JP2018171063A5 - - Google Patents
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Description
ＡＢＤＣｏｎ結合ドメイン及びその変異体は、生物活性剤に操作可能に連結され得る。代表的な生物活性剤は、周知のリンカー、例えば、ポリ−グリシン、グリシンとセリン（Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカー）、又はアラニンとプロリンを含んでいるリンカーを使用してＡＢＤＣｏｎ及びその変異体に操作可能に連結され得るペプチド及びタンパク質である。天然発生的及び人工的なペプチドリンカーの使用は文献で周知である（Ｈａｌｌｅｗｅｌｌら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６４：５２６０〜５２６８，１９８９；Ａｌｆｔｈａｎら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８：７２５〜７３１，１９９５；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ＆ Ｓａｕｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３５：１０９〜１１６、１９９６；米国特許第５，８５６，４５６号）。生物活性剤は、ＡＢＤＣｏｎ又はその変異体にそのＣ末端又はＮ末端から連結され得る。多重特異性生物活性剤もまた、ＡＢＤＣｏｎに連結され得る。そのような場合、ＡＢＤＣｏｎは分子のＮ末端又はＣ末端に連結され得る。ＡＢＤＣｏｎはまた、それが１つの薬剤のＣ末端及び別の薬剤のＮ末端に連結されるように、そのような多重特異性薬剤の内部に位置づけられてもよい。生物活性剤はまた、当該技術分野において周知の化学的架橋を用いて、例えば、ヒドラゾン又はセミカルバゾン結合により、本発明のアルブミン結合ドメインに結合されてもよい。代表的な生物活性剤は、例えば、国際公開第２０１１／１３７３１９Ａ２号及び同第２０１０／０９３６２７Ａ２号に記載されているＴｅｎｃｏｎ２５系のライブラリーなど、フィブロネクチンＩＩＩ型（ＦＮ３）リピートタンパク質ライブラリーから同定されたタンパク質などの標的抗原に特異的に結合するタンパク質である。
Claims (20)
- 配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、単離された非天然タンパク質。
- Ｎ端末に６つのアミノ酸の伸長部分を更に含む、請求項１に記載の単離された非天然タンパク質。
- 前記６つのアミノ酸の伸長部分が、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４および配列番号５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の単離された非天然タンパク質。
- 前記６つのアミノ酸の伸長部分が、配列番号４３のアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の単離された非天然タンパク質。
- 配列番号４４のアミノ酸配列を含む、請求項４に記載の単離された非天然タンパク質。
- 請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された非天然タンパク質の作製方法であって、
ａ）前記単離された非天然タンパク質をコードするポリヌクレオチドを提供する工程と、
ｂ）宿主で又はインビトロで前記ポリヌクレオチドを発現する工程と、
ｃ）前記単離された非天然タンパク質を回収する工程と、を含む、方法。 - 請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された非天然タンパク質をコードする単離されたポリヌクレオチドであって、
ａ）配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む単離された非天然タンパク質をコードするポリヌクレオチド、又は
ｂ）配列番号３５のポリヌクレオチド
を含む、単離されたポリヌクレオチド。 - 前記単離された非天然タンパク質のＮ末端への６つのアミノ酸の伸長部分をコードするポリヌクレオチドをさらに含む、請求項７に記載のポリヌクレオチド。
- 前記伸張部分をコードするポリヌクレオチドが、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４および配列番号５５からなる群から選択されるアミノ酸配列をコードする、請求項８に記載のポリヌクレオチド。
- 前記伸張部分をコードするポリヌクレオチドが、配列番号４３のアミノ酸配列をコードする、請求項９に記載のポリヌクレオチド。
- 配列番号４４のアミノ酸配列をコードする、請求項９に記載のポリヌクレオチド。
- 請求項７から１１のいずれか一項に記載の単離されたポリヌクレオチドを含む、単離されたベクター。
- 請求項１２に記載の単離されたベクターを含む、宿主細胞。
- 請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された非天然タンパク質と、生物活性剤とを含む、融合タンパク質であって、前記生物活性剤は、タンパク質、抗体、ヌクレオチドおよび小分子医薬品からなる群から選択される、融合タンパク質。
- 前記生物活性剤が、フィブロネクチンＩＩＩ型（ＦＮ３）リピートタンパク質のコンセンサス配列を含むタンパク質スカフォールドである、請求項１４に記載の融合タンパク質。
- 前記タンパク質スカフォールドが、配列番号３９のアミノ酸残基１〜９０を含む、請求項１５に記載の融合タンパク質。
- 前記単離された非天然タンパク質及び前記生物活性剤が、リンカーを使用して連結される、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
- 前記リンカーが、Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカーを含む、請求項１７に記載の融合タンパク質。
- 前記リンカーが、配列番号４０のアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の融合タンパク質。
- 請求項１４から１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質と、少なくとも１つの医薬的に許容される担体又は希釈剤とを含む、医薬組成物。
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