JP2023007949A - Ｆｍоｃ基を除去する方法 - Google Patents
Ｆｍоｃ基を除去する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023007949A JP2023007949A JP2021111128A JP2021111128A JP2023007949A JP 2023007949 A JP2023007949 A JP 2023007949A JP 2021111128 A JP2021111128 A JP 2021111128A JP 2021111128 A JP2021111128 A JP 2021111128A JP 2023007949 A JP2023007949 A JP 2023007949A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- fmoc
- stag
- amino acid
- added
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 title claims abstract description 97
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 71
- ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 9-methylidenefluorene Chemical compound C1=CC=C2C(=C)C3=CC=CC=C3C2=C1 ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 57
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 41
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 36
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 31
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 claims abstract description 31
- 239000002585 base Substances 0.000 claims abstract description 15
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 111
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 95
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 77
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 75
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 58
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 claims description 57
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 33
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 23
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 16
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 claims description 11
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 10
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 9
- IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N sulfamic acid Chemical class NS(O)(=O)=O IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- JZTPOMIFAFKKSK-UHFFFAOYSA-N O-phosphonohydroxylamine Chemical class NOP(O)(O)=O JZTPOMIFAFKKSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 claims description 7
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N phosphoramidic acid Chemical class NP(O)(O)=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000001414 amino alcohols Chemical class 0.000 claims description 6
- DQPBABKTKYNPMH-UHFFFAOYSA-N amino hydrogen sulfate Chemical class NOS(O)(=O)=O DQPBABKTKYNPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000002443 hydroxylamines Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract description 4
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 180
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 163
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 101
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 90
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 84
- -1 amino acid compound Chemical class 0.000 description 77
- SKTCDJAMAYNROS-UHFFFAOYSA-N methoxycyclopentane Chemical compound COC1CCCC1 SKTCDJAMAYNROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 77
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 75
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 61
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 58
- 239000000047 product Substances 0.000 description 56
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 51
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 45
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 42
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 40
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 34
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 26
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 26
- XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M Mesna Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCS XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N [[(z)-(1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidene)amino]oxy-morpholin-4-ylmethylidene]-dimethylazanium;hexafluorophosphate Chemical compound F[P-](F)(F)(F)(F)F.CCOC(=O)C(\C#N)=N/OC(=[N+](C)C)N1CCOCC1 GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N 0.000 description 25
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 24
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 24
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 24
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 23
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 22
- ZNEWHQLOPFWXOF-UHFFFAOYSA-N coenzyme M Chemical compound OS(=O)(=O)CCS ZNEWHQLOPFWXOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 19
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 16
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 16
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 15
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 15
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 12
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 11
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 11
- PVOAHINGSUIXLS-UHFFFAOYSA-N 1-Methylpiperazine Chemical compound CN1CCNCC1 PVOAHINGSUIXLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical compound OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 10
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 9
- 125000003983 fluorenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3CC12)* 0.000 description 9
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 9
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 9
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 9
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OTKXCALUHMPIGM-FQEVSTJZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 OTKXCALUHMPIGM-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 7
- RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N Diethylenetriamine Chemical compound NCCNCCN RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 7
- BCIIMDOZSUCSEN-UHFFFAOYSA-N piperidin-4-amine Chemical compound NC1CCNCC1 BCIIMDOZSUCSEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 7
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 7
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229940086066 potassium hydrogencarbonate Drugs 0.000 description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 7
- KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N 0.000 description 6
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 6
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical group C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 125000000383 tetramethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 6
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000025 triisopropylsilyl group Chemical group C(C)(C)[Si](C(C)C)(C(C)C)* 0.000 description 6
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 5
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 5
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- DILRJUIACXKSQE-UHFFFAOYSA-N n',n'-dimethylethane-1,2-diamine Chemical compound CN(C)CCN DILRJUIACXKSQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 5
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 125000004469 siloxy group Chemical group [SiH3]O* 0.000 description 5
- 125000001834 xanthenyl group Chemical group C1=CC=CC=2OC3=CC=CC=C3C(C12)* 0.000 description 5
- DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N (2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N 0.000 description 4
- LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N (2s,3r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]butanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@H](OC(C)(C)C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N 0.000 description 4
- IANQTJSKSUMEQM-UHFFFAOYSA-N 1-benzofuran Chemical group C1=CC=C2OC=CC2=C1 IANQTJSKSUMEQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 1-benzothiophene Chemical group C1=CC=C2SC=CC2=C1 FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UOLMNMNHGFGIDE-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanylpropylphosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CCCS UOLMNMNHGFGIDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical group C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 125000002029 aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 4
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 4
- 125000000609 carbazolyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 4
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical group C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 125000003453 indazolyl group Chemical group N1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 4
- 125000002183 isoquinolinyl group Chemical group C1(=NC=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N phenanthrene Chemical group C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 4
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 4
- FODJWPHPWBKDON-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 FODJWPHPWBKDON-IBGZPJMESA-N 0.000 description 3
- KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-oxo-4-(tritylamino)butanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 3
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004343 1-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- HCZMHWVFVZAHCR-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-sulfanylethoxy)ethoxy]ethanethiol Chemical compound SCCOCCOCCS HCZMHWVFVZAHCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 125000000732 arylene group Chemical group 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- GPQWKLDEDGOJQH-UHFFFAOYSA-N ethane-1,1,1,2-tetramine Chemical compound NCC(N)(N)N GPQWKLDEDGOJQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 125000000816 ethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- 125000004957 naphthylene group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004923 naphthylmethyl group Chemical group C1(=CC=CC2=CC=CC=C12)C* 0.000 description 3
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 3
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 3
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 3
- 125000004817 pentamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 3
- 125000000843 phenylene group Chemical group C1(=C(C=CC=C1)*)* 0.000 description 3
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 3
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000003258 trimethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 3
- KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-tritylsulfanylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)SC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 2
- ADOHASQZJSJZBT-SANMLTNESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]indol-3-yl]propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(=O)OC(C)(C)C)C=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ADOHASQZJSJZBT-SANMLTNESA-N 0.000 description 2
- WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxo-5-(tritylamino)pentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CC(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N 0.000 description 2
- HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 2
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N (aminomethyl)phosphonic acid Chemical compound NCP(O)(O)=O MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LKHVIOBYWQOAOA-UHFFFAOYSA-N 1,3-bis(sulfanyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(S)CCS LKHVIOBYWQOAOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGCYRFWNGRMRJA-UHFFFAOYSA-N 1-ethylpiperazine Chemical compound CCN1CCNCC1 WGCYRFWNGRMRJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940006193 2-mercaptoethanesulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 4-(4,6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholin-4-ium;chloride Chemical compound [Cl-].COC1=NC(OC)=NC([N+]2(C)CCOCC2)=N1 BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CCUAQNUWXLYFRA-IMJSIDKUSA-N Ala-Asn Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC(N)=O CCUAQNUWXLYFRA-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NJMNDXJCQWEVMS-UHFFFAOYSA-N CCOP(CCCSC(C1=CC=CC=C1)(C1=CC=CC=C1)C1=CC=CC=C1)(OCC)=O Chemical compound CCOP(CCCSC(C1=CC=CC=C1)(C1=CC=CC=C1)C1=CC=CC=C1)(OCC)=O NJMNDXJCQWEVMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPFBUSLHFFWMAI-HYRPPVSQSA-N [(8r,9s,10r,13s,14s,17r)-17-acetyl-6-formyl-3-methoxy-10,13-dimethyl-1,2,7,8,9,11,12,14,15,16-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl] acetate Chemical compound C1C[C@@H]2[C@](CCC(OC)=C3)(C)C3=C(C=O)C[C@H]2[C@@H]2CC[C@](OC(C)=O)(C(C)=O)[C@]21C KPFBUSLHFFWMAI-HYRPPVSQSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005577 anthracene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 2
- 239000004305 biphenyl Chemical group 0.000 description 2
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 2
- IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N bromo(trimethyl)silane Chemical compound C[Si](C)(C)Br IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004106 butoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004772 dichloromethyl group Chemical group [H]C(Cl)(Cl)* 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FIRHQRGFVOSDDY-UHFFFAOYSA-N ethyl 1-hydroxytriazole-4-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1=CN(O)N=N1 FIRHQRGFVOSDDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000005111 flow chemistry technique Methods 0.000 description 2
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000005549 heteroarylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003392 indanyl group Chemical group C1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000003454 indenyl group Chemical group C1(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000002510 isobutoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])O* 0.000 description 2
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropanol acetate Natural products CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940011051 isopropyl acetate Drugs 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229960003975 potassium Drugs 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- RIZGKEIRSQLIBK-UHFFFAOYSA-N prop-1-ene-1-thiol Chemical group CC=CS RIZGKEIRSQLIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002572 propoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- AMZPPWFHMNMIEI-UHFFFAOYSA-M sodium;2-sulfanylidene-1,3-dihydrobenzimidazole-5-sulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC=C2NC(=S)NC2=C1 AMZPPWFHMNMIEI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WBIKPQSRRXSSPQ-UHFFFAOYSA-M sodium;sulfomethanethiolate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CS WBIKPQSRRXSSPQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000005579 tetracene group Chemical group 0.000 description 2
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004784 trichloromethoxy group Chemical group ClC(O*)(Cl)Cl 0.000 description 2
- 125000003866 trichloromethyl group Chemical group ClC(Cl)(Cl)* 0.000 description 2
- IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N triethylenediamine Chemical compound C1CN2CCN1CC2 IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000876 trifluoromethoxy group Chemical group FC(F)(F)O* 0.000 description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 2
- 125000005580 triphenylene group Chemical group 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229910000406 trisodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019801 trisodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- SGUVLZREKBPKCE-UHFFFAOYSA-N 1,5-diazabicyclo[4.3.0]-non-5-ene Chemical compound C1CCN=C2CCCN21 SGUVLZREKBPKCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical compound CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006017 1-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000530 1-propynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentafluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWVPRPSXBZNOHS-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-Trimethylaniline Chemical compound CC1=CC(C)=C(N)C(C)=C1 KWVPRPSXBZNOHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 2-methyltetrahydrofuran Chemical compound CC1CCCO1 JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 description 1
- SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N 3-Aminopropanesulfonate Chemical compound NCCCS(O)(=O)=O SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMPPGHMHELILKG-UHFFFAOYSA-N 4-ethoxyaniline Chemical compound CCOC1=CC=C(N)C=C1 IMPPGHMHELILKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRKATYHWPCGPZ-UHFFFAOYSA-N 4-methyloxane Chemical compound CC1CCOCC1 OVRKATYHWPCGPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005330 8 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PEIKTSJIUKYDPC-UHFFFAOYSA-N Diethyl 3-Bromopropylphosphonate Chemical compound CCOP(=O)(OCC)CCCBr PEIKTSJIUKYDPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003302 alkenyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001124 arachidoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002511 behenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004369 butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000000 cycloalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- WSYUEVRAMDSJKL-UHFFFAOYSA-N ethanolamine-o-sulfate Chemical compound NCCOS(O)(=O)=O WSYUEVRAMDSJKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCFXLZAXGXOXAP-DAXSKMNVSA-N ethyl (2z)-2-cyano-2-hydroxyiminoacetate Chemical compound CCOC(=O)C(=N/O)\C#N LCFXLZAXGXOXAP-DAXSKMNVSA-N 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000004970 halomethyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000000555 isopropenyl group Chemical group [H]\C([H])=C(\*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QDLAGTHXVHQKRE-UHFFFAOYSA-N lichenxanthone Natural products COC1=CC(O)=C2C(=O)C3=C(C)C=C(OC)C=C3OC2=C1 QDLAGTHXVHQKRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001421 myristyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 description 1
- BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N p-anisidine Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1 BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachloro-phenol Natural products OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- KCXFHTAICRTXLI-UHFFFAOYSA-N propane-1-sulfonic acid Chemical compound CCCS(O)(=O)=O KCXFHTAICRTXLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- FRTIVUOKBXDGPD-UHFFFAOYSA-M sodium;3-sulfanylpropane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCCS FRTIVUOKBXDGPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002345 steroid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003566 thiocarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 description 1
- 150000004992 toluidines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002889 tridecyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- JQZIKLPHXXBMCA-UHFFFAOYSA-N triphenylmethanethiol Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(S)C1=CC=CC=C1 JQZIKLPHXXBMCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
【課題】Ｆｍоｃ基脱保護工程で生じるジベンゾフルベンを容易に除去でき、次の縮合工程に影響を及ぼさないＦｍоｃ基の除去方法を提供する。【解決手段】Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に塩基を反応させてＦｍоｃ基を除去する方法であって、当該反応によって生じるジベンゾフルベン誘導体を一般式（１）又は（２）で表される化合物により捕捉させる方法である。JPEG2023007949000020.jpg33170（式中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示し、Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す）【選択図】なし
Description
本発明は、Ｆｍоｃ（９－フルオレニルメトキシカルボニル）基で保護されたアミノ酸化合物からＦｍоｃ基を除去する方法に関する。
ペプチドの製造技術には、固相ペプチド合成法と液相ペプチド合成法とがあるが、医薬品等として用いられるペプチドを製造するには、大量生産に向いている液相ペプチド合成法が広く採用されている。そして、最近、保護アミノ酸や保護ペプチドの有機溶媒への溶解性を大きく向上させる化合物である液相ペプチド合成用担体（Ｔａｇ）が報告されている（特許文献１～１４）。
液相ペプチド合成法においては、アミノ基の保護基としてＦｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基、Ａｃ基などが用いられている。このうち、Ｆｍоｃ基は、保護された化合物に脂溶性を付与することができ、中性から酸性領域で安定であり、アミン化合物を用いて容易に脱保護できるなどの理由で広く用いられている。
しかしながら、Ｆｍｏｃ基の脱保護工程においてはジベンゾフルベン（ＤＢＦ）が副生する。当該ジベンゾフルベンを残存させたまま次の工程に進むと、９－フルオレニルメチル化などの副反応を引き起こすため、この脱保護工程においてジベンゾフルベンを除去しておく必要があった。
しかしながら、Ｆｍｏｃ基の脱保護工程においてはジベンゾフルベン（ＤＢＦ）が副生する。当該ジベンゾフルベンを残存させたまま次の工程に進むと、９－フルオレニルメチル化などの副反応を引き起こすため、この脱保護工程においてジベンゾフルベンを除去しておく必要があった。
このジベンゾフルベンの除去手段として、炭素数５以上の炭化水素溶媒とこれに混和しない極性有機溶媒の混液を用いて分層する手段（特許文献１５）、反応混合物を二酸化炭素と接触させる手段（特許文献１６）、チオカルボン酸類を添加する手段（特許文献１７）が報告されている。
しかしながら、前記特許文献１５～１７の手段では、ジベンゾフルベンを十分に除去できず、ジベンゾフルベン－チオカルボン酸付加体やジベンゾフルベン－アミン付加体などが残存した場合に次の縮合工程で副反応を引き起こす可能性があった。
従って、本発明の課題は、Ｆｍоｃ基脱保護工程で生じるジベンゾフルベンを容易に除去でき、次の縮合工程に影響を及ぼさないＦｍоｃ基の除去方法を提供することにある。
従って、本発明の課題は、Ｆｍоｃ基脱保護工程で生じるジベンゾフルベンを容易に除去でき、次の縮合工程に影響を及ぼさないＦｍоｃ基の除去方法を提供することにある。
そこで、本発明者は、新たなＦｍоｃ基の除去手段について検討したところ、アミン化合物などの塩基による脱保護反応時に生じるジベンゾフルベンを一般式（１）で表されるチオスルホン酸類又は一般式（２）で表されるチオホスホン酸類により捕捉することで、脱保護反応後の容易な後処理でジベンゾフルベンが除去でき、次の縮合反応に影響が生じないことを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、次の発明［１］～［６］を提供するものである。
［１］Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に塩基を反応させてＦｍоｃ基を除去する方法であって、当該反応によって生じるジベンゾフルベンを一般式（１）又は（２）
［１］Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に塩基を反応させてＦｍоｃ基を除去する方法であって、当該反応によって生じるジベンゾフルベンを一般式（１）又は（２）
（式中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示し、Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す）
で表される化合物により捕捉させることを特徴とする方法。
［２］Ｌ１及びＬ２が、炭素数１～１０の２価の有機基である［１］記載の方法。
［３］Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体が、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドである［１］又は［２］記載の方法。
［４］次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を［１］～［３］のいずれかに記載の方法で除去する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
［５］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、アミノ基含有化合物である［４］記載の液相ペプチド製造方法。
［６］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、２価以上の水溶性アミン、アルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミン、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ基含有化合物である［４］又は［５］記載の液相ペプチド製造方法。
［７］前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接またはリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である［４］～［６］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
で表される化合物により捕捉させることを特徴とする方法。
［２］Ｌ１及びＬ２が、炭素数１～１０の２価の有機基である［１］記載の方法。
［３］Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体が、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドである［１］又は［２］記載の方法。
［４］次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を［１］～［３］のいずれかに記載の方法で除去する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
［５］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、アミノ基含有化合物である［４］記載の液相ペプチド製造方法。
［６］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、２価以上の水溶性アミン、アルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミン、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ基含有化合物である［４］又は［５］記載の液相ペプチド製造方法。
［７］前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接またはリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である［４］～［６］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
本発明方法によれば、Ｆｍоｃ基の脱保護反応後の容易な後処理でジベンゾフルベンが除去でき、次の縮合反応に影響が生じないことから、液相ペプチド合成を連続して進行させることができる。
本発明のＦｍоｃ基除去方法は、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に塩基を反応させてＦｍоｃ基を除去する方法であって、当該反応によって生じるジベンゾフルベンを一般式（１）又は（２）
（式中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示し、Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す）
で表される化合物に捕捉させることを特徴とする。
で表される化合物に捕捉させることを特徴とする。
本発明方法の原料である、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体におけるアミノ酸誘導体には、アミノ酸、ペプチド及びアミノ酸アミドが含まれる。従って、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドとは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのアミノ基がＦｍоｃで保護されており、一方、カルボキシル基は種々の液相ペプチド合成用担体などの保護基と結合しているアミノ酸又はペプチドを意味する。アミノ酸又はペプチドが１以上のアミノ基を有する場合は、少なくとも一つのアミノ基がＦｍоｃで保護されていれば良い。
なお、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
なお、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、例えば、Ｆｍｏｃ基を導入したいアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに、例えばＴＨＦなどの溶媒中でクロロギ酸９－フルオレニルメチルエステルを縮合剤の存在下に反応させることにより、製造することができる。
Ｆｍｏｃ基の脱保護のために、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に反応させる塩基としては、無機塩基、有機塩基のいずれでも使用し得るが、有機塩基が好ましい。さらに、有機塩基としては、アミン化合物、例えば、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン（ＤＢＵ）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］－５－ノネン（ＤＢＮ）、１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］－オクタン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン類；１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１－エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピぺリジン、ピペラジンなどの１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミン類を用いることができる。好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミンであり、より好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジンである。さらに好ましくはＤＢＵである。
使用するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。本明細書において、Ｆｍｏｃ基の脱保護のために用いる塩基を、アミン化合物ということがあるが、本発明の限定を意図するものではない。
使用するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。本明細書において、Ｆｍｏｃ基の脱保護のために用いる塩基を、アミン化合物ということがあるが、本発明の限定を意図するものではない。
本発明のＦｍоｃ基除去方法は、前記塩基に加えて前記一般式（１）又は（２）で表される化合物を用いることを特徴とする。
一般式（１）又は（２）中Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示す。当該２価の有機基としては、炭素数１～１０の２価の有機基が好ましく、より好ましくは、メルカプト基を有していてもよい炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数６～１０のアリーレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数４～９のヘテロアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、メルカプトトリメチレン基、メルカプトプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基、インドール基、ベンズイミダゾール基、キノリル基、イソキノリン基などが挙げられる。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。３－メルカプトプロパンスルホン酸ナトリウム以外の化合物がより好ましい。
一般式（１）又は（２）中Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示す。当該２価の有機基としては、炭素数１～１０の２価の有機基が好ましく、より好ましくは、メルカプト基を有していてもよい炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数６～１０のアリーレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数４～９のヘテロアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、メルカプトトリメチレン基、メルカプトプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基、インドール基、ベンズイミダゾール基、キノリル基、イソキノリン基などが挙げられる。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。３－メルカプトプロパンスルホン酸ナトリウム以外の化合物がより好ましい。
式（１）で表されるチオスルホン酸類又は式（２）で表されるチオスルホン酸類の化合物の添加量は、理論上副生するジベンゾフルベンの量に対して１～３０当量が好ましく、１～１０当量がより好ましく、１～５当量がさらに好ましい。
前記塩基と式（１）又は（２）の化合物は、同時に添加してもよく、式（１）又は（２）の化合物、次いで塩基の順に添加してもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基の脱離を行ったのちに式（１）又は（２）の化合物を加えてもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基を脱離させたのちに式（１）又は（２）の化合物を加えてもよい。これらのうち、前記塩基と式（１）又は（２）の化合物を同時に添加、又はメルカプト化合物、次いで塩基の順に添加するのが好ましく、式（１）又は（２）の化合物、次いで塩基の順に添加するのがより好ましい。
前記式（１）又は（２）の化合物はジベンゾフルベンと反応し、ジベンゾフルベンとの間で付加体（以下、ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体ということがある）を生成する。当該ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体は、水溶性であるため、分液を行えば水溶液層に移行し、有機層から除去される。本明細書では、塩基、ジベンゾフルベン及び式（１）又は（２）の化合物の３者の共存状態を経て、前記ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体が形成されることを捕捉という。
捕捉によるＦｍｏｃ基除去工程は、―２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
前記塩基と式（１）又は（２）の化合物は、同時に添加してもよく、式（１）又は（２）の化合物、次いで塩基の順に添加してもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基の脱離を行ったのちに式（１）又は（２）の化合物を加えてもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基を脱離させたのちに式（１）又は（２）の化合物を加えてもよい。これらのうち、前記塩基と式（１）又は（２）の化合物を同時に添加、又はメルカプト化合物、次いで塩基の順に添加するのが好ましく、式（１）又は（２）の化合物、次いで塩基の順に添加するのがより好ましい。
前記式（１）又は（２）の化合物はジベンゾフルベンと反応し、ジベンゾフルベンとの間で付加体（以下、ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体ということがある）を生成する。当該ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体は、水溶性であるため、分液を行えば水溶液層に移行し、有機層から除去される。本明細書では、塩基、ジベンゾフルベン及び式（１）又は（２）の化合物の３者の共存状態を経て、前記ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体が形成されることを捕捉という。
捕捉によるＦｍｏｃ基除去工程は、―２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
前記捕捉反応終了後、反応液に水溶液を添加した後、分液すれば、ジベンゾフルベン-式（１）又は式（２）の化合物の付加体は水溶液層へ移行するため、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を効率よく得ることができる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐHを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐHを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
このように、本発明のＦｍｏｃ基除去方法によれば、捕捉後の反応液に単に水溶液を添加して分液するだけで、酸性水溶液を使用する必要がないので、アミノ酸活性エステルと生成物であるペプチドとの分液不良が起こることがない。また、固液分離を必要としないので、ペプチドの液相製造を単離せずにワンポット合成が可能になる。
また、得られた有機溶媒層は、さらに任意のアミノ酸との縮合反応に利用できる。
また、得られた有機溶媒層は、さらに任意のアミノ酸との縮合反応に利用できる。
前記のＦｍｏｃ基除去方法を利用した液相ペプチド合成法は、次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を前記の方法で除去する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を前記の方法で除去する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
工程ａで用いられる液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを保護して、当該保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを有機溶媒に可溶化する担体である。
このような液相ペプチド合成用担体としては、例えば前記特許文献１－１４に記載の化合物が挙げられる。好ましい液相ペプチド合成用担体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物が挙げられる。
このような液相ペプチド合成用担体としては、例えば前記特許文献１－１４に記載の化合物が挙げられる。好ましい液相ペプチド合成用担体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物が挙げられる。
［式中、
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが１以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが１以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
（式中、＊は結合位置を示し；
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
式（Ｉ）中の環Ａは、ヘテロ原子を含んでいてもよく、単環性でも、多環性でよいＣ４～１８の芳香環を示す。当該芳香環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の芳香族複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の芳香族複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の芳香族複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の芳香族複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
Ｒ11は、水素原子を示すか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが前記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよい。Ｒ11とＲ14が一緒になって形成してもよい環としては、フルオレン環又はキサンテン環が好ましい。
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示す。
ここで、Ｒ17としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの直鎖又は分岐鎖のＣ1～１０のアルキル基が挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ17としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの直鎖又は分岐鎖のＣ1～１０のアルキル基が挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。
本明細書において、脂肪族炭化水素基を有する有機基とは、その分子構造中に脂肪族炭化水素基を有する一価の有機基である。当該脂肪族炭化水素基を有する有機基中の脂肪族炭化水素基の部位は、特に限定されず、末端に存在してもよく、それ以外の部位に存在してもよい。
当該有機基中に存在する脂肪族炭化水素基とは、直鎖、分岐状若しくは環状の飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基であり、有機溶媒溶解性の点から、Ｃ５以上の脂肪族炭化水素基が好ましく、Ｃ５～３０の脂肪族炭化水素基がより好ましく、Ｃ８～３０の脂肪族炭化水素基がさらに好ましい。当該脂肪族炭化水素基の具体例としては、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基等が挙げられるが、特にアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基が好ましく、アルキル基がより好ましい。さらに、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルケニル基が好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基がより好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がさらに好ましく、Ｃ８～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がよりさらに好ましい。
当該有機基中に存在する脂肪族炭化水素基とは、直鎖、分岐状若しくは環状の飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基であり、有機溶媒溶解性の点から、Ｃ５以上の脂肪族炭化水素基が好ましく、Ｃ５～３０の脂肪族炭化水素基がより好ましく、Ｃ８～３０の脂肪族炭化水素基がさらに好ましい。当該脂肪族炭化水素基の具体例としては、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基等が挙げられるが、特にアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基が好ましく、アルキル基がより好ましい。さらに、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルケニル基が好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基がより好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がさらに好ましく、Ｃ８～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がよりさらに好ましい。
アルキル基の具体例としては、炭素数１～３０のアルキル基が挙げられ、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、オクチル基、デシル基、ラウリル基、トリデシル基、ミリスチル基、セチル基、ステアリル基、アラキル基、べへニル基、テトラコサニル基、ヘキサコサニル基、イソステアリル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基、各種ステロイド基から水酸基などを除外した基が挙げられる。
アルケニル基としては、ビニル基、１－プロぺニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブテニル基、オレイル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基が挙げられる。
アルキニル基としては、エチニル基、プロパルギル基、１－プロピニル基などが挙げられる。
アルケニル基としては、ビニル基、１－プロぺニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブテニル基、オレイル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基が挙げられる。
アルキニル基としては、エチニル基、プロパルギル基、１－プロピニル基などが挙げられる。
上記の脂肪族炭化水素基には、酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基が置換していてもよい。
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得るシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリル基が好ましい。従って、前記脂肪族炭化水素基には、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリルオキシ基が置換していてもよい。ここで、置換基を有していてもよいアリール基としては、フェニル基、ナフチル基などが挙げられる。
好ましい酸素原子を介して置換するシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基であり、より好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基である。シリルオキシ基に置換する３個のアルキル基又はアリール基は、同一でも異なっていてもよい。なお、当該シリルオキシ基は、前記脂肪族炭化水素基に１～３個置換しているのが好ましい。
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得るシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリル基が好ましい。従って、前記脂肪族炭化水素基には、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリルオキシ基が置換していてもよい。ここで、置換基を有していてもよいアリール基としては、フェニル基、ナフチル基などが挙げられる。
好ましい酸素原子を介して置換するシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基であり、より好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基である。シリルオキシ基に置換する３個のアルキル基又はアリール基は、同一でも異なっていてもよい。なお、当該シリルオキシ基は、前記脂肪族炭化水素基に１～３個置換しているのが好ましい。
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得る脂肪族炭化水素基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルコキシ基、炭素数２～６のアルケニルオキシ基、炭素数３～６のシクロアルキルオキシ基などの一価の基、それらから誘導される二価の基などが挙げられる。
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。ここで、ｐは、１～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示す。
ここで、芳香族環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
Ｒａの芳香族環には、１～３個のハロゲン原子が置換していてもよい。
ここで、芳香族環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
Ｒａの芳香族環には、１～３個のハロゲン原子が置換していてもよい。
Ｒｂは、水素原子、又は前記式（ａ）で表される基を示す。
式（ａ）中のｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが０～４を示す。
ｒは、０～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
式（ａ）中のｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが０～４を示す。
ｒは、０～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示す。
ここで、Ｒ18としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ18としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
Ｒ15及びＲ16で表される酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基は、前記のＲ12及びＲ13と同じものが挙げられ、前記のＲ12及びＲ13と同じものが好ましい。
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
Ｒ15及びＲ16で表される酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基は、前記のＲ12及びＲ13と同じものが挙げられ、前記のＲ12及びＲ13と同じものが好ましい。
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよい。
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。
ここで、Ｒ19としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ19としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
本発明の製造法に用いられる原料の一つである、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸又は液相ペプチド合成用担体に結合したペプチドとは、アミノ酸又はペプチドの反応性基の一つが前記の液相ペプチド合成用担体にと結合しており、少なくとも一つのアミノ基が反応性の状態であるアミノ酸又はペプチドをいう。好ましくは、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基が前記の液相ペプチド合成用担体と結合し、一方、アミノ基は保護されておらず反応性であるものである。液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸アミドとは、アミノ酸アミドの少なくとも一つのアミド基が前記の液相ペプチド合成用担体に結合し、少なくとも一つのアミノ基は保護されておらず反応性であるアミノ酸アミドをいう。
なお、液相ペプチド合成用担体に結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後に、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。その場合の水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
なお、液相ペプチド合成用担体に結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後に、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。その場合の水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
前記の液相ペプチド合成用担体に結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、液相ペプチド合成用担体をＴＨＦ等の有機溶媒に溶解し、例えばＢｏｃ保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミド及び縮合剤、例えば、Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）を添加して縮合を行い、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基に液相ペプチド合成用担体が結合した中間体である液相合成用担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを製造できる。
液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに、直接又はリンカーを介して結合するように導入される。
ここでいうリンカーとは、リンカーの一方がカルボキシル基と結合し、他方が液体ペプチド合成用担体と結合する２つの反応基をもつ有機基である。好ましいリンカーは、分子量が約２０００以下（好ましくは約１５００以下、より好ましくは約１０００以下）の有機基であって、反応基として、同じでも異なってもよく、アミノ基、カルボキシル基、及びハロメチル基からなる群より選ばれる少なくとも２つの基を分子内にもつ化合物である。例えば、以下の化合物を挙げることができる。
ここでいうリンカーとは、リンカーの一方がカルボキシル基と結合し、他方が液体ペプチド合成用担体と結合する２つの反応基をもつ有機基である。好ましいリンカーは、分子量が約２０００以下（好ましくは約１５００以下、より好ましくは約１０００以下）の有機基であって、反応基として、同じでも異なってもよく、アミノ基、カルボキシル基、及びハロメチル基からなる群より選ばれる少なくとも２つの基を分子内にもつ化合物である。例えば、以下の化合物を挙げることができる。
上記リンカーの構造式は、カルボキシル基等に結合する前の状態かつ液体ペプチド合成用担体と結合する前の状態を示す。
上記リンカーを含む液相ペプチド合成用担体のカルボキシル基への導入は、上記リンカーの一方をカルボキシル基に結合した後に他方を液相ペプチド合成用担体に結合しても良く、あるいは、上記リンカーの一方を液体ペプチド合成用担体に結合した後に他方をカルボキシル基に結合してもよい。これらのリンカーのカルボキシル基への導入手段は、公知の方法を適宜参照して行うことができる。例えば、ＤＩＰＣＩ／ＨＯＢｔによるアミド化を挙げることができる。また、上記リンカーの一方と液相ペプチド合成用担体との結合は、互いに結合するリンカーの基及び液相ペプチド合成用担体の基に応じて、公知の方法を適宜参照して行うことができる。例えば、ＤＩＰＣＩによるエステル化を挙げることができる
もう一方の原料である、Ｆｍоｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとは、アミノ酸又はペプチドのアミノ基がＦｍоｃ基で保護されており、一方、カルボキシル基は保護されておらず反応性であるアミノ酸又はペプチドを意味する。アミノ酸又はペプチドが１以上のアミノ基を有する場合は、少なくとも一つのアミノ基がＦｍоｃ基で保護されていれば良い。
なお、Ｆｍоｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
なお、Ｆｍоｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
Ｆｍоｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドは、例えば、Ｆｍｏｃ基を導入したいアミノ酸又はペプチドに、ＴＨＦなどの溶媒中でクロロギ酸９－フルオレニルメチルエステルを縮合剤の存在下に反応させることにより、製造することができる。
本発明の工程ａは前記の原料を縮合させる工程であり、工程ａに用いられる反応溶媒は有機溶媒を含む溶媒である。本発明で用いる前記の液相ペプチド合成用担体でアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを保護すれば、当該液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが、有機溶媒に溶解するようになるため、液相ペプチド合成が可能となる。
そのような有機溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、シクロヘキサン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）、メチル－ｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、２－メチルＴＨＦ、４－メチルテトラヒドロピラン（４－メチルＴＨＰ）、酢酸イソプロピル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ－メチルピロリドンを挙げることができ、好ましくは、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、２－メチルＴＨＦ、４－メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ－メチルピロリドンである。さらに、上記溶媒の２種以上の混合溶媒でもよい。
そのような有機溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、シクロヘキサン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）、メチル－ｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、２－メチルＴＨＦ、４－メチルテトラヒドロピラン（４－メチルＴＨＰ）、酢酸イソプロピル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ－メチルピロリドンを挙げることができ、好ましくは、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、２－メチルＴＨＦ、４－メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ－メチルピロリドンである。さらに、上記溶媒の２種以上の混合溶媒でもよい。
縮合反応は、前記有機溶媒を含む溶媒中で、前記液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミド（以下、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドと略する）と、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチド（以下、Ｆｍｏｃ基保護アミノ酸と略する）と、縮合剤とを混合することにより行うことができる。
液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対する、Ｆｍｏｃ基保護アミノ酸の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、通常１．０１～４当量、好ましくは１．０３～３当量、より好ましくは１．０５～２当量、さらに好ましくは１．１～１．５当量である。本発明のペプチド製造法では、未反応のアミノ酸の活性エステルをその後に添加するスカベンジャーで捕捉して不活性化することができる。そのため、過剰のＦｍｏｃ基保護アミノ酸を用いても、残存の問題が生じない。
縮合剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる縮合剤を用いることができる、例えば、４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン－２－イル）－４－メチルモルホニウムクロリド（ＤＭＴ－ＭＭ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｏ－（６－クロロベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ（６－Ｃｌ））、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｏ－（６－クロロベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、及び１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣ）を挙げることができる。好ましくは、ＤＭＴ－ＭＭ、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、又はＣＯＭＵである。縮合剤の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、好ましくは１～４当量、より好ましくは１～２当量、さらに好ましくは１．０５～１．３当量である。
縮合工程において、反応を促進し、ラセミ化などの副反応を抑制するために、好ましくは、活性化剤が添加される。ここで活性化剤とは、縮合剤との共存化で、アミノ酸を、対応する活性エステル、対称酸無水物などに導いて、ペプチド結合（アミド結合）を形成させやすくする試薬である。活性化剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる活性化剤を用いることができる。例えば、ＨＯＢｔ、ＨＯＣｔ、ＨＯＡｔ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＨＯＰｈｔ、ＨＯＮｂ、ペンタフルオロフェノール、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル（Ｏｘｙｍａ）等を挙げることができる。好ましくは、ＨＯＢｔ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＣｔ、ＨＯＡｔ、ＨＯＮｂ、ＨＯＳｕ、Ｏｘｙｍａである。活性化剤の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、好ましくは１～４当量、より好ましくは１～２当量、さらに好ましくは１．０５～１．３当量である。
前記溶媒の使用量は、液相ぺプチド合成用担体結合ペプチド等を溶解した濃度が、好ましくは０．１ｍＭ～１Ｍとなる量であり、より好ましくは１ｍＭ～０．５Ｍとなる量である。
反応温度は、ペプチド合成において一般的に用いられる温度が、例えば、－２０～４０℃が好ましく、より好ましくは０～３０℃である。反応時間（１サイクルの時間）は、通常０．５～３０時間である。
反応温度は、ペプチド合成において一般的に用いられる温度が、例えば、－２０～４０℃が好ましく、より好ましくは０～３０℃である。反応時間（１サイクルの時間）は、通常０．５～３０時間である。
工程ｂは、縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程である。
アミノ酸活性エステルスカベンジャーとしては、有機溶媒中で反応を継続する観点から、アミノ基含有化合物が好ましく、特に２価以上の水溶性アミン、アルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミン、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ基含有化合物が好ましい。
アミノ酸活性エステルスカベンジャーとしては、有機溶媒中で反応を継続する観点から、アミノ基含有化合物が好ましく、特に２価以上の水溶性アミン、アルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミン、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ基含有化合物が好ましい。
２価以上の水溶性アミンとしては、例えば、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１－エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピペラジンを挙げることができ、好ましくは、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミンであり、より好ましくは、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、ジエチレントリアミンであり、さらに好ましくは、１－メチルピペラジンである。
用いることができるアルキルアミンとしては、例えば、炭素数１～１４のアルキルアミンを挙げることができ、好ましくは炭素数２～１０のアルキルアミン、より好ましくは炭素数２～８のアルキルアミン、さらに好ましくは炭素数３～４のアルキルアミンである。また本発明で用いることができる芳香族アミンとしては、たとえば炭素数１～１４の芳香族アミンを挙げることができ、好ましくは炭素数６～１０の芳香族アミンである。具体的なアルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミンとしては、これに限定されないが、例えば、プロピルアミン、ブチルアミン、ヘキシルアミン、アニリン、トルイジン、２，４，６－トリメチルアニリン、アニシジン、フェネチジン、ヒドロキシルアミンをあげることができ、特に好ましくは、プロピルアミンである。
アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類としては、下記の一般式で挙げられるものが好ましい。
すなわち、次の一般式（３）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類；
アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類としては、下記の一般式で挙げられるものが好ましい。
すなわち、次の一般式（３）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類；
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ1は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（４）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
一般式（４）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（５）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
一般式（５）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
一般式（３）中のＲ1及び一般式（４）のＲ2は、独立して、炭素数１～１０の２価の有機基であり、好ましくは、炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～１０のアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基などが挙げられる。
一般式（３）において、Ｘ1が単結合の場合はアミノスルホン酸類であり、Ｘ２が酸素原子の場合はアミノ硫酸類である。
一般式（４）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
一般式（３）において、Ｘ1が単結合の場合はアミノスルホン酸類であり、Ｘ２が酸素原子の場合はアミノ硫酸類である。
一般式（４）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
一般式（５）中のｎは、０～２０の整数を示す。このうちｎは、０又は２～２０が好ましく、０又は２～６がより好ましく、０又は２～４がさらに好ましい。一般式（５）中のＲ3、Ｒ4は、水素原子またはヒドロキシルメチル基が好ましい。
前記アミノ基含有化合物のうち、アミノ酸活性エステルスカベンジャーとしてアミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いるのがより好ましい。これらの化合物をスカベンジャーとして用いることにより、アミノ酸活性エステルが除去できるだけでなく、酸性条件とすることなくジベンゾフルベン（ＤＢＦ）などの副生成物を除去でき、ペプチドの液相製造を単離せずにワンポット合成が可能になる。
工程ｂにおけるアミノ基含有化合物の添加量は、理論上残存する活性アミノ酸エステル１当量に対して、好ましくは１～１０当量、より好ましくは１～６当量、さらに好ましくは１～４当量である。アミノ基含有化合物の添加量が少なすぎると、アミノ酸活性エステルのスカベンジ（捕獲）が不充分となり、残存したアミノ酸活性エステルと工程ｃで生成したアミノ基が反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。一方、多すぎると、同時に脱アミノ保護基反応が進行し、残存しているアミノ酸活性エステルが再生したアミノ基と反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。
工程ｃは、反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を除去する工程である。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、反応液を塩基性にできればよいが、アミン化合物、例えば、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン（ＤＢＵ）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］－５－ノネン（ＤＢＮ）、１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］－オクタン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン類；１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１－エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピぺリジン、ピペラジンなどの１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミン類を用いることができる。好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミンであり、より好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジンである。さらに好ましくはＤＢＵである。
工程ｃにおいて添加するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。
工程ｃにおいて添加するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。
この工程では、脱Ｆｍｏｃ反応により生じるＤＢＦ（ジベンゾフルベン）を捕捉（以下、トラッピングということがある）する工程であり、当該トラッピング剤として、一般式（１）又は（２）
（式中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示し、Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す）
で表される化合物が好ましい。
で表される化合物が好ましい。
一般式（１）又は（２）中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示す。当該２価の有機基としては、炭素数１～１０の２価の有機基が好ましく、より好ましくは、メルカプト基を有していてもよい炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数６～１０のアリーレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数４～９のヘテロアリーレン基が挙げられる。さらに好ましくは、一般式（１）又は（２）中Ｌ１及びＬ２は、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基であり、さらに好ましくは炭素数１、２、４の直鎖アルキレン基であり、さらに好ましくは炭素数１、２のアルキレン基である。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、メルカプトトリメチレン基、メルカプトプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基、インドール基、ベンズイミダゾール基、キノリル基、イソキノリン基などが挙げられる。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。
本明細書において一般式（１）で表されるチオスルホン酸類及び一般式（２）で表されるチオホスホン酸類を総称する場合、「メルカプト化合物」ということがあり、これらはトラッピング剤である。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。
本明細書において一般式（１）で表されるチオスルホン酸類及び一般式（２）で表されるチオホスホン酸類を総称する場合、「メルカプト化合物」ということがあり、これらはトラッピング剤である。
メルカプト化合物の添加量は、理論上副生するＤＢＦの量に対して１～３０当量が好ましく、１～１０当量がより好ましく、１～５当量がさらに好ましい。
前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加してもよく、アミン化合物を加えＦｍｏｃ基を脱離させたのちにメルカプト化合物を加えてもよい。これらのうち、前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加するのが好適であり、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加するのがより好適である。当該メルカプト化合物はＤＢＦと反応し、ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体を生成する。当該ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体は、水溶性であるため、分液を行えば水溶液層に移行し、有機層から除去される。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、－２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加してもよく、アミン化合物を加えＦｍｏｃ基を脱離させたのちにメルカプト化合物を加えてもよい。これらのうち、前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加するのが好適であり、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加するのがより好適である。当該メルカプト化合物はＤＢＦと反応し、ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体を生成する。当該ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体は、水溶性であるため、分液を行えば水溶液層に移行し、有機層から除去される。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、－２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
工程ｄは、反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程である。
具体的には、反応液に水溶液を添加した後、水層と有機溶媒層を分液する。
水層には、Ｆｍｏｃ基が脱離した活性エステルスカベンジャーと、ジベンゾフルベン－式（１）又は（２）の化合物付加体が含まれる。すなわち、Ｆｍｏｃ基の脱離工程で副生するジベンゾフルベンは、水溶液の添加だけで、容易に水層に抽出される。
一方、有機溶媒層には、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体が含まれる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐＨを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
具体的には、反応液に水溶液を添加した後、水層と有機溶媒層を分液する。
水層には、Ｆｍｏｃ基が脱離した活性エステルスカベンジャーと、ジベンゾフルベン－式（１）又は（２）の化合物付加体が含まれる。すなわち、Ｆｍｏｃ基の脱離工程で副生するジベンゾフルベンは、水溶液の添加だけで、容易に水層に抽出される。
一方、有機溶媒層には、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体が含まれる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐＨを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
このように、本発明のＦｍｏｃ基除去方法によれば、単に水溶液を添加して分液するだけで、酸性水溶液を使用する必要がないので、アミノ酸活性エステルと生成物であるペプチドとの分液不良が起こることがない。また、固液分離を必要としないので、ペプチドの液相製造を単離せずにワンポット合成が可能になる。一連の工程は、マイクロフロー技術を用いて実施しても良い。マイクロフロー技術を用いたペプチド合成技術については、例えばＮａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ７， Ａｒｔｉｃｌｅ ｎｕｍｂｅｒ：１３４９１（２０１６）に記載がある。
また、得られた有機溶媒層は、さらに任意のアミノ酸との縮合反応に利用できる。
また、得られた有機溶媒層は、さらに任意のアミノ酸との縮合反応に利用できる。
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
なお、液相ペプチド合成用担体として、以下に示す化合物を使用した。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ベンジル化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｂ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
なお、液相ペプチド合成用担体として、以下に示す化合物を使用した。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ベンジル化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｂ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ジフェニルメタン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｄ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）は、Ｄ－ＳＴａｇのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護された化合物である。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型キサンテン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｘ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型キサンテン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｘ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）は、Ｘ－ＳＴａｇのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護された化合物である。
また、以下の実施例では、Ｂ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護グルタミン酸（Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）と表記し、下記の構造を示すものとする。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
また、以下の実施例では、Ｂ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護グルタミン酸（Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）と表記し、下記の構造を示すものとする。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
また、Ｄ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護スレオニン（Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）と表記し、これは下記の構造を示すものとする。スレオニンに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
また、Ｘ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護スレオニン（Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物をＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）と表記し、これは下記の構造を示すものとする。スレオニンに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
実施例１
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．４０ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３.２１ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３６．８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．９４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３８ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．４２ｇ（８．６ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３４ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液７５ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１７ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液６ｍＬ、ＤＭＦ １．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したジベンゾフルベン（ＤＢＦ）が２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．４０ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３.２１ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３６．８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．９４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３８ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．４２ｇ（８．６ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３４ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液７５ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１７ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液６ｍＬ、ＤＭＦ １．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したジベンゾフルベン（ＤＢＦ）が２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.３８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.３８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
３）Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.４３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.４３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
４）Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ一水和物 １.３３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ一水和物 １.３３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
５）Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．５８ｇを得た。
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．５８ｇを得た。
６）Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２９ｍＬ、ジチオトレイトール８６５ｍｇ、アニソール０．５８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ジイソプロピルエーテル７２ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をジイソプロピルエーテル１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は９０．５%であった。
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２９ｍＬ、ジチオトレイトール８６５ｍｇ、アニソール０．５８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ジイソプロピルエーテル７２ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をジイソプロピルエーテル１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は９０．５%であった。
実施例２
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．０９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３２ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（ＡＥＥＥ）６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．０９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３２ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（ＡＥＥＥ）６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
２）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
３）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
４）Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
５）Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２４ｍＬ、ＩＰＡ１８ｍＬ、ＣＰＭＥ６ｍＬ、水１２ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．８４ｇを得た。
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２４ｍＬ、ＩＰＡ１８ｍＬ、ＣＰＭＥ６ｍＬ、水１２ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．８４ｇを得た。
６）Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）１．１４ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ２２７ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７７．２%であった。
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）１．１４ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ２２７ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７７．２%であった。
実施例３
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．７９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ２ｍＬ、ＴＨＦ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．０６ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．４８ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン１２．２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール１５０μＬ（２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．７４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ４．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ１．７ｍＬ（１１．３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液６ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層に２０％食塩水２０ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ９ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．７９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ２ｍＬ、ＴＨＦ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．０６ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．４８ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン１２．２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール１５０μＬ（２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．７４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ４．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ１．７ｍＬ（１１．３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液６ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層に２０％食塩水２０ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ９ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.７９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.７９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
３）Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で５５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２５分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で５５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２５分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
４）Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 ０．４７ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７８ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８９μＬ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 ０．４７ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７８ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８９μＬ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
５）Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０．５６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、水 ３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５６ｇを得た。
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０．５６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、水 ３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５６ｇを得た。
６）Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は７８．４%であった。
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は７８．４%であった。
実施例４
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．１１ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ８ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３３ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．６ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５４ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１１０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１００分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液２０ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１５ｍＬ、ＤＭＦ １．６ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．１１ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ８ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３３ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．６ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５４ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１１０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１００分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液２０ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１５ｍＬ、ＤＭＦ １．６ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
２）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．４７ｍＬ（２．７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール（ＡＥ）８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、９０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．４７ｍＬ（２．７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール（ＡＥ）８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、９０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
３）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５７ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で１０５分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、８５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１６ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５７ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で１０５分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、８５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１６ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
４）Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、３-アミノプロパンスルホン酸０．１９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１００分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１６ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、３-アミノプロパンスルホン酸０．１９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１００分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１６ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが２－メルカプト－１－エタンスルホン酸と反応した化合物［２－（９－フルオレニルメチルチオ）エタンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
５）Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を濃縮して得た残渣２，３６ｇのうち０．４７ｇ（０．２ｍｍｏｌ相当）をはかり取り、２－メチルテトラヒドロフラン１．８ｍＬ、ＤＭＦ０．４ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.１７ｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．１１ｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．１４ｍＬ（０．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、硫酸水素２－アミノエチル３８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ０．６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸（合成例１にて合成）７６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．１８ｍＬ（１．２ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液５ｍＬ、ＣＰＭＥ１ｍＬ、ＴＨＦ１ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３ｍＬ、ＤＭＦ ０．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロパンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４ｍＬ、ＩＰＡ１ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） ０．３１ｇを得た。
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を濃縮して得た残渣２，３６ｇのうち０．４７ｇ（０．２ｍｍｏｌ相当）をはかり取り、２－メチルテトラヒドロフラン１．８ｍＬ、ＤＭＦ０．４ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.１７ｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．１１ｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．１４ｍＬ（０．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で７５分撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、硫酸水素２－アミノエチル３８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ０．６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸（合成例１にて合成）７６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ ０．１８ｍＬ（１．２ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液５ｍＬ、ＣＰＭＥ１ｍＬ、ＴＨＦ１ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３ｍＬ、ＤＭＦ ０．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロパンスルホン酸］がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４ｍＬ、ＩＰＡ１ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） ０．３１ｇを得た。
６）Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）０．２５ｇ（０．１１ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸３．２ｍＬ、水０．０９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．０９ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．１８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ３０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ５ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ７８ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は８２．０%であった。
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）０．２５ｇ（０．１１ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸３．２ｍＬ、水０．０９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．０９ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．１８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ３０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ５ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ７８ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は８２．０%であった。
合成例１
３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸の合成
３－ブロモ－１－プロパンホスホン酸ジエチル７７７ｍｇ（３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル６ｍＬに溶解し、トリフェニルメタンチオール１．６６ｇ（６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．５４ｍＬ（３．９ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で１８時間撹拌した。ＭＴＢＥ２０ｍＬ、水２０ｍＬを加え分液し、有機層を２０％塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。得られた有機層を濃縮し、濃縮残渣２．３９ｇを得た。残渣をヘプタン／酢酸エチル（２／１）に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、３－（トリフェニルメチルチオ）－１－プロパンホスホン酸ジエチル１．３６ｇを定量的収率で得た。
上記で得た３－（トリフェニルメチルチオ）－１－プロパンホスホン酸ジエチル１．３６ｇをアセトニトリル１０ｍＬに溶解し、トリメチルシリルブロミド１，９５ｍＬ（１５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間撹拌した。メタノール４ｍＬを加え、過剰なトリメチルシリルブロミドと反応させたのち、減圧濃縮した。濃縮残渣にアセトニトリル１５ｍＬを加え、溶解していない固体を濾別した。ろ液を濃縮し、濃縮残渣２．３２ｇを得た。得られた残渣にトリフルオロ酢酸２２．８ｍＬ、水０．６ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。反応液にＭＴＢＥ２４ｍＬを加え、析出した固体を濾別したのち、ろ液を濃縮し、濃縮残渣３．３０ｇを得た。残渣にＭＴＢＥ３５ｍＬ、ヘプタン１２ｍＬ、水１０ｍＬを加え、分液した。有機層から水５ｍＬで２回再抽出したのち、水層を合わせ減圧濃縮した。濃縮残渣０．７２ｇを得た。残渣を水に溶解し、ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィ（カラム：ＹＭＣ社製ＯＤＳ－ＡＱ－ＨＧ；１０ｍｍ×２５０ｍｍ）で精製し、目的とする３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸０．３０ｇを得た。
1Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ6，５００ＭＨｚ）σ＝１．６０（２Ｈ，ｍ）、１．７１（２Ｈ，ｍ）、２．３２（１Ｈ，ｂｒ）、２．５３（２Ｈ，ｍ）
ＬＣ－ＭＳ ｍ／ｚ １５７．００［Ｍ＋Ｈ+］
３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸の合成
３－ブロモ－１－プロパンホスホン酸ジエチル７７７ｍｇ（３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル６ｍＬに溶解し、トリフェニルメタンチオール１．６６ｇ（６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．５４ｍＬ（３．９ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で１８時間撹拌した。ＭＴＢＥ２０ｍＬ、水２０ｍＬを加え分液し、有機層を２０％塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。得られた有機層を濃縮し、濃縮残渣２．３９ｇを得た。残渣をヘプタン／酢酸エチル（２／１）に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、３－（トリフェニルメチルチオ）－１－プロパンホスホン酸ジエチル１．３６ｇを定量的収率で得た。
上記で得た３－（トリフェニルメチルチオ）－１－プロパンホスホン酸ジエチル１．３６ｇをアセトニトリル１０ｍＬに溶解し、トリメチルシリルブロミド１，９５ｍＬ（１５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間撹拌した。メタノール４ｍＬを加え、過剰なトリメチルシリルブロミドと反応させたのち、減圧濃縮した。濃縮残渣にアセトニトリル１５ｍＬを加え、溶解していない固体を濾別した。ろ液を濃縮し、濃縮残渣２．３２ｇを得た。得られた残渣にトリフルオロ酢酸２２．８ｍＬ、水０．６ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。反応液にＭＴＢＥ２４ｍＬを加え、析出した固体を濾別したのち、ろ液を濃縮し、濃縮残渣３．３０ｇを得た。残渣にＭＴＢＥ３５ｍＬ、ヘプタン１２ｍＬ、水１０ｍＬを加え、分液した。有機層から水５ｍＬで２回再抽出したのち、水層を合わせ減圧濃縮した。濃縮残渣０．７２ｇを得た。残渣を水に溶解し、ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィ（カラム：ＹＭＣ社製ＯＤＳ－ＡＱ－ＨＧ；１０ｍｍ×２５０ｍｍ）で精製し、目的とする３－メルカプト－１－プロパンホスホン酸０．３０ｇを得た。
1Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ6，５００ＭＨｚ）σ＝１．６０（２Ｈ，ｍ）、１．７１（２Ｈ，ｍ）、２．３２（１Ｈ，ｂｒ）、２．５３（２Ｈ，ｍ）
ＬＣ－ＭＳ ｍ／ｚ １５７．００［Ｍ＋Ｈ+］
参考例１
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．３９ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３．１９ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３７ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間半撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．６０ｇ（４．８ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 １．１８ｍＬ（１３．５ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３３．８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１６．９ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液６８ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層にＣＰＭＥ ４ｍＬ、ＤＭＦ ０．６ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液３ｍＬ、２０％食塩水９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にはＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し６．５％残存した。得られた有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２６．７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．３９ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３．１９ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３７ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間半撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．６０ｇ（４．８ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 １．１８ｍＬ（１３．５ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３３．８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１６．９ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液６８ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層にＣＰＭＥ ４ｍＬ、ＤＭＦ ０．６ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液３ｍＬ、２０％食塩水９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にはＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し６．５％残存した。得られた有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２６．７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２．３７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ６３４ｕＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ ２．７ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し０．１％残存した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２．３７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ６３４ｕＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ ２．７ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し０．１％残存した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
３）Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２．４４ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５６ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、５５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１．３％残存した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２．４４ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５６ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、５５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１．３％残存した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
４）Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 １．３４ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬ（１２．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し０．７％残存した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 １．３４ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬ（１２．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し０．７％残存した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
５）Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬ（１２．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５６ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間半撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が２．６％残存した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ３０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．４１ｇを得た。
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ１．８ｍＬ、ＤＭＦ６．７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６８ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１２ｍＬ（１２．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５６ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １５．６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。０℃に冷却し、３－メルカプトプロピオン酸 ０．６３ｍＬ（７．３ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７３ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間半撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ基から生成したＤＢＦが３－メルカプトプロピオン酸と反応した化合物［３－（９－フルオレニルメチルチオ）プロピオン酸］が２．６％残存した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ３０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．４１ｇを得た。
６）Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６１ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７４ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は２．４%であった。なお、純度が低かった理由として、各伸長反応工程で副生したＤＢＦと従来のトラッピング剤である３－メルカプトプロピオン酸が反応した化合物（ＤＢＦ－チオカルボン酸付加体）の存在の影響が考えられた。
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６１ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７４ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は２．４%であった。なお、純度が低かった理由として、各伸長反応工程で副生したＤＢＦと従来のトラッピング剤である３－メルカプトプロピオン酸が反応した化合物（ＤＢＦ－チオカルボン酸付加体）の存在の影響が考えられた。
上記したように、実施例ではＦｍｏｃ脱離反応時に生成するＤＢＦと本発明のトラッピング剤との反応物（ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体）は、当該トラッピング工程後の分液で得られた有機層では確認されなかったが、従来のトラッピング剤を用いた参考例では、ＤＢＦとの反応物が確認された。これより、アミン化合物、ＤＢＦ、本発明のトラッピング剤の３者共存下に、ＤＢＦ－メルカプト化合物付加体を形成してＤＢＦを捕捉し、次工程の分液で有機層よりＤＢＦをＤＢＦ－メルカプト化合物付加体として除去するという本発明の効果が確認された。
Claims (7)
- Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体に塩基を反応させてＦｍоｃ基を除去する方法であって、当該反応によって生じるジベンゾフルベン誘導体を一般式（１）又は（２）
で表される化合物により捕捉させることを特徴とする方法。 - Ｌ１及びＬ２が、炭素数１～１０の２価の有機基である請求項１記載の方法。
- Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸誘導体が、Ｆｍоｃでアミノ基が保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドである請求項１又は２記載の方法。
- 次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記Ｆｍｏｃ基でアミノ基が保護された化合物のＦｍｏｃ基を請求項１～３のいずれか１項記載の方法で除去する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体と結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記Ｆｍｏｃ基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。 - 前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、アミノ基含有化合物である請求項４記載の液相ペプチド製造方法。
- 前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、２価以上の水溶性アミン、アルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキシルアミン、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ基含有化合物である請求項４又は５記載の液相ペプチド製造方法。
- 前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接またはリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である請求項４～６のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021111128A JP7063409B1 (ja) | 2021-07-02 | 2021-07-02 | Ｆｍоｃ基を除去する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021111128A JP7063409B1 (ja) | 2021-07-02 | 2021-07-02 | Ｆｍоｃ基を除去する方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP7063409B1 JP7063409B1 (ja) | 2022-05-09 |
| JP2023007949A true JP2023007949A (ja) | 2023-01-19 |
Family
ID=81534470
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021111128A Active JP7063409B1 (ja) | 2021-07-02 | 2021-07-02 | Ｆｍоｃ基を除去する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP7063409B1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023136301A1 (ja) * | 2022-01-17 | 2023-07-20 | 学校法人中部大学 | ペプチド化合物の製造方法 |
| WO2023214577A1 (ja) * | 2022-05-02 | 2023-11-09 | 中外製薬株式会社 | ジケトピペラジン形成による欠損を抑制するペプチド合成方法 |
| WO2024096023A1 (ja) * | 2022-11-01 | 2024-05-10 | 中外製薬株式会社 | ジベンゾフルベンまたはジベンゾフルベン誘導体の除去方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017221889A1 (ja) * | 2016-06-20 | 2017-12-28 | 積水メディカル株式会社 | 新規ジフェニルメタン保護剤 |
| WO2018021233A1 (ja) * | 2016-07-25 | 2018-02-01 | 積水メディカル株式会社 | 新規キサンテン保護剤 |
-
2021
- 2021-07-02 JP JP2021111128A patent/JP7063409B1/ja active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017221889A1 (ja) * | 2016-06-20 | 2017-12-28 | 積水メディカル株式会社 | 新規ジフェニルメタン保護剤 |
| WO2018021233A1 (ja) * | 2016-07-25 | 2018-02-01 | 積水メディカル株式会社 | 新規キサンテン保護剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP7063409B1 (ja) | 2022-05-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7063409B1 (ja) | Ｆｍоｃ基を除去する方法 | |
| JP6092513B2 (ja) | フルオレン化合物 | |
| JP6703668B2 (ja) | ペプチド合成方法 | |
| JP6713983B2 (ja) | ペプチド合成方法 | |
| JP6350632B2 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
| JP7063408B1 (ja) | 液相ペプチド製造方法 | |
| JP6703669B2 (ja) | リュープロレリンの製造方法 | |
| CN110183347B (zh) | 一种含有苯甲基结构的化合物及其应用 | |
| JPWO2020175472A1 (ja) | ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び、縮合多環芳香族炭化水素化合物 | |
| CN110256277B (zh) | 一种含有芴环结构的化合物及其应用 | |
| JP7154513B1 (ja) | 液相ペプチド製造方法 | |
| WO2023033017A1 (ja) | ガニレリクス又はその塩の製造法 | |
| TW202112759A (zh) | 肽化合物的製造方法、保護基形成用試藥及縮合多環化合物 | |
| WO2023033016A1 (ja) | アルギニン誘導体 | |
| JP5567004B2 (ja) | グアニジノ基およびアミノ基の保護のためのインドールスルホニル保護基 | |
| JP7278775B2 (ja) | 長鎖化合物の製造方法 | |
| JP7162853B1 (ja) | 液相ペプチド合成用担体結合ペプチドの分析方法 | |
| JP5982720B2 (ja) | 高分子固体状支持体を用いたヒスチジル−プロリンアミド誘導体の製造方法 | |
| TW202233574A (zh) | 肽之製造方法、保護基形成用試藥及縮合多環化合物 | |
| WO2021192488A1 (ja) | アミド結合含有化合物の製造方法 | |
| KR100543980B1 (ko) | 2-(4-니트로페닐)설포닐에톡시카르보닐 치환된 아미노산유도체와 이의 제조방법 | |
| CN116997559A (zh) | 氨基酸或肽的制造方法、保护基形成用试剂及化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211124 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20211124 |
|
| A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20211124 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220104 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220301 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220329 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220404 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7063409 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |