JP2023085277A - 成人及び青年における低ホスファターゼ症（ｈｐｐ）を治療する方法 - Google Patents

成人及び青年における低ホスファターゼ症（ｈｐｐ）を治療する方法 Download PDF

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Abstract

【課題】長期間にわたって成人及び青年患者の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療し、モニターするために使用することができる方法を提供する。【解決手段】本開示は、例えば、血漿サンプル中の低下したピロリン酸塩（ＰＰｉ）若しくはピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度、身体障害又は低下した歩行能力を示す患者（例えば、小児発症低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）罹患成人などのＨＰＰ罹患成人又はＨＰＰ罹患青年）のＨＰＰを、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を患者に投与することによって治療する方法を特徴とする。【選択図】図１Ａ

Description

本開示は、低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療する方法を特徴とする。
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）は、稀な遺伝性骨格疾患であり、この疾患の最も重篤な形態について出生１００，０００人当たり１人の発生率を有する。この疾患は、組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＡＬＰ）をコードする遺伝子の機能喪失型変異に起因する。ＨＰＰは、くる病から子宮内の骨石灰化のほとんど完全な欠如まで極めて広範囲の症状及び重症度を示す。
ＨＰＰの症状は、患者によって異なり、患者の年齢によって異なる。ほとんどのＨＰＰ患者は、骨格変化、低身長、慢性痛、有痛性下肢、歩行障害及び早期の非外傷性歯喪失を示す。例えば、成人ＨＰＰ患者によく見られる症状として、骨軟化症、低ミネラル化骨、血中及び／又は尿中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）、ピリドキサール５’－リン酸塩（ＰＬＰ）又はホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇、低石灰化、高カルシウム尿症、低身長、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎及びピロリン酸塩関節症を挙げることができる。青年ＨＰＰ患者によく見られる症状として、ＰＰｉ、ＰＥＡ又はＰＬＰの上昇した血中又は尿中濃度、骨軟化症、骨格変形、緊張低下、筋力低下、リウマチ合併症、関節炎、偽痛風、動揺歩行、歩行困難、骨痛、痛み、歯の早期喪失、低石灰化、肺形成不全、呼吸不全、痙攣、高カルシウム尿症、低身長及び成長遅延を挙げることができる。
ＨＰＰに関連する身体的障害のために、ＨＰＰに苦しむ成人患者は、健康な対象と比較して歩行能力の低下を示すことが多い（Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ ＲＳ，Ｗｈｙｔｅ ＭＰ，Ａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ．１９８１；１４１（６）：７２７－７３１）。成人のＨＰＰ患者は、ピロリン酸カルシウム沈着症（ＣＰＰＤ）、偽痛風、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎、脊椎粉砕骨折、転子下骨折、中足骨骨折及び／又は偽骨折を患い得る（Ｃｏｅ ＪＤ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｏｎｅ Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ Ａｍ．１９８６；６８（７）：９８１－９９０；Ｓｕｔｔｏｎ，ＲＡＬ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ Ｒｅｓ．２０１２；２７（５）：９８７－９９４）。他の症状、例えばくる病、ラヒット肋骨、重度の低石灰化、発育不全、運動発達の遅延、不十分な体重増加、肺形成不全、呼吸不全、呼吸不全、頭蓋骨癒合症（頭蓋骨癒合症の合併症を含む）及び痙攣は、ＨＰＰ罹患小児又は乳児に起こるが、ＨＰＰ罹患成人には起こらない。
特にＨＰＰの治療の有効性及び安全性、特に長期間の治療を伴う、ＨＰＰの成人及び青年型に関連する特定の生理学的及び身体的障害並びに歩行能力の低下は、未知である。従って、これらの患者が、身体的及び生理学的障害が減少した状態で生存することができ、適切なレベルの歩行能力を回復することができるように、長期間にわたって成人及び青年患者のＨＰＰを治療し、モニターするために使用することができる方法に対する必要性が存在する。
（１）可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ；例えば、配列番号１）での治療のための、ＨＰＰ罹患成人（例えば、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人、例えば小児発症ＨＰＰ罹患成人）及び／又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）を同定するための方法、及び（２）そのような患者のｓＡＬＰによる治療が開示される。本明細書で定義される成人ＨＰＰの症状には、例えば、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化性関節周囲炎並びに偽骨折が含まれる。本明細書で定義される青年ＨＰＰの症状としては、例えば、ＰＰｉ、ＰＥＡ又はＰＬＰの上昇した血中又は尿中濃度、骨軟化症、１つ以上の骨格変形、緊張低下、筋力低下、リウマチ合併症、関節炎、偽痛風、動揺歩行、歩行困難、骨痛、痛み、歯の早期喪失、低石灰化、肺形成不全、呼吸不全、痙攣、高カルシウム尿症、低身長並びに成長遅延を挙げることができる。
ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）を用いた治療の必要性又は有効性を評価するために有用な例示的な測定基準には、（１）血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度、（２）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）、（３）Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙの運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）、（４）ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）、（５）下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）、並びに（６）簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）が含まれる。追加の試験及び測定基準には、Ｔｉｎｅｔｔｉ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｏｒｉｅｎｔｅｄ Ｍｏｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＰＯＭＡ；任意選択により修正）並びにＧＡＩＴＲＩＴＥ（登録商標）（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍａｇｅ Ｒｅｔｒｉｅｖａｌ Ｓｙｓｔｅｍ Ｉｎｃ．）などの時間空間歩行分析ソフトウェア及びハードウェアが含まれるであろう。本方法は、ＨＰＰ患者にｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）を使用して治療の有効性を評価するために、記載された測定基準（例えば、ＢＯＴ－２、６ＭＷＴ、血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度、ＨＨＤ、ＬＥＦＳ又はＢＰＩ－ＳＦ）の１つ以上を単独又は組み合わせて使用すること（そうした使用では、特定のスコア又は値に対する改善により、ｓＡＬＰがＨＰＰの治療に有効であることが示される）をさらに含む。さらに、ＨＰＰ患者からのサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＡＬＰの活性レベルも、患者に対するｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の治療の有効性を評価するために単独で又はこれらの測定基準の１つ若しくはそれぞれと組み合わせて使用され得る。さらに、方法は、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年に投与するｓＡＬＰの有効量を決定するためにｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）投与の用量及び／又は頻度を変化させることをさらに含む。
第１の態様は、成人ＨＰＰの症状を有するとして特徴付けられる、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ患者（例えば、ヒト）のＨＰＰを治療する方法であって、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）を、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で患者に投与することを含む方法を特徴とする。好ましくは、成人患者は、ｓＡＬＰによる治療に関して未経験（すなわち治療未経験）である。具体的には、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列（例えば、アスフォターゼアルファ）を含む。ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与は、以下：（ｉ）患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ未治療患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した約１μＭの統計学的に有意な減少；（ｉｉ）患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ未治療患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び（ｉｉｉ）６ＭＷＴによって評価される患者の歩行距離の、投与を受けていない患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加のうち１つ以上をもたらす。さらに、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与後、サンプル（例えば、血漿サンプル）中のＡＬＰの活性の増加があり得る。
本方法の結果、患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の減少、患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の減少及び／又は患者の歩行距離の増加は、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間中に持続される。
ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与前に、患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）は、約６μＭまでの血漿ＰＰｉ濃度（例えば、約３．５μＭ、約４μＭ、約４．５μＭ、約５μＭ若しくは約５．５μＭ又は約３．５μＭ～約６μＭの範囲内の血漿ＰＰｉ濃度）、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度（例えば、約２００ｎｇ／ｍｌ、３００ｎｇ／ｍｌ、４００ｎｇ／ｍｌ、５００ｎｇ／ｍｌ、６００ｎｇ／ｍｌ、７００ｎｇ／ｍｌ、８００ｎｇ／ｍｌ、９００ｎｇ／ｍｌ、１０００ｎｇ／ｍｌ、１１００ｎｇ／ｍｌ、１２００ｎｇ／ｍｌ若しくは１３００ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度又は約２００ｎｇ／ｍｌ～約１３００ｎｇ／ｍｌの範囲内の血漿ＰＬＰ濃度及び／又は約３５０メートル以下の６分間の歩行距離（例えば、約５０メートル、７５メートル、１００メートル、１２５メートル、１５０メートル、１７５メートル、２００メートル、２２５メートル、２５０メートル、２７５メートル若しくは３５０メートルの６分間の歩行距離又は約５０メートル～約３５０メートルの範囲内の６分間の歩行距離）を有するとして特徴付けられ得る。治療期間にわたるｓＡＬＰの投与後、患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の減少は、少なくとも約２μＭ（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの範囲の血漿ＰＰｉ濃度を示す）であり得、患者からのサンプル中のＰＬＰ濃度の減少は、少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌ（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの範囲の血漿ＰＬＰ濃度を示す）であり、且つ／又は少なくとも１００メートル以上の６分間の歩行距離の増加（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の６分間の歩行距離を示す）である。患者は、ｓＡＬＰ（配列番号１）の投与後、移動支援器具（例えば、歩行器、車椅子、ブレース、松葉杖及び装具）への低下した依存度及び／又は骨折（例えば、脊椎粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）の減少した発生率も示し得る。患者はまた、例えば、血清カルシウム濃度が、健康な対象の範囲（例えば、約８．５～約１０．２ｍｇ／ｄｌ）未満であり、血清リン酸塩濃度が、健康な対象の範囲（例えば、約２．５～約４．５ｍｇ／ｄｌ）未満であり、血清ビタミンＤ濃度が、健康な対象の範囲（例えば、約２０ｎｇ／ｍｌ）未満であり、血清クレアチニンが、健康な対象の範囲（例えば、約０．６ｍｇ／ｄｌ～１．２ｍｇ／ｄｌ）超であり、且つ／又は副甲状腺ホルモン濃度が、健康な対象の範囲（例えば、約１０～約６５ｐｇ／ｍｌ）超であるため、ｓＡＬＰによる治療から除外され得る。
第２の態様は、約１３歳以上の患者（例えば、ヒト）のＨＰＰを治療する方法であって、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）を、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは、６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で患者に投与する方法を特徴とする。患者は、ｓＡＬＰによる治療に関して未経験であり得る。具体的には、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列（例えば、アスフォターゼアルファ）を含む。ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与は、以下：（ｉ）患者の％予測ＨＨＤスコアの、ｓＡＬＰによる治療前の患者の％予測ＨＨＤスコアと比較した約５％以上（例えば、約５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％又は２０％以上）の変化；（ｉｉ）患者のＬＥＦＳスコアの、ｓＡＬＰによる治療前の患者のＬＥＦＳスコアと比較した約３以上（例えば、約３、４、５、６、７、８、９又は１０以上）の変化；及び（ｉｉｉ）患者のＢＰＩ－ＳＦスコアの、ｓＡＬＰによる治療前の患者のＢＰＩ－ＳＦスコアと比較した約－２以上（例えば、約－２、約－３、約－４、約－５、約－６又は約－７以上）の変化のうち１つ以上をもたらす。
第１又は第２の態様では、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、１日、１週間、１ヶ月又は１年に１回以上（例えば、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回）投与され得る。特に、ｓＡＬＰは、週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与され得る。例えば、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量（例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰ初期用量）で投与され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週以上の用量（例えば、９ｍｇ／ｋｇ／週）に増加される。特に、初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上（例えば、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年超、例えば患者の生涯）の治療期間後に増加され得る。さらに、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週以上（例えば、約９ｍｇ／ｋｇ／週）の用量で投与され得、例えば、ｓＡＬＰは、約２ｍｇ／ｋｇの用量で週３回、約３ｍｇ／ｋｇで週２回、約３ｍｇ／ｋｇで週３回又は約１ｍｇ／ｋｇの用量で週６回投与される。さらに、ｓＡＬＰは、連日又は隔日で１日１回投与され得る。さらに、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、成人ＨＰＰ症状の少なくとも１つ（例えば、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血液及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折（例えば、脊椎粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎並びに偽骨折のうち１つ以上）を治療するのに治療上有効な量で投与され得る。
第１又は第２の態様では、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、生理食塩水又は塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムなど、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与される。例えば、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤には、１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び２５ｍＭのリン酸ナトリウムが含まれる。さらに、医薬組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内に投与され得る。特に、医薬組成物は、皮下投与される。
第３の態様は、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者（例えば、ヒト）の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療するための、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸（例えば、アスフォターゼアルファ）配列を含むｓＡＬＰを特徴とする。特に、ｓＡＬＰは、少なくとも２週間、例えば少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で投与するために製剤化される。ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、患者へのｓＡＬＰの投与が、以下：（ｉ）患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ未治療患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した約１μＭの統計学的に有意な減少；（ｉｉ）患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ未治療患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び（ｉｉｉ）６ＭＷＴによって評価される患者の歩行距離の、投与を受けていない患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加のうち１つ以上をもたらすことを特徴とする。
第３の態様では、ｓＡＬＰは、患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の減少、患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の減少及び／又は患者の歩行距離の増加が少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間中に持続されることを特徴とし得る。
第３の態様では、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）がｓＡＬＰ投与前に約６μＭの血漿ＰＰｉ濃度、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度及び／又は約３５０メートル以下の６分間の歩行距離を示すことを特徴とし得る。特に、ｓＡＬＰは、患者の血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の減少が少なくとも約２μＭ（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの血漿ＰＰｉ濃度を示す）であり、患者のサンプル中のＰＬＰ濃度の減少が少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌ（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度を示す）であり、且つ／又は少なくとも１年の治療期間のｓＡＬＰの投与が少なくとも１００メートル以上の６分間の歩行距離の増加（例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の６分間の歩行距離を示す）をもたらすことを特徴とし得る。患者は、ｓＡＬＰ（配列番号１）の投与後、移動支援器具（例えば、歩行器、車椅子、ブレース、松葉杖及び装具）への低下した依存度及び／又は骨折（例えば、脊椎粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）の減少した発生率も示し得る。
第３の態様では、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、１日、１週間、１ヶ月又は１年に１回以上（例えば、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回）投与するために製剤化され得る。特に、ｓＡＬＰは、週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与するために製剤化される。例えば、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量（例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰ初期用量）で投与するために製剤化され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週以上の用量（例えば、９ｍｇ／ｋｇ／週）に増加される。特に、初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上（例えば、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年超、例えば患者の生涯）の治療期間後に増加され得る。さらに、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週以上（例えば、約９ｍｇ／ｋｇ／週）の用量で投与するために製剤化され得、例えば、ｓＡＬＰは、約２ｍｇ／ｋｇの用量で週３回、約３ｍｇ／ｋｇで週２回、約３ｍｇ／ｋｇで週３回又は約１ｍｇ／ｋｇの用量で週６回投与するために製剤化される。さらに、ｓＡＬＰは、連日又は隔日で１日１回投与するために製剤化され得る。さらに、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、成人ＨＰＰ症状の少なくとも１つ（例えば、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血液及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折（例えば、脊椎粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎並びに偽骨折のうち１つ以上）を治療するのに治療上有効な量で投与するために製剤化され得る。
第３の態様では、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、生理食塩水又は塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムなど、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与するために製剤化され得る。例えば、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤には、１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び２５ｍＭのリン酸ナトリウムが含まれる。さらに、医薬組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内投与するために製剤化され得る。特に、医薬組成物は、皮下投与するために製剤化される。
上記のいずれの態様でも、患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）は、周産期、幼児期又は小児期ＨＰＰの症状、例えばくる病、ラヒット肋骨、重度の低石灰化、発育不全、運動発達遅延、不十分な体重増加、肺形成不全、呼吸不全、呼吸不全、頭蓋骨癒合症（頭蓋骨癒合症の合併症を含む）及び痙攣などの存在に基づいて診断されなかった患者であり得る
上記のいずれの態様でも、患者は、ヒトである。患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者）は、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与後、異所性石灰化を示さなくなり得る。例えば、患者は、ｓＡＬＰの投与後、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年又は少なくとも１０年以上、例えば患者の生涯にわたって異所性石灰化を示さない。さらに、患者（例えば、約１３歳以上のＨＰＰ患者、このような患者は、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ治療未経験患者を含む）は、注射部位紅斑、ヘモグロビンの減少、発熱、肺炎、上気道感染、中耳炎、嘔吐、便秘、下痢、歯の喪失、鼻咽頭炎、発疹、虫歯及び易刺激性からなる群から選択される有害事象の欠如又は減少した発生率など、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）の投与に対して許容性を示し得る。
上記のいずれの態様でも、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、配列番号１のアミノ酸配列を含むか又はそれからなる。例えば、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）は、ＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰに対して生理学的に活性であり、骨の骨格石灰化を改善するための触媒として適格であり、且つ／又はアルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである。
上記のいずれの態様でも、ｓＡＬＰの投与は、患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度のベースラインからの最小二乗平均における統計学的に有意な変化をもたらし得る。ｓＡＬＰの投与は、約２，０００Ｕ×日／Ｌ～約７，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣｌａｓｔをもたらし得、ＡＵＣｌａｓｔは、時間ゼロから、投与間隔における最後の観察された濃度の時間までの濃度－時間曲線下の面積に等しい。ｓＡＬＰの投与は、約４，０００Ｕ×日／Ｌ～約１０，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣｉｎｆをもたらし得、ＡＵＣｉｎｆは、時間ゼロから無限大までの濃度－時間曲線下の面積に等しい。ｓＡＬＰの投与は、約３日～約８日のｔ１／２をもたらし得る。
定義
本明細書では、「１つの（ａ）」又は「１つの（ａｎ）」は、別段の指示がない限り、「少なくとも１つ」又は「１つ以上」を意味する。さらに、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明確に別に指示しない限り、複数の指示対象を含む。
本明細書では、「約」は、記載された値の±１０％、好ましくは記載された値の±５％又はより好ましくは記載された値の±２％の量を指す。
本明細書では、「少なくとも」は、記載された値の≦１０％、好ましくは記載された値の≦５％又はより好ましくは記載された値の≦２％の量を指す。
「アスフォターゼアルファ」とは、ＨＰＰの治療のために製剤化されたヒトＴＮＡＬＰ（ｈＴＮＡＬＰ）融合タンパク質を意味する。アスフォターゼアルファ（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）、Ａｌｅｘｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）は、２つの同一のポリペプチド鎖を有する可溶性糖タンパク質を含む融合タンパク質であり、各ポリペプチド鎖は、配列番号１の１～７２６のアミノ酸残基を含む。各ポリペプチド鎖の構造は、ｈＴＮＡＬＰの触媒ドメイン、ヒト免疫グロブリンＧ１のＦｃドメイン及び骨標的ドメインとして使用されるデカ－アスパラギン酸ペプチド（構造ｈＴＮＡＬＰ－Ｆｃ－Ｄ１０）を含む。２つのポリペプチド鎖は、２つのジスルフィド結合によって共有結合している。アスフォターゼアルファは、ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）の商品名において、米国、ヨーロッパ、日本、カナダ、イスラエル、オーストラリア及び韓国を含む世界中で承認されている。
本明細書では、「平均」は、データセットの平均又は中央値を表す数値を指す。データセットの平均は、セット内の値の合計をそれらの数で割ることによって計算される。日付セットの中央値は、奇数のリスト内の中央の値を決定することにより、又は偶数のリスト内の中央の２つのデータ値の平均をとることにより計算される。
本明細書では、用語「骨標的部分」は、骨標的部分が、約１０－６Ｍ～約１０－１５Ｍ（例えば、１０－７Ｍ、１０－８Ｍ、１０－９Ｍ、１０－１０Ｍ、１０－１１Ｍ、１０－１２Ｍ、１０－１３Ｍ、１０－１４Ｍ又は１０－１５Ｍ）である、骨マトリックスに対する高いインビボ結合親和性を有するように、十分な親和性を骨マトリックスに対して有する長さ１～５０アミノ酸残基のアミノ酸配列をいう。
本明細書で互換的に使用される用語「簡易痛み質問紙票」及び「ＢＰＩ－ＳＦ」は、患者、特にＨＰＰ患者（例えば、約１３歳以上の患者）の痛みを測定する方法を指す。ＢＰＩ－ＳＦは、Ｃｌｅｅｌａｎｄ＆Ｒｙａｎ（Ａｎｎ Ａｃａｄ Ｍｅｄ Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ，２３（２），１２９－１３８；１９９４）に記載されている自己報告式痛み測定であり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ＢＰＩ－ＳＦは、痛みの重症度及び日常機能に対する痛みの影響を評価するために設計された質問票である。ＢＰＩ－ＳＦは、アンケート実施の２４時間前の痛みの重症度（４項目）及び痛みの干渉度（７項目）を評価するために数値評価スケールを利用する１１項目からなる。ＢＰＩ－ＳＦ質問票では、痛みの強さ及び痛みが患者（例えば、約１３歳以上のＨＰＰ患者）の日常機能を妨げる程度に関する情報を０（痛みなし）～１０（疼痛又は痛みにより引き起こされる重大な干渉）の数値評価尺度で提供し、スコアが低いほど生活の質の改善及び痛みの軽減を示す。例えば、ＨＰＰ青年及び成人のＢＰＩ－ＳＦスコアは、１１の痛み評価を複合化したものである。
本明細書では、「Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙの運動能力試験第２版」又は「ＢＯＴ－２」という用語は、患者、例えば小児発症ＨＰＰ罹患成人などのＨＰＰ罹患成人のための、粗大及び微細運動能力を標準化した試験の第２版を指す。Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ，Ｒ．Ｈ．（２００５）．“Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ Ｔｅｓｔ ｏｆ Ｍｏｔｏｒ Ｐｒｏｆｉｃｉｅｎｃｙ，（ＢＯＴ－２）”．Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ：Ｐｅａｒｓｏｎ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（この全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。ＢＯＴ－２を個々に実施して、一連の患者の粗大及び微細運動スキルを評価する。ＢＯＴ－２は、例えば、ＨＰＰ患者（例えば、ＨＰＰ罹患成人、例えば小児発症ＨＰＰ罹患成人）の身体障害及び可動域制限を評価するために使用することができる。ＢＯＴ－２は、以下の例示的な領域における複合ＢＯＴ－２スコアを提供する：強度、走行速度及び機敏性、微細運動の精度、微細運動の統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調。例えば、ＢＯＴ－２強度の合計スコアは、患者に起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位、腕立て伏せを行わせることによって決定することができる。走行速度及び機敏性の合計スコアは、患者に平均台を跨がせるか、又はシャトルラン、両脚サイドホップ若しくは片脚サイドホップを実行させることによって決定することができる。ＢＯＴ－２強度の合計スコア並びにＢＯＴ－２の走行速度及び機敏性合計スコアの両方は、０～２５の範囲であり、約１０～２５のスコアは、健康な対象を代表すると考えられる。強度並びに走行速度及び機敏性の規準スコアは、１５＋／－５である。成人スコアは、規準化されず（スケーリングされたスコアを使用しない）、従って、より高いポイント値は、より良好なパフォーマンスを表す。平均スコア又は中央値スコアのいずれかを使用し得るが、より小さいサンプルサイズ又はより小さいデータセットには中央値スコアが好ましい。
本明細書では、「触媒として適格な」という用語は、骨石灰化阻害剤の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）を加水分解して無機リン酸塩（Ｐｉ）を提供し、それによってＰＰｉの細胞外濃度を低下させるｓＡＬＰを指す。従って、触媒として適格なｓＡＬＰは、ＰＰｉの濃度を調節することによって骨の骨格石灰化を改善する。
「細胞外ドメイン」とは、天然タンパク質、例えばアルカリホスファターゼの任意の機能的細胞外部分を意味する。特に、細胞外ドメインは、シグナルペプチドを欠いている。
「Ｆｃ」とは、免疫グロブリン重鎖のＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む、免疫グロブリンの断片結晶化可能領域、例えばＩｇＧ－１、ＩｇＧ－２、ＩｇＧ－３、ＩｇＧ－３又はＩｇＧ－４を意味する。Ｆｃは、Ｆａｂ及びＦｃ領域を接合するヒンジ領域の任意の部分も含み得る。Ｆｃは、ヒトを含む任意の哺乳動物のものであり得、翻訳後修飾され得る（例えば、グリコシル化によって）。非限定的な例では、Ｆｃは、配列番号２０のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ－１の断片結晶化可能領域であり得る。
「断片」とは、好ましくは、参照核酸分子又はポリペプチドの完全長の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれを超えて含有するポリペプチド又は核酸分子の一部を意味する。断片は、例えば、ポリペプチドの完全長まで１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、４００、５００、６００、７００又はそれを超えるアミノ酸残基を含み得る。例示的なｓＡＬＰ断片は、ＡＬＰ（例えば、配列番号２～６）のアミノ酸残基１８～４９８、１８～４９９、１８～５００、１８～５０１、１８～５０２、１８～５０３、１８～５０４、１８～５０５、１８～５０６、１８～５０７、１８～５０８、１８～５０９、１８～５１０、１８～５１１又は１８～５１２を有し、さらなるＣ末端部分及び／又はＮ末端部分を含み得る。
本明細書で互換的に使用される「ハンドヘルドダイナモメトリー」及び「ＨＨＤ」という用語は、対象、特に約１３歳以上のＨＰＰ罹患対象の握力及び筋力を測定する方法を指す。ダイナモメータは、ＨＰＰ罹患対象のグリップ強度、膝屈曲、膝伸展、股関節屈曲、股関節伸展及び股関節外転を評価するために使用することができる。例えば、約１３歳以上のＨＰＰ罹患対象の膝屈曲及び伸展並びに股関節屈曲、伸展及び外転は、例えば、ＭＩＣＲＯＦＥＴ２ＴＭダイナモメータを使用して測定することができる一方、対象のグリップ強度は、例えば、ＪＡＭＡＲ（登録商標）グリップダイナモメーターを使用して測定することができる。具体的には、管理者は、ダイナモメータを静止状態に保持し、対象は、ダイナモメータに対して最大の力を加える。最大力データをポンドで収集し、後にニュートン（Ｎ）に変換される。次いで、肢の長さを使用してＮ－メートルでトルク値が計算される。その後、トルク値は、例えば、ほぼ同じ年齢、同じ性別及び／又は同じ身長の健常対象の値と比較し、パーセンテージ値で表して対象のＨＨＤスコアを生成することができる。
本明細書では、「低ホスファターゼ症」又は「ＨＰＰ」という用語は、ＡＬＰＬ（アルカリホスファターゼ、肝臓／骨／腎臓）遺伝子の１つ以上の機能喪失変異（これは、組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＡＬＰ）をコードする）によって引き起こされる稀な遺伝性骨格障害を指す。ＨＰＰは、乳児ＨＰＰ、小児ＨＰＰ、周産期ＨＰＰ（例えば、良性周産期ＨＰＰ又は致死性周産期ＨＰＰ）、歯科－ＨＰＰ、青年期ＨＰＰ又は成人ＨＰＰとしてさらに特徴付けられ得る。例えば、「成人ＨＰＰ」は、１８歳以上のＨＰＰ患者である。「青年期ＨＰＰ」は、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ患者である。本明細書では、「成人ＨＰＰ」という用語は、以下の症状のうち１つ以上の存在によって特徴付けられる状態又は表現型を指す：無機ピロリン酸（ＰＰｉ）、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）又はピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折（例えば、椎骨粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化性関節周囲炎並びに偽骨折。本明細書では、「青年期ＨＰＰ」という用語は、以下の症状のうち１つ以上の存在によって特徴付けられる状態又は表現型を指す：ＰＰｉ、ＰＥＡ又はＰＬＰの上昇した血中又は尿中濃度、骨軟化症、１つ以上の骨格変形、緊張低下、筋力低下、リウマチ合併症、関節炎、偽痛風、動揺歩行、歩行困難、骨痛、痛み、歯の早期喪失、低石灰化、肺形成不全、呼吸不全、痙攣、高カルシウム尿症、低身長並びに成長遅延。
本明細書で互換的に使用される用語「下肢機能スケール」及び「ＬＥＦＳ」は、患者、特にＨＰＰ患者（例えば、約１３歳以上の患者）の下肢の機能障害を測定する方法を指す。ＬＥＦＳは、Ｂｉｎｋｌｅｙ ｅｔ ａｌ．（Ｐｈｙｓ Ｔｈｅｒ．７９：３７１－８３，１９９９）に記載がある自己報告尺度であり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ＬＥＦＳの合計スコアは、０～８０の範囲であり、より高いスコアは、より良好な下肢機能の指標である。約９点のＬＥＦＳスコアの変化は、臨床的に意味のある変化と考えられる。免許を有する理学療法士は、インタビュー形式でＨＰＰ患者（例えば、約１３歳以上のＨＰＰ患者）にＬＥＦＳを実施することができる。より高いＬＥＦＳスコアは、移動運動（例えば、浴から出るか又はベッドで転がる）、歩行運動（例えば、平坦でない地面を歩くか又は走る）、階段を登ること及びしゃがむことを含む、下肢機能の改善の指標である。ＬＥＦＳは、ＨＰＰ患者の一方又は両方の下肢の機能障害を評価するために使用することができ、患者を経時的に監視し、アスフォターゼアルファ治療の有効性を評価する能力を含む。
「治療未経験（ｎａｉｖｅ）患者」又は「治療未経験（ｎａｉｖｅ）対象」とは、ｓＡＬＰ（例えば、ＴＮＡＬＰ、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）などのアルカリホスファターゼ又はアルカリホスファターゼ活性を有するポリペプチドによる治療を以前に受けていない小児発症ＨＰＰ患者又は対象を意味する。
「小児発症低ホスファターゼ症」及び「小児発症ＨＰＰ」という用語は、対象が約１８歳前にＨＰＰを発症することを指す。
用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、互換的に使用され、本明細書で記載されるように、天然に存在するか又は天然に存在しないポリペプチド又はペプチドの全て又は一部を構成する、２つ以上の天然又は非天然アミノ酸残基の任意の鎖を翻訳後修飾（例えば、グリコシル化又はリン酸化）にかかわらず指す。
「薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤」とは、それぞれ対象（例えば、ヒト）に対して生理学的に許容されるが、それが投与される医薬組成物の治療特性を保持する担体、希釈剤又は賦形剤を意味する。１つの例示的な薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、生理食塩水である。例えば、薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、塩化ナトリウム（例えば、１５０ｍＭ塩化ナトリウム）及びリン酸ナトリウム（例えば、２５ｍＭリン酸ナトリウム）を含むことができる。他の生理学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤及びそれらの製剤は、当業者に公知である。
「医薬組成物」とは、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を用いて製剤化された、本明細書に記載のポリペプチド（例えば、アスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰを含む組成物）を含む組成物を意味する。医薬組成物は、患者の疾患又は事象の治療又は予防のための治療計画の一部として、政府の規制当局の承認を得て製造又は販売され得る。医薬組成物は、例えば、皮下投与、静脈内投与（例えば、粒子状塞栓を含まない無菌溶液として及び静脈内使用に適した溶媒系で）、経口投与（例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ゲルキャップ又はシロップ）又は本明細書に記載の任意の他の製剤（例えば、単位剤形）のために製剤化することができる。
本明細書では、「身体障害」という用語は、例えば、歩行能力、機能的耐久力及び患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人などのＨＰＰ罹患成人）の日常生活（ＡＤＬ）の活動能力を制限又は排除することがある、ＨＰＰに関連する骨脆弱及び筋力低下などの生理学的状態を指す。特に、身体障害は、ＡＤＬを行う患者の能力を制限又は排除し得、ＡＤＬは、健康な対象であれば支援を必要とせずに毎日実施している機能的運動又は移動（例えば、歩行）、入浴及びシャワー、身支度、自己栄養並びに個人的な衛生及びグルーミングなどの日常的な活動である。本明細書に記載のように、治療組成物（例えば、アスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰを含む組成物）は、ＨＰＰ表現型に関連する身体障害の重症度及び／又は頻度を減少させ、且つ／又は患者の歩行能力（例えば、６分間にわたって患者が歩いた距離から決定される歩行能力）を増加させるために患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人などのＨＰＰ罹患成人）に投与することができる。
本明細書では、「生理学的に活性な」という用語は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）を加水分解してＰｉを生成し、それによってＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰの細胞外濃度を低下させるｓＡＬＰ（例えば、配列番号１）を指す。
用語「ｓＡＬＰ」、「可溶性アルカリホスファターゼ」及び「アルカリホスファターゼの細胞外ドメイン」は、互換的に使用され、可溶性の非膜結合アルカリホスファターゼ又はそのドメイン、生物学的に活性な断片若しくは生物学的に活性な変異体を指す。ｓＡＬＰには、例えば、Ｃ末端糖脂質アンカーを欠くアルカリホスファターゼ（ＧＰＩシグナル配列、例えばヒトＴＮＡＬＰ（配列番号２、３、４、５又は６）のアミノ酸残基１８～５０２を含むか又はそれからなるポリペプチド）が含まれる。特に、ＴＮＡＬＰは、例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～４８５を含むか又はそれからなるポリペプチド、例えばアスフォターゼアルファ又は配列番号１のアミノ酸残基１～４８５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体を含み得る。ｓＡＬＰは、例えば、アカゲザルＴＮＡＬＰ（配列番号７）、ラットＴＮＡＬＰ（配列番号８）、イヌＴＮＡＬＰ（配列番号９）、ブタＴＮＡＬＰ（配列番号１０）、マウスＴＮＡＬＰ（配列番号１１）、ウシＴＮＡＬＰ（配列番号１２～１４）又はネコＴＮＡＬＰ（配列番号１５）などのヒトＴＮＡＬＰの哺乳動物オーソログをさらに含む。ｓＡＬＰは、ヒトＰＡＬＰ（例えば、配列番号１６又は１７のアミノ酸残基１８～５０２を含むか又はそれからなるポリペプチド）、ＧＣＡＬＰ（例えば、配列番号１８のアミノ酸残基１８～５０２を含むか又はそれからなるポリペプチド）及びＩＡＬＰ（例えば、配列番号１９のアミノ酸残基１８～５０２を含むか又はそれからなるポリペプチド）の可溶性の非膜結合形態並びにアルカリホスファターゼ活性、例えばＰＰｉを加水分解する能力を保持するそのさらなる変異体及び類似体も含む。特に、ｓＡＬＰは、Ｎ末端シグナルペプチド（例えば、配列番号２～６、８、１１～１３又は１５のａａ１～１７又は配列番号７のａａ１～～２５）を欠く。
「ｓＡＬＰポリペプチド」とは、構造Ａ－ｓＡＬＰ－Ｂを有するポリペプチドを意味し、ここで、ｓＡＬＰは、本明細書で定義されているものであり、Ａ及びＢの各々は、存在しないか、又は少なくとも１つのアミノ酸のアミノ酸配列である（例えば、本明細書に記載の任意のｓＡＬＰ融合ポリペプチド（例えば、配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）。
「シグナルペプチド」とは、ポリペプチドを分泌経路（例えば、細胞外空間）に向ける、ポリペプチドＮ末端の短いペプチド（５～３０アミノ酸長）を意味する。シグナルペプチドは、典型的にはポリペプチドの分泌中に切断される。シグナル配列は、ポリペプチドを細胞内コンパートメント又はオルガネラ、例えばゴルジ装置に向け得る。シグナル配列は、ポリペプチドを細胞の特定領域に標的化する既知の機能を有するペプチドに対する相同性又は生物学的活性によって同定され得る。当業者は、容易に入手可能なソフトウェア（例えば、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｅｎｔｅｒ，１７１０ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｖｅｎｕｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．５３７０５、ＢＬＡＳＴ又はＰＩＬＥＵＰ／ＰＲＥＴＴＹＢＯＸプログラム）を使用してシグナルペプチドを同定することができる。シグナルペプチドは、例えば、配列番号２～６のアミノ酸残基１～１７又は配列番号７のアミノ酸残基１～２５と実質的に同一であるものであり得る。
本明細書では、ポリペプチド又は核酸配列が参照配列に対して「少なくともＸ％の配列同一性」を有すると言及され、及び「Ｘ」が実数である場合、配列が最適に整列される場合、ポリペプチド又は核酸中の少なくともＸパーセントのアミノ酸残基又はヌクレオチドが参照配列のそれと同一であることを意味する。配列の最適なアラインメントは、当業者の技術の範囲内にある様々な方法、例えばＳｍｉｔｈ Ｗａｔｅｒｍａｎアライメントアルゴリズム（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５－７，１９８１）及びＢＬＡＳＴ（Ｂａｓｉｃ Ｌｏｃａｌ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ Ｓｅａｒｃｈ Ｔｏｏｌ；Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０，１９９０）で決定することができる。これら及び他のアラインメントアルゴリズムは、ＧｅｎｅＭａｔｃｈｅｒ Ｐｌｕｓ（Ｓｃｈｗａｒｚ ａｎｄ Ｄａｙｈｏｆｆ，Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｄａｙｈｏｆｆ，Ｍ．Ｏ．，Ｅｄ．ｐｐ ３５３－３５８，１９７９）に組み込まれている「Ｂｅｓｔ Ｆｉｔ」（Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ，４８２－４８９，１９８１）、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＢＬＡＳＴ－Ｐ、ＢＬＡＳＴ－Ｎ、ＢＬＡＳＴ－Ｘ、ＷＵ－ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、ＡＬＩＧＮ－２、ＣＬＵＳＴＡＬ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）又はアラインメントのための他のソフトウェア／ハードウェアなど、一般公開されているコンピュータソフトウェアにより使用できる。さらに、当業者は、比較される配列の長さにわたって最適なアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
用語「患者」又は「対象」は、ヒト又はウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ若しくはネコなどの非ヒト哺乳動物を含む哺乳動物を指すが、これらに限定されない。特に関心があるのは、ヒト患者である。
本明細書では、「非経口投与」、「非経口的な投与」及び他の文法的に均等な語句は、通常、注射による経腸投与及び局所投与以外の投与様式を指し、限定されないが、皮下、皮内、静脈内、鼻腔内、眼内、肺内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、肺内、腹腔内、経気管、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、髄腔内、硬膜外、脳内、頭蓋内、頸動脈内及び胸骨内への注射及び注入を含む。
本明細書では、「６分間歩行試験」及び「６ＭＷＴ」は、患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人などのＨＰＰ罹患成人）の歩行能力、特に患者が各脚を順番に持ち上げて下ろす能力を評価するための標準化された試験を指す。参照により全体が本明細書に組み込まれるＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｈｏｒａｃｉｃ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｓｔａｔｅｍｅｎｔ：ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｉｘ－ｍｉｎｕｔｅ ｗａｌｋ ｔｅｓｔ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１６６（１）：１１１－７，２００２）を参照されたい。６ＭＷＴは、患者が６分間に平坦な硬い表面上を歩く距離（例えば、メートル単位）から決定される。その後、６ＭＷＴ距離を、ベースラインでの患者の６ＭＷＴ距離、未治療対象（例えば、ほぼ同年齢、同身長及び／又は同性の未治療対象）の６ＭＷＴ距離又は健康な対象（例えば、ほぼ同年齢、同身長及び／又は同性の健康な対象）の６ＭＷＴ距離と比較し、パーセンテージとして表して、６ＭＷＴ値を決定することができる。
「治療有効量」とは、成人ＨＰＰの少なくとも１つの症状（例えば、ＰＰｉ、ＰＬＰ及びＰＥＡの上昇した血中又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎並びに偽骨折）を実質的に改善、治療、予防、遅延、抑制又は停止するのに十分な量の、本明細書に記載のポリペプチド（例えば、配列番号１などのｓＡＬＰ）又は核酸分子を意味する。本明細書に記載の組成物の治療有効量は、治療される障害の重症度並びに患者の状態、体重及び全身状態に依存し得、このような因子を考慮して当業者により決定することができる。本明細書に記載の組成物の治療有効量は、単回用量で又はある期間にわたって投与される複数回用量で患者に投与することができる。
「治療すること」、「治療する」又は「治療」とは、例えば、医薬組成物（例えば、配列番号１などのｓＡＬＰ）を投与することにより、成人ＨＰＰの治癒、改善、安定化、可能性の低減又は予防を意図した患者の医学的管理及び／又は成人ＨＰＰ患者若しくはその疑いのある患者の管理を意味する。この用語は、能動的治療、すなわち疾患、病的状態、障害又は事象の改善に特に向けられる治療又は治癒に関連する治療を含み、原因治療、すなわち関連する疾患、病的状態、障害又は事象の原因の除去に向けられる治療も含む。さらに、この用語は、緩和治療、すなわち疾患、病的状態、障害又は事象の治癒ではなく、少なくとも１つの症状の軽減又は改善のために設計された治療；対症療法、すなわち関連する疾患、病的状態、障害又は事象の全身症状に向けられた治療；予防的治療、すなわち関連する疾患、病的状態、障害又は事象の進行を、例えば依然として病気ではないが、特定の疾患、病的状態、障害又は事象に敏感であるか又はそうでなければリスクがある患者において最小限にするか又は部分的に若しくは完全に阻害することに向けられた治療；及び支持療法、すなわち関連する疾患、病的状態、障害又は事象の改善に向けた別の特定の治療を補足するために用いられる治療を含む。
本開示の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明、図面及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。
図１Ａ－１Ｂは成人小児発症低ホスファターゼ（ＨＰＰ）患者の血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ；図１Ａ）及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ；図１Ｂ）濃度の、アスフォターゼアルファ治療による、ベースラインから６ヶ月までの中央値の変化を示すグラフである。データは、中央値（最小値、最大値）として示す。ａＰ値は、統合アスフォターゼ－アルファ治療群（アスフォターゼアルファ０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日の用量を投与された成人ＨＰＰ患者）を未治療対照群と比較する。血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度について評価した治療患者及び未治療対照対象の数（ｎ）が示されている。 図１の続きである。 図２は６年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された小児発症ＨＰＰ成人患者の血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の中央値を示すグラフである。１８歳以上の健康対象のＰＰｉ濃度の正常上限値と正常下限値とが示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。プロトコール修正によりアスフォターゼアルファを６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加させた治療期間が示されている。６ヵ月時点でのベースラインからの血漿中のＰＰｉ濃度の中央値の変化について、ａＰ＜０．０００１である。 図３は６年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された小児発症ＨＰＰ成人患者の血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の中央値を示すグラフである。１８歳超の健康対象のＰＬＰ濃度の正常上限値と正常下限値とが示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。プロトコール修正によりアスフォターゼアルファを６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加させた治療期間が示されている。６ヵ月時点でのベースラインからの血漿中のＰＰｉ濃度の中央値の変化について、ａＰ＜０．０００１である。 図４は６年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された小児発症ＨＰＰ成人患者の６人分間歩行試験（６ＭＷＴ）距離の予測中央値パーセントを示すグラフである。各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年及び６年）の中央値、最小値、最大値及びｎ値が示されている。灰色の領域は、健康であり、年齢が一致し、身長が一致する同格者の６ＭＷＴ距離の正常な範囲を表す。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。プロトコール修正によりアスフォターゼアルファを６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加させた治療期間が示されている。プロトコールを６ｍｇ／ｋｇ／週に修正する前に、０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日のアスフォターゼアルファを投与されたａＨＰＰ患者を全治療期間にわたって統合した。 図５は６年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された小児発症ＨＰＰ成人患者についての、Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）の走行速度及び機敏性試験の合計スコアの中央値を示すグラフである。各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年及び６年）の中央値、最小値、最大値及びｎ値が示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。ベースラインのために、プロトコールを６ｍｇ／ｋｇ／週に修正する前に、０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日のアスフォターゼアルファを投与されたＨＰＰ患者を全治療期間にわたって統合した。 図６は６年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された小児発症ＨＰＰ成人患者についての、ＢＯＴ－２強度試験の合計スコアの中央値を示すグラフである。各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年及び６年）の中央値、最小値、最大値及びｎ値が示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。ベースラインのために、プロトコールを６ｍｇ／ｋｇ／週に修正する前に、０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日のアスフォターゼアルファを投与されたＨＰＰ患者を全治療期間にわたって統合した。 図７はアスフォターゼアルファによる治療の初期フェーズ（ベースラインから）から６ヶ月まで及びアスフォターゼアルファによる治療の延長フェーズ（治療の６ヶ月から治療の５年以上まで）を含む５年の期間にわたり、ＨＰＰ罹患青年及び成人にアスフォターゼアルファを投与する試験設計を示す概略図である。ａアスフォターゼアルファの用量は、体重変化のために３ヶ月毎に調整した。治験責任医師がメディカルモニターとの相談後に８０ｍｇを超える用量を承認しない限り、アスフォターゼアルファの最大用量は、８０ｍｇであった。ｂアスフォターゼアルファの用量は、プロトコール修正によって全ての患者で増加した。延長フェーズ中、全ての患者は、最初に０．５ｍｇ／ｋｇ／週のアスフォターゼアルファを約６ヶ月～１年間毎日投与され、その後、６日／週で１ｍｇ／ｋｇに変更された。 図８は試験の異なる段階（スクリーニング、無作為化、アスフォターゼアルファ治療のベースラインから６ヶ月までの一次治療期間、アスフォターゼ治療の６ヶ月から１年までの非盲検延長期間及びアスフォターゼアルファの用量が１ｍｇ／ｋｇ／日に増加され、試験の５年まで６日／週で投与された期間）の青年及び成人ＨＰＰ患者の数を示す概略図である。 図９Ａ－Ｂはアスフォターゼアルファによる治療のベースラインから６ヶ月までの、青年及び成人ＨＰＰ患者からの血漿サンプル中ピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ；図９Ａ）及び無機ピロリン酸（ＰＰｉ；図９Ｂ）の濃度の中央値変化を示すグラフである。データは、中央値（最小値、最大値）として示す。ａＰ値は、統合アスフォターゼ－アルファ治療群（アスフォターゼアルファ０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日の用量を投与された成人及び青年ＨＰＰ患者）を未治療対照群と比較する。血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度について評価した治療患者及び未治療対照対象の数（ｎ）が示されている。 図１０Ａ－１０Ｂはアスフォターゼアルファを５年の治療期間にわたって投与された青年及び成人ＨＰＰ患者の、血漿試料中のＰＬＰ（図１０Ａ）及びＰＰｉ（図１０Ｂ）の濃度の中央値を示すグラフである。健康対象のＰＰｉ及びＰＬＰ濃度の正常上限及び正常下限も示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。プロトコール修正によりアスフォターゼアルファを６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加させた治療期間が示されている。 図１０の続きである。 図１１Ａ－１１Ｂはアスフォターゼアルファを５年の治療期間にわたって投与された青年及び成人ＨＰＰ患者が６ＭＷＴで歩いた距離の中央値（図１１Ａ）及び６ＭＷＴ距離のパーセント予測中央値（図１１Ｂ）を示すグラフである。各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年及び５年）の中央値、最小値、最大値及びｎ値が示されている。灰色の領域は、健康であり、年齢が一致し、身長が一致する同格者の６ＭＷＴ距離の正常な範囲を表す。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。プロトコール修正によりアスフォターゼアルファを６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加させた治療期間が示されている。 図１２Ａ－１２ＢはＨＰＰ罹患青年におけるスクリーニング時及びベースラインでの６ＭＷＴ歩行距離（図１２Ａ）及び小児発症ＨＰＰの成人（図１２Ｂ）間の相関を示すグラフである。 図１３は５年の治療期間にわたってアスフォターゼアルファを投与された青年及び成人ＨＰＰ患者の、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性試験の合計スコアの中央値及びＢＯＴ－２強度試験の合計スコアの中央値のベースラインからの変化を示すグラフである。各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年及び５年）の中央値、最小値、最大値及びｎ値が示されている。対照群は、統合治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。ベースラインのために、プロトコールを６ｍｇ／ｋｇ／週に修正する前に、０．３ｍｇ／ｋｇ／日及び０．５ｍｇ／ｋｇ／日のアスフォターゼアルファを投与されたＨＰＰ患者を全治療期間にわたって統合した。 図１４は第２ａフェーズの臨床試験中、様々な濃度でアスフォターゼアルファを投与される患者の投与スケジュールを示す概略図である。 図１５は第２ａフェーズの臨床試験中、ベースラインから第９週の第３回投与前までのＰＰｉの最小二乗平均（ＬＳＭ）の変化間で観察された有意差を示すグラフである。 図１６は第２ａフェーズの臨床試験中、ベースラインから第９週の第３回投与前までのＰＬＰのＬＳＭの変化間で観察された有意差を示すグラフである。 図１７Ａ－１７Ｂは各投与コホート（図１７Ａ）の投薬スケジュール並びに薬物動態、薬力学及び免疫原性評価のスケジュール（図１７Ｂ）を示す概略図である。 図１７の続きである。 図１８Ａ－１８Ｂは１日目の初回投与後（図１８Ａ）及び６１日目の反復投与事象後（図１８Ｂ）の、各日の各投与コホート（０．５ｍｇ／ｋｇ ３×／週、２ｍｇ／ｋｇ ３×／週及び２ｍｇ／ｋｇ ３×／週）におけるアスフォターゼアルファ活性（Ｕ／Ｌ）の個々のＰＫプロファイルを示すグラフである。 図１９Ａ－１９Ｃは１日目の初回投与後（図２０Ａ）、１５日目～６１日目の反復投与事象後（図１９Ｂ）及び６１日目の反復投与事象後（図１９Ｃ）の、各日の各投与コホートにおけるアスフォターゼアルファ活性（Ｕ／Ｌ）のＰＫプロファイルの平均±ＳＤを示すグラフである。 図２０Ａ－２０Ｂは１日目の各日の初期投与後（図２０Ａ）及び６１日目の反復投与事象後（図２０Ｂ）の、各投与コホートにおける平均±ＳＤ用量正規化したアスフォターゼアルファ活性（Ｕ／Ｌ）を示すグラフである。 図２１はアスフォターゼアルファＣａｖｇ，ｓｓ曝露四分位数によるベースライン（ＣＢＬ）ＰＰｉからの６１日目の変化を示すグラフである。ＣＢＬ ＰＰｉ値の中央値は、ボックスの中央の線によって示される。ボックスは、四分位数間範囲（ＩＱＲ）を示す。ウィスカーは、１．５＊ＩＱＲを表す。外れ値は、ウィスカーの外側に黒丸印で示されている。
本発明者らは、アスフォターゼアルファ（配列番号１、ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）、Ａｌｅｘｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）が、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人などの約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）において、長期間（少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年超、例えば患者の生涯にわたって）、低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）、その症状及びそれに関連する身体的障害を治療するために効果的に使用できることを発見した。特に、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、身体的障害（例えば、骨又は筋肉の脆弱）、健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、性別及び／又は身長のＨＰＰに罹患していない対象）と比較した歩行能力の低下、健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は身長のＨＰＰに罹患していない対象）と比較したサンプル（例えば、血漿サンプル）中のアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）濃度の低下、健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は身長のＨＰＰに罹患していない対象）と比較した握力及び筋力の低下、健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は身長のＨＰＰに罹患していない対象）と比較した下肢の障害の減少又は健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は身長のＨＰＰに罹患していない対象）と比較した痛みの増加を示すＨＰＰ罹患成人又は青年を治療するために投与することができる。さらに、ＨＰＰ罹患成人又は青年は、アスフォターゼアルファ（配列番号１）による治療を以前に受けたことがない治療未経験患者であり得る。
ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）であって、未治療のＨＰＰ罹患成人又は青年の血漿試料中のＰＰｉ又はＰＬＰ濃度と比較して、ＨＰＰ罹患成人又は青年の血漿試料中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）又はピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の上昇を示す患者にアスフォターゼアルファ（配列番号１）を投与する方法が記載される。ｓＡＬＰの投与前に、ＨＰＰ患者は、約６μＭまでの血漿ＰＰｉ濃度及び／又は１３００ｎｇ／ｍｌまでのＰＬＰ濃度を有するとして特徴付けられ得る。さらに、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）にアスフォターゼアルファ（配列番号１）を投与する方法であって、ＨＰＰ罹患成人の歩行能力の改善をもたらす方法が記載される。例えば、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、歩行能力が低下したＨＰＰ罹患成人又は青年であって、ｓＡＬＰの投与前に６分間の歩行距離が約３５０メートル以下であると特徴付けられる患者に投与することができる。例えば、ＨＰＰ罹患成人は、ｓＡＬＰの投与後、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ及び装具のような移動支援器具への依存度が低下する。
身体障害を示す、Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙの運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）の走行速度及び機敏性試験又は筋力の合計スコア（例えば、筋力、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調のうち１つ以上のＢＯＴ－２スコア領域において約７未満のＢＯＴ－２スコア）を有するＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）にアスフォターゼアルファ（配列番号１）を投与する方法も記載される。例えば、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性が約６未満のＨＰＰ罹患成人に投与することができる。さらに、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、ＢＯＴ－２強度スコアが約１２未満のＨＰＰ罹患成人に投与することができる。
握力及び筋力の低下を示すハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）スコア（例えば、約１０、２０、３０、４０又は５０などの約５０未満のＨＤＤスコア）、下肢における機能障害の低下を示す下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）スコア（例えば、約１０、２０、３０又は４０などの４０未満のＬＥＦＳスコア）及び／又は痛みを示す簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）（例えば、約１０、約１５、約２０、約２５若しくは約３０又はそれを超えるなどの約１０超のスコア）を有するＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）にアスフォターゼアルファ（配列番号１）を投与する方法も記載されている。
これらの方法のいずれかにより、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年に対し、長期間、例えば少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年より長い期間、例えば患者の生涯にわたって）投与され得る。さらに、アスフォターゼアルファを使用した、本明細書に記載の結果を考慮すると、他のｓＡＬＰ（配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体など）を使用して、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）を、長期間、例えば少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年より長い期間、例えば患者の生涯にわたって）治療し得る。
治療方法
ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰを罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）を治療するための方法が本明細書で提供される。ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰ、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチドなどのｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファなど）を年齢の範囲、例えば約１８歳～約２０歳、約２０歳～約２５歳、約２５歳～約３０歳、約３０歳～約３５歳、約３５歳～約４０歳、約４０歳～約４５歳、約４５歳～約５０歳、約５０歳～約５５歳、約６０歳～約６５歳、約２０歳～約３０歳、約３０～約４０歳、約４０～約５０歳、約５０～約６０歳、約６０～約７０歳、約２０～約６５歳、約３０～約６５歳又は６５歳超にわたって投与することによって治療することができる。
成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又は青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰ、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰ融合ポリペプチドなど）の投与前にＨＰＰと診断されることがある。ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年は、例えば、ＨＰＰに罹患していない成人と比較して身体障害及び歩行能力障害を示すことができる。
さらに、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰ、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰ融合ポリペプチドなど）による治療を以前に受けたことがない治療未経験患者であり得る。この方法は、少なくとも１年（例えば、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年より長い期間、例えば患者の生涯）の治療期間にわたってｓＡＬＰを投与するなど、ｓＡＬＰ（例えば、配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド改変体、例えばアスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰ融合ポリペプチドなどのＴＮＡＬＰ）をＨＰＰ罹患成人又はＨＰＰ罹患青年に投与することを含む。
特に、アスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰは、約６μＭまでの血漿ＰＰｉ濃度（例えば、約３．５μＭ、約４．５μＭ、約５μＭ又は約５．５μＭ）、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度（例えば、約２００ｎｇ／ｍｌ、３００ｎｇ／ｍｌ、４００ｎｇ／ｍｌ、５００ｎｇ／ｍｌ、６００ｎｇ／ｍｌ、７００ｎｇ／ｍｌ、８００ｎｇ／ｍｌ、９００ｎｇ／ｍｌ、１０００ｎｇ／ｍｌ、１１００ｎｇ／ｍｌ、１２００ｎｇ／ｍｌ、１３００ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度）、約３５０メートル未満の６分間の歩行距離（例えば、約５０メートル、７５メートル、１００メートル、１２５メートル、１５０メートル、１７５メートル、２００メートル、２２５メートル、２５０メートル、２７５メートル又は３５０メートルの６分間の歩行距離）、約６．０未満のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコア、約１２未満のＢＯＴ－２合計強度スコア、予測ＨＨＤスコアの約８０％未満のＨＨＤスコア（例えば、予測ＨＨＤスコアの約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％又は訳７５％）、約４０未満のＬＥＦＳスコア（例えば、約１０、約２０、約３０又は約４０未満のＬＥＦＳスコア）並びに／又は約１２未満のＢＰＩ－ＳＦスコア（例えば、約０、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９又は約１０未満のＢＰＩ－ＳＦスコア）を有することが以前に決定されたＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）に治療期間にわたって投与することができる。さらに、ＨＰＰ罹患成人又は青年の血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア、ＬＥＦＳスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコアをそれぞれ患者のベースラインでの血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア、ＬＥＦＳスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコアと比較して、ｓＡＬＰによる治療後の成人又は青年への効果を評価することができる。
さらに、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコアを健康な患者の血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア、ＬＥＦＳスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコアと比較して、ｓＡＬＰ（例えば、アスフォターゼアルファ）を投与された成人又は青年への治療効果を決定することができる。特に、ｓＡＬＰは、少なくとも１年（例えば、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年超、例えば患者の生涯）の治療期間にわたって投与することができる。或いは、この方法は、ｓＡＬＰによる治療の成人又は青年への効果を評価するために、本明細書に記載のアスフォターゼアルファなどのｓＡＬＰを投与する前に血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア、ＬＥＦＳスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコアを決定することを含むことができる。
さらに、記載された測定基準（例えば、血漿ＰＰｉ濃度、血漿ＰＬＰ濃度、６分間の歩行距離、ＢＯＴ－２強度スコア、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコア、ＨＨＤスコア、ＬＥＦＳスコア並びにＢＰＩ－ＳＦスコア）の各々は、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰを有する成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）においてｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を使用した治療の有効性を評価するために単独で又は任意の組み合わせで使用することができ、試験した測定基準のある値又はスコアに対する改善を用いて、ｓＡＬＰを用いたＨＰＰ患者における治療効果を示すことができる。
成人及び青年の低ホスファターゼ症
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又は青年ＨＰＰ患者（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）にわたり、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰ、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファなど）で治療することができる。特に、アスフォターゼアルファ（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標））は、本明細書に記載のように、成人患者（例えば、治療未経験患者）の小児発症ＨＰＰを治療するために投与することができる。従って、本方法は、本明細書に記載のＨＰＰの症状のうち１つ以上又は全てを軽減するのに有用であり、特にｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年）の治療期間にわたって投与するときに有用である。特に、治療期間は、少なくとも６週間である。
例えば、本方法は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折（例えば、椎骨粉砕骨折、転子下骨折又は中足骨骨折）、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化性関節周囲炎並びに偽骨折を含むが、これらに限定されない成人ＨＰＰの症状を治療するのに有用である。この方法は、以下に限定されないが、ＰＰｉ、ＰＥＡ又はＰＬＰの上昇した血中又は尿中濃度、骨軟化症、１つ以上の骨格変形、緊張低下、筋力低下、リウマチ合併症、関節炎、偽痛風、動揺歩行、歩行困難、骨痛、痛み、歯の早期喪失、低石灰化、肺形成不全、呼吸不全、痙攣、高カルシウム尿症、低身長及び成長遅延が含まれる青年期ＨＰＰの症状を治療するのにも有用である。
ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を使用する治療の必要性又は効力を評価するために有用な例示的な測定基準には、（１）血漿ＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度、（２）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）、（３）Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙの運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）、（４）ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）、（５）下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）、及び（６）簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）が含まれ、これらは、以下でさらに詳細に説明される。
血漿無機ピロリン酸（ＰＰｉ）及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、患者の血漿又は尿サンプルなどのサンプル中のＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度を決定することにより、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療が必要と同定することができる。血漿試料或いは尿試料中のＰＰｉ及びＰＬＰ濃度を定量するために、当業者に知られている任意の方法を使用することができ、これらは、Ｗｈｙｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９５（４）：１４４０－１４４５）に詳細に記載されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。血漿又は尿サンプル中のＰＰｉ濃度を定量する方法は、Ｃｈｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９７７（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．８３：６１－６３）、Ｃｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，１９７８（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９１：５５７－５６５及びＪｏｈｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ，１９６８（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６：１３７－１４５）にも記載があり、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる。特に、血漿試料中のＰＰｉ及びＰＬＰ濃度は、患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）に対するＡＬＰ活性の評価に使用することができる。
健康な対象（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は同じ身長の健康な対象）と比較して、ＨＰＰ患者は、典型的には、ＰＰｉ及びＰＬＰの上昇した血漿中濃度、例えば約６μＭまでのＰＰｉ濃度（例えば、約３．５μＭ、約４μＭ、約４．５μＭ、約５μＭ又は約５．５μＭ）及び／又は約１３００ｎｇ／ｍｌまでのＰＬＰ濃度（例えば、約２００ｎｇ／ｍｌ、３００ｎｇ／ｍｌ、４００ｎｇ／ｍｌ、５００ｎｇ／ｍｌ、６００ｎｇ／ｍｌ、７００ｎｇ／ｍｌ、８００ｎｇ／ｍｌ、９００ｎｇ／ｍｌ、１０００ｎｇ／ｍｌ、１１００ｎｇ／ｍｌ、１２００ｎｇ／ｍｌ又は１３００ｎｇ／ｍｌの血漿中のＰＬＰ濃度）を示す。健康な成人の血漿ＰＰｉ濃度の正常下限は、約１μＭであり、正常上限は、約５．９μＭである。健康な成人の血漿ＰＬＰ濃度の正常下限は、約１０ｎｇ／ｍｌ未満であり、正常上限は、約６０ｎｇ／ｍｌである。健康な青年の血漿ＰＰｉ濃度の正常下限は、約０．７５μＭ未満であり、正常上限は、約４．７８μＭである。健康な青年の血漿ＰＬＰ濃度の正常下限は、約５．７４ｎｇ／ｍｌ未満であり、正常上限は、約６１．１５ｎｇ／ｍｌである。
血漿中のＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度が高いＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、例えばｓＡＬＰを少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたって投与することにより治療することができる。例えば、約６μＭまでのＰＰｉ濃度を有するＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、治療期間中にｓＡＬＰで治療することができる。同様に、約１３００ｎｇ／ｍｌまでのＰＬＰ濃度を有するＨＰＰ患者は、治療期間中にｓＡＬＰで治療することができる。
この方法は、患者のサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度の統計学的に有意な減少をもたらす。例えば、ｓＡＬＰでの治療は、未治療のＨＰＰ患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ対象）のサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＰＰｉ濃度と比較して患者のサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＰＰｉ濃度を約１μＭ、約１．５μＭ、約２μＭ、約２．５μＭ若しくは約３μＭ又は約２５％以上（例えば、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％若しくは６０％超）減少させる。従って、ｓＡＬＰの投与後、患者は、例えば、約２μＭ～約５μＭ、約３μＭ～約５μＭ、約２μＭ～約４μＭ又は約２μＭ～約３μＭの血漿中のＰＰｉ濃度を示す。
同様に、ｓＡＬＰによる治療は、未治療のＨＰＰ患者（例えば、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ対象）のサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＰＬＰ濃度と比較して患者のサンプル（例えば、血漿サンプル）中のＰＬＰ濃度を約１００ｎｇ／ｍｌ、１２５ｎｇ／ｍｌ、１５０ｎｇ／ｍｌ、１７５ｎｇ／ｍｌ、２００ｎｇ／ｍｌ、２２５ｎｇ／ｍｌ又は２５０ｎｇ／ｍｌ若しくは５０％以上（例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％若しくは９５％超）減少させる。従って、ｓＡＬＰの投与後、患者は、例えば、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌ、約４ｎｇ／ｍｌ～約１００ｎｇ／ｍｌ、約１０ｎｇ／ｍｌ～約７５ｎｇ／ｍｌ又は約１ｎｇ／ｍｌ～約５０ｎｇ／ｍｌの血漿中のＰＬＰ濃度を示す。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の血漿中のＰＰｉ及び／又はＰＬＰ濃度の減少は、ｓＡＬＰの投与期間を通して持続することができる。例えば、血漿中のＰＰｉ濃度は、約２５％減少し、ｓＡＬＰによる治療中、減少した血漿ＰＰｉ濃度の±１０％に留まり、且つ／又は血漿中のＰＬＰ濃度は、約５０％減少し、ｓＡＬＰによる治療中、減少した血漿ＰＬＰ濃度の±１０％に留まる。
或いは、ｓＡＬＰの投与によってもＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の血漿サンプル中のＰＰｉ濃度が約２５％以上減少しない場合、ｓＡＬＰ投与の用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）に対するｓＡＬＰ有効量を決定するために変更することができる。同様に、ｓＡＬＰの投与によっても患者の血漿サンプル中のＰＬＰ濃度が約５０％以上減少しない場合、ｓＡＬＰ投与の用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）に対するＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰの用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
６分間歩行試験（６ＭＷＴ）
ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、６ＭＷＴを使用して、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療が必要と同定することができる。特に、６ＭＷＴは、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の歩行能力を評価して、成人又は青年の６ＭＷＴ値を生成するために使用することができる。
６ＭＷＴは、平坦で直線の硬い表面を有する囲まれた廊下（例えば、長さ約３０メートルの）を使用して屋内又は屋外で実施することができる。ストップウォッチ又は他のタイマを使用して時間を追跡することができ、機械式カウンタ又は他の装置を使用して、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）が歩く距離（例えば、メートル単位で）を決定することができる。例えば、廊下の長さは、ＨＰＰ患者が歩いたメートル数を決定するために３メートル毎にマークすることができ、３０メートルの折り返し点及びスタートラインもマークする。次いで、６分間に患者が歩いた距離を、例えばほぼ同じ年齢、同性及び／又は同じ身長の未治療の対象が歩く予測メートル数と比較し、パーセンテージ値として表して、患者の６ＭＷＴ値を生成することができる。患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の６ＭＷＴ値を患者のベースラインの６ＭＷＴ値と比較することができる。さらに、ＨＰＰ罹患成人又は青年の６ＭＷＴ値を健康な患者の６ＭＷＴ値と比較することができる。
予測６ＭＷＴ値の約８０％未満の６ＭＷＴであるＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、例えばｓＡＬＰを少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたって投与することにより治療することができる。例えば、予測６ＭＷＴ値の約８０％未満の６ＭＷＴ（例えば、予測６ＭＷＴ値の約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％又は約７５％）であるＨＰＰ患者は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたって治療することができる。
この方法は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の６ＭＷＴ値の改善をもたらすことができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、患者の予測６ＭＷＴ値の約８０％以上（例えば、予測６ＭＷＴ値の約８２％、約８４％、約８６％、約８８％、約９０％、約９２％、約９４％、約９６％、約９８％又はそれを超える値）への６ＭＷＴ値の増加をもたらすことができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の６ＭＷＴ値の増加は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。例えば、６ＭＷＴ値は、患者の予測６ＭＷＴ値の約８０％を超えるまで増加し、ｓＡＬＰ（例えば、アスフォターゼアルファ）による治療中、増加した６ＭＷＴ値の±１０％のままである。
同様に、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の歩行能力の改善は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰの投与期間中に持続することができる。例えば、ＨＰＰ患者は、ｓＡＬＰによる治療中、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ又は装具などの移動支援器具への依存度が低下する。
或いは、ｓＡＬＰを投与しても予測６ＭＷＴ値（例えば、ほぼ同じ年齢、同性及び／又は身長のＨＰＰ罹患未治療対象の）の８０％を超える６ＭＷＴ値の増加をもたらさない場合、ｓＡＬＰ投与の用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のためのｓＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙの運動能力試験
第２版（ＢＯＴ－２） ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性並びにＢＯＴ－２強度試験を使用して、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療が必要と同定することができる。特に、ＢＯＴ－２速度及び機敏性並びにＢＯＴ－２強度試験は、ＨＰＰ罹患成人の身体障害及び可動域制限を評価し、成人のＢＯＴ－２速度及び機敏性の合計スコア及び／又はＢＯＴ－２強度の合計スコアを生成することができる。
ＢＯＴ－２は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の身体障害を評価するための一連の試験を含み、これは、例えば、試験を含むキットを用いて実施することができる。ＢＯＴ－２は、以下の領域における複合ＢＯＴ－２スコアを提供する：強さ、走行速度及び機敏性、微細運動の精度、微細運動の統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調。例えば、成人又は青年ＨＰＰ患者は、起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位及び／又は腕立て伏せを行って、ＢＯＴ－２強度スコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、平均台を跨ぎ、且つ／又はシャトルラン、両脚サイドホップ及び／若しくは片脚サイドホップを行って、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、円を切り取り、且つ／又は点を結んで、ＢＯＴ－２微細運動精度スコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、星をコピーし、且つ又は正方形をコピーして、ＢＯＴ－２微細運動統合スコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、ペニー貨を転写し、カードを並べ替え、且つ／又はブロックを一列に並べて、手先の器用さスコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、その足及び指でタップし、且つ／又はジャンピングジャックを行って、ＢＯＴ－２両側性協調スコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、ライン上を前方に歩き、且つ／又は平均台の上に片脚で立って、ＢＯＴ－２バランススコアを決定することができ；成人又は青年ＨＰＰ患者は、標的にボールを投げ、且つ／又はトスされたボールを捕球して、ＢＯＴ－２上肢協調スコアを決定することができる。ＢＯＴ－２スコアは、評価された各領域の加法的合計である。さらに、患者の身体的習熟度を評価するために使用されるＢＯＴ－２スコアは、生の加法的スコア又は基準スコアであり得る。
ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、記載された領域（強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調）の１つ以上の試験を行って、成人又は青年の身体的障害を示すＢＯＴ－２スコアを生成することができるであろう。各ＢＯＴ－２領域（強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調）内で、ＨＰＰ罹患成人又は青年は、１つ以上の試験を行って、成人又は青年のＢＯＴ－２スコアを決定すること、例えば成人又は青年は起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位、腕立て伏せのうち１つ以上を行ってＢＯＴ－２強度スコアを決定することができるであろう。必要に応じて、単一の試験（例えば、起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位、腕立て伏せの群から選択される１つの試験）のみを行って、ＨＰＰ罹患成人又は青年のＢＯＴ－２スコア（例えば、ＢＯＴ－２強度スコア）を決定することができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＯＴ－２スコア（強度、走行速度及び機動性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調）の各々は、ＨＰＰに罹患していない患者（例えば、約１８歳以上のＨＰＰに罹患していない成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＯＴ－２スコアと比較して例えばＢＯＴ－２スコアの標準偏差を決定することができる。ＨＰＰ罹患患者のＢＯＴ－２スコア（例えば、強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調）のそれぞれを他のＨＰＰ患者（例えば、ほぼ同じ年齢、身長及び／又は性別のＨＰＰ患者）のＢＯＴ－２スコアと比較して、例えばＨＰＰ患者のＢＯＴ－２スコアを決定することができる。
ＢＯＴ－２スコア（例えば、強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調スコア）は、約０～約２５以下の範囲であり、約１０を超えるスコアは、健康な対象（例えば、ＨＰＰに罹患していない患者）を代表すると考えられる。約１０未満のＢＯＴ－２スコア（例えば、強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調スコア）を有する患者は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたってｓＡＬＰを投与することによって治療することができる。
例えば、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアが１０未満（例えば、約０、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９又は約１０）のＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたって治療することができる。同様に、ＢＯＴ－２強度スコアが１２未満（例えば、約０、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３又は約１４）のＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、その後、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたって治療することができる。
これらの方法は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＯＴ－２スコア（例えば、強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び／又は上肢協調スコア）の改善をもたらす。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、ＢＯＴ－２強度スコアを、約１０～約２０又はそれを超える値（例えば、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４又は約２５）に増加させることができる。さらに、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアを、約９～約２０又はそれを超える値（例えば、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４又は約２５）に増加させることができる。
ＢＯＴ－２スコア（例えば、強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び／又は上肢協調スコア）の増加は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。同様に、身体障害の減少は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＯＴ－２スコア（強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調スコア）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を使用した治療の有効性を評価するために単独で又は組み合わせて使用することができ、特定の試験スコアに対する改善は、ｓＡＬＰがＨＰＰに関連する身体障害を治療するのに有効であることを示す。例えば、ｓＡＬＰをＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）に投与するとき、患者の以前のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアが約７未満であった場合、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアが約９以上に増加する場合、ｓＡＬＰは、例えば、ＨＰＰに関連する身体障害を治療するのに有効であると考えられる。或いは、治療前のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアを超える少なくとも２点以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０点）の増加は、有効性があることを示す（例えば、１年を超える治療期間に持続的な高スコアと対になる場合）。
さらに、各ＢＯＴ－２領域（強度、走行速度及び機敏性、微細運動精度、微細運動統合、手先の器用さ、両側性協調、バランス及び上肢協調）内において、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、１つ以上の試験を行って、患者のＢＯＴ－２スコアを決定することができるであろう。例えば、ＨＰＰ罹患成人又は青年は、起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位、腕立て伏せのうち１つ以上を行って、ＢＯＴ－２強度スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができるであろう。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、平均台、シャトルラン、両脚サイドホップ及び／又は片脚サイドホップのうち１つ以上を行って、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができるであろう。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、円を切り取り、且つ／又は点を結んで、ＢＯＴ－２微細運動精度スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができる。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、星をコピーし、且つ／又は正方形をコピーして、ＢＯＴ－２微細運動統合スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができる。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、ペニー貨の転写、カードの並べ替え及びブロックの一列配置のうち１つ以上を行って、ＢＯＴ－２手先の器用さスコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができるであろう。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、その足及び指でタップし、且つ／又はジャンピングジャックを行って、ＢＯＴ－２両側性協調スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができる。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、ライン上を前方に歩き、且つ／又は平均台の上に片脚で立って、ＢＯＴ－２バランススコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができる。ＨＰＰ罹患成人又は青年は、標的にボールを投げ、且つ／又はトスされたボールを捕球して、ＢＯＴ－２上肢協調スコアを決定し、ｓＡＬＰ投与の治療有効性を評価することができる。
或いは、ｓＡＬＰを投与してもＢＯＴ－２走行速度及び機敏性で約９を超えるスコアの増加（例えば、ｓＡＬＰによる治療前のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性スコアよりも少なくとも２～１０ポイント（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０ポイント）の増加）をもたらさない場合、ｓＡＬＰ投与の用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のｓＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の握力及び筋力は、ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）を用いて評価することができる。例えば、ＨＰＰ患者の膝屈曲及び伸展並びに股関節屈曲、伸展及び外転は、例えば、ＭＩＣＲＯＦＥＴ２（商標）ダイナモメータを使用して測定することができ、ＨＰＰ患者の握力は、例えば、ＪＡＭＡＲ（登録商標）握力ダイナモメータを使用して測定することができる。具体的には、管理者は、ダイナモメータを静止状態に保持し、患者は、ダイナモメータに最大の力を加える。最大力データをポンドで収集し、後にニュートン（Ｎ）に変換される。次いで、肢の長さを使用してＮ－メートルでトルク値が計算される。その後、トルク値は、例えば、ほぼ同じ年齢、同じ性別及び／又は同じ身長の健常対象のトルク値と比較され、パーセンテージ値で表して対象のＨＨＤスコアを生成することができる。
予測ＨＨＤスコアの約８０％未満のＨＨＤスコア（例えば、ほぼ同じ年齢、同じ性別及び／又は同じ身長の正常な対象と比較して）を有するＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）で治療することができる。例えば、予測ＨＨＤスコアの約８０％未満のＨＨＤを有するＨＰＰ患者は、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたってｓＡＬＰにより治療することができる。
これらの方法は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＨＨＤスコアの改善をもたらすことができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、患者の予測ＨＨＤスコアの約５％以上のＨＨＤスコアの増加（例えば、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％又は約５０％の増加）をもたらすことができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＨＨＤスコアの増加は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又はＨＰＰ患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたる、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。例えば、ＨＨＤスコアは、予測されたＨＨＤスコアの約５％以上増加し、ｓＡＬＰでの治療中、増加したＨＨＤスコアの±１０％のままである。或いは、ｓＡＬＰを投与しても、ＨＨＤスコアにおいて、予測されるＨＨＤスコア（例えば、ほぼ同じ年齢、同じ性別及び／又は身長のＨＰＰ患者の）の約５％以上の増加がもたらされない場合、ｓＡＬＰ投与の用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者のためのｓＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰの用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の下肢機能障害の減少は、下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）を用いて評価することができる。ＬＥＦＳは、ＨＰＰ患者の一方又は両方の下肢の機能障害を評価するために使用することができ、患者を経時的に監視し、アスフォターゼアルファ治療の有効性を評価する能力を含む。免許を有する理学療法士は、インタビュー形式でＨＰＰ患者（例えば、約１３歳以上のＨＰＰ患者）にＬＥＦＳを実施することができる。
ＬＥＦＳスコアが約４０未満（例えば、約１０、約１５、約２０、約２５、約３０、約３５又は約４０のＬＥＦＳスコア）のＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により治療することができる。例えば、ＬＥＦＳスコアが約４０未満（例えば、約１０、約１５、約２０、約２５、約３０、約３５又は約４０のＬＥＦＳスコア）のＨＰＰ患者は、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたってｓＡＬＰにより治療することができる。
これらの方法は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＬＥＦＳスコアの改善をもたらすことができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、ＬＥＦＳスコアの約３以上（例えば、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９又は約１０）の増加をもたらすことができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＬＥＦＳスコアの増加は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又はＨＰＰ患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたる、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。例えば、ＬＥＦＳスコアは、約３以上（例えば、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９又は約１０）増加することができ、ｓＡＬＰでの治療中、増加したＬＥＦＳスコアの±１０％のままである。或いは、ｓＡＬＰを投与しても約３以上（例えば、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９又は約１０）のＬＥＦＳスコアの増加をもたらさない場合、ｓＡＬＰの用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者のためのｓＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰの用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の痛みは、簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）を用いて評価することができる。ＢＰＩ－ＳＦは、痛みの重症度及び日常機能に対する痛みの影響を評価するために設計された質問票である。ＢＰＩ－ＳＦは、アンケート実施の２４時間前の痛みの重症度（４項目）及び痛みの干渉度（７項目）を評価するために数値評価スケールを利用する１１項目からなる。ＢＰＩ－ＳＦ質問票では、痛みの強さ及び痛みがＨＰＰ患者（例えば、約１３歳以上のＨＰＰ患者）の日常機能を妨げる程度に関する情報を０（痛みなし）～１０（疼痛又は痛みにより引き起こされる重大な干渉）の数値評価尺度で提供し、スコアが低いほど生活の質の改善及び痛みの軽減を示す。例えば、ＨＰＰ青年及び成人のＢＰＩ－ＳＦスコアは、１１の痛み評価を複合化したものである。
ＢＰＩ－ＳＦスコアが約１０を超える（例えば、約１０、約１５、約２０、約２５、約３０以上のＢＰＩ－ＳＦスコア）ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）は、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）により治療することができる。例えば、ＢＰＩ－ＳＦスコアが約１０を超える（例えば、約１０、約１５、約２０、約２５又は約３０以上のＢＰＩ－ＳＦスコア）ＨＰＰ患者は、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたってｓＡＬＰにより治療することができる。
これらの方法は、ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＰＩ－ＳＦスコアの改善をもたらすことができる。例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）による治療、例えば少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又は患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたるｓＡＬＰによる治療は、ＢＰＩ－ＳＦスコアの約２以上（例えば、約２、約３、約４、約５、約６又は約７以上）の減少をもたらすことができる。
ＨＰＰ患者（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）のＢＰＩ－ＳＦスコアの減少は、例えば、少なくとも２週間（例えば、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年又はＨＰＰ患者の生涯、特に少なくとも６週間）の治療期間にわたる、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の投与期間中に持続することができる。例えば、ＢＰＩ－ＳＦスコアは、約－２以上（例えば、約－２、約－３、約－４、約－５、約－６又は約－７以上）減少し、ｓＡＬＰによる治療中、減少したＢＰＩ－ＳＦスコアの±１０％に留まる。
或いは、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を投与しても約－２以上（例えば、約－２、約－３、約－４、約－５、約－６又は約－７以上）のＢＰＩ－ＳＦスコアの減少をもたらさない場合、ｓＡＬＰの用量及び／又は頻度は、ＨＰＰ患者のためのｓＡＬＰの有効量を決定するために変更することができる。例えば、ｓＡＬＰの用量は、例えば、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週又は約３．５ｍｇ／ｋｇ／週から約６ｍｇ／ｋｇ／週又は約９ｍｇ／ｋｇ／週に増加させることができる。
アルカリホスファターゼ
アスフォターゼアルファは、ＨＰＰの治療のために製剤化されたヒトＴＮＡＬＰ（ｈＴＮＡＬＰ；配列番号１）融合ポリペプチドである。特に、アスフォターゼアルファ（配列番号１）は、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人又は約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）、その症状及びそれに関連する身体的障害を長期間（例えば、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、少なくとも１０年又は１０年を超える期間、例えば患者の生涯）にわたって治療するために効果的に使用することができる。
本明細書に記載の結果を考慮すると、治療方法は、特定のアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）又はＡＬＰをコードする核酸配列の投与に限定されない。アルカリホスファターゼは、リン酸塩部分の切断（例えば、ピロリン酸塩ＰＰｉの加水分解）を触媒する酵素の群を包含する。４つの公知の哺乳動物アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）のアイソザイムが存在する：組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＡＬＰ；以下にさらに詳細に記載される）、胎盤アルカリホスファターゼ（ＰＬＡＬＰ）（例えば、アクセッション番号Ｐ０５１８７、ＮＰ＿１１２６０３及びＮＰ＿００１６２３）、生殖細胞アルカリホスファターゼ（ＧＡＬＰ）（例えば、アクセッション番号Ｐ１０６９６）及び腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＬＰ）（例えば、アクセッション番号Ｐ０９９２３及びＮＰ＿００１６２２）。上述の例示的なＡＬＰに加えて、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰを罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者を治療するために、ＡＬＰと同一又は類似の触媒部位構造及び／又は酵素活性を有する任意のポリペプチドを使用することができる（例えば、本明細書で定義されるｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチドとして）。ｓＡＬＰを含む骨送達複合体は、国際公開第２００５／１０３２６３号パンフレット及び国際公開第２００８／１３８１３１号パンフレットにさらに詳細に説明されている。
本明細書に記載の方法に従って使用することができるＴＮＡＬＰは、例えば、ヒトＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＮＰ＿０００４６９、ＡＡＩ１０９１０、ＡＡＨ９０８６１、ＡＡＨ６６１１６、ＡＡＨ２１２８９及びＡＡＩ２６１６６；アカゲザルＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＸＰ＿０１１０９７１７）；ラットＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＮＰ＿０３７１９１）；イヌＴＮＡＬＰ（アクセッシ番号ＡＡＦ６４５１６）；ブタＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＡＡＮ６４２７３、マウス（アクセッション番号ＮＰ＿０３１４５７、ウシＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＮＰ＿７８９８２８、ＮＰ＿７７６４１２、ＡＡＭ８２０９及びＡＡＣ３３８５８並びにネコＴＮＡＬＰ（アクセッション番号ＮＰ＿００１０３６０２８）を含む。特に、ＴＮＡＬＰは、ＨＰＰ罹患成人など（例えば、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人、例えば小児発症ＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）の、ＨＰＰ患者の治療に使用されるヒトＴＮＡＬＰであり得る（例えば、配列番号１、アスフォターゼアルファ；参照により全体が本明細書に組み込まれる米国特許第７，７６３，７１２号明細書及び同第７，９６０，５２９号明細書を参照されたい）。ＴＮＡＬＰは、上記ＴＮＡＬＰのポリペプチド又は核酸配列に対して少なくとも約９５％の配列同一性を示すものでもあり得る。
可溶性アルカリホスファターゼ
本明細書に記載の方法で使用することができるＡＬＰは、本明細書に記載の可溶性（例えば、細胞外又は非膜結合）形態の任意のアルカリホスファターゼを含む。ｓＡＬＰは、例えば、ヒト組織非特異的アルカリホスファターゼ（ヒトＴＮＡＬＰ（ｈＴＮＡＬＰ））の可溶性形態であり得る。この方法は、特定のｓＡＬＰに限定されず、例えばホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）に対して生理学的に活性である任意のｓＡＬＰを含むことができる。特に、ｓＡＬＰは、骨における骨格石灰化を改善するのに触媒として適格なものである。本方法は、本明細書に記載されるｓＡＬＰをコードする核酸をさらに含み、これは、本明細書に記載の状態、例えばＨＰＰ、例えばＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰを有する青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）を治療するために使用することができる。
ＴＮＡＬＰは、Ｃ末端の糖脂質部分によって固定された膜結合タンパク質である（Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ、Ｐ０５１８６）。この糖脂質アンカー（ＧＰＩ）は、翻訳後、疎水性Ｃ末端の除去後に加えられ、一時的な膜アンカーとして及びＧＰＩ添加のシグナルとしての両方の役割を果たす。ＧＰＩアンカーは、細胞膜に位置するが、ＴＮＡＬＰの残りの部分は、細胞外にある。特に、ＴＮＡＬＰ（例えば、ヒトＴＮＡＬＰ（ｈＴＮＡＬＰ））は、疎水性Ｃ末端配列（アラニン）の最初のアミノ酸を終止コドンで置換するように操作することができ、それにより、ＴＮＡＬＰの天然の固定形態の全てのアミノ酸残基を含有し、ＧＰＩ膜アンカーを欠く操作されたｈＴＮＡＬＰを産生する。当業者は、ＧＰＩ膜アンカーの位置が、ＡＬＰが異なれば変化し、例えばポリペプチドのＣ末端上の最後の１０、１２、１４、１６、１８、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４５、５０又はそれより多くのアミノ酸残基を含むことができることを理解する。組換えｓＴＮＡＬＰは、例えば、アミノ酸１～５０２（分泌の場合には１８～５０２）、アミノ酸１～５０１（分泌の場合には１８～５０１）、アミノ酸１～５０４（分泌の場合には１８～５０４）、アミノ酸１～５０５（分泌の場合には１８～５０５）又はアミノ酸１～５０２を含むことができる。従って、天然ＡＬＰのＣ末端は、ＡＬＰ活性に影響を及ぼすことなく、特定のアミノ酸によって切断することができる。
Ｃ末端ＧＰＩアンカーに加えて、ＴＮＡＬＰは、Ｎ末端シグナルペプチド配列も有する。Ｎ末端シグナルペプチドは、合成されると、合成されたタンパク質上に存在するが、ＥＲへの転座後にＴＮＡＬＰから切断される。ｓＡＬＰは、分泌型（すなわちＮ末端シグナルを欠く）及び非分泌型（すなわちＮ末端シグナルを有する）の両方を含む。当業者は、Ｎ末端シグナルペプチドの位置が、アルカリホスファターゼが異なれば変化し、例えばポリペプチドのＮ末端上の最初の５、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２７、３０又はそれより多くのアミノ酸残基を含むことができることを理解する。当業者は、例えば、Ｂｅｎｄｔｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（４）：７８３－７９５，２００４）で記述され、ウェブ上ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＳｉｇｎａｌＰ／で入手可能なものなど、適切なコンピューターアルゴリズムにより、シグナル配列切断部位の位置を予測することができる。
これらの方法は、ＡＬＰアイソザイム（例えば、ＴＮＡＬＰ、ＰＡＬＰ、ＧＣＡＬＰ、ＩＡＬＰなど）の細胞外ドメインに由来するｓＡＬＰコンセンサス配列を使用して実施することもできる。従って、上記ｓＴＮＡＬＰと同様に、本開示は、好ましくは、ＡＬＰの細胞外ドメインを含む、他の可溶性ヒトＡＬＰアイソザイム、すなわちペプチドシグナルを有さないものも提供する。ｓＡＬＰは、ヒトＡＬＰアイソザイムのＡＬＰ細胞外ドメイン及び哺乳動物ＴＮＡＬＰオーソログ（ヒト、マウス、ラット、ウシ、ネコ及びイヌ）由来のコンセンサス配列又は哺乳動物ＴＮＡＬＰオーソログ（ヒト、マウス、ラット、ウシ、ネコ及びイヌ）のみのＡＬＰ細胞外ドメイン由来のコンセンサスを満たすポリペプチド配列も含む。ｓＡＬＰは、これらのＴＮＡＬＰオーソログ又はヒトＡＬＰアイソザイムの種々の組み合わせにも由来する、類似のコンセンサス配列を満たすものも含む。そのようなコンセンサス配列は、例えば、国際公開第２００８／１３８１３１号パンフレットで与えられている。
本方法のｓＡＬＰは、上記ｓＡＬＰの野生型配列だけでなく、これらのアルカリホスファターゼ（例えば、配列番号１～２４；例えば、配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）に対して少なくとも５０％（例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれを超える）の配列同一性を有する任意のポリペプチドを含むことができる。ＡＬＰ配列に導入することができる変異の例は、米国特許出願公開第２０１３／０３２３２４４号明細書に記載があり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ｓＡＬＰは、任意選択により、任意の適切な１つ又は複数のアミノ酸残基の位置でグリコシル化することができる。さらに、ｓＡＬＰは、本明細書に記載の任意のｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）に対して少なくとも５０％（例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれを超える）の配列同一性を有することができる。ｓＡＬＰは、本明細書に記載の任意のｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）に対して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個又はそれより多くの付加、欠失又は置換を有することができる。
ｓＡＬＰ融合ポリペプチド
本明細書に記載の任意のｓＡＬＰ及びリンカーは、結合してｓＡＬＰポリペプチド、例えばＡ－ｓＡＬＰ－ＢのｓＡＬＰポリペプチドになることができる（但し、Ａ及びＢの各々は、存在しないか、又は少なくとも１つのアミノ酸のアミノ酸配列（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）である）。存在する場合、Ａ及び／又はＢは、本明細書中に記載の任意のリンカーであり得る。いくつかのｓＡＬＰポリペプチドでは、Ａが存在しないか、Ｂが存在しないか、又はＡ及びＢの両方とも存在しない。本発明のｓＡＬＰポリペプチドは、本明細書に記載のように、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドを提供するために任意選択によりＦｃ領域を含むことができる。ｓＡＬＰポリペプチドは、本明細書に記載のように、任意選択により骨標的化部分を含むことができる。いくつかのｓＡＬＰポリペプチドでは、リンカー、例えば可撓性リンカーを骨標的化部分とｓＡＬＰ、例えばジペプチド配列（例えば、ロイシン－リジン又はアスパラギン酸－イソロイシン）との間に含めることができる。さらなる例示的なＦｃ領域、リンカー及び骨標的化部分を以下に記載する。
本明細書に記載の任意のｓＡＬＰ、リンカー及びＦｃ領域は、結合させて、構造Ｚ－ｓＡＬＰ－Ｙ－スペーサー－Ｘ－Ｗｎ－Ｖ、Ｚ－Ｗｎ－Ｘ－スペーサー－Ｙ－ｓＡＬＰ－Ｖ，Ｚ－ｓＡＬＰ－Ｙ－Ｗｎ－Ｘ－スペーサー－Ｖ及びＺ－Ｗｎ－Ｘ－ｓＡＬＰ－Ｙ－スペーサー－Ｖ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む融合ポリペプチド、例えば組換え融合ポリペプチドとすることができる。特に、構造は、Ｚ－ｓＡＬＰ－Ｙ－スペーサー－Ｘ－Ｗｎ－Ｖ又はＺ－Ｗｎ－Ｘ－スペーサー－Ｙ－ｓＡＬＰ－Ｖであり得る。ｓＡＬＰは、ＡＬＰの完全長であるか、又は本明細書に記載（例えば、ＴＮＡＬＰ、ＰＡＬＰ、ＧＣＡＬＰ及びＩＡＬＰ）のように、ＡＬＰの可溶性細胞外ドメインのような機能的断片であり得る。Ｘ、Ｙ、Ｚ若しくはＶのいずれか１つ及び／又はスペーサーは、存在しないか、又は少なくとも１つのアミノ酸のアミノ酸配列であり得る。Ｗｎは、例えば、一連の連続したＡｓｐ又はＧｌｕ残基を有する骨標的化部分であり得る（但し、ｎ＝１～５０、例えばｎ＝３～３０、例えば５～１５、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３６、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９又は５０である）。骨標的部分は、存在する場合、融合ポリペプチド中の任意の位置、例えばＮ末端又はＣ末端若しくはその近く及び／又はリンカー領域に位置することができる。例えば、骨標的化部分は、Ｃ末端にある。ｓＡＬＰポリペプチド及び融合ポリペプチドも骨標的化部分を含まなくてよい。
本発明のｓＡＬＰ融合ポリペプチドは、ｈＴＮＡＬＰ－Ｆｃ－Ｄ１０の構造のものであり得る。特に、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸配列又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファを含むことができる。
有用なスペーサーには、Ｆｃを含むポリペプチド及び末端が強く負に荷電したペプチドの存在によって引き起こされる反発力を緩和することができる親水性且つ可撓性のポリペプチド（例えば、Ｗｎ）が含まれるが、これらに限定されない。例えば、ｓＡＬＰは、Ｎ末端又はＣ末端ドメインに免疫グロブリンのＦｃ領域を含む融合ポリペプチドであり得る。免疫グロブリン分子は、当該技術分野でよく知られた構造を有する。それは、２本の軽鎖（それぞれ約２３ｋＤ）と２本の重鎖（それぞれ約５０～７０ｋＤ）とが鎖間のジスルフィド結合でつながっている。免疫グロブリンは、タンパク質分解により（例えば、パパイン切断によって）容易にＦａｂ（軽鎖並びに重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインを含む）及びＦｃ（隣接配列と共に重鎖のＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む）に切断される。本明細書に記載の有用なＦｃ断片は、任意の哺乳動物（例えば、ヒト）由来の、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ又はＩｇＥ及びそれらの種々のサブクラス（例えば、ＩｇＧ－１、ＩｇＧ－２、ＩｇＧ－３、ＩｇＧ－４、ＩｇＡ－１、ＩｇＡ－２）を含む任意の免疫グロブリン分子のＦｃ断片を含む。例えば、Ｆｃ断片は、ヒトＩｇＧ－１である。本発明のＦｃ断片は、例えば、重鎖のＣＨ２及びＣＨ３ドメイン並びにヒンジ領域の任意の部分を含むことができる。Ｆｃ領域は、任意選択により、当業者に知られている任意の適切な１つ以上のアミノ酸残基の位置でグリコシル化することができる。特に、融合ポリペプチドのＦｃ断片は、配列番号２０のアミノ酸配列を有するか、又は配列番号２０に対して少なくとも５０％の（例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の又はそれを超える）配列同一性を有する。操作された、例えば天然に存在しないＦｃ領域は、例えば、国際公開第２００５／００７８０９号パンフレット（これは、参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているようにして、本発明の方法で使用することができる。本明細書に記載のＦｃ断片は、本明細書に記載の任意のＦｃ断片と比較して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、５０個又はそれより多くの付加、欠失又は置換を有することができる。
本明細書に記載のｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、Ｆｃ断片間にペプチドリンカー領域を含むことができる。さらに、ペプチドリンカー領域は、Ｆｃ断片と任意選択の骨標的化部分との間に含まれ得る。リンカー領域は、ｓＡＬＰが生物学的活性を維持する、例えば立体障害により妨害されないことを可能にする任意の配列及び長さであり得る。例示的なリンカー長は、１～２００のアミノ酸残基、例えば１～５、６～１０、１１～１５、１６～２０、２１～２５、２６～３０、３１～３５、３６～４０、４１～４５、４６～５０、５１～５５、５６～６０、６１～６５、６６～７０、７１～７５、７６～８０、８１～８５、８６～９０、９１～９５、９６～１００、１０１～１１０、１１１～１２０、１２１～１３０、１３１～１４０、１４１～１５０、１５１～１６０、１６１～１７０、１７１～１８０、１８１～１９０又は１９１～２００のアミノ酸残基である。例えば、リンカーは可撓性部分、例えば意味のある固定された二次又は三次構造を有さない領域を含むか又はそれからなる。例示的な可撓性リンカーは、例えば、少なくとも５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はさらには１００％のグリシン残基を含有する、グリシンに富むリンカーである。リンカーは、例えば、セリン残基を含むこともできる。いくつかの場合、リンカーのアミノ酸配列は、グリシンとセリン残基のみからなる。リンカーは、任意選択により、任意の適切な１つ以上のアミノ酸残基の位置でグリコシル化することができる。さらに、本明細書に記載のリンカーは、共有結合又は非共有結合で結合した任意の他の配列又は部分を含むことができる。リンカーも存在しなくてよく、その場合、Ｆｃ断片及びｓＡＬＰは、介在する残基を伴わずに直接融合される。特定のＦｃ－ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ－Ｆｃ融合ポリペプチドは、本開示に従って、１）リンカーを有さないか、又は２）ｓＡＬＰの一部に対応するリンカーを有するかのいずれかであると見なすことができる。例えば、ｈｓＴＮＡＬＰ（１～５０２）に直接融合したＦｃは、例えば、ｈｓＴＮＡＬＰがアミノ酸１～５０２であり、リンカーを有さないものとして、又はｈｓＴＮＡＬＰ（１８～５０２）であり、１７－アミノ酸リンカーを有するものと見なすことができる。
融合ポリペプチドを産生するために使用されるクローニング戦略に従ってポリペプチドにさらなるアミノ酸残基を導入することができる。例えば、追加のアミノ酸残基は、ポリペプチドを可溶性形態に維持するために、追加のＧＰＩアンカーシグナルを提供しない。さらに、任意のこのような追加のアミノ酸残基は、本発明のポリペプチドに組み込まれる場合、宿主細胞のエンドプロテアーゼのための切断部位を提供しない。設計された配列が宿主細胞のエンドプロテアーゼによって切断される可能性は、例えば、Ｉｋｅｚａｗａ（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２５：４０９－４１７，２００２）に記載のようにして予測することができる。
本発明のｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、二量体又は四量体に会合することができる。例えば、２つのｓＡＬＰ－Ｆｃモノマーは、Ｆｃ断片のヒンジ領域に位置する２つのジスルフィド結合を介して共有結合により連結することができる。さらに、本発明のポリペプチド又は融合ポリペプチド（例えば、ｓＡＬＰポリペプチド又は融合ポリペプチド）は、グリコシル化又はＰＥＧ化することができる。
核酸及びポリペプチドの製造
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）をコードする核酸は、当該技術分野で知られている任意の方法によって産生することができる。典型的には、所望の融合ポリペプチドをコードする核酸は、分子クローニング法を用いて生成され、一般にプラスミド又はウイルスなどのベクター内に配置される。ベクターは、融合ポリペプチドの発現に適切な宿主細胞に核酸を導入するために使用される。代表的な方法は、例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，１９８９）で開示されている。多くの細胞型を適切な宿主細胞として使用することができるが、哺乳動物細胞が適切な翻訳後修飾を加えることができるために好ましい。宿主細胞は、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、Ｌ細胞、Ｃ１２７細胞、３Ｔ３細胞、ＢＨＫ細胞、ＣＯＳ－７細胞又は当該技術分野で知られている任意の他の適切な宿主細胞を含むことができる。例えば、宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（例えば、ＣＨＯ－ＤＧ４４細胞）である。
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、宿主細胞でのｓＡＬＰポリペプチドの発現をもたらすのに適した任意の条件下で産生することができる。このような条件には、緩衝液、重炭酸塩及び／又はＨＥＰＥＳ、イオン（塩化物、リン酸塩、カルシウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、鉄のような）、単糖類のような炭素源、アミノ酸、潜在的脂質、ヌクレオチド、ビタミン及びインスリンのような成長因子などの成分；２～４ｍＭのＬ－グルタミン及び５％のウシ胎児血清を補充した、アルファ－ＭＥＭ、ＤＭＥＭ、Ｈａｍ’ｓ－Ｆ１２及びＩＭＤＭのような通常の市販培地；２～４ｍＭのＬ－グルタミンを補充した、Ｈｙｃｌｏｎｅ（商標）ＳＦＭ４ＣＨＯ、Ｓｉｇｍａ ＣＨＯ ＤＨＦＲ－、Ｃａｍｂｒｅｘ ＰＯＷＥＲ（商標）ＣＨＯ ＣＤのような動物性タンパク質を含まない通常の市販培地で調製した培地の適切な選択が含まれる。これらの培地は、望ましくは、選択圧を維持するためにチミジン、ヒポキサンチン及びＬ－グリシンなしで調製され、安定なタンパク質産物発現を可能にする。
医薬組成物及び製剤
本明細書に記載の方法で使用することができる組成物（例えば、ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む）は、当該技術分野で知られている種々の方法により投与することができる。当業者であれば、投与の経路及び／又は様式が所望の結果に依存して変化することを理解するであろう。投与経路は、環境及び治療目標などの様々な要因に依存することができる。特に、本明細書に記載のポリペプチド及び融合ポリペプチドは、当該技術分野で知られている任意の経路、例えば皮下（例えば、皮下注射によって）、静脈内、経口、経鼻、筋肉内、舌下、髄腔内又は皮内による投与であり得る。例を挙げれば、本明細書に記載の方法で使用することができる医薬組成物は、液体、溶液、懸濁液、ピル、カプセル、錠剤、ゲルキャップ、粉末、ゲル、軟膏、クリーム、噴霧剤、ミスト、霧化蒸気、エアロゾル又はフィトソームの形態であり得る。
用量
任意の量の医薬組成物（例えば、ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む）をＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）に投与することができる。用量は、投与の様式及び患者の年齢を含む多くの因子に依存するであろう。例えば、本明細書に記載のｓＡＬＰポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、ＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者に例えば０．０１ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ－患者（例えば、０．０５ｍｇ／ｋｇから５００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ若しくは２．０ｍｇ／ｋｇ～３．０ｍｇ／ｋｇ）又は１μｇ／ｋｇ～１，０００μｇ／ｋｇ（例えば、５μｇ／ｋｇ～１，０００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～７５０μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ～７５０μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ～７５０μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～５００μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ～５００μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ～５００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～１００μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ～１００μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ～１００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～５０μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ～５０μｇ／ｋｇ若しくは１０μｇ／ｋｇ～５０μｇ／ｋｇ－患者）の範囲の個々の用量で投与することができる。
ｓＡＬＰの例示的な用量には、例えば、０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、２、２．５、５、１０、２０、２５、５０、１００、１２５、１５０、２００、２５０又は５００ｍｇ／ｋｇ；又は１、２、２．５、５、１０、２０、２５、５０、１００、１２５、１５０、２００、２５０、５００、７５０、９００又は１，０００μｇ／ｋｇが含まれる。特に、本開示による組成物（例えば、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む）は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／日の範囲の用量で患者に投与することができる。例えば、ｓＡＬＰ組成物（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、例えば、約０．５ｍｇ／ｋｇ／週～約１４０ｍｇ／ｋｇ／週、例えば約０．８ｍｇ／ｋｇ／週～約５０ｍｇ／ｋｇ／週又は約１ｍｇ／ｋｇ／週～約１０ｍｇ／ｋｇ／週（例えば、約６又は約９ｍｇ／ｋｇ／週）の範囲の週間用量で患者に投与することができる。特に、ｓＡＬＰ（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、２ｍｇ／ｋｇの用量で週３回（合計用量６ｍｇ／ｋｇ／週）、１ｍｇ／ｋｇの週６回（合計用量６ｍｇ／ｋｇ／週）、３ｍｇ／ｋｇで週３回（合計用量９ｍｇ／ｋｇ／週）、０．５ｍｇ／ｋｇで週３回（合計用量１．５ｍｇ／ｋｇ／週）又は９．３ｍｇ／ｋｇで週３回（合計用量２８ｍｇ／ｋｇ／週）で投与することができる。投薬量は、疾患の程度及びＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者からの異なるパラメータなどの従来の因子に従い、臨床医によって適合される。
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む組成物の用量は、単回又は複数回投薬計画のいずれかで提供することができる。投薬は、例えば、毎時間、２時間毎、毎日、２日毎、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、毎週、隔週、毎月、隔月又は毎年投与することができる。或いは、投薬は、例えば、１日に２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回又は１２回投与することができる。特に、投与計画は、週に１回である。投薬計画の期間は、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９若しくは３０日間、１週間若しくは数週間又は１か月若しくは数ヶ月或いはＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者の残りの寿命であり得る。投薬の量、頻度及び継続期間は、疾患の程度及びＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者からの異なるパラメータなどの従来の因子に従い、臨床医によって適合される。
例えば、ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、注射のための透明で無色乃至僅かに黄色がかったｐＨ７．４の水溶液である溶液として製剤化することができる。ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、１２ｍｇ／０．３ｍＬ、１８ｍｇ／０．４５ｍＬ、２８ｍｇ／０．７ｍＬ、４０ｍｇ／１ｍＬ又は８０ｍｇ／０．８ｍＬの濃度で製剤化し得る。特に、組成物は、４０ｍｇ／ｍｌの注射用溶液として製剤化することができ、各ｍｌの溶液は、４０ｍｇのｓＡＬＰ又はｓＡＬＰポリペプチドを含有する（例えば、各バイアルは、０．３ｍｌの溶液、従って１２ｍｇのｓＡＬＰ（４０ｍｇ／ｍｌ）を含有し、各バイアルは、０．４５ｍｌの溶液、従って１８ｍｇのｓＡＬＰ（４０ｍｇ／ｍｌ）を含有し、各バイアルは、０．７ｍｌの溶液、従って２８ｍｇのｓＡＬＰ（４０ｍｇ／ｍｌ）を含有するか、又は各バイアルは、１．０ｍｌの溶液、従って４０ｍｇのアスフォターゼアルファ（４０ｍｇ／ｍｌ）を含有する）。ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、１００ｍｇ／ｍｌの濃度で注射用溶液として製剤化することができ、この場合、各１ｍｌの溶液は、１００ｍｇのｓＡＬＰ又はｓＡＬＰポリペプチドを含む（例えば、各バイアルは、０．８ｍｌの溶液、従って８０ｍｇのアスフォターゼアルファ（１００ｍｇ／ｍｌ）を含む）。患者に注入されるｓＡＬＰの体積は、例えば、０．１５ｍｌ、０．１８ｍｌ、０．２０ｍｌ、０．２３ｍｌ、０．２５ｍｌ、０．２８ｍｌ、０．３０ｍｌ、０．３３ｍｌ、０．３５ｍｌ、０．３８ｍｌ、０．４０ｍｌ、０．４３ｍｌ、０．４５ｍｌ、０．４８ｍｌ、０．５０ｍｌ、０．６３ｍｌ、０．７５ｍｌ、０．８８ｍｌ又は１．００ｍｌであり得る。
例えば、ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）の推奨用量は、週に３回皮下投与される２ｍｇ／ｋｇ－体重であるか、又は週に６回皮下投与される１ｍｇ／ｋｇ－体重の投与計画である。追加の用量情報を以下に提供する（表１）。特に、６ｍｇ／ｋｇ／週の用量を投与された４０ｋｇの患者は、週に３回、０．８ｍｌ中の８０ｍｇのｓＡＬＰ又は週に６回、１．００ｍｌ中の４０ｍｇのｓＡＬＰの注射を受け、６ｍｇ／ｋｇ／週の用量を投与された５０ｋｇの患者は、週に６回０．０５ｍｌ中の５０ｍｇのｓＡＬＰの注射を受けることになるであろう。
Figure 2023085277000002
製剤
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む組成物は、標準的な方法に従って製剤化することができる。医薬製剤は、十分に確立された技術であり、例えばＧｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２）；Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（ＩＳＢＮ：０６８３３０５７２７）；及びＫｉｂｂｅ（２０００）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（ＩＳＢＮ：０９１７３３０９６Ｘ）に詳細な記述がある。例えば、ｓＡＬＰ組成物（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を、例えば適切な濃度の、２～８℃（例えば、４℃）での保存に適した緩衝溶液として製剤化することができる。組成物は、０℃未満の温度（例えば、－２０℃又は－８０℃）で保存するために製剤化することもできる。組成物は、さらに２～８℃（例えば、４℃）で２年まで（例えば、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１年、１年半又は２年）の貯蔵のために製剤化することができる。従って、本明細書に記載の組成物は、２～８℃（例えば、４℃）で少なくとも１年間安定に貯蔵することができる。
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む組成物は、様々な形態をとることができる。これらの形態には、液体溶液（例えば、注射可能及び注入可能な溶液）、分散液又は懸濁液、錠剤、丸剤、散剤、リポソーム及び坐剤など、例えば液体、半固体及び固体の投薬形態が含まれる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療への適用に部分的に依存する。
例えば、全身又は局所送達を意図した組成物は、注射可能又は注入可能な溶液の形態とすることができる。従って、組成物（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）は、非経口様式（例えば、皮下、静脈内、腹腔内又は筋肉内注射）による投与のために製剤化することができる。
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む組成物は、高濃度での安定な保存に適した溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソーム又は他のオーダーされた構造体として製剤化することができる。無菌注射用溶液は、必要量の本明細書に記載の組成物を、必要に応じて上に列挙した成分の１つ又は組み合わせと共に適切な溶媒中に組み込み、その後、フィルター滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、本明細書に記載の組成物を、基本分散媒及び上に列挙したものからの必要な他の成分を含有する無菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。無菌注射溶液を調製するための無菌粉末の場合、調製の方法には、本明細書中に記載される組成物の粉末に加えて、あらかじめ無菌濾過された、任意の追加の所望成分の溶液からその所望成分（以下を参照されたい）を得る真空乾燥及び凍結乾燥が含まれる。溶液の適正な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用により、分散液の場合に必要な粒径を維持することにより、且つ界面活性剤を用いることにより維持することができる。注射可能な組成物の持続的吸収は、吸収を遅らせる試薬、例えばモノステアレート塩及びゼラチンを組成物中に含めることによってもたらすことができる。
本明細書に記載の組成物は、免疫リポソーム組成物中に製剤化することもできる。このような製剤は、例えば、Ｅｐｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８２：３６８８；Ｈｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９８０）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ７７：４０３０；及び米国特許第４，４８５，０４５号明細書及び同第４，５４４，５４５号明細書に記載されている方法など、当該技術分野で知られている方法によって調製することができる。延長された循環時間を有するリポソームは、例えば、米国特許第５，０１３，５５６号明細書に開示されている。
ｓＡＬＰ及びｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む組成物は、組成物（例えば、ｓＡＬＰポリペプチド又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド）を急速放出から保護する担体、例えばインプラント及びマイクロカプセル化送達系を含む制御放出製剤などと共に製剤化することもできる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル及びポリ乳酸など、生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。こうした製剤を調製する多くの方法が当該技術分野で公知である。例えば、ｅ．ｇ．，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（１９７８）Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい。
組成物が第２の活性薬剤と併用される場合、組成物は、第２の薬剤と共に製剤化することができか、又は組成物は、第２の薬剤製剤とは別に製剤化することができる。例えば、それぞれの医薬組成物は、例えば、投与の直前に混合することができ、且つ一緒に投与されるか、又は別々に、例えば同じ時点又は異なる時点で投与することができる。
担体／ビヒクル
ｓＡＬＰ又はｓＡＬＰ融合ポリペプチド（ＴＮＡＬＰなど、例えば配列番号１のｓＡＬＰポリペプチド又は配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、例えばアスフォターゼアルファ）を含む調製物は、薬学的に許容される無菌の水性又は非水性溶媒、懸濁液又はエマルションと組み合わせてＨＰＰ罹患成人（例えば、小児発症ＨＰＰ罹患成人など、約１８歳以上のＨＰＰ罹患成人）又はＨＰＰ罹患青年（例えば、約１３歳～約１７歳のＨＰＰ罹患青年）などのＨＰＰ患者に提供することができる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、魚油及び注射可能な有機エステルである。水性担体としては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルブドウ糖溶液、ブドウ糖＋塩化ナトリウム溶液、ラクトースを含むリンゲル溶液又は固定油を含む、生理食塩水及び緩衝された医療用非経口ビヒクルを含む水、水－アルコール溶液、エマルジョン又は懸濁液が挙げられる。例えば、薬学的に受容可能な担体は、塩化ナトリウム及び／又はリン酸ナトリウムを含むことができ、その場合、組成物は、例えば、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び／又は約２５ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ７．４）を含む。
静脈内ビヒクルは、リンゲルブドウ糖などに基づくものなど、流体及び栄養補充剤、電解質補充剤などを含むことができる。薬学的に許容される塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩などの無機酸塩；及び酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩などの有機酸の塩をその中に含めることができる。さらに、湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝物質などの補助物質がこうしたビヒクル中に存在し得る。薬学的に許容される担体の完全な議論は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｎ．Ｊ．１９９１）で参照することができる。
以下の実施例は、本開示を限定するのではなく、例示することを意図している。これらの試験は、約１８歳以上の小児発症ＨＰＰ罹患成人又はＨＰＰ罹患青年などのＨＰＰ罹患成人への長期間にわたるアスフォターゼアルファ（配列番号１）の投与、アスフォターゼアルファの投与後のこれらの患者のＨＰＰ症状及びそれに関連する身体障害の分析を特徴とする。
実施例１．アスフォターゼアルファによる小児発症低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者の治療
約１２歳～約６６歳の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）罹患青年及び成人が、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）（アスフォターゼアルファ；配列番号１）による治療の有効性、安全性及び忍容性を決定するための試験に参加した。約１８歳～約６６歳の小児発症低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）の成人１２人の部分母集団解析を行い、アスフォターゼアルファによる治療による生化学的及び機能的改善を調べた。６ヶ月の初期のフェーズの試験中、９人のＨＰＰ罹患成人がアスフォターゼアルファによる治療を受け（治療群）、３人のＨＰＰ罹患成人がアスフォターゼアルファによる治療を受けなかった（対照群）。対照群のＨＰＰ症状の発症年齢中央値は、３歳であり、最低は、０．８歳であり、最高は、４歳であり、治療群のＨＰＰ症状の発症年齢中央値は、２歳であり、最低は、０．１歳であり、最高は、４歳であった（表２、投薬治療群（２．１ｍｇ／ｋｇ／週及び３．５ｍｇ／ｋｇ／週）は、全ての結果で統合した）。データは、特に断らない限り、中央値（最低、最高）として表す。対照成人の合計２人は、女性（６７％）であり、治療成人の７人は、女性（７８％）であった。
Figure 2023085277000003
アスフォターゼアルファによる治療のために選択されたＨＰＰ患者は、年齢調整された正常範囲より低い血清ＡＬＰ、正常上限の少なくとも２倍の血漿ピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度並びに骨格Ｘ線写真及び／又は骨生検で骨欠乏症又は骨軟化症の証拠を有した。正常範囲未満の血清カルシウム又はリン酸濃度、２０ｎｇ／ｍＬ未満の血清ビタミンＤ濃度、正常の上限を超える血清クレアチニン若しくは副甲状腺ホルモン濃度の場合又は試験プロトコールへの患者のコンプライアンスを相当に妨害し得る医学的状態若しくは他の厳しい状況では、患者は、試験から除外された。
アスフォターゼアルファによる６ヵ月の治療の初期フェーズにおいて、４人の成人は、０．３ｍｇ／ｋｇ／日（２．１ｍｇ／ｋｇ／週）の用量でアスフォターゼアルファを投与され、５人の成人は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日（３．５ｍｇ／ｋｇ／週）の用量でアスフォターゼアルファを皮下投与された。最初の対照群の３人の患者は、アスフォターゼアルファ治療を受けなかった。初期フェーズの試験に続いて、治療群及び対照群の両方の患者（合計１２人の患者）がアスフォターゼアルファによる治療を受けた。アスフォターゼアルファは、０．５ｍｇ／ｋｇ／日（３．５ｍｇ／ｋｇ／週）の初期用量で皮下投与されたが、これは、１年後に６日間にわたる１日１回の皮下投与で１ｍｇ／ｋｇ／日（６ｍｇ／ｋｇ／週）に増加された。アスフォターゼアルファの投与量は、延長フェーズの残りの期間、６ｍｇ／ｋｇ／週に維持された。
アスフォターゼアルファによるＨＰＰ小児発症成人の治療を評価するために延長フェーズで用いた測定基準には、１）ＡＬＰ活性を評価するための患者の血漿試料中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の変化、２）歩行能力を評価するための６分間歩行試験（６ＭＷＴ）値、及び３）身体機能を評価するためのＢｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）スコアが含まれた。
実施例２．アスフォターゼアルファ投与後の血漿無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の統計学的に有意な中央値の減少
ＨＰＰ成人から収集した血漿サンプル中のＡＬＰ活性は、Ｗｈｙｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９５（４）：１４４０－１４４５）（これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるように、ＡＬＰ基質ＰＰｉ及びＰＬＰの濃度を定量することによって評価した。対照の成人及びアスフォターゼアルファで治療される成人の血漿サンプル中のＰＰｉ及びＰＬＰ濃度の中央値は、ベースライン時点で正常範囲から上昇していた（表３）。同様に、ＡＬＰ活性値は、正常ＡＬＰ活性値の年齢及び性別で補正した下限（ＬＬＮ）（１８～５０歳未満では３１Ｕ／Ｌ又は５０～７０歳未満では３５Ｕ／Ｌ）と比較して対照群（２１．０Ｕ／Ｌ）及び治療群（１８．０Ｕ／Ｌ）で比較的低かった。
Figure 2023085277000004
血漿ＰＰｉ濃度の中央値は、ベースライン時点の対照群では５．９μＭ（最低血漿ＰＰｉ濃度５．２μＭ；最高血漿ＰＰｉ濃度６．６μＭ）、ベースライン時点の治療群では５．５μＭ（最低血漿ＰＰｉ濃度２．２μＭ；最高血漿ＰＰｉ濃度８．２μＭ）であった（表３）。血漿ＰＰｉ濃度は、アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後に減少するが、これは、アスフォターゼアルファで治療された患者では、ベースラインから－３．０の統計学的に有意な中央値変化であるのに対して、未治療対照群では－０．３の変化であることによって示される（図１Ａ）。ＰＰｉ濃度のベースラインからの中央値変化に対するＰ値は、治療群を対照群と比較した正確ウィルコクソンの順位和検定に基づいて０．０３６４であった。アスフォターゼアルファを６ヵ月間投与した後の血漿中のＰＰｉ濃度を２つの異なる用量群について分析すると、０．３ｍｇ／ｋｇ／日アスフォターゼアルファで治療した患者では、ベースラインから－２．８７０、０．５ｍｇ／ｋｇ／日アスフォターゼアルファで治療した患者では、－２．９９０の中央値の変化があったことが示された（表４、各治療群を対照群と比較した正確ウィルコクソンの順位和検定に基づくＰ値；推定値及び正確な信頼区間は、治療群と対照群との間の分布の位置シフトについてのＨｏｄｇｅｓ－Ｌｅｈｍａｎｎ－Ｓｅｎの方法から取得）。
Figure 2023085277000005
血漿ＰＬＰ濃度の中央値は、対照群ではベースラインで１９９．０ｎｇ／ｍｌ（最小血漿ＰＬＰ濃度１９６．０ｎｇ／ｍｌ；最大血漿ＰＬＰ濃度４７４．０ｎｇ／ｍｌ）であり、治療群ではベースラインで２６７．０ｎｇ／ｍｌ（最小血漿ＰＬＰ濃度２８．８ｎｇ／ｍｌ；最大血漿ＰＬＰ濃度１２７０．０ｎｇ／ｍｌ）であった（表３）。血漿ＰＬＰ濃度は、アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後に減少するが、これは、アスフォターゼアルファで治療された患者では、ベースラインから－２５４．５の統計学的に有意な中央値変化であるのに対して、対照群では１４０．０の変化であることによって示される（図１Ｂ）。ＰＬＰ濃度のベースラインからの中央値変化に対するＰ値は、治療群と対照群とを比較した正確ウィルコクソンの順位和検定に基づいて０．０３６４であった。アスフォターゼアルファを６ヵ月間投与した後の血漿中のＰＬＰ濃度を２つの異なる用量群について分析すると、０．３ｍｇ／ｋｇ／日アスフォターゼアルファで治療した患者では、ベースラインから－２９８．６０、０．５ｍｇ／ｋｇ／日アスフォターゼアルファで治療した患者では、－２５４．５０の中央値の変化があったことが示された（表５、各治療群を対照群と比較した正確ウィルコクソンの順位和検定に基づくＰ値、推定値及び正確な信頼区間は、治療群と対照群との間の分布の位置シフトについてのＨｏｄｇｅｓ－Ｌｅｈｍａｎｎ－Ｓｅｎの方法から取得）。
Figure 2023085277000006
対照群が６ヶ月の初期フェーズ後にアスフォターゼアルファによる治療を受けたため、その後の測定の全てで、血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度について、それぞれの時点（アスフォターゼアルファ治療の６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年及び６年）で治療群と対照群を統合した。血漿ＰＰｉ濃度の減少は、アスフォターゼアルファによる治療の延長フェーズを通して持続した（図２）。アスフォターゼアルファによる６ヶ月の治療後、血漿ＰＰｉ濃度中央値は、５．５３μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度２．１５μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度８．２０μＭ）から３．３０μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度０．７５μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度５．０２μＭ）に減少した。ＰＰｉ濃度の中央値は、１年で３．７４μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度１．６２μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度５．４０μＭ）であり；ＰＰｉ濃度の中央値は、２年で２．４９μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度１．３２μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度１０．９０μＭ）であり；ＰＰｉ濃度の中央値は、３年で２．０９μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度１．２４μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度２．９４μＭ）であり；ＰＰｉ濃度の中央値は、４年で２．４９μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度１．０９μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度４．５２μＭ）であり；ＰＰｉ濃度の中央値は、５年で２．２μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度０．９２μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度５．３６μＭ）であり；ＰＰｉ濃度の中央値は、５年で２．６０μＭ（最小血漿ＰＰｉ濃度１．９５μＭ；最大血漿ＰＰｉ濃度４．８４μＭ）であった。サンプルサイズは、６ヵ月時点でＨＰＰ小児発症成人９人、１年～５年の時点でＨＰＰ小児発症成人１２人、６年時点でＨＰＰ小児発症成人３人であった。
同様に、血漿ＰＬＰ濃度の減少は、アスフォターゼアルファによる延長フェーズを通して持続した（図３）。血漿ＰＬＰ濃度中央値は、アスフォターゼアルファによる６ヶ月の治療後、２６７．０ｎｇ／ｍｌ（最小血漿ＰＬＰ濃度２８．８ｎｇ／ｍｌ；最大血漿ＰＬＰ濃度１２７０．０ｎｇ／ｍｌ）から２１．６ｎｇ／ｍｌ（最小血漿ＰＬＰ濃度２．５ｎｇ／ｍｌ；最大血漿濃度１４１．０ｎｇ／ｍｌ）に減少した。ＰＬＰ濃度の中央値は、１年で６５．１ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度１５．９ｎｇ／ｍｌ；最高血漿ＰＬＰ濃度３６７．０ｎｇ／ｍｌ）であり；ＰＬＰ濃度の中央値は、２年で２０．１ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度２．７ｎｇ／ｍｌ、最高血漿ＰＬＰ濃度４５．７ｎｇ／ｍｌ）であり；ＰＬＰ濃度の中央値は、３年で１４．０ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度２．５ｎｇ／ｍｌ、最高血漿ＰＬＰ濃度３６．２ｎｇ／ｍｌ）であり；ＰＬＰ濃度の中央値は、４年で１２．０ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度２．５ｎｇ／ｍｌ、最高血漿ＰＬＰ濃度３８．４ｎｇ／ｍｌ）であり；ＰＬＰ濃度の中央値は、５年で７．８ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度２．５ｎｇ／ｍｌ、最高血漿ＰＬＰ濃度２９．５ｎｇ／ｍｌ）であり；ＰＬＰ濃度中央値は、６年で６．０ｎｇ／ｍｌ（最低血漿ＰＬＰ濃度４．７ｎｇ／ｍｌ；最高血漿ＰＬＰ濃度１５．１ｎｇ／ｍｌ）であった。サンプルサイズは、６ヵ月及び１年時点でＨＰＰ小児発症成人９人、２年～５年の時点でＨＰＰ小児発症成人１２人、６年時点でＨＰＰ小児発症成人３人であった。
実施例３．６分間歩行試験（６ＭＷＴ）で評価した小児発症ＨＰＰ成人患者の身体機能及び歩行能力の改善
６分間歩行試験（６ＭＷＴ）で小児発症ＨＰＰ患者の身体機能及び歩行能力を評価した。アスフォターゼアルファで治療された患者では、ベースラインでの６分間の平均歩行距離３１５．０メートル（最小距離２２３．０、最大距離５４０．０）から、アスフォターゼアルファによる治療１年後に６分間の平均歩行距離が４２１．５メートル（最小距離２０４．０、最大距離６４０．０）へ改善した。対照的に、未治療対照群は、ベースラインでの６分間の平均歩行距離４０１．０メートル（最小距離６．０、最大距離４４０．０）から、アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後の６分間の平均歩行距離が３５５．０メートル（最小距離１３．０、最大距離４２０．０）と改善しなかった。
アスフォターゼアルファによる治療１年後のベースラインからの平均変化は、６分間の歩行で８８．０メートルの距離であったが、対照群におけるベースラインからの中央値変化は、治療なしで６ヶ月後に６分間の歩行で－２０．０メートルであった（表６）。この変化には、ベースラインで６分間を通してフルに歩行できなかった対照群の３人の患者が含まれる。治療群の６ＭＷＴのベースラインからの平均の変化は、１７．６％であり、ベースラインでの予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値４２．４％、予測６ＭＷＴの最大値１０１．３％）の６２．８％から、アスフォターゼアルファによる治療１年後に予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値３１．１％、最大予測６ＭＷＴ値１２１．３％）の８５．０％へ増加した。対照的に、未治療対照群の６ＭＷＴのベースラインからの平均の変化は、－６．２であり、ベースラインでの予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値７９．１％、予測６ＭＷＴの最大値９２．４％）の８５．８％から、アスフォターゼアルファによる治療１年後に予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値７０．４％、最大予測６ＭＷＴ値８８．７％）の７９．６％へ減少した。さらに、対照とアスフォターゼアルファ治療小児発症ＨＰＰ患者との間の、６ヵ月目のパーセント予測６ＭＷＴ値のベースラインからの変化は、統計学的に有意であった（ｐ＝０．０４）。従って、アスフォターゼによる治療１年後のＨＰＰ患者は、歩行能力において統計学的に有意な改善を示したが、対照群患者の歩行能力は、悪化したか又は改善しなかった。
Figure 2023085277000007
ベースライン後の６ＭＷＴ値について、対照群が６ヵ月の初期フェーズ後にアスフォターゼアルファによる治療を受けたため、各時点（アスフォターゼアルファ治療の１年時点、２年時点、３年時点、４年時点、５年時点及び６年時点）で治療群及び対照群の６ＭＷＴ値を統合した。６ＭＷＴの変化は、ベースラインでの予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値４２．４％、予測６ＭＷＴ最大値１０１．３％；ｎ＝８）の６２．９％から、アスフォターゼアルファによる６ヶ月の治療後に予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値４６．０％、最大予測６ＭＷＴ値１０９．０％；ｎ＝８）の８０．８％へ増加を示した（図４）。６ＭＷＴ値の増加は、アスフォターゼアルファによる治療中を通して、１年後の予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値３１．１％；最大予測６ＭＷＴ値１２１．３％；ｎ＝１０）の８５％、２年後の予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値６３．３％；最大予測６ＭＷＴ値１２０．８％；ｎ＝９）の９１．８％、３年後の予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値６４．７％；最大予測６ＭＷＴ値１２１．６％；ｎ＝８）の９３．５％、４年後の予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値５９．０％；最大予測６ＭＷＴ値１３３．４％；ｎ＝８）の９１．７％、５年後の予測６ＭＷＴ値（最小予測６ＭＷＴ値６１．５％；最大予測６ＭＷＴ値１３７．４％；ｎ＝８）の８５．１％を維持した。要約すると、アスフォターゼアルファで治療したＨＰＰ患者の６ＭＷＴ値は、ベースラインの予測６ＭＷＴ値の７６％から、６か月までに予測６ＭＷＴ値の８０．８％へ改善したが、これは、同じ年齢及び身長の健康対象の正常範囲内である。６ＭＷＴ値の改善は、アスフォターゼアルファによる治療の４年にわたって持続した。
実施例４．Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）で評価した小児発症ＨＰＰ成人患者の身体機能の改善
ＨＰＰ患者の身体機能及び障害をＢｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）の走行速度及び機敏性試験並びに強度試験により評価した。ＨＰＰ患者の走行速度及び機敏性を評価するためのＢＯＴ－２試験には、５０フィートシャトルラン、平均台の横切り並びに片脚及び両脚サイドホップが含まれた。ＨＰＰ患者の強度を評価するＢＯＴ－２試験には、起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位及び腕立て伏せが含まれた。その後、各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年及び６年）のＢＯＴ－２試験毎に与えられたポイントの合計から、ＢＯＴ－２速度及び機敏性の合計スコア及びＢＯＴ－２強度の合計スコアを決定した。ベースライン後のＢＯＴ－２スコアについて、対照群が６ヵ月の初期フェーズ後にアスフォターゼアルファによる治療を受けたため、各時点（アスフォターゼアルファ治療の６か月時点、１年時点、２年時点、３年時点、４年時点、５年時点及び６年時点）で治療群及び対照群のＢＯＴ－２スコアを統合した。
アスフォターゼアルファによる治療の６ヵ月後、ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアは、ベースライン時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性合計スコアの中央値６（最小ＢＯＴ－２スコア０；最大ＢＯＴ－２スコア２７；ｎ＝９）から６ヵ月時点の１０．５（最小ＢＯＴ－２スコア５；最大ＢＯＴ－２スコア２７；ｎ＝８）に改善した（図５）。ＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値の改善は、アスフォターゼアルファによる治療の延長フェーズを通して持続し、１年時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、９．０（最小ＢＯＴ－２スコア４；最大スコア３５；ｎ＝１１）、２年時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、１０．０（最小ＢＯＴ－２スコア３；最大スコア３３；ｎ＝１１）、３年時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、１０．０（最小ＢＯＴ－２スコア４；最大スコア３０；ｎ＝１０）、４年時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、９（最小ＢＯＴ－２スコア４；最大スコア３１；ｎ＝１１）及び５年時点のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、８．０（最小ＢＯＴ－２スコア０；最大スコア３５；ｎ＝９）であった。ＢＯＴ－２強度の合計スコアは、アスフォターゼアルファによる治療の６ヵ月後にベースライン時点のＢＯＴ－２強度の合計スコアの中央値１２（ＢＯＴ－２スコアの最小値２；スコアの最大値３０；ｎ＝５）から、６ヵ月時点の１４（ＢＯＴ－２スコアの最小値８；スコアの最大値３５；ｎ＝５）に改善した（図６）。
実施例５．アスフォターゼアルファ投与後の小児発症ＨＰＰ成人患者の骨石灰化の改善
大腿骨頸部、腰椎及び全身の二重エネルギーＸ線吸収測定（ＤＸＡ）を、未治療の対照患者に対してベースライン時点及び６ヶ月時点で行い、またアスフォターゼアルファによる治療患者に対してベースライン時点及び１年時点で行った。小児発症ＨＰＰ罹患成人では、治療患者は、アスフォターゼアルファ投与の６ヵ月後、腰椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）のベースラインからの増加を示した。アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後、腰椎ＢＭＤの統計学的に有意な増加が観察された（表７）。
Figure 2023085277000008
骨生検も未治療対照患者ではベースライン時点及び６か月時点で、アスフォターゼアルファ治療患者ではベースライン時点及び１年時点で実施し、類骨の体積及び厚さ（表８）並びに石灰化の遅延時間（表９）を決定した。アスフォターゼアルファによる治療の１年後、類骨容積／骨容積（％）及び類骨厚さ（μｍ）の統計学的に有意な減少が観察された。この試験は、ＤＸＡ試験よりもかなり侵襲的であった。
Figure 2023085277000009
ベースライン時点では、全てのＨＰＰ患者で石灰化遅延時間が延長されたが、患者間の大きいばらつきを含んでいた。このような変動性は、このタイプの組織形態計測法による測定及び試験で予想される。アスフォターゼアルファによる１年の治療後、石灰化遅延時間は、ベースラインからの平均変化が６ヶ月時点で６５日である未治療対照群と比較して、ベースラインからの平均変化が－６９６日である治療群で減少した。これらの結果は、小児発症ＨＰＰ成人患者へのアスフォターゼアルファの投与が骨石灰化を促進することを示している。
Figure 2023085277000010
実施例６．アスフォターゼアルファによるＨＰＰ青年及び成人の治療の試験設計
ｓＡＬＰ（アスフォターゼアルファ；図７）による治療の有効性、安全性及び忍容性を決定するための試験に参加した約１３歳～約６５歳のＨＰＰ罹患青年及び成人である。アスフォターゼアルファによる６ヵ月の治療の初期フェーズでは、合計１９人の患者は、アスフォターゼアルファを０．３ｍｇ／ｋｇ／日（２．１ｍｇ／ｋｇ／週；ｎ＝７）の用量で皮下投与し、０．５ｍｇ／ｋｇ／日（３．５ｍｇ／ｋｇ／週；ｎ＝６）で皮下投与するか、又は対照群では無治療（ｎ＝６）とするよう無作為化された（図８）。６ヶ月の初期フェーズの試験に続いて、治療群及び対照群の両方の患者は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日（３．５ｍｇ／ｋｇ／週）の用量のアスフォターゼアルファの皮下投与による治療を受けた。延長フェーズの最初の６ヶ月後、プロトコール修正下で全ての患者について６日／週にわたって用量を１ｍｇ／ｋｇ／日（６ｍｇ／ｋｇ／週）に増加させた。試験の選択基準及び除外基準を表１０に記載する。ＨＰＰ疾患関連病歴を含む、ＨＰＰ青年及び成人の患者デモグラフィック及びベースライン特性を表１１に要約する。
Figure 2023085277000011
Figure 2023085277000012
Figure 2023085277000013
アスフォターゼアルファによるＨＰＰ青年及び成人の治療を評価するために延長フェーズで使用された測定基準には、１）ＡＬＰ活性を評価するための患者血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）及びピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の変化；２）歩行能力を評価するための６分間歩行試験（６ＭＷＴ）値；３）身体機能を評価するためのＢｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）スコア；４）強度を評価するためのハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）；５）障害を評価するための下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）；及び６）痛みを評価するための簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）が含まれた。
有効性解析は、全ての無作為化された患者を含む治療意図集団の完全な解析セットについて実施した。全ての患者は、無作為化された治療を受けた。最初の治療期間において、プールしたアスフォターゼアルファ治療群と対照群との間で群比較を行った。分析は、アスフォターゼアルファへの５年までの曝露期間によっても実施した。対照群の患者では、アスフォターゼアルファ治療は、延長フェーズの開始から６ヶ月後に開始した。ベースラインから６ヵ月目までのＰＰｉ及びＰＬＰの血漿中の濃度変化の転帰測定のため、０．０５の両側アルファを用い、各パラメータについての正確ウィルコクソンの順位和検定を使用して、プールしたアスフォターゼアルファ治療群と対照群との比較を行った。欠損値は、直前の観察値を繰り越して帰属させた。６ＭＷＴでは、患者がベースライン時に６分間の歩行を完結した場合、パーセント予測値（％）（年齢、性別及び身長に基づいた正常の予測歩行距離と比較したパーセントとして定義される）を計算した。
実施例７．ＨＰＰ成人及び青年にアスフォターゼアルファを投与した後のＰＰｉ及びＰＬＰ濃度の中央値の減少
Ｗｈｙｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９５（４）：１４４０－１４４５）に記載されているように、ＡＬＰ基質ＰＰｉ及びＰＬＰの濃度を定量することにより、ＨＰＰ青年及び成人から採取した血漿サンプルのＡＬＰ活性を評価した。アスフォターゼアルファで治療した青年及び成人ＨＰＰ患者のＰＰｉ（－２．２μｍ）及びＰＬＰ（－２５４．５ｎｇ／ｍｌ）血漿濃度の両方において、６ヶ月後に対照群と比較してより大きい変化があった（それぞれ図９Ａ及び９Ｂ）。群間の差は、血漿ＰＬＰの変化で統計学的に有意（Ｐ＝０．０２８５）であったが、血漿ＰＰｉの変化について有意ではなかった（Ｐ＝０．０７１５）。高いベースラインＰＰｉ濃度（１２．１μＭ）を有する対照群の１人の患者を除外した事後感度分析は、対照群と比較して、アスフォターゼアルファ群の６ヶ月目の血漿ＰＰｉ濃度の統計学的に有意な減少を示した（Ｐ＝０．００４４）。青年及び成人ＨＰＰ患者の血漿ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度の中央値の減少は、５年のアスフォターゼアルファ治療中に維持された（それぞれ図１０Ａ及び１０Ｂ）。
実施例８．青年及び成人ＨＰＰ患者の６分間歩行試験（６ＭＷＴ）で評価した身体機能及び歩行能力の改善
６分間歩行試験（６ＭＷＴ）でＨＰＰ青年及び成人の身体機能及び歩行能力を評価した。ベースライン後の６ＭＷＴ値に関して、対照群は、６ヵ月の初期フェーズ後に切り替えられ、アスフォターゼアルファによる治療が開始されたため、６ＭＷＴ値は、治療群及び対照群について、各時点（アスフォターゼアルファ治療の１年時点、２年時点、３年時点、４年時点及び５年時点）で統合した。対照群は、治療群の６ヶ月後にアスフォターゼアルファによる治療を開始した。全ての分析のためのベースラインは、患者がアスフォターゼアルファの最初の投与を受ける前の最後の評価であった。予測６ＭＷＴ値は、患者が６分間の歩行を完結した場合にのみ計算した。最初に対照群に割り付けられた３人の患者は、身体的及び／又は認知障害のためにベースラインで６分間の歩行を完結することができなかったため、％予測分析に含まれなかった。ベースライン測定では、１９人の患者のうちの５人が歩行支援器具を使用した（ｎ＝３、アスフォターゼアルファ群；ｎ＝２、対照群）。
アスフォターゼアルファによる治療を受けた青年及び成人ＨＰＰ患者は、アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後に治療開始時の３５５メートル（最小距離１０メートル；最大距離６２０メートル）から４５０メートル（最小距離２８０メートル；最大距離７０７メートル）に改善した（図１１Ａ）。同様に、％予測６ＭＷＴ歩行距離の中央値は、ベースラインで予測された７６％（最小４２％、最大１０１％）から、アスフォターゼアルファによる治療の６ヶ月後に８５％（最小２９％、最大１０９％）まで増加した（図１１Ｂ）。６ＭＷＴ歩行距離及び％予測６ＭＷＴ歩行距離の改善は、アスフォターゼアルファによる治療の５年にわたって持続した。アスフォターゼアルファによる治療の２年後、歩行支援器具を使用した全５人の患者は、改善した。１人は、車椅子から松葉杖へ、１人は、歩行器から杖へ、１人は、車輪付き歩行器から独立歩行へ、２人は、杖から独立歩行へ進歩した。
アスフォターゼアルファによる治療の前後の、青年ＨＰＰ患者（ｎ＝４）及び小児発症ＨＰＰ罹患成人（ｎ＝９）に対する６ＭＷＴ結果を評価するために事後解析も行った。６ＭＷＴの試験－再試験の信頼性は、ベースライン時点とスクリーニング時点の６ＭＷＴ歩行距離との間のピアソン相関係数（ｒ）を計算することによって評価し、両側Ｐ値を計算した（正確検定の帰無仮説：ｒ＝０）。試験－再試験の信頼性は、約１３～約１７歳の青年と、約１８歳を超える成人とで別々に分析した。ベースライン時点とスクリーニング時点での歩行距離との間のピアソン相関係数（ｒ）は、青年ＨＰＰ患者で０．８１（Ｐ＝０．１２５０）（図１２Ａ）であり、小児発症ＨＰＰ成人患者で０．９４（Ｐ＝０．０００１）（図１２Ｂ）であった。若年ＨＰＰ患者（ｎ＝４）及び小児発症ＨＰＰ罹患成人（ｎ＝９）の、６ＭＷＴの臨床的に重要な最小の変化量（ＭＣＩＤ）を、スクリーニング時点及びベースライン時点の６ＭＷＴデータに適用した分布に基づく方法を用いて計算した。現在の事後分析は、ＭＣＩＤを推定するために、標準測定誤差（ＳＥＭ）及び１／３標準偏差（ＳＤ）の分布に基づく方法論を用いた。ＭＣＩＤの最も保守的な推定値は、青年（ＳＥＭ法；ｎ＝４）で４３メートルであり、スクリーニング時点及びベースライン時点で６ＭＷＴを完結した小児発症ＨＰＰ罹患成人（ＳＤ法；ｎ＝９）で３１メートルであった。
実施例９．Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）で評価した青年及び成人ＨＰＰ患者の身体機能の改善
Ｂｒｕｉｎｉｎｋｓ－Ｏｓｅｒｅｔｓｋｙ運動能力試験第２版（ＢＯＴ－２）の走行速度及び機敏性試験並びに強度試験により、ＨＰＰ青年及び成人の身体機能及び障害を評価した。ＨＰＰ患者の走行速度及び機敏性を評価するためのＢＯＴ－２試験には、５０フィートシャトルラン、平均台の横切り並びに片脚及び両脚サイドホップが含まれた。ＨＰＰ患者の強度を評価するＢＯＴ－２試験には、起き上がり腹筋運動、ｖアップ、立ち幅跳び、壁座位及び腕立て伏せが含まれた。その後、各時間間隔（ベースライン、６ヶ月、１年、２年、３年、４年及び５年）のＢＯＴ－２試験毎に与えられたポイントの合計から、ＢＯＴ－２速度及び機敏性の合計スコア及びＢＯＴ－２強度の合計スコアを決定した。ベースライン後のＢＯＴ－２スコアについて、対照群が６ヵ月の初期フェーズ後にアスフォターゼアルファによる治療を受けたため、各時点（アスフォターゼアルファ治療の６か月時点、１年時点、２年時点、３年時点、４年時点及び５年時点）で治療群及び対照群のＢＯＴ－２スコアを統合した。ＨＰＰ罹患成人及び青年のＢＯＴ－２走行速度及び機敏性の合計スコアの中央値は、ベースライン時点で６．５（最小０、最大３９）であったが、アスフォターゼアルファによる治療の５年後に４．０（最小－５、最大１８）だけ改善した（図１３）。ＢＯＴ－２強度の合計ポイントスコアの中央値は、治療開始時点で１３．５（最小０、最大３３）であったが、アスフォターゼアルファによる治療の５年後に３．５（最小－９、最大９）だけ改善した（図１３）。
実施例１０．ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）で評価した青年及び成人ＨＰＰ患者の握力及び筋力の改善
ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）を用いて、ＨＰＰ青年及び成人の握力及び筋力を評価した。ＨＨＤを行って以下の両側筋肉群を試験した：握力、膝屈筋、膝伸筋、股関節屈筋、股関節伸筋及び股関節外転筋。強度は、ポンドで報告した。測定は、ポンド（力）で評価してニュートン（Ｎ）に換算し、トルクは、肢の長さを用いてニュートン・メートル（ＮＭ）で計算した。１６歳未満の患者の年齢、性別及び体重に基づいた％予測ＨＨＤスコアの決定にトルクを使用し、成人の％予測ＨＨＤスコアの比較に力を使用した。
ＨＰＰ青年及び成人患者（ｎ＝１３）の％予測ＨＨＤ股関節外転の中央値は、ベースラインで４５．６０％（最低９．１％、最大１２６．２％）であった。アスフォターゼアルファによる治療の２４週後、アスフォターゼアルファ治療ＨＰＰ患者で股関節の近位筋強度の改善が観察された。ベースラインから２４週までの％予測値（優性側）の中央値の変化は、対照群の股関節外転で６．７０％（最小－７．１％、最大１２．０％）であったのに比べて、統合アスフォターゼアルファ治療群では１１．１０％（最小－２５．７％、最大２０．４％）であった。ベースラインから２４週までの％予測値（優性側）の中央値の変化は、対照群の股関節伸展で１．９０％（最小１５．０％、最大１１．２％）であったのに比べて、統合アスフォターゼアルファ治療群では７．９５％（最小１２．６％、最大１９．５％）であった。
アスフォターゼアルファによる治療を受けた青年及び成人のＨＰＰ患者は、アスフォターゼアルファによる治療後の４８週時点（中央値変化は、１１．００％予測値（最小値－１５．０％、最大値３０．５％））、９６週時点（中央値変化は、１１．９５％予測値（最小値－１４．０％、最大値４７．２％））、１４４週時点（中央値変化は、１７．０５％予測値（最小値－６．７％、最大値５５．５％））、１９２週時点（中央値変化は、１９．４５％予測値（最小値－２４．２％、最大値９４．７％））及び２４０週時点（中央値変化は、９．８０％予測値（最小値－７．２％、最大値１５５．２％））で股関節外転の改善を示した。アスフォターゼアルファによる治療を受けた青年及び成人のＨＰＰ患者は、アスフォターゼアルファによる治療後の２４週時点（中央値変化は、６．２０％予測値（最小値－１２．６％、最大値１９．５％））、４８週時点（中央値変化は、４．９０％予測値（最小値１．７％、最大値２７．７％））、９６週時点（中央値変化は、６．７５％予測値（最小値－２４．１％、最大値３１．２％））、１４４週時点（中央値変化は、１５．４０％予測値（最小値－１５．６％、最大値４５．２％））、１９２週時点（中央値変化は、１７．１０％予測値（最小値－３．２％、最大値５０．２％））及び２４０週時点（中央値変化は、１２．４０％予測値（最小値－９．２％、最大値４５．１％））で股関節伸展の改善を示した。アスフォターゼアルファで治療された青年及び成人ＨＰＰ患者は、アスフォターゼアルファでの治療の２４０週後に股関節外転の改善を示した。青年及び成人ＨＰＰ患者は、膝伸展の中央値変化が１６．０５％予測値（最小値７．１％、最大値４０．７％）であり、膝屈曲が１４．３０％予測値（最小値２．１％、最大値６８．０％）であった。
実施例１１．下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）で評価した青年及び成人ＨＰＰ患者における下肢の機能障害の改善
下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）を用いて、ＨＰＰ青年及び成人における下肢の機能障害を評価した。免許を有する理学療法士がＨＰＰ患者へのインタビュー形式でＬＥＦＳ評価を実施した。ＬＥＦＳの合計スコアは、０～８０の範囲であり、高いスコアほど良好な下肢機能を表す。ベースラインＬＥＦＳスコアの平均及び中央値は、統合アスフォターゼアルファ群よりも対照群ではるかに低かった。未治療対照群と比較して、青年及び成人ＨＰＰ患者の統合アスフォターゼアルファ治療群のＬＥＦＳスコアに改善があった（表１２）。ベースラインから２４週目までで、臨床的に意味のある改善（≧９ポイントの増加）が、アスフォターゼアルファで治療したＨＰＰ患者の１３人中４人（３０．８％）と比較して対照群では５人の患者中１人（２０．０％）で観察された。
Figure 2023085277000014
アスフォターゼアルファによる治療中、ベースラインＬＥＦＳスコアデータを有する１８人の患者のうちの１４人（７７．８％）が、ベースラインからアスフォターゼアルファによる治療の５年までにＬＥＦＳの合計スコアの増加（改善）を示した。さらに、合計１８人の患者のうちの８人（４４．４％）は、ベースラインＬＥＦＳスコアと比較して、患者らの最終評価時にＬＥＦＳスコアで臨床的に有意な改善（≧９ポイント）を示した。最後のアスフォターゼアルファの全曝露までの、全部で１８人の患者のベースラインからの平均の変化は、７．５（標準偏差１３．３３）であった。
実施例１２．簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）で評価した青年及び成人ＨＰＰ患者の痛み
簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）を使用してＨＰＰ青年及び成人の痛みを評価した。ＨＰＰ青年及び成人のＢＰＩ－ＳＦスコアは、１１の痛み評価を複合化したものである。ＨＰＰ青年及び成人の統合ＢＰＩ－ＳＦスコアには、ベースラインと２４週目との間に平均値の増加がなかった（表１３）。ベースラインから２４週目までのＢＰＩ－ＳＦスコアの平均及び中央値の変化は、アスフォターゼアルファで治療したＨＰＰ青年及び成人と対照群との間で類似であった。
Figure 2023085277000015
アスフォターゼアルファによる５年の治療中、ＨＰＰ青年及び成人並びに対照患者のＢＰＩ－ＳＦスコアは、最初の２４週間の治療期間中に観察されたものと一致した。アスフォターゼアルファによる治療の９６週（Ｎ＝１９）及び１４４週（Ｎ＝１７）までに、アスフォターゼアルファで治療されたＨＰＰ青年及び成人並びに対照群患者の中央値の改善は、それぞれ－４．０（範囲：－１３、１１）及び－４．０（範囲：－２４、９）であった。アスフォターゼアルファによる治療の１９２週時点（Ｎ＝１５）及び２４０週時点（Ｎ＝１６）では、ＨＰＰ青年及び成人並びに対照患者の中央値の改善は、それぞれ－３．０（範囲：－２０、８）及び－３．５（範囲－２０、５）であった。従って、ＨＰＰの青年及び成人は、アスフォターゼアルファによる治療後、約５年にわたって痛みの増加を示さなかった。
実施例１３．アスフォターゼアルファによる長期治療に対する忍容性
一般に、アスフォターゼアルファによる治療は、ＨＰＰ罹患青年及び成人に十分な忍容性があり、ほとんどの有害事象（ＡＥ）は、注射部位の反応（ＩＳＲ）及び関節痛からなる。安全性評価には、ＩＳＲ及び注射関連反応（ＩＡＲ）を含む有害事象（ＡＥ）の継続的モニタリングが含まれた。ＩＳＲは、投与部位に局在し、アスフォターゼアルファ治療開始後の任意の時点で生じた。ＩＡＲには、アスフォターゼアルファ投与後３時間以内に生じた全身性徴候、症状又は所見（例えば、全身性じんま疹又はかゆみ、低血圧又は呼吸困難）が含まれた。
アスフォターゼアルファ投与中に死亡者はいなかった。注射部位過敏症及びアナフィラキシー様反応のために中止したのは、１患者のみであった（各１回の発症）。全ての患者は、試験中に少なくとも１つの治療下発現有害事象（ＴＥＡＥ）を経験した。ほとんどのＴＥＡＥは、重篤度において軽度（８６４／１１４５（７５％））又は中等度（２２９／１１４５（２０％））であった。関節痛、注射部位紅斑、四肢痛、背部痛、注射部位血腫、骨痛、注射部位変色、眼の石灰化、筋骨格痛、末梢浮腫、浮腫、めまい、足骨折、注射部位反応、関節腫脹、上気道感染、頭痛、注射部位痛、鼻咽頭炎、咳、転倒、注射部位萎縮、注射部位掻痒、治療痛、副鼻腔炎、疲労、注射部位の腫れ、注射部位肥大、悪心、口腔咽頭痛、変形性関節症、感覚異常及び外傷後痛のＴＥＡＥが４人以上のＨＰＰ患者で報告された（表１４）。
Figure 2023085277000016
最も一般的なＴＥＡＥは、全ての患者で発現したＩＳＲ（３８５／１１４５（３４％））であった。最も一般的なＩＳＲ（≧５％のＩＳＲ）は、紅斑（１２１／３８５（３１％））、変色（６６／３８５（１７％））、特定不能のＩＳＲ（５６／３８５（１５％））、血腫（３３／３８５（９％））、痛み（２６／３８５（７％））及び掻痒（２０／３８５（５％））であった。合計２名の患者は、過敏性ＩＡＲ（１人の患者は、口腔感覚鈍麻及び悪寒；１人の患者は、アナフィラキシー様反応）に分類されるＴＥＡＥＳを経験し、これらは、全て重篤度において中等度であると考えられた。９人の患者で合計２９件の重篤な治療下発現有害事象（ＳＡＥ）が報告され、２人の患者で報告された８件のＳＡＥ（経口知覚鈍麻、悪寒、四肢痛並びに１人の患者で頭痛、１人の患者で過敏症反応及びアナフィラキシー様反応）は、アスフォターゼアルファの投与に関連していると治験責任医師により評価された。全体として、アスフォターゼアルファの投与は、ＨＰＰの青年及び成人に十分な忍容性があった。
実施例１４．小児ＨＰＰ罹患成人におけるアスフォターゼアルファのフェーズ２ａ無作為多施設非盲検用量範囲試験の薬力学的結果
６～１２歳の患者を対象とした試験及びＨＰＰ罹患青年及び成人を対象とした試験では、アスフォターゼアルファは、循環ＰＰｉ及びＰＬＰ濃度を低下させ、機能的転帰を改善した。アスフォターゼアルファは、全年齢の小児発症ＨＰＰ患者のＨＰＰ治療薬として米国、欧州及び日本で承認されており、推奨用量は、２．０ｍｇ／ｋｇを週３回又は１．０ｍｇ／ｋｇを週６回である。米国では、治療担当医師がその有効性が不十分であると考える場合、３．０ｍｇ／ｋｇを週３回にこの用量を増量し得る。
小児発症ＨＰＰ罹患成人を対象として、現在推奨されている用量の２．０ｍｇ／ｋｇ、週３回をひとまとめにした６倍の範囲にわたり、３点の用量でアスフォターゼアルファの薬力学、薬物動態及び安全性／忍容性を評価した。薬力学及び安全性／忍容性を測定した。
適格患者には、ＨＰＰ関連骨格異常の既往歴の記録及び以下のうち１つ以上によって示される、小児発症ＨＰＰ罹患の及びＨＰＰと診断された年齢≧１８の男性及び非妊娠女性が含まれた：ＴＮＳＡＬＰ遺伝子（ＡＬＰＬ）変異の記録、スクリーニング時における年齢調整正常範囲未満の血清アルカリホスファターゼ活性及び正常上限を超えるＰＬＰ（ＰＬＰの既往結果を用いて患者適格性を判定し得る；血漿ＰＬＰの基準は、ピリドキシン治療を受けている患者には適用できなかった）、スクリーニング時の血漿ＰＰｉ≧３．９μＭ及び試験登録から３年以内にアスフォターゼアルファによる治療のないこと。
試験の設計及び治療は、１３週間の第２ａフェーズ多施設無作為化非盲検用量反応試験であった。スクリーニング後、最初の導入期間により、基質分析のためのサンプリングが可能になった。その後、第１週中、皮下投与（ＳＣ）されるアスフォターゼアルファの単回用量（０．５、２．０又は３．０ｍｇ／ｋｇ）に対して、患者は、１：１：１に無作為化された。患者は、第２週中、アスフォターゼアルファを受けなかった。その後、アスフォターゼアルファを３週目から９週目まで、０．５、２．０、３．０ｍｇ／ｋｇ ＳＣを毎週３回（１．５、６．０又は９．０ｍｇ／ｋｇ／週に相当）の用量で投与した（図１４）。
薬力学的転帰測定は、ベースラインから９週目の第３投与前（トラフ）までの血漿ＰＰｉ（一次）及びＰＬＰ（二次）の変化であり、ベースラインは、アスフォターゼアルファによる最初のＳＣ注射前の全ての評価の平均として定義された。血漿ＰＰｉ及びＰＬＰの測定のための血液サンプルは、スクリーニング、導入時、１週目、９週目及び１３週目にクリニックで採取した。第２～第８週及び第１０～第１２週の血液サンプルは、診療所又は家庭で採取することができた。他の二次的転帰尺度には、安全性／忍容性及び薬物動態パラメータが含まれた。薬力学的及び安全性／忍容性の結果を報告する。
主要仮説は、コホート間でベースラインからの血漿ＰＰｉの変化の差が９週目の第３回投与前でゼロと異なるかどうかを試験した。多重度を制御するために、固定配列試験手順を使用して、最初に３．０ｍｇ／ｋｇと０．５ｍｇ／ｋｇのコホートとの間の差を決定し、これが統計学的に有意である場合にのみ、その後、２．０ｍｇ／ｋｇと０．５ｍｇ／ｋｇのコホートとの間の差を決定した。有意性検定を実施する場合、両側５％のタイプＩ誤差を使用した（Ｐ＜０．０５）。有意性検定レベル０．０５（両側ともＰ＜０．０５）で両方の比較について帰無仮説が棄却された場合、主要評価尺度が満たされた。一次解析は、制限最尤（ＲＥＭＬ）ベースの反復測定混合モデルを用いて行い、ベースラインから９週目（３回目の投与前；６１日目）までの変化を推定した。使用したこのモデルは、４週目（２２日目）、５週目（２９日目）、７週目（４３日目）、８週目（５０日目）、９週目（５７日目）及び９週目（６１日目）に得られた投与前サンプルから得られたものである。３週目（１５日目）の投与前の時点は、単回投与後の２週間のウォッシュアウト期間後に収集されたために含まれず、ベースライン時と同様の値を与えると予想された。プロトコールに従って、６週目には薬力学評価を行わなかった。解析には、来院の固定されたカテゴリー効果、治療コホート、ベースラインＰＰｉ、性別、ベースライン体重群（≧中央値対＜中央値）及び治験薬ロット割付の共変量を含めた。患者内誤差をモデル化するために、構造化されていない共分散構造を用い、Ｋｅｎｗａｒｄ－Ｒｏｇｅｒ近似を用いて分母の自由度を推定した。
スクリーニングされた３５人の患者のうち、２７人が登録され、試験を完了した。デモグラフィック特性及びベースラインの症状を表１５に要約した。３つの用量コホートのうち、年齢中央値は、４５．０歳（範囲：１８～７７）であり、ほとんどの患者は、白人（９６％）及び女性（５９％）であった。
Figure 2023085277000017
ベースラインから９週目第３回投与前までのＰＰｉの最小二乗平均（ＬＳＭ）の変化間に有意差が観察された（表１６及び図１５）。ベースラインから９週目第３回投与前までのＰＬＰのＬＳＭの変化間にも有意差が観察された（表１６及び図１６）。
Figure 2023085277000018
安全性と忍容性に関して、≧５の患者全体に認められた治療下発現有害事象（ＴＥＡＥ）を表１７に示す。例えば、注射部位反応（２１人の患者で１３７件の事象）は、２．０及び３．０ｍｇ／ｋｇコホートでより一般的であった。リポジストロフィーが観察された（２．０ｍｇ／ｋｇコホートの１人の患者で２件の事象）。異所性石灰化（４人の患者で４件の事象；２．０及び３．０ｍｇ／ｋｇのコホートでそれぞれ２件）が認められ、それらは、腎臓（２人の患者；２．０及び３．０ｍｇ／ｋｇのコホートでそれぞれ１例）、眼（２．０ｍｇ／ｋｇコホートで１人の患者）及び肝臓（３．０ｍｇ／ｋｇのコホートで１人の患者）においてであった。過敏性反応も観察された（２．０ｍｇ／ｋｇのコホートの１人の患者で４件の事象）。全体として、ＴＥＡＥの９９％（４８０／４８５）は、軽度又は中等度であった。重篤なＴＥＡＥは報告されず、ＴＥＡＥのために試験を中止した患者はいなかった。
Figure 2023085277000019
アスフォターゼアルファを推奨用量又はそれを超える用量（２．０又は３．０ｍｇ／ｋｇ）で治療した小児発症ＨＰＰ成人患者は、推奨用量より低い用量（０．５ｍｇ／ｋｇ）で治療した患者と比較して、９週目の第３回投与前ＰＰｉ及びＰＬＰ値においてベースラインからの統計学的に有意な減少を示した。注射部位反応は、用量を増加するほど頻繁になった。他の点では、アスフォターゼアルファは、全ての用量で十分な忍容性を有した。
実施例１５．ＡＡ－ＨＰＰ－２０８試験の、小児発症低ホスファターゼ症成人患者におけるアスフォターゼアルファの母集団薬物動態及び薬物動態－薬力学解析
小児発症ＨＰＰの成人患者におけるアスフォターゼアルファのＰＫを記述するために、非コンパートメント解析（ＮＣＡ）を用いてアスフォターゼアルファ薬物動態（ＰＫ）パラメータを計算した。本発明者らは、典型値及びランダムな個体間変動及び残差変動を含む母集団ＰＫパラメータを推定し、母集団ＰＫ分析における説明できないランダム変動を予測する個体特異的共変量因子（例えば、体重）を同定した。本発明者らは、アスフォターゼアルファへの曝露とＰＰｉ応答との間の母集団薬物動態－薬力学（ＰＫＰＤ）関係について述べた。さらに、本発明者らは、典型値及びランダムな個人間変動及び残差変動を含む母集団ＰＫ－ＰＰｉパラメータを推定した。また、小児発症ＨＰＰ罹患アスフォターゼアルファ成人患者におけるＰＫ－ＰＰｉ間の曝露反応（ＥＲ）の関係をシミュレートし、推奨用量６ｍｇ／ｋｇ／週を支持した。最後に、ビタミンＢ６含有サプリメントによる治療を受けなかった患者におけるアスフォターゼアルファ曝露とピリドキサール－５０－リン酸（ＰＬＰ）反応との間の母集団ＰＫＰＤの関係について述べた。これには、ＰＫ－ＰＬＰ用量又はＥＲの記述と、典型値並びにランダムな個体間変動及び残差変動の推定とが含まれる。
第２ａフェーズ試験（プロトコールＡＡ－ＨＰＰ－２０８）は、約１３週間にわたる２７人のＨＰＰ患者に対する、アスフォターゼアルファを３回増大させた反復投与計画のランダム化並行群間比較設計であった（図１７Ａ～１７Ｂ）。試験は、スクリーニング期間、単回投与期間（３週間）及び反復投与治療期間（１０週間）からなった。試験は、アスフォターゼアルファ０．５、２．０又は３．０ｍｇ／ｋｇの単回投与と、その後の２週後に開始された同量の３×／週の反復投与とからなった。２７の個体（１コホート当たり約９名）が試験に含まれ、単回及び反復投与後にリッチＰＫ、ＰＰｉ及びＰＬＰサンプリングを実施し、蓄積期中にスパースサンプリングを行った。
３つのコホート全てについて、個々のＰＫプロファイル及び平均ＰＫプロファイルを得た。個々のＰＫプロファイルは、１日目の単回投与事象後（図１８Ａ）から６１日目の反復投与事象後（図１８Ｂ）までのアスフォターゼアルファの蓄積を示した。単回用量及び複数回用量の平均±ＳＤ ＰＫプロファイルの両方において、試験した０．５～３ｍｇ／ｋｇの用量範囲内では、アスフォターゼアルファは、曝露の増加と共に直線的なＰＫを示すことが示された（図１９Ａ及び１９Ｃ）。アスフォターゼアルファトラフ濃度が３つの投与計画の全ての下で一貫してプラトーに達する２９日目前後（又は反復投与の４週後）に定常状態に達した（図１９Ｂ）。用量正規化平均±ＳＤ ＰＫプロファイルは、０．５ｍｇ／ｋｇから３．０ｍｇ／ｋｇまでで、アスフォターゼアルファＰＫがほぼ用量比例的に（又は比例範囲の２倍以内で）増加することを示した（図２０Ａ～２０Ｂ）。
濃度観察、投与履歴、事象時間及び共変量因子（年齢、身長、体重、性別及び人種）を含む母集団ＰＫデータを集め、分析のためにフォーマットした。ＰＫパラメータ値は、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ｖ７．０（Ｃｅｒｔａｒａ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ ＮＪ、ＵＳＡ）のＮＣＡモジュールを用いて推定した。ＮＣＡのデータセットは、ＮＯＮＭＥＭ（登録商標）母集団ＰＫＰＤデータセットから得た。濃度結果から得られたＰＫパラメータを用いて、アスフォターゼアルファの用量比例性を評価した。非線形混合効果モデリング（ＮＯＮＭＥＭ（登録商標））ソフトウェア、バージョン７．３（ＩＣＯＮ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、Ｈａｎｏｖｅｒ、ＭＤ）を限定インストールした非線形混合効果モデリングにより、反復測定の終了時点に対する母集団ＰＫＰＤの分析を行った。
以前のモデリング試験から、アスフォターゼアルファはマルチコンパートメント動態に従うことが示唆されたため、クリアランス（ＣＬ）、中央コンパートメントの分布容積（Ｖ２）、末梢コンパートメントの分布容積（Ｖ３）、コンパートメント間クリアランス（Ｑ）、絶対バイオアベイラビリティ（Ｆ）、吸収速度定数（ｋａ）及び皮下吸収遅延時間（ＡＬＡＧ）（ＡＤＶＡＮ１３）に関してパラメータ化された一次吸収を伴う２コンパートメントモデルを用い、適切なランダム効果分布を有する初期モデリングを行った。モデル選択は、最小目的関数値及び推定パラメータの数が与えられたものとして、診断散布図、少なくとも２桁の有効桁を有する収束、パラメータ推定値の尤度、パラメータ推定値の精度、モデルパラメータ推定誤差＜０．９５の相関及びＡＩＣを含む様々な適合度基準によって導かれた。最終のモデルパラメータ推定値は、漸近標準誤差（ＮＯＮＭＥＭ（登録商標）＄ＣＯＶＡＲＩＡＮＣＥステップから得られた）を含む推定不確実性の尺度と共に報告された。
アスフォターゼアルファを用いた先のモデリングは、共変量モデリングも導いた。予測変数の相関又は共線性を回避するように注意してフルモデルを構築した。モデルパラメータを推定し、全ての共変量効果のグラフ検査によって残りの傾向を評価した。パラメータの臨床的関連性についての推論は、得られたフルモデルのパラメータ推定値及び推定精度の尺度に基づいた。個々のＰＫパラメータも推定し、定常状態での投与間隔中の平均濃度（Ｃａｖｇ，ｓｓ）を計算した。予測チェックモデル評価ステップを行って、最終モデル及びパラメータの性能を評価した。
ＰＫ－ＰＰｉデータ分析では、ベースラインからの変化に関する血漿ＰＰｉ応答をプロットし、曝露四分位数にわたって要約した。投与前試験６１日目のＰＰｉ濃度が正常のＰＰｉ下限（１．３３μＭ）（ＬＬＮ）未満である頻度をＣａｖｇ，ｓｓ及び治療コホートの四分位間範囲によって表にした。２５３～６８００Ｕ／Ｌの範囲のアスフォターゼアルファＣａｖｇ，ｓｓの個々の値を計算し、このＥＲの関係をグラフ上で且つ定量的に評価するために使用した。
アスフォターゼアルファＰＫＰＤデータセットは、全試験期間にわたる、合計１１４０の血清アスフォターゼアルファ濃度及び１２９３の血漿ＰＰｉ濃度を提供した２７人の患者から構成された。定量限界未満の１９８の観察があり、これは、血清アスフォターゼアルファの観察総数の１７％超を占めた。試験母集団は、年齢が１８～７７歳の範囲、体重が４８．２～１２１．３ｋｇの男性１１人及び女性１６人であった。患者の大部分（９６．３％）は、白人であった。身長、性別、年齢及び人種をデータセットに含め、完全性のために表形式で要約したが、母集団モデルにおける潜在的な共変量と見なされなかった。分析に使用した薬物ＬＯＴ情報には、ロット活性、全シアル酸含有量（ＴＳＡＣ）含有量及びバッチサイズが含まれた。
ＮＣＡ分析は、比較的長い半減期及び投与頻度が全ての用量レベルで顕著な蓄積をもたらしたことを明らかにした。各コホート内の濃度対時間プロファイルで広範囲の個体間変動が観察されたが、片対数グラフ上で見ると、全てのプロファイルが単指数関数的な低下を示すようであった。曝露の推定値（投与間隔内の最大濃度（Ｃｍａｘ）、時間ゼロから、投与間隔における最後に観察された濃度の時間までの濃度－時間曲線下の面積（ＡＵＣｌａｓｔ）及び時間ゼロから無限大までの濃度－時間曲線下の面積（ＡＵＣｉｎｆ）は、用量の増加と共に、単回投与と反復投与との間で増加した。０．５ｍｇ／ｋｇコホートでは検出下限を超える濃度が限られたため、ＡＵＣｉｎｆ、皮下投与後の見かけのクリアランス（ＣＬ／Ｆ）、皮下投与後の見かけの分布容積（Ｖｚ／Ｆ）及び終末相半減期（ｔ１／２）は評価できなかった。ＣＬ／Ｆ及びＶｚ／Ｆの幾何平均推定値は、それぞれ２．０ｍｇ／ｋｇコホートで１８．８Ｌ／日及び９９．１Ｌ、３．０ｍｇ／ｋｇコホートで２２．１Ｌ／日及び１５０Ｌであった。ｔ１／２の推定値は、３．６６～５．５４日－１の範囲の幾何平均値を有した。投与間隔内最大濃度時点の中央値の推定値（Ｔｍａｘ）は、単回及び反復投与コホートでそれぞれ１．９１～３．０及び０．７４７～１．１６日の範囲であった。単回及び反復投与のＣｍａｘ値並びに単回投与のＡＵＣｉｎｆ及びＡＵＣｌａｓｔ値に対するパワーモデルの対数形フィッティングを用いて、アスフォターゼアルファＰＫの用量比例性を評価した。
結果は、非比例性が結論付けられた単回投与Ｃｍａｘを除く全てについて決定的でなかった。単回投与のＣｍａｘパラメータについて、比例性の拒絶に対する閾値用量の比は、７．８５であった。これらのパラメータの最大比例用量比は、データセットの最大用量比１８．２と比較して１．３７～１．６９の範囲であった。
本発明者らの以前のモデリング試験において、アスフォターゼアルファは、マルチコンパートメント動態に従うことが示唆されているため、最初のモデリングは、適切なランダム効果分布を有する、一次吸収を伴う２コンパートメントモデルを用いて行った。以前の分析の全共変量モデルは、ＣＬに対するアロメトリックスケール重量、ＴＳＡＣ及び抗薬物中和抗体（ＮＡｂ）；Ｖ２、Ｖ３及びＱに対するアロメトリックスケール重量並びにＦ及びｋａに対する共変量としての製造ロットバッチサイズ（複数のバッチサイズが含まれていたため）について、事前に特定された効果を含んだ。現在の分析のための製造ロットは、２０Ｋのバッチサイズのみを含んでいるため、各ロットについて観察された原体活性も用量の直接因子としてモデルに含めたが、これは、推定された共変量効果ではなかった。基準共変量効果（７０ｋｇ、１．７ｍｏｌ／ｍｏｌ、抗薬物抗体の非存在、２０Ｋロットサイズ）に対するＰＫモデルパラメータの典型的な推定値（９５％ＣＩ）は、ＣＬ／Ｆ、見かけ（皮下）中央コンパートメントの分布容積（Ｖ２／Ｆ）、見かけ（皮下）末梢コンパートメントの分布容積（Ｖ３／Ｆ）、見かけ（皮下）コンパートメント間クリアランス（Ｑ／Ｆ）及び単回投与吸収速度定数（ｋａＳＤ）について、それぞれ１７．９（１３．７、２３．４）Ｌ／日、３６．６（０．８７６、１５３０）Ｌ、９５．７（１８．５、４９６）Ｌ、３４９０（６．４７、１．８８ｅ＋０６）Ｌ／日及び１．１０（０．６０３、２．０２）日－１であった。これらの結果は、ＮＣＡからの結果と一致し、以前の分析からの結果と幾分一致した。
アスフォターゼアルファＰＫに対する共変量因子の効果も調べた。ＣＬ／Ｆ、Ｖ２／Ｆ、Ｖ３／Ｆ及びＱ／Ｆに対する共変量の予想された影響は、ヌル効果と区別可能な各予測変数に起因する値でＣａｖｇ，ｓｓを計算することによって説明された。体重（４８．２及び１２１．３ｋｇ）、ＴＳＡＣ（１．４及び１．６ｍｏｌ／ｍｏｌ）及び抗薬物抗体の存在又は不在の極端な値間において、Ｃａｖｇ，ｓｓの予測中央値は、ＴＳＡＣの正規化した値が１．７であるとき、１７５０Ｕ／Ｌ～２７６９Ｕ／Ｌの範囲であった。基本モデルＣＬ／Ｆ（４８．８ＣＶ％）による分散推定値と比較した場合、最終モデルでは、説明されないランダム変動（％ＣＶ）は、ＣＬ／Ｆで減少した（４３．９パーセント変動係数（ＣＶ％））。この知見の臨床的意義は、既知の共変量に対する用量調節が応答変動性の意味のある減少をもたらすと期待されないことである。
最終母集団ＰＫモデルは、ＰＫデータについて良好な記述を提供した。適合度基準は、最終モデルが観察されたデータと一致すること、及び系統的バイアスが残っていないことを明らかにした。モデル評価の結果は、最終モデルの固定効果成分及びランダム効果成分の両方が観察データを同様に反映しているという証拠を提供した。
血漿ＰＰｉ応答は、アスフォターゼアルファへの曝露の増加と共に大きくなる傾向があったが、曝露四分位数にわたって広い範囲の応答のオーバーラップが認められた。このＰＰｉ応答の頻度は、アスフォターゼアルファＣａｖｇ，ｓｓの中央値である２０３０Ｕ／Ｌを超える濃度で６６．７％のプラトーを形成するようであり、２０３０Ｕ／Ｌを超えるＣａｖｇ，ｓｓの中央値の増加は、ＰＰｉ応答の頻度の増加にさらなる影響を及ぼさないようであることを示した。
ＮＣＡを使用してアスフォターゼアルファのＰＫを計算し、表１８に要約する。比較的長い半減期及び投与頻度は、全ての用量レベルで顕著な蓄積をもたらしたが、０．５ｍｇ／ｋｇコホートでは検出下限を超える濃度が限られていたため、ＡＵＣｉｎｆ、ＣＬ／Ｆ、Ｖｚ／Ｆ及びｔ１／２は評価できなかった。
Figure 2023085277000020
０．５ｍｇ／ｋｇコホートにおける濃度の大部分は、１日目の投与後に定量限界（ＢＬＱ）未満のデータを与えたが、血清アスフォターゼアルファの濃度－時間データの複合及び平均プロットは、用量の増加と共に曝露量の増加を示した。各コホート内の濃度対時間プロファイルでは広範囲の患者間変動が観察されたが、全てのプロファイルは、片対数グラフ上で見た場合、単指数関数的減少を示すようであった。
曝露の推定値（Ｃｍａｘ、ＡＵＣｌａｓｔ及びＡＵＣｉｎｆ）は、用量の増加と共に、単回投与と反復投与との間で増加した。０．５ｍｇ／ｋｇコホートでは検出下限を上回る濃度が限られたため、ＡＵＣｉｎｆ、ＣＬ／Ｆ、Ｖｚ／Ｆ及びｔ１／２は評価できなかった。ＣＬ／Ｆ及びＶｚ／Ｆの幾何平均推定値は、それぞれ２．０ｍｇ／ｋｇコホートで１８．８Ｌ／日及び９９．１Ｌ、３．０ｍｇ／ｋｇコホートで２２１Ｌ／日及び１５０Ｌであった。ｔ１／２の推定値は、３．６６～５．５４日の範囲の幾何平均値を有した。ｔｍａｘの中央値は、単回投与コホート及び反復投与コホートでそれぞれ１．９１～３．０日及び０．７４７～１．１６日の範囲であった。
連続する投与間に不規則な時間が挟まれる（すなわち週３回の投与では７日間のうちの２日の間隔が２回、３日の間隔が１回）場合、蓄積率を標準的な方法で直接評価することはできなかった。週３回の投与による蓄積の近似は、複数回の投与後６１日目の投与前濃度に対する、最初の投与の４８時間後の濃度の比を計算することによって評価した。これらの比の幾何学的平均は、３つのコホートについて３．１４～４．６８の範囲であった。フルモデルの母集団ＰＫモデルを表１９に示す。
Figure 2023085277000021
アスフォターゼアルファの母集団ＰＫは、小児発症ＨＰＰ成人患者を対象として、吸収遅延時間を有する一次吸収を伴う２コンパートメントモデルによって記載された。ＣＬ／Ｆ、Ｖ２／Ｆ、Ｖ３／Ｆ、Ｑ／Ｆ及びｋａＳＤに対して、それぞれ１７．９（１３．７、２３．４）Ｌ／ｈｒ、３６．６（０．８７６、１５３０）Ｌ、９５．７（１８．５、４９６）Ｌ、３４９０（６．４７、１．８８ｅ＋０６）Ｌ／日及び１．１０（０．６０３、２．０２）日－１の典型的な母集団パラメータ推定値（９５％ＣＩ）が推定された。ＣＬ／Ｆ及びＶｚ／Ｆの推定値は、ＮＣＡと母集団解析間で一致した。
母集団で説明のつかないランダム変動を予測する個体特異的共変量因子には、ＣＬ／Ｆ、Ｖ２／Ｆ、Ｖ３／Ｆ及びＱ／Ｆに対するアロメトリースケールの重量効果並びにＣＬ／Ｆに対する抗体状態及びＴＳＡＣの効果が含まれた。単回投与及び反復投与の効果もｋａに含まれる。
アスフォターゼアルファ曝露とＰＰｉ応答との間の母集団ＰＫＰＤの関係を、予測されたＣａｖｇ，ｓｓの分位数によって表にし、グラフ上で調べた。血漿ＰＰｉ応答は、用量及びアスフォターゼアルファへの曝露の増加と共に増大する傾向があったが、曝露四分位数にわたって広い範囲の応答のオーバーラップが認められた（図２１及び表２０）。
Figure 2023085277000022
ＰＰｉ応答の頻度は、アスフォターゼアルファＣａｖｇ，ｓｓの中央値である２０３０Ｕ／Ｌを超える濃度で６６．７％のプラトーを形成するようであった（表２１）。
Figure 2023085277000023
ＡＡ－ＨＰＰ－２０８の成人患者における２ｍｇ／ｋｇ×３日／週投与の予測Ｃａｖｇ，ｓｓの中央値（１８１０Ｕ／Ｌ）は、この閾値濃度に近づくが、ＰＰｉ反応を示した患者の頻度（２０％）は、この用量における成人母集団の先の予測（１７．６％）と一致する。まとめると、これらの結果は、小児表現型の成人ＨＰＰ患者に対する２ｍｇ／ｋｇ×３日／週の投与レジメンを支持する。
小児発症ＨＰＰ成人患者からのこれらのデータから、青年ＨＰＰ患者における２ｍｇ／ｋｇ×３日／週の投与レジメンの有効性が確認される。ＡＡ－ＨＰＰ－２０８試験から得られた利用できる用量範囲及びＰＫ／ＰＤデータは、以前に検査を受けていない患者集団である１８歳以上の成人ＨＰＰ患者に対する有効な投与量を示し、小児発症ＨＰＰ成人患者がアスフォターゼアルファ治療の恩恵を受けることを確認する。
さらに、小児患者及び小児発症ＨＰＰ成人患者でアスフォターゼアルファの治療有効性を確認する能力にかなりの差がある。例えば、小児患者では、小児患者の骨格変化を評価するために、Ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｉｃ Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｎｇｅ（ＲＧＩ－Ｃ）スケールを用いて、アスフォターゼアルファの有効性を決定することができる。ＲＧＩ－Ｃスケールは、オープンな成長板を有する患者（すなわち小児患者）のみを評価することができるため、ＨＰＰでは限られる。従って、ＲＧＩ－Ｃスケールは、小児発症ＨＰＰ成人患者に対する有効性評価に使用できない。それにもかかわらず、ＡＡ－ＨＰＰ－２０８試験から得られたＰＫ／ＰＤ／有効性の結果は、これらの成人患者に対するアスフォターゼアルファの治療有効性を確認する。
最後に、ＡＡ－ＨＰＰ－２０８試験前に、アスフォターゼアルファ治療が小児発症ＨＰＰ成人患者に十分忍容されるかどうかについてのデータは示されていない。これらのデータは、アスフォターゼアルファ療法の副作用が小児患者対青年及び成人患者母集団で異なるが、アスフォターゼアルファ療法は、最小の副作用で両方の群によって十分に認容されることを確認する。
他の実施形態
上記の本明細書で言及された全ての刊行物、特許及び特許出願は、あたかも個々の刊行物、特許又は特許出願のそれぞれが、その全体を参照により組み込むことが具体的且つ個々に示されたかのような程度と同程度に参照により本明細書に組み込まれる。本発明の記載された方法、医薬組成物及びキットの種々の改変形態及び変形形態は、特許請求される本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく当業者に明らかであろう。特定の実施形態に関連して本開示を説明してきたが、さらなる修正形態が可能であること、及び特許請求される本発明がそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されるであろう。
SEQUENCE LISTING

<110> Alexion Pharmaceuticals, Inc.

<120> METHODS FOR TREATING HYPOPHOSPHATASIA (HPP) IN ADULTS AND
ADOLESCENTS

<130> PA23-104

<150> US 62/480,213
<151> 2017-03-31

<150> US 62/502,255
<151> 2017-05-05

<150> US 62/643,953
<151> 2018-03-16

<160> 20

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1
<211> 726
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic Construct

<400> 1

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Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln Leu His His Asn Pro
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Asp Asp Asp Asp Asp Asp
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Arg Lys Asn Pro Lys Gly Phe Phe Leu Leu Val Glu Gly Gly Arg Ile
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Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Val
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Val Glu Met Asp Arg Ala Ile Gly Gln Ala Gly Ser Leu Thr Ser Ser
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Met Leu Ser Asp Thr Asp Lys Lys Pro Phe Thr Ala Ile Leu Tyr Gly
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Met Val Asp Tyr Ala His Asn Asn Tyr Gln Ala Gln Ser Ala Val Pro
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Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Val
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<210> 8
<211> 524
<212> PRT
<213> Rattus norvegicus

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Leu Pro Leu Ala Leu Phe Pro Leu Arg Thr Leu Phe
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<210> 9
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<212> PRT
<213> Canis lupus familiaris

<400> 9

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130 135 140


Thr Arg Val Asn His Ala Thr Pro Ser Ala Ala Tyr Ala His Ser Ala
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Asp Arg Asp Trp Tyr Ser Asp Asn Glu Met Pro Pro Glu Ala Leu Ser
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385 390 395 400


Val Val Gly Gly Glu Arg Glu Asn Val Ser Met Val Asp Tyr Ala His
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435 440 445


Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Ile Pro His Val Met Ala Tyr
450 455 460


Ala Ala Cys Ile Gly Ala Asn Gln Asp His Cys Ala Ser Ala Ser Ser
465 470 475 480


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485 490 495


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<212> PRT
<213> Sus scrofa

<400> 10

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Leu Leu Leu Ala Leu Leu Pro Leu Gly Ile Leu Phe
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<210> 11
<211> 524
<212> PRT
<213> Mus musculus

<400> 11

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Asn Glu Val Thr Ser Ile Leu Arg Trp Ala Lys Asp Ala Gly Lys Ser
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165 170 175


Ala Tyr Ala His Ser Ala Asp Arg Asp Trp Tyr Ser Asp Asn Glu Met
180 185 190


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195 200 205


Met His Asn Ile Lys Asp Ile Asp Val Ile Met Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Tyr Pro Lys Asn Arg Thr Asp Val Glu Tyr Glu Leu Asp Glu
225 230 235 240


Lys Ala Arg Gly Thr Arg Leu Asp Gly Leu Asp Leu Ile Ser Ile Trp
245 250 255


Lys Ser Phe Lys Pro Arg His Lys His Ser His Tyr Val Trp Asn Arg
260 265 270


Thr Glu Leu Leu Ala Leu Asp Pro Ser Arg Val Asp Tyr Leu Leu Gly
275 280 285


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Thr Asp Pro Ser Leu Ser Glu Met Val Glu Val Ala Leu Arg Ile Leu
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Thr Lys Asn Leu Lys Gly Phe Phe Leu Leu Val Glu Gly Gly Arg Ile
325 330 335


Asp His Gly His His Glu Gly Lys Ala Lys Gln Ala Leu His Glu Ala
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355 360 365


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435 440 445


Leu Arg His Glu Thr His Gly Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Lys
450 455 460


Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Ile
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Pro His Val Met Ala Tyr Ala Ser Cys Ile Gly Ala Asn Leu Asp His
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Cys Ala Trp Ala Gly Ser Gly Ser Ala Pro Ser Pro Gly Ala Leu Leu
500 505 510


Leu Pro Leu Ala Val Leu Ser Leu Arg Thr Leu Phe
515 520


<210> 12
<211> 524
<212> PRT
<213> Bos taurus

<400> 12

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Ser Leu Val Pro Glu Lys Glu Lys Asp Pro Lys Tyr Trp Arg Asp Gln
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Asn Glu Val Thr Ser Ile Leu Arg Trp Ala Lys Asp Ala Gly Lys Ser
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Ser Tyr Ala His Ser Ala Asp Arg Asp Trp Tyr Ser Asp Asn Glu Met
180 185 190


Pro Pro Glu Ala Leu Ser Gln Gly Cys Lys Asp Ile Ala Tyr Gln Leu
195 200 205


Met His Asn Ile Lys Asp Ile Glu Val Ile Met Gly Gly Gly Arg Lys
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Tyr Met Phe Pro Lys Asn Arg Thr Asp Val Glu Tyr Glu Leu Asp Glu
225 230 235 240


Lys Ala Arg Gly Thr Arg Leu Asp Gly Leu Asn Leu Ile Asp Ile Trp
245 250 255


Lys Ser Phe Lys Pro Lys His Lys His Ser His Tyr Val Trp Asn Arg
260 265 270


Thr Asp Leu Leu Ala Leu Asp Pro His Ser Val Asp Tyr Leu Leu Gly
275 280 285


Leu Phe Glu Pro Gly Asp Met Gln Tyr Glu Leu Asn Arg Asn Asn Ala
290 295 300


Thr Asp Pro Ser Leu Ser Glu Met Val Glu Met Ala Ile Arg Ile Leu
305 310 315 320


Asn Lys Asn Pro Lys Gly Phe Phe Leu Leu Val Glu Gly Gly Arg Ile
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Asp His Gly His His Glu Gly Lys Ala Lys Gln Ala Leu His Glu Ala
340 345 350


Val Glu Met Asp Gln Ala Ile Gly Gln Ala Gly Ala Met Thr Ser Val
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385 390 395 400


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405 410 415


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420 425 430


Met Val Asp Tyr Ala His Asn Asn Tyr Gln Ala Gln Ser Ala Val Pro
435 440 445


Leu Arg His Glu Thr His Gly Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Lys
450 455 460


Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Ile
465 470 475 480


Pro His Val Met Ala Tyr Ala Ala Cys Ile Gly Ala Asn Arg Asp His
485 490 495


Cys Ala Ser Ala Ser Ser Ser Gly Ser Pro Ser Pro Gly Pro Leu Leu
500 505 510


Leu Leu Leu Ala Leu Leu Pro Leu Gly Ser Leu Phe
515 520


<210> 13
<211> 524
<212> PRT
<213> Bos taurus

<400> 13

Met Ile Ser Pro Phe Leu Leu Leu Ala Ile Gly Thr Cys Phe Ala Ser
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Ser Leu Val Pro Glu Lys Glu Lys Asp Pro Lys Tyr Trp Arg Asp Gln
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Asn Val Ala Lys Asn Val Ile Met Phe Leu Gly Asp Gly Met Gly Val
50 55 60


Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln Leu His His Ser
65 70 75 80


Pro Gly Glu Glu Thr Lys Leu Glu Met Asp Lys Phe Pro Tyr Val Ala
85 90 95


Leu Ser Lys Thr Tyr Asn Thr Asn Ala Gln Val Pro Asp Ser Ala Gly
100 105 110


Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Ala Asn Glu Gly Thr Val
115 120 125


Gly Val Ser Ala Ala Thr Gln Arg Ser Gln Cys Asn Thr Thr Gln Gly
130 135 140


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145 150 155 160


Val Gly Ile Val Thr Thr Thr Arg Val Asn His Ala Thr Pro Ser Ala
165 170 175


Ser Tyr Ala His Ser Ala Asp Arg Asp Trp Tyr Ser Asp Asn Glu Met
180 185 190


Pro Pro Glu Ala Leu Ser Gln Gly Cys Lys Asp Ile Ala Tyr Gln Leu
195 200 205


Met His Asn Ile Lys Asp Ile Glu Val Ile Met Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Phe Pro Lys Asn Arg Thr Asp Val Glu Tyr Glu Leu Asp Glu
225 230 235 240


Lys Ala Arg Gly Thr Arg Leu Asp Gly Leu Asn Leu Ile Asp Ile Trp
245 250 255


Lys Ser Phe Lys Pro Lys His Lys His Ser His Tyr Val Trp Asn Arg
260 265 270


Thr Asp Leu Leu Ala Leu Asp Pro His Ser Val Asp Tyr Leu Leu Gly
275 280 285


Leu Phe Glu Pro Gly Asp Met Gln Tyr Glu Leu Asn Arg Asn Asn Ala
290 295 300


Thr Asp Pro Ser Leu Ser Glu Met Val Glu Met Ala Ile Arg Ile Leu
305 310 315 320


Asn Lys Asn Pro Lys Gly Phe Phe Leu Leu Val Glu Gly Gly Arg Ile
325 330 335


Asp His Gly His His Glu Gly Lys Ala Lys Gln Ala Leu His Glu Ala
340 345 350


Val Glu Met Asp Gln Ala Ile Gly Gln Ala Gly Ala Met Thr Ser Val
355 360 365


Glu Asp Thr Leu Thr Val Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe Thr
370 375 380


Phe Gly Gly Tyr Thr Pro Arg Gly Asn Ser Ile Phe Gly Leu Ala Pro
385 390 395 400


Met Val Ser Asp Thr Asp Lys Lys Pro Phe Thr Ala Ile Leu Tyr Gly
405 410 415


Asn Gly Pro Gly Tyr Lys Val Val Gly Gly Glu Arg Glu Asn Val Ser
420 425 430


Met Val Asp Tyr Ala His Asn Asn Tyr Gln Ala Gln Ser Ala Val Pro
435 440 445


Leu Arg His Glu Thr His Gly Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Lys
450 455 460


Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Ile
465 470 475 480


Pro His Val Met Ala Tyr Ala Ala Cys Ile Gly Ala Asn Arg Asp His
485 490 495


Cys Ala Ser Ala Ser Ser Ser Gly Ser Pro Ser Pro Gly Pro Leu Leu
500 505 510


Leu Leu Leu Ala Leu Leu Pro Leu Gly Ser Leu Phe
515 520


<210> 14
<211> 124
<212> PRT
<213> Bos taurus

<400> 14

Asp Pro Lys Tyr Trp Arg Asp Gln Ala Gln Gln Thr Leu Lys Asn Ala
1 5 10 15


Leu Gly Leu Gln Lys Leu Asn Thr Lys Val Ala Lys Asn Val Ile Leu
20 25 30


Phe Leu Gly Asp Gly Met Gly Val Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile
35 40 45


Leu Lys Gly Gln Leu His His Asn Pro Gly Glu Glu Thr Arg Leu Glu
50 55 60


Met Asp Lys Phe Pro Phe Val Ala Leu Ser Lys Thr Tyr Asn Thr Asn
65 70 75 80


Ala Gln Val Pro Asp Ser Ala Gly Thr Ala Pro His Pro Val Arg Val
85 90 95


Lys Ala Met Arg Ala Pro Trp Gly Glu Pro His Gln Arg Gln Cys Asn
100 105 110


Thr Arg Arg Ala Thr Ser Thr His Leu Leu Ala Gly
115 120


<210> 15
<211> 524
<212> PRT
<213> Felis catus

<400> 15

Met Ile Ser Pro Phe Leu Val Leu Ala Ile Gly Thr Cys Leu Thr Asn
1 5 10 15


Ser Leu Val Pro Glu Lys Glu Lys Asp Pro Lys Tyr Trp Arg Asp Gln
20 25 30


Ala Gln Gln Thr Leu Lys Asn Ala Leu Arg Leu Gln Lys Leu Asn Thr
35 40 45


Asn Val Val Lys Asn Val Ile Met Phe Leu Gly Asp Gly Met Gly Val
50 55 60


Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln Leu His His Asn
65 70 75 80


Pro Gly Glu Glu Thr Arg Leu Glu Met Asp Lys Phe Pro Tyr Val Ala
85 90 95


Leu Ser Lys Thr Tyr Asn Thr Asn Ala Gln Val Pro Asp Ser Ala Gly
100 105 110


Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Ala Asn Glu Gly Thr Val
115 120 125


Gly Val Ser Ala Ala Thr Gln Arg Thr Gln Cys Asn Thr Thr Gln Gly
130 135 140


Asn Glu Val Thr Ser Ile Leu Arg Trp Ala Lys Asp Ser Gly Lys Ser
145 150 155 160


Val Gly Ile Val Thr Thr Thr Arg Val Asn His Ala Thr Pro Ser Ala
165 170 175


Ala Tyr Ala His Ser Ala Asp Arg Asp Trp Tyr Ser Asp Asn Glu Met
180 185 190


Pro Pro Glu Ala Leu Ser Gln Gly Cys Lys Asp Ile Ala Tyr Gln Leu
195 200 205


Met His Asn Val Arg Asp Ile Glu Val Ile Met Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Phe Pro Lys Asn Arg Thr Asp Val Glu Tyr Glu Met Asp Glu
225 230 235 240


Lys Ala Arg Gly Thr Arg Leu Asp Gly Leu Asn Leu Val Asp Ile Trp
245 250 255


Lys Ser Phe Lys Pro Arg His Lys His Ser His Tyr Val Trp Asn Arg
260 265 270


Thr Glu Leu Leu Thr Leu Asp Pro Tyr Gly Val Asp Tyr Leu Leu Gly
275 280 285


Leu Phe Glu Pro Gly Asp Met Gln Tyr Glu Leu Asn Arg Asn Ser Thr
290 295 300


Thr Asp Pro Ser Leu Ser Glu Met Val Glu Ile Ala Ile Lys Ile Leu
305 310 315 320


Ser Lys Asn Pro Lys Gly Phe Phe Leu Leu Val Glu Gly Gly Arg Ile
325 330 335


Asp His Gly His His Glu Gly Lys Ala Lys Gln Ala Leu His Glu Ala
340 345 350


Val Glu Met Asp Gln Ala Ile Gly Arg Ala Gly Ala Met Thr Ser Val
355 360 365


Glu Asp Thr Leu Thr Ile Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe Thr
370 375 380


Phe Gly Gly Tyr Thr Pro Arg Gly Asn Ser Ile Phe Gly Leu Ala Pro
385 390 395 400


Met Val Ser Asp Thr Asp Lys Lys Pro Phe Thr Ser Ile Leu Tyr Gly
405 410 415


Asn Gly Pro Gly Tyr Lys Val Val Gly Gly Glu Arg Glu Asn Val Ser
420 425 430


Met Val Asp Tyr Ala His Asn Asn Tyr Gln Ala Gln Ser Ala Val Pro
435 440 445


Leu Arg His Glu Thr His Gly Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Lys
450 455 460


Gly Pro Met Ala His Leu Leu His Gly Val His Glu Gln Asn Tyr Ile
465 470 475 480


Pro His Val Met Ala Tyr Ala Ala Cys Ile Gly Ala Asn Leu Asp His
485 490 495


Cys Ala Ser Ala Ser Ser Ala Gly Gly Pro Ser Pro Gly Pro Leu Phe
500 505 510


Leu Leu Leu Ala Leu Pro Ser Leu Gly Ile Leu Phe
515 520


<210> 16
<211> 532
<212> PRT
<213> Homo sapiens

<400> 16

Met Gln Gly Pro Trp Val Leu Leu Leu Leu Gly Leu Arg Leu Gln Leu
1 5 10 15


Ser Leu Gly Ile Ile Pro Val Glu Glu Glu Asn Pro Asp Phe Trp Asn
20 25 30


Arg Gln Ala Ala Glu Ala Leu Gly Ala Ala Lys Lys Leu Gln Pro Ala
35 40 45


Gln Thr Ala Ala Lys Asn Leu Ile Ile Phe Leu Gly Asp Gly Met Gly
50 55 60


Val Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln Lys Lys Asp
65 70 75 80


Lys Leu Gly Pro Glu Thr Phe Leu Ala Met Asp Arg Phe Pro Tyr Val
85 90 95


Ala Leu Ser Lys Thr Tyr Ser Val Asp Lys His Val Pro Asp Ser Gly
100 105 110


Ala Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Gly Asn Phe Gln Thr
115 120 125


Ile Gly Leu Ser Ala Ala Ala Arg Phe Asn Gln Cys Asn Thr Thr Arg
130 135 140


Gly Asn Glu Val Ile Ser Val Met Asn Arg Ala Lys Lys Ala Gly Lys
145 150 155 160


Ser Val Gly Val Val Thr Thr Thr Arg Val Gln His Ala Ser Pro Ala
165 170 175


Gly Ala Tyr Ala His Thr Val Asn Arg Asn Trp Tyr Ser Asp Ala Asp
180 185 190


Val Pro Ala Ser Ala Arg Gln Glu Gly Cys Gln Asp Ile Ala Thr Gln
195 200 205


Leu Ile Ser Asn Met Asp Ile Asp Val Ile Leu Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Phe Pro Met Gly Thr Pro Asp Pro Glu Tyr Pro Asp Asp Tyr
225 230 235 240


Ser Gln Gly Gly Thr Arg Leu Asp Gly Lys Asn Leu Val Gln Glu Trp
245 250 255


Leu Ala Lys His Gln Gly Ala Arg Tyr Val Trp Asn Arg Thr Glu Leu
260 265 270


Leu Gln Ala Ser Leu Asp Pro Ser Val Thr His Leu Met Gly Leu Phe
275 280 285


Glu Pro Gly Asp Met Lys Tyr Glu Ile His Arg Asp Ser Thr Leu Asp
290 295 300


Pro Ser Leu Met Glu Met Thr Glu Ala Ala Leu Leu Leu Leu Ser Arg
305 310 315 320


Asn Pro Arg Gly Phe Phe Leu Phe Val Glu Gly Gly Arg Ile Asp His
325 330 335


Gly His His Glu Ser Arg Ala Tyr Arg Ala Leu Thr Glu Thr Ile Met
340 345 350


Phe Asp Asp Ala Ile Glu Arg Ala Gly Gln Leu Thr Ser Glu Glu Asp
355 360 365


Thr Leu Ser Leu Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe Ser Phe Gly
370 375 380


Gly Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ser Ile Phe Gly Leu Ala Pro Gly Lys
385 390 395 400


Ala Arg Asp Arg Lys Ala Tyr Thr Val Leu Leu Tyr Gly Asn Gly Pro
405 410 415


Gly Tyr Val Leu Lys Asp Gly Ala Arg Pro Asp Val Thr Glu Ser Glu
420 425 430


Ser Gly Ser Pro Glu Tyr Arg Gln Gln Ser Ala Val Pro Leu Asp Gly
435 440 445


Glu Thr His Ala Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Arg Gly Pro Gln
450 455 460


Ala His Leu Val His Gly Val Gln Glu Gln Thr Phe Ile Ala His Val
465 470 475 480


Met Ala Phe Ala Ala Cys Leu Glu Pro Tyr Thr Ala Cys Asp Leu Ala
485 490 495


Pro Arg Ala Gly Thr Thr Asp Ala Ala His Pro Gly Pro Ser Val Val
500 505 510


Pro Ala Leu Leu Pro Leu Leu Ala Gly Thr Leu Leu Leu Leu Gly Thr
515 520 525


Ala Thr Ala Pro
530


<210> 17
<211> 535
<212> PRT
<213> Homo sapiens

<400> 17

Met Leu Gly Pro Cys Met Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Gly Leu Arg
1 5 10 15


Leu Gln Leu Ser Leu Gly Ile Ile Pro Val Glu Glu Glu Asn Pro Asp
20 25 30


Phe Trp Asn Arg Glu Ala Ala Glu Ala Leu Gly Ala Ala Lys Lys Leu
35 40 45


Gln Pro Ala Gln Thr Ala Ala Lys Asn Leu Ile Ile Phe Leu Gly Asp
50 55 60


Gly Met Gly Val Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln
65 70 75 80


Lys Lys Asp Lys Leu Gly Pro Glu Ile Pro Leu Ala Met Asp Arg Phe
85 90 95


Pro Tyr Val Ala Leu Ser Lys Thr Tyr Asn Val Asp Lys His Val Pro
100 105 110


Asp Ser Gly Ala Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Gly Asn
115 120 125


Phe Gln Thr Ile Gly Leu Ser Ala Ala Ala Arg Phe Asn Gln Cys Asn
130 135 140


Thr Thr Arg Gly Asn Glu Val Ile Ser Val Met Asn Arg Ala Lys Lys
145 150 155 160


Ala Gly Lys Ser Val Gly Val Val Thr Thr Thr Arg Val Gln His Ala
165 170 175


Ser Pro Ala Gly Thr Tyr Ala His Thr Val Asn Arg Asn Trp Tyr Ser
180 185 190


Asp Ala Asp Val Pro Ala Ser Ala Arg Gln Glu Gly Cys Gln Asp Ile
195 200 205


Ala Thr Gln Leu Ile Ser Asn Met Asp Ile Asp Val Ile Leu Gly Gly
210 215 220


Gly Arg Lys Tyr Met Phe Arg Met Gly Thr Pro Asp Pro Glu Tyr Pro
225 230 235 240


Asp Asp Tyr Ser Gln Gly Gly Thr Arg Leu Asp Gly Lys Asn Leu Val
245 250 255


Gln Glu Trp Leu Ala Lys Arg Gln Gly Ala Arg Tyr Val Trp Asn Arg
260 265 270


Thr Glu Leu Met Gln Ala Ser Leu Asp Pro Ser Val Thr His Leu Met
275 280 285


Gly Leu Phe Glu Pro Gly Asp Met Lys Tyr Glu Ile His Arg Asp Ser
290 295 300


Thr Leu Asp Pro Ser Leu Met Glu Met Thr Glu Ala Ala Leu Arg Leu
305 310 315 320


Leu Ser Arg Asn Pro Arg Gly Phe Phe Leu Phe Val Glu Gly Gly Arg
325 330 335


Ile Asp His Gly His His Glu Ser Arg Ala Tyr Arg Ala Leu Thr Glu
340 345 350


Thr Ile Met Phe Asp Asp Ala Ile Glu Arg Ala Gly Gln Leu Thr Ser
355 360 365


Glu Glu Asp Thr Leu Ser Leu Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe
370 375 380


Ser Phe Gly Gly Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ser Ile Phe Gly Leu Ala
385 390 395 400


Pro Gly Lys Ala Arg Asp Arg Lys Ala Tyr Thr Val Leu Leu Tyr Gly
405 410 415


Asn Gly Pro Gly Tyr Val Leu Lys Asp Gly Ala Arg Pro Asp Val Thr
420 425 430


Glu Ser Glu Ser Gly Ser Pro Glu Tyr Arg Gln Gln Ser Ala Val Pro
435 440 445


Leu Asp Glu Glu Thr His Ala Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Arg
450 455 460


Gly Pro Gln Ala His Leu Val His Gly Val Gln Glu Gln Thr Phe Ile
465 470 475 480


Ala His Val Met Ala Phe Ala Ala Cys Leu Glu Pro Tyr Thr Ala Cys
485 490 495


Asp Leu Ala Pro Pro Ala Gly Thr Thr Asp Ala Ala His Pro Gly Arg
500 505 510


Ser Val Val Pro Ala Leu Leu Pro Leu Leu Ala Gly Thr Leu Leu Leu
515 520 525


Leu Glu Thr Ala Thr Ala Pro
530 535


<210> 18
<211> 532
<212> PRT
<213> Homo sapiens

<400> 18

Met Gln Gly Pro Trp Val Leu Leu Leu Leu Gly Leu Arg Leu Gln Leu
1 5 10 15


Ser Leu Gly Ile Ile Pro Val Glu Glu Glu Asn Pro Asp Phe Trp Asn
20 25 30


Arg Gln Ala Ala Glu Ala Leu Gly Ala Ala Lys Lys Leu Gln Pro Ala
35 40 45


Gln Thr Ala Ala Lys Asn Leu Ile Ile Phe Leu Gly Asp Gly Met Gly
50 55 60


Val Ser Thr Val Thr Ala Ala Arg Ile Leu Lys Gly Gln Lys Lys Asp
65 70 75 80


Lys Leu Gly Pro Glu Thr Phe Leu Ala Met Asp Arg Phe Pro Tyr Val
85 90 95


Ala Leu Ser Lys Thr Tyr Ser Val Asp Lys His Val Pro Asp Ser Gly
100 105 110


Ala Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Gly Asn Phe Gln Thr
115 120 125


Ile Gly Leu Ser Ala Ala Ala Arg Phe Asn Gln Cys Asn Thr Thr Arg
130 135 140


Gly Asn Glu Val Ile Ser Val Met Asn Arg Ala Lys Lys Ala Gly Lys
145 150 155 160


Ser Val Gly Val Val Thr Thr Thr Arg Val Gln His Ala Ser Pro Ala
165 170 175


Gly Ala Tyr Ala His Thr Val Asn Arg Asn Trp Tyr Ser Asp Ala Asp
180 185 190


Val Pro Ala Ser Ala Arg Gln Glu Gly Cys Gln Asp Ile Ala Thr Gln
195 200 205


Leu Ile Ser Asn Met Asp Ile Asp Val Ile Leu Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Phe Pro Met Gly Thr Pro Asp Pro Glu Tyr Pro Asp Asp Tyr
225 230 235 240


Ser Gln Gly Gly Thr Arg Leu Asp Gly Lys Asn Leu Val Gln Glu Trp
245 250 255


Leu Ala Lys His Gln Gly Ala Arg Tyr Val Trp Asn Arg Thr Glu Leu
260 265 270


Leu Gln Ala Ser Leu Asp Pro Ser Val Thr His Leu Met Gly Leu Phe
275 280 285


Glu Pro Gly Asp Met Lys Tyr Glu Ile His Arg Asp Ser Thr Leu Asp
290 295 300


Pro Ser Leu Met Glu Met Thr Glu Ala Ala Leu Leu Leu Leu Ser Arg
305 310 315 320


Asn Pro Arg Gly Phe Phe Leu Phe Val Glu Gly Gly Arg Ile Asp His
325 330 335


Gly His His Glu Ser Arg Ala Tyr Arg Ala Leu Thr Glu Thr Ile Met
340 345 350


Phe Asp Asp Ala Ile Glu Arg Ala Gly Gln Leu Thr Ser Glu Glu Asp
355 360 365


Thr Leu Ser Leu Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe Ser Phe Gly
370 375 380


Gly Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ser Ile Phe Gly Leu Ala Pro Gly Lys
385 390 395 400


Ala Arg Asp Arg Lys Ala Tyr Thr Val Leu Leu Tyr Gly Asn Gly Pro
405 410 415


Gly Tyr Val Leu Lys Asp Gly Ala Arg Pro Asp Val Thr Glu Ser Glu
420 425 430


Ser Gly Ser Pro Glu Tyr Arg Gln Gln Ser Ala Val Pro Leu Asp Gly
435 440 445


Glu Thr His Ala Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Arg Gly Pro Gln
450 455 460


Ala His Leu Val His Gly Val Gln Glu Gln Thr Phe Ile Ala His Val
465 470 475 480


Met Ala Phe Ala Ala Cys Leu Glu Pro Tyr Thr Ala Cys Asp Leu Ala
485 490 495


Pro Arg Ala Gly Thr Thr Asp Ala Ala His Pro Gly Pro Ser Val Val
500 505 510


Pro Ala Leu Leu Pro Leu Leu Ala Gly Thr Leu Leu Leu Leu Gly Thr
515 520 525


Ala Thr Ala Pro
530


<210> 19
<211> 528
<212> PRT
<213> Homo sapiens

<400> 19

Met Gln Gly Pro Trp Val Leu Leu Leu Leu Gly Leu Arg Leu Gln Leu
1 5 10 15


Ser Leu Gly Val Ile Pro Ala Glu Glu Glu Asn Pro Ala Phe Trp Asn
20 25 30


Arg Gln Ala Ala Glu Ala Leu Asp Ala Ala Lys Lys Leu Gln Pro Ile
35 40 45


Gln Lys Val Ala Lys Asn Leu Ile Leu Phe Leu Gly Asp Gly Leu Gly
50 55 60


Val Pro Thr Val Thr Ala Thr Arg Ile Leu Lys Gly Gln Lys Asn Gly
65 70 75 80


Lys Leu Gly Pro Glu Thr Pro Leu Ala Met Asp Arg Phe Pro Tyr Leu
85 90 95


Ala Leu Ser Lys Thr Tyr Asn Val Asp Arg Gln Val Pro Asp Ser Ala
100 105 110


Ala Thr Ala Thr Ala Tyr Leu Cys Gly Val Lys Ala Asn Phe Gln Thr
115 120 125


Ile Gly Leu Ser Ala Ala Ala Arg Phe Asn Gln Cys Asn Thr Thr Arg
130 135 140


Gly Asn Glu Val Ile Ser Val Met Asn Arg Ala Lys Gln Ala Gly Lys
145 150 155 160


Ser Val Gly Val Val Thr Thr Thr Arg Val Gln His Ala Ser Pro Ala
165 170 175


Gly Thr Tyr Ala His Thr Val Asn Arg Asn Trp Tyr Ser Asp Ala Asp
180 185 190


Met Pro Ala Ser Ala Arg Gln Glu Gly Cys Gln Asp Ile Ala Thr Gln
195 200 205


Leu Ile Ser Asn Met Asp Ile Asp Val Ile Leu Gly Gly Gly Arg Lys
210 215 220


Tyr Met Phe Pro Met Gly Thr Pro Asp Pro Glu Tyr Pro Ala Asp Ala
225 230 235 240


Ser Gln Asn Gly Ile Arg Leu Asp Gly Lys Asn Leu Val Gln Glu Trp
245 250 255


Leu Ala Lys His Gln Gly Ala Trp Tyr Val Trp Asn Arg Thr Glu Leu
260 265 270


Met Gln Ala Ser Leu Asp Gln Ser Val Thr His Leu Met Gly Leu Phe
275 280 285


Glu Pro Gly Asp Thr Lys Tyr Glu Ile His Arg Asp Pro Thr Leu Asp
290 295 300


Pro Ser Leu Met Glu Met Thr Glu Ala Ala Leu Arg Leu Leu Ser Arg
305 310 315 320


Asn Pro Arg Gly Phe Tyr Leu Phe Val Glu Gly Gly Arg Ile Asp His
325 330 335


Gly His His Glu Gly Val Ala Tyr Gln Ala Leu Thr Glu Ala Val Met
340 345 350


Phe Asp Asp Ala Ile Glu Arg Ala Gly Gln Leu Thr Ser Glu Glu Asp
355 360 365


Thr Leu Thr Leu Val Thr Ala Asp His Ser His Val Phe Ser Phe Gly
370 375 380


Gly Tyr Thr Leu Arg Gly Ser Ser Ile Phe Gly Leu Ala Pro Ser Lys
385 390 395 400


Ala Gln Asp Ser Lys Ala Tyr Thr Ser Ile Leu Tyr Gly Asn Gly Pro
405 410 415


Gly Tyr Val Phe Asn Ser Gly Val Arg Pro Asp Val Asn Glu Ser Glu
420 425 430


Ser Gly Ser Pro Asp Tyr Gln Gln Gln Ala Ala Val Pro Leu Ser Ser
435 440 445


Glu Thr His Gly Gly Glu Asp Val Ala Val Phe Ala Arg Gly Pro Gln
450 455 460


Ala His Leu Val His Gly Val Gln Glu Gln Ser Phe Val Ala His Val
465 470 475 480


Met Ala Phe Ala Ala Cys Leu Glu Pro Tyr Thr Ala Cys Asp Leu Ala
485 490 495


Pro Pro Ala Cys Thr Thr Asp Ala Ala His Pro Val Ala Ala Ser Leu
500 505 510


Pro Leu Leu Ala Gly Thr Leu Leu Leu Leu Gly Ala Ser Ala Ala Pro
515 520 525


<210> 20
<211> 227
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic Construct

<400> 20

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
1 5 10 15


Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
20 25 30


Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
35 40 45


Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
50 55 60


His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
65 70 75 80


Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
85 90 95


Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
100 105 110


Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
115 120 125


Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
130 135 140


Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
145 150 155 160


Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
165 170 175


Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
180 185 190


Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
195 200 205


His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
210 215 220


Pro Gly Lys
225
他の実施形態
上記の本明細書で言及された全ての刊行物、特許及び特許出願は、あたかも個々の刊行物、特許又は特許出願のそれぞれが、その全体を参照により組み込むことが具体的且つ個々に示されたかのような程度と同程度に参照により本明細書に組み込まれる。本発明の記載された方法、医薬組成物及びキットの種々の改変形態及び変形形態は、特許請求される本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく当業者に明らかであろう。特定の実施形態に関連して本開示を説明してきたが、さらなる修正形態が可能であること、及び特許請求される本発明がそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されるであろう。
本発明はまた、以下の態様に関する。
［１］ 成人低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）の少なくとも１つの症状を有するとして特徴付けられる、約１８歳以上の治療未経験の小児発症ＨＰＰ患者のＨＰＰを治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｓＡＬＰの投与は、以下：
（ｉ）前記患者からの血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した少なくとも約１μＭの統計学的に有意な減少；
（ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のピリドキサール５'－リン酸（ＰＬＰ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び
（ｉｉｉ）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）によって評価される前記患者の歩行距離の、投与を受けていない前記患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加
のうち１つ以上をもたらす、方法。
［２］ 前記治療期間は、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年、又は前記患者の生涯、特に少なくとも６週間である、上記［１］に記載の方法。
［３］ 前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の前記減少、前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の前記減少、及び／又は前記患者の前記増加後の前記歩行距離は、前記治療期間中に持続される、上記［１］又は［２］に記載の方法。
［４］ 前記患者は、少なくとも約２μＭのＰＰｉ血漿濃度の減少を有する、上記［１］～［３］のいずれかに記載の方法。
［５］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約６μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有する、上記［１］～［４］のいずれかに記載の方法。
［６］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有する、上記［１］～［５］のいずれかに記載の方法。
［７］ 前記ＰＬＰ濃度の減少は、少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌである、上記［１］～［６］のいずれかに記載の方法。
［８］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度を有する、上記［１］～［７］のいずれかに記載の方法。
［９］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度を有する、上記［１］～［８］のいずれかに記載の方法。
［１０］ 少なくとも１年の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与は、少なくとも１００メートル以上の、前記６分間の歩行距離の増加をもたらす、上記［１］～［９］のいずれかに記載の方法。
［１１］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約３５０メートル以下の６分間の歩行距離を有するとして特徴付けられる、上記［１］～［１０］のいずれかに記載の方法。
［１２］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の６分間の歩行距離を示す、上記［１］～［１１］のいずれかに記載の方法。
［１３］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、移動支援器具への低下した依存度を示す、上記［１］～［１２］のいずれかに記載の方法。
［１４］ 移動支援器具は、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ及び装具からなる群から選択される少なくとも１つの器具である、上記［１３］に記載の方法。
［１５］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、骨折の減少した発生率を経験する、上記［１］～［１４］のいずれかに記載の方法。
［１６］ 約１３歳以上の患者の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
（ｉ）前記患者のパーセント（％）予測ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者の前記％予測ＨＨＤスコアと比較した約５％以上の変化；
（ｉｉ）前記患者の下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者のＬＥＦＳスコアと比較した約３以上の変化；及び
（ｉｉｉ）前記患者の簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者のＢＰＩ－ＳＦスコアと比較した約－２以上の変化
のうち１つ以上をもたらす、方法。
［１７］ 約１３歳以上の患者の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
（ｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した約２５％以上の減少；
（ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した約５０％以上の減少；及び （ｉｉｉ）前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者の６ＭＷＴ値と比較した、前記患者の６ＭＷＴ値の、前記患者の予測６ＭＷＴ値の約８０％又は約８０％超への増加
のうち１つ以上をもたらす、方法。
［１８］ 前記ｓＡＬＰは、１日、１週間又は１ヶ月に１回以上投与される、上記［１］～［１７］のいずれかに記載の方法。
［１９］ 前記ｓＡＬＰは、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回投与される、上記［１８］に記載の方法。
［２０］ 前記ｓＡＬＰは、週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与される、上記［１］～［１９］のいずれかに記載の方法。
［２１］ 前記ｓＡＬＰは、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量で投与され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加される、上記［１］～［２０］のいずれかに記載の方法。
［２２］ 前記ｓＡＬＰは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰの初期用量で投与される、上記［２１］に記載の方法。
［２３］ 前記初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上の治療期間後に増加される、上記［２１］又は［２２］に記載の方法。
［２４］ 前記ｓＡＬＰは、約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量で投与される、上記［１］～［２３］のいずれかに記載の方法。
［２５］ 前記ｓＡＬＰは、約２ｍｇ／ｋｇを週３回、約３ｍｇ／ｋｇを週２回、約３ｍｇ／ｋｇを週３回又は約１ｍｇ／ｋｇを週６回の用量で投与される、上記［１］～［２４］のいずれかに記載の方法。
［２６］ 前記ｓＡＬＰは、連日又は隔日で１日１回投与される、上記［２５］に記載の方法。
［２７］ 前記ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列を含む、上記［１］～［２６］のいずれかに記載の方法。
［２８］ 前記ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列からなる、上記［２７］に記載の方法。
［２９］ 前記ｓＡＬＰは、成人ＨＰＰの少なくとも１つの症状を治療するのに治療上有効な量で投与される、上記［１］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］ 前記成人ＨＰＰの少なくとも１つの症状は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎並びに偽骨折のうち１つ以上を含む、上記［２９］に記載の方法。
［３１］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さない、上記［１］～［３０］のいずれかに記載の方法。
［３２］ 前記患者は、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年又は少なくとも１０年以上にわたる前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さない、上記［３１］に記載の方法。
［３３］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与に対して忍容性を示す、上記［１］～［３２］のいずれかに記載の方法。
［３４］ 前記忍容性は、注射部位紅斑、ヘモグロビンの減少、発熱、肺炎、上気道感染、中耳炎、嘔吐、便秘、下痢、歯の喪失、鼻咽頭炎、発疹、虫歯及び易刺激性からなる群から選択される少なくとも１つの有害事象の欠如又は減少した発生率を含む、上記［３３］に記載の方法。
［３５］ 前記ｓＡＬＰは、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与される、上記［１］～［３４］のいずれかに記載の方法。
［３６］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、生理食塩水である、上記［３５］に記載の方法。
［３７］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムを含む、上記［３５］に記載の方法。
［３８］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、上記［３７］に記載の方法。
［３９］ 前記組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内に投与される、上記［３５］～［３８］のいずれかに記載の方法。
［４０］ 前記組成物は、皮下投与される、上記［３９］に記載の方法。
［４１］ 前記ｓＡＬＰは、ＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰに対して生理学的に活性である、上記［１］～［４０］のいずれかに記載の方法。
［４２］ 前記ｓＡＬＰは、骨における骨格石灰化を改善するのに触媒として適格である、上記［１］～［４１］のいずれかに記載の方法。
［４３］ 前記ｓＡＬＰは、アルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである、上記［１］～［４２］のいずれかに記載の方法。
［４４］ 前記患者は、ヒトである、上記［１］～［４３］のいずれかに記載の方法。
［４５］ 成人低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）の少なくとも１つの症状を有するとして特徴付けられる、約１８歳以上の治療未経験の小児発症ＨＰＰ患者のＨＰＰを治療するための、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）であって、ここでｓＡＬＰは、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、特に６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で投与するために製剤化されており、前記患者への前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
（ｉ）前記患者からの血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した少なくとも約１μＭの統計学的に有意な減少；
（ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のピリドキサール５'－リン酸（ＰＬＰ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び
（ｉｉｉ）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）によって評価される前記患者の歩行距離の、投与を受けていない前記患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加
のうち１つ以上をもたらすことを特徴とする、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）。
［４６］ 前記治療期間は、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、又は前記患者の生涯、特に少なくとも６週間であることを特徴とする、上記［４５］に記載のｓＡＬＰ。
［４７］ 前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の前記減少、前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の前記減少、及び／又は前記患者の前記増加後の前記歩行距離は、前記治療期間中に持続されることを特徴とする、上記［４５］又は［４６］に記載のｓＡＬＰ。
［４８］ 前記患者は、少なくとも約２μＭのＰＰｉ血漿濃度の減少を有することを特徴とする、上記［４５］～［４７］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［４９］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約６μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有することを特徴とする、上記［４５］～［４８］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５０］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有することを特徴とする、上記［４５］～［４９］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５１］ 前記ＰＬＰ濃度の減少は、少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌであることを特徴とする、上記［４５］～［５０］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５２］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度を有することを特徴とする、上記［４５］～［５１］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。［５３］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度を有することを特徴とする、上記［４５］～［５２］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５４］ 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約３５０メートル以下の６分間の歩行距離を示すことを特徴とする、上記［４５］～［５３］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５５］ 少なくとも１年の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与は、少なくとも１００メートル以上の、前記６分間の歩行距離の増加をもたらすことを特徴とする、上記［４５］～［５４］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５６］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の、６分間の歩行距離を示すことを特徴とする、上記［４５］～［５５］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５７］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、移動支援器具への低下した依存度を示すことを特徴とする、上記［４５］～［５６］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［５８］ 移動支援器具は、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ及び装具からなる群から選択される少なくとも１つの器具である、上記［５７］に記載のｓＡＬＰ。
［５９］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、骨折の減少した発生率を経験することを特徴とする、上記［４５］～［５８］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［６０］ １日、１週間又は１ヶ月に１回以上投与するために製剤化される、上記［４５］～［５９］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［６１］ 週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回投与するために製剤化される、上記［６０］に記載のｓＡＬＰ。
［６２］ 週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与するために製剤化される、上記［４５］～［６１］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。［６３］ 約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量で投与するために製剤化され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加される、上記［４５］～［６２］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［６４］ 約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰの初期用量で投与するために製剤化される、上記［６３］に記載のｓＡＬＰ。
［６５］ 前記治療計画の前記初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上の治療期間後に増加されることを特徴とする、上記［６３］又は［６４］に記載のｓＡＬＰ。
［６６］ 約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量で投与するために製剤化される、上記［４５］～［６５］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［６７］ 約２ｍｇ／ｋｇを週３回、約３ｍｇ／ｋｇを週２回、約３ｍｇ／ｋｇを週３回又は約１ｍｇ／ｋｇを週６回の用量で投与するために製剤化される、上記［４５］～［６６］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［６８］ 連日又は隔日で１日１回投与するために製剤化される、上記［６７］に記載のｓＡＬＰ。
［６９］ 配列番号１のアミノ酸配列を含む、上記［４５］～［６８］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［７０］ 配列番号１のアミノ酸配列からなる、上記［６９］に記載のｓＡＬＰ。
［７１］ ＨＰＰの少なくとも１つの症状を治療するのに治療上有効な量で投与するために製剤化される、上記［４５］～［７０］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［７２］ 前記ＨＰＰの少なくとも１つの症状は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎及びピロリン酸塩関節症のうち１つ以上を含む、上記［７１］に記載のｓＡＬＰ。
［７３］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、異所性石灰化を示さないことを特徴とする、上記［４５］～［７２］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［７４］ 前記患者は、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年又は少なくとも１０年以上にわたる前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さないことを特徴とする、上記［７３］に記載のｓＡＬＰ。
［７５］ 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与に対して忍容性を示す、上記［４５］～［７４］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［７６］ 前記忍容性は、注射部位紅斑、ヘモグロビンの減少、発熱、肺炎、上気道感染、中耳炎、嘔吐、便秘、下痢、歯の喪失、鼻咽頭炎、発疹、虫歯及び易刺激性からなる群から選択される少なくとも１つの有害事象の欠如又は減少した発生率を含む、上記［７５］に記載のｓＡＬＰ。
［７７］ 少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与するために製剤化される、上記［４５］～［７６］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［７８］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、生理食塩水である、上記［７７］に記載のｓＡＬＰ。
［７９］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムを含む、上記［７８］に記載のｓＡＬＰ。
［８０］ 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、上記［７９］に記載のｓＡＬＰ。
［８１］ 前記組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内投与のために製剤化される、上記［４５］～［８０］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［８２］ 前記組成物は、皮下投与のために製剤化される、上記［８１］に記載のｓＡＬＰ。
［８３］ ＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰに対して生理学的に活性である、上記［４５］～［８２］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［８４］ 骨における骨格石灰化を改善するのに触媒として適格である、上記［４５］～［８３］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［８５］ アルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである、上記［４５］～［８４］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［８６］ 前記患者は、ヒトである、上記［４５］～［８５］のいずれかに記載のｓＡＬＰ。
［８７］ 前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
（ｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度のベースラインからの最小二乗平均における統計学的に有意な変化；又は
（ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度のベースラインからの最小二乗平均における統計学的に有意な変化
の一方又は両方をもたらす、上記［１］～［４４］のいずれかに記載の方法。
［８８］ 前記ｓＡＬＰの投与は、約２，０００Ｕ×日／Ｌ～約７，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣ last をもたらし、前記ＡＵＣ last は、時間ゼロから、投与間隔における最後に観察された濃度の時間までの濃度－時間曲線下の面積に等しい、上記［１］～［４４］又は［８７］のいずれかに記載の方法。
［８９］ 前記ｓＡＬＰの投与は、約４，０００Ｕ×日／Ｌ～約１０，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣ inf をもたらし、前記ＡＵＣ inf は、時間ゼロから無限大までの濃度－時間曲線下の面積に等しい、上記［１］～［４４］、［８７］又は［８８］のいずれかに記載の方法。
［９０］ 前記ｓＡＬＰの投与は、約３日～約８日のｔ 1/2 をもたらす、上記［１］～［４４］又は［８７］～［８９］のいずれかに記載の方法。

Claims (90)

  1. 成人低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）の少なくとも１つの症状を有するとして特徴付けられる、約１８歳以上の治療未経験の小児発症ＨＰＰ患者のＨＰＰを治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｓＡＬＰの投与は、以下：
    （ｉ）前記患者からの血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した少なくとも約１μＭの統計学的に有意な減少；
    （ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び
    （ｉｉｉ）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）によって評価される前記患者の歩行距離の、投与を受けていない前記患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加
    のうち１つ以上をもたらす、方法。
  2. 前記治療期間は、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年若しくは少なくとも１０年、又は前記患者の生涯、特に少なくとも６週間である、請求項１に記載の方法。
  3. 前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の前記減少、前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の前記減少、及び／又は前記患者の前記増加後の前記歩行距離は、前記治療期間中に持続される、請求項１又は２に記載の方法。
  4. 前記患者は、少なくとも約２μＭのＰＰｉ血漿濃度の減少を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
  5. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約６μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
  6. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
  7. 前記ＰＬＰ濃度の減少は、少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌである、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
  8. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
  9. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
  10. 少なくとも１年の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与は、少なくとも１００メートル以上の、前記６分間の歩行距離の増加をもたらす、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
  11. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約３５０メートル以下の６分間の歩行距離を有するとして特徴付けられる、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の６分間の歩行距離を示す、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
  13. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、移動支援器具への低下した依存度を示す、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
  14. 移動支援器具は、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ及び装具からなる群から選択される少なくとも１つの器具である、請求項１３に記載の方法。
  15. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、骨折の減少した発生率を経験する、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
  16. 約１３歳以上の患者の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
    （ｉ）前記患者のパーセント（％）予測ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者の前記％予測ＨＨＤスコアと比較した約５％以上の変化；
    （ｉｉ）前記患者の下肢機能スケール（ＬＥＦＳ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者のＬＥＦＳスコアと比較した約３以上の変化；及び
    （ｉｉｉ）前記患者の簡易痛み質問紙票（ＢＰＩ－ＳＦ）スコアの、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者のＢＰＩ－ＳＦスコアと比較した約－２以上の変化
    のうち１つ以上をもたらす、方法。
  17. 約１３歳以上の患者の低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）を治療する方法であって、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で前記患者に投与することを含み、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
    （ｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した約２５％以上の減少；
    （ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の、前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した約５０％以上の減少；及び
    （ｉｉｉ）前記ｓＡＬＰの投与を受けていない前記患者の６ＭＷＴ値と比較した、前記患者の６ＭＷＴ値の約８０％の増加又は前記患者の予測６ＭＷＴ値の約８０％超の増加
    のうち１つ以上をもたらす、方法。
  18. 前記ｓＡＬＰは、１日、１週間又は１ヶ月に１回以上投与される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記ｓＡＬＰは、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回投与される、請求項１８に記載の方法。
  20. 前記ｓＡＬＰは、週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与される、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
  21. 前記ｓＡＬＰは、約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量で投与され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加される、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
  22. 前記ｓＡＬＰは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰの初期用量で投与される、請求項２１に記載の方法。
  23. 前記初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上の治療期間後に増加される、請求項２１又は２２に記載の方法。
  24. 前記ｓＡＬＰは、約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量で投与される、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
  25. 前記ｓＡＬＰは、約２ｍｇ／ｋｇを週３回、約３ｍｇ／ｋｇを週２回、約３ｍｇ／ｋｇを週１回又は約１ｍｇ／ｋｇを週６回の用量で投与される、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
  26. 前記ｓＡＬＰは、連日又は隔日で１日１回投与される、請求項２５に記載の方法。
  27. 前記ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列を含む、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 前記ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列からなる、請求項２７に記載の方法。
  29. 前記ｓＡＬＰは、成人ＨＰＰの少なくとも１つの症状を治療するのに治療上有効な量で投与される、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
  30. 前記成人ＨＰＰの少なくとも１つの症状は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎、ピロリン酸塩関節症、軟骨石灰化症、石灰化関節周囲炎並びに偽骨折のうち１つ以上を含む、請求項２９に記載の方法。
  31. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さない、請求項１～３０のいずれか一項に記載の方法。
  32. 前記患者は、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年又は少なくとも１０年以上にわたる前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さない、請求項３１に記載の方法。
  33. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与に対して忍容性を示す、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。
  34. 前記忍容性は、注射部位紅斑、ヘモグロビンの減少、発熱、肺炎、上気道感染、中耳炎、嘔吐、便秘、下痢、歯の喪失、鼻咽頭炎、発疹、虫歯及び易刺激性からなる群から選択される少なくとも１つの有害事象の欠如又は減少した発生率を含む、請求項３３に記載の方法。
  35. 前記ｓＡＬＰは、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与される、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
  36. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、生理食塩水である、請求項３５に記載の方法。
  37. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムを含む、請求項３５に記載の方法。
  38. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、請求項３７に記載の方法。
  39. 前記組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内に投与される、請求項３５～３８のいずれか一項に記載の方法。
  40. 前記組成物は、皮下投与される、請求項３９に記載の方法。
  41. 前記ｓＡＬＰは、ＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰに対して生理学的に活性である、請求項１～４０のいずれか一項に記載の方法。
  42. 前記ｓＡＬＰは、骨における骨格石灰化を改善するのに触媒として適格である、請求項１～４１のいずれか一項に記載の方法。
  43. 前記ｓＡＬＰは、アルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである、請求項１～４２のいずれか一項に記載の方法。
  44. 前記患者は、ヒトである、請求項１～４３のいずれか一項に記載の方法。
  45. 成人低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）の少なくとも１つの症状を有するとして特徴付けられる、約１８歳以上の治療未経験の小児発症ＨＰＰ患者のＨＰＰを治療するための、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）であって、ここでｓＡＬＰは、少なくとも２週間の治療期間にわたり、約１ｍｇ／ｋｇ／週～約９ｍｇ／ｋｇ／週、特に６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する治療計画で投与するために製剤化されており、前記患者への前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
    （ｉ）前記患者からの血漿サンプル中の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度と比較した少なくとも約１μＭの統計学的に有意な減少；
    （ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のピリドキサール５’－リン酸（ＰＬＰ）濃度の、約１８歳以上の未治療小児発症ＨＰＰ対象からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度と比較した少なくとも約１００ｎｇ／ｍｌの統計学的に有意な減少；及び
    （ｉｉｉ）６分間歩行試験（６ＭＷＴ）によって評価される前記患者の歩行距離の、投与を受けていない前記患者の６分間の歩行距離と比較した少なくとも５０メートルの統計学的に有意な増加
    のうち１つ以上をもたらすことを特徴とする、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）。
  46. 前記治療期間は、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、又は前記患者の生涯、特に少なくとも６週間であることを特徴とする、請求項４５に記載のｓＡＬＰ。
  47. 前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＰｉ濃度の前記減少、前記患者からの前記血漿サンプル中のＰＬＰ濃度の前記減少、及び／又は前記患者の前記増加後の前記歩行距離は、前記治療期間中に持続されることを特徴とする、請求項４５又は４６に記載のｓＡＬＰ。
  48. 前記患者は、少なくとも約２μＭのＰＰｉ血漿濃度の減少を有することを特徴とする、請求項４５～４７のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  49. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約６μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有することを特徴とする、請求項４５～４８のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  50. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２μＭ～約５μＭの血漿ＰＰｉ濃度を有することを特徴とする、請求項４５～４９のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  51. 前記ＰＬＰ濃度の減少は、少なくとも約２００ｎｇ／ｍｌであることを特徴とする、請求項４５～５０のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  52. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、１３００ｎｇ／ｍｌまでの血漿ＰＬＰ濃度を有することを特徴とする、請求項４５～５１のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  53. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約２ｎｇ／ｍｌ～約１５０ｎｇ／ｍｌの血漿ＰＬＰ濃度を有することを特徴とする、請求項４５～５２のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  54. 前記ｓＡＬＰの投与前に、前記患者は、約３５０メートル以下の６分間の歩行距離を示すことを特徴とする、請求項４５～５３のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  55. 少なくとも１年の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与は、少なくとも１００メートル以上の、前記６分間の歩行距離の増加をもたらすことを特徴とする、請求項４５～５４のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  56. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、約４２０メートル以上の、６分間の歩行距離を示すことを特徴とする、請求項４５～５５のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  57. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、移動支援器具への低下した依存度を示すことを特徴とする、請求項４５～５６のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  58. 移動支援器具は、歩行器、車椅子、ブレース、松葉づえ及び装具からなる群から選択される少なくとも１つの器具である、請求項５７に記載のｓＡＬＰ。
  59. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、骨折の減少した発生率を経験することを特徴とする、請求項４５～５８のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  60. １日、１週間又は１ヶ月に１回以上投与するために製剤化される、請求項４５～５９のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  61. 週２回、週３回、週４回、週５回、週６回又は週７回投与するために製剤化される、請求項６０に記載のｓＡＬＰ。
  62. 週に２日、週に３日、週に４日、週に５日、週に６日又は週に７日、反復投与で投与するために製剤化される、請求項４５～６１のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  63. 約２．１ｍｇ／ｋｇ／週～約３．５ｍｇ／ｋｇ／週の初期用量で投与するために製剤化され、且つその後、約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量に増加される、請求項４５～６２のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  64. 約０．３ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／ｋｇ／日のｓＡＬＰの初期用量で投与するために製剤化される、請求項６３に記載のｓＡＬＰ。
  65. 前記治療計画の前記初期用量は、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年又は少なくとも４年以上の治療期間後に増加されることを特徴とする、請求項６３又は６４に記載のｓＡＬＰ。
  66. 約１．３ｍｇ／ｋｇ／週、約２．７ｍｇ／ｋｇ／週又は約６ｍｇ／ｋｇ／週の用量で投与するために製剤化される、請求項４５～６５のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  67. 約２ｍｇ／ｋｇを週３回、約３ｍｇ／ｋｇを週２回、約３ｍｇ／ｋｇを週３回又は約１ｍｇ／ｋｇを週６回の用量で投与するために製剤化される、請求項４５～６６のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  68. 連日又は隔日で１日１回投与するために製剤化される、請求項６７に記載のｓＡＬＰ。
  69. 配列番号１のアミノ酸配列を含む、請求項４５～６８のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  70. 配列番号１のアミノ酸配列からなる、請求項６９に記載のｓＡＬＰ。
  71. ＨＰＰの少なくとも１つの症状を治療するのに治療上有効な量で投与するために製剤化される、請求項４５～７０のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  72. 前記ＨＰＰの少なくとも１つの症状は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の上昇した血中及び／又は尿中濃度、低石灰化、高カルシウム尿症、骨格変形、動揺歩行、骨痛、骨折、ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着、関節炎及びピロリン酸塩関節症のうち１つ以上を含む、請求項７１に記載のｓＡＬＰ。
  73. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与後、異所性石灰化を示さないことを特徴とする、請求項４５～７２のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  74. 前記患者は、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年又は少なくとも１０年以上にわたる前記ｓＡＬＰの投与後に異所性石灰化を示さないことを特徴とする、請求項７３に記載のｓＡＬＰ。
  75. 前記患者は、前記ｓＡＬＰの投与に対して忍容性を示す、請求項４５～７４のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  76. 前記忍容性は、注射部位紅斑、ヘモグロビンの減少、発熱、肺炎、上気道感染、中耳炎、嘔吐、便秘、下痢、歯の喪失、鼻咽頭炎、発疹、虫歯及び易刺激性からなる群から選択される少なくとも１つの有害事象の欠如又は減少した発生率を含む、請求項７５に記載のｓＡＬＰ。
  77. 少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む組成物で投与するために製剤化される、請求項４５～７６のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  78. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、生理食塩水である、請求項７７に記載のｓＡＬＰ。
  79. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、塩化ナトリウム及びリン酸ナトリウムを含む、請求項７８に記載のｓＡＬＰ。
  80. 前記少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤は、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム及び約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、請求項７９に記載のｓＡＬＰ。
  81. 前記組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、経口、経鼻、舌下、髄腔内又は皮内投与のために製剤化される、請求項４５～８０のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  82. 前記組成物は、皮下投与のために製剤化される、請求項８１に記載のｓＡＬＰ。
  83. ＰＥＡ、ＰＰｉ及びＰＬＰに対して生理学的に活性である、請求項４５～８２のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  84. 骨における骨格石灰化を改善するのに触媒として適格である、請求項４５～８３のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  85. アルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである、請求項４５～８４のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  86. 前記患者は、ヒトである、請求項４５～８５のいずれか一項に記載のｓＡＬＰ。
  87. 前記ｓＡＬＰの投与は、以下：
    （ｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＰｉ濃度のベースラインからの最小二乗平均における統計学的に有意な変化；又は
    （ｉｉ）前記患者からの血漿サンプル中のＰＬＰ濃度のベースラインからの最小二乗平均における統計学的に有意な変化
    の一方又は両方をもたらす、請求項１～４４のいずれか一項に記載の方法。
  88. 前記ｓＡＬＰの投与は、約２，０００Ｕ×日／Ｌ～約７，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣｌａｓｔをもたらし、前記ＡＵＣｌａｓｔは、時間ゼロから、投与間隔における最後に観察された濃度の時間までの濃度－時間曲線下の面積に等しい、請求項１～４４又は８７のいずれか一項に記載の方法。
  89. 前記ｓＡＬＰの投与は、約４，０００Ｕ×日／Ｌ～約１０，０００Ｕ×日／ＬのＡＵＣｉｎｆをもたらし、前記ＡＵＣｉｎｆは、時間ゼロから無限大までの濃度－時間曲線下の面積に等しい、請求項１～４４、８７又は８８のいずれか一項に記載の方法。
  90. 前記ｓＡＬＰの投与は、約３日～約８日のｔ１／２をもたらす、請求項１～４４又は８７～８９のいずれか一項に記載の方法。
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