JP2566761B2

JP2566761B2 - 骨髄単球系細胞

Info

Publication number: JP2566761B2
Application number: JP61176267A
Authority: JP
Inventors: 雅司栗本; 正和三橋
Original assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 1986-07-25
Filing date: 1986-07-25
Publication date: 1996-12-25
Anticipated expiration: 2011-12-25
Also published as: JPS6332479A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、急性骨髄性白血病患者の白血球細胞から培
養株化されたヒト由来のγ−インターフェロン産生能を
有する骨髄単球系細胞に属するHBL−38細胞、および該
細胞を細胞融合するかまたは遺伝子組換えして得られる
該ヒト由来のγ−インターフェロン産生能を有する培養
株化された骨髄単球系細胞に関するものである。

（従来の技術）インターフェロンは、小林茂保著「インターフェロ
ン」1975年株式会社講談社発行、D.A.J.Tyrell著「Inte
rferon and Its Clinical Potential」1976年 William
Heinemann Medical Books Ltd.（London）発行、「蛋白
質核酸酵素 Vol.21 No.4」1976年などにも記載さ
れているように、例えば、ウィルス、細菌、原虫、リケ
ッチャ、核酸、エンドトキシン、多糖類などのインター
フェロン誘導剤を生細胞に作用させることによって、そ
の細胞内外に誘導生成される糖蛋白質であって、その細
胞内での各種ウィルスの増殖を非特異的に抑制する機能
を持つ物質に与えられ名称である。

インターフェロンの持つこのような機能から、インタ
ーフェロンは、その発見の当初よりウィルス性疾患の予
防剤、治療剤として期待されてきた。また、近年インタ
ーフェロンは、ウィルス性腫瘍のみならず、非ウィルス
性腫瘍に対しても抗腫瘍性が認められるようになって、
医薬品としてのインターフェロンが鶴首されるに至っ
た。

インターフェロンには、α−インターフェロン（別
名、白血球インターフェロン）、β−インターフェロン
（別名、線維芽細胞インターフェロン）およびγ−イン
ターフェロン（別名、免疫インターフェロン、タイプII
インターフェロン）があり、この内α−インターフェロ
ンについては白血球などから、β−インターフェロンに
ついては繊維芽細胞などからの製造方法が確立され、最
近、これらを利用した医薬品が市販されるまでに至っ
た。一方、γ−インターフェロンについては、多数の製
造方法が提案されているもののいずれも末だ工業的に実
施されるに至っていない。

例えば、特開昭57−58891号公報、特表昭57−500961
号公報、特表昭58−502032号公報、特開昭59−82092号
公報、特開昭60−70099号公報、特開昭60−87300号公
報、特開昭60−139700号公報、特開昭60−149600号公報
などで提案されているヒト末梢血からの白球球またはＴ
−リンパ球を用いる方法は、原料の細胞を安定して大量
に供給することが困難であり、また細胞当りの産生量も
不充分である。

また、特開昭55−98118号公報で提案されている方法
は、培養株化されたヒト由来の細胞をヒト以外の温血動
物の体内に移植するか、またはヒト以外の温血動物の体
内もしくは体外に取り付けた拡散チャンバー内で、その
温血動物の体液の供給を受けながら増殖させ、得られる
ヒト由来の細胞を用いてγ−インターフェロンを製造す
る方法であり、原料のヒト由来の細胞を大量に安定して
供給できる点できわめて優れている。

しかしながら、この方法については、培養株化された
ヒト由来の細胞の違いによって、γ−インターフェロン
産生能に変動のあることが判明し、安定して高活性のγ
−インターフェロンを製造するにはなお改良の必要があ
り、末だ工業的に実施するに至っていない。

γ−インターフェロンは、細胞増殖抑制作用、抗腫瘍
作用がα−インターフェロン、β−インターフェロンよ
りも著しく強く、また、α−インターフェロン、β−イ
ンターフェロンなどと併用することにより、これらの抗
ウィルス作用、細胞増殖抑制作用、抗腫瘍作用などを増
強することが知られており、その工業的製造方法の確立
が強く望まれている。

（発明が解決しようとする問題点）本発明者等は、工業的規模で容易に実施しうるγ−イ
ンターフェロンの製造方法を確立することを目的に、γ
−インターフェロン産生能の高いヒト由来細胞株の樹立
を目ざして研究を続けた。

その結果、新たに培養株化されたヒト由来の骨髄単球
系細胞HBL−38が、他のリンパ芽球様細胞とは違って、
高いγ−インターフェロン産生能を有し、γ−インター
フェロン製造用細胞として好適であることを見いだし、
本発明を完成した。

本発明でいう培養株化されたヒト由来の骨髄単球系細
胞とは、岩波書店発行、岸本忠三、渡辺武編、「岩波講
座免疫科学３、免疫担当細胞」第181〜204頁（昭和61
年）およびMikio Shikita and Isao Yamane著「Mammari
an Cell Culture Technology」第141〜162頁1985年Soft
Science Publications,Tokyo Japanなどに記載されて
いるように、Ｔ−細胞、Ｂ−細胞に属さない細胞であっ
て、抗原抗体反応により骨髄単球系抗原（Myelomonocyt
e antigen）の存在を示すことで同定される細胞を云
う。

本発明者等が新たに樹立したHBL−38細胞のγ−イン
ターフェロン産生能は高く、そのまま、γ−インターフ
ェロン製造用に有利に利用できる。

必要ならば、この細胞のγ−インターフェロン産生能
を持つ遺伝子を、例えば、ポリエチレングリコールやセ
ンダイウィルスなどを利用する細胞融合の手段やDNAリ
ガーゼ、制限酵素（ヌクレアーゼ）、DNAポリメラーゼ
などの酵素を利用する公知の遺伝子組換えの手段などに
よって、より容易に継代培養しうる培養株化された細胞
に導入してその増殖速度を更に高めることも、また、そ
のγ−インターフェロン産生能を更に高めることも有利
に実施できる。

本発明で使用する培養株化されたヒト由来の骨髄単球
系細胞HBU−38を増殖させる方法は、適宜に選択するこ
とができる。例えば、栄養培地に接種して増殖させる生
体外で行なう組織培養法や、ヒト以外の温血動物の体内
に移植するか、または、ヒト以外の温血動物の体内もし
くは対外に取り付けた拡散チャンバー内に移植して、そ
の体液の供給を受けながら増殖させる生体内で行なう方
法などである。

まず、生体外で増殖させる場合について説明する。

この際使用する栄養培地は、HBL−38細胞を接種して
増殖しうるものであればよく、例えば、RPMI 1640培
地、イーグル最少基本培地などがあり、必要に応じて、
更に、ビタミン、ミネラル、炭水化物、アミノ酸および
哺乳類の血清などを補足して改良することもできる。

培養方法は、炭層培養法または浮遊培養法が適宜選択
できる。

培養温度は、約20〜40℃、好ましくは約35〜38℃、接
種量は、接種後約１週間で最大細胞発育をみることがで
きるような培地ml当りの細胞数であって、好ましくは培
地ml当り約10⁴〜10⁷個である。

HBL−38細胞を接種した培地を上記条件で約４〜10日
間培養し、この間培地を定期的に新鮮なものと取り替え
て栄養物を充分補給するとともに、培地中に放出された
代謝産物を洗浄または希釈して増殖させるのが望まし
い。

次に、生体内で細胞を増殖させる方法について説明す
る。

この方法では、HBL−38細胞をヒト以外の温血動物体
内に移植するか、または、その体液の供給を受けること
のできるチャンバー内に収容し、通常の飼育をすれば、
温血動物の体内から供給される栄養物を含有する体液を
利用してHBL−38細胞が容易に増殖しうることから、イ
ンビトロにおける組織培養のように高価な血清などを含
む栄養培地を使わずして、または大幅に節約しても大量
のγ−インターフェロンを生成させることができる。

すなわち、ヒト以外の温血動物を利用する方法は、細
胞増殖中の維持管理が容易なことはもとより、インビト
ロで培養する場合と比較して、細胞の増殖が安定してい
ること、加うるに細胞当りのγ−インターフェロン産生
量が増大すること、とりわけ２〜10倍、またはそれ以上
にも高まるのできわめて有利である。

この方法に使用する温血動物は、培養株化されたヒト
由来の骨髄単球系細胞HBL−38が増殖し得るものであれ
ばよく、例えばニワトリ、ハトなどの鳥類、イヌ、ネ
コ、サル、ヤギ、ブタ、ウシ、ウマ、ウサギ、モルモッ
ト、ラット、ハムスター、普通マウス、ヌードマウスな
どの哺乳類などが使用できる。

これらの動物にHBL−38細胞を移植すると好ましくな
い免疫反応を起すおそれがあるので、その反応をできる
だけおさえるために使用する動物は、できるだけ幼若な
状態、即ち卵、胚、胎児、または新生期、幼少期のもの
の方が好ましい。

また、これら動物に例えば、約200〜600レム程度のエ
ックス線若しくはガンマ線を照射するか、または抗血清
若しくは免疫抑制剤などを注射するなどの前処置をほど
こして、免疫反応を弱めて移植してもよい。

使用する動物がヌードマウスの場合には、成長したも
のであっても免疫反応が弱いので、これらの前処理を必
要とすることなく、HBL−38細胞が移植でき、急速に増
殖できるので特に好都合である。

また、HBL−38細胞を、例えば先づハムスターに移植
し増殖させた後、この細胞を更にヌードマウスに移植す
るなどのように、ヒト以外の温血動物間で移植してHBL
−38細胞の増殖をより安定化したり、更にそれらから誘
導生成されるγ−インターフェロン量を増加させること
も自由である。

この場合、同種間、同属間は勿論のこと同鋼間、同門
間移植であってもよい。HBL−38細胞を移植する動物体
内の部位は移植した細胞が増殖し得る部位であればよ
く、例えば尿液腔、静脈、腹腔、皮下など自由に選ばれ
る。

また、直接動物体内にHBL−38細胞を移植することな
く、動物細胞の通過を阻止し得る多孔性の濾過膜、例え
ば孔径約10^-7〜10^-5mを有するメンブランフイルター、
限外濾過膜またはホローフアィバーなどを設けた公知の
各種形状、大きさの拡散チャンバーを動物体内、例えば
腹腔内に埋設して、動物体からの栄養物を含む体液の供
給を受けつつ、そのチャンバー内でHBL−38細胞を何れ
も増殖させることができる。

また、必要に応じて、このチャンバー内の栄養物を含
む溶液を動物体内の体液と接続し潅流させるようにした
チャンバーを、例えば動物体表に取付け、チャンバー内
のHBL−38細胞の増殖状態を透視できるようにすること
も、また、このチャンバー部分のみを着脱交換できるよ
うにして動物を屠殺せずに寿命一杯細胞を増殖させて、
動物個体当りの細胞生産量を更に高めることもできる。

これらの拡散チャンバーを利用する方法は、HBL−38
細胞が動物細胞と直接接触しないので、HBL−38細胞の
みが容易に採取できるだけではなく、好ましくない免疫
反応を起す心配も少ないので、免疫反応を抑制する前処
置の必要もなく、各種温血動物を自由に利用できる特徴
を有している。

移植した動物の維持管理は、その動物の通常の飼育を
続ければよく、移植後と言えども特別の取扱いは何ら必
要としないので好都合である。

HBL−38細胞を増殖させるための期間は通常約１〜10
週の期間で目的を達成することができる。

このようにして得られるHBL−38の細胞数は動物個体
当り約10⁷〜10¹²、またはそれ以上に達する。

換言すれば、ヒト以外の温血動物を利用する方法によ
り増殖させたHBL−38細胞数は、動物個体当り移植した
細胞数の約10²〜10⁷倍、またはそれ以上にも達し、生体
外の栄養培地に接種して増殖させる場合の約10¹〜10
⁶倍、またはそれ以上にも達して、γ−インターフェロ
ンの製造のため極めて好都合である。

このようにして増殖させたHBL−38の生細胞を用いて
γ−インターフェロンを産生させる方法は自由である。
それが増殖した動物体内のままで、γ−インターフェロ
ン誘導剤を作用させることもできる。例えば、腹腔内の
腹水に浮遊状で増殖したHBL−38細胞に、また皮下に生
じた腫瘍細胞に、γ−インターフェロン誘導剤を直接作
用させてγ−インターフェロンを誘導生成させ、次いで
その腹水または腫瘍からγ−インターフェロンを精製分
取すればよい。

また、HBL−38細胞を動物体内から取り出し、生体外
でγ−インターフェロン誘導剤を作用させてγ−インタ
ーフェロンを誘導生成させることもできる。例えば、腹
水中で増殖したHBL−38細胞を分取し、または皮下に生
じたHBL−38細胞を含む腫瘍を摘出、分散し、得られる
細胞を約20〜40℃に保った栄養培地に細胞濃度が約10⁵
〜10⁸/mlになるように浮遊させ、これにγ−インターフ
ェロン誘導剤を作用させることによってγ−インターフ
ェロンを誘導生成させ、これを精製分取すればよい。

更に、HBL−38細胞を拡散チャンバー内で増殖させた
場合には、増殖させた細胞をチャンバー内のままで、ま
たはチャンバーから取り出して、γ−インターフェロン
誘導剤を作用させ、γ−インターフェロンを誘導生成さ
せることもできる。

また、γ−インターフェロンの誘導生成に際して、必
要ならば例えばヒトに種特異性の高いインターフェロン
を用いてプライミング処理をしたり、代謝阻害剤を使用
するスーパーインダクション法などの公知の方法を採用
することによって生成するγ−インターフェロン量を更
に高めることも自由である。

また、例えば増殖させたHBL−38細胞に先ず動物体内
のままでγ−インターフェロンを誘導生成させた後、次
いで同一動物個体の特定の部位または全体から採取した
HBL−38細胞に動物体外でγ−インターフェロンを誘導
生成させる方法、また一度γ−インターフェロンの誘導
生成に使用した細胞を更に２度以上γ−インターフェロ
ンの誘導生成に使用する方法、または動物体内に埋設、
若しくは接続するチャンバーを交換して得られる細胞数
を増加させる方法などの方法によって、使用する動物個
体当りのγ−インターフェロン生成量を更に高めること
も自由である。

γ−インターフェロン誘導剤としては、通常、例えば
フォトヘマグルチニン、コンカナバリンＡ、ポークウィ
ードミトーゲン、リポポリサッカリド、リピドＡ、エン
ドトキシン、多糖類、細菌などのミトーゲンが好適であ
る。

また、感作化された細胞にとっては抗原もγ−インタ
ーフェロン誘導剤である。これらγ−インターフェロン
誘導剤を用いる場合には、通常約0.001μg/10mg/mlの濃
度で使用される。必要ならば、例えば、ウィルス、核
酸、ポリヌクレオチドなどのα−インターフェロン誘導
剤を併用して、γ−インターフェロン量を更に増加させ
ることも、α−インターフェロンとγ−インターフェロ
ンとを同時に生成させることも自由である。

このようにして誘導生成させたγ−インターフェロン
は、公知の精製分離法、例えば、塩析、透析、濾過、遠
心分離、濃縮、凍結乾燥などを行うことによって容易に
精製分離し、採取することができる。更に、高度の精製
を必要とする場合には、例えばイオン交換体への吸着・
溶出、ゲル濾過、アフィニティクロマトグラフィー、等
電点分画、高速液体クロマトグラフィー、電気泳動など
の公知の方法を更に組み合せればよく、とりわけ、モノ
クローナル抗体を利用したクロマトグラフィーなどによ
り最高純度のγ−インターフェロンを採取することも可
能である。

このようにして得られたγ−インターフェロンは、γ
−インターフェロン感受性疾患の予防剤、治療剤などと
して有利に利用できる。

γ−インターフェロン感受性疾患とは、γ−インター
フェロンによって予防され、若しくは治療される疾患で
あり、それがウィルス性疾患、例えば、流行性血膜炎、
ヘルペス性角膜炎、インフルエンザ、風疹、血清肝炎、
エイズなどであっても、また非ウィルス性疾患、例え
ば、肺ガン、肝ガン、骨肉腫などの悪性腫瘍などであっ
てもよい。

また、γ−インターフェロン感受性疾患予防剤、若し
くは治療剤は、その目的に応じてその形状を自由に選択
できる。その一例を上げれば、噴霧剤、点眼剤、うがい
剤、注射剤などの溶剤、軟膏のようなペースト剤、粉
剤、顆粒剤、錠剤などの固剤などである。

これら予防剤、治療剤には、γ−インターフェロン
を、通常、グラム当り１〜10,000,000単位程度の活性を
含有せしめればよく、必要に応じて他の成分、例えば、
α−インターフェロン、ツモアネクロシスファクタ
ー、リンホトキシンなどのリンホカインや、他の化学療
法剤などを併用して、その予防効果、治療効果を高める
ことも有利に実施できる。

更に必要ならば、補助剤、増量剤、安定剤などの１
種、若しくは２種以上を併用することも自由である。

ヒトに種特異性の高いインターフェロンの活性は「蛋
白質核酸酵素 Vol.20 No.6」第616〜643頁 1975
年に報告されているヒト羊膜由来のFL細胞を使用して公
知のブラーク半減法で測定した。

なお、γ−インターフェロンの活性は、抗α−インタ
ーフェロン抗体及び抗β−インターフェロン抗体を共存
させて、α−インターフェロン及びβ−インターフェロ
ンを中和後、測定した。

以下、本発明で新たに樹立した骨髄単球系細胞HBL−3
8について説明する。

急性骨髄性白血病患者（男性 55才）からの白血球細
胞をin vitroで栄養培地に培養した結果、21日後に細胞
の増殖が認められた。それを継代培養し、このうちの１
種類を安定して増殖させることに成巧し、これをHBL−3
8と命名した。

（１）増殖能牛胎児活性10v/v％を加えたRPMI 1640培地での増殖能
を測定したところ、倍加時間は約30時間であった。

（２）形態増殖時にフラスコの底面に付着する性質を有していた
が付着性は弱くすぐ遊離した。また増殖時に細胞集塊の
形成もみられたが、強固ではなく軽く触れると容易に単
一細胞に分散された。この細胞を、位相差顕微鏡で観察
した結果を第１図に示した。細胞の形態は約15μｍの単
一なほぼ円形をしていた。ギムザ染色を行なった結果、
核は円形のものの他に不規則な切込や分葉傾向を示すも
のも認められた。

（３）染色体数染色体の分析には対数増殖期の細胞を使用した。染色
体数の頻度分布を第１表に示した。150個の細胞につい
て観察した結果、染色体数は低２倍体域にあり、その頻
度分布は45本が最も多く53個であった。また44本の細胞
も42個認められた。

（４）細胞表面形質各種細胞表面抗体を用いてHBL−38細胞の同定を行な
った結果を第２表に示した。ヒツジ赤血球（Ｅ）、抗体
感作ウシ赤血球（EA）、ヒト補体感作ウシ赤血球（EA
C）を用いた分析では、EAに10％のロゼット形成がみら
れたが、他のものは認められなかった。ヤギ抗ヒト抗体
を使用して、細胞表面免疫グロブリンの検出を行なった
結果、６種全て陰性であった。またモノクローナル抗体
を用いた表面マーカーの検索の結果3A1,MCS−2,B3/25,M
Y−９は高い陽性率を示し、NU−T2,Leu−5,Leu−4,A−5
0,BA−2,OKT−1,NU−N1,B2,MO−1,MO−２は全て陰性で
あった。

（５） EBウィルス特異核抗原（EBNA）の検索 EBNAについては、細胞株樹立後早期より数回にわたっ
て検索したが、常に陰性であった。

（６）軟寒天培地中でのコロニー形成コロニー形成因子（CSF）を含む0.3％寒天培地中での
コロニー形成を試験し、培養14日目で倒立顕微鏡により
観察した結果、ミエロイド様のコロニーを形成する細胞
が認められた。それらの頻度は１〜２％であった。コロ
ニー形成因子を加えない場合は全く造られなかった。以
上の結果より、HBL−38細胞は、骨髄単球系細胞に属す
ることが判明した。

次に、本発明を実験で詳細に説明する。

実験培養株化されたヒト由来の各種リンパ芽球様細胞
のγ−インターフェロン産生能の比較実験1. 生体外で増殖させた細胞によるインターフェロ
ンの産生牛胎児血清20v/v％を補足したRPMI 1640培地（pH7.
2）に、培養株化されたヒト由来の各種細胞をそれぞれ
に接種し、37℃で常法に従って培養し、次いで、血清無
添加のRPMI 1640培地（pH7.2）で洗浄し、同培地に濃度
１×10⁶/mlになるように懸濁した。

このようにして得たヒト由来の各種細胞懸濁液それぞ
れにリポポリサッカリドをml当り約10μｇを添加して37
℃で２日間保ってインターフェロンを誘導させ、遠心分
離し、上清を用いてそのml当りのインターフェロン活性
及びγ−インターフェロン活性を測定した。

その結果を第３表にまとめた。

第３表の結果から明らかなように、培養株化されたヒ
ト由来の各種リンパ芽球様細胞のγ−インターフェロン
産生能を比較したところ、従来、その産生が全く知られ
ていない骨髄単球系細胞からの産生を見いだし、しか
も、その産生量の多いことが判明した。とりわけ、HBL
−38細胞は、γ−インターフェロン産生能が著しく高
い。

実験2. 生体内で増殖させた細胞によるインターフェロ
ンの産生新生児のハムスターに、ウサギから公知の方法で調製
した抗血清を予め注射し、ハムスターの免疫を弱めた
後、その皮下に培養株化されたヒト由来の骨髄単球系細
胞をそれぞれ移植して、その後、通常の方法で３週間飼
育した。

皮下に生じた腫瘍を摘出した細切した後、トリプシン
含有の生理食塩水に懸濁して細胞を分散、分取した。

得られたそれぞれの細胞を実験１と同様に懸濁液と
し、同様に活性を測定した。

その結果を第４表にまとめた。

第３表および第４表の結果から明らかなように、培養
株化されたヒト由来の骨髄単球系細胞、とりわけ、HBL
−38細胞は、生体外で増殖させた細胞よりも、生体内で
増殖させた細胞の方が顕著に高いγ−インターフェロン
産生量を示すことが判明した。

以下、γ−インターフェロンの製造例を参考例として
示す。

参考例１ HBL−38細胞を仔牛血清10v/v％を補足したRPMI 1640
培地（pH7.2）に細胞濃度５×10⁵/mlになるよう接種し
た。

その後、常法に従って、定期的に新鮮な培地と取り替
えながら37℃で培養し、次いで、新鮮な同培地で洗浄
し、同培地に濃度２×10⁶/mlになるよう懸濁した。これ
にリポポリサッカリドをml当り約10μｇ添加し、37℃で
２日間保ってインターフェロンを誘導させた。これを遠
心分離し、その上清ml当り約5,100単位のγ−インター
フェロンを得た。

参考例２新生児のハムスターにウサギから公知の方法で調製し
た抗血清を予め注射し、ハムスターの免疫反応を弱めた
後、その皮下にHBL−38細胞を移植し、その後、通常の
方法で４週間飼育した。皮下に生じた約20gの腫瘍を摘
出した後、コラゲナーゼ含有生理食塩水に懸濁して細胞
を分散、分取した。

この細胞をイーグルの最少基本培地で洗浄した後、37
℃に保った同じ組成の培地に細胞濃度が約２×10⁶/mlに
なるように希釈し、これにml当りフィトヘマグルチニン
200μｇおよびリピドA 5μｇを加え、37℃で２日間保っ
てインターフェロンを誘導させた。これを遠心分離し、
上清ml当り約93,000単位のγ−インターフェロンを得
た。ハムスター１匹当り約183,000,000単位のγ−イン
ターフェロンが得られた。

参考例３ 37℃で５日間保ったニワトリの受精卵に、HBL−38細
胞を移植した後、37℃で１週間保った。この卵を割卵し
た後、増殖細胞を採取し、その細胞を参考例２と同様に
処理してインターフェロンを誘導させた。これを遠心分
離し、上清ml当り約36,000単位のγ−インターフェロン
を得た。受精卵10個当り約60,000,000単位のγ−インタ
ーフェロンが得られた。

【図面の簡単な説明】

図において、第１図は、HBL−38細胞の位相差顕微鏡写
真を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91）

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】急性骨髄性白血病患者の白血球細胞から培
養株化されたヒト由来のγ−インターフェロン産生能を
有する骨髄単球系細胞に属するHBL−38細胞、または該
細胞を細胞融合するかまたは遺伝子組換えして得られる
該ヒト由来のγ−インターフェロン産生能を有する培養
株化された骨髄単球系細胞。
【請求項２】モノクローナル抗体を用いた表面マーカー
の検索において、モノクローナル抗体3A1、MCS−２、B3
/25およびMY−９が高い陽性率を示す細胞であることを
特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の骨髄単球系
細胞。