JP3272621B2 - 海苔から得られるペプチド混合物 - Google Patents
海苔から得られるペプチド混合物Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は海苔から得られる種
々の有効な薬理作用を有する新規なペプチド混合物に関
し、さらにこのペプチド混合物の用途に関する。
々の有効な薬理作用を有する新規なペプチド混合物に関
し、さらにこのペプチド混合物の用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】海苔はわが国において長い間一般に愛用
されている食品であり、近年特に健康食品として注目さ
れている。しかし、一般には海苔は板海苔として食する
か、あるいは多少の加工をして食するのが従来の利用方
法であって、海苔の機能や成分を他の食品形態や食品以
外の利用法にまで広げたものは少ない。その一つとし
て、あまのり属海藻から血管新生阻害活性を有するネオ
アガロオリゴ糖を製造したもの（特開平７−１６０９２
号）等がある程度である。
されている食品であり、近年特に健康食品として注目さ
れている。しかし、一般には海苔は板海苔として食する
か、あるいは多少の加工をして食するのが従来の利用方
法であって、海苔の機能や成分を他の食品形態や食品以
外の利用法にまで広げたものは少ない。その一つとし
て、あまのり属海藻から血管新生阻害活性を有するネオ
アガロオリゴ糖を製造したもの（特開平７−１６０９２
号）等がある程度である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】海苔の健康に有益な機
能性としては一般に、高血圧症、骨粗鬆症、高コレステ
ロール症等に対する効果や改善がいわれているが、本発
明者は海苔のこのような作用に着目し、海苔成分の中に
これらの活性を有するものを見出すべく努めた。すなわ
ち、本発明は、海苔の中の上記の機能性に寄与する成分
を見出し、これをより高めた状態で取り出して、海苔を
より効果的に健康の向上に利用するようにすることを目
的とするものである。
能性としては一般に、高血圧症、骨粗鬆症、高コレステ
ロール症等に対する効果や改善がいわれているが、本発
明者は海苔のこのような作用に着目し、海苔成分の中に
これらの活性を有するものを見出すべく努めた。すなわ
ち、本発明は、海苔の中の上記の機能性に寄与する成分
を見出し、これをより高めた状態で取り出して、海苔を
より効果的に健康の向上に利用するようにすることを目
的とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、海
苔を５０℃前後で１２時間以上ペプシン分解して得られ
るアンジオテンシン変換酵素阻害活性を有し、かつ下記
の性質を有するペプチド混合物に関する。 （Ａ）平均鎖長：２〜５ （Ｂ）分子量：２００〜２０，０００ （Ｃ）溶剤に対する溶解性：水に易溶であるが、エタノ
ール、アセトン、ヘキサンにほとんど溶解しない。
苔を５０℃前後で１２時間以上ペプシン分解して得られ
るアンジオテンシン変換酵素阻害活性を有し、かつ下記
の性質を有するペプチド混合物に関する。 （Ａ）平均鎖長：２〜５ （Ｂ）分子量：２００〜２０，０００ （Ｃ）溶剤に対する溶解性：水に易溶であるが、エタノ
ール、アセトン、ヘキサンにほとんど溶解しない。
【０００５】本発明のペプチド混合物は上記したように
平均鎖長が２〜５の範囲（トリニトロベンゼンスルホン
酸法による）で、ペプチドとして次の４種のうち少なく
とも２種を含む。 イソロイシン−チロシン メチオニン−リジン−チロシン ロイシン−アルギニン−チロシン アラニン−リジン−チロシン−セリン−チロシン 分子量に関しては、後記実施例１の（２）で得られたペ
プチド混合物のＧＳ−３２０ＨＱカラムを用いたＨＰＬ
Ｃカラムクロマトグラムを図１に示す。また、図２にそ
の紫外線吸収スペクトルを示す。
平均鎖長が２〜５の範囲（トリニトロベンゼンスルホン
酸法による）で、ペプチドとして次の４種のうち少なく
とも２種を含む。 イソロイシン−チロシン メチオニン−リジン−チロシン ロイシン−アルギニン−チロシン アラニン−リジン−チロシン−セリン−チロシン 分子量に関しては、後記実施例１の（２）で得られたペ
プチド混合物のＧＳ−３２０ＨＱカラムを用いたＨＰＬ
Ｃカラムクロマトグラムを図１に示す。また、図２にそ
の紫外線吸収スペクトルを示す。
【０００６】また、本発明は、上記ペプチド混合物また
は上記ペプチド混合物を含む海苔蛋白分解物の用途に関
するもので、上記ペプチド混合物を有効成分とする血圧
降下剤、および上記ペプチドまたは上記ペプチドを含む
海苔蛋白分解物を食品に混入してなる健康食品に関す
る。
は上記ペプチド混合物を含む海苔蛋白分解物の用途に関
するもので、上記ペプチド混合物を有効成分とする血圧
降下剤、および上記ペプチドまたは上記ペプチドを含む
海苔蛋白分解物を食品に混入してなる健康食品に関す
る。
【０００７】本発明のペプチド混合物を製造するには、
海苔をペプシンで５０℃前後で１２時間以上酵素分解
し、得られた分解液の上清を採取して粉末化するか、あ
るいはこれをさらに精製して得る。ただし、平均鎖長が
２〜５の範囲に収まり、かつイソロイシン−チロシン、
メチオニン−リジン−チロシン、ロイシン−アルギニン
−チロシン、アラニン−リジン−チロシン−セリン−チ
ロシンの４種類のヘプチドのうち最低２種類は含まれる
ような分解条件を選択する必要がある。実験的には酵素
分解反応は１２時間以上が好ましい。原料に用いる海苔
は、どのような海苔を用いても構わないが、乾海苔を用
いると得られるペプチド混合物も多い。通常、食品とし
て流通している、乾海苔を焙焼して製される焼海苔を原
料に用いた場合、ペプチド混合物の収率の低下、本ペプ
チド混合物が有する生理活性の一つであるアンジオテン
シンＩ変換酵素阻害活性の低下が認められる。但し、焙
焼されていない海苔であれば、品種、グレード等の差は
収率に若干の影響を及ぼすのみで大きな問題にはならな
い。
海苔をペプシンで５０℃前後で１２時間以上酵素分解
し、得られた分解液の上清を採取して粉末化するか、あ
るいはこれをさらに精製して得る。ただし、平均鎖長が
２〜５の範囲に収まり、かつイソロイシン−チロシン、
メチオニン−リジン−チロシン、ロイシン−アルギニン
−チロシン、アラニン−リジン−チロシン−セリン−チ
ロシンの４種類のヘプチドのうち最低２種類は含まれる
ような分解条件を選択する必要がある。実験的には酵素
分解反応は１２時間以上が好ましい。原料に用いる海苔
は、どのような海苔を用いても構わないが、乾海苔を用
いると得られるペプチド混合物も多い。通常、食品とし
て流通している、乾海苔を焙焼して製される焼海苔を原
料に用いた場合、ペプチド混合物の収率の低下、本ペプ
チド混合物が有する生理活性の一つであるアンジオテン
シンＩ変換酵素阻害活性の低下が認められる。但し、焙
焼されていない海苔であれば、品種、グレード等の差は
収率に若干の影響を及ぼすのみで大きな問題にはならな
い。
【０００８】ペプチド混合物またはペプチド混合物を含
む海苔蛋白分解物を製造する工程において、通常考えら
れる手法として、酸、アルカリによる分解や種々の酵素
による分解が考えられるが、酸、アルカリによる分解は
反応が急速に進み過ぎて制御が難しい。一方、酵素分解
においては、用いる酵素により、得られるペプチドも様
々である。そのなかで、生理活性の一つであるアンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害活性が高く、収率が高かったの
は、ペプシンによる分解であった。したがって、本発明
においては、ペプシンで分解することが必須条件とな
る。
む海苔蛋白分解物を製造する工程において、通常考えら
れる手法として、酸、アルカリによる分解や種々の酵素
による分解が考えられるが、酸、アルカリによる分解は
反応が急速に進み過ぎて制御が難しい。一方、酵素分解
においては、用いる酵素により、得られるペプチドも様
々である。そのなかで、生理活性の一つであるアンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害活性が高く、収率が高かったの
は、ペプシンによる分解であった。したがって、本発明
においては、ペプシンで分解することが必須条件とな
る。
【０００９】本発明のペプチド混合物を種々の用途に用
いる場合には、海苔蛋白分解物をそのまま用いても構わ
ないが、ペプチド以外のものも含まれているので、必要
に応じ限外濾過、吸着剤処理、その他適宜の方法でペプ
チド以外の成分を除去するのが好ましい。また、さらに
必要により、単独もしくは澱粉、デキストリン等の賦形
剤や他の食品素材あるいは食品添加物とともにスプレー
ドライ、凍結乾燥等適宜の方法により乾燥して用いる。
いる場合には、海苔蛋白分解物をそのまま用いても構わ
ないが、ペプチド以外のものも含まれているので、必要
に応じ限外濾過、吸着剤処理、その他適宜の方法でペプ
チド以外の成分を除去するのが好ましい。また、さらに
必要により、単独もしくは澱粉、デキストリン等の賦形
剤や他の食品素材あるいは食品添加物とともにスプレー
ドライ、凍結乾燥等適宜の方法により乾燥して用いる。
【００１０】本発明のペプチド混合物は血圧降下作用を
示し、血圧降下剤として使用することができる。血圧降
下作用は、アンジオテンシンＩ変換酵素（アンジオテン
シンＩを血圧上昇をもたらすアンジオテンシンIIに変換
する酵素）を抑制することによって行われる。アンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害剤としては、既に種々の物質が
見出されており、例えば合成物ではカプトプリル、エナ
プリル、アラセプリル等が、その高い阻害活性から現在
経口降圧剤として実用に供されている。また天然物由来
の阻害剤として、蛇毒ペプチドあるいは魚肉、カゼイン
等を酵素分解して得られるペプチド等が知られている。
本発明のペプチド混合物もアンジオテンシンＩ変換酵素
阻害活性が認められ、動物試験においても、血圧低下作
用を示した。
示し、血圧降下剤として使用することができる。血圧降
下作用は、アンジオテンシンＩ変換酵素（アンジオテン
シンＩを血圧上昇をもたらすアンジオテンシンIIに変換
する酵素）を抑制することによって行われる。アンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害剤としては、既に種々の物質が
見出されており、例えば合成物ではカプトプリル、エナ
プリル、アラセプリル等が、その高い阻害活性から現在
経口降圧剤として実用に供されている。また天然物由来
の阻害剤として、蛇毒ペプチドあるいは魚肉、カゼイン
等を酵素分解して得られるペプチド等が知られている。
本発明のペプチド混合物もアンジオテンシンＩ変換酵素
阻害活性が認められ、動物試験においても、血圧低下作
用を示した。
【００１１】また、本発明のペプチド混合物または該ペ
プチドを含む海苔蛋白分解物は、カルシウム沈殿阻止作
用、Ｔｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２等の変異原に対する抗変
異原活性、血漿コレステロール低下作用、免疫賦活作用
等を有し、本発明のペプチド混合物または該ペプチド混
合物を含む海苔蛋白分解物を食品に添加することによっ
て、これらの作用に基づく健康食品を得ることができ
る。
プチドを含む海苔蛋白分解物は、カルシウム沈殿阻止作
用、Ｔｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２等の変異原に対する抗変
異原活性、血漿コレステロール低下作用、免疫賦活作用
等を有し、本発明のペプチド混合物または該ペプチド混
合物を含む海苔蛋白分解物を食品に添加することによっ
て、これらの作用に基づく健康食品を得ることができ
る。
【００１２】カルシウム吸収促進作用はカルシウム沈殿
阻止作用によってもたらされ、ＣＰＰのカルシウム吸収
促進のメカニスムである。このような作用を有する食品
を摂取することで、骨粗鬆症の予防が期待できる。
阻止作用によってもたらされ、ＣＰＰのカルシウム吸収
促進のメカニスムである。このような作用を有する食品
を摂取することで、骨粗鬆症の予防が期待できる。
【００１３】また近年、食品中にガンを誘発する物質で
ある変異原物質が数多く存在することが明らかにされて
いる。例えば焼き魚のこげにふくまれるＴｒｐ−Ｐ−１
などがある。一方、食品中には、逆にガン予防の可能性
を秘めた成分も発見されてきている。その一つに上記の
Ｔｒｐ−Ｐ−１等の変異原を無毒化する作用を有するも
ので抗変異原性物質と称するものがあり、ガン予防の食
品として期待されている。例えば、野菜の煮汁、食物繊
維等が抗変異原活性がある事がすでに確認されている。
本発明のペプチド混合物もＴｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２等
の変異原に対して抗変異原活性を示した。
ある変異原物質が数多く存在することが明らかにされて
いる。例えば焼き魚のこげにふくまれるＴｒｐ−Ｐ−１
などがある。一方、食品中には、逆にガン予防の可能性
を秘めた成分も発見されてきている。その一つに上記の
Ｔｒｐ−Ｐ−１等の変異原を無毒化する作用を有するも
ので抗変異原性物質と称するものがあり、ガン予防の食
品として期待されている。例えば、野菜の煮汁、食物繊
維等が抗変異原活性がある事がすでに確認されている。
本発明のペプチド混合物もＴｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２等
の変異原に対して抗変異原活性を示した。
【００１４】血漿コレステロールを低下させる食品とし
ては、大豆蛋白質の酵素処理物、キトサンなどが開発さ
れ、特定保健用食品として実用化されている。本発明の
ペプチド混合物も血漿コレステロール低下作用を示して
いる。
ては、大豆蛋白質の酵素処理物、キトサンなどが開発さ
れ、特定保健用食品として実用化されている。本発明の
ペプチド混合物も血漿コレステロール低下作用を示して
いる。
【００１５】免疫賦活作用は、体内の免疫系を積極的に
高めることにより、細菌、ウイルス等に対する抵抗力を
より高めたり、もともと人間が有する制癌作用を高める
という作用で、予防医学では重要な要素である。従来
は、インターフェロン産生増強物質として、リン脂質、
塩基性蛋白質、キトサン誘導体が、抗体産生増強物質と
してラクトフェリンが、食細胞の活性化物質として、海
藻由来の硫酸多糖、カゼインペプチド、大豆ペプチド等
が知られている。本発明のペプチド混合物もＴＮＦ（腫
瘍壊死因子）活性の上昇を指標とした試験において活性
が確認された。
高めることにより、細菌、ウイルス等に対する抵抗力を
より高めたり、もともと人間が有する制癌作用を高める
という作用で、予防医学では重要な要素である。従来
は、インターフェロン産生増強物質として、リン脂質、
塩基性蛋白質、キトサン誘導体が、抗体産生増強物質と
してラクトフェリンが、食細胞の活性化物質として、海
藻由来の硫酸多糖、カゼインペプチド、大豆ペプチド等
が知られている。本発明のペプチド混合物もＴＮＦ（腫
瘍壊死因子）活性の上昇を指標とした試験において活性
が確認された。
【００１６】本発明のペプチド混合物は非常に簡単な製
造方法で得られ、しかも食品として汎用されていた天然
物から得られるものであるので、毒性や副作用の問題が
ない。したがって、医薬としてまたは健康食品として非
常に有用である。
造方法で得られ、しかも食品として汎用されていた天然
物から得られるものであるので、毒性や副作用の問題が
ない。したがって、医薬としてまたは健康食品として非
常に有用である。
【００１７】
【発明の実施の形態】以下、実施例によって本発明をさ
らに詳細に説明するが、本発明はこれにより何等制限さ
れるものではない。 （実施例１） （１）海苔蛋白分解物の調製 乾海苔を高速粉砕機にて３５ｍｅｓｈに微粉化したもの
５０ｇを、ＨＣｌ−ＫＣｌ緩衝液（ＰＨ＝２．０）９５
０ｍｌに混濁し、ペプシン（天野製薬製）２ｇを加え、
攪拌下５０℃で２４時間反応させた。得られた分解液を
ＮａＯＨの１Ｎ溶液にて中和し、１４０００ｒｐｍで２
０分間遠心分離し、上清をグラスフィルターにて濾過し
た。その後、直ちに沸騰浴中に２０分間保持して酵素を
失活させた。保存のために凍結乾燥を行い、粉末化し
た。
らに詳細に説明するが、本発明はこれにより何等制限さ
れるものではない。 （実施例１） （１）海苔蛋白分解物の調製 乾海苔を高速粉砕機にて３５ｍｅｓｈに微粉化したもの
５０ｇを、ＨＣｌ−ＫＣｌ緩衝液（ＰＨ＝２．０）９５
０ｍｌに混濁し、ペプシン（天野製薬製）２ｇを加え、
攪拌下５０℃で２４時間反応させた。得られた分解液を
ＮａＯＨの１Ｎ溶液にて中和し、１４０００ｒｐｍで２
０分間遠心分離し、上清をグラスフィルターにて濾過し
た。その後、直ちに沸騰浴中に２０分間保持して酵素を
失活させた。保存のために凍結乾燥を行い、粉末化し
た。
【００１８】比較試験として、原料に焼海苔、酵素とし
てプロテアーゼＰ（天野製薬製）、ビオプラーゼＳＰ−
４およびデナチームＡＰ（ナガセ生化学工業製）をそれ
ぞれ用いて、海苔蛋白分解物を同様に調製した。それぞ
れの収量結果を表１に示し、ペプシン分解より得られた
海苔蛋白分解物の一般成分分析値を表２に示す。
てプロテアーゼＰ（天野製薬製）、ビオプラーゼＳＰ−
４およびデナチームＡＰ（ナガセ生化学工業製）をそれ
ぞれ用いて、海苔蛋白分解物を同様に調製した。それぞ
れの収量結果を表１に示し、ペプシン分解より得られた
海苔蛋白分解物の一般成分分析値を表２に示す。
【００１９】
【表１】
【００２０】
【表２】
【００２１】（２）ペプチド混合物の調製 上記（１）で得られた海苔蛋白分解物の粉末を蒸留水７
００ｍｌに溶解し、ＨＣｌで置換したバイオラッド社製
Ｄｏｗｅｘ−５０（Ｈ＋）カラム（φ４．５ｃｍ×４３
ｃｍ）に負荷し、５リットルの蒸留水で洗浄後、２Ｎア
ンモニア水にて吸着しているペプチドを溶出し、エバポ
レーターにてアンモニアを除去した後、凍結乾燥にてペ
プチド混合物１６ｇを得た。ペプチド混合物の一般成分
分析値を表３に示す。
００ｍｌに溶解し、ＨＣｌで置換したバイオラッド社製
Ｄｏｗｅｘ−５０（Ｈ＋）カラム（φ４．５ｃｍ×４３
ｃｍ）に負荷し、５リットルの蒸留水で洗浄後、２Ｎア
ンモニア水にて吸着しているペプチドを溶出し、エバポ
レーターにてアンモニアを除去した後、凍結乾燥にてペ
プチド混合物１６ｇを得た。ペプチド混合物の一般成分
分析値を表３に示す。
【００２２】
【表３】
【００２３】（試験例） 試験例１：アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害活
性の測定 試験管に所定濃度に溶解した実施例１（１）の海苔蛋白
分解物および比較試験分解物をそれぞれ５０μｌ入れ、
次いで酵素基質としてＬ−ヒプリルヒスチジルロイシン
（ペプチド研究所製）を１２．５ｍＭの濃度になるよう
に、１．０Ｍ塩化ナトリウムを含む硼酸緩衝液（ＰＨ＝
８．３）に溶解して、これを上記試験管に１００μｌ添
加し、最後に２５ｍＵ／ｍｌになるように蒸留水に溶か
したアンジオテンシンＩ変換酵素溶液を１００μｌ加え
て３７℃にて１時間反応させた。
性の測定 試験管に所定濃度に溶解した実施例１（１）の海苔蛋白
分解物および比較試験分解物をそれぞれ５０μｌ入れ、
次いで酵素基質としてＬ−ヒプリルヒスチジルロイシン
（ペプチド研究所製）を１２．５ｍＭの濃度になるよう
に、１．０Ｍ塩化ナトリウムを含む硼酸緩衝液（ＰＨ＝
８．３）に溶解して、これを上記試験管に１００μｌ添
加し、最後に２５ｍＵ／ｍｌになるように蒸留水に溶か
したアンジオテンシンＩ変換酵素溶液を１００μｌ加え
て３７℃にて１時間反応させた。
【００２４】その後、ＨＣｌの０．５Ｎ溶液２５０μｌ
を加えて反応を停止し、５分間放置後、酢酸エチル１．
５ｍｌを管壁に伝わらせながら加え、激しく攪拌後、遠
心分離（３０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）を行い、上層
（酢酸エチル層）０．５ｍｌを採取し、乾熱器にて１２
０℃、３０分間で酢酸エチルを蒸発させた後、生成した
馬尿酸を１．０Ｍ塩化ナトリウム３ｍｌにて溶解し、２
２８ｎｍにて吸光度を測定した。
を加えて反応を停止し、５分間放置後、酢酸エチル１．
５ｍｌを管壁に伝わらせながら加え、激しく攪拌後、遠
心分離（３０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）を行い、上層
（酢酸エチル層）０．５ｍｌを採取し、乾熱器にて１２
０℃、３０分間で酢酸エチルを蒸発させた後、生成した
馬尿酸を１．０Ｍ塩化ナトリウム３ｍｌにて溶解し、２
２８ｎｍにて吸光度を測定した。
【００２５】サンプルでの吸光度をＥｓ、サンプルの代
わりに蒸留水を加えた時の値をＥｃ、予め反応停止液を
加えて反応させた時の値をＥｂとして、阻害率（％）＝
｛（Ｅｃ−Ｅｓ）／（Ｅｃ−Ｅｂ）｝×１００で表し
た。アンジオテンシン変換酵素阻害の阻害活性ＩＣ５０
値は、アンジオテンシン変換酵素を５０％阻害するため
に必要なサンプル濃度である。結果を表４に示した。
わりに蒸留水を加えた時の値をＥｃ、予め反応停止液を
加えて反応させた時の値をＥｂとして、阻害率（％）＝
｛（Ｅｃ−Ｅｓ）／（Ｅｃ−Ｅｂ）｝×１００で表し
た。アンジオテンシン変換酵素阻害の阻害活性ＩＣ５０
値は、アンジオテンシン変換酵素を５０％阻害するため
に必要なサンプル濃度である。結果を表４に示した。
【００２６】
【表４】
【００２７】 試験例２：ラットへの投与時の降圧効果 日本チャールズリバー（株）より１５週令雄性高血圧自
然発症ラット（ＳＨＲ）を購入し、１週間の予備飼育
後、収縮期血圧が１９０ｍｍＨｇ以上（体重２８０−３
３０ｇ）の動物３匹１群として用い、実施例１（２）の
ペプチド混合物を５０ｍｇ経口投与した。血圧は非観血
的尾動脈血圧測定装置（（株）理研開発製、ＰＳ−１０
０型）を用い、ｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法により、投与前、
投与後１時間、２時間、３時間、４時間、５時間のＳＨ
Ｒ尾動脈の収縮期血圧（ＳＢＰ）、平均血圧（ＭＢ
Ｐ）、拡張期血圧（ＤＢＰ）の測定を測定時間毎に５回
行い、得られた測定値の最高値と最低値を棄却し、３回
の平均値をもって各時間の測定値とした。結果を図３に
示す。
然発症ラット（ＳＨＲ）を購入し、１週間の予備飼育
後、収縮期血圧が１９０ｍｍＨｇ以上（体重２８０−３
３０ｇ）の動物３匹１群として用い、実施例１（２）の
ペプチド混合物を５０ｍｇ経口投与した。血圧は非観血
的尾動脈血圧測定装置（（株）理研開発製、ＰＳ−１０
０型）を用い、ｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法により、投与前、
投与後１時間、２時間、３時間、４時間、５時間のＳＨ
Ｒ尾動脈の収縮期血圧（ＳＢＰ）、平均血圧（ＭＢ
Ｐ）、拡張期血圧（ＤＢＰ）の測定を測定時間毎に５回
行い、得られた測定値の最高値と最低値を棄却し、３回
の平均値をもって各時間の測定値とした。結果を図３に
示す。
【００２８】 試験例３：カルシウム沈殿阻止能の測定 リン酸緩衝液中における、ペプチド混合物共存下での塩
化カルシウムの沈殿阻止能を測定した。すなわち、サン
プルとして所定の濃度に蒸留水に溶解した実施例１
（２）のペプチド混合物溶液３ｍｌと２０ｍＭ塩化カル
シウム溶液１ｍｌを混和後、５ｍＭリン酸緩衝液（ＰＨ
７．０）４ｍｌを加え、３７℃で２時間放置し、遠心分
離後（３０００×ｇ、１０分）の上清中に溶けているカ
ルシウムを測定した。尚、比較のためにＣＰＰを用いて
同様の実験を行った。結果を図４に示す。
化カルシウムの沈殿阻止能を測定した。すなわち、サン
プルとして所定の濃度に蒸留水に溶解した実施例１
（２）のペプチド混合物溶液３ｍｌと２０ｍＭ塩化カル
シウム溶液１ｍｌを混和後、５ｍＭリン酸緩衝液（ＰＨ
７．０）４ｍｌを加え、３７℃で２時間放置し、遠心分
離後（３０００×ｇ、１０分）の上清中に溶けているカ
ルシウムを測定した。尚、比較のためにＣＰＰを用いて
同様の実験を行った。結果を図４に示す。
【００２９】試験例４：抗変異原活性の測定 抗変異原活性の測定は、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐ
ｈｉｍｕｒｉｕｍ菌の突然変異に関与しているｕｍｕ遺
伝子の発現を、β−ガラクトシダーゼ活性を指標として
測定するｕｍｕ−ｔｅｓｔを用いて行った。すなわち変
異原としてＴｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２とを用い、実施例
１（２）のペプチド混合物を添加しないものをコントロ
ールとし、β−ガラクトシダーゼ活性を発色基質Ｘ−ｇ
ａｌの発色により測定し比較した。結果を図５および図
６に示す。
ｈｉｍｕｒｉｕｍ菌の突然変異に関与しているｕｍｕ遺
伝子の発現を、β−ガラクトシダーゼ活性を指標として
測定するｕｍｕ−ｔｅｓｔを用いて行った。すなわち変
異原としてＴｒｐ−Ｐ−１、ＡＦ−２とを用い、実施例
１（２）のペプチド混合物を添加しないものをコントロ
ールとし、β−ガラクトシダーゼ活性を発色基質Ｘ−ｇ
ａｌの発色により測定し比較した。結果を図５および図
６に示す。
【００３０】 試験例５：ラットへの投与時の血漿コレステロール濃度
低下効果 実験動物として４週令の雄性Ｗｉｓｔａｒ系ＳＴラット
を市販固形飼料で１週間予備飼育し、５匹１群として３
週間の飼育実験を行った。試験飼料は、実施例１（２）
のペプチド混合物をＭＦ粉末飼料（オリエンタル酵母工
業製）に７％（粗蛋白質量として６．９％）配合したも
のとし、対照区の飼料はＭＦ粉末飼料のみとした。飼料
は毎日交換し、飲料水とともに自由摂取させた。動物飼
育室は室温２５℃、湿度５０±５％に保ち、１２時間ご
との明暗サイクル（午前８時点灯、午後８時消灯）に調
製した。試験終了後、ラットを断頭して血液を採取後、
直ちに血漿脂質成分（総コレステロール、遊離コレステ
ロール、トリグリセリド、リン脂質）の定量を酵素法に
より行った。それぞれの測定値を表５に示す。
低下効果 実験動物として４週令の雄性Ｗｉｓｔａｒ系ＳＴラット
を市販固形飼料で１週間予備飼育し、５匹１群として３
週間の飼育実験を行った。試験飼料は、実施例１（２）
のペプチド混合物をＭＦ粉末飼料（オリエンタル酵母工
業製）に７％（粗蛋白質量として６．９％）配合したも
のとし、対照区の飼料はＭＦ粉末飼料のみとした。飼料
は毎日交換し、飲料水とともに自由摂取させた。動物飼
育室は室温２５℃、湿度５０±５％に保ち、１２時間ご
との明暗サイクル（午前８時点灯、午後８時消灯）に調
製した。試験終了後、ラットを断頭して血液を採取後、
直ちに血漿脂質成分（総コレステロール、遊離コレステ
ロール、トリグリセリド、リン脂質）の定量を酵素法に
より行った。それぞれの測定値を表５に示す。
【００３１】
【表５】
【００３２】 試験例６：腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）レベルの上昇作用の
測定 ７週令の雄性Ｃ３Ｈ／ＨＣマウスに、実施例１（２）の
ペプチド混合物を経口投与し、３時間後に０．３ｍｇの
ピシバニール（ＯＫ−４３２）を静脈内投与し、その２
時間後に血液を得、血中の腫瘍壊死因子活性をＣ９２８
細胞に対する阻害活性で検定した。結果を表６に示す。
測定 ７週令の雄性Ｃ３Ｈ／ＨＣマウスに、実施例１（２）の
ペプチド混合物を経口投与し、３時間後に０．３ｍｇの
ピシバニール（ＯＫ−４３２）を静脈内投与し、その２
時間後に血液を得、血中の腫瘍壊死因子活性をＣ９２８
細胞に対する阻害活性で検定した。結果を表６に示す。
【００３３】
【表６】
【００３４】（実施例２） 実施例１（１）で調製した海苔蛋白分解物を５重量％に
なるように溶かした鶏卵にてとき卵を５０ｇ調製し、食
塩６ｇ、醤油３ｇ、グラニュー糖３ｇ、風味調味料（か
つお、椎茸、昆布）２ｇ、水１５０ｇにて調製したスー
プストックと合わせ、それぞれ５０ｇづつトレイに充填
し、凍結乾燥を行い、たまごスープを作製した。
なるように溶かした鶏卵にてとき卵を５０ｇ調製し、食
塩６ｇ、醤油３ｇ、グラニュー糖３ｇ、風味調味料（か
つお、椎茸、昆布）２ｇ、水１５０ｇにて調製したスー
プストックと合わせ、それぞれ５０ｇづつトレイに充填
し、凍結乾燥を行い、たまごスープを作製した。
【００３５】（実施例３） 実施例１（２）で調製したペプチド混合物５ｇ、塩化ナ
トリウム９ｇ、クロロブタノール５ｇ、炭酸水素ナトリ
ウム１ｇを、蒸留水１０００ｍｌに溶解し、これを２本
の点滴ビンに分注し、抗高血圧用輸液を得た。
トリウム９ｇ、クロロブタノール５ｇ、炭酸水素ナトリ
ウム１ｇを、蒸留水１０００ｍｌに溶解し、これを２本
の点滴ビンに分注し、抗高血圧用輸液を得た。
【００３６】
【発明の効果】以上説明したように、本発明の海苔をペ
プシン分解して得られるペプチド混合物は血圧低下作用
があり、血圧降下剤として有用である。また、このペプ
チド混合物またはこれをを含む海苔蛋白分解物は、カル
シウム沈殿阻止、抗変異原性、血漿コレステロール低
下、免疫賦活の生理活性を有し、これらを添加した食品
は健康食品として優れている。
プシン分解して得られるペプチド混合物は血圧低下作用
があり、血圧降下剤として有用である。また、このペプ
チド混合物またはこれをを含む海苔蛋白分解物は、カル
シウム沈殿阻止、抗変異原性、血漿コレステロール低
下、免疫賦活の生理活性を有し、これらを添加した食品
は健康食品として優れている。
【図１】本発明のペプチド混合物の分子量分布を示すＨ
ＰＬＣクロマトグラムを示す図。
ＰＬＣクロマトグラムを示す図。
【図２】本発明のペプチド混合物の紫外線吸収スペクト
ルを示す図。
ルを示す図。
【図３】本発明のペプチド混合物をラットに経口投与し
たときの血圧降下効果を示す図。
たときの血圧降下効果を示す図。
【図４】本発明のペプチド混合物およびＣＰＰのカルシ
ウム沈殿阻止作用測定値を示す図。
ウム沈殿阻止作用測定値を示す図。
【図５】本発明のペプチド混合物のＴｒｐ−Ｐ−１に対
する抗変異原活性測定値を示す図。
する抗変異原活性測定値を示す図。
【図６】本発明のペプチド混合物のＡＦ−２に対する抗
変異原活性測定値を示す図。
変異原活性測定値を示す図。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 37/04 Ｃ０７Ｋ 5/062 Ｃ０７Ｋ 5/062 5/083 5/083 7/06 ＺＮＡ 7/06 ＺＮＡ Ａ６１Ｋ 37/02 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07K 1/00 - 17/14 A61K 38/00 A23J 1/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (4)
- 【請求項１】 海苔を５０℃前後で１２時間以上ペプシ
ン分解して得られるアンジオテンシン変換酵素阻害活性
を有し、かつ下記の性質を有するペプチド混合物。 （Ａ）平均鎖長が２〜５の範囲で、ペプチドとして次の
４種のうち少なくとも２種を含む。 イソロイシン−チロシン メチオニン−リジン−チロシン ロイシン−アルギニン−チロシン アラニン−リジン−チロシン−セリン−チロシン （Ｂ）分子量：２００〜２０，０００ （Ｃ）溶剤に対する溶解性：水に易溶であるが、エタノ
ール、アセトン、ヘキサンにほとんど溶解しない。 - 【請求項２】 請求項１記載のペプチド混合物を有効成
分とする血圧降下剤。 - 【請求項３】 請求項１記載のペプチド混合物またはこ
れを含む海苔蛋白分解物を食品に添加した健康食品。 - 【請求項４】 健康食品がカルシウム沈殿阻止作用、抗
変異原活性、血漿コレステロール低下作用、免疫賦活作
用に基づく請求項３記載の健康食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33227096A JP3272621B2 (ja) | 1996-12-12 | 1996-12-12 | 海苔から得られるペプチド混合物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33227096A JP3272621B2 (ja) | 1996-12-12 | 1996-12-12 | 海苔から得られるペプチド混合物 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10175997A JPH10175997A (ja) | 1998-06-30 |
| JP3272621B2 true JP3272621B2 (ja) | 2002-04-08 |
Family
ID=18253074
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP33227096A Expired - Lifetime JP3272621B2 (ja) | 1996-12-12 | 1996-12-12 | 海苔から得られるペプチド混合物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3272621B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPWO2011089764A1 (ja) * | 2010-01-20 | 2013-05-20 | 焼津水産化学工業株式会社 | 塩化カリウム含有飲食品の呈味改善剤及び塩化カリウム含有飲食品の製造方法 |
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|---|---|---|---|---|
| JP3585778B2 (ja) | 1998-09-25 | 2004-11-04 | 株式会社白子 | 海苔の酵素分解組成物およびその用途 |
| JP2002291452A (ja) * | 2001-03-30 | 2002-10-08 | Kirin Brewery Co Ltd | イソロイシルチロシン含有飲料 |
| JP2010163400A (ja) | 2009-01-19 | 2010-07-29 | Kikkoman Corp | 新規アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド |
| CN102495169B (zh) * | 2011-11-16 | 2013-09-18 | 江南大学 | 一种紫菜可控酶解后的抗氧化活性肽的纯化及分析鉴定方法 |
-
1996
- 1996-12-12 JP JP33227096A patent/JP3272621B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPWO2011089764A1 (ja) * | 2010-01-20 | 2013-05-20 | 焼津水産化学工業株式会社 | 塩化カリウム含有飲食品の呈味改善剤及び塩化カリウム含有飲食品の製造方法 |
| JP5901294B2 (ja) * | 2010-01-20 | 2016-04-06 | 焼津水産化学工業株式会社 | 塩化カリウム含有飲食品の呈味改善剤及び塩化カリウム含有飲食品の製造方法 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH10175997A (ja) | 1998-06-30 |
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