JP2780833B2 - ケラチン質原料の減成方法及びこれに有用な細菌 - Google Patents

ケラチン質原料の減成方法及びこれに有用な細菌

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Description

【発明の詳細な説明】 （発明の技術分野） 本発明は一般に発酵法、特にバチルス・リケニホーミ
ス（Bacillus licheniformis）によりケラチン質原料を
加水分解する方法に関する。
（発明の背景技術） 羽毛は養鶏業によって大量に発生する。これらの羽毛
は、種々の潜在的用途に対して安価な原料源である。な
かでも、少なからず興味を抱かれているのは、羽毛を減
成する方法の開発であり、これによって羽毛は動物用飼
料におけるアミノ酸及び消化しやすいタンパク質の安価
な原料として用いることが可能となる。
羽毛を動物用飼料に変える方法で現在までに開発され
たのは、水蒸気加水分解法、及び水蒸気加水分解と酵素
を組み合わせた方法の両者である。例えば、Papadopoul
os,M.C.,Animal Feed Science and Technology 16,151
（1986）;Papadopoulos,M.C.etal.,Poultry Science 6
4,1729（1985）;Alderibigde,A.O.and D.Church,J.Ani
m.Sci.1198（1983）;Thomas and Beeson,J.Anim.Sci.4
5,819（1977）;Morris and Balloun,Poultry Sci.52,85
8（1973）;Moran et al.,Poultry Sci.46,456（1967）;
Davis et al.,養鶏副産物の加工と飼料への利用.Part
I.USDA Util.Res.Rep.no.3,Washington DC（1961）参照
のこと。これらの手法の不利な点、例えば熱に対して敏
感なアミノ酸の水蒸気による減成、得られる生産物の比
較的低い消化性は、厳しい水蒸気処理を必要としない経
済的な新しい羽毛減成法についての興味を継続させるこ
ととなった。
したがって、本発明の１つの目的は、水蒸気加水分解
によらないでケラチン質原料を加水分解する方法を提供
することである。
他の目的は、ケラチン質原料を高い収率でアミノ酸に
変える方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、高度の消化性を有し食餌用
タンパク質とアミノ酸の良質の原料となる飼料成分とし
て有用な加水分解された羽毛製品を提供することであ
る。
本発明のなおさらなる目的は、加水分解された羽毛製
品を食餌用アミノ酸源として使用する経済的な動物用飼
料を提供することである。
本発明の前記及びその他の目的並びに態様は、以下の
発明の要約、詳細な記載及び実施例の各節において詳細
に説明する。
（発明の要約） 本発明の第１の態様は、ケラチン質原料の減成方法で
ある。この方法は、ケラチン質原料をバチルス・リケニ
ホーミスと混合して発酵培地を形成するステップと、次
いで前記原料が減成するのに十分な時間この培地を発酵
させるステップとからなる。ケラチン質原料の減成に加
えて、本発明の方法はアミノ酸を生産するために用いる
ことができる。この場合には、前記の如くに形成した発
酵培地を遊離アミノ酸が生成するのに十分な時間発酵さ
せ、次いで遊離アミノ酸を培地から回収する。
また、本発明の方法は、加水分解した羽毛製品を作る
ためにも用いることができる。この場合には、ケラチン
質原料として羽毛を用い、前記の如くに形成した発酵培
地をその消化性を高めるのに十分な時間発酵させる（例
えば、消化しやすいタンパク質及びペプチド濃度の富化
による）。好ましくは、次いで培地中の細菌を殺して飼
料成分として有用な加水分解された羽毛製品を形成する
（すなわち、細菌を殺すために細菌を保育する培地を処
理する）。
本発明の方法を遊離アミノ酸又は加水分解された羽毛
製品を生産するために使用する場合には、発酵ステップ
は嫌気的発酵ステップであることが好ましい。嫌気的条
件下では、バチルス・リケニホーミスは活発には増殖し
ない。このために、バチルス・リケニホーミスによるア
ミノ酸の使用は減少し、遊離アミノ酸の生産は増加し又
は富化する。さらに、羽毛をバチルス・リケニホーミス
と混合する巣に先だって、好ましくはバチルス・リケニ
ホーミスを先ず好気的条件のもとで（好ましくは液体培
地中で）増殖させて、豊富な量の活性細菌を得るように
する。以下に詳細に説明するように、これらの手法は、
ケラチン質原料を減成し羽毛を利用する効率的で費用の
点でも効果的な手段を提供する。
本発明の第２の態様は、バチルス・リケニホーミスPW
D−1,ATCC No.53757の同定特性を有するケラチン質減成
微生物の純粋培養物である。バチルス・リケニホーミス
PWD−１は前記方法の実施に対して好ましい微生物であ
る。
本発明の第３の態様は、加水分解された羽毛製品であ
って、前記方法によって生産することができる。この製
品は、部分的に加水分解した羽毛と、この部分的に加水
分解した羽毛から分割（cleave）されたタンパク質と、
同じくこの加水分解した羽毛から分割されたペプチド
と、バチルス・リケニホーミス細胞（好ましくは殺され
たバチルス・リケニホーミス細胞）とを含む。この加水
分解した羽毛製品は、炭水化物源、及び好ましくはミネ
ラル、ビタミンと混合して動物用飼料を形成してもよ
い。飼料には第２の補足的タンパク源を随意に含めるこ
ともできる。
本発明のこれ以外の態様については以下に論議する。
（発明の詳細な記載） 本発明は、毛髪、ひづめ、羽毛を含む全てのタイプの
ケラチン質原料について実施することができる。羽毛が
好ましい。鶏、シチメンチョウ、アヒルの羽毛を含むど
のタイプの羽毛も使用できる。鶏の羽毛が好ましく、こ
れが以下に述べる原料である。しかしながら、この明細
書の教示は、全てのケラチン質原料の減成と利用に対し
て適用することができる。
発酵培地を形成するために羽毛をバチルス・リケニホ
ーミスと混合するのに先だって、自然に羽毛に介在し、
さもなければ発酵プロセスを中断させるおそれのある細
菌を殺すために、羽毛を滅菌しなければならない。この
滅菌のステップは、どの手段で実施してもよいが、これ
には、羽毛をホルマリンもしくはエチレンオキサイドガ
スと接触させ、羽毛を加工水蒸気と接触させ、又は両者
の組み合わせによる薫蒸消毒が含まれる。われわれの発
見によれば、羽毛を加圧水蒸気と接触させると、羽毛を
滅菌するには不十分な時間であっても、これに続く羽毛
の細菌による減成を実質的に改善する。したがって、本
発明における滅菌のステップは、好ましくは、たとえそ
れが羽毛の完全な滅菌を達成しないとしても、次の細菌
型加水分解を促進するために十分な時間と温度で羽毛を
水蒸気と接触させるステップを含む。われわれの発見に
よれば、密閉した室内で125℃で２分間という短時間羽
毛を加圧水蒸気と接触させれば、次の発酵加水分解を実
質的に増進させるのに十分である。もし羽毛の滅菌を水
蒸気のみで行うとすれば、羽毛は125℃で少なくとも15
分間加圧水蒸気と接触させなければならない（この温度
での15−20分間の処理は、定義により、オートクレーブ
ステップである）。水蒸気処理の時間と温度は、約35p.
s.i.又はこれ以上の水蒸気圧力で35分又はこれ以上の処
理時間を費やす商業的水蒸気加水分解プロセスよりも少
なくすべきである。
発酵に先だって、バチルス・リケニホーミスをいずれ
かの適当な液体増殖培地（好ましくは羽毛ベースの液体
増殖培地）中で好気的に増殖させる。細菌は、好ましく
は約45から約55℃の温度で増殖させる。十分な量の細菌
が増殖したのち（好ましくは１ミリリットル当り約105
コロニー形成ユニット）、液体増殖培地を適当な発酵容
器内で羽毛と混合する。好ましくは、液体増殖培地と羽
毛は、羽毛の比率を多くして混合するので、この発酵は
半固体発酵である。好ましい発酵培地は、重量で、液体
増殖培地４部に対し少なくとも乾燥羽毛約１部、より好
ましくは液体増殖培地２部に対し乾燥羽毛約１部からな
る。
本発明による動物用飼料を製造するために用いられる
炭水化物源には、例えば、トウモロコシ、カラスムギ、
大麦、モロコシ属、又はこれらの組み合わせが含まれ
る。好ましくは、これらの穀物は動物用飼料として用い
るためにひき割りにする。補足のタンパク質源には、例
えば、大豆のひき割り、魚粉、血粉、養鶏副産物（鶏の
臓物粉砕物）、肉食粉、及びこれらの組み合わせが含ま
れる。動物用飼料は、全タンパク質源（加水分解した羽
毛と補足物の両者）からのタンパク質を重量で約13％か
ら約25％まで含む。加水分解した羽毛を唯一のタンパク
質源としてもよいが、飼料に対して重量で約２％から約
15％までが好ましい。他の少量の栄養物、例えばビタミ
ン、ミネラル、抗生物質、及び他の物質又は化合物は必
要に応じて飼料に含ませることができる。
バチルス・リケニホーミス株PWD−１は、ブタペスト
条約に従いアメリカンタイプカルチャーコレクションに
1988年３月23日付けで寄託し、ATCC受託番号第53757号
が付されている。
PWD−１は、グラム陽性（しかしグラムバリアブル）
菌であることが分かった。これは、まっすぐなロッド形
の細菌で、ロッドの長さは約2.1から約3.0ミクロン、幅
は約0.5から約1.0ミクロンで、ロッドの末端は丸くなっ
ている。細菌の細胞は、個々のものと鎖になつているも
のとがあることが分かっている。１つのサブターミナル
エンドポァが細胞ごとに形成されており、このエンドポ
ァは中心に位置し円筒形又は卵形である。
PWD−１は、不透明な一続きの（entire）（ムコイ
ド）コロニーを形成し、形がぎざぎざで不規則である。
低度の凸状、高度の凸状（ムコイド）及び平坦なコロニ
ーが見られる。コロニーは解離（disassociate）するよ
うに見える。コロニーは、きらきら光り（ムコイド）く
すみ、乾き、滑らか（ムコイド）でかつ粗いように観察
され、不溶解性の褐色の色素を伴っている。細胞は自動
性であり（鞭毛がある）かつ緑毛がある（peritrichou
s）。
PWD−１は、約20℃から約55℃までの温度において増
殖するが、60℃においても僅かに増殖する。われわれの
場合には、この細菌は好熱的であって、45℃から50℃ま
での温度において最もよく増殖する。このほか、21ない
し30℃の間が最適増殖温度であるとの他者の報告もあ
る。異なった増殖培地が最適増殖温度に及ぼす影響を調
べる実験が進められている。
PWD−１は、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース（弱
く）、Ｄ−グルコース、ラクトース（弱く）、サッカロ
ース、及びＤ−マンニトールから酸を生ずるが、ガスは
生じない。炭素源として、サイトレートとプロピオネー
トの両者を利用することができる。PWD−１は、ポリサ
ッカリド、デンプン、及びカゼインを加水分解するが、
ヒップレートを加水分解することはない。PWD−１はゼ
ラチン液状化（liquify）する。メチレンブルーを還元
するが、再酸化はしない。ナイトレートをナイトライト
に還元するが、ナイトライトを還元することはない。
PWD−１は、フォゲスープロスカウエル（5198）陽
性、フォゲス−プロスカウエル（5198 fil）陽性、フ
ォゲス−プロスカウエル（5331）陽性である。これは、
ハイドロジェンパーオキサイドを分解するが、チロシン
を分解することはなく、インドールに対し陰性、ヒドロ
キシアセトンに対し陽性である。PWD−１は、リトマス
ミルクアシッドテスト陰性、リトマスミルコオーレイシ
ョンテスト（Litmus milk coaulation test）陰性、リ
トマスミルクアルカリンテスト陰性であるが、リトマス
ミルクペプトナイゼーション、リトマスミルクレダクシ
ョンの両テストには陽性である。
PWD−１は、pH5.7とpH6.0において増殖する。これ
は、8.0又はこれ以上のpH VP5198を示す。普通ブイヨ
ン（nutrient broth）の最適pHは7.0から7.5まである。
好気性であり条件的（facultative）である。0.02％の
アジド中では増殖しない。密閉されたナイトレートから
ガスを発生し、密閉されたグルコース中で増殖する。レ
シチナーゼに対して陰性である。
また、ケラチン質原料減成能を有するバチルス・リケ
ニホーミスPWD−１タンパク質混合物からなる細胞フリ
ーの粗抽出物も本発明の１つの態様である。この粗抽出
物は、例えば液体増殖培地からバチルス・リケニホーミ
スPWD−１細胞を分離することにより調製するので、液
体増殖培地が細胞フリーの粗抽出物となる。択一的に、
バチルス・リケニホーミスを（化学的又は物理的に）液
体増殖培地中で溶解させて、細胞フリーの粗抽出物を製
造することもできる。このような抽出物を調製する他の
手段は、当業者には明かであろう。細胞フリーの粗抽出
物は水性の形で提供することができる。択一的に、凍結
乾燥の形としてその貯蔵寿命を増すこともできる。
実質的に純粋な、ケラチン質原料減成バチルス・リケ
ニホーミスPWD−１酵素も、本発明のさらなる態様であ
る。この実質的に純粋な酵素は、前記細胞フリーの粗抽
出物からなるタンパク質を個々の構成タンパク質に分離
することによって製造される。いずれかの適当な調製手
段を用いることができる。多くのこのような調製手段、
例えばカラムクロマトグラフィーは、当業者によく知ら
れており、かつこの目的のために日常的に使用されてい
る。次いで、個々の構成タンパク質はケラチン質原料の
減成能に従ってスクリーニングされる。ケラチン質原料
を最もよく減成する構成タンパク質は、実質的に純粋な
酵素からなる。細胞フリーの粗抽出物と同様に、この実
質的に純粋な酵素は、水性、凍結乾燥のいずれの形でも
提供することができる。
細胞フリーの粗抽出物、実質的に純粋な酵素の両者と
も、水性の形で提供された場合には、これをケラチン質
原料（好ましくは羽毛）と混合して発酵培地を形成し、
次いで羽毛を減成するのに十分な時間この発酵培地を発
酵させることによって、ケラチン質原料を減成するため
に用いることができる。
本発明のなおさらなる態様は、ケラチン質原料減成バ
チルス・リケニホーミスPWD−１酵素又はその活性断片
の生産に対してコードするクローン遺伝子又はその断片
を含むDNA配列である。このクローン遺伝子は次のよう
にして生産される。始めに、多数のバチルス・リケニホ
ーミスPWD−１ DNA配列を発生させる（ゲノムDNA又は
相補DNAライブラリーとして）。次いで、これらの配列
をDNA表現ベクターに挿入して、組み換え表現ベクター
を形成する。次に、この組み換え表現ベクターを適当な
宿主に挿入して、DNA配列を表現する形質転換体（trans
formant）を形成する。最後に、ケラチン質原料減成酵
素の生産のために、これらの形質転換体をスクリーニン
グする。このような酵素を表現する形質転換体は、これ
に含まれるベクター中のインサーションとして、所望の
DNA配列を保持している。
多数のバチルス・リケニホーミスPWD−１ DNA配列
は、慣用の技術によって生じさせることができる。１つ
のアプローチは、ゲノムDNAライブラリーの調製を究極
の目標として、１つのバチルス・リケニホーミスPWD−
１のゲノムDNAをダイジェストすることである。一般的
には、R.Old and S.Primrose,Principles of Gene Mani
pulation,102−109（3d ed.1985）参照のこと。他の１
つのアプローチは、cDNAライブラリーの調製を究極の目
標として、バチルス・リケニホーミスPWD−１からmRNA
を分離して、それからcDNA配列を生じさせることであ
る。一般的には、R.Old and S.Primrose,前記,109−11
1;T.Maniatis,E.Fritsch and J.Sambrook,Molecular Cl
oning：A Laboratory Manual,187−246（1982）参照の
こと。
クローン遺伝子を製造するために、種々のベクター−
宿主の組み合わせを用いることができる。宿主細胞は、
原核細胞でも真核細胞でもよく、宿主細胞が細菌細胞で
ある場合には、グラム陰性でもグラム陽性でもよい。有
用な宿主には、例えば大腸菌（例えばE.coli x1776,E.c
oli x2282,E.coli HB101,E.coli MRC1を含む）、サルモ
ネラ種（例えばS.typhimurium,S.enteriditis,S.dublin
を含む）、プソイドモナス種（例えばP.aeruginosa,P.p
utidaを含む）及び枯草菌を含む。
本発明の実施に用いられるベクターは、選択された宿
主細胞内でクローニングベクター又は表現ベクターとし
て作用することが可能であるように選択される。ベクタ
ーとしては、例えばバクテリオファージ、プラスミド、
ウイルス又はこれらのハイブリッドであろう。大腸菌に
おいて有用なベクターには、プラスミド（例えばpSC10
1,Co1E1,RSF2124,pBR322,pBR324,pBR325,pAT153,pUC−
6,pLC−８）、バクテリオファージラムダ、コスミド、
ファスミド、及び線状コリファージが含まれる。サルモ
ネラ種は、例えばプラスミド、例えばpJC217,pBRD001,p
BRD026を用いて形質転換することができる。グラム陰性
細菌において有用なベクターには、一般的に広い宿主範
囲（例えばSa,RP4,RSF1010）を有する不和合成グループ
P,Q又はＷのプラスミド及びトランスポゾン例えばTnTが
含まれる。枯草菌、グラム陽性細菌、はS.aureusプラス
ミド（例えばpC194,pE194,pSA0501,pUB110,pT127）を用
いて形質転換することができる。
各特定ベクター内においては、分離したDNA配列を挿
入するために種々の座位を選択することができる。これ
らの座位は通常これらを切り取る制限酵素又はエンドヌ
クレアーゼによつて呼ばれる。例えば、pBR322におい
て、Pst I座位は、ペニシリナーゼタンパク質のアミノ
酸181と182に対してコードするヌクレオチドトリプレッ
トの間のペニシリナーゼに対する遺伝子に位置してい
る。
バチルス・リケニホーミスPWD−１ DNA配列は、既知
の技術によって所望のベクターに挿入することができ
る。しかしながら、もしベクターが表現ベクターとして
の役割を持つべくものであるならば、このベクターはプ
ロモーターを持つべきてあり、DNA配列はプロモーター
の下流においてベクターに挿入され、かつこのプロモー
ターと作用的に連携させるべきである。ベクターの選択
は、ベクターが挿入されるはずの宿主細胞内において、
プロモーターの作用が可能であるように行うべきである
（すなわち、プロモーターは宿主細胞のRNAポリメラー
ゼによって認識されなければならない）。そのうえ、ベ
クターは、プロモーターとDNA配列の挿入座位との間に
位置し、リボソーム結合座位に対してコードする領域を
持つべきであり、これによっていったん挿入されたバチ
ルス・リケニホーミスPWD−１ DNA配列と作用的に連携
する（好ましくは、正確な翻訳読み取りフレームにおい
て）。ベクターは、ベクターが挿入されるはずの宿主細
胞のリボソームによって認識されるリボソーム結合座位
に対してコードする領域を備えるように選択しなければ
ならない。例えば、宿主細胞が大腸菌のような原核細胞
である場合には、リボソーム結合座位に対してコードす
る領域は、シャイン−ダルガルノの配列に対してコード
するであろう。
形質転換体は、ケラチン質原料減成酵素、又はその活
性断片の生産のために、慣用のいずれかの手法によって
スクリーニングすることができる。好ましくは、形質転
換体は、粉末状ケラチン基質を含有する寒天培地で増殖
させる。いずれの粉末状ケラチンでも用いることができ
るが、粉末状羽毛、特に粉末状白色羽毛が好ましく、清
澄化ゾーン（clearing zone）が最も容易に観察でき
る。培地上に清澄化ゾーンを示すコロニーは、所望の酵
素又は酵素断片を生成している。
本発明を、以下の実施例によってもさらに説明する。
これらの実施例は例示の目的のみに提出するものであっ
て、限定として解釈されるべきではない。
（実施例 １） 好気的発酵と嫌気的発酵によるアミノ酸生産の比較 バチルス・リケニホーミスPWD−１を、羽毛を唯一の
炭素及びエネルギー源として含む２バッチの無菌水性培
地中で増殖させた。１リットルの培地中には、NH4Cl 0.
5グラム、NaCl 0.5グラム、K2HPO4 0.3グラム、KH2PO4
0.4グラム、MgCl・6H2O 0.24グラム、ハンマーで粉砕し
た羽毛（粗く刻んだ羽毛）1.0グラム、及び酵母抽出物
0.1グラムを含有した。培地はpH7.5に調整した。各カル
チャーは50℃で培養し、そのうちの１つは好気的条件
で、他の１つは嫌気的条件で増殖させた。好気的及び嫌
気的の両条件下で、０日（培養前）と培養５日後に培地
中に見出されたアミノ酸の量を次の表１に示す。
これらのデータは、嫌気的条件下では好気的条件におけ
るよりもアミノ酸の全生産量がほぼ800％多かったこと
を示す。
（実施例 ２） 半固体発酵におけるアミノ酸収率 PWD−１を、実施例１に記載したのと同様な（１リッ
トル当りハンマー粉砕の羽毛1.0グラムの代わりに10.0
グラムを用いたことを除く）液体培地中で５日間50℃に
おいて好気的条件下で増殖させて、１ミリリットル当り
108CFUに達した。ハンマー粉砕の羽毛の追加分は、125
℃（16p.s.i.）の水蒸気で15分間オートクレーブ処理を
施した。この羽毛を、増殖培地１リットル当り250グラ
ムの割合で増殖培地と発酵容器中で混合して発酵培地を
形成し、窒素を吹き込んだ。次に、この発酵培地を嫌気
的に５日間50℃で時々撹はんしながら培養した。発酵ス
テップを好気的に行うことを除き、同様な手続きを別途
に行った。これらの手続きは、両条件に対して２通り行
った。全ての発酵培地の液相中のアミノ酸濃度を、発酵
の５日目に測定したが、そのデータを次の表２に示す。
嫌気的条件下では、半固体相発酵により、遊離アミノ
酸が量的に１リットル当り10グラム余計に生産されるこ
とに注意されたい。
（実施例 ３） 加水分解した羽毛粉飼料製品の製造 ５日間の嫌気的発酵ののち、前記実施例２に記載した
ような半固体発酵培地を125℃の水蒸気で15分間オート
クレーブ処理し、次いで60℃で48時間乾燥し、続いて１
ミリトートルメッシ以下に粉砕した。得られた製品は、
部分的に加水分解した羽毛、短いペプチド、アミノ酸、
及び殺されたバチルス・リケニホーミス細菌細胞を含む
褐色の粉末であった。この製品は、次の実施例４に示す
ようになり、とりわけ、成育中の鶏に対するタンパク質
の食餌源として有用である。
（実施例 ４） バチルス・リケニホーミス加水分解羽毛を組み込んだ動
物用飼料 128羽の雛を４つの等しいグループに分け、各グルー
プを４×８に分けた。各グループは異なった餌で飼育し
た。すなわち、グループ（ａ）はトウモロコシ−大豆飼
料/20％タンパク質で飼育し、グループ（ｂ）はトウモ
ロコシ−大豆飼料/15％タンパク質で飼育し、グループ
（ｃ）はトウモロコシ−大豆飼料/15％タンパク質と加
水分解しないハンマー粉砕羽毛５％とで飼育し、グルー
プ（ｄ）はトウモロコシ−大豆飼料/15％タンパク質と
前記実施例３の手法によって製造したバチルス・リケニ
ホーミス加水分解羽毛からのタンパク質５％とで飼育し
た。全雛を３週齢において計量し、各グループの重量を
平均した。この平均を次の表３に示す。
これらのデータは、バチルス・リケニホーミス加水分
解羽毛が動物用飼料における安価な食餌タンパク源とし
て使用できることを示している。
前記実施例は、本発明を例示するためり提示したもの
であり、これを限定するものと捉えるべきではない。本
発明の範囲は、以下の請求の範囲により、かつこれらに
含まれるべき請求の範囲と均等なものも含まれる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:10） (Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:10） (Ｃ１２Ｐ 1/00 Ｃ１２Ｒ 1:10） (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12P 13/04 C12P 1/00 A23K 1/10 C12N 1/14

Claims (23)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】ケラチン質原料をバチルス・リケニホーミ
    スPWD−１（PWD−１）と混合して発酵培地を形成するス
    テップと、次いでこのケラチン質原料を減成させるのに
    十分な時間前記培地を発酵させるステップとを含むケラ
    チン質原料の減成方法。
  2. 【請求項２】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前記
    ステップに先だって、このPWD−１を好気的条件下で増
    殖させて活性細胞を生産するステップをさらに含む請求
    項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】前記発酵ステップが嫌気的発酵であること
    からなる請求項１に記載の方法。
  4. 【請求項４】前記発酵培地が、重量で、PWD−１の液状
    培養物４部に対し少なくとも約１部の乾燥ケラチン質原
    料を含み、これにより前記発酵ステップが半固体発酵ス
    テップであることからなる請求項１に記載の方法。
  5. 【請求項５】前記混合ステップに先だつて、前記ケラチ
    ン質原料を滅菌するステップをさらに含み、これにより
    このケラチン質原料に自然に介在し、さもなければ前記
    発酵プロセスを中断させるおそれのある細菌を殺すこと
    からなる請求項１に記載の方法。
  6. 【請求項６】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前記
    ステップに先だって、次の細菌型加水分解を促進するの
    に十分な時間と温度で前記ケラチン質原料を水蒸気に接
    触させるステップをさらに含むことからなる請求項１に
    記載の方法。
  7. 【請求項７】前記ケラチン質原料が羽毛であることから
    なる請求項１に記載の方法。
  8. 【請求項８】ケラチン質原料をバチルス・リケニホーミ
    スPWD−１（PWD−１）と混合して発酵培地を形成するス
    テツプと、これから遊離アミノ酸を生成するのに十分な
    時間前記発酵培地を発酵させるステップと、この発酵培
    地から前記遊離アミノ酸を回収するステップとを含むア
    ミノ酸の製造方法。
  9. 【請求項９】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前記
    ステップに先だって、好気的条件下でPWD−１を増殖さ
    せて活性細胞を生産するステップをさらに含む請求項８
    に記載の方法。
  10. 【請求項１０】前記発酵ステップが嫌気的発酵ステップ
    であることからなる請求項８に記載の方法。
  11. 【請求項１１】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前
    記ステップに先だって、好気的条件下でPWD−１を増殖
    させて活性細胞を生産するステップをさらに含む請求項
    ８に記載の方法。
  12. 【請求項１２】前記発酵培地が、PWD−１の液状培養物
    ４部に対し少なくとも約１部の乾燥ケラチン質原料を含
    み、これにより前記発酵ステップが半固体発酵ステップ
    であることからなる請求項８に記載の方法。
  13. 【請求項１３】前記混合ステップに先だつて、前記ケラ
    チン質原料を滅菌するステップをさらに含み、これによ
    りこのケラチン質原料に自然に介在し、さもなければ前
    記発酵プロセスを中断させるおそれのある細菌を殺すこ
    とからなる請求項８に記載の方法。
  14. 【請求項１４】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前
    記ステツプに先だって、次の細菌型加水分解を促進する
    のに十分な時間と温度で前記ケラチン質原料を水蒸気に
    接触させるステップをさらに含むことからなる請求項８
    に記載の方法。
  15. 【請求項１５】前記ケラチン質原料が羽毛であることか
    らなる請求項８に記載の方法。
  16. 【請求項１６】飼料成分として有用な加水分解した羽毛
    製品の製造方法であって、羽毛をバチルス・リケニホー
    ミスPWD−１（PWD−１）と混合して発酵培地を形成する
    ステップと、その消化性を増加させるのに十分な時間こ
    の発酵培地を発酵させるステップと、次いでこの培地中
    の細菌を殺して飼料製品を形成するステップとを含む飼
    料成分としての羽毛製品の製造方法。
  17. 【請求項１７】羽毛をPWD−１と混合する前記ステップ
    に先だって、好気的条件下でPWD−１を増殖させて活性
    細胞を生産するステップをさらに含む請求項16に記載の
    方法。
  18. 【請求項１８】前記発酵ステップが嫌気的発酵ステップ
    であることからなる請求項16に記載の方法。
  19. 【請求項１９】前記発酵培地が、重量で、PWD−１の液
    状培養物４部に対し少なくとも約１部の乾燥羽毛を含
    み、これにより前記発酵ステップが半固体発酵ステップ
    であることからなる請求項16に記載の方法。
  20. 【請求項２０】前記混合ステップに先だつて、前記ケラ
    チン質原料を滅菌するステップをさらに含み、これによ
    りこのケラチン質原料に自然に介在し、さもなければ前
    記発酵プロセスを中断するおそれのある細菌を殺すこと
    からなる請求項16に記載の方法。
  21. 【請求項２１】ケラチン質原料をPWD−１と混合する前
    記ステップに先だって、次の細菌型加水分解を促進する
    のに十分な時間と温度で前記ケラチン質原料を水蒸気に
    接触させるステップをさらに含む請求項16に記載の方
    法。
  22. 【請求項２２】前記ケラチン質原料が羽毛であることか
    らなる請求項16に記載の方法。
  23. 【請求項２３】バチルス・リケニホーミスPWD−1,ATCC
    受託番号第53757号の同定特性を有するケラチン質減成
    微生物の純粋培養物。
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