JP2018503374A5

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Publication number: JP2018503374A5
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Filing date: 2016-01-15
Publication date: 2019-02-21
Anticipated expiration: 2036-01-15

Description

本開示は以下の［１］から［９４］を含む。
［１］（ａ）アミノ末端アクチン結合ドメインと、
β−ジストログリカン結合ドメインと、
少なくとも４個のスペクトリン様リピートを含むスペクトリン様リピートドメインであって、上記少なくとも４個のスペクトリン様リピートのうちの２個は、神経型一酸化窒素合成酵素結合ドメインを含む、スペクトリン様リピートドメインと、
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子、および
（ｂ）制御カセット
を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２］上記少なくとも４個のスペクトリン様リピートは、スペクトリン様リピート１（ＳＲ１）、スペクトリン様リピート１６（ＳＲ１６）、スペクトリン様リピート１７（ＳＲ１７）、およびスペクトリン様リピート２４（ＳＲ２４）を含む、上記［１］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［３］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、ヒンジドメインの少なくとも一部をさらに含む、上記［１］または［２］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［４］上記ヒンジドメインは、ヒンジ１ドメイン、ヒンジ２ドメイン、ヒンジ３ドメイン、ヒンジ４ドメイン、およびヒンジ様ドメインのうちの少なくとも１つから選択される、上記［３］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［５］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターおよび心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）プロモーターから成る群から選択される、上記［１］〜［４］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［６］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、５個のスペクトリン様リピートから８個のスペクトリン様リピートの間のスペクトリン様リピートを有する、上記［１］〜［５］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［７］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［６］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［８］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［７］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［９］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［８］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１０］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［９］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１１］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［１０］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１２］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［１１］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１３］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［１２］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１４］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［１］〜［１３］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１５］アミノ末端アクチン結合ドメインと、
スペクトリン様リピート２と直接連結されたスペクトリン様リピート１、スペクトリン様リピート３と直接連結されたスペクトリン様リピート２、スペクトリン様リピート１６と直接連結されたスペクトリン様リピート１、スペクトリン様リピート２３と直接連結されたスペクトリン様リピート１７、スペクトリン様リピート２４と直接連結されたスペクトリン様リピート１７、およびスペクトリン様リピート２４と直接連結されたスペクトリン様リピート２３のうちの少なくとも１つから選択される、互いに直接連結された少なくとも２個のスペクトリン様リピートと
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１６］順番に
ヒンジ１ドメイン（Ｈ１）と、
スペクトリン様リピート１（ＳＲ１）と、
スペクトリン様リピート１６（ＳＲ１６）と、
スペクトリン様リピート１７（ＳＲ１７）と、
スペクトリン様リピート２４（ＳＲ２４）と、
ヒンジ４ドメイン（Ｈ４）と
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１７］上記Ｈ１は、上記ＳＲ１と直接連結されている、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１８］上記ＳＲ１は、上記ＳＲ１６と直接連結されている、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［１９］上記ＳＲ１６は、上記ＳＲ１７と直接連結されている、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２０］上記ＳＲ１７は、上記ＳＲ２４と直接連結されている、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２１］上記ＳＲ２４は、上記Ｈ４と直接連結されている、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２２］上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、上記ＳＲ１と上記ＳＲ１６との間に順番にスペクトリン様リピート２（ＳＲ２）およびスペクトリン様リピート３（ＳＲ３）をさらに含む、上記［１６］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２３］上記ＳＲ１は、上記ＳＲ２と直接連結され、上記ＳＲ２は、上記ＳＲ３とさらに連結されている、上記［２２］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２４］順番に
ヒンジ１ドメイン（Ｈ１）と、
スペクトリン様リピート１（ＳＲ１）と、
スペクトリン様リピート１６（ＳＲ１６）と、
スペクトリン様リピート１７（ＳＲ１７）と、
スペクトリン様リピート２３（ＳＲ２３）と、
スペクトリン様リピート２４（ＳＲ２４）と、
ヒンジ４ドメイン（Ｈ４）と、
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２５］上記Ｈ１は上記ＳＲ１と直接連結され、上記ＳＲ１は上記ＳＲ１６と直接連結され、上記ＳＲ１６は上記ＳＲ１７と直接連結され、上記ＳＲ１７は上記ＳＲ２３と直接連結され、上記ＳＲ２３は上記ＳＲ２４と直接連結され、上記ＳＲ２４は上記Ｈ４と直接連結されている、上記［２４］に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
［２６］上記［１］〜［２５］のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列、および
送達媒体
を含む医薬組成物。
［２７］上記送達媒体は、組換えアデノ随伴ウイルスベクターを含む、上記［２６］に記載の医薬組成物。
［２８］上記送達媒体は、上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させ、上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［２６］または［２７］に記載の医薬組成物。
［２９］上記送達媒体は、上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させ、上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［２８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３０］上記送達媒体は、上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させ、上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［２９］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３１］上記送達媒体は、上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させ、上記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる上記タンパク質は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［３０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３２］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［３１］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３３］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［３２］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３４］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［３３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３５］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［２６］〜［３４］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３６］上記医薬組成物は、筋強直性筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、眼咽頭筋型筋ジストロフィー、遠位型筋ジストロフィー、およびエメリードレイフス型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される筋ジストロフィーの病理学的影響または症状を低減するよう構成される、上記［２６］〜［３５］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３７］上記医薬組成物は、デュシェンヌ型筋ジストロフィーおよびベッカー型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される筋ジストロフィーの病理学的影響または症状を低減するよう構成される、上記［２６］〜［３６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３８］上記医薬組成物は、サルコペニア、心臓疾患および悪液質のうちの少なくとも１つの病理学的影響または症状を低減するよう構成される、上記［２６］〜［３７］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３９］配列番号１６の核酸配列を含むマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む医薬組成物。
［４０］上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、上記［３９］に記載の医薬組成物。
［４１］配列番号４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む医薬組成物。
［４２］上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、上記［４１］に記載の医薬組成物。
［４３］配列番号１８の核酸配列を含むマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む医薬組成物。
［４４］上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、上記［４３］に記載の医薬組成物。
［４５］配列番号５のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む医薬組成物。
［４６］上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、上記［４５］に記載の医薬組成物。
［４７］配列番号１６または配列番号１８の核酸配列を含むマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターであって、上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む、筋ジストロフィーの処置または予防的処置において使用するための医薬組成物。
［４８］配列番号１６または配列番号１８の核酸配列を含むマイクロジストロフィン遺伝子、および
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターであって、上記ＡＡＶベクターまたは上記ｒＡＡＶベクターの血清型は、血清型６、血清型８および血清型９のうちの少なくとも１つから選択される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター
を含む、筋ジストロフィーの処置または予防的処置のための医薬組成物。
［４９］筋ジストロフィーを有する対象を処置する方法であって、
上記対象に制御カセットと、機能可能に連結されたマイクロジストロフィン遺伝子とを含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む方法。
［５０］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターおよび心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）プロモーターから成る群から選択される、上記［４９］に記載の方法。
［５１］上記制御カセットは、横紋筋細胞における上記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルが、非筋肉細胞における上記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルよりも少なくとも１００倍高くなるように上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させるよう構成される、上記［４９］または［５０］に記載の方法。
［５２］上記医薬組成物は、上記対象において上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させるよう構成された組換えアデノ随伴ウイルスベクターをさらに含む、上記［４９］〜［５１］のいずれか一項に記載の方法。
［５３］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［４９］〜［５２］のいずれか一項に記載の方法。
［５４］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［４９］〜［５３］のいずれか一項に記載の方法。
［５５］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［４９］〜［５４］のいずれか一項に記載の方法。
［５６］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［４９］〜［５５］のいずれか一項に記載の方法。
［５７］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［４９］〜［５６］のいずれか一項に記載の方法。
［５８］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［４９］〜［５７］のいずれか一項に記載の方法。
［５９］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［４９］〜［５８］のいずれか一項に記載の方法。
［６０］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［４９］〜［５９］のいずれか一項に記載の方法。
［６１］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、上記対象の１つまたは複数の筋肉の収縮性が向上するように、上記１つまたは複数の筋肉においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［４９］〜［６０］のいずれか一項に記載の方法。
［６２］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、１つまたは複数の骨格筋のうちの少なくとも１つの比筋力発揮能力が正常な比筋力発揮能力の少なくとも４０％の範囲内まで増加させられるように、上記対象の上記１つまたは複数の骨格筋においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［４９］〜［６１］のいずれか一項に記載の方法。
［６３］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、基準拡張終末期容積の不足が正常な拡張終末期容積の少なくとも４０％の範囲内まで回復するように、上記対象の１つまたは複数の心筋においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［４９］〜［６２］のいずれか一項に記載の方法。
［６４］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、ジストロフィン糖タンパク質複合体への神経型一酸化窒素合成酵素の局在化が上記対象において向上するように、マイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［４９］〜［６３］のいずれか一項に記載の方法。
［６５］上記筋ジストロフィーは、筋強直性筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、眼咽頭筋型筋ジストロフィー、遠位型筋ジストロフィー、およびエメリードレイフス型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される、上記［４９］〜［６４］のいずれか一項に記載の方法。
［６６］上記筋ジストロフィーは、デュシェンヌ型筋ジストロフィーおよびベッカー型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される、上記［４９］〜［６５］のいずれか一項に記載の方法。
［６７］上記医薬組成物は、上記筋ジストロフィーの病理学的影響または症状を低減する、上記［４９］〜［６６］のいずれか一項に記載の方法。
［６８］上記筋ジストロフィーの病理学的影響または症状は、筋痛、筋力低下、筋肉疲労、筋萎縮、線維症、炎症、骨格筋の平均筋線維直径の増加、心筋症、６分間歩行試験時間の減少、歩行の減少、および心ポンプ失調のうちの少なくとも１つから選択される、上記［６７］に記載の方法。
［６９］上記筋ジストロフィーを有する上記対象を特定することさらに含む、上記［４９］〜［６８］のいずれか一項に記載の方法。
［７０］上記対象は、哺乳動物である、上記［４９］〜［６９］のいずれか一項に記載の方法。
［７１］上記対象はヒトである、上記［４９］〜［７０］のいずれか一項に記載の方法。
［７２］筋ジストロフィー発症するリスクのある対象に予防的処置を行うための方法であって、機能可能に制御カセットと連結されたマイクロジストロフィン遺伝子を含む治療有効量の医薬組成物を上記対象に投与することを含む方法。
［７３］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターおよび心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）プロモーターから成る群から選択される、上記［７２］に記載の方法。
［７４］上記制御カセットは、横紋筋細胞における上記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルが、非筋肉細胞における上記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルよりも少なくとも１００倍高くなるように上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させるよう構成される、上記［７２］または［７３］に記載の方法。
［７５］上記医薬組成物は、上記対象において上記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させるよう構成された組換えアデノ随伴ウイルスベクターをさらに含む、上記［７２］〜［７４］のいずれか一項に記載の方法。
［７６］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［７２］〜［７５］のいずれか一項に記載の方法。
［７７］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［７２］〜［７６］のいずれか一項に記載の方法。
［７８］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［７２］〜［７７］のいずれか一項に記載の方法。
［７９］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、上記［７２］〜［７８］のいずれか一項に記載の方法。
［８０］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［７２］〜［７９］のいずれか一項に記載の方法。
［８１］上記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、上記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［７２］〜［８０］のいずれか一項に記載の方法。
［８２］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有する、上記［７２］〜［８１］のいずれか一項に記載の方法。
［８３］上記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、上記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、上記［７２］〜［８２］のいずれか一項に記載の方法。
［８４］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、上記対象の１つまたは複数の筋肉の収縮性が向上するように、上記１つまたは複数の筋肉においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［７２］〜［８３］のいずれか一項に記載の方法。
［８５］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、上記対象の１つまたは複数の骨格筋のうちの少なくとも１つの比筋力発揮能力が正常な比筋力発揮能力の少なくとも４０％の範囲内まで増加させられるように、上記１つまたは複数の骨格筋においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［７２］〜［８４］のいずれか一項に記載の方法。
［８６］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、基準拡張終末期容積の不足が正常な拡張終末期容積の少なくとも４０％の範囲内まで回復するように、上記対象の１つまたは複数の心筋においてマイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［７２］〜［８５］のいずれか一項に記載の方法。
［８７］上記マイクロジストロフィン遺伝子は、上記ジストロフィン糖タンパク質複合体への神経型一酸化窒素合成酵素の局在化が上記対象において向上するように、マイクロジストロフィンタンパク質を発現する、上記［７２］〜［８６］のいずれか一項に記載の方法。
［８８］上記筋ジストロフィーは、筋強直性筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、先天性筋ジストロフィー、眼咽頭筋型筋ジストロフィー、遠位型筋ジストロフィー、およびエメリードレイフス型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される、上記［７２］〜［８７］のいずれか一項に記載の方法。
［８９］上記筋ジストロフィーは、デュシェンヌ型筋ジストロフィーおよびベッカー型筋ジストロフィーのうちの少なくとも１つから選択される、上記［７２］〜［８８］のいずれか一項に記載の方法。
［９０］上記医薬組成物は、上記筋ジストロフィーの病理学的影響または症状を発症するリスクを低減する、上記［７２］〜［８９］のいずれか一項に記載の方法。
［９１］上記筋ジストロフィーの病理学的影響または症状は、筋痛、筋力低下、筋肉疲労、筋萎縮、線維症、炎症、骨格筋の平均筋線維直径の増加、心筋症、６分間歩行試験時間の減少、歩行の減少、および心ポンプ失調のうちの少なくとも１つから選択される、上記［９０］に記載の方法。
［９２］上記筋ジストロフィーを発症するリスクのある上記対象を特定することをさらに含む、上記［７２］〜［９１］のいずれか一項に記載の方法。
［９３］上記対象は、哺乳動物である、上記［７２］〜［９２］のいずれか一項に記載の方法。
［９４］上記対象は、ヒトである、上記［７２］〜［９３］のいずれか一項に記載の方法。
本開示は、少なくとも部分的に新規のマイクロジストロフィン、その組成物および使用の関連する方法に基づく。

Claims

（ａ）アミノ末端アクチン結合ドメインと、
β−ジストログリカン結合ドメインと、
少なくとも４個のスペクトリン様リピートを含むスペクトリン様リピートドメインであって、前記少なくとも４個のスペクトリン様リピートのうちの２個は、神経型一酸化窒素合成酵素結合ドメインを含む、スペクトリン様リピートドメインと、
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子、および
（ｂ）制御カセット
を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記少なくとも４個のスペクトリン様リピートは、スペクトリン様リピート１（ＳＲ１）、スペクトリン様リピート１６（ＳＲ１６）、スペクトリン様リピート１７（ＳＲ１７）、およびスペクトリン様リピート２４（ＳＲ２４）を含む、請求項１に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる前記タンパク質は、ヒンジドメインの少なくとも一部をさらに含む、請求項１または２に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記ヒンジドメインは、ヒンジ１ドメイン、ヒンジ２ドメイン、ヒンジ３ドメイン、ヒンジ４ドメイン、およびヒンジ様ドメインのうちの少なくとも１つから選択される、請求項３に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターおよび心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）プロモーターから成る群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる前記タンパク質は、５個のスペクトリン様リピートから８個のスペクトリン様リピートの間のスペクトリン様リピートを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記マイクロジストロフィン遺伝子によってコードされる前記タンパク質は、配列番号４または配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、前記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
前記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、前記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
アミノ末端アクチン結合ドメインと、
スペクトリン様リピート２と直接連結されたスペクトリン様リピート１、スペクトリン様リピート３と直接連結されたスペクトリン様リピート２、スペクトリン様リピート１６と直接連結されたスペクトリン様リピート１、スペクトリン様リピート２３と直接連結されたスペクトリン様リピート１７、スペクトリン様リピート２４と直接連結されたスペクトリン様リピート１７、およびスペクトリン様リピート２４と直接連結されたスペクトリン様リピート２３のうちの少なくとも１つから選択される、互いに直接連結された少なくとも２個のスペクトリン様リピートと
を含むタンパク質をコードするマイクロジストロフィン遺伝子を含む、単離および精製されたヌクレオチド配列。
ヒンジ１ドメイン（Ｈ１）と、
ヒンジ４ドメイン（Ｈ４）と
をさらに含む、請求項２に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
スペクトリン様リピート２（ＳＲ２）およびスペクトリン様リピート３（ＳＲ３）をさらに含む、請求項１１に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
スペクトリン様リピート２３（ＳＲ２３）をさらに含む、請求項１１に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列。
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の単離および精製されたヌクレオチド配列、および送達媒体を含む医薬組成物。
筋ジストロフィーを有する対象を処置するため、または筋ジストロフィーを発症するリスクのある対象を予防的に処置するための医薬組成物であって、
制御カセットと機能可能に連結されたマイクロジストロフィン遺伝子を含む医薬組成物。
前記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターおよび心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）プロモーターから成る群から選択される、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記制御カセットは、横紋筋細胞における前記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルが、非筋肉細胞における前記マイクロジストロフィン遺伝子の発現のレベルよりも少なくとも１００倍高くなるように前記マイクロジストロフィン遺伝子を発現させるよう構成される、請求項１５または１６に記載の医薬組成物。
前記マイクロジストロフィン遺伝子は、配列番号４または配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するタンパク質をコードする、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記制御カセットは、ＣＫ８プロモーターであり、前記ＣＫ８プロモーターは、配列番号１９の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記制御カセットは、ｃＴｎＴプロモーターであり、前記ｃＴｎＴプロモーターは、配列番号１の核酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１５〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。