JPH10212241A - Ｂｄｎｆを安定に含有する製剤 - Google Patents
Ｂｄｎｆを安定に含有する製剤Info
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- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
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- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
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Abstract
(57)【要約】
【課題】長期保存に適した安定化されたＢＤＮＦ製剤を
提供する。 【解決手段】界面活性剤、特にＴｗｅｅｎ８０などの非
イオン性界面活性剤を０．００１から１０％添加して、
ＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）を製剤化することによ
り、ＢＤＮＦの重合や分解を抑制し、生物活性を長期間
保持できる溶液製剤、凍結乾燥製剤を得た。また、マン
ニトール等の糖アルコール、グリシン等のアミノ酸と共
に用いることにより、特に凍結乾燥製剤の安定性を高め
ることができる。
提供する。 【解決手段】界面活性剤、特にＴｗｅｅｎ８０などの非
イオン性界面活性剤を０．００１から１０％添加して、
ＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）を製剤化することによ
り、ＢＤＮＦの重合や分解を抑制し、生物活性を長期間
保持できる溶液製剤、凍結乾燥製剤を得た。また、マン
ニトール等の糖アルコール、グリシン等のアミノ酸と共
に用いることにより、特に凍結乾燥製剤の安定性を高め
ることができる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＢＤＮＦを含有す
る溶液製剤およびその溶液を凍結乾燥することにより得
られるＢＤＮＦ凍結乾燥製剤に関する。
る溶液製剤およびその溶液を凍結乾燥することにより得
られるＢＤＮＦ凍結乾燥製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】脊椎動物の神経細胞は、その生存に神経
栄養因子と呼ばれる一群のポリペプチドを必要とする。
これらの一つとして、脳由来神経栄養因子( ＢＤＮＦ)
が知られているが、本因子は中枢神経系において重要な
作用を果たしていると考えられていることから近年特に
注目されている。ＢＤＮＦは神経系において種々の薬理
作用を示すポリペプチドであり、その薬理作用について
は、例えば生体の科学 Vol.43, No.6, 616-625 (1992)
に記載されている。ＢＤＮＦはその薬理作用から、筋萎
縮性側索硬化症(ALS) 、制癌剤中毒性ニューロパチー、
糖尿病性ニューロパチー、網膜色素変性症、緑内障、ハ
ンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、末
期癌疼痛、鬱病、肥満等の疾患に対する治療剤としての
開発が期待されている（例えば、ＵＳ５１８０８２０、
生体の科学 Vol.43 No.6 (1992) ）。
栄養因子と呼ばれる一群のポリペプチドを必要とする。
これらの一つとして、脳由来神経栄養因子( ＢＤＮＦ)
が知られているが、本因子は中枢神経系において重要な
作用を果たしていると考えられていることから近年特に
注目されている。ＢＤＮＦは神経系において種々の薬理
作用を示すポリペプチドであり、その薬理作用について
は、例えば生体の科学 Vol.43, No.6, 616-625 (1992)
に記載されている。ＢＤＮＦはその薬理作用から、筋萎
縮性側索硬化症(ALS) 、制癌剤中毒性ニューロパチー、
糖尿病性ニューロパチー、網膜色素変性症、緑内障、ハ
ンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、末
期癌疼痛、鬱病、肥満等の疾患に対する治療剤としての
開発が期待されている（例えば、ＵＳ５１８０８２０、
生体の科学 Vol.43 No.6 (1992) ）。
【０００３】医薬品として応用するためには、通常の医
薬品形態及び保存条件下で経時変化することなく安定で
あることが要求される。殊に、ＢＤＮＦのような高度に
精製されたポリペプチドでは、長期間の安定性を保持す
るためには解決すべき問題が多く存在する。特に、ＢＤ
ＮＦでは、通常の生理食塩水等に溶解して保存する場
合、数日から数十日で凝集体が生成する問題がある。凝
集体は免疫毒性を惹起することが知られており、凝集生
成の防止は非常に重要である。また、ＢＤＮＦの変性体
及び重合体が生成する問題もある。ＢＤＮＦについて、
これら問題を防止するための有効な手段については何ら
報告はなかった。
薬品形態及び保存条件下で経時変化することなく安定で
あることが要求される。殊に、ＢＤＮＦのような高度に
精製されたポリペプチドでは、長期間の安定性を保持す
るためには解決すべき問題が多く存在する。特に、ＢＤ
ＮＦでは、通常の生理食塩水等に溶解して保存する場
合、数日から数十日で凝集体が生成する問題がある。凝
集体は免疫毒性を惹起することが知られており、凝集生
成の防止は非常に重要である。また、ＢＤＮＦの変性体
及び重合体が生成する問題もある。ＢＤＮＦについて、
これら問題を防止するための有効な手段については何ら
報告はなかった。
【０００４】ところで、通常、低分子量の化合物では、
溶液中で長期間の安定性が得られない場合、凍結乾燥製
剤による安定化を試みる。しかし、ポリペプチドは一般
に凍結乾燥操作においてそれほど安定でない（「蛋白
質、核酸、酵素」 Vol.37 No.91517 (1992)）。また、
水溶液中におけるポリペプチドの安定化剤は、水分子と
ポリペプチドとの相互作用により安定化させるものであ
り、したがって、水分子の存在しないポリペプチドの凍
結乾燥品においては、水溶液中におけるポリペプチドの
安定化剤は、多くの場合、安定化効果を示さない（「蛋
白質、核酸、酵素」 Vol.37 No.9 1517 (1992)）。ＢＤ
ＮＦの凍結乾燥製剤については全く知られておらず、ま
たＢＤＮＦの凍結乾燥製剤がどの程度の物理化学的及び
生物活性的安定性を示すかは予想することができなかっ
た。
溶液中で長期間の安定性が得られない場合、凍結乾燥製
剤による安定化を試みる。しかし、ポリペプチドは一般
に凍結乾燥操作においてそれほど安定でない（「蛋白
質、核酸、酵素」 Vol.37 No.91517 (1992)）。また、
水溶液中におけるポリペプチドの安定化剤は、水分子と
ポリペプチドとの相互作用により安定化させるものであ
り、したがって、水分子の存在しないポリペプチドの凍
結乾燥品においては、水溶液中におけるポリペプチドの
安定化剤は、多くの場合、安定化効果を示さない（「蛋
白質、核酸、酵素」 Vol.37 No.9 1517 (1992)）。ＢＤ
ＮＦの凍結乾燥製剤については全く知られておらず、ま
たＢＤＮＦの凍結乾燥製剤がどの程度の物理化学的及び
生物活性的安定性を示すかは予想することができなかっ
た。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】ＢＤＮＦは、低温又は
室温で数日から数十日間保存すると、凝集物が認めら
れ、性状が変化し、変性体、重合体の生成等、物理化学
的安定性が低く、長期間の保存に対し安定ではない。こ
のことは、ＢＤＮＦを注射用製剤等とした医薬又は動物
薬としての開発に障害となっていた。
室温で数日から数十日間保存すると、凝集物が認めら
れ、性状が変化し、変性体、重合体の生成等、物理化学
的安定性が低く、長期間の保存に対し安定ではない。こ
のことは、ＢＤＮＦを注射用製剤等とした医薬又は動物
薬としての開発に障害となっていた。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは前記課題を
解決するために種々検討を行った結果、ＢＤＮＦの安定
化のためには、界面活性剤の添加が極めて有効であるこ
とを見いだし、本発明を完成した。すなわち、本発明は
以下に示すように、界面活性剤を含有することを特徴と
するＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）安定化製剤であ
る。 （１）界面活性剤を含有することを特徴とするＢＤＮＦ
（脳由来神経栄養因子）安定化製剤。 （２）界面活性剤が非イオン性界面活性剤である（１）
記載の製剤。 （３）非イオン界面活性剤がＴｗｅｅｎ８０である
（２）記載の製剤。 （４）Ｔｗｅｅｎ８０の濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）
から１０％である請求項３記載の製剤。 （５）塩類を含有する（１）記載の製剤。 （６）塩類が塩化ナトリウムである（５）記載の製剤。 （７）緩衝剤を含有する（１）記載の製剤。 （８）緩衝剤がリン酸塩である請求項（７）記載の製
剤。 （９）ｐＨが５．５から７．５である（１）の製剤。 （１０）凍結乾燥された（１）の製剤。 （１１）安定化剤を含有する（１０）の製剤。 （１２）安定化剤としてアミノ酸および糖アルコールの
内少なくとも１つを含有する（１１）の製剤。 （１３）アミノ酸がグリシン、糖アルコールがマンニト
ールである（１２）の製剤。 （１４）安定化剤のＢＤＮＦに対する重量比が０．１か
ら１０である（１１）の製剤。 （１５）０．０１％から１０％（ｗ／ｖ）のＴｗｅｅｎ
８０および安定化剤としてマンニトールを含有するＢＤ
ＮＦ凍結乾燥製剤。
解決するために種々検討を行った結果、ＢＤＮＦの安定
化のためには、界面活性剤の添加が極めて有効であるこ
とを見いだし、本発明を完成した。すなわち、本発明は
以下に示すように、界面活性剤を含有することを特徴と
するＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）安定化製剤であ
る。 （１）界面活性剤を含有することを特徴とするＢＤＮＦ
（脳由来神経栄養因子）安定化製剤。 （２）界面活性剤が非イオン性界面活性剤である（１）
記載の製剤。 （３）非イオン界面活性剤がＴｗｅｅｎ８０である
（２）記載の製剤。 （４）Ｔｗｅｅｎ８０の濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）
から１０％である請求項３記載の製剤。 （５）塩類を含有する（１）記載の製剤。 （６）塩類が塩化ナトリウムである（５）記載の製剤。 （７）緩衝剤を含有する（１）記載の製剤。 （８）緩衝剤がリン酸塩である請求項（７）記載の製
剤。 （９）ｐＨが５．５から７．５である（１）の製剤。 （１０）凍結乾燥された（１）の製剤。 （１１）安定化剤を含有する（１０）の製剤。 （１２）安定化剤としてアミノ酸および糖アルコールの
内少なくとも１つを含有する（１１）の製剤。 （１３）アミノ酸がグリシン、糖アルコールがマンニト
ールである（１２）の製剤。 （１４）安定化剤のＢＤＮＦに対する重量比が０．１か
ら１０である（１１）の製剤。 （１５）０．０１％から１０％（ｗ／ｖ）のＴｗｅｅｎ
８０および安定化剤としてマンニトールを含有するＢＤ
ＮＦ凍結乾燥製剤。
【０００７】本発明に使用されるＢＤＮＦは、Ｂａｒｄ
ｅ，Ｙ．Ｅ（The EMBO Jounal. Vol.5, 549-553 (198
2)) らによって、ブタ脳から単離された神経栄養因子で
あり、その後１９８９年にブタ、ヒト、マウスなどのＢ
ＤＮＦ遺伝子がクローニングされ（Ｌｅｉｂｒｏｃｋ，
Ｊ ｅｔ． ａｌ．；Ｎａｔｕｒｅ，３４１，１４９
（１９８９））、１１９個のアミノ酸から成る一次構造
が解析されたものである。
ｅ，Ｙ．Ｅ（The EMBO Jounal. Vol.5, 549-553 (198
2)) らによって、ブタ脳から単離された神経栄養因子で
あり、その後１９８９年にブタ、ヒト、マウスなどのＢ
ＤＮＦ遺伝子がクローニングされ（Ｌｅｉｂｒｏｃｋ，
Ｊ ｅｔ． ａｌ．；Ｎａｔｕｒｅ，３４１，１４９
（１９８９））、１１９個のアミノ酸から成る一次構造
が解析されたものである。
【０００８】ＢＤＮＦの生産方法は種々報告されてお
り、何れの製法によるＢＤＮＦも本発明の製剤に用いる
ことができる。動物組織からの抽出品の場合、医薬とし
て使用できる程度に精製されたものであれば良い（The
EMBO Jounal. Vol.5, 549-553 (1982)) 。また、ＢＤＮ
Ｆを産生する初代培養細胞や株化細胞を培養し、培養物
（培養上清、培養細胞）から分離精製してＢＤＮＦを得
ることもできる。さらに、遺伝子工学的手法によりＢＤ
ＮＦをコードする遺伝子を適切なベクターに組み込み、
これを適切な宿主に挿入して形質転換し、この形質転換
体の培養上清から目的とする組み換えＢＤＮＦを得るこ
とができ（例えば、Proc. Natl. Acad. Sci.USA Vol.88
961 (1991)、Biochem. Biophys. Res. Commun. Vol.18
6 1553 (1992)）、均質かつ大量のＢＤＮＦの生産に好
適である。上記宿主細胞は特に限定されず、従来から遺
伝子工学的手法で用いられている各種の宿主細胞、例え
ば大腸菌、枯草菌、酵母、植物又は動物細胞を用いるこ
とができる。
り、何れの製法によるＢＤＮＦも本発明の製剤に用いる
ことができる。動物組織からの抽出品の場合、医薬とし
て使用できる程度に精製されたものであれば良い（The
EMBO Jounal. Vol.5, 549-553 (1982)) 。また、ＢＤＮ
Ｆを産生する初代培養細胞や株化細胞を培養し、培養物
（培養上清、培養細胞）から分離精製してＢＤＮＦを得
ることもできる。さらに、遺伝子工学的手法によりＢＤ
ＮＦをコードする遺伝子を適切なベクターに組み込み、
これを適切な宿主に挿入して形質転換し、この形質転換
体の培養上清から目的とする組み換えＢＤＮＦを得るこ
とができ（例えば、Proc. Natl. Acad. Sci.USA Vol.88
961 (1991)、Biochem. Biophys. Res. Commun. Vol.18
6 1553 (1992)）、均質かつ大量のＢＤＮＦの生産に好
適である。上記宿主細胞は特に限定されず、従来から遺
伝子工学的手法で用いられている各種の宿主細胞、例え
ば大腸菌、枯草菌、酵母、植物又は動物細胞を用いるこ
とができる。
【０００９】また、遺伝子工学的手法によると、公知の
方法にて、天然型のＢＤＮＦアミノ酸配列の一部を付
加、置換、欠失あるいは除去してＢＤＮＦの改変タンパ
クを製造することができる。かくして得られたＢＤＮＦ
の改変タンパクの製剤も、その改変タンパクがＢＤＮＦ
と同質の生物活性、即ち、神経細胞に対する生存維持、
突起伸展、伝達物質合成促進等の生物活性を有しておれ
ば、そのアミノ酸配列の一部が欠失または他のアミノ酸
により置換されていたり、他のアミノ酸配列が一部挿入
されていたり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に１又は２以上
のアミノ酸が結合していても、本発明の技術的範囲に包
含されるものである。すなわち、マチュアＢＤＮＦの
他、Ｎ末端にメチオニンの付加したＭｅｔ−ＢＤＮＦ等
も、天然型ＢＤＮＦと同質の神経栄養因子活性を示す限
り、本発明の製剤に使用しうる。
方法にて、天然型のＢＤＮＦアミノ酸配列の一部を付
加、置換、欠失あるいは除去してＢＤＮＦの改変タンパ
クを製造することができる。かくして得られたＢＤＮＦ
の改変タンパクの製剤も、その改変タンパクがＢＤＮＦ
と同質の生物活性、即ち、神経細胞に対する生存維持、
突起伸展、伝達物質合成促進等の生物活性を有しておれ
ば、そのアミノ酸配列の一部が欠失または他のアミノ酸
により置換されていたり、他のアミノ酸配列が一部挿入
されていたり、Ｎ末端及び／又はＣ末端に１又は２以上
のアミノ酸が結合していても、本発明の技術的範囲に包
含されるものである。すなわち、マチュアＢＤＮＦの
他、Ｎ末端にメチオニンの付加したＭｅｔ−ＢＤＮＦ等
も、天然型ＢＤＮＦと同質の神経栄養因子活性を示す限
り、本発明の製剤に使用しうる。
【００１０】「界面活性剤」とは医薬または動物薬の配
合剤として許容しうる界面活性剤のことを言い、一般的
には、非イオン性の界面活性剤が用いられる。最も好適
な界面活性剤の一例は、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベー
ト８０）である。この他、ポリソルベート２０、プルロ
ニックＦ−６８、ポリエチレングリコール等が挙げられ
る。界面活性剤の添加量としては、水重量に対して、
０．００１〜１０％の範囲を用いることができ、特に
０．００１〜０．１％の重量の範囲が好ましい。
合剤として許容しうる界面活性剤のことを言い、一般的
には、非イオン性の界面活性剤が用いられる。最も好適
な界面活性剤の一例は、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベー
ト８０）である。この他、ポリソルベート２０、プルロ
ニックＦ−６８、ポリエチレングリコール等が挙げられ
る。界面活性剤の添加量としては、水重量に対して、
０．００１〜１０％の範囲を用いることができ、特に
０．００１〜０．１％の重量の範囲が好ましい。
【００１１】「塩類」とは、医薬または動物薬の配合剤
として許容しうる塩のことを言い、一般的に、塩化ナト
リウムが用いられる。塩化ナトリウムはＢＤＮＦ製剤の
浸透圧を保つ作用を有する。塩化ナトリウムの添加量は
一般的に用いられる注射剤の浸透圧比を示す量でよい。
特に医療用又は動物薬用注射剤の浸透圧比として許容さ
れる浸透圧比１〜２が好ましく、１５０〜３００ｍＭと
することが好ましい。
として許容しうる塩のことを言い、一般的に、塩化ナト
リウムが用いられる。塩化ナトリウムはＢＤＮＦ製剤の
浸透圧を保つ作用を有する。塩化ナトリウムの添加量は
一般的に用いられる注射剤の浸透圧比を示す量でよい。
特に医療用又は動物薬用注射剤の浸透圧比として許容さ
れる浸透圧比１〜２が好ましく、１５０〜３００ｍＭと
することが好ましい。
【００１２】「緩衝剤」とは、溶液製剤または凍結乾燥
製剤溶解時のｐＨを調整するために添加する緩衝剤のこ
とを意味する。代表的なものとして、リン酸バッファ
ー、トリスバッファー、クエン酸バッファー等が挙げら
れる。緩衝剤は、溶液のｐＨを調整し、ＢＤＮＦの安定
性を保つ作用を有する。本発明において製剤のｐＨは特
に限定されないが、好ましいｐＨの範囲として、５．５
〜７．５の範囲が挙げられる。すなわち、例えば、酸性
条件下ではＢＤＮＦの加水分解が促進され、ＢＤＮＦ由
来のフラグメントが生成し、アルカリ条件下では脱アミ
ド化や加水分解が促進される可能性があるからである。
また、緩衝剤の添加量として好ましい範囲は、１〜１０
０ｍＭの範囲が挙げられる。
製剤溶解時のｐＨを調整するために添加する緩衝剤のこ
とを意味する。代表的なものとして、リン酸バッファ
ー、トリスバッファー、クエン酸バッファー等が挙げら
れる。緩衝剤は、溶液のｐＨを調整し、ＢＤＮＦの安定
性を保つ作用を有する。本発明において製剤のｐＨは特
に限定されないが、好ましいｐＨの範囲として、５．５
〜７．５の範囲が挙げられる。すなわち、例えば、酸性
条件下ではＢＤＮＦの加水分解が促進され、ＢＤＮＦ由
来のフラグメントが生成し、アルカリ条件下では脱アミ
ド化や加水分解が促進される可能性があるからである。
また、緩衝剤の添加量として好ましい範囲は、１〜１０
０ｍＭの範囲が挙げられる。
【００１３】「安定化剤」としては、グリシン等のアミ
ノ酸、マンニトール等の糖アルコールが挙げられ、これ
らを併用してもよい。安定化剤を加えて製造したＢＤＮ
Ｆ製剤は、さらにＢＤＮＦの保存安定性を向上させた製
剤である。例えば、グリシン、マンニトールの添加量と
して好ましいのは、ＢＤＮＦの重量に対して、０．０１
〜１００倍の重量が挙げられ、特に好ましいのは、０．
１〜１０倍の重量が挙げられる。なお、グリシンおよび
／またはマンニトールは、溶液製剤においても用いるこ
とができるが、特に本発明のＢＤＮＦ製剤の凍結乾燥製
剤において著しい安定化を示すものである。
ノ酸、マンニトール等の糖アルコールが挙げられ、これ
らを併用してもよい。安定化剤を加えて製造したＢＤＮ
Ｆ製剤は、さらにＢＤＮＦの保存安定性を向上させた製
剤である。例えば、グリシン、マンニトールの添加量と
して好ましいのは、ＢＤＮＦの重量に対して、０．０１
〜１００倍の重量が挙げられ、特に好ましいのは、０．
１〜１０倍の重量が挙げられる。なお、グリシンおよび
／またはマンニトールは、溶液製剤においても用いるこ
とができるが、特に本発明のＢＤＮＦ製剤の凍結乾燥製
剤において著しい安定化を示すものである。
【００１４】「凍結乾燥された製剤」は、ＢＤＮＦを含
有する前記溶液製剤を通常の凍結乾燥方法で凍結乾燥す
ることで製造できる。また、熱処理等の凍結乾燥技術を
用いても製造できる。例えば、適切な溶剤（例えば、注
射用蒸留水、緩衝液、生理食塩水等）に溶解したＢＤＮ
Ｆを必要に応じて、安定化剤、緩衝剤、塩類等を加え、
フィルター等でろ過して除菌し、凍結乾燥する。本発明
の製剤は製剤化に必要な添加物、例えば、溶解補助剤、
酸化防止剤、無痛化剤、等張化剤等を含んでもよい。凍
結乾燥方法としては、例えば、常圧下で冷却凍結する凍
結工程、溶質に拘束されない自由水を減圧下で昇華乾燥
する一次乾燥工程、溶質の吸着水や結晶水を除去する二
次乾燥工程の３つの操作による方法が挙げられる（Phar
m. Tech. Japan, 8(1), 75-87 (1992)）。ＢＤＮＦは溶
液調製時、凍結乾燥時、及びその凍結乾燥製剤を再溶解
した水溶液において、非常に安定である。
有する前記溶液製剤を通常の凍結乾燥方法で凍結乾燥す
ることで製造できる。また、熱処理等の凍結乾燥技術を
用いても製造できる。例えば、適切な溶剤（例えば、注
射用蒸留水、緩衝液、生理食塩水等）に溶解したＢＤＮ
Ｆを必要に応じて、安定化剤、緩衝剤、塩類等を加え、
フィルター等でろ過して除菌し、凍結乾燥する。本発明
の製剤は製剤化に必要な添加物、例えば、溶解補助剤、
酸化防止剤、無痛化剤、等張化剤等を含んでもよい。凍
結乾燥方法としては、例えば、常圧下で冷却凍結する凍
結工程、溶質に拘束されない自由水を減圧下で昇華乾燥
する一次乾燥工程、溶質の吸着水や結晶水を除去する二
次乾燥工程の３つの操作による方法が挙げられる（Phar
m. Tech. Japan, 8(1), 75-87 (1992)）。ＢＤＮＦは溶
液調製時、凍結乾燥時、及びその凍結乾燥製剤を再溶解
した水溶液において、非常に安定である。
【００１５】なお、ＢＤＮＦ含量は、適応疾患、適用投
与経路などに応じて適宜調整することができる。ＢＤＮ
Ｆ製剤は、バイアル内に窒素を封入して密封してもよ
い。バイアル内に窒素を封入するとＢＤＮＦ変性体等の
生成が抑制され、さらに安定な製剤を得ることができ
る。
与経路などに応じて適宜調整することができる。ＢＤＮ
Ｆ製剤は、バイアル内に窒素を封入して密封してもよ
い。バイアル内に窒素を封入するとＢＤＮＦ変性体等の
生成が抑制され、さらに安定な製剤を得ることができ
る。
【００１６】
【発明の効果】本発明のＢＤＮＦ製剤は、界面活性剤の
添加により、ＢＤＮＦを安定化させた長期間の保存が可
能なものである。一般的に本発明の製剤は、次の効果を
有する。（１）ＢＤＮＦ溶液製剤保存時の白濁および凝
集物生成の防止、（２）ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤溶解時の
白濁、凝集物生成の防止、（３）ＢＤＮＦのガラスまた
は樹脂製容器への吸着の防止、及び（４）ＢＤＮＦ生物
活性の保持。また、等張化のための塩類、あるいは最適
ｐＨを保持するための緩衝剤を含有した製剤、または塩
類、緩衝剤の両剤を含有した製剤は臨床応用に適した態
様である。上記ＢＤＮＦ含有製剤を凍結乾燥することに
より安定性はさらに向上される。安定化剤としてアミノ
酸、または糖アルコールを添加したＢＤＮＦ凍結乾燥製
剤はさらに安定性を向上した製剤である。特に、アミノ
酸としてグリシン、糖アルコールとしてマンニトールを
添加した製剤は最も安定である。
添加により、ＢＤＮＦを安定化させた長期間の保存が可
能なものである。一般的に本発明の製剤は、次の効果を
有する。（１）ＢＤＮＦ溶液製剤保存時の白濁および凝
集物生成の防止、（２）ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤溶解時の
白濁、凝集物生成の防止、（３）ＢＤＮＦのガラスまた
は樹脂製容器への吸着の防止、及び（４）ＢＤＮＦ生物
活性の保持。また、等張化のための塩類、あるいは最適
ｐＨを保持するための緩衝剤を含有した製剤、または塩
類、緩衝剤の両剤を含有した製剤は臨床応用に適した態
様である。上記ＢＤＮＦ含有製剤を凍結乾燥することに
より安定性はさらに向上される。安定化剤としてアミノ
酸、または糖アルコールを添加したＢＤＮＦ凍結乾燥製
剤はさらに安定性を向上した製剤である。特に、アミノ
酸としてグリシン、糖アルコールとしてマンニトールを
添加した製剤は最も安定である。
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に
説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限定
されるものではない。
説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限定
されるものではない。
【００１７】〔実施例１〕界面活性剤の効果１ ・ＢＤＮＦ溶液製剤（対照製剤１）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム含有する１０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるよ
うに調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル
充填し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明製剤１）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水
溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、ＢＤＮＦ溶液製
剤を得た。 ・試験１ 対照製剤１および本発明製剤１を用いて、界面活性剤の
凝集物の生成防止効果を検討した。製剤を２５℃、５ｃ
ｍ×７５ｓｔｒｏｋｅ／ｍｉｎの振とう条件にて保存
し、凝集物の生成が目視にて観察される保存日数を調べ
た。その結果を表１に示した。Ｔｗｅｅｎ８０の添加に
より凝集物の生成が抑制された。
液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるよ
うに調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル
充填し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明製剤１）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水
溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、ＢＤＮＦ溶液製
剤を得た。 ・試験１ 対照製剤１および本発明製剤１を用いて、界面活性剤の
凝集物の生成防止効果を検討した。製剤を２５℃、５ｃ
ｍ×７５ｓｔｒｏｋｅ／ｍｉｎの振とう条件にて保存
し、凝集物の生成が目視にて観察される保存日数を調べ
た。その結果を表１に示した。Ｔｗｅｅｎ８０の添加に
より凝集物の生成が抑制された。
【表１】
【００１８】〔実施例２〕界面活性剤の効果２ ・ＢＤＮＦ溶液製剤（対照製剤２）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム含有する１０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを０．１ｍｇ／ｍｌになる
ように調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイア
ル充填し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明製剤２）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを０．１ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ
水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、ＢＤＮＦ溶液
製剤を得た。 ・試験２ 本発明製剤および対照製剤２を用いて、界面活性剤の容
器への吸着防止効果を検討した。ガラスバイアル充填前
後のＢＤＮＦ濃度を吸光度法を用いて測定し、ガラスバ
イアルへの吸着量を算出した。その結果を表２に示し
た。Ｔｗｅｅｎ８０の添加によりＢＤＮＦのガラスバイ
アルへの吸着量が減少した。
液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを０．１ｍｇ／ｍｌになる
ように調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイア
ル充填し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明製剤２）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを０．１ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ
水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、ＢＤＮＦ溶液
製剤を得た。 ・試験２ 本発明製剤および対照製剤２を用いて、界面活性剤の容
器への吸着防止効果を検討した。ガラスバイアル充填前
後のＢＤＮＦ濃度を吸光度法を用いて測定し、ガラスバ
イアルへの吸着量を算出した。その結果を表２に示し
た。Ｔｗｅｅｎ８０の添加によりＢＤＮＦのガラスバイ
アルへの吸着量が減少した。
【表２】
【００１９】〔実施例３〕ｐＨの影響 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明溶液製剤３）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。１ＮＨＣｌ及び１ＮＮａＯＨを用いてＢＤＮ
Ｆ水溶液のｐＨを４、５、６、７、８、９の６段階に設
定された６つの溶液を調製した。無菌的にバイアル充填
し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤３）の作
製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水
溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条件
に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得た。
なお、表中の→は温度を変化させたことを示す。
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。１ＮＨＣｌ及び１ＮＮａＯＨを用いてＢＤＮ
Ｆ水溶液のｐＨを４、５、６、７、８、９の６段階に設
定された６つの溶液を調製した。無菌的にバイアル充填
し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤３）の作
製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを２０ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水
溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条件
に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得た。
なお、表中の→は温度を変化させたことを示す。
【表３】 ・試験３ 本発明溶液製剤３および本発明凍結乾燥製剤３を用い
て、保存安定性に対するｐＨの影響を検討した。作製し
た製剤を２５、４０℃にて３ヶ月保存し、保存後のＢＤ
ＮＦ含量、重合体含量、分解物含量を測定した（各測定
法は以下に示す）。表４に示すように、ＢＤＮＦ含量は
塩基性条件下にて低下が認められ、酸性条件下では含量
低下は僅かであった。また、重合体含量は酸性条件下で
はその生成は僅かであったが、塩基性条件下では増大し
た。一方、分解物含量は塩基性条件下に比べ、酸性条件
下にてその生成が高値であった。
て、保存安定性に対するｐＨの影響を検討した。作製し
た製剤を２５、４０℃にて３ヶ月保存し、保存後のＢＤ
ＮＦ含量、重合体含量、分解物含量を測定した（各測定
法は以下に示す）。表４に示すように、ＢＤＮＦ含量は
塩基性条件下にて低下が認められ、酸性条件下では含量
低下は僅かであった。また、重合体含量は酸性条件下で
はその生成は僅かであったが、塩基性条件下では増大し
た。一方、分解物含量は塩基性条件下に比べ、酸性条件
下にてその生成が高値であった。
【００２０】ＢＤＮＦ含量測定法 ＢＤＮＦ濃度を２ｍｇ／ｍｌに希釈後、逆相クロマトグ
ラフ法を用いて、下記の条件にて測定した。 カラム ：ＶＹＤＡＣ２１４ＢＴＰＣ４ 移動相 ：Ａ液０．１％トリフロロ酢酸水溶液 Ｂ液０．１％トリフロロ酢酸−アセトニトリル溶液 グラジエント条件：時間／０、３６、４２、４６、４
７、６６（分）において、Ｂ液濃度／２６、３５、３
５、９０、２６、２６（％） 検出 ：２１５ｎｍ 流量 ：１．０ｍｌ／ｍｉｎ カラム温度：６０℃ アプライ ：２５μｌ
ラフ法を用いて、下記の条件にて測定した。 カラム ：ＶＹＤＡＣ２１４ＢＴＰＣ４ 移動相 ：Ａ液０．１％トリフロロ酢酸水溶液 Ｂ液０．１％トリフロロ酢酸−アセトニトリル溶液 グラジエント条件：時間／０、３６、４２、４６、４
７、６６（分）において、Ｂ液濃度／２６、３５、３
５、９０、２６、２６（％） 検出 ：２１５ｎｍ 流量 ：１．０ｍｌ／ｍｉｎ カラム温度：６０℃ アプライ ：２５μｌ
【００２１】重合体・分解物含量測定法 ＢＤＮＦ濃度を2mg/mlに希釈後、ゲルろ過クロマトグラ
フ法を用いて、下記の条件にて測定した。 カラム ：ＳＵＰＥＲＤＥＸ７５ＨＲ 移動相 ：３００ｍＭリン酸ナトリウム、５００ｍＭ
塩化ナトリウム、５％ｎ−プロパノール、ｐＨ６ 検出 ：２１５ｎｍ 流量 ：０．６ｍｌ／ｍｉｎ アプライ ：１０μｌ
フ法を用いて、下記の条件にて測定した。 カラム ：ＳＵＰＥＲＤＥＸ７５ＨＲ 移動相 ：３００ｍＭリン酸ナトリウム、５００ｍＭ
塩化ナトリウム、５％ｎ−プロパノール、ｐＨ６ 検出 ：２１５ｎｍ 流量 ：０．６ｍｌ／ｍｉｎ アプライ ：１０μｌ
【表４】 注）＊：全ピーク面積に対する割合を示す
【００２２】〔実施例４〕凍結乾燥工程中の安定性およ
び剤形の効果 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明溶液製剤４）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。無菌的にバイアル充填し、窒素をバイアル内
に封入後、打栓し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤４）の作
製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条件に
従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得た。バ
イアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・試験４ 凍結乾燥工程中におけるＢＤＮＦの安定性を確認するた
め、実施例４において、凍結乾燥前のＢＤＮＦ溶液及び
凍結乾燥製剤を再溶解したＢＤＮＦ水溶液を用いてＢＤ
ＮＦ含量の変化及び生物活性変化を測定した（生物活性
測定法は以下に示す）。その結果を表５に示す。凍結乾
燥前後でＢＤＮＦ含量および生物活性に変化が認められ
なかったことから、凍結乾燥工程及び再溶解においてＢ
ＤＮＦは安定であり、ＢＤＮＦを凍結乾燥製剤とするこ
とが可能であることが示された。
び剤形の効果 ・ＢＤＮＦ溶液製剤（本発明溶液製剤４）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。無菌的にバイアル充填し、窒素をバイアル内
に封入後、打栓し、ＢＤＮＦ溶液製剤を得た。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤４）の作
製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製し、ＢＤＮＦ水溶
液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条件に
従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得た。バ
イアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・試験４ 凍結乾燥工程中におけるＢＤＮＦの安定性を確認するた
め、実施例４において、凍結乾燥前のＢＤＮＦ溶液及び
凍結乾燥製剤を再溶解したＢＤＮＦ水溶液を用いてＢＤ
ＮＦ含量の変化及び生物活性変化を測定した（生物活性
測定法は以下に示す）。その結果を表５に示す。凍結乾
燥前後でＢＤＮＦ含量および生物活性に変化が認められ
なかったことから、凍結乾燥工程及び再溶解においてＢ
ＤＮＦは安定であり、ＢＤＮＦを凍結乾燥製剤とするこ
とが可能であることが示された。
【００２３】生物活性測定法 ＢＤＮＦレセプターであるｔｒｋＢ遺伝子を導入させた
ＢＡＦ−ｔｒｋＢ細胞をＢＤＮＦで処理し、その際の細
胞増殖性を指標にＢＤＮＦ活性を測定した。
ＢＡＦ−ｔｒｋＢ細胞をＢＤＮＦで処理し、その際の細
胞増殖性を指標にＢＤＮＦ活性を測定した。
【表５】
【００２４】・試験５ 溶液製剤と凍結乾燥製剤の保存安定性の相違を確認する
ため、実施例４で作製した製剤を用いて、調製直後、お
よび２５℃、４０℃にて３ヶ月保存後にＢＤＮＦ含量を
測定した。その結果を表６に示す。凍結乾燥製剤は、溶
液製剤に比べて、重合体含量がやや高かったが、ＢＤＮ
Ｆ含量は高く、分解物含量が低かった。
ため、実施例４で作製した製剤を用いて、調製直後、お
よび２５℃、４０℃にて３ヶ月保存後にＢＤＮＦ含量を
測定した。その結果を表６に示す。凍結乾燥製剤は、溶
液製剤に比べて、重合体含量がやや高かったが、ＢＤＮ
Ｆ含量は高く、分解物含量が低かった。
【表６】
【００２５】〔実施例５〕界面活性剤の効果３ ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤５）の作
製 実施例４記載の方法でＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得、本発
明凍結乾燥製剤５とした。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（対照凍結乾燥製剤５）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウムを含有する１０ｍＭリン酸緩
衝液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるよ
うに調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル
充填し、表３に示す条件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮ
Ｆ凍結乾燥製剤を得た。バイアル内に窒素を封入し、打
栓した。 ・試験６ 凍結乾燥製剤の溶解後の性状に及ぼす界面活性剤の効果
を確認するため、対照凍結乾燥製剤５および本発明凍結
乾燥製剤５を精製水を用いて溶解し、性状を目視にて観
察した。その結果を表７に示す。界面活性剤を添加した
本発明凍結乾燥製剤５では、溶解後の性状は澄明であっ
たが、界面活性剤の添加していない対照凍結乾燥製剤５
では、溶解後白濁した。
製 実施例４記載の方法でＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得、本発
明凍結乾燥製剤５とした。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（対照凍結乾燥製剤５）の作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウムを含有する１０ｍＭリン酸緩
衝液（ｐＨ７．０）でＢＤＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるよ
うに調製し、ＢＤＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル
充填し、表３に示す条件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮ
Ｆ凍結乾燥製剤を得た。バイアル内に窒素を封入し、打
栓した。 ・試験６ 凍結乾燥製剤の溶解後の性状に及ぼす界面活性剤の効果
を確認するため、対照凍結乾燥製剤５および本発明凍結
乾燥製剤５を精製水を用いて溶解し、性状を目視にて観
察した。その結果を表７に示す。界面活性剤を添加した
本発明凍結乾燥製剤５では、溶解後の性状は澄明であっ
たが、界面活性剤の添加していない対照凍結乾燥製剤５
では、溶解後白濁した。
【表７】
【００２６】〔実施例６〕凍結乾燥製剤の安定性に及ぼ
す安定化剤の効果 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ａ）の
作製 実施例４記載の方法でＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得、本発
明凍結乾燥製剤６Ａとした。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ｂ）の
作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製した。続いて、マ
ンニトールを１０ｍｇ／ｍｌになるように添加し、ＢＤ
ＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示
す条件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を
得た。バイアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ｃ）の
作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製した。続いて、グ
リシンを１０ｍｇ／ｍｌになるように添加し、ＢＤＮＦ
水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条
件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得
た。バイアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・試験７ 本発明凍結乾燥製剤６Ａ、６Ｂおよび６Ｃを用いて、調
製直後、及び４０℃保存、１ヶ月後のＢＤＮＦ含量を測
定した。その結果を表８に示す。また、製剤６Ａおよび
６Ｂを用いて、調製直後、及び２５℃、４０℃、３ヶ月
保存後のＢＤＮＦ含量を測定した。その結果を表９に示
す。安定化剤を添加した製剤は、無添加の製剤に比べ安
定性の向上が認められた。
す安定化剤の効果 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ａ）の
作製 実施例４記載の方法でＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得、本発
明凍結乾燥製剤６Ａとした。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ｂ）の
作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製した。続いて、マ
ンニトールを１０ｍｇ／ｍｌになるように添加し、ＢＤ
ＮＦ水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示
す条件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を
得た。バイアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤（本発明凍結乾燥製剤６Ｃ）の
作製 １５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０
を含有する１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）でＢＤ
ＮＦを５ｍｇ／ｍｌになるように調製した。続いて、グ
リシンを１０ｍｇ／ｍｌになるように添加し、ＢＤＮＦ
水溶液を得た。無菌的にバイアル充填し、表３に示す条
件に従って凍結乾燥して、ＢＤＮＦ凍結乾燥製剤を得
た。バイアル内に窒素を封入し、打栓した。 ・試験７ 本発明凍結乾燥製剤６Ａ、６Ｂおよび６Ｃを用いて、調
製直後、及び４０℃保存、１ヶ月後のＢＤＮＦ含量を測
定した。その結果を表８に示す。また、製剤６Ａおよび
６Ｂを用いて、調製直後、及び２５℃、４０℃、３ヶ月
保存後のＢＤＮＦ含量を測定した。その結果を表９に示
す。安定化剤を添加した製剤は、無添加の製剤に比べ安
定性の向上が認められた。
【表８】 注）本検討に用いた製剤６Ａ、６Ｂ、６Ｃでは、バイアル内に窒素封入を実施 していない。
【表９】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＣＮ Ａ６１Ｋ 9/14 Ｍ 9/08 Ｂ 9/14 Ｅ 9/19 37/02 ＡＡＨ 47/10 ＡＡＫ 47/14 ＡＡＬ 47/18 ＡＢＬ ＡＡＭ ＡＣＮ (72)発明者 田中克実 大阪府茨木市蔵垣内１丁目３番45号 住友 製薬株式会社内 (72)発明者 熊野雅史 大阪府茨木市蔵垣内１丁目３番45号 住友 製薬株式会社内
Claims (15)
- 【請求項１】界面活性剤を含有することを特徴とするＢ
ＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）安定化製剤。 - 【請求項２】界面活性剤が非イオン性界面活性剤である
請求項１記載の製剤。 - 【請求項３】非イオン界面活性剤がＴｗｅｅｎ８０であ
る請求項２記載の製剤。 - 【請求項４】Ｔｗｅｅｎ８０の濃度が０．００１％から
１０％（ｗ／ｖ）である請求項３記載の製剤。 - 【請求項５】塩類を含有する請求項１記載の製剤。
- 【請求項６】塩類が塩化ナトリウムである請求項５記載
の製剤。 - 【請求項７】緩衝剤を含有する請求項１記載の製剤。
- 【請求項８】緩衝剤がリン酸緩衝液である請求項７記載
の製剤。 - 【請求項９】ｐＨが５．５から７．５である請求項１記
載の製剤。 - 【請求項１０】凍結乾燥された請求項１記載の製剤。
- 【請求項１１】安定化剤を含有する請求項１０記載の製
剤。 - 【請求項１２】安定化剤としてアミノ酸および糖アルコ
ールの内少なくとも１つを含有する請求項１１記載の製
剤。 - 【請求項１３】アミノ酸がグリシン、糖アルコールがマ
ンニトールである請求項１２記載の製剤。 - 【請求項１４】安定化剤のＢＤＮＦに対する重量比が
０．１から１０である請項１１記載の製剤。 - 【請求項１５】０．０１％から１０％（ｗ／ｖ）のＴｗ
ｅｅｎ８０および安定化剤としてマンニトールを含有す
るＢＤＮＦ凍結乾燥製剤。
Priority Applications (11)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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