JP7429032B2 - 間質性肺炎モデル非ヒト動物の作製方法 - Google Patents
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Description
また、間質性肺炎では、肺胞壁が厚く硬くなる肺線維症を併発することが多い(非特許文献1)。
従って、本発明の課題は、間質性肺炎のモデル非ヒト動物の作製法及びその利用方法を提供することにある。
[1]抗ヒトMDA5抗体を非ヒト動物に静脈内投与し、ついでリポ多糖を腹腔内投与することを特徴とする間質性肺炎モデル非ヒト動物の作製方法。
[2]リポ多糖の腹腔内投与が、抗ヒトMDA5抗体の静脈内投与の2~4日後である[1]記載の作製方法。
[3]非ヒト動物が、マウスである[1]又は[2]記載の作製方法。
[4][1]~[3]のいずれかに記載の方法によって得られる間質性肺炎モデル非ヒト動物。
[5][4]記載の間質性肺炎モデル非ヒト動物に被験物質を投与し、肺の間質性変化を観察することを特徴とする間質性肺炎治療薬のスクリーニング方法。
また、抗ヒトMDA5抗体は、ヒトMDA5を動物に投与して得られる抗血清(ポリクローナル抗体)を用いてもよいし、常法に従って得られるモノクローナル抗体でもよい。
リポ多糖は、グラム陰性菌細胞壁外膜の構成成分であり、脂質及び多糖から構成される物質であり、例えばコスモバイオ社から販売されている市販品を使用することができる。リポ多糖の投与により、抗ヒトMDA5抗体の免疫原性が増強されるものと考えられる。
リポ多糖の投与部位は、腹腔内である。リポ多糖の投与量は、0.5~3mg/kgが好ましく、1~2mg/kgがより好ましい。
この非ヒト動物は、間質性肺炎の研究材料として、また間質性肺炎治療薬のスクリーニング方法に利用可能である。
本発明の間質性肺炎モデル非ヒト動物に被験物質を投与した場合に、被験物質を投与していない間質性肺炎モデル非ヒト動物の症状に比べて、前記の症状が改善されれば、その被験物質は間質性肺炎病治療薬である。
抗ヒトMDA5抗体は、抗MDA5抗体陽性患者の血液より分離した。血液から、抗ヒトMDA5抗体を抽出するには、プロテインGアッセイ法、例えばコスモバイオSpin column based Antibody Purification Kit (Protein G) CSR APK-10G 10 ASSAYを用い、添付文書通りに実施した。すなわち、(1)製品カラムを2mLチューブに装着する。(2)プレフィルドされているエタノールを6000回転30秒遠心し、フロースルーを破棄する。(3)Binding buffer 500μLでカラムを満たし、6000回転30秒遠心し、フロースルーを破棄する。(4)患者血漿サンプル 500μLでカラムを満たし、6000回転30秒遠心し、フロースルーを破棄する。(5)Wash buffer 500μLでカラムを満たし、6000回転30秒遠心し、フロースルーを破棄する。(6)2mL tubeを新しいtubeに変更し、Neutralization buffer 10μLを注入する。(7)Elution buffer 100μLでカラムを満たし6000回転30秒遠心し、フロースルー(精製抗体液)を回収する。この作業で1回につき約300μgの抗体を回収することが可能である。
図1記載の投与スケジュールに従って、C57BL/6Jマウス尾静脈内に、抗ヒトMDA5抗体600μg/200μLを投与した。その3日後に、リポ多糖50μg/100μL腹腔内投与した。更に11日後にマウスを解剖した。肺の両側下葉部位について、HE染色(ヘマトキシリン・エオジン染色)とMT染色(マッソン・トリクローム染色)を行った。
その結果を、図2、図3及び図4に示す。図2より、肺内への高度な炎症細胞浸潤が認められた。図3より、高度炎症による肺胞出が認められた。図4より、一部線維化像と間質性変化を生じることが示された。
これらの結果より、本発明の非ヒト動物は、間質性肺炎の非ヒト動物モデルとして有用であることが判明した。
Claims (4)
- 抗ヒトMDA5抗体を非ヒト動物に静脈内投与し、ついでリポ多糖を腹腔内投与することを特徴とする間質性肺炎モデル非ヒト動物の作製方法。
- リポ多糖の腹腔内投与が、抗ヒトMDA5抗体の静脈内投与の3日後である請求項1記載の作製方法。
- 非ヒト動物が、マウスである請求項1又は2記載の作製方法。
- 請求項1~3のいずれか1項記載の方法によって得られる間質性肺炎モデル非ヒト動物に被験物質を投与し、肺の間質性変化を観察することを特徴とする間質性肺炎治療薬のスクリーニング方法。
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Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000057913A1 (fr) | 1999-03-25 | 2000-10-05 | Welfide Corporation | Prophylaxies/remedes pour la pneumonie interstitielle et la fibrose pulmonaire |
WO2001080891A1 (fr) | 2000-04-25 | 2001-11-01 | Nippon Organon K. K. | Substances medicamenteuses destinees a la pneumonie interstitielle, procede de construction d'un modele animal de cette maladie et procede de criblage dans lequel on utilise ce dernier |
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JP2012125235A (ja) | 2010-11-25 | 2012-07-05 | Nagoya City Univ | 間質性肺炎モデル及びその用途 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000057913A1 (fr) | 1999-03-25 | 2000-10-05 | Welfide Corporation | Prophylaxies/remedes pour la pneumonie interstitielle et la fibrose pulmonaire |
WO2001080891A1 (fr) | 2000-04-25 | 2001-11-01 | Nippon Organon K. K. | Substances medicamenteuses destinees a la pneumonie interstitielle, procede de construction d'un modele animal de cette maladie et procede de criblage dans lequel on utilise ce dernier |
JP2009527502A (ja) | 2006-02-23 | 2009-07-30 | ファイブレックス メディカル リサーチ アンド デベロップメント ゲーエムベーハー | ペプチドおよびペプチド誘導体ならびにそれらを含有する医薬組成物 |
JP2012125235A (ja) | 2010-11-25 | 2012-07-05 | Nagoya City Univ | 間質性肺炎モデル及びその用途 |
JP2014527821A (ja) | 2011-09-23 | 2014-10-23 | セル・アイディアズ・ピーティーワイ・リミテッド | 脂肪細胞および細胞分泌物を使用する治療 |
JP2019520348A (ja) | 2016-06-01 | 2019-07-18 | バイエル・アニマル・ヘルス・ゲーエムベーハー | 動物におけるアレルギー性および/または炎症性疾患の治療および予防に有用な置換インダゾール |
Non-Patent Citations (2)
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Yoshiyuki Abe et al.,Clinical characteristics and change in the antibody titres of patients with anti-MDA5 antibody-positive inflammatory myositis,RHEUMATOLOGY,2017年,Vol .56 Issue 9,1492-1497 |
佐藤慎二,皮膚筋炎に伴う急速進行性間質性肺炎:MDA5,呼吸臨床,2017年,Vol. 1 No. 1,No. e00013 |
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