JPWO2009119167A1 - 抗ｒｎａウイルス作用を有するアニリン誘導体 - Google Patents

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Abstract

ウイルス、特にＲＮＡウイルスは、突然変異速度が速いため、これまで開発されたウイルスのプロテアーゼや逆転写酵素などを標的とした抗ウイルス剤は、有効性が早期に失われ耐性ウイルスが出現している。また、近年、ＳＡＲＳ、鳥インフルエンザ、Ｃ型肝炎をはじめ、種々の新規ウイルスによるウイルス性疾患が社会的な脅威となっている。それゆえ、既存薬に耐性を示すウイルスや新規なウイルスに対応でき、適用性が広い新たな抗ウイルス剤の開発が希求されている。本発明は新規の抗ＲＮＡウイルス剤及びその使用方法を提供する。さらに本発明は、新規ウイルスや薬剤耐性ウイルスに対しても有効な抗ＲＮＡウイルス剤及びその使用方法を提供する。

Description

本発明は、ウイルス感染に関与する宿主細胞のリン酸化酵素を阻害する化合物に関する。本発明は、特にウイルスタンパク質の翻訳を制御するリン酸化酵素の阻害剤に関する。さらに、本発明は、リン酸化酵素阻害剤を有効成分として、フラビウイルス科、レオウイルス科、パラミキソウイルス科、オルトミキソウイルス科、レトロウイルス科等に属するＲＮＡウイルスに対する抗ウイルス剤に関する。特に、本発明は、ＲＮＡウイルスにより引き起こされる疾患の予防又は治療に有効な化合物に関し、具体的には、Ｃ型肝炎の予防又は治療剤、及びインフルエンザウイルス感染症の予防又は治療剤に関する。
従来から微生物のヒトに対する感染が問題視されている。特に、近年は交通手段の発達や人々の生活圏が拡大するに伴い、ヒトに対する様々な感染症の危険性がさらに高まっている。感染症に対する治療薬剤の代表的なものとして抗生物質が挙げられるが、抗生物質は病原体の体内における代謝経路を阻害することではじめてその効果を発揮する薬剤である。しかし、ウイルスの場合は、ウイルスがそのタンパク質合成とエネルギー産生機構のすべてを宿主細胞に依存し、自己の代謝経路を有しないことから、抗生物質では直接的なウイルス抑制作用を発揮させることはできない。したがって、現在では細菌よりもウイルスによる感染症の方が脅威となりつつある。
ウイルスは、細胞構造を持たない微小な微生物であり、ＤＮＡウイルスとＲＮＡウイルスとに大別される。ウイルスの感染様式としては、宿主細胞の崩壊が顕著な急性感染、臨床症状は比較的軽微にとどまるものの慢性化する持続感染、及びウイルスタンパク質の合成が長期間認められない状態で残存し続ける潜伏感染の３形態があり、一部の場合には癌を誘発することもある。
ヒトで疾患を引き起こすＲＮＡウイルスとしては、日本脳炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）などのフラビウイルス科、ロタウイルスなどのレオウイルス科、ムンプスウイルス、麻疹ウイルスなどのパラミキソウイルス科、インフルエンザウイルスなどのオルトミキソウイルス科、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）などのレトロウイルス科などが挙げられる。
このうち、Ｃ型肝炎ウイルスの感染により引き起こされるＣ型肝炎は、慢性化し易く、慢性化すると高い割合で肝硬変及び肝癌に進行する重篤な疾患であるため、有効な治療法が強く望まれている。インフルエンザウイルスについては、数年毎に世界的な流行が発生することがよく知られており、感染を放置すれば患者が死亡する場合があることも周知である。したがって、インフルエンザウイルスに対する有効な治療薬を市場に提供することも急務である。
ＲＮＡウイルスに対する抗ウイルス剤としては、インフルエンザウイルスに対して、アマンタジン、ザナミビル及びオセルタミビルなど、ＨＩＶに対して、ジドブジン、ネビラピン及びリトナビルなど、ＨＣＶに対して、リバビリンなどが挙げられる。
しかし、ウイルス性疾患に対する治療薬は、現状で用いられているものに対して副作用や有効性の点で問題が指摘されるなど、未だ開発途上にある。また、有効とされてきた抗ウイルス剤に対して耐性を有するウイルスが発生するという問題が生じる場合もある。したがって、現在も、新規な抗ウイルス剤の開発が望まれている。
本発明者らはこれまで、スプライシングの調節に関与するタンパク質の研究を行ってきた。その過程で、以下の式で表される化合物をはじめとする一群の化合物がリン酸化酵素であるＳＲＰＫに対する阻害活性を示し、抗ウイルス作用を有することを発見し、特許文献１中に開示している。
国際公開パンフレットＷＯ２００５／０６３２９３
ウイルス、特にＲＮＡウイルスは、突然変異速度が速いため、これまでに開発された、ウイルスのプロテアーゼや逆転写酵素などを標的とする既存の抗ウイルス剤は、有効性が失われる速度も早く、さらなる効果的な抗ウイルス剤の開発が待望されてきた。
特に、近年、ＳＡＲＳ、鳥インフルエンザ、Ｃ型肝炎をはじめ、種々の新規ウイルスによるウイルス性疾患が社会的な脅威となっている。それゆえ、本発明の課題は、既存薬に耐性を示すウイルスや新規なウイルスに対応でき、適用性が広い新たな抗ウイルス剤の開発である。
本発明者らは、従来から、ウイルス遺伝子の発現に関与する宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素に着目して研究を行なってきた。特にウイルスタンパク質の翻訳を制御するタンパク質リン酸化酵素を阻害する多数の化合物を合成し、スクリーニングした結果、下記式Ｉの構造を有する化合物が優れた抗ウイルス活性を有することを見出した。
すなわち本発明は、宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素を阻害する化合物を含有する抗ウイルス剤、特に、式Ｉの構造を有する化合物又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する、ウイルス感染症の予防又は治療剤及びその使用方法に関する。さらに、本発明はＲＮＡウイルスにより引き起こされるウイルス感染症の予防又は治療剤及びその使用方法に関する。
より具体的には、本発明は以下の特徴を有する。
〔１〕宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素を阻害する化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤。
〔２〕前記タンパク質リン酸化酵素が、ウイルス感染で活性化される宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素である、上記〔１〕に記載の抗ウイルス剤。
〔３〕前記タンパク質リン酸化酵素が、ウイルスタンパク質の翻訳を制御する宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素である、上記〔１〕又は〔２〕に記載の抗ウイルス剤。
〔４〕ウイルス感染症がＲＮＡウイルスによって引き起こされるものである、上記〔１〕〜〔３〕のいずれか１つに記載の抗ウイルス剤。
〔５〕ウイルス感染症がＣ型肝炎ウイルス、又はインフルエンザウイルスによって引き起こされるものである、上記〔１〕〜〔４〕のいずれか１つに記載の抗ウイルス剤。
〔６〕以下の一般式（Ｉ）
（式中、Ｒ１は、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基を示し；
Ｒ２は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基若しくはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基又は単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｓ）−を示し；
Ｗは、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよい単環式又は二環式含窒素複素環基を示す。）
で表される化合物、又はその製薬上許容される塩を含有する、ＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
〔７〕前記式（Ｉ）中、
Ｒ１は、フッ素、又はトリフルオロメチル基を示し；
Ｒ２は、水素原子であり；
Ｒ３は、メチル基、メトキシ基若しくはフッ素で置換されていてもよいフェニル基、又はメチル基で置換されていてもよい単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
Ｗは、フッ素原子、又は環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す、
上記〔６〕に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
〔８〕前記式（Ｉ）の化合物が、以下のもの：
からなる群より選択される化合物又はその製薬上許容される塩である、上記〔６〕に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
〔９〕前記式（Ｉ）中、
Ｒ１は、トリフルオロメチル基を示し；
Ｒ２は、水素原子であり；
Ｒ３は、フェニル基、又は単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
Ｗは、環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す、
上記〔６〕に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
〔１０〕前記式（Ｉ）の化合物が、以下のもの：
からなる群より選択される化合物又はその製薬上許容される塩である、上記〔６〕に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
〔１１〕以下のもの：
からなる群より選択される化合物、若しくはその製薬上許容される塩、又はこれらの水和物。
〔１２〕また、本発明は、ＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤の製造のための、前記一般式（Ｉ）で表される化合物、又はその製薬上許容される塩の使用に関する。
〔１３〕さらに、本発明は、前記一般式（Ｉ）で表される表される化合物、又はその製薬上許容される塩の有効量を、ＲＮＡウイルス感染症の患者に投与することを含む、ＲＮＡウイルス感染症の治療方法に関する。
本発明者らは、多数の化合物を合成し、スクリーニングした結果、式Ｉの構造を有する化合物が優れた抗ＲＮＡウイルス活性を有することを見出した。これらの化合物は、動物細胞内に存在するリン酸化酵素を阻害する。驚くべきことに、これらの化合物は、それぞれ異なる複数のタイプのＲＮＡウイルスに対して有効であることが見出された。
すなわち本発明は、ＲＮＡウイルス疾患の治療に新たな選択肢を提供するものである。特に、本発明に係る抗ＲＮＡウイルス剤は、社会的に問題となる重篤な疾患を引き起こす、Ｃ型肝炎ウイルス及びインフルエンザウイルスに対して有効である。
図１Ａは、ＬｕＨＣＶ細胞を用いて、ＨＣＶの発現・複製の程度をルシフェラーゼ活性を指標に算出した図である。得られた発光強度の数値から、各試験化合物、各濃度での平均値を算出し、試験物質の対照として用いたＤＭＳＯの発光強度を１００％としてそれぞれの試験化合物の発光強度の割合を算出した。黒三角：化合物２、×：化合物５、＊：化合物６を用いた場合を示す。
図１Ｂは、図１Ａの条件下でのＬｕＨＣＶ細胞の生細胞の割合を示す図であり、試験物質の対照として用いたＤＭＳＯ添加時の生細胞を１００％として算出した値を示している。黒三角：化合物２、×：化合物５、＊：化合物６を用いた場合を示す。
図２Ａは、図１Ａと同様の方法によりＬｕＨＣＶ細胞を用いて試験化合物存在下・非存在下でのＨＣＶの発現・複製の程度をルシフェラーゼ活性を指標に算出した結果である。試験物質の対照として用いたＤＭＳＯの発光強度を１００％として、それぞれの試験化合物について、それぞれの濃度での発光強度の割合を示している。
図２Ｂは、図１Ｂと同様の方法によりＬｕＨＣＶ細胞の生細胞の割合を示す図であり、試験物質の対照として用いたＤＭＳＯ添加時の生細胞を１００％として算出した値を示している。
図３Ａは、本発明の化合物のＨＣＶタンパク質に対する翻訳抑制効果を示す図である。ＬｕＨＣＶ細胞培養中に化合物５、又は試験化合物の対照としてＤＭＳＯを添加し、図中に示したそれぞれの時間、培養した後、抗ＮＳ５Ａ抗体又は抗β−アクチン抗体によりイムノブロットを行い、化合物５添加時のＮＳ５Ａの発現について検討した。
図３Ｂは、本発明の化合物がＨＣＶ−ＲＮＡ複製には作用しないことを示す図である。ＬｕＨＣＶ細胞培養中に化合物５、又は試験化合物の対照としてＤＭＳＯを添加し、図中に示したそれぞれの時間、培養した後、ＮＳ５Ａに対する特異的プライマー、又はＧＡＰＤＨに対する特異的プライマーを用い、ＲＴ−ＰＣＲ法により化合物５添加時のＮＳ５Ａ−ＲＮＡの量について検討を行った。
図４は、化合物５がＬｕＨＣＶ細胞に対して全く増殖抑制能や細胞障害性を有さないことを示す図である。化合物５の２０μＭ添加時において、対照として用いたＤＭＳＯと全く同様な増殖を示している。
図５は、本発明の化合物がインフルエンザウイルスに対しても抗ウイルス効果を有することを示す図である。試験化合物を添加しなかったＤＭＳＯ対照のＭＤＣＫ細胞はインフルエンザウイルスに感染し、高い割合で死滅し、プレートから剥離していたが、試験化合物添加群では細胞死による細胞の剥離は抑制された。
図６は、本発明の化合物のインフルエンザウイルス感染細胞に対する細胞死抑制効果を示す図である。試験化合物非存在下ではインフルエンザウイルスの感染により、生細胞の割合が４０％以下になったが、化合物５、化合物６又は化合物１４の添加により細胞死が低減されることが明らかとなった。
図７は、本発明の化合物５のインビボ毒性試験を示す図である。１０００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙでの７日間の反復投与においても死亡例は認められず、試験化合物投与群は、対照溶媒投与群（Ｐｌａｓｅｂｏ投与群）と比較して、全く差異を認めない順調な体重増加を示した。
以下に、本明細書において記載する用語、記号等の意義を説明し、本発明を詳細に説明する。
本発明において、「宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素」とは、動物細胞の細胞内に存在するタンパク質リン酸化酵素を意味する。本明細書中では、タンパク質リン酸化酵素は単に「リン酸化酵素」と称される場合もある。本発明におけるリン酸化酵素は、特に、ウイルスタンパク質の翻訳を制御するリン酸化酵素である。
リン酸化酵素活性の評価方法は、当該秘術分野で周知である。具体的には、例えば、特開２００２−２３６１２５号、特開平９−６８５２７号及び特開２００５−１１２８１２号などに記載されている。
本明細書における「Ｃ１−６アルキル基」とは、炭素数１〜６個の脂肪族炭化水素から任意の水素原子を１個除いて誘導される一価の基である、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝鎖状のアルキル基を意味し、具体的には例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−１−ブチル基、３−メチル−１−ブチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、１−ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、２−メチル−１−ペンチル基、３−メチル−１−ペンチル基、４−メチル−１−ペンチル基、２−メチル−２−ペンチル基、３−メチル−２−ペンチル基、４−メチル−２−ペンチル基、２−メチル−３−ペンチル基、３−メチル−３−ペンチル基、２，３−ジメチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−１−ブチル基、２，２−ジメチル−１−ブチル基、２−エチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−２−ブチル基、２，３−ジメチル−２−ブチル基等が挙げられる。
本明細書における「Ｃ１−６アルコキシ基」とは前記定義の「Ｃ１−６アルキル基」が結合したオキシ基であることを意味し、具体的には例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロピルオキシ基、２−プロピルオキシ基、２−メチル−１−プロピルオキシ基、２−メチル−２−プロピルオキシ基、１−ブチルオキシ基、２−ブチルオキシ基、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−１−ブチルオキシ基、３−メチル−１−ブチルオキシ基、２−メチル−２−ブチルオキシ基、３−メチル−２−ブチルオキシ基、２，２−ジメチル−１−プロピルオキシ基、１−ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルオキシ基、４−メチル−１−ペンチルオキシ基、２−メチル−２−ペンチルオキシ基、３−メチル−２−ペンチルオキシ基、４−メチル−２−ペンチルオキシ基、２−メチル−３−ペンチルオキシ基、３−メチル−３−ペンチルオキシ基、２，３−ジメチル−１−ブチルオキシ基、３，３−ジメチル−１−ブチルオキシ基、２，２−ジメチル−１−ブチルオキシ基、２−エチル−１−ブチルオキシ基、３，３−ジメチル−２−ブチルオキシ基、２，３−ジメチル−２−ブチルオキシ基等があげられる。
本明細書における「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味する。
本明細書における「ハロゲン化Ｃ１−６アルキル基」とは前記定義「Ｃ１−６アルキル基」中の任意の少なくとも１つの水素原子を、前記定義「ハロゲン原子」で置換した基を意味する。たとえば、トリフルオロメチル基、ジフルオロメチル基、モノフルオロメチル基などが挙げられる。
本明細書における「単環式複素環基」及び「単環式又は二環式複素環基」とは、環原子として、炭素原子、及びヘテロ原子を含む環状構造を有する基を意味する。ヘテロ原子は、一般的には酸素、窒素又は硫黄である。
本明細書における「塩」とは、本発明に係る化合物と塩を形成し、かつ製薬上許容されるものであれば特に限定されず、例えば、無機酸塩、有機酸塩、無機塩基塩、有機塩基塩、酸性又は塩基性アミノ酸塩などが挙げられる。
無機酸塩の好ましい例としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などがあげられ、有機酸塩の好ましい例としては、例えば酢酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ステアリン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩などが挙げられる。
無機塩基塩の好ましい例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、アンモニウム塩などがあげられ、有機塩基塩の好ましい例としては、例えばジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、メグルミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩などが挙げられる。
酸性アミノ酸塩の好ましい例としては、例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩などが挙げられ、塩基性アミノ酸塩の好ましい例としては、例えばアルギニン塩、リジン塩、オルニチン塩などが挙げられる。
また、本発明の化合物は、大気中に放置しておくことにより、水分を吸収し、吸着水が付いたり、水和物となったりする場合があり、そのような水和物も本発明の塩として包含される。
さらに、本発明の化合物は、他のある種の溶媒を吸収し、溶媒和物となる場合があるが、そのような塩も本発明に包含される。
また、本明細書において、「又は」という用語は非排他的に用いられる。例えば「Ａ、Ｂ、又はＣ」は、Ａ、Ｂ、又はＣのいずれかの要素を少なくとも含むことを意味しているに過ぎず、Ａ、Ｂ、及びＣの２つ以上又は３つ全てを含むもの、及びそれ以外の要素を含むものも含まれる。
また本明細書において下記の表に示す化合物は、化合物番号で表す場合もある。これらの化合物は、化合物番号を引用して「化合物−−」として表記されることもある。
本明細書において「抗ウイルス剤」とは、ウイルスによる感染症の予防又は治療に対して有効な薬剤を意味する。本明細書において「抗ＲＮＡウイルス剤」とは、ＲＮＡウイルスによる感染症の予防又は治療に対して有効な薬剤を意味する。
本明細書において、「抗ウイルス作用」とは、ウイルスの増殖を抑制する作用、ウイルスの感染を低減する作用、感染したウイルスを減少又は排除する作用など、ウイルス感染を予防又は治療するための機構として有用ないずれの作用も含むものと理解される。本明細書において、「抗ＲＮＡウイルス作用」とは、ＲＮＡウイルスの増殖を抑制する作用、ＲＮＡウイルスの感染を低減する作用、感染したＲＮＡウイルスを減少又は排除する作用など、ＲＮＡウイルス感染を予防又は治療するための機構として有用ないずれの作用も含むものと理解される。
本願発明のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤の有効成分としては、次の一般式（Ｉ）で示される化合物、及びそれらの製薬上許容される塩を用いることができる。
一般式（Ｉ）：
式中、
Ｒ１は、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基を示し；
Ｒ２は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基若しくはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基又は単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｓ）−を示し；
Ｗは、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよい単環式又は二環式含窒素複素環基を示す。
さらに、好ましくは、前記式（Ｉ）中、
Ｒ１は、フッ素、又はトリフルオロメチル基を示し；
Ｒ２は、水素原子であり；
Ｒ３は、メチル基、メトキシ基若しくはフッ素で置換されていてもよいフェニル基、又はメチル基で置換されていてもよい単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
Ｗは、フッ素原子、又は環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す。
さらに、好ましくは、前記式（Ｉ）中、
Ｒ１は、トリフルオロメチル基を示し；
Ｒ２は、水素原子であり；
Ｒ３は、フェニル基、又は単環式複素環基を示し；
Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
Ｗは、環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す。
さらにより好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、以下のもの：
からなる群より選択される。
最も好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、以下のもの：
からなる群より選択される。
以下、一般式（Ｉ）で表される具体的な化合物について、下記に挙げることができるが、本発明は、以下に列挙された化合物に限定されるものではない。
すなわち、本発明は上記に例示した任意の化合物、特に上記例示化合物番号：化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、化合物９、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、化合物１６、化合物１７、化合物１８、化合物１９、化合物２０、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び化合物２４の少なくとも１種を含有する抗ウイルス剤に関し、さらに好ましくは以下の構造式で示される上記例示化合物番号：化合物２、化合物５、化合物６、化合物１４、化合物１７、化合物１８、化合物２０、及び化合物２２の化合物：
の少なくとも１種を含有する抗ウイルス剤に関する。
これらの化合物（アニリン誘導体）、若しくはその製薬上許容される塩は、抗ＲＮＡウイルス剤として有効である。
本発明の化合物を抗ウイルス剤として用いる対象となるウイルスとしては、フラビウイルス科及びオルトミキソウイルス科に属するＲＮＡウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。他のウイルスとしては、レトロウイルス科、パラミキソウイルス科、アレナウイルス科、フィロウイルス科、ラブドウイルス科、ブニアウイルス科、コロナウイルス科、トガウイルス科、レオウイルス科、カリシウイルス科、及びピコナウイルス科に属するＲＮＡウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。好適なものはヒト病原性ＲＮＡウイルスである。最も好適なウイルスはＣ型肝炎ウイルス及びインフルエンザウイルスである。
本発明に係る前記式（Ｉ）で表される化合物の代表的な製造方法について以下に記す。なお、本発明に係る前記式（Ｉ）で表される化合物については、国際公開パンフレットＷＯ２００５／０６３２９３中にも記載があり、その内容は参照により本明細書中に組み入れられる。
以下、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｑ、Ｗは、前記式（Ｉ）における定義と同意義である。室温とは、２０〜３０℃程度の温度を意味する。
製造方法Ａ
ステップ１
化合物１ａと化合物２ａとを反応させ、化合物３ａを得るステップである。原料のニトロベンゼン誘導体１ａは、市販品又は適宜官能基を誘導して入手する。Ｈａｌは、脱離基となるハロゲン原子である。化合物２ａは導入する−ＮＲ５Ｒ６を含む試薬であり、Ｘは水素原子などである。化合物２ａは、１〜２当量用いることが好ましい。反応は、溶媒中、塩基の存在下で行うことができる。
塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、４−（ジメチルアミノ）ピリジン等を用いることができる。塩基は１〜５当量用いることが好ましい。また、塩基として過剰量（１から５当量）のＸ−ＮＲ５Ｒ６を代わりに用いることができる。
溶媒としては、例えばジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、トルエン等を挙げることができる。
反応は、反応温度を０℃から１５０℃として行うことができるが、好ましくは室温で行うことができる。
ステップ２
化合物３ａのニトロ基をアミノ基に還元し、化合物４ａを得るステップである。
還元方法としては、溶媒中、塩化スズ等の存在下、濃塩酸等を接触させて行うことができる。その他、接触水素化などの一般的な還元反応も利用可能である。
反応溶媒としてはメタノール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタン、１，４−ジオキサン、水、又はこれらの混合溶媒を用いることができる。
還元剤となる塩化スズ等は質量比で１〜２０当量の量を用いることが好ましい。反応温度は０℃から１００℃で反応を行うことができる。
なお化合物３ａ及び４ａは市販品を入手できる場合もあり、その場合は市販品を用いればよい。特に一般式（Ｉ）のＷが水素又はハロゲンの場合は、多くの場合、市販品を入手可能である。
ステップ３ａ
化合物４ａと化合物５ａを反応させ、化合物６ａを得るステップである。Ｌはハロゲン原子などである。
反応は、溶媒中、塩基の存在下、必要に応じ触媒を添加して行うことができる。この場合、化合物５ａを１〜３当量用いることが好ましい。
反応溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、トルエン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどを用いることができる。
塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、４−（ジメチルアミノ）ピリジン等を用いることができる。
その他、Ｌが水酸基である場合に縮合剤を用いる一般的なアミド結合形成反応などや、Ｌとしてスクシンイミジル基やイミダゾイル基などの脱離基である場合の一般的なアミド結合形成反応も利用可能である。
触媒としては、４−（ジメチルアミノ）ピリジンなどが挙げられる。
反応温度０℃から１００℃で反応を行うことができる。
ステップ３ｂ
化合物４ａと化合物５ｂとを反応させ、化合物６ｂを得るステップである。
反応は、溶媒中、塩基の存在下でアシルイソチオシアナートを作用させて行うことができる。アシルイソチオシアナートは、市販品、又は適宜アシルハライドとチオシアン酸塩とから反応溶液中で調製したものをそのまま用いることができる。アシルイソチオシアナートは、１〜５当量用いることが好ましい。チオシアン酸塩としては、チオシアン酸カリウム、チオシアン酸ナトリウム、チオシアン酸アンモニウム等を用いることができ、１〜５当量用いることが好ましい。
溶媒としては、例えばアセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、エチレングリコールジメチルエーテル、１，４−ジオキサン等を挙げることができる。
塩基としては、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、４−（ジメチルアミノ）ピリジン等を用いることができる。塩基は、１〜５当量用いることが好ましい。
反応温度０℃から１５０℃で反応を行うことができる。
ステップ４ａ
化合物６ａのアミド基部分をアルキル化（Ｒ２化）し、化合物７ａを得るステップである。
反応は、溶媒中、塩基の存在下でアルキル化試薬（Ｒ２−Ｘ）を用いて行うことができる。Ｘは、脱離基となるハロゲン原子又はスルホン酸エステルである。アルキル化試薬（Ｒ２−Ｘ）は、１〜５当量用いることが好ましい。
溶媒としては、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、エチレングリコールジメチルエーテル、１，４−ジオキサン、アセトニトリル、エーテル等をあげることができる。
塩基としては、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、メチルリチウム、フェニルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることができる。塩基は、１〜５当量用いることが好ましい。
反応温度０℃から１５０℃で反応を行うことができる。
ステップ４ｂ
化合物６ａのアミド結合のカルボニル基をチオカルボニル基へと変換し、化合物７ｂを得るステップである。
反応は、溶媒中、チオカルボニル化試薬を用いて行う。チオカルボニル化試薬としては、例えばＬａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬（２，４−ｂｉｓ（４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−１，３，２，４−ｄｉｔｈｉａｄｉｐｈｏｓｐｈｅｔａｎｅ ２，４−ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ）、五硫化二リン（十硫化四リン、Ｐ４Ｓ１０）等を用いることができる。チオカルボニル化試薬は、１〜５当量用いることが好ましい。
溶媒としては、例えばトルエン、ベンゼン、クロロベンゼン、キシレン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、エチレングリコールジメチルエーテル、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン等を挙げることができる。
反応温度０℃から２００℃で反応を行うことができる。
以上が本発明にかかる化合物（Ｉ）の製造方法の代表例であるが、本発明化合物の製造における原料化合物・各種試薬は、塩や水和物あるいは溶媒和物を形成していてもよく、いずれも出発原料、使用する溶媒等により異なり、また反応を阻害しない限りにおいて特に限定されない。用いる溶媒についても、出発原料、試薬等により異なり、また反応を阻害せず出発物質をある程度溶解するものであれば特に限定されないことは言うまでもない。本発明に係る化合物（Ｉ）がフリー体として得られる場合、前記の化合物（Ｉ）が形成していてもよい塩又はそれらの水和物の状態に常法に従って変換することができる。
本発明に係る化合物（Ｉ）が化合物（Ｉ）の塩又は化合物（Ｉ）の水和物として得られる場合、前記の化合物（Ｉ）のフリー体に常法に従って変換することができる。
また、本発明に係る化合物（Ｉ）について得られる種々の異性体（例えば幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、回転異性体、立体異性体、互変異性体、等）は、通常の分離手段、例えば再結晶、ジアステレオマー塩法、酵素分割法、種々のクロマトグラフィー（例えば薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、等）を用いることにより精製し、単離することができる。
本発明の化合物は、製薬上許容される担体と共に組成物とすることができる。例えば、周知の製剤技術を適用して、医薬組成物としてよい。本発明の医薬組成物を、抗ウイルス剤（すなわち、ウイルス感染症の予防剤又は治療剤）、あるいはその他の医薬として使用する場合、その投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、トローチ剤若しくはシロップ剤等による経口投与、又は注射剤、エアゾール剤、座剤、貼布剤、パップ剤、ローション剤、リニメント剤、軟膏剤、若しくは点眼剤等による非経口投与を挙げることができる。これらの製剤は、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、安定化剤、矯味矯臭剤、希釈剤などの添加剤を用いて周知の方法で製造される。
例えば、賦形剤としては、デンプン、バレイショデンプン、トウモロコシデンプン等のデンプン、乳糖、結晶セルロース、リン酸水素カルシウム等を挙げることができる。
コーティング剤としては、例えば、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、セラック、タルク、カルナウバロウ、パラフィン等を挙げることができる。
結合剤としては、例えばポリビニルピロリドン、マクロゴール及び前記賦形剤と同様の化合物を挙げることができる。
崩壊剤としては、例えば前記賦形剤と同様の化合物及びクロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾されたデンプン・セルロース類を挙げることができる。
安定化剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェエノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；及びソルビン酸を挙げることができる。
矯味矯臭剤としては、例えば通常使用される、甘味料、酸味料、香料等を挙げることができる。
また、液剤を製造するための溶媒としては、エタノール、フェノール、クロロクレゾール、精製水、蒸留水等を使用することができる。
界面活性剤又は乳化剤としては、例えば、ポリソルベート８０、ステアリン酸ポリオキシル４０、ラウロマクロゴール等を挙げることができる。
本発明の医薬組成物を、抗ウイルス剤として使用する場合、本発明の化合物又はその製薬上許容される塩の使用量は症状、年齢、投与方法等により異なる。例えば経口投与の場合、患者（温血動物、特に人間）に対して１日あたり、下限として０．０１ｍｇ（好ましくは０．１ｍｇ）、上限として、２０００ｍｇ（好ましくは５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇ）を１回又は数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。静脈内投与の場合には、成人に対して１日当たり、下限として０．００１ｍｇ（好ましくは０．０１ｍｇ）、上限として、５００ｍｇ（好ましくは５０ｍｇ）を１回又は数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。
［対象ウイルス］
本発明の化合物を抗ウイルス剤として用いる対象となるウイルスとしては、上記のとおり、フラビウイルス科及びオルトミキソウイルス科に属するＲＮＡウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。対象となる他のウイルスとしては、例えば、レトロウイルス科、パラミキソウイルス科、アレナウイルス科、フィロウイルス科、ラブドウイルス科、ブニアウイルス科、コロナウイルス科、トガウイルス科、レオウイルス科、カリシウイルス科、及びピコナウイルス科に属するＲＮＡウイルスが挙げられるが、好適なものはヒト病原性ＲＮＡウイルスである。最も好適なウイルスはＣ型肝炎ウイルス及びインフルエンザウイルスである。
［ウイルス感染症］
本発明の化合物を、その予防及び治療目的で使用することができるウイルス感染症としては、Ｃ型肝炎及び日本脳炎などのフラビウイルス感染症、インフルエンザなどのオルトミキソウイルス感染症、ＡＩＤＳなどのレトロウイルス感染症、麻疹又は流行性耳下腺炎などのパラミキソウイルス感染症、風疹などのトガウイルス感染症、ロタウイルス感染症などが挙げられるが、これらに限定されない。
［治療方法］
本発明には、本発明にかかるウイルス感染症の予防又は治療剤を投与することによるウイルス感染症の予防又は治療方法が包含される。本発明のウイルス感染症の予防又は治療剤は、例えば、体内濃度が１００ｎＭ〜１ｍＭの間のいずれかになるように、間欠的若しくは持続的に、経口、経皮、粘膜下、皮下、筋肉内、血管内、脳内、又は腹腔内に投与することができる。
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、これらは例示的なものであって、本発明はこれら実施例に制限されるものではない。なお、本明細書中に引用された文献は、すべて本明細書の一部として組み入れられる。
下記で、カラムクロマトグラフィーはシリカゲル（ＭＥＲＣＫ ９３８５−５Ｂ，７０−２３０ｍｅｓｈ）を用いて行った。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、あらかじめシリカゲルが塗布されたガラスプレート（ＭＥＲＣＫ ５７１５，ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０Ｆ２５４）を用いて行った。融点は、ヤナコ社製微量融点測定装置 ＹＡＮＡＣＯ ＭＰ−５００Ｄ又はＭＰ−Ｊ３を用いて測定した。１Ｈ ＮＭＲスペクトル及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルは日本電子（ＪＥＯＬ）社製 ＪＮＭ ＡＬ−４００核磁気共鳴装置又はバリアン（Ｖａｒｉａｎ）社製 ＭＥＲＣＵＲＹ ３００を用いて測定した。ＮＭＲスペクトル測定用溶媒には、ＣＤＣｌ３又はＣＤ３ＯＤ（ＩＳＯＴＥＣ社製又はＣＩＬ社製）を使用した。化学シフトはテトラメチルシラン（（ＣＨ３）４Ｓｉ）を内部標準（０ｐｐｍ）として相対的な値として表し、結合定数（Ｊ）はＨｚで示した。略号ｓ、ｄ、ｔ、ｍ、及びｂｒはそれぞれ単重線、二重線、三重線、四重線、多重線、及びブロードピークを表す。赤外分光スペクトル（ＩＲ）は、島津製作所製 ＦＴＩＲ−８１００Ａ又はＩＲ Ｐｒｅｓｔｉｇｅ−２１を用いて測定した。質量分析（ＭＳ）は島津製作所製 ＧＣＭＳ−ＱＰ５０５０を用いて測定した。ＭＳの分子イオンピークは整数値で表記した。元素分析はヤナコ分析工業社製 ＭＴ−６を用いて行った。
［参考例１］ 化合物１の合成
化合物１の代表的な合成法は以下の通りである。
［参考例１−１Ａ］
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（４２７ｍｇ，２．０４ｍｍｏｌ、商用品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ））（１ｍＬ）溶液に順次、ピペリジン（ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（２２０μＬ，２．２２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｎ，Ｎ−ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２２０μＬ，２．４０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を１時間撹拌した。これに水を添加し、混合物をエーテル（×３）で抽出した。抽出された有機層は、ブラインで洗浄、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（４０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン（１−［２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（５６１ｍｇ，２．０４ｍｍｏｌ，ｑｕａｎｔ．）をオレンジ色の固体として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。：ＴＬＣ Ｒｆ ０．４７（ｈｅｘａｎｅ／ａｃｅｔｏｎｅ＝１６／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６１−１．６８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７２（ｔｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．３，５．３Ｈｚ，２ＣＨ２），３．１３（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）７．６１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
［参考例１−２Ａ］
参考例１−１Ａで得られた１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン（１−［２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（５５９ｍｇ，２．０３ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に順次、濃塩酸（２．００ｍＬ，２４．０ｍｍｏｌ）及び無水二塩化スズ（２．５０ｇ，１３．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１７．５時間撹拌した。これに重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を添加した。混合物を酢酸エチル（×３）で抽出した。得られた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１４／１）で精製し、２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（４４８ｍｇ，１．８３ｍｍｏｌ，９０．４％）を淡黄色の固体として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。ＴＬＣ Ｒｆ ０．３０（ｈｅｘａｎｅ／ａｃｅｔｏｎｅ＝１８／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．５９−１．６０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７１（ｔｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．４，５．４Ｈｚ，２ＣＨ２），２．８５（ｂｒｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），４．０９（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），６．９７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
［参考例１−３Ａ］
参考例１−２Ａで得られた２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１７３ｍｇ，０．７０８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）（５ｍＬ）溶液に順次、イソニコチノイルクロリド塩酸塩（ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１５１ｍｇ，０．８５０ｍｍｏｌ、商用品）、トリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（４５０μＬ，３．２３ｍｍｏｌ）、及び触媒量の４−（ジメチルアミノ）ピリジン（４−（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｙｒｉｄｉｎｅ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１９．５時間撹拌した。これに水を添加し、混合物を酢酸エチル（×３）で抽出した。得られた有機層を重炭酸ナトリウム飽和水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、そして減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１．５／１）及び再結晶（ヘキサン）にて精製し、Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（化合物１）（８３．８ｍｇ，０．２４０ｍｍｏｌ，３３．９％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ９６−９８℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．４０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６７−１．６８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．７８（ｔｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．５，５．５Ｈｚ，２ＣＨ２），２．８８（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７６（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．０，４．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８６（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．０，４．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．５３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）４９７，５８６，６４８，６８２，７５０，８８７，８８１，８９８，９１８，９３１，１０２６，１０７４，１１２２，１１６７，１２４６，１３３６，１３７９，１４０８，１４４１，１４６２，１５３１，１５５６，１５８７，１６８２，２８１８，２８５１，２９４１，３３２３．
［参考例１−１Ｂ］
１−クロロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−ｃｈｌｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（５．００ｇ，２２．４ｍｍｏｌ、商用品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ））（７ｍＬ）溶液に、ピペリジン（ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（５．５０ｍＬ，５５．５ｍｍｏｌ、商用品）を０℃にて加え、混合物を４０分間撹拌した。これに水を加えたのち、混合物を酢酸エチルで抽出した（×３）。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２００ｇ，ヘキサン／酢酸エチル＝８／１）にて精製し、１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン（１−［２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（６．１３ｇ，ｑｕａｎｔ．）をオレンジ色の固体として得た。
［参考例１−２Ｂ］
参考例１−１Ｂで得られた１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン（１−［２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）（６．１３ｇ，２２．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）（１０ｍＬ）溶液に、濃塩酸（１２．２ｍＬ，１４６ｍｍｏｌ）及び無水二塩化スズ（１２．７ｇ，６７．２ｍｍｏｌ）を０℃にて順次加え、混合物を７時間撹拌した。これに水を加え、混合物を酢酸エチル（×３）で抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２００ｇ，ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１）にて精製し、２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（４．５５ｇ，８３．０％）を淡黄色の固体として得た。
［参考例１−３Ｂ］
参考例１−２Ｂで得られた２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（４．４５ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）（１０ｍＬ）溶液に、イソニコチノイルクロリド塩酸塩（ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（６．４８ｇ，３６．４ｍｍｏｌ、商用品）、及びトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（５．５７ｍＬ，５４．６ｍｍｏｌ）、を０℃にて順次加え、混合物を０．５時間撹拌した。これに水を加え、混合物を酢酸エチル（×３）で抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２００ｇ，ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）及び再結晶（ヘキサン）にて精製し、Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（化合物１）（５．４９ｇ，８６．３％）を無色の固体として得た。
［参考例２］ 化合物２の合成
参考例１−３で得られたＮ−［２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（化合物１）（５２８ｍｇ，１．５１ｍｍｏｌ）のトルエン（２．５ｍＬ）溶液に、Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬（３２８ｍｇ，０．８１１ｍｍｏｌ、商用品）を加え、混合物を１００℃にて１２時間還流撹拌した。室温に戻した後、これに２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えて溶液をアルカリ性にし、さらに混合物を１２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（×３）で逆抽出した。得られた水層に２Ｍ塩酸を加えて溶液を酸性としたのち混合物をエーテル（×３）で抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ，ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製し、Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸チオアミド（Ｎ−［２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｔｈｉｏａｍｉｄｅ）（化合物２）（１８６ｍｇ，３３．７％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １０８−１０９℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２７（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６１−１．６２（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．６８（ｔｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．０，５．０Ｈｚ，２ＣＨ２），２．８７（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２ＣＨ２），７．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６，７．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７１（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．６，６．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．７６（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．６，６．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１０．５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７４１，８２６，８９１，１０１３，１０７６，１１２５，１１６７，１２３３，１２７１，１３３５，１３７７，１４１０，１４３７，１４６２，１５２６，１５９１，１６１６，２８２０，２８５１，２９３８，３１６３．
［参考例３］ 化合物３の合成
チオシアン酸カリウム（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ、商用品）（１９８ｍｇ，２．０４ｍｍｏｌ）及びニコチノイルクロリド塩酸塩（ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（２７２ｍｇ，１．５３ｍｍｏｌ、商用品）のアセトニトリル（１５ｍＬ）溶液を８０℃にて１時間撹拌した。混合物を室温に戻したのち、これに参考例１−２で得られた２−（１−ピペリジニル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２５０ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２８５μＬ，２．０４ｍｍｏｌ）を順次加え、混合物を５０℃にて１時間撹拌した。これを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。得られた有機層を水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３０ｇ，ヘキサン／酢酸エチル／ジクロロメタン＝６／３／４）にて精製し、１−ニコチノイル−３−［２−（１−ピペリジル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（１−ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−３−［２−（１−ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物３）（７０．７ｍｇ，３０．１％）を淡黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １５５−１５６℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２１（ヘキサン／酢酸エチル／ジクロロメタン＝４／３／３）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ １．６１（ｍ，２Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，ＣＨ２），１．８１（ｍ，４Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２ＣＨ２），２．８９（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，１．７，８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，４．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０９（ｂｒ ｓ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ，ＮＨ），９．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１２．９（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６４４，７０４，７３１，８０４，８２６，８８３，９０８，１０２６，１０７８，１１２３，１１６５，１２０４，１２２１，１２７１，１２９８，１３３５，１４３９，１４７９，１５３１，１５８７，１６１４，１６７８，２８１４，２８５５，２９４０．
［参考例４］ 化合物４の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（５００ｍｇ，２．３９ｍｍｏｌ，市販品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（４ｍＬ）溶液に、ヘキサメチレンイミン（Ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（６７３μＬ，５．９８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１時間撹拌した。これに水を添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物を、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）により精製し、１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ヘキサメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（６９６ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．３８（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．５８−１．６１（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．８４（ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），３．３１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．９８（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ヘキサメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（５００ｍｇ，１．７３ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に、連続的に１２Ｎ ＨＣｌ（０．９４ｍＬ，１１．３ｍｍｏｌ）、ＳｎＣｌ２（１．１５ｇ，６．０６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、２時間撹拌した。これに炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を添加後、吸引濾過した。混合物は、酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物を、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１５／１）で精製し、２−（アザシクロヘプタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（３５６ｍｇ，７９．８％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．３８（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７２−１．７９（ｍ，８Ｈ，４ＣＨ２），３．０４（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２ＣＨ２），４．０９（ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），６．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（９７．２ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（１５ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（３５６ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて４０分間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロヘプタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２５８ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２７９μＬ，２．００ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を５０℃に加熱して、１時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロヘプタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物４）（４０６ｍｇ，９６．１％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ４２−４５℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．４３（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７２−１．７４（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．７９−１．８３（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），３．１８（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５０（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２０−８．２３（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．６８（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６，４．６Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．１７（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１２．５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７０４，７３９，８２４，８７６，８９３，１０２４，１０７８，１１２１，１１６３，１１９６，１２１７，１２６５，１３３１，１３８９，１４２０，１４３９，１４７７，１５３３，１５８９，１６１４，１６７６，２８５５，２９３０，３１５０．
［参考例５］ 化合物５の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（５５０ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ，市販品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（４ｍＬ）溶液にヘプタメチレンイミン（Ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（７６０μＬ，５．９８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１時間撹拌した。これに水を添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物を、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ヘプタメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（７９４ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．４４（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．５３（ｍ，６Ｈ，３ＣＨ２），１．７７（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），３．４０（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．９０（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
１−［２−ニトロ−４−（トルフルオロメチル）フェニル］ヘプタメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（５００ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のメタノール（６ｍＬ）溶液に、連続的に１２Ｎ ＨＣｌ（８９０μＬ，１０．７ｍｍｏｌ）、ＳｎＣｌ２（１．１０ｇ，５．７８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１時間撹拌した。これに炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を添加後、吸引濾過した。混合物は、酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物は、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。
残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１５／１）で精製し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（３２３ｍｇ，７１．７％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．４４（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６９−１．８０（ｂｒ ｓ，１０Ｈ，５ＣＨ２），２．９８−３．１０（ｂｒ ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），４．２１（ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９４−６．９６（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（９７．２ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（１５ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（３５６ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて４０分間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２７２ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２７８μＬ，２．００ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温で１時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物５）（４０５ｍｇ，９２．８％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １０２−１０５℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．４５（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６５−１．７６（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），２．９８−３．１０（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），７．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５０−７．５３（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２１（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２８（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１２．１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２５．３（２Ｃ），２７．０，２７．４（２Ｃ），５３．７（２Ｃ），１２０．５，１２２．６（ｑ，Ｊ＝３２．８Ｈｚ），１２３．８，１２４．５（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２４．６（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２５．５，１２７．８，１２９．５，１３５．４，１４８．８，１５０．５，１５４．２，１６５．１，１７８．４；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６１０，７０２，７３９，８０６，８５８，８９１，９６２，１０２４，１０８２，１１１７，１１６５，１２０６，１２７１，１３３３，１３９５，１４２０，１５３０，１５８９，１６１６，１６７６，２８５１，２９２４，３１５６；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４３６（Ｍ＋）．
［参考例６］ 化合物６の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（５００ｍｇ，２．３９ｍｍｏｌ，市販品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（４ｍＬ）溶液にオクタメチレンイミン（Ｏｃｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（８５５μＬ，５．９８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、１時間半撹拌した。これに水を添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物は、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］オクタメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｏｃｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（７７１ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．４２（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．４７−１．６０（ｍ，８Ｈ，４ＣＨ２），１．７０−１．７６（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），３．４４（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．８９（ｓ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
１−［２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］オクタメチレンイミン（１−［２−Ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｏｃｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（５００ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）のメタノール（６ｍＬ）溶液に、連続的に１２Ｎ ＨＣｌ（８６０μＬ，１０．３ｍｍｏｌ）、ＳｎＣｌ２（１．０５ｇ，５．５３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、２時間撹拌した。これに炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を添加後、吸引濾過した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物は、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１５／１）で精製し、２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２００ｍｇ，４４．２％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．３０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６１−１．７１（ｍ，１２Ｈ，６ＣＨ２），３．０１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２ＣＨ２），４．２５（ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９３−６．９７（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（３４．０ｍｇ，０．３５０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（６ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（１２５ｍｇ，０．７００ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて４０分間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３４９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（２ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（９７．６μＬ，０．７００ｍｍｏｌ）を連続的に加え、室温で１時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物６）（１４６ｍｇ，９２．９％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ５７−５９℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．５２（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．５８（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．６７（ｍ，８Ｈ，４ＣＨ２），３．３１（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），７．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０，７．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６，２．０，７．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６，５．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）１１．９（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２４．３（２Ｃ），２６．６（２Ｃ），２７．４（２Ｃ），５３．５（２Ｃ），１２０．０，１２２．３（ｑ，Ｊ＝３２．８Ｈｚ），１２３．８，１２５．０（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２５．５，１２６．５（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２７．８，１２９．２，１３５．４，１４８．８，１５０．５，１５４．２，１６５．３，１７９．４；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６１０，７０２，７４１，８１６，８８７，１０２４，１０８４，１１１７，１１６５，１２１９，１２７１，１３３３，１３９５，１４２０，１５２６，１５８９，１６１６，１６７４，２８５３，２９２４，３１５５；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４５０（Ｍ＋）．
［参考例７］ 化合物７の合成
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（７０．９ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（１５ｍＬ）に、イソニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（２６１ｍｇ，１．４７ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて４０分間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２００ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２０５μＬ，１．４７ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を５０℃に加熱して、１時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）で精製し、Ｎ−イソニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物７）（１４９ｍｇ，４６．８％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １３６−１３９℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３３（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６５（ｍ，６Ｈ，３ＣＨ２），１．７５（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），３．２９（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．９０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０８，６５６，６７９，７０２，７３７，７５６，８０４，８３９，９６２，１０８２，１１１７，１１６５，１２０６，１２７１，１３３３，１３９５，１４３７，１５２４，１６１６，１６８０，２８５３，２９２４，３１５４；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４３６（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ２３Ｆ３Ｎ４ＯＳ，Ｃ ５７．７８，Ｈ ５．３１，Ｎ １２．８４．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ５７．７４，Ｈ ５．４２，Ｎ １２．５４．
［参考例８］ 化合物８の合成
シアン酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍ ｃｙａｎａｔｅ）（４７．５ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（５ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（１３０ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて１．５時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１０３μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を５０℃に加熱して、４時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］ウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｕｒｅａ）（化合物８）（８０．１ｍｇ，５１．９％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １９３−１９６℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．１５（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７３−１．７９（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．２２（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２ＣＨ２），７．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．３６−８．３９（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６，４．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ ａｒｏｍａｔｉｃ），９．９６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１１．３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）５７３，６７７，７１８，７５４，８２６，８９５，１０２６，１０７８，１１２１，１１６７，１２１７，１２７７，１３３３，１４３５，１４７２，１５３９，１５８５，１６１１，１６８６，２８５３，２９２４，３１４０；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４２０（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ２３Ｆ３Ｎ４Ｏ２，Ｃ ５９．９９，Ｈ ５．５１，Ｎ １３．３３．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ５９．８４，Ｈ ５．６４，Ｎ １３．０３．
［参考例９］ 化合物９の合成
２，５−ジフルオロニトロベンゼン（２，５−Ｄｉｆｌｕｏｒｏｎｉｔｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ）（１．００ｇ，６．２９ｍｍｏｌ，市販品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（２．５ｍＬ）溶液にヘプタメチレンイミン（Ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（１．８４ｍＬ，１４．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、２時間撹拌した。これに水を添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物を、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、１−（４−フルオロ−２−ニトロフェニル）ヘプタメチレンイミン（１−（４−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−ｐｈｅｎｙｌ）ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（ｑｕａｎｔ．）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．５７（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．５４−１．７３（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１２−７．１４（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．３４−７．３７（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
１−（４−フルオロ−２−ニトロフェニル）ヘプタメチレンイミン（１−（４−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−ｐｈｅｎｙｌ）ｈｅｐｔａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）（１．５０ｇ，５．９５ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に、連続的に１２Ｎ ＨＣｌ（３．２２ｍＬ，３８．６ｍｍｏｌ）、ＳｎＣｌ２（３．９５ｇ，２０．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、一晩撹拌した。これに炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を添加後、吸引濾過した。混合物は、酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物は、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、５−フルオロ−２−（アザシクロオクタン−１−イル）アニリン（５−Ｆｌｕｏｒｏ−２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（４７８ｍｇ，３６．１％）を黄色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．４５（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７１（ｓ，１０Ｈ，５ＣＨ２），２．９５（ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），４．２３（ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．３５−６．４３（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（８７．５ｍｇ，０．９００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）溶液（１０ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（３２０ｍｇ，１．８０ｍｍｏｌ）を加え、７０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−フルオロアニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−ｆｌｕｏｒｏａｎｉｌｉｎｅ）（２００ｍｇ，０．９００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２５１μＬ，１．８０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を５０℃に加熱して、４時間撹拌した。有機混合液を室温に戻し、これに水を添加した。混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物９）（１１７ｍｇ，３３．６％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １２２−１２４℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．１１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２ＣＨ２），６．９２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９，３．１，１０．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．２２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．５，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９，４．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，２．４，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８，１０．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，５．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１２．７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７０４，７３７，８１６，８６２，９０８，１０２４，１０９６，１１５０，１１９８，１２６９，１２８８，１３４６，１４２０，１４７７，１５３０，１５９１，１６８０，２８４９，２９２０，３１５０；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ３８６（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２３ＦＮ４ＯＳ，Ｃ ６２．１５，Ｈ ６．００，Ｎ １４．５０．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ６１．７６，Ｈ ６．０４，Ｎ １４．２７．
［参考例１０］ 化合物１０の合成
６−メチルニコチン酸（６−Ｍｅｔｈｙｌｎｉｃｏｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ）（２５２ｍｇ，１．８４ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（５ｍＬ）に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（３滴）、塩化チオニル（Ｔｈｉｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（６４３μＬ，８．８１ｍｍｏｌ）を順次加え、６０℃にて４時間撹拌した。この有機混合溶液を室温に戻し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）に懸濁し、これにチオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（１７８ｍｇ，１．８４ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２００ｍｇ，０．７３４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２５６μＬ，１．８４ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、得られた有機混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。そして、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）にて精製し、Ｎ−（６−メチルニコチノイル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（６−Ｍｅｔｈｙｌｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏ−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１０）（１９．２ｍｇ，５．８１％）を赤色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ５７−６０℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２６（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７３−１．７６（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），２．６９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），３．３１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７５４，８９３，１０２４，１０８２，１１１９，１１６７，１２０６，１２７１，１３３３，１３７５，１４３７，１４８９，１５３３，１５９７，１６１４，１６７４，２８５３，２９２４，３１５０；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４５０（Ｍ＋）．
［参考例１１］ 化合物１１の合成
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（５５．６ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、４−メトキシベンゾイルクロリド（４−Ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（９６．５μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１０２μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、５時間撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、Ｎ−（６−メチルベンゾイル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（６−Ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｉｏｕｒｅａ）（化合物１１）（８０．４ｍｇ，４８．７％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ３９−４４℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２５（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６４−１．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），２．４６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），３．３１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．３４−７．３６（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．０８−８．１１（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２１．７，２５．３（２Ｃ），２７．０，２７．４（２Ｃ），５３．７（２Ｃ），１２０．２，１２２．３（ｑ，Ｊ＝３２．８Ｈｚ），１２４．４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２５．０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２５．６，１２７．６（２Ｃ），１２８．７，１２９．５，１２９．９（２Ｃ），１４４．９，１５０．５，１６６．５，１７８．９；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０８，７４６，８３１，８９１，１０８０，１１１９，１１６５，１２０６，１２６３，１３３３，１３９５，１４５２，１４９９，１５２４，１６１１，１６７０，２８５１，２９２４，３１４０；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４４９（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ２６Ｆ３Ｎ３ＯＳ，Ｃ ６１．４５，Ｈ ５．８３，Ｎ ９．３５．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ６１．５１，Ｈ ５．８３，Ｎ ９．５０．
［参考例１２］ 化合物１２の合成
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（５５．６ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、４−メチルベンゾイルクロリド（４−Ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１２５ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１０２μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、５時間撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝５／１）で精製し、Ｎ−（４−メトキシベンゾイル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（４−Ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１２）（７７．８ｍｇ，４５．５％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ３９−４４℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３３（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝５／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６１−１．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．３２（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），３．９１（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），７．０１−７．０３（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．８８−７．９０（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０９（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６１１，７０２，７３９，７６４，８１４，８４３，８９１，１０２８，１０８０，１１１７，１１７３，１２０６，１２６１，１３３３，１３９５，１４９９，１５３３，１５７６，１６０５，１６６８，２８４７，２９２６，３１４２；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ２６Ｆ３Ｎ３Ｏ２Ｓ，Ｃ ５９．３４，Ｈ ５．６３，Ｎ ９．０３．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ５９．００，Ｈ ５．５７，Ｎ ８．９６．
［参考例１３］ 化合物１３の合成
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（５５．６ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、４−フルオロベンゾイルクロリド（４−Ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（８６．３μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１０２μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、５時間撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、Ｎ−（４−フルオロベンゾイル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（４−Ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｏｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１３）（９３．９ｍｇ，５６．４％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ９５−９７℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２９（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６５−１．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．３１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２ＣＨ２），７．１９−７．２２（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．２４（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．９５（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．１，８．９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０４，７００，７６２，８１６，８４９，８９１，１０８０，１１１９，１１６１，１２０６，１２４０，１２６３，１３３３，１３４５，１４９９，１５３０，１６０３，１６７２，２８５３，２９２４，３１５４；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ２３Ｆ４Ｎ３ＯＳ，Ｃ ５８．２７，Ｈ ５．１１，Ｎ ９．２７．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ５８．４９，Ｈ ５．２８，Ｎ ９．４０．
［参考例１４］ 化合物１４の合成
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（５５．６ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、塩化ベンゾイル（Ｂｅｎｚｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（８４．７μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１．５時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１０２μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ））を連続的に加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝８／１）で精製し、Ｎ−ベンゾイル−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｂｅｎｚｏｙｌ−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１４）（９５．２ｍｇ，５９．６％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ９２−９３℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６５−１．７６（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．３１（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２ＣＨ２），７．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５４−７．５８（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６５−７．６９（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．９２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２５．３（２Ｃ），２７．１，２７．４（２Ｃ），５３．７（２Ｃ），１２０．３，１２２．５（ｑ，Ｊ＝３３．６Ｈｚ），１２４．４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２４．９（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２５．５，１２７．５（２Ｃ），１２９．２（２Ｃ），１２９．５，１３１．６，１３３．８，１５０．６，１６６．５，１７８．８；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０６，６５６，６８９，７０８，８０６，１０８０，１１１７，１１４８，１１６５，１２０６，１２６３，１３３３，１３９５，１４４９，１４８９，１５１８，１５７８，１６１６，１６７２，２８５１，２９２４，３１４６；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４３５（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ２４Ｆ３Ｎ３ＯＳ，Ｃ ６０．６７，Ｈ ５．５５，Ｎ ９．６５．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ６０．３０，Ｈ ５．６１，Ｎ ９．５４．
［参考例１５］ 化合物１５の合成
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（５５．６ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、２−メトキシベンゾイルクロリド（２−Ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１０９μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１０２μＬ，０．７３０ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝５／１）で精製し、Ｎ−（２−メトキシベンゾイル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（２−Ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１５）（５１．５ｍｇ，３０．１％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ３０−３１℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝５／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６４−１．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．３１−３．３４（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），４．１１（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），７．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，７．７，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，７．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１１．２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６００，６１５，６４８，６９８，７５６，８１４，８５８，８９１，９６４，１０１８，１０８４，１１１７，１１６３，１２４８，１２９０，１３３１，１３９５，１５１２，１５７８，１６０３，１６１４，１６６３，２８４９，２９２４，３１３６，３３１６；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ２６Ｆ３Ｎ３Ｏ２Ｓ，Ｃ ５９．３４，Ｈ ５．６３，Ｎ ９．０３．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ６０．２３，Ｈ ５．９３，Ｎ ８．６４．
［参考例１６］ 化合物１６の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（１．５０ｇ，７．１７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に、連続的に１２Ｎ ＨＣｌ（３．８９ｍＬ，４６．６ｍｍｏｌ）、ＳｎＣｌ２（４．７６ｇ，２５．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温に戻し、一晩撹拌した。これに炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を添加後、吸引濾過した。混合物は、酢酸エチルで３回抽出した。抽出した有機混合物は、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−Ｆｌｕｏｒｏ−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（９４２ｍｇ，７３．４％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ及び１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）の結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．３７（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ ３．９０（ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９６−７．２６（ｍ，３Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ）．
チオシアン酸アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（８５．３ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ）のアセトン溶液（５ｍＬ）に、ニコチノイルクロリド塩酸塩（Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｒｏｒｉｄｅ）（１９９ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−Ｆｌｕｏｒｏ−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．５５８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１５５μＬ，１．１２ｍｍｏｌ）を連続的に加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−ニコチノイル−Ｎ’−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−Ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ−Ｎ’−［２−ｆｌｕｏｒｏ−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１６）（１２８ｍｇ，６６．８％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １６３−１６５℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３１（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ ７．３２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５１−７．５７（ｍ，３Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，２．２，８．１Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．２０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７０２，７２９，８００，８８７，９０１，１０３０，１０７０，１１０７，１１２１，１１４８，２２６５，１２０２，１２６５，１２８１，１３１０，１３３５，１３４９，１４２２，１４４３，１４８３，１５５１，１６０７，１６６８，３００７，３１８１．
［参考例１７］ 化合物１７の合成
３−フランカルボン酸（３−Ｆｕｒａｎｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）（１００ｍｇ，０．８９２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）溶液（５ｍＬ）に、塩化チオニル（Ｔｈｉｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１３０μＬ，１．７８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて一晩撹拌した。この有機混合溶液を室温に戻し、減圧下で濃縮した。得られた残査をアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（５ｍＬ）に懸濁し、これにチオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（９５．４ｍｇ，０．９８２ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて１時間撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、得られた有機混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。そして、濾過を行い、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）にて精製し、Ｎ−（３−フラニル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（３−Ｆｒａｎｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１７）（ｑｕａｎｔ．）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ４２−４５℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２４（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．７３−１．７４（ｂｒ ｓ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．２９−３．３２（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），６．７７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，８．５Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５５（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．１６（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．１８（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．７８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２５．２（２Ｃ），２６．９，２７．３（２Ｃ），５３．５（２Ｃ），１０８．１，１２０．０，１２０．７，１２２．１（ｑ，Ｊ＝３３．６Ｈｚ），１２４．４（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２５．１（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），１２５．５，１２９．１，１４４．８，１４７．１，１５０．３，１６１．７，１７８．７；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０２，６９８，７５４，８１８，８５３，８７４，８９１，９７０，１０１８，１０８２，１１１７，１１６３，１２０７，１２６３，１３３１，１３９５，１４５４，１５２６，１５７０，１６１６，１６７４，２８５３，２９２６，３１３８；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４２５（Ｍ＋）；Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２２Ｆ３Ｎ３Ｏ２Ｓ，Ｃ ５６．４６，Ｈ ５．２１，Ｎ ９．８８．Ｆｏｕｎｄ，Ｃ ５６．１２，Ｈ ５．２０，Ｎ ９．７２．
［参考例１８］ 化合物１８の合成
チオシアン酸カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（９８．２ｍｇ，１．０１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）溶液（５ｍＬ）に、３−チオフェンカルボニルクロリド（３−Ｔｈｉｏｐｈｅｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１３５ｍｇ，０．９２０ｍｍｏｌ）を加え、６０℃にて一晩撹拌した。この有機混合液を室温に戻し、２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（１００ｍｇ，０．３６７ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を室温にて、一晩撹拌した。水を加え、混合液を酢酸エチルで３回抽出した後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウム上で乾燥、吸引濾過後、減圧下で濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、Ｎ−（チオフラン−３−イル）−Ｎ’−［２−（アザシクロオクタン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（Ｎ−（Ｔｈｉｏｆｕｒａｎ−３−ｙｌ）−Ｎ’−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｏｃｔａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物１８）（１５７ｍｇ，９６．９％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １３４−１３７℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２２（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ １．６６−１．７５（ｍ，１０Ｈ，５ＣＨ２），３．３０−３．３３（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９，５．１Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，５．１Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，２．９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．９８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ ２５．２（２Ｃ），２６．９，２７．３（２Ｃ），５３．５（２Ｃ），１２０．１，１２２．２（ｑ，Ｊ＝３３．６Ｈｚ），１２４．４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２５．０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），１２５．５，１２６．０，１２７．８，１２９．２，１３１．８，１３４．５，１５０．３，１６１．６，１７８．８；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）７４５，８１４，１０８２，１１１７，１１４６，１１６５，１２０９，１２６３，１３３３，１３９６，１４１２，１５２３，１６１６，１６６８，２８５１，２９２６，３１１１；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ４４１（Ｍ＋）．
［参考例１９］ 化合物１９の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（２．５０ｇ，１２．０ｍｍｏｌ、商用品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ））（６．０ｍＬ）溶液に順次、ｔｒａｎｓ−デカヒドロキノリン（ｔｒａｎｓ−ｄｅｃａｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ）（１．８４ｇ，１３．２ｍｍｏｌ、商用品）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｎ，Ｎ−ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２．５１ｍＬ，１４．４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を室温にて１９時間撹拌した。この混合溶液を水へ注ぎ込、混合物をエーテル（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×３）、ブライン（×１）で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２２０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ＝５０／１）で精製し、４−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−３−ニトロベンゾトリフルオリド）（４−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−３−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｔｒｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）（３．５７ｇ，１０．９ｍｍｏｌ，９１．８％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．７１（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．８５−１．５３（ｍ，７Ｈ，３ＣＨ２，ＣＨ），１．５８−１．８８（ｍ，６Ｈ，３ＣＨ２），２．５０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．３，９．０，１１．１Ｈｚ，ＣＨ），２．６３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０，１１．１，１１．１Ｈｚ，ＣＨ），３．１２−３．２６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，８．４Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６８７，８００，８３１，８４４，８８１，８９９，９９５，１０７４，１０９６，１１３４，１１７５，１２２９，１２５６，１２６５，１２８５，１３２５，１３６８，１４４９，１５４１，１６２２，２８０５，２８５７，２９３０．
アルゴン雰囲気下、４−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−３−ニトロベンゾトリフルオリド）（４−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−３−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｔｒｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）（２．９４ｇ，８．９５ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２５ｍＬ）溶液に、パラジウム−炭素（１０％Ｐｄ）（ｐａｌｌａｄｉｕｍ／ｃｈａｒｃｏａｌ ａｃｔｉｖａｔｅｄ（１０％Ｐｄ））（１００ｍｇ、商用品）を室温にて添加し、水素雰囲気下、室温にて１０時間撹拌した。アルゴンに置換後、これにジクロロメタン（６０ｍＬ）を添加し、室温にて３０分間撹拌した後、濾過によりパラジウム−炭素を除去し、減圧濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１１０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ＝５０／１）で精製し、２−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２．６３ｇ，８．８２ｍｍｏｌ，９８．４％）を無色の固体として得た。
ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．５０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．８０−０．９８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．０２−１．４２（ｍ，５Ｈ，２ＣＨ２，ＣＨ），１．５６−１．７７（ｍ，７Ｈ，３ＣＨ２，ＣＨ），２．４１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９，８．４，１１．３Ｈｚ，ＣＨ），２．４７−２．５６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），２．８４−２．９５（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），４．３０−４．４０（ｂｒ ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９１−６．９７（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）４７１，４９８，６５２，６６７，７４３，８１４，８６６，８８３，９３２，９９５，１０５９，１０８８，１１２１，１１６３，１２１７，１２４２，１２８５，１３３５，１３７５，１４４１，１５１２，１５６６，１５９３，１６１４，２８０１，２８５５，２９２４，３３６８，３４７４．
２−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（４３０ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（９ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（６０５μＬ，４．３４ｍｍｏｌ）及びイソニコチン酸クロリド塩酸塩（ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、商用品）（３８５ｍｇ，２．１６ｍｍｏｌ）を０℃にて順次添加し、混合物を室温に戻した後、２３時間撹拌した。これを水へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝４／１）で精製し、Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（化合物１９）（５７４ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ，９８．７％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １２８−１３１℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．４４（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．７８−０．９６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．０６−１．５５（ｍ，６Ｈ，３ＣＨ２），１．５６−１．７８（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．７８−１．９６（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．５１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，８．９，１１．８Ｈｚ，ＣＨ），２．７３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１１．８，１１．８Ｈｚ，ＣＨ），２．８３−２．９４（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），７．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，８．３Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７３−７．８０（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８５−８．８９（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１０．２−１０．３（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）５０９，５８６，６０２，６５２，６８５，７３３，８３９，９０１，９１８，９３０，９９５，１０７０，１１０１，１１２３，１１６５，１２４２，１３３３，１３６６，１４０８，１４４３，１５２８，１５９１，１６１２，１６８２，２８５５，２９２８，３２９２．
［参考例２０］ 化合物２０の合成
２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（Ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（３８１ｍｇ，１．３３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（５６０μＬ，４．０２ｍｍｏｌ）及びイソニコチン酸クロリド塩酸塩（ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、商用品）（３５６ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を０℃にて順次添加し、混合物を室温に戻した後、１４時間撹拌した。これを水へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）で精製し、Ｎ−［２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（化合物２０）（３９２ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ，７５．３％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １１３−１１５℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２７（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝２／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ １．５３−１．７０（ｂｒ ｓ，１２Ｈ，６ＣＨ２），２．９９−３．０８（ｂｒ ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），７．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７１−７．７６（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．７９−８．８６（ｍ，３Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．５０−９．６０（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６６４，６７７，６９４，７３５，７５４，８３３，９０３，９２０，１１２３，１１６３，１２４２，１３３３，１４０８，１４３７，１４６２，１５２６，１５５５，１５８７，１６１４，１６８２，２８４９，２９２８，３３２３．
［参考例２１］ 化合物２１の合成
［参考例１９］で得られたＮ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（１３８ｍｇ，３４２μｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）溶液に、Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬（８２．９ｍｇ，２０５μｍｏｌ、商用品）を室温にて加え、混合物を１２０℃にて７時間撹拌した。撹拌後、混合溶液を室温に戻した後、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（８ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝４／３／１）で精製し、Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−アザビシクロ［４．４．０］デカン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸チオアミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−２−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−２−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｔｈｉｏａｍｉｄｅ）（化合物２１）（８５．３ｍｇ，２０３μｍｏｌ，５９．４％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １４７−１４８℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３６（ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝３／３／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．７４−０．９２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．０６−１．４０（ｍ，５Ｈ，２ＣＨ２，ＣＨ），１．４２−１．５４（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．５６−１．７５（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．７５−１．９０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．４７−２．５９（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），２．７５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，１２．０，１２．０Ｈｚ，ＣＨ），２．８３−２．９３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），７．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６８−７．８０（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．７３−８．８３（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．９６（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１１．５−１１．７（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６５０，７３３，７６０，８２６，８９５，９９５，１０１３，１０７０，１１２５，１１６７，１２２９，１２７３，１２８５，１３３３，１３６６，１４０８，１４４９，１５２６，１５８９，２８５５，２９２８，３１７１．
［参考例２２］ 化合物２２の合成
１−フルオロ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１−ｆｌｕｏｒｏ−２−ｎｉｔｒｏ−４−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）（２．００ｇ，９．５６ｍｍｏｌ、商用品）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ））（５．０ｍＬ）溶液に順次、ｔｒａｎｓ−デカヒドロイソキノリン（ｔｒａｎｓ−ｄｅｃａｈｙｄｒｏｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ）（１．５８ｍＬ，１０．６ｍｍｏｌ、商用品）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｎ，Ｎ−ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２．００ｍＬ，１１．５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を室温にて２４時間撹拌した。この混合溶液を水へ注ぎ込み、混合物をエーテル（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×３）、ブライン（×１）で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ＝５０／１）で精製し、４−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−３−ニトロベンゾトリフルオリド）（４−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−３−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｔｒｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）（３．０６ｇ，９．３２ｍｍｏｌ，９７．４％）を橙色油状物質として得た。
ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．５６（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．９０−１．１８（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２，ＣＨ），１．１８−１．６３（ｍ，６Ｈ，３ＣＨ２），１．６３−１．７２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．７２−１．８４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），２．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．３，１２．３Ｈｚ，ＣＨ），３．００（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８，１２．６，１２．６Ｈｚ，ＣＨ），３．１４（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，３．７，１２．３Ｈｚ，ＣＨ），３．３５（ｄｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，２．４，４．５，１２．６Ｈｚ，ＣＨ），７．１３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７，８．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６４２，６８３，７９１，８２４，８８５，９０７，９７２，１０８６，１１２３，１１５９，１１７７，１２０６，１２１７，１２４２，１２６３，１３００，１３２５，１３９１，１４４７，１５０８，１５３３，１５６０，１６２４，２８５１，２９２２，３４４７．
アルゴン雰囲気下、４−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−３−ニトロベンゾトリフルオリド）（４−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−３−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｔｒｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）（２．９３ｇ，８．９２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１７ｍＬ）溶液に、パラジウム−炭素（１０％Ｐｄ）（ｐａｌｌａｄｉｕｍ／ｃｈａｒｃｏａｌ ａｃｔｉｖａｔｅｄ（１０％Ｐｄ））（１００ｍｇ、商用品）を室温にて添加し、水素雰囲気下、室温にて２２．５時間撹拌した。アルゴンに置換後、これにジクロロメタン（２００ｍＬ）を添加し、室温にて３０分間撹拌した後、濾過によりパラジウム−炭素を除去し、減圧濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ＝５０／１）で精製し、２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２．５８ｇ，８．６５ｍｍｏｌ，９６．９％）を無色の固体として得た。
ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．５０（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．９３−１．１５（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２，ＣＨ），１．２０−１．５０（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．５３−１．６３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．６３−１．８４（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），２．２８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．２，１１．２Ｈｚ，ＣＨ），２．６１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５，１１．９，１１．９Ｈｚ，ＣＨ），３．０１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１，３．５，１１．２Ｈｚ，ＣＨ），３．１７（ｄｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１，２．１，４．１，１１．９Ｈｚ，ＣＨ），３．９８−４．１２（ｂｒ ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），６．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），６．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６５６，６６９，７４１，８１８，８７４，８９５，９３５，９７２，１１２１，１１５２，１１６９，１２００，１２１７，１２３６，１２５４，１２９４，１３３５，１３８１，１４３９，１４６０，１５１４，１５６８，１５９３，１６１２，２７８３，２８５１，２９２０，３３３１，３４２８．
２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（７８４ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１４ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（１．１０ｍＬ，７．８９ｍｍｏｌ）及びイソニコチン酸クロリド塩酸塩（ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（２．１０ｇ，１１．８ｍｍｏｌ、商用品）を０℃にて順次添加し、混合物を室温に戻した後、２０時間撹拌した。これを水へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝７／２）で精製し、Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（５７４ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ，９８．７％）を無色の固体として得た。
ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
ＴＬＣ Ｒｆ ０．２７（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝３／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．９８−１．２２（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２，ＣＨ），１．２８−１．５０（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．５２−１．６２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．７０−１．８６（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），２．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．１，１１．１Ｈｚ，ＣＨ），２．７７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，１１．８，１１．８Ｈｚ，ＣＨ），２．８９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９，３．５，１１．１Ｈｚ，ＣＨ），３．０４（ｄｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，１．８，３．９，１１．８Ｈｚ，ＣＨ），７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．３９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，８．２Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．７３−７．７８（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．８４−８．８９（ｍ，３Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．４５−９．５５（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６５８，６８７，７３５，７５０，８３７，８８１，８９９，９１８，９３０，９７０，１０７２，１１０１，１１２３，１１６７，１２１９，１２４６，１３３３，１３８１，１４０８，１４４１，１５３０，１５８７，１６１４，１６８２，２８５３，２９２２，３３２１．
Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸アミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ）（２６１ｍｇ，６４７μｍｏｌ）のトルエン（１０．０ｍＬ）溶液に、Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬（１５８ｍｇ，３９１μｍｏｌ、商用品）を室温にて加え、混合物を１２０℃にて１４時間撹拌した。撹拌後、混合溶液を室温に戻した後、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝４／３／１）で精製し、Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］イソニコチン酸チオアミド（Ｎ−［２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｉｓｏｎｉｃｏｔｉｎｔｈｉｏａｍｉｄｅ）（化合物２２）（１７３ｍｇ，４１２μｍｏｌ，６３．７％）を黄色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １２８−１２９℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．５３（ｈｅｘａｎｅ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝３／５／２）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．９４−１．１４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．１６−１．３８（ｍ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．４７−１．５７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），１．６５−１．８４（ｍ，５Ｈ，２ＣＨ２，ＣＨ），２．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．１，１１．１Ｈｚ，ＣＨ），２．７９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５，１２．１，１２．１Ｈｚ，ＣＨ），２．８１−２．９１（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），２．９６−３．０８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），７．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６５−７．８０（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），８．７０−８．８５（ＡＡ’ＢＢ’，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．５８（ｓ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），１０．４−１０．６（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６５２，７３３，８２６，８９１，９７０，１０１１，１０７６，１１２３，１１６７，１２１７，１２３８，１２７５，１３３３，１４１０，１４３７，１４５８，１５２８，１５９１，１６１６，２８５３，２９２２，３１７１．
［参考例２３］ 化合物２３の合成
アルゴン雰囲気下、２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２．９９ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２８０μＬ，２．０１ｍｍｏｌ）及びイソチオシアン酸ベンゾイル（ｂｅｎｚｏｙｌ ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（１６５μＬ，１．２３ｍｍｏｌ、商用品）を室温にて順次添加し、混合物を５０℃にて３時間撹拌した。撹拌後、混合溶液を室温に戻した後、これを水へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。抽出された有機層を、水（×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１５／１）で精製し、１−ベンゾイル−３−［２−（ｔｒａｎｓ−３−アザビシクロ［４．４．０］デカン−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（１−ｂｅｎｚｏｙｌ−３−［２−（ｔｒａｎｓ−３−ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［４．４．０］ｄｅｃａｎ−３−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物２３）（１５８ｍｇ，３４２μｍｏｌ，３４．２％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 １４７−１４９℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．３１（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ ０．９２−１．２１（ｂｒ ｓ，３Ｈ，ＣＨ２，ＣＨ），１．２２−１．４０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２），１．５０−１．８２（ｍ，７Ｈ，３ＣＨ２，ＣＨ），２．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．９，１０．９Ｈｚ，ＣＨ），２．６９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，１１．２，１１．２Ｈｚ，ＣＨ），２．９５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，３．３，１０．９Ｈｚ，ＣＨ），３．０８−３．１７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），７．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１，８．３Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５３−７．６２（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６３−７．７２（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．８９−７．９５（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．００−９．１５（ｂｒ ｓ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ，ＮＨ），１２．９−１３．０（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６４６，６６２，６８９，７０６，７３５，８２６，８８１，８９３，９１０，９７０，１０７６，１１２１，１１５２，１２１３，１２５４，１２９８，１３３３，１３８１，１４４７，１４８７，１５１６，１５３５，１５８０，１６１６，１６７６，２８１４，２８４９，２９２２，３０８４．
［参考例２４］ 化合物２４の合成
アルゴン雰囲気下、２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（２−（ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ａｎｉｌｉｎｅ）（２８７ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（２８０μＬ，２．０１ｍｍｏｌ）及びイソチオシアン酸ベンゾイル（ｂｅｎｚｏｙｌ ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）（１６５μＬ，１．２３ｍｍｏｌ、商用品）を室温にて順次添加し、混合物を５０℃にて３時間撹拌した。撹拌後、混合溶液を室温に戻した後、これを水へ注ぎ込み、混合物をジクロロメタン（×３）で抽出した。抽出された有機層は、水（×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、フィルターにかけ、減圧下で濃縮した。
残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３０ｇ，ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝１０／１）で精製し、１−ベンゾイル−３−［２−（アザシクロノナン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオウレア（１−ｂｅｎｚｏｙｌ−３−［２−（ａｚａｃｙｃｌｏｎｏｎａｎ−１−ｙｌ）−５−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｔｈｉｏｕｒｅａ）（化合物２４）（８８．７ｍｇ，１９７μｍｏｌ，１９．７％）を無色の固体として得た。
融点、ＴＬＣ、１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）及びＩＲの結果は次の通りである。
融点 ６５−６７℃；ＴＬＣ Ｒｆ ０．１９（ｈｅｘａｎｅ／ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ＝９／１）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ １．２０−１．３５（ｂｒ ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），１．５１−１．７５（ｂｒ ｓ，８Ｈ，４ＣＨ２），３．２２−３．４０（ｂｒ ｓ，４Ｈ，２ＣＨ２），７．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，８．７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．５２−７．６１（ｍ，２Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．６３−７．７２（ｍ，１Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），７．８７−７．９８（ｍ，３Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ），９．０５−９．２５（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１２．０−１２．２（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ−１）６０４，６５４，７３３，８１４，９０８，１０８４，１１１７，１１５５，１２６７，１３３３，１３９５，１４４９，１５１８，１６１６，１６７２，２８５１，２９２２，３１５０．
［実施例１Ａ］
ＬｕＨＣＶ細胞を用いた抗ＨＣＶ活性を有する化合物のスクリーニング
ＨＣＶウイルスタンパク質発現アッセイとして、ルシフェラーゼの活性を測定することで、細胞内のＨＣＶタンパク質（ＮＳ３−ＮＳ４−ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ）の複製及び発現を評価することができるヒト肝細胞（以下、ＬｕＨＣＶと記す。）を用いて、抗ＨＣＶ活性を有する化合物のスクリーニングを行った。
ＬｕＨＣＶ細胞を９６ウェルプレートに５×１０３細胞／５０μＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＬｕＨＣＶ細胞播種の翌日、最終試験濃度の２倍濃度の試験化合物を含む培地を５０μＬ／ウェルで添加し、４８時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した（試験化合物最終濃度０、１０、２０μＭ）。その際、試験ウェルとして各試験化合物、各濃度について、３ウェルずつ用いて解析した。
４８時間後に培養液を除去し、Ｇｌｏ Ｌｙｓｉｓバッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を各ウェルに１００μＬ加え、細胞を破砕することにより、細胞抽出液を得た。得られた細胞抽出液５０μＬを用い、Ｂｒｉｇｈｔ−ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）試薬を５０μＬ添加した。抽出液中のルシフェラーゼ活性を、測定装置ＡＲＶＯ（パーキンエルマー社製）を用いる１秒間の発光強度の測定により行った。
得られた発光強度の数値から、各試験化合物、各濃度の平均値を算出した。試験物質の対照として用いたＤＭＳＯの発光強度を１００％としたそれぞれの試験化合物の発光強度の割合を算出した。図１Ａに試験化合物の発光強度の割合を示す。
試験化合物（化合物２、化合物５、及び化合物６）存在下で、濃度依存的にルシフェラーゼ活性の低下が認められた。さらに、試験化合物２０μＭの存在下では、対照（ＤＭＳＯ）と比較して顕著なルシフェラーゼ活性の低下を認めた。特に、化合物５及び化合物６では、１０μＭにおいても対照と比較して５０％程度の発光強度の低下を認めた。
この結果から、試験した化合物が有効にＨＣＶタンパク質の発現を抑制することが示された。
［実施例１Ｂ］
ＬｕＨＣＶ細胞を用いた試験化合物の細胞増殖抑制の評価
ＬｕＨＣＶ細胞を９６ウェルプレートに５×１０３細胞／５０μＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＬｕＨＣＶ細胞播種の翌日、最終試験濃度の２倍濃度の試験化合物を含む培地を５０μＬ／ウェルで添加し、４８時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した（試験化合物最終濃度０、１０、２０μＭ）。その際、試験ウェルとして各試験化合物、各濃度について、３ウェルずつ用いて解析を進めた。
４８時間後に生細胞率を測定するために、生細胞数測定試薬ＳＦ（ナカライテスク社製）を１０μＬ／ウェルで添加し、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養し、発色反応を行った。その後、測定装置ＡＲＶＯ（パーキンエルマー社製）を用い、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。
その際、吸光度のバックグラウンドとして、試験化合物（対照として用いたＤＭＳＯを含む）を含有し、かつ、細胞を含まないウェルについても測定を行った。得られた数値を、同じ化合物について同じ濃度で測定された、細胞を含むウェルの吸光度の値から差し引くことにより得た値を、バックグラウンドを含まない実際の生細胞数の測定値とした。得られた実際の生細胞数の測定値から、各試験化合物、各濃度での平均値を算出し、試験物質の対照として用いたＤＭＳＯの測定平均値を１００％とし、それぞれの試験化合物の生細胞数の割合を算出した。図１Ｂに試験化合物添加時に算出された生細胞数の割合を示す。
その結果、図１Ｂで認められるように、試験化合物添加により生細胞数の割合が変化することはなかった。このことは、実施例１Ａの条件下でこれらの化合物が生細胞の割合を変えることはないことを表している。即ち、実施例１Ａにより得られた結果は、純粋に試験化合物がＨＣＶタンパク質の発現を抑制したことを意味している。
［実施例２Ａ］
ＬｕＨＣＶ細胞を用いた抗ＨＣＶ活性を有する構造展開化合物のスクリーニング
ＬｕＨＣＶ細胞を９６ウェルプレートに５×１０３細胞／５０μＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＬｕＨＣＶ細胞播種の翌日、最終試験濃度の２倍濃度の試験化合物を含む培地を５０μＬ／ウェルで添加し、４８時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した（試験化合物最終濃度０、１０、２０μＭ）。その際、試験ウェルとして各試験化合物、各濃度について、３ウェルずつ用いて解析を進めた。
４８時間後に培養液を除き、Ｇｌｏ Ｌｙｓｉｓバッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を各ウェルに１００μＬ加え、細胞を破砕することにより、細胞抽出液を得た。得られた細胞抽出液５０μＬを用い、Ｂｒｉｇｈｔ−ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）試薬を５０μＬ添加した。抽出液中のルシフェラーゼ活性の測定を、測定装置ＡＲＶＯ（パーキンエルマー社製）を用いる１秒間の発光強度から測定した。
得られた発光強度の数値から、各試験化合物、各濃度の平均値を算出した。試験物質の対照として用いたＤＭＳＯの発光強度を１００％としたそれぞれの試験化合物の発光強度の割合を算出した。表１−１、図２Ａに試験化合物の発光強度の割合を示す。
結果から、試験したすべての化合物について、濃度依存的なルシフェラーゼ活性の低下が示された。このことは、これらの化合物が濃度依存的に細胞内でのＨＣＶタンパク質の発現を抑制する活性を有することを表している。
［実施例２Ｂ］
ＬｕＨＣＶ細胞を用いた構造展開化合物の細胞増殖抑制の評価
ＬｕＨＣＶ細胞を９６ウェルプレートに５×１０３細胞／５０μＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＬｕＨＣＶ細胞播種の翌日、最終試験濃度の２倍濃度の試験化合物を含む培地を５０μＬ／ウェルで添加し、４８時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した（試験化合物最終濃度０、１０、２０μＭ）。その際、試験ウェルとして各試験化合物、各濃度について、３ウェルずつ用いて解析を進めた。
４８時間後に生細胞率を測定するために、生細胞数測定試薬ＳＦ（ナカライテスク社製）を１０μＬ／ウェル添加し、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養し、発色反応を行った。その後、測定装置ＡＲＶＯ（パーキンエルマー社製）を用い、４５０ｎｍにて吸光度を測定した。
その際、吸光度のバックグラウンドとして、試験化合物（対照として用いたＤＭＳＯを含む）を含有し、かつ、細胞を含まないウェルについても測定を行った。得られた数値を、同じ化合物について同じ濃度で測定された細胞を含むウェルの吸光度の値から差し引くことにより得た値を、バックグラウンドを含まない実際の生細胞数の測定値とした。得られた実際の生細胞数の測定値から、各試験化合物、各濃度の平均値を算出し、試験物質の対照として用いたＤＭＳＯ添加時の値を１００％としたそれぞれの試験化合物の生細胞数の割合を算出した。表１−２、図２Ｂに各試験化合物、各濃度の生細胞の割合を示す。
結果から、試験した化合物の多くで、顕著な細胞生存率の低下がないことが示された。このことは、実施例２Ａの条件下でこれらの化合物が細胞毒性を全く有しないか、有していても弱い細胞毒性しか有しないことを表している。即ち、実施例２Ａにより得られた結果は、純粋に試験化合物がＨＣＶタンパク質の発現を抑制したことを意味している。
［実施例３Ａ］
化合物５のＨＣＶタンパク質発現抑制活性の解析
ＬｕＨＣＶ細胞を１０ｃｍディッシュに１×１０６細胞／ディッシュの割合で播種し、一晩以上インキュベートした。その後、ＤＭＳＯに溶解された化合物５を最終濃度２０μＭとなるよう添加し、さらに３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養を続けた。対照ディッシュにはＤＭＳＯのみを添加した。化合物５の添加１４時間後、及び６０時間後に細胞を回収した。細胞溶解液（２５ｍＭ ＮａＰＯ４（ｐＨ７．５）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１ｍＭ ＥＤＴＡ、２０％グリセロール、プロテアーゼインヒビターカクテル（ロシュ・ダイアグノスティックス））を用いて細胞を溶解し、細胞抽出液を得た。得られたそれぞれの細胞抽出液各１０μｇを用いて、ウエスタンブロッティング法にてＨＣＶ−ＮＳ５Ａタンパク質（抗体販売元：Ｖｉｒｏｇｅｎ）、及び、β−アクチン（抗体販売元：Ｓｉｇｍａ）の発現解析をおこなった。
結果を図３Ａに示す。化合物５添加１４時間後、６０時間後のそれぞれの時間において、化合物５添加の有無に関わらずβ−アクチンの発現量に変化はなかったが、化合物５添加細胞においては、ＮＳ５Ａの発現低下が見られた。
このことは、試験した化合物５が、正常な細胞機能に悪影響を与えることなく、ＨＣＶタンパク質に対して効率的にその発現を抑制し得ることを示唆している。
［実施例３Ｂ］
ＨＣＶ ＲＮＡの複製及び安定性に対する化合物５の影響
ＬｕＨＣＶ細胞を１０ｃｍディッシュに１×１０６細胞／ディッシュの割合で播種し、一晩以上インキュベートした。その後、ＤＭＳＯに溶解された化合物５を最終濃度２０μＭとなるよう添加し、さらに３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養を続けた。対照ディッシュにはＤＭＳＯのみを添加した。化合物５添加１４時間後、及び６０時間後に細胞を回収し、セパゾールＲＮＡ（ナカライテスク社製）により全ＲＮＡを抽出し、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＩ逆転写酵素（インビトジェン社製）及びｏｌｉｇｏ−ｄＴプライマー（プロメガ社製）又はランダムプライマー（インビトロジェン社製）を用いてｃＤＮＡ合成を行った。合成されたｃＤＮＡを鋳型として用いて、ＮＳ５Ａ特異的プライマー（５’−ＡＧＴＴＴＴＴＣＡＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＧＧＧ−３’（配列番号１）、５’−ＧＴＣＣＧＧＧＴＴＣＴＴＣＣＡＡＧＡＣＴＣＴＡ−３’（配列番号２））、ＧＡＰＤＨプライマー（５’−ＡＣＧＧＡＴＴＴＧＧＴＣＧＴＡＴＴＧＧＧ−３’（配列番号３）、５’−ＧＴＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＡＡＴＧＡＡＧＧＧＧＴＣ−３’（配列番号４））、ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ ＨＳ ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（タカラバイオ社製）を用いるＰＣＲを行った。ＤＮＡ増幅反応の後、アガロースゲルにて電気泳動、エチジウムブロマイドによる染色を行った。ＵＶトランスイルミネーターを用いてそれぞれの遺伝子の発現量を評価した。
結果を図３Ｂに示す。化合物５添加１４時間後、６０時間後のそれぞれの時間において、化合物５添加の有無に関わらず、ＮＳ５Ａ、ＧＡＰＤＨ共に量的変化を認めなかった。
このことは、試験した化合物５が、ＨＣＶ−ＲＮＡの複製及び安定性には影響しないことを表している。
実施例３Ａ及び実施例３Ｂ双方の結果から、化合物５は、ＨＣＶ−ＲＮＡの複製や安定性に影響することなく、ＨＣＶタンパク質の発現を翻訳レベルで抑制し得ることが明らかとなった。
［実施例４］
ＬｕＨＣＶ細胞の細胞増殖に対する化合物５の影響
ＬｕＨＣＶ細胞を６ウェルプレートに５×１０４細胞／１ｍＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。ＬｕＨＣＶ細胞播種の翌日、最終試験濃度の２倍濃度の化合物５を含む培地を各ウェルに１ｍＬずつ添加し、化合物５の最終濃度を２０μＭとした。細胞を、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した。化合物５添加の後、０、６、１２、２４、３６及び４８時間後に各３ウェルずつの細胞を回収し、血球計算盤を用いてウェル当たりに生存している細胞数を計測し、平均値を算出した。対照として、ＤＭＳＯのみを加えたウェルを用いた。
結果を図４に示す。ＤＭＳＯを添加した対照と、化合物５添加細胞との間で、各時間での細胞数には全く変化がなかった。このことから、化合物５はＬｕＨＣＶ細胞の細胞増殖を抑制せず、また細胞傷害性を有しないことが明らかとなった。
［実施例５］
インフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
本発明に開示する試験化合物について、Ａ型インフルエンザウイルス（ＰＲ−８）に対する増殖抑制作用を評価した。ＭＤＣＫ細胞を６ウェルプレートに５×１０５細胞／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＭＤＣＫ細胞播種の翌日、Ａ型インフルエンザウイルス（ＰＲ−８）を添加すると同時に、試験化合物を最終濃度１４μＭとなるよう添加し、７２時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した。７２時間培養後に、２ｍＬのＰＢＳ（−）にて２回洗浄を行い、次いで、１５％酢酸／８５％エタノール溶液中で３０分間固定の後、クリスタルバイオレットによる染色を行った。
位相差顕微鏡下で染色後の細胞を観察した。図５に示すように、試験化合物を添加しなかったＤＭＳＯ対照のＭＤＣＫ細胞はインフルエンザウイルスに感染し、高い割合で死滅し、プレートから剥離していたが、試験化合物添加群では細胞死による細胞の剥離は抑制されていた。
このことは、試験化合物がインフルエンザウイルスに対しても抗ウイルス効果を有することを示している。
［実施例６］
インフルエンザウイルス感染による細胞死の抑制
ＭＤＣＫ細胞を９６ウェルプレートに１×１０４細胞／１００μＬ／ウェルの割合で播種し、一晩インキュベートした。試験化合物はＤＭＳＯに溶解し、必要に応じてＤＭＳＯを用いて希釈系列を作成した。ＭＤＣＫ細胞播種の翌日、試験化合物をインフルエンザウイルス感染用培地で希釈し、９６ウェルプレート中の培養液と置換した。その後、インフルエンザウイルスを必要なウェルに添加し、４８時間、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養した（試験化合物最終濃度０、５、１０μＭ）。その際、試験ウェルとして各試験化合物、各濃度について、３ウェルずつ用いて解析を行った。
生細胞率を測定するために、４８時間後に生細胞数測定試薬ＳＦ（ナカライテスク社製）を１０μＬ／ウェルで添加し、３７℃、５％ＣＯ２の培養条件下で静かに培養し、発色反応を行った。その後、測定装置ＡＲＶＯ（パーキンエルマー社製）を用い、４５０ｎｍにて吸光度を測定した。
その際、吸光度のバックグラウンドとして、試験化合物（対照として用いたＤＭＳＯを含む）を含有し、かつ、細胞を含まないウェルについても測定を行った。得られた数値を、同じ化合物について同じ濃度で測定された細胞を含むウェルの吸光度の値から差し引くことにより得た値を、バックグラウンドを含まない実際の生細胞数の測定値とした。得られた実際の生細胞数の測定値から、各試験化合物、各濃度の平均値を算出した。試験物質の対照として用いたＤＭＳＯ添加時の算出された値を１００％とし、それぞれの試験化合物の生細胞数の割合を算出した。
結果を図６、表２に示す。試験化合物非存在下ではインフルエンザウイルスの感染により、生細胞の割合が４０％以下になったが、化合物５、化合物６又は化合物１４の添加により細胞死が低減されることが明らかとなった。
［実施例７］
化合物５のインビボ反復投与毒性試験
マウス（Ｃｒｌｊ／ＣＤ１（ＩＣＲ）系統、オス、５週齢）について、１週間の馴化期間を設け（ｄａｙ−７からｄａｙ−１）、試験開始前日の体重量平均値より群分けを行った。また、体重平均値から化合物５の投与量を算出した（ｄａｙ−１）。投与群は、ｐｌａｓｅｂｏ投与群（ｎ＝６）、化合物５投与群（ｎ＝６）の２群とした。投与当日（ｄａｙ００からｄａｙ０７）に、０．５％カルボキシメチルセルロースを用いて製剤化した試験化合物を、７日間連続で経口投与し、投与期間中の症状を観察した。
試験期間中、ｄａｙ−７、ｄａｙ−３、ｄａｙ−１、ｄａｙ４、ｄａｙ７において各個体の体重を測定した。化合物５投与開始当日の投与１／２、１、２、３、４時間後、投与開始２日後からは１日１回の症状観察をおこなった。
結果、７日間の投与期間において、ｐｌａｓｅｂｏ群と比較して、１０００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙでの化合物５投与群による死亡個体は見られず、その無毒性量は１０００ｍｇ／ｋｇ以上であるという結果が得られた。
各群の体重推移について、ｐｌａｓｅｂｏ群と試験化合物投与群とに有意な差はなく、投与期間において順調な体重量増加が認められ、健康状態を維持していた（図７、表３）。
このことは、試験化合物がインビボでの毒性を有しないことを意味する。
まとめ
以上より、本発明の化合物は、顕著な細胞毒性及びインビボ毒性を示さずに、ＨＣＶ及びインフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性を有することが示された。
本発明者らは、多数の化合物を合成し、スクリーニングした結果、式Ｉの構造を有する化合物が優れた抗ＲＮＡウイルス活性を有することを見出した。現在利用できる抗ウイルス剤は非常に限られており、本発明に係る薬剤は新たな治療選択肢を提供しうるものである。すなわち本発明は、ＲＮＡウイルス感染症の治療に新たな選択肢を提供するものである。
［配列表］

Claims (11)

  1. 宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素を阻害する化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤。
  2. 前記タンパク質リン酸化酵素が、ウイルス感染で活性化される宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素である、請求項１に記載の抗ウイルス剤。
  3. 前記タンパク質リン酸化酵素が、ウイルスタンパク質の翻訳を制御する宿主細胞のタンパク質リン酸化酵素である、請求項１又は２に記載の抗ウイルス剤。
  4. ウイルス感染症がＲＮＡウイルスによって引き起こされるものである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
  5. ウイルス感染症がＣ型肝炎ウイルス、又はインフルエンザウイルスによって引き起こされるものである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
  6. 以下の一般式（Ｉ）
    （式中、Ｒ１は、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基を示し；
    Ｒ２は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し；
    Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基若しくはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基又は単環式複素環基を示し；
    Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｓ）−を示し；
    Ｗは、ハロゲン原子、又はハロゲン原子で置換されていてもよい単環式又は二環式含窒素複素環基を示す。）
    で表される化合物、又はその製薬上許容される塩を含有する、ＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
  7. 前記式（Ｉ）中、
    Ｒ１は、フッ素、又はトリフルオロメチル基を示し；
    Ｒ２は、水素原子であり；
    Ｒ３は、メチル基、メトキシ基若しくはフッ素で置換されていてもよいフェニル基、又はメチル基で置換されていてもよい単環式複素環基を示し；
    Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
    Ｗは、フッ素原子、又は環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す、
    請求項６に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
  8. 前記式（Ｉ）の化合物が、以下のもの：
    からなる群より選択される化合物又はその製薬上許容される塩である、請求項６に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
  9. 前記式（Ｉ）中、
    Ｒ１は、トリフルオロメチル基を示し；
    Ｒ２は、水素原子であり；
    Ｒ３は、フェニル基、又は単環式複素環基を示し；
    Ｑは、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、又は−Ｃ（Ｓ）ＮＨＣ（Ｏ）−を示し；
    Ｗは、環原子として窒素１個と炭素５〜９個を含む飽和単環式又は二環式複素環基を示す、
    請求項６に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
  10. 前記式（Ｉ）の化合物が、以下のもの：
    からなる群より選択される化合物又はその製薬上許容される塩である、請求項６に記載のＲＮＡウイルス感染症の予防又は治療剤。
  11. 以下のもの：
    からなる群より選択される化合物、若しくはその製薬上許容される塩、又はこれらの水和物。
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AU2002312927A1 (en) * 2001-05-18 2002-12-03 Axxima Pharmaceuticals Ag Benzo(g)quinoxaline derivatives as effective compounds against infectious diseases
US20040171603A1 (en) * 2001-05-18 2004-09-02 Janos Pato Novel therapeutic targets for the treatment of mycobacterial infections and compounds useful therefor
JP2005112812A (ja) 2003-10-09 2005-04-28 Zeria Pharmaceut Co Ltd リン酸化部位特異的抗体及びそれを用いたスクリーニング方法
EP2666481B9 (en) * 2003-12-26 2019-05-22 HAGIWARA, Masatoshi Method of regulating phosphorylation of sr protein and antiviral agents comprising sr protein activity regulator as the active ingredient

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