JP2017526666A

JP2017526666A - 新規ピリドピリミジン誘導体化合物

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Publication number: JP2017526666A
Application number: JP2017507425A
Authority: JP
Inventors: デ・ヌッシ、ジルベルト
Original assignee: バイオラブ・サヌス・ファーマセウティカ・エルティーディーエー．
Priority date: 2014-09-12
Filing date: 2015-09-11
Publication date: 2017-09-14
Anticipated expiration: 2035-09-11
Also published as: AR101813A1; JP6661606B2; ES2701273T3; CN107074847A; US10280162B2; PL3191099T3; MX2017003067A; KR20170054408A; CA2958331C; US20180111926A2; AU2015316120A1; IL250968B; PT3191099T; AU2015316120B2; WO2016037255A3; WO2016037255A2; CA2958331A1; EP3191099B1; US10822333B2; US20160075702A1

Abstract

本発明は、一般式（Ｉ）：一般式（Ｉ）で表される構造を有する新規ピリドピリミジン誘導体化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）、それらを含有する医薬組成物、環状ヌクレオチド合成の阻害剤として、またはｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法、ならびに下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療でのそれらの使用を記載する。【化１】

Description

発明の分野

本発明は、新規ピリドピリミジン誘導体化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）、それらを含有する医薬組成物、環状ヌクレオチド合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法、ならびに下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療でのそれらの使用を記載する。

発明の背景

国連児童基金（ＵＮＩＣＥＦ）および世界保健機関（ＷＨＯ）によれば、下痢性疾患は、５歳以下の子供における死亡原因の第２位および栄養不良の主因である。かなりの割合の下痢性疾患は、安全な飲料水ならびに適切な衛生設備および衛生状態により予防できる。

下痢は、通常の排便と比較して排便回数の増加、または便の形成の減少により特徴付けられる。排便回数および便の緩さの変化は、互いに独立して異なり得るが、変化は両方に起こる場合が多い。

大抵の場合、下痢の徴候および症候は、通常数日間続く。しかし、下痢は時には数週間続く場合がある。これらの状況において、下痢は、深刻な障害、例えば、炎症性腸疾患、またはそれほど重篤でない症状、例えば、過敏性腸症候群の徴候であり得る。

下痢は、寄生虫により生じる感染細菌性またはウイルス性障害であり得る。下痢は、食中毒、食品添加物、食物アレルギー、吸収不良症候群（例えば、グルテンまたは乳糖不耐症）、抗生物質療法、腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎）などにより生じる非感染性下痢であることもある。典型的な治療では、根本原因に対して薬物を投与しながら、流体を投与して、脱水症を予防し、継続的に栄養を与える。

細菌により生じる感染症の場合、下痢を誘発する大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）（グラム陰性菌）の病原性機構には、耐熱性毒素（ｈｅａｔｓｔａｂｌｅｔｏｘｉｎ）（ＳＴａ）の分泌がおそらく関与する。

したがって、本発明者の試みは、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）の耐熱性毒素（ＳＴａ）により生じる環状ヌクレオチド合成の新規ピリドピリミジン誘導体化合物阻害剤を開発することである。ＳＴａは、腸上皮細胞膜受容体であるグアニル酸シクラーゼＣ型（ＧＣ−Ｃ）に結合し、下痢を誘発する。これは、酵素を活性化し、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）を環状グアノシン３’，５’−一リン酸（ｃＧＭＰ）に変換し、ｃＧＭＰの細胞内濃度を急上昇させる。次いで、これは、ｃＧＭＰ依存性プロテインキナーゼおよび塩化物イオンチャネルである嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）の活性化を誘導する。ＣＦＴＲの活性化は、塩化物イオンの腸管腔内への流出、ならびに水およびナトリウムイオンの蓄積をもたらすことによって下痢を引き起こす。

国際公開番号ＷＯ２００８／００８７０４には、環状ヌクレオチド合成の阻害剤および様々な疾患の療法でのその使用が記載されている。

ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤および環状ヌクレオチド合成の阻害剤の別のクラスは、ＴＡＮＩＦＵＭ［Ｅ．Ａ．ＴＡＮＩＦＵＭら、“Ｎｏｖｅｌｐｙｒｉｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｓｔａｂｌｅｔｏｘｉｎａ（ＳＴａ）ｉｎｄｕｃｅｄｃＧＭＰｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒｓ、２００９、１９：３０６７−３０７１］による刊行物に記載されている。この刊行物によれば、特定された最良の化合物の１つは、以下の構造形態：

を有する、化合物２４（ＦＰＩＰＰ）であった。

さらにＴＡＮＩＦＵＭ［Ｅ．Ａ．ＴＡＮＩＦＵＭら、“Ｎｏｖｅｌｐｙｒｉｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｓｔａｂｌｅｔｏｘｉｎａ（ＳＴａ）ｉｎｄｕｃｅｄｃＧＭＰｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒｓ、２００９、１９：３０６７−３０７１］によれば、腸内の流体の不均衡を引き起こす生理学的機構に対して有効な薬物の開発は、治療手段をさらに大きく増やすこととなるであろう。

上記に基づき、本発明の発明者は、下痢の症候の治療、予防または緩和に使用できる新規化合物である新規ピリドピリミジン誘導体を開発した。

本発明の主な目的は、一般式（Ｉ）

で表される構造を有する新規ピリドピリミジン誘導体化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）、それらを含有する医薬組成物、環状ヌクレオチド合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法、ならびに下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療でのそれらの使用を提供することである。

いくつかの側面において、本発明は、活性成分として、有効量の新規ピリドピリミジン誘導体化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。

本発明の別の目的は、環状ヌクレオチド合成を阻害するための、新規ピリドピリミジン誘導体化合物、それらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）の使用である。さらに、本発明の目的は、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成を阻害するための、新規ピリドピリミジン誘導体化合物の一種、それらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）使用である。

本発明の目的は、下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療での、新規ピリドピリミジン誘導体化合物の一種、それらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）の使用でもある。

Ｔ₈₄細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩおよびＸの効果。Ｔ₈₄細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物Ｉ、ＩＩＩ、ＶおよびＸＩＩの効果。Ｔ₈₄細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＶＩＩの効果。Ｔ₈₄細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＩＸの効果。Ｔ₈₄細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＸＩの効果。

発明の詳細な説明

本発明は、一般式（Ｉ）

［式中、Ｒ₁は、Ｃ_1〜6アルキル、アミノＣ_1〜6アルキル、ジメチルアミノＣ_1〜6アルキル、ハロＣ_1〜6アルキル、グアニジノＣ_1〜6アルキルおよびメルカプトＣ_1〜6アルキルからなる群から選択され、
Ｒ₂は、４−（トリフルオロメチル）チオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルおよび置換アリール（ここで置換基は、Ｃ_1〜6アルコキシ、ハロゲン、Ｃ_1〜6ヘテロアラルキルまたはＣ_2〜6ヘテロアラルケニルからなる群から選択される）からなる群から選択され、
Ｘは、Ｏ、ＳおよびＳｅからなる群から選択される］で表される構造を有する新規ピリドピリミジン誘導体化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）を記載する。

上で使用したように、およびこの開示全体を通して、以下の用語は、別段の指示がない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする：
「アルキル」という用語は、直鎖、分枝または環状アルキル鎖を表し、例えば、Ｃ_1〜6アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどであってよい。

「アルケニル」という用語は、直鎖、分枝または環状鎖アルケニル基、例えば、アリル、ベンジル、ビニル、スチリル、インドリルなどを含む。「アシルアミノ」という用語は、アミノ基の任意のアシル誘導体、例えば、アセトアミド、ベンズアミドなどを表す。

「アリール」という用語は、芳香族環、例えば、フェニル、ナフチル、チエニル、インドリルなどから誘導される任意の官能基または置換基を指す。

「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を表す。

「患者」という用語は、ヒトまたは非ヒト哺乳動物である。一態様において、患者はヒトである。別の態様において、患者は、サル、イヌ、ネコ、ヒヒ、アカゲザル、マウス、ラット、ウマ、ウサギ、ウシなどを含む、非ヒト哺乳動物であるが、これらに限定されるものではない。

ここで使用する「有効量」という用語は、症状を患う患者に投与したとき、所望の治療、改善、阻害または予防効果をもたらすのに有効である、新規ピリドピリミジン誘導体化合物、またはそれらの医薬組成物の量を指す。

好ましい態様において、本発明の化合物は
Ｒ₁が、メチル、エチル、プロピル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択されるＣ_1〜6アルキルであり、
Ｒ₂が、４−（トリフルオロメチル）チオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イルおよび２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルからなる群から選択され、
Ｘが、ＯまたはＳを表す、一般式（Ｉ）で表される構造を有するか、またはそれらの薬学的に許容される塩であるか、またはそれらの混合物（任意の比率で）である。

より好ましい態様において、本発明の化合物は
Ｒ₁が、メチルまたはエチルであり、
Ｒ₂が、４−（トリフルオロメチル）チオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イルおよび２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルからなる群から選択され、
Ｘが、ＯまたはＳである、一般式（Ｉ）で表される構造を有するか、またはそれらの薬学的に許容される塩であるか、またはそれらの混合物（任意の比率で）である。

特に、好ましい化合物は、個々の化合物として例に示す一般式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に許容される塩である。好ましい置換基は、表１で示す具体例のものである。

一般式（Ｉ）の好ましい化合物は、
− 化合物Ｉ：化学構造式が

である、５−（４−トリフルオロメチルチオフェン）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物ＩＩ：化学構造式が

である、５−（４−トリフルオロメチルチオフェン）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−チオキソ−４，６−ジオン、
− 化合物ＩＩＩ：化学構造式が

である、５−（３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−チオキソ−４，６−ジオン、
− 化合物ＩＶ：

５−（３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）−１−エチル−３−メチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物Ｖ：化学構造式が

である、５−（３，５−ビストリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−チオキソ−４，６−ジオン、
− 化合物ＶＩ：化学構造式が

である、５−（３，５−ビストリフルオロメチルフェニル）−１−エチル−３−メチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物ＶＩＩ：化学構造式が

である、５−（１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物ＶＩＩＩ：化学構造式が

である、５−（１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−チオキソ−４，６−ジオン、
− 化合物ＩＸ：化学構造式が

である、５−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物Ｘ：化学構造式が

である、５−（２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物ＸＩ：化学構造式が

である、５−（２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２，４，６−トリオン、
− 化合物ＸＩＩ：化学構造式が

である、５−（２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イル）−１，３−ジメチル−５，１１−ジヒドロ−１Ｈ−インデノ−［２’，１’：５，６］ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−チオキソ−４，６−ジオン
からなる群から選択されるもの、およびそれらの薬学的に許容される塩である。

新規ピリドピリミジン誘導体化合物は、薬学的に許容される塩を形成でき、これも本発明の範囲内である。

本発明の一般式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩の例としては、鉱酸の塩、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸など、有機酸の塩、例えば、ギ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸など、およびアルカリ金属またはアルカリ土類金属の塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウムなどがある。

本発明による新規ピリドピリミジン誘導体化合物は、以下の一般的な合成経路により調製できる。

一般的な合成経路
材料および方法
５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルバルデヒドは、ＡｕｒｏｒａＢｕｉｌｄｉｎｇＢｌｏｃｋｓから購入し、１−エチル−３−メチル尿素は、ＡＫｏｓＢｕｉｌｄｉｎｇＢｌｏｃｋｓから購入し、他の市販品はすべてＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈから購入した。すべての反応の後に、蛍光指示薬を有するＭｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ２５４プレート上でＴＬＣ（薄層クロマトグラフィ）を行い、プレートを、紫外線（２５４ｎｍ）で視覚化した。シリカゲルカラム（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０）を用いて分取クロマトグラフィー精製を行った。溶液を、Ｂｕｅｃｈｉロータリーエバポレーターを用いて低圧で濃縮した。ＢｕｃｈｉＭｅｌｔｉｎｇＰｏｉｎｔＢ−５４０装置を用いて決定した融点は、未修正であり、再結晶化されたか、またはクロマトグラフィーで精製された材料で得られた値を表す。中間体および最終化合物の分子量は、ＡＰＩ２０００ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ質量分析計で行われるエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ／ＭＳ）で評価した。¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、ＶａｒｉａｎＭｅｒｃｕｒｙＰｌｕｓ４００ＭＨｚ装置で記録した。全スペクトルをＤＭＳＯ−ｄ６で記録した。以下の略語は、適当な場合、ピークパターンを示すために用いられる：ｓ（シングレット）、ｂｓ（ブロードシングレット）、ｄ（ダブレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｍ（マルチプレット）。

一般的手順
合成の一般的手順は、ＨＡＮＴＺＳＣＨ［Ａ．ＨＡＮＴＺＳＣＨ、“ＣｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎｓｐｒｏｄｕｋｔｅａｕｓＡｌｄｅｈｙｄａｍｍｏｎｉａｋｕｎｄｋｅｔｏｎａｒｔｉｇｅｎＶｅｒｂｉｎｄｕｎｇｅｎ”．Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．、１８８１、１４：１６３７−１６３８］およびＡＧＡＲＷＡＬ［Ａ．ＡＧＡＲＷＡＬら、“ＦｉｒｓｔＲｅｐｏｒｔｏｎｔｈｅａｂｎｏｒｍａｌｄｅａｒｙｌａｔｉｏｎ／ａｌｋｙｌａｔｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎｉｎｏｎｅ−ｐｏｔｈａｎｔｚｃｈｓｙｎｔｈｅｓｉｓｗｉｔｈ６−Ａｍｉｎｏ−ｌ，３−ＤｉｍｅｔｈｙｌＵｒａｃｉｌ”．ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、２００４、３４：４４４７−４４６１］のジヒドロピリジンの３成分の環化に基づく。特に、市販されていない場合には合成される（例に示す合成手順）第１級アミン（ｃ）と市販されていない場合には合成されるアルデヒド（ｂ）と１，３−インダンジオン（ａ）との酢酸中での反応により、一般式（Ｉ）の所望の化合物が得られた。

以下の一般的スキームで示される一般的合成経路に従って、一般式（Ｉ）の新規ピリドピリミジン誘導体化合物を合成した。

一般的スキーム

以下の例により本発明をさらに詳細に説明する。本発明は以下の例により限定されないことに注意されたい。

例１：
化合物Ｉの調製
５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルバルデヒドの合成
ＢＩＮＤＥＲ［Ｄ．ＢＩＮＤＥＲら、“ＴｈｉｏｐｈｅｎａｌｓＳｔｒｕｋｔｕｒｅｌｅｍｅｎｔｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｓｃｈａｋｔｉｖｅｒＳｕｂｓｔａｎｚｅｎ”．Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）、１９８５、３１８：２４３−２４９］によりすでに公表されている手順に従って、５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルバルデヒド化合物を得た。ｎ−ヘキサン中の２０％ＤＩＢＡＬ溶液２０ｍＬを、無水エーテル３２．０ｍＬ中の５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルボニトリル３．１ｇ（１７．５ｍｍｏｌ）の溶液に、−４５℃以下の温度で、Ｎ₂雰囲気下で、３０分間で滴下した。次いで、混合物を−３０℃で４５分間撹拌し、続いて５％Ｈ₂ＳＯ₄溶液（３．０ｍＬ）を３回添加し、水相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶媒を蒸発させ、さらなる精製なしに所望の化合物を油として得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍｗ１７９．９９）：１８０．８（Ｍ＋Ｈ⁺）を示した。¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.95 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.95 (s, 1H)。

化合物Ｉの合成
丸底フラスコ中の酢酸（１５ｍＬ）に、（ａ）１，３−インダンジオン（０．５６ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）、（ｂ）５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルバルデヒド（０．６９７ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）および（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（０．５ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物Ｉを得た。
融点：２６５℃。
ESI-MS (M_w 445.07): 445.9 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.87 (s, 1H, NH), 7.87 (d, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.36 (m, 2H), 4.88 (s, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.13 (s, 3H)。

スキーム１

例２：
化合物ＩＩの調製
６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オンの合成
適切に修正された、ＨＵ［Ｓ．ＨＵら、“Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆ８−（Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｓｔｙｒｏｌ−ｆｏｒｍａｍｉｄｏ）ｐｈｅｎｙｌ−ｘａｎｔｈｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｏｎｍｏｎｏａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅＢ”．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、２０１２、６０（３）：３８５−３９０］によりすでに公表されている手順に従って、６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン化合物を得た。

無水酢酸（３０ｍＬ）中の１，３−ジメチルチオ尿素（１．８３ｇ、１７．５７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、シアノ酢酸（１．５ｇ、１．７６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を７０℃で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、得られた油性残留物をＨ₂Ｏ（４０ｍＬ）で希釈し、５ＮＮａＯＨ（１５ｍＬ）で処理した。このようにして形成された沈殿物を濾過により回収し、冷水で洗浄し、ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏからの再結晶化により精製し、６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オンを得た。
融点２８９℃。
ESI-MS (M_w 171.05): 172.1 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 7.01 (s, 2H, NH₂), 5.01 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.50 (s, 3H)。

化合物ＩＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（１７０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）と（ｂ）５−（トリフルオロメチル）チオフェン−３−カルバルデヒド（２０９ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン（１６６ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＩＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＩＩを得た。
融点：１７８℃。
ESI-MS (M_w 461.05): 461.9 (M+H⁺); 483.9 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.09 (s, 1H, NH), 7.87 (bs, 1H), 7.66 (bs, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.49 (bs, 1H), 7.37 (m, 2H), 4.96 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.58 (s, 3H)。

スキーム２

例３
化合物ＩＩＩの調製
化合物ＩＩＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（１．１１ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）と（ｂ）３−フルオロ−５−トリフルオロメチルベンズアルデヒド（１．４６ｇ、７．６０ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン（１．０８ｇ、６．３０ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＩＩＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＩＩＩを得た。
融点：３１３℃。
ESI-MS (Mw 473.08): 474.1 (M+H+); 496.0 (M+Na+)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.12 (s, 1H, NH), 8.05 (d, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.43 (t, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.53 (s, 3H)。
スキーム３

例４
化合物ＩＶの調製
６−アミノ−１−エチル−３−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンの合成
適切に修正されたＨＵ［Ｓ．ＨＵら、“Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆ８−（Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｓｔｙｒｏｌ−ｆｏｒｍａｍｉｄｏ）ｐｈｅｎｙｌ−ｘａｎｔｈｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｏｎｍｏｎｏａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅＢ”．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、２０１２、６０（３）：３８５−３９０］によりすでに公表されている手順に従って、６−アミノ−１−エチル−３−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン化合物を得た。

無水酢酸（３０ｍＬ）中の１−エチル−３−メチル尿素（１．３６ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、シアノ酢酸（１．１３ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を７０℃で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、得られた油性残留物をＨ₂Ｏ（４０ｍＬ）で希釈し、５ＮＮａＯＨ（１５ｍＬ）で処理した。このようにして形成された沈殿物を濾過により回収し、冷水で洗浄し、ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏからの再結晶化により精製し、６−アミノ−１−エチル−３−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン１．９１ｇを得た。
融点２３２℃。
ESI-MS (M_w 169.09): 170.1 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 6.76 (s, 2H, NH₂), 4.64 (s, 1H), 3.80 (q, 2H), 3.29 (s, 3H), 1.08 (t, 3H)。

化合物ＩＶの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（９７０ｍｇ、６．６４ｍｍｏｌ）と（ｂ）３−フルオロ−５−トリフルオロメチルベンズアルデヒド（１．２７ｇ、６．６１ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１−エチル−３−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（９３６ｍｇ、５．５３ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＩＶを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＩＶを得た。
融点：１７７℃。
ESI-MS (M_w 471.12): 471.9 (M+H⁺); 498.8 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.81 (s, 1H, NH), 7.94 (d, 1H), 7.49 (m, 3H), 7.40 (d, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.27 (t, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.26 (m, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.24 (t, 3H)。

スキーム４

例５
化合物Ｖの調製
化合物Ｖの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（５０３ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）と（ｂ）３，５−ビストリフルオロメチルベンズアルデヒド（８３３ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン（４９０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物Ｖを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物Ｖを得た。
融点：３１４℃。
ESI-MS (M_w 523.08): 524.0 (M+H⁺); 546.1 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.14 (s, 1H, NH), 8.08 (d, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.53 (t, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.51 (s, 3H)。

スキーム５

例６
化合物ＶＩの調製
化合物ＶＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（７０８ｍｇ、４．８４ｍｍｏｌ）と（ｂ）３，５−ビストリフルオロメチルベンズアルデヒド（１．１７ｇ、４．８３ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１−エチル−３−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（６８３ｍｇ、４．０４ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＶＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＶＩを得た。
融点：１６６℃。
ESI-MS (M_w 521.12): 522.1 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.87 (s, 1H, NH), 7.94 (bs, 3H), 7.88 (s, 1H), 7.50 (t, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.32 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 1.24 (t, 3H)。

スキーム６

例７
化合物ＶＩＩの調製
２，３−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒドの合成
２，３−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒド化合物を、ＤＥＶＥＡＵ［Ａ．Ｍ．ＤＥＶＥＡＵ、Ｔ．Ｌ．ＭＡＣＤＯＮＡＬＤ、“Ｐｒａｃｔｉｃａｌｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｂｉａｒｙｌｃｏｌｃｈｉｃｉｎｏｉｄｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ３’，４’−ｃａｔｅｃｈｏｌｅｔｈｅｒ−ｂａｓｅｄＡ−ｒｉｎｇｓｖｉａＳｕｚｕｋｉｃｒｏｓｓ−ｃｏｕｐｌｉｎｇｗｉｔｈｌｉｇａｎｄｌｅｓｓｐａｌｌａｄｉｕｍｉｎｗａｔｅｒ”．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ、２００４、４５：８０３−８０７］によりすでに公表されている手順に従って得た。

還流コンデンサーを備えた火炎乾燥した平底フラスコに、２，３−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１ｇ、７．２４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（乾燥、３０ｍＬ）および炭酸セシウム（１．５等量）を連続的に添加した。徹底的に混合した後、ジブロモメタン（１．５等量）をシリンジから添加した。混合物を１１０℃で２時間加熱し、次いで、室温まで冷却した。セライトのパッドから濾過した後、濾過ケーキをＥｔＯＡｃですすいだ。得られた有機濾液を濃縮し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機相を、水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮して、良好な収率の粗油を得た。粗黄色油をフラッシュクロマトグラフィーおよびクーゲルロール蒸留で精製し、所望のアルデヒドを得た。これは、冷却すると無色半透明の結晶を形成した。
融点３５℃
ESI-MS (M_w 150.03): 151,1 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.35 (s, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.24 (dd, 1H), 7.16 (dd,1H), 6.36 (s, 2H)。

化合物ＶＩＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（１．６１ｇ、１１．０２ｍｍｏｌ）と（ｂ）２，３−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒド（１．６６ｇ、１１．０６ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（１．４３ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＶＩＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＶＩＩを得た。
融点：３００℃。
ESI-MS (M_w 415.12): 416.0 (M+H⁺); 438.0 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.88 (s, 1H, NH), 7.83 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.73 (t, 1H), 6.66 (d, 2H), 5.90 (d, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.08 (s, 3H)。

スキーム７

例８
化合物ＶＩＩＩの調製
化合物ＶＩＩＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（５３５ｍｇ、３．６６ｍｍｏｌ）と（ｂ）２，３−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒド（５４９ｍｇ、３．６６ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン（５２１ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）との反応により、化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＶＩＩＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＶＩＩＩを得た。
融点：３１０℃。
ESI-MS (M_w 431.09): 432.0 (M+H⁺); 453.9 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.11 (s, 1H, NH), 7.83 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 6.77 (bs, 1H), 6.68 (bs, 2H), 5.93 (d, 2H), 4.88 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.53 (s, 3H)。

スキーム８

例９
化合物ＩＸの調製
３，４−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒドの合成
ＰＯＬＩ［Ｇ．ＰＯＬＩ、Ｇ．ＧＩＡＮＢＡＳＴＩＡＮＩ “ＡｎＥｐｉｉｓｏｐｉｃｒｏｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎａｚａａｎａｌｏｇｕｅｖｉａＰａｌｌａｄｉｕｍ−ｃａｔａｌｙｚｅｄｐｓｅｕｄｏ−ｄｏｍｉｎｏｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ”．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２００２、６７：９４５６−９４５９］によりすでに公表されている手順に従って、３，４−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒド化合物を得た。

ＣＨ₂Ｃｌ₂（２５０ｍＬ）中のピペロニルアルコール（１０ｇ、６５．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｎＯ₂（４９．３ｇ、５６７．３２ｍｍｏｌ）１回分を添加した。得られた暗色の懸濁液を室温で２４時間撹拌し、次いで、セライトパッドを通して濾過除去し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗浄した。溶媒を真空下で除去し、得られた粗結晶淡黄色固体をさらなる精製なしに使用した。
融点３３８℃。
ESI-MS (M_w 150.03): 151,1 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.80 (s, 1H), 7.40 (m, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.07 (s, 2H)。

化合物ＩＸの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（２０３ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）と（ｂ）３，４−（メチレンジオキシ）ベンズアルデヒド（２０９ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（１８０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＩＸを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＩＸを得た。
融点：３３８℃。
ESI-MS (M_w 415.12): 416.0 (M+H⁺); 437.9 (M+Na⁺); 453.9 (M+K⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.79 (s, 1H, NH), 7.98 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.72 (bs, 2H), 5.89 (s, 2H), 4.69 (s, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.10 (s, 3H)。

スキーム９

例１０
化合物Ｘの調製
２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−カルボキサルデヒドの合成
ＶＡＮＥＬＬＥ［Ｐ．ＶＡＮＥＬＬＥ、Ｃ．Ｔ．ＬＬＥＧＥＯＬＳ、Ｊ．ＭＥＵＣＨＥ、Ｊ．ＭＡＬＤＯＮＡＤＯ、Ｍ．Ｐ．ＣＲＯＺＥＴ “Ａｎｏｒｉｇｉｎａｌｗａｙｆｏｒｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｎｅｗｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｔｈｉａｄｉａｚｏｌｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ”．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ、１９９７、４５（５）：９５５−９６２］によりすでに公表されている手順に従って、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−カルボキサルデヒド化合物を得た。

メタノール（６０ｍＬ）中の４−ブロモメチル−２，１，３−ベンゾチアジアゾール（５．８２ｇ、２５．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ニトロプロパン（２．４８ｇ、２７．８４ｍｍｏｌ）のリチウム塩を添加した。室温（約２５℃）で２４時間撹拌した後、メタノールを減圧下でロータリーエバポレーターで蒸留除去した。残留物をジクロロメタンに溶解し、溶媒を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で蒸発させた。シクロヘキサンからの再結晶化による精製後、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−カルボキサルデヒドを黄色固体として得た。
融点９９℃
ESI-MS (M_w 164.18): 165.2 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.60 (s, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.91 (t, 1H)。

化合物Ｘの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（４２０ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）と（ｂ）２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−カルボキサルデヒド（４７１ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（３５９ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物Ｘを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物Ｘを得た。
融点：３３１℃。
ESI-MS (M_w 429.09): 430.1 (M+H⁺); 452.0 (M+Na⁺); 467.9 (M+K⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.08 (s, 1H, NH), 7.88 (d, 1H), 7.62 (d, 3H), 7.50 (t, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 5.46 (s, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.01 (s, 3H)。

スキーム１０

例１１
化合物ＸＩの調製
２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−カルボキサルデヒドの合成
ＣＡＲＲＯＬＬ［Ｗ．Ａ．ＣＡＲＲＯＬＬら“ＳｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄＳｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｏｆａｎｏｖｅｌｓｅｒｉｅｓｏｆ２，３，５，６，７，９−ｈｅｘａｈｙｄｒｏｔｈｉｅｎｏ［３，２−ｂ］ｑｕｉｎｏｌｉｎ−８（４Ｈ）−ｏｎｅ１，１−Ｄｉｏｘｉｄｅ（α−２７８６３７）、ａＰｏｔｅｎｔＫＡＴＰＯｐｅｎｅｒｔｈａｔｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｂｌａｄｄｅｒｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎｓ”．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４、４７：３１６３−３１７９］によりすでに公表されている手順に従って、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−カルボキサルデヒド化合物を得た。

ＣＨＣｌ₃（１５０ｍＬ）中の５−ヒドロキシ−メチルベンゾ−２，１，３−チアジアゾール（２．６ｇ、１６ｍｍｏｌ）およびＭｎＯ₂（５．６ｇ、６４．４１ｍｍｏｌ）を室温（約２５℃）で終夜撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を蒸発させた。粗残留物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、７／３、体積／体積）上でクロマトグラフにかけ、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−カルボキサルデヒド１．９ｇを得た。
融点９３℃。
ESI-MS (M_w 164.18): 165.2 (M+H⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): 10.21 (s, 1H), 8.78 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.04 (s, 1H)。

化合物ＸＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（４６８ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）と（ｂ）２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−カルボキサルデヒド（５２５ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（４１５ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、化合物ＸＩを得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＸＩを得た。
融点：３５８℃。
ESI-MS (M_w 429.09): 430.1 (M+H⁺); 452.1 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 9.92 (s, 1H, NH), 7.93 (m, 3H), 7.77 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.26 (d, 1H), 4.99 (s, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.08 (s, 3H)。

スキーム１１

例１２
化合物ＸＩＩの調製
化合物ＸＩＩの合成
（ａ）１，３−インダンジオン（４５６ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）と（ｂ）２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−カルボキサルデヒド（５１２ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）と（ｃ）６−アミノ−１，３−ジメチル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロピリミジン−４（１Ｈ）−オン（４４５ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）との反応により、例１において化合物Ｉについて記載したのと同じ手順を用いて、その化合物を得た。混合物を、還流で、窒素雰囲気下で８時間加熱した。次いで、０℃まで冷却した。得られた沈殿物を濾過し、冷水ですすぎ、粗生成物を得た。シリカゲルカラム（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ、９．５／０．５、体積／体積）上で精製し、所望の化合物ＸＩＩを得た。
融点：３６２℃。
ESI-MS (M_w 445.07): 446.0 (M+H⁺); 468.0 (M+Na⁺)。
¹H-NMR (DMSO-d6): δ 10.14 (s, 1H, NH), 7.96 (m, 3H), 7.80 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.51 (s, 3H)。

スキーム１２

いくつかの側面において、本発明は、医薬組成物、例えば、適当な剤形であって、前記組成物が、活性成分として、有効量の一般式（Ｉ）で表される構造を有する１種以上の化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）；および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物も提供する。

本発明による医薬組成物は、任意の適切な経路、例えば、経口、舌下、直腸、膣、経鼻、腹腔内または非経口経路で投与されるが、これらの例に限定されるものではない。好ましい経路は経口である。

経口投与のための医薬組成物は、多様な医薬品形態、例えば、（ｉ）錠剤、任意にコーティング、チュアブル、発泡性、多層性または分散性；（ｉｉ）ピル；（ｉｉｉ）粉末、任意に分散性または発泡性；（ｉｖ）カプセル、任意にハードゼラチンカプセル、ソフトジェルまたはデンプン質のゼラチンカプセル（ａｍｙｌａｃｅｏｕｓｇｅｌａｔｉｎｏｕｓｃａｐｓｕｌｅ）；（ｖ）トローチ；（ｖｉ）顆粒、任意に微粒子、マイクロカプセルまたはベクター化された製剤、例えば、リポソームの形態；（ｖｉｉ）坐剤；（ｖｉｉｉ）溶液；（ｉｘ）シロップ；（ｘ）懸濁液；（ｘｉ）注射可能物質などで提供され得るが、これらに限定されるものではない。

本発明による医薬組成物は、環状ヌクレオチド合成の阻害剤としての使用のためのものである。別の態様において、医薬組成物は、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤としての使用のためのものである。

本発明による医薬組成物は、下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療で用いられる。

本発明による医薬組成物を基準水準で周知の方法により調製してもよい。適切には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓまたは類似の情報源を、本発明による適切な製剤を調製するために使用してもよい。

試験化合物
例１３
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ毒素に起因するグアニル酸シクラーゼＣの刺激のためのプロトコル
ａ）細胞増殖
Ｔ８４株（ＡＴＣＣＣＣＬ−２４８）からの細胞を、供給業者の使用説明書に従って継代培養する。簡単に述べると、０．２５（重量／体積）％トリプシン溶液および０．５３ｍＭＥＤＴＡ溶液３ｍＬを用いて、培養フラスコ（７５ｃｍ²）を洗浄し、微量の血清を除去した後、同量のトリプシンを各ボトルに添加し、細胞層が分離するまで、細胞を顕微鏡下で観察する（通常、８〜１０分）。

培養培地［１０％ウシ胎児血清およびペニシリン−ストレプトマイシン（５０ＩＵ／ｍＬ：５０μｇ／ｍＬ）を補足したＤＭＥＭ−Ｆ１２］８ｍＬを添加し、細胞ホモジネートを２０００ｒｐｍで（２５℃で）５分間遠心分離した後、アッセイプレート（１２ウェルプレート）を調製する。

真空ポンプに接続された１ｍＬピペットを用いて、上清を吸引し、細胞を培養培地（１対４の比を維持するために必要な量、すなわち、１本の培養フラスコから４枚の１２ウェルプレートを得る）に再懸濁する。細胞のホモジネート後、ピペットを用いて、細胞懸濁液２ｍＬをプレートの各ウェルに添加する。増殖は、各ウェルのコンフルエンスまで、制御された条件下（３７℃、５％ＣＯ₂雰囲気）で、インキュベーター内で起こる（典型的には８〜１０日）。
ｂ）方法
最初に、培養培地を、真空ポンプに接続された１ｍＬピペットを用いて吸引し、細胞を、真空ポンプに接続された１ｍＬピペットを用いて、Ｄｕｌｂｅｃｃｏリン酸緩衝液（ＤＰＢＳ；３７℃）０．５ｍＬで少なくとも３回洗浄する。続いて、ＤＰＢＳ０．５ｍＬを、１−メチル−３−イソブチルキサンチン（１ｍＭ）、ジメチルスルホキシド（０．１体積／体積％）および試験化合物の存在下ならびに／または非存在下で添加し、オーブンで１０分間インキュベート（３７℃、５％ＣＯ₂雰囲気）する。

インキュベーション期間後、細胞をＳＴａ毒素（１μＭ、５μＬ）で刺激し、インキュベーター内で１０分間インキュベート（３７℃、５％ＣＯ₂雰囲気）する。刺激期間後、上清の容量を、真空ポンプに接続された１ｍＬピペットを用いて吸引し、振とう式「ローテーター」（ｓｈａｋｅｒｔｙｐｅ “ｒｏｔａｔｏｒ”）（Ｌａｂ−ＬｉｎｅＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、型番４６２５）で２０分間絶えず撹拌しながら（スピード４）、ｐＨ４の０．１Ｍ塩酸溶液（０．３ｍＬ、ピペットを用いて）を添加することにより、ｃＧＭＰを抽出する。抽出期間後、各ウェルの容量を遠心分離（１５０００ｒｐｍ、５分、２５℃）し、ＨＯＲＴＯＮら（１９９２）［Ｈｏｒｔｏｎ，Ｊ．Ｋ．；Ｍａｒｔｉｎ，Ｒ．Ｃ．；Ｋａｌｉｎｋａ，Ｓ．；Ｃｕｓｈｉｎｇ，Ａ．；Ｋｉｔｃｈｅｒ，Ｊ．Ｐ．；０’Ｓｕｌｌｉｖａｎ，Ｍ．Ｊ．；Ｂａｘｅｎｄａｌｅ，Ｐ．Ｍ．、“Ｅｎｚｉｍｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓｆｏｒｔｈｅｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆａｄｅｎｏｓｉｎｅ３’，５’ｃｙｃｌｉｃｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅａｎｄｇｕａｎｏｓｉｎｅ３’，５’ｃｙｃｌｉｃｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｌｕｉｄｓ”．ＪＩｍｍｕｎｏｌＭｅｔｈｏｄｓ１９９２、１５５：３１−４０］により開発され、記載された免疫アッセイ法により、ｃＧＭＰの含有量をその後定量するために、一定分量の上清（０．３ｍＬ）を、−２０℃の冷凍庫で急速に保管する。

振とう式「ローテーター」で３０分間絶えず撹拌しながら（スピード７）、０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液０．５ｍＬを添加することにより、タンパク質沈殿物または「ペレット」を直接蒸解する。のちに、ＢＲＡＤＦＯＲＤ（１９７６）［Ｍ．Ｍ．ＢＲＡＤＦＯＲＤ、“Ａｒａｐｉｄａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｇｒａｍｑｕａｎｔｉｔｉｅｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｕｔｉｌｉｚｉｎｇｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｏｆｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｙｅｂｉｎｄｉｎｇ”．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９７６、７２：２４８−２５４］により開発された方法を用いて、このタンパク質画分を試験で使用し、タンパク質を決定する。
ｃ）試験化合物
試験化合物は、表１に記載したＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩおよびＸＩＩである。
ｄ）結果
表２
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩおよびＸの効果（図１参照）

結果を平均±ＳＥＭで示す。＃ｐ＜０．０５、基準群と比較；＊ｐ＜０．０５、ＳＴａ群と比較；［ＡＮＯＶＡ、次いでチューキー検定（Ｔｕｋｅｙ’ｓｔｅｓｔ）］。

表３
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物Ｉ、ＩＩＩ、ＶおよびＸＩＩの効果（図２参照）

結果を平均±ＳＥＭで示す。＃ｐ＜０．０５、基準群と比較；＊ｐ＜０．０５、ＳＴａ群と比較；（ＡＮＯＶＡ、次いでチューキー検定）。

表４
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＶＩＩの効果（図３参照）

表５
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＩＸの効果（図４参照）

表６
Ｔ８４細胞におけるＳＴａ（１μＭ）に起因するｃＧＭＰの蓄積に対する化合物ＸＩの効果（図５参照）

例１４
絶対バイオアベイラビリティの決定のためのプロトコル
ａ）動物
試験では、２〜４歳、体重８〜１２ｋｇのオスのビーグル犬を使用し、試験中、食事制限を維持し、水は自由に摂取させた。
ｂ）動物の調製
犬の前脚の橈骨部分を剃り、７０％アルコールで湿らせたガーゼを用いてその箇所を無菌にした。

２１Ｇカテーテル（静脈投与プロトコルでは各脚に、および経口投与プロトコルでは単一の脚に１本）を挿入し、橈側皮静脈にアクセスした。

血液試料は、３ｍＬのシリンジを用いて血液１．５ｍＬを採取することにより、確立された採血時間に応じて動物から採取した。試料をヘパリン化収集チューブに移した。
ｃ）投与経路
試験化合物の投与は、経口および静脈内投与であった。

化合物の静脈内投与は、ボーラスで行われ、犬の橈側皮静脈の１つから行った。濃縮物１ｍｇ／ｋｇ；１回分３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇを別々の日に投与した。

薬物の経口投与は、３ｍｇ／ｋｇの用量のカプセル中の粉末で行われ、これはすべて犬により完全に摂取された。
ｄ）採血時間
静脈投与については、血液試料（１．５ｍｌ）を以下の所定の時間間隔：０、０．０３３、０．０８３、０．１７、０．２５、０．３３、０．５；１；２；３；４；６；８；１２および２４時間で採取した。

経口投与については、血液試料（１．５ｍｌ）を以下の所定の時間間隔：０、０．３３、０．６７、１、１．５、２、３、４、ならびに６、８、１２および２４時間で採取した。
ｅ）試験化合物
試験化合物は、表１に記載したＩＩ、ＩＶ、ＶＩおよびＸＩである。
ｆ）分析方法
ヘパリン化収集チューブを遠心分離機に入れ、２５００ｒｐｍ／分で１０分間処理した。血漿を分離し、他のチューブに入れた。血漿を、液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）で分析した。
ｇ）結果
表７
化合物ＩＩ、ＩＶ、ＶＩおよびＸＩで得られた結果は、以下の通りである：

環状ヌクレオチドの阻害について試験した４種の化合物はすべて、ごくわずかな絶対バイオアベイラビリティしか示さなかった。ゼロの絶対バイオアベイラビリティは、これらの化合物がある種の全身毒性を示す可能性を大きく低減するため、これらの結果は、腸管の障害の治療に対するこれらの化合物の優れた治療的可能性を示している。

本発明の化合物である新規ピリドピリミジン誘導体化合物は、患者の症状を治療するのに人間および獣医学において有用である。本発明によれば、前記化合物は、症状の予防および／または治療を必要とする患者に投与できる。

本発明は、環状ヌクレオチド合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法も記載する。別の態様において、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害剤として新規ピリドピリミジン誘導体化合物を使用する方法を記載する。

本発明の別の目的は、環状ヌクレオチド合成を阻害するための、新規ピリドピリミジン誘導体化合物、それらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）の使用である。さらに、本発明の目的は、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成を阻害するための、新規ピリドピリミジン誘導体化合物の一種、それらの薬学的に許容される塩、またはそれらの混合物（任意の比率で）の使用である。

Claims

一般式（Ｉ）：

［式中、Ｒ₁は、Ｃ_1〜6アルキル、アミノＣ_1〜6アルキル、ジメチルアミノＣ_1〜6アルキル、ハロＣ_1〜6アルキル、グアニジノＣ_1〜6アルキルおよびメルカプトＣ_1〜6アルキルからなる群から選択され、
Ｒ₂は、４−（トリフルオロメチル）チオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルおよび置換アリール（ここで置換基は、Ｃ_1〜6アルコキシ、ハロゲン、Ｃ_1〜6ヘテロアラルキルまたはＣ_2〜6ヘテロアラルケニルからなる群から選択される）からなる群から選択され、
Ｘは、Ｏ、ＳおよびＳｅからなる群から選択される］により表される化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、または任意の比率でのそれらの混合物。
Ｒ₁が、メチル、エチル、プロピル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択されるＣ_1〜6アルキルであり、
Ｒ₂が、４−（トリフルオロメチル）チオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イルおよび２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルからなる群から選択され、
Ｘが、ＯまたはＸを表す、請求項１に記載の化合物。
Ｒ₁が、メチルまたはエチルであり、
Ｒ₂が、４−トリフルオロメチルチオフェン、３−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、３，５−ビストリフルオロメチルフェニル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−イルおよび２，１，３−ベンゾチアジアゾール−５−イルからなる群から選択され、
Ｘが、ＯまたはＳである、請求項２に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
前記化合物が、

である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
活性成分として、有効量の請求項１〜１５の何れか１項に記載の１種以上の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩；および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
前記組成物が、環状ヌクレオチド合成の阻害のためのものである、請求項１６に記載の医薬組成物。
前記組成物が、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成の阻害のためのものである、請求項１６に記載の医薬組成物。
前記組成物が、下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療のためのものである、請求項１６に記載の医薬組成物。
請求項１６に記載の医薬組成物を投与することを含む、患者における環状ヌクレオチド合成を阻害する方法。
請求項１６に記載の医薬組成物を投与することを含む、患者におけるｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成を阻害する方法。
請求項１６に記載の医薬組成物を投与することを含む、患者における下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療のための方法。
前記医薬組成物が、適当な剤形である、請求項２０〜２２の何れか１項に記載の方法。
環状ヌクレオチド合成を阻害するための医薬の製造における、請求項１〜１５の何れか１項に記載の化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、または任意の比率でのそれらの混合物の使用。
ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成を阻害するための医薬の製造における、請求項１〜１５の何れか１項に記載の化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、または任意の比率でのそれらの混合物の使用。
下痢、大腸炎および過敏性腸症候群の予防的および／または治癒的治療ための医薬の製造における、請求項１〜１５の何れか１項に記載の化合物、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、または任意の比率でのそれらの混合物の使用。