JP2023517926A - ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含むダプトマイシン製剤 - Google Patents

Abstract

一態様では、ダプトマイシンを含む薬学的に許容される固体組成物の製造方法は、水溶液を乾燥して、固体組成物を形成する工程を含み、水溶液は、（ｉ）水と、（ｉｉ）ダプトマイシンと、（ｉｉｉ）水性組成物の総体積の約１．２重量％～約９．０重量％の量のソルビトールと、（ｉｖ）水性組成物の総体積の約０．６重量％～約９．５重量％の量のマンニトールとを含む。乾燥は、約－２５℃～約５０℃で約１５時間～約１２０時間、最も好ましくは約１５℃で約２０時間の昇華乾燥と、任意に、先行および／または後続の１つ以上の追加の乾燥工程とを含むことができる。他の態様は、ダプトマイシンを含有する固体組成物、および、固体組成物を再構成することによって作製された薬学的に許容される製品を投与する工程を含む細菌感染を治療する方法である。

Description

優先権主張
本出願は、２０２０年３月１２日に出願された「ＤＡＰＴＯＭＹＣＩＮ ＦＯＲＭＵＬＡＴＩＯＮＳ ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧ Ａ ＣＯＭＢＩＮＡＴＩＯＮ ＯＦ ＳＯＲＢＩＴＯＬ ＡＮＤ ＭＡＮＮＩＴＯＬ」と題する米国仮特許出願第６２／９８８，７３４号および２０２０年９月２５日に出願された「ＤＡＰＴＯＭＹＣＩＮ ＦＯＲＭＵＬＡＴＩＯＮＳ ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧ Ａ ＣＯＭＢＩＮＡＴＩＯＮ ＯＦ ＳＯＲＢＩＴＯＬ ＡＮＤ ＭＡＮＮＩＴＯＬ」と題する米国仮特許出願第６３／０８３，４３４号に対する優先権および利益を主張し、それぞれの内容全体が参照により本明細書に組み込まれ、依拠される。

本開示は、一般に、ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含有するダプトマイシン製剤、およびそのような製剤を製造および使用する方法に関する。

ダプトマイシン（図１）は、バンコマイシン耐性腸球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、およびペニシリン耐性肺炎球菌を含むグラム陽性生物によって引き起こされる全身性で生命を脅かす感染症の治療に使用されるリポペプチド抗生物質である。ダプトマイシンは、土壌腐生菌ストレプトマイセス・ローゼオスポラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｏｓｅｏｓｐｏｒｕｓ）に含まれる天然化合物である。化合物は、滅菌水で再構成し、次いで静脈内投与することができる凍結乾燥ケーキとして提供することができる。

当技術分野におけるコンセンサスは、スクロースが保管中の凍結乾燥ダプトマイシンの化学的安定性を高めるための好ましい賦形剤であるということである。また、マンニトールなどのポリオールはスクロースと組み合わせて使用され得るが、マンニトールなどのポリオール自体（スクロースなし）は、凍結乾燥ダプトマイシンの化学的安定性をスクロースほど効果的に高めるとは考えられていない。

本明細書において後に開示される実験例に示されるように、本発明者らは驚くべきことに、ソルビトールとマンニトールの組み合わせが、特にその特定の重量パーセンテージおよびダプトマイシンに対する特定のモル重量比が、室温以上で、例えば約２５℃で少なくとも１ヶ月、例えば約２５℃で少なくとも６ヶ月効果的に保管できる有利なダプトマイシン生成物を提供するために使用できることを発見した。さらに、そのような保管後、本明細書に開示されるソルビトールとマンニトールの組み合わせを含むダプトマイシン製剤は、一次ダプトマイシン不純物、不純物Ｄ７（図２）の形成によって測定されるように、典型的に好ましい賦形剤（スクロース）を含むダプトマイシン製剤と実質的に同様のダプトマイシン安定性を予想外に有することができる。

ソルビトールのＴ_g’値が比較的低いため、そのような製剤ではソルビトールを避けるべきであるというのが一般的な理解であるため、これらの結果は予想外である。しかし逆に、本発明者らは、ソルビトール含有製剤が、驚くべきことに、比較的低いＴｇ’値にもかかわらず、迅速かつ効果的にフリーズドライできることを発見した。例えば、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｍｅｄｉａ、２００４年、ＣｏｓｔａｎｔｉｎｏおよびＰｉｋａｌ編による「Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ」には、ソルビトールなどの非常に低いＴ_g’を持つ賦形剤の凍結乾燥は、ケーキの崩壊を促進する傾向があるため避けるべきであることが開示されている。しかし、本発明者らは、ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含むダプトマイシン製剤のＴ_g’値が非常に低い（約－４０℃）が、製剤の製造可能性には影響しないことを発見した。

さらに、この点に関して、本発明者らは予想外にも、ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含むダプトマイシン製剤が、予想よりも高い温度で実質的な安定性の損失なしにフリーズドライできることを発見した。結果として、これらの本発明のダプトマイシン製剤は、１週間未満、例えば約４８時間以下で迅速かつ効果的に（例えばケーキの崩壊なしに）フリーズドライすることができる。例えば、特定の非限定的な実施形態では、ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含有するダプトマイシン製剤を、昇華乾燥を含む乾燥プロセスによって安定なケーキにフリーズドライした。前記昇華乾燥は、約－２５℃～約５０℃の温度で約１５時間～約１２０時間、好ましくは約５℃～約３０℃で約１６時間～約２５時間、より好ましくは約８℃～約２５℃で約１７時間～約３０時間、さらにより好ましくは約１０℃～約２０℃で約１８時間～約２５時間、最も好ましくは約１５℃で約２０時間であり、任意に、１つ以上の追加の乾燥工程が先行および／または後続する。

ソルビトールの非常に低いＴ_g’は、そのような製剤の非効率的で商業的に非実用的な乾燥時間を示唆していたからであるので、この結果は驚くべきものであった。ソルビトールとマンニトールの組み合わせによって提供されるダプトマイシン製剤のこの予想外の製造可能性により、商業的に費用対効果の高い乾燥プロセスおよびダプトマイシンケーキの有益な安定性が有利に可能になる。実際、ソルビトールのＴ_g’を超えるフリーズドライ温度では、ダプトマイシンケーキが崩壊すると予想されていた。

さらに、ソルビトールはマンニトールの異性体であり、マンニトールと類似した化学構造を有する。したがって、ソルビトールとマンニトールの組み合わせが、マンニトール単独では達成できないスクロースとほぼ同等の安定性を達成するとは予想されなかったため、これらの結果も驚くべきものである。

さらに、この点に関して、本明細書に開示されているソルビトールとマンニトールの組み合わせは、約２５℃での保管から生じる不純物Ｄ７の量を、個々の効果に基づいて組み合わせで予想される量と比較して、驚くほど減少させた。したがって、図３に示され測定されるように、ダプトマイシンの予想外のレベルの安定性を達成する。これについては、後で詳しく説明する。不純物Ｄ７は、ダプトマイシンの凍結乾燥ケーキで増加する主な不純物であり、ソルビトールとマンニトールの組み合わせは、通常好ましい賦形剤であるスクロースを含むダプトマイシン製剤と比較して、実質的に同程度まで、保管中にＤ７の形成を防ぐことができる。

したがって、本開示の一態様は、ソルビトールとマンニトールの組み合わせを含む固体ダプトマイシン製剤であり、固体ダプトマイシン製剤は、図３に示すように測定され、２５℃で６か月間保管した後、不純物Ｄ７の増加が約１．００％以下であり、例えば、不純物Ｄ７の増加は、２５℃で６ヶ月保管した後に約０．９０％以下、または２５℃で６ヶ月保管した後に約０．８０％以下であり、好ましくは不純物Ｄ７の増加は２５℃で６ヶ月保管した後に約０．７０％以下であり、より好ましくは不純物Ｄ７の増加は２５℃で６ヶ月保管した後に約０．６０％以下であり、さらにより好ましくは不純物Ｄ７の増加は２５℃で６ヶ月間保管した後に約０．５０％以下であり、またより好ましくは不純物Ｄ７の増加は２５℃で６ヶ月間保管した後に約０．４０％以下であり、最も好ましくは不純物Ｄ７の増加は２５℃で６ヶ月間保管した後に約０．３０％以下である。

本開示の一態様では、ダプトマイシンを含む薬学的に許容される固体組成物の製造方法が提供される。この方法は、水溶液を乾燥して、固体組成物の総重量の約１．０重量％以下の含水量を有する固体組成物を形成する工程を含み、水溶液は、（ｉ）水、（ｉｉ）ダプトマイシン、（ｉｉｉ）水溶液の総体積の約３．０重量％～約６．０重量％の量のソルビトール、および（ｉｖ）水溶液の総体積の約３．０重量％～約５．０重量％の量のマンニトールを含む。得られた固体組成物は、本開示の別の態様である。

本開示の別の態様では、ダプトマイシンを含む薬学的に許容される固体組成物が提供される。薬学的に許容される固体組成物は、ダプトマイシンおよびソルビトールとマンニトールとの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ソルビトールは、好ましくは、固体組成物の総重量の約６．２重量％～約４５．３重量％であり、マンニトールは、固体組成物の総重量の約３．１重量％～約４７．５重量％であり、ソルビトールとマンニトールとの合計は、固形組成物の全重量の約３１．０重量％～約５９．４重量％であることが好ましい。

本開示のさらに別の態様では、細菌感染を有する対象において細菌感染を治療する方法が提供される。この方法は、有効量の薬学的製品を対象に投与する工程を含む。この薬学的製品は、ダプトマイシンおよびマンニトールとソルビトールとの組み合わせを含む。

図１はダプトマイシンの化学構造を示す。 図２はダプトマイシン不純物Ｄ７の化学構造を示す。 図３はダプトマイシン不純物Ｄ７の量を決定するための方法論を示す。 図４は、本開示によるダプトマイシンを含む固体組成物を作製する方法の一実施形態の非限定的な例のフローチャートである。 図５Ａは、本明細書に開示される実施例１Ａにおける試験品および実験研究の結果を示す。 図５Ｂは、本明細書に開示される実施例１Ａにおける試験品および実験研究の結果を示す。 図６Ａは、本明細書に開示される実施例１Ｂの実験研究における第１の生成物温度ランの凍結乾燥サイクルプロセスパラメータを示す（濃い青色の線は棚温度であり；オレンジ色の線はチャンバ圧力であり；黄色、水色、および緑色の線は３つの製剤の生成物温度であり；灰色の線は水蒸気の量を示すピラニ測定値である）。 図６Ｂは、本明細書に開示される実施例１Ｂの実験研究における第２の生成物温度ランの凍結乾燥サイクルプロセスパラメータを示す（濃い青色の線は棚温度であり；オレンジ色の線はチャンバ圧力であり；黄色、水色、および緑色の線は３つの製剤の生成物温度であり；灰色の線は水蒸気の量を示すピラニ測定値である）。 図６Ｃは、本明細書に開示される実施例１Ｂの実験研究における第３の生成物温度ランの凍結乾燥サイクルプロセスパラメータを示す（濃い青色の線は棚温度であり；オレンジ色の線はチャンバ圧力であり；黄色、水色、および緑色の線は３つの製剤の生成物温度であり；灰色の線は水蒸気の量を示すピラニ測定値である）。 図７は、本明細書に開示される実施例２における試験品および実験研究の結果を示す。 図８は、本明細書に開示される実施例２における試験品および実験研究の結果を示す。 図９は、本明細書に開示される実施例３における試験品および実験研究の結果を示す。 図１０は、本明細書に開示される実施例３における試験品および実験研究の結果を示す。 図１１は、本明細書に開示される実施例３における試験品および実験研究の結果を示す。 図１２は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１３は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１４は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１５は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１６は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１７は、本明細書に開示される実施例４における試験品および実験研究の結果を示す。 図１８は、実施例４からのいくつかの試験品を示す表であり、２５℃で６ヶ月間保管した後の不純物Ｄ７の増加が、保管開始時の量に対して約１．００％以下の増加に制限されていた。この表は、同様に２５℃で６ヶ月間保管した後の不純物Ｄ７の増加を約１．００％以下に抑えるために、これらの試験品から合理的に補間された実施形態も示している。この表には、固体ケーキについて計算された成分量が含まれている（これらの計算では、固体ケーキの約１．０重量％までの水分は除外されている）。 図１９は、ダプトマイシン製剤Ｎ１１の３つのバッチについて１８ヶ月の長期データ（２５℃で保管）を調査した実施例５の研究からの不純物Ｄ７および総不純物の結果を示す表であり、これは本開示によって提供される実施形態を代表するものである。

定義
いくつかの定義を以下に提供する。それにもかかわらず、定義は以下の「実施形態」の欄にある場合があり、上記の見出し「定義」は、「実施形態」の欄でのそのような開示が定義ではないことを意味するものではない。

固体組成物について本明細書で表される重量パーセンテージは、別段の表示がない限り、固体組成物の総重量に対する参照成分の重量によるものである。例えば、固体組成物の３．０重量％である成分は、全固体組成物の１００ｇ当たり３．０ｇの成分に相当する。水性組成物について本明細書で表される重量パーセンテージは、特に明記しない限り、水性組成物の総体積に対する参照成分の重量によるものである。例えば、水性組成物の３．０重量％である成分は、全水性組成物の１００ｍＬ当たり３．０ｇの成分に相当する。

本明細書でｐＨに言及する場合、値は、標準装置を用いて２５℃で測定したｐＨに対応する。

本明細書で使用される「約、ほぼ（ａｂｏｕｔ）」、「約、ほぼ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」、および「実質的に（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ）」は、数字のある範囲内の数を指すと理解され、例えば、参照数の－１０％～＋１０％の範囲、好ましくは参照数の－５％～＋５％、より好ましくは参照数の－１％～＋１％、さらに好ましくは参照数の－０．１％～＋０．１％、最も好ましくは参照数の－０．０１％～＋０．０１％である。

本明細書におけるすべての数字の範囲は、範囲内のすべての整数、整数または分数を含むと理解されるべきである。さらに、これらの数字の範囲は、その範囲内の任意の数または数のサブセットに向けられた請求項をサポートするものとして解釈されるべきである。例えば、１～１０までの開示は、１～８まで、３～７まで、１～９まで、３．６～４．６まで、３．５～９．９までなどの範囲をサポートすると解釈されるべきである。

本開示および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明確に指示しない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「温度（ａ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）」または「温度（ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）」への言及は、２つ以上の温度を含む。

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という言葉は、排他的ではなく包括的に解釈されるべきである。同様に、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」という用語は、そのような解釈が文脈から明確に禁止されていない限り、すべて包括的であると解釈されるべきである。さらにこの点に関して、これらの用語は、述べられた特徴の存在を特定するが、追加のまたはさらなる特徴の存在を排除するものではない。

それにもかかわらず、本明細書に開示される組成物および方法は、本明細書に具体的に開示されていない要素を欠いている可能性がある。したがって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語を使用する実施形態の開示は、（ｉ）特定された構成要素または工程、および追加の構成要素または工程を有する実施形態の開示、（ｉｉ）特定された構成要素または工程「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」実施形態の開示、並びに（ｉｉｉ）特定された構成要素または工程「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」実施形態の開示である。本明細書に開示される任意の実施形態は、本明細書に開示される任意の他の実施形態と組み合わせることができる。

「Ｘおよび／またはＹ」の文脈で使用される「および／または」という用語は、「Ｘ」もしくは「Ｙ」、または「ＸおよびＹ」と解釈されるべきである。同様に、「ＸまたはＹの少なくとも１つ」は、「Ｘ」もしくは「Ｙ」、または「ＸおよびＹ」と解釈されるべきである。

本明細書で使用される用語「例」および「など」は、特に用語のリストが後に続く場合、単に例示的および説明的であり、排他的または包括的であると見なされるべきではない。

「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」または「個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）」は、哺乳動物、好ましくはヒトである。本明細書で使用される場合、「有効量」は、欠乏を予防するか、個体の疾患または医学的状態を治療するか、より一般的には、症状を軽減するか、疾患の進行を管理するか、或いは、個人に対して栄養的、生理学的、または医学的利益をもたらす量である。

「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」および「治療する（ｔｒｅａｔ）」という用語には、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）な治療（対象となる病的状態または障害の発症を予防および／または遅らせる）と、治癒的な（ｃｕｒａｔｉｖｅ）、治療的な（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）または疾患修飾性の治療との両方が含まれ、また、診断された病的状態または障害を治癒、減速、症状の軽減、および／またはその進行を止める治療的な（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）手段；ならびに、疾病に罹患する危険性のある患者または疾病に罹患した疑いのある患者、および病気になっているか疾病または病状に苦しんでいると診断された患者の治療が含まれる。「治療」および「治療する」という用語は、対象が完全に回復するまで治療されることを必ずしも意味しない。「治療」および「治療する」という用語は、疾病に苦しんでいないが、不健康な状態を発症しやすい個人の健康の維持および／または促進も指す。「治療」および「治療する」という用語はまた、１つ以上の一次予防または治療的な（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）手段の増強または増強を含むことを意図している。非限定的な例として、治療は、患者、介護者、医師、看護師、または別の医療専門家によって実施することができる。

本明細書で使用される「単位剤形」という用語は、ヒトおよび動物の対象に対する単位用量として適した物理的に別個の単位を指し、各単位は、薬学的に許容される希釈剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）、担体、または媒体と組み合わせて、所望の効果を生み出すのに十分な量で本明細書に開示される組成物の所定量を含む。単位剤形の仕様は、使用される特定の化合物、達成される効果、および宿主内の各化合物に関連する薬力学に依存する。

本明細書で使用される「薬学的に許容される」という用語は、対象に投与された場合に実質的な有害なアレルギー反応または免疫学的反応を引き起こさない物質を指す。

特定の成分に関して使用される「実質的になし」という用語は、存在する成分のいずれかが約２．０重量％未満、例えば約１．０重量％未満、好ましくは約０．５重量％未満、より好ましくは約０．１重量％未満を構成することを意味する。

Ｔｇという用語は、乾燥状態の組成物のガラス転移温度を指し、通常は内部水分含有量と製剤の両方に影響される。Ｔｇ’（Ｔｇ－プライム）という用語は、フリーズ濃縮状態での組成物のガラス転移温度を指し、通常、製剤のみに影響される。

特に明記しない限り、ダプトマイシンおよび不純物Ｄ７などの構造類似化合物の量は、ダプトマイシンを含む水性再構成液体溶液の超高性能液体クロマトグラフィー（Ｕｌｔｒａ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＵＰＬＣ））分析を用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０またはＷａｔｅｒｓ Ｈクラスの紫外線（ＵＶ）検出器を有する超高性能液体クロマトグラフィー装置（ｕｌｔｒａ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）を用いて測定された。Ｗａｔｅｒｓ Ｅｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウェアを使用してピーク面積を測定した。特に明記しない限り、固体ダプトマイシン調製物の純度は、５００ｍｇの固体ダプトマイシン調製物を１０ｍＬの水で再構成して再構成溶液を形成し、次に図３に記載されたパラメータを使用してＵＰＬＣにより２２２ｎｍで再構成サンプルの吸光度を測定することによって決定した。ダプトマイシン不純物（不純物Ｄ７など）の面積％は、以下の式を使用して計算した。

Ａｉ＝サンプル溶液内の個々の関連物質の調整されたピーク面積応答
Ａｕ＝サンプル溶液中のダプトマイシンのピーク面積応答

実施形態
本開示の一態様は、ダプトマイシンを含む固体組成物を作製する方法である。固体組成物は、その後、水性の薬学的に許容される希釈剤（例えば、滅菌水および／または静菌水、好ましくは０．９重量％の塩化ナトリウムを含む）で再構成して、非経口投与用の薬学的製品を形成することができる。非経口投与の非限定的な例には、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、関節内、滑膜内、眼球内、髄腔内、局所、および吸入が含まれる。例えば、固体組成物は、約０．９重量％の塩化ナトリウム約１０ｍＬで再構成した後の、静脈内投与用の約５００ｍｇのダプトマイシンを含む凍結乾燥ケーキであり得る。

図４は、ダプトマイシンを含む固体組成物を作製する方法２００の実施形態の非限定的な例のフローチャートを一般的に示す。方法２００のいくつかの実施形態は、示された工程のすべてを含むことができるが、方法２００の他の実施形態は、示された工程の１つまたはすべてを省略することができ、各工程は、別段の指示がない限り任意である。本開示は、図４に示される方法２００の特定の実施形態に限定されない。

ダプトマイシンを含む固体組成物を作製する方法は、ダプトマイシン、ソルビトール、およびマンニトールの水性組成物を、水性組成物から水の少なくとも一部を除去する少なくとも１つの工程、例えば１つ以上の凍結乾燥、フリーズドライ、噴霧乾燥、流動床乾燥、噴霧冷却、沈殿または結晶化（例えば、方法２００の工程２１０）などの工程にかけることを含む。「凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｓａｔｉｏｎ）」および「フリーズドライ（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｙｉｎｇ）」という用語は、本明細書では交換可能に使用される。「水性組成物から水の少なくとも一部を除去する少なくとも１つの工程」は、以後「乾燥」工程と参照されるが、この用語は、すべての水が必ずしも除去されることを意味しない。

さらに、本開示は、乾燥工程２１０の特定の実施形態に限定されず、乾燥工程２１０は、液体組成物を本明細書に開示される含水量を有する固体組成物に変換するための任意の薬学的に許容されるプロセスを使用することができる。さらにこれに関して、当業者は、乾燥工程の１つ以上のパラメータが、固体組成物の所望の含水量、例えば、時間、温度、圧力、または乾燥工程２１０の段数のうちの１つ以上に基づいて選択できることを認識するであろう。以下により詳細に議論されるように、固体組成物の好ましい水分含有量は、固体組成物の全重量の約１．０重量％以下の水分であり、当業者は、固体組成物の総重量の約１．０重量％以下など、本明細書に開示される含水量を達成するのに適した凍結乾燥条件を容易に決定することができる。乾燥工程２１０中に組成物に適用される温度は、本明細書では「棚温度（ｓｈｅｌｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）」と称され；乾燥工程２１０中の組成物自体の温度は、本明細書では「生成物温度（ｐｒｏｄｕｃｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）」と称される。

乾燥工程２１０は、好ましくは、ダプトマイシン、ソルビトール、およびマンニトールの組成物中の氷を昇華によって除去する昇華乾燥を含み、任意に、実質的にすべての氷を除去する。昇華乾燥は、当技術分野では一次乾燥として知られていることがある。

組成物に加えられる熱が少なくとも部分的に昇華相変化に使用されるため、昇華乾燥中の生成物温度は典型的に棚温度よりも低い。氷の昇華が実質的にまたは完全に完了すると、生成物温度は通常上昇し、棚温度に近づく。したがって、本明細書に開示される昇華乾燥は、生成物温度が棚温度にほぼ等しいときに実質的に完了する。そのような実施形態では、昇華乾燥の完了後の任意の乾燥は、昇華乾燥に続く追加の乾燥として特徴付けられる。

さらにこれに関して、いくつかの実施形態は、昇華乾燥の後に１つ以上の追加の乾燥工程を任意に含む。１つ以上の後続の乾燥工程は、組成物から水、例えば、昇華乾燥後に残っている水および／または組成物の他の成分に結合している水を除去することができる。昇華乾燥に続くこのような乾燥は脱離として知られ、後続の乾燥は、固体組成物が目標水分量、好ましくは長期保管に適した水分量になるまで行うことができる。いくつかの実施形態では、後続の乾燥は、昇華乾燥に使用される棚温度と同じかまたはそれよりも高い棚温度で実施される。それにもかかわらず、いくつかの実施形態では、昇華乾燥の後に任意の後続の乾燥を行わない。

例えば、いくつかの実施形態では、乾燥工程２１０が昇華乾燥と、任意の１つ以上の先行の乾燥工程と、任意の１つ以上の後続の乾燥工程とを含むように、昇華乾燥は、任意にその前のおよび／またはその後の１つ以上の追加の乾燥工程を含む。例えば、特定の非限定的な実施形態では、昇華乾燥により組成物の含水量がより低い含水量に調整され、昇華乾燥に続く１つ以上の追加の乾燥工程により、組成物の含水量が目標の含水量に調整される。昇華乾燥の工程は、複数の異なる温度のそれぞれが所望の範囲内にある限り、組成物を一定の温度および／または複数の異なる温度にさらすことができる。

例えば昇華乾燥は、約－２５℃～約５０℃、好ましくは約５℃～約３０℃、より好ましくは約８℃～約２５℃、さらにより好ましくは約１０℃～約２０℃、最も好ましくは約１５℃の温度で、約１５時間～約１２０時間、好ましくは約１６時間～約２５時間、より好ましくは約１７時間～約３０時間、さらにより好ましくは約１８時間～約２５時間、最も好ましくは約２０時間で行うことができる。

これらの温度は、組成物に適用される温度であり（上記の「棚温度」）、組成物自体の温度（上記の「生成物温度」）は、昇華乾燥中に組成物に適用される温度よりも低く、例えば、上に開示された昇華乾燥の例示的な温度よりも低く、昇華乾燥終了時にほぼ棚温度に達する。いくつかの実施形態では、昇華乾燥中の生成物温度は約－３０℃～約４０℃であるが、典型的には棚温度を超えない。

好ましくは、乾燥工程２１０は、（ｉ）昇華乾燥を含むプロセス、（ｉｉ）昇華乾燥および１つ以上の先行の乾燥工程を含むプロセス、（ｉｉｉ）昇華乾燥および１つ以上の後続の乾燥工程を含むプロセス、および（ｉｖ）昇華乾燥、１つ以上の先行の乾燥工程、および１つ以上の後続の乾燥工程を含むプロセスからなる群より選択されるプロセスである。

一実施形態において、水性組成物は、例えば水性組成物の乾燥を行う前に約－１４℃未満（約－４０℃など）の温度で約２時間さらすことにより、乾燥を行う前に水性組成物の凝固点以下の温度で凍結することができる。そのような実施形態では、生成物温度は、通常、昇華乾燥中の棚温度よりも低くなる。

好ましくは、固体組成物は凍結乾燥粉末であり、例えば、実質的に均一な色（例えば、淡黄色から薄茶色）および実質的に均一なテクスチャーを有する実質的に均質なケーキの形態である。しかし、本開示は、固体組成物の特定の形態に限定されず、固体組成物の形態は、当業者によって薬学的に許容されることが知られている任意のものであり得る。

好ましくは、水溶液は、乾燥工程の前に、例えばポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）またはポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）のフィルターによって濾過される（例えば、方法２００の工程２０６）。水性溶液（濾過されたまたは濾過されていない）は、乾燥工程の前に１つ以上のバイアル（例えば、ガラスバイアル）に充填され得（例えば、方法２００の工程２０８）、例えば乾燥工程が水性組成物のバイアルに対して行われる。乾燥工程（例えば、方法２００の工程２１０）の１つ以上のパラメータは、固体組成物の所望の含水量、例えば乾燥工程の時間、温度、または圧力の１つ以上に基づいて選択することができる。

好ましくは、水性組成物は、水性組成物の乾燥工程の前および／または乾燥工程中に、約４．５～約８．０、好ましくは約６．０～約７．５、より好ましくは約６．７～約７．３、最も好ましくは約７．０のｐＨを有する。したがって、方法のいくつかの実施形態は、少なくとも１つのｐＨを調整する工程（例えば、方法２００の工程２０４）、例えば、水酸化ナトリウム（例えば、１Ｎ ＮａＯＨまたは５Ｎ ＮａＯＨ）などの塩基の添加および／または塩酸などの酸（例：１Ｎ ＨＣｌ）などの酸の添加を含む。特定の非限定的な例において、少なくとも１つのｐＨを調整する工程は、５Ｎ水酸化ナトリウムを使用してｐＨを約６．０に調整し、次いで１Ｎ水酸化ナトリウムを使用してｐＨを約７．０に調整し、次いで必要に応じて、意図せずｐＨが高くなりすぎた場合は、１Ｎ塩酸を使用してｐＨを下げて約７．０に調整する。しかしながら、本開示は、任意のｐＨを調整する工程の特定の実施形態に限定されず、任意のｐＨを調整する工程は、当業者によって薬学的に許容されることが知られている任意のものであり得る。

水性組成物の非限定的な例は、約８０～約１３０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約９０～約１２０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは約１００～約１１０ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは約１０５ｍｇ／ｍＬの量でダプトマイシンを含むことができる。さらにこれに関して、水性組成物の非限定的な例は、水性組成物の総体積の約８．０～約１３．０重量％、好ましくは約９．０～約１２．０重量％、より好ましくは約１０．０～約１１．０重量％、最も好ましくは約１０．５重量％の量でダプトマイシンを含むことができる。

いくつかの実施形態では、方法は、水性組成物を乾燥工程に供する前に、水性組成物を調製する工程（例えば、方法２００の工程２０２）を含む。例えばこの方法は、液体（例えば、純水および／または超純水）へダプトマイシンを添加し、およびダプトマイシンが溶解した後、溶解したダプトマイシンをすでに含む液体へソルビトールおよびマンニトールを添加することを含むことができる。好ましい実施形態では、この方法は、ソルビトールおよびマンニトールを液体（例えば、純水および／または超純水）に添加し、ソルビトールおよびマンニトールが溶解した後、溶解したソルビトールと溶解したマンニトールすでに含有する液体にダプトマイシンを添加することを含む。別の好ましい実施形態では、この方法は、ダプトマイシン、ソルビトール、およびマンニトールを一緒に乾燥混合し、次いで乾燥混合物を液体（例えば、純水および／または超純水）に添加することを含む。しかし、本開示は、水性組成物が調製される特定のプロセスに限定されず、水性組成物が調製されるプロセスは、当業者によって薬学的に許容されることが知られている任意のものであり得る。

水性組成物を調製するこれらの工程の少なくとも一部は、任意に、約２℃～約８℃、例えば約５℃で、または追加または代替として、周囲条件、すなわち約２５℃の温度で、約１気圧の圧力で実施することができる。好ましくは、混合は、一定の攪拌で、例えば各混合する工程について少なくとも約１５分間攪拌して実施される。

上記のように、水性組成物はソルビトールとマンニトールの組み合わせを含む。水性組成物の非限定的な例は、水性組成物の総体積に対して、約１．２重量％～約９．０重量％、好ましくは約３．５重量％～約５．５重量％、より好ましくは約４．０重量％～約５．０重量％、さらにより好ましくは約４．５重量％～約５．０重量％、最も好ましくは約５．０重量％の量でソルビトールを含むことができる。水性組成物の非限定的な例は、水性組成物の総体積に対して、約０．６重量％～約９．５重量％、好ましくは約３．５重量％～約５．０重量％、より好ましくは約４．０重量％～約５．０重量％、さらにより好ましくは約４．５重量％～約５．０重量％、最も好ましくは約５．０重量％の量でマンニトールを含むことができる。

本方法で使用される水溶液のいくつかの実施形態は、約１：４～約１：１３、好ましくは約１：５～約１：１３のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比を有することができ、およびソルビトール：マンニトールの重量比が２０：８０～４０：６０、例えば約３０：７０である。

本方法で使用される水溶液の他の実施形態は、約１：４～約１：９、好ましくは約１：５～約１：８．５のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比を有することができ、およびソルビトール：マンニトールの重量比は、４０：６０を超えて９０：１０まで、好ましくは４０：６０を超えて約８０：２０まで、より好ましくは約５０：５０～約７０：３０、例えば約５０：５０、約６０：４０、または約７０：３０である。

いくつかの実施形態では、水性組成物は、ダプトマイシン、ソルビトールとマンニトールとの組み合わせ、滅菌水、水酸化ナトリウムおよび／または塩酸などの任意のｐＨ調整剤、並びに、１つ以上のクエン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、トリプトファン、マレイン酸塩、または炭酸塩などの任意の緩衝剤から本質的になる（またはからなる）ことができる。さらにこれに関して、水性組成物のいくつかの実施形態は緩衝剤を含むが、好ましい実施形態は緩衝剤を実質的に含まない。

好ましくは、水性組成物は、ソルビトールおよびマンニトールに加えて、実質的に糖を含まず、および／または、他のポリオールを実質的に含まず、いくつかの実施形態では、ソルビトールおよびマンニトールが水性組成物中の唯一のポリオールである。

水性組成物を固体組成物に乾燥した後、方法は、固体組成物を保管する工程をさらに含むことができる（例えば、方法２００の工程２１２）。例えば、固体組成物は、約２５℃～約３０℃の温度で約１ヶ月～約２４ヶ月の期間、または約４０℃で約１週間～約２週間の温度で保管することができる。例えば、この方法は、固体組成物を約２５℃の温度で約６ヶ月間保管する工程をさらに含むことができる。保管は光への曝露を含むことができ、本明細書に開示される固体組成物の特性は、そのような光への曝露によって実質的に変化しない可能性がある（例えば、外観、再構成時間、色、ｐＨ、ダプトマイシン濃度、および／または不純物）。

保管後、固体組成物を再構成し、非経口的に投与することができる。例えば、固体組成物は、約２５ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬのダプトマイシン濃度を有する非経口投与可能な薬学的製品に再構成することができる。好ましくは、約５００ｍｇの固体組成物が約１０ｍＬの滅菌水または静菌水に２５℃で約２分以内に溶解し、および／または約３５０ｍｇの固体組成物が約１０ｍＬの滅菌水または静菌水に２５℃で約１分以内に溶解する。

本開示の別の態様は、ダプトマイシンおよびソルビトールとマンニトールとの組み合わせを含む固体組成物であり、非限定的な例として、上記で開示された方法のいずれかによって得られる固体組成物である。いくつかの実施形態では、固体組成物は、固体組成物の総重量の約１．０％以下、好ましくは固体組成物の総重量の約０．９％以下、より好ましくは固体組成物の総重量の約０．８％以下、さらにより好ましくは固体組成物の総重量の約０．７％以下、最も好ましくは固体組成物の総重量の約０．５％以下、例えば総重量の約０．２％以下または固体組成物の総重量の約０．１％以下の含水量を有することができる。

好ましくは、固体組成物は凍結乾燥ケーキなどの単位剤形であり、単位剤形は約３５０ｍｇ～約６００ｍｇのダプトマイシン、好ましくは約４５０ｍｇ～約５５０ｍｇのダプトマイシン、より好ましくは約４７５ｍｇ～約５２５ｍｇのダプトマイシン、最も好ましくは約５００ｍｇのダプトマイシンを含むことができる。

固体組成物の好ましい実施形態において、ソルビトールは、薬学的に許容される固体組成物の総重量の約６．２重量％～約４５．３重量％であり、マンニトールは、薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３．１重量％～約４７．５重量％である。これらの実施形態において、ソルビトールおよびマンニトールの合計は、好ましくは、薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３１．０重量％～約５９．４重量％である。

例えば、固体組成物のいくつかの実施形態は、約１：４～約１：１３、好ましくは約１：５～約１：１３のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比を有することができ、ソルビトール：マンニトールの重量比は２０：８０～４０：６０、例えば約３０：７０である。このような実施形態では、ソルビトールは、好ましくは固体組成物の総重量の約６．２重量％～約２２．１重量％、より好ましくは固体組成物の総重量の約９．３重量％～約２２．１重量％であり、マンニトールは、好ましくは固体組成物の総重量の約１８．６重量％～約４７．５重量％、より好ましくは固体組成物の総重量の約１８．６重量％～約４１．６重量％である。これらの実施形態において、ソルビトールおよびマンニトールの合計は、好ましくは、固体組成物の総重量の約３１．０重量％～約５９．４重量％である。

別の例として、固体組成物の他の実施形態は、約１：４～約１：９、好ましくは約１：５～約１：８．５のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比を有することができる。またソルビトール：マンニトールの重量比は、４０：６０を超えて９０：１０まで、好ましくは４０：６０を超えて約８０：４０まで、より好ましくは約５０：５０～約７０：３０まで、例えば約５０：５０、約６０：４０または約７０：３０である。そのような実施形態では、ソルビトールは、好ましくは固体組成物の総重量の約１２．４重量％～約４５．３重量％、より好ましくは固体組成物の総重量の約１５．５重量％～約３５．２重量％である。またマンニトールは、好ましくは固体組成物の総重量の約３．１重量％～約２５．２重量％、より好ましくは固体組成物の総重量の約９．３重量％～約２５．２重量％である。これらの実施形態において、ソルビトールおよびマンニトールの合計は、好ましくは、固体組成物の全重量の約３１．０重量％～約５０．３重量％である。

いくつかの実施形態では、固体組成物は、ダプトマイシン、ソルビトールとマンニトールとの組み合わせ、残留滅菌水、水酸化ナトリウムおよび／または塩酸などの任意のｐＨ調整剤、並びに、一つ以上のクエン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、またはトリプトファンなどの任意の緩衝剤から本質的になるか、またはそれらからなる。さらにこれに関して、固体組成物のいくつかの実施形態は緩衝剤を含むが、好ましい実施形態は、ソルビトールおよびマンニトールに加えて緩衝剤を実質的に含まない。

好ましくは固体組成物は、ソルビトールおよびマンニトールに加えて、実質的に糖を含まず、および／または他のポリオールを実質的に含まず、いくつかの実施形態では、ソルビトールおよびマンニトールが固体組成物中の唯一のポリオールである。

本開示の別の態様は、細菌感染を有する対象において細菌感染を治療する方法である。この方法は、本明細書に開示される組成物のいずれかの有効量を対象に投与する工程を含む。この方法は、投与する工程の前に、本明細書に開示される固体組成物の１つを、好ましくは、１つ以上の、滅菌水、滅菌塩化ナトリウムまたは静菌水などの薬学的に許容される希釈剤中で再構成する工程を含むことができる。本明細書に開示される方法および組成物によって治療することができる細菌感染症の非限定的な例には、グラム陽性菌、例えば、黄色ブドウ球菌、化膿連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・アガラクチア（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ亜種エクイシミリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ ｓｕｂｓｐ．ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ）、およびエンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）によって引き起こされる皮膚および皮膚構造感染症ならびに血流感染症が含まれる。

以下の非限定的な例は、マンニトールとソルビトールの組み合わせによって安定化されたダプトマイシンの概念を支持する。

実施例１Ａ
ダプトマイシンの濃度、およびマンニトール、ソルビトール、ラクトース、β－シクロデキストリンのスルホブチルエーテル（ＳＢＥ－β－ＣＤ）などの賦形剤の添加がダプトマイシンの安定性に及ぼす影響を検討する研究を行った。この点に関して、毎回、製剤はＵＰＬＣによって解析し、その条件は図３に記載されている。

試験品は、ｐＨ６．８のダプトマイシン５２５ｍｇのフリーズドライケーキを含む１０ｍＬまたは２０ｍＬのバイアルで構成された。ＡＰＩと賦形剤の濃度は、製剤によって異なっていた。この研究では、ソルビトール、マンニトール、ラクトース、およびＳＢＥ－β－ＣＤ（すなわち、ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標））を使用した（図５Ａ）。バイアルをフリーズドライヤーに入れ、凍結乾燥した。

製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９のガラス転移温度が決定された。ガラス転移温度は、それぞれ２９、３７、および３８℃であった。２５℃で安定性が高く、４０℃で安定性が低い理由は、サンプルが４０℃で保管されたときにガラス転移温度を超えたためであると仮定された。したがって、５℃で試験されるサンプルは、５℃で１．５か月後に３０℃で保管するために移動され、サンプルが３０℃でまだ安定しているかどうかを確認した。３０℃のサンプルの安定性は、２５℃のサンプルと同等であった。

ＳＢＥ－β－ＣＤサンプル（Ｂ１１～Ｂ１３）は、２５℃でわずか２ヶ月後に２％のＤ７の増加を示したので、２ヶ月後に研究から除外された。不純物Ｄ７の増加を２５℃で最もよく低減した製剤は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９であり、製剤Ｂ７はＤ７が０．２％しか増加しなかった（図５Ｂ）。

実施例１Ｂ
非常に低いＴｇ’値を有することが見出されたソルビトールおよびマンニトールを含む製剤を検討する研究、およびフリーズドライヤー内の生成物温度を調査する研究を行い、実質的な安定性を失うことなく凍結乾燥サイクルをどれだけ迅速に実施できるかを決定した。具体的には、先の実施例（図５Ａ）で論じたような製剤Ｂ７（５％ソルビトール、５％マンニトール）、Ｂ８（２．５％ソルビトール、５％マンニトール）、およびＢ９（５％ソルビトール、０％マンニトール）のサンプルを５ｍＬの水で再構成し、溶解させた。次に、サンプルをフリーズドライして、生成物温度ランを行った。ケーキの崩壊を観察し、画像を撮影した。次に、大気圧に開いたバイアルを備えたピペットを使用して、サンプルを５ｍＬの水で再構成した。再構成時間を記録し、必要に応じて画像を撮影した。

第１の生成物温度ラン（図６Ａ）では、製品を５℃の棚温度で装填し、６０分間保持した。次に凍結するために、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで－４０℃まで傾斜を付け、４時間保持した。次に、昇華乾燥のために、１００ｍＴｏｒｒの真空を適用し、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで－５℃まで傾斜を付け、３つの製剤すべての生成物温度が約－５℃（約２８時間）に達するまで保持した。さらに追加で乾燥させるために、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで４０℃まで傾斜を付け、３６０分間保持した。

第１の生成物温度ラン（図６Ａ）について決定された、一次乾燥の大部分の間で維持される生成物温度である臨界生成物温度は、製剤Ｂ７については－２２．２℃までであり、製剤Ｂ９について－２３．０℃までであった。生成物温度が約－２２．５℃の場合、すべての製剤で許容できるケーキが得られ、崩壊は見られなかった。再構成時間は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９でそれぞれ約２分、３分、および４分であった。

第２の生成物温度ラン（図６Ｂ）では、製品を５℃の棚温度で装填し、６０分間保持した。次に凍結するために、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで－４０℃まで傾斜を付け、４時間保持した。次に、昇華乾燥とそれに続く追加の乾燥のために、１００ｍＴｏｒｒの真空を適用し、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで４０℃まで傾斜を付け、１７時間保持した。昇華乾燥は、４０℃での１７時間の保持が終了する数時間前に完了した。

第２の生成物温度ラン（図６Ｂ）の昇華乾燥中に決定された臨界生成物温度は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９についてそれぞれ－１２．２℃、－１４．１℃、および－１３．５℃であった。生成物温度が約－１３℃の場合、すべての製剤で許容できるケーキが得られ、崩壊は見られなかった。再構成時間は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９でそれぞれ約１．７５分、４分、および４分であった。

第３の生成物温度ラン（図６Ｃ）では、製品を５℃の棚温度で装填し、６０分間保持した。次に凍結するために、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで－４０℃まで傾斜を付け、４時間保持した。次に、昇華乾燥のために、１００ｍＴｏｒｒの真空を適用し、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで－２５℃まで傾斜を付け、３つの製剤すべての生成物温度が約－２５℃（製剤Ｂ７およびＢ８では約１００時間）に達するまで保持した。さらに追加で乾燥するため、棚温度を０．５℃／ｍｉｎで４０℃まで傾斜を付け、３６０分間保持した。製剤Ｂ９は、他のサンプルよりも先に－２５℃の棚温度に達し、その結果、Ｂ７およびＢ８よりも早く昇華乾燥を完了した。

第３の生成物温度ラン（図６Ｃ）の一次乾燥中に決定された臨界生成物温度は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９について、それぞれ－２８．５℃、－２８．４℃、および－３０．０℃であった。生成物温度が約－２９℃の場合、すべての製剤で許容できるケーキが得られ、崩壊は見られなかった。再構成時間は、製剤Ｂ７、Ｂ８、およびＢ９でそれぞれ約１．７５分、４分、および４分であった。

結論として、一次乾燥中の臨界生成物温度が約－１２℃に達しても、一次乾燥中の臨界生成物温度による製品外観の違いはなかった。崩壊は見られなかった。

実施例２
ダプトマイシン／ソルビトール／マンニトールの開発安定性ユニットを調製し、保管中および再構成後の凍結乾燥サンプルの安定性を試験する研究を行った。試験品は、さまざまなｐＨおよび賦形剤濃度のダプトマイシン製剤で構成される。試験品の製剤を図７に示す。製剤を１０ｍＬバイアルに充填し、フリーズドライした。バイアルを逆さにして、２５℃、３０℃、および４０℃で保管した。結果を図８に示す。

実施例３
ソルビトールとマンニトールの好ましい組み合わせを含む凍結乾燥ダプトマイシン製剤（製剤Ｂ７：１０５ｍｇ／ｍＬのダプトマイシン、５％のソルビトール、５％のマンニトール、ｐＨ６．８）の安定性に対する異なる水分レベルの効果を調査する研究を行った。二次乾燥温度は、安定性のために望ましい水分レベルが得られるように選択した。

具体的には、ソルビトールとマンニトールは、５℃に制御されたジャッキ付き容器内の約２５０ｍＬの水に溶解した。ダプトマイシンを１１５分間にわたって溶液に溶解した（６．１℃で初期ｐＨ４．２６）。ＮａＯＨを添加し、溶液を水で最終体積５００ｍＬにした（最終ｐＨは２１．９℃で６．８１であった）。溶液を濾過し、バイアルに５ｍＬの溶液を満たし、トレイの中央に置いた。トレイの残りは、４．６３ｍＬの水で再構成し、溶解させたプラセボバイアルで満たされた。バイアルをフリーズドライヤーに入れ、凍結乾燥した。

サンプルを５つの残留水分レベルにグループ分けし、２５℃と３０℃で１２か月間安定状態に置かれた。各時点、すなわち、初期、１か月、２か月、３か月、６か月、および１２か月で、再構成、外観、ｐＨ、およびＨＰＬＣアッセイを測定または実行した。追加の水分分析は、２５℃および３０℃で１２か月間保管されたサンプルに対して実行した。

製剤の特徴付けのために、ダプトマイシンのバイアルの水分レベルを近赤外分光法（ＮＩＲ）によりゼロ時間と１ヶ月の試験間隔で分析した。ＮＩＲからの平均水分レベルの結果を図９の表に示す。

水分が安定性に及ぼす影響を判断するために、水分の結果を、カールフィッシャー滴定（ＫＦ）により、Ｔ０、２５℃で１か月および１２か月の保管で測定した。Ｔ０および１ヶ月保管時に試験されたダプトマイシンサンプルを、ＮＩＲによって決定された値と比較した（図１０）。図１１は、１２か月の試験による２５℃の安定性データを示す。凍結乾燥製品または再構成製品のいずれにおいても、外観上の問題はなかった。さらに、２５℃で１２か月間、ｐＨと再構成時間に大きな変化はなかった。

不純物Ｄ７の増加は、残留水分レベルが高いほど著しく高くなる。結論として、Ｄ７の形成を減らすには、製品の残留水分を約１．０％以下に制御するべきである。

実施例４
ソルビトール、スクロース、およびマンニトールの量を変え、またｐＨを変更したダプトマイシン製剤を調査する研究を行った。具体的には、試験品と対照品を２５℃、３０℃、および４０℃で保管した。次に、０、１、２、３、および６か月の時点で、５ｍＬの蒸留水を使用してサンプルを再構成し、試験した。この点に関して、毎回、製剤をＵＰＬＣによって解析した。その条件は図３に記載する。各試験品は、１０５ｍｇ／ｍＬダプトマイシンを含む溶液であった。賦形剤は、図１２および１３の表に概説されているように変化した。図１４の表に別段の記載がない限り、ｐＨは６．８に調整した。

安定性を試験するために、対照品と試験品を２５℃で６ヶ月間保管した。製剤Ｎ１～Ｎ２５を５ｍＬの水で再構成し、関連物質について試験した。２５℃で６か月間保管された製剤サンプルＮ１～Ｎ２５についての不純物Ｄ７を測定した。

２５℃での１ヶ月、２ヶ月、および３ヶ月の保管から選択された結果を図１５の表に示す。２５℃での６ヶ月の保管からの結果の完全なセットを図１６の表に示す。この完全な表から選択された結果を図１７の表（すべて不純物Ｄ７に関する）に示す。図１５、１７において、製剤Ｎ１１は、本発明の非限定的な例示的実施形態の代表であり、アスタリスクによって識別され、製剤Ｎ２１は、糖アルコールなしでスクロースを使用する対照製剤の代表であり、プラス記号によって識別される。

２５℃で６ヶ月にわたる不純物Ｄ７の変化に関して、ソルビトールの存在は増加を制御するために重要であった。ソルビトール／マンニトール混合物は、マンニトール単独またはソルビトール単独よりも良好に機能した。製剤Ｎ２５に見られるように、不純物Ｄ７はより高いｐＨでより急速に形成されるが、この量は、１００％マンニトール／ソルビトールを含有する製剤および薬に対するポリオールの比率が高い製剤よりも依然として少ない。異性体ポリオールであるソルビトールとマンニトールの組み合わせは、いずれかの賦形剤単独よりも驚くほど優れた結果をもたらす。

凍結乾燥製剤の安定性に影響を与える別の要因は、薬に対する賦形剤の比率であった。薬に対する賦形剤のレベルが低すぎると、適切な安定化が得られなかった（製剤Ｎ５、Ｎ９、Ｎ１３、Ｎ１７）。薬に対する賦形剤のレベルが高すぎると、薬製品の分解に寄与するガラス転移温度Ｔｇ（製剤Ｎ１２、Ｎ１６、Ｎ２０；図１２参照）に影響を及ぼした。製剤Ｎ１３とＮ１７のＴｇ’は高かったため、ガラス転移温度は製剤の安定性の唯一の指標ではないが、６か月後の２５℃での全不純物増加は２％近くであった。

結論として、製剤Ｎ１～Ｎ２０は、薬に対する賦形剤のモル比１．３、５．０、８．５、１３．０で１０５ｍｇ／ｍＬのダプトマイシンで製剤化した。ソルビトール濃度レベルは、０％、３０％、５０％、７０％、および１００％（賦形剤の総量に対して、残りはマンニトール）であった。サンプルを２５℃で保管し、６か月間試験した。各サンプルを５ｍＬの水で再構成し、不純物を試験した。統計分析を行った。マンニトールとソルビトールの両方を含む製剤は、マンニトールまたはソルビトールのいずれか単独よりも、不純物Ｄ７に関してダプトマイシン薬品をより安定化させた。凍結乾燥製剤の安定性に影響を与える別の要因は、薬に対する賦形剤の比率であった。薬に対する賦形剤の比率が低すぎると、十分な安定化が得られなかった。薬に対する賦形剤の比率が高すぎると、薬製品の分解に寄与するガラス転移温度Ｔｇが低下した。

図１８は、実施例４からのいくつかの試験品を示す表であり、実施例４は、２５℃で６ヶ月間保管した後の不純物Ｄ７の増加を、保管開始時の量に対して約１．００％以下の増加に制限した（例えば、Ｎ６、Ｎ８、Ｎ１０、Ｎ１１、Ｎ１４およびＮ１５）例である。同様に２５℃で６か月間保管した後の不純物Ｄ７の増加を約１．００％以下に制限するために、これらの試験品から合理的に補間された実施形態もある。表には、乾燥ケーキについて計算された成分量が含まれる（約１．０重量％までの水分を除く）。

実施例５
ダプトマイシン製剤Ｎ１１の３つのバッチについて１８ヶ月の長期データ（２５℃保管）を調査する研究を行い、この製剤が前の実施例で以前に検討されていたので、本開示によって提供される実施形態を代表するものである。具体的には、各バッチは、１０５ｍｇ／ｍＬダプトマイシン、５％マンニトール、および５％ソルビトールの製剤を有し、バイアルに充填し、凍結乾燥した（両方の賦形剤パーセンテージ＝ｇ／溶液１００ｍＬ、本明細書の段落［００１７］で定義したとおり）。不純物Ｄ７および総不純物の平均値を、３つのバッチのそれぞれについて、図１９の表に要約する（両方の不純物量＝％ｗ／ｗ、本明細書の前の段落［００３２］で定義したとおり）。

驚くべきことに、結果は、ダプトマイシン製剤Ｎ１１の長期的挙動が、すでに上で論じた短期的研究で見られたものと少なくとも同じか、それよりも優れていることを示す。例えば、図１７において、ダプトマイシン製剤Ｎ１１は、保管開始時の量と比較して、２５℃での６ヶ月の保管でＤ７が０．２７％増加し、対照では１．８２％増加した。図１９に示されるように、実施例５の３つのバッチにおける最初の６ヶ月でのＤ７の変化は、保管開始時の量に対して、それぞれ０．２１、０．１４および０．１６％であった。１８か月間の保管では、Ｄ７の変化は、保管開始時の量と比較して、それぞれ０．５０、０．４５、および０．４４％であった。このデータは、ダプトマイシン製剤Ｎ１１が有効期間にわたって製品中の不純物形成を効果的に制御することを示している。

本明細書に開示された現在好ましい実施形態に対する様々な変更および修正は、当業者には明らかであろう。そのような変更および修正は、本主題の精神および範囲から逸脱することなく、また意図した利点を損なうことなく行うことができる。したがって、そのような変更および修正は、添付の特許請求の範囲によってカバーされることが意図されている。

Claims (35)

1. ダプトマイシンを含む薬学的に許容される固体組成物の製造方法であって、前記方法は、水溶液を乾燥して、前記固体組成物の総重量に対して約１．０重量％以下の水分含有量を有する前記固体組成物を形成する工程を含み、前記水溶液は、（ａ）水と、（ｂ）ダプトマイシンと、（ｃ）前記水溶液の総体積の約１．２重量％～約９．０重量％の量のソルビトールと、（ｄ）前記水溶液の総体積の約０．６重量％～約９．５重量％の量のマンニトールとを含む、方法。
2. ソルビトールが前記水溶液の総体積の約４．０重量％～約５．０重量％であり、マンニトールが前記水溶液の総体積の約４．０重量％～５．０重量％である、請求項１に記載の方法。
3. 前記水溶液のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：１３であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が２０：８０～４０：６０である、請求項１に記載の方法。
4. 前記水溶液のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：５～約１：１３であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が約３０：７０である、請求項１に記載の方法。
5. 前記水溶液のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：９であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が４０：６０を超えて９０：１０までである、請求項１に記載の方法。
6. 前記水溶液のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：８．５であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が約５０：５０～約７０：３０である、請求項１に記載の方法。
7. 前記水溶液の乾燥が凍結乾燥を含む、請求項１に記載の方法。
8. 前記水溶液の乾燥前に、前記水溶液のｐＨを約４．５～約８．０に調整する工程を含む、請求項１に記載の方法。
9. 前記水溶液の乾燥前に、前記水溶液のｐＨを約７．０に調整する工程を含む、請求項１に記載の方法。
10. 前記水溶液が、ソルビトールおよびマンニトールに加えて、糖を実質的に含まないおよび／または他のポリオールを実質的に含まない、請求項１に記載の方法。
11. 前記水溶液が実質的に緩衝剤を含まない、請求項１に記載の方法。
12. 前記水溶液が、ダプトマイシン、ソルビトール、マンニトールおよび水から本質的になる、請求項１に記載の方法。
13. 前記水溶液が水酸化ナトリウムおよび塩化水素をさらに含む、請求項１に記載の方法。
14. 前記方法は、前記水溶液の乾燥前に、前記水溶液を調製する工程を含み、前記水溶液を調製する工程は、
    （ａ）ダプトマイシンを水に撹拌しながら溶解し、続いてソルビトールおよびマンニトールをさらに撹拌しながら水に溶解する工程と、
    （ｂ）ソルビトールおよびマンニトールを水に撹拌しながら溶解し、続いてダプトマイシンをさらに撹拌しながら水に溶解する工程と、
    （ｃ）ソルビトールおよびマンニトールをダプトマイシンと乾式混合して乾燥混合物を形成し、続いて撹拌下で前記乾燥混合物を水に溶解する工程と、
    からなる群より選択されるプロセスを含む、請求項１に記載の方法。
15. 前記薬学的に許容される固形組成物は、前記水溶液の乾燥後、２５℃で６ヶ月間保管した後、超高性能液体クロマトグラフィーを用いてダプトマイシンおよび全不純物のピーク面積で割った不純物Ｄ７のピーク面積により測定して、保管開始時の前記薬学的に許容される固形組成物の不純物Ｄ７の初期量に対して、約１．００％以下の不純物Ｄ７の増加量を有する、請求項１に記載の方法。
16. 前記薬学的に許容される固形組成物は、前記水溶液の乾燥後、２５℃で６ヶ月間保管した後、超高性能液体クロマトグラフィーを用いてダプトマイシンおよび全不純物のピーク面積で割った不純物Ｄ７のピーク面積により測定して、保管開始時の前記薬学的に許容される固形組成物の不純物Ｄ７の初期量に対して、約０．３０％以下の不純物Ｄ７の増加量を有する、請求項１に記載の方法。
17. 前記乾燥が、約－２５℃～約５０℃の温度で約１５時間～約１２０時間の昇華乾燥を含む、請求項１に記載の方法。
18. 前記昇華乾燥の温度が約１０℃～約２０℃であり、前記昇華乾燥の時間が約１８時間～約２５時間である、請求項１７に記載の方法。
19. 前記乾燥が、（ｉ）前記昇華乾燥を含むプロセス、（ｉｉ）前記昇華乾燥および１つ以上の先行の乾燥工程を含むプロセス、（ｉｉｉ）前記昇華乾燥および１つ以上の後続の乾燥工程を含むプロセス、（ｉｖ）前記昇華乾燥、１つ以上の先行の乾燥工程、および１つ以上の後続の乾燥工程を含むプロセス、からなる群より選択されるプロセスである、請求項１７に記載の方法。
20. 請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法によって製造された薬学的に許容される固体組成物。
21. ダプトマイシンおよびソルビトールとマンニトールとの組み合わせを含み、約１．０重量％以下の水分含量を有する薬学的に許容される固体組成物であって、ソルビトールは前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約６．２重量％～約４５．３重量％であり、マンニトールは前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３．１重量％～約４７．５重量％であり、ソルビトールとマンニトールの合計は前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３１．０重量％～約５９．４重量％である、薬学的に許容される固体組成物。
22. ダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：１３、ソルビトール：マンニトールの重量比が２０：８０～４０：６０である、請求項２１に記載の薬学的に許容される固体組成物。
23. ダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：５～約１：１３であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が約３０：７０である、請求項２２に記載の薬学的に許容される固体組成物。
24. ソルビトールは前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約６．２重量％～約２２．１重量％であり、マンニトールが前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約１８．６重量％～約４７．５重量％であり、ソルビトールとマンニトールの合計は、固体組成物の総重量の約３１．０重量％～約５９．４重量％である、請求項２２に記載の薬学的に許容される固体組成物。
25. 前記水溶液のダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：９であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が４０：６０を超えて９０：１０までである、請求項２２に記載の薬学的に許容される固体組成物。
26. ダプトマイシン：（ソルビトール＋マンニトール）のモル比が約１：４～約１：８．５であり、ソルビトール：マンニトールの重量比が約５０：５０～約７０：３０である、請求項２５に記載の薬学的に許容される固体組成物。
27. ソルビトールは前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約１５．５重量％～約４５．３重量％であり、マンニトールは前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３．１重量％～約２５．２重量％であり、およびソルビトールとマンニトールの合計は前記薬学的に許容される固体組成物の総重量の約３１．０重量％～約５０．３重量％である、請求項２５に記載の薬学的に許容される固体組成物。
28. 前記薬学的に許容される固形組成物は、前記水溶液の乾燥後、２５℃で６ヶ月間保管した後、超高性能液体クロマトグラフィーを用いてダプトマイシンおよび全不純物のピーク面積で割った不純物Ｄ７のピーク面積により測定して、保管開始時の前記薬学的に許容される固形組成物の不純物Ｄ７の初期量に対して、約１．００％以下の不純物Ｄ７の増加量を有する、請求項２１に記載の方法。
29. 前記薬学的に許容される固形組成物は、前記水溶液の乾燥後、２５℃で６ヶ月間保管した後、超高性能液体クロマトグラフィーを用いてダプトマイシンおよび全不純物のピーク面積で割った不純物Ｄ７のピーク面積により測定して、保管開始時の前記薬学的に許容される固形組成物の不純物Ｄ７の初期量に対して、約０．３０％以下の不純物Ｄ７の増加量を有する、請求項２１に記載の方法。
30. ソルビトールおよびマンニトールに加えて、糖を実質的に含まないおよび／または他のポリオールを実質的に含まない、請求項２１に記載の薬学的に許容される固体組成物。
31. 緩衝剤を実質的に含まない、請求項２１に記載の薬学的に許容される固体組成物。
32. ダプトマイシン、ソルビトール、マンニトール、および約１．０重量％以下の水分含有量から本質的になる、請求項２１に記載の薬学的に許容される固体組成物。
33. 水酸化ナトリウムおよび塩化水素をさらに含む、請求項２１に記載の薬学的に許容される固体組成物。
34. 細菌感染症を有する対象において細菌感染症を治療する方法であって、
    前記方法は、
    薬学的製品を調製する工程であって、前記薬学的製品を調製する工程は、請求項２０の前記薬学的に許容される固体組成物または請求項２１の前記薬学的に許容される固体組成物の少なくとも１つを、薬学的に許容される希釈剤中で再構成する工程を含む、工程と；
    有効量の前記薬学的製品を対象に投与する工程と、
    を含む、方法。
35. 前記投与が静脈内投与を含む、請求項３４に記載の方法。

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