JP3130629B2 - 電気泳動における分画処理方法 - Google Patents
電気泳動における分画処理方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、電気泳動装置を用いて
得られた血清の分画像の処理方法に関する。
得られた血清の分画像の処理方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ヒト血清をセルロース・アセテート膜を
支持体として電気泳動装置で泳動を行い、さらにデンシ
トメータを用いて測光した結果得られる泳動像のパター
ンの基本的なもの（一般に健康なヒトの場合にはこのパ
ターンになる）は、図８に示すような濃度分布である。
このような泳動像パターンは、通常、ｘ軸上のｐ0 、ｐ
1 、ｐ2 、ｐ3 、ｐ4 に対応する位置にある５個のピー
ク（以下、基準ピークと記す）を含むａ，ｂ，ｃ，ｄ，
ｅの５つの分画、すなわち、アルブミン、α1 グロブリ
ン、α2 グロブリン、βグロブリン、γグロブンリンに
分画する。そしてこのようなアナログ図と各分画毎の％
値とから正常と異常の判断がなされている。
支持体として電気泳動装置で泳動を行い、さらにデンシ
トメータを用いて測光した結果得られる泳動像のパター
ンの基本的なもの（一般に健康なヒトの場合にはこのパ
ターンになる）は、図８に示すような濃度分布である。
このような泳動像パターンは、通常、ｘ軸上のｐ0 、ｐ
1 、ｐ2 、ｐ3 、ｐ4 に対応する位置にある５個のピー
ク（以下、基準ピークと記す）を含むａ，ｂ，ｃ，ｄ，
ｅの５つの分画、すなわち、アルブミン、α1 グロブリ
ン、α2 グロブリン、βグロブリン、γグロブンリンに
分画する。そしてこのようなアナログ図と各分画毎の％
値とから正常と異常の判断がなされている。
【０００３】しかし、被測定検体を用いて実際に泳動を
行って得られた分画像を測光して得られるパターンは、
図８に示す標準的なパターンに現れた基準ピークの他
に、血清の濁りや血清の鮮度低下等の各種原因によって
ピークが生じることがある。このような基準ピーク以外
のピークが現れた場合には、比色測光を行って得られた
データに基づいて、ａ〜ｅの５分画の各分画の％値をコ
ンピュータ−で自動的に求める際に不都合を生じる。す
なわち、図８に示す標準的な泳動パターンでは、分画点
として各極小点ｍ1 、ｍ2 、ｍ3 、ｍ4 を求め、隣り合
う極小点の間の％値を求めている。しかし、上述のよう
な基準ピーク以外のピークが現れた場合には５分画での
値を求めることができない。このため、６分画以上の分
画になった場合は検査担当者がアナログパターンおよび
泳動像からみて５分画になるように、誤りの分画を、ア
ルブミン、α1 グロブリン、α2 グロブリン、βグロブ
リン、γグロブンリンのいずれかに含めて計算し直さな
ければならない。また、病気による分画異常が生じた場
合は、熟練者により主観的に分画処理するか、或いは、
分画像を処理することなく単に分画異常と報告されるた
め、正確な診断ができない。このような不都合を解消す
るために、次のような各種の分画処理方法が提案されて
いる。
行って得られた分画像を測光して得られるパターンは、
図８に示す標準的なパターンに現れた基準ピークの他
に、血清の濁りや血清の鮮度低下等の各種原因によって
ピークが生じることがある。このような基準ピーク以外
のピークが現れた場合には、比色測光を行って得られた
データに基づいて、ａ〜ｅの５分画の各分画の％値をコ
ンピュータ−で自動的に求める際に不都合を生じる。す
なわち、図８に示す標準的な泳動パターンでは、分画点
として各極小点ｍ1 、ｍ2 、ｍ3 、ｍ4 を求め、隣り合
う極小点の間の％値を求めている。しかし、上述のよう
な基準ピーク以外のピークが現れた場合には５分画での
値を求めることができない。このため、６分画以上の分
画になった場合は検査担当者がアナログパターンおよび
泳動像からみて５分画になるように、誤りの分画を、ア
ルブミン、α1 グロブリン、α2 グロブリン、βグロブ
リン、γグロブンリンのいずれかに含めて計算し直さな
ければならない。また、病気による分画異常が生じた場
合は、熟練者により主観的に分画処理するか、或いは、
分画像を処理することなく単に分画異常と報告されるた
め、正確な診断ができない。このような不都合を解消す
るために、次のような各種の分画処理方法が提案されて
いる。
【０００４】特公昭６１−１６０１９号公報には、６分
画以上に分画された泳動像パターンの場合において、前
述の基準ピークｐ0 〜ｐ4 の値を基準位置とし、この基
準位置の間に存在する極小の位置を求め、各々の基準位
置間に存在する極小点の個数を計数し１個の場合にはそ
れを分画点とし、また、２個以上の場合にはそのうち濃
度の最も小さいものを分画点することにより、基準ピー
ク以外のピーク値を５分画内に含ませた処理がコンピュ
ーターによって自動的に行ない得るようにした処理方法
が記載されている（以下、第１の従来方法という）。
画以上に分画された泳動像パターンの場合において、前
述の基準ピークｐ0 〜ｐ4 の値を基準位置とし、この基
準位置の間に存在する極小の位置を求め、各々の基準位
置間に存在する極小点の個数を計数し１個の場合にはそ
れを分画点とし、また、２個以上の場合にはそのうち濃
度の最も小さいものを分画点することにより、基準ピー
ク以外のピーク値を５分画内に含ませた処理がコンピュ
ーターによって自動的に行ない得るようにした処理方法
が記載されている（以下、第１の従来方法という）。
【０００５】また、特公昭６２−８１４２号公報には、
第１の従来方法を利用すると共に、被測定検体のうち正
常分画してデータにより基準位置を定め、これを参照し
て被測定検体の分画処理を行うことにより、標準血清を
用いずに正しい分画位置が求められるようにした電気泳
動における分画処理方法が提案されている（以下、第２
の従来方法という）。
第１の従来方法を利用すると共に、被測定検体のうち正
常分画してデータにより基準位置を定め、これを参照し
て被測定検体の分画処理を行うことにより、標準血清を
用いずに正しい分画位置が求められるようにした電気泳
動における分画処理方法が提案されている（以下、第２
の従来方法という）。
【０００６】また、特公昭６２−５９７７２号公報に
は、標準血清におけるピーク値に対応するサンプリング
点（ｘ軸上の点）又は極小点に対応するサンプリング点
を基準位置とし、この基準位置と被測定検体のアナログ
パターンにおける極小点又はピーク値を取るサンプリン
グ点とを比較することによって正しい分画点を求める分
画処理方法が記載されている（以下、第３の従来方法と
いう）。
は、標準血清におけるピーク値に対応するサンプリング
点（ｘ軸上の点）又は極小点に対応するサンプリング点
を基準位置とし、この基準位置と被測定検体のアナログ
パターンにおける極小点又はピーク値を取るサンプリン
グ点とを比較することによって正しい分画点を求める分
画処理方法が記載されている（以下、第３の従来方法と
いう）。
【０００７】さらに、特公昭６３−２１８６０号公報に
は、被測定検体の分画像から求めれたパターンのピーク
値間又は極小点間等の間隔の比を、標準血清の対応する
比と比較することによって正常な分画を求める分画処理
方法が記載されている（以下、第４の従来方法とい
う）。
は、被測定検体の分画像から求めれたパターンのピーク
値間又は極小点間等の間隔の比を、標準血清の対応する
比と比較することによって正常な分画を求める分画処理
方法が記載されている（以下、第４の従来方法とい
う）。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上述の
従来の分画処理方法には次に掲げる問題がある。
従来の分画処理方法には次に掲げる問題がある。
【０００９】まず、第１の従来方法では、５分画を正常
とした場合には、６分画以上に分画した検体を５分画に
する処理しか行うことができず、４分画以下に分画した
検体については処理できない。また、第２の従来方法で
は、標準血清に代えて被測定検体中の正常検体を使用す
るが、被測定検体中に正常なものが一切ない場合には適
用できない。
とした場合には、６分画以上に分画した検体を５分画に
する処理しか行うことができず、４分画以下に分画した
検体については処理できない。また、第２の従来方法で
は、標準血清に代えて被測定検体中の正常検体を使用す
るが、被測定検体中に正常なものが一切ない場合には適
用できない。
【００１０】また、第１〜第３の従来方法に共通する問
題として、例えば、泳動電流が不均一である場合、被測
定検体の含有成分に差がある場合、または、被測定検体
の前処理に差がある場合に、図９に示すように、各検体
９１の泳動像の泳動長ｘにバラツキが生じたり、図１０
に示すように各検体１０１の泳動位置がズレているとき
に、標準パターンの基準位置とそれに対応する被測定検
体のピーク値または極小点にズレが生じるので正確に分
画点を決定できない。
題として、例えば、泳動電流が不均一である場合、被測
定検体の含有成分に差がある場合、または、被測定検体
の前処理に差がある場合に、図９に示すように、各検体
９１の泳動像の泳動長ｘにバラツキが生じたり、図１０
に示すように各検体１０１の泳動位置がズレているとき
に、標準パターンの基準位置とそれに対応する被測定検
体のピーク値または極小点にズレが生じるので正確に分
画点を決定できない。
【００１１】これに対して、第４の従来方法では、ピー
ク値または極小点の間の距離の比は泳動長および泳動位
置に関係なく一定であるためかかる問題を生じないが、
分画毎に演算処理が反復されるので、分画処理に要する
時間が長い。
ク値または極小点の間の距離の比は泳動長および泳動位
置に関係なく一定であるためかかる問題を生じないが、
分画毎に演算処理が反復されるので、分画処理に要する
時間が長い。
【００１２】本発明は、かかる課題に鑑みてなされたも
のであり、各被測定検体間の泳動長または泳動位置のバ
ラツキによる影響を受けることなく、正確かつ比較的短
時間でパターンの分画点位置を決定できる電気泳動にお
ける分画処理方法を提供するものである。
のであり、各被測定検体間の泳動長または泳動位置のバ
ラツキによる影響を受けることなく、正確かつ比較的短
時間でパターンの分画点位置を決定できる電気泳動にお
ける分画処理方法を提供するものである。
【００１３】
【課題を解決するための手段】本発明は、基準となるよ
うな分画点およびピークを有するような基準検体を電気
泳動した後に、泳動長方向の少なくとも２点を所定の長
さとなるように正規化された基準パターンを用意すると
共に該基準パターンにおける分画点を設定する工程と、
被測定検体を電気泳動して得られた測定パターンを泳動
長方向の少なくとも２点を前記正規化された基準パター
ンの前記２点の長さと等しくなるように正規化する工程
と、前記基準パターンの分画点位置を基準位置として該
基準パターンの各分画点を前記測定パターンの分画点と
対応させる工程とを具備することを特徴とする電気泳動
における分画処理方法である。
うな分画点およびピークを有するような基準検体を電気
泳動した後に、泳動長方向の少なくとも２点を所定の長
さとなるように正規化された基準パターンを用意すると
共に該基準パターンにおける分画点を設定する工程と、
被測定検体を電気泳動して得られた測定パターンを泳動
長方向の少なくとも２点を前記正規化された基準パター
ンの前記２点の長さと等しくなるように正規化する工程
と、前記基準パターンの分画点位置を基準位置として該
基準パターンの各分画点を前記測定パターンの分画点と
対応させる工程とを具備することを特徴とする電気泳動
における分画処理方法である。
【００１４】以下、本発明をさらに詳細に説明する。な
お、以下の説明において分画点位置及びピーク位置と
は、パターンの分画点及びピークの濃度値（パターン上
の点）に対応するｘ軸上の点をいう。
お、以下の説明において分画点位置及びピーク位置と
は、パターンの分画点及びピークの濃度値（パターン上
の点）に対応するｘ軸上の点をいう。
【００１５】まず、本発明の電気泳動における分画処理
方法において、被測定検体を電気泳動して得られるパタ
ーン（以下、測定パターンという）の正規化は、先に本
出願人が提案した特開昭６２−４２０３４号公報に記載
された電気泳動パターンの処理方法に従って行うことが
できる。すなわち、測定パターンから、電気泳動像中の
予め定めた少なくとも２つの泳動長に関連する基準点を
検出し、これら基準点が予め定めた泳動長に関連する所
定のデータ位置にそれぞれ一致するように測定パターン
を正規化し、２つの基準点のデータ数と予め定めた泳動
長に関連する所定のデータ位置間のデータ数とに基づい
て測定パターンの値を正規化する。
方法において、被測定検体を電気泳動して得られるパタ
ーン（以下、測定パターンという）の正規化は、先に本
出願人が提案した特開昭６２−４２０３４号公報に記載
された電気泳動パターンの処理方法に従って行うことが
できる。すなわち、測定パターンから、電気泳動像中の
予め定めた少なくとも２つの泳動長に関連する基準点を
検出し、これら基準点が予め定めた泳動長に関連する所
定のデータ位置にそれぞれ一致するように測定パターン
を正規化し、２つの基準点のデータ数と予め定めた泳動
長に関連する所定のデータ位置間のデータ数とに基づい
て測定パターンの値を正規化する。
【００１６】この正規化した測定パターンの分画点位置
およびピーク位置は、泳動長や泳動位置の差による影響
を除かれる。従って、正常人の検体であればピーク位置
および分画点位置は略一定になる。
およびピーク位置は、泳動長や泳動位置の差による影響
を除かれる。従って、正常人の検体であればピーク位置
および分画点位置は略一定になる。
【００１７】また、基準パターンとしては、例えば、市
販されているコントロール血清を電気泳動した泳動像や
被測定検体を電気泳動して正常分画を示したものから得
たパターンを使用できる。これらの基準パターンは、コ
ントロール血清等の泳動像からパターンを得た後に上述
の正規化処理を施したものであることが好ましい。基準
パターンにおける分画点およびピークの各位置は、予め
決定し、装置に記憶しておくが、検体の種類または分析
条件が変更されるごとに決定すればよい。
販されているコントロール血清を電気泳動した泳動像や
被測定検体を電気泳動して正常分画を示したものから得
たパターンを使用できる。これらの基準パターンは、コ
ントロール血清等の泳動像からパターンを得た後に上述
の正規化処理を施したものであることが好ましい。基準
パターンにおける分画点およびピークの各位置は、予め
決定し、装置に記憶しておくが、検体の種類または分析
条件が変更されるごとに決定すればよい。
【００１８】上述のように正規化処理した被測定パター
ンの分画点位置を、基準パターンの分画点位置およびピ
ーク位置を基準位置として決定する。例えば、正規化し
た測定パターンにおいて、基準パターンの隣り合う２つ
のピーク位置の間に存在する極小点が１つ存在する場合
には当該極小点を分画点位置とする。また、極小点が２
つ以上存在する場合には基準パターンの分画点位置に近
い方を分画点位置とする。また、極小点が存在しなかっ
た場合は基準パターンの分画点位置を強制的に分画点位
置とする。このようにして決定した測定パターンの分画
点位置に基づいて％値等の各分画のデータを得る。
ンの分画点位置を、基準パターンの分画点位置およびピ
ーク位置を基準位置として決定する。例えば、正規化し
た測定パターンにおいて、基準パターンの隣り合う２つ
のピーク位置の間に存在する極小点が１つ存在する場合
には当該極小点を分画点位置とする。また、極小点が２
つ以上存在する場合には基準パターンの分画点位置に近
い方を分画点位置とする。また、極小点が存在しなかっ
た場合は基準パターンの分画点位置を強制的に分画点位
置とする。このようにして決定した測定パターンの分画
点位置に基づいて％値等の各分画のデータを得る。
【００１９】
【作用】本発明の電気泳動における分画処理方法では、
測定パターンを正規化しているので、各被測定検体の泳
動像の波動長および泳動位置のバラツキがある場合に
も、一定長さの泳動長及び一定の泳動位置での測定パタ
ーンが得られる。このため、基準パターンの分画点位置
およびピーク位置に対応する測定パターンの分画点位置
およびピーク位置が正確に求められる。この結果、正確
にかつ簡単な処理により測定パターンの分画点位置を決
定できる。
測定パターンを正規化しているので、各被測定検体の泳
動像の波動長および泳動位置のバラツキがある場合に
も、一定長さの泳動長及び一定の泳動位置での測定パタ
ーンが得られる。このため、基準パターンの分画点位置
およびピーク位置に対応する測定パターンの分画点位置
およびピーク位置が正確に求められる。この結果、正確
にかつ簡単な処理により測定パターンの分画点位置を決
定できる。
【００２０】
【実施例】以下、本発明を図面を参照して詳細に説明す
る。
る。
【００２１】まず、泳動パターンの正規化する方法につ
いて説明する。泳動パターンの正規化は、例えば、前述
の特開昭６２−４２０３４号公報に開示された方法に従
って行う。図１は、本発明の電気泳動における分画処理
方法に用いる電気泳動装置のデンシトメータの一例の要
部を示す説明図である。
いて説明する。泳動パターンの正規化は、例えば、前述
の特開昭６２−４２０３４号公報に開示された方法に従
って行う。図１は、本発明の電気泳動における分画処理
方法に用いる電気泳動装置のデンシトメータの一例の要
部を示す説明図である。
【００２２】染色槽（図示せず）において染色・脱色・
乾燥処理された支持体１は、送りローラ２によってデカ
リン３を収容する測光部４に搬送される。支持体１は、
測光装置５により、一定速度（例えば、８mm／sec ）で
測光走査された後、排紙ローラ６によって排出される。
乾燥処理された支持体１は、送りローラ２によってデカ
リン３を収容する測光部４に搬送される。支持体１は、
測光装置５により、一定速度（例えば、８mm／sec ）で
測光走査された後、排紙ローラ６によって排出される。
【００２３】測光装置５は、支持体１を透過する光源５
ａからの光を受光素子５ｂで受光するように構成されて
いる。測光装置５を、図２に示す如く、支持体１の搬送
方向ａと直交する走査方向ｂに移動させて、支持体１に
形成された電気泳動像７を測光走査する。
ａからの光を受光素子５ｂで受光するように構成されて
いる。測光装置５を、図２に示す如く、支持体１の搬送
方向ａと直交する走査方向ｂに移動させて、支持体１に
形成された電気泳動像７を測光走査する。
【００２４】次に、測光走査により得られた測光装置５
からの出力信号を、図３に示すデータ処理装置により処
理する。受光素子５ｂからの光電変換出力は、対数増幅
器１２によって対数増幅して吸光度に変換した後、Ａ／
Ｄ変換器１３において泳動時間等の分析条件に従って決
定されるサンプリングレート（例えば、１２msec）に対
応するクロックに同期してサンプリングし、デジタル信
号に変換して中央演算処理装置（以下、ＣＰＵという）
１４の制御下でメモリ１５に記憶する。
からの出力信号を、図３に示すデータ処理装置により処
理する。受光素子５ｂからの光電変換出力は、対数増幅
器１２によって対数増幅して吸光度に変換した後、Ａ／
Ｄ変換器１３において泳動時間等の分析条件に従って決
定されるサンプリングレート（例えば、１２msec）に対
応するクロックに同期してサンプリングし、デジタル信
号に変換して中央演算処理装置（以下、ＣＰＵという）
１４の制御下でメモリ１５に記憶する。
【００２５】次いで、メモリ１５に記憶されたサンプリ
ングしたデータを、移動平均処理であるスムージング処
理すると共に、光量によるベース浮き分を除去するオー
トゼロ処理した後に正規化処理を行う。
ングしたデータを、移動平均処理であるスムージング処
理すると共に、光量によるベース浮き分を除去するオー
トゼロ処理した後に正規化処理を行う。
【００２６】そして、正規化された測定パターンおよび
それに基づいて算出された各分画の％値、Ａ／Ｇ比等の
分画データを、ディスプレイ１７に表示すると共に、プ
リンタ１９で報告書２０の所定欄に夫々記録する。
それに基づいて算出された各分画の％値、Ａ／Ｇ比等の
分画データを、ディスプレイ１７に表示すると共に、プ
リンタ１９で報告書２０の所定欄に夫々記録する。
【００２７】図４は、正規化処理の基準パターンが５つ
のピークを有する場合の各工程を示すフロチャートであ
り、図中４１は基準点検出処理工程、４２はＸ軸正規化
処理工程を、４３はＹ軸正規化処理工程を、４４は濃度
正規化処理工程を示す。
のピークを有する場合の各工程を示すフロチャートであ
り、図中４１は基準点検出処理工程、４２はＸ軸正規化
処理工程を、４３はＹ軸正規化処理工程を、４４は濃度
正規化処理工程を示す。
【００２８】本実施例では、正規化における所定の泳動
長に関するデータ点数を３５０点とし、その１００デー
タ点に泳動像中で目立つピークとして安定しているアル
ブミン(Alb) のピーク位置と、２１０データ点に泳動中
の出現位置が安定しているβ−グロブリン（β−Ｇ）の
ピーク位置を基準点として正規化を行った。
長に関するデータ点数を３５０点とし、その１００デー
タ点に泳動像中で目立つピークとして安定しているアル
ブミン(Alb) のピーク位置と、２１０データ点に泳動中
の出現位置が安定しているβ−グロブリン（β−Ｇ）の
ピーク位置を基準点として正規化を行った。
【００２９】まず、メモリ１５に記憶した測定検体のサ
ンプリングデータから、予め定めた泳動長に関する夫々
のAlb ，β−Ｇのピーク位置である基準点を検出する。
基準点Alb ，β−Ｇの検出は、例えば、被測定検体のサ
ンプリングデータから、図５に示すように両端点が泳動
像の両端点となるような所定の閾値を越えるデータを抽
出し、その抽出したデータの両端点から所定の範囲Ｌ1
およびＬ2 においてピークの有無を検出し、検出された
ピーク中の濃度が最大のものを被測定検体のAlb ，β−
Ｇのピーク位置として基準点を検出する（４１）。次
に、検出したピーク位置が、Ｘ軸上で所定の泳動長に関
するAlb ，β−Ｇのデータ位置に夫々一致するようにＸ
軸を正規化する（４２）。
ンプリングデータから、予め定めた泳動長に関する夫々
のAlb ，β−Ｇのピーク位置である基準点を検出する。
基準点Alb ，β−Ｇの検出は、例えば、被測定検体のサ
ンプリングデータから、図５に示すように両端点が泳動
像の両端点となるような所定の閾値を越えるデータを抽
出し、その抽出したデータの両端点から所定の範囲Ｌ1
およびＬ2 においてピークの有無を検出し、検出された
ピーク中の濃度が最大のものを被測定検体のAlb ，β−
Ｇのピーク位置として基準点を検出する（４１）。次
に、検出したピーク位置が、Ｘ軸上で所定の泳動長に関
するAlb ，β−Ｇのデータ位置に夫々一致するようにＸ
軸を正規化する（４２）。
【００３０】次に、正規化したＸ軸上のサンプリングデ
ータの値を、その積算値が対応する被測定検体のデータ
位置の間での積算値と略等しくなるように、被測定検体
のデータ数とこれらの基準点がＸ軸上で夫々位置するデ
ータ点数との比率に基づいてＹ軸の正規化を行う（４
３）。
ータの値を、その積算値が対応する被測定検体のデータ
位置の間での積算値と略等しくなるように、被測定検体
のデータ数とこれらの基準点がＸ軸上で夫々位置するデ
ータ点数との比率に基づいてＹ軸の正規化を行う（４
３）。
【００３１】さらに、各分画における積算値と濃度の絶
対量とを対応させる濃度正規化処理を行う。まず、正規
化したデータのAlb 分画の積算値を求め、続いてその積
算値と別途生化学的装置により測定したAlb 濃度値に相
当する基準積算値との比率を求め、この比率を各点のデ
ータ値に乗算して濃度の正規化を終了する（４４）。以
上説明した正規化処理方法を適用して次のように測定パ
ターンの分画点位置を決定する分画の処理を行う。
対量とを対応させる濃度正規化処理を行う。まず、正規
化したデータのAlb 分画の積算値を求め、続いてその積
算値と別途生化学的装置により測定したAlb 濃度値に相
当する基準積算値との比率を求め、この比率を各点のデ
ータ値に乗算して濃度の正規化を終了する（４４）。以
上説明した正規化処理方法を適用して次のように測定パ
ターンの分画点位置を決定する分画の処理を行う。
【００３２】まず、正常人の血清を、例えば、電気泳動
により分離し、得られた電気泳動像から上述のように測
光走査して泳動パターンを得る。次に得られた泳動パタ
ーンを、前述の正規化処理方法に従って正規化し、図６
（Ａ）に示すような基準パターンを得る。本実施例で
は、正規化のための２つの基準点を、分画ａのピークpa
と分画ｄのピークpbとし、夫々データ点が１００，２１
０になるように正規化した。
により分離し、得られた電気泳動像から上述のように測
光走査して泳動パターンを得る。次に得られた泳動パタ
ーンを、前述の正規化処理方法に従って正規化し、図６
（Ａ）に示すような基準パターンを得る。本実施例で
は、正規化のための２つの基準点を、分画ａのピークpa
と分画ｄのピークpbとし、夫々データ点が１００，２１
０になるように正規化した。
【００３３】これにより、正規化により得られるピーク
位置は、paは１００、pbは１４０、pcは１７０、pdは２
１０、peは２７０で、分画点位置はpa〜pb間は１２５、
pb〜pc間は１５１、pc〜pd間は１８７、pd−pe間は２３
０であった。これらの値は、以後の分画処理の基準位置
とするためにメモリ１５に記憶する。
位置は、paは１００、pbは１４０、pcは１７０、pdは２
１０、peは２７０で、分画点位置はpa〜pb間は１２５、
pb〜pc間は１５１、pc〜pd間は１８７、pd−pe間は２３
０であった。これらの値は、以後の分画処理の基準位置
とするためにメモリ１５に記憶する。
【００３４】次に、被測定検体として患者の血清を電気
泳動により分離し、電気泳動像から上述のように測光走
査して測定パターンを得る。次に得られた泳動パターン
を、前述の正規化処理法に従って正規化し、図６（Ｂ）
に示すような測定パターンを得る。この際、分画ａ´の
ピークpa´と分画ｄ´のピークpd´を基準点とする。こ
の測定パターンは５分画しているが分画点位置が本来の
位置ではない。
泳動により分離し、電気泳動像から上述のように測光走
査して測定パターンを得る。次に得られた泳動パターン
を、前述の正規化処理法に従って正規化し、図６（Ｂ）
に示すような測定パターンを得る。この際、分画ａ´の
ピークpa´と分画ｄ´のピークpd´を基準点とする。こ
の測定パターンは５分画しているが分画点位置が本来の
位置ではない。
【００３５】このように得られた測定パターンにおい
て、基準パターンのピーク位置及び分画点位置を基準位
置として分画点位置の決定を図７に示すフローチャート
に従って行う。まず、PEAK＝１を入力する（７１）。次
に、PEAKおよびPEAK+1の間に極小点が幾つ存在するか判
断（７２）する。その判断に応じて次のように処理す
る。
て、基準パターンのピーク位置及び分画点位置を基準位
置として分画点位置の決定を図７に示すフローチャート
に従って行う。まず、PEAK＝１を入力する（７１）。次
に、PEAKおよびPEAK+1の間に極小点が幾つ存在するか判
断（７２）する。その判断に応じて次のように処理す
る。
【００３６】（ｉ）極小点が１つ存在するときには当該
極小点に対応するＸ軸上の位置を分画点位置とする（７
３）。例えば、図６（Ｂ）に示す測定パターンにおい
て、ピークpaおよびピークpbの間、すなわち、１００〜
１４０データ点の間で極小点を探すと１つの極小点が存
在する。この極小点に対応するＸ軸上の位置を分画ａ´
と分画ｂ´との分画点位置ｆ1 とする。ピークpcおよび
pdの間（１７０〜２１０）も、同様に極小点が１つ存在
し、その極小点に対応するＸ軸上の位置を分画ｃ´と分
画ｄ´との分画点位置ｆ3 とする。
極小点に対応するＸ軸上の位置を分画点位置とする（７
３）。例えば、図６（Ｂ）に示す測定パターンにおい
て、ピークpaおよびピークpbの間、すなわち、１００〜
１４０データ点の間で極小点を探すと１つの極小点が存
在する。この極小点に対応するＸ軸上の位置を分画ａ´
と分画ｂ´との分画点位置ｆ1 とする。ピークpcおよび
pdの間（１７０〜２１０）も、同様に極小点が１つ存在
し、その極小点に対応するＸ軸上の位置を分画ｃ´と分
画ｄ´との分画点位置ｆ3 とする。
【００３７】（ii）極小点が複数あるときには基準パタ
ーンの分画点位置に一番近い極小点に対応するＸ軸上の
位置を分画点とする（７４）。例えば、図６（Ｂ）に示
す測定パターンにおいて、ピークpdおよびピークpeの
間、すなわち２１０〜２７０データ点の間で極小点を探
すと２つの極小点ｍa およびｍb が存在する。これらの
極小点ｍa ，ｍb のうち、予め定めた基準パターンの分
画点位置（データ点２３０）に近い極小点ｍa に対応す
るＸ軸上の位置を分画ｄ´と分画ｅ´との分画点位置ｆ
4 とする。
ーンの分画点位置に一番近い極小点に対応するＸ軸上の
位置を分画点とする（７４）。例えば、図６（Ｂ）に示
す測定パターンにおいて、ピークpdおよびピークpeの
間、すなわち２１０〜２７０データ点の間で極小点を探
すと２つの極小点ｍa およびｍb が存在する。これらの
極小点ｍa ，ｍb のうち、予め定めた基準パターンの分
画点位置（データ点２３０）に近い極小点ｍa に対応す
るＸ軸上の位置を分画ｄ´と分画ｅ´との分画点位置ｆ
4 とする。
【００３８】(iii) 極小点が存在しないときには基準パ
ターンの分画点位置を強制的に測定パターンの分画点位
置として追加する（７５）。例えば、図６（Ｂ）に示す
測定パターンにおいて、ピークpbおよびピークpcの間、
すなわち１４０〜１７０データ点の間で極小点を探すと
極小点が存在しない。この場合、予め定めた基準パター
ンの分画点位置（データ点１５１）を、分画ｂ´および
分画ｃ´との分画点位置ｆ4 として追加する。
ターンの分画点位置を強制的に測定パターンの分画点位
置として追加する（７５）。例えば、図６（Ｂ）に示す
測定パターンにおいて、ピークpbおよびピークpcの間、
すなわち１４０〜１７０データ点の間で極小点を探すと
極小点が存在しない。この場合、予め定めた基準パター
ンの分画点位置（データ点１５１）を、分画ｂ´および
分画ｃ´との分画点位置ｆ4 として追加する。
【００３９】このように分画点位置を決定した後、PEAK
に１を加える（７６）。この後、PEAKが５より大きくな
るまで分画点位置の決定を繰り返し（７７）、測定パタ
ーンのスタート位置（データ点０）から出発して分画点
位置ｆ1 〜ｆ4 を順次決定する。これらの値はメモリ１
５に記憶する。
に１を加える（７６）。この後、PEAKが５より大きくな
るまで分画点位置の決定を繰り返し（７７）、測定パタ
ーンのスタート位置（データ点０）から出発して分画点
位置ｆ1 〜ｆ4 を順次決定する。これらの値はメモリ１
５に記憶する。
【００４０】この後、メモリ１５に記憶されたサンプリ
ングしたデータおよび決定された分画点位置ｆ1 〜ｆ4
に基づいて、例えば、各分画％、Ａ／Ｇ比等の分画デー
タを演算し、その結果を正規化したパターンと共にディ
スプレイ１７に表示し、プリンタ１９で報告書２０の所
定欄に夫々記録する。
ングしたデータおよび決定された分画点位置ｆ1 〜ｆ4
に基づいて、例えば、各分画％、Ａ／Ｇ比等の分画デー
タを演算し、その結果を正規化したパターンと共にディ
スプレイ１７に表示し、プリンタ１９で報告書２０の所
定欄に夫々記録する。
【００４１】以上説明したように、本実施例の分画処理
方法によれば、正規化した測定パターンがある程度の泳
動長のバラツキを有していても構わない。すなわち、正
規化した測定パターンのうち、分画数が正常でも位置ず
れが生じているパターンのピーク位置および分画位置
を、予め定めた基準パターンのピーク位置および分画点
位置と正確に対応させることができる。これにより、こ
れらのピーク位置および分画点位置を基準位置として、
短時間かつ簡略な処理工程により正確に決定できる。さ
らに、分画点が余分に存在する場合、または、分画点が
現われていない場合にも、基準パターンのピーク位置お
よび分画点位置を用いて、測定パターンの正確な分画点
位置を決定できるので、被測定検体の分画数が、基準パ
ターンより多かったり少なかったりするようなバラツキ
がある場合にも有効に適用できる。さらに、上述の実施
例では、基準パターンが５分画を有している場合につい
て述べたが、６分画以上または４分画以下に分画した基
準パターンを示す被測定検体に対しても同様に分画処理
できることは言うまでもない。
方法によれば、正規化した測定パターンがある程度の泳
動長のバラツキを有していても構わない。すなわち、正
規化した測定パターンのうち、分画数が正常でも位置ず
れが生じているパターンのピーク位置および分画位置
を、予め定めた基準パターンのピーク位置および分画点
位置と正確に対応させることができる。これにより、こ
れらのピーク位置および分画点位置を基準位置として、
短時間かつ簡略な処理工程により正確に決定できる。さ
らに、分画点が余分に存在する場合、または、分画点が
現われていない場合にも、基準パターンのピーク位置お
よび分画点位置を用いて、測定パターンの正確な分画点
位置を決定できるので、被測定検体の分画数が、基準パ
ターンより多かったり少なかったりするようなバラツキ
がある場合にも有効に適用できる。さらに、上述の実施
例では、基準パターンが５分画を有している場合につい
て述べたが、６分画以上または４分画以下に分画した基
準パターンを示す被測定検体に対しても同様に分画処理
できることは言うまでもない。
【００４２】
【発明の効果】本発明の電気泳動における分画処理方法
によれば、基準パターンを正規化し、更に、測定パター
ンを正規化した後に、分画処理を行うので、各被測定検
体間の泳動長および泳動位置のばらつきによる影響を受
けることなく、また、正確に且つ比較的短時間で測定パ
ターンの分画点位置を決定できる等顕著な効果を有す
る。
によれば、基準パターンを正規化し、更に、測定パター
ンを正規化した後に、分画処理を行うので、各被測定検
体間の泳動長および泳動位置のばらつきによる影響を受
けることなく、また、正確に且つ比較的短時間で測定パ
ターンの分画点位置を決定できる等顕著な効果を有す
る。
【図１】本発明の電気泳動における分画処理方法に用い
る電気泳動装置のデンシトメータの一例の要部を示す説
明図。
る電気泳動装置のデンシトメータの一例の要部を示す説
明図。
【図２】同実施例の電気泳動像の走査方向を示す説明
図。
図。
【図３】同実施例のデータ処理装置の要部の構成を示す
ブロック図。
ブロック図。
【図４】同実施例のパターンの正規化処理の各工程を示
すフローチャート。
すフローチャート。
【図５】同実施例の基準点の検出方法を説明するための
図。
図。
【図６】（Ａ）は、同実施例の基準パターンを示す図、
（Ｂ）は、同測定パターンを示す図。
（Ｂ）は、同測定パターンを示す図。
【図７】同実施例の分画点位置の決定方法を示すフロー
チャート。
チャート。
【図８】従来の分画処理方法における基準パターンを示
す図。
す図。
【図９】泳動長にバラツキがある泳動像を示す説明図。
【図１０】泳動位置にバラツキがある泳動像を示す説明
図。
図。
１…支持体、２…送りローラ、３…デカリン、４…測光
部、５…測光装置、６…排紙ローラ、７…電気泳動像、
１２…対数増幅器、１３…Ａ／Ｄ変換器、１４…ＣＰ
Ｕ、１５…メモリ、１６…キーボード、１７…ディスプ
レイ。
部、５…測光装置、６…排紙ローラ、７…電気泳動像、
１２…対数増幅器、１３…Ａ／Ｄ変換器、１４…ＣＰ
Ｕ、１５…メモリ、１６…キーボード、１７…ディスプ
レイ。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 27/447 ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (3)
- 【請求項１】 基準となるような分画点およびピークを
有するような基準検体を電気泳動した後に、泳動長方向
の少なくとも２点を所定の長さとなるように正規化され
た基準パターンを用意すると共に該基準パターンにおけ
る分画点を設定する工程と、被測定検体を電気泳動して
得られた測定パターンを泳動長方向の少なくとも２点を
前記正規化された基準パターンの前記２点の長さと等し
くなるように正規化する工程と、前記基準パターンの分
画点位置を基準位置として該基準パターンの各分画点を
前記測定パターンの分画点と対応させる工程とを具備す
ることを特徴とする電気泳動における分画処理方法。 - 【請求項２】 基準パターンと対応する分画点が測定パ
ターン上に存在しない場合に、該測定パターン上に基準
パターンと同一位置の分画点を加えることを特徴とする
請求項１に記載の電気泳動における分画処理方法。 - 【請求項３】 基準パターンと対応しない余剰の分画点
が測定パターン上に存在する場合に、該余剰の分画点を
除外して分画処理することを特徴とする請求項１に記載
の電気泳動における分画処理方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04055359A JP3130629B2 (ja) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | 電気泳動における分画処理方法 |
| ITMI930448A IT1271433B (it) | 1992-03-13 | 1993-03-09 | Procedimento per trattare un'immagine di una frazione nell'elettroforesi. |
| DE4307736A DE4307736C2 (de) | 1992-03-13 | 1993-03-11 | Verfahren zum Verarbeiten eines einem Fraktionsbild entsprechenden Densitogramms bei der Elektrophorese |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04055359A JP3130629B2 (ja) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | 電気泳動における分画処理方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05256819A JPH05256819A (ja) | 1993-10-08 |
| JP3130629B2 true JP3130629B2 (ja) | 2001-01-31 |
Family
ID=12996302
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04055359A Expired - Fee Related JP3130629B2 (ja) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | 電気泳動における分画処理方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3130629B2 (ja) |
| DE (1) | DE4307736C2 (ja) |
| IT (1) | IT1271433B (ja) |
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|---|---|---|---|---|
| US7537938B2 (en) | 2000-04-28 | 2009-05-26 | Monogram Biosciences, Inc. | Biomarker detection in circulating cells |
| CZ20033143A3 (en) | 2001-05-21 | 2004-04-14 | Aclara Biosciences, Inc. | Methods and compositions for analyzing proteins |
| JP2005521885A (ja) * | 2002-04-02 | 2005-07-21 | アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド | 電気泳動的に分離される分子タグを使用する多重化アッセイ |
| JP4756707B2 (ja) * | 2007-02-22 | 2011-08-24 | アングルトライ株式会社 | スペクトル波形パターンのピーク位置検出方法又は領域分割方法およびプログラム |
| JP6740941B2 (ja) * | 2016-08-05 | 2020-08-19 | 株式会社島津製作所 | 電気泳動測定方法、データ処理装置及びデータ処理プログラム |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55156851A (en) * | 1979-05-25 | 1980-12-06 | Olympus Optical Co Ltd | Fractionation processing method for electrophoresis |
| JPS5670455A (en) * | 1979-11-13 | 1981-06-12 | Olympus Optical Co Ltd | Processing method for demarcation in electrophoresis |
| JPS5719666A (en) * | 1980-07-10 | 1982-02-01 | Olympus Optical Co Ltd | Fractionation treating method in electrophoresis |
| JPS5719650A (en) * | 1980-07-10 | 1982-02-01 | Olympus Optical Co Ltd | Split processing method in electrophoresis |
| US4920498A (en) * | 1985-08-17 | 1990-04-24 | Olympus Optical Co., Ltd. | Method of processing and analyzing electrophoretic image, and method of displaying electrophoregram and a medium for recording electrophoregram |
-
1992
- 1992-03-13 JP JP04055359A patent/JP3130629B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1993
- 1993-03-09 IT ITMI930448A patent/IT1271433B/it active IP Right Grant
- 1993-03-11 DE DE4307736A patent/DE4307736C2/de not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE4307736A1 (en) | 1993-09-23 |
| JPH05256819A (ja) | 1993-10-08 |
| IT1271433B (it) | 1997-05-28 |
| DE4307736C2 (de) | 1998-06-10 |
| ITMI930448A0 (it) | 1993-03-09 |
| ITMI930448A1 (it) | 1994-09-09 |
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