JP2016511004A - タンパク質濃縮タバコ由来組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
したがって、収穫した植物の一部または部分は、タバコ製品の成分などとして用いられ、またはさらに処理され得る。
一部の実施形態において、タバコ植物またはその一部は、所望の化合物をより効果的な分離で利用可能にするために、例えば、特定の化合物を遊離させるように前処理することができる。一部の実施形態において、複数の方法を用いて、所望の化合物を得る。
沈殿物190の含有量は、その前のステップで用いられたpHにある程度依存し得ることに留意されたい。例えば、pHが約4.5と約6の間であった場合、沈殿物190はより多くのRuBisCOを含み得るが、pHが約4.5未満であった場合、沈殿物190はさらに、例えば、相当量のF2タンパク質を含み得る。
例えば、Millipore、Spectrum(登録商標)Labs、Applied Membranes Inc.、Pall Corporation、Whatman(登録商標)およびPorex Corporationなどの市販供給元は、種々のフィルター膜とカートリッジ、および/または濾過システム(たとえば、タンジェンシャルフロー濾過システム)を製造している。例示的な膜としては、Memtek(登録商標)Microfiltration SystemsおよびForty−X(商標)ディスクフィルター (Siemensから)、MFKシリーズ、Winefilter(商標)シリーズ、およびSuper−Cor(商標)MFシリーズ膜(Koch Membrane Systemsから)、Durapore膜とPellicon(登録商標)XLカセット(Milliporeから)、Microkros(登録商標)、Minikros(登録商標)、およびKrosFlo(登録商標)Hollow Fiber Modules(Spectrum(登録商標) Labsから)、Cyclopore膜(Whatman(登録商標)から)Scepter(登録商標)膜(Graver Technologies)、およびTorayfil(登録商標)精密濾過膜(Toray Industries,Inc.から)が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、精密濾過膜はセラミック膜であり、Membralox(登録商標)膜(Pall Corporationから)、MF膜(CleaNSep Systemsから)、セラミック膜 (Sterlitech Corporation製), InsideCeRAM(商標)膜、Filtanium(商標)膜、およびIsoflux(商標)膜(Tami Industriesから)、およびCeraMem(登録商標)セラミック膜(Veolia Waterから)が挙げられるが、これらに限定されない。市販の濾過システムとしては、Millipore社のLabscale(商標)タンジェンシャルフロー濾過(TFF)システムおよびSpectrum(登録商標)Labs社のKrosFlo(登録商標)とMiniKros(登録商標)タンジェンシャルフロー濾過システムが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の無煙タバコ組成物は、使用の間、口腔でゆっくり崩壊する溶解性組成物を提供する水溶性高分子結合剤と任意選択で他の成分を含むこともできる。特定の実施形態において、無煙タバコ組成物は、Cantrellらの米国特許公開第2012/0037175号(これを参照により本明細書に組み込む)に記載の組成物などの、口腔内で溶ける(単に溶解するとは対照的に)、溶解可能な組成物をもたらす脂質成分を含むことができる。
タバコ植物を収穫し、茎から葉を取り、葉をディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが8.6の緑色液である。このタンパク質含有抽出物は、まず抽出物をデカンターに通すことによって清澄化する。タンパク質含有抽出物のpHを、塩酸を用いて5.9に調整する。任意選択で、抽出物にケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスに通す。
タバコ植物を収穫し、茎から葉を取り、次いで葉をディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが8.4の緑色液である。このタンパク質含有抽出物は、まず抽出物をデカンターに通すことによって清澄化する。タンパク質含有抽出物のpHを、塩酸を用いて5.9に調整する。任意選択で、抽出物にケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスに通す。濾過物を水で洗浄し、pHを5.9に調整して、タンパク質の回収率を高める。
タバコ植物を収穫し、茎から葉を取り、次いで葉をディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが8.7の緑色液である。このタンパク質含有抽出物は、まず抽出物をデカンターに通すことによって清澄化する。タンパク質含有抽出物のpHを、塩酸を用いて5.9に調整する。抽出物にケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスに通す。
タバコ植物は収穫し、茎から葉を取り、次いで葉をディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが8.5の緑色液である。このタンパク質含有抽出物は、まず抽出物をデカンターに通すことによって清澄化する。タンパク質含有抽出物のpHを、水酸化ナトリウムを用いて10.5に調整する。抽出物に活性炭を加え、次いでケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスと接触させる。混合物はフィルタープレスを通過していなかったので、混合物のpHを、塩酸を用いて5.9に調整し、次いでフィルタープレスに通す。
タバコ植物は収穫し、茎から葉を取り、次いで葉をディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが8.4の緑色液である。このタンパク質含有抽出物は、まず抽出物をデカンターに通すことによって清澄化する。タンパク質含有抽出物のpHを、塩酸を用いて5.9に調整する。抽出物に活性炭を加え、ケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスを通す。生じた清澄化タンパク質含有透過物を、タンジェンシャルフロー濾過を用いて、500kDaの逆浸透フィルター上で処理する。残留分をグリシン溶液(75mMグリシン、pH10.5)で洗浄して、RuBisCO濃縮タバコ由来材料残留分(約75〜85重量%のタンパク質を含む)を得、これを貯蔵する。透過物を8℃まで冷却し、タンジェンシャルフロー濾過を用いて、1kDa逆浸透フィルター上で処理する。残留分をグリシン溶液で洗浄し、濃縮してF2画分タンパク質濃縮タバコ由来材料(約30〜40%のF2タンパク質を含むが、より高いパーセンテージ、例えば65%は、代替濾過方法、例えば1kDaフィルターの代わりに10kDaおよび/または20kDaフィルターを用いて得られた)を得る。
タバコ植物は収穫し、刻み、ディスインテグレーター中でそれに水を加えて均質化し、次いでこの材料を液体抽出用の水平スクリュープレスに通す。このようにして得られたタンパク質含有抽出液は、pHが5.6の緑色液である。タンパク質含有抽出物のpHを、水酸化ナトリウムを用いて7.10に調整する。抽出物にケイ藻土を加え、混合物を15分間撹拌し、次いでフィルタープレスに通す。生じた清澄化タンパク質含有透過物をタンジェンシャルフロー濾過を用いて、1kDaの逆浸透フィルター上で処理する。残留分はRuBisCOとF2タンパク質の混合物を含み、および約50%のタンパク質を含む。
Claims (20)
- ニコチアナ(Nicotiana)種の植物またはその一部からタンパク質濃縮材料を得る方法であって、
ニコチアナ種の植物材料を受け取ることと;
前記植物材料から1種または複数種のタンパク質を溶媒に抽出して、タンパク質含有抽出液を形成するのに十分な時間と条件下で、前記植物材料を前記溶媒と接触させることと;
前記タンパク質含有抽出液から固形の抽出植物材料を分離することと;
前記タンパク質含有抽出液を清澄化して、清澄化タンパク質含有抽出物と固形画分とを形成することと;
少なくとも約60乾燥重量%のタンパク質を含むタンパク質濃縮材料をもたらすために、前記清澄化タンパク質含有抽出物を処理することとを含む方法。 - 前記処理ステップが前記清澄化タンパク質含有抽出物のpHを約6未満のpHに調整して、酸性抽出物を形成することと;
前記酸性抽出物から沈殿物を単離することと;
前記沈殿物を洗浄して、タンパク質濃縮材料をもたらすこととを含む、請求項1に記載の方法。 - 前記清澄化タンパク質含有抽出物のpHを約4.5〜約6のpHに調整して、RuBisCO含有タンパク質濃縮材料をもたらす、請求項2に記載の方法。
- 前記単離ステップの後に残留している抽出物は、1)1kDa〜500kDaの細孔径を有するフィルター上で濾過すること、および残留分として第2のタンパク質濃縮材料を単離することと; 2)前記抽出物を約4.5未満のpHに調整し、そこから第2のタンパク質濃縮材料を含む第2の沈殿物を単離することとのうちの一方または両方でさらに処理され、前記第2のタンパク質濃縮材料がF2タンパク質含有タンパク質濃縮材料である、請求項3に記載の方法。
- 前記洗浄することが約1μm〜約1kDaの細孔径を有するフィルター上で行われる、請求項2に記載の方法。
- RuBisCO含有およびF2タンパク質含有タンパク質濃縮材料をもたらすために、前記清澄化タンパク質含有抽出物のpHが約3〜約4.5のpHに調整される、請求項2に記載の方法。
- 前記沈殿物を洗浄するために用いられる前記溶媒が酸性溶液である、請求項2に記載の方法。
- 前記タンパク質濃縮材料が少なくとも約80乾燥重量%のタンパク質を含む、請求項2に記載の方法。
- 前記処理ステップが、セラミックフィルターまたは限外濾過膜上で前記清澄化タンパク質含有抽出物を濾過して、残留分と透過液とを得ることと;
前記残留分を洗浄して、前記タンパク質濃縮材料をもたらすこととを含む、請求項1に記載の方法。 - 前記清澄化ステップが前記タンパク質含有抽出液のpHを調整することを含む、請求項9に記載の方法。
- 前記濾過ステップが、約1μm〜約1kDaの細孔径を有する1または複数のフィルターに、前記清澄化タンパク質含有抽出物を通すことを含む、請求項9に記載の方法。
- 前記濾過ステップが約1μm〜約500kDaの細孔径を有するフィルターに、前記清澄化タンパク質含有抽出物を通すことを含み、残留分が少なくとも約50乾燥重量%のRuBisCOを含む、請求項9に記載の方法。
- 前記濾過ステップが、約1kDa〜約500kDaの細孔径を有するフィルターに、前記清澄化タンパク質含有抽出物を通すことを含み、前記残留分がRuBisCOとF2タンパク質の混合物を含む、請求項9に記載の方法。
- 前記残留分として第2のタンパク質濃縮材料を得るために、前記透過物を約500kDa〜1kDaの細孔径を有するフィルターに通すことをさらに含み、前記第2のタンパク質濃縮材料がF2画分タンパク質を含む、請求項12に記載の方法。
- ニコチアナ種の植物材料が緑色の植物材料、黄色の植物材料、乾燥した植物材料またはそれらの混合物の形態である、請求項1に記載の方法。
- 前記タンパク質濃縮材料を噴霧乾燥することと、凍結乾燥することと、または脱水することとをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 色、臭い、味覚、アルカロイド、金属またはその組み合わせを除去するために、前記プロセスのいずれかのステップで1種または複数種の成分を添加することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 1種または複数種の成分が活性炭、樹脂、粘土、キレート剤、分子インプリントポリマー、非インプリントポリマーまたはその組み合わせからなる群から選択される、請求項17に記載の方法。
- 請求項1〜18のいずれか1項に記載の方法によって得られるタンパク質濃縮抽出物。
- 請求項19に記載の前記タンパク質濃縮抽出物を含む栄養補助食品、食品、飲料、パーソナルケア用品、医薬品またはペットフード。
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