JP2021031589A - 粒子、アフィニティー粒子、及び、これを含む試薬、キット、並びに検出方法 - Google Patents
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Abstract
Description
動的光散乱型粒径測定機:ZETASIZER NANO ZS(マルバーン製)
固形分濃度:0.01質量%
測定温度:25℃
分散液の媒体:超純水
測定用セル:DTS1070
レーザー仕様:He―Ne、4mW、633nm
検出光学系:NIBS、173℃
積算回数20回
等温化時間:5分
解析方法:スモルコフスキーの式
算出方法:5回測定し、最大値と最小値を除いた値の平均値
10≦[側鎖Aを有するユニットの数]/[[側鎖Aを有するユニットの数]+[側鎖Bを有するユニットの数]]×100≦50・・・式(1)
20≦[側鎖Aを有するユニットの数]/[[側鎖Aを有するユニットの数]+[側鎖Bを有するユニットの数]]×100≦30・・・式(1)’
式(2)において、nは整数である。エステル結合やアミド結合は、原子間のボンドの回転をともなわない剛直な構造である。これに対し、式(2)で表される部分構造は、原子間のボンドが自由に回転することから、側鎖Aが式(2)の部分構造を有することにより、側鎖Aの運動性が向上し、側鎖Aが末端に有するカルボキシ基とリガンドとを化学結合させる際に、その化学反応効率を高めることに寄与すると発明者らは考えている。
動的光散乱型粒径測定機:ZETASIZER NANO ZS(マルバーン製)
固形分濃度:0.01質量%
測定温度:25℃
分散液の媒体:超純水(日本ミリポア製)
測定用セル:GlAss Cuvette
レーザー仕様:He−Ne、4mW,633nm
検出光学系:NIBS、173℃
積算回数20回
等温化時間:5分
解析方法:GenerAl Purpose Mode(キュムラント法)
算出方法:5回測定し、最大値と最小値を除いた値の平均値
ここでR1は水素原子あるいはメチル基である。
500ml四つ口丸底フラスコに3.60gのスチレン(St:キシダ化学工業製)と5.40gのグリシジルメタクリレート(GMA;東京化成工業株式会社)、0.12gのジビニルベンゼン(キシダ化学工業株式会社)、345gのイオン交換水をはかりとり、混合液を得た後、この混合液を200rpmで撹拌しながら70℃に保持し、窒素バブリングを30分間行った。次に、窒素バブリングを窒素フローに切り替え、別途調製しておいた0.18gのV−50(富士フイルム和光純薬製)を15.0gのイオン交換水に溶解させた溶解液を上記混合液に加えることで、ラジカル重合(ソープフリー乳化重合)を開始させた。重合開始から2時間後、ラジカル重合反応場に0.92gのGMAを加え、さらに8時間、200rpmで撹拌しながら70℃で保持することによって粒子1を含有する分散液1を得た。500ml四つ口丸底フラスコの内容物を室温まで徐冷した後にサンプリングし、プロトンNMR,ガスクロマトグラフィー、ゲルパーミエーションクロマトグラフィーを用いてラジカル重合転化率を評価したところ、実質的に100%であることを確認した。粒子1のキュムラント粒径は210nmであった。
20gの分散液1を200ml四つ口丸底フラスコにはかりとり、100rpmで撹拌しながら4℃に保持した状態で、上記200ml四つ口丸底フラスコの外部から超音波(28kHz、100W)を照射しながら、全量で4.82gのジエチレングリコールビス(3−アミノプロピル)エーテル(DEG−3APE;東京化成工業製)を2.0g/分の速度で分散液1と混合し、混合液2を調整した。その後、混合液2を100rpmで撹拌しながら24時間、40℃で保持することにより、粒子1のポリグリシジルメタクリレートに由来するグリシジル基とDEG−3APEに由来する一級アミンとを反応させ、粒子1にDEG−3APEを片末端で結合させた粒子2’を得た。粒子2’を4℃、27000G、20分、3回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が5wt%になるようにイオン交換水で調整し、更にトリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris;東京化成工業製)1.48gを添加後、撹拌することでTrisを溶解した。次にトリエチルアミン(キシダ化学工業製)によりpHが11になるように調整し、70℃、24時間、撹拌した。その後4℃、27000G、20分で遠心分離を行い、上清を廃棄し、イオン交換水で沈殿物を再分散する精製を計5回行った。次に、再度、遠心精製を行い、固形分率が1wt%となるようにメタノールに再分散することで分散液2’を調整した。次に、粒子2’が0.63gとなるようにはかりとった分散液2’に、あらかじめ秤量しておいた無水コハク酸(東京化成工業製)と無水酢酸(東京化成工業製)の1:3(mol分率)混合試薬2.77gを加え、5時間、30℃で振とうすることにより、粒子2’に由来する一級アミンと無水コハク酸を反応させ、粒子1にDEG−3APEを介してカルボキシ基を導入した粒子2を得た。粒子2は3等分し、以下の3通りの方法によって処理し、トリエチルアミンを塩基としてカルボキシ基を中和した粒子2−1、ナトリウムを塩基としてカルボキシ基を中和した粒子2−2、カルボキシ基を中和しない粒子2−3の水分散液を得た。
粒子2を27000G、20分、3回の条件で3wt%トリエチルアミン水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製した。
(ii)粒子2−2の調整方法
粒子2を27000G、20分、3回の条件で0.1NのNaOH水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製した。
(iii)粒子2−3の調整方法
粒子2を27000G、20分、3回の条件でメタノールを用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製した。
粒子2−1の各種特性を表1にまとめた。また、粒子2−1、粒子2−2、粒子2−3の水分散液の分散安定性を表2で比較した。
無水コハク酸の代わりに無水マレイン酸(東京化成工業製)を用いた以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子3の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の3:17(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子4の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の9:11(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子5の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の2:23(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子6の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の1:1(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子7の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の1:4(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子8の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の1:9(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子9の水分散液を得た。
Trisを2−アミノ−1,3−プロパンジオールに変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子10の水分散液を得た。
20gの分散液1を200ml四つ口丸底フラスコにはかりとり、100rpmで撹拌しながら4℃に保持した状態で、上記200ml四つ口丸底フラスコの外部から超音波(28kHz、100W)を照射しながら、全量で4.82gのジエチレングリコールビス(3−アミノプロピル)エーテル(DEG−3APE;東京化成工業製)を2.0g/分の速度で分散液1と混合し、混合液2を調整した。その後、混合液2を100rpmで撹拌しながら24時間、40℃で保持することにより、粒子1のポリグリシジルメタクリレートに由来するグリシジル基とDEG−3APEに由来する一級アミンとを反応させ、粒子1にDEG−3APEを片末端で結合させた粒子11’を得た。粒子11’を4℃、27000G、20分、3回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分率が1wt%となるようにメタノールに再分散することで分散液11’’を調整した。次に、粒子11’が0.63gとなるようにはかりとった分散液11’’に、あらかじめ秤量しておいた無水コハク酸(東京化成工業製)と無水酢酸(東京化成工業製)の1:3(mol分率)混合試薬2.77gを加え、5時間、30℃で振とうすることにより、粒子11’’に由来する一級アミンと無水コハク酸を反応させ、粒子1にDEG−3APEを介してカルボキシ基を導入した。得られた粒子を27000G、20分、3回の条件で3wt%トリエチルアミン水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製することで粒子11の水分散液を得た。
20gの分散液1を200ml四つ口丸底フラスコにはかりとり、100rpmで撹拌しながら4℃に保持した状態で、上記200ml四つ口丸底フラスコの外部から超音波(28kHz、100W)を照射しながら、全量で4.21gのビス[2−(2−アミノエトキシ)エチル]エーテル(DEG−2AEE;東京化成工業製)を2.0g/分の速度で分散液1と混合し、混合液12を調整した。その後、混合液12を100rpmで撹拌しながら24時間、40℃で保持することにより、粒子1のポリグリシジルメタクリレートに由来するグリシジル基とDEG−2AEEに由来する一級アミンとを反応させ、粒子1にDEG−2AEEを片末端で結合させた粒子12’を得た。粒子12’を4℃、27000G、20分、3回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が5wt%になるようにイオン交換水で調整し、更にTris1.48gを添加後、撹拌することでTrisを溶解した。次にトリエチルアミンによりpHが11になるように調整し、70℃、24時間、撹拌した。その後4℃、27000G、20分で遠心分離を行い、上清を廃棄し、イオン交換水で沈殿物を再分散する精製を計5回行った。次に、再度、遠心精製を行い、固形分率が1wt%となるようにメタノールに再分散することで分散液12’’を調整した。次に、粒子12’’が0.63gとなるようにはかりとった分散液12’’に、あらかじめ秤量しておいた無水コハク酸(東京化成工業製)と無水酢酸(東京化成工業製)の1:3(mol分率)混合試薬2.77gを加え、5時間、30℃で振とうすることにより、粒子12’’に由来する一級アミンと無水コハク酸を反応させ、粒子1にDEG−2AEEを介してカルボキシ基を導入した粒子12を得た。粒子12は、27000G、20分、3回の条件で3wt%トリエチルアミン水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製し、粒子12の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
20gの分散液1を200ml四つ口丸底フラスコにはかりとり、100rpmで撹拌しながら4℃に保持した状態で、上記200ml四つ口丸底フラスコの外部から超音波(28kHz、100W)を照射しながら、全量で2.54gの1,6−ヘキサンジアミン(東京化成工業製)を2.0g/分の速度で分散液1と混合し、混合液13−1を調整した。その後、混合液13−1を100rpmで撹拌しながら24時間、40℃で保持することにより、粒子1のポリグリシジルメタクリレートに由来するグリシジル基と1,6−ヘキサンジアミンに由来する一級アミンとを反応させ、粒子1に1,6−ヘキサンジアミンを片末端で結合させた粒子13’を得た。粒子13’を4℃、27000G、20分、8回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が10wt%となるようにイオン交換水に再分散することで分散液13’を調整した。次に、粒子13’が0.63gとなるようにはかりとった分散液13’に3.81gのエチレングリコールジグリシジルエーテル(EGDE;東京化成工業製)を加え、24時間、30℃で振とうした後、さらに、アンモニア換算でEGTEに対して10倍モルの28%アンモニア水溶液(東京化成工業製)を添加し、24時間、70℃で振とうすることで粒子13’’を得た。粒子13’’を4℃、27000G、20分、8回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が5wt%になるようにイオン交換水で調整し、更にTris1.48gを添加後、撹拌することでTrisを溶解した。次にトリエチルアミンによりpHが11になるように調整し、70℃、24時間、撹拌した。その後4℃、27000G、20分で遠心分離を行い、上清を廃棄し、イオン交換水で沈殿物を再分散する精製を計5回行った。次に、再度、遠心精製を行い、固形分率が1wt%となるようにメタノールに再分散することで分散液13’’’を調整した。次に、粒子13’’’が0.63gとなるようにはかりとった分散液13’’’に、あらかじめ秤量しておいた無水コハク酸(東京化成工業製)と無水酢酸(東京化成工業製)の1:3(mol分率)混合試薬2.77gを加え、5時間、30℃で振とうすることにより、粒子5’’’に由来する一級アミンと無水コハク酸を反応させ、粒子1に1,6−ヘキサンジアミンとEGDEを介してカルボキシ基を導入した粒子13を得た。粒子13は、27000G、20分、3回の条件で3wt%トリエチルアミン水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製し、粒子13の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
1,6−ヘキサンジアミンの代わりに1.93gの1,4−ブタンジアミン(東京化成工業製)を用いた以外は、実施例13と同様の操作を行い粒子13の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
1,6−ヘキサンジアミンの代わりに1.32gのエチレンジアミン(東京化成工業製)を用いた以外は、実施例13と同様の操作を行い粒子15の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
1,6−ヘキサンジアミンの代わりに1.62gの1,2−プロパンジアミン(東京化成工業製)を用いた以外は、実施例13と同様の操作を行い粒子16の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
1,6−ヘキサンジアミンの代わりに4.82gのDEG−3APEを用いた以外は、実施例13と同様の操作を行い粒子17の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
20gの分散液1を200ml四つ口丸底フラスコにはかりとり、100rpmで撹拌しながら4℃に保持した状態で、上記200ml四つ口丸底フラスコの外部から超音波(28kHz、100W)を照射しながら、はかりとった分散液1に含有されるグリシジル基量に対して50倍モルの28%アンモニア水を2.0g/分の速度で分散液1と混合し、混合液10−1を調整した。その後、混合液10−1を100rpmで撹拌しながら24時間、70℃で保持することにより、粒子1のポリグリシジルメタクリレートに由来するグリシジル基に一級アミンを付加した粒子18’を得た。粒子18’を4℃、27000G、20分、8回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が10wt%となるようにイオン交換水に再分散することで分散液12’を調整した。次に、粒子18’が0.63gとなるようにはかりとった分散液18’に3.81gのEGDEを加え、24時間、30℃で振とうした後、さらに、アンモニア換算でEGTEに対して10倍モルの28%アンモニア水溶液を添加し、24時間、70℃で振とうすることで粒子18“を得た。粒子18’’を4℃、27000G、20分、8回の条件でイオン交換水を用いて遠心精製した後、固形分が5wt%になるようにイオン交換水で調整し、更にTris1.479gを添加後、撹拌することでTrisを溶解した。次にトリエチルアミンによりpHが11になるように調整し、70℃、24時間、撹拌した。その後4℃、27000G、20分で遠心分離を行い、上清を廃棄し、イオン交換水で沈殿物を再分散する精製を計5回行うことで粒子18’’’を得た。次に、再度、遠心精製を行い、固形分率が1wt%となるようにメタノールに再分散することで分散液18’’’を調整した。次に、粒子18’’’が0.63gとなるようにはかりとった分散液18’’’に、あらかじめ秤量しておいた無水コハク酸(東京化成工業製)と無水酢酸(東京化成工業製)の1:3(mol分率)混合試薬2.77gを加え、5時間、30℃で振とうすることにより、粒子18’’’に由来する一級アミンと無水コハク酸を反応させ、粒子1にEGDEを介してカルボキシ基を導入した粒子18を得た。粒子18は、27000G、20分、3回の条件で3wt%トリエチルアミン水溶液を用いて遠心精製し、さらに、27000G、20分、8回の条件で超純水を用いて遠心精製し、粒子18の水分散液を得た。得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
DEG−3APEの代わりに3.25gのエイレングリコールビス(2−アミノエチル)エーテル(東京化成工業製)を用いた以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子19の水分散液を得た。 得られた粒子の各種特性を表1にまとめた。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の3:97(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子20の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の3:47(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子21の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の3:2(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子22の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸と無水酢酸の3:1(mol分率)混合試薬に変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子23の水分散液を得た。
無水コハク酸と無水酢酸の1:3(mol分率)混合試薬を、無水コハク酸のみに変更した以外は、実施例2及び実施例2(i)と同様の操作を行い粒子24の水分散液を得た。
粒子2−1、粒子3、粒子4、粒子5、粒子6、粒子7、粒子8、粒子9、粒子10、粒子11、粒子12、粒子13、粒子14、粒子15、粒子16、粒子17、粒子18、粒子19をそれぞれ、0.1wt%となるようにリン酸緩衝液に分散させた分散液(P液)を調製した。次に、それぞれの分散液30μlに対して、トリオレイン、レシチン、遊離脂肪酸、ウシアルブミン、トリス緩衝液から成る乳び液(Q液)を60μl添加し、撹拌した直後の混合液に対して、波長572nmのける吸光度を測定した。吸光度測定はBiochrom社製分光光度計GeneQuAnt1300を用いた。そして、それぞれの混合液を37℃で5分間静置した後、再び波長572nmにおける吸光度を測定し、吸光度の変化量ΔABS×10000の値を算出した。この結果を表3にまとめた。値が大きいものほど、非特異吸着が生じると解釈されるが、実施形態にも記載した通り、側鎖Aの側鎖長が長くなるとP液とQ液を混合した際に生じる浸透圧由来の粒子間凝集も発生するため、値が大きいからと言って必ずしも非特異吸着が生じているとは断言できない。しかし、この値が大きい粒子は、側鎖Aを介してリガンドを化学結合させ、ラテックス凝集用粒子として用いる場合に、実質的に、非特異吸着による粒子間凝集と浸透圧由来の粒子間凝集とを区別できないため使用し難いとされている。
粒子2−1、粒子2−2、粒子2−3、粒子3、粒子4、粒子5、粒子6、粒子7、粒子8、粒子9、粒子10、粒子11、粒子12、粒子13、粒子14、粒子15、粒子16、粒子17、粒子18、粒子19をそれぞれ、1.0wt%となるようにリン酸緩衝液に分散させた分散液を1μlずつ調整した。これらの分散液に、それぞれ、0.055mgの1−[3−(ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミド](富士フイルム和光純薬製)を10μlのリン酸緩衝液に溶解させた溶解液を加えた後、モノクローナル マウス アンチユーマン C−反応性タンパク(以下、CRP抗体)のクローンC5(フナコシ製)の4.9mg/ml分散液を5μlとクローンC6(フナコシ製)の5.8mg/ml分散液を5μl加え、室温で180時間振とうすることで、側鎖Aが末端に有するカルボキシ基とリガンドとを化学結合させ、ラテックス凝集用粒子を得た。次に、4℃、15000rpm、3回の条件でラテックス凝集用粒子を遠心精製し、最終的に1mlリン酸緩衝液に分散させた分散液(以下、R2と称する)として保存した。以下、ラテックス凝集用粒子の名称は、粒子名称をそのまま踏襲し、ラテックス凝集粒子2−1、ラテックス凝集用粒子3のように表現する。カルボキシ基を金属塩基や有機塩基で中和した場合に、カルボキシ基とリガンドとの反応性がどの程度異なるかを比較する目的で、ラテックス凝集用粒子2−1、ラテックス凝集用粒子2−2、ラテックス凝集量粒子2−3のリガンド結合量を表4にまとめた。
ヒトCRP(シグマ製C4063,C反応性タンパク質 ヒト血漿由来、32mg/dl)を1μlと、緩衝液(デンカ生研 CRP−L オート「TBA」の緩衝液(R−1))を50μlとを混合した混合液(以下、R1+と称する)を調製し、37℃に保温した。また、コントロールとして、リン酸緩衝液を1μlと、緩衝液(デンカ生研 CRP−L オート「TBA」の緩衝液(R−1))を50μlとを混合した混合液(以下、R1−と称する)を調製し、同じく37℃に保温した。次に、実施例21で調整した各ラテックス凝集用粒子を含有するR2を50μlとR1+あるいはR1−とを混合し、撹拌した直後の混合液に対して、波長572nmにおける吸光度を測定した。吸光度測定はBiochrom社製分光光度計GeneQuant1300を用いた。そして、この混合液を37℃で5分間静置した後、再び波長572nmにおける吸光度を測定し、吸光度の変化量ΔABS×10000の値を算出した。この一連の評価を、実施例10において調製した直後のR2、調整後24時間経過した後のR2,調整後72時間経過した後のR2のそれぞれに対して行った。結果を表5にまとめた。ラテックス凝集粒子17に関しては、R1−を用いた場合のΔABS×10000が1000を超えておりbadと評価したが、少なくとも調整直後においては、R1+が非常に高い値を示していることはポジティブな結果ととらえている。本実施例において評価したR1+を用いた場合のΔABS×10000は何れのラテックス凝集粒子に対してもfair以上の値を示し、十分な感度を備えていると判断できるが、ラテックス凝集粒子2−1、ラテックス凝集粒子3から19は顕著に高い値を示しており、良好な結果としてとらえている。
Claims (22)
- 側鎖Aを有するユニットと側鎖Bを有するユニットを有するポリマーを含む粒子であって、前記側鎖Aの末端にカルボキシ基を有し、前記側鎖Aの分子構造中にエステル結合とアミド結合を有し、前記側鎖Bの末端にアルキル基を有し、水中に分散させたときのゼータ電位がマイナス40mV以上マイナス5mV以下であることを特徴とする粒子。
- 前記カルボキシ基及び前記アルキル基が、前記粒子表面に存在することを特徴とする請求項1に記載の粒子。
- 前記側鎖Aを有するユニットと前記側鎖Bを有するユニットとが下記式(1)の関係を満たすことを特徴とする請求項1又は2に記載の粒子。
10≦[側鎖Aを有するユニットの数]/[[側鎖Aを有するユニットの数]+[側鎖Bを有するユニットの数]]×100≦50・・・式(1) - 前記側鎖Bの分子構造中にエステル結合とアミド結合とを有することを特徴とする請求項1及至3の何れか一項に記載の粒子。
- 前記粒子がさらに、末端に水酸基を有する側鎖Cを有するユニットを有するポリマーを含むことを特徴とする請求項1及至6の何れか一項に記載の粒子。
- 前記水酸基が、前記粒子表面に存在することを特徴とする請求項7に記載の粒子。
- 前記式(7)のX1及びX2をCH3基で置換した場合に、X1−L−X2のハンセン溶解度パラメータにおける水素結合項の値が、8.3以上10.5以下であることを特徴とする請求項10に記載の粒子。
- 前記式(7)のX1−L−X2がアミン由来の窒素原子を有し、前記窒素原子の数が2以下であることを特徴とする請求項10及至12の何れか一項に記載の粒子。
- 前記側鎖Aのカルボキシ基が有機塩で中和された塩であることを特徴とする請求項1及至14の何れか一項に記載の粒子。
- 前記粒子がスチレン系単量体の繰り返し単位を含有することを特徴とする請求項1及至15の何れか一項に記載の粒子。
- 請求項1及至請求項16の何れか一項に記載の粒子に、前記側鎖Aを介してリガンドが結合しているアフィニティー粒子。
- 前記リガンドが抗原又は抗体である凝集法用粒子であることを特徴とする請求項17の何れか一項に記載のアフィニティー粒子。
- 請求項17または18に記載のアフィニティー粒子を含有することを特徴とする体外診断による検体中の標的物質の検出に用いるための試薬。
- 請求項19に記載の試薬を少なくとも備えることを特徴とする体外診断による検体中の標的物質の検出に用いるためのキット。
- 体外診断による検体中の標的物質の検出方法であって、請求項19に記載の試薬と、標的物質を含む可能性のある検体とを混合することを特徴とする検出方法。
- 側鎖Aを有するユニットと側鎖Bを有するユニットを有するポリマーを含む粒子であって、前記側鎖Aの末端にカルボキシ基を有し、前記側鎖Aの分子構造中にエステル結合とアミド結合を有し、前記側鎖Bの末端にアルキル基を有することを特徴とする粒子。
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