JP2019523092A - αケースがなく、かつ骨誘導が増強されたチタンインプラント表面 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、添付の図面と関連付けて読まれると、以下の詳細な説明から最良に理解される。図面に含まれているものは、下記に要約しているとおり、いくつかの図である。
「対象」または「患者」という用語は、互換的に使用される。対象は、伴侶動物、実験動物および非ヒト霊長類などの哺乳動物を含む任意の動物とすることができる。ヒトが好適である。
本明細書で使用する場合、「自由面」は、インプラントが体内に埋め込まれる時点では骨に直接接触しない整形外科用インプラントの表面である。しかしながら、マイクロスケール構造およびナノスケール構造を含む骨誘導するための粗さを付与するために加工される自由面は、新規の骨成長を刺激することができ、埋め込まれて自由面からの付帯的な骨成長が現れてから一定期間を経ると、自由面は、骨に接触する。一部の態様において、整形外科用インプラントの自由面の1つ以上は、例えば、インプラントが体内に埋め込まれる場合に骨移植材料(例えば、人工、同種移植または自家移植の材料)に接触することができる。開業医は、骨移植材料を自由面の1つ以上に接触して配置し得る。
A.αケースおよびそのチタン基材
チタンは、1791年および1795年にそれぞれ発見され、命名された。その不純形態は、1887に最初に調製されたが、純粋な金属(99.9%)は、1910年まで作製されなかった。チタンは、隕石、鉱物、鉄鉱石、石炭灰、植物および人体を含む複数の供給源中に見出される。チタンを商業用に製作するために現在も広く使用されている方法は、1946年に発見されたものであり、マグネシウムを使用して四塩化チタンを還元し、純粋な金属を単離する。
B.αケース
チタンは、高温で酸素を敏速に吸収する。チタンおよびその合金が、加熱した空気または酸素に曝露されると、αケースと呼ばれる酸素を多く含む表面相の形成が発生し得る。αケース層は、チタン表面への酸素拡散によって生じる。より一般的には、αケースは、加熱後にチタンに存在する、炭素、窒素または特に酸素を多く含むα安定型表面である。
C.αケースのない表面の形成
αケースの不利点を考慮すると、αケースのないチタンインプラントの表面を形成することが望ましい場合が多い。一般に、このような表面を実現するために2つの方法がある。1つの方法は、最初の段階で(すなわちチタンの加工中に)αケースの形成を回避するかまたは少なくとも最小限にすることである。αケースの形成は、チタンが酸素の非存在下で加熱される真空冶金または不活性ガスを使用することにより、最小限にすることができる。このように、αケースは、きわめて高い真空レベルまたは不活性環境でチタンを加工することにより、最小限にするかまたは回避することができる。しかし、様々な理由により、酸素の非存在下でチタンを加工することは、実際的でないかまたは望ましくない場合がある。
(実施例)
実施例1
付加製造されたチタン表面のSEM画像
チタンディスクは、レーザ溶融法/焼結法(例えば、直接金属レーザ焼結法(DMLS))または電子ビーム溶解法(EBM)のいずれかを使用して付加製造した。次いで、これらのディスクに応力除去または熱間静水圧加圧法を施し、表1に要約した機械的および化学的侵食を施した。ディスクの走査型電子顕微鏡(SEM)画像が得られ、図1A、1B、1C、1Dおよび1Eに示されている(SEMは、試料の表面が、反射する電子ビームによって走査されて、画像が形成される電子顕微鏡である)。
骨芽細胞の発生および骨誘導の既知マーカとしてのアルカリホスファターゼ、オステリクスおよびオステオカルシン
骨形成分化は、数種のタンパク質の増減を特徴とする連続プロセスである。本明細書において分析されるタンパク質は、初期(ALP)、中期(OSX)および後期(OCN)の各骨芽細胞マーカの特徴を表すものである。骨芽細胞分化のプロセスは、間葉系幹細胞が、骨形成または軟骨形成を行う能力およびALPを発現する能力がある中間的な前駆細胞へ進行することから開始される。骨形成系列を担うこれらの中間的な前駆細胞は、ここで、前骨芽細胞と称され、ALPの発現を増加させる。前骨芽細胞が骨芽細胞へ進行するにつれて、OSXの発現が増加し、最終的に前骨芽細胞が骨芽細胞になると、OCNの発現が増加する。
実施例3
骨誘導表面上で成長したMG63細胞の骨形成マーカの評価
MG63細胞は、前骨芽細胞株である。MG63細胞は、10%FBS、1%ペニシリン/ストレプトマイシン、50μg/mLアスコルビン酸および10mMβ−グリセロリン酸を添加したEMEM中で培養し、10,000細胞/cm2でディスク上に播種した。7日間培養した後、ピアース哺乳動物タンパク質抽出試薬(Pierce Mammalian Protein Extraction Reagent)とプロテアーゼ阻害剤とで細胞を溶解し、溶解物のアルカリホスファターゼ(ALP)、オステオポンチン(OPN)およびRunX2の発現を評価した。アルカリホスファターゼ(ALP)は、初期の骨芽細胞分化マーカであり、ALPの存在下でp−ニトロフェニルリン酸がp−ニトロフェノールに変換されることを利用する酵素アッセイによって測定し、次いでp−ニトロフェノールの吸光度を測定した。ALPは、試料中に存在するDNAの量を基準として正規化した。DNAは、標準的なピコグリーン(PicoGreen)アッセイで測定した。オステオポンチン(OPN)は、分化にわたり、骨芽細胞によって発現するタンパク質であり、定量的なウエスタンブロッティングによって測定し、チューブリンを基準として正規化した。結果は、図2A、2Bおよび2Cに示されている。図2A〜2Cの表面の内容は、表1に示されている。
実施例4
骨誘導表面上で成長したSaOS−2細胞の骨形成マーカの評価
SAOS−2細胞は、アメリカンタイプカルチャーコレクション(ATCC)(ヴァージニア州マナサス)から入手し、ピコグリーン(PicoGreen)アッセイ、マッコイ5A培地およびペニシリン/ストレプトマイシンは、すべてライフ・テクノロジーズ(Life Technologies)(カリフォルニア州カールスバッド)から入手し、ウシ胎仔血清は、アトランタ・バイオロジカルズ(Atlanta Biologicals)(ジョージア州アトランタ)から入手し、アルカリホスファターゼアッセイは、バイオ・ラッド(Bio−Rad)(カリフォルニア州ハーキュリーズ)から入手し、オステリクスELISAは、ライフスパン・バイオサイエンシーズ(Lifespan Biosciences)(ワシントン州シアトル)から入手し、オステオカルシンELSIAは、R&Dシステムズ(R&D Systems)(ミネソタ州ミネアポリス)から入手した。
Claims (20)
- チタンまたはチタン合金本体を有し、複数の表面を有する整形外科用インプラントにおいて、
(a)前記整形外科用インプラントを付加構築するステップと、その後、
(b)前記整形外科用インプラントの1つ以上の表面を機械的に、化学的に、または機械的および化学的に侵食して、(i)前記1つ以上の表面からαケースを除去し、かつ(ii)前記1つ以上の表面に、マイクロスケール構造およびナノスケール構造を含む骨誘導するための粗さを付与するステップと
を備える製造方法に従って製作される、整形外科用インプラント。 - 前記1つ以上の表面は、前記整形外科用インプラントの前記本体の内部内の表面を含む、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記1つ以上の表面は、骨または骨移植材料に接触する、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記1つ以上の表面は、自由面である、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記ステップ(b)は、前記整形外科用インプラントの前記1つ以上の表面を機械的に侵食し、かつその後、前記1つ以上の表面を化学的に侵食することをさらに備える、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントの前記1つ以上の表面の機械的侵食は、マイクロスケール構造を前記1つ以上の表面に付与し、および前記整形外科用インプラントの前記1つ以上の表面の化学的侵食は、ナノスケール構造を前記1つ以上の表面に付与する、請求項5に記載の整形外科用インプラント。
- 化学的に侵食された前記ナノスケール構造は、機械的に侵食された前記マイクロスケール構造と重なり合う、請求項6に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントを付加構築する前記ステップ(a)は、前記整形外科用インプラントの移動を抑制するマクロスケールの構造的特徴をもたらし、および前記マクロスケールの構造的特徴と、前記マイクロスケールの構造的特徴と、前記ナノスケールの構造的特徴とは、互いに重なり合う、請求項7に記載の整形外科用インプラント。
- 前記製造方法は、前記整形外科用インプラントを、熱間静水圧圧力もしくは熱間一軸圧力で処理するか、または応力を除去するように処理するステップをさらに備える、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記処理するステップは、減圧下または不活性ガス中で完了される、請求項9に記載の整形外科用インプラント。
- 前記プロセスは、さらに加工される前記1つ以上の表面から炭素、窒素および酸素を遮断するために、さらなる加工前に、前記付加構築された整形外科用インプラントにコーティングを適用するステップをさらに含む、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントを付加構築する前記ステップ(a)は、チタンまたはチタン合金の粉末、粒子、顆粒、ワイヤー、断片またはこれらの組合せを溶融して前記整形外科用インプラントの形状にすることによって完了される、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントを付加構築する前記ステップ(a)は、チタンまたはチタン合金の粉末、粒子、顆粒、ワイヤー、断片またはこれらの組合せを焼結して前記整形外科用インプラントの形状にすることによって完了される、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントを付加構築する前記ステップ(a)は、前記整形外科用インプラントを垂直方向に付加構築することを含む、請求項1に記載の整形外科用インプラント。
- チタンまたはチタン合金本体を有し、複数の表面を有する整形外科用インプラントにおいて、
(a)1つ以上の自由面を有し、かつ骨と接触して配置されるようになされた1つ以上の骨接触面を有する前記整形外科用インプラントを付加構築するステップであって、少なくとも前記1つ以上の骨接触面は、前記骨接触面が骨と接触して配置される場合に前記整形外科用インプラントの移動を抑制するマクロスケールの粗さを有する、ステップと、その後、
(b)前記1つ以上の自由面の1つ以上および前記1つ以上の骨接触面を、順次、機械的および化学的に侵食して、(i)前記1つ以上の自由面の1つ以上および前記1つ以上の骨接触面からαケースを除去し、かつ(ii)前記1つ以上の自由面の1つ以上および前記1つ以上の骨接触面に、マイクロスケール構造およびナノスケール構造を含む骨誘導するための粗さを付与するステップと
を備える製造方法に従って製作される、整形外科用インプラント。 - 前記マクロスケールの構造的特徴と、前記マイクロスケールの構造的特徴と、前記ナノスケールの構造的特徴とは、互いに重なり合う、請求項15に記載の整形外科用インプラント。
- 前記製造方法は、前記整形外科用インプラントを、熱間静水圧圧力もしくは熱間一軸圧力で処理するか、または応力を除去するように処理するステップをさらに備える、請求項15に記載の整形外科用インプラント。
- 前記処理するステップは、減圧下または不活性ガス中で完了される、請求項17に記載の整形外科用インプラント。
- 前記プロセスは、さらに加工される前記1つ以上の表面から炭素、窒素および酸素を遮断するために、前記ステップ(a)後およびさらなる加工前に、前記付加構築された整形外科用インプラントにコーティングを適用するステップをさらに備える、請求項15に記載の整形外科用インプラント。
- 前記整形外科用インプラントを付加構築する前記ステップ(a)は、チタンまたはチタン合金の粉末、粒子、顆粒、ワイヤー、断片またはこれらの組合せを溶融または焼結して前記整形外科用インプラントの形状にすることによって完了される、請求項15に記載の整形外科用インプラント。
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