JP2016531852A - 非常に強力なグルココルチコイド - Google Patents

Abstract

本発明は、新規なグルココルチコイド化合物に関する。本発明はまた、これらの化合物の使用方法、これらの化合物の合成、ならびに前記グルココルチコイド化合物を含む組成物および製剤、ならびにそれらの使用に関する。構造に基づく設計は、非常に改善された効力を有するいくつかの新規なグルココルチコイドの合成につながった。総合すると、これらの結果は、グルココルチコイドの効力の重要な構造機構を明らかにし、非常に強力なグルココルチコイドを開発するための合理的根拠を提供する。

Description

連邦の出資
本発明は、国立糖尿病・消化器・腎疾病研究所／アメリカ国立衛生研究所によって与えられたＤＫ０６６２０２およびＤＫ０７１６６２の下での政府支援を受けてなされた。政府は、本発明において一定の権利を有する。

関連出願への相互参照
このＰＣＴ出願は、２０１３年９月２５日に出願された米国仮出願第６１／８８２，４４４号の利益を主張する。当該文献の全体の内容は、本明細書に参考として援用される。

発明の技術分野
本発明は、新規なグルココルチコイド化合物に関する。本発明はまた、これらの化合物の使用方法、これらの化合物の合成、ならびに前記グルココルチコイド化合物を含む組成物および製剤、ならびにそれらの使用に関する。

発明の背景
プレドニゾン、デキサメタゾン（ＤＥＸ）およびブデソニドなどのグルココルチコイドは、最も有効な抗炎症薬である。それらは、喘息、関節炎、狼瘡およびクローン病などの炎症および自己免疫疾患を処置するために広く使用されている（１、２）。これらの薬物は、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）（核内受容体スーパーファミリーのリガンド活性化転写因子）に対する結合を介して、それらの生理学的役割を発揮する。グルココルチコイドの非存在下では、ＧＲは細胞質内に存在し、ｈｓｐ９０およびｈｓｐ７０などのシャペロンタンパク質と結合する。ホルモンが結合すると、ＧＲの立体構造が変化して、それが核内に移行し、転写制御活性（活性化（転写促進）または抑制（転写抑制）のいずれか）を発揮する。転写促進では、ＧＲが二量体化し、特定のグルココルチコイド応答エレメントに直接結合し、次いで、転写を活性化する活性化補助因子をリクルートする。転写抑制では、ＧＲが他の転写因子（例えば、ＮＦ−κＢ、ＡＰ−１）に結合し、タンパク質−タンパク質相互作用を介してそれらの結合部位に間接的にテザリングされるというのが一般的なモデルである。標的プロモーターの近くにテザリングされると、ＧＲは、下流の遺伝子発現を抑制する（３）。一般に、転写抑制は、ＧＲの二量体化を必要としないと考えられている（４、５）。

転写抑制は、グルココルチコイドが抗炎症剤として作用する主要な機構である（６）。ＧＲがＮＦ−κＢ／ＡＰ−１プロモーターにテザリングされると、炎症促進サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１βおよびＩＬ−６）、ケモカイン（例えば、ＣＣＬ２、ＣＣＬ１９）および炎症の発症に関連する酵素（例えば、ＣＯＸ２、ＭＭＰ１３およびホスホリパーゼＡ２）を含む主要な下流の炎症促進因子が転写抑制される（２）。それらの迅速な作用および持続的な効果により、グルココルチコイドは依然として、炎症性疾患を処置するための第一選択薬である。しかしながら、特に高用量でのグルココルチコイドの長期使用は、糖尿病／グルコース不耐性、高血圧、肥満および骨粗鬆症を含む多くの有害な結果をもたらす（７、８）。これらの結果のほとんどは、ＧＲの転写促進に起因する。例えば、グルココルチコイドは、肝臓における糖新生経路の律速酵素（グルコース−６−ホスファターゼおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ）をコードする遺伝子を誘導して（９、１０）、グルコースのデノボ合成を増強し、最終的に体重増加または糖尿病をもたらす。グルココルチコイドはまた、骨の発達の重要な調節遺伝子Ｄｉｃｋｋｏｐｆ−１（ＤＫＫ１）（このアップレギュレーションは、骨粗鬆症および骨量の減少につながる）を誘導する（１１）。一般に、グルココルチコイドの副作用の多くは、グルココルチコイドの高用量の使用に関連することが認められている（１２〜１４）。例えば、プレドニゾンの使用では、「閾値パターン」が観察された：７．５ｍｇ／日では、それは、緑内障、鬱病および高血圧を引き起こす（１２）。これらの副作用は、ＧＲの転写促進によってだけではなく、高血圧を引き起こす他の受容体（例えば、ミネラルコルチコイド受容体（ＭＲ））の非標的活性化によっても引き起こされる（１５）。したがって、望ましくない副作用を減少させるためには、非常に強力かつ選択的なグルココルチコイドを開発することが重要である。

効力および有効性は、グルココルチコイドの２つの主要な薬物動態パラメータである。有効性は、所定の薬物が最大濃度で通常達成し得る最大活性であり、効力は、半最大活性（ＥＣ５０）に達するために必要な所定の薬物の濃度である。同じ有効性を有する２つのグルココルチコイドの場合、効力が高いものは、同じ処置効果を達成するために必要な用量が少ないであろう（１４、１５）。重要なことに、グルココルチコイドは、転写促進および転写抑制について異なる効力を有し得る；例えば、ＤＥＸを介したＧＲによる遺伝子誘導は、遺伝子抑制よりも５〜６倍高いグルココルチコイド濃度を必要とする（１６−１８）。このディファレンシャルな応答は、転写促進活性および副作用を最小限に抑えながら、炎症シグナルの完全な抑制を達成するために低用量で使用し得る非常に強力なグルココルチコイドを開発する機会を提供する。最後に、グルココルチコイド治療に対する不感受性および耐性の発現は、慢性閉塞性肺疾患、関節リウマチおよび炎症性腸疾患などの一般的な炎症性疾患の処置における主要な問題である（１９）。グルココルチコイド耐性はまた、白血球癌、特に小児急性白血病に関する未解決の問題である（２０）。キナーゼ経路の変更、補因子の変化、および受容体の減少または突然変異を含むいくつかのグルココルチコイド耐性機構が同定または提案されている（１９、２１）。１つの一般的な観察結果は、グルココルチコイド耐性患者では、受容体に対するリガンドの親和性が減少していることである。非常に強力なグルココルチコイドで処置されたこのような患者は改善を示したが、その効果は徐々に減少した（２２）。したがって、新世代のより強力なグルココルチコイドの開発が急務である。
コルチゾールは、副腎によって産生される内因性グルココルチコイドである。コルチゾールは、最も一般的に使用される合成グルココルチコイド、例えばＤＥＸと比べて低い効力および受容体結合能を有する（２３）。一方、フランカルボン酸モメタゾン（ＭＦ）は、炎症性皮膚疾患（Ｅｌｏｃｏｎ）、喘息（Ａｓｍａｎｅｘ）および副鼻腔炎（Ｎａｓｏｎｅｘ）を処置するために使用される強力なグルココルチコイドである（２４、２５）。ＭＦは、ステロイドＤ環のＣ１７α位に親油性フロ酸エステルを有し、これが、その高い効力の原因であると考えられている（２６）。本明細書では、本発明者らは、ＭＦおよびコルチゾールに結合したＧＲ ＬＢＤの結晶構造を決定したが、これにより、ＭＦとコルチゾールとの間のリガンド効力を識別する基本的機構が明らかになる。次いで、本発明者らは、観察された構造機構を使用して、非常に改善された効力および有効性を有するいくつかの新規なグルココルチコイドであって、炎症性疾患を処置するための治療薬開発の出発リードとして機能し得るいくつかの新規なグルココルチコイドを設計した。

Ｂａｒｎｅｓ ＰＪ （１９９８） Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ： ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ． Ｃｌｉｎ Ｓｃｉ （Ｌｏｎｄ） ９４ （６）：５５７−５７２

発明の要旨
グルココルチコイド薬の進化は、有益な抗炎症作用を維持しながら望ましくない副作用を低下させるという要求によって促された。多くの望ましくない副作用は高用量に関連するので、効力は、この進化の非常に重要な側面である。より低用量で同じ処置効果を達成する非常に強力なグルココルチコイドによって、副作用を最小限に抑え得る。この要求が、低い効力から高い効力へのグルココルチコイドの進化を促した。コルチゾールは、比較的低い効力を有する内因性グルココルチコイドであり、フランカルボン酸モメタゾン（ＭＦ）は、多くの炎症性疾患の処置に使用されている非常に強力な合成グルココルチコイドである。グルココルチコイドの進化を促した基本的機構を理解するために、本発明者らは、コルチゾールおよびＭＦに結合したグルココルチコイド受容体（ＧＲ）リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）のＸ線構造を決定した。コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤにより、ステロイドＡ環中の１，２単結合の柔軟性が、コルチゾールの低いＧＲ親和性の主な原因であることが明らかになった。一方、ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤにより、ＭＦの高い効力は、その１７αフロエート基（これは、リガンド結合ポケットを完全に満たして、高親和性結合のためのさらなるアンカー接触を提供する）によって達成されることが明らかになった。リガンド結合ポケット中の単一アミノ酸Ｑ６４２は、ＭＦとコルチゾールとの間のリガンド効力を区別する役割を果たす。構造に基づく設計は、非常に改善された効力を有するいくつかの新規なグルココルチコイドの合成につながった。総合すると、これらの結果は、グルココルチコイドの効力の重要な構造機構を明らかにし、非常に強力なグルココルチコイドを開発するための合理的根拠を提供する。

一態様では、本発明は、式Ｉの化合物
（式中
は結合であるか、または存在せず、
Ｒ_１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_１は、場合により置換されており；
Ｒ_２は、水素またはＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_２は、場合により置換されており；
Ｒ_３は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_３は、場合により置換されており；
各Ｒ_４は独立して、水素、
（式中、Ｘは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ_４は、場合により置換されており；
Ｒ_５は、水素またはＣ_１−４アルキルであり；
Ｒ_６は、水素またはハロであり；
Ｒ_７は、水素またはハロであり；
ｎは、０、１、２、３、４または５である）またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。

別の態様では、本発明は、請求項１に記載の化合物と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む医薬組成物を提供する。

さらに別の態様では、本発明は、生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を有効量の請求項１に記載の化合物と接触させる工程を含む方法を提供する。

さらに別の態様では、本発明は、患者における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、有効量の請求項１に記載の化合物を前記患者に投与する工程を含む方法を提供する。

コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤの全体構造。（Ａ）コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤのアーキテクチャ。（Ｂ）ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ−ＬＢＤの構造比較。矢印は、これらの２つの差異を示す。１：ヘリックス１の前のループ領域；２：ヘリックス５〜ヘリックス７の前のループ領域。３：ＡＦ２ヘリックスのＣ末端の方向。（Ｃ）ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおけるコルチゾールおよびＭＦの電子密度マップ。

コルチゾール、ＤＥＸおよびＭＦの効力。（Ａ）コルチゾール、ＤＥＸおよびＭＦの化学構造。ステロイド環（Ａ〜Ｄ）が示されている。キー原子の数え方は、右の位置の近くに小文字として記されている。ＤＥＸ構造では、ＤＥＸとコルチゾールとの間の差異が示されている。ＭＦのフロエート基が示されている。（Ｂ〜Ｃ）ＡＤ２９３細胞における誘導レポーターＭＭＴＶ−Ｌｕｃおよび抑制レポーターＡＰ１−Ｌｕｃに対する、コルチゾール、ＤＥＸおよびＭＦの用量反応曲線。ＲＬＵ：相対ルシフェラーゼ単位。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｄ）ＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールのインビトロＧＲ結合アッセイ。ＣＰＭ：カウント毎秒。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝２）。

１，２単結合の柔軟性は、コルチゾールの低親和性に起因する。（Ａ）ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおけるコルチゾールおよびＤＥＸの水素結合ネットワーク。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−ＬｕｃのＧＲ転写促進に対する、コルチゾール、プレドニゾロンおよびＤＥＸの用量反応曲線。プレドニゾロンは、１，２二重結合によってのみコルチゾールと区別される。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。

ＧＲリガンド結合ポケットにおける１７αフロエート基の完全占有。（Ａ、Ｂ）ＤＥＸおよびＭＦの三次元構造。（Ｃ）ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおけるＤＥＸおよびＭＦのアライメント。ＭＦの１７αフロエート基は、ＧＲリガンド結合ポケットを拡大し、ステロイドＤ環の上の疎水性空洞を完全に占有している。（Ｄ）ＧＲ ＬＢＤリガンド結合ポケットの疎水性空洞における１７αフロエート基と残基との詳細な疎水性相互作用。

Ｑ６４２は、異なる効力のリガンドの認識において重要な役割を果たす。（Ａ）Ｑ６４２と異なるリガンドとの詳細な相互作用：ＤＥＸ結合ＧＲ−ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ−ＬＢＤ。（Ｂ）不飽和濃度のステロイドにおけるＱ６４２突然変異の転写促進活性（ＤＥＸ １０ｎＭ；ＭＦ １ｎＭ）。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ≧３）。（Ｃ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、野生型（ＷＴ）ＧＲおよびＱ６４２Ｎ突然変異体に関するＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールの用量反応曲線。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。

１７αフロエート基の誘導は、グルココルチコイド化合物の効力を増加させる。（Ａ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、ＶＳＧ２２、ＶＳＧ２４、ＤＡＣおよびＤＥＸの用量反応曲線。化学構造中のフロエート基。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する転写促進活性効力に関する、１７αフロエート基を有する／有しない化合物の対照比較。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｃ）誘導レポーターアッセイにおける化合物９とＶＳＧ２２の比較。 １７αフロエート基の誘導は、グルココルチコイド化合物の効力を増加させる。（Ａ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、ＶＳＧ２２、ＶＳＧ２４、ＤＡＣおよびＤＥＸの用量反応曲線。化学構造中のフロエート基。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する転写促進活性効力に関する、１７αフロエート基を有する／有しない化合物の対照比較。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｃ）誘導レポーターアッセイにおける化合物９とＶＳＧ２２の比較。

溶解突然変異および結晶化突然変異の位置。上のパネル：ＧＲ ＬＢＤを可溶性にする突然変異の位置；下のパネル：ＧＲ ＬＢＤの結晶化を促進する表面突然変異。

選択したＧＲ ＬＢＤ突然変異のタンパク質発現および精製。ＧＲ ＬＢＤ突然変異体を発現させ、１０μＭコルチゾールの存在下で精製した。

コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤのタンパク質結晶および回折マップ。（Ａ）コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤ。（Ｂ）ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤ。

ＧＲ ＡＹＶＴＩ突然変異の転写活性。（Ａ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、ＧＲ ＡＹＶＴＩ突然変異の転写促進活性。ＤＥＸ、１００ｎＭ。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＡＰ１−Ｌｕｃに対する、ＧＲ ＡＹＶＴＩ突然変異の転写抑制活性。ＤＥＸ、１００ｎＭ。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。

ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおけるＤＥＸおよびコルチゾールのステロイドＣ−９α基およびＣ−１６基の詳細な構造比較。（Ａ）ＤＥＸのＣ−９α位におけるＦ原子は、ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおいてＦ６２３、Ｌ５６３およびＭ６４６と密着する。（Ｂ）ＤＥＸのＣ−１６メチル基は、ＧＲ ＬＢＤのリガンド結合ポケットにおいてＹ７３５、Ｌ７３２、Ｍ６４６およびＱ６４２と密着する。

Ｆ６２３およびＭ６３９突然変異は、ＭＦおよびＤＥＸの活性を区別することができない。（Ａ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、Ｆ６２３突然変異の転写促進活性。ＤＥＸ １０ｎＭ、ＭＦ １ｎＭ。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＭＭＴＶ−Ｌｕｃに対する、Ｍ６３９突然変異の転写促進活性。ＤＥＸ １０ｎＭ、ＭＦ １ｎＭ。エラーバーは、標準偏差を表す（ｎ＝３）。

ＧＲ Ｑ６４２Ａ突然変異タンパク質のインビトロ結合アッセイ。（Ａ）野生型ＧＲまたはＱ６４２Ａ突然変異ＧＲのいずれかを発現したＡＤ２９３細胞由来の細胞質ゾルを使用したインビトロリガンド結合実験。ＣＰＭ：カウント毎分。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝２。（Ｂ）ＭＭＴＶ−ＬｕｃレポーターアッセイにおけるＷＴ ＧＲおよびＱ６４２Ａ ＧＲのＤＥＸ用量反応曲線。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。（Ｃ）ＧＲ Ｑ６４２Ａリガンド競合アッセイ。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝２。

Ｃ−１７αフロエート基を有する化合物の転写抑制特性。（Ａ）ＡＤ２９３細胞におけるＡＰ１−Ｌｕｃ活性に対する、ＶＳＧ２２、ＶＳＧ２４、ＤＡＣおよびＤＥＸの用量反応曲線。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。（Ｂ）ＡＤ２９３細胞におけるＡＰ１−Ｌｕｃに対する転写抑制活性効力に関する、導入Ｃ−１７αフロエート基を有するおよび有しない化合物の対照比較。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。

グルココルチコイドＶＳＧ１１１、ＶＳＧ１１２およびＶＳＧ１１３の活性。データは、ＤＥＸに対するパーセントとしてプロットされている。ステロイド濃度１０ｎＭ。

ＶＳＧ１１１とＺＫ ２１６３４８およびＡＬ４３８との比較。データは、ＤＥＸに対するパーセントとしてプロットされている。

上記図面は例示目的で提供するものであり、決して限定的であることを意味するものではない。

詳細な説明
グルココルチコイドはほぼ６０年にわたって使用されており、それらは依然として、多くの炎症性疾患および自己免疫疾患を処置するための第一選択薬である。しかしながら、グルココルチコイドの長期使用は、多くの有害な結果を引き起こし得る。ＧＲの活性化および抑制の構造的原理を理解することは、副作用の少ない新規なグルココルチコイドを開発するために非常に重要である。しかしながら、特に低親和性リガンドに関して、細菌系におけるＧＲの発現レベルが低いことが、この重要な細胞調節因子の構造研究の障害であった。ステロイド受容体ファミリーで保存されている残基を比較することにより、本発明者らは、受容体の生理機能に影響を与えずに受容体の発現を促進し得るアミノ酸突然変異を同定することに成功した。この方法は、未来の次世代グルココルチコイドを保持し得る特に低親和性リガンド（例えば、非ステロイドリガンド）に関して、ＧＲの構造研究を加速させるであろう。

非常に強力なグルココルチコイドの開発は、２種類の緊急性（１つは、高用量の使用によって引き起こされるグルココルチコイドの副作用であり、もう１つは、臨床的なグルココルチコイド耐性症候である）によって促された。リガンド親和性は効力の決定要因であるが、それだけではない。細胞補助因子もまた、リガンド結合によって引き起こされる表面差異を認識することによって重要な役割を果たし、異なるリガンドの結合によって誘導されるわずかな変化は、補因子の選択性に大きな影響を及ぼし得る。強固なコルチゾール骨格を改変して効力を増加させるために様々な戦略が取られ、ＤＥＸの開発につながった。コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤの構造比較は、Ｒ６１１と重要な水素結合を形成するＣ３ケトンの最適な配置のために、改変の中でもΔ^１二重結合が重要であることを示している。続いて、研究者らは、Ｃ−１７α位におけるアルキルまたはプロピオン酸エステル（２６）などの親油性のエステル基がグルココルチコイド活性を大きく増強し得ることを見出した。最も一般的に使用されている喘息薬の１つであるフルチカゾンプロピオン酸エステル（ＦＰ）は、Ｃ−１７α位においてヒドロキシル基をプロピオン酸エステルで置換することによって作製された。これらのデータにより、リガンド結合ポケットにおいて、疎水性空洞がステロイドＤ環の上に存在することが示唆された。フロ酸エステル基を有するＦＰをさらに最適化してプロピオン酸エステルを置換することにより、非常に強力なグルココルチコイドであるフロ酸フルチカゾン（ＦＦ）を作製されたが、これは、フロエート基が前記空洞に最適にフィットし得ることを示している。ＦＦ結合ＧＲ ＬＢＤの構造は解明されたが（３５）、ＭＦの高い効力の構造機構は不明確であった。本明細書では、本発明者らは、ＭＦの高い効力が、リガンド結合ポケット全体を占有するＣ−１７αフロエート基と、リガンドの結合によって引き起こされる表面立体構造の変化との両方に起因することを発見した。突然変異誘発を使用して、本発明者らは、単一アミノ酸残基Ｑ６４２が、Ｃ−１７αフロエート基の認識、および他のアミノ酸側鎖の配置の調整において重要な役割を果たすことを実証した。Ｑ６４２Ｎは、わずか１個のメチル基が野生型タンパク質と異なるが、ＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールの活性を完全に区別するのに十分であり、このことは、受容体の活性がどれ程正確に調節されているかを示している。

本発明者らは、Ｃ−１７αフロエート基が、リガンド結合ポケットにおいて、正確かつ堅固に低親和性リガンドを配置するための「アンカー」ポイントとして機能し得ることを実証した。高い解離特性のために設計されたＤＡＣ誘導体の改変の成功は、治療解離グルココルチコイド、臨床的なグルココルチコイド耐性症候が軽減されたグルココルチコイド、または非ステロイドグルココルチコイド化合物（これらの化合物は一般に、低い受容体親和性を示す）を設計するためのロバストな戦略を実証している。要約すると、本発明者らは、生理的リガンド（低い効力のグルココルチコイドであるコルチゾール）に結合したＧＲ ＬＢＤの最初の結晶構造、および臨床的に重要な高い効力の合成リガンドＭＦに結合したＬＢＤの構造を解明した。生化学的分析および突然変異分析と組み合わせて、本発明者らは、グルココルチコイドの親和性および効力の重要な決定要因を構造的に同定し、非常に強力なグルココルチコイドの構造に基づく設計および合成によってこれらの決定要因を検証した。

定義

本発明の目的のために、化学元素は、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ Ｔａｂｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ，ＣＡＳ ｖｅｒｓｉｏｎ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃｓ，７５ｔｈ Ｅｄにしたがって特定される。さらに、有機化学の一般原則は、「Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，Ｔｈｏｍａｓ Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｏｏｋｓ，Ｓａｕｓｏｌｉｔｏ：１９９９および「Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｅｄ．：Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：２００１（これらの全内容は、参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。

本発明の目的のために、式Ｉの化合物の炭素ナンバリングは、ステロイド構造について認められている慣例である。したがって、式Ｉの化合物は、以下のようにナンバリングされる：

本明細書に記載されるように、本発明の化合物は、１つまたはそれを超える置換基で場合により置換されていてもよく、例えば、一般には上記のものであるか、または本発明の特定のクラス、サブクラスおよび種によって例示されるものである。

本明細書で使用される「アルキル」基は、１〜１２個（例えば、１〜８個、１〜６個または１〜４個）の炭素原子を含有する飽和脂肪族炭化水素基を指す。アルキル基は、直鎖状または分枝状であり得る。アルキル基の例としては、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘプチルまたは２−エチルヘキシルが挙げられる。アルキル基は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、ハロ、ホスホ、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、ヘテロシクロ脂肪族［例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル］、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アシル［例えば、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、アミド［例えば、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニルまたはヘテロアリールアミノカルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ、シクロ脂肪族アミノまたはヘテロシクロ脂肪族アミノ］、スルホニル［例えば、脂肪族−ＳＯ_２−］、スルフィニル、スルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、シクロ脂肪族オキシ、ヘテロシクロ脂肪族オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシまたはヒドロキシで置換されていてもよい（すなわち、場合により置換されている）。限定されないが、置換アルキルのいくつかの例としては、カルボキシアルキル（例えば、ＨＯＯＣ−アルキル、アルコキシカルボニルアルキルおよびアルキルカルボニルオキシアルキル）、シアノアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アシルアルキル、アラルキル、（アルコキシアリール）アルキル、（スルホニルアミノ）アルキル（例えば、（アルキル−ＳＯ_２−アミノ）アルキル）、アミノアルキル、アミドアルキル、（シクロ脂肪族）アルキルまたはハロアルキルが挙げられる。

本明細書で使用される「アルケニル」基は、２〜８個（例えば、２〜１２個、２〜６個または２〜４個）の炭素原子と、少なくとも１つの二重結合とを含有する脂肪族炭素基を指す。アルキル基と同様に、アルケニル基は、直鎖状または分枝状であり得る。アルケニル基の例としては、限定されないが、アリル、イソプレニル、２−ブテニルおよび２−ヘキセニルが挙げられる。アルケニル基は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、ハロ、ホスホ、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、ヘテロシクロ脂肪族［例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル］、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アシル［例えば、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、アミド［例えば、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニルまたはヘテロアリールアミノカルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ、シクロ脂肪族アミノ、ヘテロシクロ脂肪族アミノまたは脂肪族スルホニルアミノ］、スルホニル［例えば、アルキル−ＳＯ_２−、シクロ脂肪族−ＳＯ_２−またはアリール−ＳＯ_２−］、スルフィニル、スルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、シクロ脂肪族オキシ、ヘテロシクロ脂肪族オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシまたはヒドロキシで場合により置換されていてもよい。限定されないが、置換アルケニルのいくつかの例としては、シアノアルケニル、アルコキシアルケニル、アシルアルケニル、ヒドロキシアルケニル、アラルケニル、（アルコキシアリール）アルケニル、（スルホニルアミノ）アルケニル（例えば、（アルキル−ＳＯ_２−アミノ）アルケニル）、アミノアルケニル、アミドアルケニル、（シクロ脂肪族）アルケニルまたはハロアルケニルが挙げられる。

本明細書で使用される「アルキニル」基は、２〜８個（例えば、２〜１２個、２〜６個または２〜４個）の炭素原子を含有する脂肪族炭素基であって、少なくとも１つの三重結合を有する脂肪族炭素基を指す。アルキニル基は、直鎖状または分枝状であり得る。アルキニル基の例としては、限定されないが、プロパルギルおよびブチニルが挙げられる。アルキニル基は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、アロイル、ヘテロアロイル、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、スルホ、メルカプト、スルファニル［例えば、脂肪族スルファニルまたはシクロ脂肪族スルファニル］、スルフィニル［例えば、脂肪族スルフィニルまたはシクロ脂肪族スルフィニル］、スルホニル［例えば、脂肪族−ＳＯ_２−、脂肪族アミノ−ＳＯ_２−またはシクロ脂肪族−ＳＯ_２−］、アミド［例えば、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、シクロアルキルカルボニルアミノ、アリールアミノカルボニル、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノまたはヘテロアリールアミノカルボニル］、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ］、スルホキシ、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシまたは（ヘテロアリール）アルコキシで場合により置換されていてもよい。

本明細書で使用される「アミノ」基は、−ＮＲ^ＸＲ^Ｙ（式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙはそれぞれ独立して、水素、脂肪族、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、アリール、アリール脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロアリール、カルボキシ、スルファニル、スルフィニル、スルホニル、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、アリールカルボニル、（アリール脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（ヘテロアリール）カルボニルまたは（ヘテロアリール脂肪族）カルボニルであり、これらはそれぞれ本明細書に定義されており、場合により置換されている）を指す。アミノ基の例としては、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはアリールアミノが挙げられる。「アミノ」という用語が末端基（例えば、アルキルカルボニルアミノ）ではない場合、それは−ＮＲ^Ｘ−により表される。Ｒ^Ｘは、上記に定義されているものと同じ意味を有する。

本明細書で使用される場合、単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」もしくは「アリールオキシアルキル」のようにより大きい部分の一部として使用される「アリール」基は、単環式（例えば、フェニル）；二環式（例えば、インデニル、ナフタレニル、テトラヒドロナフチル、テトラヒドロインデニル）；および三環式（例えば、フルオレニル、テトラヒドロフルオレニルまたはテトラヒドロアントラセニル、アントラセニル）環系であって、単環式環系が芳香族であるか、または二環式または三環式環系における環の少なくとも１つが芳香族であるものを指す。二環式および三環式基としては、ベンゾ縮合２〜３員炭素環式環が挙げられる。例えば、ベンゾ縮合基としては、２つまたはそれを超えるＣ_４−８炭素環式部分と縮合したフェニルが挙げられる。アリールは、１つまたはそれを超える置換基、例えば、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル］；シクロ脂肪族；（シクロ脂肪族）脂肪族；ヘテロシクロ脂肪族；（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族；アリール；ヘテロアリール；アルコキシ；（シクロ脂肪族）オキシ；（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ；アリールオキシ；ヘテロアリールオキシ；（アリール脂肪族）オキシ；（ヘテロアリール脂肪族）オキシ；アロイル；ヘテロアロイル；アミノ；オキソ（ベンゾ縮合二環式または三環式アリールの非芳香族炭素環式環におけるもの）；ニトロ；カルボキシ；アミド；アシル［例えば、（脂肪族）カルボニル；（シクロ脂肪族）カルボニル；（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；（アリール脂肪族）カルボニル；（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル；（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；または（ヘテロアリール脂肪族）カルボニル］；スルホニル［例えば、脂肪族−ＳＯ_２−またはアミノ−ＳＯ_２−］；スルフィニル［例えば、脂肪族−Ｓ（Ｏ）−またはシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）−］；スルファニル［例えば、脂肪族−Ｓ−］；シアノ；ハロ；ヒドロキシ；メルカプト；スルホキシ；ウレア；チオウレア；スルファモイル；スルファミド；またはカルバモイルで場合により置換されている。あるいは、アリールは、非置換であり得る。

置換アリールの非限定的な例としては、ハロアリール［例えば、モノ−、ジ（例えば、ｐ、ｍ−ジハロアリール）および（トリハロ）アリール］；（カルボキシ）アリール［例えば、（アルコキシカルボニル）アリール、（（アラルキル）カルボニルオキシ）アリールおよび（アルコキシカルボニル）アリール］；（アミド）アリール［例えば、（アミノカルボニル）アリール、（（（アルキルアミノ）アルキル）アミノカルボニル）アリール、（アルキルカルボニル）アミノアリール、（アリールアミノカルボニル）アリールおよび（（（ヘテロアリール）アミノ）カルボニル）アリール］；アミノアリール［例えば、（（アルキルスルホニル）アミノ）アリールまたは（（ジアルキル）アミノ）アリール］；（シアノアルキル）アリール；（アルコキシ）アリール；（スルファモイル）アリール［例えば、（アミノスルホニル）アリール］；（アルキルスルホニル）アリール；（シアノ）アリール；（ヒドロキシアルキル）アリール；（（アルコキシ）アルキル）アリール；（ヒドロキシ）アリール、（（カルボキシ）アルキル）アリール；（（（ジアルキル）アミノ）アルキル）アリール；（ニトロアルキル）アリール；（（（アルキルスルホニル）アミノ）アルキル）アリール；（（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル）アリール；（（アルキルスルホニル）アルキル）アリール；（シアノアルキル）アリール；（ヒドロキシアルキル）アリール；（アルキルカルボニル）アリール；アルキルアリール；（トリハロアルキル）アリール；ｐ−アミノ−ｍ−アルコキシカルボニルアリール；ｐ−アミノ−ｍ−シアノアリール；ｐ−ハロ−ｍ−アミノアリール；または（ｍ−（ヘテロシクロ脂肪族）−ｏ−（アルキル））アリールが挙げられる。

本明細書で使用される「アリール脂肪族」、例えば、「アラルキル」基は、アリール基で置換されている脂肪族基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を指す。「脂肪族」、「アルキル」および「アリール」は、本明細書に定義されている。アリール脂肪族、例えば、アラルキル基の例は、ベンジルである。

本明細書で使用される「アラルキル」基は、アリール基で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を指す。「アルキル」および「アリール」は両方とも、上記に定義されている。アラルキル基の例は、ベンジルである。アラルキルは、１つまたはそれを超える置換基、例えば、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル、例えばカルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルまたはハロアルキル、例えば、トリフルオロメチル］、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミド［例えば、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノまたはヘテロアラルキルカルボニルアミノ］、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイルで場合により置換されている。

本明細書で使用される「二環式環系」は、共通して少なくとも１個の原子（例えば、共通して２個の原子）を有する２つの環を形成する８〜１２（例えば、９、１０または１１）員構造を含む。二環式環系としては、ビシクロ脂肪族（例えば、ビシクロアルキルまたはビシクロアルケニル）、ビシクロヘテロ脂肪族、二環式アリールおよび二環式ヘテロアリールが挙げられる。

本明細書で使用される「炭素環」または「シクロ脂肪族」基は、「シクロアルキル」基および「シクロアルケニル」基を包含し、これらはそれぞれ、以下に示されているように場合により置換されている。

本明細書で使用される「シクロアルキル」基は、３〜１０個（例えば、５〜１０個）の炭素原子の飽和炭素環式単環式または二環式（縮合または架橋）環を指す。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、ノルボルニル、キュビル、オクタヒドロ−インデニル、デカヒドロ−ナフチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．３．１］ノニル、ビシクロ［３．３．２．］デシル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、アダマンチルまたは（（アミノカルボニル）シクロアルキル）シクロアルキルが挙げられる。

本明細書で使用される「シクロアルケニル」基は、１つまたはそれを超える二重結合を有する３〜１０個（例えば、４〜８個）の炭素原子の非芳香族炭素環式環を指す。シクロアルケニル基の例としては、シクロペンテニル、１，４−シクロヘキサ−ジ−エニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、ヘキサヒドロ−インデニル、オクタヒドロ−ナフチル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、ビシクロ［２．２．２］オクテニルまたはビシクロ［３．３．１］ノネニルが挙げられる。

シクロアルキルまたはシクロアルケニル基は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、ホスホ、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル］、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（アリール脂肪族）オキシ、（ヘテロアリール脂肪族）オキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、アミド［例えば、（脂肪族）カルボニルアミノ、（シクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（アリール）カルボニルアミノ、（アリール脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロアリール）カルボニルアミノまたは（ヘテロアリール脂肪族）カルボニルアミノ］、ニトロ、カルボキシ［例えば、ＨＯＯＣ−、アルコキシカルボニルまたはアルキルカルボニルオキシ］、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（アリール脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロアリール脂肪族）カルボニル］、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、スルホニル［例えば、アルキル−ＳＯ_２−およびアリール−ＳＯ_２−］、スルフィニル［例えば、アルキル−Ｓ（Ｏ）−］、スルファニル［例えば、アルキル−Ｓ−］、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイルで場合により置換されていてもよい。

本明細書で使用される「複素環」または「ヘテロシクロ脂肪族」という用語は、ヘテロシクロアルキル基およびヘテロシクロアルケニル基を包含し、これらはそれぞれ、以下に示されているように場合により置換されている。

本明細書で使用される「ヘテロシクロアルキル」基は、３〜１０員単環式または二環式（縮合または架橋）（例えば、５〜１０員単環式または二環式）飽和環構造であって、環原子の１つまたはそれを超えるものがヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓまたはそれらの組み合わせ）であるものを指す。ヘテロシクロアルキル基の例としては、ピペリジル、ピペラジル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフリル、１，４−ジオキソラニル、１，４−ジチアニル、１，３−ジオキソラニル、オキサゾリジル、イソオキサゾリジル、モルホリニル、チオモルホリル、オクタヒドロベンゾフリル、オクタヒドロクロメニル、オクタヒドロチオクロメニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロピリジニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロベンゾ［ｂ］チオフォンイル、２−オキサ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチルおよび２，６−ジオキサ−トリシクロ［３．３．１．０^３，７］ノニルが挙げられる。単環式ヘテロシクロアルキル基は、フェニル部分と縮合して、ヘテロアリールとして分類される構造、例えばテトラヒドロイソキノリンを形成し得る。

本明細書で使用される「ヘテロシクロアルケニル」基は、１つまたはそれを超える二重結合を有する単環式または二環式（例えば、５〜１０員単環式または二環式）非芳香族環構造であって、環原子の１つまたはそれを超えるものがヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）であるものを指す。単環式および二環式ヘテロシクロ脂肪族は、標準的化学命名法にしたがってナンバリングされる。

ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル基は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、ホスホ、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル］、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（アリール脂肪族）オキシ、（ヘテロアリール脂肪族）オキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、アミド［例えば、（脂肪族）カルボニルアミノ、（シクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（アリール）カルボニルアミノ、（アリール脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロアリール）カルボニルアミノまたは（ヘテロアリール脂肪族）カルボニルアミノ］、ニトロ、カルボキシ［例えば、ＨＯＯＣ−、アルコキシカルボニルまたはアルキルカルボニルオキシ］、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（アリール脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロアリール脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、スルホニル［例えば、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニル］、スルフィニル［例えば、アルキルスルフィニル］、スルファニル［例えば、アルキルスルファニル］、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイルで場合により置換されていてもよい。

本明細書で使用される「ヘテロアリール」基は、４〜１５個の環原子を有する単環式、二環式または三環式環系であって、環原子の１つまたはそれを超えるものがヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓまたはそれらの組み合わせ）であり、単環式環系が芳香族であるか、または二環式もしくは三環式環系における環の少なくとも１つが芳香族であるものを指す。ヘテロアリール基としては、２〜３個の環を有するベンゾ縮合環系が挙げられる。例えば、ベンゾ縮合基としては、１つまたは２つの４〜８員ヘテロシクロ脂肪族部分（例えば、インドリジル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、キノリニルまたはイソキノリニル）とベンゾ縮合しているものが挙げられる。ヘテロアリールのいくつかの例は、アゼチジニル、ピリジル、１Ｈ−インダゾリル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフリル、イソキノリニル、ベンズチアゾリル、キサンテン、チオキサンテン、フェノチアジン、ジヒドロインドール、ベンゾ［１，３］ジオキソール、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリル、シノリル、キノリル、キナゾリル、シノリル、フタラジル、キナゾリル、キノキサリル、イソキノリル、４Ｈ−キノリジル、ベンゾ−１，２，５−チアジアゾリルまたは１，８−ナフチリジルである。

限定されないが、単環式ヘテロアリールとしては、フリル、チオフェニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、２Ｈ−ピラニル、４−Ｈ−ピラニル、ピリジル、ピリダジル、ピリミジル、ピラゾリル、ピラジルまたは１，３，５−トリアジルが挙げられる。単環式ヘテロアリールは、標準的化学命名法にしたがってナンバリングされる。

限定されないが、二環式ヘテロアリールとしては、インドリジル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、キノリニル、イソキノリニル、インドリジニル、イソインドリル、インドリル、ベンゾ［ｂ］フリル、ベキソ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンズイミダジル、ベンズチアゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジル、キノリル、イソキノリル、シノリル、フタラジル、キナゾリル、キノキサリル、１，８−ナフチリジルまたはプテリジルが挙げられる。二環式ヘテロアリールは、標準的化学命名法にしたがってナンバリングされる。

ヘテロアリールは、１つまたはそれを超える置換基、例えば、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル］；シクロ脂肪族；（シクロ脂肪族）脂肪族；ヘテロシクロ脂肪族；（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族；アリール；ヘテロアリール；アルコキシ；（シクロ脂肪族）オキシ；（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ；アリールオキシ；ヘテロアリールオキシ；（アリール脂肪族）オキシ；（ヘテロアリール脂肪族）オキシ；アロイル；ヘテロアロイル；アミノ；オキソ（二環式または三環式ヘテロアリールの非芳香族炭素環式または複素環におけるもの）；カルボキシ；アミド；アシル［例えば、脂肪族カルボニル；（シクロ脂肪族）カルボニル；（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；（アリール脂肪族）カルボニル；（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル；（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；または（ヘテロアリール脂肪族）カルボニル］；スルホニル［例えば、脂肪族スルホニルまたはアミノスルホニル］；スルフィニル［例えば、脂肪族スルフィニル］；スルファニル［例えば、脂肪族スルファニル］；ニトロ；シアノ；ハロ；ヒドロキシ；メルカプト；スルホキシ；ウレア；チオウレア；スルファモイル；スルファミド；またはカルバモイルで場合により置換されている。あるいは、ヘテロアリールは、非置換であり得る。

置換ヘテロアリールの非限定的な例としては、（ハロ）ヘテロアリール［例えば、モノ−およびジ−（ハロ）ヘテロアリール］；（カルボキシ）ヘテロアリール［例えば、（アルコキシカルボニル）ヘテロアリール］；シアノヘテロアリール；アミノヘテロアリール［例えば、（（アルキルスルホニル）アミノ）ヘテロアリールおよび（（ジアルキル）アミノ）ヘテロアリール］；（アミド）ヘテロアリール［例えば、アミノカルボニルヘテロアリール、（（アルキルカルボニル）アミノ）ヘテロアリール、（（（（アルキル）アミノ）アルキル）アミノカルボニル）ヘテロアリール、（（（ヘテロアリール）アミノ）カルボニル）ヘテロアリール、（（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル）ヘテロアリールおよび（（アルキルカルボニル）アミノ）ヘテロアリール］；（シアノアルキル）ヘテロアリール；（アルコキシ）ヘテロアリール；（スルファモイル）ヘテロアリール［例えば、（アミノスルホニル）ヘテロアリール］；（スルホニル）ヘテロアリール［例えば、（アルキルスルホニル）ヘテロアリール］；（ヒドロキシアルキル）ヘテロアリール；（アルコキシアルキル）ヘテロアリール；（ヒドロキシ）ヘテロアリール；（（カルボキシ）アルキル）ヘテロアリール；（（（ジアルキル）アミノ）アルキル］ヘテロアリール；（ヘテロシクロ脂肪族）ヘテロアリール；（シクロ脂肪族）ヘテロアリール；（ニトロアルキル）ヘテロアリール；（（（アルキルスルホニル）アミノ）アルキル）ヘテロアリール；（（アルキルスルホニル）アルキル）ヘテロアリール；（シアノアルキル）ヘテロアリール；（アシル）ヘテロアリール［例えば、（アルキルカルボニル）ヘテロアリール］；（アルキル）ヘテロアリールおよび（ハロアルキル）ヘテロアリール［例えば、トリハロアルキルヘテロアリール］が挙げられる。

本明細書で使用される「ヘテロアリール脂肪族」（例えば、ヘテロアラルキル基）は、ヘテロアリール基で置換されている脂肪族基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を指す。「脂肪族」、「アルキル」および「ヘテロアリール」は、上記に定義されている。

本明細書で使用される「ヘテロアラルキル」基は、ヘテロアリール基で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を指す。「アルキル」および「ヘテロアリール」は両方とも、上記に定義されている。ヘテロアラルキルは、１つまたはそれを超える置換基、例えば、アルキル（例えば、カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル、例えば、トリフルオロメチル）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイルで場合により置換されている。

本明細書で使用される「環状部分」および「環状基」は、単環式、二環式および三環式環系、例えば、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリールまたはヘテロアリールを指し、これらはそれぞれ、先に定義されている。

本明細書で使用される「架橋二環式環系」は、二環式複素環脂肪族環系または二環式シクロ脂肪族環系であって、環が架橋されているものを指す。架橋二環式環系の例としては、限定されないが、アダマンタニル、ノルボルナニル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．３．１］ノニル、ビシクロ［３．２．３］ノニル、２−オキサビシクロ［２．２．２］オクチル、１−アザビシクロ［２．２．２］オクチル、３−アザビシクロ［３．２．１］オクチルおよび２，６−ジオキサ−トリシクロ［３．３．１．０^３，７］ノニルが挙げられる。架橋二環式環系は、１つまたはそれを超える置換基、例えば、アルキル（例えば、カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル、例えば、トリフルオロメチル）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイルで場合により置換されていてもよい。

本明細書で使用される「アシル」基は、ホルミル基またはＲ^Ｘ−Ｃ（Ｏ）−（例えば、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、「アルキルカルボニル」とも称される）（式中、Ｒ^Ｘおよび「アルキル」は、先に定義されている）を指す。アセチルおよびピバロイルは、アシル基の例である。

本明細書で使用される「アロイル」または「ヘテロアロイル」は、アリール−Ｃ（Ｏ）−またはヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−を指す。アロイルまたはヘテロアロイルのアリールおよびヘテロアリール部分は、先に定義されるように場合により置換されている。

本明細書で使用される「アルコキシ」基は、アルキル−Ｏ−基（式中、「アルキル」は、先に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「カルバモイル」基は、構造−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^ＸＲ^Ｙまたは−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−Ｏ−Ｒ^Ｚ（式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、上記に定義されており、Ｒ^Ｚは、脂肪族、アリール、アリール脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ヘテロアリールまたはヘテロアリール脂肪族であり得る）を有する基を指す。

本明細書で使用される「カルボキシ」基は、末端基として使用される場合には−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ^Ｘ、−ＯＣ（Ｏ）Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^Ｘ；または内部基として使用される場合には−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−を指す。

本明細書で使用される「ハロ脂肪族」基は、１〜３個のハロゲンで置換されている脂肪族基を指す。例えば、ハロアルキルという用語は、基−ＣＦ_３を含む。

本明細書で使用される「メルカプト」基は、−ＳＨを指す。

本明細書で使用される「スルホ」基は、末端に使用される場合には−ＳＯ_３Ｈもしくは−ＳＯ_３Ｒ^Ｘ、または内部に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）_３−を指す。

本明細書で使用される「スルファミド」基は、末端に使用される場合には構造−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^ＹＲ^Ｚ、および内部に使用される場合には−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｙ−（式中、Ｒ^Ｘ、Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「スルホンアミド」基は、末端に使用される場合には構造−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^ＸＲ^Ｙもしくは−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒ^Ｚ；または内部に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｘ−もしくは−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−（式中、Ｒ^Ｘ、Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「スルファニル」基は、末端に使用される場合には−Ｓ−Ｒ^Ｘ、および内部に使用される場合には−Ｓ−（式中、Ｒ^Ｘは、上記に定義されている）を指す。スルファニルの例としては、脂肪族−Ｓ−、シクロ脂肪族−Ｓ−、アリール−Ｓ−などが挙げられる。

本明細書で使用される「スルフィニル」基は、末端に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）−Ｒ^Ｘ、および内部に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）−（式中、Ｒ^Ｘは、上記に定義されている）を指す。例示的なスルフィニル基としては、脂肪族−Ｓ（Ｏ）−、アリール−Ｓ（Ｏ）−、（シクロ脂肪族（脂肪族））−Ｓ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｓ（Ｏ）−、ヘテロシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｓ（Ｏ）−などが挙げられる。

本明細書で使用される「スルホニル」基は、末端に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒ^Ｘ、および内部に使用される場合には−Ｓ（Ｏ）_２−（式中、Ｒ^Ｘは、上記に定義されている）を指す。例示的なスルホニル基としては、脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、アリール−Ｓ（Ｏ）_２−、（シクロ脂肪族（脂肪族））−Ｓ（Ｏ）_２−、シクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、ヘテロシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、ヘテロアリール−Ｓ（Ｏ）_２−、（シクロ脂肪族（アミド（脂肪族）））−Ｓ（Ｏ）_２−などが挙げられる。

本明細書で使用される「スルホキシ」基は、末端に使用される場合には−Ｏ−ＳＯ−Ｒ^Ｘまたは−ＳＯ−Ｏ−Ｒ^Ｘ、および内部に使用される場合には−Ｏ−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）−Ｏ−（式中、Ｒ^Ｘは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「ハロゲン」または「ハロ」基は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。

本明細書で使用される場合、単独でまたは別の基と併せて使用される「アルコキシカルボニル」（これは、カルボキシという用語に包含される）は、基、例えば、アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−を指す。

本明細書で使用される「アルコキシアルキル」は、アルキル基、例えば、アルキル−Ｏ−アルキル−（式中、アルキルは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「カルボニル」は、−Ｃ（Ｏ）−を指す。

本明細書で使用される「オキソ」は、＝Ｏを指す。

本明細書で使用される「ホスホ」という用語は、ホスフィナートおよびホスホナートを指す。ホスフィナートおよびホスホナートの例としては、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ^Ｐ）_２（式中、Ｒ^Ｐは、脂肪族、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族またはアミノである）が挙げられる。

本明細書で使用される「アミノアルキル」は、構造（Ｒ^Ｘ）_２Ｎ−アルキル−を指す。

本明細書で使用される「シアノアルキル」は、構造（ＮＣ）−アルキル−を指す。

本明細書で使用される「ウレア」基は、構造−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−ＮＲ^ＹＲ^Ｚを指し、「チオウレア」基は、末端に使用される場合には構造−ＮＲ^Ｘ−ＣＳ−ＮＲ^ＹＲ^Ｚ、および内部に使用される場合には−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−ＮＲ^Ｙ−または−ＮＲ^Ｘ−ＣＳ−ＮＲ^Ｙ−（式中、Ｒ^Ｘ、Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「グアニジン」基は、構造−Ｎ＝Ｃ（Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ））Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ）または−ＮＲ^Ｘ−Ｃ（＝ＮＲ^Ｘ）ＮＲ^ＸＲ^Ｙ（式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、上記に定義されている）を指す。

本明細書で使用される「アミジノ」基という用語は、構造−Ｃ＝（ＮＲ^Ｘ）Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ）（式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、上記に定義されている）を指す。

一般に、「近接」という用語は、２個またはそれを超える炭素原子を含む基の置換基の配置であって、置換基が隣接する炭素原子に結合しているものを指す。

一般に、「ジェミナル」という用語は、２個またはそれを超える炭素原子を含む基の置換基の配置であって、置換基が同じ炭素原子に結合しているものを指す。

「末端に」および「内部に」という用語は、置換基内の基の位置を指す。基が、化学構造の残部にさらに結合してない置換基の末端に存在する場合、前記基は末端にある。カルボキシアルキル、すなわち、Ｒ^ＸＯ（Ｏ）Ｃ−アルキルは、末端に使用されるカルボキシ基の例である。基が、化学構造の置換基の中央に存在する場合、前記基は内部にある。アルキルカルボキシ（例えば、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−またはアルキル−ＯＣ（Ｏ）−）およびアルキルカルボキシアリール（例えば、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール−またはアルキル−Ｏ（ＣＯ）−アリール−）は、内部に使用されるカルボキシ基の例である。

本明細書で使用される「脂肪族鎖」は、分枝状または直鎖状脂肪族基（例えば、アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基）を指す。直鎖状脂肪族鎖は、構造−［ＣＨ_２］_ｖ−（式中、ｖは、１〜１２である）を有する。分枝状脂肪族鎖は、１つまたはそれを超える脂肪族基で置換されている直鎖状脂肪族鎖である。分枝状脂肪族鎖は、構造−［ＣＱＱ］_ｖ−（式中、各Ｑは独立して、水素または脂肪族基であるが；Ｑは、少なくとも１つの場合において脂肪族基でなければならない）を有する。脂肪族鎖という用語は、アルキル鎖、アルケニル鎖およびアルキニル鎖（アルキル、アルケニルおよびアルキニルは、上記に定義されている）を含む。

「場合により置換されている」という語句は、「置換または非置換」という語句と互換的に使用される。本明細書に記載されるように、本発明の化合物は、例えば、上記に一般に示されているように、または本発明の特定のクラス、サブクラスおよび種により例示されているように、１つまたはそれを超える置換基で場合により置換されていてもよい。本明細書に記載されるように、可変部Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、ＸおよびＹならびに本明細書に記載される式に含まれる他の可変部は、特定の基、例えば、アルキルおよびアリールを包含する。特に注記がない限り、可変部の特定の基はそれぞれ、本明細書に記載される１つまたはそれを超える置換基で場合により置換されていてもよい。特定の基の各置換基は、ハロ、シアノ、オキソ、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、アリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ヘテロアリール、ハロアルキルおよびアルキルの１〜３個でさらに場合により置換されている。例えば、アルキル基は、アルキルスルファニルで置換されていてもよく、アルキルスルファニルは、ハロ、シアノ、オキソ、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、アリール、ハロアルキルおよびアルキルの１〜３個で場合により置換されていてもよい。さらなる例として、（シクロアルキル）カルボニルアミノのシクロアルキル部分は、ハロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、ハロアルキルおよびアルキルの１〜３個で場合により置換されていてもよい。２つのアルコキシ基が同じ原子または隣接する原子に結合している場合、それら２つのアルコキシ基は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成し得る。

一般に、「置換されている」という用語は、「場合により」という用語と共に用いられるか否かにかかわらず、特定の置換基のラジカルによる、所定の構造における水素ラジカルの交換を指す。特定の置換基は、定義において先に記載されており、化合物の説明およびその実施例において以下に記載されている。特に指示がない限り、場合により置換されている基は、基の置換可能な各位置に置換基を有し得、あらゆる所定の構造における複数の位置が、特定の群から選択される複数の置換基で置換されていてもよい場合、置換基は、各位置において、同じものでもよいし、または異なるものでもよい。環置換基、例えば、ヘテロシクロアルキルは、別の環、例えば、シクロアルキルに結合して、スピロ−二環式環系を形成し得る（例えば、両環は、１つの共通の原子を共有する）。当業者であれば認識するように、本発明により想定される置換基の組み合わせは、安定なまたは化学的に可能な化合物の形成をもたらす組み合わせである。

本明細書で使用される「安定なまたは化学的に可能な」という語句は、生産、検出、好ましくは回収、精製、および本明細書に開示される目的の１つまたはそれを超えるものの使用を可能にする条件に供された場合に、実質的に変化しない化合物を指す。いくつかの実施形態では、安定な化合物または化学的に可能な化合物は、４０℃またはそれ未満の温度で、水分の非存在下でまたは他の化学的に反応性の条件下で少なくとも１週間維持された場合に、実質的に変化されないものである。

特に指定がない限り、本明細書に示される構造はまた、構造のすべての異性体（例えば、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび幾何的（または立体配座））形態；例えば、それぞれの不斉中心についてＲおよびＳ配置、（Ｚ）および（Ｅ）二重結合異性体ならびに（Ｚ）および（Ｅ）立体配座異性体を含むことが意図される。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学的異性体ならびにエナンチオマー、ジアステレオマーおよび幾何的（または立体配座）混合物は、本発明の範囲内である。

さらに、特に指定がない限り、本明細書に示される構造はまた、１つまたはそれを超える同位体含有原子の存在においてのみ異なる化合物を含むものである。例えば、水素の重水素またはトリチウムによる交換、または炭素の^１３Ｃ−または^１４Ｃ含有炭素による交換を除いて、本構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。このような化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールもしくはプローブとして、または治療剤として有用である。

化合物

一態様では、本発明は、式Ｉの化合物
（式中
は結合であるか、または存在せず、
Ｒ_１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_１は、場合により置換されており；
Ｒ_２は、水素またはＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_２は、場合により置換されており；
Ｒ_３は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_３は、場合により置換されており；
各Ｒ_４は独立して、水素、
（式中、Ｘは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ_４は、場合により置換されており；
Ｒ_５は、水素またはＣ_１−４アルキルであり；
Ｒ_６は、水素またはハロであり；
Ｒ_７は、水素またはハロであり；
ｎは、０、１、２、３、４または５である）またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。

いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている。

一実施形態では、Ｒ_１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、アラルキル、−ＯＨまたはアルコキシである。

別の実施形態では、Ｒ_１は、−ＯＨまたはアルコキシである。

別の実施形態では、Ｒ_１は、アルコキシである。

さらなる実施形態では、Ｒ_１は、メトキシである。

一実施形態では、Ｒ_１は、Ｃ_１−６アルキルである。

別の実施形態では、Ｒ_１は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。

さらなる実施形態では、Ｒ_１は、エチルである。

別のさらなる実施形態では、Ｒ_１は、プロピルである。

一実施形態では、Ｒ_１は、アラルキルである。

さらなる実施形態では、Ｒ_１は、ベンジルである。

一実施形態では、Ｒ_２は、水素である。

一実施形態では、Ｒ_２は、Ｃ_１−６アルキルである。

さらなる実施形態では、Ｒ_２は、メチルである。

一実施形態では、Ｒ_３は、水素、Ｃ_１−６アルキル、アラルキルまたはヘテロアラルキルであり、Ｒ_３は、場合によりオキソで置換されている。

一実施形態では、Ｒ_３は、水素である。

一実施形態では、Ｒ_３は、構造
（式中、Ｒ_３ａは、Ｃ_１−６アルキル、アリールまたはヘテロアリールである）を有する。

一実施形態では、Ｒ_３ａは、Ｃ_１−６アルキルである。さらなる実施形態では、Ｒ_３ａは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。またさらなる実施形態では、Ｒ_３ａは、エチルである。

別の実施形態では、Ｒ_３ａは、ヘテロアリールである。さらなる実施形態では、Ｒ_３ａは、フリル、ピロリル、ピロゾリル、トリアゾリル、フェニル、ピリジル、ピリミジルまたはピラジルである。またさらなる実施形態では、Ｒ_３ａは、フリルである。

別の実施形態では、Ｒ_３は、オキソで場合により置換されているＣ_１−６アルキルである。

さらなる実施形態では、Ｒ_３は、
である。

またさらなる実施形態では、Ｒ_３は、
である。

一実施形態では、Ｒ_３は、オキソで場合により置換されているヘテロアラルキルである。

一実施形態では、Ｒ_３は、
である。

一実施形態では、Ｒ_４は、
（式中、Ｘは、−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ_４は、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている。

一実施形態では、Ｒ_５は、水素である。

別の実施形態では、Ｒ_５は、メチル、エチル、プロピルまたはブチルである。さらなる実施形態では、Ｒ_５は、メチルである。

一実施形態では、Ｒ_６は、フルオロである。別の実施形態では、Ｒ_６は、クロロである。別の実施形態では、Ｒ_６は、ブロモである。別の実施形態では、Ｒ_６は、ヨードである。

一実施形態では、ｎは、１である。

一実施形態では、Ｙは、アラルキルである。

一実施形態では、Ｙは、ベンジルである。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉａの化合物
（式中、可変部Ｒ_１、Ｒ_２、ＸおよびＹは、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉａ−１の化合物
（式中、可変部Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６およびｎは、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉｂの化合物
（式中、可変部Ｒ_１、Ｒ_２、ＸおよびＹは、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉａ（ａ）の化合物
（式中、可変部Ｒ_１およびＲ_２は、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉｂ（ａ）の化合物
（式中、可変部Ｒ_１およびＲ_２は、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

いくつかの態様では、本発明は、式Ｉｂ（ｂ）の化合物
（式中、可変部Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は、上記のように定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を含む。

一実施形態では、前記化合物は、
から選択される。

別の態様では、本発明は、式Ｉの化合物と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む医薬組成物を提供する。

また別の態様では、本発明は、生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を有効量の式Ｉの化合物と接触させる工程を含む方法を提供する。

また別の態様では、本発明は、患者における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、有効量の式Ｉの化合物を前記患者に投与する工程を含む方法を提供する。

この態様の一実施形態では、疾患は、喘息、関節炎、狼瘡、クローン病、炎症性腸疾患、セリアック病、糸球体腎炎、尋常性座瘡、白血病および膵臓癌から選択される。さらなる実施形態では、疾患は、喘息および関節炎から選択される。

薬学的に許容され得る組成物

本発明の一態様では、本明細書に記載される化合物のいずれかを含む薬学的に許容され得る組成物であって、薬学的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルを場合により含む薬学的に許容され得る組成物が提供される。特定の実施形態では、これらの組成物は、１つまたはそれを超えるさらなる治療剤を場合によりさらに含む。

本発明の化合物のいくつかは、処置のために遊離型で、または適切な場合、その薬学的に許容され得る誘導体もしくはプロドラッグとして存在し得るとも認識されよう。本発明によれば、薬学的に許容され得る誘導体またはプロドラッグとしては、限定されないが、薬学的に許容され得る塩、エステル、このようなエステルの塩、またはそれを必要とする患者に投与した場合に、本明細書に別様に記載される化合物もしくはその代謝産物もしくは残基を直接的もしくは間接的に提供することができる任意の他の付加体もしくは誘導体が挙げられる。

本明細書で使用される「薬学的に許容され得る塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、ヒトおよび下等動物の組織と接触して使用するのに適切な塩であって、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などを伴わず、合理的なリスク・ベネフィット比に見合う塩を指す。「薬学的に許容され得る塩」は、本発明の化合物の任意の非毒性塩または本発明の化合物のエステルの任意の非毒性塩であって、レシピエントに投与した場合に、本発明の化合物またはその阻害活性代謝産物もしくは残基を直接的または間接的に提供することができるものを意味する。

薬学的に許容され得る塩は、当技術分野で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、薬学的に許容され得る塩を詳細に、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１−１９（これは、参照により本明細書に組み込まれる）に記載している。本発明の化合物の薬学的に許容され得る塩としては、適切な無機および有機酸および塩基に由来するものが挙げられる。薬学的に許容され得る非毒性の酸付加塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸または有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸と形成された、または当技術分野で使用される他の方法、例えば、イオン交換を使用することにより形成されたアミノ基の塩である。

他の薬学的に許容され得る塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エジシル酸塩（エタンジスルホン酸塩）、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。適切な塩基に由来する塩としては、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ^＋（Ｃ_１−４アルキル）_４塩が挙げられる。本発明はまた、本明細書に開示される化合物のあらゆる塩基性窒素含有基の四級化も想定する。水溶性生成物または油溶性生成物または分散性生成物は、このような四級化により得られ得る。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが挙げられる。さらなる薬学的に許容され得る塩としては、適切な場合、非毒性の、対イオン、例えば、ハライド、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩およびアリールスルホン酸塩を使用して形成された、アンモニウム、四級アンモニウムおよびアミンカチオンが挙げられる。

上記のように、本発明の薬学的に許容され得る組成物は、薬学的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルをさらに含み、本明細書で使用される場合、これらとしては、所望の特定の剤形に適切である、あらゆるすべての溶媒、希釈剤または他の液体媒体、分散または懸濁アジュバント、界面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、保存剤、固体結合剤、潤滑剤などが挙げられる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｉｘｔｅｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８０）では、薬学的に許容され得る組成物の製剤化に使用される様々な担体およびそれらの公知の調製技術が開示されている。あらゆる通常の担体媒体が、例えば、任意の望ましくない生物学的効果を生成することにより、または薬学的に許容され得る組成物の任意の他の成分と有害な様式で相互作用することにより、本発明の化合物と不適合性である場合を除き、その使用は、本発明の範囲内であるとして考慮される。薬学的に許容され得る担体として役立ち得る物質のいくつかの例としては、限定されないが、以下が挙げられる：イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸またはソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロック重合体、羊毛脂、糖、例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えば、コーンスターチおよびジャガイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；トラガント末；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えば、カカオバターおよび坐薬ワックス；油、例えば、ピーナッツ油、綿実油；ベニバナ油；ゴマ油；オリーブ油；トウモロコシ油および大豆油；グリコール；例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール；エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質非含有水；等張生理食塩水；リンゲル液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝液、ならびに他の非毒性の適合性潤滑剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色料、解除剤、コーティング剤、甘味料、香味料および芳香剤、保存剤および抗酸化剤もまた、製剤化を行う者の判断にしたがって、組成物中に存在し得る。

化合物の使用および投与

別の態様では、本発明は、被験体における炎症の重症度を処置または低減する方法であって、式Ｉの化合物を含む有効量の組成物を、それを必要とする被験体、好ましくは哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。本発明はまた、被験体における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、式Ｉの化合物を含む有効量の組成物を、それを必要とする被験体、好ましくは哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。

さらに別の態様では、本発明は、グルココルチコイド受容体が関与する症状、疾患または障害の重症度を処置または低減する方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、グルココルチコイド受容体活性の欠損が関与する症状、疾患または障害を処置する方法であって、式Ｉの化合物を含む有効量の組成物を、それを必要とする被験体、好ましくは哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、正常なグルココルチコイド受容体活性を有する被験体における炎症性症状、炎症性疾患または炎症性障害を処置する方法であって、式Ｉの化合物を含む有効量の組成物を、それを必要とする被験体、好ましくは哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。

別の態様では、本発明は、グルココルチコイド受容体が関与する症状、疾患または障害の重症度を処置または低減する方法であって、前記症状、疾患または障害が、喘息、関節炎、狼瘡、クローン病、炎症性腸疾患、セリアック病、糸球体腎炎、尋常性座瘡、白血病および膵臓癌から選択される方法を提供する。

本発明によれば、前記化合物または薬学的に許容され得る組成物の「有効量」は、上記疾患、障害または症状の１つまたはそれを超える重症度を処置または低減するのに有効な量である。

本発明の方法によれば、上記疾患、障害または症状の１つまたはそれを超える重症度を処置または低減するのに有効な任意の量および任意の投与経路を使用して、前記化合物および組成物を投与し得る。

必要とされる正確な量は、被験体の種、年齢および全身状態、感染の重症度、特定の薬剤、その投与様式などに依存して、被験体によって変動するであろう。本発明の化合物は、好ましくは、投与の容易性および用量の均一性のために用量単位形態で製剤化される。「用量単位形態」という表現は、処置されるべき患者のために適切な物理的に別々の単位の薬剤を指す。しかしながら、本発明の化合物および組成物の１日使用総量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されると理解されよう。任意の特定の患者または生物のための特定の有効な用量レベルは、処置されるべき障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別および食事；投与時間、投与経路、使用される特定の化合物の排泄率；処置の持続時間；使用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物および医学技術分野で周知の同様の因子を含む様々な因子に依存する。本明細書で使用される「患者」という用語は、動物、好ましくは哺乳類、最も好ましくはヒトを意味する。

本発明の薬学的に許容され得る組成物は、ヒトおよび他の動物に、経口的に、直腸性に、非経口的に、嚢内に、腟内に、腹腔内に、局所的に（粉末、軟膏、点滴剤またはパッチにより）、頬側に、経口または点鼻薬としてなど、処置されるべき感染の重症度に応じて投与され得る。特定の実施形態では、本発明の化合物は、経口的または非経口的に、約０．０１ｍｇ／被験体の体重ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／被験体の体重ｋｇ／日、好ましくは約０．５ｍｇ／被験体の体重ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／被験体の体重ｋｇ／日の用量レベルで、１日１回またはそれを超えて投与され得ることにより、所望の治療効果が得られる。

経口投与のための液体剤形としては、限定されないが、薬学的に許容され得る乳濁液、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が挙げられる。活性化合物に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般に使用される不活性な希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（具体的には、綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびそれらの混合物を含有し得る。不活性な希釈剤に加えて、経口組成物はまた、アジュバント、例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、香味料および芳香剤を含み得る。

注射用調製物、例えば、無菌注射用水性または油性懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して公知の技術にしたがって製剤化され得る。無菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液としての、無菌注射用溶液、懸濁液または乳濁液であり得る。使用され得る許容される媒体および溶媒のなかでも、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張塩化ナトリウム溶液が挙げられる。さらに、無菌固定油は、通常、溶媒または懸濁化剤として用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含むあらゆる無刺激性固定油が用いられ得る。さらに、注射剤の調製では、脂肪酸、例えば、オレイン酸が使用される。

注射用製剤は、例えば、細菌−保持フィルタを介したろ過により、または使用前に無菌水もしくは他の無菌注射用媒体に溶解もしくは分散され得る無菌固体組成物の形態に滅菌剤を組み込むことにより、無菌化され得る。

本発明の化合物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅くすることが、多くの場合に望ましい。これは、水溶解性が不良な結晶性または非晶質物質の液体懸濁液の使用により達成され得る。このため、化合物の吸収速度はその溶解速度に依存し、今度はこれが結晶サイズおよび結晶形に依存し得る。あるいは、非経口的に投与された化合物形態の遅延性吸収は、化合物を油媒体に溶解または懸濁することにより達成される。注射用デポー形態は、生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸−ポリグリコライド中に化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることにより、作られる。化合物のポリマーに対する比および用いられる特定のポリマーの性質に応じて、化合物放出速度が制御され得る。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用製剤はまた、身体組織に適合性のリポソームまたはマイクロエマルション中に化合物を封入することによっても調製される。

直腸または腟投与のための組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、環境温度では固体であるが、身体温度では液体であり、したがって直腸または膣腔で融解して活性化合物を放出する適切な非刺激性の賦形剤または担体、例えば、カカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬ワックスと混合することによって調製され得る坐薬である。

経口投与のための固体剤形としては、カプセル、錠剤、丸剤、粉末および顆粒が挙げられる。このような固体剤形では、活性化合物は、少なくとも１つの不活性な薬学的に許容され得る賦形剤または担体、例えば、クエン酸ナトリウムまたは第２リン酸カルシウム、および／またはａ）充填剤または増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロースおよびアラビアゴムなど、ｃ）湿潤剤、例えば、グリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩および炭酸ナトリウム、ｅ）溶液遅延剤、例えば、パラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば、四級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど、ｈ）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイト粘土、およびｉ）潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物と混合される。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含み得る。

類似のタイプの固体組成物はまた、賦形剤、例えば、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、ソフトフィルドゼラチンカプセルおよびハードフィルドゼラチンカプセルにおける充填剤として用いられ得る。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶コーティングおよび他の医薬製剤化技術分野で周知のコーティングを使用して調製することができる。それらは乳白剤を場合により含み得、有効成分のみを、または優先的に、腸管の特定の部分において、場合により、遅延性様式で放出する組成物であり得る。使用され得る包埋組成物の例としては、重合物質およびワックスが挙げられる。類似のタイプの固体組成物はまた、賦形剤、例えば、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、ソフトフィルドゼラチンカプセルおよびハードフィルドゼラチンカプセルにおける充填剤として用いられ得る。

活性化合物はまた、１つまたはそれを超える上記賦形剤を有するマイクロカプセル化形態におけるものであり得る。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶コーティング、放出制御コーティングおよび他の医薬製剤化技術分野で周知のコーティングを使用して調製され得る。このような固体剤形では、活性化合物は、少なくとも１つの不活性な希釈剤、例えば、スクロース、ラクトースまたはデンプンと混合され得る。このような剤形はまた、通常の習慣のとおりに、不活性な希釈剤以外のさらなる物質、例えば、錠剤化潤滑剤および他の錠剤化アジュバント、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび結晶セルロースを含み得る。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含み得る。それらは乳白剤を場合により含有し得、腸管の特定部位において、場合により遅延様式で有効成分のみを、または有効成分を優先的に放出する組成物であり得る。使用され得る包埋組成物の例としては、重合物質およびワックスが挙げられる。

本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形としては、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、噴霧剤、吸入剤またはパッチが挙げられる。活性成分は、無菌条件下で薬学的に許容され得る担体および、必要とされ得る場合にはあらゆる必要な保存剤または緩衝剤と混合される。眼用製剤、点耳薬および点眼薬もまた本発明の範囲内であると企図される。さらに、本発明は、身体への化合物の制御送達を提供するというさらなる利点を有する経皮パッチの使用を企図する。このような剤形は、化合物を適切な媒体中に溶解または分配することによって調製される。吸収促進薬もまた、化合物の皮膚を横切る流動を上昇させるために使用され得る。速度は、速度制御膜を提供することにより、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルに分散することにより、制御され得る。

グルココルチコイド受容体の調節因子として本発明で利用される化合物の活性は、当技術分野および本明細書の実施例に一般に記載される方法にしたがってアッセイされ得る。

本明細書の実施例は、本発明がより十分に理解され得るように提供されるものであり、決して限定的であることを意味するものではない。

一般的な合成スキーム

スキーム１は、市販のコルチゾールから式１−Ｅの化合物を合成するための一般的な合成スキームを提供し、Ｒ_１、Ｒ_４およびＲ_３ａは、上記に定義される。過ヨウ素酸などの試薬でコルチゾールを酸化して式１−Ａのカルボン酸を得、これを、合成における後の段階でさらに官能化し得る。塩基およびアルデヒド試薬、例えばＮａＨ／ギ酸メチル条件で１−Ａを処理して、式１−Ｂの化合物を得る。ヒドラジン試薬、例えばフェニルヒドラジンまたはＮ−ベンジル−３−ヒドラジニルベンズアミドで１−Ｂを処理して、式１−Ｃの化合物を得る。式ＮＨ_２−Ｒ_１のアミン試薬で式１−Ｃの化合物のカルボン酸部分を官能化して、式１−Ｄの化合物を得る。構造
のアシルクロライドで１７αヒドロキシル置換基を官能化して、式１−Ｅの化合物を得る。

上記スキーム２にしたがって、２−Ａなどの出発化合物から、式２−Ｉの化合物を合成し得る。使用する反応工程、これらの工程の手順および試薬は例示的なものであり、決して本発明を限定するものではない。

２−Ｂを得るための、２−Ａのα−ヒドロキシアセチル基のヒドロキシルメチル基の酸化開裂は、過ヨウ素酸を使用して達成し得る。例えば、水素ガスおよびＰｄ／Ｃ触媒を使用して、２−Ｂのオレフィン部分を還元して、飽和生成物２−Ｃを得る。続いて、例えば、分子臭素を使用して、臭素化して、ビス−α，α’ブロミド化合物２−Ｄを得る。塩基、例えば炭酸カルシウムおよび触媒、例えば臭化リチウムを使用して、臭化物置換基を二重脱離して、２−Ｅを得る。塩基、例えば水素化ナトリウムを用いて、２−Ｅのエノラートの生成を達成し得、続いて、ギ酸メチルの求核付加により、化合物２−Ｆを得ることができる。

フェニルヒドラジンを使用して２−Ｆをアミノ化して、ピラジン化合物２−Ｇを得ることができる。続いて、式Ｒ_３−Ｃ（Ｏ）−Ｘの活性化カルボニル化合物（式中、Ｘは、塩化物などの脱離基である）を使用して、２−Ｇの遊離ヒドロキシル基をエステル化して、式２−Ｈの化合物を得ることができる。式Ｒ_２−ＮＨ_２のアミンを使用して、式２−Ｈの化合物のカルボン酸部分をアミド化して、式２−Ｉの化合物を得ることができる。

材料および方法

タンパク質の発現および精製。突然変異Ｆ６０２Ａ、Ｃ６２２Ｙ、Ｔ６６８Ｖ、Ｓ６７４Ｔ、Ｖ６７５Ｉ、Ｋ６９９ＡおよびＫ７０３Ａ（フランカルボン酸モメタゾンの場合）ならびに突然変異Ｆ６０２Ａ、Ｃ６２２Ｙ、Ｔ６６８Ｖ、Ｓ６７４Ｔ、Ｖ６７５Ｉ、Ｅ６８４ＡおよびＥ６８８Ａ（コルチゾールの場合）を含有するＧＲ ＬＢＤ（残基５２５−７７７）を、発現ベクターｐＥＴ２４ａ（Ｎｏｖａｇｅｎ）から６ｘＨｉｓ−ＧＳＴ融合タンパク質として発現させた。この修飾融合タンパク質は、Ｎ末端にＨｉｓ６タグ（ＭＫＫＧＨＨＨＨＨＨＧ）を含有し、ＧＳＴとＧＲ ＬＢＤとの間にトロンビンプロテアーゼ部位を含有する。発現プラスミドで形質転換したＢＬ２１ＤＥ３細胞を、１６℃のＬＢブロス中で約１のＯＤ６００まで成長させ、０．１ｍＭ ＩＰＴＧおよび５０μＭフランカルボン酸モメタゾンまたはコルチゾールで誘導した。細胞を回収し、細胞１２リットル当たり２００ｍｌの抽出緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ［ｐＨ８］、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２Ｍ尿素、１０％グリセロール＋１μＭリガンド）に再懸濁し、１０００Ｐａに圧力を設定したフレンチプレスに３回通した。溶解物を２０，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、上清を２５ｍｌニッケルカラムにロードした。７００ｍｌの抽出緩衝液でカラムを洗浄し、３００ｍｌの５０％緩衝液Ｂ（２５ｍＭ Ｔｒｉｓ［ｐＨ８］、５００ｍＭイミダゾール（Ｉｍｉｚａｄｏｌｅ）、１０％グリセロール、１μＭリガンド）で溶出した。低温室において、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ［ｐＨ８］、５００ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、１μＭリガンドに対して透析しながら、１：１０００のプロテアーゼ／タンパク質比で、ＧＲ ＬＢＤをトロンビンで一晩切断した。Ｎｉ−ＮＴＡニッケルカラムに結合することによって、Ｈ６ＧＳＴタグを除去した。ゲルろ過（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ［ｐＨ８］、５００ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＤＴＴ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０％グリセロール、１μＭリガンド）によって、フロースルーをさらに精製した。フランカルボン酸モメタゾン結合タンパク質をより長いバージョンのＳＲＣ２−３ペプチド：ＳＰＫＫＫＥＮＡＬＬＲＹＬＬＤＫＤＤＴＫＤと複合体形成させ、６ｍｇ／ｍｌにろ過濃縮した。コルチゾールＧＲ ＬＢＤをより短いバージョンのＳＲＣ２−３：ＫＥＮＡＬＬＲＹＬＬＤＫＤＤおよび０．２％Ｂ−オクチルグルコシドと複合体形成させ、７ｍｇ／ｍｌにろ過濃縮した。

結晶化。ＧＰ２ペプチドと複合体形成した１μｌのタンパク質を含有する懸滴、ならびに０．１Ｍクエン酸ナトリウム［ｐＨ６］および２．２Ｍ塩化ナトリウムを含有する２μｌのウェル溶液中で、フランカルボン酸モメタゾンＧＲ結晶を室温で成長させた。１μｌのタンパク質複合体を含有する懸滴、ならびに０．１Ｍイミダゾール（ｐＨ６．５）、１Ｍ酢酸ナトリウム三水和物を含有する１μｌのウェル溶液中で、コルチゾールＧＲ結晶を室温で成長させた。両方とも、３０％スクロースのウェル緩衝液を抗凍結剤として使用した。

構造決定。ＣＣＰ４プログラムＰＨＡＳＥＲを分子置換（３６）に使用し、検索モデルとしてＧＲ ＬＢＤ／デキサメタゾン構造（ＰＤＢコード：１Ｍ２Ｚ）（２７）を用いた。初期モデルを手動で再構築し、ＣＮＳ（３７）およびＣＣＰ４プログラムＲＥＦＭＡＣ５（３８）を使用して微調整した。ＰｙＭＯＬ（Ｔｈｅ ＰｙＭＯＬ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒａｐｈｉｃｓ Ｓｙｓｔｅｍ，Ｖｅｒｓｉｏｎ １．３，Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ ＬＬＣ）を使用して、すべての構造図を作成した。

細胞トランスフェクションおよびレポーターアッセイ。トランスフェクションの前日に、２４ウェルプレートにおいて、ＡＤ２９３細胞を２０，０００／ウェルで分けた。転写促進の場合、Ｘ−ｔｒｅｍｅＧＥＮＥ ９（Ｒｏｃｈｅ）によって、５ｎｇのｐｈＲＧｔｋＲｅｎｉｌｌａと共に１００ｎｇのｐＨＨＬｕｃ（ＭＭＴＶ−Ｌｕｃ）プラスミド、０．１ｎｇのｐＲＳｈＧＲを１ウェル当たりのＡＤ２９３細胞にトランスフェクトした。転写抑制の場合、１０ｎｇのＡＰ１−Ｌｕｃ、１００ｎｇのｐＲＳｈＧＲおよび５ｎｇのｐｈＲＧｔｋＲｅｎｉｌｌａを１ウェル当たりのＡＤ２９３細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの翌日、異なる処理（ステロイドまたはビヒクル）によって、細胞を一晩１６時間誘導した。１ｘＰａｓｓｉｖｅ ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって細胞を回収し、Ｄｕａｌ−Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によってルシフェラーゼ活性をアッセイした。Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ｖａｌｕｅ／Ｒｅｎｉｌｌａ Ｖａｌｕｅによって、相対ルシフェラーゼ単位（ＲＬＵ）としてデータをプロットした。

インビトロＧＲリガンド結合アッセイ。インビトロＧＲ結合アッセイは、以前に記載されているもの（３９）と同様である。基本的には、ホットリガンド［３Ｈ］Ｄｅｘを２５ｎＭで固定し、ＴＡＰＳ緩衝液（ｐｈ８．８）中で５％ＧＲ細胞質ゾル＋２０ｍＭモリブデン酸ナトリウムと共にインキュベートし、コールドリガンド（０．１ｎＭ〜１０μＭで変化）を追加して、ホットリガンド結合と競合させた。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５によって、標準競合曲線としてデータをプロットした。

生物学的実施例

実施例１：コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤの全体構造

ＧＲ ＬＢＤの結晶化は常に、その溶解度の問題により難題であった。タンパク質の溶解性を改善するＦ６０２Ｓ突然変異を有するＧＲ ＬＢＤに結合した高親和性リガンドＤＥＸ（２７）を用いて、元のＧＲ ＬＢＤ構造を決定した。しかしながら、コルチゾールは、ＤＥＸよりもはるかに弱いリガンドであるため、Ｆ６０２Ｓ突然変異は、内因性ホルモンであるコルチゾールに結合したＧＲ ＬＢＤを安定化するために十分ではない（図８、レーン１）。全体構造に影響を与えずにＧＲ ＬＢＤ溶解度を増加させ得るアミノ酸を同定するために、本発明者らは、ＧＲと、ＧＲよりもはるかに可溶性であるステロイドホルモンファミリーの最も近縁なメンバー（ＭＲ、アンドロゲン受容体（ＡＲ）およびプロゲステロン受容体（ＰＲ））とをアライメントした。Ｆ６０２の他に、残基Ｃ６２２、Ｔ６６８、Ｓ６７４およびＶ６７５も、前記ファミリーの保存されている配列と異なるので、本発明者らは、これらのアミノ酸を突然変異させて、保存されている残基に戻した（Ｆ６０２Ａ、Ｃ６２２Ｙ、Ｔ６６８Ｖ、Ｓ６７４ＴおよびＶ６７５Ｉ。ＡＹＶＴＩと称する）。これらの残基のほとんどは、ＰＲ ＬＢＤ構造中で上手くパッキングされるＰＲ残基を有するタンパク質の内部に見られる（２８）。実際、ＡＶＹＴＩ ＧＲ ＬＢＤは、コルチゾールに結合すると、Ｆ６０２Ｓ ＬＢＤよりもはるかに優れた溶解度を有する（図８、レーン２）。突然変異ＧＲ ＬＢＤを発現させ、１リットル当たり５ｍｇ超の収量で精製し得る。しかしながら、本発明者らは、コルチゾールまたはＭＦに結合したこの突然変異ＧＲ ＬＢＤの結晶を得ることができなかった。ＧＲ ＬＢＤは、そのヘリックスＨ９においていくつかのリジンおよびグルタミン酸残基を有し、その長い側鎖は、結晶化に影響を与え得る。表面エントロピー低減突然変異として、これらの残基のアラニン突然変異（ＭＦの場合はＫ６６９Ａ／Ｋ７０３Ａおよびコルチゾールの場合はＥ６８４Ａ／Ｅ６８８Ａ）を有するＧＲ ＬＢＤは依然として可溶性であったので（図８、レーン３および４）、本発明者らは、ＭＦおよびコルチゾールに結合したＧＲ ＬＢＤの結晶を得ることができた（図９）。これらの突然変異はすべて、リガンド結合ポケットからかなり離れており、リガンドによって媒介されるＧＲ転写促進および転写抑制機能を変化させない（図１０）。

ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤおよびコルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤの全体構造（図１Ａ）は、ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤに類似しており、１１個のヘリックスが３層のヘリカルサンドイッチバンドルにパッキングされ、リガンド結合空洞が前記バンドルの下部に埋め込まれている。データ収集の統計および微調整を表Ｓ１に要約する。コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤの全体構造は、ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤとほぼ同一であるのに対して、ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤとＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤとの間には、ヘリックス１の前のループの方向（図１Ｂでは「１」と表記されている）；ヘリックス５と６との間のループ領域の拡大（図１Ｂでは「２」と表記されている）；およびＡＦ−２ヘリックスのＣ末端方向の変化（図１Ｂでは「３」と表記されている）を含め、いくつかの顕著な差異がある。コルチゾールおよびＭＦのリガンド結合様式は、結合したリガンドおよびその周囲のポケットの残基の明確な電子密度マップによって明確に定義される（図１Ｃ）。

実施例２：コルチゾール、ＤＥＸおよびＭＦの効力、親和性

コルチゾール、ＤＥＸおよびＭＦの化学構造の変化（図２Ａ）は、グルココルチコイドの進化（単純から複雑へ、および一レベルから複数レベルへ）を映し出している。コルチゾールの構造は、基本的な４環ステロイド骨格を提供し；次いで、ＤＥＸは、１，２−ダブルボーン、１６メチル化および９αハロゲン化を追加し（図２Ａ）；さらに、ＭＦは２２位をクロル化し、より重要なことには、ＤＥＸおよびコルチゾールのヒドロキシル基を置換して、１７α位に親油性フロエステル基を追加する（図２Ａ）。ＧＲの効力に対するこれらの化学変化の効果を試験するために、本発明者らは、完全用量反応曲線の形式で、ＧＲ転写促進および転写抑制の両方に対するＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールの活性を対照比較した。転写促進の場合、本発明者らは、ＭＭＴＶ駆動ルシフェラーゼレポーター系を使用した（図２Ｂ）。ＭＦおよびＤＥＸは、飽和濃度（１μＭ）においてほぼ同じ有効性（最大活性）を示したのに対して、コルチゾールは、その飽和濃度（１０μＭ）においてＤＥＸの有効性のわずか８０％であった。ＤＥＸと比べて、ＭＦの用量反応曲線は、左方向へのシフトが大きかったが、これは、ＭＦがＤＥＸよりも２０倍を超えて高効力であることを示している。一方、コルチゾールの曲線は、右方向へのシフトは大きかったが、これは、コルチゾールがＤＥＸよりも１０倍未満の低効力であることを示している。転写促進におけるＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールのＥＣ５０値は、それぞれ０．３３ｎＭ、６．７ｎＭおよび７０ｎＭであった。

転写抑制の場合、ＡＰ１駆動のルシフェラーゼレポーターを使用した（図２Ｃ）。ＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールは、それらの飽和濃度において同様の有効性を示した。この場合もやはり、ＭＦは、ＤＥＸよりもはるかに高い（６０倍）効力を示し、コルチゾールは、ＤＥＸよりもはるかに弱かった；転写抑制におけるＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールのＥＣ５０値は、それぞれ０．００５ｎＭ、０．３２ｎＭおよび２．７ｎＭであった。より高濃度のステロイドが誘導に必要であるという頻繁な観察結果と一致して、誘導効力は、各化合物の抑制効力よりも少なくとも１０倍低かった。この差異は、非常に低用量のグルココルチコイドを使用することによって、転写促進と転写抑制とを分ける機会を提供する。例えば、０．１ｎＭでは、ＭＦが達成する転写抑制効果は９５％であるが、転写促進効果はわずか２５％である（図２Ｂおよび２Ｃ）。

一般に、高い効力は、高い受容体親和性によって決定されるが、細胞補助因子も重要な役割を果たす（２９、３０）。ＭＦのＧＲ親和性を試験するために、本発明者らは、ＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールについて、インビトロＧＲリガンド結合競合アッセイを実施したところ（図２Ｄ）、ＧＲ結合親和性の順序はＭＦ＞ＤＥＸ＞コルチゾールであることが示された。ＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールのＫｉ値は、それぞれ０．７ｎＭ、８ｎＭおよび９１ｎＭであった。この結果は、本発明者らの効力の結果と一致していた。しかしながら、ＭＦとＤＥＸとの間のインビトロ結合ＩＣ５０の差はわずか約１０倍であったが、効力の差ははるかに大きかった（誘導の場合は２０倍、および抑制の場合は６０倍）（図２Ｂおよび２Ｃ）。効力の差に関する他の要素は、異なるリガンドの結合によって引き起こされる表面立体構造の変化を認識する細胞因子との相互作用が寄与しているはずである。

実施例３：コルチゾールの低いＧＲ親和性に起因する１，２単結合の柔軟性

コルチゾールの低親和性の基本的機構を理解するために、本発明者らは、コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤおよびＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤの構造比較を行った。コルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤの全体構造は、ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤとほとんど全く同じであり、顕著な立体構造の変化はない。次いで、本発明者らは、リガンド結合の詳細を調査した。上述のように、１，２二重結合、９αハロゲン化および１６メチル化の点においてのみ、ＤＥＸはコルチゾールと異なる（図２Ａ）。ＤＥＸのＣ１−Ｃ２二重結合は、ステロイドＡ環およびＣ−３ケトン基の平面化を引き起こして、Ｃ３−ケトンがＲ６１１およびＱ５７０と容易に相互作用することを可能にする（図３Ａ）。対照的に、コルチゾールのＣ１−Ｃ２単結合の柔軟性により、ステロイドＡ環は、Ｒ６１１およびＱ５７０と水素結合を形成するためには曲がる必要がある。また、未結合のコルチゾールのＣ１−Ｃ２単結合は、２つの立体構造（Ａ環平面の上および下）間で変動するので、水素結合ネットワークを形成してリガンドをその位置に保持するためには、水分子が必要である。これらの観察結果により、コルチゾールの比較的低いＧＲ親和性が説明された。Ｃ１−Ｃ２二重結合の重要性を確認するために、本発明者らは、転写促進アッセイにおいて、Ｃ１−Ｃ２二重結合（図３Ｂ、茶色）の付加の点においてのみコルチゾールと異なるプレドニゾロンの効力を測定した。実際、プレドニゾロンのＣ１−Ｃ２二重結合は、コルチゾールの用量反応曲線の約５倍の左方向へのシフトを引き起こしたので（図３Ｂ）、ＤＥＸによって引き起こされる左方向へのシフト全体の半分以上を説明することができる。効力の残りの増加は、Ｃ−９αハロゲン化およびＣ−１６メチル化に起因する可能性があり、これらは両方とも、受容体ポケット内の相互作用面を増加させる（図１１）。

実施例４：１７αフロエートは、ＭＦの高親和性を決定した

ＤＥＸの化学構造は、ほぼ平面の二次元表面を形成するが（図４Ａ）、ＭＦでは、１７αフロエートエステルは、環平面に対してほぼ９０°でその表面から突出しており、リガンドを三次元の物体にしている（図４Ｂ）。ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤでは、ステロイドＤ環の上に空間（ヘリックス３、ヘリックス５、β３〜β４ターンおよびヘリックス６〜７によって形成された疎水性空洞）がある（図４Ｃ）。ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤの構造では、突出している１７αフロエートがリガンド結合ポケットをわずかに拡大し、その空洞のほとんどのスペースを占めている。親油性１７αフロエートは、疎水性空洞によくフィットしており、関節内にしっかりと固定された球のように、周囲のＦ６２３、Ｉ６２９、Ｍ６３９、Ｃ６４３、Ｉ５５９およびＬ５６３アミノ酸と大規模な疎水性相互作用を形成しているが（図４Ｄ）、これにより、ＭＦがＤＥＸよりも１０倍高いＧＲ親和性を有する理由が説明される。

実施例５：Ｑ６４２は、異なる効力のグルココルチコイドの認識において重要な役割を果たす

ＧＲ ＬＢＤによるグルココルチコイドの基本的な認識について説明されている（２７、３１、３２）。ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤのように、Ｑ５７０およびＲ６１１は、ステロイドＡ環のＣ−３ケト基と相互作用し、Ｎ５６４は、ステロイドＣ環のＣ−１１ヒドロキシル基と相互作用し、Ｔ７３９は、側鎖のＣ−２１カルボニル基と相互作用する（図３Ａ）。これら４組の重要な水素結合は、ステロイド骨格をその位置にしっかりと固定する。ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤおよびコルチゾール結合ＧＲ ＬＢＤと比べて、ＭＦのＣ−１７αフロエート基の導入は、リガンド結合ポケット内に唯一の大きな変化（これは、ヘリックス７のＱ６４２の移動である）を引き起こす（図５Ａ）。ＤＥＸ結合ＧＲ ＬＢＤの構造では、Ｑ６４２はヘリックス７の軸に対して垂直であり、ＤＥＸのＣ−１７αヒドロキシル基と水素結合を形成する。ＭＦが結合すると、Ｃ−１７αフロエート基はＱ６４２を押し出して、それを、ヘリックス７の軸に対して平行な位置へ約９０°折り曲げる（図５Ａ）。

Ｑ６４２の方向は、ＭＦの結合時のリガンド結合ポケット内の唯一の大きな変化であるので、本発明者らは、Ｑ６４２を突然変異させて、それをより小型（Ｑ６４２Ａ）、より大型（Ｑ６４２Ｆ）、疎水性（Ｑ６４２Ｌ）もしくは帯電性（Ｑ６４２Ｅ、Ｑ６４２Ｋ）にし、またはごくわずかな変化を作った（Ｑ６４２Ｎ）。本発明者らは、準飽和濃度（ＭＦ、１ｎＭ；ＤＥＸ、１０ｎＭ）のＭＦまたはＤＥＸのいずれかを使用して、これらの突然変異を試験した。興味深いことに、ある突然変異（Ｑ６４２Ｎ）の場合、ＤＥＸの活性はほぼ抑制されたが、ＭＦの活性は依然として最大であった（図５Ｂ）。したがって、単一の突然変異は、ＭＦの活性とＤＥＸの活性とを完全に区別することができる。他の突然変異は、ＤＥＸおよびＭＦの両方の活性のほとんどを喪失させた。例外的に、Ｑ６４２Ｌでは、ＭＦの場合には活性が半分であり、ＤＥＸの場合には活性が全くないかまたは非常に低かった。ＭＦの１７αフロエートもまた、Ｍ５６０およびＭ６３９の周囲の立体構造をわずかに変化させたが、これらの残基の突然変異は、Ｑ６４２Ｎ突然変異と同じ効果を有していなかった（図１２）。

異なる効力のリガンドの認識におけるＱ６４２の重要な役割を分析するために、本発明者らは、ＧＲ転写促進アッセイにおいて、Ｑ６４２Ｎに対する結合に関するＭＦ、ＤＥＸおよびコルチゾールの完全用量反応曲線（これは、それぞれ高効力、中効力および低効力を表す）を決定した（図５Ｃ）。ＭＦの場合、Ｑ６４２Ｎの用量反応曲線は、野生型のものと区別不可能であった。ＤＥＸの場合、野生型と比べて、Ｑ６４２Ｎは曲線を右方向に大きくシフトさせ、ＥＣ５０は７．５ｎＭ〜４０ｎＭで変化し、効力は５倍減少した。コルチゾールの場合、Ｑ６４２Ｎ受容体変異体は、飽和濃度においてさえ不活性であった。したがって、単一突然変異Ｑ６４２Ｎは、高効力、中効力および低効力のリガンドを完全に区別する能力を有しており、このことは、Ｑ６４２が、異なる効力のリガンドを認識するセンサーとして機能することを示唆している。中効力または低効力のグルココルチコイド（例えば、ＤＥＸまたはコルチゾール）に結合すると、Ｑ６４２は、１７αヒドロキシル基と水素結合を形成して、結合したリガンドをリガンド結合ポケット内の位置にテザリングする。ＭＦなどの非常に強力なリガンドに結合すると、Ｑ６４２は、１７α親油性基によって押し出される。この変化は、リガンド結合によって引き起こされる他の小さな変化と協調して、ヘリックス６、６および７を不安定化し、ヘリックス５とヘリックス６との間のループを拡大させ、ＡＦ２ヘリックスのＣ末端の方向を変化させ（図１Ｂ）、高効力の特性をもたらす。

異なるリガンドの結合におけるＱ６４２の正確な役割を調査するために、本発明者らは、ＧＲ Ｑ６４２Ａのリガンド結合能を試験したところ、ＤＥＸは、単一不飽和濃度において転写促進活性をほとんど有していなかった（図５Ｂ）。野生型ＧＲまたはＧＲ Ｑ６４２Ａのいずれかを発現するＡＤ２９３細胞由来の細胞質ゾルを使用したインビトロ結合アッセイでは、Ｑ６４２Ａ突然変異体は、野生型ＧＲと比較して、ＤＥＸに対する結合親和性の実質的な喪失を示したが（Ｋｄ（Ｑ６４２Ａ）＝２２．３ｎＭ対Ｋｄ（ＷＴ）＝５．２ｎＭ）、高いリガンド濃度では、いくらかの親和性を依然として保持していた（図１３Ａ）。一方、レポーターアッセイでは、Ｑ６４２Ａは、飽和ＤＥＸ濃度においてさえ転写促進活性をほとんど示さなかった（図１３Ｂ）。これらのデータは、ＧＲ Ｑ６４２ＡのＤＥＸ転写促進の欠如が、リガンド親和性の減少と、ＧＲの活性化を阻害する立体構造変化との両方によるものであることを示している。ＤＥＸおよびコルチゾールとは異なり、Ｑ６４２は、ＭＦと水素結合を形成しない。Ｑ６４２ＡがＭＦ結合能を依然として有するかを決定するために、本発明者らは、ＧＲ Ｑ６４２Ａ突然変異体タンパク質を使用して、競合結合実験を実施した（図１３Ｃ）。ＭＦおよびコルチゾールは両方とも、ＧＲ Ｑ６４２Ａに対する^３Ｈ−ＤＥＸの結合と競合することができたが、親和性は大きく減少した（野生型ＧＲに対するＫｉが０．７ｎＭおよび９１ｎＭであったのと比較して、ＭＦおよびコルチゾールのＫｉは、それぞれ９ｎＭおよび２５０ｎＭであった）。総合すると、これらの結果は、Ｑ６４２が、Ｃ−１７αフロエート基を有するリガンドを押し出しながら、Ｃ−１７αヒドロキシル基含有リガンドと水素結合を形成することによって、ヘリックス７のリッジを支持するための支柱として作用することを示唆している。アラニンのような小さな残基でＱ６４２を置換することにより、ヘリックス７のリッジを崩壊させて、すべての転写促進の喪失をもたらし得る。

実施例６：新規なグルココルチコイドの分子設計

以下は、本明細書で議論される化合物の指定番号と相関する：

ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤの構造により、ＭＦの高い効力は、リガンド結合ポケット残基を有する１７αフロエート基の親和性増強相互作用によって主に達成されることが明らかになった。さらに非常に強力なグルココルチコイドを得るために、本発明者らは、これらの構造的な知見を新規なグルココルチコイドの設計に適用した。以前に、本発明者らは、デアシルコルチバゾール（ＤＡＣ）（ステロイドＡ環のＣ−３ケトンに巨大なフェニルピラゾール基を有する合成グルココルチコイド（図６Ａ））に結合したＧＲ ＬＢＤの結晶構造を決定した（３２）。ＤＡＣは、グルココルチコイド耐性小児急性白血病の処置に使用されている高親和性グルココルチコイドである（２２）。しかしながら、ＤＡＣは、高濃度で使用した場合に強力な細胞毒性を有し、癌細胞が薬剤耐性を徐々に生じる（３３）。ＤＡＣは、Ｃ−１７α位にヒドロキシル基を有する。ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤにより、ＤＡＣの１７αヒドロキシル基を１７αフロエート基で置換することによる、超強力なグルココルチコイドの開発の可能性が示唆された。本発明者らは、出発点としてＤＡＣ部分ＶＳＧ２４を選択した（図６Ａ）。ＭＭＴＶレポーターアッセイでは、ＶＳＧ２４それ自体は、活性をほとんど有しない。フロ酸エステル（ＶＳＧ２２）による１７αヒドロキシル基の置換は、効力および有効性の両方を大きく増加させて、ＥＣ５０の１０００倍を超える変化をもたらす。ＶＳＧ２４Ｆの効力は、ＤＥＸおよびＤＡＣのものよりも優れていた（図６Ａ）。これらのデータは、Ｃ１７α位の親油基がグルココルチコイドの効力を増加させる力を実証している。ＶＳＧ２２はＭＦよりも依然としてわずかに弱いが、Ｃ１７αにおける単純な変化による効力の劇的な変化は、この戦略がグルココルチコイドの効力を増強する力を示している。プロピオン酸フルチカゾンの効力を増強して、非常に強力な化合物フロ酸フルチカゾン（広く使用されている喘息薬）を得るために、同様の戦略が使用されている（３４）。

ＤＡＣ結合ＧＲ ＬＢＤの構造により、ＤＡＣのフェニルピラゾール基によって開かれたこれまでに発見されていないチャンネルが明らかになった（３２）。本発明者らは、より大きな基をＣ−３ケトンに導入することによって、いくつかのこのようなグルココルチコイドを設計および合成した（ＶＳＧ０２、ＶＳＧ０３、ＶＳＧ１５；図５Ｂ）。これらの化合物はすべて、比較的低いＧＲ効力を示した。ＭＦ結合ＧＲ ＬＢＤの構造に基づいて、本発明者らは、フロエート基をＣ−１７α位に導入して、それぞれ対応する化合物ＶＳＧ１０、ＶＳＧ１１およびＶＳＧ１４を生産した。全３つの化合物のうち、１７αフロエートは、ＧＲの効力および有効性の両方を大きく増加させたが（図６Ｂ；図１４）、これは、１７αフロエートが、設計グルココルチコイドの効力を増大させる一般的な戦略であり得ることをさらに示唆している。

合成例

化合物１−Ａの合成：

コルチゾール（３．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）をメタノール（６０ｍｌ）に溶解し、次いで、過ヨウ素酸（６０ｍｌの水に４．５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、メタノールを濃縮し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍｌ）を追加すると、沈殿が形成された。沈殿物をろ過し、水（１５×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、白色の固体として化合物１−Ａ（２．８ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １２．２２ （ｓ， １Ｈ）， ５．５５ （ｓ， １Ｈ）， ４．７７ （ｓ， １Ｈ）， ４．４０ − ４．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８８ （ｓ， ３Ｈ）．

化合物１−Ｂの合成：

化合物１−Ａ（１．７ｇ、５ｍｍｏｌ）を無水トルエン（１５ｍｌ）に溶解し、ギ酸メチル（２ｍｌ）を追加した。次いで、ＮａＨ（９００ｍｇ、２０ｍｍｏｌ、鉱油中６０％分散液）を追加し、反応物を室温で４時間撹拌した。次いで、１Ｎ ＨＣｌ（１２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を数回抽出した。溶媒を乾燥および除去して、黄色の泡状物質として１．８ｇの化合物１−Ｂを得、これを精製せずに次の工程で使用した。ＬＲ−Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７５．３［Ｍ−Ｈ］^＋。

化合物１−Ｃａの合成：

化合物１−Ｂ（１．８ｇ、５ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１５ｍｌ）およびＨ_２Ｏ（３ｍｌ）に溶解し、Ｎ−ベンジル−３−ヒドラジニルベンズアミド（１．１ｇ、５ｍｍｏｌ）を追加した。混合物を室温で４時間撹拌した。冷水（１００ｍｌ）を追加し、沈殿物をろ過し、Ｈ_２Ｏ（１０×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、黄色の固体として化合物１−Ｃａ（１．９ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ ９．２４ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１ （ｓ， ０Ｈ）， ７．９０ （ｄｔ， Ｊ ＝ ７．３， １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６７ − ７．５８ （ｍ， １Ｈ）， ７．５０ （ｓ， １Ｈ）， ７．３７ − ７．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ６．１５ （ｓ， １Ｈ）， ４．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３０ （ｍ， １Ｈ）， １．２３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９０ （ｓ， ２Ｈ）．
化合物１−Ｄａの合成：

化合物１−Ｃａの調製について記載されているものと同一の手順を使用して、Ｎ−ベンジル−３−ヒドラジニルベンズアミドに代えてフェニルヒドラジンを使用して、白色の固体として化合物１−Ｄａを得た。ＬＲ−Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４７．３［Ｍ−Ｈ］^＋。

化合物１の合成：

化合物１−Ｃａ（２９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、ＤＭＡＰ（１８３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｐ（２６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびエチルアミンヒドロクロリド（５０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を追加した。室温で一晩撹拌した後、Ｈ_２Ｏ（２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水した。ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（２０：１）を用いてクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、白色の固体として化合物１を得た（７５％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９８ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６０−７．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８−７．２９ （ｍ， ５Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ６．６８ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．４１ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．１１ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ５．３４ （ｓ， １Ｈ， ＯＨ）， ４．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４８ （ｂｒｓ １Ｈ， ＯＨ）， ３．５０−３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２６−３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．６７ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．５１−１．１９ （ｍ， ２０Ｈ）， １．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６０９．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２の合成：

化合物１（１２０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０５６ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、α−フロイルクロリド（２９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、白色の固体として化合物２を得た（８２％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９９ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６４−７．５２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４３ （ｓ， １Ｈ）， ７．３４−７．２８ （ｍ， ５Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．１７ （ｄ， １Ｈ）， ６．７３ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．５１−６．５０ （ｍ， １Ｈ）， ６．１４ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ５．６０ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ４．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５７ （ｂｒｓ １Ｈ， ＯＨ）， ４．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５０−３．４８ （ｍ， １Ｈ）， ３．２７−３．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０１ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７３ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．５１−１．１５ （ｍ， ２０Ｈ）， １．０３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７０３．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物３の合成：

化合物１の調製について記載されている手順と同じ手順を使用して、エチルアミンヒドロクロリドに代えて１−アミノプロパンヒドロクロリドを使用して、白色の固体として化合物３を得た（６８％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９９ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６０−７．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８−７．２９ （ｍ， ５Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ６．６４ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．１７ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．１１ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ４．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４９ （ｂｒｓ １Ｈ， ＯＨ）， ３．５０−３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２６−３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．６７ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．５１−１．１９ （ｍ， １９Ｈ）， １．０１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）， ０．８９ （ｔ， ３Ｈ）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６２３．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物４の合成：

化合物２の調製について記載されているものと同一の手順を使用して、化合物１に代えて化合物３を使用して、白色の固体として化合物４を得た（７５％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９５ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５８−７．５０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４３ （ｓ， １Ｈ）， ７．３４−７．２８ （ｍ， ５Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．１８ （ｄ， １Ｈ）， ６．９１ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．５１−６．５０ （ｍ， １Ｈ）， ６．１２ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ５．６３ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ４．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５７ （ｂｒｓ １Ｈ， ＯＨ）， ３．５０−３．４８ （ｍ， １Ｈ）， ３．２５−３．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０２ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７５ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．５１−１．１５ （ｍ， １９Ｈ）， １．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）， ０．８７ （ｔ， ３Ｈ）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７１７．４ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．
化合物６の合成：

化合物１について記載されているものと同一の手順を使用して、エチルアミンヒドロクロリドに代えてベンジルアミンを使用して、続いて、化合物２について記載されているものと同一の手順を使用して、白色の固体として化合物６を得た（６１％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９９ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５７−７．５０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４２ （ｓ， １Ｈ）， ７．３６−７．２６ （ｍ， １０Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．１３ （ｄ， １Ｈ）， ６．５４ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．５１−６．４９ （ｍ， １Ｈ）， ６．１４ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ５．８３ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ４．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５４ （ｂｒｓ １Ｈ， ＯＨ）， ４．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５０−３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．０１ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９７−１．１５ （ｍ， １７Ｈ）， １．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７６５．４ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋； ７８７．４ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋．

化合物５の合成：

化合物６について記載されているものと同一の手順を使用して、α−フロイルクロリドに代えてプロパノイルクロリドを使用して、白色の固体として化合物５を得た（５５％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．９６ （ｓ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５６−７．５０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３５ （ｓ， １Ｈ）， ７．３４−７．２８ （ｍ， １０Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ６．５２−６．５５ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．１３ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ５．６７−５．６４ （ｔ， １Ｈ， ＮＨ）， ４．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４４−４．３３（ｍ， ２Ｈ）， ３．５０−３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ２．９９ （ｄ， Ｊ ＝ １５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２． ６９ （ｄ， Ｊ ＝ １５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２５ （ｔ， ２Ｈ）， １．９７−１．０７ （ｍ， ２０Ｈ）， １．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２７．４ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物７の合成：

化合物１の調製について記載されているものと同一の手順を使用して、エチルアミンヒドロクロリドに代えてＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンヒドロクロリドを使用し、化合物１−Ｃａに代えて化合物１−Ｄａを使用して、白色の固体として化合物７を得た（４６％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ｄ_６−ＤＭＳＯ， ４００ ＭＨｚ） δ： ７．５３−７．４８ （ｍ， ４Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ７．４５ （ｓ， １Ｈ）， ７．３９−７．３５ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ−Ｈ）， ６．１３ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ４．７８ （ｓ， １Ｈ， ＯＨ）， ３．６７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ_３）， ３．５８ （ｓ， １Ｈ， ＯＨ）， ３．１６ （ｍ， １Ｈ）， ３．０ （ｄ， Ｊ ＝ １６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７１（ｓ， ３Ｈ， ＮＣＨ_３）， ２．３６−１．２９ （ｍ， １３Ｈ） １．２５ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）， １．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ ４９２．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物８の合成：

化合物２の調製について記載されているものと同一の手順を使用して、化合物１に代えて化合物７を使用して、白色の固体として化合物８を得た（７１％）。^１Ｈ−ＮＭＲ （ｄ_６−ＤＭＳＯ， ４００ ＭＨｚ） δ： ８．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ８ Ｈｚ， １Ｈ） ７．７５−７．５０ （ｍ， ７Ｈ）， ６．７９ （ｓ， １Ｈ）， ６．２０ （ｓ， １Ｈ， ＣＨ＝Ｃ）， ４．７５ （ｓ， １Ｈ， ＯＨ）， ３．３５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ_３）， ３．０ （ｄ， Ｊ ＝ １６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９７ （ｍ， １Ｈ）， ２．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＣＨ_３）， ２．３８−１．２９ （ｍ， １３Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）， １．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ_３）； ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ ５８６．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２−Ｂの合成：

市販の化合物２−Ａ（４．１ｇ、１０ｍｍｏｌ）をメタノール（６０ｍｌ）に溶解し、次いで、過ヨウ素酸（６０ｍｌの水に４．５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。混合物を室温で２時間撹拌した。メタノールを濃縮し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍｌ）を追加した。沈殿物をろ過し、水（１５×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、白色の固体として化合物２−Ｂ（３．２ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： １２．４７ （ｓ， １Ｈ）， ７．２６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．２， １．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．２， １．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０９ （ｓ， １Ｈ）， ５．６３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ４８．５， ９．６， ６．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．８， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｓ， １Ｈ）， ４．１７ − ４．０９ （ｍ， １Ｈ）， ３．３４ （ｓ， １Ｈ）， ２．８４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １１．１， ７．１， ４．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２６ − ２．１６ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９９ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３９７．１ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２−Ｃの合成：

化合物２−Ｂ（１．９ｇ、５ｍｍｏｌ）をメタノール（２００ｍｌ）に溶解し、Ｐｂ／Ｃ（２００ｍｇ）を追加した。その後、Ｈ_２下、室温で１日間撹拌した。この溶液をセライトパッドに通してろ過し、次いで、減圧下で濃縮して、精製せずにさらに使用するための２−Ｃ（１．８ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ５．２０ − ４．９９ （ｍ， １Ｈ）， ４．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２１ （ｍ， １Ｈ）， ２．８９ − ２．７７ （ｍ， １Ｈ）， ２．５６ （ｍ， Ｊ ＝ １５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， １．２４ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４０１．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋ ．

化合物２−Ｄの合成：

化合物２−Ｃ（１．６ｇ）の酢酸（４０ｍｌ．）溶液を、６．６Ｍ臭化水素の酢酸（１．６ｍｌ）溶液および臭素の酢酸（４．５ｍｌ．）溶液で逐次処理した。その後、室温で４０分間撹拌した。水で希釈して、未精製の２−Ｄ（２．１ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ５．３２ − ４．９６ （ｍ， ３Ｈ）， ４．６９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１８ （ｍ， １Ｈ）， ３．０７ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ （ｍ， １Ｈ）， ２．８１ （ｓ， １Ｈ）， １．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８８ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５５９．１ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２−Ｅの合成：

窒素下で１００℃に維持した炭酸カルシウム（１．１ｇ）および無水臭化リチウム（０．８ｇ）の激しく撹拌したジメチルアセトアミド（１７ｍｌ）懸濁液に、化合物２−Ｄ（２．０ｇ）を追加した。３時間後、冷却した混合物を過剰な希塩酸に注ぎ、ＥｔＯＡｃで混合物を抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水した。クロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、白色の固体として化合物２−Ｅを得た（０．６ｇ、４３％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ５．８５ （ｓ， １Ｈ）， ５．６２ （ｄ， Ｊ ＝ １４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２７ − ５．１９ （ｍ， １Ｈ）， ４．７４ （ｍ， １Ｈ）， ４．１１ （ｍ， １Ｈ）， ３．０７ − ２．７８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．７０ − ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．４２ − ２．０３ （ｍ， ６Ｈ）， １．４５ （ｓ， ３Ｈ）， １．０３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３９７．１ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２−Ｆの合成：

化合物２−Ｅ（０．５ｇ）を無水トルエン（１５ｍｌ）およびギ酸メチル（２ｍｌ）に溶解した。次いで、ＮａＨ（９００ｍｇ、２０ｍｍｏｌ、鉱油中６０％分散液）を追加した。室温で４時間撹拌した後、１Ｎ ＨＣｌ（１２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を数回抽出した。溶媒を乾燥および除去して、精製せずにさらに使用するための黄色の泡状物質として０．６ｇの２−Ｆを得た。ＬＲ−Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２５．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物２−Ｇの合成：

化合物２−Ｆ（０．５０ｇ）をＡｃＯＨ（１５ｍｌ）およびＨ_２Ｏ（３ｍｌ）に溶解し、フェニルヒドラジン（０．１４ｇ）を追加した。混合物を室温で４時間撹拌した。冷水（１００ｍｌ）を追加した。沈殿物をろ過し、Ｈ_２Ｏ（１０×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、黄色の固体として化合物２−Ｇ（０．４４ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ７．６１ （ｓ， １Ｈ）， ７．５８ − ７．４９ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４２ （ｍ， １Ｈ）， ６．５４ （ｓ， １Ｈ）， ５．３３ − ５．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１６ （ｓ， １Ｈ）， ２．３８ − ２．２９ （ｍ， １Ｈ）， ２．１０ （ｄ， Ｊ ＝ １４．１ Ｈｚ， １Ｈ）， １．７１ （ｑ， Ｊ ＝ １１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １．５３ （ｄ， Ｊ ＝ １３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， １．２６ （ｓ， ３Ｈ）， １．０５ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４９７．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物２−Ｈａの合成：

化合物２−Ｇ（４００ｍｇ、ＴＥＡ（３００ｍＬ）の無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、α−フロイルクロリド（２００ｍｇ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、白色の固体として２−Ｈａを得た（８２％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．０１ − ７．９８ （ｍ， １Ｈ）， ７．６４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６０ − ７．５１ （ｍ， ５Ｈ）， ７．４５ （ｍ， １Ｈ）， ７．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， ０．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５９ （ｓ， １Ｈ）， ５．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２１．７， ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．２６ （ｓ， １Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）， １．２３ （ｓ， ２Ｈ）， １．１１ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９１．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物９の合成：

化合物２−Ｈａ（５８ｍｇ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１ｍＬ）溶液を（ＣＯＣｌ）_２（２０μＬ）で処理した。１時間撹拌した後、この溶液を真空中で蒸発させ、次いで、無水ＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンヒドロクロリド（２０ｍｇ）をＮ_２下、０℃で追加し、続いて、Ｅｔ_３Ｎ（５０μＬ）を追加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、白色の固体として化合物９を得た（４２％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ７．９９ （ｓ， １Ｈ）， ７．６５ （ｓ， １Ｈ）， ７．６１ − ７．５１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４５ （ｍ， １Ｈ）， ７．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ３．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．４， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５９ （ｓ， １Ｈ）， ５．４７ − ５．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２７ （ｓ， １Ｈ）， ３．５２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．１１ （ｓ， ３Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）， １．１１ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６３４．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．図６（Ｃ）は、誘導レポーターアッセイにおける化合物９とＶＳＧ２２との比較を示す。

化合物１−Ａの代替合成：

コルチゾール（３．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（６０ｍｌ）に溶解し、次いで、過ヨウ素酸（６０ｍｌの水に３．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。混合物を室温で２時間撹拌した。ＥｔＯＨを濃縮し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍｌ）を追加した。沈殿物をろ過し、冷水（１５×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、白色の固体として化合物１−Ａ（３．０ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １２．２２ （ｓ， １Ｈ）， ５．５５ （ｓ， １Ｈ）， ４．７７ （ｓ， １Ｈ）， ４．４０ − ４．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８８ （ｓ， ３Ｈ）．

化合物１−Ｂの代替合成：

化合物１−Ａ（１．７ｇ、５ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１５ｍｌ）およびギ酸メチル（２ｍｌ）に溶解した。次いで、ＮａＨ（９００ｍｇ、２０ｍｍｏｌ、鉱油中６０％分散液）を追加した。室温で４時間撹拌した後、１Ｎ ＨＣｌ（１２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を数回抽出した。溶媒を乾燥および除去して、精製せずにさらに使用するための黄色の泡状物質として１．８ｇの化合物１−Ｂを得た。ＬＲ−Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７５．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物１−Ｃｂの合成：

化合物１−Ｂ（１．８ｇ、５ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１５ｍｌ）に溶解し、（３−ニトロフェニル）ヒドラジン（０．７５ｇ、５ｍｍｏｌ）を追加した。混合物を室温で４時間撹拌した。冷水（１００ｍｌ）を追加し、沈殿物をろ過し、Ｈ_２Ｏ（１０×３ｍｌ）で洗浄し、空気乾燥して、黄色の固体として化合物１−Ｃｂ（１．１ｇ）を得た。ＬＲ−Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物１−Ｃｃの合成：

（４−ニトロフェニル）ヒドラジン、および１−Ｃｂの調製について記載されているものと同一の手順を使用して、黄色の固体として１−Ｃｃを得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６１ （ｓ， １Ｈ）， ６．３２ （ｓ， １Ｈ）， ４．２８ （ｍ， ３Ｈ）， １．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， ４Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４９４．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１３の合成：

化合物１−Ｃｂ（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０５６ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、α−フロイルクロリド（２９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１３を得た（６８％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．２７ （ｔ， Ｊ ＝ ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２５ − ８．１９ （ｍ， １Ｈ）， ７．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８１ （ｔ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５９ （ｓ， １Ｈ）， ７．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２９ （ｓ， １Ｈ）， ４．４１ （ｍ， ３Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ）， １．０１ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５８８．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１４の合成：

化合物１−Ｃｃ（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０５６ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、α−フロイルクロリド（２９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１４を得た（７１％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｍ， １Ｈ）， ７．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｓ， １Ｈ）， ７．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．６， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３４ （ｓ， １Ｈ）， ４．４０ （ｍ， ３Ｈ）， １．２６ （ｓ， ３Ｈ）， １．０１ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５８８．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１５の合成：

化合物１３（２９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、ＤＭＡＰ（１８３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｐ（２６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、エチルアミンヒドロクロリド（５０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を追加した。室温で一晩撹拌した後、Ｈ_２Ｏ（２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水した。ＤＣＭ−ＭｅＯＨ（２０：１）を用いてクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、黄色の固体として化合物１５を得た（７５％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．２９ − ８．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８１ （ｔ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５９ （ｓ， １Ｈ）， ７．３３ （ｄ， Ｊ ＝ ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．８， ５．６ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．２３ − ７．１７ （ｍ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２８ （ｓ， １Ｈ）， ４．５２ − ４．２４ （ｍ， ４Ｈ）， １．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９２ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６７７．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１６の合成：

化合物１４（２９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、ＤＭＡＰ（１８３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｐ（２６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、エチルアミンヒドロクロリド（５０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を追加した。室温で一晩撹拌した後、Ｈ_２Ｏ（２０ｍｌ）を追加し、ＥｔＯＡｃで混合物を抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水した。ＤＣＭ−ＭｅＯＨ（２０：１）を用いてクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、黄色の固体として化合物１６を得た（６７％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．１３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｓ， １Ｈ）， ７．３５ − ７．１７ （ｍ， ６Ｈ）， ６．６７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３３ （ｓ， １Ｈ）， ４．５０ − ４．２３ （ｍ， ４Ｈ）， １．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９２ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６７７．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１７の合成：

化合物１５（６８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍｌ）に溶解し、Ｈ_２Ｏ（１ｍｌ）、Ｆｅ（５６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＮＨ_４Ｃｌ（５３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を追加した。６時間還流撹拌した後、混合物をろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、減圧下で濃縮した。ＤＣＭ−ＭｅＯＨ（２０：１）を用いてクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、白色の固体として化合物１７を得た（７５％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．１９ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ０．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４２ − ７．２２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１７ （ｔ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．７， １．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．６５ − ６．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ６．２１ （ｓ， １Ｈ）， ５．４３ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５５ − ４．３１ （ｍ， ４Ｈ）， １．３０ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９８ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６４７．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１８の合成：

化合物１６（６８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍｌ）に溶解し、Ｈ_２Ｏ（１ｍｌ）、Ｆｅ（５６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＮＨ_４Ｃｌ（５３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を追加した。６時間還流撹拌した後、混合物をろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、減圧下で濃縮した。ＤＣＭ−ＭｅＯＨ（２０：１）を用いてクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、白色の固体として化合物１８を得た（７９％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．１９ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ０．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４２ − ７．２２ （ｍ， ７Ｈ）， ７．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７９ − ６．６１ （ｍ， ３Ｈ）， ６．０５ （ｓ， １Ｈ）， ５．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５２ − ４．３１ （ｍ， ４Ｈ）， １．３０ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９８ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６４７．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１９の合成：

化合物１７（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０２８ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、シクロプロパンカルボニルクロリド（１３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で５時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１９を得た（８８％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： １０．４０ （ｓ， １Ｈ）， ８．１４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ０．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４１ （ｔ， Ｊ ＝ ８．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ３．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３１ − ７．１１ （ｍ， ６Ｈ）， ６．６７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２０ （ｓ， １Ｈ）， ４．４８ − ４．２６ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ − ０．８０ （ｍ， ４Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７１５．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１０の合成：

化合物１８（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０２８ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、シクロプロパンカルボニルクロリド（１３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で５時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１０を得た（８２％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： １０．３６ （ｓ， １Ｈ）， ８．１４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｓ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４３ （ｓ， １Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３３ （ｄ， Ｊ ＝ ３．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２９ − ７．１９ （ｍ， ４Ｈ）， ６．６７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．４， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１２ （ｓ， １Ｈ）， ４．４９ − ４．２４ （ｍ， ４Ｈ）， １．２４ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８４ − ０．７９ （ｍ， ４Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７１５．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１１の合成：

化合物１７（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０２８ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、イソシアネートエタン（１４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１１を得た（８５％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．６８ （ｓ， １Ｈ）， ８．１４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｓ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４５ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８ − ７．１７ （ｍ， ８Ｈ）， ６．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ ＝ １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．２， ７．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７６ （ｓ， １Ｈ）， ４．４９ − ４．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１１ （ｍ， ２Ｈ）， １．２５ （ｓ， ３Ｈ）， １．０６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９３ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７１８．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

化合物１２の合成：

化合物１８（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０２８ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、イソシアネートエタン（１４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）をＮ_２下、０℃で追加した。混合物を室温で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させて粗生成物を得、これを、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（５０：１）を用いてクロマトグラフィーによって精製して、黄色の固体として化合物１２を得た（８４％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ： ８．６８ （ｓ， １Ｈ）， ８．１４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｓ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４５ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８ − ７．１７ （ｍ， ８Ｈ）， ６．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．２， ７．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７６ （ｓ， １Ｈ）， ４．４９ − ４．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１１ （ｍ， ２Ｈ）， １．２５ （ｓ， ３Ｈ）， １．０６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９３ （ｓ， ３Ｈ）． ＬＲ−Ｍａｓｓ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７１８．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋．

図１５および１６は、化合物ＶＳＧ１１１、ＶＳＧ１１２およびＶＳＧ１１３（また、それぞれ化合物１０、１１および１２）に関する活性データを示す。グルココルチコイドＶＳＧ１１１、ＶＳＧ１１２およびＶＳＧ１１３の活性を示す図１５（ＤＥＸに対するパーセントとしてプロットされているデータ；ステロイド濃度１０ｎＭ）、ならびにＶＳＧ１１１とＺＫ ２１６３４８（Ｓｃｈａｃｋｅ，Ｈら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，Ｊａｎ ６；１０１（１）：２２７−３２ ａｔ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｕｂｍｅｄ／１４６９４２０４を参照のこと）およびＡＬ４３８（Ｃｏｇｈｌａｎ，Ｍ．Ｊら、Ｍｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，２００３ Ｍａｙ；１７（５）：８６０−９ ａｔ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｕｂｍｅｄ／１２５８６８４３）との比較を示す図１６（ＤＥＸに対するパーセントとしてプロットされているデータ）を参照のこと。

他の実施形態

本発明をその詳細な説明と共に説明したが、上記説明は例示であり、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲を限定するものではないことを理解すべきである。他の態様、利点および改変は、特許請求の範囲の範囲内である。

参考文献

Claims (35)

1. 式Ｉの化合物
   （式中
   は結合であるか、または存在せず、
   Ｒ_１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_１は、場合により置換されており；
   Ｒ_２は、水素またはＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_２は、場合により置換されており；
   Ｒ_３は、水素、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ_３は、場合により置換されており；
   各Ｒ_４は独立して、水素、
   （式中、Ｘは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ_４は、場合により置換されており；
   Ｒ_５は、水素またはＣ_１−４アルキルであり；
   Ｒ_６は、水素またはハロであり；
   Ｒ_７は、水素またはハロであり；
   ｎは、０、１、２、３、４または５である）またはその薬学的に許容され得る塩。
2. Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４がそれぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ_１が、水素、Ｃ_１−６アルキル、アラルキル、−ＯＨまたはアルコキシである、請求項１に記載の化合物。
4. Ｒ_１が−ＯＨまたはアルコキシである、請求項３に記載の化合物。
5. Ｒ_１がアルコキシである、請求項４に記載の化合物。
6. Ｒ_１がメトキシである、請求項５に記載の化合物。
7. Ｒ_１がＣ_１−６アルキルである、請求項３に記載の化合物。
8. Ｒ_１が、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである、請求項７に記載の化合物。
9. Ｒ_１がエチルである、請求項８に記載の化合物。
10. Ｒ_１がプロピルである、請求項８に記載の化合物。
11. Ｒ_１がアラルキルである、請求項３に記載の化合物。
12. Ｒ_１がベンジルである、請求項１１に記載の化合物。
13. Ｒ_２が水素である、請求項１に記載の化合物。
14. Ｒ_２がＣ_１−６アルキルである、請求項１に記載の化合物。
15. Ｒ_２がメチルである、請求項１４に記載の化合物。
16. Ｒ_３が、水素、Ｃ_１−６アルキル、アラルキルまたはヘテロアラルキルであり、Ｒ_３が、オキソで場合により置換されている、請求項１に記載の化合物。
17. Ｒ_３が水素である、請求項１６に記載の化合物。
18. Ｒ_３が、オキソで場合により置換されているＣ_１−６アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
19. Ｒ_３が
    である、請求項１８に記載の化合物。
20. Ｒ_３が
    である、請求項１８に記載の化合物。
21. Ｒ_３が、オキソで場合により置換されているヘテロアラルキルである、請求項１６に記載の化合物。
22. Ｒ_３が
    である、請求項１８に記載の化合物。
23. Ｒ_４が
    （式中、Ｘは、−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ_１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ_４が、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、請求項１に記載の化合物。
24. ｎが１である、請求項２３に記載の化合物。
25. Ｙがアラルキルである、請求項２３に記載の化合物。
26. Ｙがベンジルである、請求項２５に記載の化合物。
27. が結合である、請求項１に記載の化合物。
28. Ｒ_６およびＲ_７の少なくとも１つがハロである、請求項２７に記載の化合物。
29. Ｒ_６およびＲ_７が両方とも−Ｆである、請求項２８に記載の化合物。
30. から選択される、請求項１に記載の化合物。
31. 請求項１に記載の化合物と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む、医薬組成物。
32. 生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を請求項１に記載の化合物と接触させる工程を含む、方法。
33. 患者における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、有効量の請求項１に記載の化合物を前記患者に投与する工程を含む、方法。
34. 前記疾患が、喘息、関節炎、狼瘡、クローン病、炎症性腸疾患、セリアック病、糸球体腎炎、尋常性座瘡、白血病および膵臓癌から選択される、請求項３０に記載の方法。
35. 前記疾患が、喘息および関節炎から選択される、請求項３１に記載の方法。