JP2017165743A - インターロイキン1α抗体及び有用な方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】ヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1(免疫グロブリンG1)モノクローナル抗体を含む、組成物の提供。
【解決手段】インターロイキン1αに対する非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域と、C1q結合を通じた補体系の活性化及びいくつかの異なるFc受容体への結合のいずれにおいても有効な定常領域とを含み、癌細胞の殺傷に有効なヒトIgG1(免疫グロブリンG1)モノクローナル抗体、及びこれを含む組成物。基底膜マトリクスへの腫瘍細胞細胞の阻害組成物であり、更に内皮細胞内におけるICAM−1及び/又はE−セレクチン発現の増加を阻害するヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgGIモノクローナル抗体を含む、組成物。
【選択図】なし
【解決手段】インターロイキン1αに対する非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域と、C1q結合を通じた補体系の活性化及びいくつかの異なるFc受容体への結合のいずれにおいても有効な定常領域とを含み、癌細胞の殺傷に有効なヒトIgG1(免疫グロブリンG1)モノクローナル抗体、及びこれを含む組成物。基底膜マトリクスへの腫瘍細胞細胞の阻害組成物であり、更に内皮細胞内におけるICAM−1及び/又はE−セレクチン発現の増加を阻害するヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgGIモノクローナル抗体を含む、組成物。
【選択図】なし
Description
[関連出願の相互参照]
本出願は、それぞれ、2008年5月30日、2008年12月10日及び2009年5月14日に提出された米国仮特許出願第61/057,586号、第61/121,391号、及び第61/178,350号の優先権を主張する。
[連邦政府がスポンサーとなった研究に関する陳述]
適用なし
本出願は、それぞれ、2008年5月30日、2008年12月10日及び2009年5月14日に提出された米国仮特許出願第61/057,586号、第61/121,391号、及び第61/178,350号の優先権を主張する。
[連邦政府がスポンサーとなった研究に関する陳述]
適用なし
[技術分野]
本発明は、広くは、免疫学、炎症、癌、血管障害及び医学の分野に関する。より詳細には、本発明は、インターロイキン1α(IL−1α)に特異的に結合する抗体(Ab)、及び、そのような抗体を用いることによってIL−1αの発現異常に関連した疾病を治療、予防又は検出する方法に関する。
本発明は、広くは、免疫学、炎症、癌、血管障害及び医学の分野に関する。より詳細には、本発明は、インターロイキン1α(IL−1α)に特異的に結合する抗体(Ab)、及び、そのような抗体を用いることによってIL−1αの発現異常に関連した疾病を治療、予防又は検出する方法に関する。
インターロイキン1αは、炎症、免疫反応、腫瘍転移及び造血を含む多くの様々な機能において役割を果たす炎症性サイトカインである。インターロイキン1αに対するIgG自己抗体は、一般的な人口母集団において自然に生じており、アテローム性動脈硬化などの疾病において有益であると考えられる。
本発明は、i)ヒトインターロイキン1αに対して非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域、並びに、(ii)C1q結合を通じた補体系の活性化及びいくつかの異なるFc受容体への結合のいずれにおいても有効な定常領域を含む完全なヒトモノクローナル抗体(mAb)の開発に基づいている。ここに記載されているヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体は、ヒトインターロイキン1αに対して特異的な可変領域を有するヒトIgG4モノクローナル抗体の定常領域を、ヒトIgG1モノクローナル抗体の定常領域で置換することによって作成された。
従って、本発明は、軽鎖に共有結合で結合した重鎖を含むモノクローナル抗体である、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたヒトIgG1モノクローナル抗体を特徴とする。重鎖は、配列番号:9のアミノ酸配列を含んでいてもよく、軽鎖は、配列番号:11のアミノ酸配列を含んでいてもよい。
インターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体の重鎖をコードする第1核酸、及び、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体の軽鎖をコードする第2核酸を含む単離された核酸のセットも本発明の範囲内である。第1核酸は、配列番号:9のアミノ酸配列をコードすることができ、第2核酸は、配列番号:11のアミノ酸配列をコードすることができる。第1核酸は、配列番号:10のヌクレオチド配列を含んでいてもよく、第2核酸は、配列番号:12のヌクレオチド配列を含んでいてもよい。
別の一態様において、本発明は、配列番号:9又は配列番号:11のアミノ酸配列をコードする核酸を含む発現ベクターを特徴とする。
本発明の他の特徴は、インターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体の重鎖をコードする第1核酸、及び、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体の軽鎖をコードする第2核酸を含む単離された核酸のセットを含む、単離された宿主細胞(例えば、CHO細胞などの哺乳動物細胞)である。重鎖は、配列番号:9のアミノ酸配列を含んでいてもよく、軽鎖は、配列番号:11のアミノ酸配列を含んでいてもよい。
本発明は、ヒトインターロイキン1αを発現する細胞を死滅させる方法をさらに特徴とする。この方法は、細胞を、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたヒトIgG1モノクローナル抗体に接触させるステップを含んでいてもよい。
基底膜マトリクスを経たヒト細胞の移動を阻害する方法も本発明に含まれる。この方法は、基底膜マトリクス及びヒト細胞を含む混合物に、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたモノクローナル抗体を加えるステップを含んでいてもよい。
ヒト内皮細胞の表面におけるインターロイキン1αによって誘導されるICAM−1及び/又はE−セレクチン発現の増加を阻害する方法も本発明に含まれる。この方法は、内皮細胞及びインターロイキン1αを含む混合物に、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたモノクローナル抗体を加えるステップを含んでいてもよい。
本発明は、以前に以下のステップ:最初に対象から末梢血単核細胞の第1サンプルを得るステップと;その第1サンプルを、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたモノクローナル抗体に接触させるステップと;及び、モノクローナル抗体に結合する第1サンプル中の細胞のパーセントを決定するステップとに供したヒト対象の炎症を追跡する方法をさらに含む。この方法は、以下のステップ:(a)2回目に対象から末梢血単核細胞の第2サンプルを得るステップと;(b)前記第2サンプルを、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する精製されたモノクローナル抗体に接触させるステップと;(c)モノクローナル抗体に結合する第2サンプル中の細胞のパーセントを決定するステップと;及び、(d)モノクローナル抗体に結合する第1サンプル中の細胞のパーセントを、モノクローナル抗体に結合する第2サンプル中の細胞のパーセントと比較するステップと、を具えていてもよい。
前記方法において、精製されたモノクローナル抗体は、軽鎖に共有結合で結合した重鎖を含むヒトIgG1モノクローナル抗体であってもよい。例えば、重鎖は、配列番号:9のアミノ酸配列を含み、軽鎖は、配列番号:11のアミノ酸配列を含む。
本発明に含まれるその他の方法は、以下のステップ:(a)ヒト対象から得た生体サンプルを、分子量に従って分子を分離するフィルターを用いて、インターロイキン1αと複合化された完全なIgGを含む第1画分と、100Kda未満の分子を含む第2画分とに濃縮するステップと;及び、(b)第1画分中のインターロイキン1αの量を定量するステップと、を特徴とする。
しかし、本発明に含まれるその他の方法は、以下のステップ:(a)ヒト対象から得た血漿のサンプルを、分子量に従って分子を分離するフィルターを用いて、インターロイキン1αと複合化された完全なIgGを含む第1画分と、100Kda未満の分子を含む第2画分とに濃縮するステップと;(b)第1画分中のIgGが、基質上に固定化された抗ヒトIgG抗体に特異的に結合することを許容する条件下において、固定化された抗ヒトIgG抗体を含む基質に前記第1画分を加えるステップと;(c)前記基質を洗浄して、固定化された抗ヒトIgG抗体に特異的に結合しない第1画分中の成分を除去するステップと;(d)ステップ(c)において洗浄した基質を、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する抗体が基質に結合したあらゆるヒトインターロイキン1αに特異的に結合することを許容する条件下において、ヒトインターロイキン1αに特異的に結合する抗体に接触させるステップと;(e)前記基質を洗浄して、基質に結合しないヒトインターロイキン1αに特異的に結合しているあらゆる抗体を除去するステップと;及び、(f)ステップ(e)の後に基質に結合したままのヒトインターロイキン1αに特異的に結合する抗体量を定量するステップとを特徴とする。
別段の定めがない限り、ここで用いられているすべての技術的用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有している。一般的に理解される生物学的用語の定義は、Rieger et al.,Glossary of Genetics:Classical and Molecular,5th edition,Springer−Verlag:New York,1991、及び、Lewin,Genes V,Oxford University Press:New York,1994において見つけることができる。
「特異的に結合する」という用語は、ここで用いられているように、ポリペプチド(抗体を含む)又はレセプタに言及する場合、タンパクの異種混合集団及びその他の生物製剤中におけるタンパク又はポリペプチド又はレセプタの存在の決定要因である結合反応を意味する。従って、指定された条件(例えば、抗体の場合における免疫測定条件)において、特定のリガンド又は抗体が、特定のその「ターゲット」に結合し、サンプル中に存在するその他のタンパク又は生体中においてそのリガンド若しくは抗体が接触する可能性があるその他のタンパクに有意な量で結合しない。通常、第2分子に「特異的に結合する」第1分子は、第2分子に対して約105リットル/モル超(例えば、106、107、108、109、1010、1011及び1012以上)の平衡親和定数を有する。
「精製された」は、抗体などのタンパク分子に言及する場合、そのような分子に自然に付随する成分から分離されていることを意味する。典型的には、抗体又はタンパクが、非抗体タンパク又は前記抗体又は前記タンパクに自然に付随するその他の天然有機分子を含まずに、重量によって、少なくとも約10%(例えば、9%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.9%及び100%)であれば、精製されたものである。例えば、カラムクロマトグラフイー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法、HPLC解析といったあらゆる適切な方法によって純度を測定することができる。化学的に合成されたタンパク又は天然に存在する細胞型以外の細胞型において生産されたその他の組み換えタンパクは、「精製された」ものである。
本発明の実施又は試験においては、ここに記載されているものに類似又は同等の方法及び材料を用いることができるが、適切な方法及び材料を以下に記載する。ここで言及されているすべての刊行物は、言及することによってその全体が組み込まれている。紛争の場合には、定義を含む本明細書が規定するであろう。さらに、以下に論じる特定の実施形態は例示的なものに過ぎず、限定するようには意図されていない。
本発明は、(i)インターロイキン1αに対する非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域、並びに、(ii)C1q結合を通じた補体系の活性化及びいくつかの異なるFc受容体への結合のいずれにおいても有効な定常領域を含む完全なヒトモノクローナル抗体に関する組成物及び方法を包含する。以下に記載されている好ましい実施形態は、これらの組成物及び方法の適用を説明する。それにかかわらず、これらの実施形態の説明から以下に提供する説明に基づいて本発明のその他の態様を作成及び/又は実行することができる。
従来の免疫学的手法及び分子生物学的手法を含む方法は、本明細書に記載されている。免疫学的手法(例えば、抗原抗体複合体の検出及び位置限定のための分析、免疫沈降、イムノブロッティングなど)は、当業界において一般的に知られており、Current Protocols in Immunology,Coligan et al.,ed.,John Wiley & Sons,New Yorkなどの方法論の論文に記載されている。分子生物学的手法は、分子クローニング:A Laboratory Manual,2nd ed.,vol.1−3,Sambrook et al.,ed.,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.,2001、及び、Current Protocols in Molecular Biology,Ausubel et al.,ed.,Greene Publishing and Wiley−Interscience,New Yorkなどの方法論の論文に詳細に記載されている。抗体手法は、Handbook of Therapeutic Abs,Dubel,S.,ed.,Wiley−VCH,2007に記載されている。細胞培養技術は、当業界において一般的に知られており、A Manual of Basic Technique,4th edition,by R Ian Freshney,Wiley−Liss,Hoboken,N.J.,2000、及び、and General Techniques of Cell Culture,by Maureen A Harrison and Ian F Rae,Cambridge University Press,Cambridge,UK,1994などの動物細胞培養の方法論の論文に詳細に記載されている。タンパク精製の方法は、Methods in Enzymology,Vol.182,Deutscher M P,ed.,Academic Press,San Diego,Calif.,1990といったタンパク精製のガイドにおいて論じられている。
一態様においては、本発明は、(i)ヒトインターロイキン1αに対する非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域、並びに、(ii)C1q結合を通じた補体系の活性化及びいくつかの異なるFc受容体への結合のいずれにおいても有効な定常領域を含む完全なヒトモノクローナル抗体を特徴とする。ヒト抗体はIgG1であることが好ましい。抗体のKaは、好ましくは少なくとも1×109M−1以上(例えば、9×1010M−1、8×1010M−1、7×1010M−1、6×1010M−1、5×1010M−1、4×1010M−1、3×1010M−1、2×1010M−1又は1×1010M−1よりも多い)である。
ヒトインターロイキン1αに対して特異的な免疫グロブリンを発現するBリンパ球がヒトにおいて自然に生じるので、モノクローナル抗体を高める現在の好ましい方法は、まず対象からそのようなBリンパ球を単離し、次いで、培養において連続的に複製できるように不死化させることである。ヒトインターロイキン1αに対して特異的な免疫グロブリンを発現する天然のBリンパ球の大部分を欠損している対象を、1以上のヒトインターロイキン1α抗原を用いて免疫化させてそのようなBリンパ球の数を増加させてもよい。ヒトモノクローナル抗体は、ヒト抗体分泌細胞(例えば、ヒト血漿細胞)を不死化することによって調製される。例えば、米国特許第4,634,664号を参照されたい。
1つの例示的方法においては、1以上(例えば、5、10、25、50、100又は1000以上)のヒト対象(例えば、以前にヒトインターロイキン1αワクチンを接種されていない対象)を、血液中のそのようなヒトインターロイキン1α特異的抗体の存在について検査する。その後、所望の抗体を発現する対象を、Bリンパ球ドナーとして用いることができる。あり得る1つの方法においては、ヒトインターロイキン1α特異的抗体を発現するBリンパ球を有するヒトドナーから末梢血を得る。その後、そのようなBリンパ球を、例えば、細胞分類(例えば、蛍光活性化細胞選別「FACS」;又は磁気ビーズ細胞選別)によって血液サンプルから分離することによって、ヒトインターロイキン1α特異的免疫グロブリンを発現するBリンパ球を選択する。その後、ウイルス形質転換(例えば、EBVを用いて)によって、又は、公知技術によってヒト骨髄腫などの他の永久増殖細胞に融合させることによって、これらの細胞を不死化することができる。その後、限界希釈(例えば、ヒトインターロイキン1αに対して特異的な免疫グロブリンに対してポジティブなマイクロタイタープレート中のウェル内の細胞を選択して二次培養し、所望のクローン系を分離することができるまでプロセスを繰り返すこと)によって、ヒトインターロイキン1αに対して特異的な免疫グロブリンを発現するこの集団内のBリンパ球を分離することができる。例えば、Goding,Monoclonal Abs:Principles and Practice,pp.59−103,Academic Press,1986を参照されたい。ヒトインターロイキン1αに対して少なくともナノモル又はピコモルの結合親和性を有する免疫グロブリンを発現するクローン細胞株が好ましい。これらのクローン細胞株によって分泌されるモノクローナル抗体を、脱塩、サイズ排除、イオン交換分離及び親和性クロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培地又は体液(例えば腹水)から精製することができる。
不死化されたBリンパ球をインビトロ培養に用いてモノクローナル抗体を直接的に生産してもよいが、いくつかの場合においては、異種起源の発現系を用いてモノクローナル抗体を生産することが望ましいこともある。例えば、米国特許出願第11/754,899号に記載されている方法を参照されたい。例えば、ヒトインターロイキン1αに対して特異的なモノクローナル抗体をコードする遺伝子をクローンし、異種起源の宿主細胞(例えば、CHO細胞、COS細胞、ミエローマ細胞及び大腸菌細胞)中の発現用の発現ベクター(例えば、プラスミドベースの発現ベクター)に導入してもよい。免疫グロブリンは、重鎖(H)及び軽鎖(L)をH2L2配置で含んでいるので、それぞれをコードする遺伝子を別々に分離して、異なるベクターにおいて発現させてもよい。
一般的にはあまり好ましくないキメラモノクローナル抗体に由来した異なる部分(例えば、異なる動物種(例えば、ヒト免疫グロブリンの定常領域に結合したマウス免疫グロブリンの可変領域)を有する抗原結合分子である「ヒト化」モノクローナル抗体)を本発明において用いてもよい。当業界において知られている方法、E.G.,Morrison et al.,Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA,81:6851,1984;Neuberger et al.,Nature,312:604,1984;Takeda et al.,Nature,314:452,1984によってそのようなキメラ抗体を調製することができる。同様に、当業界で知られている方法によって抗体をヒト化することができる。例えば、所望の結合特異性を有するモノクローナルの抗体を、米国特許第5,693,762号、第5,530,101号又は第5,585,089号に記載されているように商業的にヒト化することができる。
ここに記載されているモノクローナル抗体を、VH及びVLドメインシャフリング(Marks et al.Bio/Technology 10:779−783,1992)、超可変領域のランダムな突然変異誘発(HVR)、及び/又は、骨格残基(Barbas et al.Proc Nat.Acad.Sci.USA 91:3809−3813,1994;Schier et al.Gene 169:147−155,1995;Yelton et al.J.Immunol.155:1994−2004,1995;Jackson et al.,J.Immunol.154(7):3310−9,1995;及び、Hawkins et al,J.Mol.Biol.226:889−896,1992)などの公知の方法によって、結合特異性を高める又は他の方法で変更するために親和性成熟してもよい。抗体のアミノ酸配列変異は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な変異を導入することによって作成していてもよい。さらに、モノクローナル抗体をコードする核酸配列への修飾を、ある発現系におけるモノクローナル抗体の生産を高めるように(例えばモノクローナル抗体のアミノ酸配列を変化させることなく)変更してもよい(例えば、イントロン除去及び/又は規定の発現系に対するコドン最適化)。ここに記載されているモノクローナル抗体は、その他のタンパク(例えば、他のモノクローナル抗体)又は非タンパク分子への接合によっても修飾することができる。例えば、モノクローナル抗体を、ポリエチレングリコール又はカーボンナノチューブなどの水溶性ポリマーに結合させてもよい(例えば、Kam et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102:11600−11605,2005を参照されたい)。米国特許出願第11/754,899号を参照されたい。
最小限の副作用で対象に投与することができる高い力価のヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体を確かなものにするために、本発明のモノクローナル抗体組成物は、(あらゆる添加剤を除いて)少なくとも0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、95、96、97、98、99又は99.9重量%純粋であることが好ましい。本発明のモノクローナル抗体組成物は、1種類のモノクローナル抗体(すなわち、単一のクローンBリンパ球株から作られるもの)のみを含んでいてもよいし、又は、2種類以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、9又は10種類以上)の異なるモノクローナル抗体の混合物を含んでいてもよい。ヒトインターロイキン1αモノクローナル抗体に加えて、本発明の抗体組成物は、ヒトインターロイキン1α以外の抗原に特異的に結合するその他のモノクローナル抗体を含んでいてもよい。
ヒトインターロイキン1αモノクローナル抗体を、細胞毒素又は検出可能なラベルなどの他の分子に結合させて、機能を変化又は強化してもよい。ヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体を1つ以上の細胞毒素に結合させて、インターロイキン1αを発現する細胞をより効果的に死滅させてもよい。本発明で使用される細胞毒素は、ヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体に結合させることができるあらゆる細胞毒性薬(例えば、細胞と接触した後にその細胞を殺すことができる分子)であってもよい。細胞毒素の例は、限定されるものではないが、放射性核種(例えば、35S、14C、32P、125I、131I、90Y、89Zr、201Tl、186Re、188Re、57Cu、213Bi及び211At)、結合した放射性核種及び化学療法剤を含む。さらに、細胞毒素の例は、限定されるものではないが、代謝拮抗物質(例えば、5−フルオロウラシル(5−FU)、メトトレザト(MTX)、フルダラビンなど)、抗微小管薬剤(例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、タキサン(パクリタキセル及びドセタセルなど)など)、アルキル化薬(例えば、シクロホスファミド、メルファラン、ビスクロロエチルニトロソ尿素(BCNU)など)、白金薬剤(例えば、シスプラチン(cDDPとも呼ばれる)、カルボプラチン、オキサリプラチン、JM−216、CI−973など)、アントラサイクリン(例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシンなど)、抗生物質(例えば、マイトマイシンC)、トポイソメラーゼ阻害剤(例えばエトポシド、テニポシド及びカンプトテシン)、又は、(リシン、ジフテリア毒素(DT)、シュードモナス菌体外毒素(PE)A、PE40、アブリン、サポリン、アメリカヤマゴボウウィルスタンパク、臭化エチジウム、グルココルチコイド、炭疽毒素などの)その他の細胞毒性薬を含む。例えば、米国特許第5,932,188号を参照されたい。
検出可能なラベルにヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体を結合させることもできる。本発明において有用な検出可能なラベルは、ビオチン又はストレプトアビジン、磁気ビーズ、蛍光染料(例えば、フルオレセインイソチオシアネート、テキサスレッド、ローダミン、緑色蛍光タンパクなど)、放射標識(例えば、3H、125I、35S、14C、32P、111In、97Ru、67Ga、68Ga又は72As)、放射性イメージングのための金属などの放射線不透過性物質、磁気共鳴画像のための常磁性薬剤、酵素(例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、ELISAにおいて一般的に用いられるその他のもの)、コロイド金若しくは有色ガラスなどの比色定量ラベル、又は、プラスチック(例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックスなど)ビーズを含む。そのようなラベルを検出する手段は当業者に周知である。従って、例えば、写真フィルム又はシンチレーション計数器を用いて放射標識を検出してもよい。蛍光マーカーを用いてもよく、放射された光束を光検出器を用いて検出することによって、蛍光マーカーを検出することができる。酵素ラベルは、一般的には、酵素に基質を提供し、基質に対する酵素の作用によって生じた反応生成物を検出することによって検出される。比色定量ラベルは、単純に有色ラベルを視覚化することによって検出される。
本発明は、ヒトインターロイキン1αに対して特異的なヒトモノクローナル抗体をコードする完全な核酸分子を包含する。同じ核酸分子がヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖の両方をコードしてもよいが、重鎖をコードする1つの核酸と、軽鎖をコードするもう1つの核酸との2つの異なる核酸分子を用いてもよい。ヒトインターロイキン1αに対して特異的な3つのIgG1モノクローナル抗体のアミノ酸配列を与える。配列番号1、3、5、7、9及び11を参照されたい。また、これらのアミノ酸配列をコードする例示的核酸分子を記載する。配列番号2、4、6、8、10及び12を参照されたい。2つの記載されているIgG1モノクローナル抗体又は本発明に含まれるその他のモノクローナル抗体のアミノ酸配列をコードするその他のあらゆる適切な核酸を用いてもよい。
モノクローナル抗体の生産のために、本発明の核酸分子は、そのような核酸分子が作用可能な状態で転写制御配列及び翻訳制御配列などの発現制御配列に連結される方向で発現ベクター中に組み込まれていてもよい。発現ベクターの例は、プラスミドに由来するベクター、並びに、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス及びレトロウイルスなどのウイルスに由来するベクターを含む。軽鎖及び重鎖をコードする核酸分子は、単一のベクターに組み込まれていてもよいし、又は、異なるベクターに組み込まれていてもよい。本発明のベクターは、プロモータ及び/若しくはエンハンサなどの調節配列(米国特許第5,168,062号、米国特許第4,510,245号及び米国特許第4,968,615号を参照されたい)、選択マーカ、又は、親和性タグ(精製を容易にするためのもの)若しくは検出可能なラベルをコードする配列を含んでいてもよい。
モノクローナル抗体の生産のために、本発明のベクターを、例えば、バクテリアなどの原核細胞、又は、好ましくは哺乳動物、植物又は酵母などの真核細胞といった適切な宿主細胞中に導入することができる。宿主細胞中に異種起源のポリヌクレオチドを導入する方法の例は、ウイルスベクターの使用、エレクトロポレーション、リポソーム中へのポリヌクレオチドのカプセル化、デキストラン媒介性トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介性トランスフェクション、プロトプラスト融合、アグロバクテリウム媒介性トランスフォーメーション、遺伝子銃トランスフォーメーション、及び、核内へのDNAの直接的マイクロインジェクションを含む。現在のところ、哺乳動物細胞株は、ベクターからのモノクローナル抗体の発現に好ましい。哺乳動物宿主細胞の例は、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞(例えば、DG44CHO細胞株)、HeLa細胞、ベビーハムスター腎臓(BHK)細胞、アフリカミドリザル腎臓細胞(COS)、ヒト肝細胞癌細胞(例えば、Hep G2)、NS0細胞、SP2細胞、HEK−293T細胞、293フリースタイル細胞及びNIH−3T3細胞を含む。本発明のモノクローナル抗体は、トランスジェニック動物又はトランスジェニック植物において発現されてもよい。例えば、米国特許第5,827,690号;第5,756,687号;第5,750,172号;第5,741,957号;第6,046,037号;及び第5,959,177号を参照されたい。
本発明は、細胞をヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体と接触させてその細胞に結合したモノクローナル抗体を検出することによって、サンプル中のヒトインターロイキン1αを発現する細胞を検出する方法を提供する。本発明は、細胞をヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体と接触させることによってヒトインターロイキン1αを発現する細胞を死滅させる方法をも提供する。そのような死滅は、補体媒介性障害、抗体依存的細胞媒介性細胞傷害、又は、細胞毒素の抗体媒介性送達によって達成することができる。ここに記載されている抗体は、その他の方法にも有用であることが示されている。例えば、MABp1は、インターロイキン1αによって誘導される内皮細胞におけるICAM1及びE−セレクチン発現を減少させている。MABp1は、生体サンプル中のインターロイキン1αの検出及び定量のための免疫測定に用いられることが示されている。
実施例1−抗ヒトインターロイキン1αIgG1及びκ鎖のクローニング
可変領域重鎖(V−HC)及び可変領域軽鎖(V−LC)の配列は、米国特許第5,959,085号で提供されているアミノ酸配列情報を用いて合成される遺伝子であった。ATG開始コドンの上流にHindIII/Clal部位を導入し、3’末端にNhel部位を導入して、V−HCをPCR増幅させた。ヒト生殖細胞IgG1定常領域(エキソン及びイントロンを含む)を、最初の2個のアミノ酸Ala−Serをコードする5’トリプレットをNhel部位に組み換えて、3’末端にBamHI部位を導入して、PCR増幅させた。ヒト生殖細胞IgG1定常領域アミノ酸配列は、K171Q及びV261L交換を除いて、Swiss−ProtエントリーP01857に対応していた。V−HC配列と定常IgG1−HC配列とをNhel部位を用いて結合し、HindIII及びBamH1部位を用いてpcDNA3中にクローンした。
可変領域重鎖(V−HC)及び可変領域軽鎖(V−LC)の配列は、米国特許第5,959,085号で提供されているアミノ酸配列情報を用いて合成される遺伝子であった。ATG開始コドンの上流にHindIII/Clal部位を導入し、3’末端にNhel部位を導入して、V−HCをPCR増幅させた。ヒト生殖細胞IgG1定常領域(エキソン及びイントロンを含む)を、最初の2個のアミノ酸Ala−Serをコードする5’トリプレットをNhel部位に組み換えて、3’末端にBamHI部位を導入して、PCR増幅させた。ヒト生殖細胞IgG1定常領域アミノ酸配列は、K171Q及びV261L交換を除いて、Swiss−ProtエントリーP01857に対応していた。V−HC配列と定常IgG1−HC配列とをNhel部位を用いて結合し、HindIII及びBamH1部位を用いてpcDNA3中にクローンした。
>ヒトインターロイキン1α−IgG1−HC
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCTASGFTFSMFGVHWVRQAPGKGLEWVAAVSYDGSNKYYAESVKGRFTISRDNSKNILFLQMDSLRLEDTAVYYCARGRPKVVIPAPLAHWGQGTLVTFSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAQTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIALEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(配列番号:1)
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCTASGFTFSMFGVHWVRQAPGKGLEWVAAVSYDGSNKYYAESVKGRFTISRDNSKNILFLQMDSLRLEDTAVYYCARGRPKVVIPAPLAHWGQGTLVTFSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAQTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIALEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(配列番号:1)
>ヒトインターロイキン1α−IgG1−HC
atggagttcgggctgagttgggtgttcctggtggctctgctgcggggcgtgcagtgccaggtgcagctggtggagagtgggggtggcgtggtgcagcctggccggtctctgcgcctgtcttgcactgcctccggttttaccttttctatgtttggtgtgcactgggtgcgccaggctcccggcaagggactggaatgggtggccgccgtgagttacgacgggtccaacaaatattacgctgagagcgtgaaaggcagattcaccatcagcagagataattccaagaatattctgttcctgcagatggacagtctgagactggaggacactgctgtgtactactgcgctcgtggacgccctaaggtggtcatccccgcccccctggcacattggggccagggaactctggtgaccttttctagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtccacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtagtgaccgtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcccagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccctggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccttaagtccgggaaaataa(配列番号:2)
atggagttcgggctgagttgggtgttcctggtggctctgctgcggggcgtgcagtgccaggtgcagctggtggagagtgggggtggcgtggtgcagcctggccggtctctgcgcctgtcttgcactgcctccggttttaccttttctatgtttggtgtgcactgggtgcgccaggctcccggcaagggactggaatgggtggccgccgtgagttacgacgggtccaacaaatattacgctgagagcgtgaaaggcagattcaccatcagcagagataattccaagaatattctgttcctgcagatggacagtctgagactggaggacactgctgtgtactactgcgctcgtggacgccctaaggtggtcatccccgcccccctggcacattggggccagggaactctggtgaccttttctagcgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtccacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtagtgaccgtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcccagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccctggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccttaagtccgggaaaataa(配列番号:2)
ATG開始コドンの上流にHindIII/Clal部位を導入し、3’末端にBsiWI部位を導入して、V−LCをPCR増幅させた。付加されたArg及び第1アミノ酸Thrをコードする5’BsiWI部位を導入し、3’末端にBamHI部位を導入して、ヒト定常カッパLC配列をPCR増幅させた。ヒト定数カッパLCアミノ酸配列は、Swiss−ProtエントリーP01834に対応していた。BsiWI部位を用いてV−HC配列と定常カッパLC配列とを結合し、HindIII及びBamHI部位を用いてpcDNA3中にクローンした。
>ヒトインターロイキン1α−K−LC
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASNLETGVPSRFSGSGSGSDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTSSFLLSFGGGTKVEHRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC[配列番号:3]
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASNLETGVPSRFSGSGSGSDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTSSFLLSFGGGTKVEHRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC[配列番号:3]
>ヒトインターロイキン1α−K−LC
atggacatgcgcgtgcccgcccagctgctggggctgctgctgctgtggttccctggatctaggtgcgacattcagatgacccagtcccccagctcagtgtcagcctccgtgggcgacagagtgacaatcacctgccgcgcctctcagggaatctctagttggctggcctggtaccagcagaagcctggaaaggcccccaagctgctgatctatgaagcctccaacctggagaccggcgtgccctctcgcttcagcggctcaggctcaggcagtgattttactctgaccatcagctccctgcagccagaggatttcgctacttactactgccagcagacctcttccttcctgctgtccttcgggggaggcacaaaggtggagcaccgtacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagttcaccggtgacaaagagcttcaacaggggagagtgttag[配列番号:4]
atggacatgcgcgtgcccgcccagctgctggggctgctgctgctgtggttccctggatctaggtgcgacattcagatgacccagtcccccagctcagtgtcagcctccgtgggcgacagagtgacaatcacctgccgcgcctctcagggaatctctagttggctggcctggtaccagcagaagcctggaaaggcccccaagctgctgatctatgaagcctccaacctggagaccggcgtgccctctcgcttcagcggctcaggctcaggcagtgattttactctgaccatcagctccctgcagccagaggatttcgctacttactactgccagcagacctcttccttcctgctgtccttcgggggaggcacaaaggtggagcaccgtacggtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagttcaccggtgacaaagagcttcaacaggggagagtgttag[配列番号:4]
実施例2−NATHMAB−ヒトインターロイキン1α−IgG1及びκ鎖の生成
NATHMAB−ヒトインターロイキン1α/IgG1重鎖をコードする完全な配列を遺伝子合成した。V−HC配列は、米国特許第5,959,085号に記載されているアミノ酸配列に対応していた。ヒト定常IgG1−HC配列は、Swiss−ProtエントリーP01857に対応していた。このヌクレオチド配列は、CHO細胞における発現に最適化されたコドンであった。Kozac配列(gccacc)を開始ATGの上流に加えた。
NATHMAB−ヒトインターロイキン1α/IgG1重鎖をコードする完全な配列を遺伝子合成した。V−HC配列は、米国特許第5,959,085号に記載されているアミノ酸配列に対応していた。ヒト定常IgG1−HC配列は、Swiss−ProtエントリーP01857に対応していた。このヌクレオチド配列は、CHO細胞における発現に最適化されたコドンであった。Kozac配列(gccacc)を開始ATGの上流に加えた。
>NATHMAB−ヒトインターロイキン1α−IgG1−HC
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCTASGFTFSMFGVHWVRQAPGKGLEWVAAVSYDGSNKYYAESVKGRFTISRDNSKNILFLQMDSLRLEDTAVYYCARGRPKVVIPAPLAHWGQGTLVTFSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK[配列番号:5]
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>NATHMAB−ヒトインターロイキン1α−IgG1−HC
gccaccatggagtttggtctgtcctgggtgttcttggtggctctgctgaggggggtgcagtgccaggtccagctggtggagtctggtgggggagtggtgcagcctgggagatctctgcggctgtcttgcactgcctctggtttcactttctctatgtttggtgtgcattgggtcaggcaagcaccaggcaaaggactcgagtgggtcgcagctgtgagctatgacgggtctaacaaatattacgctgagtctgtcaagggtaggtttaccatcagccgggataattccaaaaatatcctgttcctgcaaatggactctctgaggctggaagatactgcagtctactattgtgcaagggggaggccaaaggtggtgatccccgctcccctcgctcactggggacagggaaccctggtgactttcagctctgctagcaccaagggccctagcgtgttcccattggctccttcctccaaatctacttctggaggcaccgccgccctgggatgtctcgtgaaagattattttcctgagcccgtcaccgtgagctggaacagcggcgccctgactagcggcgtgcacacctttcccgcagtgctgcaatctagcgggctgtactccctgagctctgtcgtgaccgtgccctccagcagcctcggaactcagacctacatctgcaatgtcaatcataaaccctctaataccaaagtcgataagaaggtcgaacctaaatcttgcgataaaacccatacctgccccccttgcccagcacccgaactgctgggcggtccctctgtgtttctgttcccccccaaacccaaagataccctgatgatctctaggacccccgaggtcacttgtgtcgtggtggatgtgtcccacgaagatccagaagtcaaattcaactggtatgtggacggggtcgaagtgcacaacgcaaagaccaagcctagggaggaacagtataatagcacatatagggtggtcagcgtcctgaccgtcctgcatcaggactggctgaatggcaaagaatataagtgtaaagtgtccaacaaggccctgccagccccaatcgaaaagacaatctctaaagccaaggggcaaccccgggaacctcaggtctatacactgccaccctctcgggatgaactgaccaagaatcaggtgagcctgacatgtcttgtgaagggtttttatccctccgacattgccgtggagtgggagagcaatggacaaccagaaaataactacaaaaccacaccccctgtgctggactccgatggttccttcttcctctactctaagctgacagtggataagtctaggtggcagcaggggaatgtgttctcctgctctgtgatgcacgaggcactgcacaatcattatacacaaaagtctctgtctctgtctccaggaaagtaa[配列番号:6]
gccaccatggagtttggtctgtcctgggtgttcttggtggctctgctgaggggggtgcagtgccaggtccagctggtggagtctggtgggggagtggtgcagcctgggagatctctgcggctgtcttgcactgcctctggtttcactttctctatgtttggtgtgcattgggtcaggcaagcaccaggcaaaggactcgagtgggtcgcagctgtgagctatgacgggtctaacaaatattacgctgagtctgtcaagggtaggtttaccatcagccgggataattccaaaaatatcctgttcctgcaaatggactctctgaggctggaagatactgcagtctactattgtgcaagggggaggccaaaggtggtgatccccgctcccctcgctcactggggacagggaaccctggtgactttcagctctgctagcaccaagggccctagcgtgttcccattggctccttcctccaaatctacttctggaggcaccgccgccctgggatgtctcgtgaaagattattttcctgagcccgtcaccgtgagctggaacagcggcgccctgactagcggcgtgcacacctttcccgcagtgctgcaatctagcgggctgtactccctgagctctgtcgtgaccgtgccctccagcagcctcggaactcagacctacatctgcaatgtcaatcataaaccctctaataccaaagtcgataagaaggtcgaacctaaatcttgcgataaaacccatacctgccccccttgcccagcacccgaactgctgggcggtccctctgtgtttctgttcccccccaaacccaaagataccctgatgatctctaggacccccgaggtcacttgtgtcgtggtggatgtgtcccacgaagatccagaagtcaaattcaactggtatgtggacggggtcgaagtgcacaacgcaaagaccaagcctagggaggaacagtataatagcacatatagggtggtcagcgtcctgaccgtcctgcatcaggactggctgaatggcaaagaatataagtgtaaagtgtccaacaaggccctgccagccccaatcgaaaagacaatctctaaagccaaggggcaaccccgggaacctcaggtctatacactgccaccctctcgggatgaactgaccaagaatcaggtgagcctgacatgtcttgtgaagggtttttatccctccgacattgccgtggagtgggagagcaatggacaaccagaaaataactacaaaaccacaccccctgtgctggactccgatggttccttcttcctctactctaagctgacagtggataagtctaggtggcagcaggggaatgtgttctcctgctctgtgatgcacgaggcactgcacaatcattatacacaaaagtctctgtctctgtctccaggaaagtaa[配列番号:6]
NATHMAB−ヒトインターロイキン1α/κ軽鎖をコードする完全な配列を遺伝子合成した。V−LC配列は、米国特許第5,959,085号に記載されているアミノ酸配列に対応していた。ヒト定常カッパLC配列は、Swiss−ProtエントリーP01834に対応していた。このヌクレオチド配列は、CHO細胞の発現に最適化されたコドンであった。Kozac配列(gccacc)をATGの上流に加えた。
>NATHMAB−ヒトインターロイキン1α−K−LC
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASNLETGVPSRFSGSGSGSDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTSSFLLSFGGGTKVEHTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC[配列番号:7]
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>NATHMAB−ヒトインターロイキン1α−K−LC
gccaccatggacatgcgcgttcctgcccagctcctcggactgctgctgctttggttcccaggctcccggtgtgatattcagatgacacagtctccctcctccgtatctgcatccgtgggcgacagggtcacaatcacttgtagggccagccaggggatctctagttggctcgcatggtaccaacaaaagccaggtaaggctccgaaactgctcatttacgaagctagtaacctcgaaacaggcgtgccaagccggtttagcggctccggttccggttctgacttcaccctcactatttcctccctgcaacctgaggattttgccacatattactgtcagcaaacttcttcttttctgctctcctttggtgggggaactaaggtggagcacacagtggccgcccccagcgtctttatcttccccccaagcgatgaacagctgaagtcagggaccgccagcgtggtctgcctgctcaataatttttaccctcgcgaggctaaggtccaatggaaagtggataacgccctccagagcggtaactctcaggagtctgtcacagagcaagacagcaaggatagcacctattccctctccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaaacacaaagtgtacgcttgtgaggtgactcaccagggactgagtagccctgtgacaaaatctttcaataggggagaatgctga[配列番号:8]
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実施例3−NATHMAB−ヒトインターロイキン1α(IgG1/kサブタイプ)の発現
NATHMAB−インターロイキン1αを一時的トランスフェクション方法を用いて発現させ、精製した。細胞培養上澄み又はGタンパク質親和性精製された抗体を、以下に記載されているさらなる分析に供した。ヒト胎児腎臓(HEK)293T細胞を、10%FCSを含むDMEM中で培養し、製造社のプロトコルに従ってjetPEI試剤(Polyplus)を用いて一時的にトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間前に10cmのディッシュ上に細胞を撒き(10cmのディッシュ当たりに3×106細胞)、トランスフェクション時に約50%の密度に達するようにした。ディッシュ当たり5μgのpcDNA3−抗ヒトインターロイキン1α−IgG1−Hc及び2倍モル過剰量のpcDNA3−抗ヒトインターロイキン1α−Kappaをトランスフェクションに用いた。回収後に、媒体を、2%FCSを含むDMEM(1ディッシュ当たり10ml)に変更し、5〜6日間抗体を回収した。上澄みを回収し、ろ過し、pH7.5〜8に調整して、さらなる使用まで4℃で保存した。
NATHMAB−インターロイキン1αを一時的トランスフェクション方法を用いて発現させ、精製した。細胞培養上澄み又はGタンパク質親和性精製された抗体を、以下に記載されているさらなる分析に供した。ヒト胎児腎臓(HEK)293T細胞を、10%FCSを含むDMEM中で培養し、製造社のプロトコルに従ってjetPEI試剤(Polyplus)を用いて一時的にトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間前に10cmのディッシュ上に細胞を撒き(10cmのディッシュ当たりに3×106細胞)、トランスフェクション時に約50%の密度に達するようにした。ディッシュ当たり5μgのpcDNA3−抗ヒトインターロイキン1α−IgG1−Hc及び2倍モル過剰量のpcDNA3−抗ヒトインターロイキン1α−Kappaをトランスフェクションに用いた。回収後に、媒体を、2%FCSを含むDMEM(1ディッシュ当たり10ml)に変更し、5〜6日間抗体を回収した。上澄みを回収し、ろ過し、pH7.5〜8に調整して、さらなる使用まで4℃で保存した。
上澄み(250ml)の一部を、回転ホイール上で4℃においてGタンパクセファロース(GE Healthcare)と共に3時間インキュベートした。その後、Gタンパクセファロースを重力流カラムにロードし、PBSで洗浄した。100mMのグリシン/150mMのNaClを含む100μlのTris(pH8)を用い、その後の10%グリセロールを含むPBSによる透析によって、1mlの画分中に抗体を溶出させた。BCAタンパク検出キット(Pierce)を用いて各画分の総タンパク濃度を測定した。SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動によって重鎖及び軽鎖の正確なサイズ並びに組み立てられた天然抗体の正確なサイズを確認した。
NATHMAB−ヒトインターロイキン1α精製抗体及び生成HEK293T細胞のトリトンX−100細胞溶解物を含む上澄みを用いて、125I−インターロイキン1αを用いた放射免疫定量法(RIA)における抗原結合について試験を行った。タンパクGへの吸着によって結合を定量した。すべてのサンプルは、溶出液中において最も高い活性で125I−ヒトインターロイキン1αに結合した。0.012%濃度(RIAにおいて最大半量の活性)の精製されたNATHMAB−ヒトインターロイキン1αの125I−ヒトインターロイキン1αに対する結合を、親和係数の測定に用いた。これらの条件下におけるNATHMAB−ヒトインターロイキン1αのKaは、3.03×1010M−1であった。逆算によって、精製された溶出液中の活性抗ヒトインターロイキン1α−IgGの濃度が推定的に約30μg/mlであることが明らかになった。
マウス又はヒトインターロイキン1αで処理を行うと高いレベルのインターロイキン2を生成するマウスEL4−6.1亜系統を用いた生物的分析において、NATHMAB−ヒトインターロイキン1αの中和活性を試験した(Zubler et al.,J.Immunol.134:3662−3668,1985)。示されている濃度のNATHMAB−ヒトインターロイキン1α(溶出液)を、96ウェル培養プレート(平底)内において、最終体積が100μl/ウェルの様々な濃度の組み換えのヒトインターロイキン1α(eBioscience)と共に37℃で30分間インキュベートした。各ポイントを培地(DMEM、5%FCS)中において3回反復して実行した。0.2μg/mlのイオノマイシンを含む培地中のEL4−6.1細胞(5×105細胞/ml)の懸濁液100μlを各ウェルに加えた。5%CO2インキュベータ内において37℃で24時間のインキューベートした後に、細胞が含まれていない上澄みを回収し、市販のELISA(R&D Systems)を用いて、インターロイキン2濃度について分析した。その結果は、NATHMAB−インターロイキン1αが、ヒトインターロイキン1αで誘導されたEL−4細胞によるインターロイキン2の分泌を有効に中和することができることを示した。
膜結合ヒトインターロイキン1αの中和について試験を行うために、上記されている同じEL−4細胞ベースの分析を以下のように変更して用いた。様々な濃度のNATHMAB−ヒトインターロイキン1α(溶出液)を、様々な数のヒト活性化単球と共にインキュベートした。単球を調製するために、フィコール・パック遠心分離機を用いて、軟膜からPBMCを分離した。RPMI中において単球を37℃で1.5時間にわたってプラスチックディッシュ上に付着させた。付着していないリンパ球を洗い流してほぼ純粋な単球培地を作った。Gln、Pyr及び10%FCSを含むRPMI中において、単球を、LPS(1μg/ml)と共に、5%CO2炭酸インキュベータ内において37℃で24時間培養した。細胞を、PBS/2mMのEDTAを用いて分離し、慎重にプレートからこすり落とし、ファルコンチューブ内に移した。細胞を、PBSで2回洗浄し、PBS/1%PFA中に再懸濁し、20℃において10分間固定した。細胞を、グリシンバッファ(150mMのグリシン、75mMのNaCl、pH7.4)で洗浄し、次いで培養液で洗浄し、数をカウントした。その結果は、NATHMAB−ヒトインターロイキン1αが、膜結合ヒトインターロイキン1αで誘導されたEL−4細胞によるインターロイキン2分泌を有効に中和することを示した。上述されているものと類似の試験において、マウスインターロイキン1αの中和についてNATHMAB−ヒトインターロイキン1αを試験した。示されている量のNATHMAB−ヒトインターロイキン1α上澄みを、組み換えヒト(h)又はマウス(m)インターロイキン1α(eBioscience)と共にインキュベートした。抗体を含む上澄みは、ヒトインターロイキン1αを中和したが、マウスインターロイキン1αを中和しなかった。
実施例4−抗体による癌細胞の死滅
標準的フィコールパック調製によって軟膜から分離されたヒト末梢血単核細胞(PBMC)を、RPMI−1640CM又は組み換えヒトインターロイキン2(30ナノグラム/ml、ebioscience)を含むRPMI−1640−CMのいずれかにおいて、37℃及び5%CO2中で一晩培養し、作動細胞(E)として用いた。THP1細胞をターゲット(T)として用いた。96ウェルプレートにおいて各ポイントを3回反復して分析を実行した。1×104個のターゲットを様々な濃度のMABp1と共に15分間インキュベートした後に、1×104個のターゲットに25:1及び50:1のET比で作動細胞を加え、さらに4時間培養した。75μlの分析体積を、新しい96ウェルプレートに移し、LDH細胞毒性検出キット(Roche)を用いて製造社のプロトコルに従って細胞毒性を分析した。
%特異的細胞溶解=(平均試験放出−抗体を含まない平均自然放出)×100/(ターゲットからの平均最大放出−ターゲットからの平均自然放出)
A.処理していないPBMCを作動細胞として用いた。
B.組み換えヒトインターロイキン2で処理したPBMCを作動細胞として用いた。
いずれの場合においても、MABp1の濃度(1.25〜20μg/ml)を増加させることは、両方のET比においてターゲット細胞殺傷の増大(約90%まで)をもたらした。
標準的フィコールパック調製によって軟膜から分離されたヒト末梢血単核細胞(PBMC)を、RPMI−1640CM又は組み換えヒトインターロイキン2(30ナノグラム/ml、ebioscience)を含むRPMI−1640−CMのいずれかにおいて、37℃及び5%CO2中で一晩培養し、作動細胞(E)として用いた。THP1細胞をターゲット(T)として用いた。96ウェルプレートにおいて各ポイントを3回反復して分析を実行した。1×104個のターゲットを様々な濃度のMABp1と共に15分間インキュベートした後に、1×104個のターゲットに25:1及び50:1のET比で作動細胞を加え、さらに4時間培養した。75μlの分析体積を、新しい96ウェルプレートに移し、LDH細胞毒性検出キット(Roche)を用いて製造社のプロトコルに従って細胞毒性を分析した。
%特異的細胞溶解=(平均試験放出−抗体を含まない平均自然放出)×100/(ターゲットからの平均最大放出−ターゲットからの平均自然放出)
A.処理していないPBMCを作動細胞として用いた。
B.組み換えヒトインターロイキン2で処理したPBMCを作動細胞として用いた。
いずれの場合においても、MABp1の濃度(1.25〜20μg/ml)を増加させることは、両方のET比においてターゲット細胞殺傷の増大(約90%まで)をもたらした。
実施例5−ヒト抗ヒトインターロイキン1α特異的モノクローナル抗体配列
ヒトインターロイキン1α(MABp1)に対して特異的なもう1つのヒト抗−ヒトインターロイキン1αIgG1/κ軽鎖をコードする完全な配列を合成して上記のように発現させた。重鎖及び軽鎖をコードする核酸中に、開始ATGの上流にKozac配列(gccacc)を加えた。
ヒトインターロイキン1α(MABp1)に対して特異的なもう1つのヒト抗−ヒトインターロイキン1αIgG1/κ軽鎖をコードする完全な配列を合成して上記のように発現させた。重鎖及び軽鎖をコードする核酸中に、開始ATGの上流にKozac配列(gccacc)を加えた。
重鎖
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCTASGFTFSMFGVHWVRQAPGKGLEWVAAVSYDGSNKYYAESVKGRFTISRDNSKNILFLQMDSLRLEDTAVYYCARGRPKVVIPAPLAHWGQGTLVTFSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK[配列番号:9]
gccaccatggagtttggtctgtcctgggtgttcttggtggctctgctgaggggggtgcagtgccaggtccagctggtggagtctggtgggggagtggtgcagcctgggagatctctgcggctgtcttgcactgcctctggtttcactttctctatgtttggtgtgcattgggtcaggcaagcaccaggcaaaggactcgagtgggtcgcagctgtgagctatgacgggtctaacaaatattacgctgagtctgtcaagggtaggtttaccatcagccgggataattccaaaaatatcctgttcctgcaaatggactctctgaggctggaagatactgcagtctactattgtgcaagggggaggccaaaggtggtgatccccgctcccctcgctcactggggacagggaaccctggtgactttcagctctgctagcaccaagggccctagcgtgttcccattggctccttcctccaaatctacttctggaggcaccgccgccctgggatgtctcgtgaaagattattttcctgagcccgtcaccgtgagctggaacagcggcgccctgactagcggcgtgcacacctttcccgcagtgctgcaatctagcgggctgtactccctgagctctgtcgtgaccgtgccctccagcagcctcggaactcagacctacatctgcaatgtcaatcataaaccctctaataccaaagtcgataagagggtcgaacctaaatcttgcgataaaacccatacctgccccccttgcccagcacccgaactgctgggcggtccctctgtgtttctgttcccccccaaacccaaagataccctgatgatctctaggacccccgaggtcacttgtgtcgtggtggatgtgtcccacgaagatccagaagtcaaattcaactggtatgtggacggggtcgaagtgcacaacgcaaagaccaagcctagggaggaacagtataatagcacatatagggtggtcagcgtcctgaccgtcctgcatcaggactggctgaatggcaaagaatataagtgtaaagtgtccaacaaggccctgccagccccaatcgaaaagacaatctctaaagccaaggggcaaccccgggaacctcaggtctatacactgccaccctctcgggaggaaatgaccaagaatcaggtgagcctgacatgtcttgtgaagggtttttatccctccgacattgccgtggagtgggagagcaatggacaaccagaaaataactacaaaaccacaccccctgtgctggactccgatggttccttcttcctctactctaagctgacagtggataagtctaggtggcagcaggggaatgtgttctcctgctctgtgatgcacgaggcactgcacaatcattatacacaaaagtctctgtctctgtctccaggaaagtaa[配列番号:10]
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCTASGFTFSMFGVHWVRQAPGKGLEWVAAVSYDGSNKYYAESVKGRFTISRDNSKNILFLQMDSLRLEDTAVYYCARGRPKVVIPAPLAHWGQGTLVTFSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK[配列番号:9]
gccaccatggagtttggtctgtcctgggtgttcttggtggctctgctgaggggggtgcagtgccaggtccagctggtggagtctggtgggggagtggtgcagcctgggagatctctgcggctgtcttgcactgcctctggtttcactttctctatgtttggtgtgcattgggtcaggcaagcaccaggcaaaggactcgagtgggtcgcagctgtgagctatgacgggtctaacaaatattacgctgagtctgtcaagggtaggtttaccatcagccgggataattccaaaaatatcctgttcctgcaaatggactctctgaggctggaagatactgcagtctactattgtgcaagggggaggccaaaggtggtgatccccgctcccctcgctcactggggacagggaaccctggtgactttcagctctgctagcaccaagggccctagcgtgttcccattggctccttcctccaaatctacttctggaggcaccgccgccctgggatgtctcgtgaaagattattttcctgagcccgtcaccgtgagctggaacagcggcgccctgactagcggcgtgcacacctttcccgcagtgctgcaatctagcgggctgtactccctgagctctgtcgtgaccgtgccctccagcagcctcggaactcagacctacatctgcaatgtcaatcataaaccctctaataccaaagtcgataagagggtcgaacctaaatcttgcgataaaacccatacctgccccccttgcccagcacccgaactgctgggcggtccctctgtgtttctgttcccccccaaacccaaagataccctgatgatctctaggacccccgaggtcacttgtgtcgtggtggatgtgtcccacgaagatccagaagtcaaattcaactggtatgtggacggggtcgaagtgcacaacgcaaagaccaagcctagggaggaacagtataatagcacatatagggtggtcagcgtcctgaccgtcctgcatcaggactggctgaatggcaaagaatataagtgtaaagtgtccaacaaggccctgccagccccaatcgaaaagacaatctctaaagccaaggggcaaccccgggaacctcaggtctatacactgccaccctctcgggaggaaatgaccaagaatcaggtgagcctgacatgtcttgtgaagggtttttatccctccgacattgccgtggagtgggagagcaatggacaaccagaaaataactacaaaaccacaccccctgtgctggactccgatggttccttcttcctctactctaagctgacagtggataagtctaggtggcagcaggggaatgtgttctcctgctctgtgatgcacgaggcactgcacaatcattatacacaaaagtctctgtctctgtctccaggaaagtaa[配列番号:10]
軽鎖
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASNLETGVPSRFSGSGSGSDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTSSFLLSFGGGTKVEHKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC[配列番号:11]
gccaccatggacatgcgcgttcctgcccagctcctcggactgctgctgctttggttcccaggctcccggtgtgatattcagatgacacagtctccctcctccgtatctgcatccgtgggcgacagggtcacaatcacttgtagggccagccaggggatctctagttggctcgcatggtaccaacaaaagccaggtaaggctccgaaactgctcatttacgaagctagtaacctcgaaacaggcgtgccaagccggtttagcggctccggttccggttctgacttcaccctcactatttcctccctgcaacctgaggattttgccacatattactgtcagcaaacttcttcttttctgctctcctttggtggaggaactaaggtggagcacaagcggacagttgctgctcctagcgtctttatcttccctccaagcgatgaacagctgaagtcagggaccgccagcgtggtctgcctgctcaataatttttaccctcgcgaggctaaggtccaatggaaagtggataacgccctccagagcggtaactctcaggagtctgtcacagagcaagacagcaaggatagcacctattccctctccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaaacacaaagtgtacgcttgtgaggtgactcaccagggactgagtagccctgtgacaaaatctttcaataggggagaatgctga[配列番号:12]
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASNLETGVPSRFSGSGSGSDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTSSFLLSFGGGTKVEHKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC[配列番号:11]
gccaccatggacatgcgcgttcctgcccagctcctcggactgctgctgctttggttcccaggctcccggtgtgatattcagatgacacagtctccctcctccgtatctgcatccgtgggcgacagggtcacaatcacttgtagggccagccaggggatctctagttggctcgcatggtaccaacaaaagccaggtaaggctccgaaactgctcatttacgaagctagtaacctcgaaacaggcgtgccaagccggtttagcggctccggttccggttctgacttcaccctcactatttcctccctgcaacctgaggattttgccacatattactgtcagcaaacttcttcttttctgctctcctttggtggaggaactaaggtggagcacaagcggacagttgctgctcctagcgtctttatcttccctccaagcgatgaacagctgaagtcagggaccgccagcgtggtctgcctgctcaataatttttaccctcgcgaggctaaggtccaatggaaagtggataacgccctccagagcggtaactctcaggagtctgtcacagagcaagacagcaaggatagcacctattccctctccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaaacacaaagtgtacgcttgtgaggtgactcaccagggactgagtagccctgtgacaaaatctttcaataggggagaatgctga[配列番号:12]
実施例6−MABp1結合親和性
BIAcore2000装置(GE Health Sciences)による表面プラズモン共鳴(SPR)を用いて、精製MABp1の結合親和性を決定した。ヒト抗体捕捉キット及びアミンカップリングキット(GE Health Sciences)を用いて、マウスモノクローナル抗ヒトIgG(Fc)抗体を、CM5センサチップのフローセル上に共有結合で固定化した。典型的には8000−14000RUの固定化レベルが達成されるであろう。マウス抗ヒトIgG(Fc)捕捉抗体の固定化の後に、HBS−EP泳動バッファ(GE Health Sciences)を用いた3回のスタートアップサイクル及びMABp1を用いた2回のスタートアップサイクルを実行して、CM5表面を安定化し、共有結合しないあらゆる抗体を除去した。分析のために、MABp1抗体を、HBS−EP泳動バッファ中で1μg/mlの最終濃度に希釈し、CM5センサチップの1個のフローセル上に700RUまで固定化した。担体を含まないヒトIL−1Aサイトカイン(eBioscience、#34−8019)を、HBS−EP泳動バッファ中によって、100nMから0.05nMの試験範囲にひと続きに希釈した。流速は30μl/分であった。各サイトカイン希釈物の溶出データを15分間記録した。各サイクル後に、3MのMgCl2の単独注射を30μl/分の流速で25秒間行って、CM5表面を再生した。BiaEvaluationソフトウェア及びLangmuir結合モデルを用いてデータを一致させた。MABp1に対するKDは、2.0×10−10M未満であることがわかった。
BIAcore2000装置(GE Health Sciences)による表面プラズモン共鳴(SPR)を用いて、精製MABp1の結合親和性を決定した。ヒト抗体捕捉キット及びアミンカップリングキット(GE Health Sciences)を用いて、マウスモノクローナル抗ヒトIgG(Fc)抗体を、CM5センサチップのフローセル上に共有結合で固定化した。典型的には8000−14000RUの固定化レベルが達成されるであろう。マウス抗ヒトIgG(Fc)捕捉抗体の固定化の後に、HBS−EP泳動バッファ(GE Health Sciences)を用いた3回のスタートアップサイクル及びMABp1を用いた2回のスタートアップサイクルを実行して、CM5表面を安定化し、共有結合しないあらゆる抗体を除去した。分析のために、MABp1抗体を、HBS−EP泳動バッファ中で1μg/mlの最終濃度に希釈し、CM5センサチップの1個のフローセル上に700RUまで固定化した。担体を含まないヒトIL−1Aサイトカイン(eBioscience、#34−8019)を、HBS−EP泳動バッファ中によって、100nMから0.05nMの試験範囲にひと続きに希釈した。流速は30μl/分であった。各サイトカイン希釈物の溶出データを15分間記録した。各サイクル後に、3MのMgCl2の単独注射を30μl/分の流速で25秒間行って、CM5表面を再生した。BiaEvaluationソフトウェア及びLangmuir結合モデルを用いてデータを一致させた。MABp1に対するKDは、2.0×10−10M未満であることがわかった。
実施例7−MABp1は基底膜マトリクス腫瘍細胞侵入を阻害する
マトリゲル(BD)、基底膜マトリクスを4℃において一晩解凍し、血清を含まない冷却された細胞培養液で希釈した(5mg/ml〜1mg/ml)。100μlの希釈されたマトリゲルを、24ウェルのトランスウェル(Costar)の上部室に入れ、ゲル化のために37℃で少なくとも4〜5時間培養した。腫瘍細胞(MDA−MB−231及びTHP−1)を、トリプシン/EDTAによって組織培養フラスコから回収し、培養液で洗浄し、1%FBSを含む媒体中に1×106細胞/mlの濃度で再懸濁した。ゲル化したマトリゲルを暖めた無血清培養液で穏やかに洗浄し、各ウェルに100μlの細胞懸濁液を加えた。トランスウェルの下部室を600μlの培養液で満たし、そのプレートを37℃で12〜24時間インキュベートした。マトリゲルに侵入しなかった細胞を各トランスウェル上から綿球で穏やかにこすり落とした。次いで、トランスウェルを24ウェルプレートから取り除き、侵入した細胞を70%エタノール又はメタノールで固定した後に、トランスウェルをクリスタルバイオレットで染色した。侵入した細胞を光学顕微鏡下でカウントした。マトリゲルに侵入する細胞の割合は、MABp1の存在下において有意に阻害された。
マトリゲル(BD)、基底膜マトリクスを4℃において一晩解凍し、血清を含まない冷却された細胞培養液で希釈した(5mg/ml〜1mg/ml)。100μlの希釈されたマトリゲルを、24ウェルのトランスウェル(Costar)の上部室に入れ、ゲル化のために37℃で少なくとも4〜5時間培養した。腫瘍細胞(MDA−MB−231及びTHP−1)を、トリプシン/EDTAによって組織培養フラスコから回収し、培養液で洗浄し、1%FBSを含む媒体中に1×106細胞/mlの濃度で再懸濁した。ゲル化したマトリゲルを暖めた無血清培養液で穏やかに洗浄し、各ウェルに100μlの細胞懸濁液を加えた。トランスウェルの下部室を600μlの培養液で満たし、そのプレートを37℃で12〜24時間インキュベートした。マトリゲルに侵入しなかった細胞を各トランスウェル上から綿球で穏やかにこすり落とした。次いで、トランスウェルを24ウェルプレートから取り除き、侵入した細胞を70%エタノール又はメタノールで固定した後に、トランスウェルをクリスタルバイオレットで染色した。侵入した細胞を光学顕微鏡下でカウントした。マトリゲルに侵入する細胞の割合は、MABp1の存在下において有意に阻害された。
実施例8−MABp1は内皮細胞におけるICAM1発現の増加をブロックする
低血清増殖サプリメント(Invitrogen)が加えられたM−200溶媒1mL中のヒト臍静脈内皮細胞(HUVEC)(BD Biosciences社)を、1ウェル当たり5×105個で24ウェルプレートに撒いた。細胞を3〜4時間定着させた。溶媒を吸引し、1ウェル当たり1mlのフレッシュなM−200を加えた。MABp1を4.26μg/mlで細胞に直接的に加え、室温で15分間共培養し、次いで、組み換えヒトIL−1α(組み換えヒトインターロイキン1α、eBioscience)を40pg/mlの最終濃度で加えた。ポジティブコントロールウェルにはIL−1αのみを加えた。IL−1α非存在下又はMABp1非存在下のHUVEC細胞をネガティブコントロールとした。37℃及び5%CO2での17〜20時間のインキューベーションの後に、細胞を、CellStripper試剤(Cellgro Mediatech)を用いた20分間の非酵素的処理によってプレートから離し、次いで、標準的流動細胞計測法プロトコルを用いてCD54(ICAM−1)発現について直ちに分析した。染色バッファは、2%の熱不活性化されたウシ胎児血清が加えられたダルベッコPBSで構成されていた。PE結合マウス抗ヒトCD54(ICAM−1)モノクローナル抗体(eBioscience、クローンHA58)又はPE結合マウスIgG1kアイソタイプコントロール(eBiocience、#12−4714)を製造社の説明書に従って用いて、100マイクロリットルの染色体積で、暗闇において室温で20分間HUVEC細胞を染色した。続いて、染色バッファ中における2回の洗浄を行い、次に、FACSCaliburフローサイトメーター(BD Biosciences)でサンプルを得た。いくつかの独立した試験(n=5)において、HUVEC細胞表面の組み換えヒトインターロイキン1αによって誘導されるICAM−1接着分子のアップレギュレーションは、MABp1によって促進されていないHUVEC細胞によって示されたベースラインレベルまで中和された。
低血清増殖サプリメント(Invitrogen)が加えられたM−200溶媒1mL中のヒト臍静脈内皮細胞(HUVEC)(BD Biosciences社)を、1ウェル当たり5×105個で24ウェルプレートに撒いた。細胞を3〜4時間定着させた。溶媒を吸引し、1ウェル当たり1mlのフレッシュなM−200を加えた。MABp1を4.26μg/mlで細胞に直接的に加え、室温で15分間共培養し、次いで、組み換えヒトIL−1α(組み換えヒトインターロイキン1α、eBioscience)を40pg/mlの最終濃度で加えた。ポジティブコントロールウェルにはIL−1αのみを加えた。IL−1α非存在下又はMABp1非存在下のHUVEC細胞をネガティブコントロールとした。37℃及び5%CO2での17〜20時間のインキューベーションの後に、細胞を、CellStripper試剤(Cellgro Mediatech)を用いた20分間の非酵素的処理によってプレートから離し、次いで、標準的流動細胞計測法プロトコルを用いてCD54(ICAM−1)発現について直ちに分析した。染色バッファは、2%の熱不活性化されたウシ胎児血清が加えられたダルベッコPBSで構成されていた。PE結合マウス抗ヒトCD54(ICAM−1)モノクローナル抗体(eBioscience、クローンHA58)又はPE結合マウスIgG1kアイソタイプコントロール(eBiocience、#12−4714)を製造社の説明書に従って用いて、100マイクロリットルの染色体積で、暗闇において室温で20分間HUVEC細胞を染色した。続いて、染色バッファ中における2回の洗浄を行い、次に、FACSCaliburフローサイトメーター(BD Biosciences)でサンプルを得た。いくつかの独立した試験(n=5)において、HUVEC細胞表面の組み換えヒトインターロイキン1αによって誘導されるICAM−1接着分子のアップレギュレーションは、MABp1によって促進されていないHUVEC細胞によって示されたベースラインレベルまで中和された。
実施例9−MABp1は内皮細胞におけるe−セレクチン発現の増大をブロックする
ICAM−1誘導に対するその効果と同様に、HUVEC細胞に対するCD62E(E−セレクチン)の誘導のMABp1によって媒介される中和も観察された。HUVEC細胞が、可溶性組み換えヒトインターロイキン1αによってではなく、DG44CHO細胞(GPI−IL1A細胞)の表面にグリコシル−ホスファチジルイノシトールによって固定された膜性IL−1aによって促進される場合、この効果が最も顕著であった。この試験において、6ウェルプレート中のHUVEC細胞のコンフルエント培養液を、単独で、10μg/mlのMABp1の存在下で、又は、10μg/mlのD5アイソタイプコントロール抗体の存在下で、M−200媒体中の5×106個のGPI−IL1A DG44細胞と共に一晩共培養した。17〜20時間後に、HUVEC単層を、ダルベッコPBSで広く洗浄し、次に、CellStripper試剤(Cellgro Mediatech)を用いた20分間の非酵素的処理によって離し、、次いで、標準的流動細胞計測法プロトコルを用いてCD62E(E−セレクチン)発現について直ちに分析した。染色バッファは、2%熱不活性化ウシ胎児血清が加えられたダルベッコPBSで構成されていた。PE結合マウス抗ヒトCD62Eモノクローナル抗体(eBioscience、クローンP2H3)又はPE結合マウスIgG1kアイソタイプコントロール(eBiocience、クローンP3)を製造社の説明書に従って用いて、100マイクロリットルの染色体積で、暗闇において室温で20分間HUVEC細胞を染色した。続いて、染色バッファ中で2回の洗濯を行い、次に、FACSCaliburフローサイトメーター(BD Biosciences)でサンプルを得た。膜性GPI−IL−1aによって誘導されるHUVEC細胞表面においてアップレギュレートされるE−セレクチン発現は、MABp1によって、促進されていないHUVEC細胞によって示されるベースラインレベルまで中和された。
ICAM−1誘導に対するその効果と同様に、HUVEC細胞に対するCD62E(E−セレクチン)の誘導のMABp1によって媒介される中和も観察された。HUVEC細胞が、可溶性組み換えヒトインターロイキン1αによってではなく、DG44CHO細胞(GPI−IL1A細胞)の表面にグリコシル−ホスファチジルイノシトールによって固定された膜性IL−1aによって促進される場合、この効果が最も顕著であった。この試験において、6ウェルプレート中のHUVEC細胞のコンフルエント培養液を、単独で、10μg/mlのMABp1の存在下で、又は、10μg/mlのD5アイソタイプコントロール抗体の存在下で、M−200媒体中の5×106個のGPI−IL1A DG44細胞と共に一晩共培養した。17〜20時間後に、HUVEC単層を、ダルベッコPBSで広く洗浄し、次に、CellStripper試剤(Cellgro Mediatech)を用いた20分間の非酵素的処理によって離し、、次いで、標準的流動細胞計測法プロトコルを用いてCD62E(E−セレクチン)発現について直ちに分析した。染色バッファは、2%熱不活性化ウシ胎児血清が加えられたダルベッコPBSで構成されていた。PE結合マウス抗ヒトCD62Eモノクローナル抗体(eBioscience、クローンP2H3)又はPE結合マウスIgG1kアイソタイプコントロール(eBiocience、クローンP3)を製造社の説明書に従って用いて、100マイクロリットルの染色体積で、暗闇において室温で20分間HUVEC細胞を染色した。続いて、染色バッファ中で2回の洗濯を行い、次に、FACSCaliburフローサイトメーター(BD Biosciences)でサンプルを得た。膜性GPI−IL−1aによって誘導されるHUVEC細胞表面においてアップレギュレートされるE−セレクチン発現は、MABp1によって、促進されていないHUVEC細胞によって示されるベースラインレベルまで中和された。
実施例10−MABp1効力(組み換えヒトインターロイキン1Aの中和)に関するMRC−5生物試験
ATCCコレクション(CCL−171)から胎児ヒト肺繊維芽細胞に由来するMRC−5細胞株を得た。MRC−5細胞からのIL−1Aによって誘導されるIL−6の放出を測定することによって、MABp1のIL−1中和能力を分析した。MRC−5細胞を、100マイクロリットルのDMEM完全培地中に1ウェル当たり5×103で96ウェルプレートに撒いた。加湿した5%CO2インキュベータ内において37℃で細胞を一晩培養した。続いて、コンフルエントのMRC−5細胞を、単独で又は増大させた濃度のMABp1の存在下で、20pg/mlの組み換えヒトIL−1A(組み換えヒトインターロイキン1A、eBioscience)と共にさらに24時間培養した。ネガティブコントロール細胞は、組み換えヒトインターロイキン1Aによって刺激されなかった。24時間後に上澄みを回収し、eBioscienceのIL−6ELISAキットを用いてIL−6放出について分析した。IC50、又は、最大のIL−6放出の50%を阻害するのに必要なMABp1の濃度は、0.001〜0.01μg/mLの範囲内であった。
ATCCコレクション(CCL−171)から胎児ヒト肺繊維芽細胞に由来するMRC−5細胞株を得た。MRC−5細胞からのIL−1Aによって誘導されるIL−6の放出を測定することによって、MABp1のIL−1中和能力を分析した。MRC−5細胞を、100マイクロリットルのDMEM完全培地中に1ウェル当たり5×103で96ウェルプレートに撒いた。加湿した5%CO2インキュベータ内において37℃で細胞を一晩培養した。続いて、コンフルエントのMRC−5細胞を、単独で又は増大させた濃度のMABp1の存在下で、20pg/mlの組み換えヒトIL−1A(組み換えヒトインターロイキン1A、eBioscience)と共にさらに24時間培養した。ネガティブコントロール細胞は、組み換えヒトインターロイキン1Aによって刺激されなかった。24時間後に上澄みを回収し、eBioscienceのIL−6ELISAキットを用いてIL−6放出について分析した。IC50、又は、最大のIL−6放出の50%を阻害するのに必要なMABp1の濃度は、0.001〜0.01μg/mLの範囲内であった。
実施例11−MABp1はIL−1a+細胞を識別する
100マイクロリットルのナトリウムヘパリン抗凝結全血をポリスチレンFACSチューブに等分した。サンプルを、2mlの熱不活性化ウシ胎児血清を加えた1mgのヒトIgG(精製されたプロテインA)と共に室温において15分間インキュベートすることによって、Fc受容体をブロックした。その後、サンプル:アレクサ−488でラベルされた1mgのMABp1、FITCでラベルされた1mgのモノクローナル抗膜ヒトIL1A抗体(FAB200F、R&D Systems)、又は、1mgのマウスアイソタイプコントロール(IC002F、R&D Systems)のいずれかに一次抗体を加えた。一次抗体を、暗闇の室温において30分間サンプルと共にインキュベートした。その後、サンプル赤血球を室温において15分間溶解させ(BD Biosciences PharmLyse溶液)、300×gで5分間遠心分離して吸引した。サンプルペレットを、2%熱不活性化胎児血清を含む1mlのハンクス液(HBSS)で3回洗浄した。サンプルを0.3mlのHBSS+2%FBS中に再懸濁し、データをFACSCaliburフローサイトメーターで得て、CellQuestソフトウェアを用いて分析した。MABp1を用いたヒトPBMCのフローサイトメトリー分析は、PBMCの0.2%のみがインターロイキン1αに対してポジティブであることを示した。
100マイクロリットルのナトリウムヘパリン抗凝結全血をポリスチレンFACSチューブに等分した。サンプルを、2mlの熱不活性化ウシ胎児血清を加えた1mgのヒトIgG(精製されたプロテインA)と共に室温において15分間インキュベートすることによって、Fc受容体をブロックした。その後、サンプル:アレクサ−488でラベルされた1mgのMABp1、FITCでラベルされた1mgのモノクローナル抗膜ヒトIL1A抗体(FAB200F、R&D Systems)、又は、1mgのマウスアイソタイプコントロール(IC002F、R&D Systems)のいずれかに一次抗体を加えた。一次抗体を、暗闇の室温において30分間サンプルと共にインキュベートした。その後、サンプル赤血球を室温において15分間溶解させ(BD Biosciences PharmLyse溶液)、300×gで5分間遠心分離して吸引した。サンプルペレットを、2%熱不活性化胎児血清を含む1mlのハンクス液(HBSS)で3回洗浄した。サンプルを0.3mlのHBSS+2%FBS中に再懸濁し、データをFACSCaliburフローサイトメーターで得て、CellQuestソフトウェアを用いて分析した。MABp1を用いたヒトPBMCのフローサイトメトリー分析は、PBMCの0.2%のみがインターロイキン1αに対してポジティブであることを示した。
実施例12−感染及び炎症を検出及び追跡するためのMABp1
MABp1を用いたヒトPBMCの(実施例11のような)フローサイトメトリー分析は、IL−1α+に対してポジティブなPBMCのパーセントが、通常のコントロールと比較して、無症状感染を有する対象において3.6倍に増加したことを示した。同様に、炎症を起こした親知らずを有する対象において、IL−1α+に対してポジティブなPBMCのパーセントが増加した。IL−1α+PBMCの数における実質的減少は、親知らずの除去の14日後から45日後までみられた。
MABp1を用いたヒトPBMCの(実施例11のような)フローサイトメトリー分析は、IL−1α+に対してポジティブなPBMCのパーセントが、通常のコントロールと比較して、無症状感染を有する対象において3.6倍に増加したことを示した。同様に、炎症を起こした親知らずを有する対象において、IL−1α+に対してポジティブなPBMCのパーセントが増加した。IL−1α+PBMCの数における実質的減少は、親知らずの除去の14日後から45日後までみられた。
実施例13−インターロイキン1αの検知及び/又は定量のための免疫分析
ヒト対象の血漿中には一般に非常に低いレベルのIL−1αが存在する。多くの場合においてこれらのレベルは従来的免疫分析の検出閾を外れているので、改善された感度を有するELISAが開発された。このELISAにおいては、抗体がサンプル中のインターロイキン1αに結合することを許容する条件下で、試験される生体サンプル(例えばヒト血漿)に外因性の抗インターロイキン1α抗体(例えばMABp1)を加えることができる。ヒト血漿サンプル中のインターロイキン1αのほとんどすべてが内因性抗インターロイキン1α抗体に既に結合して存在することがわかっているので、多くの場合においては後のステップを省略することができる。その後、ヒトインターロイキン1α抗体複合体を含むサンプルを、約100kDaの分子量遮断装置を有するフィルター(Amicon遠心装置)に適用することによって、サンプル中の分子量遮断未満の分子からヒトインターロイキン1α抗体複合体を分離した。ある試験においてはこれによって濃度が50倍になった。その後、処理されたサンプル(及びその希釈物)を、抗ヒトIgG捕捉抗体(2μg/mlのマウス抗ヒトIgG、Fc特異的、Southern Biotech 製品コード#9042−01)でコーティングされたマイクロタイタープレートのウェル中に加えた。サンプル中のヒトインターロイキン1α抗体複合体に結合するための時間を与えた後に、ウェルを洗浄して結合しない成分を除去した。その後、ラベルされた抗ヒトインターロイキン1α二次抗体(0.2μg/mlのビオチン結合モノクローナルマウス抗ヒトIL−1A抗体、クローンCRM6、eBioscienceカタログ#13−7017)をそのウェルに加えた。ウェル中のインターロイキン1αに結合するための時間を与えた後に、プレートを洗浄し、試験したサンプル中のインターロイキン1αの濃度の指標として、各ウェル中のラベルされた抗ヒトインターロイキン1αの量を定量した。
ヒト対象の血漿中には一般に非常に低いレベルのIL−1αが存在する。多くの場合においてこれらのレベルは従来的免疫分析の検出閾を外れているので、改善された感度を有するELISAが開発された。このELISAにおいては、抗体がサンプル中のインターロイキン1αに結合することを許容する条件下で、試験される生体サンプル(例えばヒト血漿)に外因性の抗インターロイキン1α抗体(例えばMABp1)を加えることができる。ヒト血漿サンプル中のインターロイキン1αのほとんどすべてが内因性抗インターロイキン1α抗体に既に結合して存在することがわかっているので、多くの場合においては後のステップを省略することができる。その後、ヒトインターロイキン1α抗体複合体を含むサンプルを、約100kDaの分子量遮断装置を有するフィルター(Amicon遠心装置)に適用することによって、サンプル中の分子量遮断未満の分子からヒトインターロイキン1α抗体複合体を分離した。ある試験においてはこれによって濃度が50倍になった。その後、処理されたサンプル(及びその希釈物)を、抗ヒトIgG捕捉抗体(2μg/mlのマウス抗ヒトIgG、Fc特異的、Southern Biotech 製品コード#9042−01)でコーティングされたマイクロタイタープレートのウェル中に加えた。サンプル中のヒトインターロイキン1α抗体複合体に結合するための時間を与えた後に、ウェルを洗浄して結合しない成分を除去した。その後、ラベルされた抗ヒトインターロイキン1α二次抗体(0.2μg/mlのビオチン結合モノクローナルマウス抗ヒトIL−1A抗体、クローンCRM6、eBioscienceカタログ#13−7017)をそのウェルに加えた。ウェル中のインターロイキン1αに結合するための時間を与えた後に、プレートを洗浄し、試験したサンプル中のインターロイキン1αの濃度の指標として、各ウェル中のラベルされた抗ヒトインターロイキン1αの量を定量した。
その他の実施形態
本発明はその詳細な説明と共に記載されているが、前記説明は例示的なものであり、本発明の範囲を限定するように意図されておらず、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によって定められることは理解されるであろう。その他の態様、長所及び変更は、添付の特許請求の範囲に含まれる。
本発明はその詳細な説明と共に記載されているが、前記説明は例示的なものであり、本発明の範囲を限定するように意図されておらず、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によって定められることは理解されるであろう。その他の態様、長所及び変更は、添付の特許請求の範囲に含まれる。
Claims (5)
- 癌細胞の殺傷用組成物であって、前記組成物がヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体を含むことを特徴とする組成物。
- 基底膜マトリクスへの腫瘍細胞侵入の阻害用組成物であって、前記組成物がヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体を含むことを特徴とする組成物。
- 内皮細胞内におけるICAM1発現の低減用組成物であって、前記組成物がヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体を含むことを特徴とする組成物。
- 内皮細胞内におけるE−セレクチン発現の低減用組成物であって、前記組成物がヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体を含むことを特徴とする組成物。
- 対象における炎症の追跡用組成物であって、前記組成物がヒトインターロイキン1αに特異的に結合するヒトIgG1モノクローナル抗体を含むことを特徴とする組成物。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE112018004836T5 (de) | 2017-08-30 | 2020-07-02 | Isuzu Motors Limited | Lenkvorrichtung |
Families Citing this family (439)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070084897A1 (en) | 2003-05-20 | 2007-04-19 | Shelton Frederick E Iv | Articulating surgical stapling instrument incorporating a two-piece e-beam firing mechanism |
US9060770B2 (en) | 2003-05-20 | 2015-06-23 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-driven surgical instrument with E-beam driver |
US11896225B2 (en) | 2004-07-28 | 2024-02-13 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a pan |
US8215531B2 (en) | 2004-07-28 | 2012-07-10 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling instrument having a medical substance dispenser |
JP5645361B2 (ja) * | 2005-08-02 | 2014-12-24 | エクスバイオテク インコーポレーティッド | IL−1α自己抗体を用いた血管障害の診断、処置、および予防 |
US9237891B2 (en) | 2005-08-31 | 2016-01-19 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled surgical stapling devices that produce formed staples having different lengths |
US7669746B2 (en) | 2005-08-31 | 2010-03-02 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Staple cartridges for forming staples having differing formed staple heights |
US11246590B2 (en) | 2005-08-31 | 2022-02-15 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge including staple drivers having different unfired heights |
US11484312B2 (en) | 2005-08-31 | 2022-11-01 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a staple driver arrangement |
US7934630B2 (en) | 2005-08-31 | 2011-05-03 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Staple cartridges for forming staples having differing formed staple heights |
US10159482B2 (en) | 2005-08-31 | 2018-12-25 | Ethicon Llc | Fastener cartridge assembly comprising a fixed anvil and different staple heights |
US20070106317A1 (en) | 2005-11-09 | 2007-05-10 | Shelton Frederick E Iv | Hydraulically and electrically actuated articulation joints for surgical instruments |
US20110295295A1 (en) | 2006-01-31 | 2011-12-01 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled surgical instrument having recording capabilities |
US11224427B2 (en) | 2006-01-31 | 2022-01-18 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling system including a console and retraction assembly |
US7753904B2 (en) | 2006-01-31 | 2010-07-13 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Endoscopic surgical instrument with a handle that can articulate with respect to the shaft |
US20120292367A1 (en) | 2006-01-31 | 2012-11-22 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled end effector |
US8186555B2 (en) | 2006-01-31 | 2012-05-29 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motor-driven surgical cutting and fastening instrument with mechanical closure system |
US11793518B2 (en) | 2006-01-31 | 2023-10-24 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with firing system lockout arrangements |
US8708213B2 (en) | 2006-01-31 | 2014-04-29 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical instrument having a feedback system |
US7845537B2 (en) | 2006-01-31 | 2010-12-07 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical instrument having recording capabilities |
US11278279B2 (en) | 2006-01-31 | 2022-03-22 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument assembly |
US8820603B2 (en) | 2006-01-31 | 2014-09-02 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Accessing data stored in a memory of a surgical instrument |
US20110024477A1 (en) | 2009-02-06 | 2011-02-03 | Hall Steven G | Driven Surgical Stapler Improvements |
US8992422B2 (en) | 2006-03-23 | 2015-03-31 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled endoscopic accessory channel |
CN101448528A (zh) * | 2006-05-15 | 2009-06-03 | 埃克斯生物科技公司 | 白细胞介素-1α免疫诱导预防动脉粥样硬化的自身抗体 |
US20110008282A1 (en) * | 2006-05-15 | 2011-01-13 | Xbiotech, Inc. | IL-1alpha immunization induces autoantibodies protective against atherosclerosis |
ES2374845T3 (es) * | 2006-05-22 | 2012-02-22 | Xbiotech, Inc | Tratamiento de cáncer con anticuerpos anti-il-1. |
US8322455B2 (en) | 2006-06-27 | 2012-12-04 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Manually driven surgical cutting and fastening instrument |
US10568652B2 (en) | 2006-09-29 | 2020-02-25 | Ethicon Llc | Surgical staples having attached drivers of different heights and stapling instruments for deploying the same |
US7665647B2 (en) | 2006-09-29 | 2010-02-23 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical cutting and stapling device with closure apparatus for limiting maximum tissue compression force |
US8652120B2 (en) | 2007-01-10 | 2014-02-18 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical instrument with wireless communication between control unit and sensor transponders |
US8684253B2 (en) | 2007-01-10 | 2014-04-01 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical instrument with wireless communication between a control unit of a robotic system and remote sensor |
US11291441B2 (en) | 2007-01-10 | 2022-04-05 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument with wireless communication between control unit and remote sensor |
US11039836B2 (en) | 2007-01-11 | 2021-06-22 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge for use with a surgical stapling instrument |
US20080169333A1 (en) | 2007-01-11 | 2008-07-17 | Shelton Frederick E | Surgical stapler end effector with tapered distal end |
US8727197B2 (en) | 2007-03-15 | 2014-05-20 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Staple cartridge cavity configuration with cooperative surgical staple |
US8893946B2 (en) | 2007-03-28 | 2014-11-25 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Laparoscopic tissue thickness and clamp load measuring devices |
US8931682B2 (en) | 2007-06-04 | 2015-01-13 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled shaft based rotary drive systems for surgical instruments |
US11564682B2 (en) | 2007-06-04 | 2023-01-31 | Cilag Gmbh International | Surgical stapler device |
US7753245B2 (en) | 2007-06-22 | 2010-07-13 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling instruments |
US11849941B2 (en) | 2007-06-29 | 2023-12-26 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge having staple cavities extending at a transverse angle relative to a longitudinal cartridge axis |
JP5410110B2 (ja) | 2008-02-14 | 2014-02-05 | エシコン・エンド−サージェリィ・インコーポレイテッド | Rf電極を有する外科用切断・固定器具 |
US9179912B2 (en) | 2008-02-14 | 2015-11-10 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled motorized surgical cutting and fastening instrument |
US8573465B2 (en) | 2008-02-14 | 2013-11-05 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Robotically-controlled surgical end effector system with rotary actuated closure systems |
US8758391B2 (en) | 2008-02-14 | 2014-06-24 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Interchangeable tools for surgical instruments |
US7819298B2 (en) | 2008-02-14 | 2010-10-26 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling apparatus with control features operable with one hand |
US8636736B2 (en) | 2008-02-14 | 2014-01-28 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motorized surgical cutting and fastening instrument |
US7866527B2 (en) | 2008-02-14 | 2011-01-11 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling apparatus with interlockable firing system |
US11272927B2 (en) | 2008-02-15 | 2022-03-15 | Cilag Gmbh International | Layer arrangements for surgical staple cartridges |
US10390823B2 (en) | 2008-02-15 | 2019-08-27 | Ethicon Llc | End effector comprising an adjunct |
EP3085773B1 (en) * | 2008-05-30 | 2020-03-18 | XBiotech, Inc | Uses of il-1 alpha antibodies |
EP2326347A4 (en) * | 2008-09-12 | 2013-03-06 | Xbiotech Inc | TARGETING PATHOGENIC MONOCYTES |
US9386983B2 (en) | 2008-09-23 | 2016-07-12 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Robotically-controlled motorized surgical instrument |
US8210411B2 (en) | 2008-09-23 | 2012-07-03 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motor-driven surgical cutting instrument |
US9005230B2 (en) | 2008-09-23 | 2015-04-14 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motorized surgical instrument |
US11648005B2 (en) | 2008-09-23 | 2023-05-16 | Cilag Gmbh International | Robotically-controlled motorized surgical instrument with an end effector |
US8608045B2 (en) | 2008-10-10 | 2013-12-17 | Ethicon Endo-Sugery, Inc. | Powered surgical cutting and stapling apparatus with manually retractable firing system |
US8517239B2 (en) | 2009-02-05 | 2013-08-27 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling instrument comprising a magnetic element driver |
US8444036B2 (en) | 2009-02-06 | 2013-05-21 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motor driven surgical fastener device with mechanisms for adjusting a tissue gap within the end effector |
CA2751664A1 (en) | 2009-02-06 | 2010-08-12 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Driven surgical stapler improvements |
US8851354B2 (en) | 2009-12-24 | 2014-10-07 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical cutting instrument that analyzes tissue thickness |
US8220688B2 (en) | 2009-12-24 | 2012-07-17 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Motor-driven surgical cutting instrument with electric actuator directional control assembly |
KR101539684B1 (ko) | 2010-05-14 | 2015-07-27 | 애브비 인코포레이티드 | Il-1 결합 단백질 |
DK2582391T3 (en) * | 2010-06-18 | 2019-01-21 | Xbiotech Inc | ARTHRITIS TREATMENT |
US8783543B2 (en) | 2010-07-30 | 2014-07-22 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Tissue acquisition arrangements and methods for surgical stapling devices |
KR20160062200A (ko) * | 2010-08-23 | 2016-06-01 | 엑스바이오테크, 인크. | 종양성 질병들에 대한 치료 |
AU2015271978B2 (en) * | 2010-08-23 | 2017-10-26 | Xbiotech Inc. | Treatment for neoplastic diseases |
US11925354B2 (en) | 2010-09-30 | 2024-03-12 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising staples positioned within a compressible portion thereof |
US9592050B2 (en) | 2010-09-30 | 2017-03-14 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | End effector comprising a distal tissue abutment member |
US11298125B2 (en) | 2010-09-30 | 2022-04-12 | Cilag Gmbh International | Tissue stapler having a thickness compensator |
US9517063B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-12-13 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Movable member for use with a tissue thickness compensator |
US9629814B2 (en) | 2010-09-30 | 2017-04-25 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Tissue thickness compensator configured to redistribute compressive forces |
US10945731B2 (en) | 2010-09-30 | 2021-03-16 | Ethicon Llc | Tissue thickness compensator comprising controlled release and expansion |
US9320523B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-04-26 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Tissue thickness compensator comprising tissue ingrowth features |
US11812965B2 (en) | 2010-09-30 | 2023-11-14 | Cilag Gmbh International | Layer of material for a surgical end effector |
US8864009B2 (en) | 2010-09-30 | 2014-10-21 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Tissue thickness compensator for a surgical stapler comprising an adjustable anvil |
US9351730B2 (en) | 2011-04-29 | 2016-05-31 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Tissue thickness compensator comprising channels |
US9364233B2 (en) | 2010-09-30 | 2016-06-14 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Tissue thickness compensators for circular surgical staplers |
US8695866B2 (en) | 2010-10-01 | 2014-04-15 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical instrument having a power control circuit |
KR102004554B1 (ko) * | 2011-04-01 | 2019-10-01 | 엑스바이오테크, 인크. | 피부과학적 병리의 치료 |
US9724409B2 (en) * | 2011-04-01 | 2017-08-08 | Xbiotech, Inc. | Treatment of inflammatory skin disease |
AU2012250197B2 (en) | 2011-04-29 | 2017-08-10 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Staple cartridge comprising staples positioned within a compressible portion thereof |
US9072535B2 (en) | 2011-05-27 | 2015-07-07 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical stapling instruments with rotatable staple deployment arrangements |
US11207064B2 (en) | 2011-05-27 | 2021-12-28 | Cilag Gmbh International | Automated end effector component reloading system for use with a robotic system |
CN102296050B (zh) * | 2011-05-30 | 2013-04-03 | 苏州大学 | 抗人IL-1α单克隆抗体及其应用 |
CA2842359A1 (en) | 2011-08-01 | 2013-02-07 | Denovo Sciences | Cell capture system and method of use |
US10466160B2 (en) | 2011-08-01 | 2019-11-05 | Celsee Diagnostics, Inc. | System and method for retrieving and analyzing particles |
CN103906536A (zh) * | 2011-09-23 | 2014-07-02 | 埃克斯生物科技公司 | 恶病质治疗 |
US9044230B2 (en) | 2012-02-13 | 2015-06-02 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Surgical cutting and fastening instrument with apparatus for determining cartridge and firing motion status |
CN104334098B (zh) | 2012-03-28 | 2017-03-22 | 伊西康内外科公司 | 包括限定低压强环境的胶囊剂的组织厚度补偿件 |
CN104321024B (zh) | 2012-03-28 | 2017-05-24 | 伊西康内外科公司 | 包括多个层的组织厚度补偿件 |
CN104379068B (zh) | 2012-03-28 | 2017-09-22 | 伊西康内外科公司 | 包括组织厚度补偿件的保持器组件 |
CN102636655B (zh) * | 2012-05-10 | 2014-07-23 | 苏州大学附属第一医院 | 一种荧光原位微量淋巴毒检测方法和试剂盒 |
US9101358B2 (en) | 2012-06-15 | 2015-08-11 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Articulatable surgical instrument comprising a firing drive |
US9282974B2 (en) | 2012-06-28 | 2016-03-15 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Empty clip cartridge lockout |
RU2636861C2 (ru) | 2012-06-28 | 2017-11-28 | Этикон Эндо-Серджери, Инк. | Блокировка пустой кассеты с клипсами |
US11278284B2 (en) | 2012-06-28 | 2022-03-22 | Cilag Gmbh International | Rotary drive arrangements for surgical instruments |
US20140001234A1 (en) | 2012-06-28 | 2014-01-02 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Coupling arrangements for attaching surgical end effectors to drive systems therefor |
US20140001231A1 (en) | 2012-06-28 | 2014-01-02 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Firing system lockout arrangements for surgical instruments |
US9289256B2 (en) | 2012-06-28 | 2016-03-22 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Surgical end effectors having angled tissue-contacting surfaces |
BR112014032776B1 (pt) | 2012-06-28 | 2021-09-08 | Ethicon Endo-Surgery, Inc | Sistema de instrumento cirúrgico e kit cirúrgico para uso com um sistema de instrumento cirúrgico |
US9204879B2 (en) | 2012-06-28 | 2015-12-08 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Flexible drive member |
US9545441B2 (en) | 2012-09-18 | 2017-01-17 | Xbiotech, Inc. | Treatment of diabetes |
EP2903643A4 (en) * | 2012-10-04 | 2016-06-15 | Xbiotech Inc | TREATMENT OF PSYCHIATRIC DISEASES |
EP2904010A4 (en) * | 2012-10-04 | 2016-06-01 | Xbiotech Inc | TREATMENT OF VASCULAR DISEASES AND ASSOCIATED COMPLICATIONS |
US9752181B2 (en) | 2013-01-26 | 2017-09-05 | Denovo Sciences, Inc. | System and method for capturing and analyzing cells |
JP6345707B2 (ja) | 2013-03-01 | 2018-06-20 | エシコン・エンド−サージェリィ・インコーポレイテッドEthicon Endo−Surgery,Inc. | ソフトストップを備えた外科用器具 |
RU2672520C2 (ru) | 2013-03-01 | 2018-11-15 | Этикон Эндо-Серджери, Инк. | Шарнирно поворачиваемые хирургические инструменты с проводящими путями для передачи сигналов |
US9888919B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-02-13 | Ethicon Llc | Method and system for operating a surgical instrument |
US9629629B2 (en) | 2013-03-14 | 2017-04-25 | Ethicon Endo-Surgey, LLC | Control systems for surgical instruments |
US9814460B2 (en) | 2013-04-16 | 2017-11-14 | Ethicon Llc | Modular motor driven surgical instruments with status indication arrangements |
BR112015026109B1 (pt) | 2013-04-16 | 2022-02-22 | Ethicon Endo-Surgery, Inc | Instrumento cirúrgico |
US10391490B2 (en) | 2013-05-31 | 2019-08-27 | Celsee Diagnostics, Inc. | System and method for isolating and analyzing cells |
US9283054B2 (en) | 2013-08-23 | 2016-03-15 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Interactive displays |
MX369362B (es) | 2013-08-23 | 2019-11-06 | Ethicon Endo Surgery Llc | Dispositivos de retraccion de miembros de disparo para instrumentos quirurgicos electricos. |
US10278120B2 (en) * | 2014-01-16 | 2019-04-30 | Industry-University Cooperation Foundation Hanyang University | Method for controlling small cell and apparatus for same |
US9962161B2 (en) | 2014-02-12 | 2018-05-08 | Ethicon Llc | Deliverable surgical instrument |
BR112016019387B1 (pt) | 2014-02-24 | 2022-11-29 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Sistema de instrumento cirúrgico e cartucho de prendedores para uso com um instrumento cirúrgico de fixação |
RU2556816C1 (ru) * | 2014-03-12 | 2015-07-20 | Открытое акционерное общество "Фармацевтический импорт, экспорт" (ОАО "Фармимэкс") | Штамм клеток яичников китайского хомячка - продуцент рекомбинантного антитела против фактора некроза опухоли альфа человека |
US9826977B2 (en) | 2014-03-26 | 2017-11-28 | Ethicon Llc | Sterilization verification circuit |
US10004497B2 (en) | 2014-03-26 | 2018-06-26 | Ethicon Llc | Interface systems for use with surgical instruments |
BR112016021943B1 (pt) | 2014-03-26 | 2022-06-14 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Instrumento cirúrgico para uso por um operador em um procedimento cirúrgico |
US10028761B2 (en) | 2014-03-26 | 2018-07-24 | Ethicon Llc | Feedback algorithms for manual bailout systems for surgical instruments |
BR112016023698B1 (pt) | 2014-04-16 | 2022-07-26 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Cartucho de prendedores para uso com um instrumento cirúrgico |
CN106456158B (zh) | 2014-04-16 | 2019-02-05 | 伊西康内外科有限责任公司 | 包括非一致紧固件的紧固件仓 |
US9801628B2 (en) | 2014-09-26 | 2017-10-31 | Ethicon Llc | Surgical staple and driver arrangements for staple cartridges |
US11517315B2 (en) | 2014-04-16 | 2022-12-06 | Cilag Gmbh International | Fastener cartridges including extensions having different configurations |
BR112016023807B1 (pt) | 2014-04-16 | 2022-07-12 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Conjunto de cartucho de prendedores para uso com um instrumento cirúrgico |
US20150297225A1 (en) | 2014-04-16 | 2015-10-22 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Fastener cartridges including extensions having different configurations |
US9724094B2 (en) | 2014-09-05 | 2017-08-08 | Ethicon Llc | Adjunct with integrated sensors to quantify tissue compression |
US11311294B2 (en) | 2014-09-05 | 2022-04-26 | Cilag Gmbh International | Powered medical device including measurement of closure state of jaws |
BR112017004361B1 (pt) | 2014-09-05 | 2023-04-11 | Ethicon Llc | Sistema eletrônico para um instrumento cirúrgico |
US10105142B2 (en) | 2014-09-18 | 2018-10-23 | Ethicon Llc | Surgical stapler with plurality of cutting elements |
BR112017005981B1 (pt) | 2014-09-26 | 2022-09-06 | Ethicon, Llc | Material de escora para uso com um cartucho de grampos cirúrgicos e cartucho de grampos cirúrgicos para uso com um instrumento cirúrgico |
US11523821B2 (en) | 2014-09-26 | 2022-12-13 | Cilag Gmbh International | Method for creating a flexible staple line |
US20160099559A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | Continental Automotive Systems, Inc. | Overcurrent protection for an automotive instrument cluster |
US10076325B2 (en) | 2014-10-13 | 2018-09-18 | Ethicon Llc | Surgical stapling apparatus comprising a tissue stop |
US9924944B2 (en) | 2014-10-16 | 2018-03-27 | Ethicon Llc | Staple cartridge comprising an adjunct material |
US10517594B2 (en) | 2014-10-29 | 2019-12-31 | Ethicon Llc | Cartridge assemblies for surgical staplers |
US11141153B2 (en) | 2014-10-29 | 2021-10-12 | Cilag Gmbh International | Staple cartridges comprising driver arrangements |
US9844376B2 (en) | 2014-11-06 | 2017-12-19 | Ethicon Llc | Staple cartridge comprising a releasable adjunct material |
US10736636B2 (en) | 2014-12-10 | 2020-08-11 | Ethicon Llc | Articulatable surgical instrument system |
US9844374B2 (en) | 2014-12-18 | 2017-12-19 | Ethicon Llc | Surgical instrument systems comprising an articulatable end effector and means for adjusting the firing stroke of a firing member |
US10085748B2 (en) | 2014-12-18 | 2018-10-02 | Ethicon Llc | Locking arrangements for detachable shaft assemblies with articulatable surgical end effectors |
US9943309B2 (en) | 2014-12-18 | 2018-04-17 | Ethicon Llc | Surgical instruments with articulatable end effectors and movable firing beam support arrangements |
US9844375B2 (en) | 2014-12-18 | 2017-12-19 | Ethicon Llc | Drive arrangements for articulatable surgical instruments |
US10188385B2 (en) | 2014-12-18 | 2019-01-29 | Ethicon Llc | Surgical instrument system comprising lockable systems |
US9987000B2 (en) | 2014-12-18 | 2018-06-05 | Ethicon Llc | Surgical instrument assembly comprising a flexible articulation system |
BR112017012996B1 (pt) | 2014-12-18 | 2022-11-08 | Ethicon Llc | Instrumento cirúrgico com uma bigorna que é seletivamente móvel sobre um eixo geométrico imóvel distinto em relação a um cartucho de grampos |
US11154301B2 (en) | 2015-02-27 | 2021-10-26 | Cilag Gmbh International | Modular stapling assembly |
US10321907B2 (en) | 2015-02-27 | 2019-06-18 | Ethicon Llc | System for monitoring whether a surgical instrument needs to be serviced |
US10180463B2 (en) | 2015-02-27 | 2019-01-15 | Ethicon Llc | Surgical apparatus configured to assess whether a performance parameter of the surgical apparatus is within an acceptable performance band |
US10687806B2 (en) | 2015-03-06 | 2020-06-23 | Ethicon Llc | Adaptive tissue compression techniques to adjust closure rates for multiple tissue types |
US10245033B2 (en) | 2015-03-06 | 2019-04-02 | Ethicon Llc | Surgical instrument comprising a lockable battery housing |
US10052044B2 (en) | 2015-03-06 | 2018-08-21 | Ethicon Llc | Time dependent evaluation of sensor data to determine stability, creep, and viscoelastic elements of measures |
US9924961B2 (en) | 2015-03-06 | 2018-03-27 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Interactive feedback system for powered surgical instruments |
JP2020121162A (ja) | 2015-03-06 | 2020-08-13 | エシコン エルエルシーEthicon LLC | 測定の安定性要素、クリープ要素、及び粘弾性要素を決定するためのセンサデータの時間依存性評価 |
US9901342B2 (en) | 2015-03-06 | 2018-02-27 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Signal and power communication system positioned on a rotatable shaft |
US10617412B2 (en) | 2015-03-06 | 2020-04-14 | Ethicon Llc | System for detecting the mis-insertion of a staple cartridge into a surgical stapler |
US9993248B2 (en) | 2015-03-06 | 2018-06-12 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Smart sensors with local signal processing |
US9808246B2 (en) | 2015-03-06 | 2017-11-07 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Method of operating a powered surgical instrument |
US10441279B2 (en) | 2015-03-06 | 2019-10-15 | Ethicon Llc | Multiple level thresholds to modify operation of powered surgical instruments |
US10213201B2 (en) | 2015-03-31 | 2019-02-26 | Ethicon Llc | Stapling end effector configured to compensate for an uneven gap between a first jaw and a second jaw |
US11058425B2 (en) | 2015-08-17 | 2021-07-13 | Ethicon Llc | Implantable layers for a surgical instrument |
US10327769B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-06-25 | Ethicon Llc | Surgical stapler having motor control based on a drive system component |
US10238386B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-03-26 | Ethicon Llc | Surgical stapler having motor control based on an electrical parameter related to a motor current |
US10105139B2 (en) | 2015-09-23 | 2018-10-23 | Ethicon Llc | Surgical stapler having downstream current-based motor control |
US10363036B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-07-30 | Ethicon Llc | Surgical stapler having force-based motor control |
US10299878B2 (en) | 2015-09-25 | 2019-05-28 | Ethicon Llc | Implantable adjunct systems for determining adjunct skew |
US10524788B2 (en) | 2015-09-30 | 2020-01-07 | Ethicon Llc | Compressible adjunct with attachment regions |
US11890015B2 (en) | 2015-09-30 | 2024-02-06 | Cilag Gmbh International | Compressible adjunct with crossing spacer fibers |
US10980539B2 (en) | 2015-09-30 | 2021-04-20 | Ethicon Llc | Implantable adjunct comprising bonded layers |
US10736633B2 (en) | 2015-09-30 | 2020-08-11 | Ethicon Llc | Compressible adjunct with looping members |
US10265068B2 (en) | 2015-12-30 | 2019-04-23 | Ethicon Llc | Surgical instruments with separable motors and motor control circuits |
US10292704B2 (en) | 2015-12-30 | 2019-05-21 | Ethicon Llc | Mechanisms for compensating for battery pack failure in powered surgical instruments |
US10368865B2 (en) | 2015-12-30 | 2019-08-06 | Ethicon Llc | Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments |
CN105573555B (zh) * | 2016-01-28 | 2018-06-29 | 京东方科技集团股份有限公司 | 一种压力触控结构、触控显示面板、显示装置 |
CN108882932B (zh) | 2016-02-09 | 2021-07-23 | 伊西康有限责任公司 | 具有非对称关节运动构造的外科器械 |
US11213293B2 (en) | 2016-02-09 | 2022-01-04 | Cilag Gmbh International | Articulatable surgical instruments with single articulation link arrangements |
US10413291B2 (en) | 2016-02-09 | 2019-09-17 | Ethicon Llc | Surgical instrument articulation mechanism with slotted secondary constraint |
US10258331B2 (en) | 2016-02-12 | 2019-04-16 | Ethicon Llc | Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments |
US10448948B2 (en) | 2016-02-12 | 2019-10-22 | Ethicon Llc | Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments |
US11224426B2 (en) | 2016-02-12 | 2022-01-18 | Cilag Gmbh International | Mechanisms for compensating for drivetrain failure in powered surgical instruments |
US10617413B2 (en) | 2016-04-01 | 2020-04-14 | Ethicon Llc | Closure system arrangements for surgical cutting and stapling devices with separate and distinct firing shafts |
US10413297B2 (en) | 2016-04-01 | 2019-09-17 | Ethicon Llc | Surgical stapling system configured to apply annular rows of staples having different heights |
US10492783B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-12-03 | Ethicon, Llc | Surgical instrument with improved stop/start control during a firing motion |
US11179150B2 (en) | 2016-04-15 | 2021-11-23 | Cilag Gmbh International | Systems and methods for controlling a surgical stapling and cutting instrument |
US10828028B2 (en) | 2016-04-15 | 2020-11-10 | Ethicon Llc | Surgical instrument with multiple program responses during a firing motion |
US10426467B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-10-01 | Ethicon Llc | Surgical instrument with detection sensors |
US10357247B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-07-23 | Ethicon Llc | Surgical instrument with multiple program responses during a firing motion |
US10405859B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-09-10 | Ethicon Llc | Surgical instrument with adjustable stop/start control during a firing motion |
US10456137B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-10-29 | Ethicon Llc | Staple formation detection mechanisms |
US10335145B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-07-02 | Ethicon Llc | Modular surgical instrument with configurable operating mode |
US11607239B2 (en) | 2016-04-15 | 2023-03-21 | Cilag Gmbh International | Systems and methods for controlling a surgical stapling and cutting instrument |
US20170296173A1 (en) | 2016-04-18 | 2017-10-19 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Method for operating a surgical instrument |
US11317917B2 (en) | 2016-04-18 | 2022-05-03 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling system comprising a lockable firing assembly |
US10363037B2 (en) | 2016-04-18 | 2019-07-30 | Ethicon Llc | Surgical instrument system comprising a magnetic lockout |
US20180168615A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-21 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Method of deforming staples from two different types of staple cartridges with the same surgical stapling instrument |
US10758229B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-09-01 | Ethicon Llc | Surgical instrument comprising improved jaw control |
US10588630B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-03-17 | Ethicon Llc | Surgical tool assemblies with closure stroke reduction features |
BR112019011947A2 (pt) | 2016-12-21 | 2019-10-29 | Ethicon Llc | sistemas de grampeamento cirúrgico |
US11090048B2 (en) | 2016-12-21 | 2021-08-17 | Cilag Gmbh International | Method for resetting a fuse of a surgical instrument shaft |
CN110099619B (zh) | 2016-12-21 | 2022-07-15 | 爱惜康有限责任公司 | 用于外科端部执行器和可替换工具组件的闭锁装置 |
US10426471B2 (en) | 2016-12-21 | 2019-10-01 | Ethicon Llc | Surgical instrument with multiple failure response modes |
US10542982B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-01-28 | Ethicon Llc | Shaft assembly comprising first and second articulation lockouts |
US10639035B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-05-05 | Ethicon Llc | Surgical stapling instruments and replaceable tool assemblies thereof |
US20180168625A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-21 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Surgical stapling instruments with smart staple cartridges |
US10893864B2 (en) | 2016-12-21 | 2021-01-19 | Ethicon | Staple cartridges and arrangements of staples and staple cavities therein |
US20180168598A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-21 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Staple forming pocket arrangements comprising zoned forming surface grooves |
US10695055B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-06-30 | Ethicon Llc | Firing assembly comprising a lockout |
US11419606B2 (en) | 2016-12-21 | 2022-08-23 | Cilag Gmbh International | Shaft assembly comprising a clutch configured to adapt the output of a rotary firing member to two different systems |
US11134942B2 (en) | 2016-12-21 | 2021-10-05 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling instruments and staple-forming anvils |
US10485543B2 (en) | 2016-12-21 | 2019-11-26 | Ethicon Llc | Anvil having a knife slot width |
JP7010956B2 (ja) | 2016-12-21 | 2022-01-26 | エシコン エルエルシー | 組織をステープル留めする方法 |
US10667810B2 (en) | 2016-12-21 | 2020-06-02 | Ethicon Llc | Closure members with cam surface arrangements for surgical instruments with separate and distinct closure and firing systems |
US20180168618A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-21 | Ethicon Endo-Surgery, Llc | Surgical stapling systems |
EP3582813A4 (en) | 2017-02-16 | 2020-12-30 | XBiotech, Inc | TREATMENT OF SUPPURATIVE HIDRADENITIS |
USD879808S1 (en) | 2017-06-20 | 2020-03-31 | Ethicon Llc | Display panel with graphical user interface |
US10624633B2 (en) | 2017-06-20 | 2020-04-21 | Ethicon Llc | Systems and methods for controlling motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument |
US10646220B2 (en) | 2017-06-20 | 2020-05-12 | Ethicon Llc | Systems and methods for controlling displacement member velocity for a surgical instrument |
US10888321B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-01-12 | Ethicon Llc | Systems and methods for controlling velocity of a displacement member of a surgical stapling and cutting instrument |
US10779820B2 (en) | 2017-06-20 | 2020-09-22 | Ethicon Llc | Systems and methods for controlling motor speed according to user input for a surgical instrument |
US11071554B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-07-27 | Cilag Gmbh International | Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on magnitude of velocity error measurements |
US10327767B2 (en) | 2017-06-20 | 2019-06-25 | Ethicon Llc | Control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on angle of articulation |
US10368864B2 (en) | 2017-06-20 | 2019-08-06 | Ethicon Llc | Systems and methods for controlling displaying motor velocity for a surgical instrument |
US10307170B2 (en) | 2017-06-20 | 2019-06-04 | Ethicon Llc | Method for closed loop control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument |
US11090046B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-08-17 | Cilag Gmbh International | Systems and methods for controlling displacement member motion of a surgical stapling and cutting instrument |
US10881399B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-01-05 | Ethicon Llc | Techniques for adaptive control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument |
US11382638B2 (en) | 2017-06-20 | 2022-07-12 | Cilag Gmbh International | Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured time over a specified displacement distance |
US11653914B2 (en) | 2017-06-20 | 2023-05-23 | Cilag Gmbh International | Systems and methods for controlling motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument according to articulation angle of end effector |
USD879809S1 (en) | 2017-06-20 | 2020-03-31 | Ethicon Llc | Display panel with changeable graphical user interface |
US10813639B2 (en) | 2017-06-20 | 2020-10-27 | Ethicon Llc | Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on system conditions |
US10881396B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-01-05 | Ethicon Llc | Surgical instrument with variable duration trigger arrangement |
USD890784S1 (en) | 2017-06-20 | 2020-07-21 | Ethicon Llc | Display panel with changeable graphical user interface |
US10980537B2 (en) | 2017-06-20 | 2021-04-20 | Ethicon Llc | Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured time over a specified number of shaft rotations |
US11517325B2 (en) | 2017-06-20 | 2022-12-06 | Cilag Gmbh International | Closed loop feedback control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on measured displacement distance traveled over a specified time interval |
US10390841B2 (en) | 2017-06-20 | 2019-08-27 | Ethicon Llc | Control of motor velocity of a surgical stapling and cutting instrument based on angle of articulation |
US10772629B2 (en) | 2017-06-27 | 2020-09-15 | Ethicon Llc | Surgical anvil arrangements |
US11324503B2 (en) | 2017-06-27 | 2022-05-10 | Cilag Gmbh International | Surgical firing member arrangements |
US10993716B2 (en) | 2017-06-27 | 2021-05-04 | Ethicon Llc | Surgical anvil arrangements |
US11141154B2 (en) | 2017-06-27 | 2021-10-12 | Cilag Gmbh International | Surgical end effectors and anvils |
US10856869B2 (en) | 2017-06-27 | 2020-12-08 | Ethicon Llc | Surgical anvil arrangements |
US11266405B2 (en) | 2017-06-27 | 2022-03-08 | Cilag Gmbh International | Surgical anvil manufacturing methods |
US11564686B2 (en) | 2017-06-28 | 2023-01-31 | Cilag Gmbh International | Surgical shaft assemblies with flexible interfaces |
USD854151S1 (en) | 2017-06-28 | 2019-07-16 | Ethicon Llc | Surgical instrument shaft |
US10211586B2 (en) | 2017-06-28 | 2019-02-19 | Ethicon Llc | Surgical shaft assemblies with watertight housings |
US11000279B2 (en) | 2017-06-28 | 2021-05-11 | Ethicon Llc | Surgical instrument comprising an articulation system ratio |
USD906355S1 (en) | 2017-06-28 | 2020-12-29 | Ethicon Llc | Display screen or portion thereof with a graphical user interface for a surgical instrument |
US10765427B2 (en) | 2017-06-28 | 2020-09-08 | Ethicon Llc | Method for articulating a surgical instrument |
USD869655S1 (en) | 2017-06-28 | 2019-12-10 | Ethicon Llc | Surgical fastener cartridge |
US10786253B2 (en) | 2017-06-28 | 2020-09-29 | Ethicon Llc | Surgical end effectors with improved jaw aperture arrangements |
US11246592B2 (en) | 2017-06-28 | 2022-02-15 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an articulation system lockable to a frame |
US10716614B2 (en) | 2017-06-28 | 2020-07-21 | Ethicon Llc | Surgical shaft assemblies with slip ring assemblies with increased contact pressure |
US11259805B2 (en) | 2017-06-28 | 2022-03-01 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising firing member supports |
EP3420947B1 (en) | 2017-06-28 | 2022-05-25 | Cilag GmbH International | Surgical instrument comprising selectively actuatable rotatable couplers |
US10903685B2 (en) | 2017-06-28 | 2021-01-26 | Ethicon Llc | Surgical shaft assemblies with slip ring assemblies forming capacitive channels |
USD851762S1 (en) | 2017-06-28 | 2019-06-18 | Ethicon Llc | Anvil |
US10398434B2 (en) | 2017-06-29 | 2019-09-03 | Ethicon Llc | Closed loop velocity control of closure member for robotic surgical instrument |
US10258418B2 (en) | 2017-06-29 | 2019-04-16 | Ethicon Llc | System for controlling articulation forces |
US11007022B2 (en) | 2017-06-29 | 2021-05-18 | Ethicon Llc | Closed loop velocity control techniques based on sensed tissue parameters for robotic surgical instrument |
US10932772B2 (en) | 2017-06-29 | 2021-03-02 | Ethicon Llc | Methods for closed loop velocity control for robotic surgical instrument |
US10898183B2 (en) | 2017-06-29 | 2021-01-26 | Ethicon Llc | Robotic surgical instrument with closed loop feedback techniques for advancement of closure member during firing |
US11974742B2 (en) | 2017-08-03 | 2024-05-07 | Cilag Gmbh International | Surgical system comprising an articulation bailout |
US11944300B2 (en) | 2017-08-03 | 2024-04-02 | Cilag Gmbh International | Method for operating a surgical system bailout |
US11304695B2 (en) | 2017-08-03 | 2022-04-19 | Cilag Gmbh International | Surgical system shaft interconnection |
US11471155B2 (en) | 2017-08-03 | 2022-10-18 | Cilag Gmbh International | Surgical system bailout |
AU2018323449B2 (en) | 2017-08-29 | 2020-09-03 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | System and method for isolating and analyzing cells |
USD907647S1 (en) | 2017-09-29 | 2021-01-12 | Ethicon Llc | Display screen or portion thereof with animated graphical user interface |
US10796471B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-10-06 | Ethicon Llc | Systems and methods of displaying a knife position for a surgical instrument |
US10743872B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-08-18 | Ethicon Llc | System and methods for controlling a display of a surgical instrument |
USD907648S1 (en) | 2017-09-29 | 2021-01-12 | Ethicon Llc | Display screen or portion thereof with animated graphical user interface |
US10729501B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-08-04 | Ethicon Llc | Systems and methods for language selection of a surgical instrument |
US10765429B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-09-08 | Ethicon Llc | Systems and methods for providing alerts according to the operational state of a surgical instrument |
USD917500S1 (en) | 2017-09-29 | 2021-04-27 | Ethicon Llc | Display screen or portion thereof with graphical user interface |
US11399829B2 (en) | 2017-09-29 | 2022-08-02 | Cilag Gmbh International | Systems and methods of initiating a power shutdown mode for a surgical instrument |
US11090075B2 (en) | 2017-10-30 | 2021-08-17 | Cilag Gmbh International | Articulation features for surgical end effector |
US11134944B2 (en) | 2017-10-30 | 2021-10-05 | Cilag Gmbh International | Surgical stapler knife motion controls |
US10779903B2 (en) | 2017-10-31 | 2020-09-22 | Ethicon Llc | Positive shaft rotation lock activated by jaw closure |
US10842490B2 (en) | 2017-10-31 | 2020-11-24 | Ethicon Llc | Cartridge body design with force reduction based on firing completion |
US10779825B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-09-22 | Ethicon Llc | Adapters with end effector position sensing and control arrangements for use in connection with electromechanical surgical instruments |
US10779826B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-09-22 | Ethicon Llc | Methods of operating surgical end effectors |
US10743875B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-08-18 | Ethicon Llc | Surgical end effectors with jaw stiffener arrangements configured to permit monitoring of firing member |
US11071543B2 (en) | 2017-12-15 | 2021-07-27 | Cilag Gmbh International | Surgical end effectors with clamping assemblies configured to increase jaw aperture ranges |
US11033267B2 (en) | 2017-12-15 | 2021-06-15 | Ethicon Llc | Systems and methods of controlling a clamping member firing rate of a surgical instrument |
US10687813B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-06-23 | Ethicon Llc | Adapters with firing stroke sensing arrangements for use in connection with electromechanical surgical instruments |
US10869666B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-12-22 | Ethicon Llc | Adapters with control systems for controlling multiple motors of an electromechanical surgical instrument |
US11006955B2 (en) | 2017-12-15 | 2021-05-18 | Ethicon Llc | End effectors with positive jaw opening features for use with adapters for electromechanical surgical instruments |
US10828033B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-11-10 | Ethicon Llc | Handheld electromechanical surgical instruments with improved motor control arrangements for positioning components of an adapter coupled thereto |
US10743874B2 (en) | 2017-12-15 | 2020-08-18 | Ethicon Llc | Sealed adapters for use with electromechanical surgical instruments |
US11197670B2 (en) | 2017-12-15 | 2021-12-14 | Cilag Gmbh International | Surgical end effectors with pivotal jaws configured to touch at their respective distal ends when fully closed |
US10966718B2 (en) | 2017-12-15 | 2021-04-06 | Ethicon Llc | Dynamic clamping assemblies with improved wear characteristics for use in connection with electromechanical surgical instruments |
US11020112B2 (en) | 2017-12-19 | 2021-06-01 | Ethicon Llc | Surgical tools configured for interchangeable use with different controller interfaces |
US10835330B2 (en) | 2017-12-19 | 2020-11-17 | Ethicon Llc | Method for determining the position of a rotatable jaw of a surgical instrument attachment assembly |
USD910847S1 (en) | 2017-12-19 | 2021-02-16 | Ethicon Llc | Surgical instrument assembly |
US10729509B2 (en) | 2017-12-19 | 2020-08-04 | Ethicon Llc | Surgical instrument comprising closure and firing locking mechanism |
US10716565B2 (en) | 2017-12-19 | 2020-07-21 | Ethicon Llc | Surgical instruments with dual articulation drivers |
US11045270B2 (en) | 2017-12-19 | 2021-06-29 | Cilag Gmbh International | Robotic attachment comprising exterior drive actuator |
US11076853B2 (en) | 2017-12-21 | 2021-08-03 | Cilag Gmbh International | Systems and methods of displaying a knife position during transection for a surgical instrument |
US10682134B2 (en) | 2017-12-21 | 2020-06-16 | Ethicon Llc | Continuous use self-propelled stapling instrument |
US11129680B2 (en) | 2017-12-21 | 2021-09-28 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a projector |
US11311290B2 (en) | 2017-12-21 | 2022-04-26 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an end effector dampener |
WO2019209923A1 (en) * | 2018-04-24 | 2019-10-31 | Xbiotech, Inc. | Treatment of atopic dermatitis |
US10975146B2 (en) | 2018-06-29 | 2021-04-13 | Cedars-Sinai Medical Center | Interleukin-1 inhibition for combination treatment of pancreatic cancer |
US10856870B2 (en) | 2018-08-20 | 2020-12-08 | Ethicon Llc | Switching arrangements for motor powered articulatable surgical instruments |
US11207065B2 (en) | 2018-08-20 | 2021-12-28 | Cilag Gmbh International | Method for fabricating surgical stapler anvils |
US11045192B2 (en) | 2018-08-20 | 2021-06-29 | Cilag Gmbh International | Fabricating techniques for surgical stapler anvils |
US11083458B2 (en) | 2018-08-20 | 2021-08-10 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with clutching arrangements to convert linear drive motions to rotary drive motions |
US10779821B2 (en) | 2018-08-20 | 2020-09-22 | Ethicon Llc | Surgical stapler anvils with tissue stop features configured to avoid tissue pinch |
US11253256B2 (en) | 2018-08-20 | 2022-02-22 | Cilag Gmbh International | Articulatable motor powered surgical instruments with dedicated articulation motor arrangements |
US11039834B2 (en) | 2018-08-20 | 2021-06-22 | Cilag Gmbh International | Surgical stapler anvils with staple directing protrusions and tissue stability features |
USD914878S1 (en) | 2018-08-20 | 2021-03-30 | Ethicon Llc | Surgical instrument anvil |
US11291440B2 (en) | 2018-08-20 | 2022-04-05 | Cilag Gmbh International | Method for operating a powered articulatable surgical instrument |
US10912559B2 (en) | 2018-08-20 | 2021-02-09 | Ethicon Llc | Reinforced deformable anvil tip for surgical stapler anvil |
US10842492B2 (en) | 2018-08-20 | 2020-11-24 | Ethicon Llc | Powered articulatable surgical instruments with clutching and locking arrangements for linking an articulation drive system to a firing drive system |
US11324501B2 (en) | 2018-08-20 | 2022-05-10 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling devices with improved closure members |
TW202045206A (zh) | 2019-02-27 | 2020-12-16 | 美商健生生物科技公司 | 抗體調配物 |
CA3131011A1 (en) | 2019-02-28 | 2020-09-03 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-il-alpha antibody for the treatment of hidradenitis suppurativa |
US11147553B2 (en) | 2019-03-25 | 2021-10-19 | Cilag Gmbh International | Firing drive arrangements for surgical systems |
US11147551B2 (en) | 2019-03-25 | 2021-10-19 | Cilag Gmbh International | Firing drive arrangements for surgical systems |
US11696761B2 (en) | 2019-03-25 | 2023-07-11 | Cilag Gmbh International | Firing drive arrangements for surgical systems |
US11172929B2 (en) | 2019-03-25 | 2021-11-16 | Cilag Gmbh International | Articulation drive arrangements for surgical systems |
US10633693B1 (en) | 2019-04-16 | 2020-04-28 | Celsee Diagnostics, Inc. | System and method for leakage control in a particle capture system |
US11253254B2 (en) | 2019-04-30 | 2022-02-22 | Cilag Gmbh International | Shaft rotation actuator on a surgical instrument |
US11903581B2 (en) | 2019-04-30 | 2024-02-20 | Cilag Gmbh International | Methods for stapling tissue using a surgical instrument |
US11452528B2 (en) | 2019-04-30 | 2022-09-27 | Cilag Gmbh International | Articulation actuators for a surgical instrument |
US11648009B2 (en) | 2019-04-30 | 2023-05-16 | Cilag Gmbh International | Rotatable jaw tip for a surgical instrument |
US11471157B2 (en) | 2019-04-30 | 2022-10-18 | Cilag Gmbh International | Articulation control mapping for a surgical instrument |
US11432816B2 (en) | 2019-04-30 | 2022-09-06 | Cilag Gmbh International | Articulation pin for a surgical instrument |
US11426251B2 (en) | 2019-04-30 | 2022-08-30 | Cilag Gmbh International | Articulation directional lights on a surgical instrument |
US11273439B2 (en) | 2019-05-07 | 2022-03-15 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | System and method for target material retrieval from microwells |
CA3138881A1 (en) | 2019-05-07 | 2020-11-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | System and method for automated single cell processing |
US11291451B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-04-05 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument with battery compatibility verification functionality |
US11638587B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-05-02 | Cilag Gmbh International | RFID identification systems for surgical instruments |
US11259803B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-03-01 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling system having an information encryption protocol |
US11224497B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-01-18 | Cilag Gmbh International | Surgical systems with multiple RFID tags |
US11684434B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-06-27 | Cilag Gmbh International | Surgical RFID assemblies for instrument operational setting control |
US11464601B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-10-11 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an RFID system for tracking a movable component |
US11376098B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-07-05 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument system comprising an RFID system |
US11771419B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-10-03 | Cilag Gmbh International | Packaging for a replaceable component of a surgical stapling system |
US11553971B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-01-17 | Cilag Gmbh International | Surgical RFID assemblies for display and communication |
US11246678B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-02-15 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling system having a frangible RFID tag |
US11478241B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-10-25 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge including projections |
US11497492B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-11-15 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument including an articulation lock |
US11219455B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-01-11 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument including a lockout key |
US11298127B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-04-12 | Cilag GmbH Interational | Surgical stapling system having a lockout mechanism for an incompatible cartridge |
US11399837B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-08-02 | Cilag Gmbh International | Mechanisms for motor control adjustments of a motorized surgical instrument |
US11523822B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-12-13 | Cilag Gmbh International | Battery pack including a circuit interrupter |
US11627959B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-04-18 | Cilag Gmbh International | Surgical instruments including manual and powered system lockouts |
US11350938B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-06-07 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an aligned rfid sensor |
US11426167B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-08-30 | Cilag Gmbh International | Mechanisms for proper anvil attachment surgical stapling head assembly |
US11660163B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-05-30 | Cilag Gmbh International | Surgical system with RFID tags for updating motor assembly parameters |
US11051807B2 (en) | 2019-06-28 | 2021-07-06 | Cilag Gmbh International | Packaging assembly including a particulate trap |
US11298132B2 (en) | 2019-06-28 | 2022-04-12 | Cilag GmbH Inlernational | Staple cartridge including a honeycomb extension |
US11529137B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-12-20 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising driver retention members |
US11844520B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-12-19 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising driver retention members |
US11529139B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-12-20 | Cilag Gmbh International | Motor driven surgical instrument |
US11607219B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-03-21 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a detachable tissue cutting knife |
US11234698B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-02-01 | Cilag Gmbh International | Stapling system comprising a clamp lockout and a firing lockout |
US11701111B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-07-18 | Cilag Gmbh International | Method for operating a surgical stapling instrument |
US11464512B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-10-11 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a curved deck surface |
US11559304B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-01-24 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a rapid closure mechanism |
US11576672B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-02-14 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a closure system including a closure member and an opening member driven by a drive screw |
US11446029B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-09-20 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising projections extending from a curved deck surface |
US11931033B2 (en) | 2019-12-19 | 2024-03-19 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a latch lockout |
US11911032B2 (en) | 2019-12-19 | 2024-02-27 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a seating cam |
US11291447B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-04-05 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising independent jaw closing and staple firing systems |
US11504122B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-11-22 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a nested firing member |
US11304696B2 (en) | 2019-12-19 | 2022-04-19 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a powered articulation system |
CN111471655B (zh) * | 2020-03-19 | 2023-07-07 | 湖州正熙医学检验实验室有限公司 | 抗人il12/23稳转细胞株及其构建方法和应用 |
WO2021211924A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Janssen Biotech, Inc. | Treatment of atopic dermatitis |
MX2022012967A (es) | 2020-04-16 | 2023-01-18 | Janssen Biotech Inc | Tratamiento de la hidradenitis supurativa. |
USD967421S1 (en) | 2020-06-02 | 2022-10-18 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD975850S1 (en) | 2020-06-02 | 2023-01-17 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD966512S1 (en) | 2020-06-02 | 2022-10-11 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD976401S1 (en) | 2020-06-02 | 2023-01-24 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD974560S1 (en) | 2020-06-02 | 2023-01-03 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD975278S1 (en) | 2020-06-02 | 2023-01-10 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
USD975851S1 (en) | 2020-06-02 | 2023-01-17 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge |
US20220031320A1 (en) | 2020-07-28 | 2022-02-03 | Cilag Gmbh International | Surgical instruments with flexible firing member actuator constraint arrangements |
CA3095676A1 (en) * | 2020-10-07 | 2022-04-07 | Xbiotech Inc. | True human antibody specific for interleukin 1 alpha (il-1a) |
CA3095675A1 (en) * | 2020-10-07 | 2022-04-07 | Xbiotech Inc. | True human antibody specific for interleukin 1 alpha (il-1a) |
CA3095740A1 (en) * | 2020-10-07 | 2022-04-07 | Xbiotech Inc. | True human antibody specific for interleukin alpha (il-1a) |
CA3095679A1 (en) * | 2020-10-07 | 2022-04-07 | Xbiotech Inc. | True human antibody specific for interleuken 1 alpha (il-1a) |
USD1013170S1 (en) | 2020-10-29 | 2024-01-30 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument assembly |
US11844518B2 (en) | 2020-10-29 | 2023-12-19 | Cilag Gmbh International | Method for operating a surgical instrument |
US11534259B2 (en) | 2020-10-29 | 2022-12-27 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an articulation indicator |
US11617577B2 (en) | 2020-10-29 | 2023-04-04 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a sensor configured to sense whether an articulation drive of the surgical instrument is actuatable |
US11779330B2 (en) | 2020-10-29 | 2023-10-10 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a jaw alignment system |
US11717289B2 (en) | 2020-10-29 | 2023-08-08 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an indicator which indicates that an articulation drive is actuatable |
US11896217B2 (en) | 2020-10-29 | 2024-02-13 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising an articulation lock |
US11931025B2 (en) | 2020-10-29 | 2024-03-19 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a releasable closure drive lock |
USD980425S1 (en) | 2020-10-29 | 2023-03-07 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument assembly |
US11452526B2 (en) | 2020-10-29 | 2022-09-27 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a staged voltage regulation start-up system |
US11517390B2 (en) | 2020-10-29 | 2022-12-06 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a limited travel switch |
US11744581B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-09-05 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with multi-phase tissue treatment |
US11890010B2 (en) | 2020-12-02 | 2024-02-06 | Cllag GmbH International | Dual-sided reinforced reload for surgical instruments |
US11849943B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-12-26 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument with cartridge release mechanisms |
US11653915B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-05-23 | Cilag Gmbh International | Surgical instruments with sled location detection and adjustment features |
US11944296B2 (en) | 2020-12-02 | 2024-04-02 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with external connectors |
US11627960B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-04-18 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with smart reload with separately attachable exteriorly mounted wiring connections |
US11653920B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-05-23 | Cilag Gmbh International | Powered surgical instruments with communication interfaces through sterile barrier |
US11678882B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-06-20 | Cilag Gmbh International | Surgical instruments with interactive features to remedy incidental sled movements |
US11737751B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-08-29 | Cilag Gmbh International | Devices and methods of managing energy dissipated within sterile barriers of surgical instrument housings |
US11950777B2 (en) | 2021-02-26 | 2024-04-09 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising an information access control system |
US11751869B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-09-12 | Cilag Gmbh International | Monitoring of multiple sensors over time to detect moving characteristics of tissue |
US11744583B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-09-05 | Cilag Gmbh International | Distal communication array to tune frequency of RF systems |
US11950779B2 (en) | 2021-02-26 | 2024-04-09 | Cilag Gmbh International | Method of powering and communicating with a staple cartridge |
US11812964B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-11-14 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a power management circuit |
US11749877B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-09-05 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising a signal antenna |
US11730473B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-08-22 | Cilag Gmbh International | Monitoring of manufacturing life-cycle |
US11696757B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-07-11 | Cilag Gmbh International | Monitoring of internal systems to detect and track cartridge motion status |
US11723657B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-08-15 | Cilag Gmbh International | Adjustable communication based on available bandwidth and power capacity |
US11793514B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-10-24 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising sensor array which may be embedded in cartridge body |
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US11701113B2 (en) | 2021-02-26 | 2023-07-18 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising a separate power antenna and a data transfer antenna |
US11717291B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-08-08 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising staples configured to apply different tissue compression |
US11826042B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-11-28 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument comprising a firing drive including a selectable leverage mechanism |
US11759202B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-09-19 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising an implantable layer |
US11826012B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-11-28 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising a pulsed motor-driven firing rack |
US11737749B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-08-29 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling instrument comprising a retraction system |
US11806011B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-11-07 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising tissue compression systems |
US11723658B2 (en) | 2021-03-22 | 2023-08-15 | Cilag Gmbh International | Staple cartridge comprising a firing lockout |
US11944336B2 (en) | 2021-03-24 | 2024-04-02 | Cilag Gmbh International | Joint arrangements for multi-planar alignment and support of operational drive shafts in articulatable surgical instruments |
US11896218B2 (en) | 2021-03-24 | 2024-02-13 | Cilag Gmbh International | Method of using a powered stapling device |
US11849945B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-12-26 | Cilag Gmbh International | Rotary-driven surgical stapling assembly comprising eccentrically driven firing member |
US11903582B2 (en) | 2021-03-24 | 2024-02-20 | Cilag Gmbh International | Leveraging surfaces for cartridge installation |
US11744603B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-09-05 | Cilag Gmbh International | Multi-axis pivot joints for surgical instruments and methods for manufacturing same |
US11896219B2 (en) | 2021-03-24 | 2024-02-13 | Cilag Gmbh International | Mating features between drivers and underside of a cartridge deck |
US11857183B2 (en) | 2021-03-24 | 2024-01-02 | Cilag Gmbh International | Stapling assembly components having metal substrates and plastic bodies |
US11849944B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-12-26 | Cilag Gmbh International | Drivers for fastener cartridge assemblies having rotary drive screws |
US11786243B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-10-17 | Cilag Gmbh International | Firing members having flexible portions for adapting to a load during a surgical firing stroke |
US11832816B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-12-05 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling assembly comprising nonplanar staples and planar staples |
US11786239B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-10-17 | Cilag Gmbh International | Surgical instrument articulation joint arrangements comprising multiple moving linkage features |
US11793516B2 (en) | 2021-03-24 | 2023-10-24 | Cilag Gmbh International | Surgical staple cartridge comprising longitudinal support beam |
US11826047B2 (en) | 2021-05-28 | 2023-11-28 | Cilag Gmbh International | Stapling instrument comprising jaw mounts |
US11877745B2 (en) | 2021-10-18 | 2024-01-23 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling assembly having longitudinally-repeating staple leg clusters |
US11957337B2 (en) | 2021-10-18 | 2024-04-16 | Cilag Gmbh International | Surgical stapling assembly with offset ramped drive surfaces |
US11937816B2 (en) | 2021-10-28 | 2024-03-26 | Cilag Gmbh International | Electrical lead arrangements for surgical instruments |
WO2024065083A1 (zh) * | 2022-09-26 | 2024-04-04 | 成都优洛生物科技有限公司 | 一种非鼠类哺乳动物IL-1α抗体的体内药效检测方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5959085A (en) * | 1993-11-23 | 1999-09-28 | Schering Corporation | Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies |
WO2007135546A2 (en) * | 2006-05-22 | 2007-11-29 | Xbiotech Inc. | TREATMENT OF CANCER WITH ANTI-IL-1α ANTIBODIES |
Family Cites Families (72)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH652145A5 (de) | 1982-01-22 | 1985-10-31 | Sandoz Ag | Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen. |
US4510245A (en) | 1982-11-18 | 1985-04-09 | Chiron Corporation | Adenovirus promoter system |
US5672347A (en) | 1984-07-05 | 1997-09-30 | Genentech, Inc. | Tumor necrosis factor antagonists and their use |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
US4968615A (en) | 1985-12-18 | 1990-11-06 | Ciba-Geigy Corporation | Deoxyribonucleic acid segment from a virus |
US4965198A (en) | 1985-12-24 | 1990-10-23 | Konica Corporation | Monoclonal antibody and method of manufacturing hybridoma producing the same |
DE3631229A1 (de) | 1986-09-13 | 1988-03-24 | Basf Ag | Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung |
DK590387A (da) | 1986-11-13 | 1988-05-14 | Otsuka Pharma Co Ltd | Antistoffer mod interleukin-1 |
US5034316A (en) | 1987-03-30 | 1991-07-23 | The Regents Of The University Of California | In vitro human monoclonal IgG rheumatoid factor autoantibody |
US5750172A (en) | 1987-06-23 | 1998-05-12 | Pharming B.V. | Transgenic non human mammal milk |
US4968607A (en) | 1987-11-25 | 1990-11-06 | Immunex Corporation | Interleukin-1 receptors |
US20040101528A1 (en) * | 1988-02-25 | 2004-05-27 | Dower Steven K. | Type I IL-1 receptors |
FR2640146B1 (fr) | 1988-12-08 | 1993-12-24 | Commissariat A Energie Atomique | Anticorps monoclonaux anti-interleukines 1(alpha) et 1(beta), leur procede de production et applications desdits anticorps a la detection des interleukines 1(alpha) et 1(beta) et en therapeutique |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5407431A (en) | 1989-07-11 | 1995-04-18 | Med-Design Inc. | Intravenous catheter insertion device with retractable needle |
US5959177A (en) | 1989-10-27 | 1999-09-28 | The Scripps Research Institute | Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies |
US5633076A (en) | 1989-12-01 | 1997-05-27 | Pharming Bv | Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo |
GB9122820D0 (en) | 1991-10-28 | 1991-12-11 | Wellcome Found | Stabilised antibodies |
DE69327659T2 (de) | 1992-10-14 | 2000-09-21 | Nycomed Imaging As | Therapeutische und diagnostische bilderzeugungzusammensetzung und verfahren zur herstellung |
PT614984E (pt) | 1993-03-05 | 2001-12-28 | Bayer Ag | Anticorpos humanos anti-tnf |
JP3801196B2 (ja) | 1993-03-09 | 2006-07-26 | ジェンザイム・コーポレイション | 乳からの対象化合物の単離 |
EP0659766A1 (en) | 1993-11-23 | 1995-06-28 | Schering-Plough | Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
US6046037A (en) | 1994-12-30 | 2000-04-04 | Hiatt; Andrew C. | Method for producing immunoglobulins containing protection proteins in plants and their use |
GB9509620D0 (en) | 1995-05-12 | 1995-07-05 | Nat Blood Authority | Transepithelial transport of molecular species |
WO1997002479A2 (en) | 1995-06-30 | 1997-01-23 | Yale University | Human monoclonal anti-tumor antibodies |
US6090382A (en) * | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
SE9802402D0 (sv) | 1998-07-03 | 1998-07-03 | Karolinska Innovations Ab | Method of diagnosing cardiovascular disease and early atherosclerosis |
US20030040617A9 (en) * | 1999-03-12 | 2003-02-27 | Rosen Craig A. | Nucleic acids, proteins and antibodies |
AU3395900A (en) * | 1999-03-12 | 2000-10-04 | Human Genome Sciences, Inc. | Human lung cancer associated gene sequences and polypeptides |
CN101066997B (zh) * | 1999-03-25 | 2013-03-27 | 艾博特股份有限两合公司 | 结合人il-12的人抗体及其生产方法 |
ATE316982T1 (de) * | 1999-08-09 | 2006-02-15 | Lexigen Pharm Corp | Mehrere zytokin-antikörper komplexen |
DE19943790C2 (de) | 1999-09-13 | 2001-11-15 | Ericsson Telefon Ab L M | Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung eines Synchronisationsfehlers in einem Netzwerkknoten |
US6399857B1 (en) * | 1999-09-22 | 2002-06-04 | Paradigm Genetics, Inc. | Modified nucleotide sequence encoding a LexA DNA binding domain optimized for arabidopsis species |
US6380129B1 (en) | 1999-11-02 | 2002-04-30 | Richard J. Kraemer | Enhanced materials for treatment of contamination |
US20030232054A1 (en) | 2000-01-25 | 2003-12-18 | Tang Y. Tom | Novel nucleic acids and polypeptides |
US20020131954A1 (en) | 2000-05-02 | 2002-09-19 | Tobinick Edward L. | Interleukin antagonists for the treatment of neurological, retinal and muscular disorders |
AU2007202323C1 (en) | 2000-06-29 | 2012-04-12 | Abbvie Inc. | Dual specificity antibodies and methods of making and using |
US20040086507A1 (en) | 2000-10-19 | 2004-05-06 | Kenya Shitara | Antibody inhibiting vplf activity |
US20030026806A1 (en) | 2000-10-27 | 2003-02-06 | Amgen Inc. | Antibodies and other selective IL-1 binding agents that allow binding to IL-1 receptor but not activation thereof |
US7595378B2 (en) * | 2001-06-13 | 2009-09-29 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor (EGFR) |
AR036833A1 (es) * | 2001-10-18 | 2004-10-06 | Bayer Corp | Anticuerpos humanos que se unen a mn y tienen actividad neutralizante de la adhesion celular. |
AU2002343609B2 (en) | 2001-11-16 | 2008-12-11 | Als Therapy Development Foundation, Inc. | Treatment of neurodegenerative disorders through the modulation of the polyamine pathway |
AU2003208415B2 (en) * | 2002-02-14 | 2009-05-28 | Immunomedics, Inc. | Anti-CD20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use |
JP4450644B2 (ja) | 2003-03-03 | 2010-04-14 | 日本化薬株式会社 | Amf類を有効成分とする医薬製剤 |
WO2004100987A2 (en) | 2003-05-06 | 2004-11-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of using il-1 antagonists to treat neointimal hyperplasia |
US20070025961A1 (en) * | 2003-06-03 | 2007-02-01 | Kenzo Bamba | Composition for stabilizing survival of transplanted hematopoietic stem cell, kit for obtaining the composition, method of stabilizing survival of transplanted hematopoietic stem cell, human monoclonal antibody or human polyclonal antibody and method of producing the same, gene encoding human monoclonal antibody and transf |
KR100493102B1 (ko) | 2003-06-30 | 2005-06-02 | 삼성전자주식회사 | 서브 하우징 스토퍼를 구비하는 휴대용 단말기의 힌지 장치 |
HN2004000285A (es) | 2003-08-04 | 2006-04-27 | Pfizer Prod Inc | ANTICUERPOS DIRIGIDOS A c-MET |
US7799327B2 (en) | 2003-12-24 | 2010-09-21 | Henry John Smith | Autoantibodies utilized as carrier agents for pharmaceutical compounds used in cancer treatment |
US7105183B2 (en) | 2004-02-03 | 2006-09-12 | The Regents Of The University Of California | Chlorite in the treatment of neurodegenerative disease |
WO2006001967A2 (en) | 2004-05-25 | 2006-01-05 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Migrastatin analogs in the treatment of cancer |
US20050276807A1 (en) | 2004-06-15 | 2005-12-15 | Advanced Biotherapy, Inc. | Treatment of acne |
US7718674B2 (en) | 2004-09-27 | 2010-05-18 | Bridge Pharma, Inc. | Methods of relieving neuropathic pain with the S-isomer of 2-{2[N-(2-indanyl)-N-phenylamino]ethyl}piperidine |
US8603483B2 (en) | 2004-12-09 | 2013-12-10 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-integrin immunoconjugates, methods and uses |
JP5645361B2 (ja) | 2005-08-02 | 2014-12-24 | エクスバイオテク インコーポレーティッド | IL−1α自己抗体を用いた血管障害の診断、処置、および予防 |
US20090215992A1 (en) | 2005-08-19 | 2009-08-27 | Chengbin Wu | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
WO2007039552A1 (en) | 2005-09-28 | 2007-04-12 | Cytos Biotechnology Ag | Interleukin-1 conjugates and uses thereof |
CA2635445A1 (en) * | 2006-02-22 | 2007-08-30 | University Of Zurich | Methods for treating autoimmune or demyelinating diseases |
WO2007120828A1 (en) | 2006-04-14 | 2007-10-25 | Novartis Ag | Use of il-i antibodies for treating ophthalmic disorders |
BRPI0710826A2 (pt) * | 2006-04-21 | 2011-08-23 | Novartis Ag | composições farmacêuticas de anticorpo anti-cd40 antagonista |
CN101448528A (zh) | 2006-05-15 | 2009-06-03 | 埃克斯生物科技公司 | 白细胞介素-1α免疫诱导预防动脉粥样硬化的自身抗体 |
RS54163B1 (en) | 2006-05-30 | 2015-12-31 | Genentech Inc. | ANTI-CD22 ANTIBODIES, THEIR IMMUNCONJUGATES AND THEIR USE |
JP5535633B2 (ja) * | 2006-09-29 | 2014-07-02 | オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 癌の診断および処置のための組成物および方法 |
EP2114443A4 (en) | 2006-12-29 | 2011-08-10 | Abbott Lab | IL-1A / IL-1B ANTIBODY WITH DOUBLE SPECIFICITY |
ES2763703T3 (es) | 2008-04-15 | 2020-05-29 | Sarcode Bioscience Inc | Antagonistas de LFA-1 tópicos utilizados en el tratamiento localizado de trastornos inmunes |
EP3085773B1 (en) * | 2008-05-30 | 2020-03-18 | XBiotech, Inc | Uses of il-1 alpha antibodies |
EP2326347A4 (en) | 2008-09-12 | 2013-03-06 | Xbiotech Inc | TARGETING PATHOGENIC MONOCYTES |
KR20110110349A (ko) | 2009-01-29 | 2011-10-06 | 아보트 러보러터리즈 | Il-1 결합 단백질 |
CA2775402A1 (en) | 2009-10-15 | 2011-04-21 | Abbott Laboratories | Il-1 binding proteins |
US9724409B2 (en) | 2011-04-01 | 2017-08-08 | Xbiotech, Inc. | Treatment of inflammatory skin disease |
-
2009
- 2009-06-01 EP EP16164746.6A patent/EP3085773B1/en active Active
- 2009-06-01 PT PT97587398T patent/PT2285409T/pt unknown
- 2009-06-01 CA CA3011485A patent/CA3011485A1/en not_active Abandoned
- 2009-06-01 MY MYPI2010005659A patent/MY154067A/en unknown
- 2009-06-01 DK DK09758739.8T patent/DK2285409T3/en active
- 2009-06-01 ES ES09758739.8T patent/ES2576681T3/es active Active
- 2009-06-01 MX MX2010012963A patent/MX2010012963A/es active IP Right Grant
- 2009-06-01 PL PL09758739.8T patent/PL2285409T3/pl unknown
- 2009-06-01 CN CN201310556893.3A patent/CN103656638B/zh active Active
- 2009-06-01 RU RU2010148904/10A patent/RU2498998C2/ru active
- 2009-06-01 EP EP20156323.6A patent/EP3705135A1/en active Pending
- 2009-06-01 SI SI200931460A patent/SI2285409T1/sl unknown
- 2009-06-01 NZ NZ590033A patent/NZ590033A/en unknown
- 2009-06-01 PL PL16164746T patent/PL3085773T3/pl unknown
- 2009-06-01 AU AU2009255670A patent/AU2009255670B2/en active Active
- 2009-06-01 CA CA2726345A patent/CA2726345C/en active Active
- 2009-06-01 BR BRPI0909610-8A patent/BRPI0909610B1/pt active IP Right Grant
- 2009-06-01 KR KR1020157031363A patent/KR20150127300A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-06-01 KR KR1020167037032A patent/KR20170005166A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-06-01 US US12/455,458 patent/US8034337B2/en active Active
- 2009-06-01 CN CN2009801250336A patent/CN102112154B/zh active Active
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5959085A (en) * | 1993-11-23 | 1999-09-28 | Schering Corporation | Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies |
WO2007135546A2 (en) * | 2006-05-22 | 2007-11-29 | Xbiotech Inc. | TREATMENT OF CANCER WITH ANTI-IL-1α ANTIBODIES |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
ARTHRITIS & RHEUMATISM, vol. 40, no. 5, JPN6018004249, 1997, pages 865 - 874 * |
BIOTHERAPHY, vol. 10, no. 5, JPN6018004246, 1996, pages 789 - 790 * |
INT. J. CANCER, vol. 60, no. 5, JPN6018004247, 1995, pages 712 - 717 * |
JOURNAL OF VIROLOGY, vol. 76, no. 1, JPN6018004251, 2002, pages 427 - 431 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE112018004836T5 (de) | 2017-08-30 | 2020-07-02 | Isuzu Motors Limited | Lenkvorrichtung |
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