JP3437574B2

JP3437574B2 - ガンの治療のためのクレアチンホスフェート又はホスホエノールピルビン酸の使用

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Publication number: JP3437574B2
Application number: JP50989193A
Authority: JP
Inventors: ブリュ、ニコル; イズラエル、ビクトール
Original assignee: ブリュ、ニコル; イズラエル、ビクトール
Priority date: 1991-12-03
Filing date: 1992-12-01
Publication date: 2003-08-18
Anticipated expiration: 2018-08-18
Also published as: AU3260093A; RU94030808A; RU2097040C1; FR2684381A1; CZ134394A3; UA41285C2; ATE142499T1; DE69213757T2; HU216826B; CA2124793C; CZ284966B6; HU9401656D0; US5219846A; LV11821B; BG61595B1; KR100235893B1; EP0614366A1; DE69213757D1; SK280785B6; ES2094522T3

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、ガンの治療を意図した薬剤の調製のための
ホスホアミド結合若しくはエノールホスフェート結合を
有する化合物の使用に関する。

本説明のフレームワーク内で、ホスホアミド結合を有
する化合物は、その化学構造に下記の基を含有する任意
の化合物を意味すると解される。

このような化合物の好ましい例は、クレアチンホスフ
ェート（ホスフェートクレアチンとも呼ばれる）であ
る。これは、脊椎動物に広く存在する物質であり、また
これは、特に横紋筋に存在するが、血液及び細胞外液に
は存在しない。他の例にはアルギニンホスフェートがあ
り、これは、無脊椎動物の筋肉に見出される。

同様に、エノールホスフェート結合を有する化合物
は、その化学構造に以下の基を含有する任意の化合物を
意味すると解される。

このような化合物の好ましい例には、ホスホエノール
ピルビン酸があり、これは、解糖に含まれる内因性の代
謝産物であり、従って、生理学的な条件下では細胞に局
在化され、血液には存在しない。

上記の化合物のホスホアミド又はエノールホスフェー
ト結合は、いわゆるエネルギーに富んだ結合の一群に属
する。

EP−Ａ−0199117及びEP−Ａ−0222257の書類には、一
般的な条件下における心臓病及び特に心筋梗塞の治療の
ための結晶状態のホスホクレアチン及びそのナトリウム
塩の使用が開示されている。

WO83/02391の書類には、一般的な条件下におけるアデ
ノシン三リン酸と混合されたホスホエノールピルビン酸
の塩を含有する薬学的な組成物が開示されている。前記
組成物は、虚血によって細胞に起こるダメージを治療及
び防ぐためのものである。

US−4769318の書類は、種々のホスホエノールピルビ
ン酸誘導体を含有する溶液に関連している。この溶液
は、血液の保存のためのものである。

最後に、EP−Ａ−239−357の書類には、虚血に伴う心
臓若しくは腎臓病の治療のためにホスホエノールピルビ
ン酸の１ナトリウム塩を使用することが開示されてい
る。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有
する化合物が、特に種々の未知の薬学的性質、特に顕著
な抗腫瘍活性を有すること（これは本発明の基本であ
る）が発見された。

従って、本発明は主に、ホスホアミド又はエノールホ
スフェート結合から選択されるエネルギーに富んだ結合
を有する少なくとも１つの化合物を、腫瘍の治療を意図
した薬剤の調製のために使用することに関する。

目下の１つの好ましい態様において、エネルギーに富
んだ結合を有する上記の化合物は、クレアチンホスフェ
ート及びその薬学的に許容しうる塩、特にナトリウム塩
である。

他の態様としては、エネルギーに富んだ結合を有する
化合物はホスホエノールピルビン酸及びその薬学的に許
容しうる塩、特にナトリウム塩である。

本発明に従って得られる薬剤で処理されうる腫瘍は、
特に初期の腫瘍、又は化学療法に抵抗するようになる腫
瘍、例えばアデノカルチノーマ（結腸、膵臓、胃、気管
支、腎臓、乳房、子宮、卵巣）；類表皮癌（上気道消化
管（upper re−spiratory−digestive tract）、気管
支、尿路、肛門、皮膚）；悪性黒色腫；軟組織肉腫；白
血病；リンパ腫；及び多発性骨髄腫である。

これらの薬剤は、一般に従来の方法によって調製さ
れ、静脈的、巨丸薬又は間欠的若しくは連続的散布（pe
rfusion）の形態、動脈的、腹腔内的、又は筋肉内的に
投与される。これらの投与量は、24時間当たり50mgから
5g/kg体重まで変化する。

本発明の１つの特性に従えば、本薬剤は、投与量単位
の形態での組成物である。

有利には、投与量単位は0.1から50gの活性成分を含有
する。

好ましい態様では、この薬剤は、0.1から50gの活性成
分を含有する注射可能な製剤として製剤化される。

１つの有利な態様として、本薬剤の上記の活性成分
は、投与モードに適合した混合剤（bulking agent）で
希釈されうる。このような混合剤は、当業者に周知であ
り、特に有利な混合剤の例には以下のようなものがあ
る。

− マンニトール − ソルビトール − 無水リン酸二水素ナトリウム／リン酸水素ナトリウ
ムを含有するリン酸バッファー − クエン酸ナトリウム／クエン酸を含有するクエン酸
バッファー − ナトリウムラクテート／乳酸を含有する乳酸バッフ
ァー − 塩化ナトリウム我々の有利な態様において、上記の活性成分は、投与
モードに適合した再構成溶媒（reconstituting solven
t）に希釈されうる。

再構成溶媒は、当業者に周知である。この例としては
以下のようなものがある。

− 注射可能な製剤用の水； − 0.9％NaCl; − ５％〜15％のグルコース溶液； − 10〜20％のマンニトール； − 20〜30％ソルビトール； − クエン酸三ナトリウム塩溶液。

本発明はまた、人の腫瘍を治療するための方法を含む
こともねらいとしている。この方法は、ホスホアミド結
合又はエノールホスフェート結合を有する少なくとも１
種の化合物を治療として効果的な量投与することを具備
する。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有
する化合物の薬学的性質は、他の試験を用いて種々の腫
瘍細胞に関してクレアチンホスフェートの効果を評価す
ることによって行われる。

観測された効果が、この分子中のホスホアミド結合の
存在に起因することは明白である。

ホスホエノールピルビン酸に関する相補試験によっ
て、類似の薬学的性質が、エノールホスフェート結合を
有する化合物から得られうることが示唆される。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有
する化合物の薬学的性質を試験することを可能にさせる
実験計画及び結果が以下に示される。

1.方法 1.1特性腫瘍を、癌細胞の皮下接種によってヌードマウスに作
製した。この後、接種から１週間後にUP999−247で計画
されたクレアチンホスフェート又はNaClの腹腔内注射を
１週間に６又は７日行った。治療の後、動物の体重を量
り、腫瘍の大きさを毎週測定した。

1.2手順 1.2.1ヌードマウス中のヒト由来の癌の発育 Swiss系の４週齢ヌードマウスを、加圧下においてア
イソレーター（無菌環境）中で飼育した。

ヒト癌細胞系、即ちCaco2（結腸）、SK−MEL5（メラ
ノーマ）、Capan−１（膵臓）及びNCl−H69（小細胞
肺）は、10から20％のウシ胎児血清及び１％の可欠アミ
ノ酸を含有する異なった媒体で培養される。

PBS中の５×10⁶（SK−MEL5）、９×10⁶（Caco2）、２
×10⁵（Capan−１）、2.3×10⁶（NCl−H69）個の細胞
が、各々のマウスの右側に皮下的に接種された。操作は
無菌条件下のフード中で行われた。

接種の後毎週、動物の体重を測定し、腫瘍を滑りはさ
み尺（sliding caliper）で測定した。

該（半楕円体の）腫瘍の容積は、以下の式によって計
算した。

（DETHLEFSEN L.A.,PRWITT J.M.S.,MENDELSOHN M.
L.,腫瘍生成長曲線の分析（Analysis of tumor grow
th curves.）J.Natl.Cancer Institite,1968,40,389
−408;RADULOVIC S.,MILLER G.,SCHALLY A.V.,ボン
ベスチン／ガストリン遊離ペプチド拮抗剤（RC−3095）
を用いた治療によるヌードマウス中でのHT−29ヒト結腸
癌異種移植の成長阻害（Inhibition of growth of
HT−29 human colon cancer xenografts in nude
mice by treatment with bombesin/gastrin rel
easing peptide antagonist（RC−3095））Cancer R
es.,1991,51,6006−6009）。

1.2.2腫瘍成長のUP999−247の効果に関する研究治療は、接種の後７日で始め、UP999−247の腹腔内注
射（治療群）又は等張溶液（対照群）よりなる。それぞ
れの群は、10から15のマウスから構成されている。動物
（各々は背中に入れ墨をして識別できるようにしてあ
る）はマクローロンボックス（makrolon boxes）に区
分けした。治療の継続は、各々の試験系に対する治療の
対象に依存する。治療を停止したとき、腫瘍を除去し、
病理学的解剖の分析のためにボーインズ（Bouin's）固
定液で固定した。

1.2.3投与計画試験物は、0.9％NaCl中で使用され、0.2μｍのフィル
ターを用いて無菌にされた。これを1m／マウスの量で
腹腔内的に投与した。

対照群には1mの0.9％NaClを与えた。

投与計画は以下のとおりである。

１マウス当たり及び１回の注射当たり、0.04mmol、0.
1mmol、0.2mmol及び0.4mmol。

これらの投与量は、腹腔内投与によって使用されうる
最大投与量に従って、及び薬学的試験において予め決定
されている血漿濃度に従って選択される。

1.2.4結果の表示以下のパラメーターは測定した個々の値から計算し
た。

− ｇでの体重、平均±標準偏差、毎週測定した。

− mm³での腫瘍の容積、平均±標準偏差、毎週測定し
た。

2.結果結果は以下の表に示されている。

得られた結果は、ヒト起源の種々の報告された腫瘍を
有するヌードマウスにクレアチンホスフェートを投与し
た後に、腫瘍の増殖が阻害されたことを示している。

この阻害は、投与量依存性である。

体重の変化、及び動物の挙動を実験期間にわたって追
跡した。

生物化学的及び血液学的評価を、動物が死亡した後に
採集された血漿及び血液で行った。説明した実験条件下
で、クレアチンホスホフェートは大量死を招かなかっ
た。

観測された変動は、試験された最も高い投与量で治療
された動物のグループに関係し、これはトランスアミナ
ーゼ及びナトリウムの適度な増加、並びにアルカリ性ホ
スファターゼ及び形成される血液要素の減少に因ってい
る。

他の修正は、ラットで通常遭遇する変動に一致してい
る。

クレアチンホスフェートは、静脈内的に投与された24
00mg/kgまでの範囲の投与量で優れた生物学的耐性を示
した。

同様に、ホスホエノールピルビン酸は良い生物学的耐
性を示し、大量死を招くことなく500mg/kgまでの投与量
でラットに投与された。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有
する化合物を基にした薬学的組成物の非制限的な例は以
下に見出される。

クレアチンホスフェートは、すぐに使用できる無菌溶
液の形態、又は無菌の粉末若しくは凍結乾燥物の形態で
あり得る。この場合には、ラクトース、マンニトール、
無水リン酸二水素ナトリウム／リン酸水素ナトリウムを
含有するリン酸バッファー、クエン酸ナトリウム／クエ
ン酸を含有するクエン酸バッファー、ナトリウムラクテ
ート／乳酸を含有する乳酸バッファー、塩化ナトリウ
ム、又は任意の比率でのこれらの混合剤の混合物から選
択される薬学的活性の全くない混合剤を、当業者に周知
の方法で使用することが有利であり得る。

再構成溶媒は、通常使用される注射溶液（0.9％NaC
l、５％もしくは15％グルコース溶液、20〜30％ソルビ
トール、クエン酸三ナトリウム塩溶液又は注射可能な製
剤）から選択されるか、又は一般に使用される、任意の
他の利用しうる散布溶液であり得る。

好ましくは、薬学的製剤は、25gのクレアチンホスフ
ェートを含有する無菌の凍結乾燥物の形態を取り、100m
の0.9％塩化ナトリウムの溶液で再構成される。

例１ − クエン酸バッファー pH7 − クエン酸 0.0329％ − Na₂HPO₄・2H₂O 0.253％ − グルコース５％ − 注射可能な製剤のための水→ qsq 100％凍結乾燥物を使用する場合は、吸い上げ溶媒（take−
up solvent）は注射可能な製剤のための水である。

例２ − リン酸バッファー pH7.2 − Na₂HPO₄・2H₂O 0.758％ − NaH₂PO₄ 0.184％ − NaCl 0.44％ − 注射可能な製剤のための水→ qsq 100％例３ − マンニトール５％ − 注射可能な製剤のための水→ qsq 100％凍結乾燥物を使用する場合は、吸い上げ溶媒（take−
up solvent）は注射可能な製剤のための水である。

例４ − グルコース５％ − 注射可能な製剤のための水→ qsq 100％凍結乾燥物を使用する場合は、吸い上げ溶媒（take−
up solvent）は注射可能な製剤のための水である。

例５ − KH₂PO₄ 0.178％ − Na₂HPO₄・2H₂O 0.953％ − グルコース２％ − 注射可能な製剤のための水→ qsq 100％凍結乾燥物を使用する場合は、吸い上げ溶媒（take−
up solvent）は注射可能な製剤のための水である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者イズラエル、ビクトールフランス国、75014 パリ、リュ・エルネスト・クレッソン 16 (56)参考文献特表平４−506058（ＪＰ，Ａ) Ｏｕａｓｓｉｎｉ，Ａｂｄｅｌｈａｍｉｄ，ｅｔａｌ．，ＳｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＰ−ｔｒｉｃｈｌｏｒｏ−Ｎ−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｚｅｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｉｎ，ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．23，Ｎｏ．４, ｐ．347−352，1988 Ｌ．Ａ．Ｃａｔｅｓ，ｅｔａｌ．, Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ−ｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．22．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｒｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｅａｎａｌｏｇｕ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．21，Ｎｏ．11，ｐ．1146 −1149，1978 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 31/664 A61P 35/00

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】クレアチンホスフェート又はその薬学的に
許容し得る塩、特にナトリウム塩の一種を活性成分とし
て含有する腫瘍を治療するための薬剤。
【請求項２】該腫瘍が、アデノカルチノーマ、類表皮癌
及び悪性黒色腫から選択される請求の範囲第１項に記載
の薬剤。
【請求項３】投与量単位のクレアチンホスフェート又は
その薬学的に許容し得る塩の一種を活性成分として含有
する腫瘍を治療するための薬学的組成物。
【請求項４】該投与量単位が、0.1ないし50gの活性成分
を含有する請求の範囲第３項に記載の組成物。
【請求項５】注射可能な製剤の形態にある請求の範囲第
３項又は第４項に記載の組成物。