JP2014511899A - 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 - Google Patents
大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2014511899A JP2014511899A JP2014505772A JP2014505772A JP2014511899A JP 2014511899 A JP2014511899 A JP 2014511899A JP 2014505772 A JP2014505772 A JP 2014505772A JP 2014505772 A JP2014505772 A JP 2014505772A JP 2014511899 A JP2014511899 A JP 2014511899A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- compound
- prot
- resin
- protecting group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 108
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 108010002156 Depsipeptides Proteins 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 title abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 219
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 72
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 11
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 245
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 245
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 135
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 85
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 85
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 82
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 76
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 69
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 66
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 60
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 56
- -1 isobutyryl Chemical group 0.000 claims description 54
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 48
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 45
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 37
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 37
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 36
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 34
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 33
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 33
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 29
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 27
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 23
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 15
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 14
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 claims description 11
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 10
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 10
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 10
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 10
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 10
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 9
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 8
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 8
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 8
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 8
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims description 6
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims description 6
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 125000003143 4-hydroxybenzyl group Chemical group [H]C([*])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000002374 hemiaminals Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000010930 lactamization Methods 0.000 claims description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 claims description 3
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 claims description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 claims 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 269
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 152
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 127
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 86
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 59
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 58
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 58
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 52
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 46
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 5-[(1r)-1-hydroxy-2-[4-[(2r)-2-hydroxy-2-(4-methyl-1-oxo-3h-2-benzofuran-5-yl)ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]-4-methyl-3h-2-benzofuran-1-one Chemical compound C1=C2C(=O)OCC2=C(C)C([C@@H](O)CN2CCN(CC2)C[C@H](O)C2=CC=C3C(=O)OCC3=C2C)=C1 OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 0.000 description 36
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 36
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 31
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 29
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 29
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 28
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 27
- MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 25
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 25
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 25
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 20
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 17
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 16
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 15
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 15
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 14
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 14
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N Val-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 9
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropanol acetate Natural products CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940011051 isopropyl acetate Drugs 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 9
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 9
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N (2s,3s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- GSMBUVTZXAPMMN-QPFVWYQWSA-N (2s)-2-acetamido-n-[(2s,5s,8s,11r,12s,15s,18s,21r)-2-benzyl-21-hydroxy-5-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-4,11-dimethyl-15-(2-methylpropyl)-3,6,9,13,16,22-hexaoxo-8-propan-2-yl-10-oxa-1,4,7,14,17-pentazabicyclo[16.3.1]docosan-12-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(C)=O)C(=O)N[C@H](C(N[C@H]2CC[C@@H](O)N(C2=O)[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N1C)=O)CC(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GSMBUVTZXAPMMN-QPFVWYQWSA-N 0.000 description 6
- CQMJEZQEVXQEJB-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-1,3-dioxobenziodoxole Chemical compound C1=CC=C2I(O)(=O)OC(=O)C2=C1 CQMJEZQEVXQEJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 6
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 6
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010038479 nostopeptin BN920 Proteins 0.000 description 6
- GSMBUVTZXAPMMN-UHFFFAOYSA-N nostopeptin BN920 Natural products CN1C(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)N(C2=O)C(O)CCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(C)=O)C(C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 GSMBUVTZXAPMMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 6
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 6
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 6
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 6
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 5
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- SFYDWLYPIXHPML-UHFFFAOYSA-N 3-nitro-1-(2,4,6-trimethylphenyl)sulfonyl-1,2,4-triazole Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)N1N=C([N+]([O-])=O)N=C1 SFYDWLYPIXHPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 5
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 5
- CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 4
- WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxo-5-(tritylamino)pentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CC(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N 0.000 description 4
- OYULCCKKLJPNPU-DIFFPNOSSA-N (2s,3r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 OYULCCKKLJPNPU-DIFFPNOSSA-N 0.000 description 4
- FMWLYDDRYGOYMY-DEOSSOPVSA-N (4s)-4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxo-5-phenylmethoxypentanoic acid Chemical compound O=C([C@@H](NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CCC(=O)O)OCC1=CC=CC=C1 FMWLYDDRYGOYMY-DEOSSOPVSA-N 0.000 description 4
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 4
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 4
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 4
- RCCYSVYHULFYHE-UHFFFAOYSA-N pentanediamide Chemical compound NC(=O)CCCC(N)=O RCCYSVYHULFYHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- OHRURASPPZQGQM-GCCNXGTGSA-N romidepsin Chemical compound O1C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H]2CSSCC\C=C\[C@@H]1CC(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)N2 OHRURASPPZQGQM-GCCNXGTGSA-N 0.000 description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 125000005500 uronium group Chemical group 0.000 description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical class CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XHCLAFWTIXFWPH-UHFFFAOYSA-N [O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[V+5].[V+5] Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[V+5].[V+5] XHCLAFWTIXFWPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 3
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 3
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 3
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 3
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 3
- 238000005710 macrocyclization reaction Methods 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- SCPYDCQAZCOKTP-UHFFFAOYSA-N silanol Chemical compound [SiH3]O SCPYDCQAZCOKTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl-chloro-diphenylsilane Chemical compound C=1C=CC=CC=1[Si](Cl)(C(C)(C)C)C1=CC=CC=C1 MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000383 tetramethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 3
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 18-crown-6 Chemical compound C1COCCOCCOCCOCCOCCO1 XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)N=NC2=C1 HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNKUSGQVOMIXLU-UHFFFAOYSA-N Formamidine Chemical compound NC=N PNKUSGQVOMIXLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 125000004202 aminomethyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 2
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N methyl-cyclopentane Natural products CC1CCCC1 GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N nitroxyl Chemical class O=N ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 2
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000001823 pruritic effect Effects 0.000 description 2
- LEHBURLTIWGHEM-UHFFFAOYSA-N pyridinium chlorochromate Chemical compound [O-][Cr](Cl)(=O)=O.C1=CC=[NH+]C=C1 LEHBURLTIWGHEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 125000001981 tert-butyldimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([H])(C([H])([H])[H])[*]C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- LZTRCELOJRDYMQ-UHFFFAOYSA-N triphenylmethanol Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(O)C1=CC=CC=C1 LZTRCELOJRDYMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- WTLSDEYZKFJXFT-SANMLTNESA-N (2s)-2-[9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl(methyl)amino]-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound C([C@H](N(C)C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(O)=O)C1=CC=C(OC(C)(C)C)C=C1 WTLSDEYZKFJXFT-SANMLTNESA-N 0.000 description 1
- AXDLCFOOGCNDST-VIFPVBQESA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(methylamino)propanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AXDLCFOOGCNDST-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- UVNPEUJXKZFWSJ-LMTQTHQJSA-N (R)-N-[(4S)-8-[6-amino-5-[(3,3-difluoro-2-oxo-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-4-yl)sulfanyl]pyrazin-2-yl]-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-4-yl]-2-methylpropane-2-sulfinamide Chemical compound CC(C)(C)[S@@](=O)N[C@@H]1COCC11CCN(CC1)c1cnc(Sc2ccnc3NC(=O)C(F)(F)c23)c(N)n1 UVNPEUJXKZFWSJ-LMTQTHQJSA-N 0.000 description 1
- YXIWHUQXZSMYRE-UHFFFAOYSA-N 1,3-benzothiazole-2-thiol Chemical compound C1=CC=C2SC(S)=NC2=C1 YXIWHUQXZSMYRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-[chloro(diphenyl)methyl]benzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQIRIWDEZSKOCN-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-n,n,2-trimethylprop-1-en-1-amine Chemical compound CN(C)C(Cl)=C(C)C GQIRIWDEZSKOCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001917 2,4-dinitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1*)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJSQZQMVXKZAGW-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol hydrate Chemical compound O.OC1=CC=CC2=C1N=NN2 ZJSQZQMVXKZAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXPNYDCXCQJLFI-UHFFFAOYSA-N 3-amino-3,4-dihydro-1h-pyridin-2-one Chemical compound NC1CC=CNC1=O SXPNYDCXCQJLFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNZZKKFBIKYMGP-UHFFFAOYSA-N 3-amino-6-hydroxypiperidin-2-one Chemical compound NC1CCC(O)NC1=O MNZZKKFBIKYMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOXOZONBQWIKDA-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropyl Chemical group [CH2]CCO QOXOZONBQWIKDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPIUUMROPXDNRH-UHFFFAOYSA-N 3647-74-3 Chemical compound C1C2C3C(=O)NC(=O)C3C1C=C2 GPIUUMROPXDNRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGHDLJAZIIFENW-UHFFFAOYSA-N 4-[1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-(4-hydroxy-3-prop-2-enylphenyl)propan-2-yl]-2-prop-2-enylphenol Chemical group C1=C(CC=C)C(O)=CC=C1C(C(F)(F)F)(C(F)(F)F)C1=CC=C(O)C(CC=C)=C1 QGHDLJAZIIFENW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 125000006847 BOC protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003043 Cellulose fiber Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000862992 Chondromyces Species 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 241001464430 Cyanobacterium Species 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N D-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002260 Keloid Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000011219 Netherton syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010037575 Pustular psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 241001303601 Rosacea Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQVGDGSRVMNMR-JCTPKUEWSA-N [[(z)-(1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidene)amino]oxy-(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium;tetrafluoroborate Chemical compound F[B-](F)(F)F.CCOC(=O)C(\C#N)=N/OC(N(C)C)=[N+](C)C FPQVGDGSRVMNMR-JCTPKUEWSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001265 acyl fluorides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001266 acyl halides Chemical class 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000003927 aminopyridines Chemical class 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004082 barrier epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yloxy(tripyrrolidin-1-yl)phosphanium Chemical compound C1CCCN1[P+](N1CCCC1)(N1CCCC1)ON1C2=CC=CC=C2N=N1 WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUUOABUKZOMRBA-AWEZNQCLSA-N benzyl (2s)-5-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CCCO)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 GUUOABUKZOMRBA-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- FAOSYNUKPVJLNZ-UHFFFAOYSA-N butylstannane Chemical compound CCCC[SnH3] FAOSYNUKPVJLNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005828 desilylation reaction Methods 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 1
- BADXJIPKFRBFOT-UHFFFAOYSA-N dimedone Chemical compound CC1(C)CC(=O)CC(=O)C1 BADXJIPKFRBFOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- LCFXLZAXGXOXAP-QPJJXVBHSA-N ethyl (2e)-2-cyano-2-hydroxyiminoacetate Chemical compound CCOC(=O)C(=N\O)\C#N LCFXLZAXGXOXAP-QPJJXVBHSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003745 glyceroyl group Chemical group C(C(O)CO)(=O)* 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002140 halogenating effect Effects 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- RCBVKBFIWMOMHF-UHFFFAOYSA-L hydroxy-(hydroxy(dioxo)chromio)oxy-dioxochromium;pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1.C1=CC=NC=C1.O[Cr](=O)(=O)O[Cr](O)(=O)=O RCBVKBFIWMOMHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003402 intramolecular cyclocondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940047889 isobutyramide Drugs 0.000 description 1
- ZUBZATZOEPUUQF-UHFFFAOYSA-N isopropylhexane Natural products CCCCCCC(C)C ZUBZATZOEPUUQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001117 keloid Anatomy 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- PQXKHYXIUOZZFA-UHFFFAOYSA-M lithium fluoride Chemical compound [Li+].[F-] PQXKHYXIUOZZFA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052987 metal hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004681 metal hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- AXTNYCDVWRSOCU-UHFFFAOYSA-N n'-tert-butyl-n-ethylmethanediimine Chemical compound CCN=C=NC(C)(C)C AXTNYCDVWRSOCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N pentamethylene Natural products C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004817 pentamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- PARWUHTVGZSQPD-UHFFFAOYSA-N phenylsilane Chemical compound [SiH3]C1=CC=CC=C1 PARWUHTVGZSQPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000004714 phosphonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000001476 phosphono group Chemical group [H]OP(*)(=O)O[H] 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 description 1
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000004886 process control Methods 0.000 description 1
- IVRIRQXJSNCSPQ-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl carbonochloridate Chemical compound CC(C)OC(Cl)=O IVRIRQXJSNCSPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 201000004700 rosacea Diseases 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003930 superacid Substances 0.000 description 1
- 238000006557 surface reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 238000003419 tautomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000037 tert-butyldiphenylsilyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[Si]([H])([*]C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N tert‐butyl hydroperoxide Chemical compound CC(C)(C)OO CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N tetrachloro-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C(Cl)C1=O UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 description 1
- DBGVGMSCBYYSLD-UHFFFAOYSA-N tributylstannane Chemical compound CCCC[SnH](CCCC)CCCC DBGVGMSCBYYSLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBYLVOKEDDQJDY-UHFFFAOYSA-N tris(2-aminoethyl)amine Chemical compound NCCN(CCN)CCN MBYLVOKEDDQJDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001935 vanadium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K11/02—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof cyclic, e.g. valinomycins ; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Cookers (AREA)
- Cereal-Derived Products (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
〔式中、各記号は明細書において定義した意味を有する。〕
のデプシペプチド類の化学合成のための方法または工程、新規中間体およびそれらの製造、ならびに関連発明態様に関する。
Description
本発明は大環状デプシペプチド類の製造のための方法または工程、新規中間体およびそれらの製造、ならびに関連発明態様に関する。
環状デプシペプチド類は薬理学において多くの用途がある。一例として、WO2009/024527に開示されているデプシペプチド類は種々の疾患の処置に有用である。例えば、WO2009/024527に記載されている式IIの化合物は、炎症性および/または過剰増殖性および掻痒性皮膚疾患、例えばアトピー性皮膚炎、乾癬、膿疱性乾癬、酒さ、ケロイド、肥大型瘢痕、アクネ、ネザートン症候群または他の掻痒性皮膚疾患、例えば結節性痒疹、高齢者の不特定掻痒ならびに上皮バリア機能不全を伴う他の疾患、例えば老化した皮膚の処置および予防に有用である。
A1は末端カルボキシ基またはカルバモイル基を有するアミノ酸、特にアスパラギンまたはグルタミンの二価基であり、式Iにおける右手側(C末端に対応)でカルボニル(好ましくはそのα−カルボキシル基のカルボニル)を介して分子の残りに結合しているか;またはC1−8−アルカノイルまたはリン酸化ヒドロキシ−C1−8−アルカノイルであり;
XはA1のNを介して結合しており、アシルであるかまたはA1がC1−8−アルカノイルまたはリン酸化ヒドロキシ−C1−8−アルカノイルであるならば存在せず;
R2はC1−8−アルキル、特にメチルであり;
R3はアミノ酸、特にロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
R5はアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン、ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
R6はヒドロキシアミノ酸、特にチロシンの側鎖であり;
R7はアミノ酸、好ましくはアミノ酸ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
Yは水素またはC1−8−アルキルである。〕
の環状デプシペプチド化合物またはその塩を製造するための方法または工程に関し、
の化合物を選択的脱保護して、式III
の化合物を得て、
所望により、式Iまたは特にIAの遊離化合物をその塩に変換し、式Iの化合物の塩を式Iまたは特にIAの化合物の別の塩または式Iまたは特にIAの遊離化合物に変換しおよび/または式Iまたは特にIAの化合物の脱水類似体および/または5員環類似体を対応する式Iまたは特にIAの化合物に変換することを含む。
の化合物と、式VII
の酸またはその反応性誘導体を反応させ;X**がアミノ保護基であるならば、該アミノ保護基X**を除去して、X*の代わりにH(水素)が存在する式II(特にIIA)の誘導体を得て、対応する酸X*−OH(式中、X*は上記式IIの化合物について定義したとおりである)またはその反応性誘導体を使用して、得られたアミノ基とアシル基X*をカップリングさせることを含む。
の化合物であるとき、さらに、式VIII、特にVIIIAの化合物の環化後、インサイチュで保護基Prot*を除去して、式VI、特にVIAの化合物を得ることを含む。
変法a)において、式IX
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、酸素を介して、固形樹脂RESに結合している開裂可能リンカーLをカップリングさせ(例えば式(X−L)z−RES(式中、LおよびRESは直前に定義したとおりであり、Xは例えばハロ、例えばクロロであり、zは0より大きい数、例えば自然数である)の樹脂との反応により)、
そして保護基Prot**を除去し;
で表される樹脂結合アミノ酸と、式XI
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、
で表される樹脂結合ジペプチドと、遊離ヒドロキシ基を介して、式XIII
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去するか;
のジペプチドまたは該ジペプチドの反応性誘導体と、変法a)の下に記載したとおりに得ることができる式X
を有する固形樹脂RESに結合した開裂可能リンカーLに酸素を介して結合したアミノアシル基をカップリングさせ、保護基Prot**を除去し;
そして、変法a)または変法b)の反応後、
の化合物と、式XV
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去し;
の化合物と、式XVII
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去し、そして好ましくは
の化合物と、式XIX
の非天然アミノ酸(=シントン)または該シントンの活性化誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去して、式XX
の化合物を得て、そして
のものである。
の化合物を開裂し、(開裂前に、開裂と並行してまたは開裂後に)保護基Prot**を除去して、式XXVの化合物を得ることを含む。
のアミノ酸または該アミノ酸の活性化誘導体と、式XXIII
の化合物をカップリングさせることを含む。
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXII
の化合物をカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む。
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXI
の化合物をカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む。
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXVI
の化合物のヒドロキシル基を反応させ、保護基Prot***を除去することを含む。
で表される樹脂結合ジペプチドと、保護基Prot****の除去後、こうして得た遊離アミノ基を介して、式VII
の酸または該酸の反応性誘導体とカップリングさせ;
X**がアミノ保護基であるならば、該アミノ保護基X**を除去して、X*の代わりにHが存在する式IIの誘導体を得て、対応する酸X*−OH(式中、X*は上記式IIの化合物について定義したとおりである)または該酸の反応性誘導体を使用して、得られたアミノ基とアシル基X*をカップリングさせることを含む。
で表される樹脂結合アミノ酸と、式XI*
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせることを含む。
のアミノ酸または式IXの該アミノ酸の反応性誘導体と、固形樹脂RESに結合している開裂可能リンカーLをカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む。
A1が、α−カルボキシ基のカルボニルを介して式IにおけるA1の右手側のアミノ基に結合し、α−アミノ基を介してXに結合するL−グルタミンの二価残基であるかまたは2S−(2−ヒドロキシ−3−ホスホノオキシ)−プロピオニルであり;
R2がメチルであり;
R3がイソプロピル、イソブチル(使用するとき2−メチル−n−プロピル)またはベンジル、特にイソブチルであり;
R5がsec−ブチルまたはベンジル、特にsec−ブチルであり;
R6が4−ヒドロキシベンジルであり;
R7がイソプロピルまたはsec−ブチル(使用するとき1−メチル−n−プロピル)、特にsec−ブチルであり;
XがアセチルまたはイソブチリルであるかまたはA1が2S−(2−ヒドロキシ−3−ホスホノオキシ)−プロピオニルであるとき存在せず、
Yがメチルである
ように選択する。この段落は、下記で段落a)とも呼ぶ。
の構造を有するものであるか、または
特に、式Iの化合物およびその対応する脱水物および/または副生成物としても形成され得て、式V*
の構造を有する、式Iにおけるahp構造の代わりに5員環(five-ring)を有するその対応するヘミアミナール類似体の混合物の平衡を式Iの化合物に有利にシフトさせる方法または工程に関し、
該方法または工程は、酸水溶液を、反応を起こさせるための反応性溶媒として使用することを含む。この方法は独立して(例えば発酵または生合成の生成物のために)または上におよび下に記載する他の工程または方法に加えて、収率を上げるために、または式V、特にVAの化合物および/または式Iにおけるahp構造の代わりに5員環を有する類似体を対応する式Iの化合物に再変換するために使用し得る。
の化合物に関する。
スキーム1の、化合物2、化合物3、化合物4、シントン1;
スキーム2の化合物5;
実施例1B(2)のFmoc−Leu−リンカー−樹脂;
実施例1B(3)のFmoc−Thr−Leu−リンカー−樹脂;
実施例1B(4)のFmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂;
実施例1B(5)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂;
実施例1B(6)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂;
実施例1B(7)の生成物であるイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr(tBu)−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂);
実施例1B(8)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr(tBu)−Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂);
実施例1B(9)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−リンカー−樹脂(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−Me−Tyr(tBu)−Ile−シントン1−H)−Leu−リンカー−樹脂);
実施例1B(10)およびスキーム3のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−OH(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−Me−Tyr(tBu)−Ile−シントン1−H)−Leu−OH);
実施例1B(12)のH−Thr−Leu−樹脂;
実施例1B(13)のH−Gln(Trt)−Thr−Leu−樹脂;
実施例1B(14)イソブチリル−Gln(Trt)−Thr−Leu−樹脂;
実施例1B(15)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−H)−Leu−樹脂;
実施例1B(16)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−H)−Leu−樹脂;
実施例1B(17)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−H)−Leu−樹脂;
実施例1B(18)のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−樹脂a;
スキーム3から、化合物6および/または7(後者が好ましい);
スキーム4から、化合物8および5員環(5-ring)ヘミアミナール異性体;
スキーム5から、前駆体ペプチド2、化合物9、化合物10(スキーム5に記載されている現在のものの中ではこれが好ましい)および/または化合物11;
実施例2A(1)のFmoc−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S;
実施例2A(2)のFmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S;
実施例2A(3)のAc−Gln(Trt)−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S;
実施例2A(4)のAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S;
実施例2A(5)のAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S(以前の名称:Ac−Gln(Trt)−Thr(Val−N−Me−Tyr(tBu)−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S);
実施例2A(6)のAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Phe−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S(以前の名称:Ac−Gln(Trt)−Thr(Val−N−Me−Tyr(tBu)−Phe−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S);および
実施例2A(7)のAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Phe−シントン1−H)−Leu−OH(以前の名称:Ac−Gln(Trt)−Thr(Val−N−Me−Tyr(tBu)−Phe−シントン1−H)−Leu−OH)(前駆体ペプチド2)。
R2およびR2 *は、記載するときC1−8−アルキル、特にメチルである。
R6はヒドロキシアミノ酸、特にチロシンの側鎖である。
保護基Protは、好ましくはデプシペプチドの本発明による合成中に使用するまたは存在する他の保護基の除去に耐える、例えば穏やかな塩基に耐えるが(Prot*参照)、フッ素イオン(特に無水条件下)、例えばBu4N+F−(例えばBu4N+Cl−とKF・H2O、KFと18−クラウン−6、LiFと18−クラウン−6、BF3・ジエチルエーテル、ピリジン−HF、HFのウレア溶液、Et3N(HF)3(式中、Etはエチルである)などを使用して、インサイチュで形成されたときも)を使用し、溶媒が例えばN,N−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、クロロホルムおよびテトラヒドロフランから成る群から選択されるとき、除去可能であるように選択する。
− スペーサーを伴わないまたは伴うゲル型支持体:これらは官能基が均等に分配された高度に溶媒和されたポリマー類である。このタイプの支持体は最も一般的であり、次のものを含む。
ポリスチレン:例えば1〜2%ジビニルベンゼンと架橋したスチレン;ポリアクリルアミドまたはポリメタクリルアミド:ポリスチレンの親水性代替物として;ポリエチレングリコール(PEG):PEG−ポリスチレン(PEG−PS)はポリスチレンも安定であり、ポリマー主鎖から合成の場所を離す;PEGベースの支持体:PEG−ポリプロピレングリコールネットワークまたはPEGとポリアミドまたはポリスチレンから成る(これらは既にスペーサー、PEGを含む);
− 表面型支持体:多孔性ガラス、セルロース線維および高度に架橋したポリスチレンを含む、表面官能化のために開発された材料;
− 複合材料:剛性マトリクスにより支持されたゲル型ポリマー類。
あらゆるこのような支持体を本発明の態様において使用できる。
可能なリンカーの中で、全ての一般的に知られたおよび適当なものを使用し得る。
トリアゾール類、ウロニウムまたはヘキサフルオロホスホニウム誘導体、例えば1−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール(HOBt)、1−ヒドロキシ−7−アザ−ベンゾトリアゾール(HOAt)、2−シアノ−2−(ヒドロキシイミノ)酢酸エチル、2−(1H−7−アザベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウム(HATU)、ベンゾトリアゾール−1−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、ベンゾトリアゾール−1−イル−オキシ−トリス−(ジメチルアミノ)−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、1−(メシチレン−2−スルホニル)−3−ニトロ−1,2,4−トリアゾール(MSNT)、2−(1H−ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、2−(1H−ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロボラート(TBTU)、2−スクシンイミド−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボラート(TSTU)、2−(5−ノルボルネン−2,3−ジカルボキシミド)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボラート(TNTU)、O−[(シアノ(エトキシカルボニル)メチリデン)アミノ]−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボラート(TOTU)、O−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,3−ジメチル−1,3−ジメチレンウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBMDU)、O−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−ビス(テトラメチレン)ウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBPyU)、O−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−ビス(ペンタメチレン)ウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBPipU)、3−ヒドロキシ−4−オキソ−3,4−ジヒドロ−1,2,3−ベンゾトリアジン(HODhbt)、1−ヒドロキシ−7−アザベンゾトリアゾールおよびその対応するウロニウムまたはホスホニウム塩類、指定HAPyUおよびAOP、1−シアノ−2−エトキシ−2−オキソエチリデンアミノオキシ−ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロホスフェート(COMU)、クロロトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyCloP)など;
カルボジイミド類、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド、N−(3−ジメチルアミノプロピル)−N’−エチルカルボジイミド、1−tert−ブチル−3−エチルカルボジイミド、N−シクロヘキシル−N’−2−モルホリノエチル)カルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド(特にカルボン酸基のO−アシルウレア形成を介するエステル形成のために);または
活性エステル形成剤、例えば2−メルカプトベンゾチアゾール(2−MBT)、アジド形成剤、例えばジフェニルホスホリルアジド、酸無水物、例えばプロパンホスホン酸無水物、酸ハロゲン化剤、例えば1−クロロ−N,N,2−トリメチル−1−プロペニルアミン、クロロ−N,N,N’,N’−ビス(テトラメチレン)ホルムアミジニウムテトラフルオロボラートまたはヘキサフルオロホスフェート、クロロ−N,N,N’,N’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート、フルオロ−N,N,N’,N’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート、フルオロ−N,N,N’,N’−ビス(テトラメチレン)ホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート
などまたはこのような反応材の2種以上の混合物。
開鎖オリゴペプチド類の名称は、Pure & Appl. Chem. 1984, 56, 595-624に公開されたthe Joint Commission on Biochemical Nomenclature(“International Union of Pure and Applied Chemistry”および“International Union of Biochemistry”)の推奨に由来していている。以前は、単純なペプチド命名規約をこれらの化合物に使用していた。以前の名称を括弧内に示す。
1A シントン1の合成
(i)別法1:
反応スキーム1:
(S)−ベンジル2−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)−5−ヒドロキシペンタノエート
化合物1を、R. K. Olson, K. Ramasamy, T. Emery, J. Org. Chem. 1984, 49, 3527に記載された方法に類似する方法により製造した。BOC−Glu−OBzl(50g、148.2mmol)をテトラヒドロフラン(800mL)に溶解し、トリエチルアミン(47.3g、467.4mmol)を添加した。溶液をITが−10℃になるまで冷却した。クロロギ酸エチル(51.8g、98%純度、467.8mmol)を、温度を−10〜−15℃のITを維持しながらゆっくり添加した。こうして得た懸濁液をさらに1時間撹拌した。IPC(HPLC)は出発物質の消失を示した。反応混合物を0℃に暖め、水(800mL)を0〜5℃で25〜30分間以内に添加した。混合物の2相への分離が可視となった。激しい撹拌下、水素化ホウ素ナトリウム(11.8g、299.4mmol)を0〜5℃で10回に分けて添加した。水素化ホウ素ナトリウムの添加中、水素ガスが発生するために注意が必要であった。反応混合物をさらに5分間、0〜5℃で撹拌し、温度を30分間以内に20〜25℃に上げた。温度上昇中、水素ガスが発生し続けるため、注意が必要であった。反応混合物を、後処理前に15分間、20〜25℃で撹拌した。
後処理のために、水(1250mL)を反応混合物に添加し、続いて酢酸エチル(1250mL)を添加した。相を分離し、水相を酢酸エチル(600mL)で抽出した。有機相を合わせ、塩水(2×600mL)で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下、40〜45℃で蒸発させて、50.8gの粗生成物を得た。HPLC純度:94a%。粗生成物を移動相としてヘキサンフラクション/酢酸エチル(7:3〜1:1)を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製した。
収量:40.85g(85.2%)。純度:98%(HPLC)。MSおよびNMRは提案された構造を確認した。
(S)−ベンジル2−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)5−((tert−ブチルジフェニルシリル)オキシ)ペンタノエート
先の工程からのアルコール(化合物1)(40.3g、124.6mmol)をジメチルホルムアミド(200mL)に溶解し、イミダゾール(12.8g、99.5%純度、186.9mmol)を添加した。混合物を、溶液が形成されるまで室温で撹拌した(5〜10分間)。tert−ブチル−ジフェニル−シリル−クロライド(41.9g、98%純度、149.5mmol)を10分間以内に滴下し、撹拌をさらに15分間、室温で続けた。IPC(HPLC)は出発物質(アルコール)の消失を示した。
後処理のために、酢酸イソプロピル(400mL)を反応混合物に添加し、続いて半飽和重炭酸ナトリウム水溶液(400mL)をゆっくり添加した。添加が発熱性であり、ガス発生が起こるために注意が必要であった。相を分離し、水相を酢酸イソプロピル(400mL)で抽出した。有機相を合わせ、水(400mL)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を40〜45℃で減圧下蒸発させた。残渣を一夜、真空で25℃で乾燥させて、83.25gの粗生成物を無色油状物として得た。HPLC分析は、81a%の所望の生成物および18.6a%の対応するシラノールを得た。粗生成物をさらに精製することなく次工程で使用した。精製サンプルのNMRおよびHR−MSは案された構造を確認した。HR−MS:C33H43NO5Siの計算値:[M+H]+:562.29833;[M+NH4]+:579.32488;[M+Na]+:584.28027。実測値:[M+H]+:562.29848;[M+NH4]+:579.32489;[M+Na]+:584.27995
(S)−ベンジル2−((((9H−フルオレン−9−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−5−((tert−ブチルジフェニルシリル)オキシ)ペンタノエート
83.25gの先の工程からの粗生成物(化合物2の70g理論収量に対応、124.6mmol)をジクロロメタン(650mL)に溶解し、トリフルオロ酢酸(358.8g、99%純度、3115mmol)を、激しく撹拌している溶液に滴下した。30分間後のIPC(HPLC)はBOC保護基の完全な開裂を示した。反応混合物(透明溶液)をメカニカルスターラーを備えた6L 4−頸丸底フラスコに移し、ジクロロメタン(1000mL)で希釈した。半飽和炭酸ナトリウム水溶液(1800mL)を、激しく撹拌している溶液にゆっくり添加した。炭酸ナトリウム添加中、強いガス発生が観察されたため、注意が必要であった。添加完了後の水相のpH:9−10。反応混合物をさらに15分間撹拌し、相を分離した。水相をジクロロメタン(1000mL)で抽出し、有機相を合わせて、生成物のジクロロメタン溶液を得た。溶液を、次工程のために、40〜45℃で減圧下、約650mLの最終容積まで濃縮した。HPLCは溶液中の80.5%の化合物3および19.5a%シラノールの存在を示した。
FMOC化(FMOCylation)のために、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(650mL)を、激しく撹拌している化合物3の溶液にゆっくり添加し、続いてFMOC−クロライド(36.55g、97%純度、137mmol)を添加した。FMOC−Clの添加中ガス発生が観察されたため、注意が必要であった。撹拌を、15分間、室温で続けた。有機相のIPC(HPLC)は中間体化合物3の消失と、化合物4への完全な変換を示した。後処理のために、相を分離し、水相をジクロロメタン(650mL)で抽出した。有機相を合わせ、水(650mL)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を40〜45℃で減圧下に除去して、112.6gの粗生成物を得た。
粗生成物をエタノール/イソプロパノール/水(89:5:6;2400mL)に懸濁し、懸濁液をIT=50℃まで加熱して、溶液とした。溶液を45℃に冷却し、種晶を添加し、温度を1時間以内に20〜25℃に冷却し続けた。結晶化が約40℃で開始した。懸濁液を一夜20〜25℃で撹拌し、30分間以内にIT=0〜5℃まで冷却し、撹拌をさらに2時間、0〜5℃で続けた。生成物を濾過により単離し、フィルターケーキをエタノール/イソプロパノール/水(89:5:6;240mL)で洗浄し、減圧下乾燥させて、純粋化合物4を得た(HPLCによると100a%純度)。収量:66g(77.4%)。生成物をMSおよびNMR HR−MSで十分に特徴付けした:C43H45NO5Siの計算値:[M+H]+:684.31398;[M+NaH4]+:701.34053;[M+Na]+:706.29592。実測値:[M+H]+:684.31392;[M+NH4]+:701.34021;[M+Na]+:706.29539。母液は、HPLCによると30a%生成物および29a%シラノールを含む30.6gの泡状物となった。
(S)−2−((((9H−フルオレン−9−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−5−((tert−ブチルジフェニルシリル)オキシ)ペンタン酸
化合物4(66g、96.6mmol)をエタノール/イソプロピルアルコール/水(89:5:6;3000mL)に懸濁させ、懸濁液をITが45℃になるまで暖めて、溶液とした。溶液をIT=30℃まで冷却した。アルゴンで不活性化後、パラジウム−触媒(硫酸バリウム上10%;6.6g)を、アルゴン流下溶液に添加した。生成物を、大気圧よりわずかに高い水素圧下、30〜35℃で水素化した。水素化は、HPLCによると1.5時間後に完了した。反応混合物をセルロースベースの濾過助剤(Cellflock 40;セルロースベースの濾過助剤)で濾過し、濾過助剤をエタノール/イソプロパノール/水(89:5:6;600mL)で洗浄した。溶媒の、減圧下、45〜50℃での蒸発により、59.58gの泡状物を粗生成物として得た。粗生成物を、ジクロロメタン/メタノール95:5〜80:20を移動相として使用する2個のシリカゲルクロマトグラフィー(2×1kgシリカゲル60)で精製した。収率:52g(90.6%)。生成物をMSおよびNMRでで十分に特徴付けした。HR−MS:C36H39NO5Siの計算値:[M+H]+:594.26703;[M+NH4]+:611.29358;[M+Na]+:616.24897;実測値:[M+H]+:594.26743;[M+NH4]+:611.29385;[M+Na]+:616.24900。
反応スキーム2:
Fmoc−Glu−OBzl(5g、10.88mmol)をテトラヒドロフラン(80mL)に溶解し、トリエチルアミン(3.3g、32.6mmol)を添加した。溶液を−15℃に冷却し、クロロギ酸エチル(7.3g、67.27mmol)を、30分間かけて、−12℃で溶液に添加した。こうして得た懸濁液をさらに1時間、−10〜−15℃で撹拌し、温度を0℃に上げた。水(80mL)を、温度を0℃に維持しながら反応混合物に滴下した。水素化ホウ素ナトリウム(計0.805g、21.27mmol)を3回に分けて(10分間毎に1回)、0℃で添加し、反応混合物をさらに1時間、0℃で撹拌した。水素ガス発生により注意が必要であった。反応混合物を水(100mL)で希釈し、酢酸イソプロピル(150mL)で抽出し、相を分離した。水相を酢酸イソプロピル(100mL)で再び抽出し、有機相を合わせた。合わせた有機相を半飽和塩化ナトリウム溶液(2×50mL)で洗浄し、溶液を減圧下、約50mLの最終容積まで濃縮した。濃縮溶液を浄化濾過し(clear-filtered)、濾過残渣を酢酸イソプロピル(20mL)で洗浄した。こうして得た化合物5の溶液を丸底フラスコに移し、イミダゾール(1.49g、21.89mmol)を添加した。混合物を15分間、rtで撹拌し、tert−ブチル−ジフェニル−シリル−クロライド(4.45g、16.19mmol)を添加した。反応混合物を15時間、rtで撹拌した。後処理のために、懸濁液を酢酸イソプロピル(20mL)で希釈し、水(3×50mL)で抽出した。有機相を分離し、溶媒を減圧下蒸発させて、9.95gの粗生成物を得た。粗生成物を移動相として酢酸イソプロピル/ヘキサン(2:8)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、6.5gの固体を得て、それをヘキサンに懸濁し、3時間、rtで撹拌した。沈殿を濾過により単離し、50℃で減圧下に乾燥させて、5.6gの化合物4を得た。収率:2工程で75%。HR−MS:C43H45NO5Siの計算値:[M+H]+:684.31398;[M+NH4]+:701.34053;[M+Na]+:706.29592。実測値:[M+H]+:684.31430;[M+NH4]+:701.34073;[M+Na]+:706.29577
Fmoc−Glu−OBzl(60g、130.579mmol)をテトラヒドロフラン(550mL)に溶解し、トリエチルアミン(40.8g、403.202mmol)を添加した。濁った溶液が得られ、幾分沈殿があった。この濁った溶液/懸濁液を滴下漏斗に移し、4.5Lリアクター中の予め冷却したクロロギ酸イソブチル(54.96g、402.41mmol)のテトラヒドロフラン(300mL)溶液に−35〜−30℃で、添加中この温度を維持しながら添加した。滴下漏斗中の残留物をさらにテトラヒドロフラン(50mL)で洗浄し、反応混合物を−35〜−30℃でさらに2時間撹拌した。水(960mL)を45分間以内に反応混合物に添加し、温度を0℃まで上げた。懸濁液が形成された。水素化ホウ素ナトリウム(14.4g、380.625mmol)を1時間以内に0℃で20回に分けて添加し、反応混合物をさらに1時間、0℃で撹拌した。水素ガス発生により注意が必要であった。
懸濁液をt−ブチル−メチルエーテル(600mL)に注加し、反応フラスコを水(600mL)で洗浄し、それを生成物混合物(2相)に添加した。相を分離し、水相をt−ブチル−メチルエーテル(600mL)で抽出し、有機相を合わせた。有機相を水(2×600mL)で洗浄し、無水硫酸マグネシウム(200g)で乾燥させ、溶媒を、最終容積が1Lとなるまで減圧下で除去した。溶液をジメチル−ホルムアミド(600g)で希釈し、溶媒を、最終容積が400mLとなるまで減圧下で除去した。こうして得た化合物5の溶液を丸底フラスコに移した。イミダゾール(14.4g、211.524mmol)を化合物5のDMF溶液に添加し、混合物を5分間、rtで撹拌した。最後に、TBDPS−Cl(39.6g、144.07mmol)を20分間、20〜25℃で添加し、反応混合物をこの温度でさらに1時間撹拌する。
反応混合物を酢酸エチル(1200mL)に注加し、混合物を水(700mL)で抽出した。相を分離し、有機相を水(3×300mL)で洗浄した。溶媒の減圧下の蒸発により、106gの粗生成物を得た。
粗生成物(106g)をエタノール/イソプロパノール/水(89:5:6;1200mL)に40〜50℃で添加し、種晶(0.5gの化合物4)を添加した。混合物を室温に冷却し、17時間、rtで撹拌した。懸濁液を−20℃に冷却し、2時間、−20℃で撹拌した。生成物を濾過により単離し、フィルターケーキを溶媒混合物エタノール/イソプロパノール/水(89:5:6;3×200mL)で洗浄し、40℃で減圧下に乾燥させて、66.5gの化合物4を得た(2工程で74.6%収率)。HPLCは精製物が>99a%純度であることを示した。
さらなる生成物が母液から単離可能であり(溶媒蒸発後34g)、それはHPLCによると約30a%化合物4を含む。
前駆体ペプチド1:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−OH
底部に濾布または焼結ガラス濾過プレートを備えた固相合成リアクター。窒素連結管は、濾布または焼結ガラス濾過プレートおよび底部バルブを介するリアクター内容物の排水を可能にする。
200gのアミノメチル−ポリスチレン樹脂(1%ジビニルベンゼンと架橋、アミノメチル基1mmol/g充填)(供給者:Senn Chemicals AG, Dielsdorf/Switzerland)の撹拌とジメチルホルムアミド(1600mL)およびイソプロパノール(1600mL)添加を交互に数回繰り返した。ジメチルホルムアミドで最後に2回洗浄後、樹脂を予め調製した4−ヒドロキシ−ジフェニルメチル−安息香酸(91.3g、300mmol)、1−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール一水和物(45.9g、300mmol)およびジイソプロピルカルボジイミド(75.7g、600mmol)のジメチルホルムアミド(1600mL)溶液で処理した。反応混合物を1.5時間撹拌し、ニンヒドリン試験を行った。試験ではまだ遊離アミノ基が示され、ジイソプロピルカルボジイミド(7.6g、60mmol)を添加し、反応物を一夜撹拌した。翌朝のさらなるニンヒドリン試験では陰性であり、反応混合物を濾別した。樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空で乾燥させて、257gの乾燥リンカー−樹脂を得た。本物質をさらに分析することなく次合成工程で使用した。
Fmoc−Leu−リンカー−樹脂の製造
リンカー−樹脂(190g、147.8mmol)を、トルエン(1400mL)中での撹拌により膨張させた。溶媒を濾別し、トルエン(1400mL)およびアセチルクロライド(53mL、1478mmol)の溶液と置き換えた。この混合物を2時間撹拌し、濾別し、同一の混合物と置き換え、それをさらに2時間撹拌して、濾別した。塩素化樹脂をトルエンで2回およびジクロロメタンで3回洗浄した。
丸底フラスコに、Fmoc−Leu−OH(104.8g、296mmol)およびN−メチル−モルホリン(49mL、444mmol)のジクロロメタン(600mL)溶液を調製した。この溶液を樹脂に添加し、一夜撹拌した。翌朝、溶液を濾別し、樹脂をジクロロメタンとイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空で乾燥させて、234.7gの乾燥Fmoc−Leu−リンカー−樹脂を得た。Fmoc基の負荷は、185mmol(理論値の125%)の収率を生じる0.787mmol/gと決定された。外部業者でのアミノ酸分析は<0.1%D−Leuエナンチオマーを確認した。
Fmoc−Thr−Leu−リンカー−樹脂の製造
Fmoc−Leu−リンカー−樹脂(140g、109mmol)を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(1100mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をテトラヒドロフラン(1200mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
丸底フラスコに、Fmoc−Thr−OH(112.1g、328mmol)、ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物(51.25g、334mmol)およびジイソプロピルカルボジイミド(51mL、655mmol)のテトラヒドロフラン(600mL)溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、pHを直ぐに確認した(pH=6.5)。反応混合物を1.5時間、ニンヒドリン試験が完全な反応を示すまで撹拌した。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂の小サンプルを乾燥させ、アミノ酸分析に送り(0.13%D−Leu、<0.1%D−Thr、<0.1%L−アロ−Thr、<0.1%D−アロ−Thr)、物質の大部分をさらに乾燥させることなく次工程に付した。
Fmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂の調製
先の工程からのFmoc−Thr−Leu−リンカー−樹脂を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(1100mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をテトラヒドロフラン(1100mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
丸底フラスコで、Fmoc−Gln(Trt)−OH(138.6g、226mmol)、HATU(86.2g、226mmol)およびエチルジイソプロピルアミン(58.4g、452mmol)のジメチルホルムアミド(400mL)溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、pHを直ぐに確認した(pH=10)。反応混合物を3時間、ニンヒドリン試験が完全な反応を示すまで撹拌した。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
樹脂を真空で乾燥させて、170gの乾燥Fmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂を得た。Fmoc基の負荷は、102mmol(最後の2工程の理論値の94%)の収量を示す0.60mmol/gと決定された。外部業者でのアミノ酸分析により次の値が得られた:(0.13%D−Leu、<0.1%D−Thr、<0.1%L−アロ−Thr、<0.1%D−アロ−Thr、<0.8%D−Gln)。
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂の調製
Fmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂(169g、101mmol)を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(1300mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液(1300mL)での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をテトラヒドロフラン(1100mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
丸底フラスコで、イソ酪酸(17.9g、203mmol)、PyBOP(105.5g、203mmol)およびエチルジイソプロピルアミン(52.4g、406mmol)のジメチルホルムアミド(550mL)溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、pHを直ぐに確認した(pH=9.5)。反応混合物を2.5時間、ニンヒドリン試験が完全な反応を示すまで撹拌した。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
本バッチを乾燥およびさらなる分析をすることなく、直接次工程に付した
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂の製造
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr−Leu−リンカー−樹脂(上記工程からの湿物質、101mmol)各20分間ずつ、3回連続ジクロロメタン(1200mL)中での撹拌により膨張させた。
溶媒を濾別し、MSNT(88g、297mmol)およびFmoc−Ile−OH(105g、297mmol)を固体として添加した。ジクロロメタン(500mL)ならびにN−メチルイミダゾール(18.2g、223mmol)およびエチルジイソプロピルアミン(51.2g、396mmol)のジクロロメタン(100mL)溶液を添加した。反応混合物を2時間、プロセスコントロールのHPLCが完全な反応を示すまで撹拌した。溶液を濾別し、樹脂を、ジクロロメタンで3回、ジメチルホルムアミドで3回およびイソプロパノールで3回連続的に洗浄した。樹脂を真空で乾燥させて、172gの乾燥イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂を得た。Fmoc負荷は0.418mmol/gであることが決定され、それ故に、72mmol(最後の2工程で71%)の収量を示す。
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂の製造
(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr(tBu)−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂)
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂(172g、72mmol)を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(1300mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液(1400mL)での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。a桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をテトラヒドロフラン(1100mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
Fmoc−N−メチル−Tyr(tBu)−OH(68.7g、144mmol)およびHATU(55.1g、144mmol)のジメチルホルムアミド(700mL)溶液を調製し、ペプチド−樹脂に添加し、エチル−ジイソプロピルアミン(37.5g、289mmol)のジメチルホルムアミド(100mL)溶液を撹拌下に添加した。カップリング溶液直後および反応1時間後のpH確認は同じ結果となった(pH10)。溶液を2時間、ニンヒドリン試験が完全な反応を示すまで撹拌した。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
本バッチを乾燥およびさらなる分析をすることなく、直接次工程に付した
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−IleFmoc)−Leu−リンカー−樹脂の製造
(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr(tBu)−Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂)
湿イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂(72mmol)を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(1200mLおよび1300mL)中での撹拌により膨張させた。Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液(1400mL)での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をテトラヒドロフラン(1100mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
丸底フラスコで、Fmoc−Ile−OH(103.9g、294mmol)、COMU(125.9g、294mmol)およびエチルジイソプロピルアミン(76g、588mmol)のジクロロメタン(440mL)およびジメチルホルムアミド(440mL)溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、反応混合物を20時間撹拌した。その後ニンヒドリン試験を行い、完全な反応が示された。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
樹脂を真空で乾燥させて、185.5gの乾燥イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂を得た。Fmoc基負荷は0.40mmol/gと決定された。それ故に定量的収量の74mmolが得られた。
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−リンカー−樹脂の製造
(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr−Ile−シントン1−H)−Leu−リンカー−樹脂)
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−Fmoc)−Leu−リンカー−樹脂(30g、12mmol)を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(240mLおよび250mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液(250mL)での2回連続洗浄により開裂させた。樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことにより、ピペリジン除去の成功が確認された。
樹脂をジメチルホルムアミド(250mL)で3回洗浄して、下記カップリング工程のための準備をした。
丸底フラスコで、シントン1(14.6g、24.6mmol)、PyBOP(12.85g、24.6mmol)およびエチルジイソプロピルアミン(6.4g、49.2mmol)のジメチルホルムアミド(120mL)溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、反応混合物を3時間核はンした。その後、ニンヒドリン試験は完全な反応を確認した。溶液を濾別し、樹脂をジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
得られたペプチド−樹脂を、各30分間ずつ、2回連続ジメチルホルムアミド(250mL)中での撹拌により膨張させた。
Fmoc保護基を、それぞれ5分間および15分間、20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液(250mL)での2回連続洗浄により開裂させた。ペプチド−樹脂を数回ジメチルホルムアミドとイソプロパノールで交互に洗浄した。
最後に、ペプチド−樹脂をジクロロメタン(250mL)で3回洗浄して、ペプチド開裂のための準備をした。
イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−OH(=前駆体ペプチド1)の製造
(以前の名称:イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−N−me−Tyr(tBu)−Ile−シントン1−H)−Leu−OH)
湿イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−リンカー−樹脂に、酢酸(125mL)およびジクロロメタン(125mL)の混合物を添加し、懸濁液2時間撹拌した。懸濁液を濾過し、濾液を丸底フラスコに回収した(濾液1)。樹脂をジクロロメタン(250mL)で2回洗浄し、洗浄液を濾液1と合わせた。
樹脂を新鮮な酢酸(125mL)およびジクロロメタン(125mL)でさらに2時間処理した。懸濁液を濾過し、濾液を丸底フラスコに回収した(濾液2)。樹脂をジクロロメタン(250mL)で2回洗浄し、洗浄液を濾液2と合わせた。
酢酸(200mL)およびジクロロメタン(50mL)を樹脂に添加し、懸濁液一夜撹拌した。懸濁液を濾過し、濾液を濾液3として回収した。
3個の濾液を開裂方法の有効性を評価するために別々に後処理した。濾液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留酢酸を3回のトルエン(100mL)との共沸蒸留により除去した。油性残渣を高真空で凍結乾燥機で乾燥させた。収量:濾液1:12.5g、濾液2:2.1g、濾液3:0.3g
粗製の物質である前駆体ペプチド1をRP−クロマトグラフィーで精製し、フラクションをロータリーエバポレーターで濃縮し、濃縮物を凍結乾燥させた。純度:98.8%収率:8.5g(最後の2工程で48%)。生成物を1H−NMR、13C−NMRおよびHR−MSにより特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した。NMRスペクトルは数個の配座の存在を示した。
HR−MS:C85H116N8O13Siの計算値:[M+H]+:1485.85039。実測値:[M+H]+:1485.84929
1B(11) 第一アミノ酸(Fmoc−Leu−OH)の固定化
2−クロロトリチルクロライド樹脂(30g、L=1.2mmol/g;Merck Novabiochem 855017)を乾燥DCM(240ml)で10分間膨潤させ、溶媒を排水し、固相リアクターを緩い窒素流下に閉じたままにした。同時に、丸底フラスコでFmoc−Leu−OH(42.6g、120.8mmol)および乾燥1,4−ジオキサン(100ml)を撹拌した。溶媒を真空下、45℃で蒸発させ、2回めの1,4−ジオキサンを添加した。溶媒を再び、無色油状残渣が得られるまで、真空下、45℃で蒸発させた。この油状残渣に、乾燥DCM(155mL)およびDIPEA(40.4mL)を連続的に添加し、溶液を一度に予め膨張させた樹脂に添加し、次いで5分間後、2回目のDIPEA(16.5mL)を添加した。懸濁液を2時間撹拌し、反応媒体を排水した。潜在的未反応クロライドを消失させるために、240mlのDCM/MeOH/DIPEA(70/15/15、v/v)の消失溶液を添加し、混合物を10分間撹拌した。0.95mmol/gの負荷が測定された。
予め膨張させた樹脂に、25%ピペリジンのDMF溶液(240ml)を添加し、懸濁液を5分間撹拌し、反応混合物を濾過により除去し、2回目のピペリジンの同溶液を添加し、懸濁液を15分間撹拌し、溶媒を濾過により除去した。
樹脂洗浄と乾燥:
樹脂を次のとおり洗浄した:
DMF(250ml)(6×2分間)
250mlのIPA(3×2分間)
250mlのTBME(6×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、35.7gのH−Leu−樹脂を得た。
先の工程のH−Leu−樹脂(30g)をDMF(270ml)で30分間膨張させ、溶媒を排水した。
丸底フラスコ(RBF)で、Fmoc−Thr−OH(25.0g、73.2mmol)、BOP(40.4g、91.5mmol)およびDMF(250mL)を混合し、混合物を2分間撹拌し、DIPEA(18.9g、146.4mmol)を添加した。こうして得た混合物を、予め膨張させたペプチド−樹脂に一度に添加し、反応混合物を2.5時間撹拌した。カイザー試験は陽性であり、それ故に、先に記載した条件によって2回目のカップリングを行った。1.0時間後、カイザー試験は陰性であり、反応は完了したと見なされ、反応媒体を濾過により除去した。
樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(5×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、52.2gのFmoc−Thr−Leu−樹脂を得て、Fmoc開裂工程の準備ができた。
樹脂(52.2g)をDMF(272ml)に懸濁し、1.0時間撹拌し、溶媒を濾過により除去した。
Fmoc保護基を1B(11)において記載したのと同じ方法で開裂し、ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(6×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(6×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、39.9gのH−Thr−Leu−樹脂を得た。
先の工程のH−Thr−Leu−樹脂(39.9g)をDMF(270ml)で30分間膨張させ、溶媒を排水した。
RBFで、Fmoc−Gln(Trt)−OH(44.7gg、73.2mmol)、BOP(40.4g、91.5mmol)およびDMF(250ml)を混合した。混合物を2分間撹拌し、DIPEA(18.9g、146.4mmol)を添加した。得られた混合物を予め膨張させたH−Thr−Leu−樹脂に一度に添加し、反応混合物を2.5時間撹拌し、カイザー試験は陰性であり、反応は完了したと見なされ、反応媒体を濾過により除去した。
樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml DMF(4×2分間)
湿ペプチド−樹脂をさらに何の操作もすることなくFmoc開裂工程で使用した。
fmoc保護基を工程1B(11)に記載した方法によって開裂した。次いで樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(5×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、54.4gのH−Gln(Trt)−Thr−Leu−樹脂を得た。
先の工程のペプチド−樹脂(54.4g)をDMF(270ml)で30分間膨張させ、溶媒を排水した。
RBFで、イソ酪酸(6.4g、73.2mmol)、PyBop(38.1g、73.2mmol)およびDMF(230ml)を混合し、混合物を2分間撹拌し、DIPEA(28.3g、219.6mmol)を添加した。溶液を予め膨張させたペプチド−樹脂に一度に添加し、反応混合物を1.5時間撹拌した。カイザー試験は陰性であり、反応は完了したと見なされ、反応媒体を濾過により除去した。
樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(5×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、55.8gのイソブチリル−Gln(Trt)−Thr−Leu−樹脂を得た。
先の工程由来のペプチド−樹脂(55.8g)を乾燥DCM(250ml)に1.0時間懸濁させた。溶媒を濾過により除去し、湿ペプチド−樹脂を穏やかな窒素流下に維持し、温度を0〜5℃に調節した。
RBFで、Fmoc−Ile−OH(51.7g、146.4mmol)および乾燥ジオキサン(150ml)を混合した。溶媒を真空下、45℃で油状残渣が観察されるまで蒸発させた。蒸留工程を繰り返し、残渣に乾燥DCM(150ml)を添加し、溶液を−10℃に冷却し、MSNT(43.3g、146.4mmol)を添加し、懸濁液を3分間撹拌し、N−メチル−イミダゾール(14.2g、173mmol)を添加し、混合物を2分間撹拌し、溶液を10分間、上記で製造したペプチド−樹脂に滴下した。添加完了後、懸濁液を窒素雰囲気下、2.0時間撹拌した。
樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMC(4×2分間)
250ml DMF(3×2分間)
湿ペプチド−樹脂をさらに何の操作もすることなくFmoc開裂工程で使用した。
Fmoc保護基を、1B(11)に記載する一般的プロトコールによって開裂した。
Fmoc開裂実施後、樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(5×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(5×2分間)
樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、57.2gのイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(O−Ile−H)−Leu−樹脂を得た。
先の工程由来のペプチド−樹脂(57.2g)を、DMF(250ml)に30分間懸濁させた。膨張のために、溶媒を濾過により除去した。
RBFで、Fmoc−NMeTyr(tBu)−OH(52.0g、109.8mmol)、HATU(41.7g、109.8mmol)およびDMF(230ml)を混合し、混合物を2分間撹拌した。DIPEA(28.3g、219.6mmol)を添加し、溶液を2.0分間撹拌した。得られた溶液を予め膨張させたペプチド−樹脂に添加した。
反応混合物を1.0時間撹拌し、カイザー試験を行った。カイザー試験は陰性であった。反応は完了したと見なされ、反応媒体を濾過により除去した。
ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(1×2分間)
湿ペプチド−樹脂をさらに何の操作もすることなくFmoc開裂工程で使用した。
Fmoc保護基を、1B(11)で使用した一般的プロトコールによって開裂した。
Fmoc開裂実施後、樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(5×2分間)
250ml IPA(1×2分間)
250ml DMF(5×2分間)
得られたイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−H)−Leu−樹脂を乾燥させずに次工程で使用した。
先の工程のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−H)−Leu−樹脂を、DMF(270ml)で30分間膨張させ、溶媒を排水した。
丸底フラスコで、Fmoc−Ile−OH(38.8g、109.8mmol)、HATU(41.7g、109.8mmol)およびDMF(250mL)を混合し、混合物を2分間撹拌し、DIPEA(28.3g、219.6mmol)を添加した。溶液を予め膨張させたペプチド−樹脂に一度に添加し、反応混合物を2.0時間撹拌し、クロラニル事件は陽性であり、Fmoc−Ile−OHとの2回目のカップリングを行った。2回目のカップリング3時間後、ペプチド−樹脂を濾過により単離した。
ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(4×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml DMF(4×2分間)
湿ペプチド−樹脂をさらに何の操作もすることなくFmoc開裂工程で使用した。
Fmoc保護基を1B(11)に記載したのと同じ方法で除去し、ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
250ml DMF(5×2分間)
250ml IPA(3×2分間)
250ml TBME(4×2分間)
ペプチド−樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、67.0gのイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−H)−Leu−樹脂を得た。
先の工程のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−H)−Leu−樹脂(33.5g)をDMF(150ml)に30分間懸濁させ、溶媒を排水した。RBFで、Fmoc−シントン1−OH(34.3g、57.8mmol)、PyBop(30.0g、57.7mmol)およびDMF(113ml)を混合し、混合物を2分間撹拌し、DIPEA(14.9g、115.2mmol)を添加した。溶液を予め膨張させたペプチド−樹脂に一度に添加し、反応混合物を2.0時間撹拌した。反応媒体を濾過により除去した。
ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
150ml DMF(4×2分間)
150ml IPA(3×2分間)
150ml DMF(4×2分間)
湿ペプチド−樹脂をさらに何の操作もすることなくFmoc開裂工程で使用した。
Fmoc保護基を、ピペリジン溶液(150ml)を使用する以外1B(11)と同じ方法で除去し、ペプチド−樹脂を次のとおり洗浄した。
150ml DMF(5×2分間)
150ml IPA(3×2分間)
150ml TBME(4×2分間)
ペプチド−樹脂を一夜、真空下、40℃で乾燥させて、36.0gのイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−樹脂を得た。
先の工程のイソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−樹脂(29.75g)を、乾燥DCM(350ml)で1.0時間処理し、溶媒を濾過により除去し、350mlの30%v/v HFIPのDCM溶液を添加した。混合物を10分間撹拌し、溶媒を濾過により除去し、別にとっておいた。湿樹脂に2回目の同HFIP溶液を添加し、溶液を10分間撹拌し、溶媒を濾過により除去し、先の溶液と共に貯蔵した。樹脂をDCM(350ml)で3回洗浄し、洗浄液を開裂溶液と合わせた。
合わせた溶液を油性残渣が観察されるまで真空下で濃縮し、トルエン(200ml)を添加し、溶媒を減圧下、45℃で、油性残渣が得られるまで蒸発させた。350mlのヘキサンを添加し、懸濁液を2時間撹拌した。溶媒を濾過により除去し、フィルターケーキをヘキサン(50ml)で洗浄し、湿ケーキを一夜、真空下、35℃で乾燥させて、19.24gの粗前駆体ペプチド1(=イソブチリル−Gln(Trt)−Thr(Ile−Tyr(tBu)Me−Ile−シントン1−H)−Leu−OH)を得た。
粗前駆体ペプチド1(6.0g)の一部をRP−クロマトグラフィーで精製し、生成物フラクションをロータリーエバポレーターで濃縮し、濃縮物を凍結乾燥させて、2.2gの純粋前駆体ペプチド1を99.3%a純度で得た。生成物含有副フラクションを同様に処理して、さらに1.25gの低純度前駆体ペプチドを71.4%a純度で得た。粗前駆体ペプチド1(19.24g)の全量について外挿し、これは、主フラクションからの7.05gの純粋前駆体ペプチド1および副フラクションからのさらに4.01gの前駆体ペプチド1(71.4%a純度で)に対応する。
(S)−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−3,9−ジ((S)−sec−ブチル)−12−(3−ヒドロキシプロピル)−15−イソブチル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−2−イソブチラミド−N5−トリチルペンタンジアミド
前駆体ペプチド1(1.9g、1.28mmol)のアセトニトリル(120mL)中の濁った溶液/懸濁液を、90分間かけて、撹拌中のHATU(972mg、2.56mmol)およびDMAP(468.6mg、3.84mmol)のアセトニトリル(100mL)中の混合物に35℃で添加した。滴下漏斗をアセトニトリル(30mL)で洗浄した。懸濁液添加後のIPC(HPLC)は、前駆体ペプチドの不在および環化の完了を示した。後処理のために、溶媒を約50mLの最終容積となるまで減圧下蒸発させ、残渣を酢酸イソプロピル(250ml)で希釈した。有機相を水(2×100mL)で抽出し、溶媒を減圧下蒸発させて、2.3gの粗生成物を得た。粗生成物を移動層として酢酸エチルを使用するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、1.79g(1.22mmol)の化合物6を泡状物として得た。収率:95%。生成物を1H−NMR、13C−NMRおよびHR−MSで特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した.NMRスペクトルは数個の配座の存在を示した。
HR−MS:C85H114N8O12Siの計算値:[M+H]+:1467.83983;[M+NH4]+:1484.86637;[M+Na]+:1489.82177。実測値:[M+H]+:1467.83984;[M+NH4]+:1484.86555;[M+Na]+:1489.82073
前駆体ペプチド1(15.0g)のt−ブチル−メチル−エーテル(750mL)溶液を、1.5時間かけて、予め冷却したDMAP(2.80g)およびHATU(5.87g)のアセトニトリル(375mL)溶液に0℃で添加した。反応混合物をさらに30分間、室温で撹拌した。反応混合物をt−ブチル−メチル−エーテル(750mL)で希釈し、半飽和NaCl水溶液(1500mL)に注加した。相を分離し、有機相を再び半飽和NaCl水溶液(1500mL)で抽出した。有機相を分離し、溶媒を、最終容積約175mLまで減圧下、一部蒸発させた。この溶液を移動層としてt−ブチル−メチル−エーテルを使用するシリカゲル(225gシリカゲルのカラム)で濾過した。溶媒の蒸発および真空で40〜45℃での乾燥により、化合物6をHPLCによると97.53%純度で得た。収量:14.19g(95.7%)
(S)−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−3,9−ジ((S)−sec−ブチル)−12−(3−((tert−ブチルジフェニルシリル)オキシ)プロピル)−15−イソブチル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−2−イソブチラミド−N5−トリチルペンタンジアミド
化合物6(1.79g、1.22mmol)をテトラヒドロフラン(60mL)に溶解し、Et3N(HF)3(6.62g、41.1mmol)を室温で添加した。反応混合物を室温で8.5時間撹拌し、酢酸イソプロピル(200mL)で希釈し、得られた溶液/懸濁液を激しく撹拌している飽和NaHCO3水溶液にゆっくり添加した。有機相を分離し、水(100mL)で抽出した。溶媒の減圧下の蒸発により、1.86gの粗生成物を得て、それを移動相として酢酸エチル/イソプロパノール(95:5)を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、1.24g(1.00mmol)の化合物7を得た。収率:82%
生成物はIR、NMRおよびMSで十分に特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した。
HR−MS:C69H96N8O12の計算値:[M+H]+:1229.72205;[M+NH4]+:1246.74860;[M+Na]+:1251.70399。実測値:[M+H]+:1229.72128;[M+NH4]+:1246.74780;[M+Na]+:1251.70310
化合物6(14.0g、9.537mmol)をテトラヒドロフラン(220mL)に溶解し、t−ブチル−メチル−エーテル(116mL)を添加した。溶液をEt3N(HF)3(23.05g)で10分間以内のゆっくりした添加により処理した。反応混合物を24時間、室温で撹拌した。後処理のために、反応混合物をt−ブチル−メチル−エーテル(570mL)で希釈し、混合物を半飽和NaHCO3水溶液(632mL)に注加した。二相混合物を30分間撹拌し、相を分離した。有機相を水(280mL)で抽出した。両水相をt−ブチル−メチル−エーテル(380mL)で抽出し、有機相を合わせた。有機相を無水MgSO4(8.0g)で乾燥させ、溶媒を、最終容積約100mLまで、減圧下、一部蒸発させた。トルエン(140mL)を添加し、溶媒を再び最終容積80mLまで蒸発させた。この溶液をt−ブチル−メチル−エーテル(70mL)で希釈し、生成物を、30分間のヘプタン(140mL)のゆっくりした添加により沈殿させた。形成した懸濁液を50〜55℃に加熱し、30分間、この温度で撹拌した。懸濁液を30分間以内に0℃に冷却し、0℃で2時間撹拌し、生成物を濾過により単離した。生成した白色沈殿を真空で乾燥させて、11.08gの化合物7(94.5%収率)を得た。生成物のHPLCは97a%純度を示した。
(S)−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−3,9−ジ((S)−sec−ブチル)−15−イソブチル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−12−(3−オキソプロピル)−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−2−イソブチラミド−N5−トリチルペンタンジアミド
化合物7(1.2g、0.98mmol)をテトラヒドロフラン(190mL)およびジメチルスルホキシド(62mL)の混合物に溶解した。1−ヒドロキシ−1,2−ベンズヨードキソール−3(1H)−オン1−オキシド(IBX)(2.42g、45%g/g、3.9mmol)を添加し、溶液を約4.5時間撹拌し、その後HPLCは出発物質(化合物7)の消失を示した。反応混合物を飽和NaHCO3水溶液(300mL)に注加し、ジクロロメタン(2×300mL)で抽出した。有機相を合わせ、水(2×300mL)で洗浄した。溶媒の減圧下の蒸発により、2.31gの粗生成物を泡状物として得た。粗生成物を酢酸エチル/イソプロパノール(95:5)を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、LC−MSで所望の質量を有する少なくとも2種の生成物を含む1.16gの生成物混合物を得た。生成物混合物をそのまま次工程で使用した。
HR−MS(主異性体):C69H94N8O12の計算値:[M+H]+:1227.70640;[M+NH4]+:1244.73295;[M+Na]+:1249.68834。実測値:[M+H]+:1227.70599;[M+NH4]+:1244.73200;[M+Na]+:1249.68733
HR−MS(副異性体):C69H94N8O12の計算値:[M+H]+:1227.70640;[M+NH4]+:1244.73295;[M+Na]+:1249.68834。実測値:[M+H]+:1227.70598;[M+NH4]+:1244.73198;[M+Na]+:1249.68751
化合物7(10.0g、8.13mmol)をテトラヒドロフラン(127mL)およびジメチルスルホキシド(42mL)に溶解した。この溶液に、1−ヒドロキシ−1,2−ベンズヨードキソール−3(1H)−オン1−オキシド(IBX)(15.18g、45%m/m、24.4mmol)を室温で激しく撹拌したながら添加した。反応混合物を16時間、室温で撹拌した。反応混合物をNaHCO3水溶液(500mL)に注加し、酢酸エチル(250mL)を添加した。二相混合物を30分間撹拌し、相を分離した。有機相を半飽和NaCl水溶液(250mL)で洗浄し、相を分離した。水相を酢酸エチル((250mL)で抽出し、有機相を合わせた。合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を一部蒸発させて、約50g溶液を得た。この溶液を移動相として酢酸エチル/メタノール(98:2v/v)を使用してシリカゲルカラム(100gシリカゲル)を流した。こうして得た生成物溶液(537.4g)をトルエン(135mL)で処理し、得られた溶液を溶媒を、一部45℃で減圧下に蒸発させることにより、最終重量112gまで濃縮した。得られた溶液を0℃に冷却し、ヘプタン(135mL)を30分間かけて添加した。こうして得た懸濁液を1時間、0℃で撹拌し、生成物を濾過により単離し、ヘプタン(2×30mL)で洗浄した。最後に生成物を真空で、45℃で一夜乾燥させて、8.824gの化合物8およびそのヘミアミナール−異性体の混合物を得た。収率:88.4%
(S)−N1−((2S,5S,8S,11R,12S,15S,18S,21R)−2,8−ジ−(S)−sec−ブチル−21−ヒドロキシ−5−(4−ヒドロキシベンジル)−15−イソブチル−4,11−ジメチル−3,6,9,13,16,22−ヘキサオキソ−10−オキサ−1,4,7,14,17−ペンタアザビシクロ[16.3.1]ドコサン−12−イル)−2−イソブチラミドペンタンジアミド
粗生成物を、移動相としてアセトニトリル/水の勾配を用いるRP−シリカクロマトグラフィーKromasil 100-10-C8で精製した。生成物含有フラクションを蒸発させてアセトニトリルを除去し、沈殿を酢酸エチルに溶解し、溶媒を減圧下で除去して、0.895gの化合物Aを得た;収率:59.1%。生成物をNMRおよびMSにより十分に特徴付けし、本生成物のスペクトルは発酵由来の化合物Aのものと同一であった。
1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO) δH:-0.11 (3H, d, J=6.2Hz), 0.64 (4H, m), 0.77 (3H, d, J=6.2Hz), 0.81 (3H, t, J=7.3Hz), 0.84 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.88 (3H, d, J=6.6Hz), 1.02 (3H, d, J=6.7Hz), 1.02 (1H, m), 1.03 (3H, d, J=6.7Hz), 1.09 (1H, m), 1.20 (3H, d, J=6.2Hz), 1.24 (1H, m), 1.39 (1H, m), 1.51 (1H, m), 1.75 (6H, m), 1.83 (1H. m), 1.92 (1H, m), 2.12 (2H, m), 2.47 (1H, m), 2.58 (1H, m), 2.67 (1H, m), 2.71 (3H, s), 3.16 (1H, d, J=14.2Hz), 4.30 (1H, m), 4.34 (1H, m), 4.42 (1H, d, J=10.6Hz), 4.45 (1H, m), 4.61 (1H, d, J=9.2Hz), 4.71 (1H, dd, J=9.5, 5.5Hz), 4.93 (1H, s), 5.05 (1H, dd, J=11.4, 2.6 Hz), 5.48 (1H, m), 6.07 (1H, d, J=2.6Hz), 6.64 (2H, d, J=8.4Hz), 6.73 (1H, s), 6.99 (2H, d, J=8.4Hz), 7.25 (1H, s), 7.35 (1H, d, J=9.2Hz), 7.64 (1H, d, J=9.5Hz), 7.73 (1H, d, J=9.2Hz), 8.01 (1H, d, J=7.7Hz), 8.42 (1H, d, J=8.8Hz), 9.17 (1H, s)
13C-NMR (150 MHz, d6-DMSO) δC:10.35, CH3;11.21 CH3;13.85, CH3;16.00, CH3;17.68, CH3;19.52, 2 x CH3;20.89, CH3;21.75, CH2;23.30, CH3;23.74, CH2;24.21, CH;24.48, CH2;27.35, CH2;29.78, CH2;30.08, CH3;31.49, CH2;33.18, CH;33.24, CH2;33.76, CH, 37.41, CH;39.23, CH2;48.84, CH;50.69, CH;52.11, CH;54.17 CH;54.70, CH;55.31, CH;60.66, CH;71.89, CH;73.97, CH;115.32, 2 x CH;127.34, Cq;130.37, 2 x CH;156.27, Cq;169.12, Cq;169.29, Cq;169.37, Cq;169.79 Cq;170.65, Cq;172.40, Cq;172.53, Cq;173.87 Cq;176.38, Cq
化合物8(8.5g、6.924mmol)をジクロロメタン(595mL)に溶解し、溶液を0℃に冷却した。トリフルオロ酢酸(127.5mL)のジクロロメタン(127.5mL)溶液を冷却した溶液に、温度を0〜5℃に維持しながら添加した。反応混合物を5.5時間、0℃で撹拌し、ジクロロメタン(850mL)で希釈し、水(42.5mL)を添加した。反応混合物を室温に暖め、17.5時間、室温で撹拌した。後処理のために、反応混合物を撹拌している、酢酸ナトリウム水溶液(722g水中169g酢酸ナトリウム)および酢酸エチル(700mL)の二相混合物に添加した。相を分離し、有機相を再び酢酸ナトリウム水溶液(722g水中169g酢酸ナトリウム)で洗浄した。相を分離し、有機相を水(2×850mL)で洗浄した。個々の水相を酢酸エチル(700mL)で抽出し、有機相を合わせた。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を40〜45℃で減圧下一部蒸発させて、187gの薄懸濁液を得た。ヘプタン(187g)を15分間以内に添加し、形成した懸濁液を0℃に冷却した。懸濁液を1時間、0℃で撹拌し、生成物を濾過により単離した。粗生成物を真空で40℃で乾燥させて、5.65gの粗化合物Aを得た。粗収率:87.8%。
0.96gの粗生成物を、移動相としてアセトニトリル/水の勾配を使用するRP−シリカクロマトグラフィーKromasil 100-10-C8で精製した。生成物含有フラクションを蒸発させてアセトニトリルを除去し、沈殿を酢酸エチルに溶解し、溶媒を一部減圧下で除去して、40gの溶液を得た。ヘプタン(40g)を撹拌している溶液に30分間、室温で添加し、得られた懸濁液を室温でさらに2時間撹拌した。生成物を濾過により単離し、酢酸エチル/ヘプタン(1:1、2×10mL)で洗浄した。生成物を真空で、40〜45℃で16時間乾燥させて、0.702gの化合物Aを得た。RP−クロマトグラフィーおよび析出後の収率:64%
(S)−2−アセトアミド−N1−((1S,2S,5S,8S,11R,12S,15S,18S,21R)−2−ベンジル−21−ヒドロキシ−5−(4−ヒドロキシベンジル)−15−イソブチル−8−イソプロピル−4,11−ジメチル−3,6,9,13,16,22−ヘキサオキソ−10−オキサ−1,4,7,14,17−ペンタアザビシクロ[16.3.1]ドコサン−12−イル)ペンタンジアミド
Ac−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Phe−シントン1−H)−Leu−OH
設備:250mlフリットガラスリアクターならびに自動溶媒送達、振盪および反応材の吸入のための連結管を備えたをペプチド合成装置。
Fmoc−Leu−Trt−Tentagel−S−樹脂(18.7g負荷0.37mmol/g(Rapp Polymere GmBH, Tuebingen/Germanyから供給))を、30分間振盪させることによりDMF中で膨張させた。
Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂を数回DMFとイソプロパノールで交互に洗浄後、塩基類の完全な除去をフェノールフタレインおよび水を最後の洗浄工程で添加して桃色とならないことにより確認した。
Fmoc−Thr−OH(4.7g)、HATU(5.26g)およびDIPEA(1.8g)をDMF(50ml)に溶解させた。5分間撹拌後、さらにDIPEA(1.8g)を添加した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、2時間振盪した。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。乾燥後、樹脂重量は19.01gであった。小サンプルを開裂させ、HPLCで確認した。単一主ピークは変換の成功を示した。
Fmoc−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S−樹脂(19.01g、6.6mmol)をDMF中で予め膨張させ、Fmoc保護基を20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂を数回DMFとイソプロパノールで交互に洗浄後、塩基類の完全な除去をフェノールフタレインおよび水を最後の洗浄工程で添加して桃色とならないことにより確認した。
Fmoc−Gln(Trt)−OH(8.07g)、HATU(5.01g)およびDIPEA(3.4g)をDMF(50ml)に溶解した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、1.5時間振盪させた。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。得られた樹脂を次の下記工程で直接使用し、小サンプルのみを開裂させ、HPLCで確認した。単一主ピークは変換の成功を示した。
上記のFmoc−Gln(Trt)−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S樹脂を、DMF中で10分間振盪することによりDMFで再膨張させた。Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことによりピペリジン除去成功を確認した。
酢酸(0.774g)、PyBOP(6.707g)およびDIPEA(3.33g)をDMF(50ml)に溶解した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、2.5時間振盪させた。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。得られた樹脂を次の下記工程で直接使用し、小サンプルのみを開裂させ、HPLCで確認した。単一主ピークは変換の成功を示した。
上記からのAc−Gln(Trt)−Thr−Leu−Trt−Tentagel−S樹脂を、DMF中で10分間振盪することによりDMFで再膨張させた。
Fmoc−Val−OH(8.7g)およびDIPEA(8.3g)をDCM(25ml)に溶解した。並行してMSNT(2.76g)を別のDCM(25ml)に溶解した。両溶液を合わせ、3分間の前活性化後、ペプチド樹脂に付加し、2時間振盪した。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。得られた樹脂を次の下記工程で直接使用し、小サンプルのみを開裂させ、HPLCで確認した。単一主ピークは変換の成功を示した。
上記からのAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S樹脂を、DMF中で10分間振盪することによりDMFで再膨張させた。
Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことによりピペリジン除去成功を確認した。
6.1gのFmoc−N−Me−Tyr(tBu)−OH、4.8gのHATUおよび3.3gのDIPEAをDMF(50ml)に溶解した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、2.5時間振盪させた。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。得られた樹脂を次の下記工程で直接使用した。少量のサンプルを開裂させ、HPLCで確認したところ、単一主ピークは変換の成功を示した。
上記からのAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S樹脂を、DMF中で10分間振盪することによりDMFで再膨張させた。
Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色がないことによりピペリジン除去成功を確認した。
Fmoc−Phe−OH(9.66g)、HATU(9.48g)およびDIPEA(6.4g)をDMF(100ml)に溶解した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、2時間振盪した。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。得られた樹脂を次の下記工程で直接使用し、小サンプルのみを開裂させ、HPLCで確認した。単一主ピークは変換の成功を示した。
上記からのAc−Gln(Trt)−Thr(Val−Tyr(tBu)Me−Phe−Fmoc)−Leu−Trt−Tentagel−S樹脂を、DMF中で10分間振盪することによりDMFで再膨張させた。
Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。桃色の発色がないことによりピペリジン除去成功を確認した。
シントン1(6.77g)、PyBOP(5.9g)およびDIPEA(2.95g)をDMF(100ml)に溶解した。pH(>11)確認後、混合物を脱保護樹脂に添加し、2時間振盪した。実施したカイザー試験の結果はOKであり、樹脂をDMFおよびイソプロパノールでの交互の洗浄により洗浄した。HPLC確認のために小サンプルを取った後、Fmoc保護基を、20%ピペリジンのDMF溶液でそれぞれ5分間および15分間の2連続処理により開裂させた。樹脂をDMFおよびイソプロパノールで数回交互に洗浄することにより洗浄した。最後に樹脂をDCMで2回洗浄した。樹脂からの合成ペプチドの開裂を、80%の酢酸のDCM溶液の混合物中、一夜振盪させることにより達成した。得られたペプチド溶液を濾別し、樹脂をDCMで2回洗浄した。合わせた濾液を蒸発させ、最後に勾配システムを使用するRP−クロマトグラフィーにより精製した。回収したフラクションをHPLCで分析し、純粋フラクションを貯留し、蒸発させ、最後に凍結乾燥させた。
収量:3.54g(42%)前駆体ペプチド2。
HR−MS:C85H108N8O13Siの計算値:[M+H]+=1477.78779;実測値:[M+H]+=1477.78691
(S)−2−アセトアミド−N1−((1S,2S,5S,8S,11R,12S,15S,18S,21R)−2−ベンジル−21−ヒドロキシ−5−(4−ヒドロキシベンジル)−15−イソブチル−8−イソプロピル−4,11−ジメチル−3,6,9,13,16,22−ヘキサオキソ−10−オキサ−1,4,7,14,17−ペンタアザビシクロ[16.3.1]ドコサン−12−イル)ペンタンジアミド
(S)−2−アセトアミド−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−9−ベンジル−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−12−(3−((tert−ブチルジフェニルシリル)オキシ)プロピル)−15−イソブチル−3−イソプロピル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−N5−トリチルペンタンジアミド
化合物Bを得るための前駆体ペプチド2のラクタム化は、化合物6の製造について記載したものと類似の条件下で行った。生成物、化合物9、はIR、NMRおよびMSで十分に特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した。
HR−MS:C85H106N8O12Siの計算値:[M+H]+:1459.77723;[M+NH4]+:1476.80377。実測値:[M+H]+:1459.77719;[M+NH4]+:1476.80291
(S)−2−アセトアミド−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−9−ベンジル−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−12−(3−ヒドロキシプロピル)−15−イソブチル−3−イソプロピル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−N5−トリチルペンタンジアミド
化合物10を得るための脱シリル化反応は、化合物7の製造について記載したものと類似の条件下で行った。生成物はIR、NMRおよびMSで十分に特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した。
HR−MS:の計算値C69H88N8O12:[M+H]+:1221.65945;[M+NH4]+:1238.6860;[M+Na]+:1243.64139。実測値:[M+H]+:1221.65894;[M+NH4]+:1238.68518;{M+Na]+:1243.64001
(S)−2−アセトアミド−N1−((3S,6S,9S,12S,15S,18S,19R)−9−ベンジル−6−(4−(tert−ブトキシ)ベンジル)−15−イソブチル−3−イソプロピル−7,19−ジメチル−2,5,8,11,14,17−ヘキサオキソ−12−(3−オキソプロピル)−1−オキサ−4,7,10,13,16−ペンタアザシクロノナデカン−18−イル)−N5−トリチルペンタンジアミド
化合物11を得るための化合物10の酸化は、化合物8の製造について記載したものと類似の条件下で行った。LC−MS分析は所望の質量を伴う数個のピークを示し、アルデヒド、5員環(5-ring)−ヘミアミナールおよび6員環(6-ring)−ヘミアミナールの混合物の存在を示した。混合物をそのまま次工程で使用した。HR−MS(主ピーク):の計算値C69H86N8O12:[M+H]+:1219.64380;[M+NH4]+:1236.67035;[M+Na]+:1241.62574。実測値:[M+H]+:1219.64404;[M+NH4]+:1236.67053;[M+Na]+:1241.62524
(S)−2−アセトアミド−N1−((1S,2S,5S,8S,11R,12S,15S,18S,21R)−2−ベンジル−21−ヒドロキシ−5−(4−ヒドロキシベンジル)−15−イソブチル−8−イソプロピル−4,11−ジメチル−3,6,9,13,16,22−ヘキサオキソ−10−オキサ−1,4,7,14,17−ペンタアザビシクロ[16.3.1]ドコサン−12−イル)ペンタンジアミド
化合物11(1.0g、0.82mmol)をジクロロメタン(200mL)に溶解した。トリフルオロ酢酸(57.8g)を15〜25℃で10分間かけて添加し、反応混合物を45時間、室温で撹拌した。反応混合物をジクロロメタン(200mL)で希釈し、水(10mL)を添加した。撹拌をさらに24時間、室温で続けた。反応混合物を飽和NaHCO3水溶液(700mL)に20分間以内に注加し、ジクロロメタン(500mL)、イソプロパノール(50mL)および水(500mL)を逐次的に添加した。相を分離し、水相をイソプロパノール(50mL)のジクロロメタン(500mL)溶液で抽出した。相を再び分離し、水相をジクロロメタン(5×300mL)で数回抽出した。有機相を合わせ、溶媒を減圧下で蒸発させて、所望のノストペプチンBN920をトリチルアルコールおよび反応の他の副生成物と共に含む粗生成物混合物(1.0g)を得た。粗生成物を移動相としてジクロロメタン/イソプロパノールを用いる
シリカゲルクロマトグラフィーで精製して、純粋ノストペプチンBN920(212mg、97%(A)純度)を得た。低純度フラクションの回収により、さらに90%(A)純度の402mgの生成物を得た。全フラクションからの収量:614mg(81%)。生成物はIR、NMRおよびMSで十分に特徴付けした。スペクトルは提案された構造を確認した。
HR−MS:C46H64N8O12の計算値:[M+H]+:921.47165;[M+NH4]+:938.49820;[M+Na]+:943.45359。実測値:[M+H]+:921.47167;[M+NH4]+:938.49861;[M+Na]+:943.45337
反応スキーム4は、化合物Aの脱水物形態の存在を示す。本発明により、これが、次の反応スキームに記載する脱水物形態の水和のための単純な方法を使用して容易に化合物Aに(戻り)変換できることが判明した。
例えば、1:2の化合物A/化合物A−脱水物比が、トリフルオロ酢酸/ジクロロメタン(5:95 v/v)を酸化工程後の保護基開裂に使用したとき観察される(実施例1)。
実施例3B由来の化合物A−脱水物から化合物Aへの変換は、化合物A−脱水物を、トリフルオロ酢酸および水の存在下、ジクロロメタン中で撹拌することにより証明された(実施例3C)。こうして得た生成物は、HPLCによると、95.6面積%の化合物Aとわずか4.4面積%の化合物A−脱水物を含む。
3A:
酸化からの生成物混合物(23mg)(化合物8およびそれ由来の環状アミナール類)をDCM(5.7mL)に溶解し、TFA(0.3mL)を溶液に激しい撹拌下に添加した。反応混合物を5時間、室温で、IPC(HPLC)が保護基の完全な開裂を示すまで撹拌した。1:2比の化合物Aおよび化合物A−脱水物がさらなる副生成物と共に反応混合物中に存在した。反応混合物をDCM(5.7mL)で希釈し、激しく撹拌している溶液を水(0.23mL)で処理した。室温で、19時間撹拌後のHPLCは、化合物A/化合物A−脱水物の96:4比を示した。
後処理のために、反応混合物を酢酸ナトリウム(1.62g)の水(23mL)溶液に注加し、酢酸エチル(35mL)を添加した。相を分離し、有機相を水(2×25mL)で抽出した。水相を酢酸エチル(35mL)で抽出し、有機相を合わせた。溶媒を減圧下に蒸発させて、22mgの粗生成物を泡状物として得た。粗生成物を酢酸エチル/メタノール95:5〜90:10を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、96.8面積%純度の化合物Aを、1.8面積%の5員環(5-ring)異性体と共に得た。
化合物A(250mg)をジクロロメタン(10mL)に溶解し、トリフルオロ酢酸(5mL)を添加し、モレキュラー・シーブ(1g)を添加した。1時間後のIPC(HPLC)は、化合物A/化合物A−脱水物の17:83比を示した。反応混合物を合計72時間、室温で撹拌した。後処理のために、モレキュラー・シーブを濾過により除去し、溶液を飽和NaHCO3水溶液に注加した。水相を酢酸エチル(50mL)で抽出した。有機相を水(20mL)で洗浄し、溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を真空で乾燥させて、定量的収量(245mg)の粗生成物を泡状物として得た。粗生成物のHPLC分析は、約4:96面積%比での化合物A/化合物A−脱水物の存在を示した。
HR−MS:C46H70N8O11の計算値:[M+H]+=911.52368、[M+NH4]+=928.55023、[M+Na]+=933.50563;実測値[M+H]+=911.52372、[M+NH4]+=928.55029、[M+Na]+=933.50538。化合物A−脱水物の構造を1H−NMRで確認した。
1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO) δH:0.06 (3H, d, J=6.6 Hz), 0.67 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.70 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.77 (3H, d, J=6.6 Hz), 0.81 (1H, m), 0.87 (6H, m), 1.00 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.02 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.06 (1H, m), 1.16 (3H, d, J=6.5 Hz), 1.17 (1H, m), 1.30 (1H, m), 1.41 (1H, m), 1.53 (1H, m), 1.74 (2H, m), 1.91 (2H, m), 2.01 (1H, m), 2.11 (2H, m), 2.45 (3H, m), 2.73 (3H, s), 2.74 (1H, m), 3.18 (1H, m), 4.32 (2H, m), 4.50 (1H, m), 4.54 (1H, m), 4.64 (1H, d, J=9.5 Hz), 4.77 (1H, d, J=11.0 Hz), 5.18 (1H, m), 5.26 (1H, m), 5.42 (1H, q, J=6.6 Hz), 6.25 (1H, d, J=7.3 Hz), 6.32 (1H, d, J=7.7 Hz), 6.67 (2H, d, J=8.4 Hz), 6.75 (1H, s), 7.04 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.25 (1H, s), 7.30 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.89 (1H, d, J=9.2 Hz), 7.98 (1H, d, J=8.1 Hz), 8.50 (1H, d, J=8.4 Hz), 9.24 (1H, s)
実施例3Bからの化合物A−脱水物(110mg)をDCM(20mL)に溶解した。TFA(1g)および水(0.2mL)を添加し、反応混合物を20時間、室温で撹拌した。後処理のために、反応混合物を酢酸エチル(50mL)に注加し、酢酸エチル溶液を飽和NaHCO3水溶液(50mL)で抽出した。有機相を水(20mL)で抽出し、溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル/イソプロパノール9:1(20mL)に溶解し、溶液を0.45マイクロメートルフィルターで、浄化濾過した。溶媒を減圧下蒸発させ、残渣を真空で45℃で乾燥させて、100mgの粗生成物を得た。HPLC分析は、約95.6面積%の化合物Aおよび約4.4面積%の化合物A−脱水物の存在を示した。
Claims (22)
- 式I
A1は末端カルボキシ基またはカルバモイル基を有するアミノ酸、特にアスパラギンまたはグルタミンの二価基であり、式Iにおける右手側でカルボニルを介して分子の残りに結合しているか、またはC1−8−アルカノイルまたはリン酸化ヒドロキシ−C1−8−アルカノイルであり;
XはA1のNを介して結合しており、アシルであるかまたはA1がC1−8−アルカノイルまたはリン酸化ヒドロキシ−C1−8−アルカノイルであるならば存在せず;
R2はC1−8−アルキル、特にメチルであり;
R3はアミノ酸、特にロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
R5はアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン、ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
R6はヒドロキシアミノ酸、特にチロシンの側鎖であり;
R7はアミノ酸、好ましくはアミノ酸ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり;
Yは水素またはC1−8−アルキルである。〕
の環状デプシペプチド化合物またはその塩を製造するための方法または工程であって、式II
の化合物を選択的脱保護して、式III
の化合物を得て、
遊離ヒドロキシル基を酸化条件下で反応させて、式IV
所望により、遊離式Iの化合物を塩に変換し、式Iの化合物の塩を式Iの化合物の異なる塩または式Iの遊離化合物に変換しおよび/または式Iの化合物の脱水類似体を対応する式Iの化合物に変換することを含む、方法または工程。 - 式IVの化合物を、対応する出発アミノ酸類および側鎖前駆体から固相ペプチド合成および液相合成の組み合わせにより合成する、請求項1に記載の方法または工程。
- さらに、請求項1に記載した式IIの化合物の製造のために、式VI
の化合物と、式VII
の酸またはその反応性誘導体を反応させ;X**がアミノ保護基であるならば、該アミノ保護基X**を除去して、X*の代わりにHを得て、対応する酸X*−OH(式中、C*は請求項1で式IIの化合物について定義したとおりである)またはその反応性誘導体を使用して、得られたアミノ基とアシル基X*をカップリングさせることを含む、請求項1または2に記載の方法または工程。 - さらに、好ましくは液相化学を使用する、N末端アミノ基およびC末端カルボキシ基を担持する、式VIの化合物の直鎖状前駆体ペプチドの、該アミノ基および該カルボキシ基からアミド結合の形成を可能にする反応条件下でのラクタム化下の環化を含む、請求項3に記載の方法または工程。
- 直鎖状前駆体ペプチドが式VIII
の化合物であるとき、さらに、式VIII、特にVIIIAの化合物の環化後、インサイチュで保護基Prot*を除去して、式VIの化合物を得ることを含む、請求項4に記載の方法または工程。 - 式VIII、特にVIIIAの直鎖状前駆体ペプチドを、対応するアミノ酸類から、固相ペプチド合成および続く使用した固体支持体からの開裂により合成する、請求項5に記載の方法または工程。
- 変法a)において、式IX
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、酸素を介して、固形樹脂RESに結合している開裂可能リンカーLをカップリングさせ、
そして、保護基Prot**を除去し;
得られる式X
で表される樹脂結合アミノ酸と、式XI
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、
得られる式XII
で表される樹脂結合ジペプチドと、遊離ヒドロキシ基を介して、式XIII
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去するか;
または、変法b)において、式XXVII
のジペプチドまたは該ジペプチドの反応性誘導体と、変法a)の下に記載したとおりに得ることができる式X
。〕
を有する固形樹脂RESに結合している開裂可能リンカーLに酸素を介して結合したアミノアシル基をカップリングさせ;
保護基Prot**を除去し;
そして、変法a)または変法b)の反応後、得られる式XIV
の化合物と、式XV
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去し;
得られる式XVI
の化合物と、式XVII
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去し、
最後に得られた式XVIII
の化合物と、式XIX
のシントンまたは該シントンの活性化誘導体をカップリングさせ、保護基Prot**を除去して、式XX
の化合物を得て、式XXにおける固相結合ペプチドを固相L−RESから開裂させて、請求項5に示す対応する式VIII、特にVIIIAの化合物を得ることを含む、請求項6に記載の方法または工程。 - 請求項1に記載の式IIの化合物の合成のために、好ましくは液相化学を使用する、N末端アミノ基およびC末端カルボキシ基を担持する、式IIの化合物の直鎖状前駆体ペプチドの、該アミノ基および該カルボキシ基からアミド結合の形成を可能にする反応条件下での、ラクタム化の下の環化を含む、請求項1または2に記載の方法または工程。
- 直鎖状前駆体ペプチドが式XXV
である、請求項8に記載の方法または工程。 - さらに、式XXVの化合物の合成のために、式XXIV
の化合物を開裂し、(開裂前に、開裂と並行してまたは開裂後に)保護基Prot**を除去して、式XXVの化合物を得ることを含む、請求項9に記載の方法または工程。 - さらに、式XXIVの化合物の合成のために、式XIX
のアミノ酸または該アミノ酸の活性化誘導体と、式XXIII
の化合物をカップリングさせることを含む、請求項10に記載の方法または工程。 - さらに、式XXIIIの化合物の合成のために、式XVII*
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXII
の化合物をカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む、請求項11に記載の方法または工程。 - さらに、式XXIIの化合物の合成のために、式XV*
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXI
の化合物をカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む、請求項12に記載の方法または工程。 - さらに、式XXIの化合物の合成のために、式XIII*
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体と、式XXVI
の化合物のヒドロキシル基を反応させ、保護基Prot***を除去することを含む、請求項13に記載の方法または工程。 - さらに、式XXVIの化合物の合成のために、式XII*
で表される樹脂結合ジペプチドと、保護基Prot****の除去後、こうして得た遊離アミノ基を介して、式VII
の酸または該酸の反応性誘導体とカップリングさせ;
X**がアミノ保護基であるならば、該アミノ保護基X**を除去して、X*の代わりにHを得て、得られたアミノ基と、アシル基X*を、対応する酸X*−OH(式中、X*は請求項1で式IIの化合物について定義したとおりである)または該酸の反応性誘導体とカップリングさせることを含む、請求項14に記載の方法または工程。 - さらに、式XIIの化合物の合成のために、式X
で表される樹脂結合アミノ酸と、式XI*
のアミノ酸または該アミノ酸の反応性誘導体をカップリングさせることを含む、請求項15に記載の方法または工程。 - さらに、式Xの樹脂結合アミノ酸を得るために、式IX*
のアミノ酸または式IXの該アミノ酸の反応性誘導体、固形樹脂RESに結合している開裂可能リンカーLをカップリングさせ、保護基Prot***を除去することを含む、請求項16に記載の方法または工程。 - A1、R2、R3、R5、R6、R7、XおよびYまたは対応する保護されていないもしくは保護された基R2 *、R3 *、R5 *、R6 *、R7 *、X*およびY3が、得られた式Iの化合物またはその塩において、
A1が、α−カルボキシル基のカルボニルを介して式IにおけるA1の右手側のアミノ基に結合し、α−アミノ基を介してXに結合するL−グルタミン結合の二価残基であるかまたは2S−(2−ヒドロキシ−3−ホスホノオキシ)−プロピオニルであり;
R2がメチルであり;
R3がイソプロピル、イソブチルまたはベンジル、特にイソブチルであり;
R5がsec−ブチルまたはベンジル、特にsec−ブチルであり;
R6が4−ヒドロキシベンジルであり;
R7がイソプロピルまたはsec−ブチル、特にsec−ブチルであり;
XがアセチルまたはイソブチリルであるかまたはA1が2S−(2−ヒドロキシ−3−ホスホノオキシ)−プロピオニルであるとき存在せず、
Yがメチルである
ように選択する、請求項1〜16のいずれかに記載の方法。 - 請求項1に記載した式Iの化合物の脱水物または請求項18で定義した置換基を有するものを対応する式Iの化合物に変換するための方法または工程であり、ここで、脱水物が式V
の構造を有するものおよび/または副生成物として形成され得て、式V*
の構造を有する、式Iにおけるahp構造の代わりに5員環(five-ring)を有するその対応するヘミアミナール類似体であるものであるか、または、
式Iの化合物およびその対応する脱水物および/またはヘミアミナールの混合物の平衡を式Iの化合物に有利にシフトさせる方法または工程に関し、
酸水溶液を、反応を起こさせるための反応性溶媒として使用することを含む、方法または工程。 - 酸がカルボン酸、特にハロ置換C1−8アルカン酸、さらに具体的にはトリフルオロ酢酸またはトリクロロ酢酸である、請求項19に記載の方法。
- 式II
の化合物。 - 式III
の化合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161477319P | 2011-04-20 | 2011-04-20 | |
US61/477,319 | 2011-04-20 | ||
PCT/IB2012/051977 WO2012143888A1 (en) | 2011-04-20 | 2012-04-19 | Processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016043330A Division JP2016164158A (ja) | 2011-04-20 | 2016-03-07 | 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014511899A true JP2014511899A (ja) | 2014-05-19 |
JP5951006B2 JP5951006B2 (ja) | 2016-07-13 |
Family
ID=46317455
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014505772A Expired - Fee Related JP5951006B2 (ja) | 2011-04-20 | 2012-04-19 | 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 |
JP2016043330A Pending JP2016164158A (ja) | 2011-04-20 | 2016-03-07 | 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016043330A Pending JP2016164158A (ja) | 2011-04-20 | 2016-03-07 | 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8614289B2 (ja) |
EP (1) | EP2699585A1 (ja) |
JP (2) | JP5951006B2 (ja) |
KR (1) | KR101580729B1 (ja) |
CN (2) | CN103476789B (ja) |
AR (1) | AR086168A1 (ja) |
AU (1) | AU2012245980B2 (ja) |
BR (1) | BR112013026660A2 (ja) |
CA (1) | CA2833109A1 (ja) |
CL (2) | CL2013003037A1 (ja) |
CO (1) | CO6801799A2 (ja) |
EA (2) | EA025546B1 (ja) |
GT (1) | GT201300256A (ja) |
IL (1) | IL228727A0 (ja) |
MA (1) | MA35034B1 (ja) |
MX (1) | MX337526B (ja) |
PE (1) | PE20141206A1 (ja) |
SG (1) | SG193918A1 (ja) |
TN (1) | TN2013000385A1 (ja) |
TW (1) | TW201249863A (ja) |
WO (1) | WO2012143888A1 (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CL2008002394A1 (es) | 2007-08-17 | 2009-05-15 | Novartis Ag | Depsipeptido ciclico, o derivados, inhibidores de calicreína 7, obtenidos desde chondromyces crocatus, metodo de obtencion y usos terapeuticos. |
US8614289B2 (en) | 2011-04-20 | 2013-12-24 | Novartis Ag | Processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
US8680054B2 (en) | 2011-04-20 | 2014-03-25 | Novartis Ag | Suspension type topical formulations comprising cyclic depsipeptide |
US8987413B2 (en) * | 2012-10-09 | 2015-03-24 | Novartis Ag | Aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
US9067978B2 (en) * | 2012-10-09 | 2015-06-30 | Novartis Ag | Solution phase processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
WO2015155676A1 (en) | 2014-04-08 | 2015-10-15 | Novartis Ag | Novel aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
PL3298027T3 (pl) * | 2015-05-20 | 2021-11-08 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Przeciwrobacze związki depsipeptydów |
CN108290923A (zh) | 2015-09-17 | 2018-07-17 | 麻省理工学院 | 用于固相肽合成的方法和系统 |
KR102031186B1 (ko) * | 2017-01-11 | 2019-11-08 | 주식회사 엘지생활건강 | 단백질 강도 강화용 조성물 |
WO2020018888A1 (en) | 2018-07-20 | 2020-01-23 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Antimicrobial peptides and methods of use |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010536731A (ja) * | 2007-08-17 | 2010-12-02 | ノバルティス アーゲー | 環状デプシペプチド類 |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3043252C2 (de) | 1980-11-15 | 1982-12-02 | Degussa Ag, 6000 Frankfurt | Cyclische Acetale von N-Acylglutaminsäure -γ- semialdehyden, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung |
US5595756A (en) | 1993-12-22 | 1997-01-21 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents |
DE4421113A1 (de) | 1994-06-16 | 1995-12-21 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Chondramide, Gewinnungsverfahren, Mittel mit Chondramiden und Mischkultur zur Chondramid-Gewinnung |
DE19828043A1 (de) | 1998-06-24 | 1999-12-30 | Bayer Ag | Ektoparasitizide Mittel |
JP2000154198A (ja) | 1998-11-20 | 2000-06-06 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 環状デプシペプチドの固相合成方法及びその中間体 |
GB0108234D0 (en) * | 2001-04-02 | 2001-05-23 | Pharma Mar Sa | Process for producing trunkamide A compounds |
US20040110228A1 (en) | 2002-04-01 | 2004-06-10 | Mcalpine Shelli R. | Combinatorial organic synthesis of unique biologically active compounds |
ES2341545T3 (es) | 2003-06-06 | 2010-06-22 | Arexis Ab | Uso de compuestos heterociclicos condensados como inhibidores de scce para el tratamiento de enfermedades de la piel. |
GB0322140D0 (en) | 2003-09-22 | 2003-10-22 | Pfizer Ltd | Combinations |
EP1716248A1 (en) | 2004-02-03 | 2006-11-02 | Bayer HealthCare AG | Diagnostics and therapeutics for diseases associated with kallikrein 7 (klk7) |
EP1994181A4 (en) | 2006-02-27 | 2010-05-19 | Univ Arizona | IDENTIFICATION AND USE OF NOVOPEPTIDES FOR THE TREATMENT OF CANCER |
GB0715750D0 (en) | 2007-08-13 | 2007-09-19 | Karus Therapeutics Ltd | Chemical compounds |
EP2183270B1 (en) | 2007-08-17 | 2014-12-17 | Novartis AG | Use of cyclic depsipeptides to inhibit kallikrein 7 |
DE102007052391A1 (de) | 2007-10-31 | 2009-05-07 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Mattwachs |
US20110112121A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-05-12 | Joerg Berghausen | Pharmaceutical Compositions and Solid Forms |
KR101004362B1 (ko) | 2010-03-19 | 2010-12-28 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 자가 면역 질환 예방 및 치료용 TNF-α와 TWEAK 이중 길항제 |
US20120064136A1 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-15 | Nanobio Corporation | Anti-aging and wrinkle treatment methods using nanoemulsion compositions |
WO2012035468A2 (en) | 2010-09-14 | 2012-03-22 | Trima - Israel Pharmaceutical Products Maabarot Ltd. | Foamable topical composition |
TR201905477T4 (tr) | 2011-01-24 | 2019-05-21 | Anterios Inc | Nano-parçacık bileşimler. |
SG10201804552WA (en) | 2011-01-24 | 2018-07-30 | Anterios Inc | Nanoparticle compositions, formulations thereof, and uses therefor |
US8614289B2 (en) | 2011-04-20 | 2013-12-24 | Novartis Ag | Processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
US8680054B2 (en) | 2011-04-20 | 2014-03-25 | Novartis Ag | Suspension type topical formulations comprising cyclic depsipeptide |
US9067978B2 (en) | 2012-10-09 | 2015-06-30 | Novartis Ag | Solution phase processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
US8987413B2 (en) | 2012-10-09 | 2015-03-24 | Novartis Ag | Aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
WO2015155676A1 (en) | 2014-04-08 | 2015-10-15 | Novartis Ag | Novel aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates |
-
2012
- 2012-04-18 US US13/449,937 patent/US8614289B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-04-18 AR ARP120101326A patent/AR086168A1/es unknown
- 2012-04-19 JP JP2014505772A patent/JP5951006B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-04-19 MX MX2013012188A patent/MX337526B/es active IP Right Grant
- 2012-04-19 TW TW101114027A patent/TW201249863A/zh unknown
- 2012-04-19 KR KR1020137030625A patent/KR101580729B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2012-04-19 EA EA201391554A patent/EA025546B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-04-19 CN CN201280019062.6A patent/CN103476789B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2012-04-19 EA EA201500734A patent/EA201500734A1/ru unknown
- 2012-04-19 EP EP12727933.9A patent/EP2699585A1/en not_active Withdrawn
- 2012-04-19 WO PCT/IB2012/051977 patent/WO2012143888A1/en active Application Filing
- 2012-04-19 AU AU2012245980A patent/AU2012245980B2/en not_active Ceased
- 2012-04-19 PE PE2013002370A patent/PE20141206A1/es not_active Application Discontinuation
- 2012-04-19 MA MA36321A patent/MA35034B1/fr unknown
- 2012-04-19 CA CA2833109A patent/CA2833109A1/en not_active Abandoned
- 2012-04-19 BR BR112013026660A patent/BR112013026660A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2012-04-19 SG SG2013070453A patent/SG193918A1/en unknown
- 2012-04-19 CN CN201510232322.3A patent/CN104804072A/zh active Pending
-
2013
- 2013-09-25 TN TNP2013000385A patent/TN2013000385A1/fr unknown
- 2013-10-03 IL IL228727A patent/IL228727A0/en unknown
- 2013-10-18 CL CL2013003037A patent/CL2013003037A1/es unknown
- 2013-10-18 GT GT201300256A patent/GT201300256A/es unknown
- 2013-10-24 CO CO13252979A patent/CO6801799A2/es unknown
- 2013-11-18 US US14/082,315 patent/US9278997B2/en active Active
-
2015
- 2015-03-18 CL CL2015000688A patent/CL2015000688A1/es unknown
-
2016
- 2016-03-07 JP JP2016043330A patent/JP2016164158A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010536731A (ja) * | 2007-08-17 | 2010-12-02 | ノバルティス アーゲー | 環状デプシペプチド類 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
JPN5014005890; TETRAHEDRON Vol. 61, 2005, pp.1459-1480 * |
JPN5014005891; TETRAHEDRON LETTERS Vol. 43, 2002, pp.8673-8677 * |
JPN5014005892; TETRAHEDRON LETTERS Vol. 42, 2001, pp.5903-5908 * |
JPN5014005894; JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY Vol. 48, 2005, pp.1330-1335 * |
JPN5014005895; TETRAHEDRON LETTERS Vol. 47, 2006, pp.8587-8590 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5951006B2 (ja) | 大環状デプシペプチド類の製造方法および新規中間体 | |
AU2013328284B2 (en) | Solution phase processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates | |
AU2013328285B2 (en) | Aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates | |
JP2023052381A (ja) | 液相ペプチド合成のための方法およびその保護戦略 | |
WO2015155676A1 (en) | Novel aldehyde acetal based processes for the manufacture of macrocyclic depsipeptides and new intermediates | |
Zhang | Synthesis of Triazole Bridged Vancomycin Mimics |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140110 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131211 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131211 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20140822 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20140902 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150224 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150522 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20151110 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160307 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20160315 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160524 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160607 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5951006 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |