JP2022551290A - 芫花、威霊仙、及び天麻の複合生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または治療用組成物 - Google Patents
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Abstract
本発明は、芫花（ゲンカ）、威霊仙（イレイセン）、及び天麻（テンマ）の複合生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物に関する。さらに、本発明は、前記生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または改善用食品組成物または飼料組成物に関する。【選択図】図１
Description
本発明は、芫花（ゲンカ）、威霊仙（イレイセン）、及び天麻（テンマ）の複合生薬抽出物を有効成分として含む神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物に関する。さらに、本発明は、前記生薬抽出物を有効成分として含む神経変性疾患の予防または改善用食品組成物または飼料組成物に関する。
近年、高齢者人口の急増に伴い、様々な神経変性脳疾患患者が増加しており、それに対する治療と予防に関心が高まっている。神経変性脳疾患は、神経の変性変化によって運動障害、記憶障害、認知障害などの様々な病症を引き起こす疾病である。
特に、パーキンソン病は、過剰な活性酸素種の生成、酸化ストレス、ミスフォールド（ｍｉｓｆｏｌｄｅｄ）タンパク質及び損傷したミトコンドリア機能のような様々な刺激による黒質緻密部（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａ ｎｉｇｒａ ｐａｒｓ ｃｏｍｐａｃｔｒａ；ＳＮｐｃ）のメラニン色素を含有したドーパミン神経の細胞死滅と線条体（ｓｔｒｉａｔｕｍ）のドーパミン欠乏により現れる疾患として知られている。ドーパミンは脳の黒質で生成されるが、黒質の神経細胞は、脳の運動皮質及びその他の様々な部位と複雑に連結されており、人体の運動をスムーズ且つ正確に行えるようにする基底核という部位と連結されており、ドーパミンは、そのような基底核の機能を調節する。黒質から分泌されるドーパミンが不足して発病するパーキンソン疾患は、振戦（ｔｒｅｍｏｒ）、運動緩徐（ｂｒａｄｙｋｉｎｅｓｉａ）、筋硬直（ｒｉｇｉｄｉｔｙ）、姿勢動揺（ｐｏｓｔｕｒａｌ ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ）、運動不能（ａｋｉｎｅｓｉａ）などの症状を伴う。これまで、パーキンソン病を治療するために、主にドーパミン前駆物質であるＬ－ｄｏｐａを投与してドーパミンを補充する方法を用いていたが、多くの臨床研究から、継続したＬ－ｄｏｐａの使用は深刻な副作用を招くことが知られている（ＭｃＧｅｅｒ ＰＬ、ＭｃＧｅｅｒ ＥＧ．Ｇｌｉａｌ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｏｖ Ｄｉｓｏｒｄ．２００８；２３（４）：４７４－８３．）。従って、パーキンソン病において合成医薬品より副作用の少ない天然物医薬品の開発は患者にとって多いに役立つ可能性がある。
従って、副作用を最低限に抑えるために天然物質を利用した治療薬が開発されており、その例として、カガミグサ抽出物を有効成分として含むパーキンソン病の予防または治療用組成物（特許文献１）、牧丹皮抽出物を含むパーキンソン病の予防または治療用組成物（特許文献２）などが知られている。
一方、芫花（ゲンカ；Ｇｅｎｋｗａｅ Ｆｌｏｓ）は、ジンチョウゲ科（Ｔｈｙｍｅｌｅａｃｅａｅ）フジモドキ（Ｄａｐｈｎｅ ｇｅｎｋｗａ Ｓｉｅｂｏｌｄ ｅｔ Ｚｕｃｃａｒｉｎｉ）のつぼみであって、肺経、脾経、腎経に作用して、利尿作用及び痰をなくす効能を有し、喘息、咳嗽、水腫、食中毒を治療する漢方薬材として用いられてきた。威霊仙（イレイセン；Ｃｌｅｍａｔｉｄｉｓ Ｒａｄｉｘ）は、キンポウゲ科（Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ）のコマセンニンソウ（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒｅｃｈｔ）及び代替可能な同属近縁植物であるホソバクサボタン（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｈｅｘａｐｅｔａｌａ Ｐａｌｌａｓ）、サキシマボタンヅル（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｏｓｂｅｃｋ）、クレマチストリコトマナカイ（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｔｒｉｃｈｏｔｏｍａ Ｎａｋａｉ）、クレマチスアーマンディー（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ａｒｍａｎｄｉｉ）の根及び根茎である。威霊仙は、風湿を除去して関節屈伸不利、四肢麻痺、腰痛、四肢疼痛、筋肉麻痺、及び打撲傷を治療し、五臓の機能亢進及び経絡が詰まって生じる痛みに用いられ、薬理作用としては、血圧降下、平滑筋興奮、利尿作用、血糖下降作用、陣痛、坑菌作用が報告されている。天麻（テンマ；Ｇａｓｔｒｏｄｉａｅ Ｒｈｉｚｏｍａ）は、ラン科（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）のオニノヤガラ（Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａ ＢＬＵＭＥ）の塊茎を蒸して乾燥したものであって、肝臓に作用してけいれん発作、破傷風、小児急慢驚風、目まい症、頭痛、神経衰弱、頭痛などに用いられる。また、天麻は、鎮静、抗けいれん、陣痛、抗炎症、心臓と脳血流の増加、血圧降下、抗酸化力の増加、免疫活性化作用を示す。
しかしながら、これまで、芫花、威霊仙、天麻の複合生薬抽出物がパーキンソン病のような神経変性疾患の治療に効果的に用いられ得るかは公知にされていない。
そのような背景下において、本発明者らは、神経変性疾患を治療できる方法を開発するために繰り返し研究を重ねた結果、芫花、威霊仙、及び天麻の複合生薬抽出物を用いると、それぞれの単一抽出物を用いることよりはるかに優れた治療効果があることを見出し、本発明の完成に至った。
本発明は、芫花、威霊仙、及び／または天麻の複合生薬抽出物を有効成分として含む神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物を提供することを目的とする。
本発明は、芫花、威霊仙、及び／または天麻の複合生薬抽出物を有効成分として含む神経変性疾患の予防または改善用食品組成物を提供することを目的とする。
本発明は、芫花、威霊仙、及び／または天麻の複合生薬抽出物を有効成分として含む神経変性疾患の予防または改善用飼料組成物を提供することを目的とする。
本発明は、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物を提供する。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び威霊仙の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、威霊仙及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は芫花、威霊仙、及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記生薬抽出物は、水、Ｃ１～Ｃ６のアルコール、酢酸、それらの混合溶媒、及び非極性溶媒からなる群より選ばれる溶媒で抽出されてもよい。好ましくは、０．０１～９０％のエタノール抽出物であり、最も好ましくは、５０～７０％のエタノール抽出物である。
一実施形態において、前記神経変性疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ピック病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、プリオン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、進行性核上性麻痺、フリードライヒ運動失調症、側頭葉てんかん、または脳卒中であってもよい。好ましくは、パーキンソン病である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び威霊仙の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５であり、さらに好ましくは１：１０である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び天麻の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５であり、さらに好ましくは１：１０である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、威霊仙及び天麻の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：０．０５～２０であってもよく、最も好ましくは１：１である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花、威霊仙、及び天麻の生薬抽出物を含み、芫花、威霊仙、及び天麻の配合重量比は１：１～２０：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５：５～１５であり、最も好ましくは１：１０：１０である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、行動能力を向上させることで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞において毒性による細胞死滅を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
さらに他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞において活性酸素種（ＲＯＳ）の生成を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞においてミトコンドリアの機能を保護することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
さらに他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞のアポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、酸化窒素（ＮＯ）の生成を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
本発明はまた、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または改善用食品組成物を提供する。
本発明はさらに、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または改善用飼料組成物を提供する。
本発明の芫花、威霊仙、及び／または天麻の複合生薬抽出物を有効成分として含む薬学組成物は、神経変性疾患、特に、パーキンソン病において優れた治療効果を示し、新規な治療薬として用いられてもよい。
また、本発明の薬学組成物は、天然物を有効成分として含むことで従来の治療薬の副作用を減らし、安全な治療薬として用いられてもよい。
以下、添付の図面を参照して、本発明の属する技術分野における通常の知識を有する者が容易に実施できるように本願の実施態様及び実施例を詳しく説明する。しかしながら、本願は、さまざまな形態で具現されることができ、ここで説明する実施態様及び実施例に限定されるものではない。
本願の明細書全体で、どの部分がどの構成要素を「含む」とするとき、これは、特に反対される記載がない限り、他の構成要素を除外するのではなく、他の構成要素をさらに含んでもよいことを意味する。
本発明は、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物に関する。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び威霊仙の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、威霊仙及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花、威霊仙、及び天麻の生薬抽出物を含んでもよい。
本願に用いられた用語「生薬抽出物」または「複合生薬抽出物」は、本発明の薬学組成物の有効成分として、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる生薬から抽出されたそれぞれの抽出物を含むか、あるいはこれら生薬の混合物から抽出された抽出物を含んでもよい。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び威霊仙の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５であり、さらに好ましくは１：１０である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花及び天麻の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５であり、さらに好ましくは１：１０である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、威霊仙及び天麻の生薬抽出物を含み、前記二つの生薬またはそれらの生薬抽出物の配合重量比は１：０．０５～２０であってもよく、最も好ましくは１：１である。
一実施形態において、前記薬学組成物は、芫花、威霊仙、及び天麻の生薬抽出物を含み、芫花、威霊仙、及び天麻の配合重量比は１：１～２０：１～２０であってもよく、好ましくは１：５～１５：５～１５であり、最も好ましくは１：１０：１０である。
また、本発明の薬学組成物は、本発明の組成物が示すものと同一または類似した効果を有するものと当業界に知られている他の生薬の抽出物をさらに含んでもよい。
また、本発明の薬学組成物は、当業界に神経変性疾患の治療効果があるものと知られている有効成分をさらに含んでもよい。例えば、Ｌ－ｄｏｐａまたはドーパミンアゴニスト、ＭＡＯ－Ａ、Ｂ阻害薬、神経保護剤などがある。
また、本発明の薬学組成物は、神経変性疾患の他の別の疾患に効果を示す有効成分をさらに含んでもよい。
本発明の生薬抽出物が追加の有効成分と共に用いられる場合、生薬抽出物及び追加の有効成分は一つの剤形で同時に投与されてもよく、あるいは別個の剤形で同時にまたは順次的に投与されてもよい。
また、本発明の薬学組成物は、神経変性疾患を治療するために単独で、または手術、ホルモン治療、薬物治療または生物学的反応調節剤を用いる方法と併用して用いられてもよい。
本発明に用いられる生薬抽出物は、当業界に公知となった通常の抽出溶媒を利用して得られてもよい。抽出溶媒としては、極性溶媒または非極性溶媒を用いてもよい。極性溶媒としては、水、Ｃ１～Ｃ６のアルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ノルマル－プロパノール、イソ－プロパノール及びノルマル－ブタノールなど）、酢酸、または前記極性溶媒の混合物が挙げられる。非極性溶媒としては、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、メチルアセテート、ブチルアセテート、フルオロアルカン、ヘキサン、エーテル、クロロホルム、ジクロロメタンまたは前記非極性溶媒の混合物が挙げられる。
一実施形態において、前記生薬抽出物は、水、Ｃ１～Ｃ６のアルコール、酢酸、それらの混合溶媒、及び非極性溶媒からなる群より選ばれる溶媒で抽出されてもよい。好ましくは、０．０１～９０％のエタノール抽出物であり、最も好ましくは５０～７０％のエタノール抽出物である。
本発明に用いられる生薬抽出物は、熱水抽出、冷浸抽出、還流冷却抽出、超音波抽出または当業界に知られている通常の抽出方法によって抽出されてもよい。
本願に用いられた用語「抽出物」は、当業界において粗抽出物（ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔ）で知られているものを意味するが、広義的に抽出物をさらに分画（ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎ）した分画物も含む。すなわち、生薬抽出物は、前述の溶媒を利用して得たものだけでなく、そこに精製過程をさらに適用して得たものを含む。例えば、前記抽出物を一定の分子量カット－オフ値を有する限外ろ過膜を通して得た分画、様々なクロマトグラフ（大きさ、電荷、疏水性または親和性による分離のために製作されたもの）による分離など、さらに行われた様々な精製方法によって得られた分画も本発明の生薬抽出物に含まれる。
一実施形態において、前記神経変性疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ピック病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、プリオン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、進行性核上性麻痺、フリードライヒ運動失調症、側頭葉てんかん、または脳卒中であってもよい。好ましくは、パーキンソン病である。
本願に用いられた用語「神経変性」は、神経細胞（ｎｅｒｖｅ ｃｅｌｌ）が定常状態から機能の低下した状態への移行、遺伝的な機能低下、散発的な機能低下を全て含み、神経系の一部分あるいは複数の部分で徐々に絶えずに進行する神経細胞の死滅を含む。
本願に用いられた用語「予防」は、本発明による薬学組成物の投与によって神経変性疾患の発病を抑制または遅延させる全ての行為を意味し、「治療」は、前記薬学組成物の投与によって神経変性疾患の疑い及び発病個体の症状が好転されるか、あるいは有利に変更される全ての行為を意味する。
一実施形態において、前記薬学組成物は、行動能力を向上させることで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞において毒性による細胞死滅を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
さらに他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞において活性酸素種（ＲＯＳ）の生成を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞においてミトコンドリアの機能を保護することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
さらに他の実施形態において、前記薬学組成物は、神経細胞のアポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
また他の実施形態において、前記薬学組成物は、酸化窒素（ＮＯ）の生成を抑制することで神経変性疾患を予防または治療することができる。
本発明はまた、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または改善用食品組成物を提供する。
本願に用いられた用語「改善」は、本発明の抽出物を含む組成物の投与により治療される状態に関するパラメータ、例えば、症状の重さを少なくとも減少させる全ての行為を意味する。
本発明の食品組成物は保健機能食品及び健康食品などを含む。
本発明の食品組成物は長期服用してもよい。
本発明の食品組成物は、様々なサプリメント、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び重鎮剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に用いられる炭酸化剤などを含有してもよい。
本発明は、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む神経変性疾患の予防または改善用飼料組成物を提供する。
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、下記の実施例は説明を目的とするものに過ぎず、本願発明の範囲を限定しようとする意図ではない。
［製造例１］
単一生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻を用いた。それぞれ７５ｇの芫花、威霊仙、天麻の生薬に１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけて撹拌させながら抽出し、抽出物を得た。その後、前記それぞれの抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の単一生薬抽出物を得た。
単一生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻を用いた。それぞれ７５ｇの芫花、威霊仙、天麻の生薬に１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけて撹拌させながら抽出し、抽出物を得た。その後、前記それぞれの抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の単一生薬抽出物を得た。
［製造例２］
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻の生薬を１：１：１の重量比で合計７５ｇとなるように混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけてよく撹拌させながら抽出した。その後、前記抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物（混合抽出物）を得た。
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻の生薬を１：１：１の重量比で合計７５ｇとなるように混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけてよく撹拌させながら抽出した。その後、前記抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物（混合抽出物）を得た。
［製造例３］
威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された威霊仙及び天麻生薬を１：１の重量比で合計８０ｇとなるように混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけてよく撹拌させながら抽出した。その後、前記抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物（混合抽出物）を得た。
威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された威霊仙及び天麻生薬を１：１の重量比で合計８０ｇとなるように混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけてよく撹拌させながら抽出した。その後、前記抽出液をろ過して５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物（混合抽出物）を得た。
［製造例４］
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻を利用して次のように複合生薬抽出物を製造し、実施例９～１１の実験に用いた。芫花の場合、円形に、威霊仙と天麻の場合、粗切（４，７５０μｍ）のふるいを通過する大きさに粉砕した後、実験に用いた。前記芫花、威霊仙、天麻を表１に記載された重量比（ｗ／ｗ）に応じて混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけて抽出した。抽出液をろ過した後、５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物を得た。
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の製造
洗浄して乾燥された芫花、威霊仙、天麻を利用して次のように複合生薬抽出物を製造し、実施例９～１１の実験に用いた。芫花の場合、円形に、威霊仙と天麻の場合、粗切（４，７５０μｍ）のふるいを通過する大きさに粉砕した後、実験に用いた。前記芫花、威霊仙、天麻を表１に記載された重量比（ｗ／ｗ）に応じて混合した後、１０倍の７０％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液を加えて常温で７２時間にかけて抽出した。抽出液をろ過した後、５０～６５℃で減圧濃縮してから、凍結乾燥して粉末状態の複合生薬抽出物を得た。
［実施例１］
Ｒｏｔｅｎｏｎｅ－誘発パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
Ｒｏｔｅｎｏｎｅは殺虫剤として用いられる物質であり、ミトコンドリアの電子伝達系を阻害することでミトコンドリアの活性を抑制させるが、その場合、脳細胞が死滅し、結局、運動機能が低下する。従って、複合生薬抽出物の行動能力を向上させる効能を検証するためにＲｏｔｅｎｏｎｅによって誘発されたパーキンソン病動物モデルにおいて運動機能性を確認できる実験を行った。
Ｒｏｔｅｎｏｎｅ－誘発パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
Ｒｏｔｅｎｏｎｅは殺虫剤として用いられる物質であり、ミトコンドリアの電子伝達系を阻害することでミトコンドリアの活性を抑制させるが、その場合、脳細胞が死滅し、結局、運動機能が低下する。従って、複合生薬抽出物の行動能力を向上させる効能を検証するためにＲｏｔｅｎｏｎｅによって誘発されたパーキンソン病動物モデルにおいて運動機能性を確認できる実験を行った。
体重２０～２２ｇの５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｏｒｉｅｎｔ Ｂｉｏ Ｉｎｃ．、Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ）を利用した。動物はＮＩＨ（ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．８５－２３、ｒｅｖｉｓｅｄ １９８５）のガイドラインに従って１２時間の昼、１２時間の夜のサイクルを有する２３±１℃の室内温度で維持した。マウスを以下のようにランダムに７つのグループに分けて生体内実験を行った。
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）Ｒｏｔｅｎｏｎｅ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；１ｍｇ／ｋｇ／日の濃度でＲｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（３）芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１：１の比率）１、３、１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（４）芫花抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（５）威霊仙抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（６）天麻抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（７）Ｌ－ＤＯＰＡ ２５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；Ｌ－ＤＯＰＡの腹腔内注射、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）Ｒｏｔｅｎｏｎｅ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；１ｍｇ／ｋｇ／日の濃度でＲｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（３）芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１：１の比率）１、３、１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（４）芫花抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（５）威霊仙抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（６）天麻抽出物１、３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（７）Ｌ－ＤＯＰＡ ２５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；Ｌ－ＤＯＰＡの腹腔内注射、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
３日間のハウジング（ｈｏｕｓｉｎｇ）の後、２１日間マウスに４つの抽出物をそれぞれ経口投与した。陽性対照群であるＬ－ＤＯＰＡの場合にも２１日間腹腔内投与（ｉ．ｐ．）を行った。正常群を除いたグループには、食塩水に溶かした１ｍｇ／ｋｇ／日のＲｏｔｅｎｏｎｅを抽出物投与の開始時点の７日後から１４日間腹腔内投与（ｉ．ｐ．）した。
運動機能性を確認するためにＲｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔを行った。Ｒｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔは回る円筒上で走る時間を測定する検査であって、ＲＯＴＡ－ＲＯＤ ＴＲＥＡＤＭＩＬＬ ＤＪ３４５（（株）ＤＡＥ ＪＯＮＧ機器産業、大韓民国）を用いた。本実験を行う前に、マウスが該当機構に慣れるように、二日及び一日前に５、１５ｒｐｍの速度で回る円筒上で５分間走るように３回のトレーニングを行った。
２０ｒｐｍで回る円筒上で走っていたマウスが床に落ちる時間を測定した。測定時間は、機器に付着された自動タイマーを利用し、最大測定時間は３００秒に固定した。その結果を図１に示す。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＲｏｔｅｎｏｎｅのみを注入した陰性対照群の場合、行動能力がＲｏｔｅｎｏｎｅを投与していない正常群に対して僅か１１．９％であった（８８．１％減少）。前記の製造例２において製造した複合生薬抽出物を１、３、１０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与すると、行動能力がそれぞれ正常群に対して１９．０％、４４．８％、７５．０％の水準に向上されたことから、Ｒｏｔｅｎｏｎｅ処理による行動能力の減少現象が抑制されたことを確認した。各単一生薬抽出物を処理した群においては、行動能力が陰性対照群に比べて若干増加するか、あるいは類似の程度を示し、複合生薬抽出物を投与した群より行動能力向上の程度に劣っていた。Ｌ－ＤＯＰＡを２５ｍｇ／ｋｇ投与した陽性対照群において示された行動能力向上の程度は、複合生薬抽出物を３ｍｇ／ｋｇ投与した群と類似しており、複合生薬抽出物を１０ｍｇ／ｋｇ投与した群はＬ－ＤＯＰＡを投与した陽性対照群に比べてさらに行動能力向上の程度に優れていた。
複合生薬抽出物は、陰性対照群はもちろん、単一生薬抽出物よりも行動能力を有意に向上させた。ドーパミンの前駆物質であるＬ－ＤＯＰＡを投与した場合と比較しても、より低い容量で類似または優れた効果を示し、パーキンソン病の治療に活用され得ることを確認した。
［実施例２］
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による細胞毒性の保護効能
本実施例においては、複合生薬抽出物の細胞保護活性を評価した。芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物のＭＰＰ＋を処理した神経細胞損傷を保護する効果有無を確認するために、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株を利用してＷＳＴ－１ ａｓｓａｙを行った。
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による細胞毒性の保護効能
本実施例においては、複合生薬抽出物の細胞保護活性を評価した。芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物のＭＰＰ＋を処理した神経細胞損傷を保護する効果有無を確認するために、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株を利用してＷＳＴ－１ ａｓｓａｙを行った。
具体的に、ヒト神経芽細胞腫ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞を１０％のウシ胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ、ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）及び抗生剤（１％のＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ［Ｐ／Ｓ］、Ｇｉｂｃｏ－ＢＲＬ、ＵＳＡ）が含有されたＲＰＭＩ １６４０ｍｅｄｉｕｍ（ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）の培地下で培養した。培養器は３７℃の温度を維持し、９５％の空気及び５％のＣＯ２が混合された気体が供給され続けて細胞培養の適切な条件を備えた。細胞を９６－ウェルプレートに１Ｘの濃度条件でＰＤＬ（Ｐｏｌｙ－Ｄ－ｌｙｓｉｎｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）でコーティングした後、ＰＢＳで洗浄して乾燥してから、細胞を培養した。細胞は５×１０4細胞／ウェルとなるように実験の２４時間前に培養した。適切な数の細胞が培養されたら、０．５％のＦＢＳが含まれた培地に交換した後、２４時間さらに培養して細胞を分化させた。
ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株が培養されている９６－ウェルプレートに製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１、１０、１００μｇ／ｍｌの濃度で３０分にかけて処理し、その後２ｍＭのＭＰＰ＋を処理した。ＭＰＰ＋処理の４８時間後、９６－ウェルプレートに１０％のＷＳＴ－１溶液をウェルに１００μｌずつ添加した。３７℃の培養器で３０分にかけて反応させ、４５０、６３０ｎｍの波長値で吸光度を測定した。その結果を図２に示す。
ＭＰＰ＋を処理した結果、陰性対照群においてＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて細胞生存率が２６．４％の水準であって、細胞死滅が高く誘発されることが確認された。複合生薬抽出物を１、１０、１００μｇ／ｍｌの濃度で処理したときには、全ての濃度でＭＰＰ＋による細胞死滅が濃度依存的に抑制された（正常群に対して４６．３％、８３．１％、１０１．８％の水準の細胞生存率を確認）。特に、１００μｇ／ｍｌの濃度処理群の場合、ＭＰＰ＋未処理群（正常群；ＮＣ）の水準で細胞死滅が抑制された（すなわち、１００％の細胞生存）。従って、複合生薬抽出物の細胞保護活性が非常に優れていることを確認した。
［実施例３］
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による活性酸素種生成の減少効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の活性酸素種（ＲＯＳ）の減少能を確認した。活性酸素種によって細胞の中でＤＣＦに転換されて緑色蛍光を発するＤＣＦ－ＤＡ（２’，７’－ｄｉｃｈｌｏｒｏｄｉｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｄｉａｃｅｔａｔｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）を利用して前記の実施例２において培養したＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞内の活性酸素種の水準を測定した。
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による活性酸素種生成の減少効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の活性酸素種（ＲＯＳ）の減少能を確認した。活性酸素種によって細胞の中でＤＣＦに転換されて緑色蛍光を発するＤＣＦ－ＤＡ（２’，７’－ｄｉｃｈｌｏｒｏｄｉｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｄｉａｃｅｔａｔｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）を利用して前記の実施例２において培養したＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞内の活性酸素種の水準を測定した。
具体的に、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞に、前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１、１０、１００μｇ／ｍｌの濃度で３０分にかけて処理し、その後２ｍＭのＭＰＰ＋を処理した。ＭＰＰ＋処理の４８時間後、９６－ウェルプレートにＤＣＦ－ＤＡを１０μＭの濃度で３０分間処理した。ＰＢＳで１回洗浄し、その後４８５、５３０ｎｍの波長領域で蛍光を測定した。波長補正のために、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、ＵＳＡ）を１０ｍｇ／ｍｌで３次蒸溜水に溶かした後、１：２０００の割合で処理して３５０、４６１ｎｍの波長条件で蛍光を測定した。その結果を図３に示す。
ＭＰＰ＋を処理した結果、ＭＰＰ＋のみを処理した陰性対照群（ＭＰＰ）においてＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて活性酸素種が増加した。複合生薬抽出物を濃度ごとに処理すると、陰性対照群（ＭＰＰ）に比べて活性酸素種の生成が減少し、特に、１００μｇ／ｍｌの濃度処理群の場合、ＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）の水準で活性酸素種が抑制された。従って、複合生薬抽出物の活性酸素種の抑制能が優れていることを確認した。
［実施例４］
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋によるミトコンドリア機能損傷の改善効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞の毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物のミトコンドリアの機能を保護する効果を分析した。正常ミトコンドリアの細胞内へ吸収されて蛍光を発するＴＭＲＥ（Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｒｈｏｄａｍｉｎｅ、Ｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ、Ｐｅｒｃｈｌｏｒａｔｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、８７９１７）を利用して蛍光水準を測定することでミトコンドリアの機能を分析した。
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋によるミトコンドリア機能損傷の改善効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞の毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物のミトコンドリアの機能を保護する効果を分析した。正常ミトコンドリアの細胞内へ吸収されて蛍光を発するＴＭＲＥ（Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｒｈｏｄａｍｉｎｅ、Ｅｔｈｙｌ Ｅｓｔｅｒ、Ｐｅｒｃｈｌｏｒａｔｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、８７９１７）を利用して蛍光水準を測定することでミトコンドリアの機能を分析した。
前記の実施例２において培養したＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞に、前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１００μｇ／ｍｌの濃度で３０分にかけて処理し、その後２ｍＭのＭＰＰ＋を４８時間にかけて処理した。その後、ＴＭＲＥを０．５μＭの濃度で３０分間処理した。ＰＢＳで１回洗浄し、その後各ウェルに１００μｌずつＰＢＳを添加した。５４９、５７５ｎｍの波長領域で蛍光を測定し、その結果を図４に示す。
ＭＰＰ＋を処理した結果、ＭＰＰ＋のみを処理した陰性対照群（ＭＰＰ）においてＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）に比べてミトコンドリアの機能損失が確認された。複合生薬抽出物を１００μｇ／ｍｌの濃度で処理すると、ＭＰＰ＋処理によるミトコンドリアの機能損失が抑制された。特に、複合生薬抽出物はＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）の水準であって、ミトコンドリアの機能損失が抑制され、該当抽出物のミトコンドリアの機能回復能が優れていることを確認した。従って、複合生薬抽出物のミトコンドリアの機能回復能が優れていることを確認した。
［実施例５］
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による細胞死滅の減少効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞の毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の細胞内アポトーシスの減少能の効果を分析した。
ドーパミン性神経細胞株における複合生薬抽出物のＭＰＰ＋による細胞死滅の減少効能
本実施例においては、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経細胞の毒素物質であるＭＰＰ＋を処理した場合、芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の細胞内アポトーシスの減少能の効果を分析した。
カスパーゼ（Ｃａｓｐａｓｅ）は、システインプロテアーゼの一種類であって、細胞自殺というプログラムされたアポトーシスに必須のタンパク質である。カスパーゼによって活性化されたアポトーシスは細胞自殺を誘発してかかる細胞の死滅を誘発し、パーキンソン病において脳細胞アポトーシスは疾患を悪化させる。ＤＥＶＤルシフェリンが含有されているカスパーゼ－Ｇｌｏ試薬とカスパーゼが反応すれば、ＡＴＰに会って光を発散する。
前記の実施例２において培養したＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞に、前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１、１０、１００μｇ／ｍｌの濃度で３０分にかけて処理し、２ｍＭのＭＰＰ＋を４８時間にかけて処理した。その後、カスパーゼ－Ｇｌｏ ｂｕｆｆｅｒとｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）を混合して各ウェル当たり５０μｌを添加し、光のない条件で３０分にかけて常温処理した。その後、４９０、５７０ｎｍの波長領域で値を測定し、波長補正のためにＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、ＵＳＡ）を１０ｍｇ／ｍｌで３次蒸溜水に溶かした後、１：２０００の割合で追加して３５０、４６１ｎｍの波長で測定した。その結果を図５に示す。
ＭＰＰ＋を処理した結果、ＭＰＰ＋のみを処理した陰性対照群（ＭＰＰ）においてＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて２７９％のカスパーゼが測定されてアポトーシス現象が高い水準に誘発された。複合生薬抽出物を１、１０、１００μｇ／ｍｌの濃度で処理すると、正常群に対してカスパーゼの増加量は、陰性対照群に比べて２９．０％、４６．５％、２１．９％減少し、ＭＰＰ＋処理によるアポトーシス現象が抑制されることが分かった。以上の結果から、抽出物のアポトーシスの現象抑制能が優れていることを確認した。
［実施例６］
ミクログリア細胞株における複合生薬抽出物のＬＰＳによる炎症反応の抑制効能
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の抗炎症効能を確認するために、Ｇｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙを利用してマウスミクログリア細胞であるＢＶ２細胞内の酸化窒素（ＮＯ）の含量の変化を測定した。
ミクログリア細胞株における複合生薬抽出物のＬＰＳによる炎症反応の抑制効能
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の抗炎症効能を確認するために、Ｇｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙを利用してマウスミクログリア細胞であるＢＶ２細胞内の酸化窒素（ＮＯ）の含量の変化を測定した。
ＢＶ２細胞をウシ胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ、ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）及び抗生剤（１％のＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ［Ｐ／Ｓ］ Ｇｉｂｃｏ－ＢＲＬ、ＵＳＡ）が含有されたＤＭＥＭ ｍｅｄｉｕｍ（ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）の培地下で培養した。具体的に、培養器は３７℃の温度を維持し、９５％の空気と５％のＣＯ２が混合された気体が供給され続けて細胞培養の適切な条件を満たすようにした。細胞は１２－ウェルプレートに３×１０4ｃ細胞／ウェルとなるように実験の２４時間前に培養した。
準備された１２－ウェルプレートに前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１、１０、３０、１００μｇ／ｍｌの濃度で一時間にかけて前処理した後、１μｇ／ｍｌの濃度のＬＰＳを２４時間にかけて処理した。その後、上澄み液を取ってＧｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｇ２９３０、Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）によって酸化窒素含量の変化を５２０、５５０ｎｍの波長値で吸光度を測定することで評価した。その結果を図６に示す。
ＢＶ２ミクログリア細胞にＬＰＳを処理した結果、ＬＰＳのみを処理した陰性対照群（ＬＰＳ）は、ＬＰＳ無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて酸化窒素が高い水準で生成された（１１２３％）。複合生薬抽出物を１、１０、３０、１００μｇ／ｍｌの濃度で処理したときには、全ての濃度で酸化窒素の生産増加量が減少し、特に、複合生薬抽出物を１０、３０、１００μｇ／ｍｌの濃度で処理すると、陰性対照群に比べて５６．４％、９１．４％、９９．５％ずつ減少した。従って、複合生薬抽出物のＬＰＳによって誘発された炎症反応の抑制能が優れていることを確認した。
［実施例７］
Ｒｏｔｅｎｏｎｅ－誘発パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
体重２０～２２ｇの５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｏｒｉｅｎｔ Ｂｉｏ Ｉｎｃ．、Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ）を利用した。動物はＮＩＨ（ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．８５－２３、ｒｅｖｉｓｅｄ １９８５）のガイドラインに従って１２時間の昼、１２時間の夜のサイクルの条件下で２３±１℃の室内温度で維持した。マウスを以下のようにランダムに５つのグループに分けて生体内実験を行った。
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）Ｒｏｔｅｎｏｎｅ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；１ｍｇ／ｋｇ／日の濃度でＲｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（３）芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１：１の比率）５ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（４）威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１の比率）５ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（５）Ｌ－ＤＯＰＡ ２５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；Ｌ－ＤＯＰＡの腹腔内注射、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
Ｒｏｔｅｎｏｎｅ－誘発パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
体重２０～２２ｇの５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｏｒｉｅｎｔ Ｂｉｏ Ｉｎｃ．、Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ）を利用した。動物はＮＩＨ（ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．８５－２３、ｒｅｖｉｓｅｄ １９８５）のガイドラインに従って１２時間の昼、１２時間の夜のサイクルの条件下で２３±１℃の室内温度で維持した。マウスを以下のようにランダムに５つのグループに分けて生体内実験を行った。
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）Ｒｏｔｅｎｏｎｅ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；１ｍｇ／ｋｇ／日の濃度でＲｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（３）芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１：１の比率）５ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（４）威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（１：１の比率）５ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；抽出物の経口投与、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
（５）Ｌ－ＤＯＰＡ ２５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；Ｌ－ＤＯＰＡの腹腔内注射、Ｒｏｔｅｎｏｎｅの腹腔内注射）
３日間のハウジング（ｈｏｕｓｉｎｇ）の後、２１日間マウスに２種類の複合生薬抽出物をそれぞれ経口投与した。陽性対照群であるＬ－ＤＯＰＡの場合にも２１日間腹腔内投与（ｉ．ｐ．）を行った。正常群を除いたグループには、食塩水に溶かした１ｍｇ／ｋｇ／日のＲｏｔｅｎｏｎｅを抽出物投与開始時点の７日後から１４日間腹腔内投与（ｉ．ｐ．）した。
運動機能性を確認するためにＲｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔを行った。Ｒｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔは回る円筒上で走る時間を測定する検査であって、ＲＯＴＡ－ＲＯＤ ＴＲＥＡＤＭＩＬＬ ＤＪ３４５（（株）ＤＡＥ ＪＯＮＧ機器産業、大韓民国）を用いた。本実験を行う前に、マウスが該当機構に慣れるように、二日及び一日前に５、１５ｒｐｍの速度で回る円筒上で５分間走るように３回のトレーニングを行った。
２０ｒｐｍで回る円筒上で走っていたマウスが床に落ちる時間を測定した。測定時間は、機器に付着された自動タイマーを利用し、最大測定時間は３００秒に固定した。その結果を図７に示す。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＲｏｔｅｎｏｎｅのみを注入した陰性対照群の場合、行動能力がＲｏｔｅｎｏｎｅを投与していない正常群に対して僅か２８．６％であった（７１．４％減少）。前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（図７における「複合生薬抽出物」）及び製造例３において製造した威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（図７における「威霊仙／天麻複合抽出物」）をそれぞれ５ｍｇ／ｋｇの濃度で投与すると、行動能力がそれぞれ正常群に対して５７．５％、４８．４％の水準に向上されたことから、Ｒｏｔｅｎｏｎｅ処理による行動能力の減少現象が抑制されたことを確認した。
［実施例８］
ミクログリア細胞株における複合生薬抽出物のＬＰＳによる炎症反応の抑制効能
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物及び威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の抗炎症効能を確認するために、Ｇｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙを利用してマウスミクログリア細胞であるＢＶ２細胞内の酸化窒素（ＮＯ）の含量の変化を測定した。
ミクログリア細胞株における複合生薬抽出物のＬＰＳによる炎症反応の抑制効能
芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物及び威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物の抗炎症効能を確認するために、Ｇｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙを利用してマウスミクログリア細胞であるＢＶ２細胞内の酸化窒素（ＮＯ）の含量の変化を測定した。
ＢＶ２細胞をウシ胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ、ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）及び抗生剤（１％のＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ［Ｐ／Ｓ］ Ｇｉｂｃｏ－ＢＲＬ、ＵＳＡ）が含有されたＤＭＥＭ ｍｅｄｉｕｍ（ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）の培地下で培養した。具体的に、培養器は３７℃の温度を維持し、９５％の空気と５％のＣＯ２が混合された気体が供給され続けて細胞培養の適切な条件を満たすようにした。細胞は１２－ウェルプレートに３×１０4ｃ細胞／ウェルとなるように実験の２４時間前に培養した。
準備された１２－ウェルプレートに前記の製造例２において製造した芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物及び製造例３において製造した威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物を１０μｇ／ｍｌの濃度で一時間にかけて前処理した後、１μｇ／ｍｌの濃度のＬＰＳを２４時間にかけて処理した。その後、上澄み液を取ってＧｒｉｅｓｓ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｇ２９３０、Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）によって酸化窒素含量の変化を５２０、５５０ｎｍの波長値で吸光度を測定することで評価した。その結果を図８に示す。
ＢＶ２ミクログリア細胞にＬＰＳを処理した結果、ＬＰＳのみを処理した陰性対照群（ＬＰＳ）は、ＬＰＳ無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて酸化窒素が高い水準で生成された（１１２３％）。芫花、威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（図８における「複合生薬抽出物」）及び威霊仙及び天麻の複合生薬抽出物（図８における「威霊仙／天麻複合抽出物」）をそれぞれ１０μｇ／ｍｌの濃度で処理したときには、酸化窒素の生産増加量が減少し、特に、陰性対照群に比べてそれぞれ５６．４％、５４．１％ずつ減少した。従って、複合生薬抽出物及び威霊仙／天麻抽出物のＬＰＳによって誘発された炎症反応の抑制能が優れていることを確認した。
［実施例９］
配合比率別の複合生薬抽出物のビーグル犬での嘔吐発生有無の比較
本実施例においては、芫花、威霊仙及び天麻の１：１：１、１：５：５または１：１０：１０の配合比率による複合生薬抽出物を経口投与後のビーグル犬での体重変化及び嘔吐などの一般症状の変化を観察した。
配合比率別の複合生薬抽出物のビーグル犬での嘔吐発生有無の比較
本実施例においては、芫花、威霊仙及び天麻の１：１：１、１：５：５または１：１０：１０の配合比率による複合生薬抽出物を経口投与後のビーグル犬での体重変化及び嘔吐などの一般症状の変化を観察した。
試験に用いられたビーグル犬（Ｂｅａｇｌｅ ｄｏｇ）は９～１４ヶ月齢（Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．、Ｌｔｄ．、Ｃｈｉｎａ）の雄雌各５匹（雄Ｇ１１０１、Ｇ１２０１、Ｇ１３０１、Ｇ１４０１、Ｇ１５０１；雌Ｇ２１０１、Ｇ２２０１、Ｇ２３０１、Ｇ２４０１、Ｇ２５０１）を用い、試験物質は前記の製造例４－１（配合比率１：１：１）、４－２（１：５：５）及び４－３（１：１０：１０）によって製造された凍結乾燥粉末を必要量に合わせて称量して注射用水（ＪＷ中外製薬、大韓民国）に懸濁させて投与当日に調剤するか、あるいは一般ゼラチンカプセルまたは腸溶カプセルに投与前日に充填して用いた。投与液量は５ｍｌ／ｋｇ体重とした。試験設計は表２のように行い、各試験別に最低で５日以上のｗａｓｈ－ｏｕｔ期間を置いて試験を行った。
各試験別動物の体重を測定した結果（単回投与：投与翌日、繰り返し投与：最後の投与翌日）を下記の表３に示す。
下記の表３に示すように、雄雌のいずれもが試験物質投与による体重変化は観察されていない。
また、各試験別動物の一般症状（嘔吐の有無、糞便状態など）を観察した結果を下記の表４に示す。
前記の表４に示したように、芫花、威霊仙及び天麻を１：１：１の配合比率で含む製造例４－１を単回または繰り返し投与した全ての試験（試験番号１～４）において雄雌いずれもに嘔吐が発生することを確認した。
また、芫花、威霊仙及び天麻を１：５：５の配合比率で含む前記の製造例４－２を繰り返し投与した試験（試験番号５）においては、雄雌いずれもに１日目に嘔吐が発生することを確認した。
それに対し、芫花、威霊仙及び天麻を１：１０：１０の配合比率で含む前記の製造例４－３を単回投与した試験（試験番号６）の場合、製造例４－１を同一容量で投与した試験（試験番号１乃至３）と異なり、雄雌いずれもに嘔吐を含んだ異常症状が現れていないことを確認した。
また、前記の製造例４－３（配合比率１：１０：１０）の複合生薬抽出物を繰り返し投与した試験（試験番号７）の場合、製造例４－１（配合比率１：１：１）及び４－２（配合比率１：５：５）の複合生薬抽出物の繰り返し投与試験（試験番号４及び５）と比較してさらに高い投与容量及び投与期間の条件にもかかわらず、相対的に軽微な嘔吐の発生程度を示すことを確認した。
従って、芫花、威霊仙及び天麻の配合比率が１：１０：１０である複合生薬抽出物投与群は嘔吐誘発などの副作用が顕著に改善されることを確認した。
［実施例１０］
配合比率別の複合生薬抽出物のＭＰＰ＋または６－ヒドロキシドーパミンによる細胞毒性保護効能の比較
芫花、威霊仙及び配合比率別の複合生薬抽出物がＭＰＰ＋または６－ヒドロキシドーパミン（６－ｈｙｄｒｏｘｙｄｏｐａｍｉｎｅ、６－ＯＨＤＡ）柔道の神経細胞損傷を保護する効果有無を確認するために、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株を利用してＭＴＴ ａｓｓａｙを行った。
配合比率別の複合生薬抽出物のＭＰＰ＋または６－ヒドロキシドーパミンによる細胞毒性保護効能の比較
芫花、威霊仙及び配合比率別の複合生薬抽出物がＭＰＰ＋または６－ヒドロキシドーパミン（６－ｈｙｄｒｏｘｙｄｏｐａｍｉｎｅ、６－ＯＨＤＡ）柔道の神経細胞損傷を保護する効果有無を確認するために、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株を利用してＭＴＴ ａｓｓａｙを行った。
具体的に、ヒト神経芽細胞腫ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞を１０％のウシ胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ、ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）及び抗生剤（１％のＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ［Ｐ／Ｓ］、Ｇｉｂｃｏ－ＢＲＬ、ＵＳＡ）が含有されたＤＭＥＭ ｍｅｄｉｕｍ（ＧｉｂｃｏTM、ＵＳＡ）の培地下で培養した。培養器は３７℃の温度を維持し、９５％の空気及び５％のＣＯ２が混合された気体が供給され続けて細胞培養の適切な条件を備えた。細胞は４×１０5細胞／ｍｌとなるように実験の２４時間前に培養した。適切な数の細胞が培養されたら、０．５％のＦＢＳが含まれた培地に交換した後、２０時間を追加的に培養して細胞を分化させた。
ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株が培養されている９６－ウェルプレートに製造例４－１、４－２、４－３において製造した芫花、威霊仙及び天麻の１：１：１、１：５：５、１：１０：１０の複合生薬抽出物をそれぞれ３、１０、３０μｇ／ｍｌの濃度で４時間にかけて処理した後、１ｍＭのＭＰＰ＋を処理した。ＭＰＰ＋処理の４４時間後の９６－ウェルプレートに１ｍｇ／ｍｌ濃度のＭＴＴ溶液をウェルに１００μｌずつ添加した。３７℃の培養器で１時間にかけて反応させてＭＴＴ溶液を除去した後、１００％のＤＭＳＯ １００μｌ／ウェルを添加し、約１５分間ｓｈａｋｉｎｇした後、５７０ｎｍの波長値で吸光度を測定した。
その結果、図９Ａに示すように、ＭＰＰ＋を処理した陰性対照群において、ＭＰＰ＋無処理群（正常群；ＮＣ）に比べて細胞生存率が５５．６％の水準であって、統計的に有意な細胞死滅が確認された。また、１：１：１、１：５：５、１：１０：１０の配合比率を有する複合生薬抽出物をそれぞれ３、１０、３０μｇ／ｍｌの濃度で処理すると、１：１：１の複合生薬抽出物（１０、３０μｇ／ｍｌ）、１：５：５の複合生薬抽出物（３、１０、３０μｇ／ｍｌ）、１：１０：１０の複合生薬抽出物（１０、３０μｇ／ｍｌ）において、ＭＰＰ＋による細胞死滅が濃度依存的に抑制された。特に、１０、３０μｇ／ｍｌの濃度で１：１０：１０の複合生薬抽出物処理群は、１：１：１または１：５：５の複合生薬抽出物処理群と比較して同一濃度で最も高い細胞保護活性を示し、優れた神経細胞保護効能を有することを確認した。
また、同一の細胞に対して製造例４－１、４－２、４－３において製造した芫花、威霊仙及び天麻の１：１：１、１：５：５、１：１０：１０の複合生薬抽出物をそれぞれ１０、３０μｇ／ｍｌの濃度で１時間にかけて処理した後、神経細胞の毒性柔道物質としてＭＰＰ＋の代わりに５０μＭの６－ＯＨＤＡを処理した。６－ＯＨＤＡ処理の２３時間の後、ＭＰＰ＋と同一の方法で吸光度を測定し、その結果を図９Ｂに示す。６－ＯＨＤＡ神経毒性に対する細胞保護効果は、１：１：１、１：５：５、１：１０：１０の配合比率による複合生薬抽出物で類似に示された。
［実施例１１］
ＭＰＴＰ柔道パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
ＭＰＴＰ（１－ｍｅｔｈｙｌ－４－ｐｈｅｎｙｌ－１，２，３，６－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）は、ミトコンドリアの電子伝達系を阻害することでミトコンドリアの活性を抑制させるが、その場合、脳細胞が死滅し、結局、運動機能が低下する。従って、複合生薬抽出物の行動能力を向上させる効能を検証するためにＭＰＴＰによって誘発されたパーキンソン病動物モデルにおいて運動機能性を確認できる実験を行った。
ＭＰＴＰ柔道パーキンソン病動物モデルに対する複合生薬抽出物の運動能力の改善効能
ＭＰＴＰ（１－ｍｅｔｈｙｌ－４－ｐｈｅｎｙｌ－１，２，３，６－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）は、ミトコンドリアの電子伝達系を阻害することでミトコンドリアの活性を抑制させるが、その場合、脳細胞が死滅し、結局、運動機能が低下する。従って、複合生薬抽出物の行動能力を向上させる効能を検証するためにＭＰＴＰによって誘発されたパーキンソン病動物モデルにおいて運動機能性を確認できる実験を行った。
８週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（ＤＢＬ Ｉｎｃ．、大韓民国）を５日の純化期間を経て実験に用いた。動物はＮＩＨ（ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．８５－２３、ｒｅｖｉｓｅｄ １９８５）のガイドラインに従って１２時間の昼、１２時間の夜のサイクルを有する２３±１℃の室内温度で維持した。マウスを以下のようにランダムに５つのグループに分けて生体内実験を行った。
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）ＭＰＴＰ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；３０ｍｇ／ｋｇ／日の濃度で１日１回５日間、腹腔内投与）
（３）ＭＰＴＰ＋芫花、威霊仙及び天麻の１：５：５の複合生薬抽出物（製造例４－２）３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；１日１回１２日間、抽出物の経口投与、ＭＰＴＰの腹腔内投与）
（４）ＭＰＴＰ＋芫花、威霊仙及び天麻の１：１０：１０複合生薬抽出物（製造例４－３）３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；１日１回１２日間、抽出物の経口投与、ＭＰＴＰの腹腔内投与）
（１）正常群（ｎ＝８）
（２）ＭＰＴＰ（陰性対照群；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）（ｎ＝８；３０ｍｇ／ｋｇ／日の濃度で１日１回５日間、腹腔内投与）
（３）ＭＰＴＰ＋芫花、威霊仙及び天麻の１：５：５の複合生薬抽出物（製造例４－２）３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；１日１回１２日間、抽出物の経口投与、ＭＰＴＰの腹腔内投与）
（４）ＭＰＴＰ＋芫花、威霊仙及び天麻の１：１０：１０複合生薬抽出物（製造例４－３）３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８；１日１回１２日間、抽出物の経口投与、ＭＰＴＰの腹腔内投与）
純化期間後、１２日の間マウスに抽出物をそれぞれ経口投与した。また、正常群を除いたグループには、食塩水に溶かした３０ｍｇ／ｋｇ／日のＭＰＴＰを抽出物の投与開始日から５日間腹腔内投与（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、ｉ．ｐ．）した。
回転運動に対する機能性を確認するためにＰｏｌｅ ｔｅｓｔを行った。Ｐｏｌｅ ｔｅｓｔは垂直棒の上側端にマウスを上に向かうように置き、マウスが下方向に回転するのにかかる時間を測定する検査であって、本実験を行う前に、マウスが該当機構に慣れるように、一日前に同一の方法で１回のトレーニングを行った。
マウスを垂直棒の上側端に置き、マウスが下方向に体を回転するのにかかる時間を測定した。その結果を図１０に示す。
図１０において確認されるように、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＭＰＴＰのみを注入した陰性対照群の場合、Ｐｏｌｅ ｔｅｓｔのＴ－ｔｕｒｎの所要時間の測定結果において、正常群に対して６８．２％の時間がさらに所要された。それに対し、芫花、威霊仙及び天麻の１：５：５または１：１０：１０の複合生薬抽出物をそれぞれ３０ｍｇ／ｋｇの濃度で投与すると、陰性対照群に比べてそれぞれ４９．７％及び４６．４％の所要時間が減少し、ＭＰＴＰ処理による回転運動能力の減少現象が抑制されたことを確認した。
また、総合的な運動能力を評価するために、Ｒｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔを行った。Ｒｏｔａｒｏｄ ｔｅｓｔは回る円筒上で実験動物を置いて運動能力を評価する検査であって、ＲＯＴＡ－ＲＯＤ ＴＲＥＡＤＭＩＬＬ（（株）ＪＥＵＮＧ ＤＯ Ｂ＆Ｐ、大韓民国）を用いて行った。本実験を行う前に、マウスが該当機構に慣れるように、一日前に９ｒｐｍの速度で回る円筒上で３分間走るように２回のトレーニングを行った。本実験は、１１ｒｐｍで回る円筒上で３分間走っているマウスが床に落ちた回数を測定し、その結果を図１１に示す。
図１１において確認されるように、３分間円筒からマウスが落ちた回数を測定したところ、ＭＰＴＰのみを注入した陰性対照群の場合、正常群に対して５２．６％増加した。それに対し、芫花、威霊仙及び天麻の１：５：５または１：１０：１０の複合生薬抽出物をそれぞれ３０ｍｇ／ｋｇ投与した群は、陰性対照群に比べて円筒から落ちた回数がそれぞれ５７．９％、４７．４％減少し、ＭＰＴＰ処理による全般的な運動能力の減少現象が抑制されたことを確認した。
結局、前記パーキンソン病動物モデル試験によって、本発明の芫花、威霊仙及び天麻複合生薬抽出物は優れた運動能力の改善効能を有することを確認した。
Claims (21)
- 芫花（ゲンカ）、威霊仙（イレイセン）、及び天麻（テンマ）からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む、神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記生薬抽出物が、芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる生薬から抽出されたそれぞれの抽出物を含むか、あるいは芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる生薬の混合物から抽出されたことを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記生薬抽出物が、水、Ｃ１～Ｃ６のアルコール、酢酸、及びそれらの混合溶媒からなる群より選ばれる溶媒で抽出されたことを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記生薬抽出物が、０．０１～９０％のエタノール抽出物であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記生薬抽出物が、５０～７０％のエタノール抽出物であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記神経変性疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病、ピック病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、プリオン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、進行性核上性麻痺、フリードライヒ運動失調症、側頭葉てんかん、及び脳卒中からなる群より選ばれた少なくとも一つであることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記神経変性疾患がパーキンソン病であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、芫花及び威霊仙の生薬抽出物を含み、芫花及び威霊仙の配合重量比が１：１～２０であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、芫花及び天麻の生薬抽出物を含み、芫花及び天麻の配合重量比が１：１～２０であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、威霊仙及び天麻の生薬抽出物を含み、威霊仙及び天麻の配合重量比が１：０．０５～２０であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、芫花、威霊仙、及び天麻の生薬抽出物を含み、芫花、威霊仙、及び天麻の配合重量比が１：１～２０：１～２０であることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 芫花、威霊仙、及び天麻の配合重量比が１：５～１５：５～１５であることを特徴とする、請求項１１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 芫花、威霊仙、及び天麻の配合重量比が１：１０：１０であることを特徴とする、請求項１１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、行動能力を向上させることを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、神経細胞において毒性による細胞死滅を抑制することを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、神経細胞において活性酸素種（ＲＯＳ）の生成を抑制することを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、神経細胞においてミトコンドリアの機能を保護することを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、神経細胞のアポトーシスを抑制することを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 前記薬学組成物が、酸化窒素（ＮＯ）の生成を抑制することを特徴とする、請求項１に記載の神経変性疾患の予防または治療用薬学組成物。
- 芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む、神経変性疾患の予防または改善用食品組成物。
- 芫花、威霊仙、及び天麻からなる群より選ばれる少なくとも二つの生薬抽出物を含む、神経変性疾患の予防または改善用飼料組成物。
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| KR20160058992A (ko) * | 2014-11-11 | 2016-05-26 | 강원대학교산학협력단 | 위령선 추출물을 함유하는 치매 예방 또는 치료 또는 인지능 개선용 조성물 |
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