JP3108059B2 - 生理活性ペプチド組成物の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、生理活性ペプチド
組成物の製造に関するものであり、更に詳細には、植物
種子等天然物由来の安全性の高い組成物であって、アン
ジオテンシンＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害作用、腫瘍壊死
因子（ＴＮＦ）−α産生調節作用、活性酸素産生抑制作
用、抗腫瘍作用等優れた生理作用を有する組成物の製造
に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】植物種子には生理活性成分を有するもの
が古来より各種知られており、例えばイネ科植物である
ハトムギ（Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａ−ｊｏｂｉ
Ｌ．ｖａｒ．ｍａ−ｙｕｅｎ）(Ｒｏｍａｎ)Ｓｔａｐｆ
は、その殻を除いた種子（ヨクイニン）が生薬として使
用され、利尿、消炎、排膿等に有効であるとされている
（共立出版「化学大辞典７」第１３１頁）。しかしなが
ら、これら天然物中においては、有効成分の多くは組織
内にあるため、そのままでは水や有機溶媒での抽出量が
少ないか、または抽出された脂溶性成分は水に溶解しな
いため、その使用法が限定され、用途によっては非常に
大量に且つ長期間使用しなければならないし、余りにも
速効性に欠けるという問題点は避けられない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記した技
術の現状に鑑み、機能性食品や生薬に対する当業界のニ
ーズも高いことから、有効成分を多量に含有する天然物
由来の、生理活性を有する新規組成物を開発する目的で
なされたものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、本発明者らは各方面から検討した結果、生薬として
用いられているヨクイニンに着目し、その起源であるハ
トムギについて、これを粉砕して酢酸で処理し、そのプ
ロテアーゼ分解物の生理活性についての研究を行った。
その結果、酢酸処理により水不溶性の蛋白質や組織構成
成分が可溶化され、これをプロテアーゼで処理すると、
その分解物にはＴＮＦ−α産生抑制作用、活性酸素産生
抑制作用、抗腫瘍作用があり、高いＡＣＥ阻害活性を有
するペプチドが得られるという新知見を得た。

【０００５】また、玄米並びに焼酎製造の副産物である
大麦発酵エキス乾燥物について検討した結果、それらの
酢酸処理後のプロテアーゼ分解物が高収量で得られ、Ａ
ＣＥ阻害作用、ＴＮＦ−α産生抑制作用及び活性酸素産
生抑制作用があるという新知見を得た。更に、各種植物
種子に含まれる成分の可成りのものが、この酢酸処理と
プロテアーゼ処理によって水可溶化し、その抽出物に各
種の生理作用があることを見出し、本発明を完成するに
至った。

【０００６】本発明を実施するには、原料として植物種
子、樹皮、実部、茎部、根部、葉部等植物全般、その各
部又はその１部、若しくはこれらの処理物、これらから
得られた食品又はその処理物を使用する。植物種子とし
ては、ハトムギ、米、大麦、小麦、カラス麦、裸麦、ソ
バ、大豆、小豆、エンドウ、ソラ豆、落花生、インゲ
ン、トウモロコシ、コウリャン、ゴマ、アワ、ヒエ、ヒ
マワリ、麻の実、野菜の種子その他が挙げられる。その
処理物としては、植物種子を脱殻したもの、それを粉砕
したもの、糠類、ヨクイニン、そのヘキサン等による脱
脂物、その水抽出残渣、そのアルコール等有機溶媒抽出
物、その他植物種子の各種処理物が挙げられる。また、
その処理物には、酒粕、オカラ、焼酎粕、醤油製造粕、
澱粉製造粕、その他植物種子又はその処理物を加工、処
理して飲食品を製造する際に副生するものも包含する。

【０００７】次いで、原料を必要であれば乾燥粉砕した
後、酢酸処理して蛋白質その他成分を溶解せしめ、プロ
テアーゼ処理して目的とする生理活性ペプチド組成物を
得る。酢酸処理は、５０〜１０％酢酸溶液中で、１０〜
５０℃、０．５〜２時間、必要であれば攪拌しながら実
施する。酢酸としては、９０％食品添加用の合成酢酸、
あるいは醸造酢を濃縮した濃厚酢酸を使用する。合成酢
酸の場合、処理後に定法にしたがって酢酸を除去しても
よい。

【０００８】プロテアーゼ処理が、１種の酵素を用いる
ほか、２種以上の酵素を用いる処理も包含する。後者の
場合、２種以上の酵素の同時併用処理のほか、２種以上
の酵素を順次用いて処理してもよい。使用酵素として
は、ペプシン、パパイン、ブロメライン、プロレザー
（ビオプラーゼ）、サーモライシン等、動植物や微生物
起源のプロテアーゼが市販品を含め各種使用可能であ
る。

【０００９】本発明に係わる生理活性組成物を製造する
態様例としては、次のものが例示される。原料に水や熱
水等を加え、必要に応じてホモゲナイズした後、これを
濾過して濾液と残渣に分ける。残渣を酢酸処理した後、
プロテアーゼ処理して得た分解物は、例えば清酒酒粕を
原料とした場合、ＡＣＥ阻害作用を有する組成物として
利用できる。

【００１０】また、原料のエタノール抽出液を、水に投
入して水不溶性の蛋白質（プロラミンなど）を沈殿とし
て得、これを酢酸処理後、プロテアーゼ処理して得た分
解物は、例えばハトムギを原料とした場合、ＡＣＥ阻害
作用を有する組成物として利用できる。

【００１１】本発明に係わる水可溶性組成物は、ＡＣＥ
阻害作用、ＴＮＦ−α産生抑制・誘導作用、活性酸素産
生抑制作用、抗腫瘍作用等の各種生理作用を有し、しか
も天然の食品関連植物由来であって、安全性にも問題が
なく、したがって、通常の食品はもとより、各種の機能
性食品（本発明においては飲料も含む）として利用する
ことができる。その期待される機能性食品の非限定例と
しては、次のものが挙げられる。

【００１２】（血液循環関連の機能性食品） アンジオテンシンＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害作用：血圧
上昇の抑制（軽症高血圧症の血圧を低下させ、健常人の
血圧値に変動のないもの）、脳卒中予防効果（脳浮腫の
予防効果）、心臓肥大の抑制効果、血管損傷の予防効果 活性酸素産生の抑制作用、活性酸素消去能：動脈硬化の
予防 食物繊維：血中コレステロールの低下

【００１３】（免疫関連の機能性食品） 腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生の抑制作用：アトピー
性皮膚炎や関節炎の予防効果や体質改善 ＴＮＦ−α産生の誘導・増強作用：Ｔリンパ球の増殖、
Ｂリンパ球の抗体産生や分裂の促進

【００１４】（ガン・老化関連の機能性食品） 抗腫瘍作用（ハトムギに含まれるｃｏｉｘｅｎｏｌｉｄ
ｅ）：ガンの予防 活性酸素産生の抑制作用：老化の予防

【００１５】本発明に係わる組成物は、上記した生理活
性を有し、これらの生理活性を利用した上記機能性食品
として用いることができるほか、通常の飲食品、特定保
健用飲食品、健康食品、健康飲料、栄養食品、その他各
種タイプの飲食品として用いることができる。また、ア
トピー性皮膚炎用外皮剤、いぼとり、しみとり、美白等
を目的とした美白、美肌関連の機能性食品や化粧品とし
ても利用することができる。

【００１６】なお、この際、本組成物は固体状（粉末、
顆粒状その他）、濃縮物、ペースト状、液状ないし懸濁
状のいずれでもよい。本組成物は、そのまま飲食品とし
て利用できることは勿論のこと、他の食品ないし食品成
分と併用したりして、適宜常法にしたがつて飲食品とし
て利用できる。例えば、本組成物を有効成分とし、これ
に甘味料、酸味料、ビタミン剤その他ドリンク剤製造に
用いられる常用成分を用いて、健康ドリンクやスポーツ
ドリンクに有利に製剤化することができる。

【００１７】また、本組成物は、錠剤、カプセル剤、顆
粒剤、散剤、シロップ剤等の剤型に製剤化することもで
きる。これらの各種製剤は、常法にしたがって、本組成
物を主剤とし、これに賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢
剤、矯味・矯臭剤等の医薬の製剤技術分野における通常
の各種補助剤を用いて製剤化することができる。

【００１８】本組成物は天然起源であり、しかも永年に
亘って漢方薬や食品として使用されていたものを起源と
するため、毒性は全くないか又は極めて低く、卓越した
安全性を示し、ハトムギ由来の本組成物は、これをラッ
トに対して１日当たり５００ｍｇを経口投与したが、急
性毒性は認められなかつた。したがって、本組成物（そ
れを有効成分とする飲食品）は、その使用量に格別の限
定はないし、たとえ高齢者、幼児、病弱者であっても長
期間摂取することができる。以下、実施例について述べ
る。

【００１９】

【実施例１】市販の精白ハトムギ２００ｇを水に一夜浸
漬した後、水を加えてホモゲナイズして攪拌後、濾過し
た。このようにして得た残渣（９１ｇ）に７０％エタノ
ールを加え、５０℃で５時間攪拌しながらハトムギ・プ
ロラミン（ｃｏｉｘｉｎ）を抽出した。エタノール抽出
液を大量の水に投入してｃｏｉｘｉｎを沈殿として、あ
るいは抽出液をスプレードライして粉末として得た。得
られたｃｏｉｘｉｎは、同様にして分離したトウモロコ
シのプロラミン（ｚｅｉｎ）と異なり、無色・無臭であ
り、より利用価値が高いことがわかった。

【００２０】得られたｃｏｉｘｉｎのアミノ酸組成（モ
ル％）を、コメ及びトウモノコシのプロラミンのそれと
ともに表１に示す。この結果から、ｃｏｉｘｉｎにはグ
ルタミンを除き、アラニン、ロイシン、プロリン等の疎
水性アミノ酸が多量に含まれることがわかった。

【００２１】 表１．各種プロラミンのアミノ酸組成（モル％） ────────────────────────── アミノ酸 ハトムギ コ メ トウモロコシ ────────────────────────── Asp 6.27 7.36 6.04 Glx 21.74 20.79 24.67 Ser 4.89 5.92 5.33 Gly 1.48 5.54 2.39 His 0.92 0.97 1.00 Arg 1.39 4.55 1.21 Thr 2.26 2.12 3.95 Ala 18.36 10.17 12.99 Pro 9.12 4.78 9.69 Tyr 3.15 7.81 3.42 Val 5.00 6.45 4.94 Met 1.06 0.08 1.45 Cys - - 1.07 Ils 2.68 4.48 3.77 Leu 16.90 13.20 13.69 Phe 4.83 5.16 2.00 Lys - 0.08 1.00 ──────────────────────────

【００２２】

【実施例２】Ｃｏｉｘｉｎの溶解牲に及ぼす酢酸濃度の
効果を次のようにして調べた。Ｃｏｉｘｉｎ粉末５００
ｍｇに表２に示すような濃度と容積の酢酸溶液を加え、
室温で１時間攪拌しながらインキュベートした後、水を
加えて１００ｍｌ（最終酢酸濃度５％）にした。遠心分
離後、上清中の蛋白量をＬｏｗｒｙ法により測定し溶解
度を算出した。得られた結果（表２）から明らかなよう
に、ｃｏｉｘｉｎは２５％以上、好適には４０％以上の
濃度の酢酸溶液に充分可溶化されることが立証された。

【００２３】 表２． Ｃｏｉｘｉｎの溶解度及びプロテアーゼ分解度に対する 前処理酢酸濃度の効果 ────────────────────────────────── 添加した酢酸溶液 プロテアーゼ分解物 ─────────── 酢酸処理後 ───────────── 濃度（％） 容量（ml） の溶解度（％） 溶解度（％） ＩＣ₅₀（μg/ml） ────────────────────────────────── 0(pH2〜4) 100 2〜2.5 - - 5 100 47 42 165 10 50 50 48 120 15 33.3 51 50 40 20 25 53 52 36 25 20 85 56 - 30 16.7 89 58 38 40 12.5 92 67 56 ──────────────────────────────────

【００２４】上記で得た酢酸処理ｃｏｉｘｉｎ溶液に、
酢酸濃度が５％になるように水を加えた後、１／５０量
のペプシン（消化力＝１：１００、和光純薬工業）を用
い、３７℃で２０時間分解した。次いで、減圧濃縮し凍
結乾燥後、水に溶解してｐＨを９．０に調節し、１／５
０量のプロレザー（天野製薬製）を用い、５０℃で２０
時間分解した。得られた分解液をｐＨ５に調節して比較
的分子量の大きいペプチドを沈殿させた後、遠心分離し
て得た上清中のペプチド量をＬｏｗｒｙ法で測定した結
果、表２に示すように、酢酸濃度が高い程ぺプチドの量
は多く、ｃｏｉｘｉｎのプロテアーゼ分解には高濃度の
酢酸溶液による処理がより効果的であることがわかっ
た。

【００２５】

【実施例３】分解物のＡＣＥ阻害活性は、Ｙａｍａｍｏ
ｔｏらの方法に従い、Ｈｉｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕを基質と
しアンジオテンシンI変換酵素によって生成される馬尿
酸を定量して測定し、５０％阻害に要する試料の濃度Ｉ
Ｃ_５０によって表した。

【００２６】各種濃度の酢酸溶液で処理したｃｏｉｘｉ
ｎのプロテアーゼ分解物のＡＣＥ阻害活性を図１に示
す。１５％以上の酢酸で処理したｃｏｉｘｉｎの分解物
で高いＡＣＥ阻害活性が得られ、その収量とＡＣＥ阻害
活性から、ｃｏｉｘｉｎの酢酸処理には１５％以上のよ
り高い濃度の酢酸溶液が効果的であることが明らかにな
った。

【００２７】

【実施例４】３０％酢酸で処理したｃｏｉｘｉｎのペプ
シン／プロレザー分解物を製造し、Ｂｉｏ Ｇｅｌ Ｐ
−１０カラムよるゲル濾過に供し、ＡＣＥ阻害作用につ
いて調べた。図２Ａに示すように、ｃｏｉｘｉｎは小さ
い分子量のペプチドにまで分解され、それらの全ての画
分にＡＣＥ阻害作用があることがわかった。

【００２８】

【実施例５】トウモロコシのプロラミンであるｚｅｉｎ
（サンエイ糖化社製）粉末１ｇに９０％酢酸１０ｍｌを
加え、５０℃で２時間インキュベート後、酢酸濃度が５
％になるまで水で希釈し、１／５０量のペプシンを用
い、３７℃で２０時間分解した。次いで、酢酸を除去し
た後、ｐＨを８．０に調節し、１／５０量のサーモライ
シンを用い、３７℃で６時間分解した。分解物はｐＨ７
では全て可溶性で、そのＩＣ_５０は５０μｇ／ｍｌ、ｐ
Ｈ４では７１％が可溶性で、そのＩＣ_５０は３８μｇ／
ｍｌであり、非常に高いＡＣＥ阻害活性を示した。分解
物のＢｉｏ Ｇｅｌ Ｐ−１０カラムによるゲル濾過パ
ターンとＡＣＥ阻害活性を図２Ｂに示す。Ｃｏｉｘｉｎ
同様、ｚｅｉｎは小さい分子量のペプチドにまで分解さ
れ、それらの全ての画分にＡＣＥ阻害作用があった。Ｃ
ｏｉｘｉｎの場合と異なり、管数６３以降に小さいピー
クが現れたが、これは恐らくｚｅｉｎに混在した色素と
推定される。

【００２９】

【実施例６】精白ハトムギ粉末２５０ｇに９０％酢酸２
５０ｍｌを加えて攪拌後、同容の水を加えてホモゲナイ
ズし、室温で１時間攪拌した。酢酸濃度が４．５％にな
るよう水で希釈し、１／１００量のペプシンを加えて、
３７℃で２０時間インキュベートした。酢酸除去後、１
／１００量のプロレザーを用い、ｐＨ９、５０℃で２０
時間分解した。遠心分離して得られた上清を凍結乾燥し
て精白ハトムギ分解物とした。分解物の収量は６４．４
ｇ（収量＝２５．８％）で、そのＡＣＥ阻害活性ＩＣ
_５０は４６０μｇ／ｍｌであつた。

【００３０】

【実施例７】上記で得た分解物のヒト末梢血好中球にお
けるＴＮＦ−α産生抑制作用、白血球における活性酸素
産生抑制作用、及び抗腫瘍作用について調べた。 ＴＮＦ−α産生抑制作用：まず、好中球浮遊液（１．０
×１０^８細胞／ｍｌ）５００μｌの試料溶液を加え、３
７℃で１時間インキュベートした。次いで、終濃度が
０．１μｇ／ｍｌになるようにリポポリサッカライド
（ＬＰＳ）を添加して６時間インキュベートした後、培
養上清を採り、産生されたＴＮＦ−α量をＥＬＩＳＡ法
にて測定して調べた。 活性酸素産生抑制作用：まず、白血球浮遊液（０．５〜
１．０×１０^８細胞／ｍｌ）１００μｌに試料溶液−Ｈ
ＢＳＳ−５０μＭルシフェリン溶液（２０μｌ：７３０
μｌ：５０μｌ）を加え、３７℃で１４０秒間インキュ
ベートした。次いで、２０μＭ ｆ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−
Ｐｈｅ（ｆＭＬＰ）を１００μｌ添加して６分間インキ
ュベートした後、産生された活性酸素量を測定して調べ
た。 抗腫瘍作用：５週令の雄マウス（ｄｄｙ）の腹腔内に、
０．２５ｍｌのＳａｒｃｏｍａ １８０腹水腫瘍細胞浮
遊液（８×１０^６細胞／ｍｌ）を移植した後、０．２５
ｍｌの試料溶液（３００ｍｇ／ｍｌ）を、毎日６日間連
続投与して飼育した。試料投与群と対照群のマウス体重
の経日的増加（腫瘍細胞増殖）を測定し、細胞移植後の
生存日数を比較して、抗腫瘍作用の有無を判定した。

【００３１】図３に示すように、精白ハトムギのプロテ
アーゼ分解物にはＴＮＦ−α産生と活性酸素産生を抑制
する作用が認められ、その作用はいずれも濃度依存的で
あった。また、マウス腹腔内に投与したＳａｒｃｏｍａ
１８０腹水腫瘍細胞の増殖は抑制され、マウスに対し
て延命効果を示すことがわかった。これらの結果から、
精白ハトムギのプロテアーゼ分解物中には、ＴＮＦ−α
産生抑制成分、活性酸素産生抑制成分、及び抗腫瘍成分
が含まれることが立証された。

【００３２】

【実施例８】分解物をＢｉｏ Ｇｅｌ Ｐ−１０カラム
を用いたゲル濾過によって分画した結果、図４に示すよ
うに、分解物中には分子量の大きい成分の量は少なく、
ＴＮＦ−α産生抑制成分は低分子量の広い領域に亘って
溶出された。

【００３３】

【実施例９】市販の玄米（福岡産“夢つくし”）粉末２
５０ｇを４５％酢酸で１時間処理した後、水で１０倍に
希釈してペプシン分解（１／００量、３７℃、２０時
間）を、次いでｐＨ９．０でプロレザー分解（１／００
量、５０℃、２０時間）を行った。可溶性成分を凍結乾
燥した結果、５１ｇ（収量＝２０．４％）の分解物が得
られた。そのＡＣＥ阻害活性(ＩＣ_５０)は６８０μｇ／
ｍｌで、図５上に示すように、ＴＮＦ−αの産生に対し
ては抑制作用と誘導作用を、白血球における活性酸素の
産生に対しては抑制作用を有することがわかった。

【００３４】分解物のゲル濾過の結果（図５下）から、
分解物中には高分子成分は余り含まれず、玄米中の蛋白
はかなり分解を受けていることがわかった。６つの画分
に分画し、ＴＮＦ−αと活性酸素の産生に及ぼす影響に
ついて調べた結果、ＴＮＦ−αでは画分１、２（高分子
成分）に誘導作用が、画分３〜６（低分子成分）に誘導
と抑制の両作用が認められ、活性酸素産生抑制作用は画
分５に認められた。

【００３５】また、各種試料の酢酸処理−ペプシン／プ
ロレザー分解物のＡＣＥ阻害活性(ＩＣ_５０)は、脱脂ハ
トムギ糠：１４５０μｇ／ｍｌ、玄麦ハトムギ：８８０
μｇ／ｍｌ、ハトムギ７０％エタノール抽出残渣：８３
０μｇ／ｍｌ、ハトムギ水抽出残渣：８９０μｇ／ｍ
ｌ、コメ糠：６８０μｇ／ｍｌであった。一方、ＴＮＦ
−α産生に及ぼす影響については、図６に示すように、
脱脂ハトムギ糠に誘導作用と抑制作用が、コメ糠に誘導
作用と促進作用が、その他には抑制作用のみが認められ
た。

【００３６】

【実施例１０】酒粕（（株）いそのさわ）を熱水ととも
にホモゲナイズし、遠心分離により可溶性成分（約６０
％）と残渣（約４０％）を得た。可溶性成分について
は、活性炭処理して非吸着成分と吸着成分に分画した。
前者には、グルコース（９２％）、アミノ酸（０．９３
％）、核酸（０．３％）及びニンヒドリン反応陽性の呈
味性成分が含まれ、後者には、主にペプチドが含まれ、
そのＡＣＥ阻害活性（ＩＣ_５０）は１．６２ｍｇ／ｍｌ
であった。

【００３７】一方、残渣については、５０％酢酸処理
後、５％酢酸溶液（ｐＨ２に調節）中でペプシン（１／
５０、３７℃、２４時間）分解を、次いでｐＨ９．０で
プロレザー（１／５０量、５０℃、１６時間）分解を行
った。得られた分解物は、６７％水可溶で、粗蛋白質
（４１．６％）、灰分（１２．０％）、食物繊維（１
２．０％）を含み、そのアミノ酸組成（モル％）は、下
記表３の通り、コメの不溶性蛋白質（プロラミンとグル
テリン）並びに酵母に由来するものと推定され、優れた
組成を有することがわかった。

【００３８】 表３．酒粕残渣プロテアーゼ分解物のアミノ酸組成（モル％） ────────────────────────── コ メ アミノ酸 酒粕残渣 ────────────── 分解物 プロラミン グルテリン ────────────────────────── Asp 7.72 7.36 10.16 Glu 16.57 20.79 19.02 Ser 7.77 5.92 5.67 Gly 6.01 5.54 4.27 His - 0.97 2.26 Arg 5.48 4.55 9.81 Thr 4.79 2.12 3.70 Ala 11.58 10.17 4.79 Pro 6.40 4.78 4.24 Tyr 3.62 7.81 5.28 Val 6.79 6.45 6.56 Met 0.92 0.08 1.25 Cys 0.63 0.00 0.94 Ile 3.72 4.48 4.38 Leu 9.73 13.20 8.05 Phe 4.74 5.16 5.77 Lys 3.52 0.08 3.86 ──────────────────────────

【００３９】上記によって製造した酒粕残渣プロテアー
ゼ分解物のＡＣＥ阻害活性ＩＣ_５０は２００μｇ／ｍｌ
であり、さらに、ヒトの血中コレステロ一ルを減少させ
ることがわかった。

【００４０】

【実験例１１】大麦発酵エキス乾燥物（三和酒類
（株））を酢酸処理後、４．５％酢酸溶液中でペプシン
分解（１／１００量、３７℃、２４時間）、次いでｐＨ
９．０でビオプラーゼ（ナガセ生化学（株））分解（１
／１００量、５０℃、１６時間）を行った。得られた分
解物のＡＣＥ阻害活性(ＩＣ_５０)は４４０μｇ／ｍｌで
あった。そのゲル濾過パターンを図７に示すが、画分４
〜７にＴＮＦ−α産生抑制作用が認められた。

【００４１】

【実施例１２】実施例４で得たｃｏｉｘｉｎペプシン／
プロレザー分解物のスプレードライ粉末１０ｇ、糖類１
５０ｇ、蜂蜜１５ｇ、アスコルビン酸１ｇ、クエン酸
０．５ｇ、香料適量に水を加えて１ｋｇとし、これを９
５℃で２０分間殺菌し、１００ｍｌずつ無菌時にビンに
充填して、健康ドリンクを製造した。

【００４２】

【実施例１３】実施例６で得た精白ハトムギのペプシン
／プロレーザー分解物の凍結乾燥粉末を用いて、下記に
より化粧水及びクリームを製造したが、いずれの製品も
アトピー性皮膚炎、しみぬきに効果があることがわかっ
た。

【００４３】次に示す化粧水用処方を用意した： （１）エタノール ５．０（重量％、以下同じ）、
（２）植物油 ０．１、（３）ポリオキシエチレン硬化
ヒマシ油 ０．５、（４）Ｄ−グルクロン酸ラクトン１
０．０、（５）プロピレングリコール ５．０、（６）
実施例６の凍結乾燥粉末 ２．０、（７）防腐剤、香料
適量、（８）精製水 全量１００．０

【００４４】先ず（１）〜（４）を溶解し、これを
（５）〜（８）の溶液に加えて溶解し、化粧水とした。

【００４５】次に示すクリーム用処方を用意した： （１）ワセリン ２．５（重量％、以下同じ）、（２）
流動パラフィン １０．０、（３）セトステアリルアル
コール １２．０、（４）ポリオキシエチレンソルビタ
ンモノステアレート ７．０、（５）ソルビタンモノス
テアレート１．０、（６）α，β−グルコオクトニック
−γ−ラクトン ２．０、（７）プロピレングリコール
５．０、（８）実施例６の凍結乾燥粉末 １．０、
（９）防腐剤、香料 適量（１０）精製水 全量１
００．０

【００４６】（１）〜（６）の油層、（７）〜（１０）
の水層をそれぞれ７５℃に加温し、混合乳化する。これ
を３０℃にまで冷却してクリームを製造する。

【００４７】

【発明の効果】本発明に係わる組成物は、天然由来であ
って、しかもＡＣＥ阻害作用、ＴＮＦ−α産生調節作
用、活性酸素産生抑制作用、抗腫瘍作用等優れた生理作
用を有する。しかも、安全性も高いため、本発明に係わ
る組成物は、通常の飲食品は勿論のこと、機能性飲食
品、外皮用剤、化粧品として有効利用される。

【図面の簡単な説明】

【図１】酢酸処理ｃｏｉｘｉｎのペプシン／プロレザー
分解物のＡＣＥ阻害活性に及ぼす処理酢酸濃度の影響を
示す。（ａ）：５％酢酸処理、（ｂ）：１０％酢酸処
理、（ｃ）：１５％酢酸処理、（ｄ）：２０％酢酸処
理、（ｅ）：３０％酢酸処理、（ｆ）：４０％酢酸処
理。

【図２】Ｃｏｉｘｉｎのペプシン／プロレザー（２０時
間）分解物（Ａ）とｚｅｉｎのペプシン／サーモライシ
ン（６時間）分解物（Ｂ）の水中におけるＢｉｏ Ｇｅ
ｌ Ｐ−１０カラム（２×２６ｃｍ）によるゲル濾過パ
ターンを示す。

【図３】精白ハトムギのペプシン／プロレザー分解物の
ＴＮＦ−α産生と活性酸素産生に及ぼす影響、並びに抗
腫瘍作用による延命効果を示す。

【図４】精白ハトムギのペプシン／プロレザー分解物の
Ｂｉｏ Ｇｅｌ Ｐ−１０カラム（２×２６ｃｍ）によ
るゲル濾過パターン（上図）と各画分のＴＮＦ−α産生
に及ぼす影響（下図）を示す。

【図５】玄米のぺプシン／プロレザー分解物のＴＮＦ−
α産生と活性酸素産生に及ぼす影響（上図）、並びにＢ
ｉｏ Ｇｅｌ Ｐ−１０カラム（２×２６ｃｍ）による
ゲル濾過パターン（下図）を示す。

【図６】各種ペプシン／プロレザー分解物のＴＮＦ−α
産生に及ぼす影響を示す。

【図７】大麦発酵エキス乾燥物のペプシン／ビオプラー
ゼ分解物の水中におけＢｉｏＧｅｌ Ｐ−１０カラム
（２×２６ｃｍ）によるゲル濾過パターン（上図）と各
画分のＴＮＦ−α産生に及ぼす影響（下図）を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 7/48 Ａ６１Ｋ 7/48 38/00 Ａ６１Ｐ 17/00 Ａ６１Ｐ 17/00 35/00 35/00 Ａ６１Ｋ 37/02 (56)参考文献 特開 昭63−233921（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−167198（ＪＰ，Ａ) 特開 平７−70180（ＪＰ，Ａ) 特開 平９−194391（ＪＰ，Ａ) 特開 平９−249695（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07K 1/00 - 19/00 C12P 21/00 - 21/06 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (3)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 精白ハトムギ粉末に９０％の酢酸を加え
   て攪拌後、同容の水を加え、インキュベイト処理し、得
   られた酢酸処理物をプロテアーゼ処理し、低分子化した
   ペプチド含有物を得ることを特徴とする生理活性ペプチ
   ド含有物の製造法。
2. 【請求項２】 インキュベイト処理が、１０〜５０℃、
   ０．５〜２時間の攪拌処理であることを特徴とする請求
   項１に記載の生理活性ペプチド含有物の製造法。
3. 【請求項３】 プロテアーゼ処理が、ペプシン分解後、
   更にプロレザー、パパイン、ブロメライン、サーモライ
   シンから選ばれる少なくともひとつのプロテアーゼによ
   る低分子化処理であることを特徴とする請求項１〜２の
   いずれか１項に記載の生理活性ペプチド含有物の製造
   法。