JP2023517920A - コロナウイルス感染の治療 - Google Patents

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Abstract

本開示は、概して、ウイルス学、感染性疾患、及び医薬の分野に関し、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲ８、又はＭＥＲＳによって引き起こされるものなどの、ＣｏＶ媒介性疾患の治療のための化合物、組成物、方法、及びキットに関する。より具体的には、本開示は、２０１９年新型コロナウイルスを含むコロナウイルスを治療することができるコロナウイルスに対する有効阻害剤に関する。一実施形態では、本開示は、コロナウイルスの有効阻害剤としてのＷＸ－６７１の新しい用途及びヒトにおけるコロナウイルス感染を治療するための医薬品の調製におけるその用途を提供する。一実施形態では、本開示は、コロナウイルスの有効阻害剤としてのＡＢＣ２９４６４０の新しい用途及びヒトにおけるコロナウイルス感染を治療するための医薬品の調製におけるその用途を提供する。

Description

コロナウイルスは、細胞の細胞質内で複製する、脂質エンベローププラス鎖ＲＮＡウイルス（＋ｓｓＲＮＡ）である。２００２年以前、コロナウイルスは、重要なヒト病原体であるとは見なされていなかった。ＨＣｏＶ－２２９Ｅ及びＨＣｏＶ－ＯＣ４３などの他のヒトコロナウイルスは、健康な成人においては、軽度の呼吸器感染のみしかもたらさなかった。しかしながら、２００２年に、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（severe acute respiratory syndrome coronavirus、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）が、中国の広東省に出現した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶが主に東南アジアに影響を与え、特に中国全土、香港、台湾、シンガポール、及びベトナムで大流行する間に、そのウイルスは、上記の領域外に運ばれていた。
２０１２年には、中東呼吸器症候群コロナウイルス（Middle East respiratory syndrome coronavirus、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）が、サウジアラビアにおいて重度の呼吸器疾患を有する患者において検出された。ヒトにおけるＭＥＲＳ－ＣｏＶ感染症の臨床的特徴は、無症候性から非常に重度の肺炎までの範囲に及び、潜在的には、急性呼吸窮迫症候群、敗血症性ショック、及び結果として死に至る多臓器不全を発生させる。ＭＥＲＳ－ＣｏＶ感染の最初の症例が報告され、ウイルスが単離されて以来、そのウイルスに関する疫学、生態学、及び生物学を理解するための相当の進歩がなされている。リアルタイム逆転写（reverse transcription、ＲＴ）－ＰＣＲにより、ＭＥＲＳ－ＣｏＶへの急性感染を検出するためのいくつかのアッセイが開発されており、広範囲に使用されている。
２０１９年には、新型のコロナウイルス（novel coronavirus、ｎＣｏＶ）が世界で出現し、現在、新型コロナウイルス感染症２０１９（coronavirus disease 2019、ＣＯＶＩＤ－１９）を引き起こすことが知られている。ＣｏＶＩＤ－１９は、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2、ＳＡＲＳコロナウイルス－２又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）によって引き起こされる感染性疾患であるが、このウイルスは、ＳＡＲＳウイルスに系統学的に密接に関連するウイルスである。世界保健機関（World Health Organization、ＷＨＯ）は、２０１９年～２０２０年のコロナウイルスの大流行を国際的に懸念される公衆衛生上の緊急事態（Public Health Emergency of International Concern、ＰＨＥＩＣ）であると宣言した。ほとんどの患者について、コロナウイルスは主に呼吸器疾患を引き起こすため、ＣＯＶＩＤ－１９は患者の肺に始まり、肺で終了する。
本発明は、概して、ウイルス学、感染性疾患、及び医学の分野に関する。一実施形態では、本発明は、ヒトにおけるコロナウイルス感染を治療するための薬剤の調製において、遊離塩基として、又はその塩としてのＡＢＣ２９４６４０の新しい用途を提供する。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（2019 coronavirus disease、ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための方法が開示され、これは、それを必要とする人に、有効量のＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000002
 を、その遊離塩基として又はその塩として投与することを含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は塩酸塩として存在する。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は、薬学的に許容される担体材料と組み合わせられる。一実施形態では、薬学的に許容される担体材料は、緩衝生理食塩水（physiologically buffered saline）である。一実施形態では、緩衝生理食塩水に懸濁されたＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を含む懸濁液が形成され、投与することは、チューブを使用して懸濁液を胃に直接送達することを含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０及び任意選択で薬学的に許容される担体材料は、経口投与に好適な単位剤形になっている。一実施形態では、剤形は、固体剤形である。一実施形態では、固体剤形はカプセル剤である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは野生型である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは、天然に存在するコロナウイルス変異体である。一実施形態では、経口投与に好適な単位剤形は、２５０ｍｇのＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を有するカプセルであり、投与することは、ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩の総１日投与量を１０００ｍｇとするために、２つのカプセルを１日２回、少なくとも１０日間投与されることを含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０の有効量の投与により、ウイルス負荷が少なくとも１０％減少する。
本明細書に示される態様によれば、有効量のＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000003
 を、その遊離塩基又は塩として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を有するヒトに投与することを含む治療方法が開示される。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は塩酸塩として存在する。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は、薬学的に許容される担体材料と組み合わせられる。一実施形態では、薬学的に許容される担体材料は、緩衝生理食塩水である。一実施形態では、緩衝生理食塩水に懸濁されたＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を含む懸濁液が形成され、投与することは、チューブを使用して懸濁液を胃に直接送達することを含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０及び任意選択で薬学的に許容される担体材料は、経口投与に好適な単位剤形になっている。一実施形態では、剤形は、固体剤形である。一実施形態では、固体剤形はカプセル剤である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは野生型である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは、天然に存在するコロナウイルス変異体である。一実施形態では、経口投与に好適な単位剤形は、２５０ｍｇのＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を有するカプセルであり、投与することは、ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩の総１日投与量を１０００ｍｇとするために、２つのカプセルを１日２回、少なくとも１０日間投与されることを含む。
本明細書に示される態様によれば、その遊離塩基として、又はその塩としてコロナウイルス感染の治療において使用するためのＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000004
 が開示される。
本明細書に示される態様によれば、その遊離塩基として、又はその塩として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療に使用するためのＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000005
 が開示される。
本明細書に示される態様によれば、その遊離塩基として、又はその塩として、コロナウイルス感染の治療に使用するための、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）が開示される。
本明細書に示される態様によれば、その遊離塩基として、又はその塩として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療に使用するための、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための医薬品の製造のためのＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000006
 の、その遊離塩基として、又はその塩としての用途が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための医薬品の製造のための、ＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000007
 の、その遊離塩基として、又はその塩としての用途が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための医薬品の製造のための、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）の、その遊離塩基として、又はその塩としての用途が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を治療するための医薬品の製造のための、化合物（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）の、その遊離塩基として、又はその塩としての用途が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための、ＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000008
 を、その遊離塩基として、又はその塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための、ＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000009
 を、その遊離塩基として、又はその塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）を、その遊離塩基として、又はその塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）を、その遊離塩基として、又はその塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＡＢＣ２９４６４０、すなわち
Figure 2023517920000010
 を、その遊離塩基として、又はその塩として含む抗コロナウイルス感染剤が開示される。
本明細書に示される態様によれば、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）を、その遊離塩基として、又はその塩として含む抗コロナウイルス感染剤が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ヒトコロナウイルス感染の治療のための方法が開示され、その方法は、治療有効量のＡＢＣ２９４６４０、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）又はその薬学的に許容される塩を、それを必要とする対象に投与することを含む。一実施形態では、本方法は、ＡＢＣ２９４６４０を投与する前に、対象がヒトコロナウイルスに感染していることを診断的に確認することを更に含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は塩酸塩として存在する。一実施形態では、コロナウイルス感染は、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）である。
本明細書に示される態様によれば、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）コロナウイルス感染を治療する方法が開示され、この方法は、ＡＢＣ２９４６４０、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）又はその薬学的に許容される塩の治療有効用量の１回分以上を、それを必要とする対象に、少なくとも１０日間投与することを含む。一実施形態では、本方法は、化合物を投与する前に、対象がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染していることを診断的に確認することを更に含む。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は塩酸塩として存在する。一実施形態では、１日あたりのＡＢＣ２９４６４０の総投与量は、約２５０ｍｇ～約１５００ｍｇから、発生（occurrence）ごとに独立して選択される。
本明細書に示される態様によれば、ＣｏＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）コロナウイルス感染を治療するための方法が開示され、本方法は、薬学的に有効な量のＡＢＣ２９４６４０、（３－（４－クロロ－フェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）－アミド）、又はその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトである対象に投与することを含み、ＡＢＣ２９４６４０は、細胞内ウイルス複製と、下流での炎症／免疫応答との両方に関与する宿主細胞因子、スフィンゴシンキナーゼ－２（sphingosine kinase 2、ＳＫ２）に作用する能力を有する。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルスに感染した宿主細胞におけるコロナウイルスの複製を調節する方法が開示され、本方法は、宿主細胞に、ＡＢＣ２９４６４０を、その遊離塩基として、又はその塩として、ウイルスの複製を調節するのに有効な量で投与することを含む。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染を治療するための薬物の調製における、ＡＢＣ２９４６４０の、その遊離塩基又はその塩としての用途が開示される。一実施形態では、コロナウイルスは、２０１９年新型コロナウイルスＣＯＶＩＤ－１９である。一実施形態では、コロナウイルス感染は、コロナウイルス肺炎である。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は塩酸塩として存在する。一実施形態では、ＡＢＣ２９４６４０は、細胞内ウイルス複製と、下流での炎症／免疫応答との両方に関与する宿主細胞因子、スフィンゴシンキナーゼ－２に対する活性を有する。
本明細書に例示される態様によれば、本発明は、包装された医薬製品を特徴とする。包装された医薬製品は、容器と、容器内の経口投与に適した複数のＡＢＣ２９４６４０単位剤形と、及び容器に関連付けられ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を治療するためのＡＢＣ２９４６４０の投与を示す説明文（例えば、ラベル又は挿入物）と、を含む。
一実施形態では、本発明は、ヒトにおけるコロナウイルス感染を治療するための薬剤の調製における、ＷＸ－６７１の、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物としての、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての新たな用途を提供する。
本明細書に示される態様によれば、それを必要とするヒトにおける、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための方法が開示され、その方法は、有効量のＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000011
 を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物としての、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として、投与することを含む。一実施形態では、ＷＸ－６７１は、硫酸水素塩として存在する。一実施形態では、ＷＸ－６７１は、薬学的に許容される担体材料と組み合わせられる。一実施形態では、ＷＸ－６７１及び任意選択で薬学的に許容される担体材料は、経口投与に好適な単位剤形である。一実施形態では、剤形は、固体剤形である。一実施形態では、固体剤形はカプセル剤である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは野生型である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは、天然に存在するコロナウイルス変異体である。一実施形態では、２００ｍｇのＷＸ－６７１が、単一のカプセルで、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたり２００ｍｇの総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。一実施形態では、４００ｍｇのＷＸ－６７１が、２つのカプセルで、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたり４００ｍｇの総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。一実施形態では、約２３１ｍｇのＷＸ－６７１．１（ウパモスタット）が、単一のカプセルで、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたりその遊離形態で２００ｍｇ相当の総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。一実施形態では、約４６３ｍｇのＷＸ－６７１．１（ウパモスタット）が、２つのカプセルで、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたりその遊離形態で４００ｍｇ相当の総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。一実施形態では、ＷＸ－６７１の有効量の投与により、ウイルス負荷が少なくとも１０％減少する。
本明細書に示される態様によれば、有効量のＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000012
 を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を有するヒトに投与することを含む治療方法が開示される。一実施形態では、ＷＸ－６７１は、硫酸水素塩として存在する。一実施形態では、ＷＸ－６７１は、薬学的に許容される担体材料と組み合わせられる。一実施形態では、ＷＸ－６７１及び任意選択で薬学的に許容される担体材料は、経口投与に好適な単位剤形である。一実施形態では、剤形は、固体剤形である。一実施形態では、固体剤形はカプセル剤である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは野生型である。一実施形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは、天然に存在するコロナウイルス変異体である。一実施形態では、ＷＸ－６７１．１（ウパモスタット）は、２００ｍｇの遊離塩基を含む単一のカプセルとして投与され、単一のカプセルは、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたり２００ｍｇの総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。一実施形態では、ＷＸ－６７１．１（ウパモスタット）は、それぞれが２００ｍｇの２つのカプセルとして投与され、２つのカプセルは、１日１回、少なくとも１０日間にわたり、１日あたり４００ｍｇの総投与量で、それを必要とするヒトに投与される。
本明細書に例示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療に使用するための、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、かつ遊離塩基として、又は塩としての、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000013
 が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療に使用するための、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、かつ遊離塩基として、又は塩としての、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000014
 が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療に使用するための、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての、（Ｎ－α－（２、４、６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療に使用するための、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての、（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための医薬品の製造のための、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000015
 の、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物としての、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての用途が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための医薬品の製造のための、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000016
 の、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物としての、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての用途が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための医薬品の製造のための、（Ｎ－α－（２、４、６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）の、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物としての、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての用途が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための医薬品の製造のための、（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）の、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての用途が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000017
 を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000018
 を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染の治療のための、（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む医薬組成物が開示される。
本明細書に例示される態様によれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための医薬組成物、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩としての（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ＷＸ－６７１、すなわち
Figure 2023517920000019
 を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む抗コロナウイルス感染剤が開示される。
本明細書に示される態様によれば、（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む抗コロナウイルス感染剤が開示される。
本明細書に示される態様によれば、ヒトコロナウイルス感染の治療のための方法が開示されており、その方法は、治療有効量のＮ－α（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシ－カルボニルピペラジド－塩酸塩若しくはそのプロドラッグＮ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドのうちの１つから選択される化合物を、それを必要とする対象に投与することを含み、選択された化合物は、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として存在してよい。一実施形態では、本方法は、化合物を投与する前に、対象がヒトコロナウイルスに感染していることを診断的に確認することを更に含む。一実施形態では、コロナウイルス感染は、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）である。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドであり、かつ経口投与可能な形態である。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシ－カルボニルピペラジド－塩酸塩であり、かつ静脈内的又は筋肉内的に送達される注射可能な剤形である。一実施形態では、化合物は、硫酸塩又は硫酸水素塩として存在するＮ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドである。
一実施形態では、化合物は、Ｌ立体配座で存在する、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドである。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－（Ｌ）－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジニウム硫酸水素塩である。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドであり、１日あたり２００ｍｇの投与量で投与されるべきである。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドであり、１日あたり４００ｍｇの投与量で投与されるべきである。
本明細書に示される態様によれば、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）コロナウイルス感染を治療する方法が開示され、その方法は、Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシ－カルボニルピペラジド－塩酸塩、又はそのプロドラッグである、Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドのうちの１つから選択される化合物の、治療有効投与量の１回分以上を、それを必要とする対象に、少なくとも１４日間投与することを含み、選択された化合物は、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として存在し得る。一実施形態では、本方法は、化合物を投与する前に、対象がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染していることを診断的に確認することを更に含む。一実施形態では、１日あたりの化合物Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドの総投与量は、約２００ｍｇ～約４００ｍｇから、発生ごとに独立して選択される。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－（Ｌ）－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジニウム硫酸水素塩である。
本明細書に例示される態様によれば、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）コロナウイルス感染を治療する方法が開示され、その方法は、治療的に許容される量のＮ－α（２、４、６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシ－カルボニルピペラジド－塩酸塩又はそのプロドラッグＮ－α－（２、４、６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノフェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドのうちの１つから選択される化合物を、それを必要とするヒトである対象に、投与することを含み、選択された化合物は、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として存在することができ、その化合物は、血球凝集素（ＨＡ）活性化ＩＩ型膜貫通セリンプロテアーゼ（type II transmembrane serine protease、ＴＴＳＰ）（hemagglutinin-activating type II transmembrane serine protease）をバインドする能力を有して、コロナウイルスへの曝露後のヒトである対象におけるコロナウイルス複製を減少させる。一実施形態では、ＴＴＳＰは、膜貫通プロテアーゼセリンＳＩメンバー２（transmembrane protease serine SI member 2、ＴＭＰＲＳＳ２）である。一実施形態では、ＴＴＳＰは、膜貫通プロテアーゼセリン１１Ａ（transmembrane protease serine 11A、ＴＭＰＲＳＳ１１（Ａ））である。一実施形態では、本方法は、化合物を投与する前に、対象がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染していることを診断的に確認することを更に含む。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－（Ｌ）－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジニウム硫酸水素塩である。
本明細書に例示される態様によれば、コロナウイルスに感染した宿主細胞におけるコロナウイルスの複製を調節する方法が開示され、本方法は、Ｎ－α（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシ－カルボニルピペラジド－塩酸塩若しくはそのプロドラッグＮ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジドのうちの１つから選択される化合物を宿主細胞に投与することを含み、選択された化合物は、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として、ウイルスの複製を調節するのに有効な量で存在し得る。一実施形態では、化合物は、Ｎ－α－（２，４，６トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－（Ｌ）－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジニウム硫酸水素塩である。
本明細書に示される態様によれば、コロナウイルス感染を治療するための薬物の調製における、ＷＸ－６７１の用途が開示される。一実施形態では、コロナウイルスは、２０１９年新型コロナウイルスＣＯＶＩＤ－１９である。一実施形態では、コロナウイルス感染は、コロナウイルス肺炎である。一実施形態では、ＷＸ－６７１は、宿主セリンプロテアーゼ阻害剤に対する活性を有し、宿主細胞へのスパイクタンパク質駆動侵入をブロックする。
本明細書に例示される態様によれば、本発明は、包装された医薬製品を特徴とする。包装された医薬製品は、容器と、容器内の経口投与に適した複数のＷＸ－６７１単位剤形と、及び容器に関連付けられ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を治療するためのＷＸ－６７１の投与を示す説明文（例えば、ラベル又は挿入物）と、を含む。
本開示の実施形態は、添付の図面を参照して更に説明される。示される図面は必ずしも縮尺どおりではなく、その代わりに、概して、本開示の実施形態の原理を例示することに重点が置かれている。
本明細書においてヒト気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ）と称される、ヒトＥｐｉＡｉｒｗａｙ（商標）細胞培養モデルを描いた図である。 オパガニブ処理され、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後に、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少が、薬理学的に妥当な濃度で観察されたことを示すグラフである。 オパガニブ処理され、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後に、強力な抗ウイルス効果が見られる投与量範囲にわたって、細胞傷害性が限定されたことが観察されたことを示すグラフである。 ＷＸ－ＵＫ１処理された、及びウパモスタット処理された、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後に、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少が、薬理学的に妥当な濃度で観察されたことを示すグラフである。ウイルスは、頂端洗浄でのＴＣＩＤ５０アッセイを介して滴定された（titered）。各記号は、試験された３つの複製から平均化された力価を表す。 ウパモスタット処理され、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後に、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少が薬理学的に妥当な濃度で観察されたことを示すグラフである。ウイルスは、頂端洗浄でのプラーク減少アッセイを介して滴定された。各記号は、試験された３つの複製から平均化された力価を表す。 ＷＸ－ＵＫ１処理及びウパモスタット処理され、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後に、強力な抗ウイルス効果が見られる投与量範囲にわたって、細胞傷害性が制限されたことが観察されたことを示すグラフである。 式１をフィットさせた曲線であり、ｙ軸上には分数速度を取り、ｘ軸上にはＷＸ－ＵＫ１濃度を取った曲線である。グラフは、ＷＸ－ＵＫ１がＴＭＰＲＳＳ２の活性をどのように阻害するかを示す。 式１をフィットさせた曲線であり、ｙ軸上には分数速度を取り、ｘ軸上にはＷＸ－ＵＫ１濃度を取った曲線である。グラフは、ＷＸ－ＵＫ１がＴＭＰＲＳＳ１１Ａの活性をどのように阻害するかを示す。 Ｃａｌｕ－３細胞における、ＳＡＲＳ－２－Ｓにより駆動された侵入に対するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１による阻害を示すグラフである。Ｃａｌｕ－３細胞は、示された濃度のウパモスタット、ＷＸ－ＵＫ１、メシル酸カモスタット、又はクロロキンと共にプレインキュベートされ、続いてＶＳＶ－ＳＡＲＳ－２Ｓタンパク質を有する擬似粒子を接種された。シュードタイプの侵入を、細胞溶解物におけるルシフェラーゼ活性を決定することによって分析した。四重複製試料で実施された単一の実験の結果を示す。エラーバーは標準偏差（standard deviation、ＳＤ）を示す。 Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞における、ＳＡＲＳ－２－Ｓにより駆動された侵入に対するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１による阻害を示すグラフである。Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞は、示された濃度のウパモスタット、ＷＸ－ＵＫ１、メシル酸カモスタット、又はクロロキンと共にプレインキュベートされ、続いてＶＳＶ－ＳＡＲＳ－２Ｓタンパク質を有する擬似粒子を接種された。偽型の侵入を、細胞溶解物におけるルシフェラーゼ活性を決定することによって分析した。四重複製試料で実施された単一の実験の結果を示す。エラーバーは標準偏差（ＳＤ）を示す。 Ｃａｌｕ－３細胞における、ＶＳＶ－ｇによって駆動される侵入の、ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１による阻害を示すグラフである。Ｃａｌｕ－３細胞は、示された濃度のウパモスタット、ＷＸ－ＵＫ１、メシル酸カモスタット、又はクロロキンと共にプレインキュベートされ、続いてＶＳＶ－ｇタンパク質を有する擬似粒子を接種された。偽型の侵入を、細胞溶解物におけるルシフェラーゼ活性を決定することによって分析した。四重複製試料で実施された単一の実験の結果を示す。エラーバーは標準偏差（ＳＤ）を示す。 実施例７に記載の、ＣＯＶＩＤ－１９肺炎における、オパガニブの無作為化二重盲検プラセボ対照化第２ａ相試験からの、統計分析後少なくとも２４時間にわたって、補助酸素をもはや受けていない時間のカプランマイヤー曲線（ｍＩＴＴ感度）を示す。 実施例７に記載のＣＯＶＩＤ－１９肺炎におけるオパガニブの無作為化二重盲検プラセボ対照第２ａ相試験からの統計分析後の、Ｌ／ｍｉｎ単位の酸素流量に基づく、補助酸素におけるベースラインから５０％減少までの時間の時間累積発生率のカプランマイヤー曲線（ｍＩＴＴ感度）を示す。 実施例７に記載のＣＯＶＩＤ－１９肺炎におけるオパガニブの無作為化二重盲検プラセボ対照化第２ａ相試験からの統計分析後の、１４日間（１日目～１４日目）にわたる、１日の酸素流量（Ｌ／分）測定値を使用した、ベースラインからのパーセント変化の総補助酸素必要量（曲線下面積）のドットプロットを示す。
定義
本発明で使用される場合、「薬剤」という用語は、患者に対する薬理活性又は効果を有する医薬物質を指す。「薬剤」、「活性成分」、「医薬物質」、及び「化合物」という用語は、本明細書において互換的に使用される。
本明細書において、ＡＢＣ２９４６４０という用語は、遊離塩基若しくは塩として、又は立体異性体若しくは非立体異性体としての形態の、［３－（４－クロロフェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）アミド］を指す。固形である化合物、塩、プロドラッグ、又は溶媒和物の場合、本発明の化合物、塩、及び溶媒和物が異なる結晶形態で存在し得、それらの全てが本発明の範囲内であることが意図されるということが、当業者には理解される。ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩としても知られるオパガニブ（opaganib）は、ＡＢＣ２９４６４０の具体的な１つの塩形態である。
本明細書で使用される場合、ＷＸ－６７１という用語は、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基又は塩としての、（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）を指す。固形である化合物、塩、プロドラッグ、又は溶媒和物の場合、本発明の化合物、塩、及び溶媒和物が異なる結晶形態で存在し得、それらの全てが本発明の範囲内であることが意図されるということが、当業者には理解される。ＷＸ－６７１．１（ウパモスタット（upamostat））は、ＷＸ－６７１の具体的な１つの結晶塩形態である。
本明細書で使用される場合、「コロナウイルス」という用語は、天然に存在する（例えば、野生型）コロナウイルスと、天然に存在するコロナウイルス変異体と、実験室で生成されたコロナウイルス変異体であって、選択によって生成された変異体と、化学修飾によって生成された変異体と、及び遺伝子改変された変異体（例えば、組換えＤＮＡ法によって実験室で修飾されたコロナウイルス）と、を含む。一実施形態では、対象は、発症又は本開示による治療後の数日以内に、鼻腔内分泌物（鼻又は鼻咽頭（nasopharyngeal、ＮＰ）綿棒）、のど（口腔咽頭）スワブ、血液、又は他の体液試料を収集して、例えば抗原捕獲式酵素結合免疫吸着測定法（enzyme-linked immunosorbent assay、ＥＬＩＳＡ）を使用して、ＩｇＭ ＥＬＩＳＡを使用して（対象がＩｇＭ抗体を有するかどうかを判定する）、ＩｇＧ ＥＬＩＳＡを使用して（対象がＩｇＧ抗体を有するかどうかを判定する）、ポリメーラーゼ鎖反応（polymerase chain reaction、ＰＣＲ）を用いて、又はウイルス単離によって、血液及び他の体液中のウイルス抗原又はＲＮＡを検出するために試料を試験することによって、ウイルス感染の有無を検査することができる。一実施形態では、コロナウイルスは、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）、重度急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２からなる群から選択される。
本明細書で使用される場合、「備える（comprise）」、「含む（include）」、「有している（having）」、「有する（has）」、「可能である（can）」、「含有する（contain）」、及びそれらの変形例は、追加の行為又は構造物の可能性を排除しない、オープンエンド移行句、用語、又は単語であることが意図される。単数形「ａ」、「ａｎｄ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上そうではないことが明確に示されない限り、複数への参照を含む。本開示はまた、明示的に記載されているか否かにかかわらず、本明細書に提示される実施形態又は、要素を「含む」、要素「からなる」、及び要素「から本質的になる」他の実施形態も企図する。
「共投与する」、「共投与」、又は「組み合わせて」という用語は、少なくとも１つの他の抗ウイルス活性剤と組み合わせた、本発明の化合物の投与を説明するために使用される。共投与のタイミングは、患者を治療する医療専門家によって最もよく決定される。薬剤が同時に投与されることが時には望ましい。あるいは、併用療法のために選択された薬物は、患者に異なるタイミングで投与され得る。当然のことながら、２つ以上のウイルス又は他の感染症又は他の状態が存在する場合、本化合物は、必要に応じて当該他の感染症又は状態を治療するための他の薬剤と組み合わされてもよい。
本発明に関連するように、「治療」、「治療すること」などの用語は、本明細書に記載の方法における化合物の予防的投与に先立って、ウイルス感染前に、又は感染後に、ウイルス活性を阻害することとして定義される。一実施形態では、「治療すること」という用語は、本発明の１種類以上の化合物を投与して、インビトロ又はインビボで、ウイルスの複製を測定可能に阻害すること、インビトロ又はインビボでウイルスの負荷を測定可能に低減すること、又は患者において、ＣｏＶ媒介性疾患を有することに関連する少なくとも１つの症状を低減することを意味する。望ましくは、複製の阻害率又はウイルス負荷の低減率は、好適なアッセイを使用して決定されると、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％である。ウイルスの複製を監視するアッセイには、細胞変性ウイルスアッセイ、レポーターウイルス及びレポーター細胞アッセイ、ウイルスレプリコンアッセイ、及び遺伝子標的ウイルスアッセイが含まれるが、これらに限定されない。ウイルス負荷試験は、血漿試料に対する核酸増幅ベースの試験（ＮＡＴ又はＮＡＡＴ）及び非核酸ベースの試験を使用して実行され得るが、これらにより、血漿及び組織におけるウイルスＲＮＡレベル及び総ウイルスＤＮＡを含む、所与の体積中のウイルスの量を決定し得る。あるいは、特定の実施形態では、治療は、ＣｏＶ媒介性疾患を有する患者における症状が、かなり又は実質的に緩和された状態として、訓練を受けた医師によって観察される。典型的には、ウイルス複製の減少は、ＲＮＡ重合の速度の低下、ＲＮＡ翻訳の速度の低下、タンパク質処理の速度の低下、若しくはタンパク質修飾の速度の低下によって、又はウイルス複製の任意のステップに関与する分子（例えば、ウイルス複製に重要な、ウイルス又は宿主のゲノムによってコードされるタンパク質）の活性を低下させることによって達成される。一実施形態では、「治療する」という用語は、ＲＮＡウイルスなどのウイルスの複製を阻害又は抑制する、本発明の化合物（複数可）の能力を指す。一実施形態では、「治療する」という用語は、ＲＮＡウイルス感染中の細胞変性効果を阻害する、本発明の化合物（複数可）の能力を指す。
いくつかの実施形態では、本発明の化合物の「有効量」又は「免疫刺激量」は、対象に投与されたときに、検出可能な免疫応答を発生させるのに十分な量である。他の実施形態では、免疫原性組成物の「防御有効量」は、対象に投与されると、対象に防御免疫を付与するのに十分な量である。他の実施形態では、化合物の「治療有効量」は、対象に投与されると、ウイルスの浄化値を増加させるなど、ウイルス感染を治療するのに十分な量である。
本発明の薬剤及び方法は、それを必要とする対象を治療するために利用され得る。特定の実施形態では、対象は、例えばヒト又は非ヒト哺乳動物などの、哺乳動物である。ヒトなどの動物に投与される場合、薬剤は、好ましくは、例えば、本発明の少なくとも１つの薬剤を、少なくとも１つの薬剤と組み合わせることができる１つの物質又は複数の物質の集合と共に含む、医薬組成物として投与される。本明細書で使用される「薬学的に許容される担体材料」という用語は、予想される曝露条件下での哺乳動物における治療的処置の目的で、哺乳動物の組織と接触させて用いるのに好適な薬剤と組み合わせることができる１つの物質、又は複数の物質の集合を意味する。薬学的に許容される担体材料は、当該技術分野で周知であり、例えば、不活性な固体、半固体、又は液体の、充填剤、希釈剤、カプセル化材料を含む。薬学的に許容される担体材料は、当然のことながら、それらを、治療されているヒト又はより下等な動物への投与に適したものにするのに十分に高い純度及び十分に低い毒性のものでなければならない。医薬組成物は、錠剤、カプセル（スプリンクルカプセル及びゼラチンカプセルを含む）、顆粒、粉末、シロップ、坐剤、注入などの単位剤形であり得る。
「免疫応答」という用語は、抗原などの刺激に対する、例えばＢ細胞、Ｔ細胞、マクロファージ、又は多形核球などの、免疫系の細胞の応答を指す。免疫応答は、宿主防御応答に関与する身体の任意の細胞を含み得るが、例えば、インターフェロン又はサイトカインを分泌する上皮細胞が挙げられる。免疫応答には、自然免疫応答又は炎症が含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、防御免疫応答は、感染から対象を防御する（感染を防止するか、又は感染に関連する疾患の発症を妨げる）免疫応答を指す。
「より有効な」とは、治療がより優れた効能を示すか、又は比較される別の治療よりも毒性が低い、安全である、便利である、又は安価であることを意味する。効能は、所与の適応症に適切な任意の標準方法を用いて、熟練した施術者によって測定され得る。
本明細書で使用される場合、「好適な期間」という用語は、患者が、コロナウイルス感染の診断に対して本開示の方法を使用しての治療を開始し始めた時に始まり、治療全体を通し、患者が、コロナウイルス感染に関連する症状の減少又はウイルス感染がコントロールされた状態になっていることを示す実験室での診断のいずれかによって治療を停止するまでの期間を指す。一実施形態において、好適な期間は、１週間である。一実施形態において、好適な期間は、１週間～２週間である。一実施形態において、好適な期間は、２週間である。一実施形態において、好適な期間は、２週間～３週間である。一実施形態において、好適な期間は、３週間である。一実施形態において、好適な期間は、３週間～４週間である。一実施形態において、好適な期間は、４週間である。一実施形態において、好適な期間は、４週間～５週間である。一実施形態において、好適な期間は、５週間である。一実施形態において、好適な期間は、５週間～６週間である。一実施形態において、好適な期間は、６週間である。一実施形態において、好適な期間は、６週間～７週間である。一実施形態において、好適な期間は、７週間である。一実施形態において、好適な期間は、７週間～８週間である。一実施形態において、好適な期間は、８週間である。
本明細書で使用される場合、「細胞変性効果」という用語は、ウイルス感染による細胞形態の変化を指す。
本明細書で使用される場合、「細胞変異体」又は「病因」という用語は、宿主細胞遺伝子発現の阻害を含み、顕微鏡レベルで見える変化に加えて、ウイルス性の病理発生に寄与する他の細胞変化を含む。
本明細書で使用される場合、「阻害剤」という用語は、酵素の活性に影響を及ぼす分子を指す。本発明の阻害剤は、可逆的であり、それらが、それらの標的酵素との弱い相互作用を形成し、容易に除去されることを意味する。可逆的阻害剤は、酵素との一過性相互作用を形成する。酵素と可逆的阻害剤との間の結合の強度は、解離定数（Ｋｄ）によって定義される。Ｋｄの値が小さいほど、酵素と阻害剤との間の相互作用が強くなり、阻害効果が大きくなる。酵素阻害について言及する場合、Ｋｄは、Ｋｉと称される。
本明細書で使用する場合、「インビトロ」という用語は、人工の環境において、例えば、限定するものではないが、試験管又は細胞培養系において行われる手順を指す。当業者は、例えば、単離されたＳＫ酵素がインビトロ環境において、モジュレータと接触し得ることを理解するであろう。代替的に、単離された細胞を、インビトロ環境においてモジュレータと接触させ得る。
本明細書で使用する場合、「インビボ」という用語は、限定するものではないが、ヒト、サル、マウス、ラット、ウサギ、ウシ、ウマ、ブタ、イヌ、ネコ又は霊長類などの生物内で行われる手順を指す。
詳細な説明
本発明は、概して、ウイルス学、感染性疾患、及び医学の分野に関する。本発明は、ＣｏＶ媒介性疾患、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ、又はＭＥＲＳによって引き起こされる疾患の治療のための化合物、組成物、方法、及びキットを特徴とする。より具体的には、本発明は、２０１９年新型コロナウイルスを含むコロナウイルスを治療することができる、コロナウイルスに対する有効阻害剤に関する。本発明は、２０１９年新型コロナウイルスを含むコロナウイルスに対する有効阻害剤としての化合物の新しい用途、及びヒトにおけるコロナウイルス感染を治療するための薬物の調製におけるそれらの用途を提供する。
ＡＢＣ２９４６４０、［３－（４－クロロフェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）アミド］は、経口投与されるスフィンゴシンキナーゼ２（sphingosine kinase 2、「ＳｐｈＫ２」又は「ＳＫ２」）阻害剤である。ＡＢＣ２９４６４０は、以下の構造式：
Figure 2023517920000020
 によって表され、遊離塩基、その塩の形態及び結晶変態として調製することができる。参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，３３８，９６１号、同第８，０６３，２４８号、同第８，３２４，２３７号、及び同第８，５５７，８００号は、これらの化合物、用法、及びそれらの化合物を作製する方法を教示する。
塩酸塩としてのＡＢＣ２９４６４０は、オパガニブの国際一般名（international nonproprietary name、ＩＮＮ）を与えられており、以下の構造式で表される：
Figure 2023517920000021
オパガニブの分子式は、Ｃ２３Ｈ２５ＣｌＮ２Ｏ・ＨＣｌであり、分子質量は４１７．４ｇ／ｍｏｌである。オパガニブは、水及び酢酸エチルに実質的に不溶性である、非吸湿性白色からオフホワイトの固体である。一実施形態では、医薬は、硬質ゼラチン製サイズ１のカプセルにオパガニブを充填することによって調製され、そのカプセルは、以下の賦形剤のうちの少なくとも１つを更に含む：微結晶性セルロース、コロイド状二酸化ケイ素、植物性ステアリン酸マグネシウム、二酸化チタン。一実施形態では、オパガニブカプセルは、塩酸塩として２５０ｍｇのＡＢＣ２９４６４０、又は２２８．１６ｍｇのＡＢＣ２９４６４０の遊離塩基を含有する。一実施形態では、オパガニブカプセルは、塩酸塩として３７５ｍｇのＡＢＣ２９４６４０、又は３４２．２４ｍｇのＡＢＣ２９４６４０の遊離塩基を含有する。
一実施形態では、オパガニブの２５０ｍｇカプセルは、サイズ１の、ゼラチン製、白色不透明体、及びキャップ、コンニスナップカプセルにカプセル化された賦形剤と共に、塩酸塩として薬剤ＡＢＣ２９４６４０を含有する。一実施形態では、オパガニブの３７５ｍｇカプセルは、サイズ１の、ゼラチン製、白色不透明体、及びキャップ、コンニスナップカプセルにカプセル化された賦形剤と共に、塩酸塩として薬剤ＡＢＣ２９４６４０を含有する。
コロナウイルス感染を治療するためのオパガニブは、一般に、１日あたり約２５０ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の量で投与される。一実施形態では、オパガニブ２５０ｍｇは、２つのカプセルとして、１日２回、１日あたり１０００ｍｇの総投与量で投与される。一実施形態では、オパガニブ２５０ｍｇは、２つのカプセル、５００ｍｇ、Ｑ１２時間として投与される。一実施形態では、確定診断されたコロナウイルス感染を有する患者には、１２時間ごとに、一回投与量５００ｍｇのオパガニブ（２５０ｍｇカプセル２つとして）を（結果、１日あたり１０００ｍｇのオパガニブを）、最大で合計２週間、又は最大で連続１４日間摂取するように指示が提供される。
本発明者らは、多くの研究の末、オパガニブの新しい用途を発見した。オパガニブは、抗ウイルス性、抗炎症性、及び抗血栓性活性を示す。つまりＣＯＶＩＤ－１９の原因及び結果の両方に作用する。オパガニブは、スフィンゴシンキナーゼ－２を標的とするが、これは、ウイルス複製に関与するヒトの細胞成分であり、ウイルス自体ではない。新型のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の、世界中で出現する突然変異の証拠が積み上がっているが、これらは、この固有のメカニズムの重要性を強調しており、このメカニズムは潜在的に、治療に対しウイルスが耐性を持つリスクを最小限に抑えるものである。
本明細書では、容器と、容器内の経口投与に適した複数のオパガニブ剤形と、容器に関連付けられ、コロナウイルス感染を治療するためのオパガニブの投与を示す説明文（例えば、ラベル又は挿入物）と、を含む、医薬キットとしても知られる包装された医薬製品が提供される。一実施形態では、説明文は、上述の方法を実行するための指示及び／又はキットを使用する方法の指示を含む。キットに含まれる指示は、ラベルとして包装材料に取り付けることができ、又は包装への挿入物として含めることができる。指示は、典型的には手書きの又は印刷された材料であるが、そのようなものに限定されない。指示を記憶し、それらをエンドユーザに伝達することができる任意の媒体は、本開示によって企図される。そのような媒体には、電子記憶媒体（例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ）、光学媒体（例えば、ＣＤ ＲＯＭ）などが含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「指示」という用語は、指示を提供するインターネットサイトのアドレスを含むことができる。
ＷＸ－６７１、すなわち（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）は、強力なセリンプロテアーゼ阻害剤ＷＸ－ＵＫ１（Ｎ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－アミジノ－フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド）の、経口的に活性なプロドラッグである。ＷＸ－６７１は、以下の構造式：
Figure 2023517920000022
 によって表され、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、かつそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として調製することができる。
ＷＸ－６７１はプロドラッグである。本明細書で使用される場合、プロドラッグは、インビボで代謝されて、薬物の活性形態を生成する、生物学的に不活性な化合物を含む医薬組成物を指す。ＷＸ－６７１は、ＷＸ－ＵＫ１を得るためにインビボで転換可能な化合物である。ＷＸ－ＵＫ１は、静脈内注入によってのみ投与することができる。ＷＸ－ＵＫ１は、本明細書に記載の実験的インビトロの例の多くで使用される。本開示は、医薬品として経口用ＷＸ－６７１化合物を説明するが、本発明の範囲及び趣旨の範囲内にある静脈内注入用化合物ＷＸ－ＵＫ１を使用して医薬品を作製することができるということを理解されたい。参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，８６１，４３５号、同第７，２４７，７２４号、同第７，６５９，３９６号、及び同第９，０８９，５３２号は、ＷＸ－ＵＫ１及びその作製方法を開示している。
ＷＸ－６７１．１、すなわちＮ－α－（２，４，６－トリイソプロピルフェニルスルホニル）－３－ヒドロキシアミジノ－（Ｌ）フェニルアラニン－４－エトキシカルボニルピペラジド硫酸水素塩は、エチル４－｛３－［（Ｅ）－アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］－Ｎ－［（２，４，６－トリイソプロピルフェニル）スルホニル］－Ｌ－フェニルアラニル｝ピペラジン－１－カルボキシレート硫酸水素塩とも言及されるが、この物質は、Ｃ３２Ｈ４７Ｎ５Ｏ６Ｓ × Ｈ２ＳＯ４の分子式と、７２７．９１ｇ／ｍｏｌ（遊離塩基：６２９．８３ｇ／ｍｏｌ）の分子量とを有する。参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，６２４，１６９号、同第７，２１１，６７０号、同第７，２４７，７２４号、同第７，３４２，０１８号、同第７，６０８，６２３号、同第７，６５９，３９６号、同第７，７１３，９８０号、同第７，７４５，４４１号、同第７，８０７，６８１号、同第７，８８４，２０６号、同第７，９５１，９４３号、同第８，４９２，３８５号、同第８，６９２，７６１号、及びＲＥ第４６４２４号に記載されている。物質ＷＸ－６７１．１は、ウパモスタットという国際一般名（ＩＮＮ）を与えられている。
ＷＸ－６７１．１（ウパモスタット）の構造式は、以下のとおりである：
Figure 2023517920000023
ウパモスタットは、ジメチルスルホキシドに自由に溶解し、エタノールに可溶性である、非吸湿性の白色から黄色がかった粉末である。この医薬物質は、水又は０．１ＭのＨＣｌに、非常にわずかしか溶解しない。経口投与用の固体調製物は、錠剤、丸剤、粉末、顆粒、カプセルなどとして調製することができる。これらの固体調製物は、デンプン、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトース、又はゼラチンなどの少なくとも１つの賦形剤を、本発明の１つ以上の化合物に添加することによって製造される。更に、ステアリン酸マグネシウム、及びタルクなどの潤滑剤が、典型的な賦形剤に加えて使用され得る。
一実施形態では、医薬品は、以下の賦形剤のうちの少なくとも１つを更に含む硬質ゼラチンカプセル中に、ウパモスタットを充填することによって調製される：微結晶性セルロース、ヒプロメロース、エチルアルコール無水物、精製水、及び植物性ステアリン酸マグネシウム。一実施形態では、ウパモスタットカプセルは、ウパモスタット硫酸水素塩を２３１．２６ｍｇ（遊離塩基２００ｍｇに相当）含有する。経口投与後、ウパモスタットは、活性ＷＸ－ＵＫ１に変換され、これがいくつかのセリンプロテアーゼを阻害する。ウパモスタットは経口製剤として提供することができるため、コロナウイルス感染の治療に有用であり得る他の薬物の、静脈内投与に関連する欠点を排除することができる。
コロナウイルス感染を治療するためのウパモスタットは、一般に、１日あたり約２００ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で投与される。一実施形態では、ウパモスタットは、１カプセル、１日１回、約２３１．２６ｍｇ（遊離塩基２００ｍｇに相当）の、１日あたりの総投与量で投与される。一実施形態では、ウパモスタットは、２つのカプセルとして、１日１回、約４６２．５２ｍｇ（遊離塩基４００ｍｇに相当）の、１日あたりの総投与量で投与される。一実施形態では、確定診断されたコロナウイルス感染を有する患者には、毎日１つのウパモスタットのカプセルを（ウパモスタット遊離塩基２００ｍｇに相当）を、合計で連続２週間、又は連続１４日間にわたって摂取するように指示が提供される。一実施形態では、確定診断されたコロナウイルス感染を有する患者には、毎日２つのウパモスタットのカプセルを（ウパモスタット遊離塩基４００ｍｇに相当）を、合計で連続２週間、又は連続１４日間にわたって摂取するように指示が提供される。
本発明者らは、多くの研究の末、ウパモスタットの新しい用途を発見した。理論に束縛されるものではないが、セリンプロテアーゼ阻害剤ＷＸ－ＵＫ１、すなわちひとたびウパモスタットが体内で分解されたときのウパモスタットの活性薬物は、ウイルススパイク（Ｓ）タンパク質プライミングに関与するように思われるセリンプロテアーゼのうちの少なくとも１つに対して活性を有する、と考えられる。したがって、ＷＸ－ＵＫ１（又はそのプロドラッグＷＸ－６７１）などのプロテアーゼ阻害剤の使用は、ＣｏＶの活性化及び拡散を減少させるのに有効であり得るため、効果的な予防的処置及び治療的処置をもたらし得る。したがって、ＷＸ－ＵＫ１は、ＳＡＲＳ－２－Ｓにより駆動される細胞への侵入をブロックすることができ、したがって、その結果、コロナウイルスの複製を阻害することができる。一実施形態では、感染は、ウイルスと宿主細胞受容体との相互作用を促進し、感染性及び拡散を強化するタンパク質分解活性化を必要とするため、本発明のウパモスタットが、治療有効量で好適な期間にわたって投与された場合には、コロナウイルスによる感染から保護する。
本明細書では、容器と、容器内の経口投与に適した複数のウパモスタット剤形と、容器に関連付けられ、コロナウイルス感染を治療するためのウパモスタットの投与を示す説明文（例えば、ラベル又は挿入物）と、を含む、医薬キットとしても知られる包装された医薬製品が提供される。一実施形態では、説明文は、上述の方法を実行するための指示及び／又はキットを使用する方法の指示を含む。キットに含まれる指示は、ラベルとして包装材料に取り付けることができ、又は包装への挿入物として含めることができる。指示は、典型的には手書きの又は印刷された材料であるが、そのようなものに限定されない。指示を記憶し、それらをエンドユーザに伝達することができる任意の媒体は、本開示によって企図される。そのような媒体には、電子記憶媒体（例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ）、光学媒体（例えば、ＣＤ ＲＯＭ）などが含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「指示」という用語は、指示を提供するインターネットサイトのアドレスを含むことができる。
併用療法及び交互療法
本明細書に記載の化合物は、ＣＯＶＩＤ患者の現在の標準治療に加えて、又は医療提供者が患者にとって有益であると考える、任意の他の化合物又は療法と併用して又は交互に投与することができる。併用療法及び／又は交互療法は、治療的、補助的、又は一時緩和的なものであり得る。これらの方法が、２つ以上の活性剤を患者に投与することを含む場合、それらの薬剤は、７、６、５、４、３、２、若しくは１日以内、２４、１２、６、５、４、３、２、若しくは１時間以内、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５、若しくは１分以内、又は実質的に同時に投与され得る。本発明の方法は、経口、全身、非経口、局所、静脈内、吸入、又は筋肉内投与によって患者に１種以上の薬剤を投与することを含み得る。
ＣＯＶＩＤ患者は、疾患の様々な段階を通過する可能性があり、患者が病気のどの段階を提示しているか又はこれからどの段階に進もうとしているのかに基づいて、標準治療が異なり得るということが観察されている。ＣＯＶＩＤは、免疫系と凝固系との間の「クロストーク」を発生させるという点で注目すべきである。疾患が進行するにつれて、患者は免疫系による過剰反応を高めてしまう場合があり、これはサイトカインストームを含む、多くの深刻な潜在的結果をもたらし得る。免疫系と凝固系との間のクロストークを介して、患者は、呼吸器系、脳、心臓、及び他の器官を含む、身体の様々な領域で、凝血し始める場合があり得る。抗凝血療法を必要とする複数の血餅が、ＣＯＶＩＤ患者の身体全体において観察されている。これらの血餅は、長期にわたる損傷を、又は治療されて疾患を軽減されていない場合には、永久的な損傷さえも引き起こし兼ねないと考えられている。
より具体的には、ＣＯＶＩＤ－１９は、以下の３つの一般的な段階で進行すると記載されている：ステージ１（感染早期）、ステージ２（肺相）、及びステージ３（高炎症相／サイトカインストーム）。
ステージ１は、非特異的、しばしば軽度の症状を特徴とする。ウイルスの複製が起こり、おそらくは別の抗ウイルス療法と併用して、又は交互に、本明細書に記載の化合物による即時治療を開始することが適切である。インターフェロンβもまた、ウイルスに対する自然免疫応答を高めるために投与され得る。したがって、一実施形態では、インターフェロンβ及び／又は追加の抗ウイルス薬と併用して又は交互に、本発明の化合物が有効量で用いられる。亜鉛サプリメント及び又はビタミンＣもまた、この段階で、又は病気が進行するにつれて、時々投与される場合がある。
ＣＯＶＩＤ－１９のステージ２は、患者が急性低酸素呼吸不全を経験し得る、肺相である。実際、ＣＯＶＩＤ－１９の主要な臓器不全は、低酸素呼吸不全である。ステロイド、例えばデキサメタゾンを介した中程度の免疫抑制は、急性低酸素呼吸不全を有する患者及び／又は機械的換気装置に繋がれている患者に有益であり得ることが明らかになっている。一実施形態では、グルココルチコイドであり得るコルチコステロイドと併用して、本発明の化合物が有効量で使用される。非限定的な例としては、ブデソニド（Ｅｎｔｏｃｏｒｔ ＥＣ）、ベタメタゾン（Ｃｅｌｓｔｏｎｅ）、プレドニゾン（Ｐｒｅｄｏｎｉｓｏｎｅ Ｉｎｔｅｎｓｏｌ）、プレドニゾロン（Ｏｒａｐｒｅｄ、Ｐｒｅｌｏｎｅ）、トリアムシノロン（Ａｒｉｓｔｏｓｐａｎ Ｉｎｔｒａ－Ａｒｔｉｃｕｌａｒ、Ａｒｉｓｔａｐｓｐａｎ Ｉｎｔｒａｌｅａｔｉｏｎａｌ、Ｋｅｎａｌｏｇ）、メチルプレドニゾロン（Ｍｅｄｒｏｌ、Ｄｅｐｏ－Ｍｅｄｒｏｌ、Ｓｏｌｕ－Ｍｅｄｒｏｌ）、ヒドロコルチゾン、又はデキサメタゾン（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ Ｉｎｔｅｎｓｏｌ、Ｄｅｘ Ｐａｃｋ １０ Ｄａｙ、Ｄｅｘ Ｐａｃｋ １３ Ｄａｙ、Ｄｅｘ Ｐａｃｋ ６ Ｄａｙ）が挙げられる。
ＮＳ５Ｂ阻害剤であるレムデシビルは、ＣＯＶＩＤ１９患者に与えられた場合に、どちらとも言えない結果をもたらした。それは、病院環境でのみ、及び静脈内注射によってのみ、典型的には１日３回、投与することが可能であるが、これでは、軽度から中程度のＣＯＶＩＤ１９患者には、適さないものになってしまう。一実施形態では、本発明の化合物は、全体的な抗ウイルス効果を増幅させるために、レムデシビルと併用して、又は交互に投与される。
ステージ３、すなわち疾患の最終段階は、血流全体に小さな血餅が発生する状態である進行性の播種性血管内凝固（disseminated intravascular coagulation、ＤＩＣ）を特徴とする。この段階はまた、多臓器不全（例えば、血管拡張性ショック、心筋炎）を含み得る。多くの患者が、「サイトカインストーム」で、ＣＯＶＩＤ－１９感染症のこの重症段階に応答するということも観察されている。ＤＩＣ及びサイトカインストーム間には、双方向性の相乗的な関係が存在するように思われる。ＤＩＣに対抗するために、患者はしばしば抗凝血剤を投与されるが、これは、例えば、間接トロンビン阻害剤又は直接経口抗凝固剤（direct oral anticoagulant、「ＤＯＡＣ」）であり得る。非限定的な例としては、低分子量ヘパリン、ワルファリン、ビバリルジン（Ａｎｇｉｏｍａｘ）、リバーロキサバン（Ｘａｒｅｌｔｏ）、ダビガトラン（Ｐｒａｄａｘａ）、アピキサバン（Eliquis）、又はｅｄｏｘａｂａｎ（Ｌｉｘｉａｎａ）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物は、抗凝固剤療法と併用して、又は交互に投与される。ＣＯＶＩＤ患者における凝血のいくつかの重度の症例では、ＴＰＡ（tissue plasminogen activator、組織プラスミノゲン活性化因子）を投与することができる。
高いレベルのサイトカインインターロイキン－６（interleukin-6、ＩＬ－６）は、ＣＯＶＩＤ－１９患者において、呼吸不全及び死の前触れであることが観察されている。サイトカインストームを構成し得る免疫応答のこの急上昇に対処するために、患者に、ＩＬ－６と分解を媒介するタンパク質とに結合する二重特異性化合物などの、ＩＬ－６標的化モノクローナル抗体、薬学的阻害剤、又はタンパク質分解剤を投与することができる。抗体の例としては、トシリズマブ、サリルマブ、シルツキシマブ、オロキズマブ、及びクラザキズマブが挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物は、トシリズマブ又はサリルマブと併用して、又は交互に投与される。過剰反応免疫系を治療するために使用される免疫抑制薬の追加の非限定的な例には、ヤヌスキナーゼ阻害剤（トファシチニブ（Ｘｅｌｊａｎｚ））、カルシニューリン阻害剤（シクロスポリン（Ｎｅｏｒａｌ、Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ、ＳａｎｇＣｙａ））、タクロリムス（Ａｓｔａｇｒａｆ ＸＬ，Ｅｎｖａｒｓｕｓ ＸＲ，Ｐｒｏｇｒａｆ））、ｍＴＯＲ阻害剤（シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ）、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ、Ｚｏｒｔｒｅｓｓ））、及びＩＭＤＨ阻害剤（アザチオプリン（Ａｚａｓａｎ、Ｉｍｕｒａｎ）、レフルノミド（Ａｒａｖａ）、マイコフェノール酸（ＣｅｌｌＣｅｐｔ、Ｍｙｆｏｒｔｉｃ））が挙げられる。追加の抗体及び生物製剤としては、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、アナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ）、セルトリズマブ（Ｃｉｍｚｉａ）、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ）、ゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、イクセキズマブ（Ｔａｌｔｚ）、ナタリツズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ）、セクキヌマブ（Ｃｏｓｅｎｔｙｘ）、トシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ）、ウステキヌマブ（Ｓｔｅｌａｒａ）、ベドリズマブ（Ｅｎｔｙｖｉｏ）、バシリキシマブ（Ｓｉｍｕｌｅｃｔ）、及びダクリズマブ（Ｚｉｎｂｒｙｔａ）が挙げられる。
ＩＬ－１は、ＩＬ－６及び他の炎症誘発性サイトカインの産生をブロックする。ＣＯＶＩＤ患者はまた、時々、抗ＩＬ－１療法、例えば、アナキンラの静脈内投与で治療されて、高炎症反応を低減することもある。抗ＩＬ－１療法は、一般に、例えば、ＩＬ－１と分解を媒介するタンパク質とに結合する二重特異性化合物などの、標的化モノクローナル抗体、薬学的阻害剤、又はタンパク質分解剤であり得る。
ＣＯＶＩＤを有する患者は、多くの場合、細菌性肺炎につながり得る、ウイルス性肺炎を発症する。重度のＣＯＶＩＤ－１９を有する患者はまた、敗血症又は「敗血症性ショック」によって影響を受ける可能性がある。ＣＯＶＩＤに次ぐ細菌性肺炎又は敗血症に対する治療法には、抗生物質、例えばマクロライド系抗生物質の投与が挙げられ、その例としては、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、又はロキシスロマイシンが挙げられる。追加の抗生物質としては、アモキシシリン、ドキシシクリン、セファレキシン、シプロフロキサシン、クリンダマイシン、メトロニダゾール、スルファメトキサゾール、トリメトプリム、アモキシシリン、クラブラネート、又はレボフロキサシンが挙げられる。したがって、一実施形態では、本発明の化合物は、抗生物質、例えばアジスロマイシンと併用して、又は交互に投与される。アジスロマイシンなどのこれらの抗生物質のいくつかは、独立した抗炎症特性を有する。そのような薬物は、ＣＯＶＩＤ患者の抗炎症剤として使用され得るが、二次的細菌感染症に対する治療効果を発揮する。
ＣＯＶＩＤ－１９に感染した患者の治療における独特の課題は、患者が５、１０、又は更に１４日間を超えて続く可能性がある機械的人工呼吸を必要とする場合、比較的長期間にわたって鎮静状態を必要とすることである。この治療中の継続的な疼痛の場合、鎮痛剤を順次追加することができ、継続的な不安に対しては、鎮静剤を順次追加することができる。鎮痛剤の非限定的な例としては、アセトアミノフェン、ケタミン、及びＰＲＮオピオイド（ヒドロモルホン、フェンタニル、及びモルヒネ）が挙げられる。鎮静剤の非限定的な例としては、メラトニン、鎮静を主要な特性とする非定型抗精神病薬（オランザピン、クエチアピン）、プロポフォール又はデキスメデトミジン、ハロペリドール、及びフェノバルビタールが挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物は、アセトアミノフェン、ケタミン、ヒドロモルホン、フェンタニル、又はモルヒネなどの鎮痛剤と併用して、又は交互に投与される。一実施形態では、本発明の化合物は、メラトニン、オランザピン、クエチアピン、プロポフォール、デキスメデトミジン、ハロペリドール、又はフェノバルビタールなどの鎮静剤と併用して、又は交互に投与される。
ＣＯＶＩＤ－１９の治験薬には、クロロキン及びヒドロキシクロロキンが含まれる。一実施形態では、本発明の化合物は、クロロキン又はヒドロキシクロロキンと併用して、又は交互に投与される。
以前にＨＩＶについて承認されたロピナビル又はリトナビルなどのプロテアーゼ阻害剤も投与され得る。
一実施形態では、オパガニブは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療に使用するため、ウパモスタットと併用して投与される。一実施形態では、オパガニブは、コロナウイルス感染の治療のための医薬品の製造のために、ウパモスタットと併用して投与される。一実施形態では、オパガニブは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療のための医薬品の製造のために、ウパモスタットと併用して投与される。
ＣＯＶＩＤ患者の治療に使用され得る追加の薬物には、ファビピラビル、フィンゴリモド（Ｇｉｌｅｎｙａ）、メチルプレドニゾロン、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ）、アクテムラ（トシリズマブ）、ウミフェノビル、ロサルタン、及びＲＥＧＮ３０４８とＲＥＧＮ３０５１のモノクローナル抗体の組み合わせ、又はリバビリンが挙げられるが、これらに限定されない。これらの薬物又はワクチンのいずれも、そのような罹りやすいウイルス感染症を治療するために、本明細書で提供される活性化合物と併用して、又は交互に使用することができる。
一実施形態では、本発明の化合物は、ｍＲＮＡ－１２７３（Ｍｏｄｅｒｎａ，Ｉｎｃ．）、ＡＺＤ－１２２２（Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ及びＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｏｘｆｏｒｄ）、ＢＮＴ１６２（Ｐｆｉｚｅｒ及びＢｉｏＮｔｅｃｈ）、ＣｏｒｏｎａＶａｃ（Ｓｉｎｏｖａｃ）、ＮＶＸ－ＣｏＶ ２３７２（ＮｏｖｏＶａｘ）、ＳＣＢ－２０１９（Ｓａｎｏｆｉ及びＧＳＫ）、ＺｙＣｏＶ－Ｄ（Ｚｙｄｕｓ Ｃａｄｉｌａ）、及びＣｏＶａｘｉｎ（Ｂｈａｒａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ）が挙げられるがそれらに限定されない抗コロナウイルスワクチン療法と併用して、有効量で使用される。別の一実施形態では、本発明の化合物は、受動的抗体療法又は回復期血漿療法と併用して、有効量で使用される。
一実施形態では、本発明の化合物は、下痢などのコロナウイルスに感染した患者に存在し得る特定の症状を緩和することができる、５－ＨＴ受容体アンタゴニストと併用して、有効量で使用される。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、絶えず変異し、それは、病毒性及び伝染速度を増加させる。ウイルスの薬物耐性変種は、抗ウイルス剤による長期治療後に出現し得る。薬物耐性は、ウイルス複製に使用される酵素をコードする遺伝子の変異によって生じ得る。特定の場合におけるＲＮＡウイルス感染に対する薬物の有効性は、化合物を、主たる薬物のものとは異なる変異を誘発するか、又は異なる経路を介して作用する、別の１つの、またおそらくは別の２つ又は３つの抗ウイルス化合物と併用して又は交互に投与することによって、長期化させる、増大させる、又は復活させることができる。
本発明は、以下の非限定的な実施例によって例示される複数の態様を有する。以下の実施例は、本発明の様々な実施形態を例示する目的で与えられ、本発明をいかなる様式でも限定することを意味するものではない。
実施例１：ヒト気道上皮細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するＡＢＣ２９４６４０の抗ウイルス活性の評価
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染及び拡散がオパガニブによって直接阻害され得るかどうかを評価するため、ヒト一次気管支上皮細胞（human primary bronchial epithelial cell、ＨＢＥＣ、ＥｐｉＡｉｒｗａｙ（商標）、ＭａｔＴｅｋ）の器官型の気相液相界面（air-liquid-interface、ＡＬＩ）培養における、インビトロ評価をデザインした。このヒト細胞培養モデルシステムは、形態学的及び機能的に、ヒトの気道に類似している、偽重層上皮層を含有するため選択されており、この偽重層上皮層は、頂部層から空気に曝露された繊毛性細胞及びゴブレット（粘液産生）細胞からなる。これらの細胞は、侵入ウイルスに対する第１の防御線として作用し、複製の部位として機能する。利用可能な証拠はまた、ヒト気管支上皮細胞が、オパガニブによって標的とされる宿主因子（スフィンゴシンキナーゼ－２）を発現することを示唆している。
試験化合物：
オパガニブ－試験化合物
説明：オパガニブ［３－（４－クロロフェニル）－アダマンタン－１－カルボン酸（ピリジン－４－イルメチル）アミド、塩酸塩］は、酵素スフィンゴシンキナーゼ－２（ＳＫ２）の経口利用可能な阻害剤である。溶媒：ＤＭＳＯ
レムデシビル（ＧＳ－５７３４）－陽性抗ウイルス対照
説明：レムデシビルは、ヌクレオチド類似体抗ウイルスプロドラッグである。細胞ベースのアッセイにおいて、ＥＢＯＶの多くの変種に対して、０．０６～０．１４μＭの範囲のＥＣ５０値で、抗ウイルス活性を示し、かつＳＡＲＳ－ＣｏＶを含む他の病原性ＲＮＡウイルスに対して、インビトロでの広範囲の抗ウイルス活性を示す。溶媒：ＤＭＳＯ １００ｍｇ／ｍＬ（１６６．０ｍＭ）
ブレオマイシン（硫酸塩）－陽性細胞毒性対照
説明：ブレオマイシンは、ホジキンリンパ腫及び胚性がんの治療に一般的に使用される化学療法剤である。ブレオマイシンにより誘発された広範な肺毒性が、このような治療の合併症としてよく知られており、そのような肺毒性のうち最も一般的に見られるものは、ブレオマイシン誘発性間質性肺炎（bleomycin-induced pneumonitis、ＢＩＰ）である（Ｓｌｅｉｊｆｅｒら、２００１年を参照）。ブレオマイシン（bleomycin、ＢＬＭ）は、遺伝毒性の異なるメカニズムを有するヒトリンパ球における最良の研究された小核（micronucleus、ＭＮ）誘導剤として選択される。溶媒：ＤＭＳＯ １６．６７ｍｇ／ｍＬ（１１．２ｍＭ）
方法：
細胞培養－分化されたヒト気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ）
正常なヒト気管支上皮（ＨＢＥＣ）細胞を、ＭａｔＴｅｋ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ＭＡ、Ａｓｈｌａｎｄ）によって分化させ、それぞれ１２ウェルインサート又は２４ウェルインサートのいずれかを有するキットに入れて、入手した。ＨＢＥＣ細胞を、トランスウェルインサート内の６ｍｍ２メッシュディスク上で増殖させた。出荷の３日前に、組織を、ヒドロコルチゾンの含まれない培地に移した。輸送中、組織をアガロースのシート上に安定化させ、このシートは受領時に除去した。１つのインサートは、約１．２×１０６の細胞からなると推定された。細胞インサートのキット（ＥｐｉＡｉｒｗａｙ（商標）ＡＩＲ－１００）は、単一ドナー、＃９８３１、２３歳、健康、非喫煙、白人男性に由来した。細胞は、層を形成する際に独特の特性を有し、その頂端側は空気にのみ曝露され、ムチン層を生成する。到着時に、メーカーの指示に従って、細胞トランスウェルインサートを、６ウェルプレートの個々のウェルに直ちに移し、１ｍＬのＭａｔＴｅｋ独自の培養培地（ＡＩＲ－１００－ＭＭ）を、基底外側に添加したが、頂端側は、加湿された５％のＣＯ２環境に曝露された。実験開始前に、細胞を３７℃で１日間培養した。１６～１８時間の平衡化期間後、細胞の頂端側から分泌されたムチン層を、４００μＬの予熱されたＴＥＥＲ緩衝液で洗浄することによって除去した。培養培地を、洗浄ステップ後に補充した。図１には培養インサート及びＥｐｉＡｉｒｗａｙ組織を描いた図が提供されている。
試験化合物による処理：
試験化合物を、アッセイ培地（ＡＩＲ－ＡＳＹ－１００、ＭａｔＴｅｋ）中で、ストック溶液（ＤＭＳＯを含む）から段階的に希釈し、室温に置いた。試験化合物の希釈法を以下に概説する（最終ＤＭＳＯは、０．５％未満とする）。ＨＢＥＣ培養物を、リン酸緩衝生理食塩水（phosphate-buffered saline、ＰＢＳ）で洗浄し、感染前に、１時間にわたって、レムデシビル（２μＭ）、ブレオマイシン硫酸塩（７５．６μｇ／ｍＬ及び１５１μｇ／ｍＬ）、及びアッセイ培地（ＡＩＲ－１００－ＡＳＹ、ＭａｔＴｅｋ）で希釈したオパガニブ（０．０５～１１．２５μｇ／ｍＬの範囲の６つの濃度）とともに３７℃でインキュベートした。対照ウェルの場合、ＤＭＳＯを含むアッセイ培地（最終ＤＭＳＯは０．５％未満、対照）及びウイルスのみの対照（アッセイ培地のみ）を、感染前１時間のものに加えた。化合物を、各インサートに、頂部層（０．１５ｍＬ）及び基底層（０．８５ｍＬ）上に、３重に添加した。
ウイルス感染及び試料処理：
化合物と共に１時間インキュベートした後、培養物の頂端側を洗浄し、次いで、化合物又はアッセイ対照培地の存在下で、ＭＯＩ＝０．１ＰＦＵ／細胞で１時間、３７℃で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２臨床分離物（２０１９－ｎＣｏＶ／ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０）に感染させた。１時間のウイルスインキュベーション後、ウイルスを頂部側から除去し、培養物をＰＢＳで１回洗浄して、いかなる非結合ウイルスをも除去した。次いで、培養物を、新鮮な化合物と共に７２時間にわたり３７℃でインキュベートした。感染後２４時間及び４８時間後の時点で、基底外側の培地を、それぞれの化合物を含有する１ｍＬの新鮮な培地に置き換えた。
感染後７２時間後の時点で、組織及び培地を処理のために回収した。その頂部層を、０．４ｍＬのＴＥＥＲ緩衝液（Ｍｇ２＋とＣａ２＋とを含むＰＢＳ）で洗浄し、回収して、ＴＣＩＤ５０（５０％組織培養感染性用量）アッセイを介してウイルス力価を評価した。頂部層上清試料濃度の８倍連続希釈液を、ＶｅｒｏＥ６細胞を含む９６ウェルアッセイプレート（細胞２０、０００個／ウェル）に添加した。プレートを３７℃、５％のＣＯ２、及び９５％の相対湿度下でインキュベートした。３日間（７２±４時間）にわたりインキュベートした後、プレートをクリスタルバイオレットで染色して、細胞変性効果（cytopathic effect、ＣＰＥ）を測定した。ウイルス力価は、ＲｅｅｄとＭｕｅｎｃｈ（Ｒｅｅｄら、１９３８年）の方法を使用して計算した。これにより、ＴＣＩＤ５０の値は、３重に作製した試料から決定された。
オパガニブ、対照化合物、及びウイルス感染に曝露した後のＨＢＥＣ細胞の健康を評価するために、乳酸デヒドロゲナーゼ（lactate dehydrogenase、ＬＤＨ）放出アッセイを行った。組織培養インサートの底部外側層からの培地を感染後７２時間後に除去し、製造元（Ｐｒｏｍｅｇａ）の指示に従ってＬＤＨ貯蔵緩衝液で希釈した。試料をＬＤＨ緩衝液で更に希釈し、等量のＬＤＨ検出試薬と共にインキュベートした。室温で６０分間インキュベーションした後に、発光を記録した。無細胞対照が、培養培地バックグラウンドを決定するための陰性対照として、またブレオマイシンが、陽性細胞傷害性対照として、含められた。発光を報告し、バックグラウンドレベルは、許容可能な発光範囲（範囲１，０００～１０，０００）内に見られた。
更に、ＨＢＥＣ組織の頂部層は、Ｔｒｉｚｏｌ ＬＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を各培養インサートに添加し、数回上下にピペッティングし、細胞を溶解させて回収し、将来のＲＮＡ及びタンパク質発現分析用に－８０℃で保存した。
結果：
オパガニブは、ＨＢＥＣ培養におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して高度な活性を有する
この研究では、正常なヒト気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ）を、各培養物の頂端及び基底外側の両方において、６つの異なる濃度（１１．２５～０．０５μｇ／ｍＬの範囲）のオパガニブで、３重に前処理した。前処理した後、ＨＢＥＣをＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（２０１９－ｎＣｏＶ／ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０）に１時間曝露し、頂部層を洗浄して未結合ウイルスを除去し、次いで培養物を化合物と共に３日間インキュベートした。感染させた３日後、頂部層を洗浄し、ＴＣＩＤ５０アッセイによって、ウイルス負荷について評価した。基底外側培地を回収し、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の存在について評価した。これは、損傷した細胞から放出されて、細胞死／生存率の指標として機能するものである。
オパガニブは、強力な抗ウイルス活性を示し、細胞生存率を有意に損なうことなく、ウイルス複製が投与量依存的に阻害される。オパガニブ処理されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少が観察され、オパガニブの濃度が１μｇ／ｍＬ（薬理学的に妥当な濃度）以上では、完全な阻害が観察された。これらの結果は、研究における陽性対照であるレムデシビルと比較しても、良好な結果である。ＬＤＨ放出アッセイにおいて評価される細胞生存率は、ヒト一次上皮培養系におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するオパガニブの抗ウイルス活性を実証するために、空気液体界面で成長させる、ヒト誘導気道の細胞の複雑さ及び生理学を要約するＨＢＥＣ培養における抗ウイルスアッセイを実施した。オパガニブ処理されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少が観察され、オパガニブの濃度が１μｇ／ｍＬ（薬理学的に妥当な濃度）以上では、完全な阻害が観察された（図２）。これらの結果は、研究における陽性対照であるレムデシビルと比較しても、良好な結果である。
オパガニブは、強力な抗ウイルス効果が見られる濃度範囲にわたって、ＨＢＥＣ培養において細胞傷害性を引き起こさなかった（図３）。まとめると、これらのデータは、細胞膜の完全性、一定の細胞生存率及び薬物安全性を損なうことなく、一次ヒト肺培養において、オパガニブがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して強力な抗ウイルス性を有することを示し、ＣＯＶＩＤ－１９を有する患者を治療するためのオパガニブの有望な可能性を更に実証するものである。
試験された濃度範囲では、５０％の阻害も５０％の細胞傷害性も達成されなかった。試験した中で最も低い濃度、０．０５μｇ／ｍＬでは、感染性ウイルス産生の９０％超の阻害率に達した。試験した中で最も高い濃度、１１．２５μｇ／ｍＬでは、細胞は実験全体を通して生存可能であった。この実験から高濃度及び低濃度範囲を利用して、選択性指数（selectivity index、ＳＩ）、すなわち、抗ウイルス活性値（ＡＶＡ）を毒性（ＴＯＸ）値（ＡＶＡ／ＴＯＸ）で除算することによって、細胞傷害性と抗ウイルス活性との間のウィンドウを測定する比率を計算すると、ＳＩ値は２２５である。より広い範囲の濃度が試験される場合、ＳＩ値はより大きくなると予想される。
実施例２：ヒト気道上皮細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の抗ウイルス活性の評価
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染及び拡散がウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１によって直接阻害され得るかどうかを評価するため、ヒト一次気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ、ＥｐｉＡｉｒｗａｙ（商標）、ＭａｔＴｅｋ）の器官型の気相液相界面（ＡＬＩ）培養における、インビトロ評価をデザインした。このヒト細胞培養モデルシステムは、形態学的及び機能的に、ヒトの気道に類似している、偽重層上皮層を含有するため選択されており、この偽重層上皮層は、頂部層から空気に曝露された繊毛性細胞及びゴブレット（粘液産生）細胞からなる。これらの細胞は、侵入ウイルスに対する第１の防御線として作用し、複製の部位として機能する。利用可能な証拠はまた、ヒト気管支上皮細胞が、ウパモスタット（例えば、ＴＭＰＲＳＳ２）によって標的とされる宿主因子を発現することを示唆している。
試験化合物：
ウパモスタット－試験化合物
説明：ウパモスタット エチル４－｛３－［（Ｅ）－アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］－Ｎ－［（２、４、６－トリイソプロピルフェニル）スルホニル］－Ｌ－フェニルアラニル｝－ピペラジン－１－カルボキシレート硫酸水素塩。
溶媒：ＤＭＳＯ
ＷＸ－ＵＫ１－試験化合物
説明：ＷＸ－ＵＫ１エチル４－［（２５）－３－（３－カルバムイミドイルフェニル）－２－［（２，４，６－トリイソプロピルフェニル）スルホニルアミノ］プロパノイル］ピペラジン－１－カルボキシレート。
溶媒：ＤＭＳＯ
メシル酸カモスタット－試験化合物
説明：メシル酸カモスタット（camostat mesylate、ＣＭ）４－［［４－［（アミノイミノメチル）アミノ］ベンゾイル］オキシ］ベンゼン酢酸２－（ジメチルアミノ）－２－オキソエチルエステルメタンスルホネート、ＦＯＹ ３０５、ＦＯＹ－Ｓ ９８０、メシル酸フォイパン。カモスタットは、合成の、経口生物学的に利用可能なセリンプロテアーゼである。
溶媒：ＤＭＳＯ
ブレオマイシン（硫酸塩）－陽性細胞毒性対照
説明：ブレオマイシンは、ホジキンリンパ腫及び胚性がんの治療に一般的に使用される化学療法剤である。ブレオマイシンにより誘発された広範な肺毒性が、このような治療の合併症としてよく知られており、そのような肺毒性のうち最も一般的に見られるものは、ブレオマイシン誘発性間質性肺炎（ＢＩＰ）である（Ｓｌｅｉｊｆｅｒら、２００１年を参照）。ブレオマイシン（ＢＬＭ）は、遺伝毒性の異なるメカニズムを有するヒトリンパ球における最良の研究された小核（ＭＮ）誘導剤として選択される。
溶媒：ＤＭＳＯ １６．６７ｍｇ／ｍＬ（１１．２ｍＭ）
方法：
細胞培養－分化されたヒト気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ）
正常なヒト気管支上皮（ＨＢＥＣ）細胞を、ＭａｔＴｅｋ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ＭＡ、Ａｓｈｌａｎｄ）によって分化させ、それぞれ１２ウェルインサート又は２４ウェルインサートのいずれかを有するキットに入れて、入手した。ＨＢＥＣ細胞を、トランスウェルインサート内の６ｍｍ２メッシュディスク上で増殖させた。出荷の３日前に、組織を、ヒドロコルチゾンの含まれない培地に移した。輸送中、組織をアガロースのシート上に安定化させ、このシートは受領時に除去した。１つのインサートは、約１．２×１０６の細胞からなると推定された。細胞インサートのキット（ＥｐｉＡｉｒｗａｙ（商標）ＡＩＲ－１００）は、単一ドナー、＃９８３１、２３歳、健康、非喫煙、白人男性に由来した。細胞は、層を形成する際に独特の特性を有し、その頂端側は空気にのみ曝露され、ムチン層を生成する。到着時に、メーカーの指示に従って、細胞トランスウェルインサートを、６ウェルプレートの個々のウェルに直ちに移し、１ｍＬのＭａｔＴｅｋ独自の培養培地（ＡＩＲ－１００－ＭＭ）を、基底外側に添加したが、頂端側は、加湿された５％のＣＯ２環境に曝露された。実験開始前に、細胞を３７℃で１日間培養した。１６～１８時間の平衡化期間後、細胞の頂端側から分泌されたムチン層を、４００μＬの予熱されたＴＥＥＲ緩衝液で洗浄することによって除去した。培養培地を、洗浄ステップ後に補充した。図１には培養インサート及びＥｐｉＡｉｒｗａｙ組織を描いた図が提供されている。
試験化合物による処理：
試験化合物を、アッセイ培地（ＡＩＲ－ＡＳＹ－１００、ＭａｔＴｅｋ）中で、ストック溶液（ＤＭＳＯを含む）から段階的に希釈し、室温に置いた。試験化合物の希釈法を以下に概説する（最終ＤＭＳＯは、０．５％未満とする）。ＨＢＥＣ培養物を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、ブレオマイシン硫酸塩（７５．６及び１５１μｇ／ｍＬ）、ウパモスタット（０．１２～３０．００μｇ／ｍＬの範囲の６濃度）、ＷＸ－ＵＫ１（３．３３、１０、及び３０．００μｇ／ｍＬ）又はアッセイ培地（ＡＩＲ－１００－ＡＳＹ、ＭａｔＴｅｋ）で希釈したカモスタット（０．５、５、及び２５μｇ／ｍＬ）とともに、感染前に１時間にわたり３７℃でインキュベートした。対照ウェルの場合、ＤＭＳＯを含むアッセイ培地（最終ＤＭＳＯは０．５％未満、対照）及びウイルスのみの対照（アッセイ培地のみ）を、感染前１時間のものに加えた。化合物を、各インサートに、頂部層（０．１５ｍＬ）及び基底層（０．８５ｍＬ）上に、３重に添加した。
ウイルス感染及び試料処理：
化合物と共に１時間インキュベートした後、培養物の頂端側を洗浄し、次いで、化合物又はアッセイ対照培地の存在下で、ＭＯＩ＝０．１ＰＦＵ／細胞で１時間、３７℃で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２臨床分離物（２０１９－ｎＣｏＶ／ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０）に感染させた。１時間のウイルスインキュベーション後、ウイルスを頂部側から除去し、培養物をＰＢＳで１回洗浄して、いかなる非結合ウイルスをも除去した。次いで、培養物を、新鮮な化合物と共に７２時間にわたり３７℃でインキュベートした。感染後２４時間及び４８時間後の時点で、基底外側の培地を、それぞれの化合物を含有する１ｍＬの新鮮な培地に置き換えた。
感染後７２時間後の時点で、組織及び培地を処理のために回収した。その頂部層を、０．４ｍＬのＴＥＥＲ緩衝液（Ｍｇ２＋とＣａ２＋とを含むＰＢＳ）で洗浄し、回収して、ＴＣＩＤ５０（５０％組織培養感染性用量）アッセイを介してウイルス力価を評価した。頂部層上清試料濃度の８倍連続希釈液を、ＶｅｒｏＥ６細胞を含む９６ウェルアッセイプレート（細胞２０、０００個／ウェル）に添加した。プレートを３７℃、５％のＣＯ２、及び９５％の相対湿度でインキュベートした。３日間（７２±４時間）にわたりインキュベートした後、プレートをクリスタルバイオレットで染色して、細胞変性効果（ＣＰＥ）を測定した。ウイルス力価は、ＲｅｅｄとＭｕｅｎｃｈ（Ｒｅｅｄら、１９３８年）の方法を使用して計算した。ＴＣＩＤ５０値は、３重に作製した試料から決定された。ＴＣＩＤ５０アッセイの結果を確認するために、プラーク減少アッセイを行った。簡潔に説明すると、頂部層上清試料濃度の１０倍連続希釈液を、プラーク減少アッセイのために、ＶｅｒｏＥ６細胞を含む２４ウェルアッセイプレート（１００，０００細胞／ウェル）に添加した。プレートを３７℃、５％のＣＯ２、及び９５％の相対湿度でインキュベートした。３日間（７２±４時間）インキュベートした後、プレートを５％中性緩衝ホルマリンで固定し、クリスタルバイオレットで染色してプラークを可視化した。力価は、以下の式を使用してＰＦＵ／ｍＬを単位として計算された：力価（ＰＦＵ／ｍＬ）＝プラークの数×１０希釈回数×１０（１００μＬの希釈された試料を添加したため、ｍＬ単位の数を得るため）。アッセイを２回行い、第２のアッセイを、ウイルス＋ＤＭＳＯ及び０．２μｇ／ｍＬのウパモスタットで行い、追加の試料希釈液を評価した。
オパガニブ、対照化合物、及びウイルス感染に曝露した後のＨＢＥＣ細胞の健康を評価するために、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）放出アッセイを行った。組織培養インサートの底部外側層からの培地を感染後７２時間後に除去し、製造元（Ｐｒｏｍｅｇａ）の指示に従ってＬＤＨ貯蔵緩衝液で希釈した。試料をＬＤＨ緩衝液で更に希釈し、等量のＬＤＨ検出試薬と共にインキュベートした。室温で６０分間インキュベーションした後に、発光を記録した。無細胞対照が、培養培地バックグラウンドを決定するための陰性対照として、またブレオマイシンが、陽性細胞傷害性対照として、含められた。発光を報告し、バックグラウンドレベルは、許容可能な発光範囲（範囲１，０００～１０，０００）内に見られた。
更に、ＨＢＥＣ組織の頂部層は、Ｔｒｉｚｏｌ ＬＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を各培養インサートに添加し、数回上下にピペッティングし、細胞を溶解させて回収し、将来のＲＮＡ及びタンパク質発現分析用に－８０℃で保存した。
結果：
ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１は、ヒト気管支上皮組織培養におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の非常に強力な抗ウイルス阻害剤である。
この研究では、正常なヒト気管支上皮細胞（ＨＢＥＣ）を、各培養物の頂端及び基底外側の両方において、６つの異なる濃度のウパモスタット（０．１２～３０．０μｇ／ｍＬの範囲）及び３つの異なる濃度のＷＸ－ＵＫ１（３．３３～３０．０μｇ／ｍＬの範囲）で３重に前処理した。前処理後、ＨＢＥＣをＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（２０１９－ｎＣｏＶ／ＵＳＡ－ＷＡ１／２０２０）に曝露し、化合物と共に３日間インキュベートした。感染させた３日後、頂部層を洗浄し、ＴＣＩＤ５０アッセイによって、ウイルス負荷について評価した。基底外側培地を回収し、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の存在について評価した。これは、損傷した細胞から放出されて、細胞死／生存率の指標として機能するものである。比較のために、３つの濃度のカモスタット（０．５～２５．０μｇ／ｍＬの範囲）、確立されたＴＭＰＲＳＳ２阻害剤を含めた。
ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の両方は、強力な抗ウイルス活性を示し、細胞生存率を有意に損なうことなく複製は、投与量依存的に阻害された（ただし各化合物の最も高い投与量を除く）。ウイルス負荷が３桁及び４桁分も減少するのが、ＴＣＩＤ５０によって、それぞれ、ウパモスタット（０．１２μｇ／ｍＬ）及びＷＸ－ＵＫ１（３．３３μｇ／ｍＬ）の最も低い濃度で観察された。ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の両方は、感染後３日時点でのウイルス力価に同様の減少をもたらした。ＬＤＨ放出アッセイにおいて評価された、細胞生存率は、ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１について評価された中の最も高い濃度を除いて、全く損なわれないと報告された。
ヒト一次上皮培養系におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の抗ウイルス活性を実証するために、空気液体界面で成長させる、ヒト誘導気道の細胞の複雑さ及び生理学を要約するＨＢＥＣ培養における抗ウイルスアッセイを実施した。ウパモスタットで処理された、及びＷＸ－ＵＫ１で処理された、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたＨＢＥＣ培養物において、３日間のインキュベーション後、感染性ウイルス産生の投与量依存的な減少（ＴＣＩＤ５０及びプラーク減少アッセイによって確認）が、薬理学的に妥当な濃度で観察された（図４Ａ及び図４Ｂ）。これらの結果は、既知のＴＭＰＲＳＳ２阻害剤であるカモスタットと比較しても、良好な結果である。
プラーク減少アッセイ結果でＥＣ５０推定値を計算した。試験された中の最も高い濃度では、ウイルス産生の阻害は５０％を超えた。グラフパッドを使用して、ＥＣ５０を利用可能なデータで推定した。推定されたＥＣ５０は、０．０２μｇ／ｍＬであった。以下の式を利用して、以下に記載されるように、ＴＣＩＤ値を推定ＰＦＵ値に変換した後の％阻害率を計算した。
％阻害率＝（（値－平均ウイルス対照値）／（平均細胞対照値－平均ウイルス対照値）＊１００）
次いで、以下の指示に従って、ＧｒａｐｈＰａｄを介して％阻害率の値を分析した。
－Ｘ値は、ウパモスタット濃度である。
－Ｙ値は応答である。
－「投与量対応答曲線」を選択する。
－分析、非線形回帰、及び方程式の投与量対応答（刺激）セットを選択し、［投与量］対応答の、可変勾配を選択する。他の全てのデフォルト設定を受け入れた。その結果、ＥＣ５０は、０．０２μｇ／ｍＬであると計算された。
ウイルス複製は、ＬＤＨ放出量を通じて測定された細胞生存率を有意に損なうことなく（ただし試験された中での最も高い濃度を除く）、ウパモスタット、ＷＸ－ＵＫ１、及びカモスタットによって阻害された。非生存細胞から放出されたＬＤＨを測定するために、組織培養インサートの底部外側層からの培地を感染後７２時間後に除去し、製造元（Ｐｒｏｍｅｇａ）の指示に従ってＬＤＨ貯蔵緩衝液で希釈した。試料をＬＤＨ緩衝液で更に希釈し、等量のＬＤＨ検出試薬と共にインキュベートした。室温で６０分間インキュベーションした後に、発光を記録した。無細胞対照が、培養培地バックグラウンドを決定するための陰性対照として、またブレオマイシン（１５１μｇ／ｍＬ）が、陽性細胞傷害性対照として、含められた。発光値から無細胞対照の値を引いた値（平均発光読み取り値は６９３６）を使用して、データをプロットする。生理学的に妥当なヒト呼吸器組織モデルを使用するこのデータは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス複製を強く阻害するウパモスタットの潜在性を示し、強力な抗ウイルス効果が見られる投与量範囲にわたるＨＢＥＣ培養における細胞傷害性が限定的であり（図５）、ＣＯＶＩＤ－１９を有する患者を治療するためのウパモスタットの有望可能性を更に実証している。細胞培養物の５０％の細胞毒性濃度（ＣＣ５０）を利用可能なデータで生成して、対照細胞と比較して処理細胞の吸光度を５０％減少させるために必要な化合物濃度を決定した。ＭＴＴアッセイを介して生成された発光データを使用して、計算されたウパモスタットのＣＣ５０値は、４６．３７μＭ（又は２９．２μｇ／ｍＬ）であった。このＣＣ５０濃度では、４．６μＭ（又は２．９μｇ／ｍＬ）未満のＥＣ５０濃度が、１０より大きいＳＩ値（ＣＣ５０／ＥＣ５０）をもたらすであろう。
実施例３：ＡＲＤＳ誘導性血栓症に対するＡＢＣ２９４６４０のインビボでの有効性の評価
この研究は、ラット静脈うっ血モデルを使用して、急性呼吸窮迫症候群（acute respiratory distress syndrome、ＡＲＤＳ）条件における、その場での血栓性塞栓有害事象の発生率を低減するためのＡＢＣ２９４６４０の有効性を評価した。このアッセイは、ＬＰＳ誘発性肺損傷後の血栓性リスクを測定するように設計されている。ＬＰＳ誘発性肺損傷は、ＡＲＤＳの最も一般的に使用されるげっ歯類モデルのうちの１つであり、ＡＲＤＳ患者において観察された好中球炎症応答を模倣すると説明されたものである。ＬＰＳ誘発性ＡＲＤＳのメカニズムは、内皮細胞の損傷及び全身性炎症応答に基づく。
動物における静脈うっ血（Ｗｅｓｓｌｅｒ）試験は、インビボでの高い凝固性を測定するための実験室尺度として、４０年以上にわたって広く使用されている。様々な血液製品の血栓形成性を評価するのに非常に貴重なものであることが証明されている。
注入後３時間、注入後２４、４８、及び７２時間時点で、試験化合物を、２５０ｍｇ／ｋｇの用量で強制経口投与によって投与した。Ｅ．ｃｏｌｉ（Ｏ５５：Ｂ５）からの適切な量のＬＰＳを、生理食塩水で希釈して、４００μｇ／ｍＬの最終濃度とした。この溶液を、気管内注入（０．５ｍＬ／ｋｇ）によって与えた。ビヒクルは、ＰＢＳｐＨ７．４±０．１で構成された。ＡＢＣ２９４６４０を秤量し、ビヒクル（ＰＢＳ、０．３７５％、ｐＨ７．４）中に移して、２５ｍｇ／ｍＬの最終溶液を得た。ＡＢＣ２９４６４０溶液を、投与前に室温で１０分間撹拌した。この溶液は、強制経口投与（２５０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍＬ／ｋｇ）によって与えられた。
この研究には、２７５～４００ｇの体重のスプラーグドーリーラット（雄）を使用した。動物を研究ディレクターによって治療群にランダムに割り当てた。食物及び水は、自由に与えた。行動及び一般的な健康状態の観察は、屠殺まで行った。注入前に体重を記録し、注入後２４、４８、及び７２時間後の時点で記録した。
動脈酸素飽和度（ＳｐＯ２）と心拍数を、意識のあるマウスに装着したマウスパルス酸素メーターカラープローブ（ＭｏｕｓｅＯｘ Ｐｌｕｓ ｓｙｓｔｅｍ、Ｓｔａｒｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって、注入前、並びに注入後２４、４８、及び７２時間後の時点で記録した。ラットはまた、ＳｐＯ２の場合と同じスケジュールで、プレチスモグラフチャンバ環境にも導入された。機能的呼吸器パラメータは、全身プレチスモグラフ（ＶｉｖｏＦｌｏｗ、ＳＣＩＲＥＱ）によって評価された。分析された機能性呼吸器パラメータには、呼吸数、ＰｅｎＨ（肺混雑指数）、及び吸気／呼気時間の測定値が含まれた。血液試料もまた、完全な血球数及びサイトカインレベル評価のため、最終的手順の前に採取した。
この研究では、ＡＲＤＳは、ＬＰＳの気管内注入によって誘発された。ＡＲＤＳ誘発及び発症プロセスを通して、動物に、ビヒクル又はＡＢＣ２９４６４０を（注入後３時間、２４時間、４８時間及び７２時間後の時点で）、強制経口投与することによって投与した。７２時間の意識のある状態での測定に続いて、ラットを麻酔し、静脈の血行停止を下大静脈（７２時間の時点での強制経口投与から４時間後の時点）で行った。血行停止状態を３０分間維持した。次いで、そのセグメントを切除し、その内容物をスコア化した。続いて、動物を全採血によって安楽死させた。
全採血後、気管切開を行い、胸腔を開き、肺を露出させた。次いで、気管を灌流システムのカニューレに接続した。冷たいＰＢＳ１ｘと、プロテアーゼ阻害剤１ｘとの溶液を気管によって注入している間、左の肺をクランプし、肺の右葉で気管支肺胞洗浄液（bronchoalveolar lavage fluid、ＢＡＬＦ）での洗浄を実行し、更なる分析のために回収した。ＢＡＬＦ試料中の総細胞数を、細胞の差分数と共に、また総タンパク質含有量を、評価した。ＢＡＬＦのアリコートは、ＢＡＬＦにおけるケモカイン／サイトカインのレベルの定量化のために保持された。
肺の左葉を切除した。採取したばかりの左葉を湿った状態で秤量し、左肺重量及び左肺指数（左肺重量／体重×１００）を決定した。左葉の下部を使用して、肺浮腫の指標である、左肺湿潤／乾燥比を決定した。左肺の残りの部分を均質化し、タンパク質含有量の定量化のために等分した。
ＬＰＳによる肺損傷の誘発：
１．ＬＰＳ又は生理食塩水の注入前に、全てのラットの機能的呼吸器パラメータを全身プレチスモグラフィーによって評価し、ＳｐＯ２を、カラープローブパルスオキシメータを装着した意識のあるラットで評価した。ラットを最初に、生理学的評価の前に、プレチスモグラフチャンバに順応させた。呼吸数、ＰｅｎＨ、及び吸気／呼気時間の測定値を分析した。
２．酸素中の２．５％イソフルランＵＳＰ（Ａｂｂｏｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、Ｃａｎａｄａ）でラットを麻酔した。次いで、ラットに管を取り付け、ＬＰＳ又は生理食塩水を、気管内注入によって送達した。
３．麻酔からラットを覚まし、それぞれのケージに戻した。
４．注入の３時間後、ＡＢＣ２９４６４０の最初の投与量を強制経口投与によって投与した（以下の表１参照）。
Figure 2023517920000024
 ５．ラットを定期的に評価して、動物の福祉（一般的な挙動及び毎日の体重）を確保した。
６．動物には、注入後２４、４８、及び７２時間後の時点でも、強制経口投与によって投与した。
７．ＳｐＯ２と、全体的なボディプレチスモグラフィも、注入後２４、４８、及び７２時間の時点で評価した。
８．静脈停止手順に先立って、血液試料を、頸静脈から、完全な血球数及びサイトカインレベルの測定のために採取した。
９．最後の投与の４時間後、ラットを、酸素中の２．５％イソフルランＵＳＰ（Ａｂｂｏｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社、カナダ、モントリオール）でラットを麻酔した。この手順は、体温を制御するために、恒温ブランケット上で行った。
１０．ラットの下大静脈を露出させ、２本の緩い縫合糸を、１ｃｍ離して配置した。隔離されたセグメントの任意の側副血管を結紮した。
１１．血行停止は、３０分間にわたって、その場で維持された。
１２．静脈血行停止セグメントを取り外し、長手方向に開き、濾紙上で空にし、撮影した。いかなる既存の血栓も取り除き、濾紙上で乾かした。血栓を測定し、秤量し、０～４のスケールでスコア化した（表２を参照）。
Figure 2023517920000025
 １３．静脈の血行停止に続いて、動物を全採血することによって安楽死させ、右肺から気管支肺胞洗浄液を回収した。そうするために、気管切開を行う前に、気管上の筋肉を切開した。胸腔を開いて肺を露出させ、気管を灌流システムのカニューレに接続した。１５ｍＬ（３×５ｍＬ）の、冷たいＰＢＳ１ｘと、プロテアーゼ阻害剤１ｘとの溶液を気管によって注入している間、左の肺をクランプし、肺の右葉で気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）での洗浄を実行した。更なる分析のためにＢＡＬＦを回収した。ＢＡＬＦ試料中の総細胞数を、細胞の差分数と共に評価した。ＢＡＬＦのアリコートは、ＢＡＬＦにおけるケモカイン／サイトカインのレベルの定量化のために保持された。
１４．次いで、左肺を採取し、左肺重量及び左肺指数計算のために秤量した。肺組織浮腫を、湿潤／乾燥比計算を使用して評価した。左肺の下部を単独で秤量（湿潤重量）し、肺の湿潤／乾燥比を決定するために使用した。６０℃で少なくとも２４時間乾燥させた後、再秤量した（乾燥重量）。
各パラメータ（以下に列挙）を各グループについてコンパイルし、適切な統計分析で棒グラフで提示した。
１－体重の変化
２－飽和度（ＳｐＯ２）及び心拍数（ｂｐｍ）
３－呼吸器パラメータ： 吸気／呼気時間
一回換気量及び呼気量
呼吸数
ＰｅｎＨ
４－ＢＡＬＦ総細胞数、及び細胞差
５－ＢＡＬＦサイトカイン／ケモカインレベル
６－左肺重量及び指数
７－肺の湿潤／乾燥比
８－肺ホモジネート中の肺総タンパク質含有量
ＬＰＳは、炎症及び致死状態と関連する肺重量の有意な増加を誘発する。この増加は、湿潤／乾燥比の重要な増加によって示される、重度の浮腫に関連している。肺の重量増加は、７２時間の時点での強制経口投与から４時間後の時点で、ＬＰＳ－ビヒクル群と比較してＬＰＳ－ビヒクル群においてより大きかった。２５０ｍｇ／ｋｇで投与されたＡＢＣ２９４６４０は、血栓症の低減を実証した。それは、血餅の長さ、重量、及び全血栓スコアの低下によって証明されている。
実施例４：ＷＸ－ＵＫ１阻害の標的としてのＴＭＰＲＳＳ２及びＴＭＰＲＳＳ１１（Ａ）の評価
異なるプロテアーゼファミリーに属するいくつかの酵素は、プライミングのためにＣｏＶ Ｓタンパク質によって乗っ取られ得る。ｐＨ依存性システインプロテアーゼカテプシンＬ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、並びにセリンプロテアーゼフュリンは、標的細胞へのウイルス侵入中にＳタンパク質をプライミングすることができる。ＴＴＳＰのいずれかがウパモスタットによる阻害の関連標的であるかどうかを決定するために、構造モデル化／予測、構造分析、及び関連文献のレビューを含む分析を実施した。
ＴＭＰＲＳＳ２及びＴＭＰＲＳ１１Ａの哺乳動物発現系は、ＭｙＢｉｏＳｏｕｒｃｅから購入した（それぞれＭＢＳ１１９３７３１及びＭＢＳ１３４５８２４）。タンパク質を製造業者に従って１ｍｇ／ｍＬに再構成し、再構成タンパク質と共にゲルで試験を行った。ＷＸ－ＵＫ１の新鮮なストック溶液（１００％のＤＭＳＯ中、１００ｍＭのＷＸ－ＵＫ１）を作製した。濃縮ストックを、アッセイで更に希釈する前に、ＨＢＳ緩衝液中で１ｍＭに希釈した。
酵素阻害剤は、いくつかの異なる方法で酵素及び／又は酵素基質錯体と相互作用し、酵素触媒反応の速度を低下させ得る。各阻害モードについて、酵素と阻害剤との間の相互作用の強度を反映する、阻害剤の解離定数Ｋｉを計算することができる。阻害剤のＫｉは、基材のＫｍに類似している。小さなＫｉ値は、酵素への阻害剤の緊密な結合を反映するが、より大きなＫｉ値は、より弱い結合を反映する。Ｋｉを計算するために使用される正確な式は、阻害のモードに依存し、これは、阻害剤の存在下での酵素に対するＶｍａｘの「見かけの」値及びＫｍと、いかなる阻害剤も存在しない下での、Ｖｍａｘ及びＫｍ値とを比較することによって実験的に決定することができる（以下の式２）。
これらの研究のために選択された発色基質は、Ｓ－２２８８基質であった。Ｋｉ値は、発色基質のヒトセリンプロテアーゼ開裂に対するＷＸ－ＵＫ１の効果を測定することによって決定した。Ｋｉ値の決定については、発色基質を添加して反応を開始する前に、一連の濃度のＷＸ－ＵＫ１を標的ヒトセリンプロテアーゼと共にプレインキュベートした。反応速度を、線形回帰を使用して勾配から決定し、これらを非阻害反応のものに正規化した。正規化された活性をＷＸ－ＵＫ１濃度に対してプロットした後、Ｋｉ値を、式１を用いて非線形回帰によって得た。
Figure 2023517920000026
 ｖｉ／ｖ０は、阻害剤があるときとないときの初期速度の比であり、阻害剤濃度［Ｉ］と、基質濃度［Ｓ］との関数として記載される。
ＫＭパラメータは、標準的なミカエリス・メンテン速度式によって得られた。セリンプロテアーゼを、実験Ｖｍａｘ値を得るのに十分に高い好適な一連の濃度の基質に添加した。その後の反応速度を、基質濃度に対してプロットした後、ミカエリス・メンテンの式（２）を用いてＫＭ値を導出した。
Figure 2023517920000027
全ての実験は、ＨＢＳ（３０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ＝７．４；１５０ｍＭのＮａＣｌ；０．５％のＢＳＡ）中、３７℃で少なくとも３回実施した。反応を、４０５ｎｍにおいて、２読み取り／分で、少なくとも４５分間監視した。ＷＸ－ＵＫ１を１００％のＤＭＳＯ中に保存したため、プロテアーゼ活性に対する望ましくないＤＭＳＯ効果を排除するために、全ての実験には阻害されていないＤＭＳＯ－対照が含まれた。
ＷＸ－ＵＫ１によるヒトＴＭＰＲＳＳ２の阻害
図６は、式１をフィットさせた曲線であり、ｙ軸上には分数速度を取り、ｘ軸上にはＷＸ－ＵＫ１濃度を取った曲線である。グラフは、ＷＸ－ＵＫ１がＴＭＰＲＳＳ２の活性をどのように阻害するかを示す。これにより、Ｋｉは、２．９±０．０４（３）μＭであると決定された。
ＷＸ－ＵＫ１によるヒトＴＭＰＲＳＳ１１ａの阻害
図７は、式１をフィットさせた曲線であり、ｙ軸上には分数速度を取り、ｘ軸上にはＷＸ－ＵＫ１濃度を取った曲線である。グラフは、ＷＸ－ＵＫ１がＴＭＰＲＳＳ１１Ａの活性をどのように阻害するかを示す。これにより、Ｋｉは、０．３９±０．０１（３）μＭであると決定された。
表３は、プロテアーゼのパネルに対するＷＸ－ＵＫ１の阻害定数、Ｋｉ値を列挙する。
Figure 2023517920000028
実施例５：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に媒介された侵入に対するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の効果の評価
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質（ＶＳＶｐｐ＋ＳＡＲＳ－２－Ｓ Δ１８）又は対照としての水疱性口内炎ウイルス（vesicular stomatitis virus、ＶＳＶ）の糖タンパク質で偽型とした、複製欠陥のある、単一サイクル水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）粒子の細胞侵入に対する、ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の両方の阻害効果を評価するために、研究を行った。Δ１８は、Ｓタンパク質の１８個のＣ末端アミノ酸の欠失を指し、ＡＣＥ２又はＴＭＰＲＳＳ２の使用に影響を与えることなく、偽型決定効率を増加させるものである。偽型の侵入及びその阻害を、Ｃａｌｕ－３細胞及びＶｅｒｏ－Ｅ６細胞で評価した。肺由来ヒト癌細胞株であるＣａｌｕ－３細胞は、ＴＭＰＲＳＳ２依存的な様式でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＳ－駆動侵入を可能にする。培養した肺細胞のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を阻害することが示される既知のＴＭＰＲＳＳ２阻害剤である、カモスタット（Ｈｏｆｆｍａｎｎら、２０２０年）を含む、ＴＭＰＲＳＳ２を阻害する薬剤は、このモデルでＳ－駆動侵入を阻害すると予想される。ミドリザル腎臓細胞株であるＶｅｒｏ細胞は、ＴＭＰＲＳＳ２非依存性ながらカテプシンＬ依存的に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク駆動侵入を可能にする。クロロキンを含む酸性細胞内エンドソームのｐＨを上昇させる薬剤は、このモデルで侵入を阻害すると予想される。水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）のＧタンパク質によって駆動される侵入は、特異性対照として機能した（ＶＳＶ－Ｇ駆動侵入は、低いｐＨ値に依存し、したがってクロロキン感受性であるが、カモスタット感受性ではない）。
方法：
シュードタイピングの場合、水疱性口内炎ウイルスの偽型（ＶＳＶｐｐ）は、公開されたプロトコル（Ｂｅｒｇｅｒ Ｒｅｎｔｓｃｈ ａｎｄ Ｚｉｍｍｅｒ、２０１１年）に従って生成された。簡潔に言えば、研究中のウイルス表面糖タンパク質を発現するようにトランスフェクトされた２９３Ｔには、ＶＳＶ－Ｇ開リードフレーム、ＶＳＶ＊ＤＧ－ｆＬｕｃ（親切にも、Ｇｅｒｔ Ｚｉｍｍｅｒ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｍｉｔｔｅｌｈａｕｓｅｒｎ／Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）により提供された）の代わりに、強化緑色蛍光タンパク質（enhanced green fluorescent protein、ｅＧＦＰ）及びホタルルシフェラーゼの発現カセットを含有する複製欠損ＶＳＶベクターが接種された。３７℃で１時間のインキュベーション期間の後、接種物を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄した後、抗ＶＳＶ－Ｇ抗体（Ｉ１、マウスハイブリドーマ上清、ＣＲＬ－２７００、ＡＴＣＣから）を補充した培地を添加して、残留入力ウイルス（ＶＳＶ－Ｇを発現する細胞には、抗体を添加しなかった）を中和した。偽型粒子が、接種後１６時間後の時点で採取され、遠心分離によって細胞破片から清澄化され、実験に使用された。
形質導入のため、標的細胞を、それらがそれぞれの偽型を接種する前に５０％～７５％の培養密度に達するまで、９６ウェルプレートで増殖させた。プロテアーゼ阻害剤を含む実験では、標的細胞を、形質導入の２時間前にそれぞれの化学物質で処理した。形質導入効率を、市販の基質（Ｂｅｅｔｌｅ－Ｊｕｉｃｅ、ＰＪＫ）及びＨｉｄｅｘ Ｓｅｎｓｅ プレート照度計（Ｈｉｄｅｘ）を使用して、細胞溶解物中のホタルルシフェラーゼの活性を測定することによって、形質導入１６時間後に定量化した。形質導入アッセイは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクを有する単一サイクルの水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）の侵入を測定するものである。
結果：
ＳＡＲＳ－２－Ｓ及びＶＳＶ－Ｇを有する偽型の侵入を阻害するウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１の能力を、Ｃａｌｕ－３（ヒト肺癌細胞）及びＶｅｒｏ－Ｅ６細胞で評価した。肺由来ヒト癌細胞株であるＣａｌｕ－３細胞は、ＴＭＰＲＳＳ２依存的な様式、したがって、カモスタット感受性様式でのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク駆動侵入を可能にする。アフリカミドリザル由来の腎臓細胞株であるＶｅｒｏ細胞は、カテプシンＬ依存的様式及びクロロキン感受性様式でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク駆動侵入を可能にする。水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）のＧタンパク質によって駆動される侵入は、特異性対照として機能した（ＶＳＶ－Ｇ駆動侵入は、低いｐＨ値に依存し、したがってクロロキン感受性であるが、カモスタット感受性ではない）。
ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１は、中程度の効率で、ヒト肺癌細胞（Ｃａｌｕ－３）及びミドリザル腎臓細胞（ＶｅｒｏＥ６）における、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｓタンパク質媒介侵入を阻害する。
Ｃａｌｕ－３細胞において、ＶＳＶｐｐ＋ＳＡＲＳ－２－ＳΔ１８に対して試験される場合、ＷＸ－ＵＫ１及びウパモスタットの両方は、カモスタット、別のセリンプロテアーゼ阻害剤（図８Ａ）よりは低いものの、中程度の阻害活性を示した。表面ＴＭＰＲＳＳ２を有さないＶｅｒｏ－Ｅ６細胞で試験される場合も、中程度の阻害活性が、ウパモスタット及びＷＸ－ＵＫ１について依然として見られた。カモスタットは、この状況において不活性であったが、クロロキンの最高濃度は、Ｓタンパク質駆動侵入を強力に阻害した（図８Ｂ）。ＷＸ－ＵＫ１及びウパモスタットは、Ｃａｌｕ－３細胞におけるＶＳＶ－Ｇ侵入を中適度に阻害し、ウパモスタットのより広い範囲の活性を示唆している（図９）。クロロキンを除く３つの化合物は全て、Ｖｅｒｏ７６細胞においてＶＳＶ－Ｇに対して試験した場合には不活性であった。全体として、これらの結果は、ＷＸ－ＵＫ１及びウパモスタットが、Ｃａｌｕ－３及びＶｅｒｏ細胞へのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク駆動侵入を、中程度の効率で阻害することを示す。モデルの性質により、実際のインビトロ又はインビボ阻害濃度の具体的推定は、不可能である。
実施例６：オパガニブによる、肺炎を伴うＣＯＶＩＤ－１９の治療
ＣＯＶＩＤ－１９感染症と診断され、肺炎を発症し、機械的換気を必要としない、又は２４時間以下しか機械的に換気されていない患者が、この入院研究で評価された。
主要目的：
１）ＣＯＶＩＤ－１９感染症で入院した患者において、５００ｍｇ、Ｑ１２時間で投与されたオパガニブの安全性及び許容性を評価すること。
オパガニブ治療に対するウイルス排出を評価する。
副次的／探索的には、以下のうちの１つ以上を含み得る：
１）ＣＯＶＩＤ－１９感染症で入院した患者で、オパガニブ治療を受けている患者のバイタルサインを評価すること。
２）ＣＯＶＩＤ－１９感染症で入院した患者で、オパガニブ治療を受けている患者の、臨床的改善を評価すること。
３）ベースラインで機械的に換気されていない患者について、オパガニブ治療を受けた場合の、機械的換気の必要性を評価すること。
４）ＳｐＯ２／ＦｉＯ２比又はＰａＯ２／ＦｉＯ２比と、室内空気に対するＳｐＯ２とを介して、低酸素症の改善を評価すること。室内空気に、又は室内空気で特定のあるＳｐＯ２酸素飽和度に戻ること。
治療上のウイルス負荷の変化、及びＤ－二量体、心臓トロポニン、ＬＤＨ、及びフェリチンレベルの変化の評価。
研究設計
この研究には、１つの能動的治療アームが含まれた。機械的換気を必要としない又は２４時間未満の機械的換気しか受けていない、ＣＯＶＩＤ－１９肺炎で入院する全ての適格な患者に、非盲検オパガニブを、５００ｍｇＱ１２時間で毎日２回投与。患者は、最大１週間のスクリーニング期間に入った。適格な患者は、最大２週間の治療期間に入った。全ての参加者は、２週間の治療期間の終わりに、試験薬の最後の投与を受けた後、又は１４日目の前にＣＯＶＩＤ－１９ウイルスについて２回連続して毎日のウイルススワブ検査で陰性となった後、又は１４日目よりも前に、早期に薬物投与を中止された後に、２週間にわたりフォローされた。研究参加の最大期間は３５日（７週間）であった。試験参加者は、最大で合計１４日間（２週間）まで、又は２回連続して毎日の鼻咽頭ウイルススワブ検査でＣＯＶＩＤ－１９に陰性となるまでのうち、いずれか早い方までの期間、毎日オパガニブを、２×２５０ｍｇカプセル（５００ｍｇ）、Ｑ１２時間で受けた。オパガニブは、食事と共に（軽度～中程度の食事の後に）投与され、投与に続いて２４０ｍＬ（８流体オンス）の水を飲ませた。患者が経鼻胃管を通してオパガニブを服用することのみが可能であった場合、カプセルの内容物を２０ｃｃの通常の生理食塩水溶液に懸濁させ、経鼻胃管を通して押し出し、滅菌水で十分に洗い流した。患者が経管で給食されている場合、オパガニブは、経管での食事の少し後（約１５～３０分後）に投与された。
主要な参加基準：
１．成人男性又は女性、年齢１８歳以上７５歳以下。
２．ＣＯＶＩＤ－１９への感染及び肺炎が証明されていること。ただし、機械的換気を必要としないか、又はインフォームドコンセントの時点で、２４時間以下の機械的換気しか必要としていなかった。
３．患者、保護者、又は法的に許容可能な代表者は、ＩＲＢ承認のインフォームドコンセント同意書に署名している。
主要除外基準：
１．ニューヨーク心臓協会クラスＩＩＩ又はＩＶの心臓疾患、過去６ヶ月以内の心筋梗塞、不安定性不整脈、又はＥＣＧ上での虚血の証拠があること
２．治験責任医師の判断における、治療のリスクを追加し得る任意の併存疾患。
３．妊娠（血清試験で陽性）又は授乳中の女性
４．このプロトコルで必要とされる手順に従う意思がないか、従うことが能力的にできないこと。
５．ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）又はＡＬＴ（ＳＧＰＴ）が、２．５×正常上限（ＵＬＮ）よりも大きいこと
６．ビリルビン値が、１．５×ＵＬＮより大きい（ビリルビンの増加が、ギルバート症候群に起因する場合を除く）こと
７．血清クレアチニンが、２．０×ＵＬＮよりも大きいこと
８．絶対好中球数が、１０００個／ｍｍ３未満であること
９．血小板数が、７５，０００個／ｍｍ３未満であること
１０．ヘモグロビンが８．０ｇ／ｄＬ未満であること
１１．現在ワルファリン、アピキサバン、アルガトロバン、又はリバーロキサバンを摂取していること
１２．現在、薬物乱用又はアルコール乱用をしていること
研究評価：
以下を毎日監視する（表４参照）：
・併用薬のレビュー
・有害事象
・物理的検査
・バイタルサイン（体温、血圧、心拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度）
・臨床症状（咳、呼吸困難、悪心、嘔吐、下痢）
・鼻咽頭ウイルススワブ
・血清の化学的性質
・差分を含むＣＢＣ
・胸部Ｘ線
・尿検査
Figure 2023517920000029
 １２回連続で毎日のウイルススワブ試験でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に陰性である場合、１４日目又はそれより早い。
２体温、血圧、心拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度を評価する。
３咳、呼吸困難、悪心、嘔吐、下痢を評価する。
４妊娠の可能性がある女性。無作為化前の３日以内の血清妊娠検査は陰性でなければならない。
投与形態及び投与モード：
オパガニブは、白色不透明硬質ゼラチンカプセル中の賦形剤と共に、２５０ｍｇのオパガニブを含有する、カプセル２５０ｍｇとして供給された。
オパガニブは、２つのカプセル（５００ｍｇ）として最大２週間、１２時間ごとに、経口（又は、適切な場合には、経鼻胃管を介して）投与された。各投与量は、適切な場合、食事と共に、又は経管での食事の後１５～３０分後に投与される。
研究エンドポイント：
主要安全エンドポイント：
１）有害事象、実験室試験、身体検査、及びバイタルサイン
２）オパガニブ治療に対する１４日目までに、鼻咽頭ウイルススワブで２回連続で陰性になった患者の割合
副次的／探索的エンドポイント：
１）バイタルサイン改善を示す患者のパーセンテージ（体温、心拍数、呼吸数、酸素飽和度のうちの１つ以上の改善に基づく）
２）臨床的改善を示す患者のパーセンテージ（以下の症状のうちの１つ以上の改善に基づく：咳、呼吸困難、悪心、嘔吐、下痢）
ベースラインで機械的に換気されなかった患者で、２週間の試験薬なしのフォローアップの終了までに機械的換気を必要としない患者のパーセンテージ
結果：
・結果は、特例使用について承認された７人の患者から得られた。これらの患者は、補助酸素が供給された、低酸素症を伴う中程度から重度のＣＯＶＩＤ－１９関連肺炎を有した。患者には、７人の患者のうちの６人におけるバックグラウンド療法としてヒドロキシクロロキン（ＨＣＱ）を含む、オパガニブ＋標準治療を与えた。
・以下の表５から分かるように、オパガニブに関連したものかも、していないものかもしれない下痢のために１日のみの治療しかできなかった患者＃７（その患者には、ＨＣＱ及びアジスロマイシンも与えられた）を除いて、６人の中程度から重度の患者が有意に改善され、５人の患者は室内の空気を呼吸する状態に戻り、３人の患者は退院した。
・６人の患者全てがＣ反応性タンパク質（C-Reactive Protein、ＣＲＰ）の低減を示し、６人の患者全てが、補助酸素の使用の減少及びより高いリンパ球数を含む、測定可能な臨床的改善を示した。
・全ての患者は、２５０ｍｇのオパガニブをＱ１２時間で、最初の３日間を開始し、次いで５００ｍｇのオパガニブを、Ｑ１２時間で投与するように増加された。
・６人のみの患者にもかかわらず、これらの予備的な所見は、オパガニブで治療された最初のＣＯＶＩＤ－１９患者の臨床的改善を示し、ＣＯＶＩＤ－１９患者におけるオパガニブ使用の許容性に、予備的ではあるが裏付けを提供するものである。
Figure 2023517920000030
 ＊治療開始後１日での改善、血液検査なしで室内空気へ。
ＲＡ－室内空気、Ｄ／Ｃ－退院、ＳＯＢ－息切れ
５人の患者を分析に含め、比較の目的で、同じ性別、同じ重症度の患者（ベースライン特性）を有する対照群を使用した。グループ間の単変量比較は、カテゴリー変数のカイ二乗検定及びｔ検定又はマンホイットニーＵ検定を適宜、連続的変数について行った。時間変数は、年齢及び背景疾患のために調整されたコックス比例ハザード回帰と比較された。ＣＲＰ及びリンパ球の変化を、複数の比較のためのボンフェローニ補正を伴う反復測定による一般的な線形モデルを利用して比較した。
オパガニブで治療された患者は、リンパ球数の有意に速い増加を有した。他の全ての臨床転帰は、統計的に有意ではないが、治療群に有利であるという傾向を有していた：対照では、高い流量の鼻カニューレ（high-flow nasal cannula、ＨＦＮＣ）の使用中止までの平均時間は、治療例で１０日、それに対して対照群では１５日であり（ＨＲ＝０．３、９５％ＣＩ：０．０７～１．７、ｐ＝０．２）、周囲空気まで復帰にかかる時間が１３日対１４．５日であり、（ＨＲ＝０．４、９５％ＣＩ：０．１５～１．５）、治療例では機械的換気が必要なケースはなかったが、対照例では３３％が必要であった。重症のＣＯＶＩＤ－１９患者のこの小さな群では、オパガニブは、全ての治療された患者における臨床的パラメータ及び実験室パラメータの両方の改善が見られて、安全でありかつ十分に許容された。ＣＯＶＩＤ－１９感染についてのオパガニブの有効性は、無作為化されたプラセボ対照化試験で更に試験されるべきである。
実施例７：ＣＯＶＩＤ－１９肺炎におけるオパガニブの無作為化二重盲検プラセボ対照化、第２ａ相試験
主要目的：
１４日間（１日目～１４日目）にわたって、毎日の補助酸素流量（Ｌ／分）を使用した、総酸素必要量（曲線下の面積）を評価すること。
副次的目的：
１）Ｌ／分単位の酸素流量に基づいて、補助酸素におけるベースラインから５０％減少までかかった時間を評価すること。
２）１４日目までには、少なくとも２４時間にわたって補助酸素をもはや必要としない患者の割合を評価すること。
３）１４日目の無熱患者の割合を評価すること。
４）ＰＣＲによるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスワブ検査で陰性になるまでの時間を評価すること。
５）１４日目までに、ＰＣＲによってＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスワブ検査で陰性となった患者の割合を評価すること。
６）１４日目までの挿管及び機械的換気の必要性を評価すること。
７）機械的換気を必要とするまでの時間を評価すること。
８）ベースライン（体温が３８．０℃［１００．４°Ｆ］超として定義される）における発熱の少なくとも１つの測定値を有する患者で、１４日目で無熱（３７．２℃［９９°Ｆ］未満の体温として定義される）である患者の割合を評価すること。
９）ベースライン到達後、３０日間の死亡率を評価すること。
探索的目的：
炎症の全身マーカー（Ｄ－二量体、心臓トロポニン、Ｃ反応性タンパク質［ＣＲＰ］、乳酸デヒドロゲナーゼ［ＬＤＨ］、及びフェリチン）の変化を評価すること。
安全性についての目的：
ＣＯＶＩＤ－１９肺炎患者において、５００ｍｇを、Ｑ１２時間で最大１４日間、経口投与されたオパガニブの安全性及び許容性を評価すること。
研究対象の集団：
研究対象集団は、胸部Ｘ線における放射線不透過性として定義される肺炎を発症し、補助酸素を必要とする、ＣＯＶＩＤ－１９感染症と診断された患者からなる。患者は、少なくともスクリーニング中に入院し、ベースラインの状態になければならない（１日目）。
研究設計及び説明：
これは、第２ａ相、概念証明、多中央無作為化二重盲検、平行アーム、プラセボ対照化研究であった。インフォームドコンセントが得られた後、患者は、適格性を決定するために３日以下のスクリーニング段階に入った。４２人の適格患者がランダム化されて、標準治療に追加されたオパガニブか、又は標準治療に追加されたプラセボを１：１のランダム化比で受けた。治療割り当ては、患者、治験責任医師、及び病院スタッフ、並びに治験依頼者に対して盲検化されたままであった。ＣＯＶＩＤ－１９（Ｗｉｌｓｏｎ、２０２０）を引き起こすＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを特異的に標的とする確定的な治療のためのコンセンサスはないため、標準治療は、ＣｏＶＩＤ－１９パンデミック中に実施された、地域の、大きな施設で、又は個々の医師により実施された療法を参照した。
試験参加者は、標準的なケア（薬理学的及び／又は支持的ケア）に加えて、１２時間ごとに、オパガニブ２×２５０ｍｇカプセル（５００ｍｇ）か又はマッチするプラセボのいずれかを受けた。試験薬は、患者が補助酸素を必要とせずに病院から退院（この場合、試験薬は１０日目にのみ投与される）されない限り、１４日間毎日（１日目～１４日目）投与されるべきである。
全ての参加者は、患者又は医師の決定に基づいて、２週間の二重盲検治療期の終了時又は早期治験薬中止後に発生し得る試験薬の最後の投与後、４週間にわたってフォローアップされた。研究参加の最大持続期間は、最大４５日まで（最大３日間のスクリーニング、２週間の二重盲検治療段階及び４週間の試験薬物なしのフォローアップを含む）
層別化：
患者は、以下の３つのパラメータを考慮する最小化アルゴリズムに基づいて層別化された：スクリーニング時の年齢、７０歳以上、（はい又はいいえ）、スクリーニング時のＨｂＡ１ｃ、６．５以上（はい又はいいえ）、ベースラインでの酸素要件、非侵襲性正圧換気を必要とする（例えば、ＢＩＰＡＰ、ＣＰＡＰを介して）（はい又はいいえ）。
適格性基準：
参加：
１．成人男性又は女性、年齢１８歳以上８０歳以下
２．咽頭試料（鼻咽頭又は口腔咽頭）のＲＴ－ＰＣＲアッセイにより、ＣＯＶＩＤ－１９感染と証明され、かつ胸部Ｘ線における放射線非透過性として定義される肺炎である
３．患者はベースラインで補助酸素を必要とする
４．患者、保護者、又は法的代表者は、ＩＲＢ承認のインフォームドコンセント同意書に署名している
除外：
１．治験責任医師の判断における、治療のリスクを追加し得る任意の併存疾患。
２．挿管及び機械的換気を必要とする
３．室内空気では、酸素飽和度が９５％以上である
４．入院前に断続的又は連続的な携帯型酸素を必要とする、何らかの既存の呼吸器の不良状態
５．患者は、治験責任医師の臨床判断において、７２時間超生存する可能性が低い
６．妊娠（無作為化前３日以内の血清による検査で陽性）又は授乳中の女性
７．このプロトコルで必要とされる手順に従う意思がないか、従うことが能力的にできないこと。
８．フリーデリシアの式（ＱＴｃＦ）を使用して計算した、心電図（ＥＣＧ）の補正ＱＴ（ＱＴｃ）間隔が、女性の場合に４７０ｍｓ超、男性の場合に４５０ｍｓ超である
９．ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）又はＡＬＴ（ＳＧＰＴ）が、２．５×正常上限（ＵＬＮ）よりも大きいこと
１０．ビリルビン値が、１．５×ＵＬＮより大きい（ビリルビンの増加が、ギルバート症候群に起因する場合を除く）こと
１１．血清クレアチニンが、２．０×ＵＬＮよりも大きいこと
１２．絶対好中球数が、１０００個／ｍｍ３未満であること
１３．血小板数が、７５，０００個／ｍｍ３未満であること
１４．ヘモグロビンが８．０ｇ／ｄＬ未満であること
１５．現在、感受性ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ９、又はＣＹＰ２Ｃ１９基質であり、狭い治療指数を有する薬剤を摂取している
１６．強力な誘導剤又はＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４の阻害剤である薬剤を現在摂取している
１７．現在ワルファリン、アピキサバン、アルガトロバン、又はリバーロキサバンを摂取していること
１８．現在、薬物乱用又はアルコール乱用をしていること
１９．現在、抗ウイルス研究を含む薬理学的治療を評価する臨床研究に参加している
対象の数：
合計４９人の患者が研究においてスクリーニングされ、その４２人の患者が無作為化され（２３人がオパガニブ、１９人がプラセボに割り当て）、７人はスクリーニング不良であった。２人の患者を各群で無作為化したが、治療しなかった。１９人のオパガニブ患者と１６人のプラセボ患者とは、治療を完了した（１４日目）。３人のオパガニブ患者及び２人のプラセボ患者は、治療を早期に中止した。オパガニブ群の２人の患者は、研究薬の投与が終了するような有害事象を経験し、１人のプラセボ患者が有害事象により終了した。
スクリーニング／ベースライン評価：
・署名されたインフォームドコンセント
・適格性決定
・完全な病歴（ＣＯＶＩＤ－１９症状の発症を含む）
・併用薬評価
・システムのベースラインレビュー
・身体検査
・バイタルサイン（体温、血圧、脈拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度）
・患者が歩行可能である場合、体重
・酸素必要量（Ｌ／分）
・１２－リード心電図
・胸部Ｘ線
・ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＰＣＲ試験用の鼻咽頭又は口腔咽頭スワブ
・血清の化学的性質
・ＣＲＰ、Ｄ－二量体、ＬＤＨ、フェリチン、心臓トロポニン
・ＨｂＡ１ｃ
・差分を含むＣＢＣ
・尿検査
・治療前３日以内の血清妊娠検査（妊娠可能性のある女性の場合）
研究評価：
以下をモニタリングし、その標準的ケアの一部として毎日記録した：
・併用薬
・有害事象
・中間身体検査
・バイタルサイン（体温、血圧、脈拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度）
・酸素必要量（Ｌ／分）
以下は、標準的なケアの一部としてより少ない頻度で、なるべく監視される。
・ヒドロキシクロロキンの併用患者の場合、１２リード心電図（ＣＯＶＩＤ－１９下では、病院の処値ガイドラインにより許容される場合）が、１日目の最初の研究薬物投与の約３時間後、２日目及び４日目はいつでも、かつ治療終了時（１０日目、１４日目又は早期の研究薬中止時のいずれか）必要。患者がモニター上にある場合（遠隔又はホルターモニタを含む）、治験責任医師は、ＱＴ間隔時間データを収集するように奨励されている
・１～３日ごとにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＰＣＲ試験用の鼻咽頭又は口腔咽頭ウイルススワブ
・週１回の血清化学
・血清ＣＲＰ、Ｄ－二量体、ＬＤＨ、フェリチン、心臓トロポニンを、週１回
・毎週１回、差分を含むＣＢＣ
・医師の意思決定による胸部Ｘ線
研究エンドポイント：
主要
１４日間（１日目～１４日目）にわたって、毎日の補助酸素流量（Ｌ／分）を使用した、総酸素必要量（曲線下の面積）。
副次的
１）Ｌ／分単位の酸素流量に基づいて、補助酸素におけるベースラインから５０％減少までかかった時間。
２）１４日目までには、少なくとも２４時間にわたって補助酸素をもはや受けてない患者のパーセンテージ。
３）ＰＣＲによって、少なくとも２４時間離れた２回の連続したスワブ検査で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についていずれも陰性になるまでの時間。
４）少なくとも２回の連続した陰性のスワブ試験結果を有する患者で、引き続いて、１４日目のＰＣＲで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２について引き続き陰性である患者のパーセンテージ。
５）２週間の試験薬なしフォローアップの終了までに、挿管及び機械的換気を必要とする患者のパーセンテージ
６）挿管又は機械的換気までの時間
７）ベースライン（体温が３８．０℃［１００．４°Ｆ］超として定義される）における発熱の少なくとも１つの測定値を有する患者で、１４日目で無熱（３７．２℃［９９°Ｆ］未満の体温として定義される）である患者のパーセンテージ。
８）３０日目に何らかの理由で死亡している死亡率。
探索的
１）１４日目のベースラインからの炎症の全身マーカー（Ｄ－二量体、心臓トロニン、Ｃ反応性タンパク質［ＣＲＰ］、プロカルシトニン［ＰＣＴ］、乳酸デヒドロゲナーゼ［ＬＤＨ］及びフェリチン）の平均変化
安全性
１）全ての治療中に発生した有害事象（treatment-emergent AE、ＴＥＡＥ）及び重篤有害事象（ＳＡＥ）の発生率
２）バイタルサインの評価
３）実験室パラメータ（化学及び血液学パラメータ）の評価
４）心電図（ＥＣＧ）の評価
統計的方法：
研究の主要な有効性目的は、１４日間（１日目～１４日目）の１日あたりの酸素流量（Ｌ／分）測定値を使用した総補助酸素必要量（曲線下の面積）に対するオパガニブの効果を評価することであった。主要な有効性エンドポイントは、各日のベースライン酸素要件を差し引いた後の台形ルールを使用して、１４日目までの補助酸素必要量の曲線下面積を各患者について計算した。補助酸素が必要ない日は、０として記録した。ある一日に対して、酸素必要量（Ｌ／分）の数値がいくつか記録される場合、一次分析のためにこれらの値のうちの最高値を取得した。一次分析では、１４日目の前に死亡した患者、又は挿管及び機械的換気を必要とする患者について、１日の値のうち欠落した値に対しては、８Ｌ／分の最大補助酸素必要流量を割り当てられた。１４日目の前に病院から退院した患者について、退院後にサイトによって値が収集されなかった場合、退院日の補助酸素必要量（Ｌ／分）をその後毎日、１４日目まで割り当てる。
一次分析は、無作為化され、少なくとも１回の投与量の研究薬で治療された全ての患者からなるｍｏｄｉｆｉｅｄ ｉｎｔｅｎｔ ｔｏ ｔｒｅａｔ（ｍＩＴＴ）集団に基づいていた（集団は、オパガニブ群が２２人、プラセボ群が１８人、合計４０人の対象を含んでいた）。ベースライン調整されたＡＵＣの記述統計を群ごとに９５％信頼区間と共に、群間の平均値の違いと共に提示する。１４日目の前に患者が治療を中止したが、研究において１４日目まで継続した場合でさえ、最大１４日目までの補助酸素必要量を収集した。更に、最大１４日目までのバイタル状態が欠落するような、フォローアップに対する損失はあまり可能性がないものと想定された。したがって、一次分析では、治療中止後に全ての補助酸素値が欠落している場合、最後の値は、１４日目まで、又はその前に死亡した場合には死亡するまで持ち越されるものと想定した。上記の欠落データ処理アプローチに対する感度分析は、ＡＵＣ要約統計アプローチを使用して実行され、ここで、群ＡＵＣは、繰り返し測定モデルの推定パラメータから計算される。
ｍＩＴＴコホート内では、グレード１の胃腸有害事象により、２人の対象が、彼らの同意書を撤回した。更に、１人の対象が、治療を開始する前にベースラインでいかなる補助酸素も必要としなかったが、その対象は、統計分析計画（statistical analysis plan、ＳＡＰ）において義務付けられているように、いくつかの分析から排除された。したがって、事後活動分析集団（「ｍＩＴＴ感度」）は、これら３人の患者を分析から除外し、その結果、３７人の対象、うち１９人をオパガニブ、１８人をプラシーボに含んだ。ｍＩＴＴ集団（これら３名の対象を含む）及びｍＩＴＴ感度集団の両方の結果は、同様の活性傾向を示した。
結果：
研究からのトップラインの結果は、オパガニブが安全であることを見出し、オパガニブ治療アームとプラセボ治療アームとの間には、材料安全性の違いはない。全体として、プラセボアームよりも、オパガニブ治療アームにおいて重篤な有害事象（serious adverse event、ＳＡＥ）に見舞われている患者が少ない。この小さなサンプルサイズでは、挿管又は致命性のイベントがほとんどなく、これらは２つのアーム間でバランスしていた。
オパガニブ処理されたアームは、世界保健機関（ＷＨＯ）の順序のスケールによって定義される臨床的改善と相関する主要な一次的及び副次的効能結果にわたって、１４日目の治療の終了による酸素必要量の低減についてより大きな改善という一貫した傾向を示した。
室内空気に達し、１４日目までに酸素支援を必要としなくなった患者の割合に関して、対照群に対してより大きな改善を示した（５２．６％対２２．２％）。図１０は、少なくとも２４時間にわたり、補助酸素をもう受けなくなるまでにかかる時間のカプランマイヤー曲線（ｍＩＴＴ感度）を示す。
１４日目までに補助酸素の５０％減少を実現した患者の割合で、対照アームに対して大きな改善が見られた（８９．５％対６６．７％）。図１１は、Ｌ／分単位での酸素流量に基づく、補助酸素がベースラインから５０％する減少までにかかった時間の累積発生率のカプランマイヤー曲線（ｍＩＴＴ感度）を示す。
対照群に対して、より高い割合の患者が、１４日目までに退院した（７３．７％対５５．６％）。
１４日間にわたる平均総酸素必要量（ＡＵＣ）のベースラインからの減少がより大きい（６８．０％対４６．７％）。図１２は、１４日間（１日目～１４日目）の毎日の酸素流量（Ｌ／分）測定値を使用した、総補助酸素必要量（曲線下の面積）のベースラインからの変化率のドットプロットを示す。
実施例８：無作為化、二重盲検、プラセボ対照化国際第２／３相の研究－ＣＯＶＩＤ－１９肺炎におけるオパガニブ
主要目的：
１４日目までに挿管及び機械的換気を必要とする患者の割合を評価する。
副次的目的：
１）臨床改善に関するＷＨＯの順序スケールに基づいて変化を評価すること。
２）挿管又は機械的換気までにかかった時間を評価すること。
３）高酸素流量が利用可能なオプションではない場合、例えば、鼻カニューレ又はＣＰＡＰを介した高酸素流からの、鼻カニューレを介した低酸素流量までにかかった時間を評価すること。
４）１４日目までに、少なくとも２４時間にわたって補充酸素をもはや必要としない患者の割合を評価すること。
５）１４日間（１日目～１４日目）にわたって、毎日の補助酸素流量（Ｌ／分）を使用した、総酸素必要量（曲線下の面積）を評価すること。
６）ＰＣＲによるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の２回の連続したスワブ検査で陰性になるまでの時間を評価すること。
７）１４日目のＰＣＲによってＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して２回連続したスワブ検査で陰性となった患者の割合を評価すること。
８）ベースライン（体温が３８．０℃［１００．４°Ｆ］超として定義される）における発熱の少なくとも１つの測定値を有する患者で、１４日目で無熱（３７．２℃［９９°Ｆ］未満の体温として定義される）である患者の割合を評価すること。
９）ベースライン到達後、３０日間の死亡率を評価すること。
探索的目的：
１４日間の治療期間にわたる、炎症の全身マーカー（Ｄ－二量体、心臓トロポニン、Ｃ反応性タンパク質［ＣＲＰ］、乳酸デヒドロゲナーゼ［ＬＤＨ］、及びフェリチン）の変化を評価すること。
安全性についての目的：
重篤なＣＯＶＩＤ－１９肺炎患者において、５００ｍｇを、Ｑ１２時間で最大１４日間、経口投与されたオパガニブの安全性及び許容性を評価すること。
研究対象の集団：
研究対象集団は、現在の地域特異的診断ガイダンスと合わせるため、適格性基準に基づいて重篤として定義されるＣＯＶＩＤ－１９感染症と診断された患者からなる。具体的には、高酸素流が利用可能なオプションではない場合、患者は、少なくとも、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に付帯的な肺炎を有し、胸部Ｘ線又はＣＴスキャンにおいて、肺炎のＸ線画像による証拠を有し、鼻カニューレ又はＣＰＡＰを介して高流量酸素による補助酸素を必要としている。患者は、少なくともスクリーニング中及びベースライン（１日目）で入院しなければならない。
研究設計及び説明：
これは、無用性評価を利用する適応設計を有する、２／３相、多中心無作為化、二重盲検、平行アーム、プラセボ対照化研究である。研究は、イタリア、他のＥＵ諸国、ロシア、ブラジル、メキシコ、及び米国で、最大約４０の臨床サイトで実施される。
インフォームドコンセントが得られた後、患者は、適格性を判定するために、３日以下のスクリーニング段階に入る。約２７０人の適格な患者は無作為化され、標準治療に追加されたオパガニブを受けるか、又は標準治療に添加されたプラセボを、無作為化比１：１で受ける。治療割り当ては、患者、治験責任医師、及び病院スタッフ、並びに治験依頼者に対して盲検化されたままである。ＣＯＶＩＤ－１９を治療するための承認及び／又はガイダンスが進化することから、このプロトコルについて、標準的な治療は、例えば一時的な方法勧告：新型ウコロナイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防、診断、及び治療、ＥＵ委員会、欧州医薬品庁（European Medicines Agency、ＥＭＡ）、Ｈｅａｄｓ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ａｇｅｎｃｙ（ＨＭＡ）及びＦＤＡ、などの、地元の診断及びガイドライン文書に基づく、疾患の重症度に従った、治療の推奨スキームによって、及び推奨の最新版に更新されたとおりに、定義される。
試験参加者は、標準的なケア（上に定義したような薬理学的及び／又は支持的ケア）に加えて、１２時間ごとに、オパガニブ２×２５０ｍｇカプセル（５００ｍｇ）か、又はマッチするプラセボのいずれかを、任意の所与の施設で受ける。試験薬は、毎日、１４日間（１日目～１４日目）にわたって投与される。全ての参加者は、１４日目に発生し得る試験薬の最後の投与後、又は患者又は医師の決定に基づいた、早期治験薬中止後に、２８日間にわたってフォローされる。
無作為化戦略：
疾患の重症度に従う、推奨された治療のスキームにおける治療法は、例えば一時的な方法勧告：新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防、診断、及び治療、ＥＵ委員会、欧州医薬品庁（ＥＭＡ）、Ｈｅａｄｓ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ａｇｅｎｃｙ（ＨＭＡ）及びＦＤＡなどの、地元の診断及びガイドライン文書に基づいて、異なり得るため、患者に投与される標準的ケアも、施設によって異なり得る。両方の治療群における標準治療レジメンのバランスを確保するために、個々のサイトレベルで無作為化を決定する。
無用性に関する適応性暫定分析：
非盲検無用性暫定分析は、約１００人の対象（各群から約５０人の対象）が主要なエンドポイントについて評価されて、効果なしというヌル仮説を拒否する確率を決定し、試験を継続することが無用あるかどうかを決定する場合に行われる。基準は、暫定分析の前に、統計分析プラン（ＳＡＰ）の最終バージョンで、将来を見越して決定及び文書化される。
データ安全監視委員会：
治験参加者の安全性を保証するために、データ安全監視ボード（data safety monitoring board、ＤＳＭＢ）が、研究の安全上の監視について会合を開く。安全データをレビューするためのＤＳＭＢミーティングは、２５％、５０％、及び７５％、又はそれぞれ約７０、１３５、及び２００人の無作為化された患者が、７日目次いで１４日目に到達した後に計画されている。ＤＳＭＢはまた、独立した非盲検統計によって実施される無用性分析の結果を、治験依頼者に伝えることに関与する（無用／非無用）。
層別化：
患者は、ベースライン（はい又はいいえ）でのＣＯＶＩＤ－１９転帰のための３つ以上の高リスク臨床パラメータを満たすことに基づいて層別化される。パラメータは、１）スクリーニング時の年齢、６０歳以上であるか？（はい又はいいえ）、２）男性であるか？（はい又はいいえ）、３）スクリーニング時のＨｂＡ１ｃは、６．５以上であるか？（はい又はいいえ）、４）比例する呼吸の作業の増加を伴わない低酸素血症（呼吸数の増加、鼻翼呼吸の増加、及び／又は横隔膜を含む呼吸筋の使用の増加？５）既知の下地の慢性肺疾患があるか？（はい又はいいえ）、６）既知の心臓疾患又は高血圧があるか？（はい又はいいえ）；７）ＢＭＩが、２８．０ｋｇ／ｍ２以上であるか？（はい又はいいえ）８）既知の腎疾患があるか？（はい又はいいえ）。
治療及び投与：
オパガニブ５００ｍｇを、又はマッチさせたプラセボを、Ｑ１２時間で。懸濁形態に作製されたオパガニブ又はプラセボは、経鼻胃チューブによって患者の胃に投与され得る。
研究期間：
研究参加の最大持続期間は、最大４５日でまで（最大３日間のスクリーニング、最大１４日間の二重盲検治療、及び２８日間の試験薬なしでのフォローアップ）。
適格性基準：
参加：
１．成人男性又は女性、年齢１８歳以上８０歳以下。
２．咽頭試料（鼻咽頭又は口腔咽頭）のＲＴ－ＰＣＲアッセイにより、ＣＯＶＩＤ－１９感染と証明され、かつ胸部Ｘ線又はＣＴスキャンにおける放射線非透過性として定義される肺炎である。
３．患者が、高流量酸素が利用可能なオプションではない場合、ベースラインで、高流量補助酸素又はＣＰＡＰを必要とする。
４．患者は、研究中及び試験薬の最後の投与から３ヶ月後まで、適切な避妊方法を使用する。
５．患者又は法的代表者は、ＩＲＢ／倫理委員会によって承認された書面によるインフォームドコンセントに署名をしている。
除外：
１．治験責任医師の判断における、治療のリスクを追加し得る任意の併存疾患。
２．挿管及び機械的換気を必要とする
３．室内空気では、酸素飽和度が９５％超である。
４．入院前に断続的又は連続的な携帯型酸素を必要とする、何らかの既存の呼吸器の不良状態
５．患者は、治験責任医師の臨床判断において、７２時間超生存する可能性が低い。
６．妊娠（無作為化前３日以内の血清又は尿による検査で陽性）又は授乳中の女性。
７．このプロトコルで必要とされる手順に従う意思がないか、従うことが能力的にできないこと。
８．フリーデリシアの式（ＱＴｃＦ）を使用して計算した、心電図（ＥＣＧ）の補正ＱＴ（ＱＴｃ）間隔が、女性の場合に４７０ｍｓ超、男性の場合に４５０ｍｓ超である。
９．ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）又はＡＬＴ（ＳＧＰＴ）が、２．５×正常上限（ＵＬＮ）よりも大きいこと。
１０．総ビリルビン値が、１．５×ＵＬＮより大きい（ビリルビンの増加が、ギルバート症候群に起因する場合を除く）こと。
１１．血清クレアチニンが、２．０×ＵＬＮよりも大きいこと。
１２．絶対好中球数が、１０００個／ｍｍ３未満であること。
１３．血小板数が、７５，０００個／ｍｍ３未満であること。
１４．ヘモグロビン＜８．０ｇ／ｄＬ
１５．現在、感受性ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ９、又はＣＹＰ２Ｃ１９基質であり、狭い治療指数を有する薬剤を摂取している。
１６．強力な誘導剤又はＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４の阻害剤である薬剤を現在摂取している。
１７．現在、ＣＹＰ４５０代謝に基づく薬物どうしの相互作用に起因して、ワルファリン、アピキサバン、アルガトロバン、又はリバーロキサバンを摂取している。
１８．現在、薬物乱用又はアルコール乱用をしていること。
１９．現在、抗ウイルス研究を含む薬理学的治療を評価する臨床研究に参加している。
スクリーニング／ベースライン評価：
・患者又は法的代表者による署名されたインフォームドコンセント
・適格性決定
・完全な病歴（ＣＯＶＩＤ－１９症状の発症を含む）
・併用薬評価
・システムのベースラインレビュー
・身体検査
・バイタルサイン（体温、血圧、脈拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度）
・患者が歩行可能である場合、体重
・酸素必要量（Ｌ／分）
・ＦｉＯ２（推定値）
・１２－リード心電図
・胸部Ｘ線又はＣＴスキャン
・ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＰＣＲ試験用の鼻咽頭又は口腔咽頭スワブ
・血清の化学的性質
・ＣＲＰ、Ｄ－二量体、ＬＤＨ、フェリチン、心臓トロポニン
・ＨｂＡ１ｃ
・差分を含むＣＢＣ
・尿検査
・治療前３日以内に血清又は尿による妊娠検査（妊娠可能な女性の場合）
研究評価：
以下をモニタリングし、その標準的ケアの一部として毎日記録する：
・併用薬
・有害事象
・中間身体検査
・バイタルサイン（体温、血圧、脈拍数、呼吸数、及びパルスオキシメータによる酸素飽和度）
・酸素流量設定（Ｌ／分）
・ＦｉＯ２（患者が換気されている場合の推定又は既知）
以下は、標準的なケアの一部としてより少ない頻度で、なるべく監視される。
・クロロキン／ヒドロキシクロロキン／メフロキンの併用患者の場合、１２リード心電図（ＣＯＶＩＤ－１９下では、病院の処値ガイドラインにより許容される場合）が、１日目の最初の研究薬物投与の約３時間後、２日目及び４日目はいつでも、かつ治療終了時（１４日目又は早期の研究薬中止時のいずれか）必要。患者がモニター上にある場合（遠隔又はホルターモニタを含む）、治験責任医師は、ＱＴ間隔時間データを収集するように奨励されている
・３日ごとにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＰＣＲ試験用の鼻咽頭又は口腔咽頭ウイルススワブ試験
・週１回の血清化学
・血清ＣＲＰ、Ｄ－二量体、ＬＤＨ、フェリチン、心臓トロポニンを、週１回
・毎週１回、差分を含むＣＢＣ
・医師の意思決定に従って、胸部Ｘ線又はＣＴスキャン
研究エンドポイント：
主要
１４日目までに、挿管及び機械的換気を必要とする患者のパーセンテージ
副次的
１）臨床改善のＷＨＯ基本尺度に対する２つ以上のカテゴリー改善を有する患者のパーセンテージ。
２）挿管又は機械的換気時間。
３）高酸素流量が利用可能なオプションではない場合、例えば、鼻カニューレ又はＣＰＡＰを介した高酸素流からの、鼻カニューレを介した低酸素流量までにかかった時間。
４）１４日目までには、少なくとも２４時間にわたって補助酸素をもはや受けてない患者のパーセンテージ。
５）１４日間（１日目～１４日目）にわたって、毎日の補助酸素流量（Ｌ／分）を使用した、総酸素必要量（曲線下の面積）。
６）ＰＣＲによって、少なくとも２４時間離れた２回の連続したスワブ検査で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についていずれも陰性になるまでの時間。
７）１４日目のＰＣＲによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についての少なくとも２回連続して陰性のスワブ試験結果を有する患者のパーセンテージ
８）ベースライン（体温が３８．０℃［１００．４°Ｆ］超として定義される）における発熱の少なくとも１つの測定値を有する患者で、１４日目で無熱（３７．２℃［９９°Ｆ］未満の体温として定義される）である患者のパーセンテージ。
９）ベースライン後３０日目の、何らかの原因による死亡率
探索的
１４日目のベースラインからの炎症の全身マーカー（Ｄ－二量体、心臓トロニン、Ｃ反応性タンパク質［ＣＲＰ］、プロカルシトニン［ＰＣＴ］、乳酸デヒドロゲナーゼ［ＬＤＨ］及びフェリチン）の平均変化
安全性
１）全ての治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）及び重篤有害事象（ＳＡＥ）の発生率
２）バイタルサインの評価
３）実験室パラメータ（化学及び血液学パラメータ）の評価
４）心電図（ＥＣＧ）の評価
研究中に禁止された薬剤：
以下の薬剤は、２８日間のフォローアップ期間を含む、研究中に禁止される。
・感受性ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ９、又はＣＹＰ２Ｃ１９基質であり、狭い治療指数を有する薬剤が禁止されている。
・ＣＹＰ２Ｄ６及び３Ａ４の強い誘導剤又は阻害剤が禁止されている。
ワルファリン、アピキサバン、アルガトロバン及びリバーロキサバンは、ＣＹＰ４５０代謝に基づく薬物相互作用に起因して禁止される。
停止のルール：
研究中の任意の時点で、参加者が以下の有害事象のいずれかを経験した場合（改訂されたＮＣＩのＣｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ［ＣＴＣＡＥｖ．５．０］で定義されているグレーディング基準を用いる）、試験薬を停止する。
・グレード３の重症度の任意の神経精神医学的有害事象
・任意の重症度の幻覚（任意のグレード）
・グレード３の重症度の悪心
・グレード３の重症度の嘔吐
・グレード２の重症度のクレアチニン増加
統計的方法：
一次分析は、研究１４日目までに対象が挿管及び機械的換気を必要とするか、又は死亡したかどうかを示す複合不良（はい／いいえ）変数に基づく。
患者の結果が不明という稀な場合（患者はフォローアップされ損ねた）、一次分析のため、治療失敗としてもカウントされる。患者が１４日以内にＣＯＶＩＤ－１９の新たな調査療法を開始する場合、これは、一次分析において、治療不良としても見なされる。
不良事象を有する対象の数及びパーセンテージは、治療群ごとに表にされる。９５％信頼区間は、各割合に対して構築される。Ｃｏｃｈｒａｎ Ｍａｎｔｅｌ－Ｈａｅｎｚｅｌ（ＣＭＨ）試験は、無作為化に使用される研究層別因子を使用して、２つの群間の不良の割合を比較し、対応するリスク差推定値は、９５％信頼区間で提示される。必要に応じて、正確な信頼区間を使用する。
この試験の有意性レベルは、両側５％である。少数の事象（任意の研究アームにおいて５事象未満）の場合、フィッシャーの正確な検定が使用される。
不良タイプ（挿管及び機械的換気）の各々の数及びパーセントは、グループごとに説明される。
一次分析は、無作為化され、少なくとも１回の投与量の研究薬で治療された全ての患者からなるｍｏｄｉｆｉｅｄ ｉｎｔｅｎｔ ｔｏ ｔｒｅａｔ（ｍＩＴＴ）集団に基づくものである。
ＤＳＭＢ無用性レビュー
２０２１年１月に、独立したデータ安全監視ボード（ＤＳＭＢ）は、研究で治療された最初の１３５人の患者からの非盲検効果データ及び最初の１７５人の患者からの安全性データの、予め決められた無用性の検討後に、研究を継続することを全会一致で推奨した。
実施例９：ＣＯＶＩＤ－１９疾患の治療のためのオパガニブ、すなわちスフィンゴシンキナーゼ－２（ＳＫ２）阻害剤、又はプラセボの、無作為化、二重盲検、プラセボ対照化、第２／３相研究
この研究では、治験責任医師の判断において、入院を必要としないＣＯＶＩＤ－１９患者の治療のための、プラセボに対するオパガニブの活性を評価する。
主要目的：
病気からの持続的な回復までの時間における、オパガニブとプラセボとの比較。患者は、以下の基準を満たすと、回復したと見なされる。
１）解熱剤を使用せずに少なくとも４８時間、無熱である（３８．０℃未満のコア温度）。
２）全ての症状が、病気前レベルに解消又は戻った（例えば、患者がＣＯＶＩＤ－１９の発症前にベースライン呼吸障害を有する場合）。ただし、以下を除く：
ａ．急性の病気中のものと同様のレベル、すなわち、症状質問票に従って同じレベルで持続し得る倦怠感、無嗅覚症、無味覚症、又は味覚異常、
ｂ．胸痛、咳又は呼吸困難が、もし続いていても、治療開始時よりも少なくとも１グレード低く、グレード１（軽度）よりも悪くないことが必要である。
持続的な回復は、上記の定義によれば、回復であり、少なくとも２８日間又は研究の終了まで（いずれか早い方）維持される。
副次的目的：
以下について、積極的治療群とプラセボとの間の比較をする：
１）治療開始から８、１５、２９、及び５７日目にＰＣＲ陰性である患者の割合（ランドマーク分析）、
２）ベースラインで存在する個々の疾患関連症状の解消までの時間、
３）研究中の新しい疾患関連症状の発生、
４）ベースライン肺炎を含まない患者（臨床的に診断された）の間の、研究中の肺炎の発生率、
５）ベースラインから研究上で測定される時点までの、疾患重症度の実験室マーカー、すなわち酸素飽和度、ＣＲＰ、リンパ球数、心臓トロポニン及びＤ－二量体レベルの変化、
６）有害事象、
７）試験薬の最初の投与後８週間以内に、全体的指標及びＣＯＶＩＤ－１９関連指標のせいでの入院、
８）試験薬の最初の投与から３０日後の死亡率。
探索的
１）症候性、ＰＣＲで確認されたＣＯＶＩＤ－１９を５７日目までに発症した家庭での接触を報告する患者のパーセント、
２）治療開始から５７日での、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する血清ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体のレベル。
安全性：
治験の過程を通して、臨床イベント及び実験室イベントの両方を含む有害事象について患者がフォローされる。
特に、療法の投薬量の低減又は投薬の中止をもたらす毒性がフォローされ、表にされる。
集団：
参加基準：
１．気道試料のＲＴ－ＰＣＲアッセイに従って、確定診断されたＣＯＶＩＤ－１９を有する、症状もある患者。
２．患者は、又は無作為化から３日以内で、症状があるか、ＲＴ－ＰＣＲによって陽性と判明したかいずれかで、いずれであっても、その必要がある。
３．１８歳以上の男性及び女性。
４．ベースラインでは、以下に列挙される実験室パラメータは、以下に記載の例外を除いて、ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０グレード２よりも悪い。
－ビリルビンが、通常の上限値（ＵＬＮ、グレード１のみ）の１．５倍以下であること。
－ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＳＧＰＴ）が、５．０×ＵＬＮ以下であること。
－血清クレアチニンが、１．５×ＵＬＮ以下であること。（グレード１）
－アルブミンが２．０ｇ／ｄＬ以上であること。
５．－許容可能な血液学的状態：
－絶対好中球数が、１０００個／ｍｍ３以上であること。
－血小板数が、５０，０００個／ｍｍ３以上であること。
－ヘモグロビンが８．０ｇ／ｄＬ以上であること。
６．治験責任医師の意見における臨床的に許容される血糖コントロール。
７．患者がダビガトラン又はヘパリンを摂取していない限り、それぞれが、１．５×ＵＬＮ（すなわち、グレード１）以下である、ＩＮＲ及び部分トロンボプラスチン時間（partial thromboplastin time、ＰＴＴ）。
８．室内空気でパルスオキシメータによる酸素飽和度が９２％以上
９．陰性の妊娠検査（妊娠可能性の女性）。
１０．妊娠可能な女性と、妊娠可能な女性のパートナーのいる男性は、調査の間及び試験薬を最後に投与されてから少なくとも２か月は、許容可能な避妊方法を用いることに合意する必要がある。
１１．毎日の日誌を独立して完了する能力。
１２．患者はインフォームドコンセントを提出しなければならない。
除外基準：
１．患者は、臨床医評価に従って急性入院を必要とする。
２．妊娠中又は授乳中の女性。
３．このプロトコルで必要とされる手順に従う意思がないか、従うことが能力的にできないこと。
４．患者は、補助酸素を必要とする
５．患者は現在レムデシビル、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アジスロマイシン、又はＣＯＶＩＤ－１９のために他の具体的抗ウイルス療法を、又は毎日２０ｍｇのプレドニゾン／毎日３ｍｇのデキサメタゾン以上相当の全身性コルチコステロイドを受けているか、過去７日以内に受けていたか、又は研究のどこか途中で受けるように予想されている。
６．患者は現在、治験適応症（例えば、抗サイトカイン治療）のために与えられた承認された薬剤を含む任意の治験適応症に対するなんらかの他の治験薬を、現在受けているか、又はスクリーニング前の３０日以内に受けた。
７．患者は、ワラフィン、アピキサバイン（Ｅｌｑｕｉｓ）、又はリバーロキサバン（Ｘａｒｅｌｔｏ）を、現在摂取しているか、摂取することを開始することが予想されている。患者は、ダビガトラン（Ｐｒａｄａｘａ）、標準又は低分子量ヘパリンを摂取していてもよいし、又は治験時に開始してもよい。
設計
これは、入院治療を必要としない、症候性ＣＯＶＩＤ－１９を有する患者における、プラセボと比較した、オパガニブの無作為化二重盲検プラセボ対照化並列群研究である。この研究には、初期結果によって示されるように、無用性ゆえの早期終了のための中間分析又はサンプルサイズの増加が含まれる。
方法論：
パートＢ：試験参加者は、１２時間ごとにオパガニブ２×２５０ｍｇカプセル（５００ｍｇ）又はマッチングするプラセボのいずれかを受ける。患者を、以下の状況（なし、１つ、又は２つ以上）の数によって層別化する：年齢が６５歳以上である、以下の懸念される医学的状態の存在（高血圧、慢性肺疾患、肥満［ＢＭＩが３０以上］、糖尿病、心不全、冠動脈疾患、血栓性事象（現在又は病歴あり）、腎疾患）。患者はまた、患者が治療される地域によって層別化される（米国対非米国）。次いで、それらは、活性薬物又はプラセボについて、１：１に無作為化される。患者は、有害事象、体温及びパルスオキシメトリーを含むバイタルサインを含む症状についての毎日の質問票、及び最初の４週間の研究にわたっては毎日、かつその後は週３回、摂取した薬剤のログの記入を完了する。安全性実験室及び薬力学マーカー用のウイルススワブ及び血液が、医療従事者による家庭訪問時に取得される。治療の完了後、患者が無作為化から５７日後までフォローされる。
研究中に禁止された薬剤：
以下の薬剤は、２８日間のフォローアップ期間を含む、研究中に禁止される。
・感受性ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ９、又はＣＹＰ２Ｃ１９基質であり、狭い治療指数を有する薬剤が禁止されている。
・ＣＹＰ２Ｄ６及び３Ａ４の強い誘導剤又は阻害剤が禁止されている。
ワルファリン、アピキサバン、アルガトロバン及びリバーロキサバンは、ＣＹＰ４５０代謝に基づく薬物相互作用に起因して禁止される。
実施例１０：ＣＯＶＩＤ－１９疾患の治療のためのウパモスタット、セリンプロテアーゼ阻害剤、又はプラセボの無作為化、二重盲検、プラセボ対照化第２／３相研究
この研究では、治験責任医師の判断において、入院を必要としないＣＯＶＩＤ－１９患者の治療のための、プラセボに対するウパモスタットの活性を評価する。
主要目的：
研究のパートＡ：２つの投与量レベルの安全性及び許容性の決定と、パートＢのためのウパモスタット投与量に関する決定。疾患マーカーの重症度の変化が評価されるが、これはどの投与量が追究されるかを決定する際の主要な因子ではない。回復までの時間も計算されるが、しかし、小さな試料サイズ及び予想される結果の変動性のため、臨床的に意味のある違いは見られない場合がある。
研究のパートＢ：病気からの持続的回復まで時間における、ウパモスタットとプラセボとの間の比較。患者は、以下の基準を満たすと、回復したと見なされる。
１）解熱剤を使用せずに少なくとも４８時間、無熱である（３８．０℃未満のコア温度）。
２）全ての症状が、病気前レベルに解消又は戻った（例えば、患者がＣＯＶＩＤ－１９の発症前にベースライン呼吸障害を有する場合）。ただし、以下を除く：
ｃ．急性の病気中のものと同様のレベル、すなわち、症状質問票に従って同じレベルで持続し得る倦怠感、無嗅覚症、無味覚症、又は味覚異常、
ｄ．胸痛、咳又は呼吸困難が、もし続いていても、治療開始時よりも少なくとも１グレード低く、グレード１（軽度）よりも悪くないことが必要である。
持続的な回復は、上記の定義によれば、回復であり、少なくとも２８日間又は研究の終了まで（いずれか早い方）維持される。
副次的目的：
以下について、積極的治療群とプラセボとの間の比較をする：
１）治療開始から８、１５、２９、及び５７日目にＰＣＲ陰性である患者の割合（ランドマーク分析）、
２）ベースラインで存在する個々の疾患関連症状の解消までの時間、
３）研究中の新しい疾患関連症状の発生、
４）ベースライン肺炎を含まない患者（臨床的に診断された）の間の、研究中の肺炎の発生率、
５）ベースラインから研究上で測定される時点までの、疾患重症度の実験室マーカー、すなわち酸素飽和度、ＣＲＰ、リンパ球数、心臓トロポニン及びＤ－二量体レベルの変化、
６）有害事象、
７）試験薬の最初の投与後８週間以内に、全体的指標及びＣＯＶＩＤ－１９関連指標のせいでの入院、
８）試験薬の最初の投与から３０日後の死亡率。
探索的
１）症候性、ＰＣＲで確認されたＣＯＶＩＤ－１９を５７日目までに発症した家庭での接触を報告する患者のパーセント、
２）治療開始から５７日での、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する血清ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体のレベル。
安全性：
治験の過程を通して、臨床イベント及び実験室イベントの両方を含む有害事象について患者がフォローされる。
特に、療法の投薬量の低減又は投薬の中止をもたらす毒性がフォローされ、表にされる。
集団：
参加基準：
１．気道試料のＲＴ－ＰＣＲアッセイに従って、確定診断されたＣＯＶＩＤ－１９を有する、症状もある患者。
２．患者は、又は無作為化から３日以内で、症状があるか、ＲＴ－ＰＣＲによって陽性と判明したかいずれかで、いずれであっても、その必要がある。
３．１８歳以上の男性及び女性。
４．ベースラインでは、以下に列挙される実験室パラメータは、以下に記載の例外を除いて、ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０グレード２よりも悪い。
－ビリルビンが、通常の上限値（ＵＬＮ、グレード１のみ）の１．５倍以下であること。
－ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＳＧＰＴ）が、５．０×ＵＬＮ以下であること。
－血清クレアチニンが、１．５×ＵＬＮ以下であること。（グレード１）
－アルブミンが２．０ｇ／ｄＬ以上であること。
５．許容可能な血液学的状態：
－絶対好中球数が、１０００個／ｍｍ３以上であること。
－血小板数が、５０，０００個／ｍｍ３以上であること。
－ヘモグロビンが８．０ｇ／ｄＬ以上であること。
６．治験責任医師の意見における臨床的に許容される血糖コントロール。
７．患者がダビガトラン又はヘパリンを摂取していない限り、それぞれが、１．５×ＵＬＮ（すなわち、グレード１）以下である、ＩＮＲ及び部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）。
８．室内空気でパルスオキシメータによる酸素飽和度が９２％以上
９．陰性の妊娠検査（妊娠可能性の女性）。
１０．妊娠可能な女性と、妊娠可能な女性のパートナーのいる男性は、調査の間及び試験薬を最後に投与されてから少なくとも２か月は、許容可能な避妊方法を用いることに合意する必要がある。
１１．毎日の日誌を独立して完了する能力。
１２．患者はインフォームドコンセントを提出しなければならない。
除外基準：
１．患者は、臨床医評価に従って急性入院を必要とする。
２．妊娠中又は授乳中の女性。
３．このプロトコルで必要とされる手順に従う意思がないか、従うことが能力的にできないこと。
４．患者は、補助酸素を必要とする
５．患者は現在レムデシビル、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アジスロマイシン、又はＣＯＶＩＤ－１９のために他の具体的抗ウイルス療法を、又は毎日２０ｍｇのプレドニゾン／毎日３ｍｇのデキサメタゾン以上相当の全身性コルチコステロイドを受けているか、過去７日以内に受けていたか、又は研究のどこか途中で受けるように予想されている。
６．患者は現在、治験適応症（例えば、抗サイトカイン治療）のために与えられた承認された薬剤を含む任意の治験適応症に対するなんらかの他の治験薬を、現在受けているか、又はスクリーニング前の３０日以内に受けた。
７．患者は、ワラフィン、アピキサバイン（Ｅｌｑｕｉｓ）、又はリバーロキサバン（Ｘａｒｅｌｔｏ）を、現在摂取しているか、摂取することを開始することが予想されている。患者は、ダビガトラン（Ｐｒａｄａｘａ）、標準又は低分子量ヘパリンを摂取していてもよいし、又は治験時に開始してもよい。
設計
これは、入院治療を必要としない、症候性ＣＯＶＩＤ－１９を有する患者における、プラセボと比較した、ウパモスタットの無作為化二重盲検プラセボ対照化並列群研究である。研究は、投与量選択（パートＡ）のためと、推論非依存的確認のための第３相試験（パートＢ）のための、第２／３相のオペレーション的にシームレスな設計の方法論を使用する。第３相の部分には、初期結果によって示されるように、無用性ゆえの早期終了のための中間分析又はサンプルサイズの増加が含まれる。
方法論：
パートＡ：試験の認定後、患者は、年齢、すなわち６５歳未満であるか、６５歳以上であるかによって層別化される。次いで、それらは、以下の治療群のいずれかに１：１：１で無作為化される：
１．ウパモスタット２００ｍｇ、２つのカプセルｑｄ（ｎ＝２０）、
２．ウパモスタット２００ｍｇの１つのカプセル及びマッチするプラセボ１カプセルｑｄ（ｎ＝２０）
３．プラセボ２つのカプセルｑｄ（ｎ＝２０）。
盲検を維持するために、患者に薬剤の２つのボトルが与えられ、毎日各瓶から１つのピルを摂取するように指示される。両方のピルを同時に摂取する。
薬剤は、食事の有無にかかわらず、水で摂取されるべきである。
患者は、１４日間、又は以下のうちの１つが発生するまで薬剤を服用することになっている。
・治験薬に関係するか無関係であるかにかかわらず、治験責任医師の判断において治療の中止を必要とする有害事象、
・患者又は治験責任医師が、治療を停止することこそが、患者の最良の利益にあると決定する。
中間分析は、合計６０人の患者がパートＡを完了した後で、データ安全監視ボード（ＤＳＭＢ）によって実行される。
・ＤＳＭＢが、両方のレジメンの安全性が類似していると決定する場合、パートＢの増加（accrual）は、４００ｍｇのｑｄ用量を継続する。
・２００ｍｇのｑｄレジメンを用いて安全性がより好ましい場合、パートＢにおける増加は２００ｍｇのｑｄ用量で継続する。
パートＢ：パートＡからの安全性結果に基づいて、２００ｍｇ又は４００ｍｇのいずれか（すなわち、１つ又は２つの２００ｍｇカプセル）の治療レジメンが選択される。パートＢに登録された患者を、以下の状況（なし、１つ、又は２つ以上）の数によって層別化する：年齢が６５歳以上である、以下の懸念される医学的状態の存在（高血圧、慢性肺疾患、肥満［ＢＭＩが３０以上］、糖尿病、心不全、冠動脈疾患、血栓性事象（現在又は病歴あり）、腎疾患）。患者はまた、患者が治療される地域によって層別化される（米国対非米国）。次いで、それらは、パートＡに基づいて選択されたスケジュールで活性薬物又はプラセボについて３：２に無作為化される。合計約２５０人の追加の患者が研究のパートＢに登録され、１５０人は、活性薬物を受け、１００人はプラセボを受けている。したがって、研究の両方の部分を組み合わせることにより、合計１７０人の患者がパートＡで選択された投与量で活性物質を受け、１２０人はプラセボを受ける。しかしながら、分析は、パートＡ及びパートＢについて独立して実行される。
患者は、有害事象、体温及びパルスオキシメトリーを含むバイタルサインを含む症状についての毎日の質問票、及び最初の４週間の研究にわたっては毎日、かつその後は週３回、摂取した薬剤のログの記入を完了する。安全性実験室及び薬力学マーカー用のウイルススワブ及び血液が、医療従事者による家庭訪問時に取得される。治療の完了後、患者が無作為化から５７日後までフォローされる。
統計：
この研究のパートＡでは、２つの投与量レベルの活性薬物及びプラセボが試験される。各活性群における毒性の発生率及び重症度、ＤＳＭＢによる安全性の全体的な評価に基づいて、研究のパートＢのレジメンが選択される。２つの活性群間に毒性の顕著な違いがない場合、パートＢへの継続についてのデフォルトの選択は、毎日４００ｍｇのレジメンである。
パートＡ及びパートＢからの有効性データは、別々に分析される。
全体的な試料サイズは、中間研究結果に基づいて拡大され得る。
試料サイズは、主要なエンドポイント、主要目的で定義される、ＣＯＶＩＤ－１９疾病から持続的な回復までにかかった時間に基づいて決定された。３：２の割り当て比の活性群とプラセボ群とを比較するハザード比＝１．５を検出するためには、０．０５の両側有意水準でログランク検定を使用して、８０％のパワーを提供するために、合計２０１個の回復事象が必要であることが計算された。フォローアップの終了（全ての登録された患者に対して等しいフォローアップを想定）までに、８０％の持続的回復率を仮定すると、パートＢに登録された患者の最小数は、合計で２５０人であり、試験のパートＢに取り込まれたレジメンの活性アームに１５０人、及びプラセボアームにおける１００人である。
産業上の利用可能性
本発明は、抗コロナウイルス剤を提供し、その抗コロナウイルス剤は、活性成分として、
Figure 2023517920000031
 で表される化合物を、その遊離塩基として又はその塩として含む。本発明はまた、上記の抗コロナウイルス剤を含む抗ＳＡＲＳ剤と、その抗コロナウイルス剤を使用して、ＳＡＲＳを治療する方法とを提供する。本発明は、コロナウイルス、特にＳＡＲＳ関連コロナウイルスによって引き起こされる疾患の治療を可能にする。
本発明は、抗コロナウイルス剤を提供し、その抗コロナウイルス剤は、活性成分として、
Figure 2023517920000032
 で表される化合物を、その（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として含む。本発明はまた、上記の抗コロナウイルス剤を含む抗ＳＡＲＳ剤と、その抗コロナウイルス剤を使用して、ＳＡＲＳを治療する方法とを提供する。本発明は、コロナウイルス、特にＳＡＲＳ関連コロナウイルスによって引き起こされる疾患の治療を可能にする。
本明細書で引用される全ての特許、特許出願、及び公開された参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。本発明の記載された組成物及び方法の様々な修正及び変形は、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく、当業者には明らかであろう。本発明は特定の実施形態に関連して説明されてきたが、本発明はそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されよう。実際、分子生物学、医学、免疫学、薬理学、ウイルス学、又は関連する分野の当業者に明らかな本発明を実施するための記載されたモードの様々な修正は、本発明の範囲内であることが意図される。

Claims (64)

  1. コロナウイルス疾患の治療のための方法であって、有効量のＡＢＣ２９４６４０、すなわち
    Figure 2023517920000033
     を、その遊離塩基として、又はその塩として、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
  2. 前記コロナウイルス疾患が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）である、請求項１に記載の方法。
  3. ＡＢＣ２９４６４０が塩酸塩として存在する、請求項１に記載の方法。
  4. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＡＢＣ２９４６４０及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項１に記載の方法。
  5. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項３に記載の方法。
  6. 前記剤形が、固体剤形である、請求項４に記載の方法。
  7. 前記剤形が、固体剤形である、請求項５に記載の方法。
  8. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項６に記載の方法。
  9. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項７に記載の方法。
  10. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項１に記載の方法。
  11. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項１に記載の方法。
  12. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項３に記載の方法。
  13. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項３に記載の方法。
  14. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２５０ｍｇのＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を有するカプセルであり、投与することが、ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩の総１日投与量を１０００ｍｇとするために、２つのカプセルを１日２回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項５に記載の方法。
  15. ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩及び薬学的に許容される担体材料を含み、前記薬学的に許容される担体材料が緩衝生理食塩水である、請求項３に記載の方法。
  16. 緩衝生理食塩水に懸濁されたＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を含む懸濁液が形成され、投与することは、チューブを使用して胃に直接、前記懸濁液を送達することを含む、請求項１５に記載の方法。
  17. 有効量のＡＢＣ２９４６４０、すなわち
    Figure 2023517920000034
     を、その遊離塩基として、又はその塩として、コロナウイルス疾患を有するヒトに投与することを含む、治療方法。
  18. 前記コロナウイルス疾患が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）である、請求項１７に記載の方法。
  19. ＡＢＣ２９４６４０が塩酸塩として存在する、請求項１７に記載の方法。
  20. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＡＢＣ２９４６４０及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項１７に記載の方法。
  21. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項１９に記載の方法。
  22. 前記剤形が、固体剤形である、請求項２０に記載の方法。
  23. 前記剤形が、固体剤形である、請求項２１に記載の方法。
  24. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項２２に記載の方法。
  25. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項２３に記載の方法。
  26. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項１７に記載の方法。
  27. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項１９に記載の方法。
  28. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項１７に記載の方法。
  29. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項１９に記載の方法。
  30. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２５０ｍｇのＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を有するカプセルであり、投与することが、ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩の総１日投与量を１０００ｍｇとするために、２つのカプセルを１日２回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項２１に記載の方法。
  31. ＡＢＣ２９４６４０塩酸塩及び薬学的に許容される担体材料を含み、前記薬学的に許容される担体材料が緩衝生理食塩水である、請求項１９に記載の方法。
  32. 緩衝生理食塩水に懸濁されたＡＢＣ２９４６４０塩酸塩を含む懸濁液が形成され、前記投与することは、チューブを使用して胃に直接、前記懸濁液を送達することを含む、請求項３１に記載の方法。
  33. コロナウイルス疾患の治療のための方法であって、有効量のＷＸ－６７１すなわち
    Figure 2023517920000035
     を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
  34. 前記コロナウイルス疾患が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）である、請求項３３に記載の方法。
  35. ＷＸ－６７１が、硫酸水素塩として存在する、請求項３３に記載の方法。
  36. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＷＸ－６７１及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項３３に記載の方法。
  37. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＷＸ－６７１硫酸水素塩及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項３５に記載の方法。
  38. 前記剤形が、固体剤形である、請求項３６に記載の方法。
  39. 前記剤形が、固体剤形である、請求項３７に記載の方法。
  40. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項３８に記載の方法。
  41. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項３９に記載の方法。
  42. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項３３に記載の方法。
  43. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項３３に記載の方法。
  44. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項３５に記載の方法。
  45. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項３５に記載の方法。
  46. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２００ｍｇのＷＸ－６７１遊離塩基を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１の総１日投与量を２００ｍｇとするために、１つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項４０に記載の方法。
  47. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２００ｍｇのＷＸ－６７１遊離塩基を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１の総１日投与量を４００ｍｇとするために、２つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項４０に記載の方法。
  48. 経口投与に好適な前記単位剤形が、約２３１ｍｇのＷＸ－６７１硫酸水素塩を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１硫酸水素塩の総１日投与量を約２３１ｍｇとするために、１つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
  49. 経口投与に好適な前記単位剤形が、約２３１ｍｇのＷＸ－６７１硫酸水素塩を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１硫酸水素塩の総１日投与量を約４６３ｍｇとするために、２つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
  50. 有効量のＷＸ－６７１、すなわち
    Figure 2023517920000036
     を、（Ｌ）－エナンチオマー又は（Ｄ）－エナンチオマーとして、及びＥ－異性体若しくは（Ｚ）－異性体又は（Ｅ／Ｚ）－混合物として、及びそれらの遊離塩基として、又はそれらの塩として、コロナウイルス疾患を有するヒトに投与することを含む、治療方法。
  51. 前記コロナウイルス疾患が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる２０１９年コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）である、請求項５０に記載の方法。
  52. ＷＸ－６７１が硫酸水素塩として存在する、請求項５０に記載の方法。
  53. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＷＸ－６７１及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項５０に記載の方法。
  54. 薬学的に許容される担体材料を更に含み、前記ＷＸ－６７１硫酸水素塩及び前記薬学的に許容される担体材料が、経口投与に好適な単位剤形にある、請求項５２に記載の方法。
  55. 前記単位剤形が、固体剤形である、請求項５３に記載の方法。
  56. 前記単位剤形が、固体剤形である、請求項５４に記載の方法。
  57. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項５５に記載の方法。
  58. 前記固体剤形が、カプセルである、請求項５６に記載の方法。
  59. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項５０に記載の方法。
  60. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、野生型である、請求項５２に記載の方法。
  61. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項５０に記載の方法。
  62. 前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスが、天然に存在するコロナウイルス変異体である、請求項５２に記載の方法。
  63. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２００ｍｇ相当のＷＸ－６７１を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１の総１日投与量を約４００ｍｇとするために、１つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項５７に記載の方法。
  64. 経口投与に好適な前記単位剤形が、２００ｍｇ相当のＷＸ－６７１を有するカプセルであり、投与することが、ＷＸ－６７１の総１日投与量を約４００ｍｇとするために、２つのカプセルを、１日１回、少なくとも１０日間にわたり投与することを含む、請求項５７に記載の方法。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20210244705A1 (en) * 2020-02-07 2021-08-12 Centre For Digestive Diseases Therapeutic compositions, products of manufacture and methods for ameliorating or preventing coronavirus infection
JP2023517920A (ja) 2020-03-10 2023-04-27 レッド ヒル バイオファーマ リミテッド コロナウイルス感染の治療
US11471448B2 (en) * 2020-12-15 2022-10-18 Redhill Biopharma Ltd. Sphingosine kinase 2 inhibitor for treating coronavirus infection in moderately severe patients with pneumonia
CN113398219A (zh) * 2021-06-30 2021-09-17 广州白云山星群(药业)股份有限公司 橘红痰咳浸膏在制备抑制人冠状病毒感染的药物中的用途
EP4286851A1 (en) * 2022-06-01 2023-12-06 Universität Wien Methods and means for molecular characterization of post-viral fatigue syndrome

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4603162B2 (ja) 1998-07-20 2010-12-22 ヴィレックス アクチェンゲゼルシャフト 新規ウロキナーゼインヒビター
US7342018B2 (en) 1998-07-20 2008-03-11 Wilex Ag Urokinase inhibitors and uses thereof
EP1114024B1 (de) 1998-09-18 2002-11-27 Pentapharm A.G. Urokinase-inhibitoren
JP4414652B2 (ja) 2001-03-21 2010-02-10 ヴィレックス アクチェンゲゼルシャフト ウロキナーゼ阻害剤
CH695999A5 (de) 2002-02-28 2006-11-15 Wilex Ag Verfahren zur Herstellung von 3- Amidinophenylalanin-Derivaten.
DE10238048A1 (de) 2002-07-25 2004-02-05 Wilex Ag Verfahren zur Herstellung von Phenylalanin-Derivaten
US7247724B2 (en) 2002-07-25 2007-07-24 Wilex Ag Method for the production of phenylalanine derivatives
US9770349B2 (en) * 2002-11-13 2017-09-26 University Of Virginia Patent Foundation Nanoporous stents with enhanced cellular adhesion and reduced neointimal formation
DE10323898A1 (de) 2003-05-26 2004-12-23 Wilex Ag Hydroxyamidin- und Hydroxyguanidin-Verbindungen als Urokinase-Hemmstoffe
GB0420874D0 (en) 2004-09-20 2004-10-20 Swetree Technologies Ab Modulation of flowering time and growth cessation in perennial plants
DE102004045720A1 (de) 2004-09-21 2006-03-23 Wilex Ag Stabile Dosierungsform von Phenylalanin-Derivaten
DE502005007959D1 (de) 2004-10-14 2009-10-01 Wilex Ag Verfahren zur reinigung von 3-hydroxy-amidino-phenylalanin-derivaten durch ausfällung und umkristallisation eines salzes mit einer aromatischen sulfonsäure
DE102004057195A1 (de) 2004-11-26 2006-06-01 Wilex Ag Kristalline Modifikationen von N-Alpha-(2,4,6-Triisopropylphenylsulfonyl)-3-hydroxyamidino-(L)-phenylalanin-4-ethoxycarbonylpiperazid und/oder Salzen davon
US8324237B2 (en) 2005-05-20 2012-12-04 Smith Charles D Methods for the treatment and prevention of inflammatory diseases
KR101386282B1 (ko) 2005-06-17 2014-04-17 아포지 바이오테크놀로지 코포레이션 스핑고신 키나제 저해제
WO2012166859A2 (en) * 2011-06-01 2012-12-06 The Curators Of The University Of Missouri Modulation of sphingosine 1-phosphate metabolizing enzymes for the treatment of negative-strand rna virus infections
WO2015161908A1 (en) * 2014-03-11 2015-10-29 Ludwig-Maximilians-Universität München Non-immunosuppressive cyclophilin inhibitors for the treatment of coronavirus infections
KR20170070234A (ko) * 2014-10-24 2017-06-21 레드힐 바이오파마 엘티디 단일 가닥 ｒｎａ 바이러스 복제의 억제를 위한 요법
DK3297438T3 (da) * 2015-05-21 2022-01-17 Chemocentryx Inc Ccr2-modulatorer
RU2727474C2 (ru) * 2015-10-06 2020-07-21 Редхилл Байофарма Лтд. Виды комбинированной терапии для лечения рака
US10195188B2 (en) * 2016-06-13 2019-02-05 Chemocentryx, Inc. Method of treating pancreatic cancer
US10251888B2 (en) * 2016-06-13 2019-04-09 Chemocentryx, Inc. Method of treating pancreatic cancer
DE102018217334A1 (de) * 2018-10-10 2020-04-16 Harbins Ruhr Bioscience, Inc. Sphingoid-Base und/oder Wirkstoff zur Verwendung bei der Prophylaxe und/oder Therapie einer viralen Infektion und/oder viralen Infektionskrankheit oder der Desinfektion, Nahrungsmittel/Nahrungsergänzungsmittel, Futtermittel/Futterergänzungsmittel und Pflanzenschutzmittel
JP2023517920A (ja) * 2020-03-10 2023-04-27 レッド ヒル バイオファーマ リミテッド コロナウイルス感染の治療

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