JP2776787B2 - 新規レチノイド化合物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するため
の手段】本発明は、式（Ｉ）：

【０００２】

【化３】

【０００３】（式中、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合は、二重結合又は
三重結合であり；Ｒ₁ 及びＲ₂ は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が二
重結合である場合、独立にハロゲン又は低級アルキルで
あるか、又はＲ₁ 及びＲ₂ は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が三重結
合である場合、独立に低級アルキルであるか；あるいは
Ｒ₁ 及びＲ₂ は、一緒になって、その１つの炭素原子が
硫黄、酸素及び窒素よりなる群から選択されるヘテロ原
子で置換されていてもよいＣ₃ 〜Ｃ₁₃−アルキレンであ
るか；あるいはＲ₁ 及びＲ₂ は、これらが結合している
炭素原子と一緒になって、５〜６個の炭素原子を有する
芳香族環であるか、又はＲ₁ 若しくはＲ₂ の１つの原子
が、酸素、窒素及び硫黄よりなる群から選択されるヘテ
ロ原子であり、Ｒ₁ 及びＲ₂ の残りの原子が炭素であ
る、５〜６個の原子を有する複素芳香族環である。ただ
し、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が二重結合であり、Ｒ₁ がメチルで
ある場合、Ｒ₂ はＦではない）で示される新規な化合
物、又はその薬学的に許容しうる塩、エステルもしくは
アミドに関する。

【０００４】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、一緒になってＣ₃ 〜Ｃ₁₃
−アルキレンである場合、これらは、好ましくは、Ｃ₃
〜Ｃ₆ −アルキレン、特にＣ₆ −アルキレンである。Ｒ
₁ 及びＲ₂ が、これらが結合している炭素原子と一緒に
なって芳香族環又は複素芳香族環である場合、好ましい
芳香族環又は複素芳香族環は、チオフェン、ベンゼン及
びピリジンである。Ｒ₁ 及びＲ₂ のハロゲンは、Ｃｌ、
Ｂｒ、Ｆ、又はＩであってよく、ＢｒとＩが好ましい。
Ｒ₁ 及びＲ₂ の低級アルキルは、直鎖又は分枝鎖状のＣ
₁ 〜Ｃ₄ −アルキルである。好ましい低級アルキル基
は、メチルである。

【０００５】本発明の好ましい化合物は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結
合が二重結合であり、Ｒ₁ 及びＲ₂が、独立にハロゲン
又は低級アルキルであるか、あるいはＲ₁ 及びＲ₂ が、
一緒になってＣ₃ 〜Ｃ₁₃−アルキレン、好ましくはＣ₃
〜Ｃ₆ −アルキレン（その１つの炭素原子が、硫黄、酸
素及び窒素よりなる群から選択されるヘテロ原子で置換
されていてもよい）であるか、あるいはＲ₁ 及びＲ₂
が、これらが結合している炭素原子と一緒になって、５
〜６個の炭素原子を有する芳香族環であるか、又はＲ₁
若しくはＲ₂ の１つの原子が、酸素、窒素及び硫黄より
なる群から選択されるヘテロ原子であり、Ｒ₁ 及びＲ₂
の残りの原子が炭素である、５〜６個の原子を有する複
素芳香族環である、式（Ｉ）の化合物、ならびにその薬
学的に許容しうる塩、エステル及びアミドである。Ｒ₁
及びＲ₂ の一方が低級アルキルである場合、他方は好ま
しくはハロゲンである。

【０００６】別の面で本発明は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が三重
結合であり、Ｒ₁ 及びＲ₂ が独立に低級アルキルである
か、あるいはＲ₁ 及びＲ₂ が一緒になってＣ₃ 〜Ｃ₁₃−
アルキレン（その１つの炭素原子が、硫黄、酸素及び窒
素よりなる群から選択されるヘテロ原子で置換されてい
てもよい）であるか、あるいはＲ₁ 及びＲ₂ が、これら
が結合している炭素原子と一緒になって、５〜６個の炭
素原子を有する芳香族環、好ましくはベンゼンである
か、又はＲ₁ 若しくはＲ₂ の１つの原子が、酸素、窒素
及び硫黄よりなる群から選択されるヘテロ原子であり、
Ｒ₁ 及びＲ₂ の残りの原子が炭素である、５〜６個の原
子を有する複素芳香族環、好ましくはチオフェン又はピ
リジンである、式（Ｉ）の化合物、ならびにその薬学的
に許容しうる塩、エステル及びアミドに関する。

【０００７】レチノイン酸は、核のレチノイン酸受容体
（「ＲＡＲ」）として公知の一連のタンパク質に結合す
ることによって機能する。この仲間の３種類のタンパク
質は、ＲＡＲα、ＲＡＲβ及びＲＡＲγと呼ばれる。９
−ｃｉｓレチノイン酸は、レチノイン酸Ｘ受容体（「Ｒ
ＸＲ」）（Levin et al., Nature, 355:359-361 (199
2); Heyman et al., Cell, 68:397-406 (1992)）として
公知の一群の受容体に結合するが、一方ＲＡＲαに結合
する全ｔｒａｎｓ−及び１３−ｃｉｓ−レチノイン酸は
結合しない。しかし、９−ｃｉｓレチノイン酸は、ＲＡ
Ｒ群の受容体に対するリガンドとしても作用するため、
全ｔｒａｎｓ及び１３−ｃｉｓレチノイン酸が示す望ま
しくない副作用を示すかもしれない。ＲＡＲ及びＲＸＲ
受容体は、両者とも、ヘテロ二量体を形成してその生物
学的作用を媒介することが知られている（Leid et al.,
Cell, 68:377-395 (1992); Yu et al., Cell, 67:1251
-1266 (1991); Zhang et al., Nature, 355:441-446 (1
992)）。

【０００８】本発明の化合物は、ＲＸＲファミリーの受
容体に対して高度の選択性を示し、皮膚科及び腫瘍科の
適応症に、抗増殖剤として有用である。特に本発明の化
合物は、脂腺細胞（sebocytes)の増殖を阻害する。脂腺
細胞の増殖は、ざ瘡（acne）の原因であることが知られ
ている。従って、脂腺細胞の増殖の阻害は、ざ瘡を治療
する公知の方法であり、このため本発明の化合物は、ざ
瘡の治療に有用である。

【０００９】更に本発明のＲＸＲ選択性化合物は、これ
ら自体が不活性な用量で、ガン、特に白血病及び固形ガ
ン、固形ガンの中ではとりわけ頭部ガン、頚部ガン及び
乳ガン、特に乳ガンの治療に有用なレチノイド（retino
ids)の活性を増強し、またこれら自体で、皮膚の種々の
状態、特にざ瘡及び日光による損傷を受けた皮膚の治療
に有用であり、９−ｃｉｓ−又は１３−ｃｉｓレチノイ
ン酸に比較して毒性作用が低下している。全ｔｒａｎｓ
レチノイン酸及び１３−ｃｉｓレチノイン酸のようなＲ
ＡＲα活性を有するレチノイドは、これらのＲＡＲα受
容体への結合及びそのトランス活性化（transactivatin
g ）に基づく生物学的活性を有する化合物である。従っ
て本発明の化合物は、これらのレチノイドが有用である
ことが知られている適応症の治療において、ＲＡＲα活
性を有するレチノイドの活性の増強剤としての有用性を
有する。ＲＡＲα活性を有するレチノイドと組合せて本
発明の化合物を投与することにより、レチノイドを非常
に低用量で使用することが可能になるか、又はＲＡＲα
活性を有するレチノイドが有用であることが知られてい
る適応症に対しての通常用量でのレチノイドの効果が増
強される。

【００１０】従って本発明は更に、ＲＡＲα活性を有す
る化合物の活性を増強するのに有効な量の本発明化合物
（好ましくは、ＲＡＲα活性を有する化合物の１〜１０
倍の重量）を、ＲＡＲα活性を有する化合物の有効量と
一緒に患者に投与することを特徴とする、ＲＡＲα活性
を有するレチノイドの活性を増強する方法よりなる。
「一緒に」は、ＲＸＲ選択性化合物とＲＡＲα活性を有
する化合物が同時に患者の血流中に存在して、本発明の
ＲＸＲ選択性化合物がＲＡＲα活性を有する化合物の活
性を増強するであろう濃度で存在するように、本発明の
ＲＸＲ選択性化合物を、ＲＡＲα活性を有する化合物と
連続して、本質的に同時に、必須ではないが好ましく
は、単一の経口単位投与剤型で組み合せて、又はＲＡＲ
α活性を有する化合物の投与の前若しくは後に投与して
もよいことを意味する。好ましくは、本発明のＲＸＲ選
択性化合物とＲＡＲα活性を有する化合物は、４時間以
上の間隔をおかずに、より好ましくは１時間以上の間隔
をおかずに、最も好ましくは本質的に同時に投与する。

【００１１】本発明により、標準的細胞培養アッセイで
ヒト白血病細胞の分化を起こす、ＲＡＲα活性を有する
レチノイドの活性を、本発明の化合物が増強することが
認められた。従って本発明の化合物は、血液ガン、特に
急性前骨髄球性白血病と関連するこれらのガンを緩解又
は軽減する、ＲＡＲα活性を有するレチノイドの公知の
活性を増強する活性を有する。白血病のこのような治療
は、血液ガンの進行を遅らせるか又は緩解させるために
有用であることが公知である、ＲＡＲα活性を有するレ
チノイドと一緒に、本発明の化合物を患者に全身投与す
ることにより実施されるであろう。この量は、ガンの量
と大きさ及び患者の条件に依存する。

【００１２】また、本発明により、固形ガン、特に頭部
や頚部のガン、及び乳ガンを緩解又は軽減するＲＡＲα
活性を有するレチノイドの活性を、本発明の化合物が増
強することが認められた。従って本発明の化合物は、固
形ガン、特に頭部や頚部のガン、及び乳ガンを緩解又は
軽減する、ＲＡＲα活性を有するレチノイドの公知の活
性を増強する活性を有する。固形ガンのこのような治療
は、固形ガン、特に頭部ガン、頚部ガン、及び乳ガンを
緩解又は軽減する、ＲＡＲα活性を有するレチノイドと
一緒に、本発明の化合物を患者に全身投与することによ
り実施されるであろう。この量は、ガンの量と大きさ及
び患者の条件に依存する。

【００１３】上述の治療のために、本発明の化合物は、
場合によりＲＡＲα活性を有する化合物と組み合せて、
本発明の化合物、及びこの化合物と適合性である薬学的
に許容しうる担体を含有する組成物として全身投与す
る。このような組成物を調製する際、既存の薬学的に許
容しうる任意の担体を使用することができる。薬剤を経
口投与する場合、一般には規則的な間隔で、便利には食
事時間に、又は１日１回投与する。

【００１４】薬学的に許容しうる塩は、レチノイン酸に
ついての当業界で化学的に許容しうる、そして薬学的に
許容しうる製剤においてヒト患者に適用可能な任意の塩
を含む。このような既存の薬学的に許容しうる本発明の
化合物の任意の塩を使用することができる。使用するこ
とができる既存の塩としては、例えば、ナトリウム又は
カリウムのようなアルカリ金属塩、カルシウム又はマグ
ネシウムのようなアルカリ土類金属塩、及びアンモニウ
ム又はアルキルアンモニウム塩などの塩基塩がある。

【００１５】本発明により、本発明の化合物は、その薬
学的に許容しうる加水分解可能なエステルの形で投与す
ることができる。本発明の組成物と方法には、薬学的に
許容しうる加水分解可能な任意のエステルを使用するこ
とができる。エステルとしては、ベンジル（ＯＢｚ
ｌ）、又は低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、チオ、若
しくは置換チオ（即ち、低級アルキル、ｔ−ブチル、シ
クロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又は
９−フルオレニルメチルで置換されている）で置換され
たベンジルのような芳香族エステルがある。

【００１６】本医薬組成物は、下記を含む既存の任意の
形で作ることができる：（ａ）錠剤、カプセル剤、丸
剤、粉剤、顆粒剤などのような経口投与のための固型
剤；及び（ｂ）液剤、懸濁剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲ
ル剤、微粉末剤（micronized powders）、エーロゾルな
どのような局所投与のための製剤。本医薬組成物は、滅
菌されてもよく、及び／又は保存剤、安定化剤、湿潤
剤、乳化剤、浸透圧を変化させるための塩、及び／又は
緩衝化剤のような補助剤を含有してもよい。

【００１７】本発明により、本発明の前述の化合物は、
薬学的に許容しうる経口方式に有用である。本発明のこ
れらの医薬組成物は、本発明の化合物、又はその薬学的
に許容しうる塩もしくはその薬学的に許容しうる加水分
解可能なエステルを、適合性の薬学的に許容しうる担体
物質と共に含有する。既存の任意の担体物質を使用する
ことができる。この担体物質は、経口投与に適した有機
又は無機の不活性担体物質であってよい。適当な担体
は、水、ゼラチン、アラビアゴム、ラクトース、デンプ
ン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリ
アルキレングリコール、ワセリン（petroleum jelly)な
どを含む。更に、本医薬製剤は、他の薬学的に活性な薬
剤、好ましくはＲＡＲα活性を有するレチノイドを含有
することができる。香料、保存剤、安定化剤、乳化剤、
緩衝化剤などのような添加剤も、薬剤調合の許容される
慣行により更に添加されてよい。

【００１８】本医薬製剤は、錠剤、カプセル剤、丸剤、
粉剤、顆粒剤などのような経口投与のための固形剤型を
含む既存の任意の経口投与剤型に作られてよい。好まし
い経口投与剤型は、錠剤、硬質若しくは軟質ゼラチン、
メチルセルロース製の、又は消化管で容易に溶解する別
の適当な物質のカプセル剤よりなる。本発明に企図され
る経口投与剤型は、処方する医師により決定されるとお
り、個々の患者の必要に応じて変化する。

【００１９】急性前骨髄球性白血病、又は頭部ガン、頚
部ガンもしくは乳ガンを治療するために使用されるＲＡ
Ｒα活性を有するレチノイドの分化活性を増強するため
に本発明の化合物を患者に経口投与する際、本発明の化
合物は、一般に成人に１日当りＲＡＲα活性を有するレ
チノイドの量の約１〜１０倍の量で投与する。ＲＡＲα
活性を有するレチノイドの投与量は、１日当り約２０mg
/m² 〜約３００mg/m²、好ましくは１日当り約５０mg/m²
〜約１００mg/m² であり、正確な投薬量は、患者の大
きさと体重に依存して変化する。一般に、併用治療は約
３ケ月の期間実施する。

【００２０】本発明の化合物又はその薬学的に許容しう
る塩もしくは加水分解可能なエステルと、ＲＡＲα活性
を有するレチノイドは、本発明により別々に投与しても
よいが、好ましくは、組み合わせた場合に急性前骨髄球
性白血病又は頭部ガン、頚部ガンもしくは乳ガンを治療
するのに充分な量で、ＲＡＲα活性を有するレチノイド
と組み合せて、本発明の化合物、その薬学的に許容しう
る塩又はエステルを含有する経口組成物として投与す
る。

【００２１】一般に好ましい単位経口投与剤型は、ＲＡ
Ｒα活性を有するレチノイド１０〜５０mgと、ＲＡＲα
活性を有するレチノイドの量の１〜１０倍量の本発明の
化合物、その薬学的に許容しうる塩又はその薬学的に許
容しうる加水分解可能なエステルを含有する、錠剤又は
カプセル剤である。従って、各錠剤又はカプセル剤中の
本発明の化合物の量は、１０〜５００mgであってよい。
これらの錠剤又はカプセル剤は、患者の体重と大きさに
応じて１日当り１回又は２回投与することができる。

【００２２】本発明により、本発明の化合物、その薬学
的に許容しうる塩及びその薬学的に許容しうる加水分解
可能なエステルの局所及び経口投与は、炎症性及び非炎
症性のような全ての形のざ瘡の治療に有効である。

【００２３】皮膚への局所投与のために、薬学的に許容
しうる担体中に本発明の化合物を含有する組成物は、好
ましくは軟膏剤、チンキ剤、クリーム剤、ゲル剤、溶液
剤、ローション剤、スプレー剤、懸濁剤、シャンプー
剤、毛髪石鹸（hair soaps）などとして調製される。実
際、頭皮又は皮膚への適用に使用される既存の任意の組
成物を本発明に使用してよい。本発明の活性成分を含有
する組成物を適用する好ましい方法としては、本発明の
活性成分をゲル、ローション又はクリームの形で適用す
る方法がある。皮膚への局所投与のための医薬製剤は、
前述の本発明の活性成分を、このような製剤に通常使用
される、非毒性で治療的に不活性な固体又は液体担体と
混合することにより調製することができる。これらの製
剤は、組成物の総重量に基づき、本発明の活性成分を少
なくとも約０．０５wt％含有すべきである。本発明の活
性成分は、比較的非毒性で非刺激性であるため、３．０
％を越える量でさえも局所組成物中に使用されてもよ
い。これらの製剤は、組成物の総重量に基づき、本発明
の活性成分を約１〜２wt％含有することが好ましい。ま
た、これらの製剤は、１日当り１回又は２回皮膚に適用
することが好ましい。これらの製剤は、患者の必要に応
じて適用することができる。本発明を実施する際、本発
明の活性成分はまた、水溶液又はエチルアルコールのよ
うなアルコール溶液として適用することもできる。

【００２４】上記局所製剤を調製する際、局所製剤の薬
剤調合の分野で既存の保存剤、増粘剤、香料などのよう
な添加剤を使用することができる。更に、本発明の前述
の活性成分を含有する局所製剤中に既存の抗酸化剤を配
合することができる。これらの製剤に使用することがで
きる既存の抗酸化剤としては、Ｎ−メチル−α−トコフ
ェロールアミン、トコフェロール、ブチル化ヒドロキシ
アニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、エトキシキ
ン（ethoxyquin）などが含まれる。

【００２５】毛髪用の局所製剤に一般に使用される既存
の香料とローションを、本発明に使用することができ
る。更に、必要であれば、本発明の局所製剤に既存の乳
化剤を使用することができる。

【００２６】本発明の活性成分を含有する軟膏処方物
は、半固体の石油系炭化水素と本発明の活性成分の溶媒
分散液との混合物よりなる。

【００２７】本発明の活性成分を含有するクリーム組成
物は、好ましくは湿潤剤、粘度安定化剤及び水からなる
水相、脂肪酸アルコール、半固体の石油系炭化水素及び
乳化剤からなる油相、及び水性安定化剤−緩衝液中に分
散された本発明の活性成分を含有する相から形成される
乳濁液よりなる。この局所製剤に安定化剤を添加しても
よい。本発明に、既存の任意の安定化剤を使用すること
ができる。油相においては、脂肪酸アルコール成分が、
安定化剤として機能する。これらの脂肪酸アルコール成
分は、好ましくは炭素数が少なくとも約１４の長鎖飽和
脂肪酸の還元により誘導される。本発明の活性成分を含
有するクリームを基剤にした医薬処方物は、例えば、脂
肪酸アルコール、半固体石油系炭化水素、１，２−エチ
レングリコール及び乳化剤を含有する水性乳濁液よりな
る。

【００２８】一般に、炎症性又は非炎症性のざ瘡の治療
は、本発明の化合物０．１〜１０mg/kg を１日１回又は
２回患者に経口投与することにより行われてもよい。ざ
瘡の治療は、本発明の化合物を約０．０５wt％〜約３wt
％、好ましくは約１wt％〜約２wt％の量で含有する局所
組成物を、１日１回又は２回局所適用することにより行
われてもよい。

【００２９】治療に要する用量は、代表的には投与経
路、各個人の年齢、体重、大きさ及び病状に依存する。

【００３０】本発明の好ましい化合物は、以下のもので
ある：（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）−３，６，７−トリ
メチル−９−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘ
キセン−１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラエン
酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（２−（（Ｅ）
−２−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン
−１−イル）エテニル）−１−シクロヘキセン−１−イ
ル）−２，４−ペンタジエン酸；（全Ｅ）−６−ブロモ
−３，７−ジメチル−９−（２，６，６−トリメチル−
１−シクロヘキセン−１−イル）−２，４，６，８−ノ
ナテトラエン酸；（全Ｅ）−６−ヨード−３，７−ジメ
チル−９−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキ
セン−１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラエン
酸；（全Ｅ）−６−クロロ−３，７−ジメチル−９−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）−２，４，６，８−ノナテトラエン酸；（２Ｅ，
４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
エテニル〕−１−シクロペンテン−１−イル｝−２，４
−ペンタジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−
｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１−
シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−シクロヘ
プテン−１−イル｝−２，４−ペンタジエン酸；（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−１−シクロオクテン−１−イル｝−
２，４−ペンタジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル
−５−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル
−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−フ
ェニル｝−２，４−ペンタジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−
３−メチル−５−｛３−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−
トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニ
ル〕−２−チエニル｝−２，４−ペンタジエン酸；（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−３−チエニル｝−２，４−ペンタジ
エン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛４−
〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１−シクロ
ヘキセン−１−イル）エテニル〕−３−チエニル｝−
２，４−ペンタジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル
−５−〔２−（２，６，６−トリメチル−シクロヘキサ
−１−エニルエチニル）−シクロペンタ−１−エニル〕
−ペンタ−２，４−ジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メ
チル−５−〔２−（２，６，６−トリメチル−シクロヘ
キサ−１−エニルエチニル）−シクロヘプタ−１−エニ
ル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸；及び（２Ｅ，４Ｅ）
−３−メチル−５−〔２−（２，６，６−トリメチル−
シクロヘキサ−１−エニルエチニル）−フェニル〕−ペ
ンタ−２，４−ジエン酸。

【００３１】ＲＡＲ受容体とＲＸＲ受容体に関するレチ
ノイドの結合及びトランス活性化の特性を決定するため
の方法は、当業界で公知である（例えば、Levin et a
l., Nature, 355:359-361 (January 23, 1992); Allenb
y et al., Proc. Natl. Acad.Sci. USA, 90:30-34 (Jan
uary, 1993); Allenby et al., J. Biol. Chem., 269:1
6689-16695 (June 17, 1994))。本質的にこれらの刊行
物に記載される方法が、本発明の実施例に報告されるレ
チノイドの結合及びトランス活性化の特性を決定するた
めに使用された。

【００３２】ざ瘡を治療するために使用する本発明の化
合物の活性は、既存の任意の方法により決定されてよ
い。例えば、本発明の化合物の脂腺細胞の増殖に対する
阻害能は、ざ瘡治療の標準的モデルである。本発明の化
合物の脂腺細胞への抗増殖活性は、実施例２０（１）の
方法により決定することができる。

【００３３】更に、ライノマウスの小嚢（Rhino mouse
utricles）の大きさを縮小する本発明の化合物の活性
は、ざ瘡治療のもう１つの標準的モデルである。この活
性は、実施例２０（２）の方法により決定することがで
きる。

【００３４】更に、ゴールデンハムスター（Syrian Gol
den Hamsters）の脂腺の大きさを縮小する本発明の化合
物の活性は、ざ瘡治療の別の標準的モデルである。この
活性は、実施例２０（３）の方法により決定することが
できる。

【００３５】レチノイドのＲＡＲα活性を増強する本発
明の化合物の活性は、既存の任意の方法により決定する
ことができる。従って、レチノイドのＲＡＲα活性を増
強する本発明の化合物の活性は、レチノイドが治療に有
用であることが公知である病状との関連が知られている
標準的スクリーニングアッセイで、本発明の化合物とＲ
ＡＲα活性を有するレチノイドとの組み合せの活性を測
定することにより決定することができる。特定のレベル
のＲＡＲα活性を得るために要するＲＡＲα活性を有す
るレチノイドの濃度の低下、又は一定の濃度でのレチノ
イドの活性の上昇は、本発明の化合物がこれ自体ではほ
とんど又は全く活性を示さない濃度である場合、本発明
の化合物が増強活性を有することを証明している。

【００３６】例えば、ＨＬ−６０細胞（ヒト白血病の標
準的モデル）を分化させるレチノイドの活性を増強する
本発明の化合物の活性に関して以下に示す結果は、本発
明の化合物の増強活性を証明している。ＨＬ−６０細胞
を分化させる、ＲＡＲα活性を有するレチノイドの活性
を増強する本発明の化合物の活性は、実施例１８により
実施される。

【００３７】更に、マウスＢ細胞活性化を阻害（免疫抑
制の標準的モデル）する、ＲＡＲα活性を有するレチノ
イドの活性を増強する本発明の化合物の活性に関して以
下に示す結果は、本発明の化合物の増強活性を証明して
いる。マウスＢ細胞活性化を阻害するレチノイドの活性
を増強する本発明の化合物の活性は、実施例１９に示
す。

【００３８】更に、乳ガン細胞株（固形ガンのモデル）
の増殖を阻害する、ＲＡＲα活性を有するレチノイドの
活性を増強する本発明の化合物の活性に関して以下に示
す結果は、本発明の化合物の増強活性を証明している。
乳ガン細胞株の増殖を阻害するレチノイドの活性を増強
する本発明の化合物の活性は、実施例２１に示す。

【００３９】本発明の化合物は、既存の任意の方法によ
り調製することができる。好ましい方法を下記の反応式
で説明する：

【００４０】

【化４】

【００４１】

【化５】

【００４２】

【化６】

【００４３】

【化７】

【００４４】

【化８】

【００４５】

【化９】

【００４６】

【化１０】

【００４７】

【化１１】

【００４８】

【化１２】

【００４９】

【化１３】

【００５０】

【化１４】

【００５１】

【化１５】

【００５２】反応式１ａ〜１ｄは、Ｒ₁ 及びＲ₂ が一緒
になって環を形成しない式（Ｉ）の化合物を得るのに使
用される中間体エステルを調製するための好ましい方法
を示す。反応式１ａは、Ｒ₁ 及びＲ₂ が独立に低級アル
キルである式（Ｉ）の化合物への経路である。反応式１
ｂは、Ｒ₁ が低級アルキルであり、そしてＲ₂ がハロゲ
ン又は低級アルキルである式（Ｉ）の化合物への経路で
ある。反応式１ｃは、Ｒ₁ が低級アルキル又はハロゲン
であり、そしてＲ₂ が低級アルキル、フルオロ又はクロ
ロである式（Ｉ）の化合物への経路である。反応式１ｄ
は、Ｒ₁ が低級アルキル又はハロゲンであり、そしてＲ
₂ がブロモである式（Ｉ）の化合物への別の経路であ
る。しかし、Ｒ₁ がアルキルである場合、Ｒ₂ がブロモ
である式（Ｉ）の化合物は、好ましくは反応式１ｂの経
路により調製される。

【００５３】反応式１ａでは、強塩基（例えば、リチウ
ムジイソプロピルアミド）への１の暴露及びハロゲンゲ
ン化アルキルによるエノレートのアルキル化により、エ
ステル３が生成され、これを平衡条件下で塩基（例え
ば、還流エタノール中のナトリウムエトキシド）に暴露
後、主に１つの異性体（Ｚ）としてエステル３が得られ
る。

【００５４】Ｒ₂ がハロゲンである式（Ｉ）の化合物を
得るために、好ましくは反応式１ｂを使用する。しか
し、反応式１ｂは、また、Ｒ₂ が低級アルキルである式
（Ｉ）の化合物の調製のためにも使用することができ
る。アセチレン７（Carotenoids,Otto Isled 編（Birkh
auser Verlage, バーゼル, 1971))への銅酸塩（cuprat
e)（Ｒ₁₁）₂ ＬｉＣｕの付加により、シン付加により新
規な銅酸塩を得、これを適当なハロゲンゲン化物（例え
ば、ジオキサン中のヨウ素）で失活させて３’（Ｒ₂ ＝
Ｉ）を得る。この銅酸塩をハロゲンゲン化アルキルで失
活させると、Ｒ₂ がアルキルであるエステル３’が生成
する。銅酸塩化学の利点は、多くの場合に単一の異性体
が形成されることである。

【００５５】Ｒ₂ が低級アルキルである式（Ｉ）の化合
物を得るために、好ましくは反応式１ｃを使用する。市
販されている出発物質；例えば、β−イオノン１４（Ｒ
₁₂＝ＣＨ₃ ）を適当なホスホネート１５（Carotenoids,
上記）とカップリングさせて、目的のエステル３”を得
る。

【００５６】反応式１ｄは、Ｒ₂ がブロモである式
（Ｉ）の化合物を生成するために使用することができる
（G. Kobrich et al., LIebigs Ann. Chem., 51:704 (1
967)）。参照の方法によりケトン１４をアルケン１６に
変換する。ブロモ酸（bromo acids)１６の公知の混合物
をエステル３”’（例えば、Ｒ₁ ＝Ｍｅ；Ｒ₂ ＝Ｂｒ）
の混合物に変換し、次にこれをＨＰＬＣにより分離し、
次いで前記のように最終生成物に変換する。

【００５７】入手したエステル３、３’、３”又は
３”’により、標準的な方法により最終生成物を調製す
る（Caroteroids,上記）。例えば、この反応は反応式２
に示すように実施することができる。反応式２では、任
意のエステル３、３’、３”又は３”’のアルコールへ
の還元、続いての二酸化マンガンによる再酸化によりア
ルデヒド４を得る。次にこのアルデヒド４をホスホネー
ト５とカップリングさせて、メチルエステル６として最
終生成物を得る。６の塩基性加水分解により遊離酸が生
成する。

【００５８】Ｒ₁ 及びＲ₂ が一緒になってＣ₃ 〜Ｃ₁₃−
アルキレンである式（Ｉ）の化合物は、反応式３に示す
ように容易に調製することができる（R.M. Coates et a
l.,J. Org. Chem., 47:3597 (1982))。即ち、環状ケト
ン８（例えば、シクロペンタノン又はシクロヘキサノン
など）をジメチルホルムアミド中で三臭化リンに暴露し
てブロモアルデヒド９を得て（Coates et al.,上記）、
次にこれをホスホニウム塩１０とカップリングさせて、
臭化ビニル１１を得る。次にこの臭化ビニルを、金属交
換反応とジメチルホルムアミドとの反応によりアルデヒ
ド１２に変換する。入手した新規アルデヒドにより、１
２とホスホネート５とのカップリングにより、最終生成
物１３は容易に生成される。次いで加水分解により目的
の酸が得られる。

【００５９】反応式７は、Ｒ₁ 及びＲ₂ が一緒になって
Ｃ₃ 〜Ｃ₁₃−アルキレンである、反応式３に使用される
中間体１２の調製のための好ましい方法である。即ち、
ケトン８を公知の方法（例えば、Org. Synthesis, Coll
Vol. 5:198 (1973)）によりエステル３６に変換し、次
にエノールホスフェート３７に変換する。ホスフェート
基のジメチル銅酸塩（dimethyl cuprate）（J. Org. Ch
em., 53:2984 (1988)）による置換によりエステル３８
を得る。リチウムジイソプロピルアミドへの３８の暴
露、続いてのシクロシトラール３９の付加により、ラク
トン４０を得る（Tet. Letters, 21:2509 (1980)）。ラ
クトン４０をカリウムｔ−ブトキシドで処理し、次に反
応生成物をヨウ化メチルで失活させて、エステル４１を
得る。水素化ジイソブチルアルミニウムによる還元、続
いての二酸化マンガンによる酸化により、アルデヒド１
２を得る。

【００６０】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、これらが結合している炭
素原子と一緒に５〜６員芳香族環（例えば、チオフェ
ン、ベンゼン、ピリジンなど）である式（Ｉ）の化合物
を得るために、反応式４、５及び６に示す経路を使用す
ることができる。即ち、反応式４にはベンゼン含有構造
２２への経路を示す。フタリドをトリフェニルホスフィ
ン臭化水素酸塩で処理し、次に生成した塩１７をアルデ
ヒド１８とカップリングさせて、示されるように酸エス
テル１９を得る。酸エステル１９を酸塩化物（示されて
いない）を経て還元して、ベンジルアルコール２０を得
て、次にこれをアルデヒド２１に変換し、次いでシクロ
ゲラニルホスホニウムイリド１０とカップリングさせて
エステル２２を得て、加水分解後に酸を得る。

【００６１】反応式５及び６に示されるように、適当な
ブロモチオフェンから種々のチオフェン誘導体が調製さ
れる。例えば、反応式５では、２，３−ジブロモチオフ
ェン２３を選択的に金属化し、ジメチルホルムアミドに
暴露して、アルデヒド２４を得、次にこれをトリエチル
ホスホノアセテートでエステル２５に同族体化する。こ
のエステル基の還元によりアルコール２６を得、これを
アセタール２７として保護し、再度金属化し、ジメチル
ホルムアミドで失活させることが可能になり、アルデヒ
ド２８を得る。２８とシクロゲラニルホスホニウムイリ
ドとの縮合、続いての酸処理によりアルコール２９を得
る。次にこのアルコール２９を二酸化マンガンで酸化し
てアルデヒド３０にし、メチルリチウムに暴露し、二酸
化マンガンで再度酸化してメチルケトン３１を得る。ト
リエチルホスホノアセテートによる鎖伸長により、エス
テル３２として目的の物質を得て、加水分解してその酸
を得る。同様な方法で他の類似体を調製することができ
る（実施例を参照のこと）。

【００６２】反応式６では、アルデヒド２４をシクロゲ
ラニルホスホニウムイリド１０とカップリングさせて３
３を得、これを選択的に金属化し、ジメチルホルムアミ
ドに暴露して、アルデヒド３４を得る。ホスホネートに
よる鎖伸長によりエステル３５として目的の物質を得
て、加水分解によりその酸を得る。

【００６３】反応式８及び９は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が三重
結合である式（Ｉ）の化合物を調製するための好ましい
方法である。

【００６４】反応式８では、アルデヒド４２を、ウィッ
ティヒ・ホーナー反応（Wittig-Horner reaction）で、
塩基（例えば、ＮａＨ）の存在下で４−（ジエトキシ−
ホスフィニル）−３−メチル−ブタ−２−エン酸エチル
エステルとカップリングさせて、エステル４３を得る。

【００６５】２，２，６−トリメチルシクロヘキサノン
を、強塩基（例えば、ブチルリチウム）を使用してトリ
メチルシリルアセチレン（ＴＭＳ−アセチレン）と反応
させる。バージェス試薬（Burgess-reagent)（メトキシ
カルボニルスルファモイル−トリエチルアンモニウムヒ
ドロキシド、分子内塩）で水を脱離し、テトラブチルア
ンモニウムフルオリドでシリル保護基を除去して、２−
エチニル−１，３，３−トリメチル−１−シクロヘキセ
ンを得る。

【００６６】このシクロヘキセン誘導体を、Ｐｄ（Ｐｈ
₃ Ｐ）₄ ／ＣｕＩ複合体を触媒として、ピペリジンを溶
媒として使用してエステル４３とカップリングさせる。
次に生成したエステルを加水分解して酸III にする。

【００６７】反応式９では、２−エチニル−ベンジルア
ルコール（ＲがＨである化合物４４）をトリメチルシリ
ルクロリドと反応させる。保護アルコール（４４、Ｒ＝
ＳｉＭｅ₃)を、ブチルリチウムによる脱プロトン後に
２，２，６−トリメチル−シクロヘキサノンと反応させ
て、Ｒ’がＳｉＭｅ₃ である付加物４５を生成する。塩
基（例えば、水酸化カリウム水溶液）によるシリル保護
基の除去、続いての塩化アセチルとトリエチルアミンに
よるアセチル化により、アセテート４５（Ｒ’＝アセチ
ル）を得る。

【００６８】バージェス試薬（Burgess reagent)で処理
してシクロヘキサノール誘導体４５から水を脱離して、
対応するシクロヘキセン誘導体を得る。続いてアセチル
基の加水分解、及び第一級アルコールのＭｎＯ₂ による
酸化により、アルデヒド４６を得る。このアルデヒド４
６を、ウィッティヒ・ホーナー反応（Wittig-Hornerrea
ction）で、４−（ジエトキシ−ホスフィニル）−３−
メチル−ブタ−２−エン酸エチルエステルと反応させ
て、対応するエステルの加水分解後、酸III を得る。

【００６９】

【実施例】下記の実施例により本発明を説明する。実施
例中で、濃縮は、ロータリーエバポレーターを使用する
４０℃で２０mmHgの真空下での溶媒の留去を伴う。ＨＰ
ＬＣは、シリカカートリッジを有するウォーターズ・プ
レップ５００（Waters Prep 500)を使用する高速液体ク
ロマトグラフィーのことをいう。全ての中間体と最終生
成物は、ＨＮＭＲ分光法により性状解析した。

【００７０】実施例１ （２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）−３，６，７−トリメチル
−９−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン
−１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラエン酸の調
製 エチル（全Ｅ）−３−メチル−５−（２，６，６−トリ
メチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−２，４−ペ
ンタジエノエート（１；Ｒ₁ ＝Ｍｅ；１３．１ｇ）をテ
トラヒドロフラン（２５ml）に溶解し、次にテトラヒド
ロフラン（１００ml）に溶解したリチウムジイソプロピ
ルアミド（ジイソプロピルアミンとｎ−ブチルリチウム
から出発するエステルについて１．２当量；ヘキサン中
１．６M)の新たに調製した溶液に−７０℃で添加した。
得られた溶液をこの温度で更に１時間撹拌し、次にヨウ
化メチル（１０ml）で処理して室温にした。塩化アンモ
ニウム飽和水溶液を添加し、ヘキサン／酢酸エチル混合
物（４：１）で抽出することにより有機物質を単離し
た。真空下で溶媒を留去して、油状物としてアルキル化
生成物（１４ｇ）を得た。この物質を、ナトリウムメト
キシド（１０ml；メタノール中４．６M)を含有するメタ
ノール（１００ml）に溶解して、２時間還流しながら加
熱した。次にこの混合物を室温に冷却し、水で処理して
上記のようにヘキサン／酢酸エチルで抽出した。真空下
で溶媒を留去して、２，３二重結合についての異性体の
９：１混合物として粗メチル（２Ｚ，４Ｅ）−２，３−
ジメチル−５−（２，６，６−トリメチル−１−シクロ
ヘキセン−１−イル）−２，４−ペンタジエノエート
（１３．２ｇ）を得た。この物質を、−７０℃に冷却し
たヘキサン（１５０ml）に溶解し、次いで過剰の水素化
ジイソブチルアルミニウム（ヘキサン中１M)で処理して
０℃に加温した。次にジエチルエーテル（２００ml）、
続いてロシェル塩の水溶液（２０％；２０ml）を添加し
た。次いで微発熱反応が始まった時にこの混合物を注意
深く室温に加温した。この混合物を３５℃に加熱し、次
に室温に冷却した。次いで固体硫酸マグネシウム（５０
ｇ）を添加して固体を濾過した。

【００７１】真空下で溶媒を留去して、油状物として粗
アルコールを得た。この物質をヘキサン（２０ml）に溶
解し、５℃に冷却したヘキサン−エーテルの混合物
（１：１；４００ml）中の二酸化マンガン（１０２ｇ）
のスラリーに添加して、この温度で１．５時間、次いで
室温で更に１時間撹拌した。次にこの固体を濾過して溶
液を真空下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（５％エーテル
−ヘキサン溶媒系）によるクロマトグラフィーに付し
て、純粋な（２Ｚ，４Ｅ）−２，３−ジメチル−５−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）−２，４−ペンタジエナール（６ｇ；エチルエス
テルからの全収率５１％）を得た。

【００７２】水素化ナトリウム（１．３ｇ；油中６４
％）をヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥して、次にテト
ラヒドロフラン（６０ml）に５℃で懸濁した。次いでテ
トラヒドロフラン中のメチル３−メチル−４−ジエチル
ホスホノクロトネートの溶液（３０ml中に８．６ｇ）を
上記懸濁液に添加して、ナトリウム塩の清澄な溶液を得
た（注：混濁している場合は、混合物をセライト珪藻土
で濾過する）。次にこの清澄な溶液を１０℃に冷却し、
テトラヒドロフラン（２０ml）に溶解した上記アルデヒ
ド（６ｇ）で処理して室温で３０分間撹拌した。次にヘ
キサンを添加し、混合物を水で洗浄し、乾燥（硫酸マグ
ネシウム）し、濾過して固体を除いて濃縮した。残渣を
ヘキサンから結晶化させて、黄色の結晶性固体として純
粋なメチル（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）−３，６，７−
トリメチル−９−（２，６，６−トリメチル−１−シク
ロヘキセン−１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラ
エノエートを得た。この物質を、水酸化カリウム（４
ｇ）を含有するエタノール−水の混合物（１００ml；
９：１）に溶解し、２０分間還流しながら加熱した。次
にこの混合物を室温に冷却し、冷リン酸水溶液（２M)中
に注ぎ入れて、固体をジクロロメタン中に抽出した。真
空下で溶媒を留去し、残渣をアセトニトリルから結晶化
して、淡黄色の結晶性固体として（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ，
８Ｅ）−３，６，７−トリメチル−９−（２，６，６−
トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−２，
４，６，８−ノナテトラエン酸（３．８ｇ）を得た。こ
の物質は、プロトン磁気共鳴スペクトルでＥ，Ｅ，Ｚ，
Ｅポリエン系についての特徴的なピークを示した。

【００７３】実施例２ （全Ｅ）−６−ブロモ−３，７−ジメチル−９−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
−２，４，６，８−ノナテトラエン酸の調製 （２Ｅ，４Ｅ）及び（２Ｚ，４Ｅ）−２−ブロモ−３−
メチル−５−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘ
キセン−１−イル）−２，４−ペンタジエン酸の混合物
（７５ｇ）をジメチルホルムアミド（５００ml）に溶解
して、テトラヒドロフラン（１，１００ml）中の水素化
ナトリウム（１０．５ｇ；油中６５％）の懸濁液に１０
℃で添加し、次に水素の発生が全て停止するまで撹拌し
た。次いでヨウ化メチル（５０ｇ）を添加して、生じた
混合物を５０〜６０℃で２時間加熱し、氷−水混合物上
に注ぎ、ヘキサンで抽出した。このヘキサン抽出物を水
で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）して濃縮した。次
にこのメチルエステルの混合物をＨＰＬＣ（２．５％エ
ーテル／ヘキサン）により分離して、純粋なメチル（２
Ｚ，４Ｅ）−２−ブロモ−３−メチル−５−（２，６，
６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−
２，４−ペンタジエノエート（２０ｇ）とメチル（２
Ｅ，４Ｅ）−２−ブロモ−３−メチル−５−（２，６，
６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−
２，４−ペンタジエノエート（３７ｇ）を得た。

【００７４】このメチル（２Ｅ，４Ｅ）−２−ブロモ−
３−メチル−５−（２，６，６−トリメチル−１−シク
ロヘキセン−１−イル）−２，４−ペンタジエノエート
（３７ｇ）を実施例１のようにアルコールに還元し、次
に直ちに二酸化マンガンに暴露して不安定性アルデヒド
（１５ｇ）を得た。次いでこの物質を実施例１のよう
に、エチル（全Ｅ）−６−ブロモ−３，７−ジメチル−
９−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−
１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラエノエートに
変換し、続いて（全Ｅ）−６−ブロモ−３，７−ジメチ
ル−９−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセ
ン−１−イル）−２，４，６，８−ノナテトラエン酸に
加水分解した。

【００７５】実施例３ （全Ｅ）−６−ヨード−３，７−ジメチル−９−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
−２，４，６，８−ノナテトラエン酸の調製 テトラヒドロフラン（５００ml）中の臭化第一銅ジメチ
ルスルフィド複合体（１０．３ｇ）のスラリーを、０℃
でエーテル中のメチルリチウムの溶液（１．４M ；低臭
化物）で処理し、更に１５分間撹拌して次に−７０℃に
冷却した。この清澄な冷溶液にテトラヒドロフラン（５
０ml）に溶解したエチル（Ｅ）−５−（２，６，６−ト
リメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−４−ペン
テン−２−イノエート（１０ｇ）を添加し、この混合物
を２時間撹拌して、次にテトラヒドロフラン中のヨウ素
の溶液（１００ml中に１３ｇ）で０．５時間以上処理し
た。次にこの混合物を−６０℃に加温し、塩化アンモニ
ウム水溶液中に注ぎ入れ、そして有機物質をヘキサン中
に抽出した。このヘキサン抽出物をチオ硫酸ナトリウム
希水溶液で洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、室温で
濃縮して、不安定性のヨードエステルを得て、これをＨ
ＰＬＣ（２．５％エーテル／ヘキサン）により精製し
て、純粋なエチル（２Ｅ，４Ｅ）−２−ヨード−３−メ
チル−５−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキ
セン−１−イル）−２，４−ペンタジエノエート（５
ｇ）を得た。このエステルを対応するアルデヒドに変換
し、次いで前記実施例のようにホスホナートとカップリ
ングさせて、生じたレチノイン酸エステル類似体を加水
分解して、ヘキサン／テトラヒドロフラン混合物から結
晶化後、淡黄色の固体として純粋な（全Ｅ）−６−ヨー
ド−３，７−ジメチル−９−（２，６，６−トリメチル
−１−シクロヘキセン−１−イル）−２，４，６，８−
ノナテトラエン酸を得た。

【００７６】実施例４ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−シクロヘキセン−１−イル｝
−２，４−ペンタジエン酸の調製 テトラヒドロフラン（３００ml）中の〔（２，６，６−
トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）メチル〕
トリフェニルホスホニウムクロリド（１８ｇ）の懸濁液
を−６０℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中
１．４M ；３２ml）で滴下により処理し、そして更に１
０分間撹拌した。この冷溶液にテトラヒドロフランに溶
解した２−ブロモシクロヘキセン−１−カルボキサルデ
ヒド（８．５ｇ、ＨＮＭＲ分析により純度７５％）を添
加し、この混合物を室温に加温し、次いで更に２時間撹
拌した。次にこの反応物にヘキサンを添加して、得られ
た混合物を水、５０％水性メタノールで洗浄し、乾燥
（硫酸マグネシウム）した。溶媒を留去して、異性体の
混合物として粗（Ｅ）−１−ブロモ−２−〔２−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
エテニル〕−シクロヘキセン（１２．５ｇ）を得て、こ
れをこのまま次の工程に使用した。標準的な金属交換反
応及びＤＭＦとの反応により、粗アルデヒド（４．５
ｇ）を得て、これをテトラヒドロフラン（１００ml）に
溶解し、実施例１のように過剰のホスホナートと反応さ
せて、ＨＰＬＣ（ヘキサン中２．５％エーテル）による
精製後、油状物としてメチル（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチ
ル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチ
ル−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−
シクロヘキセン−１−イル｝−２，４−ペンタジエノエ
ート（３ｇ）を得た。水酸化カリウム水溶液により加水
分解して、結晶性の（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−
｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１−
シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−シクロヘ
キセン−１−イル｝−２，４−ペンタジエン酸（ヘキサ
ン−テトラヒドロフランから１．６ｇ）を得た。

【００７７】実施例５ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−シクロペンテン−１−イル｝
−２，４−ペンタジエン酸の調製 実施例４のように、２−ブロモシクロペンテン−１−カ
ルボキサルデヒドを（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−
｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１−
シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−シクロペ
ンテン−１−イル｝−２，４−ペンタジエン酸エチルエ
ステルに変換し、これを塩基により加水分解して、（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−１−シクロペンテン−１−イル｝−
２，４−ペンタジエン酸を得た。

【００７８】実施例６ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−シクロヘプテン−１−イル｝
−２，４−ペンタジエン酸の調製 実施例４及び５のように、１−ブロモシクロヘプテン−
２−カルボキサルデヒドを（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル
−５−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル
−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−シ
クロヘプテン−１−イル｝−２，４−ペンタジエン酸エ
チルエステルに変換し、塩基による加水分解後、（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−１−シクロヘプテン−１−イル｝−
２，４−ペンタジエン酸を得た。

【００７９】実施例７ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−シクロオクテン−１−イル｝
−２，４−ペンタジエン酸の調製 上記実施例のように、１−ブロモシクロオクテン−２−
カルボキサルデヒドを（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５
−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１
−シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−１−シクロ
オクテン−１−イル｝−２，４−ペンタジエン酸エチル
エステルに変換し、続いて塩基性加水分解により（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−１−シクロオクテン−１−イル｝−
２，４−ペンタジエン酸に変換した。

【００８０】実施例８ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−フェニル｝−２，４−ペンタ
ジエン酸の調製 反応式４に示されるように、フタリド（０．１Mol)とト
リフェニルホスフィン臭化水素酸塩（０．１Mol)を２時
間２００℃で加熱し、室温に冷却し、次に熱アセトニト
リルで温浸して白色固体として塩１７（３９ｇ）を得
た。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ；５０ml）中のこ
の塩（４．６ｇ）の溶液を、５℃でＤＭＳＯのナトリウ
ム塩の溶液（１M ；２０ml）、続いてアルデヒド１８
（１．５ｇ）で処理して、淡黄色の反応混合物を得た。
次に水を添加し、得られた混合物をリン酸水溶液（２M)
で酸性にして、酢酸エチル中に抽出することにより酸１
９を単離した。この粗生成物（４．３ｇ）をベンゼンに
溶解して塩化オキサリル（３ml）とジメチルホルムアミ
ド（３滴）に暴露し、次いで室温に３０分間静置した。
真空下で溶媒を留去し、続いてこの粗酸塩化物をテトラ
ヒドロフラン（１００ml）に溶解して、水素化ホウ素ナ
トリウムを−２０℃で添加して室温に加温後、アルコー
ル２０を得た。この粗アルコールをＨＰＬＣにより精製
し、続いてヘキサン／酢酸エチル混合物から結晶化し
て、無色の固体として３−メチル−５−（２−ヒドロキ
シメチルフェニル）−２，４−ペンタジエン酸エチルエ
ステル２０（１．１ｇ）を得た。アルコール２０（１．
１ｇ）を、ヘキサン／ジクロロメタン（５：１、６０m
l）中の二酸化マンガン（１１ｇ）のスラリーに０℃で
暴露し、続いて更に２時間室温で撹拌して、アルデヒド
２１（１．１ｇ）を得た。テトラヒドロフラン（２０m
l）中の臭化シクロゲラニルホスホニウム１０（１．３
ｇ）から誘導されたホスホニウムイリドの溶液とｎ−ブ
チルリチウムを１０℃で粗アルデヒド２１（１．０ｇ）
で処理して、室温で１５〜３０分間加温した。水で希釈
し、ヘキサン／酢酸エチル混合物（４：１）に有機物質
を抽出して、油状物として粗付加物２２を得た。このヘ
キサン中の物質をシリカゲルの充填物に流して、油状物
としてエステル（０．８ｇ）を得た。この物質を還流エ
タノール中で水酸化カリウム水溶液で加水分解して、鉱
酸（２M リン酸）で酸性化後、酸を得た。ヘキサン／酢
酸エチル混合物から結晶化して、白色固体として純粋な
（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−１−フェニル｝−２，４−ペンタ
ジエン酸を得た。

【００８１】実施例９ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛３−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−２−チエニル｝−２，４−ペンタ
ジエン酸の調製 ジエチルエーテル中の２，３−ジブロモチオフェン
（０．１mol)の溶液（濃度約５％）を−７０℃でｎ−ブ
チルリチウム（ヘキサン中１．６M ；１．１当量）で処
理して３０分間撹拌した。次に過剰のジメチルホルムア
ミドを添加して、この混合物を室温に加温し、水で急冷
し、次いで希リン酸水溶液で酸性にした。ヘキサンで抽
出して粗アルデヒドを得て、次にこれをＨＰＬＣにより
精製した。次いでこの流出物からの全アルデヒドを、テ
トラヒドロフラン中の過剰のトリエチルホスホノアセテ
ートのナトリウム塩に添加して、この混合物を室温で１
時間撹拌し、水と酢酸で急冷した。次にこの粗エステル
２５を、−４０℃でヘキサン中の過剰の水素化ジイソブ
チルアルミニウムに添加して、混合物を０℃に加温し
て、ロシェル塩の水溶液（２０％；１０ml）で失活させ
て、３２℃に加温した。次いでヘキサンで抽出して、ア
ルコール２６を得て、これを２−メトキシプロペンでア
セタール２７に変換した。ＨＰＬＣによりこのアセター
ルを精製後、全生成物を、−７０℃に冷却したテトラヒ
ドロフランに溶解（濃度〜５％）し、次に前記のように
ｎ−ブチルリチウムで処理した。この温度で更に３０分
間撹拌後、過剰のジメチルホルムアミドを添加し、混合
物を室温に加温し、塩化アンモニウム水溶液（２０％）
で急冷して、ヘキサンでの単離及びＨＰＬＣによる精製
後、アルデヒド２８を得た。次いでこのアルデヒドを、
テトラヒドロフランとヘキサン中の臭化シクロゲラニル
ホスホニウム１０とｎ−ブチルリチウムから生成した過
剰のイリド（１．２当量）に−７０℃で暴露し、更に室
温で２時間撹拌した。次に水と希リン酸水溶液を添加し
て、ヘキサン中に抽出後アルコール２９を得た。この物
質をジエチルエーテル（最少量）に溶解し、次いで０℃
で多量のエーテル（３００ml）中の二酸化マンガンのス
ラリー（１０倍）に添加して。室温に加温した。更に１
時間撹拌後、固体を濾過し、溶媒を留去して、ＨＰＬＣ
により精製後、アルデヒド３０を得た。次にこの物質を
エーテルに溶解し、−１０℃に冷却し、エーテル（１．
４当量）中の過剰のメチルリチウムに暴露し、続いて室
温に加温した。水を添加し、有機相を濃縮して、粗アル
コールを得て、これを上記のように二酸化マンガンで酸
化して、ケトン３１を得た。この物質を、室温でテトラ
ヒドロフラン中の過剰のトリエチルホスホノアセテート
のナトリウム塩に暴露して、新たに生成した二重結合に
ついて目的の異性体が主である異性体混合物（〜４：
１）として、目的のエステル３２（Ｒ＝エチル）を得
た。ＨＰＬＣによりこの混合物を精製し、主要な異性体
をヘキサンから結晶化して、純粋なエチル（２Ｅ，４
Ｅ）−３−メチル−５−｛３−〔（Ｅ）−２−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
エテニル〕−２−チエニル｝−２，４−ペンタジエノエ
ートを得た。実施例８のように還流エタノール中の水酸
化カリウム水溶液で加水分解して、テトラヒドロフラン
／ヘキサン混合物から結晶化後、純粋な（２Ｅ，４Ｅ）
−３−メチル−５−｛３−〔（Ｅ）−２−（２，６，６
−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニ
ル〕−２−チエニル｝−２，４−ペンタジエン酸を得
た。

【００８２】実施例１０ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−３−チエニル｝−２，４−ペンタ
ジエン酸の調製 実施例９のように、２，３−ジブロモチオフェンをアル
デヒド２４に変換し、次いで臭化シクロゲラニルホスホ
ニウム１０とｎ−ブチルリチウムから誘導されたイリド
に暴露して付加物３３を得た。ブロモ化合物３３を、実
施例９のようにヘキサン／テトラヒドロフラン中のｎ−
ブチルリチウム、続いて過剰のジメチルホルムアミドで
処理して、リン酸水溶液で処理後、アルデヒド３４を得
た。次にこの物質を、実施例１のようにホスホナート５
とカップリングさせて、末端二重結合についての異性体
の混合物としてメチル（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５
−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１
−シクロヘキセン−１−イル）エテニル〕−３−チエニ
ル｝−２，４−ペンタジエノエート３５（Ｒ＝メチル）
を得た。ＨＰＬＣにより精製してメチル（２Ｅ，４Ｅ）
−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−（２，６，６
−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）エテニ
ル〕−３−チエニル｝−２，４−ペンタジエノエートを
得て、これを上記のように加水分解後、テトラヒドロフ
ラン／ヘキサン混合物からの結晶化により純粋な（２
Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛２−〔（Ｅ）−２−
（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−
イル）エテニル〕−３−チエニル｝−２，４−ペンタジ
エン酸を得た。

【００８３】実施例１１ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛４−〔（Ｅ）−２
−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１
−イル）エテニル〕−３−チエニル｝−２，４−ペンタ
ジエン酸の調製 実施例１０のように３，４−ジブロモチオフェンを処理
して、（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−｛４−
〔（Ｅ）−２−（２，６，６−トリメチル−１−シクロ
ヘキセン−１−イル）エテニル〕−３−チエニル｝−
２，４−ペンタジエン酸を得た。

【００８４】実施例１２ （全Ｅ）−６−クロロ−３，７−ジメチル−９−（２，
６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）
−２，４，６，８−ノナテトラエン酸の調製 テトラヒドロフラン中のトリエチル２−クロロホスホノ
アセテート（J. Org.Chem., 51:5467 (1986))（０．１
２M)の溶液を水素化ナトリウム（６４％油懸濁液；０．
１２M)で処理し、室温で撹拌して、陰イオンの清澄な溶
液を得た。この混合物にβ−イオノン（０．１M)を添加
し、この反応物を４５℃で一夜加熱した。次に水を添加
し、生成物をヘキサン／酢酸エチル（４：１）中に抽出
した。溶媒を留去して、二重結合異性体の混合物（１：
１）としてカップリング生成物を得、これから目的の異
性体であるエチル（２Ｅ，４Ｅ）−２−クロロ−３−メ
チル−５−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキ
セン−１−イル）−２，４−ペンタジエノエートをＨＰ
ＬＣにより分離した。このエステルを、実施例１のよう
に水素化ジイソブチルアルミニウムで還元し、続いて前
記のように二酸化マンガンで酸化して、（２Ｅ，４Ｅ）
−２−クロロ−３−メチル−５−（２，６，６−トリメ
チル−１−シクロヘキセン−１−イル）−２，４−ペン
タジエナールを得た。次にこの物質を、実施例１のよう
にメチル３−メチル−４−ジエチルホスホノクロトネー
トとカップリングさせて、メチル（全Ｅ）−６−クロロ
−３，７−ジメチル−９−（２，６，６−トリメチル−
１−シクロヘキセン−１−イル）−２，４，６，８−ノ
ナテトラエノエートを得た。前記のようにこのエステル
を加水分解し、テトラヒドロフランとヘキサンの混合物
からこの酸を結晶化して、黄色固体として純粋な（全
Ｅ）−６−クロロ−３，７−ジメチル−９−（２，６，
６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−
２，４，６，８−ノナテトラエン酸を得た。

【００８５】実施例１３ （全Ｅ）−３，７−ジメチル−９−〔（２−メトキシ−
４−メチル−６−オクチルオキシ）フェニル〕−２，
４，６，８−ノナテトラエン酸の調製 アセトン中の２，６−ジヒドロキシ−４−メチル−安息
香酸の溶液（５０．４ｇ；７５０ml）をヨウ化メチル
（１００ml）と炭酸カリウム（１２４．２ｇ）で処理し
て、還流しながら１８時間加熱した。次にこの混合物を
室温に冷却し、濾過して固体を除いた。この溶液を濃縮
して粗生成物を得て、これを酢酸エチルに溶解して水酸
化ナトリウム水溶液（１N ；冷溶液）で洗浄した。次に
溶媒を真空下で留去して、２，６−ジメトキシ−４−メ
チル−安息香酸メチル（５４ｇ）を得た。この物質（５
２．５ｇ）を、−７０℃に冷却したジクロロメタン
（１，０００ml）に溶解して、同一溶媒中の三塩化ホウ
素の溶液（２９．３g/１００ml；１８０ml）で処理し
た。次にこの混合物を室温に加温し、更に４５分間撹拌
し、そして氷上に注いだ。有機層を分離し、多めの水で
洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濾過して濃縮し
た。

【００８６】次にこの残渣を、ウォーターズ・プレップ
５００（Waters prep.500)クロマトグラフ（７％酢酸エ
チル／ヘキサン溶離液）を使用して高速分取液体クロマ
トグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製して、固体として
純粋な２−ヒドロキシ−６−メトキシ−４−メチル安息
香酸メチル（２８．３ｇ）を得た。炭酸カリウム（２
７．１ｇ）を含有するメチルエチルケトン（７００ml）
中のこの物質（３５ｇ）の溶液を、ヨウ化１−オクチル
（３４．２ｇ）で処理して、還流しながら２０時間加熱
した。この反応混合物を冷却し、濾過して固体を除き、
瀘液を濃縮して、そしてヘキサンと酢酸エチルの混合物
に再溶解した。次にこの溶液を塩基水溶液（１N 水酸化
ナトリウム）、水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）
して、濃縮乾固した。前記のようにＨＰＬＣにより精製
して、純粋な２−メトキシ−６−オクチルオキシ−４−
メチル−安息香酸メチル（５１．８ｇ）を得た。

【００８７】トルエン（５００ml）中のこの物質（５
１．８ｇ）の溶液を−６０℃に冷却し、水素化ジイソブ
チルアルミニウムの溶液（ヘキサン中２５％；２８１m
l）で処理し、次いで室温に加温した。次に、温度を２
０℃に保つように冷却しながら、この反応混合物を水性
メタノール（１００ml；１：１）で注意深く処理し、続
いてヘキサン（５００ml）と硫酸マグネシウムを添加し
た。次に固体を濾過し、溶媒を真空下で留去して、粗ア
ルコールを得た。この物質（４７ｇ）を、トリフェニル
ホスホニウム臭化水素酸塩（５４．９ｇ）を含有するア
セトニトリル（５００ml）に溶解して、還流しながら２
２時間加熱した。次に溶媒を真空下で留去して、粗塩を
室温で０．１mm圧で乾燥した（この物質をテトラヒドロ
フランから結晶化させて純粋な〔（２−メトキシ−６−
オクチルオキシ−４−メチル）フェニル〕メチル−トリ
フェニルホスホニウムブロミドを得ることができた）。
次にこの塩を、米国特許第4,894,480 号の実施例５に記
載されているように（全Ｅ）−３，７−ジメチル−９−
〔（２−メトキシ−４−メチル−６−オクチルオキシ）
フェニル〕−２，４，６，８−ノナテトラエン酸に変換
した。

【００８８】実施例１４ （Ｅ）−２−〔２−（２，６，６−トリメチル−１−シ
クロヘキセン−１−イル）エテニル〕シクロヘプテンカ
ルボキサルデヒドの調製 反応式７に示すように、シクロヘプタノン（１５２ｇ）
をそのエステル（Org.Syn. Coll., 5:198 (1973) ；２
３２ｇ）に変換し、エノールホスフェート３７（２７４
ｇ）に変換し、続いてリチウムジメチルクプラートで処
理してエチル２−メチル−シクロヘプタ−１−エノエー
ト３８（１１９ｇ）を得た。次にテトラヒドロフラン中
のエチル２−メチル−シクロヘプタ−１−エノエート
（９１ｇ）の溶液をリチウムジイソプロピルアミド
（０．５３Mol)の溶液に添加し、次いでシクロシトラー
ル３９（７６ｇ）で失活させて、酸処理後ラクトン４０
（１１３ｇ）を得た。４０をテトラヒドロフラン中のカ
リウムｔｅｒｔ−ブトキシド、続いて過剰のヨウ化メチ
ルに暴露してメチルエステル４１（１１１ｇ）を得た。
上記エステルを水素化ジイソブチルアルミニウムで還元
し、続いて実施例１のように二酸化マンガンで酸化し
て、アルデヒド１２（ｎ＝３）（９８ｇ）を得た。

【００８９】実施例１５ Ａ：（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，
６，６−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニ
ル）−シクロペンタ−１−エニル〕−ペンタ−２，４−
ジエン酸エチルエステルの調製 （２Ｅ，４Ｅ）−５−（２−ブロモ−シクロペンタ−１
−エニル）−３−メチル−ペンタ−２，４−ジエン酸エ
チルエステル（１．４３ｇ）をベンゼン５mlに溶解し
た。室温で、Ｐｄ（Ｐｈ₃ Ｐ）₄ ２９３mg、ＣｕＩ９５
mg、（Ｐｈ）₃ Ｐ１４７mg、及びピペリジン８mlを連続
して添加した。この混合物に、滴下ロートにより１時間
以内にベンゼン５mlに溶解した２−エチニル−１，３，
３−トリメチル−１−シクロヘキセン（７４５mg）を添
加した。４．５時間後、更にアセチレン（３５０mg）を
添加して３０分間撹拌を続けた。次にこの混合物を砕氷
／ＨＣｌ中に注ぎ入れて、ＥｔＯＥｔで抽出し、水で２
回洗浄し、Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥し、蒸発乾固させた。中
圧クロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／ＡｃＯＥ
ｔ＝９８／２）により、黄色油状物として（２Ｅ，４
Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，６−トリメチ
ル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）−シクロペン
タ−１−エニル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸エチルエ
ステル１．４７８ｇを得た。

【００９０】前もって必要な（２Ｅ，４Ｅ）−５−（２
−ブロモ−シクロペンタ−１−エニル）−３−メチル−
ペンタ−２，４−ジエン酸エチルエステルは下記のとお
り合成した：

【００９１】ＮａＨ（鉱物油中５０％）２．０３ｇをＤ
ＭＦ１２０mlに懸濁した。４−（ジエトキシ−ホスフィ
ニル）−３−メチル−ブタ−２−エン酸エチルエステル
（１２．９ｇ）を０℃で添加した。この混合物を０℃で
１５分間、室温で３０分間撹拌した。再度０℃に冷却
後、ＤＭＦ１１mlに溶解した２−ブロモ−シクロペンタ
−１−エン−カルバルデヒド（５．７２ｇ）を滴下によ
り添加し、０℃で１０分間、室温で２時間反応させた。
次にこの混合物を砕氷中に注ぎ入れて、ＥｔＯＥｔで抽
出し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥
し、蒸発乾固させた。フラッシュクロマトグラフィー
（シリカゲル、ヘキサン／ＡｃＯＥｔ＝９７／３）によ
り残渣を精製し、ヘキサン／痕跡量のＡｃＯＥｔから結
晶化させて、最終的に融点８５〜８６℃の黄色の結晶と
して純粋な（２Ｅ，４Ｅ）−５−（２−ブロモ−シクロ
ペンタ−１−エニル）−３−メチル−ペンタ−２，４−
ジエン酸エチルエステル３．４０８ｇを得た。

【００９２】前もって必要な２−エチニル−１，３，３
−トリメチル−１−シクロヘキセンは、ＴＭＳ−アセチ
レンのＬｉ誘導体の２，２，６−トリメチルシクロヘキ
サノンへの付加、バージェス試薬（メトキシカルボニル
スルファモイル−トリエチルアンモニウムヒドロキシ
ド、分子内塩）での処理による脱水、及び最後にテトラ
ブチルアンモニウムフルオリドによる脱シリル化による
標準的な方法により合成した。これは、それ自体が不安
定であるため、すぐに使用する必要があった。

【００９３】Ｂ：（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−
〔２−（２，６，６−トリメチル−シクロヘキサ−１−
エニルエチニル）−シクロペンタ−１−エニル〕−ペン
タ−２，４−ジエン酸の調製 （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，６
−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）−
シクロペンタ−１−エニル〕−ペンタ−２，４−ジエン
酸エチルエステル（１．４７ｇ）をＴＨＦ／ＥｔＯＨ＝
１／１（１４ml）に溶解した。３N のＮａＯＨ水溶液
（７．０ml）を添加し、反応フラスコを暗所に置いた。
室温で１６時間撹拌後、この混合物を砕氷／ＨＣｌ上に
注ぎ、ＥｔＯＥｔで２回抽出し、水で洗浄し、Ｎａ₂ Ｓ
Ｏ₄ で乾燥して蒸発乾固させた。ＥｔＯＥｔ／ペンタン
から結晶化して、融点１７３〜１７４℃の黄色結晶とし
て（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，
６−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）
−シクロペンタ−１−エニル〕−ペンタ−２，４−ジエ
ン酸１．３１ｇを得た。

【００９４】実施例１６ 実施例１５と同様に、融点１６６〜１６７℃の黄色結晶
として（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，
６，６−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニ
ル）−シクロヘプタ−１−エニル〕−ペンタ−２，４−
ジエン酸を調製した。

【００９５】実施例１７ （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，６
−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）−
フェニル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸の調製 （２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，６
−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）−
フェニル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸エチルエステル
２２９mgをエタノール８mlに溶解した。水２．５ml中の
水酸化カリウム４１１mgの溶液を添加後、この反応混合
物を５０℃で２時間撹拌した。次にこの混合物を氷／水
上に注ぎ、２N 塩酸で酸性にし、酢酸エチルで抽出し
た。有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶
媒を蒸発させて、わずかに黄色の結晶を得て、これを酢
酸エチル／ヘキサンから再結晶した。融点１９４〜１９
６℃の（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，
６，６−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニ
ル）−フェニル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸９３mgを
得た。

【００９６】本実施例に使用した出発物質は、下記のよ
うに調製した：２−エチニル−ベンジルアルコール９７
０mgをジエチルエーテル５０mlに溶解した。トリエチル
アミン１．９mlを添加し、続いてトリメチルシリルクロ
リド０．９mlを滴下により添加した。この反応混合物を
室温で４時間撹拌し、氷／５％重炭酸ナトリウム水溶液
上に注ぎ、エーテルで抽出した。乾燥と溶媒の留去後に
得られた油状残渣を蒸留して、沸点８５〜８９℃／０．
８mmの無色の油状物として２−エチニルベンジルトリメ
チルシリルエーテル１．３ｇを得た。

【００９７】この無色の油状物をテトラヒドロフラン５
mlに溶解した。−７８℃でブチルリチウム（ヘキサン中
１．６Mol)３．９mlを滴下により添加後、この反応混合
物をこの温度で３０分間撹拌した。テトラヒドロフラン
４ml中の２，２，６−トリメチル−シクロヘキサノン
０．５９ｇの溶液を滴下し、反応混合物を室温で５時間
撹拌して、黄色の溶液を生成した。この黄色の溶液を氷
水／１０％塩化アンモニウム水溶液上に注ぎ、ヘキサン
で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去した。
この黄色の油状残渣をフラッシュクロマトグラフィー
（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／５％酢酸エチル）により精製し
て、黄色油状物１．７ｇを得た。

【００９８】この黄色の油状物をテトラヒドロフラン９
０mlに溶解し、０．５N の水酸化カリウム水溶液２８．
８mlと共に室温で６時間撹拌した。この反応混合物を氷
／水上に注ぎ、エーテルで抽出し、水で洗浄し、乾燥し
て溶媒を蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー
（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／酢酸エチル＝７：３）によりこ
の残渣を精製し、酢酸エチル／ヘキサンから結晶化し
て、融点１２０〜１２１℃の白色結晶１．１ｇを得た。

【００９９】この白色結晶をテトラヒドロフラン１０ml
に溶解し、次々にトリエチルアミン６７９mg及び塩化ア
セチル４００mgで処理した。室温で４時間撹拌後、この
反応混合物を氷／１N 塩酸上に注ぎ、エーテルで抽出
し、硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を蒸発させた。フラ
ッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／酢酸
エチル＝４：１）により、無色の油状物０．８ｇを得
た。

【０１００】この無色の油状物をベンゼン１３mlに溶解
し、ベンゼン４０ml中のバージェス試薬（メトキシカル
ボニルスルファモイルトリエチルアンモニウムヒドロキ
シド、分子内塩）１．３ｇの溶液に添加した。この反応
混合物を６０℃で３時間加熱した。溶媒の大部分を留去
後、残渣を氷水に溶解し、エーテルで抽出した。乾燥と
溶媒の留去後、得られた残渣をフラッシュクロマトグラ
フィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／酢酸エチル＝９：１）に
より精製して、わずかに黄色の油状物０．７ｇを得た。

【０１０１】この黄色の油状物をエタノール１８mlに溶
解し、水４ml中の水酸化カリウム０．７８ｇの溶液で４
５℃で２．５時間処理した。この反応混合物を氷／飽和
塩化アンモニウム溶液上に注ぎ、エーテルで抽出し、乾
燥して溶媒を蒸発させた。残渣を中圧液体クロマトグラ
フィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／酢酸エチル＝９：１）で
精製して、わずかに黄色の油状物０．４６ｇを得た。こ
の黄色の油状物を塩化メチレン２０mlに溶解し、室温で
激しく撹拌しながら１５時間二酸化マンガン１．６ｇで
処理した。この二酸化マンガンを濾過し、瀘液から溶媒
を蒸発させ、残渣を中圧クロマトグラフィー（（Ｓｉ）
₂ 、ヘキサン／２％酢酸エチル）で精製して、黄色油状
物として２−（２，６，６−トリメチル−シクロヘキサ
−１−エニルエチニル）−ベンズアルデヒド２２５mgを
得て、これを冷却して凝固させた。

【０１０２】水素化ナトリウム（鉱物油中５０％）８５
mgをペンタンで洗浄し、テトラヒドロフラン４mlに懸濁
した。テトラヒドロフラン４mlに溶解した４−（ジエト
キシホスフィニル）−３−メチル−ブタ−２−エン酸エ
チルエステル４７０mgを０℃で滴下により添加し、この
反応混合物を室温で１時間撹拌した。再度０℃に冷却
後、テトラヒドロフラン３ml中の前工程からの黄色のア
ルデヒド２２５mgの溶液を滴下した。この反応混合物を
室温で３時間撹拌し、氷／飽和塩化アンモニウム溶液上
に注ぎ、エーテルで抽出し、水で洗浄し、乾燥して溶媒
を蒸発させた。この残渣を、最初にフラッシュクロマト
グラフィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキサン／５％酢酸エチル）
で、次に中圧液体クロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ 、ヘキ
サン／２％酢酸エチル）で精製して、無色の油状物とし
て（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−〔２−（２，６，
６−トリメチル−シクロヘキサ−１−エニルエチニル）
−フェニル〕−ペンタ−２，４−ジエン酸エチルエステ
ル２２９mgを得た。

【０１０３】実施例１８ レチノイドの影響下で、ＨＬ−６０細胞（ヒト骨髄性白
血病細胞株）は顆粒球に分化する。このＨＬ−６０の顆
粒球への分化は、ＲＡＲαにより媒介され、これにより
白血病を治療するためのレチノイドの使用の根拠を提供
する。この試験の結果は、本発明のＲＸＲ選択性化合物
が、これら自体が不活性である用量で、全ｔｒａｎｓの
レチノイン酸と式：

【０１０４】

【化１６】

【０１０５】の別のＲＡＲα選択性レチノイド（化合物
Ａ）の前分化作用を、ある程度の大きさまで増強するこ
とができることを証明した。

【０１０６】レチノイド受容体をトランス活性化（tran
sactivate)する試験化合物の活性は下記のとおりであっ
た：

【０１０７】

【表１】

【０１０８】ＨＬ−６０分化 ＨＬ−６０細胞のレチノイド誘導性分化を、ＮＢＴ（ニ
トロブルーテトラゾリウム）の還元によりこれらの酸化
的バースト能力（oxidative burst potential)を測定す
ることにより評価した〔Pick et al., J. Reticuloendo
thelial Soc.,30:581-593 (1981) 〕。

【０１０９】ＨＬ−６０細胞を、１０％ＦＣＳ、２mMの
Ｌ−グルタミン、１mMピルビン酸ナトリウム、１％非必
須アミノ酸、５０U/mlペニシリン及び５０μg/mlストレ
プトマイシンを補充したＲＰＭＩ１６４０培地（＝ＲＰ
ＭＩ／ＦＣＳ）で維持した。この細胞には、マイコプラ
ズマがいないことが認められた。

【０１１０】平底マイクロタイターウェルに３０，００
０細胞／ＲＰＭＩ／ＦＣＳ１００μl を播種した。完全
培地中に希釈したレチノイド１０μl を同時に添加し
て、最終濃度１０^-11 〜１０^-6M にした（エタノール中
の１０^-2M の保存溶液は、−２０℃で維持し、遮光し
た）。３日後、マルチチャネルピペットで培地を除去
し、ＮＢＴ溶液（２００nMホルボールミリスタートアセ
テート（ＰＭＡ）を含むＰＢＳ中１mg/ml ）１００μl
で置換した。３７℃で更に１時間インキュベーション
後、ＮＢＴ溶液を除去して０．０１N のＨＣｌ中の１０
％ＳＤＳ１００μl を添加した。還元されたＮＢＴの量
を、自動プレートリーダーを使用して５４０nmで比色定
量した。３つのウェルの平均を計算した。標準誤差は５
〜１０％であった。

【０１１１】結果 ＨＬ−６０分化に及ぼすＲＸＲ選択性レチノイドの効果 ＲＡＲαの活性化物質としての活性の低さに一致して、
実施例４のＲＸＲ選択性レチノイドは、全ｔｒａｎｓの
レチノイン酸に比べてＨＬ−６０分化の誘導物質として
は明らかに低い活性を示した（第１図）。実際、実施例
４の化合物は、そのトランス活性化（transactivation)
特性によく一致して、１×１０^-6M でさえ実質的に不活
性であった。ＨＬ−６０細胞は、トランス活性化系（tr
ansactivation system）に比べてレチノイドに対して約
１０×より高感度であると考えられる（表１のＲＡＲα
と図１を比較）。

【０１１２】しかし、図２及び図３に見られるように、
実施例４のＲＸＲ選択性レチノイドは、これ自体が活性
でない濃度で、全ｔｒａｎｓのレチノイン酸と化合物Ａ
の効果を増強することができた。この増強は、３×〜１
０×の範囲であって、即ち、これに匹敵するレベルにＨ
Ｌ−６０を分化をさせるには、３〜１０倍高濃度の単独
の全ｔｒａｎｓのレチノイン酸又は化合物Ａ単独が必要
であった。

【０１１３】得られた結果から、ＨＬ−６０分化に及ぼ
すＲＸＲ選択性リガンドの効果は相加的以上であり、従
って残りのＲＡＲ活性化効果では説明できないことが明
らかである。この観察された効果はまた、より選択性の
低い（ＲＡＲ対ＲＸＲ）全ｔｒａｎｓのＲＡ（レチノイ
ン酸）よりも選択的なＲＡＲαリガンド（化合物Ａ）を
使用した場合に、より明白であった。増強効果はまた、
ＲＸＲがＲＡＲとヘテロ二量体を形成してＲＡＲ特異的
プロモーター配列の転写活性を増強することを示すin v
itroのデータとも一致した。何らかの効果を得るには、
なぜ比較的高濃度のＲＸＲ選択性レチノイド（１０^-7M)
が必要であるかは、今のところ明白ではない。これらの
濃度は、ＲＸＲ転写活性化アッセイにおけるＥＣ₅₀より
も２オーダー以上高いが、ＲＸＲのレチノイド結合親和
性がヘテロ二量体形成で変化するかどうかは知られてい
ない。従って、第１表に示されるＥＤ₅₀値は、ＲＸＲを
含むヘテロ二量体に媒介される効果について充分に代表
的とは言えないかもしれない。

【０１１４】実施例１９ マウスＢ細胞増殖を阻害する能力について、全ｔｒａｎ
ｓのＲＡとの組合せで実施例４の化合物を試験した。本
発明のＲＸＲ選択性リガンドは、マウスＢ細胞増殖に及
ぼす全ｔｒａｎｓのＲＡの阻害活性を増強した。

【０１１５】材料と方法 レチノイド これらの検討に使用したレチノイドの結合特性とトラン
ス活性化特性を、下記の表に示した：

【０１１６】

【表２】

【０１１７】細胞アッセイ マウス脾臓の単細胞懸濁液を、平底の９６ウェルマイク
ロタイタートレーの培養物に、１０％ウシ胎児血清、Ｈ
ＥＰＥＳ、抗生物質及び５０μM の２−メルカプトエタ
ノールを補充したＩＭＤＭ中の２×１０⁵/ml細胞懸濁液
０．２ml/ ウェルにセットした。特異的なＢ細胞のマイ
トジェンであるE. coli のリポ多糖類（DIFCO)（ＬＰ
Ｓ）を５０μg/mlで添加した。培養物を加湿雰囲気及び
５％ＣＯ₂で３７℃でインキュベートした。

【０１１８】試験を行うレチノイドを、最初に１０nM〜
１０μM で三重に滴定し、全培養期間を通じてそのまま
にした。続いて活性化合物をＩＣ₅₀値に達するまで更に
滴定した。参照化合物としてシクロスポリンＡ（サンド
社（Sandoz AG)）を使用した（１nM〜１μM)。

【０１１９】培養２、３及び４日後、細胞に〔 ³Ｈ〕チ
ミジンを１ウエル当り１μCiで４時間適用し、パルス標
識を行った。次にこの培養物をガラス繊維フィルター上
に回収し、ＤＮＡに取り込まれた放射活性をβ−液体シ
ンチレーションカウンター（Betaplate, Wallac Oy, Tu
rku,フィンランド）で測定した。

【０１２０】結果を未処理培養物の応答の％として示し
た。培養２４、４８及び７２時間後に、マイトジエン誘
導性増殖を ³Ｈ−チミジンの取り込みとして測定した。
培養期間の開始時に、レチノイドを培養物に添加した。

【０１２１】結果 １．マウスＢ細胞増殖に及ぼすＲＸＲ選択性リガンドの
効果 実施例４のＲＸＲ選択性リガンドを、最初にＬＰＳ誘導
性マウスＢ細胞増殖への直接の干渉について試験した。
この結果を図４に示したが、これは、実施例４のレチノ
イドが１００nMのＩＣ₅₀で増殖を阻害したことを証明し
ている。この能力は、全ｔｒａｎｓのＲＡ（ＩＣ₅₀＝１
nM）のそれの１／１００であった。第４日目に、低用量
の実施例４のレチノイド（およそ第３日目のＩＣ₅₀）は
わずかに応答を増強し、これはこの系における全てのレ
チノイドの結果に一致した。

【０１２２】２．ＲＸＲ選択性リガンドは、マウスＢ細
胞増殖に及ぼす全ｔｒａｎｓのレチノイン酸の阻害効果
を増強した 全ｔｒａｎｓのＲＡは、ＬＰＳ誘導性マウスＢ細胞の増
殖を、１nMのＩＣ₅₀で阻害した。１０〜３０nMで最大阻
害が得られ、７５〜８０％を越えることはなかった。本
発明の実施例４のＲＸＲ選択性リガンドを、全ｔｒａｎ
ｓのＲＡ１nMに暴露したＬＰＳ刺激培養物中に投与し；
全ｔｒａｎｓのＲＡ１０nMに暴露した培養物を平行に置
いた。全ての場合に、本発明の実施例４のＲＸＲリガン
ドは、それ自体ではほとんど阻害しない濃度で、１nMで
のＲＡによる効果を、１０nMのＲＡで観察されるレベル
まで増強した。同様な結果を培養第２及び３日目に得
た。第３日目のデータを図５に示した。

【０１２３】実施例４の化合物の活性のため、この効果
は恐らく相加的又は増強的なものであった。しかし培養
の後期に得られた結果は、この効果が単に相加的ではな
く、むしろ増強的であることを示した。

【０１２４】第４日目に、１nMのＲＡはもはや阻害効果
を示さず、実際には応答のわずかな増強を誘導したが、
一方１０nMのＲＡは約３０％のみを阻害した。この現象
の理由は不明であるが、そこではこの化合物の半減期が
役割を担っているであろう。このＲＸＲ選択性リガンド
も同様の効果を有していた（図４の曲線を参照のこ
と）。しかし１nMのＲＡと本発明の実施例４のＲＸＲリ
ガンドの組合せは、なおも１０nMのＲＡにより誘導され
る阻害と同程度の阻害をもたらした。結果を図６に示し
た。

【０１２５】結果は、レチノイドの効果がＲＡＲαによ
り媒介される機能系において、ＲＸＲ選択性レチノイド
（実施例４）が、全ｔｒａｎｓのＲＡの効果を増強する
ことを証明した。ＲＸＲリガンドでは、全ｔｒａｎｓの
ＲＡよりも１０〜３０倍高い増強効果が得られた。増強
の大きさは、ほぼ１０倍であった：１０nMのＲＡにより
通常誘導されるレベルの阻害が、本発明のＲＸＲリガン
ドと組み合せて、１nMのＲＡで得られた。

【０１２６】実施例２０ 抗ざ瘡活性の従来のアッセイ法を用いた下記の測定法に
より、本発明の化合物の抗ざ瘡活性が証明された： （１）ヒト脂腺細胞に対する抗増殖活性 方法 成人ヒト脂腺から、酵素的及び機械的方法の組合せ（Do
ran et al., 1991）により脂腺細胞を単離した。この細
胞を、１０％ウシ胎児血清とデキサメタゾン４μg/mlを
含有するイスコブ培地（Iscove's medium)中で、増殖を
阻止した３Ｔ３マウス繊維芽細胞の層上で培養した。細
胞を、試験化合物を含まない培地に塗布し、次に最初の
塗布の２４〜４８時間後に新鮮培地中の試験化合物を加
えた。試験化合物を含有する新鮮培地を４８時間毎に培
養物に加えた。回収の日に培養物をＰＢＳ中の０．０３
％ＥＤＴＡで濯ぎ、３Ｔ３繊維芽細胞のみを除去し、続
いて０．０５％トリプシン／０．０３％ＥＤＴＡ中でイ
ンキュベートした。細胞を懸濁し、激しく混合して単細
胞懸濁液を調製して、血球計でカウントした。

【０１２７】１００％ＤＭＳＯ中の１０^-2M 溶液として
化合物の保存溶液を調製して、暗所に−２０℃で保存し
た。溶液中の化合物を室温にして、完全培地中に直接適
当な濃度に希釈して使用した。

【０１２８】１０^-6及び１０^-7M でのin vitroの脂腺細
胞の増殖の阻害についてこの化合物を試験した。

【０１２９】薬剤への暴露の１０日後in vitroで第一継
代のヒト脂腺細胞の増殖の阻害に対する効果について、
実施例１２、実施例２、及び実施例４の化合物を試験し
た。５０％増殖を阻害するのに要する濃度（nM）として
結果を報告した（ＩＣ₅₀）。

【０１３０】

【表３】

【０１３１】実施例４の化合物は、増殖が３０〜４０％
ほどしか抑制されない不充分な用量作用曲線を示した。
これは１３−ｃｉｓ−レチノイン酸よりもはるかに弱い
が、なおin vitroの生物学的活性を示した。実施例２の
化合物は、最初の実験で１００nMのＩＣ₅₀を示したが、
その実験で１，０００nMの用量においてのみ、７０％の
増殖の阻害が示された。

【０１３２】（２）ライノマウスの小嚢（Rhino mouse
utricles）の縮小活性 このモデルでは、ヒト面皰に似た角質化した毛嚢脂腺構
造である予め存在する小嚢（utricles）の大きさを縮小
する活性について化合物を試験した（Mezick et al., 1
985)。

【０１３３】方法 ジャクソン・ラボラトリーズ（Jackson Laboratories）
から入手した６〜８週齢の雌性ライノマウス（ｈｒ^rhｈ
ｒ^rh）を６群に分けて使用した。化合物を１００％アセ
トンに溶解して、実験の期間中窒素下で４℃で保存し
た。連続３週間、週に５日間毎日試験化合物をマウスの
背部に適用した。最終投薬の１日後、ＣＯ₂ 吸入により
マウスを屠殺した。背部から皮膚片を切り出し、室温で
２〜３時間２M 臭化ナトリウム中でインキュベートし
た。次に表皮を真皮から分離した。

【０１３４】次にこの表皮を、７０％、８０％、９５
％、１００％エタノール、及びキシレンにより脱水し
た。この試料を各々上記溶液中で２時間保存した。この
皮膚試料をキシレンから取り出し、顕微鏡スライドガラ
ス上にマウントした。小嚢の平均直径及び面積を測定す
るために、アルティメージ画像分析ソフトウェア（Ulti
mage image analysis software）を用いる画像分析を行
った。試料当りおよそ５つの視野を試験して、マウス当
り平均１５０個の小嚢（utricles）を測定した。

【０１３５】結果 本発明の幾つかの化合物（実施例１２、実施例２、及び
実施例４）をライノマウス（rhino mouse ）において局
所的に試験した。

【０１３６】マウスに、アセトン中の１３−ｃｉｓ−レ
チノイン酸、９−ｃｉｓ−レチノイン酸、ならびに実施
例１２、実施例２、及び実施例４の化合物１００μl を
局所投与した。結果を下記表４に示した：

【０１３７】

【表４】

【０１３８】注意：この実験中に幾つかの副作用を認め
た。１３−ｃｉｓ−レチノイン酸１００μg を投与した
マウスは、第５日目に剥脱と紅斑を示した。９−ｃｉｓ
−レチノイン酸を投与したマウスは、同一用量で１日早
くこれらの副作用を示した。

【０１３９】投薬の第７日目に、実施例１２の化合物１
００μg で紅斑を認めた。同じ日に実施例２の化合物１
００μg を投与したマウスで、少数の紅斑が認められ
た。しかし、この紅斑は実施例１２のもの程重度ではな
かった。同一時点で、相応する用量の実施例４の化合物
を投与したマウスは、明らかな紅斑を示さなかった。

【０１４０】投薬の第１４日目までには、実施例１２の
化合物１００μg を投与した全てのマウスで、前日まで
には認められなかった剥脱が認められた。化合物を、剥
脱／紅斑に関して１００μg において最も重度のものか
ら最も軽度のものへと順に並べると、９−ｃｉｓ−Ｒ
Ａ、１３−ｃｉｓ−ＲＡ、実施例１２の化合物、実施例
２の化合物、及び実施例４の化合物であった。

【０１４１】従って、本発明の化合物は、９−ｃｉｓ−
ＲＡ、１３−ｃｉｓ−ＲＡに比較して刺激性が低かっ
た。

【０１４２】（３）ゴールデンハムスター（Golden Syr
ian Hamsters）の脂腺の大きさに及ぼす化合物のin viv
o での効果 方法 チャールズ・リバー（Charles River)の雄性ゴールデン
ハムスターに、アセトン中の目的の用量の化合物を投与
した。化合物を遮光して４℃で保存した。新鮮溶液を毎
週調製した。

【０１４３】ハムスターに、２０回の用量を投与し終え
るまで、５日間毎日投与し、２日間休薬し、再度５日間
投与した。溶液の容量を１つの耳当り５０マイクロリッ
トルとした。

【０１４４】ＣＯ₂ 吸入によりハムスターを屠殺し、組
織学的評価のために耳を採取した。１つの耳を採取し、
残りの耳から腹側の表面を分離した。耳の先端から５mm
の所から２mmのパンチ孔を取り、１００％プロピレング
リコールに溶解した０．１％スダンブラックＢで一夜染
色した。脱色（destaining）後、ドンサント画像分析シ
ステム（Donsanto Image Analysis System）で脂腺の大
きさを定量した。

【０１４５】データは、各用量当り８０〜１２０個の脂
腺の平均面積として、コントロール（溶媒で処理）の切
片の百分率として示した。

【０１４６】

【表５】

【０１４７】参照文献 Doran et al., 「ヒト脂腺細胞のin vitroでの性状解析
（"Characterization ofhuman sebaceous cells in vit
ro"）」, J. Invest. Dermatol., 96:341-348 (1991) Mezick et al.,「ライノマウスにおける皮角を埋める小
嚢の大きさに及ぼすレチノイドの局所及び全身性作用。
レチノイドの『抗角質化』作用を定量するためのモデル
（"Topical and systemic effects of retinoids on ho
rn-filled utriculus size in the rhino mouse. A mod
el to quantify 'antikeratinizing' effects of retin
oids."）」, J. Invest. Dermatol, 83:110-113 (1985)

【０１４８】実施例２１ ヒト乳ガン細胞株を阻害する活性について、式：

【０１４９】

【化１７】

【０１５０】で示される、ＲＡＲα活性を有するレチノ
イドである全Ｅ−３，７−ジメチル−９−〔（２−メト
キシ−４−メチル−６−オクチルオキシ）フェニル〕−
２，４，６，８−ノナテトラエン酸（化合物Ｂ）と組み
合せて、実施例６の化合物を試験した。

【０１５１】結果は、本発明のＲＸＲ選択性リガンド
が、化合物Ｂの固形ガン阻害活性を増強することを証明
した。

【０１５２】１．化合物Ｂの合成 下記方法により化合物Ｂを調製した：

【０１５３】

【化１８】

【０１５４】アセトン中の２，６−ジヒドロキシ−４−
メチル−安息香酸１の溶液（５０．４ｇ；７５０ml）を
ヨウ化メチル（１００ml）と炭酸カリウム（１２４．２
ｇ）で処理して、１８時間還流しながら加熱した。次に
この混合物を室温に冷却し、濾過して固体を除いた。こ
の溶液を濃縮して粗生成物を得て、これを酢酸エチルに
溶解し、水酸化ナトリウム水溶液（１N ；冷溶液）で洗
浄した。次に真空下で溶媒を留去して、２，６−ジメト
キシ−４−メチル−安息香酸メチル２（５４ｇ）を得
た。この物質（５２．５ｇ）を、−７０℃に冷却したジ
クロロメタン（１，０００ml）に溶解して、同一溶媒中
の三塩化ホウ素の溶液（２９．３ｇ／１００ml；１８０
ml）で処理した。次にこの混合物を室温に加温し、更に
４５分間撹拌し、次いで氷上に注いだ。有機層を分離
し、多めの水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、
濾過して濃縮した。次にこの残渣を、ウォーターズ・プ
レップ５００（Waters prep.500)クロマトグラフ（７％
酢酸エチル／ヘキサン溶離液）を使用して高速分取液体
クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製して、固体
として純粋な２−ヒドロキシ−６−メトキシ−４−メチ
ル−安息香酸メチル３（２８．３ｇ）を得た。炭酸カリ
ウム（２７．１ｇ）を含有するメチルエチルケトン（７
００ml）中のこの物質（３５ｇ）の溶液を、ヨウ化１−
オクチル（３４．２ｇ）で処理して、還流しながら２０
時間加熱した。この反応混合物を冷却し、濾過して固体
を除き、瀘液を濃縮して、次いでヘキサンと酢酸エチル
の混合物に再溶解した。次にこの溶液を塩基水溶液（１
N 水酸化ナトリウム）、水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネ
シウム）し、濃縮乾固した。前記のようにＨＰＬＣによ
り精製して、純粋な２−メトキシ−６−オクチルオキシ
−４−メチル−安息香酸メチル４（５１．８ｇ）を得
た。トルエン（５００ml）中のこの物質（５１．８ｇ）
の溶液を−６０℃に冷却し、水素化ジイソブチルアルミ
ニウムの溶液（ヘキサン中２５％；２８１ml）で処理し
て、室温に加温した。次に、温度を２０℃に保つように
冷却しながら、この反応混合物を水性メタノール（１０
０ml；１：１）で注意深く処理し、続いてヘキサン（５
００ml）と硫酸マグネシウムを添加した。次に固体を濾
過し、真空下で溶媒を留去して、粗アルコール５を得
た。この物質（４７ｇ）を、トリフェニルホスホニウム
臭化水素酸塩（５４．９ｇ）を含有するアセトニトリル
（５００ml）に溶解し、還流しながら２２時間加熱し
た。次に真空下で溶媒を留去し、粗塩６を室温で０．１
mmHg圧で乾燥した（この物質をテトラヒドロフランから
結晶化させて純粋な〔（２−メトキシ−６−オクチルオ
キシ−４−メチル）フェニル〕メチル−トリフェニルホ
スホニウムブロミドを得ることができた）。次にこの塩
６を、米国特許第4,894,480 号（実施例５）に記載され
ているように、（全Ｅ）−３，７−ジメチル−９−
〔（２−メトキシ−４−メチル−６−オクチルオキシ）
フェニル〕−２，４，６，８−ノナテトラエン酸である
化合物Ｂに変換した。

【０１５５】２．試験 上述のように化合物Ｂ及び実施例６の化合物でレチノイ
ド受容体結合及びトランス活性化アッセイを行った。結
果は以下の通りである：

【０１５６】

【表６】

【０１５７】ＡＴＣＣから入手した〔受託番号ＨＴＢ１
３３〕乳ガン細胞株Ｔ４７−Ｄを、１０％ＦＢＳ、１０
μg/mlインスリン及び１３ng/ml ゲンタマイシンを補充
したＲＰＭＩ１６４０培地で培養し、３７℃、４．５％
ＣＯ₂ 及び９５．５％加湿空気でインキュベートした。
７０〜８０％の集密度(confluency)に達した時点で細胞
を回収してペレット化した。この細胞を培地に再懸濁し
て、７日間のアッセイ期間中、線形増殖が可能な密度に
９６ウェルプレート（Corning)に播種（１５０μl/ウェ
ル）した（即ち、Ｔ４７−Ｄを４×１０³ 細胞／ウェル
に播種した）。プレートを３７℃のインキュベーターに
一夜置いた。

【０１５８】薬物（１００％ＤＭＳＯ中１mM保存溶液）
を播種の１８〜２４時間後に添加した。薬物の組み合せ
剤は９６ウェルマイクロタイタープレート中で調製し、
手作業でアッセイプレートに添加した。薬物添加の３〜
７日後にＭＴＴアッセイを行った。このＭＴＴアッセイ
は、培養物中の細胞の生存を測定するテトラゾリウムに
基づくアッセイである。ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチ
ルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラ
ゾリウムブロミド）保存溶液（１×ＰＢＳ中５mg/ml)を
アッセイプレートに添加（５０μl/ウェル）して、３７
℃で２．５時間インキュベートした。

【０１５９】吸引により液体を除去し、９５％エタノー
ル５０μl を添加し、ホルマザン生成物を可溶化するた
めに、プレートを１５分間振盪（ミニオービタルシェー
カー（Mini-Orbital Shaker)、Bellco）した。試験波長
５７０nmと対照波長６６０nmで自動プレートリーダー
（マイクロプレートＥＬ３２０リーダー（Microplate E
L320 Reader), Bio-Tek Instruments)を使用して、各ウ
ェルの光学密度を測定した。式：

【０１６０】

【数１】

【０１６１】により、一定濃度の実施例６の化合物と組
み合せての種々の濃度の化合物Ｂによりもたらされた細
胞増殖阻害を測定した。

【０１６２】結果を図７に図示した。この結果は、固形
ガン細胞株の増殖の阻害において、本発明のＲＸＲ選択
性化合物が、ＲＡＲα活性を有するレチノイドの活性を
増強することを証明した。

【０１６３】実施例Ａ 活性物質２０mgを含有する硬ゼラチンカプセル 組成：１個のカプセルは下記を含有する： 式（Ｉ）の化合物 ２０mg ＲＡＲαレチノイド ２０mg ゼラチンブルーム３０（Gelatine Bloom 30) ７０．０mg マルトデキストリンＭＤ０５ １０８．０ｍｇ ｄｌ−α−トコフェロール ２．０ｍｇ アスコルビン酸ナトリウム １０．０mg 微結晶セルロース ４８．０mg ステアリン酸マグネシウム ２．０mg （カプセル内容物重量） ２８０．０mg

【０１６４】製法：活性物質をゼラチン、マルトデキス
トリン、ｄｌ−α−トコフェロール及びアスコルビン酸
ナトリウムの溶液中で湿式粉砕（wet milled）した。湿
式粉砕した懸濁液を噴霧乾燥した。噴霧乾燥した粉末
を、微結晶セルロース及びステアリン酸マグネシウムと
混合した。この混合物２８０mgづつを、適当な大きさと
色の硬ゼラチンカプセルに充填した。

【図面の簡単な説明】

【図１】全ｔｒａｎｓのレチノイン酸（ＲＡ）、別のＲ
ＡＲα選択性レチノイド（ここでは化合物Ａ）、及びＲ
ＸＲ選択性レチノイド（ここでは実施例４の化合物）に
よるＨＬ−６０細胞の分化の誘導を示す。ＯＤ₅₄₀ は、
分化したＨＬ−６０細胞の数に比例する。

【図２】全ｔｒａｎｓのレチノイン酸（ＲＡ）とＲＸＲ
選択性レチノイド（実施例４の化合物）の組み合せによ
るＨＬ−６０細胞の分化の誘導を示す。

【図３】化合物ＡとＲＸＲ選択性レチノイド（実施例４
の化合物）の組み合せによるＨＬ−６０細胞の分化の誘
導を示す。

【図４】全ｔｒａｎｓのＲＡ又はＲＸＲ選択性レチノイ
ド（実施例４の化合物）に暴露したＢ細胞培養物による
チミジンの取り込みを示す。値は、非処理培養物との相
対値である。

【図５】培養第３日目の全ｔｒａｎｓのＲＡ及びＲＸＲ
選択性レチノイド（実施例４の化合物）の、単独及び組
み合せによるＬＰＳ誘導性Ｂ細胞増殖の阻害を示す。

【図６】培養第４日目の全ｔｒａｎｓのＲＡ及びＲＸＲ
選択性レチノイド（実施例４の化合物）の、単独及び組
み合せによるＬＰＳ誘導性Ｂ細胞増殖の阻害を示す。

【図７】乳ガン細胞株におけるＲＡＲα活性を有する化
合物（化合物Ｂ）及びＲＸＲ選択性化合物（実施例６の
化合物）の増強された抗増殖活性を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｄ 333/24 Ｃ０７Ｄ 333/24 (72)発明者 アレン・ジョン・ラヴィー アメリカ合衆国、ニュージャージー 07006、ノース・コールドウェル、ヒッ コリー・ドライブ 21 (72)発明者 ペーター・モール スイス国、ツェーハー−4054 バーゼ ル、ベンケンシュトラーセ 26 (72)発明者 マイケル・ローゼンバーガー アメリカ合衆国、ニュージャージー 07006、コールドウェル、アーリント ン・アベニュー 79 (56)参考文献 米国特許3277147（ＵＳ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (3)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合は、二重結合又は三重結合であ
   り；Ｒ₁ 及びＲ₂ は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が二重結合である
   場合、独立にハロゲン又は低級アルキルであるか、又は
   Ｒ₁ 及びＲ₂ は、Ｃ₇ −Ｃ₈ 結合が三重結合である場
   合、独立に低級アルキルであるか；あるいはＲ₁ 及びＲ
   ₂ は、一緒になって、その１つの炭素原子が硫黄、酸素
   及び窒素よりなる群から選択されるヘテロ原子で置換さ
   れていてもよいＣ₃ 〜Ｃ₁₃−アルキレンであるか；ある
   いはＲ₁ 及びＲ₂ は、これらが結合している炭素原子と
   一緒になって、５〜６個の炭素原子を有する芳香族環で
   あるか、又はＲ₁ 若しくはＲ₂ の１つの原子が、酸素、
   窒素及び硫黄よりなる群から選択されるヘテロ原子であ
   り、Ｒ₁ 及びＲ₂ の残りの原子が炭素である、５〜６個
   の原子を有する複素芳香族環である。ただし、Ｃ₇ −Ｃ
   ₈ 結合が二重結合であり、Ｒ₁ がメチルである場合、Ｒ
   ₂ はＦではない）で示される化合物、又はその薬学的に
   許容しうる塩、エステルもしくはアミド。
2. 【請求項２】 請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、又は
   その薬学的に許容しうる塩、エステル若しくはアミド、
   及び薬学的に許容しうる不活性担体よりなる医薬組成
   物。
3. 【請求項３】 ＲＡＲα活性を有するレチノイドである
   第１の化合物、及び請求項１記載の式（Ｉ）の第２の化
   合物、又はその薬学的に許容しうる塩、エステル若しく
   はアミドよりなる経口投与のための単位投与剤型の組成
   物であって、該第１の化合物が、該単位投与剤型中に１
   ０〜５０mgの量で存在し、該第２の化合物が、該単位投
   与剤型中に該第１の化合物の量の１〜１０倍の量で存在
   する組成物。