JP2015536979A - チオレドキシンを含有する皮膚外用剤組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
胞白血病由来因子)は細胞の増殖や転写因子の制御にも関与することが知られている。
本発明の組成物の効能を実験するためのチオレドキシンは、株式会社ファーマフーズ(〒615−8245、京都府京都市西京区御陵大原1−49)のTRX日本酒エキス〔サッカロミケス発酵物(Saccharomyces Ferment)〕であり、チオレドキシンの含量は、4mg/1gである。
下記表1の組成に従い、通常の方法により栄養クリームを製造した(単位:重量%)。
チオレドキシンが皮膚の保湿力の増加に及ぼす効果を測定するために、前記剤形例1および比較剤形例1を用い、下記のようにして評価した。
チオレドキシンの角質形成細胞の分化促進効果を調べるために、下記のように角質形成細胞の分化時に生成される角化膜(CE:Cornified Envelop)の量を、吸光度を用いて測定した。
チオレドキシンが肌の損傷により損傷された肌のバリア機能の修復に及ぼす効果を測定するために、下記の実験を行った。成人男女10名の上腕をテープストリッピング(Tape Stripping)法を用いて肌のバリアに損傷を与え、それぞれ下記表4の組成に従い製造した剤形例2および比較剤形例2の2つの群を塗布しながら7日間1日につき1回ずつ経皮水分損失量(TWEL)の修復度をポータブル水分蒸散計バポメーター(Vapometer)(デルフィン・テクノロジーズ社製、フィンランド)を用いて測定し且つ比較した。ここで、比較剤形例2は陰性対照群であり、ビヒクル(展色剤)である。実験結果は、下記表5に示す。表5は、バリア損傷前と、バリア損傷後の剤形例2および比較剤形例2の処理前との違いを、100%を基準として比較したものである。
本発明に係る化粧料組成物の肌の血液循環促進効果を評価するために、レーザードップラー血流計(LDPI:Laser Doppler Perfusion Imager)を用いて肌における血液循環の度合いを測定した。レーザードップラー血流計(LDPI)は、肌における血液循環を測定する機器として広く知られており、現在用いられている器機であり、肌の毛細血管における血液の速度および量だけではなく、小動脈と小静脈における流れまで測定可能な非常に敏感な機器である。
前記剤形例1および比較剤形例1の肌トーンの改善効果を調べるために、30名の被験者にそれぞれ使用(1日につき夕方に1回塗布、合計1週間)させた後、コスメティック用全顔撮影装置フェイシャルステージ(Facial Stage)DM−3(モリテックス社製、日本)を用いて肌トーンの改善度を評価した。肌トーンの改善率は、肌の明度および色彩の測定値で判断し、その結果を下記表7に示す。明度および色彩の変化値が大きくなればなるほど、肌トーンが改善されたことを意味する。
1.コラーゲン生合成の促進を通じた毛穴の縮小効果
本発明に係るチオレドキシンのコラーゲン生合成の促進効果をTGF−βと比較して測定した。まず、繊維芽細胞(fibroblast)を24ウェルに1ウェル当たりに105個ずつ播種して約90%生長するまで培養した。これを無血清のダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)において24時間培養した後、無血清培地に溶かした本発明のチオレドキシンとTGF−βをそれぞれ10ng/mlずつ処理し、CO2培養器において24時間培養した。これらの上澄み液を取ってプロコラーゲン型(I)のELISAキット〔procollagen type(I)〕を用いてプロコラーゲンの増減有無を調べてみた。その結果を下記表8に示し、コラーゲンの合成能は、非処理群を100にして比較した。
剤形例1および比較剤形例1の毛穴の縮小効果を調べるために、下記のようにして評価を行った。毛穴が大きい被験者男女20名を選定して10名ずつ2つの群に分け、各群別に顔に剤形例1および比較剤形例1の栄養クリームをそれぞれ4週間毎日塗布させた。毛穴の縮小効果に対する判定は、実験前と4週後の写真を撮って専門家の目視評価により行われた。その結果を、下記表9に示す(評価等級:0−全く縮小されていない、5−非常に縮小されている)。
1. 5α−リダクターゼ活性の抑制を通じた肌の過分泌の抑制効果
5α−リダクターゼ活性の抑制効果を確認するために、HEK293−5αR2細胞において[14C]テストステロンが[14C]ジヒドロテストステロン(DHT:dihydrotestosterone)に変換される割合を測定した。HEK293細胞にp3xFLAG−CMV−5αR2を形質感染させて24ウェルプレートに1ウェル当たりに2.5×105の細胞を入れて培養した(Park et al.,2003,JDS.Vol.31,pp.191−98)。翌日に酵素基質および阻害剤が添加された新たな培地に交換した。培地の基質としては、0.05μCi[14C]テストステロン(アマシャム・ファルマシア・バイオテク社製、英国)を用いた。
転換率[%] =[〔ジヒドロテストステロン(DHT)領域における放射能〕/総放射能]×100
阻害率[%] ={(対照群の転換率−試験物質の転換率)/対照群の転換率}×100
前記剤形例1および比較剤形例1の皮脂分泌の抑制効果を調べるために、下記のようにして評価を行った。皮脂分泌が多いと感じる被験者男女30名を選定して指定された部位に剤形例1および比較剤形例1の栄養クリームを4週間毎日塗布させた。皮脂減少の効果に対する判定は、皮脂量測定器〔セブメーター(Sebumeter)SM810、C+Kエレクトロニック社製、ドイツ〕を用いて2週間および4週間経過後の平均皮脂減少率(%)をそれぞれ測定し、その結果を下記表11に示す。
Claims (15)
- チオレドキシンを有効成分として含有する保湿用皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚バリア機能強化用皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚角質形成細胞分化誘導用皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する血色および肌トーン改善用皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する毛穴縮小用皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮脂調節用皮膚外用剤組成物。
- 前記チオレドキシンは、組成物の総重量に対して0.00001〜50重量%の量で含有されることを特徴とする請求項1から請求項6のうちのいずれか1項に記載の皮膚外用剤組成物。
- 前記チオレドキシンは、酵母発酵物のろ過物から得られるものであることを特徴とする請求項1から請求項6のうちのいずれか1項に記載の皮膚外用剤組成物。
- 前記酵母は、サッカロミケス属であることを特徴とする請求項8に記載の皮膚外用剤組成物。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の皮膚保湿用としての用途。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の皮膚バリア機能強化用としての用途。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の皮膚角質形成細胞分化誘導用としての用途。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の血色および肌トーン改善用としての用途。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の毛穴縮小用としての用途。
- チオレドキシンを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物の皮脂調節用としての用途。
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