JP2019515906A - オベチコール酸およびその誘導体の調製方法 - Google Patents

Abstract

本願は、胆汁酸誘導体またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：を含む方法に関する。

Description

ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）は、胆汁酸ホメオスタシスを制御する胆汁酸センサーとして機能する核内受容体である。ＦＸＲは、様々な器官で発現し、多くの疾患および病態、例えば肝疾患、肺疾患、腎疾患、腸疾患および心疾患など、ならびにグルコース代謝、インスリン代謝および脂質代謝を含む生物学的プロセスの調整に関与することが示されている。

多くの胆汁酸誘導体は、ＦＸＲアゴニストであり、ＦＸＲ介在性の疾患および病態を調整することができる。オベチコール酸（すなわちＯＣＡ、６−エチルケノデオキシコール酸または６−ＥＣＤＣＡ）は、強力なＦＸＲアゴニスト活性を有する。ＯＣＡの種々の合成方法は、例えば、国際公開第２００２／０７２５９８号パンフレット、国際公開第２００６／１２２９７７号パンフレットにおいて、最近では国際公開第２０１３／１９２０９７号パンフレットにおいて記載されている。しかし、高い収率、低いコストおよび良好な安全性プロファイルでＯＣＡおよびその誘導体を調製することができる改良型プロセスの必要性が依然としてある。本願は、そのような必要性に対処するものである。

本願は、オベチコール酸（ＯＣＡ）およびその誘導体を調製する方法に関する。一態様において、本願は、オベチコール酸（ＯＣＡ）：

またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ）化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

ｂ）化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

ｃ）化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：

、および
ｄ）化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：

を含む方法に関する。

本願は、化合物３を調製する方法であって、化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

を含む方法にさらに関する。

本願は、化合物４を調製する方法であって、化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

を含む方法にも関する。

本願は、化合物５を調製する方法であって、化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：

を含む方法にも関する。

本願は、ＯＣＡを調製する方法であって、化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：

を含む方法にも関する。

本願は、６α−エチル−３α，７α−２３−トリヒドロキシ−２４−ノル−５β−コラン−２３−スルフェート（化合物１１）：

またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ｅ）ＯＣＡをエステル化して化合物６を形成するステップ：

ｆ）化合物６を変換して化合物７を形成するステップ：

ｇ）化合物７を変換して化合物８を形成するステップ：

ｈ）化合物８を変換して化合物９を形成するステップ：

ｉ）化合物９を変換して化合物１０を形成するステップ：

、および
ｊ）化合物１０を変換して化合物１１を形成するステップ：

を含む方法にも関する。

調製方法
本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

を含む方法を提供する。

一実施形態では、反応は、トリフルイミド（すなわち（ＣＦ_３Ｓ（Ｏ）_２）_２ＮＲまたは（Ｔｆ）_２ＮＲ）触媒の存在下で行われ、ここで、Ｒは、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルまたはトリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルである。一実施形態では、トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２ＮＨ、（Ｔｆ）_２Ｎ−（Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル）および（Ｔｆ）_２Ｎ−トリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルから選択される。一実施形態では、トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２ＮＨである。一実施形態では、トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２ＮＣＨ_３、（Ｔｆ）_２ＮＣＨ_２ＣＨ_３および（Ｔｆ）_２ＮＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３から選択される。一実施形態では、トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２Ｎ−トリメチルシリル、（Ｔｆ）_２Ｎ−トリエチルシリルおよび（Ｔｆ）_２Ｎ−トリプロピルシリルから選択される。一実施形態では、トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２Ｎ−トリメチルシリル（すなわち（Ｔｆ）_２ＮＴＭＳ）である。一実施形態では、反応は、ＴｉＣｌ_４の存在下で行われる。一実施形態では、反応は、ＢＦ_３の存在下で行われる。一実施形態では、反応は、行われ、反応は、Ｚｎ（ＯＴｆ）_２、ＦｅＣｌ_３、ＳｎＣｌ_４またはＣｅＣｌ_３・ＮａＩの存在下で行われる。

一実施形態では、反応は、不活性気体下で行われる。一実施形態では、不活性気体は、Ａｒである。

一実施形態では、反応は、約０℃〜約５０℃、約０℃〜約４０℃、約０℃〜約３５℃、約５℃〜約３５℃、約５℃〜約３０℃、約１０℃〜約３０℃、約１０℃〜約２５℃、約１５℃〜約２５℃または約２０℃〜約２５℃の温度で行われる。

一実施形態では、反応は、約１０分間〜４時間、約１０分間〜３時間、約１０分間〜２時間、約２０分間〜２時間、約２０分間〜９０分間、約２０分間〜６０分間、約２０分間〜４０分間または約３０分間にわたって行われる。

一実施形態では、反応は、ニートなパラアルデヒド中で行われる。一実施形態では、パラアルデヒド対化合物２のモル比は、約３：１〜約６：１である。一実施形態では、パラアルデヒド対化合物２のモル比は、約３：１〜約５：１である。一実施形態では、パラアルデヒド対化合物２のモル比は、約４：１である。

一実施形態では、反応物は、撹拌される。

一実施形態では、化合物３は、反応が完了した後に濾過される。

一実施形態では、本願の方法は、化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

をさらに含む。

一実施形態では、塩基は、金属水酸化物、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシドおよび金属水素化物から選択される。一実施形態では、塩基は、金属水酸化物である。一実施形態では、金属水酸化物は、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである。一実施形態では、塩基は、アルコキシド（例えば、メトキシド、エトキシド、プロポキシド、イソ−プロポキシド、ブトキシド、イソ−ブトキシド、ｔｅｒｔ−ブトキシド、ペントキシド、イソ−ペントキシド、ｔｅｒｔ−ペントキシドおよびヘキシルオキシド）である。一実施形態では、塩基は、金属水素化物である。一実施形態では、金属水素化物は、水素化ナトリウムまたは水素化カリウムである。

一実施形態では、反応は、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、水およびそれらの混合物から選択される溶媒中で行われる。一実施形態では、反応は、１：３〜３：１、１：２〜２：１、１：１．５〜１．５：１、１：１．２〜１．２：１、または約１：１（ｖｏｌ／ｖｏｌ）のエタノール／水の比におけるエタノールと水との混合物中で行われる。

一実施形態では、反応混合物は、加熱される。一実施形態では、反応混合物は、約４０℃〜約５０℃、約５０℃〜約６０℃、約６０℃〜約７０℃または約７０℃〜約８０℃に加熱される。一実施形態では、反応混合物は、約７５℃に加熱される。

一実施形態では、反応は、約１時間〜８時間、約１時間〜６時間、約１時間〜４時間、約１時間〜３時間、約１．５時間〜２．５時間、または約２時間にわたって行われる。

一実施形態では、反応混合物は、反応が完了した後に冷却される。一実施形態では、反応物は、約０℃〜約５０℃、約０℃〜約４０℃、約０℃〜約３５℃、約５℃〜約３５℃、約５℃〜約３０℃、約１０℃〜約３０℃、約１０℃〜約２５℃、約１５℃〜約２５℃または約２０℃〜約２５℃の温度に冷却される。

一実施形態では、反応混合物は、エーテルで抽出される。一実施形態では、エーテルは、ジエチルエーテル、メチルエチルエーテルおよびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）から選択される。一実施形態では、エーテルは、ＭＴＢＥである。

一実施形態では、抽出後、反応混合物は、酸（例えば、ＨＣｌ）で処理される。

一実施形態では、本願の方法は、化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：

をさらに含む。

一実施形態では、水素化は、触媒の存在下で行われる。一実施形態では、触媒は、ニッケル触媒（例えば、ラネーニッケルおよび漆原ニッケル）、パラジウム触媒（例えば、Ｐｄ／Ｃ）および白金触媒（例えば、ＰｔＯ_２）から選択される。一実施形態では、触媒は、パラジウム触媒である。一実施形態では、触媒は、Ｐｄ／Ｃである。

一実施形態では、反応混合物は、加熱される。一実施形態では、反応混合物は、約８０℃〜約１２０℃、約８５℃〜約１１０℃、約９０℃〜約１１０℃または約９５℃〜約１０５℃に加熱される。

一実施形態では、本願の方法は、化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：

をさらに含む。

一実施形態では、還元は、化合物５を金属水素化物で処理するステップを含む。一実施形態では、金属水素化物は、水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムである。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ）化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

、および
ｂ）化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

を含む方法を提供する。

一実施形態では、ステップａ）およびステップｂ）は、それぞれ上に詳細に記載されているとおりである。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ）化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

ｂ）化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

、および
ｃ）化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：

を含む方法を提供する。

一実施形態では、ステップａ）、ステップｂ）およびステップｃ）は、それぞれ上に詳細に記載されているとおりである。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ）化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：

ｂ）化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：

ｃ）化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：

、および
ｄ）化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：

を含む方法を提供する。

一実施形態では、ステップａ）、ステップｂ）、ステップｃ）およびステップｄ）は、それぞれ上に詳細に記載されているとおりである。

一実施形態では、本願の方法は、化合物１をトリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルハライドと反応させて化合物２を形成するステップ：

をさらに含む。

一実施形態では、トリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルハライド（例えば、トリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルブロミドおよびトリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルクロリド）は、トリメチルシリルハライド、トリエチルシリルハライドおよびトリプロピルシリルハライドから選択される。一実施形態では、トリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルハライドは、トリメチルシリルクロリドである。

一実施形態では、反応は、強塩基の存在下で行われる。一実施形態では、強塩基は、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ナトリウムアミドおよび水素化ナトリウムから選択される。一実施形態では、強塩基は、ＬＤＡである。

一実施形態では、反応は、非プロトン性溶媒中で行われる。一実施形態では、非プロトン性溶媒は、非プロトン性極性溶媒である。一実施形態では、非プロトン性極性溶媒は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）から選択される。一実施形態では、非プロトン性極性溶媒は、ＴＨＦである。一実施形態では、非プロトン性溶媒は、非プロトン性非極性溶媒である。一実施形態では、非プロトン性非極性溶媒は、トルエン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、１，４−ジオキサン、クロロホルム、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジエチルエーテルおよびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）から選択される。一実施形態では、非プロトン性非極性溶媒は、トルエンである。

一実施形態では、反応混合物は、冷却される。一実施形態では、反応混合物は、約０℃〜約−４０℃、約−１０℃〜約−４０℃、約−１０℃〜約−３０℃、約−１５℃〜約−３０℃、約−２０℃〜約−３０℃または約−２０℃〜約−２５℃に冷却される。

一実施形態では、本願の方法は、７−ケトリトコール酸（ＫＬＣＡ）をエステル化して化合物１を形成するステップ：

をさらに含む。

一実施形態では、エステル化は、約３０℃〜約６０℃の温度で行われる。

一実施形態では、エステル化は、酸の存在下で行われる。一実施形態では、酸は、硫酸またはメタンスルホン酸である。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ１）７−ケトリトコール酸（ＫＬＣＡ）をエステル化して化合物１を形成するステップ：

、および
上記のステップａ）
を含む方法を提供する。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ）およびステップｂ）を含む方法を提供する。一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ）、ステップｂ）およびステップｃ）を含む方法を提供する。一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ）、ステップｂ）、ステップｃ）およびステップｄ）を含む方法を提供する。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ２）化合物１をトリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルハライドと反応させて化合物２を形成するステップ：

、および
上記のステップａ）
を含む方法を提供する。

一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ２）およびステップａ）を含む方法を提供する。一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ２）、ステップａ）およびステップｂ）を含む方法を提供する。一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ２）、ステップａ）、ステップｂ）およびステップｃ）を含む方法を提供する。一実施形態では、本願は、ＯＣＡまたはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、それぞれ上記のとおりのステップａ１）、ステップａ２）、ステップａ）、ステップｂ）、ステップｃ）およびステップｄ）を含む方法を提供する。

一実施形態では、本願の方法は、以下のスキームに示されている。

スキーム１によれば、化合物２を不活性雰囲気（例えば、Ａｒ）下でパラアルデヒドに溶解し、（Ｔｆ）_２ＮＨ（例えば、触媒量）に添加することができる。化合物３は、高収率（例えば、＞８５％）で単離することができる。

スキーム２によれば、化合物２を不活性雰囲気（例えば、Ａｒ）下でパラアルデヒドに溶解することができ、ＴＭＳ−トリフルイミド（例えば、触媒量）を添加することができる。

スキーム３によれば、化合物３を溶媒混合物（例えば、ＥｔＯＨおよび水（例えば、１／１ｖ：ｖ））に溶解することができ、塩基（例えば、ＫＯＨ）を添加することができる。得られた反応混合物を１〜１０時間（例えば、２時間）にわたって加熱することができる。

本願のプロセスは、以前に開示された例えば国際公開第２００２／０７２５９８号パンフレットおよび国際公開第２００６／１２２９７７号パンフレット、最近では国際公開第２０１３／１９２０９７号パンフレットにあるようなプロセスの改良である。例えば、国際公開第２０１３／１９２０９７号パンフレットは、以下のスキームＡ：

に示されるステップを含む、ＯＣＡを作製するプロセスを記載している。

スキームＡにおいて、化合物Ａ５は、出発材料７−ケトリトコール酸（ＫＬＣＡ）を用いて５ステップの合成プロセスを通して調製される。ステップ１では、ＫＬＣＡのメタノール溶液を、触媒試薬として硫酸を用いて加熱することにより、ＫＬＣＡをエステル化してメチルエステル、化合物Ａ１を形成する。化合物Ａ１を単離して収率９０〜９８％（例えば、９２％）を得る。ステップ２では、トリメチルシリルクロリド（ＴＭＳ−Ｃｌ）の存在下において化合物Ａ１をリチウムジ−イソプロピルアミド（ＬＤＡ）で処理して、Ｃ−３位にＴＭＳ−エーテルおよびＣ−７位にシリルエノールエーテルの両方を有する化合物Ａ２を生成させる。ステップ３では、化合物Ａ２をアセトアルデヒドと混合し、ＢＦ_３−Ｅｔ_２Ｏを低温で添加して化合物Ａ３を形成する。ステップ４では、化合物Ａ３を加水分解（例えば、ＮａＯＨ水溶液中で）して化合物Ａ４を生成させる。

スキームＡにおいて、シリルエノールエーテルＡ２の合成には大過剰のＬＤＡが必要であり、後処理後、反応により、副生成物としてかなりの量のジイソプロピルアミンが生成される。さらに、Ａ３への有効な変換を実現するために、大過剰のＢＦ_３・Ｅｔ_２Ｏを必要とし、Ａ３は、純粋な形態で単離されない。

本願の方法は、以前に記載されたプロセスと比較して複数の改良点を提供する。意外にも、向山アルドール（すなわちスキームＡの化合物Ａ３および本願の化合物３）の形成において、求電子剤をアセトアルデヒド（スキームＡのように）からパラアルデヒド（本願のように）に変更すると、化合物４の純度および合成の全収率が顕著に改善された。

一実施形態では、本願の方法は、実質的に純粋な化合物４：

を提供する。

一実施形態では、化合物４の純度は、約９０％より高い。一実施形態では、化合物４の純度は、約９５％より高い。例えば、化合物４の純度は、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、約９９．５％、約９９．８％または約９９．９％である。一実施形態では、純度は、ＨＰＬＣにより決定される。

一実施形態では、本願の方法は、高い収率をもたらす。一実施形態では、本願の方法は、ＯＣＡまたはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％の収率で製造する。一実施形態では、本願の方法は、ＯＣＡを少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％の収率で製造する。

一実施形態では、本願の方法は、実質的に純粋なオベチコール酸またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を製造する。本明細書で使用する「純度」という用語は、当技術分野で広く使用される分析方法（例えば、ＨＰＬＣ）に基づくオベチコール酸の量を指す。純度とは、化合物の「有機」純度に基づくものであり、水、溶媒、金属、無機塩などのいずれの量の測定値も含まない。一実施形態では、オベチコール酸の純度を、ＨＰＬＣのピーク下面積を比較することにより、標準試料の純度と比較する。一実施形態では、既知の純度基準は、オベチコール酸標準試料である。一実施形態では、オベチコール酸の純度は、約９６％より高い。一実施形態では、オベチコール酸の純度は、約９８％より高い。例えば、オベチコール酸の純度は、９６．０％、９６．１％、９６．２％、９６．３％、９６．４％、９６．５％、９６．６％、９６．７％、９６．８％、９６．９％、９７．０％、９７．１％、９７．２％、９７．３％、９７．４％、９７．５％、９７．６％、９７．７％、９７．８％、９７．９％、９８．０％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９８．６％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９．０％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％である。例えば、オベチコール酸の純度は、９８．０％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９８．６％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９．０％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％である。例えば、オベチコール酸の純度は、９８．０％、９８．５％、９９．０％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％である。例えば、オベチコール酸の純度は、９８．５％、９９．０％または９９．５％である。一実施形態では、純度は、ＨＰＬＣにより決定される。

別の実施形態では、本願の方法により調製されるオベチコール酸の純度は、水、硫酸灰分、残留溶媒の量、ならびに他の不純物含量、例えば６−エチルウルソデオキシコール酸、３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸、６β−エチルケノデオキシコール酸、３α，７α−ジヒドロキシ−６−エチリデン−５β−コラン−２４−酸、ケノデオキシコール酸および３α（３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−オイルオキシ）−７α−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸などの量を１００％から減算した純度を有する。

別の実施形態では、本願の方法により調製されるオベチコール酸の純度は、ジイソプロピルアミン副生成物の量を１００％から減算した純度を有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約１０％未満、約９％未満、約８％未満、約７％未満、約６％未満、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満または約０．１％未満のジイソプロピルアミン副生成物を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約１０％未満の水、約９％未満の水、８％未満の水、７％未満の水、６％未満の水、５％未満の水、４％未満の水、３％未満の水、２％未満の水または１％未満の水を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、０．１５％以下の６−エチルウルソデオキシコール酸および３α，７α−ジヒドロキシ−６−エチリデン−５β−コラン−２４−酸を含有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約０．０７％未満、約０．０６％未満または約０．０５％未満の６−エチルウルソデオキシコール酸および３α，７α−ジヒドロキシ−６−エチリデン−５β−コラン−２４−酸を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、０．１５％以下（ＮＭＴ）の３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を含有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約０．０７％未満、約０．０６％未満または約０．０５％未満の３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、０．１５％以下（ＮＭＴ）の６β−エチルケノデオキシコール酸を含有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約０．０７％未満、約０．０６％未満または約０．０５％未満の６β−エチルケノデオキシコール酸を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、３％以下（ＮＭＴ）のケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）を含有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約１％未満、約０．３％未満または約０．２％未満のＣＤＣＡを含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、４％以下（ＮＭＴ）のＣＤＣＡおよび６−エチルウルソデオキシコール酸を含有する。

一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、１．５％以下（ＮＭＴ）の３α（３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−オイルオキシ）−７α−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸を含有する。一実施形態では、本願の方法に従って調製されるオベチコール酸は、約１％未満、約０．０７％未満、約０．０６％未満または約０．０５％未満の３α（３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−オイルオキシ）−７α−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸を含有する。

本願は、安全な高純度のオベチコール酸を合成する方法であって、オベチコール酸を大規模に製造する方法を提供する。一実施形態では、オベチコール酸は、工業規模プロセスで製造される。一実施形態では、本願の方法は、高収率（＞８０％）で不純物が限定的であるオベチコール酸を製造する。

本願は、６α−エチル−３α，７α−２３−トリヒドロキシ−２４−ノル−５β−コラン−２３−スルフェート（化合物１１）：

またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ｅ）ＯＣＡをエステル化して化合物６を形成するステップ：

ｆ）化合物６を変換して化合物７を形成するステップ：

ｇ）化合物７を変換して化合物８を形成するステップ：

ｈ）化合物８を変換して化合物９を形成するステップ：

ｉ）化合物９を変換して化合物１０を形成するステップ：

、および
ｊ）化合物１０を変換して化合物１１を形成するステップ：

を含む方法にも関する。

一実施形態では、本方法は、化合物１１のナトリウム塩：

を調製するステップをさらに含む。

ステップｅ）は、ＯＣＡをエステル化して化合物６を形成することを伴う。一実施形態では、反応は、メタノール中で行われる。別の実施形態では、反応は、酸で触媒される。一実施形態では、酸は、ｐ−トルエンスルホン酸である。一実施形態では、酸は、硫酸またはメタンスルホン酸である。一実施形態では、エステル化は、約５５℃〜約８５℃の温度、例えば５５℃、６５℃、７５℃および８５℃ならびにその間の任意の温度上昇において行われる。

ステップｆ）は、グリニャール反応を行い、ジフェニルカルビノール中間体を形成することによって化合物７を得ることを伴う。一実施形態では、最初に化合物６をフェニルマグネシウムブロミドに接触させてジフェニルカルビノール中間体を得る。別の実施形態では、フェニルマグネシウムブロミド対化合物６のモル比は、約６：１である。別の実施形態では、フェニルマグネシウムブロミド対化合物６のモル比は、約５：１である。一実施形態では、反応は、非プロトン性溶媒中で行われる。一実施形態では、非プロトン性は、テトラヒドロフランである。一実施形態では、ジフェニルカルビノール中間体の形成後に酸が反応に添加される。一実施形態では、酸は、ｐ−トルエンスルホン酸である。一実施形態では、反応は、約５０℃〜約９０℃の温度、例えば５０℃、６０℃、７０℃、７５℃、８０℃および９０℃ならびにその間の任意の温度上昇において行われる。

ステップｇ）は、化合物７のＣ−３位のヒドロキシル基を保護して化合物８を得ることを伴う。一実施形態では、化合物７を無水酢酸に接触させる。一実施形態では、無水酢酸対化合物７のモル比は、約２：１である。別の実施形態では、モル比は、約１．６６である。一実施形態では、反応は、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）で触媒される。別の実施形態では、ピリジンが反応に添加される。別の実施形態では、反応は、ジエチルエーテルまたはテトラヒドロフラン中で行われる。一実施形態では、反応は、３０℃未満の温度で行われる。

ステップｈ）は、化合物８の二重結合を酸化的開裂し、Ｃ−７位のヒドロキシル基を酸化して化合物９を得ることを伴う。一実施形態では、化合物８をＲｕＣｌ_３、ＮａＩＯ_４および酸に接触させる。一実施形態では、化合物８対ＲｕＣｌ_３のモル比は、約１８：１〜約２２：１である。一実施形態では、化合物８対ＲｕＣｌ_３のモル比は、約１９：１〜約２１：１である。別の実施形態では、化合物８対ＲｕＣｌ_３のモル比は、約２０：１である。一実施形態では、酸は、Ｈ_２ＳＯ_４、ＨＣｌ、ＨＣｌＯ_４およびＨＩＯ_４から選択される。一実施形態では、酸は、２Ｎ Ｈ_２ＳＯ_４である。別の実施形態では、酸は、２Ｎ ＨＣｌである。一実施形態では、化合物８対酸のモル比は、約２：１〜約６：１である。一実施形態では、化合物８対酸のモル比は、約３：１〜約５：１である。別の実施形態では、化合物８対酸のモル比は、約４：１である。一実施形態では、反応は、約−１０℃〜約１０℃の温度で行われる。別の実施形態では、温度は、約−５℃〜約５℃である。別の実施形態では、温度は、約０℃である。一実施形態では、反応は、溶媒混合物中で行われる。一実施形態では、溶媒混合物は、１種のプロトン性極性溶媒および２種の非プロトン性極性溶媒を含む。一実施形態では、プロトン性極性溶媒は、Ｈ_２Ｏである。一実施形態では、非プロトン性極性溶媒は、アセトニトリルおよび酢酸エチルである。一実施形態では、非プロトン性極性溶媒は、アセトニトリルおよびクロロホルムである。一実施形態では、溶媒混合物は、Ｈ_２Ｏ／酢酸エチル／アセトニトリルである。一実施形態では、Ｈ_２Ｏ対酢酸エチル対アセトニトリルの比は、体積比で約１：１：１〜約１：３：２である。別の実施形態では、比は、体積比で約１：１．５：１〜約１：２．５：１．５である。別の実施形態では、比は、体積比で約１：２：１．５である。

ステップｉ）は、化合物９のＣ−２３位カルボン酸およびＣ−７位カルボニル基を還元して化合物１０を得ることを伴う。一実施形態では、化合物９をクロロギ酸エステル、塩基および還元剤に接触させる。一実施形態では、クロロギ酸エステルは、クロロギ酸イソブチル、クロロギ酸エチル、クロロギ酸イソプロピルまたはクロロギ酸ｔ−ブチルである。一実施形態では、クロロギ酸エステルは、クロロギ酸イソブチルである。一実施形態では、塩基は、トリエチルアミンである。一実施形態では、還元剤は、水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムである。一実施形態では、反応は、非プロトン性極性溶媒中で行われる。一実施形態では、非プロトン性極性溶媒は、テトラヒドロフランである。一実施形態では、反応は、約−１０℃〜約１０℃の温度で行われる。実施形態では、温度は、約−５℃〜約５℃である。別の実施形態では、温度は、約０℃である。

ステップｊ）は、化合物１０のＣ−２３位のヒドロキシル基を硫酸化し、Ｃ−３位のヒドロキシル基を脱保護して化合物１１を得ることを伴う。一実施形態では、硫酸化は、三酸化硫黄、クロロスルホン酸またはスルファミン酸で行われる。一実施形態では、硫酸化は、三酸化硫黄錯体で行われる。一実施形態では、三酸化硫黄錯体は、三酸化硫黄ピリジン、三酸化硫黄ジオキサンおよび三酸化硫黄トリメチルアミンから選択される。一実施形態では、三酸化硫黄錯体は、三酸化硫黄ピリジンである。

一実施形態では、反応混合物を塩基およびプロトン性極性溶媒で処理して化合物１１のナトリウム塩を形成する。一実施形態では、プロトン性極性溶媒は、ＣＨ_３ＯＨである。一実施形態では、塩基は、ＮａＯＨである。一実施形態では、塩基は、ＮａＯＨの１０％（ｗ／ｗ）ＣＨ_３ＯＨ溶液である。

本願は、スキーム４に記載の式ＩＩＩの化合物を調製する方法にさらに関する。

式中、
Ａは、

（式中、「＊」で印を付けられた炭素原子は、Ａが結合されている炭素原子に結合されている）、オキサジアゾロニルまたはイソオキサゾロニルであり、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^４は、互いに独立に、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ^３は、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＣ（Ｏ）ＯＨ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＯＨ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＯＳＯ_３Ｈ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ^７、テトラゾリル、オキサジアゾリル、オキサジアゾロニル、または任意選択によりＮＨＳ（Ｏ）_２−（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルキルで置換されているチアゾリジン−ジオニルであり、
Ｒ^５およびＲ^６は、互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、または任意選択によりＯＨもしくはハロゲンで置換されているアルキルであり、
Ｒ^７は、ＯＨ、（ＣＨ_２）_ｐＯＨまたは（ＣＨ_２）_ｐＯＳＯ_３Ｈであり、
ｐは、１または２であり、および
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^４のヒドロキシル基は、保護されていることができる。

一実施形態では、式ＩＩＩの化合物は、以下からなる群から選択される。

経口製剤および投与
本願は、経口投与するための本発明の化合物を提供する。一実施形態では、本製剤は、ＦＸＲ介在性の疾患および病態を予防および処置するための経口投与に関する。

経口投与に好適な製剤は、錠剤、カプセル剤、カシェ剤（薬剤師が薬物を提供するために使用するウエハカプセル剤）、トローチ剤など、各々が所定量の本発明の化合物を含有する別個の単位として、散剤もしくは顆粒剤として、水性もしくは非水性液中の溶液剤もしくは懸濁剤として、または水中油もしくは油中水の乳剤として提供され得る。

本願の製剤は、任意の好適な方法によって（通常、本発明の化合物を液体もしくは微粉化固体担体またはその両方と必要な割合で均一および均質に混合し、次いで必要に応じて、得られた混合物を所望の形状に成形することによって）調製することができる。

例えば、錠剤は、粉末または顆粒の本発明の化合物と、１種または複数の任意選択の成分、例えば結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤または界面活性分散剤などとを含む均質混合物を圧縮することにより、または粉末化活性成分と不活性液体希釈剤との均質混合物を鋳型成形することにより調製することができる。

例えば、対象の体重（例えば、約３０ｋｇ〜約７０ｋｇのヒト）に基づく標的用量レベルに到達させるために、１つまたは複数の錠剤を投与してもよい。

上記で具体的に述べた成分に加えて、本願の経口製剤は、対象の製剤のタイプに配慮した上で、薬学分野の当業者に公知の他の薬剤を含んでもよい。経口製剤は、好適な香味剤を含んでもよい。

一実施形態では、本願は、本発明の化合物の医薬製剤であって、本発明の化合物が本願のプロセスによって製造される、医薬製剤に関する。別の実施形態では、本製剤は、経口投与される。

一実施形態では、本製剤は、錠剤の形態である。別の実施形態では、本製剤は、本発明の化合物と、微結晶セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、コーティング材料およびコロイド状二酸化ケイ素から選択される１種または複数の成分とを含む。一実施形態では、コーティング材料は、Ｏｐａｄｒｙ（登録商標）コーティング材料である。

本明細書で使用するすべてのパーセンテージおよび比率は、別段の指定がない限り、重量またはモル当量によるものである。パーセント二量体不純物は、一般的に分析用ＨＰＬＣで定量されるように、面積パーセントベースで計算される。

医薬組成物
本発明の化合物は、種々の医療目的に有用である。本発明の化合物は、ＦＸＲ介在性の疾患および病態を予防または処置する方法において使用することができる。一実施形態では、疾患または病態は、胆道閉鎖症、胆汁うっ滞性肝疾患、慢性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、Ｃ型肝炎感染症、アルコール性肝疾患、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、進行性線維症による肝損傷、肝線維症、ならびにアテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、高コレステロール血症および高脂血症を含む心血管疾患から選択される。一実施形態では、本発明の化合物は、トリグリセリドを低下させ、および／またはＨＤＬを上昇させる方法において使用することができる。本発明の化合物の他の効果としては、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）、ビリルビン、ＡＬＴ、ＡＳＴおよびＧＧＴを低下させることが含まれる。一実施形態では、本願は、本発明の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物であって、本発明の化合物が本願の方法によって製造される、医薬組成物に関する。

一実施形態では、化合物または医薬組成物は、経口で、非経口で、または局所的に投与される。一実施形態では、化合物または医薬組成物は、経口投与される。

一実施形態では、本願は、胆汁うっ滞性病態に罹患している対象の線維症を阻害する方法であって、対象に有効量の本発明の化合物を投与するステップを含み、本発明の化合物が本願の方法によって製造される、方法に関する。一実施形態では、本願は、胆汁うっ滞性病態に罹患していない対象の線維症を阻害する方法であって、対象に有効量の本発明の化合物を投与するステップを含み、本発明の化合物が本願の方法によって製造される、方法に関する。一実施形態では、阻害しようとする線維症は、ＦＸＲが発現する器官で生じる。

一実施形態では、胆汁うっ滞性病態は、アルカリホスファターゼ、７−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）および５’ヌクレオチダーゼの血清レベルが異常に上昇するものと定義される。別の実施形態では、胆汁うっ滞性病態は、少なくとも１つの臨床症状を生じさせるものとしてさらに定義される。別の実施形態では、症状は、かゆみ（掻痒）である。別の実施形態では、線維症は、肝線維症、腎線維症および腸線維症からなる群から選択される。別の実施形態では、胆汁うっ滞性病態は、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、薬物性胆汁うっ滞、遺伝性胆汁うっ滞および妊娠性肝内胆汁うっ滞からなる群から選択される。別の実施形態では、対象は、原発性肝臓および胆道がん、転移性がん、敗血症、持続的完全静脈栄養、嚢胞性線維症ならびに肉芽腫性肝疾患からなる群から選択される疾患または病態を伴う胆汁うっ滞性病態に罹患していない。

一実施形態では、対象は、Ｂ型肝炎；Ｃ型肝炎；寄生虫性肝疾患；移植後の細菌、ウイルスおよび真菌感染症；アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）；非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；メトトレキサート、イソニアジド、オキシフェニスタチン、メチルドパ、クロルプロマジン、トルブタミドまたはアミオダロンにより誘発される肝疾患；自己免疫性肝炎；サルコイドーシス；ウィルソン病；ヘモクロマトーシス；ゴーシェ病；ＩＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、ＩＸおよびＸ型糖原病；α_１−アンチトリプシン欠損症；ツェルウェーガー症候群；チロシン血症；果糖血症；ガラクトース血症；バッド・キアリ症候群、静脈閉塞症または門脈血栓症を伴う血管障害；ならびに先天性肝線維症からなる群から選択される疾患を伴う肝線維症を有する。

一実施形態では、対象は、クローン病、潰瘍性大腸炎、照射後大腸炎および顕微鏡的大腸炎からなる群から選択される疾患を伴う腸線維症を有する。

一実施形態では、対象は、糖尿病性腎症、高血圧性腎硬化症、慢性糸球体腎炎、慢性移植糸球体症、慢性間質性腎炎および多発性嚢胞腎疾患からなる群から選択される疾患を伴う腎線維症を有する。

定義
本明細書で使用する場合、「本発明の化合物」は、オベチコール酸（ＯＣＡ）、６α−エチル−３α，７α−２３−トリヒドロキシ−２４−ノル−５β−コラン−２３−スルフェート（化合物１１）、記載したそれらの誘導体（例えば、式ＩＩＩの化合物など）および反応中間体（例えば、化合物３など）またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を指す。

「処置すること」には、病態、疾患、障害などの改善をもたらす任意の効果、例えば減少、軽減、調節または消失が含まれる。疾患状態を「処置すること」または疾患状態の「処置」には、疾患状態の阻害、すなわち疾患状態またはその臨床症状の発症の抑止；または疾患状態の緩和、すなわち疾患状態もしくはその臨床症状の一時的退行もしくは永続的退行の誘起が含まれる。

疾患状態を「予防すること」には、疾患状態に曝され得るかまたは罹患しやすい恐れがあるが、疾患状態の症状を依然として経験していないかまたは呈していない対象において、疾患状態の臨床症状を発症させないようにすることが含まれる。

「疾患状態」とは、任意の疾患、障害、病態、症状または徴候を意味する。

本明細書で使用する場合、「約」または「およそ」などの用語は、数値と一緒に使用されると、その用語が指すまたは関連する数値より大きい数値の範囲も小さい数値の範囲も含み得る。例えば、その範囲は、その用語が指すまたは関連する数値より１０％小さい〜１０％大きい、９％小さい〜９％大きい、８％小さい〜８％大きい、７％小さい〜７％大きい、６％小さい〜６％大きい、５％小さい〜５％大きい、４％小さい〜４％大きい、３％小さい〜３％大きい、２％小さい〜２％大きい、または１％小さい〜１％大きい数値を含むことができる。例えば、「約５」は、４．５〜５．５、４．５５〜５．４５、４．６〜５．４、４．６５〜５．３５、４．７〜５．３、４．７５〜５．２５、４．８〜５．２、４．８５〜５．１５、４．９〜５．１または４．９５〜５．０５の数値を含むことができる。

「有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、適切な用量を投与すると救急治療効果または長期治療効果を生じさせる本発明の化合物（例えば、ＦＸＲ−活性化リガンド）の量を指す。そのような効果としては、疾患／病態（例えば、肝臓、腎臓または腸の線維症）および関連する合併症の、症状、徴候および根底にある病状の、何らかの検出可能な程度までの予防、矯正、阻害または逆転が挙げられる。

「治療有効量」とは、疾患を処置するために哺乳動物に投与される場合、疾患に対してそのような処置を施すのに十分である本発明の化合物の量を意味する。「治療有効量」は、疾患およびその重症度ならびに処置しようとする哺乳動物の齢、体重などに依存して変動するであろう。

治療有効量の本発明の化合物は、ヒトまたは動物に投与するために薬学的に許容される担体と一緒に製剤化することができる。したがって、本発明の化合物またはその製剤は、有効量の化合物を提供するために、例えば経口、非経口または局所経路で投与することができる。別の実施形態では、本願に従って調製される本発明の化合物は、医療器具、例えばステントを被覆またはそれに含浸させるために使用することができる。

本願は、同位体標識した本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体も包含し、これらは、自然界で最もよく見られる原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子によって１つまたは複数の原子が置換されているという事実以外、本願および以降に記載のものと同一である。本発明の化合物に組み入れることができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、フッ素の同位体、例えば^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃおよび^１８Ｆなどが挙げられる。

トリチウム標識、すなわち^３Ｈ同位体、炭素−１３、すなわち^１３Ｃ同位体、および炭素−１４、すなわち^１４Ｃ同位体は、調製および検出が容易であるため、特に好ましい。さらに、重水素、すなわち^２Ｈなどのより重い同位体で置換すると、代謝安定性が高まることから生じる一定の治療上の利点（例えば、インビボ半減期の延長または必要投与量の減少）を得ることができ、このため、状況により、この置換が好ましい場合がある。本発明の同位体標識化合物は、一般に、容易に入手可能な同位体標識試薬を非同位体標識試薬の代わりに用いて、本顔のスキームおよび／または実施例に開示されている手順を実行することによって調製することができる。一実施形態では、本発明の化合物は、同位体標識されていない。一実施形態では、本発明の重水素化した化合物は、生物学的分析アッセイに有用である。別の実施形態では、本発明の化合物は、放射標識されている。

「幾何異性体」とは、その存在が二重結合を軸とする束縛回転によるものである、ジアステレオマーを意味する。これらの立体配置は、シスおよびトランスまたはＺおよびＥの接頭辞によってその名称が異なり、これは、カーン・インゴルド・プレローグ則に従い、分子内で基同士が二重結合の同側または逆側にあることを示す。

「溶媒和物」とは、化学量論量または非化学量論量の溶媒を含有する溶媒付加形態を意味する。本発明の化合物は、結晶性固体状態で固定モル比の溶媒分子を捕捉する傾向を有し得、このようにして溶媒和物が形成される。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は、水和物である。溶媒がアルコールである場合、形成される溶媒和物は、アルコレートである。水和物は、水の１つまたは複数の分子と、その中で水がそのＨ_２Ｏとしての分子状態を保持している物質の１つとの組合せによって形成され、このような組合せにより、１種または複数の水和物を形成することが可能となる。加えて、本願の化合物、例えば本化合物の塩は、水和もしくは非水和（無水）形態で、または他の溶媒分子との溶媒和物として存在することができる。水和物の非限定的な例としては、一水和物、二水和物などが挙げられる。溶媒和物の非限定的な例としては、エタノール溶媒和物、アセトン溶媒和物などが挙げられる。

「互変異性体」は、その構造が原子の配置において著しく異なるが、高速平衡状態で存在する化合物を指す。本発明の化合物は、様々な互変異性体として示し得ることが理解されるべきである。本発明の化合物および本願の合成中間体が互変異性型を有する場合、すべての互変異性型が本願の範囲内にあることが意図され、本発明の化合物の命名は、いずれの互変異性体型も排除するものではないことも理解されるべきである。本発明の化合物および本願の合成中間体は、ケト−エノールを含むいくつかの互変異性型で存在することができる。例えば、ケト−エノール互変異性では、電子と水素原子との同時移動が起こる。互変異性体は、溶液中で互変異性セットの混合物として存在する。固体形態では、通常、１つの互変異性体が優位である。１つの互変異性体が記載されている場合でも、本願は、本化合物のすべての互変異性体を含む。

「医薬組成物」とは、本発明の化合物を、対象への投与に好適な形態で含有する製剤である。一実施形態では、医薬組成物は、バルクまたは単位剤形である。投与を容易にし、投与量を均一にするために、組成物を投薬単位形に製剤化することが有利であり得る。投薬単位形とは、本明細書で使用する場合、処置されることになる対象への単位投与量として適した物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性な試薬を含有する。本願の投薬単位形の仕様は、活性な試薬に独自の特徴、達成されるべき特定の治療効果、および各個体を処置するためのそのような活性剤の調合に関する技術分野に固有の制限によって決定され、これらに直接的に依存する。

単位剤形は、例えば、カプセル剤、ＩＶバッグ、錠剤、エアゾール吸入器の単一ポンプまたはバイアルを含む種々の形態のいずれかである。組成物の単位用量中の本発明の化合物（例えば、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体の製剤）の量は、有効量であり、関与する特定の処置に従って変動する。当業者は、患者の年齢および病態に応じて、投与量に日常的な変更を行うことが時として必要であることを理解するであろう。投与量は、投与経路にも依存するであろう。経口、経肺、経直腸、非経口、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、吸入、バッカル、舌下、胸膜内、くも膜下腔内および鼻腔内などを含む種々の経路が企図される。本願の化合物の局所投与または経皮投与用の剤形としては、散剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、貼付剤および吸入剤が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物は、滅菌条件下において、薬学的に許容される担体および必要な任意の防腐剤、緩衝剤または噴射剤と混合される。

「対象」には、哺乳動物（例えば、ヒト）、伴侶動物（例えば、イヌ、ネコおよびトリなど）、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマおよび家禽など）、および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットおよびトリなど）が含まれる。一実施形態では、対象は、ヒトである。一実施形態では、対象は、ヒト小児（例えば、約３０ｋｇ〜約７０ｋｇ）である。一実施形態では、ヒト小児は、葛西手術を受けており、出生時に胆管がないか、または出生時に胆管が完全に遮断されている場合、葛西手術によってヒト小児に機能的な胆管が効果的に付与される。

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される」という表現は、健全な医学的判断の範囲内において、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答または他の問題もしくは合併症を起こさず、適切なリスク／ベネフィット比に相応する化合物、材料、組成物、担体および／または剤形を指す。

「薬学的に許容される添加剤」とは、概して安全であり、無毒性であり、生物学的にも他の点でも望ましい医薬組成物を調製することにおいて有用である添加剤を意味し、獣医学での使用およびヒトの薬学的使用に許容可能な添加剤を含む。「薬学的に許容される添加剤」は、本明細書および特許請求の範囲で使用する場合、このような添加剤の１種および複数の両方を含む。

本発明の化合物を何ら製剤化せずに直接投与することが可能であるが、本発明の化合物は、通常、薬学的に許容される添加剤と本発明の化合物とを含む医薬製剤の形態で投与される。これらの製剤は、経口、バッカル、経直腸、鼻腔内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内および鼻腔内を含む種々の経路で投与することができる。本発明の化合物の経口製剤は、本明細書の「経口製剤および投与」という名称の部分でさらに記載されている。

一実施形態では、本発明の化合物は、経皮投与することができる。経皮投与するために、経皮送達用具（「貼付剤」）が必要な場合がある。このような経皮貼付剤は、本願の化合物を制御量で連続注入または非連続注入するために使用することができる。医薬品の送達のための経皮貼付剤の構築および使用は、当技術分野において周知である。例えば、米国特許第５，０２３，２５２号明細書を参照されたい。このような貼付剤は、医薬品を連続的に、パルス的に、または必要に応じて送達するために構築され得る。

「線維症」とは、組織または器官における過剰な線維性結合組織、例えば瘢痕組織の発達を伴う病態を指す。このような瘢痕組織の生成は、疾患、外傷、化学的毒性などによる器官の感染、炎症または損傷に反応して起こり得る。線維症は、肝臓、腎臓、腸、肺、心臓などを含む種々の異なる組織および器官において発症し得る。

「阻害すること」または「阻害」という用語は、本明細書で使用する場合、疾患または病態の発症または進行に対する何らかの検出可能な正の効果を指す。このような正の効果には、疾患または病態の少なくとも１つの症状または徴候の開始の遅延または予防、症状または徴候の軽減または逆転、および症状または徴候のさらなる悪化の遅延または予防が含まれ得る。

本明細書で使用する場合、「胆汁うっ滞性病態」は、肝臓からの胆汁排出に障害があるかまたはそれが遮断される何らかの疾患または病態を指し、これは、肝臓内または胆管内で起こり得る。肝内胆汁うっ滞および肝外胆汁うっ滞は、胆汁うっ滞性病態の２つのタイプである。（肝臓内で起こる）肝内胆汁うっ滞は、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、敗血症（全身感染）、急性アルコール性肝炎、薬物毒性、（静脈内供給される）完全静脈栄養、悪性腫瘍、嚢胞性線維症および妊娠で最もよく見られる。（肝臓の外側で起こる）肝外胆汁うっ滞は、胆管腫瘍、狭窄、嚢胞、憩室、総胆管での結石、膵炎、膵腫瘍または仮性嚢胞、および近くの器官における腫瘤または腫瘍による圧迫により引き起こされ得る。

胆汁うっ滞性病態の臨床症状および徴候としては、かゆみ（掻痒）、疲労、皮膚または眼の黄疸、ある種の食物の消化不能、悪心、嘔吐、白色便、暗色尿および右上腹部痛が挙げられる。胆汁うっ滞性病態の患者は、患者の血清中におけるアルカリホスファターゼ、γ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）、５’ヌクレオチダーゼ、ビリルビン、胆汁酸およびコレステロールの各レベルの測定を含む一連の標準的な臨床検査試験に基づいて診断され、臨床的に経過観察され得る。一般に、患者は、アルカリホスファターゼ、ＧＧＴおよび５’ヌクレオチダーゼの３つのすべての診断マーカーの血清レベルが異常に上昇していると考えられる場合、胆汁うっ滞性病態を有するものと診断される。これらのマーカーの正常な血清レベルは、試験プロトコルに依存して、検査室間および手順間である程度変動し得る。したがって、医師は、特定の検査室および試験手順に基づいて、マーカーの各々に対して、いずれの血液レベルが異常に上昇しているのかを判定することが可能であろう。例えば、胆汁うっ滞性病態に罹患している患者は、一般に、血中のアルカリホスファターゼが約１２５ＩＵ／Ｌを超え、ＧＧＴが約６５ＩＵ／Ｌを超え、５’ヌクレオチダーゼが約１７ＮＩＬを超える。血清マーカーレベルの可変性のため、胆汁うっ滞性病態は、かゆみ（掻痒）などの上記の症状の少なくとも１つに加えて、これらの３種類のマーカーの異常なレベルに基づいて診断され得る。

「器官」という用語は、細胞および組織からなり、生体において特定の機能を実行する分化した構造体（心臓、肺、腎臓、肝臓などに見られる）を指す。この用語は、機能を実行し、または活動に協力する身体部分（例えば、眼および視覚的な器官を構成する関連した構造体）も包含する。「器官」という用語は、完全な構造体に発達することが潜在的に可能である、分化した細胞および組織の任意の部分的構造体（例えば、肝臓の葉または区域）をさらに包含する。

本明細書で引用されるすべての刊行物および特許文献は、このような刊行物または文献のそれぞれが具体的かつ個別に参照により本明細書に組み込まれるように指示されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。刊行物および特許文献の引用は、いずれも関連先行技術であると認めることを意図するものではなく、また、その内容または日付に関しても何ら受け入れを構成するものではない。ここまで本願を書面の記載によって説明してきたが、当業者は、本願を種々の実施形態で実施し得ることと、上記の記載および下記の実施例が説明を目的とし、続く特許請求の範囲の限定ではないことを理解するであろう。

本明細書において、文脈上明らかに他の意味に解するべき場合を除き、単数形は、複数も含む。別段の定めがない限り、本明細書で使用するすべての技術用語および科学用語は、本願が属する技術分野の当業者に広く理解されているものと同じ意味を有する。矛盾がある場合、本明細書が優先する。

実施例１：化合物２の精製
粗製化合物２（１０ｇ）を、ショートプラグシリカゲル（２０．０ｇ）カラムクロマトグラフィーにおいてヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃを使用して精製した。

別法として、化合物２（４１．０ｇ）を、ショートプラグシリカゲル（８０．０ｇ）カラムクロマトグラフィーにおいてヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃを使用して精製した（１００ｍｌの５画分を回収した）。溶媒をすべて除去した後、３４．３ｇの化合物２を黄色油状物として得た。

別法として、化合物２をＴＨＦに溶解し、ＭｇＳＯ_４で脱水した。溶媒を除去し、化合物を高真空下（１×１０−２ｍｂａｒ）で３０分間乾燥した。

別法として、化合物２（６．７ｇ）を１２ｍｌのＰｈＭｅに溶解し、ＭｇＳＯ_４（６．７ｇ）を添加した。この混合物を室温で３０分間撹拌し、濾過してＭｇＳＯ_４を除去し、ＰｈＭｅ（１０ｍｌ×２）で洗浄した。溶媒を除去し、５．５ｇの化合物２を得た。

実施例２：化合物３の調製

化合物２（４．２７ｇ、８ｍｍｏｌ）をパラアルデヒド（４当量、３２．０ｍｍｏｌ、４．０ｍＬ）に溶解し、１ｍｏｌ％の（Ｔｆ）_２ＮＨ（２２．５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を含有するフラスコにＡｒ雰囲気下で添加する。３０分間撹拌し、その間に化合物３が無色固体として沈殿してから、反応混合物を水で希釈し、濾過し、水で洗浄する。化合物３を＞８５％収率で単離する。

別法として、化合物２（１．３７６ｇ、２．５７ｍｍｏｌ）をパラアルデヒド（４当量、１０．２８ｍｍｏｌ、１．２５ｍＬ）に溶解し、１ｍｏｌ％のＴＭＳ−トリフルイミド（０．０２５７ｍｍｏｌ、１２μＬ）をＡｒ雰囲気下で添加する。３０分間撹拌し、その間に化合物３が無色固体として沈殿してから、反応混合物をヘキサンで希釈し、溶媒を濾過（または小規模でのトリチュレート）により除去する。

別法として、精製した化合物２（３４．３ｇ（６４．１２ｍｍｏｌ））を３１．４ｍｌ（４当量、２５６．４９ｍｍｏｌ）のパラアルデヒドに溶解した。０．３ｍｌのＴＭＳ−トリフルイミド（１ｍｏｌ％、０．０６４ｍｍｏｌ）触媒を室温で添加した。３０分間撹拌した後、化合物３が無色固体として沈殿し、この反応混合物をヘキサン（１００ｍｌ）で希釈した。溶媒を濾過により除去し、化合物３をヘキサン（１０ｍｌ×３）で洗浄し、乾燥した。化合物３（１１．３１ｇ）をそれ以上精製せずに次のステップに使用した。

反応の進行をＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン ２／８）によりモニターした。ヘキサン母濾液のＴＬＣ分析も行い、相当量のアルドール生成物がヘキサン濾液中に見られた。

実施例３：化合物４の調製

鹸化ステップでは、４０ｍｌの水およびエタノール１：１（ｖ／ｖ）を１０．８ｇ（２１．２８ｍｍｏｌ）の化合物３に添加した。ＫＯＨ（３．０当量、３．５８ｇ、６３．８４ｍｍｏｌ）を反応混合物に室温で添加した。この反応混合物を加熱した。反応の進行をＴＬＣによりモニターした。３０分後、反応混合物を室温まで冷却し、分液漏斗に移した。反応物をＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で抽出した。得られた水性相を、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（４０ｍｌ）を使用して、ｐＨ３未満が得られるまで酸性化した。ＭＴＢＥ（３×３０ｍＬ）での抽出、それに続くＮａ_２ＳＯ_４（３ｇ）での有機相の脱水および溶媒の除去により、化合物４を得た。

別法として、化合物３（０．９４４ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨと水との混合物（１／１ｖ：ｖ、４ｍＬ）に溶解し、ＫＯＨ（２．５当量、０．２８１ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を添加する。得られた反応混合物を２時間加熱する。十分に変換してから、化合物４をＴＬＣにより観察する。反応混合物を室温まで冷却し、分液漏斗に移す。水（３ｍＬ）で希釈してから、反応物をＭＴＢＥ（５ｍＬ）で抽出する。得られた水性相を、１０％ＨＣｌ水溶液を使用して、ｐＨ３未満が得られるまで酸性化する。濃縮後、化合物４をＭＴＢＥ（３×５ｍＬ）でオフホワイト色泡沫として抽出する（０．８２６ｇ、精製したシリルエノールエーテルについて７７％、粗製シリルエノールエーテルについて６７％）。

実施例４：化合物５の調製

化合物４のＮａＯＨ水溶液中溶液をパラジウム担持炭素と接触させ、２−ｂａｒ水素圧で加圧する。混合物を激しく撹拌し、水素の取り込みが終了するまで加熱する。混合物をＣｅｌｉｔｅで濾過し、酢酸ｎ−ブチルの存在下で水性層を希薄ＨＣｌ水溶液と接触させる。有機層を分離し、部分的に蒸発させて結晶化を誘導する。この懸濁液を濾過し、固体を酢酸ｎ−ブチルで洗浄して化合物５を得る。

実施例５：ＯＣＡの調製

化合物５のＮａＯＨ水溶液中溶液を９０℃に加熱し、水素化ホウ素ナトリウムと接触させる。混合物を冷却し、酢酸ｎ−ブチルの存在下においてクエン酸水溶液で反応停止する。有機層を分離し、部分的に蒸発させて結晶化を誘導する。懸濁液を濾過し、固体を酢酸ｎ−ブチルで洗浄してＯＣＡを得る。

実施例６：化合物６の調製

ｐ−トルエンスルホン酸一水和物をＯＣＡのメタノール撹拌溶液に添加し、反応混合物を、ＯＣＡが完全に見えなくなるまで超音波処理し、これにはおよそ３時間かかる。溶媒を減圧下で蒸発させ、得られた残渣を塩化メチレンに溶解し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液、水および塩水で洗浄する。まとめた有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧下で蒸発させて化合物６を得る。

実施例７：化合物７の調製

化合物６を、新たに蒸留したＴＨＦに溶解し、得られた混合物を窒素雰囲気下で撹拌しながら加温する。１ＭフェニルマグネシウムブロミドのＴＨＦ溶液を滴加し、得られた混合物を同じ温度で終夜撹拌する。反応混合物を室温まで冷却し、シクロヘキサンを添加する。反応混合物を濾過し、ゴム状固体の残渣を３Ｎ塩酸溶液とＤＣＭとの混合物に溶解する。得られた混合物を３０分間撹拌する。有機相を分離し、水性相をＤＣＭで抽出する。まとめた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗製残渣をＤＣＭ中に採り、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液、水、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮して化合物７を得る。

実施例８：化合物８の調製

無水酢酸、ピリジンおよび４−ジメチルアミノピリジンを化合物７の新たに蒸留したＴＨＦ中撹拌溶液に添加する。反応混合物を室温で終夜保持する。反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭで抽出する。まとめた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を蒸発させて化合物８を得る。

実施例９：化合物９の調製

ＮａＩＯ_４をＨ_２Ｏおよび２Ｎ Ｈ_２ＳＯ_４中で撹拌する。１５分後、反応混合物を０℃まで冷却し、ＲｕＣｌ_３を添加する。反応混合物を、色が鮮黄色に変わるまで撹拌する。酢酸エチルおよびアセトニトリルを添加し、得られた反応混合物を５分間撹拌する。化合物８を反応混合物に０℃で添加し、化合物８が消費されるまで撹拌する。反応混合物を濾過し、Ｈ_２Ｏに注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出する。まとめた有機層をＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３の飽和溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、減圧下で濃縮する。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して、化合物９を白色固体として得る。

実施例１０：化合物１０の調製

トリエチルアミンを化合物９とクロロギ酸イソブチルとのＴＨＦ撹拌氷冷溶液に添加する。１時間後、反応混合物をアルゴン雰囲気中において減圧下で濾過する。得られた溶液を、小分けにして添加する水素化ホウ素ナトリウムで０℃において１時間処理する。反応混合物をＨ_２Ｏで反応停止し、室温でさらに２時間撹拌し、３Ｎ塩酸で酸性化し、酢酸エチルで抽出する。まとめた有機抽出物を塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、減圧下で濃縮して化合物１０を得る。

実施例１１：化合物１１（ナトリウム塩）の調製

化合物１０を三酸化硫黄ピリジン錯体の乾燥ピリジン（６０ｍＬ）懸濁液に添加し、窒素雰囲気下において室温で２４時間反応させる。溶媒を蒸発させ、得られた残渣をメタノールに溶解し、ＮａＯＨの１０％（ｗ／ｗ）ＭｅＯＨ溶液で処理する。反応混合物を終夜還流する。溶媒を蒸発させ、得られた白色固体をＨ_２Ｏ／ＭｅＯＨ溶液に溶解し、ＮａＯＨで活性化したＤｏｗｅｘ樹脂に通過させ、最初にＨ_２Ｏで、次にＨ_２Ｏ／ＭｅＯＨの溶液で溶離する。化合物１１のナトリウム塩を含有する画分を蒸発乾固し、得られた固体を、逆相カラムＲＰ−１８（Ｌｏｂａｒ Ｃ）により、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ混合物を移動相として使用して精製する。

均等物
当業者は、本明細書に具体的に記載される具体的な実施形態に対する多くの均等物を、通常の実験に過ぎない実験を使用して認識または特定することが可能であろう。そのような均等物は、続く特許請求の範囲に包含されるものとする。

Claims (24)

1. オベチコール酸（ＯＣＡ）：
   

   

   またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
   ａ）化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：
   

   

   ｂ）化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：
   

   

   ｃ）化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：
   

   

   、および
   ｄ）化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：
   

   

   を含む方法。
2. 化合物３を調製する方法であって、化合物２をパラアルデヒドと反応させて化合物３を形成するステップ：
   

   

   を含む方法。
3. 前記反応は、トリフルイミド触媒の存在下で行われる、請求項２に記載の方法。
4. 前記トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２ＮＨ、（Ｔｆ）_２Ｎ−（Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル）および（Ｔｆ）_２Ｎ−トリ−Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルシリルから選択される、請求項３に記載の方法。
5. 前記トリフルイミド触媒は、（Ｔｆ）_２Ｎ−トリメチルシリルである、請求項４に記載の方法。
6. 前記反応は、ニートなパラアルデヒド中で行われる、請求項２に記載の方法。
7. パラアルデヒド対化合物２のモル比は、約３：１〜約６：１である、請求項６に記載の方法。
8. 前記反応は、約１０℃〜約３０℃の温度で行われる、請求項２に記載の方法。
9. 前記反応は、約１０分間〜４時間にわたって行われる、請求項２に記載の方法。
10. 化合物３を塩基と反応させて化合物４を形成するステップ：
    

    

    をさらに含む、請求項２に記載の方法。
11. 前記塩基は、金属水酸化物、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシドおよび金属水素化物から選択される、請求項１０に記載の方法。
12. 前記金属水酸化物は、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである、請求項１１に記載の方法。
13. 前記金属水酸化物は、水酸化カリウムである、請求項１２に記載の方法。
14. 前記反応は、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、水およびそれらの混合物から選択される溶媒中で行われる、請求項１０に記載の方法。
15. 前記溶媒は、１：３〜３：１、１：２〜２：１、１：１．５〜１．５：１、１：１．２〜１．２：１、または約１：１（ｖｏｌ／ｖｏｌ）のエタノール／水の比におけるエタノールと水との混合物である、請求項１４に記載の方法。
16. 化合物４を水素化して化合物５を形成するステップ：
    

    

    をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
17. 前記反応は、パラジウム触媒の存在下で行われる、請求項１６に記載の方法。
18. 化合物５のＣ−７位のケト基を還元してＯＣＡを形成するステップ：
    

    

    をさらに含む、請求項１６に記載の方法。
19. 前記還元は、水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを用いて行われる、請求項１８に記載の方法。
20. ６α−エチル−３α，７α−２３−トリヒドロキシ−２４−ノル−５β−コラン−２３−スルフェート（化合物１１）：
    

    

    またはその薬学的な許容される塩、溶媒和物もしくはアミノ酸抱合体を調製するステップであって、
    ｅ）ＯＣＡをエステル化して化合物６を形成するステップ：
    

    

    ｆ）化合物６を変換して化合物７を形成するステップ：
    

    

    ｇ）化合物７を変換して化合物８を形成するステップ：
    

    

    ｈ）化合物８を変換して化合物９を形成するステップ：
    

    

    ｉ）化合物９を変換して化合物１０を形成するステップ：
    

    

    、および
    ｊ）化合物１０を変換して化合物１１を形成するステップ：
    

    

    を含むステップをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
21. 化合物１１は、ナトリウム塩：
    

    

    である、請求項２０に記載の方法。
22. 化合物１をアルキルシリルハライドと反応させて化合物２を形成するステップ：
    

    

    をさらに含む、請求項１に記載の方法。
23. ７−ケトリトコール酸（ＫＬＣＡ）をエステル化して化合物１を形成するステップ：
    

    

    をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
24. 式ＩＩＩ
    

    

    の化合物を調製する方法であって、式Ｉの化合物をパラアルデヒドと反応させて２の化合物を形成するステップ
    

    

    を含み、
    式中、
    Ａは、
    

    

    （式中、「＊」で印を付けられた炭素原子は、Ａが結合されている炭素原子に結合されている）、オキサジアゾロニルまたはイソオキサゾロニルであり、
    ｎは、０、１または２であり、
    Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^４は、互いに独立に、ＨまたはＯＨであり、
    Ｒ^３は、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＣ（Ｏ）ＯＨ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＯＨ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＯＳＯ_３Ｈ、（ＣＲ^５Ｒ^６）_ｐＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ^７、テトラゾリル、オキサジアゾリル、オキサジアゾロニル、または任意選択によりＮＨＳ（Ｏ）_２−（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルキルで置換されているチアゾリジン−ジオニルであり、
    Ｒ^５およびＲ^６は、互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、または任意選択によりＯＨもしくはハロゲンで置換されているアルキルであり、
    Ｒ^７は、ＯＨ、（ＣＨ_２）_ｐＯＨまたは（ＣＨ_２）_ｐＯＳＯ_３Ｈであり、
    ｐは、１または２であり、および
    Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^４のヒドロキシル基は、保護されていることができる、方法。