JP3010509B2 - 免疫測定用容器、免疫測定方法及び免疫測定装置 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、上部に少なくとも二つ
の開口部を有し、下方に筒状部を有する容器を用いてな
る免疫測定法に関する。更には、血液あるいは体液中の
微量成分の定量により臨床検査に用いる免疫測定法に関
する。

【０００２】

【従来の技術】放射免疫測定法（以下ＲＩＡと省略す
る）及び酵素免疫測定法（以下ＥＩＡと省略する）は、
検体中の測定対象物を検出する高感度な測定法ではある
が、検体中に存在する測定対象物以外の物質の影響を受
けやすいため、これを除く方法として、バインド／フリ
ー（Ｂ／Ｆ）分離操作が測定中に用いられている。この
操作を効率よく行うため、抗原又は抗体を結合した固相
を用いる固相法がある。一般に、固相法によるＲＩＡ及
びＥＩＡは、測定中に反応、洗浄、検出等の工程を含ん
でおり、この工程を実施するために、分注、希釈、撹
拌、Ｂ／Ｆ分離、固相の移動等の複雑な操作を繰り返し
行っており、その操作に対し、いくつかの改良技術が知
られている。その一つに測定のために用いられる容器の
改良がある。容器の改良の例として、磁性粒子を入れる
ための専用容器であるマイクロプレート及びこのプレー
トに合う磁石の入った磁気分離デバイスを用いる方法が
報告されている（特開平１−２０１１５６号参照）。さ
らに他の例としては、自動化を目指し、繊維状マトリク
スを有する反応ウエル、試料ウエル等の複数のウエルを
有する容器を用いる方法が知られている（特開昭６３−
２８１０５３号参照）。

【０００３】一方、ＲＩＡ及びＥＩＡにおいて、多量の
検体の測定のため自動化された測定機器が開発されてい
る。この機器は、測定の際使用する固相及び標識物の種
類により各種知られている（「酵素免疫測定法」石川栄
治著、医学書院１８０〜２０７ぺージ（１９８７）参
照）。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】一般に固相を用いるＲ
ＩＡ及びＥＩＡは、測定操作中に繁雑な分注、希釈、撹
拌、Ｂ／Ｆ分離、固相の移動等の操作を必要としてい
る。これを解決する手段として、前記したマイクロプレ
ート及び磁気分離デバイスを用いる方法、さらには複数
のウエルを有する容器を用いる方法等が知られているも
のの、測定時間が１〜１８時間と長く、緊急の検査がで
きないこと、大量の検体の測定が迅速に行えないこと、
抗原検出系又は抗体検出系等の異なった検出系に対し同
一の容器による測定が簡単にできないこと等の欠点を有
していた。さらに前記した改良された容器を用いた場合
でも、測定機器は、未だ複雑な測定操作を必要としてい
た。

【０００５】そこで本発明は、これらの問題点を解決し
た免疫測定用容器、免疫測定方法及び免疫測定装置を提
供することを目的としている。

【０００６】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明による免疫測定用容器は、例えば図１に示す
ように、上部にそれぞれ開口部１、２、３を有する少な
くとも２つの筒状部８、９、１０を有し（図１には３つ
の筒状部を有する場合を示してあり、例えば図２には２
つの筒状部１１、１２を有する場合を示してある）；筒
状部８、９、１０のうち少なくとも１つの筒状部８は、
他の１つの筒状部９（又は１０）よりも下方に長いこと
を特徴とする。

【０００７】このように構成すると、少なくとも１つの
筒状部は、他の１つの筒状部よりも下方に長いので、そ
の長い筒状部は容量が大きく、例えば抗体結合固相を入
れ、さらに反応液を入れることができ、また外部からの
検出が容易である。

【０００８】この免疫測定用容器では、下方に長い筒状
部８の内壁に抗原または抗体を結合して、他の１つの筒
状部１０（又は９）に試薬を入れた構成としてもよい。
試薬とは、抗原の結合した固相または抗体の結合した固
相も含む概念であるが、ここで前記他の１つの筒状部１
０に入れるのは、典型的には酵素標識抗体溶液または酵
素標識抗原溶液や血清又は希釈液等である。

【０００９】このように構成すると、試薬を入れた筒状
部からその試薬を分取し、下方に長い筒状部に注入し
て、内壁に結合した抗原または抗体と試薬とを反応させ
て測定することができる。

【００１０】また、前記免疫測定用容器では、開口部
１、２、３をシールしてもよい。

【００１１】このように構成すると、開口部をシールす
るので、筒状部に入れた試薬等が封入され、免疫測定容
器の取扱が容易になる。また、試薬を入れた容器は、使
用時まで安定性よく保存することができる。試薬を吸引
分注するためには、シールを例えばシールブレーカーに
より破ればよい。

【００１２】また、下方に長い筒状部８に抗原結合固相
または抗体結合固相を入れて、他の１つの筒状部１０
（又は９）に試薬を入れてもよいし、さらに開口部１、
２、３をシールしてもよい。

【００１３】ここで、前記免疫測定用容器では、固相が
磁性粒子であってもよいし、また、固相がビーズであっ
てもよい。

【００１４】このように構成すると、磁性粒子を用いた
場合は、例えば外部磁力によりＢ／Ｆ分離操作を容易に
行うことができるため測定に好適に用いることができ
る。このとき、Ｂ／Ｆ分離操作は、他の筒状部より下方
に長い筒状部で行うことにより、外部よりの磁力を磁性
粒子の近くに置くことができ、測定を効率よく実施する
ことができる。またビーズの場合は、下方に長い筒状部
の容量が大きいため、免疫反応、Ｂ／Ｆ分離操作等に好
適に用いることができる。

【００１５】ここで、前記免疫測定用容器では、試薬が
標識抗体または標識抗原であってもよい。

【００１６】さらに上記目的を達成するために、本発明
による免疫測定方法は、前記いずれかの免疫測定用容器
を用いて行うことを特徴とする。

【００１７】このようにすると、少なくとも１つの筒状
部が他の１つの筒状部よりも下方に長い容器を用いるの
で、その容量の大きい長い筒状部に、例えば抗体結合固
相を入れ、さらに反応液を入れることができ、その長い
筒状部の内部の様子は外部から容易に検出ができる。ま
た、開口部をシールした容器を用いる場合は、容器の筒
状部に入れた試薬等が封入されるため、免疫測定容器の
取扱が容易になるし、試薬を吸引分注するためには、シ
ールを例えばシールブレーカーにより破ればよい。

【００１８】また、本発明による別の免疫測定方法で
は、前記いずれかの免疫測定用容器を提供し；例えば図
１に示される容器の場合、下方に長い筒状部８に、検体
と、前記他の１つの筒状部１０中の試薬とを注入して免
疫複合体を形成させ；下方に長い筒状部８中に形成され
た前記免疫複合体を測定する。

【００１９】さらに、以上の免疫測定用容器では、上部
にそれぞれ開口部を有する少なくとも３つの筒状部を有
することとしてもよい。

【００２０】このように構成すると、例えば図１に示さ
れるような３つの筒状部を有する容器の場合、他の２本
の筒状部よりも下方に長い筒状部８には、抗原結合固相
または抗体結合固相を入れ、筒状部９には検体又は希釈
液を入れ、筒状部１０には標識抗体又は標識抗原を入
れ、筒状部８では反応、Ｂ／Ｆ分離及び検出を行い、筒
状部９では、反応又は希釈を行うというような用い方が
できる。

【００２１】また、前記免疫測定用容器では、試薬が標
識抗体または標識抗原であってもよいし、さらに、前記
下方に長い筒状部及び前記他の１つの筒状部とは別の第
３の筒状部に血清または希釈液を入れた構成としてもよ
いし、さらに前記免疫測定用容器では、前記開口部をシ
ールした構成としてもよい。

【００２２】また、本発明の別の免疫測定方法では、前
記いずれかの免疫測定用容器を用いて測定を行う。

【００２３】また、本発明のさらに別の免疫測定方法で
は、前記いずれかの免疫測定用容器を提供し；前記下方
に長い筒状部に、検体と前記他の１つの筒状部中の標識
抗体または標識抗原と前記第３の筒状部中の血清または
希釈液とを注入して免疫複合体を形成させ；前記下方に
長い筒状部中に形成された前記免疫複合体を測定する。

【００２４】また、前記いずれかの免疫測定用容器で
は、前記標識抗体または標識抗原がそれぞれ酵素標識抗
体または酵素標識抗原であるものとしてもよい。

【００２５】また、さらに前記標識抗体または標識抗原
がそれぞれ酵素標識抗体または酵素標識抗原である免疫
測定方法としてもよい。

【００２６】さらに前記目的を達成するために、本発明
による免疫測定装置は、前記いずれかの免疫測定方法に
用いる免疫測定装置において；図７に示されるように、
前記免疫測定用容器を供給する供給部１３０と；前記検
体と前記試薬とを混合し、かつ前記測定対象物を検出す
る処理部１１０と；前記供給部１３０と前記処理部１１
０とを制御する制御部１０５とを備える。

【００２７】さらに前記目的を達成するために、本発明
による免疫測定方法は、自動制御によって、前記免疫測
定用容器を提供し、前記検体と前記試薬とを混合し、か
つ前記測定対象物を検出するものとするのが好ましい。

【００２８】このように構成すると、制御部を備え、あ
るいは自動制御によって検出を制御するので、多項目の
測定対象物の測定に迅速に対応できる。

【００２９】

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て、説明する。本発明は、測定対象物である例えば血清
あるいは体液中の抗原又は抗体の測定にあたり、上部に
少なくとも二つの開口部を有し、下方に筒状部を有する
容器、及びそのような容器を用いることにより、従来の
繁雑かつ複雑な測定操作を改善し、短時間で各検出系の
多項目の測定対象物にも対応できる免疫測定方法（適宜
「免疫測定法」という）、そしてそのような免疫測定装
置を提供しようとするものである。特に、自動化された
測定機器を用いる免疫測定には威力を発揮する容器であ
り測定方法、測定装置である。

【００３０】本発明は、ＥＩＡ及びＲＩＡに採用するこ
とができる。該ＥＩＡ及びＲＩＡは、標識物を用いる１
ステップ法又は２ステップ法の固相法免疫測定法を意味
し、抗原あるいは抗体を測定することができる。例えば
２ステップ法の抗原検出系では、３つの開口部を有する
容器を用い、まず一つの筒状部に、標識抗体溶液を入れ
た他の筒状部から分取した標識抗体溶液と検体とを加え
混合し反応させる。この混合液の一部をさらに抗体結合
固相の入ったもう１つの筒状部に加え撹拌し、反応させ
たのち、Ｂ／Ｆ分離後、基質との反応を行い、酵素活性
から固相に結合した抗原量をこの筒状部内で測定する方
法である。

【００３１】この測定法は、この三つの開口部を有する
容器の中で各測定工程の操作である希釈、分注、撹拌、
Ｂ／Ｆ分離、測定等のすべての操作を行う方法である。
前記した抗体結合固相の入った筒状部は、固相及び反応
液を入れることができ、さらに外部よりの検出を容易に
するため他の筒状部より下方に長く、容量の大きい形状
であることが好ましい。

【００３２】また容器の開口部の数は、少なくとも二つ
の開口部を有するものとし、測定対象物によつても決ま
るがその数には制限はなく、操作性及び簡便性により決
めることができる。例えば、２種の抗体結合固相を別々
の筒状部にそれぞれ入れ、１つの検体に対して同時に２
項目の測定を行うことができる。又、同種の抗体結合固
相を別々の筒状部に入れ、同時に２つの検体を測定する
こともできる。

【００３３】更に、四つの開口部を有する容器を用いて
４つ目の筒状部を検体希釈槽として使うこともできる。
前記した抗体結合固相の入った筒状部は、固相及び反応
液を入れ、さらに外部よりの検出を容易にするため他の
筒状部より下方に長く、容量の大きい形状であることが
好ましい。

【００３４】本発明を実施するための容器は、プラスチ
ック製、例えばポリスチレン樹脂製、アクリル樹脂製、
塩化ビニル樹脂製等、又はガラス製のものを使用するこ
とができるが、低価格であり、光透過性がよく、取扱い
が容易なポリスチレン樹脂製のものを好適に使用するこ
とができる。

【００３５】この容器は、少なくとも二つの開口部を有
しているが、筒状部以外の部分には、本発明の目的を達
成するため必要に応じ突起部等を付加することもでき
る。

【００３６】また、容器は試薬等を入れ、容器の上面を
シールしても使用することができる。この時、容器の上
面は平らであることが好ましい。この方法により容器に
は、試薬類、例えば抗原もしくは抗体の結合した固相又
は酵素標識抗体溶液もしくは酵素標識抗原溶液等を入れ
ておき、使用時まで安定性よく保存することができる。
シール剤は、アルミはく、各種高分子フィルム等を単独
又はラミネートして使用することができ、使用開始時に
はブレーカー等により破って使用することができる。

【００３７】本発明を実施するために用いられる試薬の
うち抗原結合固相又は抗体結合固相としては、従来のＥ
ＩＡで行われているように、抗原又は抗体を化学的にあ
るいは物理的に筒状部内壁に結合させたもの、抗原又は
抗体を同様に結合させたビーズあるいは粒子等を挙げる
ことができる。このビーズとしては、通常ＥＩＡで用い
られるポリスチレン製のビーズ等を挙げることができ
る。さらに粒子としては磁性粒子、例えば、磁性体、磁
性体を含む粒子等であり、具体的にはフェライト粒子を
挙げることができる。

【００３８】磁性粒子は、外部磁力によりＢ／Ｆ分離操
作を容易に行うことができるため測定に好適に用いるこ
とができる。この際、Ｂ／Ｆ分離操作は、他の筒状部よ
り下方に長い前記した筒状部で行うことにより、外部よ
りの磁力を磁性粒子の近くに置くことができ効率よく実
施することができる。

【００３９】固相に結合する抗原又は抗体は、検体中の
測定対象物により決めることができる。抗原は薬剤、例
えばテオフィリン、フェニトイン、バルプロ酸；低分子
ホルモンとして、例えばサイロキシン、エストロゲン、
エラストラジオール；癌マーカーとして、例えばＣＥ
Ａ、ＡＦＰ；高分子ホルモンとして、例えば甲状腺刺激
ホルモン（ＴＳＨ）、インスリン；サイトカインとし
て、例えばＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−６；各種グロス
ファクターとして、例えばＥＧＦ、ＰＤＧＦ等、抗体は
例えばＨＩＶ、ＡＴＬＡ、ＨＢＶ等に対する抗体；更に
前記ウイルスの適当なＤＮＡ、ＲＮＡなどに対する抗体
等を挙げることができる。固相に結合する抗体は、モノ
クローナル抗体又はポリクローナル抗体であってもよ
く、さらには抗体の分解物であるＦ（ａｂ’）₂ 、Ｆａ
ｂ’、Ｆａｂであってもよい。また、固相に結合する抗
原は、ウイルスの構成成分、例えばＨＩＶ、ＡＴＬＡ、
ＨＢＶ；前記のウイルスのＤＮＡ、ＲＮＡ等である。

【００４０】抗原又は抗体の固相への結合方法は、例え
ば物理吸着法又は化学結合法等を採用することができ
る。物理吸着法は、適当な緩衝液中で前記固相と抗原又
は抗体とを吸着させることにより行うものである。この
吸着の際に使用する緩衝液としては、リン酸緩衝液、ト
リス−塩酸緩衝液、炭酸緩衝液等を挙げることができ
る。吸着は、両者を４℃〜３７℃、好適には室温にて混
合することにより容易に進行し、目的物を得ることがで
きる。又、化学結合法は、いわゆるペプチド結合法にお
けるカルボジイミド法を採用することができる。さらに
その他の化学結合法としては、グルタールアルデヒドや
塩化シアヌルなどの二価性架橋試薬の存在下に行う方法
も採用することができる（「ペプチド合成法」丸善株式
会社（昭和５０年発行）及び「酵素免疫測定法」共立出
版株式会社、「蛋白質核酸酵素」別冊第３１号（１９８
７年）参照）。

【００４１】ＥＩＡで用いる酵素標識抗体の製造にあた
り、用いる抗体は測定対象物により決まり、例えばサン
ドイッチ法による抗原検出系では固相結合抗体と異なる
エピトープを認識する抗体あるいは同じエピトープを認
識する抗体であってもよい。さらに、抗体検出系では測
定対象となる抗体と同じ動物種のイムノグロブリンに対
する抗体を用いることができる。また、抗体と酵素との
結合方法は、公知の共有結合又は非共有結合を使う方法
を利用して製造することができる（例えば、「蛋白質核
酸酵素」別冊第３１号、３７〜４５ページ（１９８７）
参照）。

【００４２】ＥＩＡで用いる酵素標識物質に使用する酵
素は、パーオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β
−Ｄ−ガラクトシダーゼ、グルコースオキシダーゼなど
である。この際基質は、用いる酵素に適したものを用い
ることは言うまでもなく、例えばＡＢＴＳ、ルミノール
−Ｈ₂ Ｏ₂ （パーオキシダーゼ用）、ｐ−ニトロフェニ
ルホスフェート、メチルウンベリフェニルホスフェー
ト、３−（２’−スピロアダマンタン）−４−メトキシ
−４−（３”−ホスホリルオキシ）フェニル−１，２−
ジオキセタン ２ナトリウム塩（以下ＡＭＰＰＤと省略
する）（アルカリホスファターゼ用）、ｐ−ニトロフェ
ニル−β−Ｄ−ガラクトース、メチルウンベリフェニル
−β−Ｄ−ガラクトース （β−Ｄ−ガラクトシダーゼ
用）などを使用することができる。

【００４３】測定は４〜４０℃で反応させ、生じた発
色、蛍光あるいは発光量を検出装置により測定すること
により行うことができる。これらの測定法は、それぞれ
比色法、蛍光法及び化学発光法による酵素免疫測定法と
呼ばれている。検出装置としては、分光光度計、蛍光光
度計、フォトンカウンター等の他、写真フイルム等を用
いることもできる。さらに測定は、４℃〜４０℃の範囲
で加温しながら行ういわゆるレート法を採用することも
できる。

【００４４】又、ＲＩＡは、上記酵素標識の代わりに
¹²⁵Ｉなどの放射性同位元素を標識し、行うものであ
る。放射能を測定する以外は、操作は前記ＥＩＡの場合
と同じである。

【００４５】又、ＲＩＡで用いる抗原あるいは抗体の放
射標識は、既に市販されているボルトンハンター試薬に
より容易に行うことができる。例えば、０．１Ｍ炭酸水
素ナトリウム水溶液に溶かした抗原あるいは抗体溶液に
このボルトンハンター試薬を加え１〜２時間後に、Ｇ−
２５の脱塩カラム等を用いて未反応のボルトンハンター
試薬を除去することにより調製することができる。

【００４６】この他、クロラミンＴ法やヨードジン法な
どを採用することにより容易に ¹²⁵Ｉの放射標識を行う
ことができる。免疫反応を行うにあたっては例えば抗体
結合固相に検体を加え、４℃〜４０℃好ましくは２０℃
〜３８℃で１〜１８時間反応させる。この後、蒸留水あ
るいは生理食塩水等で洗浄を行い、放射標識抗体を固相
に加え、４℃〜４０℃好ましくは２０℃〜３８℃で１〜
１８時間反応させ、蒸留水あるいは生理食塩水等で洗浄
を行い、固相上の放射活性を計測する。測定にはシンチ
レーションカウンターを使用することができる。

【００４７】以上、本発明をマニュアルによる操作に従
って説明してきたが、それぞれの操作を機械化し、自動
免疫測定装置を組むことができる。本発明を実施するこ
とができる自動免疫測定装置としては、例えば図７に示
すような装置がある。図７に示された装置は、前記開口
部を有する容器が反応ライン部１１１をＳからＥ方向へ
移動する間に検体と抗原結合固相あるいは抗体結合固
相、酵素標識抗体あるいは酵素標識抗原及び基質液等の
混合、撹拌、反応、Ｂ／Ｆ分離、測定等の一連の処理が
為され、途中で人手を介することなく免疫測定が終了す
るものである。

【００４８】以下、本発明の実施の形態について、図面
を参照して詳細に説明する。なお、各図において互いに
同一あるいは相当する部材には同一符号を付し、重複し
た説明は省略する。

【００４９】図１に、本発明の一実施の形態である容器
の例を示す。ここで本発明を実施するにあたり使用する
容器は、開口部１、２及び３を有している。各開口部に
は開口があけられている。またこの容器は開口部１、
２、３から下方に筒状である筒状部８、９、１０をそれ
それ有する。即ち図１に示されるように、各筒状部８、
９、１０が各開口１、２、３を有する。開口部１を有す
る筒状部８は、他の二本の筒状部よりも下方に長い筒状
部を有し、抗原結合固相又は抗体結合固相を入れ反応、
Ｂ／Ｆ分離及び検出を行うためのものである。筒状部は
開口部から下方に筒状を呈している。開口部２を有する
筒状部９は、検体又は希釈液を入れ、反応又は希釈を行
うための筒状部である。この筒状部９は、検体中の抗原
検出系では反応のために、抗体検出系では希釈のために
用いることができる。開口部３を有する筒状部１０は、
ＥＩＡでは酵素標識抗体又は酵素標識抗原又ＲＩＡでは
放射性同位元素標識抗体又は放射性同位元素標識抗原を
入れるためのものである。

【００５０】図２は、別の容器の実施態様を示す一例で
ある。この容器は、開口部４及び５を有しており、各
々、図１の筒状部８及び１０に相当する作用を持つ筒状
部１１及び１２がある。二つの開口部を有するこの容器
は、希釈操作を行わず測定するために好適に用いること
ができる。

【００５１】図３は、免疫測定の効率化を計るために工
夫された容器の実施態様を示す一例である。この容器
は、３つの開口部を有しており、図１の筒状部８に相当
する作用を持つ筒状部１３、１５及び図１の筒状部１０
に相当する作用を持つ筒状部１４がある。この容器は筒
状部１３及び１５に同じ種類の抗原結合固相又は抗体結
合固相を入れることにより、同時２血清測定に用いるこ
とができる。又異なる種類の抗原結合固相または抗体結
合固相を入れることにより、同時２項目測定に用いるこ
ともできる。

【００５２】図４は、別の容器の実施態様を示す一例で
ある。この容器は、４つの開口部を有しており、各々、
図３の筒状部１３、１４及び１５に相当する作用を持つ
筒状部１６、１７及び１９がある。筒状部１８を有する
この容器は希釈操作を行なう同時２項目測定を行なうた
めに好適に用いることができる。

【００５３】図５は、固相として磁性粒子を用いたとき
のＢ／Ｆ分離操作を行う場合の一例である。図中６は、
筒状部８に隣接して置かれ磁力を発生する装置であり、
永久磁石でも電磁石であってもよい。

【００５４】図６は、検出を行う場合の一例である。図
中７は、検出装置であり、ＥＩＡでは使用する基質に応
じ、発色強度、蛍光強度又は発光量を検出するための装
置である。ＲＩＡでは放射活性を検出するための装置で
ある。

【００５５】図７は、本発明を実施するに当り、用いる
ことのできる自動測定装置を示す一例である。

【００５６】

【実施例】以下参考例、実施例及び測定例により更に詳
細に本発明を説明する。

【００５７】（参考例１）カルボキシル化フェライト粒
子の調製 カルボキシル化フェライト粒子は、日本ペイント社製フ
ェライト被覆粒子（核の平均粒径０．３μｍのポリスチ
レン製）５ｇに３−アミノプロピルトリエトキシシラン
５０mlを加え、更に氷酢酸３０mlを添加し、室温下３時
間反応し、洗浄後、無水グルタル酸を反応させることに
より得られる。氷酢酸は氷冷下撹拌しながら滴下し、洗
浄は蒸留水、メタノール、蒸留水で各々３回ずつ洗浄し
更に、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液で３００mlずつ
５回洗浄した。無水グルタル酸との反応は、粒子の５wt
％溶液（０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液）１００mlに
無水グルタル酸２．８５ｇを加え、１０分間反応させ
た。反応終了後、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液で３
００mlずつ３回洗浄し、更に蒸留水で５回洗浄し、これ
をカルボキシル化フェライト粒子として用いた。

【００５８】（参考例２）抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合フ
ェライト粒子の調製 ２０ｍＭリン酸緩衝液（pH４．５）５mlに参考例１で調
製したカルボキシル化フェライト粒子５０mgを分散さ
せ、これに水溶性カルボジイミド５０mgを加えた。室温
で２０分間反応させた後、上清を除去し、抗ＴＳＨマウ
スＩｇＧ溶液（１mg／ml、０．０２Ｍリン酸緩衝液、pH
４．５）５mlを加え、エンドオーバーエンドミキサーで
撹拌した。２時間後この粒子を２％ＢＳＡ溶液（０．１
Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、pH７．
５）で５回洗浄し、これを同じＢＳＡ溶液に分散させ、
抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合フェライト粒子とした。

【００５９】（実施例１）抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合筒
状部の調製 図１に示した容器の筒状部８に抗ＴＳＨマウスＩｇＧ溶
液（４μｇ／ml、１０ｍＭリン酸緩衝液、pH７．０）を
２００μｌ入れ室温で１８時間放置した。この筒状部８
を生理食塩水で３回洗浄し、２％ＢＳＡ溶液（０．１Ｍ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、pH７．６）
を３００μｌ加え、抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合筒状部と
した。

【００６０】（参考例３）抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合ポ
リスチレンビーズの調製 抗ＴＳＨマウスＩｇＧ溶液２５ml（４μｇ／ml、１０ｍ
Ｍ リン酸緩衝液）中に１／８インチポリスチレンビー
ズ１００個を浸し、室温で一夜放置した。このビーズを
生理食塩水で３回洗浄し、２％ＢＳＡ溶液（上記に同
じ）を２５ml加え抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合ポリスチレ
ンビーズとした。

【００６１】（実施例２）ＴＳＨ測定用容器の調製 （２−１）粒子型ＴＳＨ測定用容器の調製 参考例２で調製した抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合フェライ
ト粒子（０．０４％粒子）２５０μｌを図１で示した容
器の筒状部８に入れ、筒状部１０にアルカリホスファタ
ーゼ結合抗ＴＳＨマウスＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液（０．１
Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．１ｍＭ ＺｎＣｌ₂ 、１ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂ 、pH７．５、２％ＢＳＡ、５００ｎｇ／
mlアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウスＩｇＧＦ
ａｂ’含有）１００μｌを入れた。この容器の開口部を
アルミシールでカバーし、ヒートシールした。これを粒
子型ＴＳＨ測定用容器として用いた。

【００６２】（２−２）チューブ型ＴＳＨ測定用容器の
調製 実施例１で調製した抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合筒状部を
有する容器の筒状部１０にアルカリホスファターゼ結合
抗ＴＳＨマウスＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液（０．１Ｍ Ｔｒ
ｉｓ−ＨＣｌ、０．１ｍＭ ＺｎＣｌ₂ 、１ｍＭ Ｍｇ
Ｃｌ₂ 、pH７．５、２％ＢＳＡ、５００ｎｇ／mlアルカ
リホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウスＩｇＧＦａｂ’含
有）１００μｌを入れた。この容器の開口部をアルミシ
ールでカバーし、ヒートシールした。これをチューブ型
ＴＳＨ測定用容器として用いた。なおアルミシールとし
ては、接着面がポリビニルクロライドでコートされたア
ルミホイルを用いることができる。

【００６３】（２−３）ビーズ型ＴＳＨ測定用容器の調
製 参考例３で調製した抗ＴＳＨマウスＩｇＧ結合ポリスチ
レンビーズ１個を図１で示した容器の筒状部８に入れ２
％ＢＳＡ溶液を２５０μｌ加えた。次に筒状部１０にア
ルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウスＩｇＧ−Ｆａ
ｂ’溶液（０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．１ｍＭ
ＺｎＣｌ₂ 、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、pH７．５、２％ＢＳ
Ａ、５００ｎｇ／mlアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳ
ＨマウスＩｇＧＦａｂ’含有）１００μｌを入れた。こ
の容器の開口部をアルミシールでカバーし、ヒートシー
ルした。これをビーズ型ＴＳＨ測定用容器として用い
た。

【００６４】（参考例４）ＨＴＬＶ−Ｉ抗原結合フェラ
イト粒子の調製 日本ペイント社製フェライト粒子を１０％濃度で分散さ
せた溶液８００μｌに、ＨＴＬＶ−Ｉ抗原（４００μｇ
／ml）を２ml加え室温で一夜エンドオーバーエンドミキ
サーで撹拌した。この粒子を２％ＢＳＡ溶液（０．１Ｍ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、pH７．５）
で５回洗浄し、これを同じＢＳＡ溶液に分散させＨＴＬ
Ｖ−Ｉ抗原結合フェライト粒子とした。

【００６５】（実施例３）ＨＴＬＶ−Ｉ抗体検出用容器
の調製 図１で示した容器の筒状部８に参考例４で調製したＨＴ
ＬＶ−Ｉ抗原結合フェライト粒子（０．００８％／粒子
／ＢＳＡ溶液）３５０μｌを入れた。次に筒状部１０に
アルカリホスファターゼ結合抗ヒトＩｇＧマウスＩｇＧ
３００μｌを入れた。この容器の開口部をアルミシール
でカバーしヒートシールして目的の容器とした。

【００６６】（実施例４）各容器によるＴＳＨの測定 実施例２で調製した各容器の開口部のアルミシールをシ
ールブレーカーでやぶり、５０μｌのＴＳＨを含むサン
プル（０、１、３、６、１２μＵ／ml）及び各筒状部１
０に入ったアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウス
ＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液５０μｌ（アルカリホスファター
ゼ結合抗ＴＳＨマウスＩｇＧ−Ｆａｂ’濃度５００ｎｇ
／ml、０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、２％ＢＳＡ、１ｍ
ＭＭｇＣｌ₂ 、０．１ｍＭ ＺｎＣｌ₂ 、pH７．５）を
各筒状部９に入れ混合した。

【００６７】（４−１）ビーズ型ＴＳＨ測定用容器によ
る測定 サンプルとアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウス
ＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液とを混合して１０分後、実施例
（２−３）で調製した容器の筒状部９に入った混合液３
０μｌをビーズの入った筒状部８に加え撹拌した。１０
分後上清をアスピレーションにより除き、生理食塩水で
４回洗浄した。この筒状部８にＡＭＰＰＤ１００μｇ／
mlを含む基質液（０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ
ＭｇＣｌ₂ 、pH９．８）３００μｌを加え室温で反応
させた。１０分間反応を行った後ルミノメーター（アロ
カ社製）で５秒間の発光量を測定した。結果を図８に示
す。

【００６８】（４−２）チューブ型ＴＳＨ測定用容器に
よる測定 サンプルとアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウス
ＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液を混合して１０分後、実施例（２
−２）で調製した容器の筒状部９に入った混合液３０μ
ｌを抗体を結合した筒状部８に加え撹拌した。１０分後
上清をアスピレーションにより除き、生理食塩水で４回
洗浄した。この筒状部８に実施例４−１と同じＡＭＰＰ
Ｄ溶液を３００μｌ加え室温で反応させ、５分後にルミ
ノメーター（アロカ社製）で５秒間の発光量を測定し
た。結果を図８に示す。

【００６９】（４−３）粒子型ＴＳＨ測定用容器による
測定 サンプルとアルカリホスファターゼ結合抗ＴＳＨマウス
ＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液を混合して１０分後、実施例（２
−１）で調製した容器の筒状部９に入った混合液３０μ
ｌを抗体結合粒子の入った筒状部８に加え撹拌し、１０
分間放置した。この筒状部８を表面磁場が３０００ガウ
スの磁石に接して、フェライト粒子を集磁させ、上清を
アスピレーションにより排液した。この筒状部８に生理
食塩水を分注した後、前述の磁石によりフェライト粒子
を集磁し、上清をアスピレーションにより排液した。こ
の操作を４回繰り返した。この筒状部８に実施例４−１
と同じＡＭＰＰＤ溶液を３００μｌを加え室温で反応さ
せ、５分後にルミノメーター（アロカ社製）で５秒間の
発光量を測定した。結果を図８に示す。

【００７０】（実施例５）ＨＴＬＶ−Ｉ抗体検出用容器
を用いるＨＴＬＶ−Ｉ抗体の測定 実施例３で調製した容器の開口部のアルミシールをシー
ルブレーカーで破り、筒状部９に血清２０μｌを入れ、
更に希釈液（１０％ＮＲＳ、２％ ＢＳＡを含む０．１
Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、０．１ｍ
Ｍ ＺｎＣｌ₂、pH７．０）１８０μｌを加えた。この
希釈血清２０μｌを筒状部８に入ったＨＴＬＶ−Ｉ抗原
結合フェライト粒子と混合し、撹拌後３７℃で１０分間
放置した。この筒状部８の外側から表面磁場が３０００
ガウスの永久磁石を接してフェライト粒子を集磁させ、
上清をアスピレーションにより排液した。この後、０．
４％食塩水４００μｌを加え撹拌した。この筒状部を前
述の磁石により集磁させ、上清をアスピレーションして
排液した。この操作を２回繰り返した。

【００７１】この筒状部８に筒状部１０に入ったアルカ
リホスファターゼ結合抗ヒトＩｇＧマウスＩｇＧ溶液
（３００ｎｇ／ml）２５０μｌを加え１０分間放置し
た。この筒状部８を表面磁場が３０００ガウスの磁石に
接して、フェライト粒子を集磁させ、上清をアスピレー
ションにより排液した。この後０．４％食塩水４００μ
ｌを加え撹拌した。この筒状部を前述の磁石に接して上
清をアスピレーションにより排液した。この操作を４回
繰り返した。この筒状部に実施例４−１と同じＡＭＰＰ
Ｄ溶液を３００μｌ加え室温で５分間反応させた。５分
後にルミノメーター（アロカ社製）で５秒間の発光量を
測定した。各血清サンプルについて、結果を表−１に示
す。

【００７２】

【表１】

【００７３】（実施例６） ＣＡ１９−９の測定 （６−１）抗ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ結合フェライト
粒子の調製 参考例２と同様に抗ＣＡ１９−９モノクローナル抗体
（マウスＩｇＧ）２mgをカルボキシル化フェライト粒子
に反応させ、充分洗浄して抗ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ
結合フェライト粒子を調製した（０．０４％粒子／２％
ＢＳＡ、０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ
₂ 、０．１ｍＭ ＺｎＣｌ₂ 、pH７．５）。

【００７４】（６−２）粒子型ＣＡ１９−９測定用容器
の調製 実施例６−１で調製した抗ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ結
合フェライト粒子２５０μｌを図２で示した容器の筒状
部１１に入れ、筒状部１２にアルカリホスファターゼ結
合抗ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液（０．５
μｇ／ml）を３５０μｌ入れた。この容器の開口部にア
ルミシートをヒートシールした。

【００７５】（６−３）ＣＡ１９−９の測定 予め、実施例６−２で調製した容器の開口部のアルミシ
ールをシールブレーカーで破り、筒状部１１にＣＡ１９
−９標準液又は血清２０μｌを加え撹拌し、室温で１０
分間放置した。次にこの筒状部１１の外側に表面磁場が
３０００ガウスの磁石を接してフェライト粒子を集磁さ
せ、上清をアスピレーションにより排液し、この後、
０．２％食塩水を加えて撹拌した。この後上述と同様に
粒子を集磁させ上清を除去した。この操作を２度行い、
筒状部１２に入ったアルカリホスファターゼ結合抗ＣＡ
１９−９マウスＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液２５０μｌを筒状
部１１に加え撹拌した。室温で１０分後、前述の磁石で
フェライト粒子を集磁させ上清を除去した。次に洗浄液
４００μｌを加え撹拌し、再度集磁させ上清を除去し
た。この操作を４回繰り返した。次に実施例（４−１）
と同じ基質液を３００μｌ加え、撹拌し室温で５分間放
置し、直ちにルミノメーター（アロカ社製）で５秒間の
発光量を測定した。各血清サンプルの結果を表−２に示
す。

【００７６】

【表２】

【００７７】（実施例７） 粒子型ＣＡ１９−９測定用
容器の調製 （７−１） 実施例６−１で調製した抗ＣＡ１９−９マ
ウスＩｇＧ結合フェライト粒子２５０μｌを図３で示し
た筒状部１３、１５に入れ、筒状部１４にアルカリホス
ファターゼ結合抗ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ−Ｆａｂ’
溶液（０．５μｇ／ml）を６００μｌ入れた。この容器
の開口部にアルミシールをヒートシールした。

【００７８】（７−２） ＣＡ１９−９の測定 予め、実施例（７−１）で調製した容器の開口部のアル
ミシールをシールブレーカーで破り、筒状部１３、１５
に２種類の血清を各々２０μｌ加え撹拌し、室温で１０
分間放置した。次にこの筒状部１３、１５の外側に表面
磁場が３０００ガウスの磁石を接してフェライト粒子を
集磁させ、上清をアスピレーションにより排液し、この
後、０．２％食塩水を加えて撹拌した。この後上述と同
様に粒子を集磁させ上清を除去した。この操作を２度行
い、筒状部１４に入ったアルカリホスファターゼ結合抗
ＣＡ１９−９マウスＩｇＧ−Ｆａｂ’溶液２５０μｌを
筒状部１３、１５に加え撹拌した。室温で１０分後、前
述の磁石でフェライト粒子を集磁させ上清を除去した。
次に洗浄液４００μｌを加え撹拌し、再度集磁させ上清
を除去した。この操作を４回繰り返した。次に実施例
（４−１）と同じ基質液を３００μｌ加え、撹拌し室温
で５分間放置し、直ちにルミノメーター（アロカ社製）
で５秒間の発光量を測定した。各血清サンプルの結果を
表−３に示す。

【００７９】

【表３】

【００８０】（参考例５） ＨＢs 抗原結合フェライト
粒子の調製 日本ペイント社製フェライト粒子を５％濃度で分散させ
た溶液８００μｌに、ＨＢs 抗原（４００μｇ／ml）を
２ml加え室温で一夜エンドオーバーエンドミキサーで撹
拌した。この粒子を２％ＢＳＡ溶液（０．１Ｍ Ｔｒｉ
ｓ−ＨＣｌ、１ｍＭＭｇＣｌ2 、pH７．５）で５回洗浄
し、これを同じＢＳＡ溶液に分散させＨＢs 抗原結合フ
ェライト粒子とした。

【００８１】（実施例８） 粒子型ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨ
Ｂs 抗体検出用容器の調製 図４で示した容器の筒状部１６に参考例４で調製したＨ
ＴＬＶ−Ｉ抗原結合フェライト溶液（０．００８％／粒
子／ＢＳＡ溶液）３５０μｌを入れた。さらに筒状部１
９に参考例５で調製したＨＢs 抗原結合フェライト溶液
（０．００８％／粒子／ＢＳＡ溶液）３５０μｌを入れ
た。次に筒状部１７にアルカリホスファターゼ結合抗ヒ
トＩｇＧマウスＩｇＧ溶液６００μｌを入れた。この筒
状部をアルミシールでカバーしヒートシールして目的の
容器とした。

【００８２】（実施例９） ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＢs 抗
体の測定 実施例８で調製した容器の開口部のアルミシールをシー
ルブレーカーでやぶり、筒状部１８に血清２０μｌを入
れ、更に希釈液（１０％ＮＲＳ、２％ ＢＳＡを含む
０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、
０．１ｍＭ ＺｎＣｌ₂ 、pH７．０）１８０μｌを加え
た。この希釈血清２０μｌを筒状部１６、１９に入った
ＨＴＬＶ−Ｉ抗原結合フェライト粒子及びＨＢs 抗原結
合フェライト粒子とそれぞれ混合し、撹拌後３７℃で１
０分間放置した。この筒状部１６、１９の外側から表面
磁場が３０００ガウスの永久磁石を接してフェライト粒
子を集磁させ、上清をアスピレーションにより排液し
た。この後、０．４％食塩水４００μｌを加え撹拌し
た。この筒状部を前述の磁石により集磁させ、上清をア
スピレーションして排液した。この操作を２回繰り返し
た。

【００８３】この筒状部１６、１９に筒状部１７のアル
カリホスファターゼ結合抗ヒトＩｇＧマウスＩｇＧ溶液
（３００ｎｇ／ml）を各々２５０μｌづつ加え１０分間
放置した。この筒状部１６、１９を表面磁場が３０００
ガウスの磁石に接して、フェライト粒子を集磁させ、上
清をアスピレーションにより排液した。この後０．４％
食塩水４００μｌを加え撹拌した。この筒状部１６、１
９を前述の磁石に接して上清をアスピレーションにより
排液した。この操作を４回繰り返した。この筒状部１
６、１９に実施例（４−１）と同じＡＭＰＰＤ溶液を各
々３００μｌずつ加え室温で５分間反応させた。５分後
にルミノメーター（アロカ社製）で片方の筒状部を遮光
し５秒間の発光量をそれぞれ測定した。各血清サンプル
について、結果を表−４に示す。

【００８４】

【表４】

【００８５】（実施例１０）本発明の実施に用いること
のできる装置 本発明を実施するにあたって用いることのできる装置の
例を図７に従って説明する。この装置は、抗原または抗
体を結合した磁性粒子及び発光基質を用いた酵素免疫測
定法のための装置である。図中１１０は検体と固相、酵
素標識抗体及び基質液との混和、撹拌、反応、Ｂ／Ｆ分
離、測定等の一連の処理を行う処理部であり、１３０は
処理部１１０に反応容器を供給する供給部、１０５は装
置各部を制御する制御部、１０１は装置のケース本体で
ある。

【００８６】前記供給部１３０は、反応容器を保管する
反応容器保管部１３１と、検体を収容する検体収容部１
１２と、検体分注に用いる複数のチップを収容するチッ
プ収容部１１３と、反応容器を反応ライン部１１１へ移
動させる反応容器移動部１３２とを有する。反応容器保
管部１３１に保管された反応容器１０４は、モータ（図
中省略）によりＡ方向に移動し、反応容器運搬部１３３
により反応容器移動部１３２を経て反応ライン部１１１
へ移動する。吸引分注部１１６ａはＡＢ方向に移動しな
がら、チップ収容部１１３に収容されたチップ１１３ａ
を取り出し、検体収容部１１２に収容された検体１４４
を適宜のポンプ手段等によりチップ１１３ａ内に所定量
吸引し、反応ライン部１１１の希釈部１２５に移動され
た反応容器１０４に検体を分注し、免疫測定方法に応じ
て、反応容器１０４の所定の筒状部内での検体を希釈
し、また筒状部に収容された酵素標識物質を吸引し、分
注して混合液を調整する。

【００８７】前記処理部１１０は、反応容器１０４が移
動しながら免疫反応及び測定等を行う反応ライン部１１
１を有し、反応ライン部１１１に沿って、検体を希釈分
注する希釈部１２５と、所定の攪拌手段によって混合液
を撹拌する撹拌部１１７ａ、１１７ｂと、混合液の反応
物と未反応物との分離を磁気的に行う磁気分離部１１８
ａ、１１８ｂと、未反応物を洗浄除去する洗浄部１１９
ａ、１１９ｂと、免疫測定方法に応じて反応混合液、酵
素標識物質等を分注する吸引分注攪拌部１１６ｂと、基
質液を分注攪拌する分注攪拌部１１６ｃと、基質液等を
収容する試薬収容部１１５と、前記反応混合液と基質液
との反応により生ずる発光情報を光学的方法により測定
する測定部１２０と、測定後の反応容器１０４を排出す
る排出部１２１とを有している。

【００８８】例えば、図１に示した容器を用いる２ステ
ップサンドイッチ法による免疫測定方法の場合は、反応
ライン部１１１をＳからＥ方向に反応容器１０４が移動
しながら免疫反応を行う。希釈部１２５にて抗原結合磁
性粒子または抗体結合磁性粒子の入った反応容器１０４
の筒状部８に吸引分注部１１６ａによって検体１１４が
分注され、撹拌部１１７ａで混合液を撹拌後、反応ライ
ン部１１１上をＥ方向に向かって移動しながら第一免疫
反応をし、磁気分離部１１８ａで磁性粒子を集磁し、洗
浄部１１９ａにて未反応物の洗浄除去を行い、吸引分注
撹拌部１１６ｂにて反応容器１０４の筒状部１０から所
定量の酵素結合抗体または酵素結合抗原を筒状部８に分
注撹拌し、さらに反応容器１０４がＥ方向に移動しなが
ら第二免疫反応をし、磁気分離部１１８ｂで磁性粒子を
集磁し、洗浄部１１９ｂ及び撹拌部１１７ｂにて未反応
物の洗浄除去を行い、分注撹拌部１１６ｃにて試薬収容
部に収容されている基質液を反応容器１０４の筒状部８
に所定量分注し、さらに反応ライン部１１１をＥ方向に
移動しながら酵素反応を行い、測定部１２０にて酵素反
応により生ずる発光量を測定し、測定後の反応容器１０
４は排出部１２１へ排出される。

【００８９】前記制御部１０５は、起動釦、測定方法選
択釦等を備えた入力部１０２と、１ステップ測定法、２
ステップ測定法、ディレイ反応測定法及び希釈液を用い
る２ステップ測定法その他酵素免疫測定プログラムを記
憶しているプログラムメモリ１２２と、測定部１２０が
測定した測定情報に基づいて測定結果を求めるための計
算式等の情報を記憶しているメモリ１２３と、この装置
各部の制御を司るＣＰＵ１２４と、測定結果を出力する
出力部１０３とを有している。この制御部１０５は、入
力部１０２の測定法選択釦の選択操作に基づく酵素免疫
測定法を実行し得るものである。

【００９０】

【発明の効果】本発明は、上部に少なくとも二つの開口
部を有し、下方に筒状である容器、及び該容器を用い免
疫反応により検体中の微量成分の検出を行うものであ
る。本発明によれば、各検出系の多項目の測定対象物に
対し、簡便にしかも迅速に測定することができかつ自動
化された測定機器に適用することができるため、臨床検
査の分野に大きな貢献をする。

【図面の簡単な説明】

【図１】三つの開口部を有する容器の断面図である。

【図２】二つの開口部を有する容器の断面図である。

【図３】同時２血清測定又は同時２項目測定に用いる三
つの開口部を有する容器の断面図である。

【図４】四つの開口部を有する容器の断面図である。

【図５】Ｂ／Ｆ分離操作を行うときの構成例を示すもの
である。

【図６】検出操作を行うときの構成例を示すものであ
る。

【図７】本発明を実施する際に用いることができる装置
の概要構成図である。

【図８】粒子型、チューブ型、及びビーズ型の各容器を
用いた、発光法によるＴＳＨの測定結果である。

【符号の説明】

６ 磁力発生装置 ７ 検出装置

フロントページの続き (72)発明者 岡田 政久 東京都新宿区下落合４丁目６番７号富士 レビオ株式会社内 (56)参考文献 特開 昭63−281053（ＪＰ，Ａ) 特公 平１−11910（ＪＰ，Ｂ２) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 35/00 - 35/10 G01N 33/48 G01N 33/543 501

Claims (23)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 上部にそれぞれ開口部を有する少なくと
   も２つの筒状部を有し； 前記筒状部のうち少なくとも１つは、他の１つの筒状部
   よりも下方に長く； 前記下方に長い筒状部は、洗浄が可能なように開放空間
   を有することを特徴とする； 免疫測定用容器。
2. 【請求項２】 上部にそれぞれ開口部を有する少なくと
   も２つの筒状部を有し； 前記筒状部のうち少なくとも
   １つは、他の１つの筒状部よりも下方に長く； 前記下方に長い筒状部の内壁に抗原または抗体を結合し
   たことを特徴とする； 免疫測定用容器。
3. 【請求項３】 前記開口部をシールしたことを特徴とす
   る； 請求項２に記載の免疫測定用容器。
4. 【請求項４】 上部にそれぞれ開口部を有する少なくと
   も２つの筒状部を有し； 前記筒状部のうち少なくとも１つは、他の１つの筒状部
   よりも下方に長く； 前記他の１つの筒状部に試薬を入れ； 前記開口部をシールしたことを特徴とする； 免疫測定用容器。
5. 【請求項５】 上部にそれぞれ開口部を有する少なくと
   も２つの筒状部を有し； 前記筒状部のうち少なくとも１つは、他の１つの筒状部
   よりも下方に長く； 前記下方に長い筒状部の内壁に抗原または抗体を結合
   し； 前記他の１つの筒状部に試薬を入れたことを特徴とす
   る； 免疫測定用容器。
6. 【請求項６】 前記開口部をシールしたことを特徴とす
   る； 請求項５に記載の免疫測定用容器。
7. 【請求項７】 上部にそれぞれ開口部を有する少なくと
   も２つの筒状部を有 し； 前記筒状部のうち少なくとも１つは、他の１つの筒状部
   よりも下方に長く； 前記下方に長い筒状部に抗原結合固相または抗体結合固
   相を入れ； 前記他の１つの筒状部に試薬を入れたことを特徴とす
   る； 免疫測定用容器。
8. 【請求項８】 前記開口部をシールしたことを特徴とす
   る； 請求項７に記載の免疫測定用容器。
9. 【請求項９】 前記固相が磁性粒子であること特徴とす
   る、請求項７または請求項８に記載の免疫測定用容器。
10. 【請求項１０】 前記固相がビーズであることを特徴と
    する、請求項７または請求項８に記載の免疫測定用容
    器。
11. 【請求項１１】 前記試薬が標識抗体または標識抗原で
    あることを特徴とする、請求項５乃至請求項１０のいず
    れかに記載の免疫測定用容器。
12. 【請求項１２】 請求項５乃至請求項１１のいずれかに
    記載の免疫測定用容器を用いて行うことを特徴とする、
    免疫測定方法。
13. 【請求項１３】 請求項５乃至請求項１１のいずれかに
    記載の免疫測定用容器を提供し； 前記下方に長い筒状部に、検体と前記他の１つの筒状部
    中の試薬とを注入して免疫複合体を形成させ； 前記下方に長い筒状部中に形成された前記免疫複合体を
    測定することを特徴とする； 免疫測定方法。
14. 【請求項１４】 上部にそれぞれ開口部を有する少なく
    とも３つの筒状部を有することを特徴とする、請求項５
    乃至請求項１０のいずれかに記載の免疫測定用容器。
15. 【請求項１５】 前記試薬が標識抗体または標識抗原で
    あることを特徴とする、請求項１４に記載の免疫測定用
    容器。
16. 【請求項１６】 前記下方に長い筒状部及び前記他の１
    つの筒状部とは別の第３の筒状部に血清または希釈液を
    入れたことを特徴とする、請求項１５に記載の免疫測定
    用容器。
17. 【請求項１７】 前記開口部をシールしたことを特徴と
    する、請求項１６に記載の免疫測定用容器。
18. 【請求項１８】 請求項１５乃至請求項１７のいずれか
    に記載の免疫測定用容器を用いて行うことを特徴とす
    る、免疫測定方法。
19. 【請求項１９】 請求項１５乃至請求項１７のいずれか
    に記載の免疫測定用容器を提供し； 前記下方に長い筒状部に、検体と前記他の１つの筒状部
    中の標識抗体または標識抗原と前記第３の筒状部中の血
    清または希釈液とを注入して免疫複合体を形成させ； 前記下方に長い筒状部中に形成された前記免疫複合体を
    測定することを特徴とする； 免疫測定方法。
20. 【請求項２０】 前記標識抗体または標識抗原がそれぞ
    れ酵素標識抗体または酵素標識抗原である、請求項１
    １、請求項１５、請求項１６及び請求項１７のいずれか
    に記載の免疫測定用容器。
21. 【請求項２１】 前記標識抗体または標識抗原がそれぞ
    れ酵素標識抗体または酵素標識抗原である、請求項１８
    または請求項１９に記載の免疫測定方法。
22. 【請求項２２】 請求項１２、請求項１３、請求項１
    ８、請求項１９及び請求項２１のいずれかに記載の免疫
    測定方法に用いる免疫測定装置において； 前記免疫測定用容器を供給する供給部と； 前記検体と前記試薬とを混合し、かつ前記測定対象物を
    検出する処理部と； 前記供給部と前記処理部とを制御する制御部とを備え
    る； 免疫測定装置。
23. 【請求項２３】 自動制御によって、前記免疫測定容器
    を提供し、前記検体と前記試薬とを混合し、かつ前記測
    定対象物を検出する、請求項１２、請求項１３、請求項
    １８、請求項１９及び請求項２１のいずれかに記載の免
    疫測定方法。