CN113845558A - 高效糖皮质激素 - Google Patents

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CN113845558A
CN113845558A CN202110799536.4A CN202110799536A CN113845558A CN 113845558 A CN113845558 A CN 113845558A CN 202110799536 A CN202110799536 A CN 202110799536A CN 113845558 A CN113845558 A CN 113845558A
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H·E·徐
Y·何
K·梅尔彻
易伟
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Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Van Andel Research Institute
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Abstract

本发明涉及新的糖皮质激素化合物。本发明还涉及使用这些化合物的方法、合成这些化合物的方法以及包含所述糖皮质激素化合物的组合物和制剂及其用途。

Description

高效糖皮质激素
本申请是申请日为2014年9月25日、申请号为201480063706.0(国际 申请号为PCT/US2014/057497)、发明名称为“高效糖皮质激素”的发明专利 申请的分案申请。
相关申请的交叉引用
本PCT申请要求2013年9月25日提交的美国临时申请61/882,444的 益处。将该文件的全部内容通过引入的方式并入本申请。
技术领域
本发明涉及新的糖皮质激素化合物。本发明还涉及使用这些化合物的方 法、合成这些化合物的方法以及包含所述糖皮质激素化合物的组合物和制剂 及其用途。
背景技术
糖皮质激素，诸如泼尼松、地塞米松(DEX)和布地奈德，为最有效的抗 炎药物。它们广泛用于治疗炎症和自身免疫性疾病诸如哮喘、关节炎、狼疮 和克罗恩病(1,2)。通过结合至糖皮质激素受体(GR)，即一种细胞核受体超 家族的配体激活的转录因子，这些药物发挥它们的生理学作用。在不存在糖 皮质激素的情况下，GR位于细胞质且与侣伴蛋白诸如hsp90和hsp70缔合。 与激素的结合引起GR的构象改变，这导致其易位至细胞核，在此其发挥转 录控制活性，即为激活(转录激活)或抑制(转录抑制)。在转录激活中，GR二 聚化、直接结合于特异性糖皮质激素应答元件，然后募集共活化物以激活转 录。在转录抑制中，一般模型为GR结合其他转录因子(例如NF-κB、AP-1) 以变为间接连接至其结合位点(经蛋白-蛋白相互作用)。在接近靶标启动子连 接时，GR抑制下游基因表达(3)。通常认为转录抑制不需要GR二聚化(4,5)。
转录抑制为糖皮质激素作为抗炎因子所借助的主要机制(6)。GR与 NF-κB/AP-1启动子的连接导致主要下游促炎因子包括促炎细胞因子(例如 TNF-α、IL-1β和IL-6)、趋化因子(例如CCL2、CCL19)以及与炎症发作相关 的酶(例如COX2、MMP13和磷脂酶A2)的转录抑制(2)。由于它们快速起效 且持续作用，糖皮质激素仍然为治疗炎性疾病的首选。然而，糖皮质激素的 长期使用，特别是高剂量使用，具有许多不良后果，包括糖尿病/葡萄糖耐受 不良、高血压、肥胖和骨质疏松(7,8)。大部分这些后果归因于GR的转录激 活。例如，糖皮质激素诱导肝中糖异生途径的基因编码限速酶，即葡萄糖-6- 磷酸酶和烯醇丙酮酸磷酸羧激酶(9,10)，由此促进葡萄糖的从头合成且最终 导致体重增加或糖尿病。糖皮质激素也诱导了骨发育的关键调节基因，即 Dickkopf-1(DKK1)，其上调导致骨质疏松和骨丢失(11)。通常观察到的是糖 皮质激素的许多副作用与高剂量使用糖皮质激素相关(12-14)。例如，使用7.5 mg/天的泼尼松观察到“阈值模式”，其引起青光眼、抑郁和高血压(12)。这些 副作用由GR转录激活以及其他受体诸如盐皮质激素受体(MR)的非靶标激 活而引起，该激活引起高血压(15)。因此，重要的是开发高效且选择性糖皮 质激素以减少不期望的副作用。
效价强度(potency)和效能(efficacy)为糖皮质激素的两个关键药代动力 学参数。效能是给定药物通常在最大浓度可实现的最大活性，而效价强度表 示为给定药物达到一半最大活性所需的浓度(EC50)。对于具有相同效能的两 种糖皮质激素而言，高效的一者需要较低的剂量以实现相同治疗效果(14,15)。 重要的是，糖皮质激素可具有对于转录激活和转录抑制而言的不同效价强度； 例如，由GR经DEX的基因诱导所需的糖皮质激素浓度为基因阻遏所需浓 度的5至6倍(16-18)。该差异应答提供了开发高效糖皮质激素的机会，其可 在低剂量使用以实现对炎症信号的完全抑制而具有最小的转录激活活性和 副作用。最终，对糖皮质激素疗法的不敏感和耐受的发展是在治疗常见炎性 疾病诸如慢性阻塞性肺病、类风湿性关节炎和炎性肠病过程中的主要问题 (19)。糖皮质激素耐受也为对于白细胞癌症，特别是儿童期急性白血病而言 的未解决的问题(20)。已经鉴别或提议了糖皮质激素耐受的若干机制，包括 激酶途径的改变、辅助因子的改变和受体的损失或突变(19,21)。一种通常的 观察是配体对受体的亲和性在糖皮质激素耐受的患者中降低。尽管用高效糖皮质激素治疗的所述患者已经显示出疾病改善，但是该效果逐渐减弱(22)。 因此，急需开发一类更有效的糖皮质激素。
氢化可的松为由肾上腺产生的内源性糖皮质激素。氢化可的松具有低的 效价强度和与最常用的合成糖皮质激素诸如DEX相关的受体结合能力(23)。 在另一方面，糠酸莫米松(MF)为用于治疗炎性皮肤病症(Elocon)、哮喘 (Asmanex)和鼻窦炎症(Nasonex)的有效糖皮质激素(24,25)。MF在类固醇D 环的C17α位具有亲脂性糠酸酯，认为其为高效价强度的来源(26)。发明人 确定了与MF和氢化可的松结合的GR LBD的晶体结构，这揭示了区分MF和氢化可的松之间的配体效价强度的潜在机制。发明人由此使用所观察的结 构机制来设计若干具有改善的效价强度和效能的新的糖皮质激素，其可用作 治疗炎性疾病的治疗进展的起始先导物。
发明内容
糖皮质激素药物的进展由对降低不期望副作用而同时保持有益抗炎效 果的需求所驱使。效价强度为该进展的一个非常重要的方面，这是因为许多 不期望副作用与高剂量相关。该副作用可由在较低剂量实现了相同治疗效果 的高效糖皮质激素而最小化。该需求推进了由低至高效价强度的糖皮质激素 的进展。氢化可的松为内源性糖皮质激素，其具有相对低的效价强度，而糠 酸莫米松(MF)为已经用于治疗许多炎性疾病的高效合成糖皮质激素。为了理 解驱使糖皮质激素进展的潜在机制，发明人确定了与氢化可的松和MF结合的糖皮质激素受体(GR)-配体结合域(LBD)的X射线结构。氢化可的松-结合 的GR LBD揭示了在类固醇A环的1,2单键的柔性为氢化可的松对GR的低 亲和性的主要原因。同时，MF-结合的GR LBD揭示了MF的高效价强度由 其17α糠酸酯基实现，其完全充满了配体结合口袋，由此提供了用于高亲和 性结合的额外的锚接触。配体结合口袋中的单氨基酸Q642起到了MF和氢 化可的松之间的配体效价强度的区分作用。基于结构的设计导致了若干具有 显著改善的效价强度的新的糖皮质激素的合成。这些结果一起揭示了糖皮质 激素效价强度的关键结构机制且提供了用于开发高效糖皮质激素的合理基 础。
在一方面，本发明提供了式I化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000041
其中
-----为键或不存在；
R1为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R1为任选取代的；
R2为氢或C1-6烷基，其中R2为任选取代的；
R3为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R3为任选取代的；
每个R4独立为氢、
Figure BDA0003164122920000042
其中X为–O-或–NH-，且Y 为C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、-OH、 卤代烷基或磺酰基，其中R4为任选取代的；
R5为氢或C1-4烷基；
R6为氢或卤素；
R7为氢或卤素；且
n为0、1、2、3、4或5。
在另一方面，本发明提供了包含本发明化合物和药用载体或辅料的药物 组合物。
在另一方面，本发明提供了在生物样本中调节糖皮质激素受体活性的方 法，包括使糖皮质激素受体与有效量的本发明化合物接触的步骤。
在另一方面，本发明提供了治疗患者中炎性疾病或减轻其严重性的方法， 包括向所述患者给予的步骤有效量的本发明化合物。
本发明还涉及以下实施方案：
1.式I化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000051
其中
_____为键或不存在；
R1为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R1为任选取代的；
R2为氢或C1-6烷基，其中R2为任选取代的；
R3为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R3为任选取代的；
每个R4独立为氢、
Figure BDA0003164122920000052
其中X为–O-或–NH-，且Y 为C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、-OH、 卤代烷基或磺酰基，其中R4为任选取代的；
R5为氢或C1-4烷基；
R6为氢或卤素；
R7为氢或卤素；且
n为0、1、2、3、4或5。
2.实施方案1的化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立地任选取代有 烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、卤素、CN、羧基或氧代。
3.实施方案1的化合物，其中R1为氢、C1-6烷基、芳烷基、-OH或烷氧 基。
4.实施方案3的化合物，其中R1为–OH或烷氧基。
5.实施方案4的化合物，其中R1为烷氧基。
6.实施方案5的化合物，其中R1为甲氧基。
7.实施方案3的化合物，其中R1为C1-6烷基。
8.实施方案7的化合物，其中R1为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、 异丁基或叔丁基。
9.实施方案8的化合物，其中R1为乙基。
10.实施方案8的化合物，其中R1为丙基。
11.实施方案3的化合物，其中R1为芳烷基。
12.实施方案11的化合物，其中R1为苄基。
13.实施方案1的化合物，其中R2为氢。
14.实施方案1的化合物，其中R2为C1-6烷基。
15.实施方案14的化合物，其中R2为甲基。
16.实施方案1的化合物，其中R3为氢、C1-6烷基、芳烷基或杂芳烷 基，其中R3任选取代有氧代。
17.实施方案16的化合物，其中R3为氢。
18.实施方案16的化合物，其中R3为C1-6烷基，其任选被氧代取代。
19.实施方案18的化合物，其中R3为
Figure BDA0003164122920000061
Figure BDA0003164122920000062
20.实施方案18的化合物，其中R3为
Figure BDA0003164122920000063
21.实施方案16的化合物，其中R3为杂芳烷基，其任选被氧代取代。
22.实施方案18的化合物，其中R3为
Figure BDA0003164122920000064
23.实施方案1的化合物，R4为
Figure BDA0003164122920000065
其中X为–NH-，且Y为 C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、-OH、卤 代烷基或磺酰基，其中R4任选取代有卤素、CN、羧基或氧代。
24.实施方案23的化合物，其中n为1。
25.实施方案23的化合物，其中Y为芳烷基。
26.实施方案25的化合物，其中Y为苄基。
27.实施方案1的化合物，其中_____为键。
28.实施方案27的化合物，其中R6和R7中的至少一者为卤素。
29.实施方案28的化合物，其中R6和R7均为-F。
30.实施方案1的化合物，其中所述化合物选自：
Figure BDA0003164122920000071
Figure BDA0003164122920000081
31.药物组合物，包含实施方案1的化合物和药用载体或辅料。
32.在生物样本中调节糖皮质激素受体活性的方法，包括使糖皮质激 素受体与实施方案1的化合物接触的步骤。
33.治疗患者中炎性疾病或减轻其严重性的方法，包括向所述患者给 予有效量的实施方案1的化合物的步骤。
34.实施方案30的方法，其中所述疾病选自哮喘、关节炎、狼疮、克 罗恩病、炎性肠病、腹部疾病、肾小球肾炎、寻常痤疮、白血病和胰腺癌。
35.实施方案31的方法，其中所述疾病选自哮喘和关节炎。
附图说明
图1:氢化可的松-结合的GR LBD和MF-结合的GR LBD的总体结构。 (A)氢化可的松-结合的GR LBD和MF-结合的GR LBD的结构。(B)DEX- 结合的GR LBD和MF-结合的GR-LBD的结构比较。箭头表示两者之间的 差异，1:螺旋1前面的环状区域；2:螺旋5至螺旋7前面的环状区域；3:AF2 螺旋的C端的方向。(C)氢化可的松和MF在GR LBD的配体结合口袋中的 电子密度图。
图2:氢化可的松、DEX和MF的效价强度。(A)氢化可的松、DEX和 MF的化学结构。指明了类固醇环(A-D)。关键原子编号标记为接近右侧的小 数字。DEX和氢化可的松之间的差异指示于DEX结构中。指明了MF的糠 酸酯基。(B-C)AD293细胞中氢化可的松、DEX和MF的诱导报道分子 MMTV-Luc和抑制报道分子AP1-Luc的剂量响应曲线，RLU:相对萤光素酶 单位。误差棒表示标准偏差,n＝3。(D)MF、DEX和氢化可的松的体外GR 结合测定。CPM:每秒次数。误差棒表示标准偏差,n＝2。
图3:1,2单键的柔性导致氢化可的松的低亲和性。(A)氢化可的松和DEX 在GR LBD的配体结合口袋中的氢键网状结构。(B)AD293细胞中氢化可的 松、泼尼松龙和DEX的对MMTV-Luc的GR转录激活的剂量响应曲线。泼 尼松龙与氢化可的松的区别仅在于1,2双键。误差棒表示标准偏差,n＝3。
图4:17α糠酸酯基在GR配体结合口袋中的完全占据。(A,B)DEX和 MF的三维结构。(C)DEX和MF在GR LBD的配体结合口袋中的定位。MF 的17α糠酸酯基延伸至GR配体结合口袋且完全占据类固醇D环上方的疏 水空腔。(D)17α糠酸酯基与残基在GR LBD配体结合口袋的疏水空腔中的 确切的疏水性相互作用。
图5:Q642在识别具有不同效价强度的配体中起到关键作用。(A)Q642 与以下不同配体的详细的相互作用：DEX-结合的GR-LBD和MF-结合的 GR-LBD。(B)在类固醇的不饱和浓度(DEX 10nM；MF 1nM)的Q642突变的 转录激活活性。误差棒表示标准偏差,n≥3。(C)AD293细胞中野生型(WT)GR 和Q642N突变MMTV-Luc的MF、DEX和氢化可的松的剂量响应曲线。误差棒表示标准偏差,n＝3。
图6:17α-糠酸酯基的诱导提高了糖皮质激素化合物的效价强度。(A) AD293细胞中VSG22、VSG24、DAC和DEX对MMTV-Luc的剂量响应曲 线。化学结构中的糠酸酯基。误差棒表示标准偏差,n＝3。(B)AD293细胞中 具有/不具有17α糠酸酯基的化合物对在MMTV-Luc的转录激活活性的效价 强度的并排比较。误差棒表示标准偏差,n＝3。(C)化合物9与VSG22在诱导 报道分子测定中的比较。
图7:溶解性突变和结晶突变的位置。上图：溶解GR LBD的突变位置； 下图：促进GRLBD结晶的表面突变。
图8:所选GR LBD突变的蛋白表达和纯化。在10μM氢化可的松的 存在下表达和纯化GR LBD突变体。
图9:氢化可的松-结合的和MF-结合的GR LBD的蛋白质晶体和衍射图。 (A)氢化可的松-结合的GR LBD。(B)MF-结合的GR LBD。
图10:GR AYVTI突变的转录活性。(A)AD293细胞中GR AYVTI突变 对MMTV-Luc的转录激活活性。DEX,100nM。误差棒表示标准偏差,n＝3。 (B)AD293细胞中GR AYVTI突变对AP1-Luc的转录抑制活性。DEX,100nM。 误差棒表示标准偏差,n＝3。
图11:DEX和氢化可的松的类固醇C-9α基团和C-16基团在GR LBD 的配体结合口袋中的确切的结构比较。(A)DEX的C-9α位上的F原子使得 在GR LBD的配体结合口袋中与F623、L563和M646的紧密接触。(B)DEX 的C-16甲基使得在GR LBD的配体结合口袋中与Y735、L732、M646和 Q642的紧密接触。
图12:F623和M639突变使MF和DEX的活性分开。(A)AD293细胞 中F623突变对MMTV-Luc的转录激活活性。DEX 10nM,MF 1nM。误差棒 表示标准偏差,n＝3。(B)AD293细胞中M639突变对MMTV-Luc的转录激活 活性。DEX 10nM,MF 1nM。误差棒表示标准偏差,n＝3。
图13:GR Q642A突变蛋白的体外结合测定。(A)体外配体结合实验， 其使用来自表达野生型GR或Q642A突变体GR的AD293细胞的胞质溶胶。 CPM:每分钟计数。误差棒s＝SD,n＝2。(B)在MMTV-Luc报道分子测定中 WT GR和Q642A GR的DEX剂量响应曲线。误差棒s＝SD,n＝3。(C)GR Q642A配体竞争测定。误差棒s＝SD,n＝2。
图14:具有C-17α糠酸酯基的化合物的转录抑制性质。(A)AD293细胞 中VSG22、VSG24、DAC和DEX对AP1-Luc活性的剂量响应曲线。误差 棒s＝SD,n＝3。(B)AD293细胞中具有和不具有引入的C-17α糠酸酯基的化合 物对在AP1-Luc的转录抑制活性的效价强度的并排比较。误差棒s＝SD,n＝3。
图15:糖皮质激素VSG111、VSG112和VSG113的活性。数据按照DEX 的百分数绘制曲线。类固醇浓度10nM。
图16:VSG111与ZK 216348和AL438的比较。数据按照DEX的百分 数绘制曲线。
提供前述各图以用于示例说明的目的，且不意在以任何方式进行限制。
具体实施方式
糖皮质激素已经使用了将近60年且其仍然为治疗许多炎性疾病和自身 免疫性疾病的首选。然而，长期使用糖皮质激素可引起许多不良作用。理解 GR激活和抑制的结构基础对于开发具有较少副作用的新的糖皮质激素而言 是非常重要的。然而，GR在细菌系统，特别是对于低亲和性配体而言的低 表达水平阻碍了该重要的细胞调节剂的结构研究。通过比较类固醇受体家族 中的保守残基，发明人已经成功鉴别了可促进受体表达而不影响受体生理学 功能的氨基酸突变。该方法将加速GR的结构研究，特别是对于那些低亲和 性配体诸如非-类固醇配体而言，它们可能成为下一代糖皮质激素的未来。
高效糖皮质激素的开发由两种类型的迫切需要所推进，一种是由使用高 剂量引起的糖皮质激素的副作用，且另一种是临床糖皮质激素耐受症状。尽 管配体亲和性为效价强度的确定因素，但是其不是唯一一个。细胞辅助因子 通过识别由配体结合引起的表面差异也起到关键作用，且由结合不同配体诱 导的微小变化可对辅助因子选择性产生深远影响。已经采用了不同策略以修 饰刚性氢化可的松骨架以提高效价强度，且导致开发DEX。氢化可的松-结 合的GR LBD和DEX-结合的GR LBD的结构比较显示了在众多修饰中，Δ1双键对于最优定位C3酮是关键的，其与R611形成了关键的氢键。随后，研 究者发现在C-17α位上的亲脂性酯基诸如烷基酯或丙酸酯(26)可显著增强糖 皮质激素活性。一种最常用的哮喘药物，丙酸氟替卡松(FP)，其通过在C-17α 位将羟基用丙酸酯代替产生。这些数据表明在配体结合口袋中的类固醇D环 上方存在疏水空腔。用糠酸酯基代替丙酸酯以进一步优化FP产生了高效糖 皮质激素，糠酸氟替卡松(FF)，这表明了糠酸酯基可能最符合该空腔。尽管 已经解析了FF-结合的GR LBD的结构(35)，但是尚未确定MF的高效价强 度的结构机制。在此，发明人已经发现MF的高效价强度归因于占据全部配 体结合口袋的C-17α糠酸酯基以及由配体结合引起的表面构象改变两者。使 用诱发突变，发明人证实了单一氨基酸残基Q642在识别C-17α糠酸酯基和 调整其他氨基酸侧链的定位中起到关键作用。Q642N与野生型蛋白的区别仅 在于一个甲基，而这足以使MF、DEX和氢化可的松的活性分开，由此表明 了受体活性调节是非常精确的。
发明人已经证实了C-17α糠酸酯基可用作“锚”连接点以使低亲和性配 体精确且稳固地定位于配体结合口袋中。成功修饰了针对提高离解性质所设 计的DAC衍生物，其证实了一种用于设计治疗性离解的糖皮质激素、具有 临床糖皮质激素耐受症状减少的糖皮质激素或非-类固醇糖皮质激素化合物 (通常显示对受体的弱亲和性的那些化合物)的稳固策略。总的来说，发明人 已经解析了与生理学配体，即低效价强度的糖皮质激素氢化可的松结合的 GR LBD的首个晶体结构，以及与临床上重要的高效价强度合成配体MF结 合的LBD的结构。结合生物化学和突变分析，发明人已经在结构上鉴别了 糖皮质激素亲和性和效价强度的关键决定因素，且通过基于结构的设计和合 成高效糖皮质激素证实了这些决定因素。
定义
针对本发明的目的，根据元素周期表(CAS版,Handbook of Chemistry andPhysics,75th Ed)鉴别了化学元。此外，有机化学的一般规则描述于 "OrganicChemistry",Thomas Sorrell,University Science Books,Sausolito:1999, and"March’s Advanced Organic Chemistry",5th Ed.,Ed.:Smith,M.B.and March,J.,John Wiley&Sons,New York:2001，将它们的全部内容通过引用的 方式并入本申请。
针对本发明的目的，式I化合物的碳编号为针对类固醇结构的可接受规 则。因此，式I化合物如下编号：
Figure BDA0003164122920000131
本申请所述的本发明化合物可任选取代有一个或多个取代基，诸如上文 一般说明或以本发明的特定类型、亚类和种类示例。
本申请使用的"烷基"是指含有1-12个(例如1-8、1-6或1-4个)碳原子的 饱和的脂族烃基。烷基可为直链或支链的。烷基的实例包括但不限于甲基、 乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正庚基或 2-乙基己基。烷基可取代(即任选取代)有一个或多个取代基，诸如卤素、膦 酰基(phospho)、环脂族基团[例如环烷基或环烯基]、杂环脂族基团[例如杂环 烷基或杂环烯基]、芳基、杂芳基、烷氧基、芳酰基、杂芳酰基、酰基[例如(脂 族基团)羰基、(环脂族基团)羰基或(杂环脂族基团)羰基]、硝基、氰基、酰胺 基团[例如(环烷基烷基)羰基氨基、芳基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环 烷基)羰基氨基、(杂环烷基烷基)羰基氨基、杂芳基羰基氨基、杂芳烷基羰基 氨基烷基氨基羰基、环烷基氨基羰基、杂环烷基氨基羰基、芳基氨基羰基或 杂芳基氨基羰基]、氨基[例如脂族基团氨基、环脂族基团氨基或杂环脂族基 团氨基]、磺酰基[例如脂族基团-SO2-]、亚硫酰基、硫烷基(sulfanyl)、亚磺酰 氧基(sulfoxy)、脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰氨基、氧代、羧基、氨基甲酰基、 环脂族基团氧基、杂环脂族基团氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、芳烷基氧基、 杂芳基烷氧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基或羟基。不是用来限定，取代的 烷基的一些实例包括羧基烷基(诸如HOOC-烷基、烷氧基羰基烷基和烷基羰 基氧基烷基)、氰基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、酰基烷基、芳烷基、(烷 氧基芳基)烷基、(磺酰基氨基)烷基(诸如(烷基-SO2-氨基)烷基)、氨基烷基、 酰氨基烷基、(环脂族基团)烷基或卤代烷基。
本申请使用的"烯基"是指含有2-8个(例如2-12、2-6或2-4个)碳原子和 至少一个双键的脂族碳基团。与烷基类似，烯基可为直链或支链的。烯基的 实例包括，但不限于烯丙基、异戊二烯基、2-丁烯基和2-己烯基。烯基可任 选被一个或多个取代基取代，该取代基诸如卤素、膦酰基、环脂族基团[例 如环烷基或环烯基]、杂环脂族基团[例如杂环烷基或杂环烯基]、芳基、杂芳 基、烷氧基、芳酰基、杂芳酰基、酰基[例如(脂族基团)羰基、(环脂族基团) 羰基或(杂环脂族基团)羰基]、硝基、氰基、酰氨基[例如(环烷基烷基)羰基氨 基、芳基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环烷基)羰基氨基、(杂环烷基烷基) 羰基氨基、杂芳基羰基氨基、杂芳烷基羰基氨基烷基氨基羰基、环烷基氨基 羰基、杂环烷基氨基羰基、芳基氨基羰基或杂芳基氨基羰基]、氨基[例如脂 族基团氨基、环脂族基团氨基、杂环脂族基团氨基或脂族基团磺酰基氨基]、 磺酰基[例如烷基-SO2-、环脂族基团-SO2-或芳基-SO2-]、亚硫酰基、硫烷基、 亚磺酰氧基、脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰氨基、氧代、羧基、氨基甲酰基、 环脂族基团氧基、杂环脂族基团氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、芳烷基氧基、 杂芳烷氧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基或羟基。不是用来限定，取代的烯 基的一些实例包括氰基烯基、烷氧基烯基、酰基烯基、羟基烯基、芳烯基、 (烷氧基芳基)烯基、(磺酰基氨基)烯基(诸如(烷基-SO2-氨基)烯基)、氨基烯基、 酰氨基烯基、(环脂族基团)烯基或卤代烯基。
本申请使用的"炔基"是指包含2-8个(例如，2-12、2-6或2-4个)碳原子 并且具有至少一个三键的脂族碳基团。炔基可以为直链或支链的。炔基的实 例包括，但不限于，炔丙基和丁炔基。炔基可任选被一个或多个取代基取代， 该取代基诸如芳酰基、杂芳酰基、烷氧基、环烷基氧基、杂环烷基氧基、芳 基氧基、杂芳基氧基、芳烷基氧基、硝基、羧基、氰基、卤素、羟基、磺基、 巯基、硫烷基[例如脂族基团硫烷基或环脂族基团硫烷基]、亚硫酰基[例如脂 族基团亚硫酰基或环脂族基团亚硫酰基]、磺酰基[例如脂族基团-SO2-、脂族 基团氨基-SO2-或环脂族基团-SO2-]、酰氨基[例如氨基羰基、烷基氨基羰基, 烷基羰基氨基、环烷基氨基羰基、杂环烷基氨基羰基、环烷基羰基氨基、芳 基氨基羰基、芳基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环烷基)羰基氨基、(环烷 基烷基)羰基氨基、杂芳烷基羰基氨基、杂芳基羰基氨基或杂芳基氨基羰基]、 脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰氨基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基、环脂族基团、 杂环脂族基团、芳基、杂芳基、酰基[例如(环脂族基团)羰基或(杂环脂族基 团)羰基]、氨基[例如脂族基团氨基]、亚磺酰氧基、氧代、羧基、氨基甲酰 基、(环脂族基团)氧基、(杂环脂族基团)氧基或(杂芳基)烷氧基。
本申请使用的"氨基"是指-NRXRY，其中RX和RY各自独立地为氢、脂 族基团、环脂族基团、(环脂族基团)脂族基团、芳基、芳脂族基团、杂环脂 族基团、(杂环脂族基团)脂族基团、杂芳基、羧基、硫烷基、亚硫酰基、磺 酰基、(脂族基团)羰基、(环脂族基团)羰基、((环脂族基团)脂族基团)羰基、 芳基羰基、(芳脂族基团)羰基、(杂环脂族基团)羰基、((杂环脂族基团)脂族 基团)羰基、(杂芳基)羰基或(杂芳脂族基团)羰基，它们各自如本申请定义并且任选被取代。氨基的实例包括烷基氨基、二烷基氨基或芳基氨基。当术语 "氨基"不为端基(例如，烷基羰基氨基)时，其由-NRX-表示。RX具有与如上文 定义相同的含义。
本申请使用的"芳基"单独使用或作为在如"芳烷基"、"芳烷氧基"或"芳氧 基烷基"的较大部分中的组成部分使用时是指单环(例如苯基)；二环(例如茚 基、萘基、四氢萘基、四氢茚基)；和三环(例如芴基、四氢芴基或四氢蒽基， 蒽基)环系，其中单环系为芳族的或二环或三环环系中的至少一个环为芳族 的。二环和三环基团包括苯并稠合的2-3元碳环。例如，苯并稠合基团包括 与两个或更多个C4-8碳环部分稠合的苯基。芳基任选被一个或多个取代基取 代，所述取代基包括脂族基团[例如烷基、烯基或炔基]；环脂族基团；(环脂族基团)脂族基团；杂环脂族基团；(杂环脂族基团)脂族基团；芳基；杂芳基； 烷氧基；(环脂族基团)氧基；(杂环脂族基团)氧基；芳基氧基；杂芳基氧基； (芳脂族基团)氧基；(杂芳脂族基团)氧基；芳酰基；杂芳酰基；氨基；氧代(在 苯并稠合二环或三环芳基的非-芳族碳环上)；硝基；羧基；酰氨基；酰基[例 如(脂族基团)羰基；(环脂族基团)羰基；((环脂族基团)脂族基团)羰基；(芳脂 族基团)羰基；(杂环脂族基团)羰基；((杂环脂族基团)脂族基团)羰基；或(杂芳 脂族基团)羰基]；磺酰基[例如脂族基团-SO2-或氨基-SO2-]；亚硫酰基[例如脂族基团-S(O)-或环脂族基团-S(O)-]；硫烷基[例如脂族基团-S-]；氰基；卤素； 羟基；巯基；亚磺酰氧基；脲；硫脲；氨磺酰基；磺酰氨基或氨基甲酰基。 可选择地，芳基可以未被取代。
取代的芳基的非限制性实例包括卤代芳基[例如，单-、二(诸如对、间- 二卤代芳基)和(三卤代)芳基]；(羧基)芳基[例如(烷氧基羰基)芳基、((芳烷基) 羰基氧基)芳基和(烷氧基羰基)芳基]；(酰氨基)芳基[例如(氨基羰基)芳基、 (((烷基氨基)烷基)氨基羰基)芳基、(烷基羰基)氨基芳基、(芳基氨基羰基)芳 基和(((杂芳基)氨基)羰基)芳基]；氨基芳基[例如((烷基磺酰基)氨基)芳基或 ((二烷基)氨基)芳基]；(氰基烷基)芳基；(烷氧基)芳基；(氨磺酰基)芳基[例如 (氨基磺酰基)芳基]；(烷基磺酰基)芳基；(氰基)芳基；(羟基烷基)芳基；((烷 氧基)烷基)芳基；(羟基)芳基、((羧基)烷基)芳基；(((二烷基)氨基)烷基)芳基； (硝基烷基)芳基；(((烷基磺酰基)氨基)烷基)芳基；((杂环脂族基团)羰基)芳基；((烷基磺酰基)烷基)芳基；(氰基烷基)芳基；(羟基烷基)芳基；(烷基羰基)芳 基；烷基芳基；(三卤代烷基)芳基；对氨基-间烷氧基羰基芳基；对氨基-间 氰基芳基；对卤代-间氨基芳基；或(间(杂环脂族基团)-邻(烷基))芳基。
本申请使用的"芳脂族基团"诸如"芳烷基"是指被芳基取代的脂族基团 (例如，C1-4烷基)。"脂族基团"、"烷基"和"芳基"在本申请中定义。芳脂族基 团诸如芳烷基的实例为苄基。
本申请使用的"芳烷基"是指被芳基取代的烷基(例如，C1-4烷基)。"烷基" 和"芳基"如上文所定义。芳烷基的实例为苄基。芳烷基任选被一个或多个取 代基取代，该取代基诸如脂族基团[例如烷基、烯基或炔基，包括羧基烷基、 羟基烷基或卤代烷基诸如三氟甲基]、环脂族基团[例如环烷基或环烯基]、(环 烷基)烷基、杂环烷基、(杂环烷基)烷基、芳基、杂芳基、烷氧基、环烷基氧 基、杂环烷基氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、芳烷基氧基、杂芳烷基氧基、 芳酰基、杂芳酰基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基、酰氨基[例 如氨基羰基、烷基羰基氨基、环烷基羰基氨基、(环烷基烷基)羰基氨基、芳 基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环烷基)羰基氨基、(杂环烷基烷基)羰基 氨基、杂芳基羰基氨基或杂芳烷基羰基氨基]、氰基、卤素、羟基、酰基、 巯基、烷基硫烷基、亚磺酰氧基、脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰氨基、氧代或 氨基甲酰基。
本申请使用的"二环环系"包括形成两个环的8-12(例如9、10或11)元结 构，其中两个环具有至少一个共用原子(例如2个共用原子)。二环环系包括 二环脂族基团(例如二环烷基或二环烯基)、二环杂脂族基团、二环芳基和二 环杂芳基。
本申请使用的"碳环"或"环脂族基团"包括"环烷基"和"环烯基"，它们各 自任选如下所述被取代。
本申请使用的"环烷基"是指3-10(例如5-10)个碳原子的饱和碳环单-或 二环(稠合或桥连)环。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、 环庚基、金刚烷基、降冰片基、立方烷基(cubyl)、八氢-茚基、十氢-萘基、 二环[3.2.1]辛基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.3.1]壬基、二环[3.3.2]癸基、二环[2.2.2]辛基、金刚烷基或((氨基羰基)环烷基)环烷基。
本申请使用的"环烯基"是指3-10(例如4-8)个碳原子的具有一个或多个 双键的非-芳族碳环。环烯基的实例包括环戊烯基、1,4-环己-二-烯基、环庚 烯基、环辛烯基、六氢-茚基、八氢-萘基、环己烯基、环戊烯基、二环[2.2.2] 辛烯基或二环[3.3.1]壬烯基。
环烷基或环烯基可任选取代有一个或多个取代基，该取代基诸如膦酰基(phosphor)、脂族基团[例如烷基、烯基或炔基]、环脂族基团、(环脂族基团) 脂族基团、杂环脂族基团、(杂环脂族基团)脂族基团、芳基、杂芳基、烷氧 基、(环脂族基团)氧基、(杂环脂族基团)氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、(芳 脂族基团)氧基、(杂芳脂族基团)氧基、芳酰基、杂芳酰基、氨基、酰氨基[例 如(脂族基团)羰基氨基、(环脂族基团)羰基氨基、((环脂族基团)脂族基团)羰 基氨基、(芳基)羰基氨基、(芳脂族基团)羰基氨基、(杂环脂族基团)羰基氨基、 ((杂环脂族基团)脂族基团)羰基氨基、(杂芳基)羰基氨基或(杂芳脂族基团)羰基氨基]、硝基、羧基[例如HOOC-、烷氧基羰基或烷基羰基氧基]、酰基[例 如(环脂族基团)羰基、((环脂族基团)脂族基团)羰基、(芳脂族基团)羰基、(杂 环脂族基团)羰基、((杂环脂族基团)脂族基团)羰基或(杂芳脂族基团)羰基]、 氰基、卤素、羟基、巯基、磺酰基[例如烷基-SO2-和芳基-SO2-]、亚硫酰基[例 如烷基-S(O)-]、硫烷基[例如烷基-S-]、亚磺酰氧基、脲、硫脲、氨磺酰基、 磺酰氨基、氧代或氨基甲酰基。
本申请使用的术语"杂环"或"杂环脂族基团"包括杂环烷基和杂环烯基， 它们各自如下所述任选被取代。
本申请使用的"杂环烷基"是指3-10元单-或二环(稠合或桥连)(例如5-至 10-元单-或二环)饱和环结构，其中环原子中的一个或多个为杂原子(例如N， O，S或其组合)。杂环烷基的实例包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、四氢 呋喃基、1,4-二氧戊环基、1,4-二噻烷基、1,3-二氧戊环基、噁唑烷基、异噁 唑烷基、吗啉基、硫吗啉基、八氢苯并呋喃基、八氢色烯基、八氢硫代色烯 基、八氢吲哚基、八氢吡啶基、十氢喹啉基、八氢苯并[b]噻吩基、2-氧杂- 二环[2.2.2]辛基、1-氮杂-二环[2.2.2]辛基、3-氮杂-二环[3.2.1]辛基和2,6-二氧杂-三环[3.3.1.03,7]壬基。单环杂环烷基可以与苯基部分稠合形成结构，诸如 四氢异喹啉，可以将其分类为杂芳基。
本申请使用的"杂环烯基"是指单-或二环(例如5-至10-元单-或二环)非- 芳族环结构，它具有一个或多个双键并且其中环原子中的一个或多个为杂原 子(例如N、O或S)。单环和二环杂环脂族基团按照标准化学命名法编号。
杂环烷基或杂环烯基可任选取代有一个或多个取代基，该取代基诸如膦 酰基，脂族基团[例如烷基、烯基或炔基]、环脂族基团、(环脂族基团)脂族 基团、杂环脂族基团、(杂环脂族基团)脂族基团、芳基、杂芳基、烷氧基、(环 脂族基团)氧基、(杂环脂族基团)氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、(芳脂族基 团)氧基、(杂芳脂族基团)氧基、芳酰基、杂芳酰基、氨基、酰氨基[例如(脂 族基团)羰基氨基、(环脂族基团)羰基氨基、((环脂族基团)脂族基团)羰基氨 基、(芳基)羰基氨基、(芳脂族基团)羰基氨基、(杂环脂族基团)羰基氨基、((杂 环脂族基团)脂族基团)羰基氨基、(杂芳基)羰基氨基或(杂芳脂族基团)羰基氨 基]、硝基、羧基[例如HOOC-、烷氧基羰基或烷基羰基氧基]、酰基[例如(环 脂族基团)羰基、((环脂族基团)脂族基团)羰基、(芳脂族基团)羰基、(杂环脂 族基团)羰基、((杂环脂族基团)脂族基团)羰基或(杂芳脂族基团)羰基]、硝基、 氰基、卤素、羟基、巯基、磺酰基[例如烷基磺酰基或芳基磺酰基]、亚硫酰 基[例如烷基亚硫酰基]、硫烷基[例如烷基硫烷基]、亚磺酰氧基、脲、硫脲、 氨磺酰基、磺酰氨基、氧代或氨基甲酰基。
本申请使用的"杂芳基"是指具有4-15个环原子的单环、二环或三环环系， 其中环原子中的一个或多个为杂原子(例如N，O，S或其组合)，并且其中单 环环系为芳族的或二环或三环环系中的环的至少一个为芳族的。杂芳基包括 具有2-3个环的苯并稠合环系。例如，苯并稠合基团包括与一个或两个4-8 元杂环脂族基团部分(例如吲嗪基、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、二氢吲 哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、喹啉基或异喹啉基)稠合的苯并稠合 基团。杂芳基的某些实例为氮杂环丁烷基、吡啶基、1H-吲唑基、呋喃基、 吡咯基、噻吩基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、四唑基、苯并呋喃基、异喹啉 基、苯并噻唑基、呫吨、噻吨、吩噻嗪、二氢吲哚、苯并[1,3]间二氧杂环戊 烯、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、 嘌呤基、噌啉基、喹啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉 基、异喹啉基、4H-喹嗪基、苯并-1,2,5-噻二唑基或1,8-萘啶基。
单环杂芳基包括呋喃基、噻吩基、2H-吡咯基、吡咯基、噁唑基、噻唑 基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、1,3,4-噻二唑基、2H-吡喃基、 4-H-吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、吡唑基(pyrazyl)或1,3,5- 三嗪基，但不限于这些。单环杂芳基按照标准化学命名法编号。
二环杂芳基包括吲嗪基(indolizyl)、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、二 氢吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、异喹啉基、吲嗪基、 异吲哚基、吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、 苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、 喹唑啉基、喹喔啉基、1,8-萘啶基或蝶啶基，但不限于这些。二环杂芳基按 照标准化学命名法编号。
杂芳基任选取代有一个或多个取代基，该取代基诸如脂族基团[例如烷 基,烯基或炔基]；环脂族基团；(环脂族基团)脂族基团；杂环脂族基团；(杂 环脂族基团)脂族基团；芳基；杂芳基；烷氧基；(环脂族基团)氧基；(杂环 脂族基团)氧基；芳基氧基；杂芳基氧基；(芳脂族基团)氧基；(杂芳脂族基 团)氧基；芳酰基；杂芳酰基；氨基；氧代(在二环或三环杂芳基的非-芳族碳 环或杂环上)；羧基；酰氨基；酰基[例如脂族基团羰基；(环脂族基团)羰基； ((环脂族基团)脂族基团)羰基；(芳脂族基团)羰基；(杂环脂族基团)羰基；((杂 环脂族基团)脂族基团)羰基；或(杂芳脂族基团)羰基]；磺酰基[例如脂族基团 磺酰基或氨基磺酰基]；亚硫酰基[例如脂族基团亚硫酰基]；硫烷基[例如脂 族基团硫烷基]；硝基；氰基；卤素；羟基；巯基；亚磺酰氧基；脲；硫脲； 氨磺酰基；磺酰氨基；或氨基甲酰基。可选择地，杂芳基可以未被取代。
取代的杂芳基的非限制性实例包括(卤代)杂芳基[例如单-和二-(卤代)杂 芳基]；(羧基)杂芳基[例如(烷氧基羰基)杂芳基]；氰基杂芳基；氨基杂芳基[例 如((烷基磺酰基)氨基)杂芳基和((二烷基)氨基)杂芳基]；(酰氨基)杂芳基[例如 氨基羰基杂芳基、((烷基羰基)氨基)杂芳基、((((烷基)氨基)烷基)氨基羰基) 杂芳基、(((杂芳基)氨基)羰基)杂芳基、((杂环脂族基团)羰基)杂芳基和((烷基 羰基)氨基)杂芳基]；(氰基烷基)杂芳基；(烷氧基)杂芳基；(氨磺酰基)杂芳基 [例如(氨基磺酰基)杂芳基]；(磺酰基)杂芳基[例如(烷基磺酰基)杂芳基]；(羟 基烷基)杂芳基；(烷氧基烷基)杂芳基；(羟基)杂芳基；((羧基)烷基)杂芳基； (((二烷基)氨基)烷基]杂芳基；(杂环脂族基团)杂芳基；(环脂族基团)杂芳基； (硝基烷基)杂芳基；(((烷基磺酰基)氨基)烷基)杂芳基；((烷基磺酰基)烷基) 杂芳基；(氰基烷基)杂芳基；(酰基)杂芳基[例如(烷基羰基)杂芳基]；(烷基) 杂芳基和(卤代烷基)杂芳基[例如三卤代烷基杂芳基]。
本申请使用的"杂芳脂族基团"(诸如杂芳烷基)是指被杂芳基取代的脂族 基团(例如C1-4烷基)。"脂族基团"、"烷基"和"杂芳基"如上文所定义。
本申请使用的"杂芳烷基"是指被杂芳基取代的烷基(例如，C1-4烷基)。" 烷基"和"杂芳基"如上文所定义。杂芳烷基任选被一个或多个取代基取代，该 取代基诸如烷基(包括羧基烷基、羟基烷基和卤代烷基诸如三氟甲基)、烯基、 炔基、环烷基、(环烷基)烷基、杂环烷基、(杂环烷基)烷基、芳基、杂芳基、 烷氧基、环烷基氧基、杂环烷基氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、芳烷基氧基、 杂芳烷基氧基、芳酰基、杂芳酰基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧 基、氨基羰基、烷基羰基氨基、环烷基羰基氨基、(环烷基烷基)羰基氨基、 芳基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环烷基)羰基氨基、(杂环烷基烷基)羰 基氨基、杂芳基羰基氨基、杂芳烷基羰基氨基、氰基、卤素、羟基、酰基、 巯基、烷基硫烷基、亚磺酰氧基、脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰氨基、氧代或 氨基甲酰基。
本申请使用的"环状部分"和"环状基团"是指单-，二-和三-环环系，包括 环脂族基团，杂环脂族基团、芳基或杂芳基，它们各自如上所述定义。
本申请使用的"桥连二环环系"是指二环杂环脂肪族环系或二环环脂肪 族环系，其中环为桥连的。桥连二环环系的实例包括，但不限于金刚烷基、 降冰片烷基、二环[3.2.1]辛基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.3.1]壬基、二环[3.3.2] 癸基、2-氧杂二环[2.2.2]辛基、l-氮杂二环[2.2.2]辛基、3-氮杂二环[3.2.1]辛基 和2,6-二氧杂-三环[3.3.1.03,7]壬基。桥连二环环系可任选被一个或多个取代 基取代，该取代基诸如烷基(包括羧基烷基、羟基烷基和卤代烷基诸如三氟 甲基)、烯基、炔基、环烷基、(环烷基)烷基、杂环烷基、(杂环烷基)烷基、 芳基、杂芳基、烷氧基、环烷基氧基、杂环烷基氧基、芳基氧基、杂芳基氧 基、芳烷基氧基、杂芳烷基氧基、芳酰基、杂芳酰基、硝基、羧基、烷氧基 羰基,烷基羰基氧基、氨基羰基,烷基羰基氨基、环烷基羰基氨基、(环烷基烷 基)羰基氨基、芳基羰基氨基、芳烷基羰基氨基、(杂环烷基)羰基氨基、(杂 环烷基烷基)羰基氨基、杂芳基羰基氨基、杂芳烷基羰基氨基、氰基、卤素、 羟基、酰基、巯基、烷基硫烷基、亚磺酰氧基、脲、硫脲、氨磺酰基、磺酰 氨基、氧代或氨基甲酰基。
本申请使用的"酰基"是指甲酰基或或RX-C(O)-(诸如烷基-C(O)-，也称 作"烷基羰基")，其中RX和"烷基"如上述定义。乙酰基和新戊酰基为酰基的 实例。
本申请使用的"芳酰基"或"杂芳酰基"是指芳基-C(O)-或杂芳基-C(O)-。芳 酰基或杂芳酰基的芳基和杂芳基部分任选如上所述的被取代。
本申请使用的"烷氧基"是指烷基-O-，其中"烷基"如上述定义。
本申请使用的"氨基甲酰基"是指具有结构-O-CO-NRXRY或 -NRX-CO-O-RZ的基团，其中RX和RY如上述定义并且RZ可以为脂族基团、 芳基、芳脂族基团、杂环脂族基团、杂芳基或杂芳脂族基团。
本申请使用的"羧基"在用作端基时是指-COOH、-COORX、-OC(O)H、 -OC(O)RX；或在用作中部基团时是指-OC(O)-或-C(O)O-。
本申请使用的"卤代脂族基团"是指被1-3个卤素取代的脂族基团。例如， 术语卤代烷基包括基团-CF3。
本申请使用的"巯基"是指-SH。
本申请使用的"磺基"在末端使用时是指-SO3H或-SO3RX或在中部使用 时是指-S(O)3-。
本申请使用的"磺酰胺基团(sulfamide)"在末端使用时是指结构 -NRX-S(O)2-NRYRZ并且在中部使用时是指-NRX-S(O)2-NRY-，其中RX、RY和RZ如上述定义。
本申请使用的"氨磺酰胺基团(sulfonamide)"在末端使用时是指结构 -S(O)2-NRXRY或-NRX-S(O)2-RZ；或在中部使用时是指-S(O)2-NRX-或 -NRX-S(O)2-，其中RX、RY和RZ如上述定义。
本申请所用的"硫烷基(sulfanyl)"在末端使用时是指-S-RX，在中部使用时 是指-S-，其中RX如上述定义。硫烷基的实例包括脂族基团-S-、环脂族基团 -S-、芳基-S-等。
本申请所用的"亚磺酰基"在末端使用时是指-S(O)-RX，并且在中部使用 时是指-S(O)-，其中RX如上述定义。亚磺酰基的实例包括脂族基团-S(O)-、 芳基-S(O)-、(环脂族基团(脂族基团))-S(O)-、环烷基-S(O)-、杂环脂族基团 -S(O)-、杂芳基-S(O)-等。
本申请所用的"磺酰基"在末端使用时是指-S(O)2-RX，并且在中部使用时 是指-S(O)2-，其中RX如上述定义。示例性的磺酰基包括脂族基团-S(O)2-、 芳基-S(O)2-、(环脂族基团(脂族基团))-S(O)2-、环脂族基团-S(O)2-、杂环脂族 基团-S(O)2-、杂芳基-S(O)2-、(环脂族基团(酰氨基(脂族基团)))-S(O)2-等。
本申请所用的"亚磺酰氧基(sulfoxy)"在末端使用时是指-O-SO-RX或-SO-O-RX，并且在中部使用时是指-O-S(O)-或-S(O)-O-，其中RX如上述定义。
本申请使用的"卤素(halogen)"或"卤代(halo)"是指氟、氯、溴或碘。
本申请使用的术语羧基包括的"烷氧基羰基"在单独使用或与另一种基 团联用时是指诸如烷基-O-C(O)-的基团。
本申请使用的"烷氧基烷基"是指烷基，诸如烷基-O-烷基-，其中烷基如 上述定义。
本申请使用的"羰基"是指-C(O)-。
本申请使用的"氧代"是指＝O。
本申请使用的术语"膦酰基(phospho)"是指次膦酸基(phosphinate)和膦酸 基(phosphonate)。次膦酸基和膦酸基的实例包括-P(O)(RP)2，其中RP为脂族 基团、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、(环脂族基团)氧基、(杂环脂族基团)氧 基芳基、杂芳基、环脂族基团或氨基。
本申请使用的"氨基烷基"是指结构(RX)2N-烷基-。
本申请使用的"氰基烷基"是指结构(NC)-烷基-。
本申请使用的"脲"基在末端使用时是指结构-NRX-CO-NRYRZ且"硫脲" 基是指结构-NRX-CS-NRYRZ，并且在中部使用时是指结构-NRX-CO-NRY-或 -NRX-CS-NRY-，其中RX、RY和RZ如上述定义。
本申请使用的"胍"基是指结构-N＝C(N(RXRY))N(RXRY)或 -NRX-C(＝NRX)NRXRY，其中RX和RY如上述定义。
本申请使用的术语"脒"基是指结构-C＝(NRX)N(RXRY)，其中RX和RY如 上述定义。
通常，术语"邻位"是指包括两个或更多个碳原子的基团上的取代基位置， 其中取代基与相邻碳原子连接。
通常，术语"偕位(geminal)"是指包括两个或更多个碳原子的基团上的取 代基位置，其中取代基与同一碳原子连接。
术语"在末端"和"在中部"是指取代基中基团的位置。在基团存在于并非 与化学结构剩余部分进一步键合的取代基末端时，该基团在末端。羧基烷基， 即RXO(O)C-烷基为在末端使用的羧基的实例。基团存在于化学结构取代基 中部时，该基团在中部。烷基羧基(例如烷基-C(O)O-或烷基-OC(O)-)和烷基 羧基芳基(例如烷基-C(O)O-芳基-或烷基-O(CO)-芳基-)为中部使用的羧基的 实例。
本申请使用的"脂族基团链"是指支链或直链脂族基团(例如烷基、烯基或 炔基)。直链脂族基团链具有结构-[CH2]v-，其中v为1-12。支链脂族基团链 为被一个或多个脂族基团取代的直链脂族基团链。支链脂族基团链具有结构 -[CQQ]v-，其中Q独立为氢或脂族基团；然而，Q在至少一种情况下应为脂 族基团。术语脂族基团链包括烷基链、烯基链和炔基链，其中烷基，烯基和 炔基如上述定义。
短语"任选取代的"与短语"取代或未被取代的"可以互换使用。本申请所 述的本发明化合物可以任选被一个或多个取代基取代，诸如上述一般说明的 或以本发明的具体类型、亚类和种类示例。本申请所用的变量R1、R2、R3、 R4、X和Y和本申请所述式中包含的其它变量包括具体的基团，诸如烷基和 芳基。除非另作陈述，用于变量的具体各个基团可以任选被一个或多个本申 请所述的取代基取代。具体基团的每个取代基进一步任选被1-3个卤素、氰 基、氧代基团、烷氧基、羟基、氨基、硝基、芳基、环脂族基团、杂环脂族 基团、杂芳基、卤代烷基和烷基取代。例如，烷基可以被烷基硫基取代且烷 基硫基可以任选被1-3个卤素、氰基、氧代基团、烷氧基、羟基、氨基、硝 基、芳基、卤代烷基和烷基取代。作为另外的实例，(环烷基)羰基氨基的环 烷基部分任选被1-3个卤素、氰基、烷氧基、羟基、硝基、卤代烷基和烷基 取代。当两个烷氧基与相同或相邻原子键合时，两个烷氧基可以与它们键合 的原子一起形成环。
通常，术语"取代的"，无论是否以术语"任选"修饰，均是指在指定结构 上的一个或者多个氢原子被具体取代基替代。具体的取代基如上述定义和如 下化合物及其实施例中的描述中说明。除非另有说明，任选取代的基团可以 在该基团的每个可取代位置上带有取代基，并且在任何指定结构上的一个以 上位置可以被一个以上选自具体基团的取代基取代时，取代基在每个位置上 可以相同或不同。环取代基，诸如杂环烷基可以与另一个环，诸如环烷基键 合成螺-二环环系，例如两个环共有一个共有的原子。本领域技术人员会认识本发明关注的取代基组合为导致稳定或化学上可行的化合物形成的那些 组合。
本申请所用的短语"稳定或化学上可行的"是指在进行其制备、检测和优 选其回收、纯化和本申请公开的一个或多个目的的应用条件时基本上不改变 的化合物。在某些实施方案中，稳定的化合物或化学上可行的化合物为在没 有水分或其它化学反应条件存在下保持在40℃或40℃以下至少1周时基 本上不改变的化合物。
除非另作陈述，本申请所述的结构还意味着包括结构的所有异构体(例 如对映异构体、非对映异构体和几何(或构象)异构体)形式；例如，每个不对 称中心的R和S构型、(Z)和(E)双键异构体和(Z)和(E)构象异构体。因此， 本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体、非对映异构体和几何 (或构象)异构体混合物属于本发明的范围。
另外，除非另作陈述，本申请所述的结构还意味着包括区别仅在于存在 一个或多个富含同位素原子的化合物。例如，具有本发明结构，但氢被氘或 氚替代或碳被富含13C-或14C的碳替代的化合物属于本发明的范围。例如， 这类化合物用作生物测定中的分析工具或探针或用作治疗剂。
化合物
在一方面，本发明提供了式I化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000241
其中
_____为键或不存在；
R1为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R1为任选取代的；
R2为氢或C1-6烷基，其中R2为任选取代的；
R3为氢、C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、-OH 或烷氧基，其中R3为任选取代的；
每个R4独立为氢、
Figure BDA0003164122920000242
其中X为–O-或–NH-，且Y 为C1-6烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、-OH、 卤代烷基或磺酰基，其中R4为任选取代的；
R5为氢或C1-4烷基；
R6为氢或卤素；
R7为氢或卤素；且
n为0、1、2、3、4或5。
在一些实施方案中，R1、R2、R3和R4各自独立地任选取代有烷基、芳 基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、卤素、CN、羧基或氧代。
在一个实施方案中，R1为氢、C1-6烷基、芳烷基、-OH或烷氧基。
在另一个实施方案中，R1为–OH或烷氧基。
在另一个实施方案中，R1为烷氧基。
在另一个实施方案中，R1为甲氧基。
在一个实施方案中，R1为C1-6烷基。
在另一个实施方案中，R1为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基 或叔丁基。
在另一个实施方案中，R1为乙基。
在另一个实施方案中，R1为丙基。
在一个实施方案中，R1为芳烷基。
在另一个实施方案中，R1为苄基。
在一个实施方案中，R2为氢。
在一个实施方案中，R2为C1-6烷基。
在另一个实施方案中，R2为甲基。
在一个实施方案中，R3为氢、C1-6烷基、芳烷基或杂芳烷基，其中R3任选取代有氧代。
在一个实施方案中，R3为氢。
在一个实施方案中，R3具有结构
Figure BDA0003164122920000251
其中R3a为C1-6烷基、芳基或 杂芳基。
在一个实施方案中，R3a为C1-6烷基。在另一个实施方案中，R3a为甲基、 乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基或叔丁基。在另一个实施方案中，R3a为乙基。
在另一个实施方案中，R3a为杂芳基。在另一个实施方案中，R3a为呋喃 基、吡咯基、吡唑基、三唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基或吡唑基。在另一个 实施方案中，R3a为呋喃基。
在另一个实施方案中，R3为C1-6烷基，其任选被氧代取代。
在另一个实施方案中，R3为
Figure BDA0003164122920000261
在另一个实施方案中，R3为
Figure BDA0003164122920000262
在一个实施方案中，R3为杂芳烷基，其任选被氧代取代。
在一个实施方案中，R3为
Figure BDA0003164122920000263
在一个实施方案中，R4为
Figure BDA0003164122920000264
其中X为–NH-，且Y为C1-6烷基、 环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、-OH、卤代烷基或磺 酰基，其中R4任选取代有卤素、CN、羧基或氧代。
在一个实施方案中，R5为氢。
在另一个实施方案中，R5为甲基、乙基、丙基或丁基。在另一个实施方 案中，R5为甲基。
在一个实施方案中，R6为氟。在另一个实施方案中，R6为氯。在另一 个实施方案中，R6为溴。在另一个实施方案中，R6为碘。
在一个实施方案中，n为1。
在一个实施方案中，Y为芳烷基。
在一个实施方案中，Y为苄基。
在一些方面，本发明包括式Ia化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000265
其中变量R1、R2、X和Y如上定义。
在一些方面，本发明包括式Ia-1化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000271
其中变量R1、R2、R3、R4、R5、R6和n如上定义。 在一些方面，本发明包括式Ib化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000272
其中变量R1、R2、X和Y如上定义。
在一些方面，本发明包括式Ia(a)化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000273
其中变量R1和R2如上定义。
在一些方面，本发明包括式Ib(a)化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000281
其中变量R1和R2如上定义。
在一些方面，本发明包括式Ib(b)化合物或其药用盐
Figure BDA0003164122920000282
其中变量R1、R2和R3如上定义。
在一个实施方案中，所述化合物选自：
Figure BDA0003164122920000283
Figure BDA0003164122920000291
Figure BDA0003164122920000301
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含式I化合物和药用载体或 辅料。
在另一方面，本发明提供在生物样本中调节糖皮质激素受体活性的方法， 包括使糖皮质激素受体与有效量的式I化合物接触的步骤。
在另一方面，本发明提供治疗患者中炎性疾病或减轻其严重性的方法， 包括向所述患者给予有效量的式I化合物的步骤。
在该方面的一个实施方案中，所述疾病选自哮喘、关节炎、狼疮、克罗 恩病、炎性肠病、腹部疾病、肾小球肾炎、寻常痤疮、白血病和胰腺癌。在 另一实施方案中，所述疾病选自哮喘和关节炎。
药用组合物
在本发明的一个方面，提供了药用组合物，其中这些组合物包含本申请 所述的任何化合物，且任选包含药用载体、辅料或媒介物。在某些实施方案 中，这些组合物任选进一步包含一种或多种额外的治疗剂。
还应当认识到本发明的某些化合物可以游离形式存在以用于治疗，或适 当时作为其药用衍生物或前药。根据本发明，药用衍生物或前药包括但不限 于药用盐、酯、所述酯的盐或任何其他加合物或衍生物，其在向有此需要的 患者给药后，能够直接或间接提供本申请所述的化合物或其代谢物或残留物。
本申请使用的术语“药用盐”是指这样的盐，其在合理医学判断范围内适 用于与人和低等动物的组织接触而无过度的毒性、刺激性、变应性反应等， 并与合理的益处/风险比相称。“药用盐”是指本发明化合物的任何无毒盐或酯 的盐，其在给予接受者后，能够直接或间接提供本发明化合物或其抑制活性 代谢物或残留物。
药用盐是本领域熟知的。例如，S.M.Berge等在J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中详细描述了药用盐，将其通过引用的方式并入本申 请。本发明化合物的药用盐包括衍生自适当无机和有机酸以及无机和有机酸 碱的那些。药用、无毒酸加成盐的实例为氨基与以下形成的盐：无机酸诸如 盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，或有机酸诸如乙酸、草酸、马来酸、 酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸；或通过使用本领域使用的其他方法诸如 离子交换形成的盐。
其他药用盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸 盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬 酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙二磺酸盐 (ethanedisulfonate)、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸 盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、 乳糖醛酸盐、乳酸盐、月硅酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙 二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈 酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、 特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、 对甲苯磺酸盐、十一碳酸盐、戊酸盐等。衍生自适当碱的盐包括碱金属、碱 土金属、铵和N+(C1-4烷基)4盐。本发明还涉及本申请披露的化合物的任何 含碱性氮基团的季铵化。水溶性或水可分散性或油溶性或油可分散性产物可 通过上述季铵化获得。代表性碱金属或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、 钙盐、镁盐等。其他药用盐包括(在适当时)无毒铵盐、季铵盐以及使用抗衡 离子诸如卤离子、氢氧根离子、羧酸根离子、硫酸根离子、磷酸根离子、硝 酸根离子、低级烷基磺酸根离子和芳基磺酸根离子形成的胺阳离子。
如上所述，本发明的药用组合物额外地包含药用载体、辅料或媒介物， 其在本申请中使用时包括适于所期望的具体剂型的任何以及所有溶剂、稀释 剂或其他液体媒介物、分散或混悬助剂、表面活性剂、等张剂、增稠剂或乳 化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition,E.W.Martin(MackPublishing Co.,Easton,Pa.,1980)披露了 在配制药用组合物中使用的各种载体及其制备的已知技术。除了任何常规载 体介质与本发明化合物不相容(诸如产生任何不期望的生物效应或以有害方 式相互作用)之外，认为其用途均落入本发明的范围内。可用作药用载体的 物质的一些实例包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血 清蛋白诸如人血清白蛋白、缓冲物质诸如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸或山梨酸 钾、不饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质诸如硫酸鱼精 蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、 聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、羊毛脂、 糖诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；西黄蓍胶粉；麦芽 糖；明胶；滑石；赋形剂诸如可可豆脂和栓剂蜡；油诸如花生油、棉籽油； 红花油；麻油；橄榄油；玉米油和大豆油；二醇诸如丙二醇或聚乙二醇；酯 诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂诸如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻 酸；无热原水；等渗盐水；林格溶液；乙醇和磷酸盐缓冲溶液，以及其他无 毒相容性润滑剂诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣 剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中(根 据配制人员的判断)。
化合物的使用和给药
在另一方面，本发明提供了治疗受试者中炎症或减轻其严重性的方法， 所述方法包括对有此需要的所述受试者优选哺乳动物给予有效量的包含式I 化合物的组合物。本发明还提供了治疗受试者中炎性疾病或减轻其严重性的 方法，所述方法包括对有此需要的所述受试者优选哺乳动物给予有效量的包 含式I化合物的组合物。
在另一方面，本发明提供了治疗涉及糖皮质激素受体的病症、疾病或障 碍或减轻其严重性的方法。在某些实施方案中，本发明提供了治疗涉及糖皮 质激素受体活性缺陷的病症、疾病或障碍的方法，所述方法包括对有此需要 的受试者优选哺乳动物给予有效量的包含式I化合物的组合物。在某些实施 方案中，本发明提供了治疗受试者的炎性病症、疾病或障碍的方法，其中所 述受试者具有正常糖皮质激素受体活性，所述方法包括对有此需要的受试者 优选哺乳动物给予有效量的包含式I化合物的组合物。
在另一方面，本发明提供了治疗涉及糖皮质激素受体的病症、疾病或障 碍或减轻其严重性的方法，其中所述病症、疾病或障碍选自哮喘、关节炎、 狼疮、克罗恩病、炎性肠病、腹部疾病、肾小球肾炎、寻常痤疮、白血病和 胰腺癌。
本发明的化合物或药用组合物的“有效量”为有效治疗如上所述的一种 或多种疾病、障碍或病症或减轻其严重性的量。
可根据本发明的方法，使用有效治疗如上所述的一种或多种疾病、障碍 或病症或减轻其严重性的任何量以及任何给药途径来给予化合物和组合物。
所需的精确量将在受试者之间变化，这取决于受试者的物种、年龄和一 般状况、感染的严重性、具体药物及其给药模式等。本发明的化合物优选地 配制为剂量单位形式以便于给药和剂量均一化。本申请使用的表述“剂量单 位形式”是指适于待治疗患者的药物的物理上离散的单位。然而，应当理解 的是本发明化合物和组合物的总体每日用量将由主治医师在合理医学判断 范围内来决定。针对任何具体患者或生物体的特定有效剂量水平将取决于多 种因素，包括待治疗的病症以及所述病症的严重性；所采用的特定化合物的活性；所采用的特定组合物；患者的体重、一般健康、性别和饮食；所采用 的特定化合物的给药时间、给药途径和排泄速率；治疗持续时间；与所采用 的特定化合物组合或同时使用的药物等；以及医药领域熟知的因素。本申请 使用的术语“患者”是指动物，优选哺乳动物，且最优选人类。
本发明的药用组合物可经如下给予至人类和其他动物：口服、直肠、肠 胃外、池内、阴道内、腹膜内、局部(如经粉末、软膏剂、滴剂或贴剂)、口 腔(作为口服或鼻部喷雾)等，这取决于待治疗的感染的严重性。在某些实施 方案中，本发明化合物可口服或肠胃外给予，其剂量水平为约0.01mg/kg至 约50mg/kg且优选约0.5mg/kg至约25mg/kg受试者体重/天，每日给予一 次或多次，以获得期望的治疗效果。
口服给药的液体剂型包括但不限于药用乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、 浆剂和醑剂。除了活性化合物之外，液体剂型可含有本领域通常使用的惰性 稀释剂，诸如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、 乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油 类(具体地，棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄榄油、蓖麻油和麻油)、甘 油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和山梨糖醇酐脂肪酸酯，以及它们的混合物。除了惰性稀释剂之外，所述口服组合物也可包含辅料诸如润湿剂、乳化剂 和助悬剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂。
可注射制剂例如无菌可注射水性或油性混悬液可根据本领域已知的技 术使用适当的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。无菌可注射制剂也可为于无 毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、混悬剂或乳剂，例如， 于1,3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受媒介物和溶剂为水、林格溶液、U.S.P. 和等渗氯化钠溶液。此外，无菌、不挥发性油通常用作溶剂或助悬介质。针 对该目的，可采用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。 此外，脂肪酸诸如油酸用于制备可注射液。
可注射制剂可通过如下灭菌：例如经细菌截留滤器进行过滤或以无菌固 体组合物形式引入灭菌剂，所述组合物可在使用前溶于或分散于无菌水或其 他无菌可注射介质中。
为了延长本发明化合物的效果，通常期望的是减缓化合物由皮下或肌内 注射的吸收。这可通过使用具有较差水溶性的晶体或无定形物质的液体混悬 液来完成。然后化合物的吸收速率取决于其溶出速率，后者继而可取决于晶 体粒度和晶型。可选择地，肠胃外给药的化合物形式的延长吸收通过将所述 化合物溶于或混悬于油性媒介物来完成。可注射储存制剂(depot)形式通过在 生物可降解聚合物诸如聚乳酸-聚乙醇酸交酯中形成所述化合物的微囊基质 来制备。取决于化合物与聚合物的比率以及所采用的具体聚合物的性质，可 控制化合物的释放速率。其他生物可降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和 聚(酸酐)。可注射储存制剂也通过将化合物包囊于与身体组织相容的脂质体 或微乳中来制备。
用于直肠或阴道给药的组合物优选为栓剂，其可通过如下制备：使本发 明化合物与适当的无刺激性赋形剂或载体诸如可可豆脂、聚乙二醇或栓剂蜡 混合，所述赋形剂或载体在环境温度为固体，但在体温时为液体且由此在直 肠或阴道腔中融化且释放活性化合物。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉末剂和颗粒剂。 在所述固体剂型中，使活性化合物与至少一种惰性、药用赋形剂或载体诸如 枸橼酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或膨胀剂诸如淀粉、乳糖、 蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂例如，羧甲基纤维素、藻酸盐、明 胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂诸如甘油，d)崩解剂诸如 琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂诸如石蜡，f)吸收加速剂诸如季铵化合物，g)润湿剂诸如鲸蜡醇 和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂诸如高岭土和膨润土，以及i)润滑剂诸如滑石、 硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，以及它们的混合物。 在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包含缓冲剂。
相似类型的固体组合物也可用作软和硬填充胶囊中的填充剂，其所使用 的赋形剂诸如乳糖或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等。片剂、锭剂、 胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可使用包衣和包囊(shell)诸如肠溶包衣以 及医药配制领域中熟知的其他包衣来制备。它们可任选含有遮光剂且也可为 组合物，所述组合物仅在或优先在肠道的某一部分任选以延迟方式释放活性 成分。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。相似类型的固体组合 物也可用作软和硬填充胶囊中的填充剂，其所使用的赋形剂诸如乳糖以及高 分子量聚乙二醇等。
活性化合物也可为含有如上所述的一种或多种赋形剂的微囊形式。片剂、 锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可使用包衣和包囊诸如肠溶包衣以 及医药配制领域中熟知的其他包衣来制备。在所述固体剂型中，活性化合物 可与至少一种惰性稀释剂诸如蔗糖、乳糖或淀粉混合。所述剂型也可包含作 为常规实践的除惰性稀释剂之外的额外物质，例如制片润滑剂和其他制片助 剂诸如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，剂型也可 包含缓冲剂。它们可任选含有遮光剂且也可为组合物，所述组合物仅在或优 先在肠道的某一部分任选以延迟方式释放活性成分。可使用的包埋组合物的 实例包括聚合物质和蜡。
用于局部和经皮给药本发明化合物的剂型包括软膏剂、糊剂、如高级、 洗剂、凝胶剂、粉末剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂。使活性成分在无 菌条件下与药用载体和任何需要的防腐剂或缓冲剂(可能需要时)混合。眼部 好自己、滴耳剂和滴眼剂也可认为在本发明范围内。此外，本发明涵盖使用 经皮贴剂，其具有向机体提供化合物的可控递送的额外优势。所述剂型通过 将化合物溶于或分散于适当介质中来制备。吸收增强剂也可用于提高化合物 穿过皮肤的流量。速率可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物 基质或凝胶来控制。
在本发明中用作糖皮质激素受体调节剂的化合物的活性可根据本领域 通常所述的方法以及在本申请实施例中所述的方法来测定。
实施例
提供本申请的实施例以使得本发明能够得到更完全地理解，且不意在以 任何方式进行限制。
一般合成方案
方案1:
Figure BDA0003164122920000361
方案1提供了由可商购得到的氢化可的松合成式1-E化合物的一般合成 方案，其中R1、R4和R3a如上定义。使用试剂诸如高碘酸氧化氢化可的松得 到式1-A的羧酸，其可进一步在合成的以后阶段被官能化。将1-A用碱和醛 试剂诸如NaH/甲酸甲酯条件处理得到式1-B化合物。将1-B用肼试剂诸如 苯基肼或N-苄基-3-肼基苯甲酰胺处理得到式1-C化合物。将式1-C化合物 的羧酸部分用式NH2—R1的胺试剂进行官能化得到式1-D化合物。将17α 羟基取代基用结构
Figure BDA0003164122920000371
的酰氯进行官能化得到式1-E化合物。
方案2:
Figure BDA0003164122920000372
式2-I化合物可由起始化合物诸如2-A根据上述方案2合成。反应步骤、 所述步骤的顺序以及使用的试剂意在示例说明而不意在以任何方式限制本 发明。
可使用高碘酸实现2-A的α-羟基乙酰基的羟基甲基的氧化断裂得到2-B。 使用例如氢气和Pd/C催化剂将2-B的烯烃部分还原得到饱和产物2-C。使 用例如分子溴进行随后的溴化得到二-α,α’溴化物化合物2-D。使用碱诸如碳 酸钙以及催化剂诸如溴化锂将溴取代基进行双重消除得到2-E。2-E的烯醇 式盐的产生可使用碱诸如氢化钠来完成，随后进行甲酸甲酯的亲核加成可得 到化合物2-F。
使用苯基肼将2-F胺化可得到吡嗪化合物2-G。随后使用式R3-C(O)-X 的活化羰基化合物(其中X为离去基团诸如氯)将2-G的游离羟基进行酯化可 得到式2-H化合物。使用式R2-NH2的胺将式2-H化合物的羧酸部分进行酰 胺化可得到式2-I化合物。
材料和方法
蛋白表达和纯化.含有对于糠酸莫米松的突变F602A、C622Y、T668V、 S674T、V675I、K699A和K703A以及对于氢化可的松的突变F602A、C622Y、 T668V、S674T、V675I、E684A和E688A的GR LBD(残基525-777)表达为 来自表达载体pET24a(Novagen)的6xHis-GST融合蛋白。经修饰的融合蛋白 在N端以及GST和GR LBD之间的凝血酶蛋白酶位点含有His6-tag (MKKGHHHHHHG)。使用表达质粒转化的BL21DE3细胞在16℃生长于LB 培养基中以达到OD600～1并用0.1mM IPTG和50μM糠酸莫米松或氢化 可的松诱导。收集细胞，使每12升的细胞再混悬于200ml提取缓冲液(50mM Tris[pH8],150mM NaCl,2M脲,10％甘油+1μM配体)，并经French Press (压力设置在1000Pa)传代三次。将溶胞产物在20,000rpm离心30min，并 将上清液加载至25ml镍柱。将柱用700ml提取缓冲液洗涤并用300ml 50％ 缓冲液B(25mM Tris[pH8],500mM咪唑,10％甘油,1μM配体)洗脱。用凝 血酶以1:1000的蛋白酶/蛋白比在冷的室内使GR LBD裂解过夜，同时对20 mM Tris[pH8],500mM NaCl,10％甘油,1μM配体透析。通过结合至Ni-NTA 镍柱移去H6GST-tag。流动液体(flow through)进一步经凝胶过滤(20mM Tris [pH8],500mM NaCl,1mM DTT,1mM EDTA,10％甘油,1μM配体)纯化。使糠酸莫米松结合蛋白与较长形式的SRC2-3肽： SPKKKENALLRYLLDKDDTKD复合，并过滤浓缩至6mg/ml。使氢化可的 松GR LBD与较短形式的SRC2-3：KENALLRYLLDKDD以及0.2％B-辛基葡萄糖苷复合，并过滤浓缩至7mg/ml。
结晶.使糠酸莫米松GR晶体在室温在悬滴中生长，所述悬滴含有1μl 与GP2肽复合的蛋白以及含有0.1M枸橼酸钠[pH6]和2.2M氯化钠的2μl 孔溶液。使氢化可的松GR晶体在室温在悬滴中生长，所述悬滴含有1μl蛋 白复合物以及含有0.1M咪唑pH6.5、1M乙酸钠三水合物的1μl孔溶液。于 孔缓冲液中的30％蔗糖用作以上两者的冷冻保护剂。
结构确定.CCP4程序PHASER用于分子置换(36)，其中使用GR LBD/ 地塞米松结构(PDB编码:1M2Z)(27)作为搜索模型。使用CNS(37)和CCP4 程序REFMAC5(38)对初始模型进行手动重建和精修。使用PyMOL(PyMOL Molecular Graphics System,Version 1.3,
Figure BDA0003164122920000391
LLC)制备所有结构图。
细胞转染和报道分子测定.在转染前一天，AD293细胞以20,000/孔在 24孔板中裂解。对于转录激活，经X-tremeGENE 9(Roche)将100ng pHHLuc (MMTV-Luc)质粒、0.1ngpRShGR以及5ng phRGtkRenilla一起转染至 AD293细胞/孔。对于转录抑制，将10ng AP1-Luc、100ng pRShGR和5ng phRGtkRenilla转染至AD293细胞/孔。在转染后一天，将细胞经不同处理(类 固醇或媒介物)进行诱导16hrs过夜。经1xPassive裂解缓冲液(Promega)收集细胞，经Dual-Glo萤光素酶系统(Promega)测定萤光素酶活性。按照萤光素 酶值/花虫型荧光素酶值(作为相对萤光素酶单位(RLU))对数据进行作图。
体外GR配体结合测定.体外GR结合测定与先前所述是相似的(39)。 基本上讲，热配体[3H]Dex固定于25nM，且与5％GR胞质溶胶+20mM钼 酸钠在TAPS缓冲液(ph8.8)中培养，加入冷配体(由0.1nM至10μM变化) 以完成热配体结合。经GraphPad Prism 5对数据进行作图以绘制标准竞争曲 线。
生物学实施例
实施例1:氢化可的松-结合以及MF-结合的GR LBD的总体结构
GR LBD的结晶由于其溶解性问题而为一直以来的挑战。使用高亲和性 配体DEX(27)确定原始GR LBD结构，所述配体与具有F602S突变的GR LBD结合，其改善蛋白溶解性。然而，相比于DEX而言，氢化可的松是明 显较弱的配体且F602S突变不足以稳定与氢化可的松(一种内源性激素)结合 的GR LBD(图8,第1道)。为了鉴定可提高GR LBD溶解性而不影响总体 结构的氨基酸，发明人将GR定位于类固醇激素家族的最接近成员，即MR、 雄激素受体(AR)和黄体酮受体(PR)，它们相比于GR而言明显更易溶解。除 了F602之外，残基C622、T668、S674和V675不同于该家族的保守序列， 因此发明人使那些氨基酸突变回至保守残基(F602A、C622Y、T668V、S674T 和V675I，称为AYVTI)。这些残基中的大部分位于具有PR残基的蛋白内部， 所述PR残基在PRLBD结构中具有更好的填充(28)。事实上，当与氢化可 的松结合时，AVYTI GR LBD相比于F602S LBD而言具有明显更好的溶解 性(图8,第2道)。可表达并纯化突变的GR LBD，其收率大于5mg/L。然而， 发明人未能获得结合于氢化可的松或MF的该突变GR LBD的晶体。GR LBD 在其螺旋H9具有若干赖氨酸和谷氨酸残基，其长的侧链可影响结晶。具有 作为表面熵减少突变的这些残基的丙氨酸突变(对于MF的K669A/K703A， 以及对于氢化可的松的E684A/E688A)的GR LBD仍然是可溶的(图8,第3 和4道)，且发明人获得了结合至MF和氢化可的松的GR LBD的晶体(图9)。 所有这些突变远离配体结合口袋且不改变配体-介导的GR转录激活或转录 抑制功能(图10)。
MF-结合的和氢化可的松-结合的GR LBD的总体结构(图1A)类似于 DEX-结合的GRLBD，其中11个螺旋填充至螺旋多层束(helical sandwich bundle)的三层中，且配体-结合腔包埋于该束的下部。数据采集和精修的统 计汇总于表S1。氢化可的松-结合的GR LBD的总体结构几乎与DEX-结合 的GR LBD相同，而在MF-结合的GR LBD和DEX-结合的GR LBD之间存 在一些显著差异，包括螺旋1前的成环方向(在图1B中标记为“1”)；螺旋5 和6之间的环状区域的扩展(在图1B中标记为“2”)；以及AF-2螺旋的C端 方向的变化(在图1B中标记为“3’)。氢化可的松和MF的配体结合方式通过 结合配体和周围口袋残基的清晰的电子密度图得到良好限定(图1C)。
Figure BDA0003164122920000411
实施例2:氢化可的松、DEX和MF的效价强度、亲和性
氢化可的松、DEX和MF的化学结构变化(图2A)反映了糖皮质激素的 进展：由简单至复杂以及由一个水平至多个水平。氢化可的松结构提供了碱 性4环类固醇骨架；然后DEX添加1,2双键、16甲基化以及9α卤化(图2A)； 且MF进一步在22氯化，且更重要的是，在17α添加亲脂性糠酸酯基(图2A)， 从而替换DEX和氢化可的松的羟基。为了测试所述化学变化对GR效价强 度的作用，发明人以完全剂量响应曲线的形式并列比较了MF、DEX和氢化 可的松活性对GR转录激活和转录抑制两者的作用。对于转录激活，发明人 使用MMTV-驱动的萤光素酶报道分子系统(图2B)。MF和DEX在饱和浓度 (1μM)显示了几乎相同的效能(最大活性)，而氢化可的松在其饱和浓度(10 μM)仅具有80％的DEX效能。相对于DEX，MF剂量响应曲线中存在大的 向左偏移，这表明MF的效力是DEX的20倍。在另一方面，氢化可的松曲 线具有大的向右偏移，这显示出其效力是DEX的十分之一。MF、DEX和 氢化可的松在转录激活方面的EC50值分别为0.33nM、6.7nM和70nM。
对于转录抑制，使用AP1-驱动的萤光素酶报道分子(图2C)。MF、DEX 和氢化可的松在它们的饱和浓度显示出相似的效能。同样地，MF相比于DEX 显示出明显更高的(60倍)效价强度，且氢化可的松相比于DEX显著更弱； MF、DEX和氢化可的松在转录抑制方面的EC50值分别为0.005nM、0.32nM 和2.7nM。与有关诱导需要更高类固醇浓度的频繁观察一致的是，对于各个 化合物而言，诱导效价强度至少为抑制效价强度的十分之一。该差异提供了通过使用极低剂量的糖皮质激素而使转录激活与转录抑制区分的机会。例如， 在0.1nM，MF达到了95％的转录抑制效能，而仅25％的转录激活效能(图 2B和2C)。
一般地，高效价强度由针对受体的高亲和性确定，但细胞辅助因子也起 到了重要作用(29,30)。为了测试MF对于GR的亲和性，发明人针对MF、 DEX和氢化可的松进行了体外GR配体结合竞争测定(图2D)，其显示出GR 结合亲和性的次序为MF>DEX>氢化可的松。MF、DEX和氢化可的松的 Ki值分别为0.7nM、8nM和91nM。该结果发明人针对效价强度的结果一致。然而，MF和DEX之间的体外结合IC50差异仅为约10倍，而效价强度 差异更大：针对诱导的差异为20倍且针对抑制的差异为60倍(图2B和2C)。 效价强度差异的其他组成必然是由与细胞因子的相互作用引起，所述细胞因 子识别由不同配体结合引起的表面构型变化。
实施例3:引起氢化可的松与GR的低亲和性的1,2单键的柔性
为了理解氢化可的松的低亲和性的潜在机制，发明人对氢化可的松-结 合的GRLBD和DEX-结合的GR LBD进行了结构比较。氢化可的松-结合的 GR LBD的总体结构几乎与DEX-结合的GR LBD完全相同，且不存在显著 的构型变化。发明人之后研究了配体结合的详细内容。如上所提及的，DEX 与氢化可的松的差异仅在于：1,2双键、9α卤化以及16甲基化(图2A)。DEX 的C1-C2双键使得类固醇A环和C3-酮基变成平面的，因此使得C3-酮容易 地与R611和Q570相互作用(图3A)。相反地，由于氢化可的松C1-C2单键 的柔性，类固醇A环需要弯曲以与R611和Q570形成氢键。同样地，由于 未结合的氢化可的松的C1-C2单键在两种构型(A环平面的上方和下方)之间 来回变换，需要水分子以形成氢键网状结构，从而使配体保持在原位。这些 观察解释了氢化可的松与GR的相对低的亲和性。为了证实C1-C2双键的重 要性，发明人在转录激活测定中测量了泼尼松龙的效价强度，其与氢化可的 松的区别仅在于添加C1-C2双键(图3B,棕色)。事实上，泼尼松龙的C1-C2 双键引起了氢化可的松剂量响应曲线的约5倍的向左偏移(图3B)且因此可解 释由DEX引起的多于一半的总体向左偏移。保持效价强度提高可能是由于 C-9α卤化以及C-16甲基化，这两者均增强了受体口袋内的表面相互作用(图 11)。
实施例4:17α糠酸酯确定MF的高亲和性
DEX的化学结构形成了几乎平面的二维表面(图4A)，但在MF中，17α 糠酸酯以与该环平面几乎成90°伸出该表面，使得该配体成为三维结构(图 4B)。在DEX-结合的GR LBD中，在类固醇D环上方存在空的空间，其为 由螺旋3、螺旋5、β3-β4转弯和螺旋6-7形成的疏水空腔(图4C)。在MF- 结合的GR LBD结构中，伸出的17α糠酸酯略微使配体结合口袋伸展，且占据该空腔的大部分空间。亲脂性17α糠酸酯很好地嵌入该疏水空腔并产生了 与周围F623、I629、M639、C643、I559和L563氨基酸的大量的疏水性相 互作用(图4D)，其类似球窝关节(socket joint)内的稳固锚定球(firmly anchored ball)，由此解释了为何MF所具有的对GR的亲和性是DEX的10倍。
实施例5:Q642在识别具有不同效价强度的糖皮质激素中起到关键作 用
已经描述了糖皮质激素被GR LBD的基本识别(27,31,32)。如在DEX- 结合的GRLBD中，Q570和R611与类固醇A环的C-3酮基相互作用，N564 与类固醇C环的C-11羟基相互作用，且T739与侧链C-21羰基相互作用(图3A)。这四对重要的氢键使得类固醇骨架稳固地保持在该位置。相对于DEX- 结合的以及氢化可的松-结合的GR LBD而言，MF的伸入的C-17α糠酸酯基 仅引起配体结合口袋内的一个大变化，其为螺旋7中的Q642的移动(图5A)。 在DEX-结合的GR LBD结构中，Q642与螺旋7的轴垂直且与DEX的C-17α 羟基形成氢键。在结合MF后，C-17α糠酸酯基使Q642移开，使其以几乎 90°弯曲至与螺旋7的轴平行的位置(图5A)。
由于Q642定向为在结合MF后配体结合口袋中唯一的大变化，发明人 使Q642突变以使其变小(Q642A)、变大(Q642F)、呈疏水性(Q642L)或荷电 (Q642E,Q642K)，或仅产生轻微变化(Q642N)。发明人使用MF或DEX以亚 饱和浓度(MF,1nM；DEX,10nM)测试了那些突变。有趣的是，对于一个突 变(Q642N)，DEX活性几乎被抑制，而MF活性仍保持最大(图5B)。因此， 单一突变可使MF活性与DEX活性完全区分。其他突变引起DEX和MF的 大部分活性的丧失；例外的是，Q642L具有MF的一半活性而不具有或仅具 有非常低的DEX活性。MF的17α糠酸酯也轻微地改变M560和M639周围 的构型，但在那些残基中的突变不具有与Q642N突变相同的效果(图12)。
为了分析Q642对识别具有不同效价强度的配体所起的显著作用，发明 人在GR转录激活测定中确定了对于MF、DEX和氢化可的松(分别代表高、 中和低的效价强度)在结合Q642N中的完全剂量响应曲线(图5C)。对于MF， Q642N的剂量响应曲线无法与其野生型相区分。DEX在于其野生型相比时， Q642N引起了曲线的大的向右偏移，其中EC50由7.5nM至40nM变化， 效价强度降低5倍。对于氢化可的松，Q642N受体变体是失活的，即使在饱 和浓度条件下。因此，单一突变Q642N具有完全区分具有高、中和低的效 价强度的配体的能力，这表明Q642作为识别具有不同效价强度的配体的感 受器。当结合中-或低-效价强度的糖皮质激素(例如DEX或氢化可的松)时， Q642与17α羟基形成氢键以使结合的配体固定在配体结合口袋中的位置。 当结合与高效配体诸如MF时，Q642被17α亲脂性基团移开。该变化与由配体结合引起的其他小的变化相适应，其干扰螺旋6、6和7，导致螺旋5 和螺旋6之间的环延伸并改变了AF2螺旋的C端的方向(图1B)，从而产生 了高效价强度特征。
为了研究Q642在结合不同配体方面的确切作用，发明人测试了GR Q642A的配体结合能力，对此DEX在单一不饱和浓度下几乎不具有转录激 活活性(图5B)。在使用来自表达野生型GR或GR Q642A的AD293细胞的 胞质溶胶的体外结合测定中，相比于野生型GR而言，Q642A突变体显示出 与DEX的结合亲和性的大量丧失(Kd(Q642A)＝22.3nM相比Kd(WT)＝5.2 nM)，但在高配体浓度仍然保持某种亲和性(图13A)。在另一方面，在报道 分子测定中Q642A显示出几乎无转录激活活性，即使在DEX的饱和浓度情 况下(图13B)。这些数据显示出GR Q642A的DEX转录激活的缺失是由于配 体亲和性降低以及抑制GR激活的构型变化两者。与DEX和氢化可的松不 同的是，Q642不与MF形成氢键。为了确定Q642A是否仍然具有结合MF 的能力，发明人使用GR Q642A突变蛋白进行了竞争结合实验(图13C)。MF 和氢化可的松均能够竞争3H-DEX与GR Q642A的结合，但具有大的亲和性 降低(MF和氢化可的松的Ki分别为9nM和250nM，分别与其野生型GR 的0.7nM和91nM进行比较)。总的来说，这些结果表明Q642作为一个支 柱以支撑螺旋7的脊部，其通过与含有C-17α羟基的配体形成氢键并同时使 具有C-17α糠酸酯基的配体移开。将Q642用小的残基如丙氨酸替换可导致 螺旋7的脊部塌陷且由此丧失全部转录激活。
实施例6:新的糖皮质激素的分子设计
以下关联了本申请讨论的化合物指定编号：
VSG# 化合物#
VSG02 1
VSG03 3
VSG10 2
VSG11 4
VSG14 6
VSG15 5
VSG22 8
VSG24 7
VSG111 10
VSG112 11
VSG113 12
MF-结合的GR LBD结构揭示了MF的高效价强度主要通过17α糠酸酯 基与配体结合口袋残基的亲和性增强的相互作用来实现。发明人采用了这些 启示以设计新的糖皮质激素，从而获得了甚至更多的高效糖皮质激素。发明 人先前已经确定了与脱酰可的发唑(DAC)结合的GR LBD的晶体结构(32)， 其为在类固醇A环的C-3酮具有大的苯基吡唑基的合成糖皮质激素(图6A)。 DAC为高亲和性糖皮质激素，其已经用于治疗糖皮质激素-抵抗的儿童期急 性白血病(22)。然而，DAC在以高浓度使用时具有强的细胞毒性，且癌细胞 逐渐发展为对药物耐受(33)。DAC在C-17α位具有羟基。MF-结合的GR LBD 暗示了通过将DAC的17α羟基用17α糠酸酯基替代来开发高效能糖皮质激 素的可能性。发明人选择了DAC部分VSG24作为起始点(图6A)。在MMTV 报道分子测定中VSG24本身几乎不具有活性。将17α羟基用糠酸酯(VSG22) 替代显著增强了效价强度和效能两者，导致EC50变化超过1000倍。VSG24F 的效价强度优于DEX和DAC(图6A)。这些数据证实了在C17α位的亲脂性 基团的提高糖皮质激素效价强度的功效。尽管VSG22仍然略微弱于MF，但 是经C17α的简单变化引起的效价强度的显著变化表明该策略的增强糖皮质 激素效价强度的功效。类似策略已经用于增强丙酸氟替卡松的效价强度，获 得了高效化合物糠酸氟替卡松，其为一种广泛使用的哮喘治疗药物(34)。
DAC-结合的GR LBD结构揭示使得先前未发现的通道经DAC的苯基 吡唑基而打开(32)。发明人通过在C-3酮引入了甚至更大的基团，设计并合 成了若干所述糖皮质激素(VSG02,VSG03,VSG15；图5B)。所有这些化合物 显示出针对GR的相对低的效价强度。基于MF-结合的GR LBD结构，发明 人在C-17α位引入了糠酸酯基，从而分别产生了相应的化合物VSG10、 VSG11和VSG14。在所有这三个化合物中，17α糠酸酯显著提高了GR效价 强度和效能两者(图6B；图14)，这进一步表明了添加17α糠酸酯可为一种增 强经设计的糖皮质激素的效价强度的常用策略。
合成实施例
Figure BDA0003164122920000461
合成化合物1-A:
将氢化可的松(3.6g,10mmol)溶于甲醇(60ml)，然后在0℃逐滴加入高 碘酸(4.5g在60ml水中,20mmol)。将混合物在室温搅拌2h。然后将甲醇浓 缩并加入H2O(100ml)，形成析出物。将析出物滤过，用水(15×3ml)洗涤， 并空气干燥得到化合物1-A(2.8g)，其为白色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ12.22(s,1H),5.55(s,1H),4.77(s,1H),4.40–4.08(m,2H),1.37 (s,3H),0.88(s,3H).
Figure BDA0003164122920000471
合成化合物1-B:
将化合物1-A(1.7g,5mmol)溶于无水甲苯(15ml)并加入甲酸甲酯(2ml)。 然后加入NaH(900mg,20mmol,60％分散于矿物油中)，并将反应混合物在 室温搅拌4h。然后加入1NHCl(120ml)并将混合物用EtOAc萃取若干次。 将溶剂干燥并除去得到1.8g化合物1-B，其为黄色泡沫状物，其无需进一步 纯化即可在下一步中使用。LR-Mass(ESI)m/z:375.3[M-H]+.
Figure BDA0003164122920000472
合成化合物1-Ca:
将化合物1-B(1.8g,5mmol)溶于AcOH(15ml)和H2O(3ml)，并加入N- 苄基-3-肼基苯甲酰胺(1.1g,5mmol)。将混合物在室温搅拌4h。加入冷水(100 ml)，并将析出物滤过，用H2O(10×3ml)洗涤，并空气干燥得到化合物 1-Ca(1.9g)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(t,J＝6.0Hz, 1H),8.01(s,0H),7.90(dt,J＝7.3,1.6Hz,1H),7.67–7.58(m,1H),7.50(s,1H), 7.37–7.20(m,4H),6.15(s,1H),4.49(d,J＝5.9Hz,2H),4.30(m,1H),1.23(s, 3H),0.90(s,2H).
Figure BDA0003164122920000481
合成化合物1-Da:
使用与针对制备化合物1-Ca所述相同的操作，并使用苯基肼代替N- 苄基-3-肼基苯甲酰胺，得到化合物1-Da，其为白色固体。LR-Mass(ESI)m/z: 447.3[M-H]+.
Figure BDA0003164122920000482
合成化合物1:
将化合物1-Ca(290mg,0.5mmol)溶于无水DMF(4ml)，并加入DMAP (183mg,1.5mmol)、Bop(265mg,0.6mmol)和乙胺盐酸盐(50mg,0.6mmol)。在 室温搅拌过夜后，加入H2O(20ml)并将混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤， 并经Na2SO4干燥。将粗产物经色谱法纯化(使用DCM:MeOH(20:1))得到化 合物1，其为白色固体(75％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.98(s,1H,Ph-H), 7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.60-7.52(m,2H),7.40(s,1H),7.38-7.29(m,5H,Ph-H),6.68(t,1H,NH),6.41(t,1H,NH),6.11(s,1H,CH＝C),5.34(s,1H,OH), 4.66(d,J＝8.0Hz,2H),4.48(brs 1H,OH),3.50-3.45(m,1H),3.26-3.23(m, 2H),2.98(d,J＝12Hz,1H),2.67(d,J＝12Hz,1H),2.51-1.19(m,20H),1.05(s, 3H,CH3)；LR-Mass(ESI)m/z:609.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000491
合成化合物2:
在0℃在氮气下向化合物1(120mg,0.2mmol)、TEA(0.056mL,0.4 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入α-呋喃甲酰氯(29mg,0.22mmol)。 将混合物在室温搅拌30min。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯 化(使用DCM:MeOH(50:1))得到化合物2，其为白色固体(82％)。1H-NMR (CDCl3,400MHz)δ:7.99(s,1H,Ph-H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.64-7.52(m, 3H),7.43(s,1H),7.34-7.28(m,5H,Ph-H),7.17(d,1H),6.73(t,1H,NH), 6.51-6.50(m,1H),6.14(s,1H,CH＝C),5.60(t,1H,NH),4.64(d,J＝4.0Hz, 2H),4.57(brs 1H,OH),4.48(d,J＝8.0Hz,2H),3.50-3.48(m,1H),3.27-3.24 (m,2H),3.01(d,J＝12Hz,1H),2.73(d,J＝12Hz,1H),2.51-1.15(m,20H), 1.03(s,3H,CH3)；LR-Mass(ESI)m/z:703.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000492
合成化合物3:
使用与针对制备化合物1所述的操作相一致的操作，并使用1-氨基丙烷 盐酸盐代替乙胺盐酸盐，得到化合物3，其为白色固体(68％)。1H-NMR(CDCl3, 400MHz)δ:7.99(s,1H,Ph-H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.60-7.52(m,2H), 7.41(s,1H),7.38-7.29(m,5H,Ph-H),6.64(t,1H,NH),6.17(t,1H,NH),6.11(s, 1H,CH＝C),4.66(d,J＝8.0Hz,2H),4.49(brs1H,OH),3.50-3.45(m,1H), 3.26-3.23(m,2H),2.98(d,J＝12Hz,1H),2.67(d,J＝12Hz,1H),2.51-1.19(m, 19H),1.01(s,3H,CH3),0.89(t,3H)；LR-Mass(ESI)m/z:623.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000501
合成化合物4:
使用与针对制备化合物2所述相同的操作，并使用化合物3代替化合物 1，得到化合物4，其为白色固体(75％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.95(s, 1H,Ph-H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.58-7.50(m,3H),7.43(s,1H),7.34-7.28 (m,5H,Ph-H),7.18(d,1H),6.91(t,1H,NH),6.51-6.50(m,1H),6.12(s,1H, CH＝C),5.63(t,1H,NH),4.65(d,J＝4.0Hz,2H),4.57(brs 1H,OH),3.50-3.48 (m,1H),3.25-3.20(m,2H),3.02(d,J＝12Hz,1H),2.75(d,J＝12Hz,1H), 2.51-1.15(m,19H),1.05(s,3H,CH3),0.87(t,3H)；LR-Mass(ESI)m/z:717.4[M +H]+.
Figure BDA0003164122920000502
合成化合物6:
使用与针对化合物1所述的相同操作，并使用苄基胺代替乙胺盐酸盐； 随后使用与针对化合物2所述相同的操作，得到化合物6，其为白色固体 (61％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.99(s,1H,Ph-H),7.58(d,J＝6.6Hz, 1H),7.57-7.50(m,3H),7.42(s,1H),7.36-7.26(m,10H,Ph-H),7.13(d,1H), 6.54(t,1H,NH),6.51-6.49(m,1H),6.14(s,1H,CH＝C),5.83(t,1H,NH),4.65 (d,J＝4.0Hz,2H),4.54(brs 1H,OH),4.48(d,J＝8.0Hz,2H),3.50-3.45(m, 1H),3.01(d,J＝12Hz,1H),2.74(d,J＝12Hz,1H),1.97-1.15(m,17H),1.06(s, 3H,CH3)；LR-Mass(ESI)m/z:765.4[M+H]+；787.4[M+Na]+.
Figure BDA0003164122920000511
合成化合物5:
使用与针对化合物6所述的相同操作，并使用丙酰氯代替α-呋喃甲酰氯， 得到化合物5，其为白色固体(55％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.96(s,1H, Ph-H),7.78(d,J＝6.6Hz,1H),7.56-7.50(m,2H),7.35(s,1H),7.34-7.28(m, 10H,Ph-H),6.52-6.55(t,1H,NH),6.13(s,1H,CH＝C),5.67-5.64(t,1H,NH), 4.65(d,J＝5.3Hz,2H),4.44-4.33(m,2H),3.50-3.45(m,1H),2.99(d,J＝15.2 Hz,1H),2.69(d,J＝15.7Hz,1H),2.25(t,2H),1.97-1.07(m,20H),1.05(s,3H, CH3)；LR-Mass(ESI)m/z:727.4[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000512
合成化合物7:
使用与针对制备化合物1所述相同的操作，并使用N,O-二甲基羟基胺 盐酸盐代替乙胺盐酸盐且使用化合物1-Da代替化合物1-Ca，得到化合物7， 其为白色固体(46％)。1H-NMR(d6-DMSO,400MHz)δ:7.53-7.48(m,4H, Ph-H),7.45(s,1H),7.39-7.35(m,1H,Ph-H),6.13(s,1H,CH＝C),4.78(s,1H, OH),3.67(s,3H,OCH3),3.58(s,1H,OH),3.16(m,1H),3.0(d,J＝16Hz,1H), 2.74(d,J＝16Hz,1H),2.71(s,3H,NCH3),2.36-1.29(m,13H)1.25(s,3H,CH3), 1.04(s,3H,CH3)；LR-Mass(ESI):m/z 492.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000521
合成化合物8:
使用与针对制备化合物2所述相同的操作，并使用化合物7代替化合物 1，得到化合物8，其为白色固体(71％)。1H-NMR(d6-DMSO,400MHz)δ:8.18 (d,J＝8Hz,1H)7.75-7.50(m,7H),6.79(s,1H),6.20(s,1H,CH＝C),4.75(s, 1H,OH),3.35(s,3H,OCH3),3.0(d,J＝16Hz,1H),2.97(m,1H),2.74(d,J＝ 16Hz,1H),2.73(s,3H,NCH3),2.38-1.29(m,13H),1.27(s,3H,CH3),1.09(s, 3H,CH3)；LR-Mass(ESI):m/z 586.2[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000522
合成化合物2-B:
将可商购得到的化合物2-A(4.1g,10mmol)溶于甲醇(60ml)，然后在0℃ 滴加高碘酸(4.5g在60ml水中,20mmol)。将混合物在室温搅拌2h。将甲醇 浓缩并加入H2O(100ml)。将析出物滤过，用水(15×3ml)洗涤，空气干燥得 到化合物2-B(3.2g)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:12.47(s, 1H),7.26(dd,J＝10.2,1.2Hz,1H),6.28(dd,J＝10.2,1.9Hz,1H),6.09(s,1H), 5.63(ddd,J＝48.5,9.6,6.7Hz,1H),5.33(dd,J＝3.8,1.7Hz,1H),4.71(s,1H), 4.17–4.09(m,1H),3.34(s,1H),2.84(ddd,J＝11.1,7.1,4.1Hz,1H),2.26– 2.16(m,1H),1.49(s,3H),0.99(s,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)。LR-Mass(ESI) m/z:397.1[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000531
合成化合物2-C:
将化合物2-B(1.9g,5mmol)溶于甲醇(200ml)并加入Pb/C(200mg)。在 室温在氢气下搅拌1d后，将溶液经硅藻土填料滤过，然后减压浓缩得到 2-C(1.8g)，去无需纯化即可进一步使用。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:5.20 –4.99(m,1H),4.93(d,J＝2.6Hz,1H),4.21(m,1H),2.89–2.77(m,1H),2.56 (m,J＝15.9Hz,1H),1.24(s,3H),0.93(s,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)。 LR-Mass(ESI)m/z:401.2[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000532
合成化合物2-D:
将化合物2-C(1.6g)在乙酸(40ml)中的溶液先后用6.6M氢溴酸在乙酸 (1.6ml)中的溶液和溴在乙酸(4.5ml)中的溶液处理。在室温搅拌40min后， 用水稀释得到粗物质2-D(2.1g)。1H NMR(300MHz,DMSO)δ:5.32–4.96(m, 3H),4.69(m,2H),4.18(m,1H),3.07(m,1H),2.95(m,1H),2.81(s,1H),1.31(s, 3H),0.88(s,3H),0.84(d,J＝7.1Hz,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:559.1[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000533
合成化合物2-E:
在氮气下将化合物2-D(2.0g)加入至保持在100℃的碳酸钙(1.1g)和无 水溴化锂(0.8g)在二甲基乙酰胺(17ml)中的剧烈搅拌的混悬液中。3hr后，将 冷却的混合物倒入过量的稀盐酸中，将混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤， 经Na2SO4干燥。将粗产物经色谱法纯化得到化合物2-E，其为白色固体(0.6 g,43％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:5.85(s,1H),5.62(d,J＝14.8Hz,1H), 5.27–5.19(m,1H),4.74(m,1H),4.11(m,1H),3.07–2.78(m,3H),2.70–2.58 (m,1H),2.42–2.03(m,6H),1.45(s,3H),1.03(s,3H),0.89(d,J＝7.1Hz,3H)。 LR-Mass(ESI)m/z:397.1[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000541
合成化合物2-F:
将化合物2-E(0.5g)溶于无水甲苯(15ml)和甲酸甲酯(2ml)。然后加入 NaH(900mg,20mmol,60％分散于矿物油中)。在室温搅拌4h后，加入1N HCl(120ml)并将混合物用EtOAc萃取若干次。将溶剂干燥并除去得到0.6g 2-F，其为黄色泡沫状物，去无需纯化即可进一步使用。LR-Mass(ESI)m/z: 425.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000542
合成化合物2-G:
将化合物2-F(0.50g)溶于AcOH(15ml)和H2O(3ml)，加入苯基肼(0.14 g)。将混合物在室温搅拌4h。加入冷水(100ml)，将析出物滤过，用H2O(10 ×3ml)洗涤，空气干燥得到化合物2-G(0.44g)，其为黄色固体。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:7.61(s,1H),7.58–7.49(m,4H),7.42(m,1H),6.54(s,1H), 5.33–5.20(m,2H),4.16(s,1H),2.38–2.29(m,1H),2.10(d,J＝14.1Hz,1H), 1.71(q,J＝11.5Hz,1H),1.53(d,J＝13.7Hz,1H),1.26(s,3H),1.05(s,3H), 0.87(d,J＝7.1Hz,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:497.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000551
合成化合物2-Ha:
在0℃在氮气下向化合物2-G(400mg,TEA(300mL)在无水DCM(10 mL)中的溶液中加入α-呋喃甲酰氯(200mg)。将混合物在室温搅拌30min。 将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使用DCM:MeOH(50:1)) 得到2-Ha，其为白色固体(82％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.01–7.98(m, 1H),7.64(s,1H),7.60–7.51(m,5H),7.45(m,1H),7.16(dd,J＝3.5,0.6Hz, 1H),6.70(dd,J＝3.5,1.7Hz,1H),6.59(s,1H),5.38(dd,J＝21.7,8.8Hz,2H),4.26(s,1H),1.29(s,3H),1.23(s,2H),1.11(s,3H),0.92(d,J＝7.1Hz,3H)。 LR-Mass(ESI)m/z:591.2[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000552
合成化合物9:
将化合物2-Ha(58mg)在CH2Cl2(1mL)中的溶液用(COCl)2(20μL)处理。 搅拌1h后，将溶液真空蒸发，然后溶于无水DCM(1mL)，在0℃在氮气 下加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(20mg)，随后加入Et3N(50μL)。将混合物 在室温搅拌30min。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使用 DCM:MeOH(50:1))得到化合物9，其为白色固体(42％)。1H NMR(400MHz, DMSO)δ:7.99(s,1H),7.65(s,1H),7.61–7.51(m,4H),7.45(m,1H),7.16(d, J＝3.1Hz,1H),6.70(dd,J＝3.4,1.7Hz,1H),6.59(s,1H),5.47–5.28(m,2H), 4.27(s,1H),3.52(s,3H),3.11(s,3H),1.29(s,3H),1.11(s,3H),0.86(d,J＝6.4 Hz,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:634.3[M+H]+。图6(C)显示在诱导报道分子测 定中化合物9与VSG22的比较。
替代合成化合物1-A:
将氢化可的松(3.6g,10mmol)溶于EtOH(60ml)，然后在0℃滴加高碘 酸(3.0g在60ml水中,20mmol)。将混合物在室温搅拌2h。将EtOH浓缩并 加入H2O(100ml)。将析出物滤过，用冷水(15×3ml)洗涤，空气干燥得到化 合物1-A(3.0g)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22(s,1H), 5.55(s,1H),4.77(s,1H),4.40–4.08(m,2H),1.37(s,3H),0.88(s,3H).
替代合成化合物1-B:
将化合物1-A(1.7g,5mmol)溶于无水THF(15ml)和甲酸甲酯(2ml)。然 后加入NaH(900mg,20mmol,60％分散于矿物油中)。在室温搅拌4h后，加 入1N HCl(120ml)并将混合物用EtOAc萃取若干次。将溶剂干燥并除去得 到1.8g化合物1-B，其为黄色泡沫状物，去无需纯化即可进一步使用。 LR-Mass(ESI)m/z:375.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000561
合成化合物1-Cb:
将化合物1-B(1.8g,5mmol)溶于AcOH(15ml)，加入(3-硝基苯基)肼 (0.75g,5mmol)。将混合物在室温搅拌4h。加入冷水(100ml)，将析出物滤过， 用H2O(10×3ml)洗涤，空气干燥得到化合物1-Cb(1.1g)，其为黄色固体。 LR-Mass(ESI)m/z:494.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000562
合成化合物1-Cc:
使用(4-硝基苯基)肼以及与针对制备1-Cb所述相同的操作得到1-Cc， 其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.36(d,J＝9.0Hz,2H),7.82(d, J＝9.0Hz,2H),7.61(s,1H),6.32(s,1H),4.28(m,3H),1.26(s,3H),0.90(d,J ＝5.7Hz,4H)。LR-Mass(ESI)m/z:494.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000571
合成化合物13:
在0℃在氮气下向化合物1-Cb(100mg,0.2mmol)、TEA(0.056mL,0.4 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入α-呋喃甲酰氯(29mg,0.22mmol)。 将混合物在室温搅拌30min。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯 化(使用DCM:MeOH(50:1))得到化合物13，其为黄色固体(68％)。1H NMR (400MHz,DMSO)δ:8.27(t,J＝2.1Hz,1H),8.25–8.19(m,1H),7.99(m,2H), 7.81(t,J＝8.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.37(d,J＝3.5Hz,1H),6.69(dd,J＝3.5,1.7Hz,1H),6.29(s,1H),4.41(m,3H),1.27(s,3H),1.01(s,3H)。LR-Mass(ESI) m/z:588.2[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000572
合成化合物14:
在0℃在氮气下向化合物1-Cc(100mg,0.2mmol)、TEA(0.056mL,0.4 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入α-呋喃甲酰氯(29mg,0.22mmol)。 将混合物在室温搅拌30min。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯 化(使用DCM:MeOH(50:1))得到化合物14，其为黄色固体(71％)。1H NMR (400MHz,DMSO)δ:8.37(d,J＝9.1Hz,2H),7.98(m,1H),7.82(d,J＝9.1Hz, 2H),7.63(s,1H),7.37(d,J＝3.5Hz,1H),6.69(dd,J＝3.6,1.7Hz,1H),6.34(s,1H),4.40(m,3H),1.26(s,3H),1.01(s,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:588.2[M+ H]+.
Figure BDA0003164122920000581
合成化合物15:
将化合物13(290mg,0.5mmol)溶于无水DMF(4ml)，加入DMAP (183mg,1.5mmol)、Bop(265mg,0.6mmol)和乙胺盐酸盐(50mg,0.6mmol)。在 室温搅拌过夜后，加入H2O(20ml)并将混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤， 经Na2SO4干燥。将粗产物经色谱法纯化(使用DCM-MeOH(20:1))得到化合 物15，其为黄色固体(75％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.29–8.10(m,3H),7.97(t,J＝8.7Hz,2H),7.81(t,J＝8.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.33(d,J＝ 3.5Hz,1H),7.29(dd,J＝7.8,5.6Hz,4H),7.23–7.17(m,1H),6.68(dd,J＝3.5, 1.7Hz,1H),6.28(s,1H),4.52–4.24(m,4H),1.26(s,3H),0.92(s,3H)。 LR-Mass(ESI)m/z:677.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000582
合成化合物16:
将化合物14(290mg,0.5mmol)溶于无水DMF(4ml)，加入DMAP (183mg,1.5mmol)、Bop(265mg,0.6mmol)和乙胺盐酸盐(50mg,0.6mmol)。在 室温搅拌过夜后，加入H2O(20ml)并将混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤， 经Na2SO4干燥。将粗产物经色谱法纯化(使用DCM-MeOH(20:1))得到化合 物16，其为黄色固体(67％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.36(d,J＝9.1Hz, 2H),8.13(t,J＝6.0Hz,1H),7.96(s,1H),7.81(d,J＝9.1Hz,2H),7.63(s,1H),7.35–7.17(m,6H),6.67(dd,J＝3.5,1.7Hz,1H),6.33(s,1H),4.50–4.23(m, 4H),1.26(s,3H),0.92(s,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:677.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000591
合成化合物17:
将化合物15(68mg,0.1mmol)溶于MeOH(4ml)和H2O(1ml)，加入Fe (56mg,1.0mmol)和NH4Cl(53mg,1.0mmol)。回流搅拌6h后，将混合物滤 过，用EtOAc洗涤，并减压浓缩。将粗产物经色谱法纯化(使用DCM-MeOH (20:1))得到化合物17，其为白色固体(75％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ: 8.19(t,J＝5.9Hz,1H),8.03(d,J＝0.8Hz,1H),7.46(s,1H),7.42–7.22(m, 6H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),6.73(dd,J＝3.7,1.6Hz,2H),6.65–6.56(m,2H), 6.21(s,1H),5.43(s,2H),4.55–4.31(m,4H),1.30(s,3H),0.98(s,3H)。 LR-Mass(ESI)m/z:647.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000592
合成化合物18:
将化合物16(68mg,0.1mmol)溶于MeOH(4ml)和H2O(1ml)，加入Fe (56mg,1.0mmol)和NH4Cl(53mg,1.0mmol)。回流搅拌6h后，将混合物滤 过，用EtOAc洗涤，并减压浓缩。将粗产物经色谱法纯化(使用DCM-MeOH (20:1))得到化合物18，其为白色固体(79％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ: 8.19(t,J＝5.9Hz,1H),8.02(d,J＝0.8Hz,1H),7.42–7.22(m,7H),7.12(d,J ＝8.7Hz,2H),6.79–6.61(m,3H),6.05(s,1H),5.35(s,2H),4.52–4.31(m, 4H),1.30(s,3H),0.98(s,3H)。LR-Mass(ESI)m/z:647.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000601
合成化合物19:
在0℃在氮气下向化合物17(65mg,0.1mmol)、TEA(0.028mL,0.2 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入环丙烷碳酰氯(13mg,0.12mmol)。 将混合物在室温搅拌5h。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使 用DCM:MeOH(50:1))得到化合物19，其为黄色固体(88％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:10.40(s,1H),8.14(t,J＝5.8Hz,1H),7.97(d,J＝0.8Hz,1H), 7.82(s,1H),7.56(d,J＝8.8Hz,1H),7.46(s,1H),7.41(t,J＝8.1Hz,1H),7.34(d,J＝3.1Hz,1H),7.31–7.11(m,6H),6.67(dd,J＝3.5,1.7Hz,1H),6.20(s, 1H),4.48–4.26(m,4H),1.25(s,3H),0.92(s,3H),0.83–0.80(m,4H)。 LR-Mass(ESI)m/z:715.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000611
合成化合物10:
在0℃在氮气下向化合物18(65mg,0.1mmol)、TEA(0.028mL,0.2 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入环丙烷碳酰氯(13mg,0.12mmol)。 将混合物在室温搅拌5h。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使 用DCM:MeOH(50:1))得到化合物10，其为黄色固体(82％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:10.36(s,1H),8.14(t,J＝5.9Hz,1H),7.97(s,1H),7.72(d,J＝ 8.9Hz,2H),7.43(s,1H),7.39(d,J＝8.9Hz,2H),7.33(d,J＝3.3Hz,1H),7.29–7.19(m,4H),6.67(dd,J＝3.4,1.7Hz,1H),6.12(s,1H),4.49–4.24(m,4H), 1.24(s,3H),0.92(s,3H),0.84–0.79(m,4H)。LR-Mass(ESI)m/z:715.3[M+ H]+.
Figure BDA0003164122920000612
合成化合物11:
在0℃在氮气下向化合物17(65mg,0.1mmol)、TEA(0.028mL,0.2 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入异氰酰乙烷(14mg,0.2mmol)。将 混合物在室温搅拌12h。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使 用DCM:MeOH(50:1))得到化合物11，其为黄色固体(85％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:8.68(s,1H),8.14(t,J＝5.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.66(s,1H), 7.45(s,1H),7.38–7.17(m,8H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.68(d,J＝1.7Hz, 1H),6.17(dd,J＝13.2,7.8Hz,2H),5.76(s,1H),4.49–4.27(m,4H),3.11(m, 2H),1.25(s,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H),0.93(s,3H)。LR-Mass(ESI)m/z: 718.3[M+H]+.
Figure BDA0003164122920000621
合成化合物12:
在0℃在氮气下向化合物18(65mg,0.1mmol)、TEA(0.028mL,0.2 mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液中加入异氰酰乙烷(14mg,0.2mmol)。将 混合物在室温搅拌12h。将溶剂减压蒸发得到粗产物，将其经色谱法纯化(使 用DCM:MeOH(50:1))得到化合物12，其为黄色固体(84％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ:8.68(s,1H),8.14(t,J＝5.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.66(s,1H), 7.45(s,1H),7.38–7.17(m,8H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.68(d,J＝1.6Hz, 1H),6.17(dd,J＝13.2,7.8Hz,2H),5.76(s,1H),4.49–4.27(m,4H),3.11(m, 2H),1.25(s,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H),0.93(s,3H)。LR-Mass(ESI)m/z: 718.3[M+H]+.
图15和16显示了与化合物VSG111、VSG112和VSG113(分别为化合 物10、11和12)相关的活性数据。参见图15，其显示出糖皮质激素VSG111、 VSG112和VSG113的活性(数据按照DEX百分比绘制曲线；类固醇浓度为 10nM)；且参见图16，其显示出VSG111与以下的比较：ZK216348(参见 Schacke,H.,et al,Proc Natl Acad Sci USA,Jan 6；101(1):227-32，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14694204)以及AL438(参见Coghlan, M.J.,etal.Mol Endocrinol.,2003May；17(5):860-9， http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 12586843)(数据按照DEX百分比绘制曲 线)。
其他实施方案
应当理解的是尽管已经结合如上详述的内容描述了本发明，但是前述描 述意在示例说明而不限制本发明的范围，而本发明的范围由随附的权利要求 所限定。其他方面、优势和修改在所述权利要求的范围内。
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Claims (6)

1.一种化合物或其药用盐，所述化合物为
Figure FDA0003164122910000011
2.药物组合物，包含权利要求1的化合物或其药用盐和药用载体或辅料。
3.权利要求1的化合物或其药用盐在制备用于调节糖皮质激素受体活性的药物中的用途。
4.权利要求1的化合物或其药用盐在制备用于治疗炎性疾病或减轻其严重性的药物中的用途。
5.权利要求4的用途，其中所述疾病选自哮喘、关节炎、狼疮、克罗恩病、炎性肠病、腹部疾病、肾小球肾炎、寻常痤疮、白血病和胰腺癌。
6.权利要求5的用途，其中所述疾病选自哮喘和关节炎。
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