JP2017526716A

JP2017526716A - カテプシンｃのスピロ環状阻害剤

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Publication number: JP2017526716A
Application number: JP2017513658A
Authority: JP
Inventors: ヴィクトルヴィントニャック; マティアスグラウエルト; マルクグルンドル; アレクサンダーパウチ
Original assignee: ベーリンガーインゲルハイムインターナショナルゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング
Priority date: 2014-09-12
Filing date: 2015-09-08
Publication date: 2017-09-14
Also published as: BR112017003433A2; WO2016038007A1; UA118610C2; CN108047240A; MY188382A; CO2017002268A2; US9540373B2; HUE047208T2; SG11201701633SA; RS59444B1; AU2015314355B2; JP6360961B2; PT3191487T; KR102510588B1; HK1255362A1; PE20170438A1; NZ728684A; DK3191487T3; CA2960916A1; PH12017500453B1

Abstract

本発明は、式（Ｉ）の化合物（式中、ＡおよびＣｙは、本明細書において示したような意味の１つを有する）、カテプシンＣの阻害剤としての該化合物の使用、該化合物を含有する医薬組成物、ならびに該化合物を、ジペプチジルペプチダーゼＩ活性と関連がある疾患、例えば、呼吸器疾患の治療および／または予防のための作用物質として使用する方法に関する。【化１】

Description

本発明は、式Ｉの化合物
（式中、ＡおよびＣｙは、本明細書において示したような意味の１つを有する）およびカテプシンＣの阻害剤としての該化合物の使用、該化合物を含有する医薬組成物、ならびに該化合物を、ジペプチジルペプチダーゼＩ活性と関連がある疾患、例えば呼吸器疾患の治療および／または予防のための作用物質として使用する方法に関する。

・国際公開第２００４１１０９８８号は、一連の疾患の治療のためのジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＤＰＰＩ：Ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌ−ａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄａｓｅＩ）阻害剤としてのペプチジルニトリル阻害剤を開示している。
・国際公開第２００９０７４８２９号および国際公開第２０１０１４２９８５号は、喘息、ＣＯＰＤまたはアレルギー性鼻炎の治療のためのジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＤＰＰＩ）阻害剤としてのペプチジルニトリル阻害剤も開示している。

・国際公開第２０１３０４１４９７号は、置換Ｎ−［１−シアノ−２−（フェニル）エチル］−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボキサミドを、例えば、呼吸器疾患の治療のためのジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＤＰＰＩ）阻害剤として開示している。

ジペプチジル−アミノペプチダーゼＩ（ＤＰＰＩまたはカテプシンＣ；ＥＣ３．４．１４１）は、タンパク性基質のアミノ末端からジペプチドを除去することができるリソソームシステインプロテアーゼである。ＤＰＰＩは、ＧｕｔｍａｎおよびＦｒｕｔｏｎによって、１９４８年に初めて発見された（J. Biol. Chem 174: 851-858, 1948）。ヒト酵素のｃＤＮＡについては、１９９５年に記述されている（Paris et al.; FEBS Lett 369: 326-330, 1995）。ＤＰＰＩタンパク質は、処理されて、重鎖、軽鎖、および活性酵素と会合したままであるプロペプチドからなる、成熟したタンパク質分解活性を有する酵素となる（Wolters et al.; J. Biol. Chem. 273: 15514-15520, 1998）。これに対し、他のシステインカテプシン（例えば、Ｂ、Ｈ、Ｋ、ＬおよびＳ）は単量体であり、ＤＰＰＩは、それぞれ３つの異なるポリペプチド鎖から構成される４つの同一サブユニットを持つ２００−ｋＤ四量体である。ＤＰＰＩは、多くの組織において構成的に発現され、肺、腎臓、肝臓および脾臓において最高レベルである（Kominami et al.; Biol. Chem. Hoppe Seyler 373: 367-373, 1992）。造血（ｈｅｍａｔｏｐｏｅｔｉｃ）細胞からのセリンプロテアーゼの活性化におけるその役割と合致して、ＤＰＰＩは、好中球、細胞傷害性リンパ球、ナチュラルキラー細胞、肺胞マクロファージおよびマスト細胞においても比較的高度に発現される。ＤＰＰＩ欠損マウスからの最近のデータは、ＤＰＰＩが、リソソームのタンパク質分解における重要な酵素であることに加えて、細胞傷害性Ｔリンパ球およびナチュラルキラー細胞（グランザイムＡおよびＢ；Pham et al.; Proc. Nat. Acad. Sci 96: 8627-8632, 1999）、マスト細胞（キマーゼおよびトリプターゼ；Wolter et al.; J Biol. Chem. 276: 18551-18556, 2001）、ならびに好中球（カテプシンＧ、エラスターゼおよびプロテイナーゼ３；Adkison et al.; J Clin. Invest. 109: 363.371, 2002）における顆粒セリンプロテアーゼの活性化における鍵酵素としても機能することを示唆している。活性化されると、これらのプロテアーゼは、種々の細胞外マトリックス成分を分解することができ、これが組織損傷および慢性炎症につながり得る。

故に、カテプシンＣの阻害剤は、潜在的に、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ：ｃｈｒｏｎｉｃｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ）、肺気腫、喘息、多発性硬化症および嚢胞性線維症等の好中球優位の炎症性疾患の治療のための有用な治療薬となり得る（Guay et al.; Curr. Topics Med. Chem. 10: 708-716, 2010; Laine and Busch-Petersen; Expert Opin. Ther. Patents 20: 497-506, 2010）。関節リウマチも、ＤＰＰＩが役割を果たすと思われるもう１つの慢性炎症性疾患である。好中球は、関節の炎症部位に動員され、関節リウマチに関連する軟骨破壊を司ると考えられているプロテアーゼ、カテプシンＧ、エラスターゼおよびプロテイナーゼ３を放出する。実際に、ＤＰＰＩ欠損マウスは、ＩＩ型コラーゲンに対するモノクローナル抗体の受動伝達によって誘発された急性関節炎から保護されていた（Adkison et al.; J Clin. Invest. 109: 363.371, 2002）。

ある特定の炎症促進性セリンプロテアーゼを活性化させる際にＤＰＰＩが果たす役割を踏まえて、本発明の問題は、その活性を阻害し、それにより、下流のセリンプロテアーゼ活性を阻害する化合物を調製することである。
驚くべきことに、本発明のスピロ環状化合物は、
・好ましくは、ＩＣ₅₀［μＭ］＜０．００５０、特に好ましくは、＜０．００３０のＤＰＰＩの阻害を示す、強力なカテプシンＣ（ＤＰＰＩ）活性
を保有することが見出されている。

さらに、本発明の化合物は、これらの薬理学的有効性のために都合よい下記の能力を示す。
・高い細胞活性、例えば、好ましくは、ＩＣ５０［μＭ］＜０．５、特に好ましくは、＜０．００３を示す、Ｕ９３７細胞系における好中球エラスターゼプロセシングの阻害、
・他のカテプシン、例えば、カテプシンＫに対する高い選択性、ならびに
・一般に、望ましい薬物動態特性、例えば、好ましくは、ヒト肝ミクロソームインキュベーションにおけるｉｎｖｉｔｒｏでのｔ１／２［分］＞１１０、特に好ましくは、≧１２０の安定性を示す、代謝安定性。

驚くべきことに、本発明の化合物は、標的結合マウスモデルにおいてＢＡＬＦ（気管支肺胞洗浄液）細胞溶解物中で好中球エラスターゼ活性の高い阻害を示すことがまた見出されている。
さらに、驚くべきことに、本発明のスピロ環状化合物は、カテプシンＣのＧｌｕ２７５へのさらなる塩橋を形成し、これによってこの化合物クラスの高い酵素活性および細胞活性がもたらされることが見出されている。スピロ環状アミンのこのさらなる相互作用（例えば、例１１におけるスピロ−アゼチジンおよび例１６におけるスピロ−ピロリジン）は、例１１および１６とのカテプシンＣタンパク質の共結晶化実験によって検証した。いずれにしても、塩基性窒素原子は、Ｇｌｕ２７５への塩橋を形成する。

カテプシンＣリガンド複合体の構造である。

驚くべきことに、上記の問題は本発明の式Ｉの化合物によって解決されることが見出されている。

したがって、本発明は、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩
［式中、
Ｃｙは、

であり、
Ａは、

であり、
式中、
Ｗは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｘは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｙは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
ただし、Ｗ、ＸおよびＹの最大で１つは、Ｎであってよく、
Ｄ−Ｅは、Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）、ＣＨ₂ＣＨ₂、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＣＨ₂−Ｏからなる群から選択され、
Ｒ²は、ＨおよびＣ_1-3−アルキルからなる群から選択され、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-3−アルキル、ＣＨ₃ＯＣＨ₂ＣＨ₂−、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、４−テトラヒドロピラニルおよび３−テトラヒドロピラニルからなる群から選択され、
ｉは、１、２または３であり、
ｊは、１、２または３であり、
ただし、ｉ＋ｊの合計は、２、３または４である］に関する。

好ましい実施形態
特に好ましいのは、
Ｃｙが、
である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｃｙが、
である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ²がＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ²がＣＨ₃である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｄ−ＥがＣＨ₂−Ｏである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＣＨ₃であり、
Ｗが、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｘが、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｙが、ＣＨからなる群から選択され、
ただし、Ｗ、ＸおよびＹの最大で１つが、Ｎであってよく、
Ｄ−Ｅが、Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）、ＣＨ₂ＣＨ₂、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＣＨ₂−Ｏからなる群から選択され、
ｉが、１または２であり、
ｊが、１または２であり、
ただし、ｉ＋ｊの合計が、２、３または４である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ａが、式Ａ１からＡ１４からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ａが、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、Ａ７、Ａ１０、Ａ１３、およびＡ１４からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ａが、Ａ２およびＡ１３からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ａが、式Ａ２．１の基である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ａが、式Ａ１３．１の基である、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、例１、５、８、１０、１２、１３、１４、１９、２２、２３、２４、２５および２７からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、
Ｒ¹が、オキセタニルである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃−からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択され。
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ₂）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃、オキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、
Ｒ¹が、オキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択される、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、Ｎであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｗが、Ｎであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、Ｎである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃−からなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ₂）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃−からなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ₂）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択され、
Ｗが、Ｎであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択され、
Ｗが、Ｎであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃−からなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ₂）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、Ｎであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、Ｎであり、
Ｙが、ＣＨである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃−からなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏ、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＮ（Ｒ₂）−Ｃ（Ｏ）からなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、Ｎである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−ＯおよびＣ（Ｏ）−Ｏからなる群から選択され、
Ｗが、ＣＨであり、
Ｘが、ＣＨであり、
Ｙが、Ｎである、
上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、Ａ７、Ａ８、Ａ９、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１２、Ａ１３およびＡ１４からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、Ａが、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ６、Ａ７、Ａ９、Ａ１０、Ａ１３およびＡ１４からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ４、Ａ５、Ａ６、Ａ７、Ａ８、Ａ９およびＡ１４から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ１０、Ａ１１およびＡ１２からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ２、Ａ３、Ａ９、Ａ１３およびＡ１４からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ２、Ａ３およびＡ１３からなる群から選択される、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

特に好ましいのは、Ａが、Ａ２である、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、Ａが、Ａ１３である、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、ｉが、２であり、ｊが、１である、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
好ましいのは、ｉが、１であり、ｊが、１である、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、ｉが、２であり、ｊが、２である、上記の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、例１、３、４、５、６、７、８、１０、１２、１３、１４、１６、１７、１８、１９、２０、２２、２３、２４、２５、２６および２７からなる群から選択される、式Ｉの化合物である。
Ｒ¹、Ｒ²、Ｃｙ、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、ｉおよびｊの定義のいずれかおよびそれぞれは、互いに合わせてもよい。
本発明のさらなる実施形態は、医薬として使用するための、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩である。
本発明のさらなる実施形態は、喘息およびアレルギー性疾患、胃腸炎症性疾患、糸球体腎炎、好酸球性疾患、慢性閉塞性肺疾患、病原微生物による感染症、関節リウマチ、好中球性疾患、嚢胞性線維症（ＣＦ）、非嚢胞性線維症、特発性肺線維症、気管支拡張症、ＡＮＣＡ関連血管炎、肺がん、気腫、慢性気管支炎、急性肺傷害（ＡＬＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、肺高血圧症、肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）およびアルファ−１−アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）、肥満症および関連する炎症、インスリン抵抗性、糖尿病、脂肪肝および肝脂肪症の治療用の医薬として使用するための式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩である。

好ましいのは、喘息およびアレルギー性疾患、胃腸炎症性疾患、好酸球性疾患、慢性閉塞性肺疾患、気腫、病原微生物による感染症、関節リウマチおよびアテローム性動脈硬化症の治療用の医薬として使用するための、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩である。
特に好ましいのは、慢性閉塞性肺疾患および気腫の治療用の医薬として使用するための、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩である。

本発明のさらなる実施形態は、１つまたは複数の式の化合物またはその医薬活性塩を含有することを特徴とする医薬組成物である。
本発明のさらなる実施形態は、ＤＰＰＩ活性阻害剤が治療上の利点を有する疾患の治療または予防の方法であり、この方法は、それを必要とする患者への治療的にまたは予防的に有効な量の式１の化合物の投与を含む。
本発明のさらなる実施形態は、式Ｉの化合物に添加して、ベータ模倣剤、抗コリン作用薬、コルチコステロイド、ＰＤＥ４阻害剤、ＬＴＤ４アンタゴニスト、ＥＧＦＲ阻害剤、ＣＲＴＨ２阻害剤、５ＬＯ阻害剤、ヒスタミン受容体アンタゴニスト、ＣＣＲ９アンタゴニストおよびＳＹＫ阻害剤、ＮＥ阻害剤、ＭＭＰ９阻害剤およびＭＭＰ１２阻害剤からなる群から選択される医薬活性化合物を含むが、また２種もしくは３種の活性物質の組合せを含む医薬組成物である。

使用される用語および定義
本明細書において具体的に定義されてない用語は、本開示および文脈を踏まえて当業者によって与えられるであろう意味が与えられるべきである。しかしながら、本明細書において使用される場合、それに反する指定がない限り、下記の用語は、指示されている意味を有し、下記の規約を順守する。
以下で定義される基、ラジカルまたは部分において、炭素原子の数は、多くの場合、基に先行して指定されており、例えば、Ｃ_1-6−アルキルは、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基またはラジカルを意味する。
概して、ＨＯ、Ｈ₂Ｎ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、ＮＣ（シアノ）、ＨＯＯＣ、Ｆ₃Ｃ等のような単一の基において、当業者は、基自体の自由原子価から分子とのラジカル結合点が分かる。２つ以上のサブ基を含む複合基については、最後に挙げられているサブ基がラジカル結合点であり、例えば、置換基「アリール−Ｃ_1-4−アルキル−」は、Ｃ_1-4−アルキル−基と結合しているアリール基を意味し、後者は、該置換基が結合しているコアまたは基と結合している。
代替として、「^*」は、化学的実体内の結合点を指示している。

本発明の化合物が、化学名の形態でおよび式として描写され、何らかの矛盾がある場合には、式を優先するものとする。定義されている通りのコア分子と結び付けられている結合を指示するために、サブ式においてアスタリスクを使用してよい。
下記の用語の多くは、式または基の定義において繰り返し使用され得、各場合において、互いに独立に、上記に記した意味の１つを有する。
用語「置換されている」は、本明細書において使用される場合、指定された原子上の任意の１個または複数の水素が、指示されている群からの選択で置きかえられており、ただし、該指定された原子の通常の原子価を超えないこと、および置換が安定化合物をもたらすことを意味する。
本明細書において使用される表現「予防」、「防護」、「防護的治療」または「予防的治療」は、同義に、以上に言及した状態を発生するリスクを、とりわけ、前記状態または対応する既往歴のリスクが上昇している患者において、例えば、糖尿病もしくは肥満等の代謝障害または本明細書において言及されている別の障害を発生するリスクの上昇が低減しているという意味で理解されるべきである。故に、表現「疾患の予防」は、本明細書において使用される場合、疾患の臨床的発症前の、疾患を発生するリスクがある個体の管理およびケアを意味する。予防の目的は、疾患、状態または障害の発生と闘うことであり、症状または合併症の発症を予防するまたは遅延させるための、および関連疾患、状態または障害の発生を予防するまたは遅延させるための、活性化合物の投与を包含する。前記予防的治療の成功は、予防的治療なしの同等の患者集団と比較して低減した、この状態のリスクがある患者集団内における前記状態の発生率によって、統計的に反映される。

表現「治療」または「療法」は、明白な、急性または慢性形態の前記状態の１つまたは複数を既に発生している患者の、具体的な適応症の症状を和らげるための対症治療、あるいは、状態およびその重症度に応じて、状態を反転させるもしくは部分的に反転させるため、または適応症の進行を可能と思われる限り遅延させるための原因治療を包含する、療法的治療を意味する。故に、表現「疾患の治療」は、本明細書において使用される場合、疾患、状態または障害を発生している患者の管理およびケアを意味する。治療の目的は、疾患、状態または障害と闘うことである。治療は、疾患、状態または障害を解消するまたは制御するため、および疾患、状態または障害に関連する症状または合併症を緩和するための、活性化合物の投与を包含する。

具体的に指示がない限り、本明細書および添付の請求項の全体にわたって、所与の化学式または名称は、互変異性体およびすべての立体、光学および幾何異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオマー、Ｅ／Ｚ異性体等）およびそれらのラセミ体、ならびに別個の鏡像異性体の異なる割合での混合物、ジアステレオマーの混合物、またはそのような異性体および鏡像異性体が存在する場合の前述の形態のいずれかの混合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩を包含する塩、および遊離化合物の溶媒和物または化合物の塩の溶媒和物を包含する例えば水和物等のその溶媒和物を包括するものとする。

語句「薬学的に許容される」は、本明細書において、妥当な医学的判断の範囲内であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに、ヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、化合物、材料、組成物および／または剤形を指すために用いられている。

本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される塩」は、親化合物がその酸または塩基塩を作製することによって修飾されている、開示化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例は、アミン等の塩基性残基の鉱物または有機酸塩；カルボン酸等の酸性残基のアルカリまたは有機塩等を包含するがこれらに限定されない。例えば、そのような塩は、アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン（２，２’−イミノビス（エタノール））、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、２−アミノエタノール、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、リジン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン（２，２’，２”−ニトリロトリス（エタノール））、トロメタミン、水酸化亜鉛、酢酸、２．２−ジクロロ−酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、２，５−ジヒドロキシ安息香酸、４−アセトアミド−安息香酸、（＋）−ショウノウ酸、（＋）−カンファー−１０−スルホン酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、デカン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、エチレンジアミン四酢酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、Ｄ−グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリシン、グリコール酸、ヘキサン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イソ酪酸、ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、リジン、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ガラクタル酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オクタン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸（エンボン酸）、リン酸、プロピオン酸、（−）−Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびウンデシレン酸由来の塩を包含する。さらなる薬学的に許容される塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛等のような金属からカチオンと形成され得る（Pharmaceutical salts, Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19も参照）。

本発明の薬学的に許容される塩は、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から、従来の化学的方法によって合成され得る。概して、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、十分な量の適切な塩基または酸と、水中で、あるいはエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールもしくはアセトニトリルまたはそれらの混合物のような有機希釈剤中で反応させることによって、調製され得る。

例えば本発明の化合物を精製または単離するために有用な上記で言及したもの以外の酸の塩（例えば、トリフルオロ酢酸塩）も、本発明の一部を構成する。
用語ハロゲンは、概して、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表す。
用語「Ｃ_1-n−アルキル」は、ｎが、２、３、４、５または６から選択される整数である場合、単独で、または別のラジカルと組み合わせてのいずれかで、１〜ｎ個のＣ原子を持つ非環式、飽和、分枝鎖状または線形炭化水素ラジカルを表す。例えば、用語Ｃ_1-5−アルキルは、ラジカルＨ₃Ｃ−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−Ｃ（ＣＨ₃）₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−、Ｈ₃Ｃ−Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ（ＣＨ₃）−およびＨ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）−を内包する。
用語「オキセタニル」は、結合点に対して３位において酸素原子を含有する４員飽和環式環を表す。

調製
一般的な合成方法
本発明は、式Ｉの化合物を作製するためのプロセスも提供する。

最適な反応条件および反応時間は、使用される特定の反応物質に応じて変動し得る。別段の指定がない限り、溶媒、温度、圧力、および他の反応条件は、当業者によって容易に選択され得る。具体的な手順は、合成例の項において提供されている。典型的には、反応進行は、所望ならば、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ：ｔｈｉｎｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）またはＬＣ−ＭＳによってモニターすることができ、中間体および生成物は、シリカゲル上でのクロマトグラフィー、ＨＰＬＣによって、および／または再結晶によって精製することができる。次の例は、例証的なものであり、当業者によって認識されている通り、特定の試薬または条件は、必要以上の実験をすることなく、個々の化合物に必要とされる通りに修飾され得る。以下の方法において使用される出発材料および中間体は、市販されているか、または当業者によって市販の材料から簡単に調製されるかのいずれかである。

式Ｉの化合物は、スキーム１、２、３または４において概説されている方法によって作製し得る。

スキーム１で例証されている通り、官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の脱保護のために、ギ酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸またはＨＣｌ等の酸を、水、ＤＣＭまたはジオキサン等の好適な溶媒中で使用して、式ＩＩＩの化合物を提供し得る。

アミドの形成のための標準的な文献手順を使用した、好適な溶媒中、例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）等の塩基、およびＨＡＴＵまたはＴＢＴＵ等の活性化剤の存在下での、式ＩＶの酸（式中、ＰＧ₁は、保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表す）と、式ＩＩＩのアミンとの反応によって、式Ｖの化合物が提供される。当技術分野で公知の標準的なペプチドカップリング反応（例えば、M. Bodanszky, 1984, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlagを参照）をこれらの合成において用いてよい。

式Ｖの化合物中等のアミドの、式ＶＩの対応するニトリルへの脱水は、ジクロロメタン（ＤＣＭ：ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）等の好適な溶媒中、（メトキシカルボニルスルファモイル）トリエチルアンモニウムヒドロキシド等の脱水剤の使用によって行われ得る。

式ＶＩの化合物（Ｘ₁＝Ｉ、Ｂｒ）は、対応するボロン酸誘導体ＶＩＩ（式中、Ｒは、独立に、Ｈまたは低級アルキルであってよく、残基Ｒは、環を形成することができる）に変換することができる。例えば、ＶＩは、ジオキサン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、またはジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）等の好適な触媒、および酢酸カリウム、または炭酸もしくはリン酸ナトリウム、カリウムもしくはセシウム等の好適な塩基の存在下で、ビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロンと反応して、ボロン酸誘導体ＶＩＩを産出することができる。

これらを、式ＶＩＩＩの化合物（Ｘ₂＝Ｃｌ、Ｂｒ）の（遷移）金属触媒反応において反応させることができる。これらのハロゲン化物ＶＩＩＩのカップリングは、式ＩＸの化合物を提供する。例えば、ジオキサン等の好適な溶媒中、１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド等の好適な触媒、および炭酸ナトリウム、カリウムまたはセシウム等の好適な塩基の存在下での、これらのハロゲン化物と、ボロン酸または対応するボロン酸エステルＶＩＩとの反応は、式ＩＸの化合物を提供する。
官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の脱保護のために、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物等の酸を、アセトニトリル等の好適な溶媒中で使用して、式Ｉの化合物を提供し得る。

スキーム２で例証されている通り、アミドの形成のための標準的な文献手順を使用した、好適な溶媒中、例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）等の塩基、およびＨＡＴＵまたはＴＢＴＵ等の活性化剤の存在下での、式ＩＶの酸（式中、ＰＧ₁は、保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表す）と、式ＩＩＩのアミンとの反応によって、式Ｖの化合物が提供される。当技術分野で公知の標準的なペプチドカップリング反応（例えば、M. Bodanszky, 1984, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlagを参照）をこれらの合成において用いてよい。

式Ｖの化合物は、スキーム１において記述されている反応手順と類似して、対応するボロン酸誘導体Ｘに変換することができる。

これらを、スキーム１において記述されている反応手順と類似した、式ＶＩＩＩの化合物（Ｘ₂＝Ｃｌ、Ｂｒ）の（遷移）金属触媒反応において反応させて、式ＸＩの化合物を産出することができる。

式ＸＩの化合物は、テトラヒドロフラン等の好適な溶媒中、水素化ホウ素リチウムまたは水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を使用して、式ＸＩＩの化合物に変換することができる。

式ＸＩＩの化合物は、テトラヒドロフラン等の好適な溶媒中、トリエチルアミンまたはＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）等の塩基の存在下での、ｐ−トルエンスルホン酸無水物またはメタンスルホニル（ｍｅｔｈａｎｓｕｌｆｏｎｙｌ）クロリド等の試薬を使用して、式ＸＩＩＩの化合物に変換することができる。

式ＸＩＩＩの化合物中等のアミドの、式ＸＩＶの対応するニトリルへの脱水は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、（メトキシカルボニルスルファモイル）トリエチルアンモニウムヒドロキシド等の脱水剤の使用によって行われ得る。

官能基の保護および脱保護については、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の脱保護のために、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物等の酸を、アセトニトリル等の好適な溶媒中で使用して、式Ｉの化合物を提供し得る。

スキーム３で例証されている通り、アミドの形成のための標準的な文献手順を使用した、好適な溶媒中、例えば、Ｎ−メチルモルホリン等の塩基、および１−プロパンホスホン酸環状無水物（ＰＰＡ）等の活性化剤の存在下での、式ＸＶの酸（式中、ＰＧ₁は、保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表す）と、式ＩＩＩのアミンとの反応によって、式ＸＶＩの化合物が提供される。当技術分野で公知の標準的なペプチドカップリング反応（例えば、M. Bodanszky, 1984, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlagを参照）をこれらの合成において用いてよい。

官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、式ＸＶＩのアミンの保護のために、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートは、ジクロロメタン等の好適な溶媒中で使用され、式ＸＶＩＩの化合物を提供し得る。
式ＸＶＩＩの化合物中等のアミドの、式ＸＶＩＩＩの対応するニトリルへの脱水は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、（メトキシカルボニルスルファモイル）トリエチルアンモニウムヒドロキシド等の脱水剤の使用によって行われ得る。

式ＸＶＩＩＩの化合物（Ｘ₁＝Ｉ、Ｂｒ）は、対応するボロン酸誘導体ＸＩＸ（式中、Ｒは、独立に、Ｈまたは低級アルキルであってよく、残基Ｒは、環を形成することができる）に変換することができる。例えば、ＸＶＩＩＩは、ジオキサン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、またはジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）等の好適な触媒、および酢酸カリウム、または炭酸もしくはリン酸ナトリウム、カリウムもしくはセシウム等の好適な塩基の存在下で、ビス（ピナコラト）ジボロンと反応して、ボロン酸誘導体ＸＩＸを産出することができる。

これらは、式ＶＩＩＩの化合物（Ｘ₂＝Ｃｌ、Ｂｒ）の（遷移）金属触媒反応において反応させることができる。これらのハロゲン化物ＶＩＩＩのカップリングは、式ＸＸの化合物を提供する。例えば、ジオキサン等の好適な溶媒中、１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド等の好適な触媒、および炭酸ナトリウム、カリウムまたはセシウム等の好適な塩基の存在下での、これらのハロゲン化物と、ボロン酸または対応するボロン酸エステルＸＩＸとの反応は、式ＸＸの化合物を提供する。
官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の脱保護のために、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物等の酸をアセトニトリル等の好適な溶媒中で使用して、式Ｉの化合物を提供し得る。

スキーム４で例証されている通り、式ＩＩの化合物は、対応するボロン酸誘導体ＸＸＩ（式中、Ｒは、独立に、Ｈまたは低級アルキルであってよく、残基Ｒは、環を形成することができる）に変換することができる。例えば、ＩＩは、ジオキサン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、またはジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）等の好適な触媒、および酢酸カリウム、または炭酸もしくはリン酸ナトリウム、カリウムもしくはセシウム等の好適な塩基の存在下で、ビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロンと反応して、ボロン酸誘導体ＸＸＩを産出することができる。
これらは、スキーム１に記載した反応手順と類似した、式ＶＩＩＩの化合物の（遷移）金属触媒反応において反応させて、式ＸＸＩＩの化合物を産出することができる。

式ＸＸＩＩの化合物中等のアミドの、式ＸＸＩＩＩの対応するニトリルへの脱水は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）等の好適な溶媒中、（メトキシカルボニルスルファモイル）トリエチルアンモニウムヒドロキシド等の脱水剤の使用によって行われ得る。

官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルの脱保護のために、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物等の酸は、アセトニトリル等の好適な溶媒中で使用して、式ＸＸＩＶの化合物を提供し得る。
アミドの形成のための標準的な文献手順を使用して、好適な溶媒中、例えば、Ｎ−メチルモルホリン等の塩基、および１−プロパンホスホン酸環状無水物（ＰＰＡ）等の活性化剤の存在下で、式ＸＶの酸（式中、ＰＧ１は、保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表す）と、式ＸＸＩＶのアミンとの反応によって、式ＸＸＶの化合物が提供される。当技術分野で公知の標準的なペプチドカップリング反応（例えば、M. Bodanszky, 1984, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlagを参照）をこれらの合成において用いてよい。

官能基の保護および脱保護は、‘Protective Groups in Organic Synthesis’, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Wiley-Interscienceにおいて記述されている。例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルの脱保護のために、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物等の酸は、アセトニトリル等の好適な溶媒中で使用して、式Ｉの化合物を提供し得る。

当技術分野で公知の方法の、および以下の例において例証される方法による、式Ｉの化合物のさらなる修飾を使用して、本発明の追加の化合物を調製することができる。

合成例
下記は、一般的合成スキーム、例、および当技術分野において公知の方法によって作製され得る本発明の代表的化合物である。出発材料および中間体は、市販されており、ＡＢＣＲ、ＡＣＲＯＳ、ＡＢＬＯＣＫＰＨＡＲＭＡＴＥＣＨ、ＡＣＴＩＶＡＴＥ、ＡＬＤＲＩＣＨ、ＡＰＯＬＬＯＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ、ＡＲＫＰＨＡＲＭＩＮＣ、ＡＴＬＡＮＴＩＣＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ、ＢＥＴＡＰＨＡＲＭ、ＢＥＦＡＲＭ、ＣＨＥＭＢＲＩＤＧＥＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ、ＣＮＨ−ＴＥＣＨ、ＥＮＡＭＩＮＥＬＴＤ、ＧＯＬＤＥＮＢＲＩＤＧＥＰＨＡＲＭＡＩＮＣ、ＧＶＫＢＩＯ、ＭＥＲＣＡＣＨＥＭ、ＭＯＬＢＲＩＤＧＥ、ＷＵＸＩＡＰＰＴＥＣ、ＺＥＲＥＮＥＸのカタログから購入したものであるか、あるいは、文献に従って、または「出発材料／遊離体の合成」において以下で記述されている通りに合成したものかのいずれかであった。
以下の化合物についての液クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣＭＳ：Ｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）保持時間および観察されたｍ／ｚデータは、下記の方法の１つによって取得される：

合成方法：
方法Ａ
（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−［１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［１Ｈ−イソベンゾフラン−３，４’−ピペリジン］−５−イル］フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド（例１）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−１．１の合成
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中のＲ１（２０．００ｇ、５５．３７ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（１７．０９ｍＬ、２２１．４８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を濃縮し、残留物をジクロロメタン（１５ｍＬ）およびジイソプロピルエーテル（１４０ｍＬ）に溶解する。沈殿物を濾過除去し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、乾燥させ、Ｉ−１．１をＴＦＡ塩として得る。
収率99%, m/z 261 [M+H]+, 保持時間0.50分, LC-MS法Z018_S04.

ステップ２：中間体Ｉ−１．２の合成
ＤＭＦ（６５ｍＬ）中のＲ２（１３．８６ｇ、５５．７２ｍｍｏｌ）に、ＤＩＰＥＡ（９．０２ｍＬ、５０．６７ｍｍｏｌ）を添加し、５℃まで冷却する。ＴＢＴＵ（１７．８９ｇ、５５．７２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１５分間撹拌する。その後、Ｉ−１．１（ＴＦＡ塩）（１９．０ｇ、５０．６５ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（６５ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１３．５２ｍＬ、７５．９８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で抽出する。水層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を、水、１ｍｏｌ／Ｌの塩酸水溶液、水、炭酸水素ナトリウム水溶液（５％）および再び水で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール９５：５）によって精製する。
収率82%, m/z 484 [M+H]+, 保持時間0.91分, LC-MS法Z018_S04.

ステップ３：中間体Ｉ−１．３の合成
ジクロロメタン（２００ｍＬ）中のＩ−１．２（２０．０ｇ、４１．２９ｍｍｏｌ）に、Ｒ３（１９．６８ｇ、８２．５８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を酢酸エチルに溶解し、水、１ｍｏｌ／Ｌの酢酸水溶液、および水で抽出する。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物をアセトニトリルから再結晶化し、濾過除去する。
収率71%, m/z 466 [M+H]+, 保持時間0.98分, LC-MS法Z018_S04.

ステップ４：中間体Ｉ−１．４の合成
ジオキサン（２０ｍＬ）中のＩ−１．３（１．５ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（１：１）（５２．５４ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）との複合体としてのＲ４（７９９．２２ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（０．９４７ｇ、９．６５ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加する。反応混合物を窒素でパージし、７０℃に１．５時間加熱する。反応混合物をジクロロメタンおよび水で希釈する。有機層を分離し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率94% m/z 332 [M+H-Boc]+, 保持時間0.96分, LC-MS法Z020_S01.

ステップ５：中間体Ｉ−１．５の合成
アセトニトリル（１８ｍＬ）中のＩ−１．４（４００．０ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）に、Ｒ５（３０１．０ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸ナトリウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（９２８μＬ、１．８６ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（６０．５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、マイクロ波反応器中で８０℃で４５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９８：２〜９２：８）によって精製し、Ｉ−１．５を得る。
収率79% m/z 631 [M+H]+, 保持時間1.09分, LC-MS法Z011_S03.

中間体Ｉ−１．５の代替合成
中間体Ｉ−１．４．１の合成
ジオキサン（２５５ｍＬ）中のＩ−１．３（２０ｇ、４２．８９ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（１：１）（１．７５ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）との複合体としてのビス（ピナコラト）ジボロン（１３．０７ｇ、５１．４６ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１２．６３ｇ、１２８．６６ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加する。混合物を窒素で５分間パージし、７０℃に加熱し、この温度で一晩撹拌する。反応混合物をジクロロメタンおよび水で希釈する。有機層を分離し、真空中で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝９２：８〜３４：６６）によって精製する。
収率64% m/z 332 [M+H - Boc - ((CH₃)₂CH)₂]+, 保持時間0.73分, LC-MS法Z011_S03.

中間体Ｉ−１．５の合成
アセトニトリル（６０ｍＬ）中のＩ−１．４．１（３．９６ｇ、７．７１ｍｍｏｌ）に、Ｒ５（２．５０ｇ、７．７１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸ナトリウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（７．７１ｍＬ、１５．４２ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（５０２．６ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、８０℃で９０分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９９：１〜９４：６）によって精製し、Ｉ−１．５を得る。
収率75% m/z 631 [M+H]+, 保持時間1.09分, LC-MS法Z011_S03.

表１に示す通りの下記の中間体を、中間体Ｉ−１．４および適切な遊離体から同様の方式で合成する。

ステップ６：例１の合成
アセトニトリル（６０ｍＬ）中のＩ−１．５（３．６４ｇ、５．７８ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（５．４９ｇ、２８．８８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率84% m/z 531 [M+H]+, 保持時間1.00分, LC-MS法Z011_S03.

（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−［１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピリジン−１，４’−ピペリジン］−６−イル］フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド（例２３）の合成
ステップ１：中間体Ｉ−１．５．２２の合成
アセトニトリル（３ｍＬ）中のＩ−１．４（９２．２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）に、Ｒ１７（４８．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸セシウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（１７１μＬ、０．３４ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（１１．１ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、マイクロ波反応器中で８０℃で４５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−１．５．２２を得る。
収率52% m/z 632 [M+H]+, 保持時間1.04分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ２：例２３の合成
アセトニトリル（２ｍＬ）中のＩ−１．５．２２（５６．０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８４．３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物をＴＥＡで塩基性化し、メンブランフィルターに通して濾過し、逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率83% m/z 532 [M+H]+, 保持時間0.96分, LC-MS法Z011_S03.

（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−［１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［５Ｈ−フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−２−イル］フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド（例２５）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−１．５．２４の合成
アセトニトリル（５０ｍＬ）中のＩ−１．４（２．３０４ｇ、５．３４ｍｍｏｌ）に、Ｒ１９（１．５０ｇ、５．３４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸ナトリウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（５．３４３ｍＬ、１０．６９ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（３４８．２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、マイクロ波反応器中で７０℃で４５分間撹拌する。さらなる量のＩ−１．４（１５０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を７０℃で２５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９９：１〜９：１）によって精製し、Ｉ−１．５．２４を得る。
収率55% m/z 632 [M+H]+, 保持時間1.05分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ２：例２５の合成
アセトニトリル（５０ｍＬ）中のＩ−１．５．２４（１．８５ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２．７８ｇ、１４．６４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率88% m/z 532 [M+H]+, 保持時間0.97分, LC-MS法Z011_S03.

方法Ｂ
（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−（１’−メチルスピロ［３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピリジン−１，４’−ピペリジン］−６−イル）フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド（例２６）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−２．１の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のＩ−１．２（１．０ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（１：１）（３３．７２ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）との複合体としてのＲ４（５１２．９９ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（６０７．９２ｍｇ、９．６５ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加する。反応混合物を窒素でパージし、７０℃に一晩加熱する。再び、ジクロロメタン（１：１）（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）との複合体としてのＲ４（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加し、反応混合物を７０℃で２時間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率５０％ｍ／ｚ４５０［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ２：中間体Ｉ−２．２の合成
アセトニトリル（４ｍＬ）中のＩ−２．１（２０４．４６ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）に、Ｒ１０．７（１１５ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸セシウム溶液２ｍｏｌ／Ｌ（４５５．０９μＬ、０．９１ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（２９．６６ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、マイクロ波反応器中で８０℃で４５分間撹拌する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率７５％。

ステップ３：中間体Ｉ−２．３の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＩ−２．２（２１２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）に、水素化ホウ素リチウム（２ｍｏｌ／Ｌ、０．２６ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で３時間撹拌する。反応混合物をメタノールでクエンチし、水および酢酸エチルで希釈する。有機層を炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率９１％。

ステップ４：中間体Ｉ−２．４の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＩ−２．３（１９４ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（０．２２ｍＬ、１．５５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸無水物（１２１．４３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。反応混合物を室温にし、一晩撹拌する。反応混合物を水でクエンチし、真空中で濃縮する。残留物を炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率３４％ｍ／ｚ６０８［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ５：中間体Ｉ−２．５の合成
ジクロロメタン（２．５ｍＬ）中のＩ−２．４（６５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に、Ｒ３（６３．７２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率＞９５％。

ステップ６：例２６の合成
アセトニトリル（２ｍＬ）中のＩ−２．５（６８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９８．７０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌する。反応混合物をＴＥＡで塩基性化し、逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率28% m/z 490 [M+H]+, 保持時間0.96分, LC-MS法Z011_S03.
方法Ｃ
Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−［１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［１Ｈ−イソベンゾフラン−３，４’−ピペリジン］−５−イル］フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．２］オクタン−４−カルボキサミドの合成（例２７）

ステップ１：中間体Ｉ−３．１の合成
０℃に冷却したＩ−１．１（５．８０ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）、Radchenko et al. J. Org. Chem. 2009, 5541-5544によって調製した３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−アザビシクロ［２．２．２］オクタン−４−カルボン酸（５．６７ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）およびＮ−メチル−モルホリン（１２．２ｍＬ、１１１．０ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（ｄｉｃｈｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）（６７ｍＬ）溶液に、ＰＰＡ（１３．０８ｍＬ（酢酸エチル中５０％）、２２．２ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温に達しさせ、一晩撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、ジクロロメタンで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、Ｉ−３．１を得て、これをそれ以上精製することなく次のステップで使用した。
収率73%, m/z 398/400 [M+H]+, 保持時間0.87分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ２：中間体Ｉ−３．２の合成
０℃に冷却したＩ−３．１（８．６２５ｇ、２１．６６ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（３００ｍＬ）溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（６．２６ｇ、２８．７０ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液を滴下添加する。反応混合物を０℃で２時間撹拌し、室温に達しさせ、２日間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、Ｉ−３．２を得て、これをそれ以上精製することなく次のステップで使用した。
収率98%, m/z 398/400 [M+H - Boc]+, 保持時間1.04分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ３：中間体Ｉ−３．３の合成
Ｉ−３．２（５．５２ｇ、１１．０７ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（７０ｍＬ）懸濁液に、Ｒ３（３．９６ｇ、１６．６０ｍｍｏｌ）を４分割で添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。さらなる量のＲ３（７９１．０ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で６時間撹拌する。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、酒石酸の１０％水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。取得された残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝９４：６〜６９：３１）によって精製し、Ｉ−３．３を得る。
収率77% m/z 380/382 [M+H - Boc]⁺, 保持時間1.10分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ４：中間体Ｉ−３．４の合成
ジオキサン（４５ｍＬ）中のＩ−３．３（３．６１ｇ、７．５２ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（１：１）（６１．４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）との複合体としてのビス（ピナコラト）ジボロン（３．２４ｇ、１２．７８ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（２．２１ｇ、２２．５５ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加する。混合物を窒素で５分間パージし、７０℃で３時間加熱する。反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１００：０〜９１：９）によって精製し、Ｉ−３．４を得る。
収率68% m/z 346 [M+H - Boc - ((CH₃)₂CH)₂]+, 保持時間0.77分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ５：中間体Ｉ−３．５の合成
アセトニトリル（３０ｍＬ）中のＩ−３．４（１．１４ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）に、Ｒ５（０．７０ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸ナトリウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（２．１６ｍＬ、４．３２ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（１４１．０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再び５分間パージし、マイクロ波反応器中で８０℃で７０分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９９：１〜９：１）によって精製し、Ｉ−３．５を得る。
収率81% m/z 645 [M+H]+, 保持時間1.11分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ６：例２７の合成
アセトニトリル（４０ｍＬ）中のＩ−３．５（９２３．０ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（６８１．０ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で３日間撹拌する。反応混合物をＴＥＡで中和し、真空中で濃縮する。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率61%, m/z 545 [M+H]+, 保持時間1.02分, LC-MS法Z011_S03.

方法Ｄ
Ｎ−［（１Ｓ）−１−シアノ−２−［２−フルオロ−４−［１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［１Ｈ−イソベンゾフラン−３，４’−ピペリジン］−５−イル］フェニル］エチル］−３−アザビシクロ［２．２．２］オクタン−４−カルボキサミド（例２７）の代替合成

ステップ１：中間体Ｉ−４．１の合成
ジオキサン（７ｍＬ）中のＲ１（３４０ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（１：１）（１５．３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）との複合体としてのＲ４（２８８ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（２７７ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を添加する。混合物を窒素でパージし、７０℃に２時間加熱する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−４．１を得る。
収率90%, m/z 325 [M-H]-, 保持時間0.94分, LC-MS法Z020_S01.

ステップ２：中間体Ｉ−４．２の合成
アセトニトリル（１０ｍＬ）中のＩ−４．１（２２８ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）に、Ｒ５（２３９ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴンでパージする。炭酸カリウム水溶液２ｍｏｌ／Ｌ（７００μＬ、１．４ｍｍｏｌ）および１，１−ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（４６ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで再びパージし、マイクロ波反応器中で８０℃で４５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−４．２を得る。
収率80%, m/z 526 [M+H]⁺, 保持時間0.83分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ３：中間体Ｉ−４．３の合成
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のＩ−４．２（２９４ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）に、Ｒ３（３３３ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で４０分間撹拌する。ＤＣＭを真空中で除去し、取得された残留物を酢酸エチル、および酒石酸の１０％水溶液の間で分配し、相を分離し、水相を酢酸エチル（ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｔｅ）で抽出する。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、Ｉ−４．３を得る。
収率95%, m/z 508 [M+H]⁺, 保持時間1.06分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ４：中間体Ｉ−４．４の合成
アセトニトリル（８ｍＬ）中のＩ−４．３（３２０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（６００ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで３回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率80%, m/z 408 [M+H]+, 保持時間0.90分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ５：例２７の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＩ−４．４（３０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）に、Radchenko et al. J. Org. Chem. 2009, 5541-5544によって調製した３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−アザビシクロ［２．２．２］オクタン−４−カルボン酸（１９ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチル−モルホリン（１６μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＰＰＡ（４３μＬ、ＤＭＦ中５０％）を室温で添加する。反応混合物を室温で２．５時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、例２７を得る（ワークアップおよび／または精製、Ｂｏｃ基の脱保護が起こる間）。
収率32%, m/z 545 [M+H]+, 保持時間1.02分, LC-MS法Z011_S03.

出発材料／遊離体の合成
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−［（４−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）メチル］−２−オキソ−エチル］カルバメート（Ｒ１）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−５．１の合成
乾燥テトラヒドロフラン（６００ｍＬ）中の（２Ｒ）−（−）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジン（２１２ｇ、１１５１ｍｍｏｌ）を、−７８℃に冷却する。次いで、温度を−７８℃未満に維持しながらｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、５５２ｍＬ、１３８１ｍｍｏｌ）を滴下添加する。３０分後、乾燥テトラヒドロフラン（１２０ｍＬ）中の４−ブロモ−２−フルオロベンジルブロミド（３２４ｇ、１２０９ｍｍｏｌ）を滴下添加する。反応混合物を−７８℃で１時間撹拌する。混合物を飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させる。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝８０／２０）によって精製する。収率６０％。

ステップ２：中間体Ｉ−５．２の合成
アセトニトリル（６００ｍＬ）中のＩ−５．１（１０４ｇ、２６５ｍｍｏｌ）に、０．２ＭＨＣｌ水溶液（２７８８ｍＬ、５５８ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で１２時間撹拌する。混合物をジエチルエーテルで抽出し、水性層のｐＨを飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で約８に調整する。次いで、これを酢酸エチルで３回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、濃縮する。収率８０％。

ステップ３：中間体Ｉ−５．３の合成
Ｉ−５．２（６２．４ｇ、２１１ｍｍｏｌ）を、３ＭＨＣｌ水溶液（３ｍｏｌ／Ｌ、１０００ｍＬ）中、６０℃で１６時間撹拌する。混合物を冷却し、ｐＨを６ＭＮａＯＨ水溶液で約７に調整する。次いで、反応混合物を濾過し、水で３回洗浄し、真空オーブン内、４０℃で１２時間乾燥させる。収率７４％。

ステップ４：中間体Ｉ−５．４の合成
１，４−ジオキサン（２．２Ｌ）中のＩ−５．３（１５１ｇ、５４６ｍｍｏｌ）に、２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（３０１ｍＬ、６０２ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔブチルジカーボネート（１３８ｇ、６３２ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を４時間撹拌する。次いで、水を添加し、ｐＨをクエン酸で約４〜５に調整する。混合物を酢酸エチルで３回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、濃縮する。残留物をヘプタン中で１５分間撹拌し、生成物を濾過除去する。収率８７％。
ステップ５：Ｒ１の合成
乾燥ＤＭＦ（１２００ｍＬ）中のＩ−５．４（１８１ｇ、４７６ｍｍｏｌ）に、Ｎ−メチルモルホリン（７２ｇ、７１３ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１５３ｇ、４７６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を３０分間撹拌する。次いで、反応混合物を０℃に冷却し、３５％塩化アンモニウム水溶液（４７ｍＬ、８５６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１２時間撹拌する。水を添加し、形成された生成物を濾過除去し、水で３回洗浄する。生成物を、真空オーブン内、４０℃で７２時間乾燥させる。収率６４％。

（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ．−ブトキシ）カルボニル］−３−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキシレート（Ｒ２）の合成
化合物は、市販されているか、またはTararov et al, Tetrahedron Asymmetry 13 (2002), 25-28と同様にして合成できる。

ステップ１：中間体Ｉ−６．１の合成
ジエチルエーテル（３００ｍｌ）中の、トルエン中市販溶液から（５０ｍｂａｒ、５５℃で）新たに蒸留したエチルオキソアセテート（４４．９ｇ、０．４４ｍｏｌ）の溶液を、−１０℃で冷却し、続いて、（Ｒ）−（＋）−１−フェニルエタンアミン（５３ｇ、４４０ｍｍｏｌ）を、温度を０℃未満に保ちながら、滴下添加する。完全な添加の後、ＭｇＳＯ₄ ^*Ｈ₂Ｏ（９１ｇ、６６０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を濾過し、母液を真空中で濃縮し、残留物を減圧下蒸留し、Ｉ−６．１を産出させる（４７ｇ、ｍ／ｚ２０６［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間１．２９分、ＬＣ−ＭＳ法Ｖ００３＿００３）。生成物をさらに精製することなく使用する。

ステップ２：中間体Ｉ−６．２の合成
Ｉ−６．１（４７ｇ、２２９ｍｍｏｌ）および１，３−シクロペンタジエン（３０ｇ、４５８ｍｍｏｌ）（ジシクロペンタジエンから新たに蒸留）のＤＭＦ（１５０ｍｌ）および水（１２０μＬ）溶液を、０℃に冷却し、その後、ＴＦＡ（１８ｍｌ、２３４ｍｍｏｌ）を滴下添加する。混合物を室温で終夜撹拌し、次いで、１２００ｍｌの水中４０ｇのＮａＨＣＯ₃の溶液に添加し、ジエチルエーテルで抽出する。有機層を分離し、ＮａＨＣＯ₃水溶液および水で引き続き洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル＝９：１）によって精製し、Ｉ−６．２を産出させる（収率５２％ｍ／ｚ２７２［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間０．４２分、ＬＣ−ＭＳ法Ｘ００１＿００４）。

ステップ３：中間体Ｉ−６．３の合成
エタノール（２５０ｍｌ）中のＩ−６．２（２４．８ｇ、９１ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケルを添加し（２．５ｇ）、水素雰囲気下、５０ｐｓｉ、室温で反応させる。触媒を濾過除去し、溶液を真空中で濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）によって精製する。有機溶媒の蒸発後、取得された生成物をジエチルエーテルに再溶解し、ジオキサン中のＨＣｌの溶液とすり混ぜ、真空で濃縮し、２００ｍｌのエタノールに再溶解し、真空で濃縮して、Ｉ−６．３（収率７８％ｍ／ｚ２７４［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間０．４２分、ＬＣ−ＭＳ法Ｘ００１＿００４）を産出する。
ステップ４：中間体Ｉ−６．４の合成
エタノール（２５０ｍｌ）中のＩ−６．３（２２ｇ、７１ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃを添加し（２．５ｇ）、水素雰囲気下、１５ｂａｒ、室温で反応させる。触媒を濾過除去し、溶液を真空で濃縮する。残留物をジイソプロピルエーテルで洗浄して、Ｉ−６．４（収率９８％ｍ／ｚ１７０［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間０．４８分、ＬＣ−ＭＳ法Ｖ００１＿００７）を産出する。

ステップ５：中間体Ｉ−６．５の合成
トリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎ）（２４．６ｍｌ、１７５．３ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１５０ｍｌ）および水（２ｍＬ）の溶液中のＩ−６．４（１４．３ｇ、６９．３ｍｍｏｌ）に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１５．９ｇ、７３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で４０時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮する。酢酸エチルを残留物に添加し、それに続いて、水、１Ｎの酢酸水溶液および水で抽出し、その後、有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、Ｉ−６．５を産出させる。(収率95% m/z 270 [M+H]+, 保持時間1.33分, LC-MS法V003_003).

ステップ６：Ｒ２の合成
アセトン（１５２ｍｌ）、水（５０ｍｌ）および水酸化リチウム（３ｇ、１２６ｍｍｏｌ）中のＩ−６．５（１６．９ｇ；６３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で終夜撹拌する。水（１００ｍｌ）を添加し、真空で体積を低減させた後、０℃に冷却し、続いて、１ＮＨＣｌ水溶液を添加して、２〜３のｐＨに酸性化し、その直後に、酢酸エチルで抽出する。有機層を水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濃縮する。残留物に、ジクロロメタン（１００ｍｌ）およびシクロヘキサン（１００ｍｌ）を添加し、真空で体積を半分に低減させ、混合物を１５℃の温度にする（ｔｅｍｐｅｒａｔｅｄ）。沈殿物を濾過除去し、シクロヘキサンで洗浄して、Ｒ２（収率６６％、ｍ／ｚ２４２［Ｍ＋Ｈ］＋）を産出する。

５−ブロモ−１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［１Ｈ−イソベンゾフラン−３，４’−ピペリジン］（Ｒ５）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−７．１の合成
メチル２−アミノ−４−ブロモベンゾエート（ｂｒｏｍｂｅｎｚｏａｔｅ）（１０ｇ、４３．４７ｍｍｏｌ）を硫酸２０％（２００ｍＬ）に懸濁させ、取得された溶液を０℃に冷却する。水（４０ｍＬ）に溶解した亜硝酸ナトリウム（３．６０ｇ、５２．１６ｍｍｏｌ）を０℃〜５℃で滴下添加し、反応混合物をこの温度でさらに４０分間撹拌する。その後、冷却した（約０℃）ヨウ化カリウム（１４．４３ｇ、８６．９３ｍｍｏｌ）の水（４０ｍＬ）溶液を滴下添加し、反応混合物を５℃で１時間撹拌する。反応混合物を氷水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出する。有機層を水、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。収率９４％。

ステップ２：中間体Ｉ−７．２の合成
乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のＩ−７．１（９．４２ｇ、２７．６３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（６．２４ｇ、３０．４０ｍｍｏｌ）を−７０℃に冷却する。塩化イソプロピルマグネシウム−塩化リチウム複合体（ＴＨＦ中１．３ｍｏｌ／Ｌ、２３．３８ｍＬ、３０．４０ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物をこの温度でさらに２０分間撹拌し、室温にさせ、４５分間撹拌する。反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝９５：５〜４０：６０）によって精製し、Ｉ−７．２を得る。
収率74%, m/z 326,328 [M+H - tert-Bu]+, 保持時間1.09分, LC-MS法Z011_S03.

表２において示すような下記の中間体を、適切な中間体から同様の方式で合成する。

中間体Ｉ−７．１の代替合成
メタノール（５０ｍＬ）中の４−ブロモ−２−ヨード安息香酸（９．０ｇ、２７．５３ｍｍｏｌ）に、濃硫酸（１０ｍＬ）を添加し、反応混合物を８０℃で９０分間撹拌する。反応混合物を氷冷水に注ぎ入れ、７のｐＨ値に達するまで炭酸水素ナトリウムを添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。収率９５％。

ステップ３：中間体Ｉ−７．３の合成
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のＩ−７．２（８．１１ｇ、２１．２２ｍｍｏｌ）に、水素化ホウ素リチウム（ＴＨＦ中２ｍｏｌ／Ｌ、２１．２２ｍＬ、４２．４４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。ＨＰＬＣ−ＭＳ分析は、２０％の変換を示した。追加の水素化ホウ素リチウム（ＴＨＦ中２ｍｏｌ／Ｌ、２７．０ｍＬ、５４．０ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物を室温で６日間撹拌する。氷浴で約０℃に冷却しながら、反応混合物を水で注意深くクエンチする。飽和炭酸水素ナトリウム溶液を反応混合物に添加し、取得された沈殿物を濾過除去し、母液を酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率>95%, m/z 312/314 [M+H - tert-ブチル - H₂O]+, 保持時間1.01分, LC-MS法 Z011_S03.

ステップ４：中間体Ｉ−７．４の合成
Ｉ−７．３（６０５ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却し、ＴＥＡ（１．０９ｍＬ、７．８３ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸無水物（６１３．４４ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温にし、一晩撹拌する。反応混合物を水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製する。
収率７２％、ｍ／ｚ３６８；３７０［Ｍ＋Ｈ］＋

ステップ５：中間体Ｉ−７．５の合成
Ｉ−７．４（２４０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（５００μＬ、６．５３ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を７０分間室温にさせる。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物をメタノールに再溶解し、固相カートリッジ（ＳｔｒａｔｏＳｐｈｅｒｅｓ（商標）ＰＬ−ＨＣＯ３ＭＰ樹脂）に通して濾過し、メタノールを真空中で除去する。
収率97%, m/z 268; 270 [M+H]+, 保持時間0.93分, LC-MS法Z011_S03.

中間体Ｉ−７．５の代替合成
Ｉ−７．３（８．３９ｇ、２１．７１ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、５ＮのＨＣｌ水溶液（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を９０℃で３０時間撹拌する。反応混合物を室温に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で塩基性化し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率76%, m/z 268; 270 [M+H]+, 保持時間0.93分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ６：Ｒ５の合成
Ｉ−７．５（５．０ｇ、１８．４９ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解し、３−オキセタノン（１．７８ｍＬ、２７．７３ｍｍｏｌ）および酢酸（１．０６ｍＬ、１８．４９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２５分間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６．８２ｇ、３０．５７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温でさらに３０分間撹拌する。反応混合物をＭｅＯＨでクエンチし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、Ｒ５を得る。
収率89%, m/z 324; 326 [M+H]+, 保持時間0.93分, LC-MS法Z011_S03.

６−ブロモ−１’−メチル−スピロ［インダン−１，４’−ピペリジン］（Ｒ７）の合成
ステップ１：中間体Ｉ−８．１の合成
ジクロロメタン（３ｍＬ）中のＷＵＸＩＡＰＰＴＥＣから購入したＲ６（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（０．２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物をメタノールに再溶解し、固相カートリッジ（ＳｔｒａｔｏＳｐｈｅｒｅｓ（商標）ＰＬ−ＨＣＯ３ＭＰ樹脂）に通して濾過し、メタノールを真空中で除去する。収率＞９５％。

ステップ２：Ｒ７の合成
メタノール（４ｍＬ）中のＩ−８．１（１５２ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）に、ホルムアルデヒド（水中３７％、０．２１ｍＬ、２．８６ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０５ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で２時間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３０２．６ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で８０分間撹拌する。反応混合物を濃縮し、水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液とすり混ぜ、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄する。沈殿物を濾過除去し、濾液をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、Ｒ７を産出させる。
収率８９％。

５−ブロモ−１，１’−ジメチル−スピロ［インドリン−３，４’−ピペリジン］−２−オン（Ｒ１０）の合成

ステップ１：Ｒ９の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＡＣＴＩＶＡＴＥから購入したＲ８（２００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）に、０℃に冷却しながら水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散物、３１．５ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温でさらに３０分間撹拌する。ヨウ化メチル（３６μＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で４０分間撹拌する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、Ｒ９を得る。収率９８％。

ステップ２：中間体Ｉ−９．１の合成
ジクロロメタン（５ｍＬ）中のＲ９（１９１ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で２０分間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物をメタノールに再溶解し、固相カートリッジ（ＳｔｒａｔｏＳｐｈｅｒｅｓ（商標）ＰＬ−ＨＣＯ３ＭＰ樹脂）に通して濾過し、メタノールを真空中で除去する。
収率＞９５％

表３に示す通りの下記の中間体は、適切な中間体から、同様の方式で合成される：

ステップ３：Ｒ１０の合成
メタノール（５ｍＬ）中のＩ−９．１（１５２ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）に、ホルムアルデヒド（水中３７％、０．１９ｍＬ、２．５８ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０４４ｍＬ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で２時間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２７３．０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で４０分間撹拌する。反応混合物を濃縮し、水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率>95%, 309; 311 [M+H]+, 保持時間0.75分, LC-MS法Z012_S04.

表４に示す通りの下記の中間体は、適切な中間体から、同様の方式で合成される：
５−ブロモスピロ［インドリン−３，４’−ピペリジン］−２−オン（Ｒ１１）のＴＦＡ塩の合成

ジクロロメタン（３ｍＬ）中のＡＣＴＩＶＡＴＥから購入したＲ８（１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（ａｉｃｄ）（０．５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で４５分間撹拌する。反応混合物を濃縮する。収率１００％。

ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモ−２−オキソ−スピロ［インドリン−３，３’−ピロリジン］−１’−カルボキシレート（Ｒ１２）の合成
アセトニトリル（１．５ｍＬ）中のＺｅｒｅｎｅｘから購入したｔｅｒｔ−ブチル２−オキソスピロ［インドリン−３，３’−ピロリジン］−１’−カルボキシレート（５０．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（３０．５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で５時間撹拌する。反応混合物を水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮する。収率８０％、ｍ／ｚ３６７；３６９［Ｍ＋Ｈ］＋

５−ブロモ−１−メチル−スピロ［インドリン−３，３’−ピペリジン］−２−オン（Ｒ１３）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−１０．１の合成
ジクロロメタン（２０ｍＬ）中のＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから購入した１−メチルスピロ［インドール−３，３’−ピペリジン］−２（１Ｈ）−オン（１．０ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（０．６４ｍＬ、４．６２ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（９５８．６ｍｇ、４．３９ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。相を分離し、水層をＤＣＭで抽出する。合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。
収率>95%, m/z 261 [M+H - tert-ブチル]+, 保持時間1.06分, LC-MS法Z020_S01.

ステップ２：中間体Ｉ−１０．２の合成
アセトニトリル（３５ｍＬ）中のＩ−１０．１（１．５４ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（８５６．７ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
収率93%, m/z 340 [M+H - tert-ブチル]+, 保持時間1.13分, LC-MS法Z020_S01.

ステップ３：Ｒ１３の合成
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のＩ−１０．２（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、凍結乾燥する。残留物をジクロロメタンに溶解し、１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液およびブラインで抽出する。有機層を乾燥させ、真空中で濃縮する。
収率88%, m/z 295; 297 [M+H]+, 保持時間0.59分, LC-MS法Z020_S01.

ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−オキソ−スピロ［フロ［３，４−ｃ］ピリジン−１，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（Ｒ１４）の合成
ステップ１：中間体Ｉ−１１．１の合成
中間体Ｉ−１１．１の合成は、欧州特許出願公開第２０７２５１９号、３６頁において記述されている。−７８℃で、１．６Ｍのｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（９４ｍＬ、１５０．８１ｍｍｏｌ）を、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（１６．１４ｇ、１１３．１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１１０ｍＬ）に滴下添加し、取得された溶液を１時間撹拌する。その後、６−クロロニコチン酸（６．０ｇ、３７．７０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）を１時間に亘り滴下添加し、反応混合物を２時間撹拌する。１−ベンジル−４−ピペリドン（２１．６ｇ、１１３．１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）を−７８℃で滴下添加する。２時間撹拌した後、水（７０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温に温める。

水層を分離し、有機層を１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（２×７５ｍＬ）で抽出する。取得された水層をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で抽出し、濃塩酸を添加することによって水層を酸性化する（ｐＨ約１）。
１時間撹拌した後、沈殿物を濾過除去し、水で洗浄し、酢酸エチルに溶解する。
有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。残留物をジエチルエーテルで洗浄する。
収率66%, m/z 329 [M+H]+, 保持時間0.72分, LC-MS法Z012_S04.
表５に示す通りの下記の中間体を、適切な中間体から同様の方式で合成する。

ステップ２：中間体Ｉ−１１．２の合成
ジクロロエタン（１５ｍＬ）中のＩ−１１．１（２．０ｇ、６．０８ｍｍｏｌ）を０℃に冷却する。１−クロロエチルクロロホルメート（１．９８ｍＬ、１８．２５ｍｍｏｌ）のジクロロエタン（５ｍＬ）溶液をゆっくり添加し、反応混合物を０℃でさらに１５分間撹拌する。その後、反応混合物を加熱還流させ、一晩撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮する。残留物をメタノールに溶解し、３０分間加熱還流させ、この時間の間に沈殿物が形成される。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、沈殿物を濾過除去し、Ｉ−１１．２（塩酸塩）を得る。
収率６１％。

ステップ３：Ｒ１４の合成
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のＩ−１１．２（５００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（０．５１ｍＬ、３．６４ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（３９６．６ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で２０分間撹拌し、水および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層を乾燥させ、真空中で濃縮する。収率９１％。

３−クロロ−１’−メチル−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−５，４’−ピペリジン］−７−オン（Ｒ１５）の合成
−７８℃で、１．６Ｍのｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（２．３８ｍＬ、３．８１ｍｍｏｌ）を、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（０．７６ｍＬ、４．４３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５ｍＬ）に滴下添加し、取得された溶液をこの温度で１時間撹拌する。その後、５−クロロ−２−ピリジンカルボン酸（０．２ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１ｍＬ）を５分に亘り滴下添加し、反応混合物を４５分間撹拌する。１−メチル−４−ピペリドン（０．４４ｍＬ、３．８１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１ｍＬ）を−７８℃で滴下添加する。１時間後、水（１０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温に温める。

酢酸エチル（１５ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（１５ｍＬ）を反応混合物に添加し、水層を分離する。有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（２×１０ｍＬ）で抽出する。濃塩酸を添加することによって合わせた水相を酸性化する（ｐＨ約１）。

１時間撹拌した後、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液を添加することによって反応混合物を塩基性化し、酢酸エチル（４×２５ｍＬ）で抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、Ｒ１５を得る。
収率21%, m/z 253, 255 [M+H]+, 保持時間0.41分, LC-MS法Z012_S04.

６−クロロ−１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［フロ［３，４−ｃ］ピリジン−１，４’−ピペリジン］−３−オン（Ｒ１６）の合成
ａ）遊離塩基の生成：
Ｉ−１１．２（２００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を乾燥メタノールに部分的に溶解し、ポリマー結合テトラアルキル−アンモニウムカーボネート（Ａｌｄｒｉｃｈ、５４０２９３）を添加し、この混合物を室温で２時間撹拌する。ポリマー結合テトラアルキル−アンモニウムカーボネートを濾過除去し、メタノールを真空中で除去し、Ｉ−１１．２の遊離塩基を送達する。
ｂ）Ｉ−１１．２の遊離塩基を乾燥ジクロロメタン（３ｍＬ）／乾燥テトラヒドロフラン（１ｍＬ）混合物に溶解し、３−オキセタノン（０．２３ｍＬ、３．６４ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０６ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で７５分間撹拌し、次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。
収率80%, m/z 295 [M+H]+, 保持時間0.75分, LC-MS法Z011_S03.

６−クロロ−１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピリジン−１，４’−ピペリジン］（Ｒ１７）の合成
ステップ１：中間体Ｉ−１１．３の合成
メタノール（１５ｍＬ）中のＩ−１１．１（１．００ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）に、水素化ホウ素ナトリウム（３４５ｍｇ、９．１２ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、反応混合物を室温で２０時間撹拌する。追加の水素化ホウ素ナトリウム（７５０ｍｇ、１９．８２ｍｍｏｌ）を３分割（それぞれ２５０ｍｇ）で反応混合物に５時間に亘り添加する。反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで希釈する。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−１１．３を得る。
収率40%, m/z 333 [M+H]+, 保持時間0.91分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ２：中間体Ｉ−１１．４の合成
乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＩ−１１．３（３７８ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（０．９５ｍＬ、６．８１ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（０．２６ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。反応混合物を室温にし、１時間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、粗生成物を得て、これを次のステップにおいてそれ以上精製することなく使用する。
収率95%, m/z 315 [M+H]+, 保持時間1.06分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ３：中間体Ｉ−１１．５の合成
Ｉ−１１．４（２４６ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）のジクロロエタン（４ｍＬ）溶液に、１−クロロエチルクロロホルメート（０．４２ｍＬ、３．９１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を加熱還流し、３時間撹拌する。ジクロロエタンを真空中で除去し、取得された残留物をメタノール（３ｍＬ）に再溶解し、取得された溶液を３０分間還流させる。反応混合物を室温に冷却し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−１１．５を得る。
収率72%, m/z 225 [M+H]+, 保持時間0.71分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ４：Ｒ１７の合成
Ｉ−１１．５（１１４ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、３−オキセタノン（０．０５ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０４４ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２６９ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温でさらに１５分間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、Ｒ１７を得る。
収率62%, m/z 281 [M+H]+, 保持時間0.76分, LC-MS法Z011_S03.

２−クロロ−１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−５−オン（Ｒ１８）の合成
ステップ１：中間体Ｉ−１２．１の合成
ＡＢＬＯＣＫＰＨＡＲＭＡＴＥＣＨから購入した２−アミノ−６−クロリノニコチノニトリル（ｃｈｌｏｒｉｎｏｎｉｃｏｔｉｎｏｎｉｔｒｉｌｅ）（２．０ｇ、１３．０２ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）に溶解し、ヨウ化銅（Ｉ）（３．７２ｇ、１９．５４ｍｍｏｌ）、ジヨードメタン（８．３９ｍＬ、１０４．２ｍｍｏｌ）および亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．２０ｍＬ、５２．１ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を１．５時間還流させ、室温に冷却し、すべての揮発性物質を真空中で除去する。取得された残留物を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、Ｉ−１２．１を得る（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル）。
収率74%, m/z 265 [M+H]+, 保持時間0.90分, LC-MS法Z012_S04.

ステップ２：中間体Ｉ−１２．２の合成
Ｉ−１２．１（１．０ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（７５３ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、反応混合物を−６５℃に冷却する。塩化イソプロピルマグネシウム−塩化リチウム複合体（ＴＨＦ中１．３ｍｏｌ／Ｌ、３．７８ｍＬ、４．９２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物をこの温度でさらに１０分間撹拌する。その後、反応混合物を室温に達しさせ、２０分間撹拌し、メタノール（０．８ｍＬ、１９．７ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を０℃に冷却し、５０％硫酸水溶液（２．０ｍＬ）を滴下添加する。反応混合物を室温に温め、一晩撹拌する。形成された白色の沈殿物を濾過除去し、ＴＨＦで洗浄し、真空中で乾燥させ、粗Ｉ−１２．２（硫酸塩）を白色の固体として得る。粗生成物を、それ以上精製することなく次のステップで使用した。
収率94%, m/z 239 [M+H]+, 保持時間0.69分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ３：Ｒ１８の合成
ａ）遊離塩基の生成：
Ｉ−１２．２（１５０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）／水（２ｍＬ）混合物に溶解し、ポリマー結合テトラアルキルアンモニウムカーボネート（Ａｌｄｒｉｃｈ、５４０２９３）を添加し、この混合物を室温で１時間撹拌する。ポリマー結合テトラアルキルアンモニウムカーボネートを濾過除去し、メタノールおよび水を真空中で除去し、Ｉ−１２．２の遊離塩基を送達する。
ｂ）取得された残留物をＴＨＦ（２ｍＬ）／水（０．１ｍＬ）混合物に再溶解し、３−オキセタノン（０．０４ｍＬ、０．６７ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０３８ｍＬ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、Ｒ１８（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）を得る。
収率18%, m/z 295 [M+H]+, 保持時間0.74分, LC-MS法Z011_S03.

２−クロロ−１’−（オキセタン−３−イル）スピロ［５Ｈ−フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］（Ｒ１９）の合成

ステップ１：中間体Ｉ−１２．３の合成
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中のＩ−１２．２（３．２５ｇ、９．６５ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（４．０４ｍＬ、２８．９５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２０分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（２．１１ｇ、９．６５ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を室温で９０分間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、取得された残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝９５：５〜６０：４０）によって精製し、Ｉ−１２．３を得る。
収率49%, m/z 239 [M-Boc+H]+, 保持時間1.03分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ２：中間体Ｉ−１２．４の合成
エタノール（５００ｍＬ）中のＩ−１２．３（１０．０ｇ、２９．５２ｍｍｏｌ）に、水素化ホウ素ナトリウム（２．２３ｇ、５９．０３ｍｍｏｌ）および塩化カルシウム（６．５５ｇ、５９．０３ｍｍｏｌ）を２分割で添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌する。ＨＰＬＣ−ＭＳは、所望の生成物への８５％の変換を示した。さらなる量の水素化ホウ素ナトリウム（３５０ｍｇ、９．２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で６時間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、エタノールを真空中で除去し、取得された残留物を酢酸エチルとすり混ぜる。形成された沈殿物を濾過除去し、母液を酢酸エチルで数回抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。取得された残留物をアセトニトリルとすり混ぜ、形成された沈殿物を濾過除去し、母液を真空中で濃縮し、この手順をさらに２回繰り返す。沈殿物を合わせ、真空中で乾燥させ、Ｉ−１２．４を得る。
収率54%, m/z 243 [M+H-Boc]+, 保持時間0.97分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ３：中間体Ｉ−１２．５の合成
乾燥ＴＨＦ（７５ｍＬ）中のＩ−１２．４（６．７７ｇ、１７．７７ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（１４．８４ｍＬ、１０６．６４ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（５．５０ｍＬ、７１．０９ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。反応混合物を室温に達しさせ、１時間撹拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、ジクロロメタンで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮し、取得された残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝９５：５〜７２：２８）によって精製し、Ｉ−１２．５を得る。
収率65%, m/z 225 [M+H-Boc]+, 保持時間1.07分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ４：中間体Ｉ−１２．６の合成
ジクロロメタン（１５ｍＬ）中のＩ−１２．５（４．１３ｇ、１２．０７ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で３時間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、取得された残留物をメタノール（５０ｍＬ）に再溶解し、ポリマー結合テトラアルキル−アンモニウムカーボネート（Ａｌｄｒｉｃｈ、５４０２９３）を添加し、この混合物を室温で３０分間撹拌する。ポリマー結合テトラアルキル−アンモニウムカーボネートを濾過除去し、メタノールを真空中で除去し、Ｉ−１２．６を送達する。
収率99%, m/z 225 [M+H]+, 保持時間0.74分, LC-MS法Z011_S03.

ステップ５：Ｒ１９の合成
Ｉ−１２．６（３．６２ｇ、１２．０８ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）、３−オキセタノン（１．１６ｍＬ、１８．１３ｍｍｏｌ）に溶解し、酢酸（６９１μＬ、１２．０８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２０分間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６．７４ｇ、３０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２５分撹拌する。反応混合物をメタノールでクエンチし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで数回抽出する。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中で濃縮する。取得された残留物をアセトニトリル／メタノール混合物（９：１）とすり混ぜ、形成された沈殿物を濾過除去し、母液を真空中で濃縮し、この手順をさらに２回繰り返す。沈殿物を合わせ、真空中で乾燥させ、２．４７ｇのＲ１９を得る。母液を真空中で濃縮し、取得された残留物をアセトニトリルに再溶解し、逆相ＨＰＬＣによって精製し、さらなる量（０．３２ｇ）のＲ１９を得る。
収率78%, m/z 281 [M+H]+, 保持時間0.78分, LC-MS法Z011_S03.

（ｒｔ＝保持時間）。脱保護方法：ＴＳＡ（トルエンスルホン酸、例１参照）。ニトリル基に隣接する炭素原子における立体化学を割り当てる：立体結合はＳ−異性体を意味する。

例の分析データ

薬理学的データ
本発明の他の特色および利点は、本発明の原理を例として例証する、下記のより詳細な例から明らかとなるであろう。

ヒトＤＰＰＩ（カテプシンＣ）の阻害
材料：マイクロタイタープレート（オプティプレート−３８４Ｆ）は、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒから購入した（製品番号１０６００７２７０）。基質Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣは、Ｂｉｏｔｒｅｎｄから（製品番号８０８７５６カスタムペプチド）であった。
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ：ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ；製品番号Ａ３０５９）およびジチオスレイトール（ＤＴＴ：ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ；製品番号Ｄ０６３２）は、Ｓｉｇｍａからであった。ＴａｇＺｙｍｅ緩衝液はＲｉｅｄｅｌ−ｄｅ−Ｈａｅｎから（製品番号０４２６９）であり、ＮａＣｌはＭｅｒｃｋから（製品番号１．０６４０４．１０００）であり、モルホリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ：ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄ）はＳｅｒｖａから（製品番号２９８３４）であった。ＤＰＰ１阻害剤Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＭＫはＭＰＢｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ（製品番号０３ＤＫ００６２５）から購入した。組換えヒトＤＰＰＩはＰｒｏｚｙｍｅｘから購入した。すべての他の材料は、市販されている最高グレードのものであった。

下記の緩衝液を使用した：ＭＥＳ緩衝液：２５ｍＭのＭＥＳ、５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、ｐＨ６．０に調整したもの、０．１％ＢＳＡを含有する；ＴＡＧＺｙｍｅ緩衝液：２０ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ＨＣｌでｐＨ２０６．０に調整したもの。
アッセイ条件：組換えヒトＤＰＰＩをＴＡＧＺｙｍｅ緩衝液中で希釈して、１Ｕ／ｍｌ（それぞれ３８．１μｇ／ｍｌ）とし、次いで、システアミン水溶液（２ｍＭ）と１：２比で混合することによって活性化し、室温で５分間インキュベートした。
アクアビデスト５（４％ＤＭＳＯを含有する、最終ＤＭＳＯ濃度１％）中の５ｕＬの試験化合物（最終濃度０．１ｎＭ〜１００μＭ）を、ＭＥＳ緩衝液中１０μＬのＤＰＰＩ（最終濃度０．０１２５ｎｇ／μＬ）と混合し、１０分間インキュベートした。次いで、ＭＥＳ緩衝液中５μＬの基質（最終濃度５０μＭ）を添加した。次いで、マイクロタイタープレートを室温で３０分間インキュベートした。次いで、１０ＭＥＳ緩衝液中１０μＬのＧｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＭＫ（最終濃度１μＭ）を添加することによって、反応を停止した。ウェル中の蛍光は、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓスペクトラマックスＭ５蛍光リーダー（Ｅｘ３６０ｎｍ、Ｅｍ４６０ｎｍ）またはＥｎｖｉｓｉｏｎ蛍光リーダー（Ｅｘ３５５ｎｍ、Ｅｍ４６０ｎｍ）を使用して決定した。

各アッセイマイクロタイタープレートは、非阻害酵素活性（１００％対照；高値）のための基準としてのビヒクル対照（ビデスト＋０．０７５％１５ＢＳＡ中１％ＤＭＳＯ）を加えたウェル、およびバックグラウンド蛍光（０％対照；低値）のための対照としての阻害剤（ビデスト＋１％ＤＭＳＯ＋０．０７５％ＢＳＡ中Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＭＫ、最終濃度１μＭ）を加えたウェルを含有していた。
データの分析は、下記の式を使用してバックグラウンド蛍光を２０減算した後、ビヒクル対照の蛍光と比較した、試験化合物の存在下における蛍光のパーセンテージを算出することによって実施した：
（ＲＦＵ（試料）−ＲＦＵ（バックグラウンド））＊１００／（ＲＦＵ（対照）−ＲＦＵ（バックグラウンド））
これらの算出からのデータを使用して、ＤＰＰＩの阻害のためのＩＣ５０値をそれぞれ生成した。

試験化合物とのインキュベーション後の、Ｕ９３７細胞質溶解物調製物における好中球エラスターゼ活性の決定
材料：
オプティプレート３８４Ｆは、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒから（製品番号６００７２７０番）購入した。２４ウェルヌンクロン細胞培養プレート（１４２４７５番）および９６ウェルプレート（２６７２４５番）は、Ｎｕｎｃからであった。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ：Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄ）は、Ｓｉｇｍａから（製品番号Ｄ８４１８）であった。ノニデット−Ｐ４０（ＮＰ４０）は、ＵＳＢｉｏｌｏｇｉｃａｌから（製品番号Ｎ３５００）であった。
好中球エラスターゼに特異的な基質は、Ｂａｃｈｅｍから（ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ；製品番号Ｉ−１２７０）であった。
ヒト好中球エラスターゼは、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍから（製品番号３２４６８１）であった。

緩衝液：
トリス緩衝液（１００ｍＭトリス；１ＭＮａＣＬ；ｐＨ７．５）
トリス緩衝液＋ＨＳＡ０．１％；Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍからのヒト血清アルブミン（カタログ番号１２６６５８）
セリン−プロテアーゼ緩衝液（２０ｍＭトリス；１００ｍＭＮａＣＬ；ｐＨ７．５）＋０．１％ＨＳＡ
セリンプロテアーゼ溶解緩衝液：２０ｍＭトリス−ＨＣＬ；１００ｍＭＮａＣｌｐＨ７．５；＋０．２％ノニデット−Ｐ４０；
ＰＢＳ：ＣａおよびＭｇを加えていないリン酸緩衝生理食塩水、Ｇｉｂｃｏから
細胞培養：
懸濁液中、３７℃および５％ＣＯ２で培養した、ＥＣＡＣＣからのＵ９３７（カタログ番号８５０１１４４０）。
細胞密度：０．２〜１Ｍｉｏ細胞／ｍｌ。
培地：Ｇｉｂｃｏからの、１０％ＦＣＳを加えたＲＰＭＩ１６４０グルタマックス（６１８７０番）

細胞播種および処理：
１００％ＤＭＳＯ中の化合物を、１０％ＤＭＳＯを加えた培地（−ＦＣＳ）中で希釈し、計画された実験に従ってさらに希釈した。
２０μｌの化合物溶液を、２４ウェルプレートのそれぞれのウェルに移し、１×１０⁵細胞／ｍｌを含有する２ｍｌの細胞懸濁液／ウェルで希釈した（ＤＭＳＯの最終濃度＝０．１％）。化合物希釈係数＝１００
化合物（最大７つの濃縮物）を、３つのウェルを用いて三通りに、ＤＭＳＯ０．１％対照について試験し、培地変更なしに、３７℃、５％ＣＯ２および９５％相対湿度で４８時間インキュベートした。

細胞収穫および細胞溶解物：
細胞懸濁液を、２ｍｌの９６ウェルアッセイブロックに移す。細胞を遠心分離（５００×ｇ；１０分；室温）によって培地から分離し、上清を廃棄する。１ｍｌのＰＢＳに再懸濁し、遠心分離（５００×ｇ；１０分；室温）し、細胞をＰＢＳで２回洗浄する。８０μｌのセリンプロテアーゼ溶解緩衝液（氷冷）を細胞ペレットに添加し、ペレットを再懸濁し、氷上に１０分間保存する。４℃で１０分間の１０００×ｇでの遠心分離により、残屑を除去する。８０〜１００μｌの溶解物上清を９６ウェルプレートに移し、−８０℃で直ちに保存する。

好中球エラスターゼ活性アッセイ：
凍結した溶解物を３７℃で１０分間解凍し、氷上に保存した。タンパク質含有量をブラッドフォードタンパク質アッセイで決定した。溶解物を、セリンプロテアーゼ緩衝液＋ＨＳＡ中０．２〜０．５ｍｇ／ｍｌタンパク質に希釈した。

標準：ＮＥ（トリス緩衝液中１００μｇ／ｍｌのストック溶液；−８０℃で保存したもの）をトリス緩衝液＋ＨＳＡ中で７５０ｎｇ／ｍｌに希釈し、標準曲線のためにさらに１：２連続希釈した。緩衝液、ブランク、標準および溶解物試料を、３８４ウェルプレートに移した。

ピペッティング計画
ブランク：５μｌのトリス緩衝液＋１０μｌのセリンプロテアーゼ緩衝液＋５μｌの基質
標準：５μｌのトリス緩衝液＋１０μｌのＮＥ（異なる濃度）＋５μｌの基質
溶解物：５μｌのトリス緩衝液＋１０μｌの溶解物（Ｌｙｓａｔ）＋５μｌの基質
蛍光の増大（Ｅｘ３６０ｎｍ／Ｅｍ４６０ｎｍ）は、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅスペクトラマックスＭ５蛍光リーダーで３０分後に決定する。結果を、エクセルの式関数を使用して、ｎｇ／ｍｇ溶解物タンパク質に内挿する。化合物で処理した溶解物試料におけるパーセント阻害を、ＤＭＳＯで処理した対照−試料と比べて算出する（１００−（化合物−試料＊１００）／対照−試料）。

試験化合物は、好中球エラスターゼの０％〜１００％阻害の間の値を与えるであろう。ＩＣ５０は、ＧｒａｐｈＰａｄプリズム；非線形当てはめ（ログ（阻害剤）対応答−−可変傾斜）を使用して算出する。ＩＣ５０値は試験化合物の濃度として内挿され、これは、５０％（ＤＭＳＯで処理した対照と比べて）の好中球エラスターゼ活性低減につながる。

ヒトカテプシンＫの阻害
材料：
マイクロタイタープレート（オプティプレート−３８４Ｆは、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒから購入した（製品番号６００７２７０）。基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＡＭＣは、Ｂｉｏｍｏｌから（製品番号Ｐ−１４２）であった。Ｌ−システイン（製品番号１６８１４９）は、Ｓｉｇｍａからであった。酢酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍａｃｔｅｔａｔｅ）はＭｅｒｃｋから（製品番号６２６８．０２５０）であり、ＥＤＴＡはＦｌｕｋａから（製品番号０３６８０）であった。阻害剤Ｅ−６４は、Ｓｉｇｍａから購入した（製品番号Ｅ３１３２）。組換えヒトカテプシンＫプロ酵素は、Ｂｉｏｍｏｌから購入した（製品番号ＳＥ−３６７）。すべての他の材料は、市販されている最高グレードのものであった。
下記の緩衝液を使用した：活性化緩衝液：３２．５ｍＭの酢酸ナトリウム、ＨＣｌでｐＨ３．５に調整したもの、アッセイ緩衝液：１５０ｍＭの酢酸ナトリウム、４ｍＭのＥＤＴＡ、２０ｍＭのＬ−システイン、ＨＣｌでｐＨ５．５に調整したもの。
アッセイ条件：
プロ酵素を活性化するために、５μｌのプロカテプシンＫを１ｕｌの活性化緩衝液と混合し、室温で３０分間インキュベートした。

アクアビデスト（４％ＤＭＳＯを含有する、最終ＤＭＳＯ濃度１％）中の５μＬの試験化合物（最終濃度０．１ｎＭ〜１００μＭ）を、アッセイ緩衝液（最終濃度２ｎｇ／μＬ）中１０μＬのカテプシンＫと混合し、１０分間インキュベートした。次いで、アッセイ緩衝液中５μＬの基質（最終濃度１２．５μＭ）を添加した。次いで、プレートを室温で６０分間インキュベートした。次いで、アッセイ緩衝液中１０μＬのＥ６４（最終濃度１μＭ）を添加することによって、反応を停止した。ウェル中の蛍光は、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓスペクトラマックスＭ５蛍光リーダー（Ｅｘ３６０ｎｍ、Ｅｍ４６０ｎｍ）を使用して決定した。

各アッセイマイクロタイタープレートは、非阻害酵素活性（１００％対照；高値）のための基準としてのビヒクル対照（ビデスト中１％ＤＭＳＯ）を加えたウェル、およびバックグラウンド蛍光（０％対照；低値）のための対照としての阻害剤（ビデスト＋１％ＤＭＳＯ中Ｅ６４、最終濃度１μＭ）を加えたウェルを含有している。データの分析は、バックグラウンド蛍光を減算した後、ビヒクル対照の蛍光と比較した、試験化合物の存在下における蛍光のパーセンテージを算出することによって実施した：
（ＲＦＵ（試料）−ＲＦＵ（バックグラウンド））＊１００／（ＲＦＵ（対照）−ＲＦＵ（バックグラウンド））

これらの算出からのデータを使用して、カテプシンＫの阻害のためのＩＣ₅₀値をそれぞれ生成した。

ヒト肝臓ミクロソームを用いる代謝的安定性の決定
試験化合物の代謝退化を、プールしたヒト肝臓ミクロソームを用いて３７℃でアッセイする。時点ごとに１００μｌの最終インキュベーション体積は、ＴＲＩＳ緩衝液ｐＨ７．６（０．１Ｍ）、塩化マグネシウム（５ｍＭ）、ミクロソームタンパク質（１ｍｇ／ｍｌ）および１μＭの最終濃度の試験化合物を含有している。３７℃での短いプレインキュベーション期間の後、ベータ−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、還元形態（ＮＡＤＰＨ、１ｍＭ）の添加によって反応を開始し、異なる時点の後、アリコートをアセトニトリル中に移すことによって終了させる。加えて、ＮＡＤＰＨを用いないインキュベーションにおいてＮＡＤＰＨ非依存性退化をモニターし、最終時点で終了させる。ＮＡＤＰＨ非依存性インキュベーション後に残っている試験化合物［％］は、パラメーターｃ（対照）（代謝的安定性）によって反映される。クエンチしたインキュベーションを、遠心分離（１０’０００ｇ、５分）によってぺレット化する。上清のアリコートを、親化合物の量についてＬＣ−ＭＳ／ＭＳによってアッセイする。

半減期（ｔ１／２ＩＮＶＩＴＲＯ）を、濃度−時間プロフィールの片対数プロットの傾斜によって決定する。固有クリアランス（ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ）は、インキュベーション中におけるタンパク質の量を考慮することによって算出される：
ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ［μｌ／分／ｍｇタンパク質］＝（ｌｎ２／（半減期［分］＊タンパク質含有量［ｍｇ／ｍｌ］））＊１’０００。

上述した代謝的安定性アッセイにおける選択された化合物の半減期（ｔ１／２ＩＮＶＩＴＲＯ）値を、下記の表に収載する。

標的結合マウスモデル
化合物による処理：
末梢の好中球における好中球エラスターゼ活性に対する試験化合物の効果をモニターするために、雌性Ｃｒｌ：ＮＭＲＩマウスを下記のように処理した。
群１（６匹の動物）：０．５％Ｎａｔｒｏｓｏｌ（ｐＨ２〜３）中の０．５ｍｇ／ｋｇの試験化合物
群２（６匹の動物）：０．５％Ｎａｔｒｏｓｏｌ（ｐＨ２〜３）
群３（２匹の動物）：０．５％Ｎａｔｒｏｓｏｌ（ｐＨ２〜３）
試験化合物またはＮａｔｒｏｓｏｌ溶液を、研究第１週の月曜日から金曜日まで毎日７：００ａｍおよび４：００ｐｍに、ならびに第２週の月曜日および火曜日（７：００ａｍおよび４：００ｐｍ）に適用した。試験化合物またはＮａｔｒｏｓｏｌを、経口的に適用した。

ＬＰＳ誘発および気管支肺胞上皮洗浄物の調製：
第２週の水曜日に、動物を上記のような試験化合物またはＮａｔｒｏｓｏｌ溶液（７：００ａｍ）、それに続いてＬＰＳ（リポ多糖）吸入誘発で処理した。
群１および２：ＭｉｎｉＨｅａｒｔＨｉ−Ｆｌｏ連続ネブライザー（Ｗｅｓｔｍｅｄ）を使用したＬＰＳの２０分の吸入（大腸菌セロタイプ０５５：Ｂ５；ＰＢＳ中１ｍｇ／ｍｌ）
群３：ＬＰＳ誘発はなし
ＬＰＳ誘発の４時間後、動物毎に２×１ｍｌのハンクス塩溶液を使用した気管支肺胞上皮洗浄物をすべての動物から調製し、ＳｙｓｍｅｘＸＴ−１８００ｉを使用して洗浄液中の細胞数を決定した。洗浄液中の細胞を遠心分離によって分離し、溶解緩衝液（１００ｍＭのＴＲＩＳ、ｐＨ７．５、１ＭのＮａＣｌ、０．２％ＮＰ４０）中で溶解した。

好中球エラスターゼ（ＮＥ）測定：
ＢＡＬＦ（気管支肺胞上皮洗浄液）細胞溶解物中のＮＥ活性を、蛍光ＮＥ基質ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ）を使用して測定した。３８４ウェルプレート（Ｏｐｔｉｐｌａｔｅ３８４ｆ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）において、１０μＬの細胞溶解物を、５μＬのアッセイ緩衝液（２０ｍＭのトリス、ｐＨ７．５、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．１％ヒト血清アルブミン）および５μＬの基質（アッセイ緩衝液中１ｍＭ）と混合した。反応混合物を室温で６０分間インキュベートし、蛍光を測定した（３６０ｎｍの励起、４６０ｎｍの発光）。各動物について取得された蛍光値をＢＡＬＦ好中球数に規準化した。試験化合物によるＮＥ活性の阻害を計算するために、群３の平均蛍光値を群１および２についての蛍光値から減算し、群１におけるＮＥ活性の阻害％を、計算した群２における平均蛍光値と比較した。

カテプシンＣ阻害剤による事前処理の後のＢＡＬＦ溶解物中の好中球エラスターゼ活性（７日、ｂｉｄ（１日２回）投与）を、下記の表に収載する。

カテプシンＣリガンド複合体の結晶構造
方法
タンパク質：
組換えヒトカテプシンＣ（ＣａｔＣ）を、標準的な分子生物学的プロトコル（文献：１〜３）によって生成した。

結晶化およびソーキング：
結晶化の前に、タンパク質緩衝液を、ＮＡＰ１０カラム（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）で、２０ｍＭのビス−トリス、ｐＨ７．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのＥＤＴＡ、２ｍＭのＤＴＴに交換した。タンパク質試料を９〜１０ｍｇ／ｍＬに濃縮した。結晶を１．０μＬのタンパク質および１．０μＬのウェル溶液（０．１Ｍのビス−トリス−プロパン、ｐＨ６．０〜６．５、１８〜２０％（ｗ／ｖ）ＰＥＧ３３５０、２００ｍＭのＮａＦ、１ｍＭのＤＤＴ）を使用した懸滴中で２０℃で成長させた。結晶が一晩で現れ、２〜３日以内でフルサイズに成長した。１ｍＭのそれぞれのリガンド（ＤＭＳＯ中の１００ｍＭのストック溶液からの希釈による）を補充したウェル溶液中でアポ型結晶を一晩ソーキングすることによってリガンド共構造を得た。次いで、データ収集の前に、２０％グリセロールおよびウェル溶液を凍結保護剤として使用して、結晶を液体窒素中で凍結した。

データ収集、構造解析および精密化：
すべての回折データは、回転陽極発生装置（リガク）上でＣｕＫα線を使用して１００Ｋで集め、ＸＤＳでプロセシングした（文献：４）。リガンド共構造を差フーリエ法によって解析し、プログラムｃｏｏｔを使用したマニュアルリビルディングと反復実行するプログラムａｕｔｏＢｕｓｔｅｒ（ＧｌｏｂａｌＰｈａｓｉｎｇＬｔｄ．）で精密化した（文献：５）。最終的なデータプロセシングおよび精密化統計値を、表１３において収載する。プログラムＰｙＭＯＬ（ＤｅＬａｎｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＬＬＣ）を図の調製のために使用した。

結果
カテプシンＣリガンド複合体の構造：
ヒトカテプシンＣ（ＣａｔＣ）の構造を、文献（文献２）において４つの同一のサブユニットを含有する四量体として記載する。各サブユニットは、３つの鎖からなり、軽鎖および重鎖は、触媒ドメインを形成し、一方、いわゆる除外ドメインは、Ｓ２ポケットを越えた活性部位溝をブロックし、ＣａｔＣのエクソペプチダーゼ活性に関与している。例１１および１６と複合したＣａｔＣの構造（表１４、図１）を決定して、このクラスの化合物の結合モードを解明した。例１１および１６は、Ｃｙｓ２３４とのニトリル基の共有結合的相互作用を介して結合する。例１１は、（Ｓ）配置でニトリル基に隣接する炭素原子を有する単一のエナンチオマーであり、一方、例１６（スピロ環状炭素原子はＲＳ立体配置を有する）はジアステレオマーの混合物である。二環式アミノ酸は、酵素Ｓ１ポケットに到達し、ここでこれはＧｌｙ２７７およびＡｓｎ３８０の骨格原子、ならびにＡｓｐ１の側鎖への水素結合を介して固着している。ビス−アリール系は、Ｓ２ポケット中に配向され、ここでこれは除外ドメインの残基Ａｓｐ１およびＰｒｏ３へのファンデルワールス相互作用に関与している。驚くべきことに、本発明者らは、スピロ環状アミン：例１１におけるスピロ−アゼチジンおよび例１６におけるスピロ−ピロリジンのさらなる相互作用を観察した。いずれにしても、塩基性窒素原子は、Ｇｌｕ２７５への塩橋を形成し、これはこの化合物クラスの高い酵素活性と一致する。

参照文献：

医薬組成物
式Ｉの化合物を投与するための好適な調製物は当業者には明らかであり、例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、サシェ剤、注射剤、吸入剤および散剤等、好ましくは、錠剤を含む。

好適な錠剤は、例えば、式Ｉによる１つまたは複数の化合物と、公知の賦形剤、例えば、不活性な希釈剤、担体、崩壊剤、アジュバント、界面活性剤、結合剤および／または滑沢剤とを混合することによって得てもよい。錠剤はまた、いくつかの層で構成し得る。

組合せ
一般式Ｉの化合物を、単独で、または本発明に従う式Ｉの他の活性物質と組み合わせて使用してよい。一般式Ｉの化合物を、他の薬理的活性物質と組み合わせてもよい。これらは、β２−アドレナリン受容体アゴニスト（短時間および長時間作用型）、抗コリン剤（短時間および長時間作用型）、抗炎症ステロイド薬（経口および局所コルチコステロイド）、クロモグリケート、メチルキサンチン、解離性グルココルチコイド模倣薬、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４−阻害剤、ＰＤＥ７−阻害剤、ＬＴＤ４アンタゴニスト、ＥＧＦＲ−阻害剤、ドーパミンアゴニスト、ＰＡＦアンタゴニスト、リポキシンＡ４誘導体、ＦＰＲＬ１モジュレーター、ＬＴＢ４−受容体（ＢＬＴ１、ＢＬＴ２）アンタゴニスト、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、ヒスタミンＨ４受容体アンタゴニスト、デュアルヒスタミンＨ１／Ｈ３−受容体アンタゴニスト、ＰＩ３−キナーゼ阻害剤、非受容体チロシンキナーゼの阻害剤、例えば、ＬＹＮ、ＬＣＫ、ＳＹＫ、ＺＡＰ−７０、ＦＹＮ、ＢＴＫまたはＩＴＫ、ＭＡＰキナーゼの阻害剤、例えば、ｐ３８、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＪＮＫ１、ＪＮＫ２、ＪＮＫ３またはＳＡＰ、ＮＦ−κＢシグナリング経路の阻害剤、例えば、ＩＫＫ２キナーゼ阻害剤、ｉＮＯＳ阻害剤、ＭＲＰ４阻害剤、ロイコトリエン生合成（ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｅ）阻害剤、例えば、５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯ）阻害剤、ｃＰＬＡ２阻害剤、ロイコトリエンＡ４ヒドロラーゼ阻害剤またはＦＬＡＰ阻害剤、非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ：Ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｇｅｎｔ）、ＣＲＴＨ２アンタゴニスト、ＤＰ１−受容体モジュレーター、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ＣＣＲ３アンタゴニスト、ＣＣＲ⁴アンタゴニスト、ＣＣＲ１アンタゴニスト、ＣＣＲ５アンタゴニスト、ＣＣＲ６アンタゴニスト、ＣＣＲ７アンタゴニスト、ＣＣＲ８アンタゴニスト、ＣＣＲ９アンタゴニスト、ＣＣＲ３０アンタゴニスト、ＣＸＣＲ³アンタゴニスト、ＣＸＣＲ⁴アンタゴニスト、ＣＸＣＲ²アンタゴニスト、ＣＸＣＲ¹アンタゴニスト、ＣＸＣＲ５アンタゴニスト、ＣＸＣＲ６アンタゴニスト、ＣＸ３ＣＲ³アンタゴニスト、ニューロキニン（ＮＫ１、ＮＫ２）アンタゴニスト、スフィンゴシン１−リン酸受容体モジュレーター、スフィンゴシン１リン酸リアーゼ阻害剤、アデノシン受容体モジュレーター、例えば、Ａ２ａ−アゴニスト、プリン作動性受容体（ｒｅｚｅｐｔｏｒｓ）のモジュレーター、例えば、Ｐ２Ｘ７阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）活性化剤、ブラジキニン（ＢＫ１、ＢＫ２）アンタゴニスト、ＴＡＣＥ阻害剤、ＰＰＡＲガンマモジュレーター、Ｒｈｏ−キナーゼ阻害剤、インターロイキン１−ベータ変換酵素（ＩＣＥ）阻害剤、トール様受容体（ＴＬＲ）モジュレーター、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＶＬＡ−４アンタゴニスト、ＩＣＡＭ−１阻害剤、ＳＨＩＰアゴニスト、ＧＡＢＡａ受容体アンタゴニスト、ＥＮａＣ−阻害剤、プロスタシン−阻害剤、マトリプターゼ−阻害剤、メラノコルチン受容体（ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５Ｒ）モジュレーター、ＣＧＲＰアンタゴニスト、エンドセリンアンタゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト、抗ＴＮＦ抗体、抗ＧＭ−ＣＳＦ抗体、抗ＣＤ４６抗体、抗ＩＬ−１抗体、抗ＩＬ−２抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、抗ＩＬ−１３抗体、抗ＩＬ−４／ＩＬ−１３抗体、抗ＴＳＬＰ抗体、抗ＯＸ４０抗体、ムコレギュレーター（ｍｕｃｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ）、免疫治療剤、気道の腫脹に対する化合物、咳に対する化合物、ＶＥＧＦ阻害剤、ＮＥ−阻害剤、ＭＭＰ９阻害剤、ＭＭＰ１２阻害剤だけでなく、２つまたは３つの活性物質の組合せも包含する。

好ましいのは、ベータミメティック、抗コリン剤、コルチコステロイド、ＰＤＥ４−阻害剤、ＬＴＤ４−アンタゴニスト、ＥＧＦＲ−阻害剤、ＣＲＴＨ２阻害剤、５−ＬＯ−阻害剤、ヒスタミン受容体アンタゴニストおよびＳＹＫ−阻害剤、ＮＥ−阻害剤、ＭＭＰ９阻害剤、ＭＭＰ１２阻害剤だけでなく、２つまたは３つの活性物質の組合せ、すなわち：
・コルチコステロイド、ＰＤＥ４−阻害剤、ＣＲＴＨ２−阻害剤またはＬＴＤ４−アンタゴニストを加えたベータミメティック、
・ベータミメティック、コルチコステロイド、ＰＤＥ４−阻害剤、ＣＲＴＨ２−阻害剤またはＬＴＤ４−アンタゴニストを加えた抗コリン剤、
・ＰＤＥ４−阻害剤、ＣＲＴＨ２−阻害剤またはＬＴＤ４−アンタゴニストを加えたコルチコステロイド、
・ＣＲＴＨ２−阻害剤またはＬＴＤ４−アンタゴニストを加えたＰＤＥ４−阻害剤
・ＬＴＤ４−アンタゴニストを加えたＣＲＴＨ２−阻害剤
もである。

適応症
本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容される塩は、医薬品として、特に、ジペプチジルペプチダーゼＩ活性の阻害剤としての活性を有し、故に、以下の治療において使用され得る：

１．呼吸器：気管支、アレルギー性、内因性、外因性、運動誘発性、薬物誘発性（アスピリンおよびＮＳＡＩＤ誘発性を包含する）および粉塵誘発性喘息を包含する、間欠的および持続的両方ならびにすべての重症度の喘息、ならびに気道過敏性の他の原因を包含する気道の閉塞性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；感染性および好酸球性気管支炎を包含する気管支炎；肺気腫；アルファ１−アンチトリプシン欠乏症、気管支拡張症；嚢胞性線維症；サルコイドーシス；農夫肺および関連疾患；過敏性肺炎；特発性線維化性肺胞炎、特発性間質性肺炎、線維症併発抗腫瘍療法、ならびに慢性感染症（結核およびアスペルギルス症ならびに他の真菌感染症を包含する）を包含する肺線維症；肺移植の合併症；肺血管系の脈管および血栓障害、多発性血管炎（ウェゲナー肉芽腫症）ならびに肺高血圧症；気道の炎症および分泌状態に関連する慢性咳、ならびに医原性咳の治療を包含する鎮咳作用；薬物性鼻炎および血管運動神経性鼻炎を包含する急性および慢性鼻炎；神経性鼻炎（花粉症）を包含する通年性および季節性アレルギー性鼻炎；鼻ポリープ；風邪を包含する急性ウイルス感染症、ならびに、呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザ、コロナウイルス（ＳＡＲＳを包含する）およびアデノウイルスによる感染症；

２．皮膚：乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎または他の湿疹性皮膚炎、および遅延型過敏反応；植物性および光線皮膚炎；脂漏性皮膚炎、疱疹状皮膚炎、扁平苔癬、硬化性萎縮性苔癬、壊疽性膿皮症、皮膚サルコイド、円板状エリテマトーデス、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、じんましん、血管性浮腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚好酸球増多症、円形脱毛症、男性型脱毛症、スイート症候群、ウェーバー・クリスチャン症候群、多形性紅斑；感染性および非感染性両方の蜂巣炎；脂肪織炎；皮膚リンパ腫、非黒色腫皮膚がんおよび他の異形成病変；固定薬疹を包含する薬物誘発性障害；

３．目：眼瞼炎；通年性および春季アレルギー性結膜炎を包含する結膜炎；虹彩炎；前部および後部ブドウ膜炎；脈絡膜炎；網膜に影響を及ぼす自己免疫、変性または炎症性障害；交感性眼炎を包含する眼炎；サルコイドーシス；ウイルス、真菌および細菌を包含する感染症；
４．泌尿生殖器：間質性および糸球体腎炎を包含する腎炎；ネフローゼ症候群；急性および慢性（間質性）膀胱炎ならびにハナー潰瘍を包含する膀胱炎；急性および慢性尿道炎、前立腺炎、精巣上体炎、卵巣炎および卵管炎；外陰腟炎；ペイロニー病；勃起不全（男性および女性両方）；
５．同種移植の拒絶反応：例えば、腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚もしくは角膜の移植後、または輸血後の、急性および慢性；あるいは慢性移植片対宿主病；

６．関節リウマチ、過敏性腸症候群、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、橋本甲状腺炎、バセドウ病、アジソン病、真性糖尿病、特発性血小板減少性（ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐａｅｎｉｃ）紫斑病、好酸球性筋膜炎、高ＩｇＥ症候群、抗リン脂質症候群およびセザリー（Ｓａｚａｒｙ）症候群を包含する、他の自己免疫およびアレルギー性障害；
７．腫瘍学：前立腺、乳房、肺、卵巣、膵臓、腸および結腸、胃、皮膚および脳腫瘍を包含する一般的ながん、ならびに、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫等、骨髄（白血病を包含する）およびリンパ球増殖系に影響を及ぼす悪性腫瘍の治療；転移性疾患および腫瘍再発ならびに腫瘍随伴症候群の予防および治療を包含する；ならびに、

８．感染性疾患：陰部疣贅、尋常性疣贅、足底疣贅、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、単純ヘルペスウイルス、伝染性軟属腫、天然痘、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、ライノウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、インフルエンザ、パラ−インフルエンザ等のウイルス疾患；結核およびトリ型結核菌、ハンセン病等の細菌性疾患；真菌性疾患、クラミジア、カンジダ、アスペルギルス、クリプトコックス髄膜炎、ニューモシスティス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｎｉｉ）、クリプトスポリジウム症、ヒストプラスマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマ感染症およびリーシュマニア症等の他の感染性疾患。
９．疼痛：カテプシンＣ欠損マウスからの最近の文献データは、痛覚におけるカテプシンＣの調節性役割を暗示している。したがって、カテプシンＣの阻害剤は、種々の形態の慢性疼痛、例えば、炎症性または神経因性疼痛の臨床状況においても有用となり得る。

上述した疾患および状態の治療のために、治療有効用量は、概して、本発明の化合物の投薬量当たり、体重１ｋｇにつき約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇ；好ましくは、投薬量当たり、体重１ｋｇにつき約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲内となる。例えば、７０ｋｇの人物への投与のためには、投薬量範囲は、本発明の化合物の投薬量当たり、約０．７ｍｇ〜約７０００ｍｇ、好ましくは、投薬量当たり、約７．０ｍｇ〜約１４００ｍｇとなるであろう。最適な投薬レベルおよびパターンを決定するために、ある程度の日常的な用量最適化が必要とされ得る。活性成分は、１日に１〜６回投与され得る。

実際の薬学的有効量または治療投薬量は、当然ながら、患者の年齢および体重、投与ルート、ならびに疾患の重症度等、当業者によって公知の要因によって決まることになる。いずれの事例でも、活性成分は、薬学的有効量を患者の特有の状態に基づいて送達させる投薬量および様式で投与されることになる。

Claims

式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩。
［式中、
Ｃｙは、
であり、
Ａは、
であり、
式中、
Ｗは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｘは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｙは、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
ただし、Ｗ、ＸおよびＹの最大で１つは、Ｎであってよく、
Ｄ−Ｅは、Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）、ＣＨ₂ＣＨ₂、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＣＨ₂−Ｏからなる群から選択され、
Ｒ²は、ＨおよびＣ_1-3−アルキルからなる群から選択され、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-3−アルキル、ＣＨ₃ＯＣＨ₂ＣＨ₂−、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、４−テトラヒドロピラニルおよび３−テトラヒドロピラニルからなる群から選択され、
ｉは、１、２または３であり、
ｊは、１、２または３であり、
ただし、ｉ＋ｊの合計は、２、３または４である］
Ｃｙが、
である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
式中
Ｃｙが、
である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃−およびオキセタニルからなる群から選択される、請求項１、２もしくは３に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ｒ²が、ＨおよびＣＨ₃からなる群から選択される、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ｄ−Ｅが、ＣＨ₂−Ｏである、請求項１から５までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ｒ¹が、Ｈ、ＣＨ₃およびオキセタニルからなる群から選択され、
Ｒ²が、ＣＨ₃であり、
Ｗが、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｘが、ＣＨおよびＮからなる群から選択され、
Ｙが、ＣＨからなる群から選択され、
ただし、Ｗ、ＸおよびＹの最大で１つが、Ｎであってよく、
Ｄ−Ｅが、Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）、ＣＨ₂ＣＨ₂、Ｃ（Ｏ）−ＯおよびＣＨ₂−Ｏからなる群から選択され、
ｉが、１または２であり、
ｊが、１または２であり、
ただし、ｉ＋ｊの合計が、２、３または４である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ａが、式Ａ１からＡ１４
からなる群から選択される、請求項１から７までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ａが、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、Ａ７、Ａ１０、Ａ１３、およびＡ１４
からなる群から選択される、請求項８に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
Ａが、Ａ２およびＡ１３
からなる群から選択される、請求項８もしくは９に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
例１、５、８、１０、１２、１３、１４、１９、２２、２３、２４、２５および２７
からなる群から選択される、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
医薬として使用するための、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
喘息およびアレルギー性疾患、胃腸炎症性疾患、糸球体腎炎、好酸球性疾患、慢性閉塞性肺疾患、病原微生物による感染症、関節リウマチ、好中球性疾患、嚢胞性線維症（ＣＦ）、非嚢胞性線維症、特発性肺線維症、気管支拡張症、ＡＮＣＡ関連血管炎、肺がん、気腫、慢性気管支炎、急性肺傷害（ＡＬＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、肺高血圧症、肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）およびアルファ−１−アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）、肥満症および関連する炎症、インスリン抵抗性、糖尿病、脂肪肝および肝脂肪症の治療用の医薬として使用するための、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
請求項１から１１までのいずれか１項に記載の１つまたは複数の式Ｉの化合物または薬学的に活性なその塩を含有することを特徴とする、医薬組成物。
ＤＰＰＩ活性阻害剤が治療的有益性を有する疾患の治療または予防の方法であって、治療的にまたは予防的に有効な量の、請求項１から１１の１項に記載の式Ｉの化合物の、それを必要とする患者への投与を含む方法。
請求項１から１１までのいずれか１項に記載の式Ｉの化合物に加えて、ベータミメティック、抗コリン剤、コルチコステロイド、ＰＤＥ４−阻害剤、ＬＴＤ４−アンタゴニスト、ＥＧＦＲ−阻害剤、ＣＲＴＨ２阻害剤、５−ＬＯ−阻害剤、ヒスタミン受容体アンタゴニスト、ＣＣＲ９アンタゴニストおよびＳＹＫ−阻害剤、ＮＥ−阻害剤、ＭＭＰ９阻害剤、ＭＭＰ１２阻害剤だけでなく、２または３つの活性物質の組合せからもなる群から選択される薬学的に活性な化合物を含む、医薬組成物。