１から４に示した。ＩＬ−１８ノック
アウト・マウスおよびＩＬ−１８受容体αノックアウト
・マウスでは正常C57BL/6マウスと比べ肺間質部、血管
部へのリンパ球浸潤が抑制された。 これらの事実よりＩＬ−１８を抑制することでブレオ
マイシンによる肺炎（肺線維症）が抑制された。 以下に、実施例を挙げて、本発明をさらに具体的に説
明する。 実施例１ 注射剤： ヒトＩＬ−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗
体が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅菌した後、
１アンプルに５ｍｌずつ分注することにより、ヒトＩＬ
−１８の受容体に特異的なモノクローナル抗体を含有す
る注射剤(５ｍｇ／アンプル）が調製される。 実施例２ 注射剤： 抗ＩＬ−２受容体ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化
抗Tac抗体）が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅
菌した後、１アンプルに１００ｍｌずつ分注することに
より、ヒト化抗Tac抗体を含有する点滴用注射剤（１０
０ｍｇ／アンプル）が調製される。 産業上の利用可能性 本発明の間質性肺炎治療薬は、間質性肺炎の病態形成
に深く関与するＩＬ−１８の過剰な作用発現を抑えるこ
とによって治療効果をもたらす。また、本発明の間質性
肺炎治療薬は、間質性肺炎がリンパ球を活性化させた状
態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症することから、
当該ＩＬ−２の作用を抑制することによっても治療効果
をもたらす。 本発明の間質性肺炎治療薬によって、間質性肺炎から
肺線維症への移行が抑制されるため、本発明の間質性肺
炎治療薬は、肺線維症の予防・治療薬としても有用であ
る。 また、本発明に包含される間質性肺炎治療薬の動物モ
デルは、ヒトにおける間質性肺炎の臨床所見に非常に近
いことから、当該動物モデルを用いる間質性肺炎治療薬
のスクリーニング方法によって、臨床上の有効性が期待
し得る薬剤を的確にスクリーニングすることができる。
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早期審査対象出願
(56)参考文献 特開 昭64−25729（ＪＰ，Ａ)
Ｇｅｎ．Ｐｈａｒｍａｃ．，Ｖｏｌ.
27，Ｎｏ．３，ｐｐ．483−486，1996
アレルギー，Ｖｏｌ．41，Ｎｏ．３,
ｐｐ．428−433，1992
岡山医誌，104，ｐｐ．701−711,
1992
岡山医誌，105，ｐｐ．353−364,
1993
岡山医誌，102，ｐｐ．719−732,
1990
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
A01K 67/00
G01N 33/15
G01N 33/50
A61K 45/00
A61K 38/00
A61K 39/395
ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)
ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ)
ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (3)
- 【請求項１】 インターロイキン１８およびインターロ
イキン２をげっ歯類に投与することを特徴とする間質性
肺炎の動物モデルの作成方法。 - 【請求項２】 げっ歯類がマウスである請求項２に記載
の間質性肺炎の動物モデルの作成方法。 - 【請求項３】 請求項１または２に記載の間質性肺炎の
動物モデルを用いることを特徴とする間質性肺炎治療薬
のスクリーニング方法。
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