JP2714461B2

JP2714461B2 - ラセミ体混合物からｌ―異性体の単離方法

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Publication number: JP2714461B2
Application number: JP1324847A
Authority: JP
Inventors: イー．キッドマンジーン; イー．ガードナーウイリアム
Original assignee: ザヌトラスウィートカンパニー
Priority date: 1988-12-14
Filing date: 1989-12-14
Publication date: 1998-02-16
Anticipated expiration: 2013-02-16
Also published as: GR3015077T3; EP0373583B1; DE68921163T2; DE68921163D1; IE66004B1; EP0373583A2; ES2068233T3; ATE118470T1; CA2004887A1; KR900009996A; KR0160757B1; JPH02243636A; IE893996L; US4847409A; EP0373583A3; CA2004887C

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）アミノ酸はヒトの食物および動物試料の双方で重要な
添加物であり、これらの製造および精製は多くの食品産
業に対し絶対に必要となった。多数のアミノ酸は化学的
に、又はブロスから所望アミノ酸の分離および単離を必
要とする醗酵方法を通して製造される。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題）多数のアミノ酸は２つの光学的活性の光学的対掌体、
Ｌ−およびＤ−異性体として存在する。化学的加工中製
造されるこれらのラセミ体混合物からこの２つを分離す
ることはしばしば多くの適用で選択される。例えばＬ−
フェニルアラニンは一般的にはジペプチド甘味料アスパ
ルテーム、当業界で公知のアルファ−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（APM）の成分
である。ジペプチドはアスパラギン酸およびフェニルア
ラニンの２つのＬ−異性体から成る場合甘味を有する
が、これらのＤ−Ｌ、Ｌ−Ｄ、Ｄ−Ｄ光学的対掌体は甘
味を有しなことも知られている。さらに、Ｄ−フェニル
アラニンを含有する任意の光学的対掌体は甘味料として
価値がない。

アスパルテームはいくつかの生化学的方法のうち任意
の１方法により合成できるが、これらは一般にカップリ
ング反応を含み、それによってアスパラギン酸はフェニ
ルアラニン又はそのメチルエステルと結合する。従っ
て、最終生成物はその光学的対掌体および、未反応フェ
ニルアラニンおよびアスパラギン酸から分離しなければ
ならない。非−甘味エステルを加水分解し、フェニルア
ラニンを回収することによりＬ−フェニルアラニンを保
全することは経済的に有利である。しかし、APMを製造
し、残存フェニルアラニンを回収するために使用する各
種化学処理工程中いくらかのＬ−フェニルアラニンはラ
セミ化する。従って、このフェニルアラニンを回収する
場合、これはいくらかのＤ−異性体を含有する。Ｄ−異
性体はジペプチド甘味料の製造に利用できないので、ラ
セミ混合物からできるだけ経済的いＬ−フェニルアラニ
ン異性体を分離できることは有用である。

ラセミ体がＬ−異性体をＤ−異性体より多く含む場
合、ラセミ体混合物からアミノ酸の純粋Ｌ−異性体を結
晶化し、単離することは本発明の目的である。特に、Ｌ
−およびＤ−形の双方から成るラセミ混合物から純粋Ｌ
−フェニルアラニンを得ることが本発明の目的である。

Ｌ−およびＤ−異性体の各種分離方法が既知であり、
総称的には分割を意味する。D,L−混合物を分割するも
っとも通常的方法は、分割剤として既知の光学的活性化
合物とこれらを併せ、次いで溶液中の化合物（ジアステ
レオマー）の形成混合物を分別結晶化することを含む。
実際的分割では、ジアステレオマー間に明白な溶解度の
差を有する良好な結晶化挙動を与える分割剤および溶媒
の組み合せを見出すことが必要である。アミノ酸の分割
に適用するこの技術の例はエムミック，アール.,の米国
特許第2,556,907号およびロジャース，エー.,の米国特
許第2,657,230号明細書にある。これらの特許はD,L−リ
ジンを分割する方法を論じ、光学的に活性のグルタミン
酸を分割剤として使用する。

さらに最近になって、フェニルアラニンはそのジアス
テレオマーの酵素加水分解により分割された。酵素キモ
トリプシンは選択的にＬ−フェニルアラニンエステルを
加水分解する。従ってＬ−フェニルアラニンはD,L−フ
ェニルアラニンエステルの混合物から回収される。この
方法の例はエムピー，エム.,のヨーロッパ特許出願第EP
174,862号（8/17/84）明細書である。

しかし、上記先行技術方法は、フェニルアラニン誘導
体を形成して所望の異性体を単離するために化学的又は
酵素的反応又はこれらのいくつかの組み合せにおいて分
割剤の使用を含む付加的工程を醗酵工程の他に必要とす
る。本発明はラセミ体混合物からＬ−異性体を分離し、
同じ工程で、分割剤、当該アミノ酸の誘導体を次に形成
する必要なしに、そして酵素反応を使用せずに他のアミ
ノ酸塩などから精製することができる。

（課題を解決するための手段）アミノ酸異性体のD,L混合物からＬ−異性体の選択的
結晶化方法を記載する。特に、Ｌ−フェニルアラニンの
選択的結晶化方法を示す。さらにラセミ体の異性体を結
晶化し、分離することによりＬ−フェニルアラニンの豊
富な母液を製造し、次にこの液からＬ−フェニルアラニ
ンを選択的に結晶化する方法を記載する。純粋Ｌ−フェ
ニルアラニンは真空下に約5.0〜65℃の温度でラセミ体
から結晶化でき、その場合結晶化後溶液に残存するＤ−
フェニルアラニンはフェニルアラニン全量の約7.0％以
下である。約50％Ｄ−および50％Ｌ−フェニルアラニン
から成るラセミ体結晶は上記温度でラセミ体から結晶化
でき、その場合結晶化後溶液中に残存するＤ−フェニル
アラニンンはフェニルアラニン全量の約7.0％以上であ
る。結晶化条件は純粋Ｌ−フェニルアラニン又は50％ラ
セミ体結晶の所望組成を保証するためにゆっくりした結
晶成長および結晶の熟成を含まねばならない。Ｄ−異性
体対全フェニルアラニン比が約7.0％以上である場合、
Ｄ−フェニルアラニンによる汚染が7.0％未満のＬ−フ
ェニルアラニンをさらに沈澱させるには、溶液に純粋Ｌ
−フェニルアラニンを播種し、次いで熟成時間を置き、
次にゆっくり結晶化させる場合、約5.0〜55.0℃で可能
である。

本発明はフェニルアラニンのＤ−およびＬ−異性体が
２つの異性体のいずれかが単独で存在するのと同様に半
分のみが溶解するフェニルアラニンのラセミ結晶を形成
するために組み合せる。過剰のＬ−フェニルアラニンの
存在はD,L−フェニルアラニン複合体の溶解度を減少す
る。驚くべきことにこの効果に限界がある。この限界は
溶液のある温度範囲又は全体のフェニルアラニンの溶液
濃度下でＤ−フェニルアラニン対全フェニルアラニン
（D/T）のほとんど同じ相対比で起こる。この現象は
「限界比」、又は「等飽和点」として引用する。この限
界で、溶液の物理的状態はＬ−フェニルアラニンおよび
D,L−フェニルアラニン複合体により飽和していると記
載できる。

驚くべきことに、限界比以下の比較的近いＤ−フェニ
ルアラニンレベルで、純粋のＬ−フェニルアラニン結晶
は蒸発による結晶化により沈澱する。この沈澱はＤ−フ
ェニルアラニンの相対的溶液濃度が溶液中に全フェニル
アラニンの約7.0％（D/全体≧7.0％）に達するまで継続
する。純粋Ｌ−フェニルアラニンは、結晶化前にD/Tは
7.0％より小さく、結晶後D/Tは溶液中に約7.0％になる
ように、真空下で約5.0〜65℃の温度でラセミ体から結
晶化できる。

ラセミ体混合物中の一層高いＤ−フェニルアラニンの
相対的濃度で、すなわちD/T＞7.0％である場合、ラセミ
体D,L結晶はＤ−フェニルアラニンの相対的濃度が約7.0
％に減少するまで蒸発結晶化により沈澱する。約50％Ｄ
−および50％Ｌ−フェニルアラニンから成るラセミ体結
晶は、結晶化前にD/Tが7.0％以上で、結晶化後D/Tが溶
液中に約7.0％より大きいか又は等しい場合、約5.0〜10
0℃でラセミ体混合物から結晶化できる。純粋Ｌ−フェ
ニルアラニン結晶又は50％ラセミ体結晶の所望組成を保
証するために、結晶化および結晶の熟成はゆっくりした
割合で行なうべきである。

第１図はラセミ体の沈澱による溶液相のＬ−フェニル
アラニンの豊富化を説明する。各種重量のフェニルアラ
ニンを水に添加し、水の容量は試料の溶解度１にし
た。溶液は約50℃に冷却し、次いで濾過した。フェニル
アラニン試験バッチは17.35％Ｄ−フェニルアラニン
（すなわち、Ｄ−異性体高濃度）であった。ｘ軸は溶液
から沈澱したフェニルアラニン％である、ｙ軸は形成溶
液相のフェニルアラニンの比旋光度である。フェニルア
ラニンの形成溶液濃度はすべての場合はほとんど等し
く、約45g/であった。これは等飽和点又は溶液のD/T
の限界比の存在を支持する。何故なら溶液中のフェニル
アラニンの比旋光度はフェニルアラニンの沈澱が多くな
る程上昇するが、しかしある点までしか上昇しないから
である。

第２図では、出発溶液は等飽和点であった。固定相の
フェニルアラニンの比旋光度（S.R.）は溶液相のものと
比較できる。低蒸発比では、フエニルアラニンの比旋光
度はいずれの相でも同じである。液体および固体相の組
成は等飽和点における溶液に関しては従って等しいまま
である。ラセミ化がそれ以上の濃度で起こることは予測
できないことであった。さらに、ラセミ化の度合いは蒸
発度に比例する。溶液相のS.R.は蒸発度により変化しな
い。この事実は等飽和点又はD/Tの限界比の存在を支持
する。

D/Tが約7.0％である場合、溶液からフェニルアラニン
のそれ以上の沈澱は異性体の相対的溶液濃度を維持す
る。従って、Ｌ−フェニルアラニンの過剰の光学的対掌
体を有するラセミ体溶液は、純粋なＬ−フェニルアラニ
ンか、50％Ｄ−および50％Ｌ−フェニルアラニンから成
るラセミ体か、又は２つの結晶組成物の混合物のいずれ
かを生成する。

しかし、結晶相の組成は動力学因子により達成でき
る。結晶化方法を確立できるラセミ体結晶がほとんどな
いか又は全くなく、しかし過剰のＬ−フェニルアラニン
結晶が存在する場合、Ｌ−フェニルアラニンを結晶化さ
せ、溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対的濃度を増加
させる。純粋Ｌ−フェニルアラニンの存在下の熟成はＬ
−フェニルアラニンの結晶化および溶液中のＤ−フェニ
ルアラニンの相対的濃度の上昇に有である。Ｄ−対全フ
ェニルアラニンの比が約7.0％である場合、Ｌ−フェニ
ルアラニンのそれ以上の沈澱は7.0％より少ないＤ−フ
ェニルアラニンについて約5.0〜55℃で可能である。そ
の場合、溶液は純粋Ｌ−フェニルアラニンを播種し、次
いで熟成し、次にゆっくり結晶化させる。

（１）純粋Ｌ−フェニルアラニンの沈澱、（２）50％
Ｄ−および50％Ｌ−フェニルアラニンから成るラセミ体
の沈澱および（３）選択的結晶化の方法を組み合せるこ
とにより、50％より少ないラセミ体から過剰のＬ−フェ
ニルアラニンを分離することができる。分離結果は一方
ではほとんど50％のラセミ体および他方ではほとんど純
粋のＬ−フェニルアラニンである。従って、Ｄ−フェニ
ルアラニンの少ない任意のレベルでラセミ体を作ること
ができる。

出発物質中のＤ−フェニルアラニン対結晶生成物中の
Ｄ−フェニルアラニンおよび対母液中のＤ−フェニルア
ラニンの関係のモデルは次の方程式に存在する。出発物
質が非常に低いD/Tを有する場合、この方程式はさらに
沈澱を進行させることによりＤ−フェニルアラニンが許
容しえない程多くなる前にどの位Ｌ−フェニルアラニン
を沈澱させうるかを予測するために使用できる。非常に
高いD/Tでは、母液のＬ−フェニルアラニンを最高に豊
富化するためにどの位ラセミ体を沈澱させうるかを予測
できる。

％D_t＝％D_p（％Ｐ）−0.07（％Ｓ）式中、％D_t＝出発物質のＤ−フェニルアラニンの相対％、％D_p＝生成物のＤ−フェニルアラニンの相対％、％Ｐ＝生成物中の出発物質の％、％Ｓ＝溶液に残留する出発物質の％、および 0.07＝等飽和点におけるＤ−フェニルアラニンの相対
％の見積り。

例えば、出発物質が３％のＤ−フェニルアラニンを含
有し、1.5％のＤ−フェニルアラニンが生成物に許容さ
れる場合、生成物として出発物質の約73％を溶解し、再
沈澱できる。別の態様では、出発物質が30％のＤ−フェ
ニルアラニンを有し、ラセミ体は47％のＤ−フェニルア
ラニンを含有することが予期される場合、Ｌ−フェニル
アラニン豊富化溶液の回収はラセミ体生成物として出発
物質の約57.5％を溶解し、沈澱させることにより7.0％
で最高化できる。

本発明の別の態様は選択的結晶化によりラセミ体混合
物からＬ−フェニルアラニン豊富化画分の回収である。
ラセミ体混合物は上記節第２例におけるように創造でき
るＬ−フェニルアラニン豊富化母液である。この方法は
Ｌ−フェニルアラニン種子の添加および種子結晶の熟成
時間を含む。この方法は沈澱中のＬ−フェニルアラニン
の豊富化に有利であり、２つの結晶の生長の相対的割合
に影響する。

第３図は上記方法論を商業的方法に如何に組み合せる
かを示す一般図である。出発物質はアスパルテーム（AP
M）母液から回収したD,L−フェニルアラニンである。D,
L−フェニルアラニンは溶解タンクに入れ、任意の再循
環母液と組み合せる。Ｌ−フェニルアラニンの大部分を
溶液に確実に溶解するために、溶液は約60〜100℃、好
ましくは95〜100℃の上限に加熱する。次にラセミ体を
すべて溶解せずに別な仕方で約50％Ｄ−フェニルアラニ
ンラセミ体からＬ−フェニルアラニンを溶解することが
できる。溶液を冷却し、ラセミ体を除去すると、Ｌ−フ
ェニルアラニン豊富化母液が残る。ラセミ体を除去する
温度は熟成中の結晶槽の温度と略々同じであるべきであ
る。ダルコ炭素を任意には添加し、溶解タンクの溶液と
混合できる。炭素はラセミ体と一緒に除去でき、二者は
当業者に既知のダルコプレスのような任意の標準濾過装
置により除去できる。母液の炭素処理は結晶化を妨害
し、Ｌ−フェニルアラニン生成物の品質を低下できる不
純物を除去する。

溶解タンクに組み入れるフェニルアラニン量は出発物
質および再循環母液双方のＤ−フェニルアラニン濃度を
考慮して計算しなければならない。これら組み合せに起
源のD/Tは次の方程式の％Ｄである。Ｌ−フェニルアラ
ニン豊富化母液を製造するために除去するラセミ体は方
程式のDL−ロスである。この％は溶解タンクに組み入れ
ねばならない結晶槽中の所望の溶液濃度を得るために必
要な上記フェニルアラニン量である。この方程式は母液
が7.0％Ｄ−フェニルアラニンを含有すると概算される
場合およびラセミ体が47％Ｄ−フェニルアラニンを含有
すると概算される場合上記方程式から誘導される。

DL−ロス％＝［（％Ｄ×100）−700］/40 例えば、出発物質が30％Ｄ−フェニルアラニンおよび
ラセミ体を有する場合、この物質の57.5％はラセミ体と
して沈澱する。これは熟成温度が50℃である場合の上記
例の場合であり、この場合所望の溶液濃度は約45g/で
ある。従って溶解タンクに組み入れる濃度は106g/あ
る。

Ｌ−フェニルアラニン豊富化母液を結晶槽に移す前に
結晶槽及び移送ラインは熟成温度より僅かに高い温度に
加熱すべきである。何故ならラセミ体溶液のいずれかの
部分の突然の冷却は誤った結晶タイプの形成を生じうる
からである。

母液の結晶槽に移すと、次に溶液から純粋Ｌ−フェニ
ルアラニンの沈澱を開始させるために純粋Ｌ−フェニル
アラニンの豊富な用量を播種する。次いでツイーン界面
活性剤を添加し、熟成させる。熟成温度は約45.0〜65.0
℃が好ましいが、約20.0〜65.0℃の範囲でより。熟成は
その後溶液から晶出するＬ−フェニルアラニンの純度を
改良する。ツイーンはいくらかの隙間の水を除去する。
結晶は溶液をゆっくり冷却することにより形成させる。

こうして形成したＬ−フェニルアラニン結晶は遠心分
離し、約15.0〜25.0℃、好ましくは20.0℃に冷却した母
液から取り出す。結晶はこれらが沈澱する時に取り出
す。この方法で結晶の取り出しに失敗すると手に余る濃
厚スラリーを形成する。結晶化中母液は遠心分離機から
結晶槽に再循環して結晶の回収を最高にする。結晶化が
完了し、それ以上の結晶を回収できない場合、母液は次
のバッチに対し溶液タンクに再循環する。方法を反復す
る前に結晶槽、遠心分離機および処理ラインを洗滌して
残留結晶を除くことが重要である。洗液は廃棄できる。
何らかの残留結晶が存在すると次に選択的結晶化を妨害
することができる。

本発明の他の態様はラセミ体からＬ−フェニルアラニ
ンおよび醗酵ブロスからＬ−フェニルアラニンを同時回
収することである。Ｌ−フェニルアラニンは蒸発結晶化
し、次に再溶解し、炭素により溶解フェニルアラニンを
処理して不純物を除去し、再結晶化することにより回収
する。各結晶化で母液が残り、その全部又は一部は廃棄
する廃棄母液はＤ−フェニルアラニンのブリードとして
使用できる。必要な最高ブリードは回収中生成し、回収
流に添加されるすべてのＤ−フェニルアラニンが廃棄液
と一緒に残留するようなものである。廃棄液のＤ−フェ
ニルアラニンがこの流の全体のフェニルアラニンの7.0
％より多くない（すなわち、D/T≦7.0％）場合、これは
達成できる。いくつかの条件下では、母液のD/Tは高く
なりうる。

純粋Ｌ−フェニルアラニンはラセミ体として存在する
フェニルアラニンをその塩に転換することにより母液か
ら回収することもできる。これを行なうことにより、50
％Ｄ−フェニルアラニンラセミ体の溶解度は増大する。
例えばラセミ体の溶解度は次の各条件下で増大する：（１）NaOHを使用して50％ラセミ体溶液のpHを上げる場
合、（２）NaHCO₃を添加し、加熱して50％ラセミ体のナトリ
ウム塩を形成する場合、（３）酢酸を使用して50％ラセミ体溶液のpHを下げる場
合。

ナトリウム塩として、ラセミ体は同一条件下で純粋Ｌ−
フェニルアラニンの２倍溶解する。高濃度の塩はラセミ
体の溶解度を明白に増加させることができる。

しかし、選択的結晶化を行なわずに、上記条件下で沈
澱する過剰のＬ−フェニルアラニンは純粋ではなく、通
例結晶化前の溶液のD/Tと比較してごく僅かに低いD/Tを
有する。

選択的結晶化の原理を使用することにより、過剰のＬ
−フェニルアラニンは純粋Ｌ−フェニルアラニンとして
沈澱させることができ、廃棄流のD/Tは7.0％を超すこと
ができる。従って、高濃度の硫酸アンモニウムの存在
で、低D/Tラセミ体の蒸発結晶化中、母液の平均D/Tは塩
濃度の増加につれて増加し、純粋Ｌ−フェニルアラニン
を回収できる。しかし、母液のフェニルアラニンの全体
の溶解度も減少する。母液の高D/Tの不利は、これらの
溶液はD/Tの増加につれて安定性が低下することで、従
って50％ラセミ体を突然沈澱させて別な仕方で純粋Ｌ−
フェニルアラニンを汚染できる。従って、選択的結晶化
による場合でさえ、母液のD/Tは7.0％を高く超えない
（すなわち、D/T≦15.0％）場合最善である。

次例は本発明の好ましい態様を一層良く実証するため
に示す。これらは例示目的のみのもので、特許請求の範
囲に挙げた本発明の精神および範囲を限定するためのも
のではない。

例１ 30％のＤ−異性体を含有するラセミ体混合物を80℃の
温度および約4.5のpHで30g/の濃度に15の水に溶解
した。このpHで、Ｌ−フェニルアラニン異性体の非−水
和形が主体を占める。溶液を結晶槽に供給し、溶液５
毎に真空下で55℃で、3.750の水を蒸発除去した。次
に濃縮液は50℃に冷却し、濾過してＬ−フェニルアラニ
ン豊富な母液を得た。この方法で製造した３つのバッチ
からの母液を併せ、１の水をこの母液に添加した。次
に第２蒸発結晶化は2.75の水を除去するまで真空下で
80℃で行なった。蒸発により付加的2.4の水を除去し
て1gのＬ−フェニルアラニンを結晶化に対する種子とし
て添加した。この最終濃縮液は濾過し、溶液から沈澱し
た結晶を取り出した。

溶液から濾別した結晶の最初のバッチの重量は273.85
gで、−13.5の比旋光度を有した。これらは予期したよ
うにD,L異性体から成ることが分った。溶液から沈澱し
た結晶の第２バッチの重量は46.17gで、−32.3の比旋光
度を有することが分った。これは99.7％純度のＬ−フェ
ニルアラニンから成ることが分った。

例２いくつかのＬ−フェニルアラニン精製試験を第３図に
概説した回収処理に従って行なった。D,Lラセミ体は３
つの別のロット試験に対し下記するＤ−フェニルアラニ
ンの相対的濃度で溶解タンクに加えた。次に各ロットは
本発明に従って４サイクルにより処理した。リストの数
字はｇである。出発物質のＤ−フェニルアラニンの相対
的濃度はかっこで示す。

実質的に純粋のＬ−フェニルアラニンの回収は本発明
方法により予期できることは上記データから明らかであ
る。極端に過剰のＬ−フェニルアラニン光学的対掌体を
含有する出発物質では、溶液にＤ−フェニルアラニンを
残し、一方実質的に純粋のＬ−フェニルアラニンを沈澱
させる等飽和点の原理を適用することができる。出発物
質がＬ−フェニルアラニンを一層低い相対的濃度で含有
する場合、等飽和点を使用して溶液からD,Lラセミ体結
晶を沈澱させ、Ｌ−フェニルアラニンにより豊富化した
母液を残すことができる。次に所望のＬ−異性体は選択
的結晶化により母液から単離し、精製できる。この方法
は他のアミノ酸の結晶化および精製に、方法に僅かに変
更を加えることにより実用することもできる。

【図面の簡単な説明】

第１図は溶液相のＬ−フェニルアラニンの豊富化を示
す。第２図はＤ−フェニルアラニン溶液の蒸発結晶化を示
す。第３図はラセミ体からＬ−フェニルアラニンの回収を示
す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献特開昭63−57560（ＪＰ，Ａ) 特開昭63−83056（ＪＰ，Ａ) 特開昭57−70859（ＪＰ，Ａ) 特開昭57−26648（ＪＰ，Ａ) 特開昭50−111033（ＪＰ，Ａ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】D,Lラセミ体混合物からフェニルアラニン
の実質的に純粋なＬ−異性体を単離する方法において、（ａ）ラセミ体を溶液状に溶解し、（ｂ）溶解しているＤ−異性体の相対濃度が約7.0％
になるまで、結晶をゆっくり沈澱させるのに十分な時間
ラセミ体溶液を蒸発し、（ｃ）この溶液に十分量のＬ−異性体結晶をゆっくり
接種してさらに結晶の沈澱を生じさせることによりフェ
ニルアラニンのＬ−異性体を選択的に結晶化させ、（ｄ）Ｌ−異性体結晶を再溶解するのに十分な温度で
混合物を加熱し、（ｅ）この混合物を冷却してＬ−異性体結晶を再沈澱
させ、そして（ｆ）溶液からＬ−異性体結晶を取り出すことを特徴
とする、Ｌ−異性体の単離方法。
【請求項２】高L/D異性体比を有するフェニルアラニン
のラセミ体混合物から実質的に純粋のＬ−フェニルアラ
ニン画分を単離する方法において、（ａ）ラセミ体を溶液状に溶解し、（ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が約
7.0％に達するまで実質的に純粋のＬ−フェニルアラニ
ンをゆっくり沈澱させるための十分な時間溶液を蒸発
し、（ｃ）Ｌ−異性体結晶をさらに沈澱させるため、この
溶液に十分量のＬ−フェニルアラニン結晶をゆっくり接
種することによりＬ−フェニルアラニンを選択的に結晶
化させ、（ｄ）Ｌ−異性体結晶をゆっくり再溶解するのに十分
な温度で混合物を加熱し、（ｅ）混合物を冷却して実質的に純粋のＬ−フェニル
アラニン結晶を沈澱させ、そして（ｆ）溶液から結晶を取り出すことを特徴とする、Ｌ−フェニルアラニンの単離方法。
【請求項３】低L/D異性体比を有するフェニルアラニン
のラセミ体混合物から実質的に純粋のＬ−フェニルアラ
ニン画分を単離する方法において、（ａ）ラセミ体を溶液に溶解し、（ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が約
7.0％に達するまでD,L−フェニルアラニンラセミ体結晶
を沈澱させるため、十分な時間溶液を蒸発し、（ｃ）溶液から沈澱を除去し、（ｄ）沈澱を生じさせるために十分量のＬ−フェニル
アラニン結晶を溶液にゆっくり接種することにより溶液
に残留するＬ−フェニルアラニンを選択的に結晶化さ
せ、（ｅ）Ｌ−フェニルアラニン結晶をゆっくり再溶解さ
せるのに十分な温度で溶液を加熱し、（ｆ）溶液を冷却して実質的に純粋のＬ−フェニルア
ラニン結晶を再沈澱させ、そして、（ｇ）溶液から結晶を取り出すことを特徴とする、Ｌ−フェニルアラニンの単離方法。
【請求項４】次の工程：（ａ）ラセミ体を溶液状に溶解し、（ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が約
7.0％に達するまで結晶を沈澱させ、（ｃ）さらにＬ−異性体結晶の沈澱を生じさせるため
に十分量のＬ−フェニルアラニン結晶を溶液にゆっくり
接種することによりＬ−フェニルアラニンを選択的に結
晶させ、（ｄ）Ｌ−異性体結晶をゆっくり再溶解するのに十分
な温度で混合物を加熱し、（ｅ）混合物を冷却して実質的に純粋のＬ−フェニル
アラニン結晶を再沈澱させ、そして（ｆ）溶液から結晶を取り出すことを特徴とする、フェニルアラニンのラセミ体混合物から実質的に純粋の
Ｌ−フェニルアラニン画分を単離する方法。