JP2014502616A - 細菌由来の感染症を治療する抗細菌剤 - Google Patents

Abstract

本発明は、薬剤の分野、より詳細には院内感染及び薬剤耐性結核を含む細菌由来の感染症を治療する、炭水化物、タンパク質及び／又はポリペプチド（アルブミン、インターロイキン、インターフェロン、シグナルタンパク質など）から合成されるナノ構造イオン複合体の形態の抗細菌剤に関し、これは、免疫適格細胞の活性化を介してインビボで抗微生物効果を増強するために、電子供与体官能基を有する例えばＰｈｅ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｈｅなどの少なくとも１つの末端アミノ酸、ヨウ素、並びにアルカリ及びアルカリ土類元素ハロゲン化物を所定のイオン強度により４段階で含有し、抗細菌剤は、抗生物質耐性細菌を含む細菌の抗生物質に対する感受性を増加し、単球及びマクロファージ活性を増強し、院内感染及び薬剤耐性結核の抗生物質治療の有効性を増加し、また、抗ウイルス効果を有し、骨髄の造血機能を刺激し、抗腫瘍効果及び放射線防護特性を示す。許容濃度の成分によって、抗細菌剤を非薬剤（生物学的に活性な添加剤又は一般用医薬品）として使用することができる。抗細菌剤は、非経口、経口、外用又は他の投与に適した薬理学的形態で提案され、ナノ構造イオン複合体は、式：［｛（Ｌ_ｎ（ＭｅＩ_３）^＋）_ｙ［Ｍｅ（Ｌ_ｍ）Ｉ］^＋ _ｘ｝（Ｃｌ⁻）_{ｙ＋ｘ＋ｋ}］を有し、Ｍ＝３０〜３００ｋＤａである。

Description

本発明は、薬剤、すなわち医薬に関し、細菌由来の疾患を治療するため、とりわけ、微生物の薬剤耐性菌株により、並びに細菌及びウイルス（混合）感染により引き起こされる疾患の治療に使用することができる。

現在、病原性細菌を損傷する主な方法及び手段は、細菌、真菌及び原生動物などの感染性病原体の活性を抑制する全ての投薬と組み合わせた抗生物質である。

しかし、既知の群の抗生物質に対する感染性病原体の薬剤耐性が高まっているので、新たな抗微生物薬の開発における問題は、その重要性を失っていない。

したがって、例えば世界中で、薬剤耐性病原体が原因で結核の発症率が増加しており、死亡率の増加が観察されている。抗結核薬に対する耐性は、調査した３５の国及び地域の全てにおいて見出され、この問題が地球規模であることを示している。

抗結核薬に対する多重耐性は、現在知られている最も困難な形態の薬剤耐性である。ＷＨＯによると、９０年代初頭から地球上の異なる地域において、多剤耐性結核の幾つかの大流行が報告されている。

ヨウ素分子は、微生物の脂質二重細胞膜を容易に通過し、細胞内に侵入できることが知られている。ヨウ素化合物の抗微生物作用は、アミノ酸（リシン、ヒスチジン、アルギニンなど）のＮＨ_２基と、またヌクレオチド（アデニン、シトシン、グアニン）と相互作用して、Ｎヨウ素誘導体を形成するヨウ素（ヨウ素元素、次亜ヨウ素酸、ヨウ素カチオン）の能力に起因している。加えて、システインのＳＨ基の酸化も生じ、タンパク質合成の破壊をもたらす。ヨウ素チロシンのフェノール基との相互作用は、これらのアミノ酸における水素結合の破断をもたらす。不飽和脂肪酸の二重炭素結合に影響を及ぼすと、ヨウ素はそれによって脂質の性質を変える。

細胞膜を通って容易に侵入するヨウ素の能力は、主な発症が細胞内構造において生じる感染（ブルセラ病、クラミジオシス（clamidiosis）、肝炎など）においてその適用をより重要にする。

ヨウ素、ヨウ化カリウム又はナトリウム、合成水溶性ポリマー、多糖、単糖及びオリゴ糖などの天然ポリマーを以下の比率（ｇ／Ｌ）：
ヨウ素 ６〜１０
ヨウ化カリウム ９〜１５
合成水溶性ポリマー ２〜４
天然ポリマー（多糖）、単糖及びオリゴ糖 ８〜１２０
水 残部
で含有する、殺菌及び殺ウイルス活性を有する既知の薬剤ヨドミドール（Ｙｏｄｏｍｉｄｏｌ）が存在する（ＫＺ６７３０Ｂ、１９９８年１１月１６日）。この薬剤の欠点は、その相対的に高い毒性である。

ヨウ素、ヨウ化カリウム又はナトリウム、合成水溶性ポリマー、天然の単糖、オリゴ糖及び多糖と塩化リチウムの混合物を以下の成分比（ｇ／Ｌ）：
ヨウ素 ０．８〜２５
ヨウ化カリウム １．２〜３８
塩化リチウム ０．１〜２０
合成水溶性ポリマー ０．０１〜６
単糖、オリゴ糖及び多糖 ８〜４００
水 残部
で含有する、抗ウイルス活性を有する既知の殺ウイルス性医薬品が存在する（ＥＰ０９７８２８９Ａ１、２０００年９月２日）。

タンパク質及び／又はハロゲン化タンパク質のプール、炭水化物及び／又は炭水化物のハロゲン誘導体、合成水溶性ポリマー、塩化リチウム、ヨウ化カリウム又はナトリウム、ヨウ素、水又は生理食塩水を以下の比率（ｇ／Ｌ）：
タンパク質及び／又はハロゲン化タンパク質のプール ０．０１〜２００
炭水化物及び／又は炭水化物のハロゲン誘導体 ０．０１〜４５０
合成水溶性ポリマー ０．０１〜１００
塩化リチウム ０．０１〜２００
ヨウ化カリウム又はナトリウム ０．０１〜３００
ヨウ素 ０．０１〜２００
水又は生理食塩水 １Ｌになる量
で含有する、結核、ブルセラ病、ペスト、肝炎、ＨＩＶを含む単一菌及び混合感染の予防及び治療のための既知の殺菌及び殺ウイルス性医薬品が存在する（ＫＺ１５１１６Ａ、２００４年１２月１５日）。

殺菌及び殺ウイルス性医薬品は、単官能性及び多官能性リガンド（アニオン、タンパク質、炭水化物、合成水溶性ポリマー）及び酸（ヨウ素、アルカリ金属カチオン）により形成される複雑な物理化学系を表し、これは偽平衡状態にある。この系では、随伴する複合体形成、会合及び解離プロセスが生じる。酸塩基相互作用の一連のプロセス、それに関与する多官能性リガンド（タンパク質、炭水化物、水溶性合成ポリマー）の化学的性質、プロセスにおける異なる分子量のリガンド（例えば、単糖、オリゴ糖及び多糖）の存在は、系における構造形成をもたらし、したがってコロイド系の全ての特性を得る。

組成物における医薬ヨウ素の存在は、ヨウ素それ自体の殺菌及び殺ウイルス特性に起因してそれらの特性を増強するばかりでなく、それぞれ個別の各活性物質の相乗効果及び平衡の取れた濃度で作用剤中に一緒に存在する活性物質全ての相乗効果も確実にする。

この生成物は、ハロゲン化タンパク質及びハロゲン化炭水化物であるハロゲン誘導体化合物を含有する。

０．５〜３０重量％のヨウ素、０．２〜１４重量％の塩、酸又はそれらのブレンド形態のヨウ化物及び２〜８５重量％の、アルキルグルコースエーテル、アルドビオンアミド（aldobionamide）、グリシンアミド、グリセルアミド、グリセログルリポイド（glyceroglulipoid）、脂肪ポリヒドロキシ酸アミド、一般式：Ｒ_１Ｏ（Ｒ_２Ｏ）ｂ（Ｚ）ａ［式中、Ｒ_１は６〜３０個の炭素原子の一価有機ラジカルであり、Ｒ_２は２〜４個の炭素原子を有する二価アルキレンラジカルであり、Ｚは５〜６個の炭素原子を含有する糖誘導体であり、ｂは０〜１２の自然数であり、ａは１〜６の自然数である］のアルキルポリグルコシドを含有する糖類の群から選択される糖界面活性剤を含有するアルキルポリグリコシドの既知のヨウ素複合体が存在する（ＷＯ９６３９８３９Ａ１、１９９６年１２月１９日）。

ヨウ素分子とヨウ化カリウムの複合体形成反応を介して固定酵素を生成する既知の方法が存在し（ＲＵ２１５７４０５Ｃ２）、複合体形成反応の結果、結合ヨウ素を含有するタンパク質が生成され、溶液が固相状態になり、すなわち水不溶性複合体が形成される。固相状態は、数マイクロメートルから数十又は数百ミクロンのサイズ範囲の多分散粒子の形成により特徴付けられ、微生物基質の分子と相互作用することができるチモフォールの大きな総表面積を考慮すると、粒子は固定酵素の抗微生物作用を確実にする。複合体の一部であるヨウ素は、殺微生物効果を提供する。

少なくとも１つの消毒薬を既知の方法で得られる粒子形態の支持体と組み合わせて含有し、担体が、パルスレーザーを使用してポリマーで被覆された１〜３０ミクロンのサイズ範囲である少なくとも１つのリポソーム調製物、微小球試料、ナノ粒子調製物、大型多孔質粒子調製物又は分子調製物を含有する、ハロゲンを含む消毒剤を下気道に投与するための既知の薬剤が存在する（特許ＲＵ２２１２８８４Ｃ２）。

全ての上記の既知の特許において、著者たちは、所定の構造及び特性を有する複合化合物を合成する作業も、溶液から複合化合物を放出し、これらの組成及び物理化学特性を決定する作業も記載しておらず、殺生物特性を有する炭水化物及びタンパク質との複合ヨウ素化合物を、医薬品として使用することを困難にしている。更に、適切な投与形態を開発することは、物理的及び化学的特性、組成により特徴付けられる、抗細菌剤としての複合ヨウ素化合物の特性と品質の特定のセットがないと妨げられる。

近年、炭水化物とマグネシウムやカルシウムの塩及び他の複合体形成剤との複合化合物の構造の探求に専念した幾つかの研究が、科学文献に現れている（Ｏ．Ｎｉｍｚ，Ｋ．Ｇｅβｌｅｒ，Ｉ．Ｕｓｏｎ，Ｗ．Ｓａｅｎｇｅｒ／／Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２００１．Ｖ．３３６．Ｐ．１４１〜１５３．；Ｍ．Ｎｏｌｔｅｍｅｙｅｒ，Ｗ．Ｓａｅｎｇｅｒ／／ＪＡＣＳ １９８０．Ｖ．１０２：８．９．Ｐ．２７１０．；Ｍ．Ｎｏｌｔｅｍｅｙｅｒ，Ｗ．Ｓａｅｎｇｅｒ／／Ｎａｔｕｒｅ．１９７６．Ｖ．２５９．２６．Ｐ．６２９）。

組成にマグネシウム、カリウム、カルシウム、リチウムの組成イオン、すなわち金属塩を有するような整数の酵素の結晶構造、が確立されている。（Ｙ．Ｇｏｌｄｇｕｒ，Ｆ．Ｄｙｄａ，Ａ．Ｂ．Ｈｉｃｋｍａｎ，Ｔ．Ｍ．Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｒ．Ｃｒａｉｇｉｅ，Ｄ．Ｒ．Ｄａｖｉｅｓ／／Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃｉｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ １９９８．Ｖ．９５．Ｎｏ１６．Ｐ．９１５０〜９１５４．；Ｆ．Ｄｙｄａ，Ａ．Ｂ．Ｈｉｃｋｍａｎ，Ｔ．Ｍ．Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ａ．Ｅｎｇｅｌｍａｎ，Ｒ．Ｃｒａｉｇｉｅ，Ｄ．Ｒ．Ｄａｖｉｅｓ／／Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９４．Ｖ．２６６．Ｐ．１９８１〜１９８６）。

同時に、これらの化合物の作用機構の実現に適するように適応させたナノスケール構造を有し、したがって適応された殺生物特性を有するヨウ素配位化合物の意図的な合成を伴う研究がない。

したがって、本発明の目的は、院内感染性疾患及び薬剤耐性ＴＢを含む細菌由来の疾患の治療のために抗細菌剤（ＡＢＡ）を作り出すことである。

本発明の追加の目的は、細菌由来の感染症を治療する抗細菌剤及びＡＢＡに基づいた薬剤の調製方法を開発することである。

本発明の技術的な結果は、免疫適格細胞の活性化を介したインビボでのＡＢＡの効率の増加である。

技術的な結果は、開発されたＡＢＡを介して達成され、これはタンパク質及び／又は炭水化物、金属塩と、それらに挿入されたヨウ素から形成されるイオンナノ構造複合体（ＩＮＳＣ）を表し、抗微生物剤の規則正しい構造及び必要なイムノトロピック（immunotropic）作用を得るためには、複合体形成反応が４段階で実施され、第１は、炭水化物及びタンパク質と金属塩の相互作用であり、第２工程は、ヨウ素の必要量の５〜９５％を、複合体形成反応の第１段階で形成された複合体に特定のイオン強度で挿入することであり、第３段階は、電子供与官能基を有する少なくとも１つの鎖末端アミノ酸及び必要な免疫反応の原因となる特定の部位を含有するタンパク質を複合体形成反応に導入することであり、第４段階は、ヨウ素の残りの量を抗細菌剤に挿入することである。

加えて、本発明によると、弱い抗腫瘍活性、弱い放射線防護効果を有するという事実にもかかわらず、骨髄の造血機能を回復する独特の能力とともに、腫瘍の複合薬剤療法に伴う化学及び放射線療法の可能性のある有害作用を防止する大きな実用的な重要性がありうるＡＢＡが提案された。

別の技術的な結果は、ＡＢＡの一部であるタンパク質及び／又はポリペプチドが、免疫原活性を有し、電子供与官能基を有する少なくとも１つの末端アミノ酸を含有するという事実により達成され、これらは、ＡＢＡが体内に投与されると、疎水性及び電子供与官能基を有する鎖末端アミノ酸を介して免疫適格細胞のレセプターを刺激及び同時刺激する領域に固着し、これらのタンパク質の特定の部位は、防御の第一線及び第二線の免疫適格細胞の単球−マクロファージ及び細胞毒性Ｔリンパ球を活性化する。

更に、本発明は、クレームされたＡＢＡの医薬形態を含む。

特定の提案される用途に応じて、本発明の医薬組成物は、液剤、懸濁剤、非経口組成物、軟膏剤、クリーム剤、エアゾール剤、粉末剤、錠剤、カプセル剤又は許容される他の投与形態の剤形で調製することができ、これらは、特定の用量で投与され、適切に適用又は混合される。医薬製剤は、
ａ）潜在的な製剤では、充填剤、特に発熱物質不含の水、緩衝剤又は通常生理食塩水；
ｂ）軟膏剤、クリーム剤、エアゾール剤では、媒質、特に植物又は合成油、ラノリン、ペトロラタム又は高分子アルコール；
ｃ）錠剤又はカプセル剤では、希釈剤、特にラクトース、結合剤、潤滑物質（例えば、ステアリン酸）並びに分解生成物（例えば、トウモロコシデンプン）
を含むことができる。

本発明の全ての医薬製剤を、抗細菌剤（例えば、抗生物質）、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、免疫調節剤及び他の作用物質と組み合わせることができ、組み合わせた場合、これらがクレームされた医薬組成物と相乗効果を提供する又は医薬組成物に対して不応性であるとしても、組み合わせることにより治療スペクトルを広げる。

更に、本発明によると、ＡＢＡを、特定の条件下で観察に付される非薬用作用物質（ＢＡＡ、食品添加物、飼料添加剤、ローション、練り歯磨き粉、チューインガムなどのパーソナルケアプロダクト成分など）として使用することができる。そのような条件には、例えば、これらの成分のみであり、国際食品規格に規定された濃度のみでの組成物における使用が含まれる。

本発明の複合化合物に基づいた非薬用調製物は、免疫調節効果を有し、季節性インフルエンザ、ＡＲＶＩ、ヨウ素欠乏症などの感染症の防止、並びにアダプトゲン（adaptogen）に使用することができる。

本発明は、炭水化物及び／又はタンパク質の存在下、特定のイオン強度のアルカリ及びアルカリ土類金属の塩溶液において、ヨウ素挿入のプロセス中に複合体が固相に放出されるという、驚くべき事実に基づいている。

本発明の基礎にある別の驚くべき事実は、実験データから確立されるように、本発明が、特定の免疫機能を有する部位を含有するタンパク質を抗微生物剤組成物に導入できるということである。

クレームされた発明は、以下の図面により例示される。

調製物ＦＳ−１の異なる結晶構造の顕微鏡写真を表す。 調製物ＦＳ−１の異なる結晶構造の顕微鏡写真を表す。 調製物ＦＳ−１の異なる結晶構造の顕微鏡写真を表す。 調製物ＦＳ−１の異なる結晶構造の顕微鏡写真を表す。 イオン強度に対する三ヨウ化物イオンと炭水化物のカルシウム複合体の収率の依存性を示す。 イオン強度に対する三ヨウ化物イオンと炭水化物のマグネシウム複合体の収率の依存性を示す。 炭水化物−タンパク質−ＬｉＣｌ塩、ＭｇＣｌ_２塩の系における安定した配位化合物の形成を示す。 ヨウ素分子とハロゲン化リチウム、炭水化物及びタンパク質の側鎖アミノ酸残基との相互作用を例示する構造を示す。 ＡＢＡサブユニット形成のダイアグラムを表す。 図１０ａ−ｉは、実施例１〜９の化合物の顕微鏡写真を表す。 実施例５（ＦＳ−１）の化合物の顕微鏡写真を表す。 １）８００Ｒの照射線量、２）照射の３０分前のＨＲＰ経口投与（１．０ｍｌ）に対する８００Ｒの照射線量での照射後、３０日間にわたる対照群及び実験群におけるラットの生存率の動力学を示す。

発明の実施可能性をサポートするデータ
上記から続けると、本発明によると、抗細菌剤組成物における免疫原性タンパク質の特性の保存を確実にするため、調製方法には複合体形成の第３及び第４の段階が補足される。

本発明の文脈において、成分、これらの相互関係及びイオン強度間隔は、ＡＢＡ合成において必須の特徴である。

ＡＢＡ組成物及び構造を決定する全ての特質が、処方目標を達成するために必要であり、十分である。除外できるもの又は別のものに代えることができるものはなく、そうでなければ技術的な結果が得られない。ＡＢＡを形成する物質の定性的な組成及び成分の定量的な比率の両方、並びにイオン強度間隔の選択は、構成成分の組成に応じた、複合体形成の規則性及びＡＢＡ抗細菌活性を決定する数多くの実験データに基づいた。

物質の定性的組成は、抗細菌効果をもたらす生物学的有意性及び化学的特性に基づいて選択された。

本発明の著者によりリガンドとして選択された炭水化物は、極めて重要な部類の天然化合物である。生物学及び医学において、炭水化物の価値は、動物生体において指定されている支配的な役割及びそれらの機能の複雑さからなる。炭水化物は、高分子粒子の形態で大部分の生化学プロセスに関与するが、多くの体液は単糖及びオリゴ糖を含有する（Ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ／Ｅ．Ｈａｓｌａｍ編．Ｖ．５．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９）。

ヨウ素と炭水化物及び／又はタンパク質及び金属塩との複合化合物を表すＡＢＡの主な特徴は、末端アミノ酸の電子供与官能基と部位の特定のセットを有するタンパク質の存在である。

タンパク質は、ほぼ全ての生物学的プロセスにおいて主要な役割を果たし、細胞において生物学的反応の進路を決定し、物質の輸送及びこれらの蓄積などの他の多様な機能に関与する。

本発明は、低分子ペプチド及びこれらの構成モノマーも含む。

タンパク質の輸送の役割は極めて重要であり、それは、膜を通過する場合、タンパク質に結合している拡散分子が化学的に修飾されず、他の種類の分子と結合しないからである。仲介又は単純化された膜輸送プロセスは、飽和動態学（すなわち、輸送系は、輸送される溶質により飽和されうる）及び輸送された物質に対する特異性によって特徴付けられる。

仲介された輸送の可能性は、ヨウ素分子を含む特定の基質に可逆的に結合することができるタンパク質に起因する。これらの輸送タンパク質分子は、異なる名称：輸送系、輸送体、担体又は転移酵素を有する。

表１は、アルカリ及びアルカリ土類金属の塩により作り出された異なるイオン強度の溶液で炭水化物、タンパク質及びヨウ素から合成されたＡＢＡ組成物を示す。炭水化物：タンパク質（ポリペプチド）の比に応じた幾つかの化合物（抗細菌剤）の結晶構造が、光学及び電子写真で示される（図１〜４）。

写真から分かるように、ＡＢＡは、ナノ結晶（図１：１Ａは４００×の拡大、１Ｂは４００００×の拡大）、かなり大きな（０．１ｍｍ）微結晶（図２：２Ａは５０００×の拡大、２Ｂは１２０００×の拡大）、単結晶（図３）又は多様なサイズの結晶（図４）を形成することができる。

結晶のサイズは、他の条件が全て同じであるとすると（溶液のイオン強度）、タンパク質（ポリペプチド）に対する炭水化物の含有量が増加すると減少し、また、ヨウ素：炭水化物及び／又はタンパク質（ペプチド）の比が増加すると減少する。

クレームされた方法によると、ＡＢＡ合成の反応は、複合体形成反応と一致して進行する。第１段階では、炭水化物（Ｌ_１）、タンパク質（Ｌ_２）、ポリマー（Ｌ_３）並びにカルシウム及びマグネシウムカチオンを含有する塩の複合体の形成が生じる。

ヨウ素挿入のために調製された溶液では、ヨウ素とヨウ化カリウムの複合体形成が生じる。

上記の溶液を混合する際ヨウ素及び／又はポリヨウ化物イオンの挿入が生じ、すなわち、第１溶液及び第２溶液の両方において形成された複合体粒子の間で相互作用が生じる。このプロセスにおいて、供与体−受容体特性に従って、ＡＢＡ（複合体）を構成する物質の再分配が生じる。

反応（３）の結果により生成される三ヨウ化物イオンも、ヨウ素分子と同じように強力な複合体形成剤である。

ＡＢＡ産出量：

最終生成物の産出量は、反応の物理化学的パラメーター（表２、３）に応じて決まる。

予想外の事実は、反応媒質の特定のイオン強度でＡＢＡ産出量が１００％に近づくことであった。

推定平衡の計算の結果によると、ＡＢＡ産出量は、イオン強度が増加すると変化（増加）する（図５、６）。マグネシウムイオンを含有する複合体において観察されるイオン強度についてとりわけ有意な効果があり（図６）、これは、ピアソンによるより硬い酸としてのこのイオンの特性に起因しうる［Ｐｅａｒｓｏｎ Ｒ．Ｇ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ＡＣＳ，１９６３，８５，ｃｌ．３５３３．Ｐｅａｒｓｏｎ Ｒ．Ｇ．Ｊｏｕｒｎａｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，１９６８，４５，ｃｌ．６４３．Ｐｅａｒｓｏｎ Ｒ．Ｇ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，１９６８，ｃｌ．６５，Ｇｅｈｌｅｎ Ｈ．Ｚ．，Ｐｈｙｓｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９５４，２０３，１２５．Ｆｉｎｓｔｏｎ Ｈ．Ｚ．，Ｒｙｃｈｔｍａｎ Ａ．Ｃ．，Ａ ｎｅｗ ｖｉｅｗ ｏｆ ｃｕｒｒｅｎｔ ａｃｉｄ−ｂａｓｅ ｓｅｒｉｅｓ．Ｎ．Ｙ．，Ｗｉｌｅ，１９８２］。

更により驚くべきことは、遠心分離クロマトグラフィー及び／又は乾燥の方法を使用する抽出のプロセスにおいて、イオンポリマー複合体を表すＡＢＡ結晶が形成されることであり、その上単結晶の組成は十分に確定し、一定であり、このことは個別のＡＢＡ化合物の形成を示している。ＡＢＡ構造及びこの構造形成のための一連の作用は、本発明によってクレームされた抗細菌剤調製の方法によると、以下（図７）のように表すことができる。この図では、青色の球が炭素原子であり、暗青色が窒素原子であり、黄色が塩素原子であり、赤色が酸素原子であり、黒色がマグネシウム原子であり、褐色がリチウム原子である。構造体Ｉでは、ΔＥ＝−１０６．０１ｋｃａｌ／ｍｏｌであり、構造体ＩＩでは、ΔＥ＝−７９．１２ｋｃａｌ／ｍｏｌであり、構造体ＩＩＩでは、ΔＥ＝−８８．８６ｋｃａｌ／ｍｏｌである。

炭水化物−タンパク質−アルカリ又はアルカリ土類金属の塩系の複合ポリイオン化合物の形成は、量子化学計算、並びにＵＶ、フーリエ変換ＩＲ分光法、電子及び光学顕微鏡法、量子化学計算データを介して確認される。

最初の量子化学３−２１Ｇ^＊＊方法の枠組み内で、構造体Ｉ〜ＩＩＩの計算が実施された（図７）。計算では、炭水化物をエタノールで模擬し、タンパク質骨格をアミドで模擬し、最も供与体活性な酸残基の１つであるヒスチジンをイミダゾール（imidozol）で模擬した。ΔＥ複合体形成エネルギーを以下のように計算した：
ΔＥ＝Ｅ（複合体）−（Ｅ（ＬｉＣｌ）＋Ｅ（エタノール）＋Ｅ（アミド又はイミダゾール）

構造体Ｉでは、ΔＥ＝−１０６．０１ｋｃａｌ／ｍｏｌであり、構造体ＩＩでは、ΔＥ＝−７９．１２ｋｃａｌ／ｍｏｌであり、構造体ＩＩＩでは、ΔＥ＝−８８．８６ｋｃａｌ／ｍｏｌである。計算は、タンパク質及び炭水化物の供与体活性基によるＬｉＣｌ塩、ＭｇＣｌ_２塩の配位が、エネルギー的に好ましいことを示した。

系へのヨウ素分子の挿入では、複合体ＩＶ〜ＶＩＩが形成され、ここでヨウ素分子は、タンパク質及びハロゲン化リチウムにより配位され、ハロゲン化リチウムは炭水化物により配位される。

ヨウ素分子とハロゲン化リチウム、炭水化物及びタンパク質の側鎖アミノ酸残基との複合体の安定性の計算は、系へのヨウ素分子挿入のプロセスにおいて、複合体が形成される（ＩＶ〜ＶＩＩ 図８）ことを示唆し、ここでヨウ素分子はタンパク質により配位され、ハロゲン化リチウム及びハロゲン化リチウムは炭水化物により配位される。

表４は、複合体の安定化エネルギーのための配位結合の長さ及びΔＥを示す。

ΔＥは、以下のように計算される：
ΔＥ＝Ｅ_１（複合体）−（Ｅ_２＋Ｅ_３） （９）
ここで、Ｅ_１は総複合体エネルギーであり、Ｅ_２は総ＬｉＣｌＯＨＣ_２Ｈ_５エネルギーであり、Ｅ_３は、アミノ酸残基とのＩ_２複合体の総エネルギーである。

表４から分かるように、最も安定した複合体は、アルギニンの参加により形成され（構造体ＶＩＩ）、この場合、Ｉ−Ｉ結合は破断されており、そのような複合体では、ヨウ素分子の特性は保存されない。ヨウ素分子とアルギニンの複合体（−１８．１７ｋＪ／ｍｏｌ）と、アデノシンの複合体（−１０．９３ｋｃａｌ／ｍｏｌ）及びグアニンの複合体（−１１．５０ｋＪ／ｍｏｌ）との安定化エネルギーの比較は、アルギニンがＡＢＡ組成物に含まれる場合、Ｉ_２分子が製剤の構造にそのまま残存して、ＤＮＡヌクレオチドと複合体を形成しないことを示唆している。

複合体Ｉ〜ＩＩＩでは、Ｉ−Ｉ結合は破断せずに弱まるだけである。アルギニンに次いで最も安定した複合体は、タンパク質アミドフラグメントのカルボニル基の参加により得られる。アミドフラグメントは、ポリペプチド骨格の一部であり、アスパラギン及びグルタミンのアミノ酸残基の一部である。

最終生成物の産出量は、反応の物理化学的パラメーターΚ_ｒｅｖ、化学量論係数ｎ及び試薬の濃度によって決まる。

ＵＶ、フーリエ変換ＩＲ分光法、電子及び光学顕微鏡法、量子化学計算のデータに基づいて、本発明によりクレームされたＡＢＡ調製方法によるＡＢＡの構造及びこの構造の形成における一連の作用を、以下（図９）のように概略的に表すことができる。

ＡＢＡサブユニット（分子）の形成は、２８６〜２８６０ｋｇ／ｃｍ^２の圧力に相当する０．０１５から１０．２までの範囲のイオン強度で影響を受けた後に生じる。そのような圧力（イオン強度）の影響を受けた後、炭水化物及びタンパク質の巨大分子は、複合体形成に関与しない末端アミノ酸トリプレットがコアタンパク質及び／又はポリペプチド骨格鎖から外側に向かって配向されるように詰め込まれ、電子供与体官能基を含有する鎖末端アミノ酸を介して細胞膜に抗細菌剤を固着させることを実施し、このことは、下記に提示されているＡＢＡイムノトロピック作用についてのデータからまさに明白である。

クレームされたＡＢＡの調製方法は、以下の通りである：
炭水化物試料を、水、ジオキサン他などの適切な溶媒に溶解する。この溶液において、複合化合物を得るために、金属塩及び塩化ナトリウムの特定の試料を加えて、適切なイオン強度の溶液を生じる（生成物Ａ）。

タンパク質試料を、水、ジオキサン他などの適切な溶媒に溶解する。この溶液において、複合化合物を得るために、金属塩及び塩化ナトリウムの特定の試料を加えて、適切なイオン強度の溶液を生じる（生成物Ｂ）。

結晶性ヨウ素又はヨウ素及びヨウ化カリウムの試料を、クロロホルム、ヘキサン他などの適切な溶媒に溶解し、溶液を、ヨウ素が完全に溶解するまで撹拌する（生成物Ｃ）。

次に生成物Ａ及びＢの混合物に、７０％の生成物Ｃを、撹拌しながら少量ずつ加える。反応混合物を４２÷４３℃で１時間撹拌した後、電子供与体官能基を有する少なくとも１つの末端アミノ酸を含有する特定のイムノトロピック機能のタンパク質を溶液に加え、最終３０％ヨウ素挿入を、残りの３０％の生成物Ｃの少量ずつの添加により実施する。得られる抗細菌剤（ＡＢＡ）（ヨウ素と炭水化物及び／又はタンパク質及び金属塩との複合化合物）を、適切な方法を使用して抽出し、乾燥する。この抗細菌剤に基づいた薬剤は、既知の方法を使用して、経口投与用の液剤、非経口使用の液剤、錠剤及びカプセル剤の剤形で調製した。

抗細菌剤の分析は、色彩標示、電位差滴定（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ Ｍｅｔｅｒ ＰＰ−５０）、キャピラリー電気泳動（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＣＥ３Ｄ，ＵＳＡ）、フーリエ変換による振動（ＩＫ）分光法（Ｔｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｎｉｃｏｌｅｔ ６７００）、紫外及び可視スペクトルでの電子顕微鏡法（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌａｍｂｄａ ３５）により実施した。

複合化合物の顕微鏡法は、走査電子顕微鏡Ｑｕａｎｔａ ２００ｉ ３Ｄ（ＦＥＩ Ｃｏｍｐａｎｙ，ＵＳＡ）により実施した。

生成物の細胞毒性は、３７℃で５％ＣＯ_２を含有する雰囲気下でインキュベートした９６ウエルプレートにおいて、マイクロメソッドによって、単層継代接種細胞培養物ＲＤ、ＭＤＣＫ、ＭＲＣ−５、懸濁培養物のＭＴ−２及びＨ９で顕微鏡法により、ＭＴＴ試験を使用してインビトロで決定した（表５）。

ＭＲＳＡ及びＭＳＳＡの臨床分離菌、並びに黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣＣ４３３００及び黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ２９２１３の参考菌株に対するＡＢＡの最小阻止濃度（ＭＩＣ）の決定は、培養培地において段階希釈法により実施した［Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｄｏｃｕｍｅｎｔ Ｍ７−Ａ７．好気的に増殖する細菌における希釈抗微生物剤感受性試験の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａ ｔｈａｔ ｇｒｏｗ ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ）；Ａｐｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄ−７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗａｙｎｅ，Ｐａ：Ｃｌｉｎｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，２００６］（表６）。

ＭＲＳＡ及びＭＳＳＡの臨床分離菌、並びに黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣＣ４３３００及び黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ２９２１３の参考菌株に対する、抗生物質とのＡＢＡの相乗作用の研究は、チェッカーボード（Checkerboard）法により実施した［Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓ Ｇ及びＭｏｅｌｌｅｒｉｎｇ Ｒ．抗微生物剤の組合せ（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ）．Ｉｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９６，４ｒｄ ｅｄｎ（Ｌｏｒｉａｎ，Ｖ．，Ｅｄ．），Ｐｃｌ．３３１〜３９６．Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｃｏ．，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，ＵＳＡ］。

時間−殺菌（Time-Kill）法による相乗作用の決定は、ＭＲＳＡ ＡＴＣＣ４３３００の対照菌株に対して実施した［Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，Ｄｏｃｕｍｅｎｔ Ｍ２６−Ａ．抗微生物剤の殺菌活性を決定する方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ）；Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ Ｗａｙｎｅ，Ｐａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，１９９９］。

ＡＢＡ ＦＳ−１の抗マイコバクテリア効果は、薬剤を含有しない培地及び０．１μｇ／ｍｌの濃度の第一選択薬剤であるイソニアジドを含有する培地における菌株の増殖と比較した、異なる濃度の生成物の存在下での濃縮液体培地Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ ７Ｈ９における結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）Ｈ３７Ｒｖ、結核菌ＭＳ−１１５及びウシ型結核菌（Ｍ．ｂｏｖｉｓ Ｂｏｖｉｎｕｓ）のマイコバクテリア菌株の増殖動力学に基づいて研究した。試験は３回繰り返した。増殖検出は、特別のＭＧＩＴ管中のＢａｃｔｅｃ ＭＧＩＴ ９６０（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ，ＵＳＡ）の培養物で自動化増殖記録系を使用して実施した。マイコバクテリア培養物の増殖検出は、Ｅｐｉｃｅｎｔｅｒソフトウエア（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ，ＵＳＡ）を使用して毎時実施した。

実施例５（ＦＳ−１）においてＡＢＡから作製した生成物の抗結核効果を研究するため、雌の白モルモットのガス産生性感染モデルを使用した。接種は、肺１つあたり１５０ＣＦＵの結核菌Ｈ３７Ｒｖの用量でエアゾールチャンバ「ＧｌａｓＣｏｌ」において実施した。

ＦＳ−１の抗結核効果を研究するため、Ｄｕｎｋｉｎ Ｈａｒｔｌｅｙ系モルモットを使用した。、動物１匹あたり１ｍｌ中に約３０７〜６９２個の結核菌Ｈ_３７Ｒ_ｖ細菌体を含有する懸濁剤０．５ｍｌによって筋肉内接種した。

インフルエンザウイルスＡ／ＦＰＶ／Ｗａｙｂｒｉｇｅ／７８／Ｈ７Ｎ７及び単純ヘルペスウイルス菌株「Ｖｉｃｔｏｒｙ」に対するインビトロでのＡＢＡ抗ウイルス作用の決定は、継代接種したＭＤＣＫ及びＲＤ細胞培養物のマイクロメソッドを使用して実施した。物質を、最大許容濃度（ＭＴＣ）の１／２、１／４、１／８、１／１６に等しい濃度で加えた。

ヒト免疫不全ウイルスＨＩＶ−１（ＬＡＩ）に対するＦＳ−１抗ウイルス作用の研究は、参照物質としてアジドチミジンを用いて、細胞培養物ＭＴ−２（ＨＴＬＶ−１ウイルスで形質転換されたヒトＴリンパ芽球様細胞）において実施した。

ウイルス含有材料の供給源は、ヒト免疫不全ウイルスＨＩＶ−１菌株（ＬＡＩ）で慢性的に感染させたＮ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩＢ系細胞の培養液であった。

Ａｍｅｓ試験におけるＦＳ−１の突然変異誘発活性の評価は、代謝活性化を有する及び代謝活性化を有さないサルモネラ・チフィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｈｙｐｈｙｍｕｒｉｕｍ）の４つの突然変異誘発性（ヒスチジンの栄養要求）菌株：ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１０２及びＴＡ１５３５で実施した。

コメットアッセイにおけるＦＳ−１のＤＮＡ損傷活性の研究は、マウスリンパ腫細胞系Ｌ５１７８Ｙ及びヒト肝細胞癌細胞系ＨｅｐＧ２においてインビトロで実施した。

ＡＢＡの細胞遺伝学的活性の研究は、哺乳類の骨髄白血球の染色体異常を考慮して、マウスにおいてインビボで実施した。

ＡＢＡの細胞遺伝学的活性の研究は、マウスの骨髄細胞の多染性及び正染性赤血球において小核試験を使用してインビボで実施した。

ＦＳ−１を投与したときの哺乳類における精子の優位致死突然変異の研究を、マウスにおいてインビボで実施した。

多剤耐性（ＭＤＲ）結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の博物館及び臨床分離菌を含む病原性微生物に対するＡＢＡの有効性を例示する本発明の記載に提示されている例の大部分は、実施例５（ＦＳ−１）のＡＢＡに基づいた薬剤に属するが、これらに限定されない。

薬剤のＡＢＡ ＦＳ−１の放射線防護特性を研究する実験は、体重１９０〜２００ｇの白色ラット及び体重２２〜２５ｇの白色マウスで実施した。照射実験では、動物を、８００Ｒ（ＬＤ５０に近い放射線量）の線量で治療用Ｘ線装置ＲＵＭ−１７（１８０ｋＶ、１０ｍＡ、フィルター０．５ｍｍ Ｃｕ＋１．０ Ａｌ、焦点距離−４０ｃｍ、放射線量率−１７８Ｒ／分）の単一で均一の放射線に曝露した。

ＡＢＡ ＦＳ−１による骨髄抑制の誘導は、［Ｇａｌｏｙａｎ Ａ．Ａ．，Ｋｏｒｏｃｈｋｉｎ Ｌ．Ｉ．，Ｒｙｂａｌｋｉｎａ Ｅ．Ｊ．，Ｐａｖｌｏｖａ Ｇ．Ｖ．，Ｓａｂｕｒｉｎａ Ｉ．Ｎ．，Ｚａｒａｉｓｋｉ Ｅ．Ｉ．，Ｇａｌｏｙａｎ Ｎ．Ａ．，Ｄａｖｔｙａｎ Ｔ．Ｋ．，Ｂｅｚｉｒｇａｎｙａｎ Ｋ．Ｂ．，Ｒｅｖｉｓｈｃｈｉｎ Ａ．Ｖ．視床下部プロリン豊富ポリペプチドは骨髄コロニー形成細胞繁殖及び間質前駆細胞分化を増強する（Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ ｐｒｏｌｉｎｅ−ｒｉｃｈ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｃｏｌｏｎｙ−ｆｏｒｍｉｎｇ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）／／Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．−２００８．−Ｖｏｌ．１７．−Ｐ．１０６１〜１０６６］の方法により実施した。

動物の末梢血及び骨髄の試料採取は、［Ｂｅｚｉｒｇａｎｙａｎ ＫＢ，Ｄａｖｔｙａｎ ＴＫ，Ｇａｌｏｙａｎ ＡＡ 視床下部プロリン豊富ポリペプチドは造血を調節する（Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ ｐｒｏｌｉｎｅ ｒｉｃｈ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ）／／Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．−２０１０．−Ｖｏｌ．３５．−ＣＬ．９１７〜９２４．Ｇｅｒｓｈａｎｏｖｉｃｈ Ｍ．Ｌ．，Ｐａｉｋｉｎ Ｍ．Ｄ．悪性疾患の対症治療（Ｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ）．２^ｎｄ ｅｄ．−Ｍｏｓｃｏｗ：Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９８６．−２８５ｐ．］の方法により実施した。

骨髄抑制の評価は、自動化血液学分析器Ｃｅｌｌｙ ｖ２．２０、Ｈｙｃｅｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓを使用して末梢血における白血球、リンパ球及び単球の絶対的及び相対的含有量をカウントすることにより実施した。

骨髄の造血機能の回復は、顆粒球−単球コロニー形成（ＣＦＵ−ＧＭ）前駆骨髄細胞の数を決定することにより、クローン原性試験［Ｂｅｚｉｒｇａｎｙａｎ Ｋ．Ｂ．，Ｄａｖｔｙａｎ Ｔ．Ｋ．，Ｇａｌｏｙａｎ Ａ．Ａ．視床下部プロリン豊富ポリペプチドは造血を調節する（Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ ｐｒｏｌｉｎｅ ｒｉｃｈ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ）／／Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．−２０１０．−Ｖｏｌ．３５．−ＣＬ．９１７〜９２４］を使用して推定した。この目的のために、骨髄細胞は、メチルセルロース及び増殖因子の前駆細胞（幹細胞因子、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＬ−３）を含有する培地Ｍｅｔｈｏｃｕｌｔ（商標）ＧＦ Ｒ３７７４、ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ（カタログ番号０３７７４）で培養した。

実施例１ ＦＳ−１．１
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。１３０ｇの炭水化物を５００ｍｌの水に５０℃で溶解する。更に、１００ｍｌの水に溶解した３．０ｇの塩化ナトリウム及び１．９８ｍｇの塩化カルシウムを加える。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

５．０ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に３．９６ｇの塩化リチウム、８．４ｇの塩化マグネシウム及び２．０ｇの塩化ナトリウムを加える（生成物Ｂ）。１３５ｍｌの得られた溶液を反応器に注ぐ。反応体混合物を２０分間撹拌し、その後、溶液温度を２５℃に低減する。

０．８２ｇのＩ_２及びи １．２ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する（生成物Ｂ）。７０ｍｌの得られた溶液を少量ずつ反応器に注ぐ。ヨウ素挿入を２５℃で２時間実施し、その後、残りの１５ｍｌの生成物Ｂを加える。１時間後、別の３０ｍｌの生成物Ｂを少量ずつ反応器に加え、ヨウ素挿入は２時間以内に完了する。

溶液のイオン強度は１３．６である。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法、例えば「Ｋｒｏｍａｔｏｎ」ＦＣＰＣ（Ｆａｓｔ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）による遠心分離クロマトグラフィー法の使用によって反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ａ））。
分析結果：

［５２８０Ｌ_１・１．５Ｌ_２・３３Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例２ ＦＳ−１．２
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。１０８．３ｇのデキストランを５００ｍｌの水に４５℃で溶解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１５０ｍｌの水に溶解した２．５ｇのＰＶＡ、１００ｍｌの水に溶解した４．０ｇの塩化ナトリウム及び１．６５ｇの塩化カルシウムを加える。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

４．１７ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に３．３ｇの塩化リチウム、７．０ｇの塩化マグネシウム及び０．１７ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を、上記に特定された生成物Ａの温度に達したときに反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する（生成物Ｂ）。

２．０ｇのＩ_２及び３．０ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素挿入を２５℃で４時間実施する。

溶液のイオン強度は１３．２である。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｂ））。
分析結果：

［３８Ｌ_１・１．５Ｌ_２・９７Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例３ ＦＳ−１．３
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。７２．０ｇの炭水化物を６００ｍｌの水に６０℃で加水分解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１００ｍｌの水に溶解した１．７ｇのＰＶＡ、１００ｍｌの水に溶解した２．８ｇの塩化ナトリウム及び１．１ｇの塩化カルシウムを注ぐ。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

２．８ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に２．２ｇの塩化リチウム、４．６６ｇの塩化マグネシウム及び０．８ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を、上記に特定された生成物Ａの温度に達したときに反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する（生成物Ｂ）。

溶液のイオン強度は１０．８である。

４．１ｇのＩ_２及び６．０ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素挿入を２５℃で４時間実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｃ））。
分析結果：

［６１１Ｌ_１・２４Ｌ_２・２９４Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例４ ＦＳ−１．４
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。７２．０ｇの炭水化物を５５０ｍｌの水に１００℃で加水分解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、２５０ｍｌの水に溶解した１．７ｇのＰＶＡを注ぐ（生成物Ａ）。混合物を２０分間十分に撹拌し、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する。

４．１ｇのＩ_２及び６．０ｇのヨウ化カリウムを２００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素挿入を２５℃で４時間実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｄ））。

溶液のイオン強度は３．０２である。
分析結果：

［３７Ｌ_１・２９４Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例５ ＦＳ−１
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。アミラーゼとアミロペクチンの１：４の比の１３０ｇの混合物を、５００ｍｌの水に４３℃で溶解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１５０ｍｌの水に溶解した３．０ｇのＰＶＡ、１００ｍｌの水に溶解した４．５ｇの塩化ナトリウム及び２．０ｇの塩化カルシウムを注ぐ（生成物Ａ）。

５．０ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に４．０ｇの塩化リチウム、８．４ｇの塩化マグネシウム及び０．５ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する（生成物Ｂ）。

８．２ｇのＩ_２及び１２．１ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素の挿入を、前記の例に記載されたように２段階で実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１１）。

溶液のイオン強度は２０．６０である。
分析結果：

［３８Ｌ_１・２Ｌ_２・３３３Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例６ ＦＳ−１．５
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。２４．１ｇの炭水化物を、特定のモル重量に達するまで５００ｍｌの水に８０℃で加水分解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１５０ｍｌの水に溶解した２．８ｇのＰＶＡを注ぐ。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

３４．０ｇのＩ_２及び５０．５ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｃ）。ヨウ素の挿入を、２５℃で４時間かけて２段階で実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｄ））。

溶液のイオン強度は２５．３である。
分析結果：

［８Ｌ_１・１４８８Ｉ_２］・Ｌ_３

実施例７ ＦＳ−１．６
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。２４．１ｇの炭水化物を、特定のモル重量に達するまで５００ｍｌの水に１００℃で加水分解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１５０ｍｌの水に溶解した２．８ｇのＰＶＡ、１００ｍｌの水に溶解した０．８ｇの塩化ナトリウム及び０．３７ｇの塩化カルシウムを注ぐ。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

０．９３ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に０．７３ｇの塩化リチウム、１．５５ｇの塩化マグネシウム及び０．１３ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を、上記に特定された必要な生成物Ａの温度に達した後に反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し（生成物Ｂ）、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する。

３４．０ｇのＩ_２及び５０．５ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｃ）。ヨウ素の挿入を、２５℃で４時間かけて２段階で実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｅ））。

溶液のイオン強度は２７．９である。
分析結果：

［２６Ｌ_１・Ｌ_２・４９７０Ｉ_２］・３Ｌ_３

実施例８ ＦＳ−１．７
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。１３０．０ｇのデキストリン及び３．０ｇのＰＶＡを５００ｍｌの水に５０℃で溶解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１００ｍｌの水に溶解した４．０ｇの塩化ナトリウム及び２．０ｇの塩化カルシウムを注ぐ。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する（生成物Ａ）。

５．０ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に４．０ｇの塩化リチウム、８．４ｇの塩化マグネシウム及び１．０ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を、上記に特定された必要な生成物Ａの温度に達した後に反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し（生成物Ｂ）、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する。

８．２ｇのＩ_２及び１２．１ｇのヨウ化カリウムを１００ｍｌの水に溶解する。７０ｍｌの得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素の挿入を、２５℃で４時間かけて２段階で実施する。

０．６ｇのＩＬ−２を１５０ｍｌの水に溶解し、反応器にゆっくりと加える。ＩＬ−２の投入の３０分後、２０ｍｌの生成物Ｂを反応器に加える。得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｆ））。

溶液のイオン強度は２０．６０である。
分析結果：

［７９Ｌ_１・３Ｌ_２・Ｉｌ−２・６８４Ｉ_２］・２Ｌ_３

実施例９ ＦＳ−１．８
ＡＢＡ合成を、実験室用反応器Ｄ−５５１２２ Ｍａｉｎｚ、ＲｕｈｒｇｅｆａＢ ２Ｌ型、ＱＶＦ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＧＭＢＨにおいて一定の撹拌の後に実施する。１３．１ｇの炭水化物を１００ｍｌの水に１３０℃で加水分解する。温度を、サーモスタット「ＨＵＢＥＲ」−Ｍｉｎｉｓｔａｔ ２３０ ＣＣ２の使用により維持する。更に、１５０ｍｌの水に溶解した３．０ｇのＰＶＡ、１００ｍｌの水に溶解した０．３ｇの塩化ナトリウム及び０．２ｇの塩化カルシウムを注ぐ（生成物Ａ）。混合物を十分に撹拌し、４３℃に冷却する。

０．５１ｇのアルブミンを１５０ｍｌの水に溶解し、次に０．４ｇの塩化リチウム、０．８４ｇの塩化マグネシウム及び０．２ｇの塩化ナトリウムを加える。得られた溶液を、上記に特定された必要な生成物Ａの温度に達した後に反応器に移す。混合物を２０分間撹拌し（生成物Ｂ）、その後、反応領域の温度を２５℃に低減する。

７４．５ｇのＩ_２及び１１０．０ｇのヨウ化カリウムを５００ｍｌの水に溶解する。得られた溶液を少量ずつ複合化合物溶液に注ぐ（生成物Ｂ）。ヨウ素の挿入を、２５℃で４時間かけて２段階で実施する。

得られたイオンナノ構造ＡＢＡ複合体を、適切な方法の使用により反応媒質から抽出し、乾燥する（図１０（ｇ））。

溶液のイオン強度は５６．３である。
分析結果：

［２５Ｌ_１・Ｌ_２・１９５７５Ｉ_２］・７Ｌ_３

生物学的活性試験において、ＡＢＡ ＦＳ−１はＭＲＳＡ及びＭＳＳＡの臨床分離菌及び対照菌株の両方に対してインビトロで活性があることが確立された。抗微生物剤のＭＩＣは、０．９３８ｍｇ／ｍｌから０．２３４ｍｇ／ｍｌに変わった。

オキサシリンとの相乗作用についての試験は、両方の薬剤のＭＩＣが減少することを示している。低下は、オキサシリンでは２５６から６４μｇ／ｍｌであり、ＡＬＡ ＦＳ−１では０．２３４から０．１１７μｇ／ｍｌであった。この試験のＦＩＣ指数は０．７５であり、これは試験薬剤間の部分的な相乗作用と考慮することができる。

セファマンドールとの相乗作用についての試験は、両方の薬剤のＭＩＣが減少することを示している。低減範囲は、セファマンドールでは６４から８μｇ／ｍｌであり、ＡＢＡ ＦＳ−１では０．４６９μｇ／ｍｌから０．２３４μｇ／ｍｌであった。この試験のＦＩＣ指数は０．６２であり、これは、これらの抗生物質の相互作用が部分的な相乗作用であることを決定している。

リンコマイシンとの相乗作用についての試験は、両方の薬剤のＭＩＣが減少することを示している。低減範囲は、リンコマイシンでは６４μｇ／ｍｌから８μｇ／ｍｌであり、ＡＢＡ ＦＳ−１では０．２３４ｍｇ／ｍｌから０．１１７ｍｇ／ｍｌであった。この試験のＦＩＣ指数は０．６２５であり、これは、これらの抗生物質の相互作用が部分的な相乗作用であることを決定している。

実施例１〜９のＡＢＡ（ＦＳ−１．１〜ＦＳ−１．８）は、異なる部類の病原性微生物に対して大きな又は小さな殺菌活性を有する（表６）。表６から分かるように、結核菌に対して最も許容性及び効果があるものは、実施例５のＡＢＡ（ＦＳ−１）である。

多剤耐性を有する結核菌Ｈ３７Ｒｖ、結核菌ＭＳ−１１５、及びウシ型結核菌に対するＦＳ−１の抗マイコバクテリア作用を研究した結果、１：１２．５、１：２５及び１：５０の希釈の薬剤濃度で、マイコバクテリアの生殖の完全な抑制が記録期間の全体にわたって観察されたことが確立された。

ＦＳ−１の殺菌活性は、Ｌｅｖｅｎｓｔｅｉｎ−Ｊｅｎｓｅｎ培地へ続いて継代するＳｈｋｏｌｎｉｋｏｖａ液体培地において、二重段階希釈の微生物学的な方法を使用してインビトロで評価した。マイコバクテリアの野外菌株における１．７５０〜０．０４３７ｍｇ／ｍｌの濃度範囲でのＦＳ−１のインビトロ殺菌活性では、薬剤耐性臨床分離菌及び結核菌Ｎ３７Ｒｖが確立されている。ＦＳ−１の静菌効果は、０．０２１８〜０．０１０９ｍｇ／ｍｌの濃度で観察される。

博物館菌株の結核菌Ｎ３７Ｒｖ及び８個の多剤耐性菌株に対して、Ｌｅｖｅｎｓｔｅｉｎ−Ｊｅｎｓｅｎ培地へ続いて継代する、抗ＴＢ薬Ｉ型と組み合わせた濃度０．０４３７ｍｇ／ｍｌのＦＳ−１のインビトロでの殺菌活性を評価した。試験は、多様な濃度のＩ型抗ＴＢ薬によって、博物館感受性及び多剤耐性菌株を同定した。結果を表７に提示する。

表７から分かるように、ＦＳ−１と異なる濃度の抗ＴＢ薬とを組み合わせた作用の後、結核菌の多剤耐性菌株の増殖は、実験試験管では検出されず、すなわち、菌株は、感受性がＦＳ−１を有するものと有さないものの両方で観察された博物館菌株と比較して、Ｉ型抗ＴＢ薬の全ての濃度に対して感受性があった。

感染したモルモットにＦＳ−１を５ｍｇ／ｋｇの用量で投与すると、動物の対照群と比較して、感染動物の肺から平板培養したマイコバクテリアの数が低減したことが、インビボで確立された。ＡＢＡ ＦＳ−１は、モルモットの実験的結核の臨床経過に顕著な抗炎症効果を有し、肺実質の通風を２倍に増加する。

治療開始後の２１日目での０．３ｍｌ／ｋｇの用量の抗ＴＢ薬とＦＳ−１の併用は、感染性菌株の耐性の種類にかかわりなく、動物の臓器における結核変化の完全な消滅をもたらすことが、インビボで確立された。

表８に提示された結果によると、第３群では、観察された肺の結核病変の数が減少し、治療開始後の３５日目には完全に消滅したことが明白である。第４群では、肺及び肝臓における結核病変の消滅は、治療開始後の２８日目に記録された。第５群では、肺及び肝臓における結核病変の消滅は、治療開始後の２１日目に記録された。

抗ＴＢ薬に対して耐性のマイコバクテリアの多剤耐性菌株に感染した動物の群では、以下の結果が観察された：第６群では、結核感染の進行性臨床経過があり、第７群では、肺及び肝臓における結核病変の消滅が治療開始後の３５日目に記録され、第８群では、肺及び肝臓における結核病変の消滅が治療開始後の２１日目に記録された。

結核菌Ｈ３７Ｒｖの菌株に感染した動物の群とマイコバクテリアの多剤耐性菌株に感染した群の両方において、抗ＴＢ薬と組み合わせ実施例５（ＦＳ−１）の薬剤は、結核の臨床経過に対して治療効果を有する。結核で典型的な病理学的変化は、２１日及び２８日後にそれぞれ消滅する（第４群及び第７群）。

なにも治療を受けなかった対照群の動物では、結核のプロセスは、全体的な内臓傷害を有する全身性の形態に進行した（第１群及び第２群）。

複合化合物作用の機構を説明するために提供されるあらゆる機構が、限定的であると考慮されるべきではないが、ＡＢＡの抗微生物活性は、ａ）生物学的に活性な炭水化物及びペプチドの構造、ｂ）細菌細胞の膜を通過した活性物質の拡散における、細胞膜及び細胞構造の両方に対するヨウ素分子の酸化作用、ｃ）微生物のＤＮＡのハロゲン化、ｄ）免疫適格細胞に対する複合化合物の影響の経過でのインターフェロン誘導、ｅ）単球−マクロファージ及び細胞毒性Ｔリンパ球の活性化に関連する可能性が最も高い。

インビトロでの実施例１〜９において研究されたＡＢＡは、インフルエンザ、ヘルペス及びＨＩＶ−１免疫不全ウイルスに対するより大きな又はより小さな殺ウイルス活性を有する（表９〜１３）。

継代接種細胞培養物に対するインビトロでのＦＳ−１抗ウイルス作用試験では、ＦＳ−１の抗ＨＩＶ活性が、ＨＩＶ−１の実験室菌株（ＬＡＩ）に対する細胞培養物において同定された。薬剤誘導作用の後のＨＩＶウイルスの感染力指数−ｐ２４含有量及びリバーストランスクリプターゼ−の低下は、ヒト免疫不全ウイルスに対する薬剤の殺ウイルス（virusocidal）作用を示す。０．１８８ｍｇ／ｍｌ及び０．０９４ｍｇ／ｍｌの用量でのＦＳ−１又は０．０１ｍｇ／ｍｌの用量でのアジドチミジンの適用は、プラセボと比較して死滅に有意な減少をもたらし、結果的にヒト免疫不全ウイルスのｐ２４タンパク質（ウイルスの感染力指数）を６０分の１に減少した（表１２）。

０．０９４ｍｇ／ｍｌ及び０．１８８ｍｇ／ｍｌの用量でのＦＳ−１の適用は、陰性対照と比較して、リバーストランスクリプターゼの含有量−ウイルスの感染力指数−を４．１及び１２．７倍減少した。陽性対照として０．０１ｍｇ／ｍｌの用量でアジドチミジンを適用すると、この数値は５分の１に低下しただけであった（表１３）。

インフルエンザウイルスＡ／ＦＰＶ／Ｒｏｓｔｏｃｋ／３４に対する薬剤ＦＳ−１の抗ウイルス活性が、インビトロ及びインビボで確立された（表１４〜１６）。

したがって、０．２９０ｍｇ／ｋｇ及び１．４５８ｍｇ／ｋｇの用量での薬剤ＦＳ−１の予防的使用後の、１００ＥＩＤ_５０／０．１ｍｌの用量でインフルエンザウイルスに感染したニワトリの生存率は１００％であり、リマンタジンの予防的使用後では、２８±１２．５３％であった。生理食塩水を受けた対照ニワトリは全て死亡した（死亡率１００％）。

実施例１〜９のＡＢＡの細胞毒性及び効果の試験は、急性毒性の観点から試験した３つの主要な化合物を同定した。毒性試験は、生命倫理基準（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ．Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ．１９９６）に従って実験動物において実施した。急性毒性（ＬＤ５０）のパラメーターを確立するため、ＡＢＡをマウス及びラットに経腸的及び非経口的に投与した。

非近交マウスへの経腸的及び非経口的経路の投与による３つのＡＢＡの急性毒性の結果を表１７、１８に示す。

最小毒性物質はＡＢＡ ＦＳ−１であることが証明された。マウス及びラットへの経腸的（胃内）投与では、投与薬剤の最大量がそれぞれ１ｍｌ及び５ｍｌであり、一方、用量がそれぞれ９２２及び４９６ｍｇ／ｋｇであったので、ＦＳ−１の致死効果は達成されなかった。死亡動物の内部臓器の肉眼試験は、死亡原因が血行力学的障害に関連すると思われ、このことが死亡した動物の内部臓器における散在的な凝血傾向及び重度の血液充満の発生により間接的に確認されることを明らかにした。１４日目の終了時には、内部臓器及び組織の構造における異常は、対照グループと比べた生存動物における病理形態学的研究によって検出されなかった。この場合、胃腸管の粘膜に有意な傷害は確認されなかった。累積計数（Ｃｃｕｍ）は１．８５であり、これは、国際薬剤毒性スケールによると、かすかな蓄積効果を有する薬剤のパラメーターに相当する。

更に研究は、５．０ｍｇ／ｋｇ（ラットに確立されたＭＴＤの１／１００に等しい用量）及び５０ｍｇ／ｋｇ（ラットに確立されたＭＴＤの１／１０に等しい用量）の用量で６０日間及び３０日間の回復期間で投与する胃内投与方法により、ラット及びウサギにおいて慢性毒性について実施した。

５．０ｍｇ／ｋｇの用量での薬剤の慢性投与は、血液及び尿の体重動力学的、物理的、血液学的、及び生化学的指数に関して対照群の動物との偏差がなかった。心臓周期に異常は観察されなかった。全ての動物は、内部臓器の正常なマクロ構造及びミクロ構造を保持した。

ラット及びウサギにおける薬剤の５０．０ｍｇ／ｋｇの用量での慢性投与は、以下の毒性作用を引き起こした。血液生化学パラメーターの部分では、肝臓酵素のアラニントランスアミラーゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ及びアルカリホスファターゼ、並びに窒素代謝の成分のクレアチニン、尿素に僅かな増加があった。一部の動物は、静脈性多血症、細胞質に変性変化の徴候がある肝細胞を有することが見出されて、胃壁に非びらん性点状出血が観察された。一部の動物は小腸皮膜膨張を有した。この群の動物における甲状腺の変化は、極めて多様であり、独特であった。一般に、大きな濾胞の出現及び上皮の平坦化に起因する甲状腺の機能的活性の減少があった。しかし、実験の９０日目（回復期間の３０日目）に実施した研究は、内部臓器の同定された生化学的変化及びミクロ構造変化が可逆性であることを示した。

生殖毒性をマウスで試験した。妊娠前及び期間中の雌に、実施例５の薬剤を胃内及び筋肉内に投与した。試験の結果を表１９に提示する。

胃内投与（妊娠前及び後）は、高用量（１００ｍｇ／ｋｇ）で薬剤を試験した場合でも、マウスに未熟分娩をもたらさなかったことが確立された。

胎芽毒性試験をニワトリの胚において実施した。１２．５ｍｇ／ｍｌまでの実施例５のＡＢＡ用量は、異なる段階の胚の発育に病理学的効果を有さないことを示した。

実施例５（ＦＳ−１）の薬剤の発癌活性試験では、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）Ｅｃ１０００（ＰＪＥ４３）のＳＯＳ Ｃｈｒｏｍｏｔｅｓｔにおける遺伝子毒性活性の同定、１〜２０００μｇ／ｍｌの濃度範囲での血球における及び横紋筋肉腫の細胞培養物における一本鎖ＤＮＡ破断の同定及び回復（不定期）ＤＮＡ合成の決定を含む、一連の試験を使用した。ＦＳ−１の発癌活性の研究の結果を表２０に提示する。使用した条件では、試験したＦＳ−１は、大腸菌Ｅｃ１０００（ＰＪＥ４３）の試験菌株の細胞においてＳＯＳ反応インデューサーではない。

陰性の結果は、２００、３００、６００μｇ／ｍｌのＦＳ−１に曝露されたときに認められた（一本鎖ＤＮＡ破断の不在）。

実施例５の薬剤の遺伝子毒性活性は、提供者の末梢血の細胞における不定期（回復）ＤＮＡ合成の誘導試験で研究した。５０、１００、２００μｇ／ｍｌの濃度範囲では、代謝活性化を有する又は有さないにかかわらず、不定期合成への刺激が検出されないことが示された。

代謝活性化を有するもの及び代謝活性化を有さないものの両方の実験において、Ａｍｅｓ試験の際に、研究されたサルモネラ・チフィムリウムの４つ全ての突然変異誘発性菌株の増殖活性には、陰性対照と比較してＦＳ−１の影響後、有意な変化は検出されなかった。

その上、突然変異誘発性菌株の増殖に対する効果の欠如は、１．０及び２．０ｍｇ／ｃｕｃｌなどの比較的高い濃度でも記録された。したがって、ＦＳ−１は、Ａｍｅｓ試験においてサルモネラ・チフィムリウムのヒスチジン栄養要求性菌株のＤＮＡに対して突然変異誘発性ではない。

マウスリンパ腫Ｌ５１７８Ｙ細胞及びヒト肝細胞癌ＨｅｐＧ２細胞の両方へのＦＳ−１のＤＮＡ損傷効果の分析は、これらの系の細胞において彗星状（尾状）ＤＮＡの自発的形成に有意な増加がないことを明らかにした。更に、両方の種類の研究細胞系の細胞質における彗星状（尾状）ＤＮＡの形成に対して効果を誘導する薬剤の不在も、マウスにおける肝臓酵素による代謝活性化の存在下で明らかとなった。したがって、研究範囲の濃度の薬剤は、１．０及び２．０ｍｇ／ｍｌのように大きい場合でも、代謝活性化の不在及び後の両方において、インビトロで真核生物ＤＮＡに対して損傷効果を有さない。

表２１は、細胞遺伝学的活性研究の結果を提示する。染色体異常を有する骨髄白血球のレベルに統計的に有意な差は検出されず、動物体重の２２ｍｇ／ｋｇの用量のＦＳ−１の単回投与の影響の後、骨髄白血球の染色体異常の量及び質は見出されなかった。更に、動物体重の８ｍｇ／ｋｇの用量のＦＳ−１の反復投与も、対照と比較して、骨髄白血球の染色体異常の数及び特徴の両方に対する影響の欠如によって特徴付けられた（表２１）。

したがって、調査した用量のＦＳ−１は、インビボで真核生物ＤＮＡに対して損傷効果を有さない。

表２２に提示されているデータは、動物体重の２２ｍｇ／ｋｇの用量での単回ＦＳ−１投与の後、小核を有する多染性及び正染色性骨髄赤血球の含有量、並びにそれらにおける小核の数に増加がないことを示す。加えて、動物体重の８ｍｇ／ｋｇの用量での反復薬剤投与も、対照と比較して、小核を含有する多染性及び正染性赤血球の数と赤血球における小核の総数の両方に対する効果の不在によって特徴付けられる（表２２）。

したがって、調査用量の薬剤は、インビボでの通常の発育の経過において、真核生物ＤＮＡに対する損傷効果を有さず、特に小核の形態の核からのＤＮＡの一部の放出がない。

生殖細胞におけるＦＳ−１による優位致死突然変異の誘導を研究する実験の結果は、動物体重の２２ｍｇ／ｋｇの用量での筋肉内注射を介して薬剤に曝露された動物（試験群１．１〜１．３）における着床後損失のレベルが、対照群と比較して変化がなかったことを示している（表２３）。

したがって、ＦＳ−１は、調査用量で体内に投与されたとき、哺乳類においてインビボで生殖細胞（成熟精子細胞、後期及び初期精細胞）に優位致死突然変異の発生を誘導せず、すなわち、優位致死対立遺伝子の試験において突然変異誘発活性を有さない。

インビトロ及びインビボの両方における、異なる感受性を有する試験系でＦＳ−１突然変異誘発活性を試験する多数の実験の結果は、薬剤が有意な量であっても突然変異誘発性ではないことを示している。このことは、ＦＳ−１が、活動的な分化を含む真核細胞との相互作用及び高度な感受性の部類に属する生殖細胞との相互作用において、ＤＮＡ損傷及び特定の突然変異誘発効果を有さず、すなわち、遺伝学的装置の通常の実行においてＤＮＡ損傷及び／又は機能不全を引き起こさないことを示している。

電離放射線量の曝露、すなわち８００Ｒの場合では、照射の前に０．１５ｍｌのＦＳ−１を受けたマウスの群では、特定の放射線防護効果が達成された。３０日間の最終日までには、対照群では生存率は３０％であり、平均寿命は１８．９±０．４日間であり、実験群では、これらの数値はそれぞれ７０％及び２４．６±０．７日間であった。スチューデントｔ検定を使用した結果（平均寿命）の統計的分析は、平均寿命に関して有意な差（３０％）を示した（ｐ＜０．０５）。

観察期間の最終日における８００Ｒの線量でのラットの実験では、２６．７％のラットが生存し、この群の平均寿命は１７．２±０．５日間であった。８００Ｒの線量で曝露される前に１．０ｍｌのＦＳ−１を胃内に受けたラットでは、生存率は５０％であり、平均寿命は２４％延びた（２１．３±０．８日間）（図１２）。そしてこの場合では、特定の放射線防護効果があった。スチューデントｔ検定を使用した結果（平均寿命）の統計的分析は、平均寿命に関して有意な差を示した（ｐ＜０．０５）。実験の結果を比較すると、ＦＳ−１は、半致死（ＬＤ_５０）に近い線量で照射された動物において現れた特定の放射線防護効果を有すると結論付けることができる。

Ｖｅｎｔｕｒｉ（２０００）により行われた研究によると、ヨウ素は地球の生命の夜明けにおける最初の酸化防止剤であり、人類の進化において桁外れに大きな役割を果たしてきた。主な有害放射線因子は、照射直後に体内に形成されるフリーラジカルであることが良く知られている（Ｂａｃｑ，１９６５；Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｂａｃｑ，１９７４；Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ，１９８５，１９９１）。ヨウ素を含む酸化防止剤は、フリーラジカルと結合して、体の生体分子との相互作用を妨げる（Ｓｈｉｍｏｉ，１９９６；Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ，１９８５，１９９１）。

実施例５（ＦＳ−１）のＡＢＡに基づいた薬剤の治療作用の有効性は、ＭＤＲ肺結核を有する志願患者の３つの群における臨床試験によって確立された（表２４）。

第１群（ｎ＝１９）は、体重の０．１ｍｌ／ｋｇの用量でのＩＩ型の抗ＴＢ薬と実施例５のＡＢＡとの併用療法を受けた。第２群（ｎ＝１７）は、体重の０．１ｍｌ／ｋｇの用量でのＩＩ型の抗ＴＢ薬とプラセボを受け、第３群（ｎ＝１９）は、体重の０．１２５ｍｌ／ｋｇの用量でのＩＩ型の抗ＴＢ薬とＦＳ−１を受けた。全ての薬剤を１日１回投与した。

耐性肺結核を有する患者の複合体治療の最初の１か月間の止血（ＡＰＴＴ、プロトロンビン指数、トロンビン時間、フィブリノゲン）に基づいた薬剤安全性研究は、０．１及び０．１２５ｍｇ／ｋｇの使用用量のＦＳ−１が凝血に対して効果がないことを示した。更に、療法の１か月後の甲状腺超音波検査は、被験者にどのような変化も検出しなかった。

結核菌の薬剤感受性試験によると、Ｉ型のＴＢ薬（以降、ＴＢＤ）（イソニアジド（Ｈ）、リファンピシン（Ｒ）、エタンブトール，（Ｅ）、ストレプトマイシン（Ｓ））に対する耐性が立証された。患者を無作為に３つの群にした。第１群（一次）は、ＩＩ型のＴＢＤ（サイクロセリン（Ｃｓ）、オフロキサシン（Ｏｆｓ）、ＰＡＳ、プロチオナミド（Ｐｔｏ）、カプリオミシン（capriomicine）（Ｃｍ））＋ＦＳ−１（０．１ｍｌ／ｋｇ）を受け、第２群（一次）は、ＩＩ型のＴＢＤ（サイクロセリン（Ｃｓ）、オフロキサシン（Ｏｆｓ）、ＰＡＳ（Ｐａｓ）、プロチオナミド（Ｐｔｏ）、カプリオミシン（Ｃｍ））＋ＦＳ−１（０．１２５ｍｌ／ｋｇ）を受け、第３群（対照）は、ＩＩ型のＴＢＤ（サイクロセリン（Ｃｓ）、オフロキサシン（Ｏｆｓ）、ＰＡＳ（Ｐａｓ）、プロチオナミド（Ｐｔｏ）、カプリオミシン（Ｃｍ））＋プラセボ）を受けた。

被験者の平均年齢は３３．１４±９．０３（歳）であり、そのうち７５．８％が男性であり、２４．２％が女性であった。臨床形態のうち、最も頻繁な形態は浸潤性であり（７０．１％）、頻度の低いものは線維海綿状（fibrocavernous）であった（２８．２％）。群は均一であり、背景特徴に有意な差は観察されなかった。

薬剤の治療効果の予備研究は、スメア変換が、治療の３か月目から始まって一次群において有意に高いことを示し、これは併用療法におけるＦＳ−１の効能を立証している（表２８）。

表２９に提示されているデータは、療法の３か月目から始まって、陰性培養物が対照群と比較して一次群において有意に高いことも示し、これはＴＢ治療におけるＦＳ−１の効能を立証している。

固形培地の喀痰接種の伝統的な方法（表３０）は、ＩＩ型の抗ＴＢ薬と組み合わせてＦＳ−１を受けている耐性ＴＢの患者において、陰性結果の細菌検査の特定の重量が、療法の２か月後に対照と比較して有意に高いことも示唆し、これを３及び４か月後も追跡することができる。

ＩＩ型の抗ＴＢ薬と組み合わせてＦＳ−１を受けているＭＤＲ結核患者のＸ線パターンの変化は、治療の１か月後の早さで、陽性動力学が対照群（プラセボ＋ＴＢＤ、ＩＩ型）よりも有意に高いこと、すなわち、浸潤の吸収、病巣の硬化及び空洞の退縮（表３１）が早期に開始することを示唆している。

表３２から分かるように、主要な群に体重増加が観察され、一方、対照群では、反対に体重が減少し、３か月後には体重の有意な変化が第１群及び第２群において明らかであり、４か月後には第３群において明らかである。

第ＩＩ相臨床試験の予備段階の結果は、ＭＤＲ ＴＢの患者における併用抗結核療法へのＦＳ−１の適用の効能を立証している。

Claims (13)

1. 院内感染及び薬剤耐性ＴＢを含む細菌感染疾患を治療するための、タンパク質及び／又はポリペプチド、炭水化物、アルカリ及びアルカリ土類金属塩と、それらに挿入されたヨウ素から形成されるイオンナノ構造複合体を表し、イオンナノ構造複合体のタンパク質及び／又はポリペプチドが、電子供与体官能基を有する少なくとも１つの鎖末端アミノ酸を含有することを特徴とする、抗細菌剤。
2. インターロイキンがタンパク質として使用され、鎖末端アミノ酸が、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅなどであることを特徴とする、請求項１に記載の抗細菌剤。
3. 抗微生物剤が、抗生物質耐性細菌を含めた、細菌の抗生物質に対する感受性を増加することを特徴とする、請求項１又は２に記載の抗細菌剤。
4. 院内感染及び薬剤耐性ＴＢを含む細菌感染疾患の抗生物質治療の効率を増加することを特徴とする、請求項１、４に記載の抗細菌剤。
5. 抗ウイルス作用を有することを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
6. 免疫原活性を有し、単球−マクロファージ及び細胞毒性Ｔリンパ球の活性を増加することを特徴とする、請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
7. 骨髄の造血機能を刺激することを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
8. 抗新生物質作用を有することを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
9. 放射線防護特性を有することを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
10. ＩＮＳＣが以下の式：［｛（Ｌｎ（ＭｅＩ３）＋）ｙ［Ｍｅ（Ｌｍ）Ｉ］＋ｘ｝（Ｃｌ−）ｙ＋ｘ＋ｋ］を有し、Ｍ＝３０〜３００ｋＤａであることを特徴とする、請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
11. 非経口、経口、外用又は他の適用に適した医薬形態で提示されることを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
12. 特定の許容される濃度の成分において非薬剤であることを特徴とする、請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗細菌剤。
13. 炭水化物及びタンパク質と金属塩の複合体形成反応、並びにイオン強度５・１０^−４〜１５での複合体へのヨウ素の挿入を含み、イムノトロピックタンパク質の導入が５〜９５％のヨウ素挿入後の個別の段階で実施されることを特徴とする、請求項１に記載の抗細菌剤の生成方法。