JP2016516192A - 尿アルブミン及び尿クレアチニンの迅速検査 - Google Patents
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Abstract
Description
尿アルブミン検査
検査を実施するため、尿サンプルをランニングバッファ中に希釈させ、テストカセットのサンプル塗布パッドに塗布する。バッファされた尿サンプルは、コンジュゲートパッド内に移動し、乾燥抗アルブミン及び抗クレアチニン抗体コンジュゲートを可溶化する。尿サンプル中のアルブミン及びクレアチニンは、コンジュゲートパッド中のアルブミン特異及びクレアチニン特異コンジュゲートと混ざり、それぞれの抗体コンジュゲートと結合する。コンジュゲートパッドからコンジュゲートは、ニトロセルロースメンブレンを通過し、4つの分析領域を通過する。
尿クレアチニン検査
尿クレアチニン検査は、実施例1の尿アルブミン検査のような同じテストストリップ上で同時に実施される。クレアチニン検査のために、抗クレアチニン抗体コンジュゲートが、コンジュゲートパッドに存在し、分析領域であるクレアチニンテスト及びクレアチニンコントロールは、尿サンプル中に存在するクレアチニンを捕捉するために、設けられる。
尿アルブミン及び尿クレアチニンの迅速テストの線形性
精製ヒトアルブミン標準サンプル及び精製クレアチニンサンプルのそれぞれを、様々な濃度で準備し、それぞれアルブミン(図8)及びクレアチニン(図9)について標準曲線を作成するため、実施例1及び2に説明された尿アルブミン及び尿クレアチニンの迅速テストを用いてテストした。
1.それぞれのサンプル1部をランニングバッファ14部で希釈する、
2.サンプルとランニングバッファとを混合する、
3.図1に示すテストカセットのサンプルウェルに、希釈された尿サンプルを75μL添加する、
4.15分経過後、テストカセットリーダを用いてテストカセットを読み取る、
5.尿アルブミン及びクレアチニンのテスト及びコントロール分析領域双方について、[テスト領域/(テスト領域+コントロール領域)]を計算する。
開示の方法と尿アルブミン及びクレアチニンを検出する従来技術の方法との相関
尿アルブミン免疫比濁法と尿クレアチニン比色分析法との組み合わせと、ここで開示されているイムノクロマトグラフィラテラルフロー尿アルブミンアッセイとの間の相関を36のヒト尿サンプルを用いて決定した(図10−12)。
Claims (20)
- ヒトのサンプルのアルブミン−クレアチニン比を決定する装置であって、
固体サポート上に配置されたサンプルウェルを含む、1つのサンプル塗布パッドと、
クレアチニン特異コンジュゲート及びアルブミン特異コンジュゲートが中に配置されたコンジュゲートパッドと、
ラテラルフローメンブレンと、
サンプル中に存在し、前記クレアチニン特異コンジュゲートに結合したクレアチニンが、前記メンブレンに結合されたクレアチニン特異固定化剤によって保持される、クレアチニン特異テスト領域と、
前記クレアチニン特異テスト領域において保持されなかった前記クレアチニン特異コンジュゲートが、前記メンブレンに結合されたクレアチニンコンジュゲート特異固定化剤によって保持される、クレアチニン特異コントロール領域と、
前記サンプル中に存在し、前記アルブミン特異コンジュゲートに結合したアルブミンが、前記メンブレンに結合されたアルブミン特異固定化剤によって保持される、アルブミン特異テスト領域と、
前記アルブミン特異テスト領域において保持されなかった前記アルブミン特異コンジュゲートが、前記メンブレンに結合されたアルブミンコンジュゲート特異固定化剤によって保持される、アルブミン特異コントロール領域と、
リザーバと、
を備える、テストストリップを備えるテストカセットと、
前記サンプル中のアルブミン濃度と、サンプル中のクレアチニン濃度と、アルブミン−クレアチニン比と、を決定する測定装置と、
を備える、ことを特徴とする、装置。 - 前記サンプルは、尿サンプルである、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記装置は、ラテラルフローイムノクロマトグラフィ装置である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記測定装置は、反射分光装置又は蛍光光度計である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記クレアチニン特異コンジュゲートは、クレアチニンに特異的な抗体である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記アルブミン特異コンジュゲートは、アルブミンに特異的な抗体である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記クレアチニン特異固定化剤は、クレアチニンである、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記クレアチニンは、キャリアに結合している、ことを特徴とする請求項7に記載の装置。
- 前記クレアチニンコンジュゲート特異固定化剤は、前記クレアチニン特異抗体の種に対して特異的な抗体である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記アルブミン特異固定化剤は、ヒト血清アルブミンである、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記アルブミンコンジュゲート特異固定化剤は、前記アルブミン特異抗体の種に対して特異的な抗体である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記クレアチニン特異的コンジュゲート及び前記アルブミン特異的コンジュゲートは、検出可能部分によってラベルされている、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記検出可能な部分は、微粒子又は染料である、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記微粒子は、コロイド金粒子、ラテックス粒子、ポリスチレン粒子、アクリル粒子、又は他の固相微粒子である、ことを特徴とする請求項13に記載の装置。
- 前記微粒子は、着色され、又は蛍光化合物がタグ付けされている、ことを特徴する請求項14に記載の装置。
- 前記1つのサンプル塗布パッド、前記コンジュゲートパッド、前記クレアチニン特異テスト領域、前記クレアチニン特異コントロール領域、前記アルブミン特異テスト領域、前記アルブミン特異コントロール領域、及び前記リザーバは、全て1つのテストストリップ上に配置される、ことを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記システムは、2つのテストストリップを備えることを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 第1のテストストリップは、クレアチニン特異コンジュゲートと、クレアチニン特異テスト領域と、クレアチニン特異コントロール領域と、第1のリザーバと、を備える第1のコンジュゲートパッドを備え、
第2のテストストリップは、アルブミン特異コンジュゲートと、アルブミン特異テスト領域と、アルブミン特異コントロール領域と、第2のリザーバと、を備える第2のコンジュゲートパッドを備え、
前記第1のテストストリップと前記第2のテストストリップとは、並列に、又は互いに対向するように、又は前記第1のテストストリップと前記第2のテストストリップとが1つのサンプル塗布パッドを共有するように互いに角度をなして配置される、ことを特徴とする請求項17に記載の装置。 - サンプル中のアルブミン−クレアチニン比を決定する方法であって、
請求項1に記載のテストカセットのサンプル塗布パッドにサンプルを置くことであって、前記サンプルはコンジュゲートパッド内に移動し、クレアチニン特異コンジュゲート及びアルブミン特異コンジュゲートに曝され、前記サンプル中のクレアチニンは前記クレアチニン特異コンジュゲートに結合し、前記サンプル中のアルブミンは前記アルブミン特異コンジュゲートに結合し、クレアチニンと結合した前記クレアチニン特異コンジュゲートは、クレアチニンテスト領域内のクレアチニン特異固定化剤に結合し、結合していない前記物質を、前記クレアチニン特異固定化剤に結合していない前記クレアチニン特異コンジュゲートを結合するクレアチニン特異コントロール領域に送り、アルブミンに結合した前記アルブミン特異コンジュゲートは、アルブミンテスト領域内のアルブミン特異固定化剤に結合し、結合していない前記物質を、前記アルブミン特異固定化剤に結合していない前記アルブミン特異コンジュゲートを結合するアルブミン特異コントロール領域に送り、前記サンプルが前記コンジュゲートと反応し、終点に到達する時間は、約2分から約30分である、テストカセットのサンプル塗布パッドにサンプルを置くことと、
テストカセットを測定装置に挿入することと、
サンプルからクレアチニンの濃度、アルブミンの濃度、及びアルブミン−クレアチニン比の数値結果を提供することと、を含むことを特徴とする、方法。 - 前記サンプルが前記コンジュゲートと反応し、終点に到達するまでの時間は約15分である、ことを特徴とする請求項19に記載の方法。
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