JP2014032064A - 光誘起蛍光測定器 - Google Patents
光誘起蛍光測定器 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2014032064A JP2014032064A JP2012171825A JP2012171825A JP2014032064A JP 2014032064 A JP2014032064 A JP 2014032064A JP 2012171825 A JP2012171825 A JP 2012171825A JP 2012171825 A JP2012171825 A JP 2012171825A JP 2014032064 A JP2014032064 A JP 2014032064A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- light
- fluorescence
- sample
- pigment
- resin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims abstract description 191
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 128
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims abstract description 103
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 87
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 87
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 claims abstract description 34
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 51
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 20
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 20
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 14
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 44
- 230000035939 shock Effects 0.000 abstract description 3
- 229920002050 silicone resin Polymers 0.000 description 200
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 141
- 238000001499 laser induced fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 46
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 31
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 31
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 28
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 19
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 15
- 230000008859 change Effects 0.000 description 12
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 12
- 238000012123 point-of-care testing Methods 0.000 description 8
- 229920000089 Cyclic olefin copolymer Polymers 0.000 description 7
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 7
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 6
- 239000004713 Cyclic olefin copolymer Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 3
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 239000011796 hollow space material Substances 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- -1 polydimethylsiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920005672 polyolefin resin Polymers 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/44721—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by optical means
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/02—Mechanical
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/02—Mechanical
- G01N2201/022—Casings
- G01N2201/0221—Portable; cableless; compact; hand-held
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/06—Illumination; Optics
- G01N2201/061—Sources
- G01N2201/06113—Coherent sources; lasers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/06—Illumination; Optics
- G01N2201/064—Stray light conditioning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/0004—Gaseous mixtures, e.g. polluted air
- G01N33/0009—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment
- G01N33/0027—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment concerning the detector
- G01N33/0036—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment concerning the detector specially adapted to detect a particular component
- G01N33/0057—Warfare agents or explosives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
【解決手段】励起光を出射するレーザ光源1、試料ケース2、蛍光測定器である光電子増倍管4、蛍光収集光学系3等を、励起光および試料Sから放出される蛍光を含む光に対して透明な樹脂6内に埋設する。蛍光収集光学系3の蛍光を導光する光路の少なくとも一部には上記樹脂6を充填し、この樹脂によりレーザ光源1、蛍光収集光学系3、光電子増倍管4等を保持する筐体を構成する。また、上記励起光および蛍光を含む光が通過する光路を包囲する樹脂領域61には、上記励起光、樹脂から発生するラマン光等を吸収する波長特性を有する顔料をほぼ一様に含有させ、光路外へ進行するこれらの光を全て吸収する。
【選択図】 図1
Description
LIFは、計測する対象である原子や分子の共鳴遷移を利用して励起準位に合致した(波長をチューニングした)レーザ光を照射して上記計測対象(原子や分子)を励起し、それによって引き起こされる発光(蛍光)を測定する手法である。
蛍光の強度から測定対象の濃度が算定され、蛍光のスペクトル分布から測定対象の温度が算定される。
また、特許文献4には、蛍光標識された生体試料をマイクロチップ内で電気泳動させ、当該試料をLIFにより分析する測定装置が開示されている。また、特許文献5には、抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドとを備え、前記抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドのいずれか一方が蛍光色素により標識されたキット、並びに、このキットと反応する抗原濃度測定が蛍光色素の蛍光強度を検出することにより行われることが開示されており、この蛍光強度の検出についてLIFを利用する例が記載されている。特許文献6には、LIFによる抗原測定装置が開示されている。
試料Sに抗原が導入され試料中で抗体抗原反応が発生する。そして、高電圧電源110により電力を供給すると、電気泳動により試料中から抗体抗原複合体や抗体が分離されキャピラリーカラム101中を移動する。途中、電力供給を停止し、抗体抗原複合体や抗体の酵素反応を行う。再度、電力供給を再開すると、酵素反応した抗体抗原複合体や抗体が電気泳動により、レーザ装置105からのレーザビーム111がミラー106により反射されて集光レンズ104により集光されている測定位置に移動する。測定位置に到達した酵素反応した抗体抗原複合体や抗体は、レーザビーム111が照射され蛍光を発する。
なお、光学フィルタ108は、励起光であるレーザビームの散乱光をカットして、蛍光のみを選択的に透過させる機能を有し、レーザビームの散乱光が光電子増倍管109に入射するのを防止する。また、酵素反応した抗体抗原複合体と抗体は、電気泳動で進むスピードが互いに相違するので、酵素反応した抗体抗原複合体からの蛍光、酵素反応した抗体からの蛍光が光電子増倍管109に到達するタイミングは相違する。
ポイントオブケア検査(POCT)は、例えば、救急車内での検査、患者自身が自宅などで行う自己検査、屋外での禁止薬物検査等の状況で行われる。このような検査作業者は、上記したような光学系のアライメントを実施する技能を必ずしも持ち合わせているわけではない。
また、上記したように、レーザビームの反射光や散乱光の影響を小さくするため、LIFの光学系を構成する光学素子の数は多くなるので、光学素子ホルダー、光学素子からなる光学系の構造は大掛かりにならざるを得ない。
すなわち、従来は、POCTの要請に対応できるような、小型かつ携帯や運搬が可能で、迅速かつ高精度な測定性能を有するLIF測定装置を構築するのは、非常に困難であった。
(1)固体光源と、試料を保持する試料保持部材と、上記試料保持部材に保持された試料から放出される蛍光を検出する蛍光測定器と、上記試料から放出される蛍光を収集し上記蛍光測定器まで導光する蛍光収集光学系とからなる光誘起蛍光測定器において、上記試料保持部材を、励起光である該固体光源から出射する光及び上記試料から放出される蛍光に対して透明とし、上記固体光源、試料保持部材、蛍光測定器、及び蛍光収集光学系を、上記固体光源から出射する励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光に対して透明な樹脂内に埋設する。そして、上記蛍光収集光学系の上記蛍光を導光する光路の少なくとも一部に上記樹脂を充填し、上記樹脂により、上記試料保持部材、蛍光測定器、及び、蛍光収集光学系を保持する筐体を構成する。
また、上記励起光および試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を包囲する樹脂領域には、上記励起光、上記試料保持部材に上記励起光が照射される際に発生する自家蛍光、及び上記励起光が上記樹脂内を進行する際、上記樹脂から発生するラマン光を吸収する波長特性を有する顔料をほぼ一様に含有させ、この顔料の含有量を、上記励起光及び上記試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を含む空間において発生し該光路外へ進行する光を全て吸収する量に設定する。
(2)上記(1)において、上記蛍光収集光学系は、少なくとも、レンズ、ノッチフィルタ、色ガラスフィルタを含む。
(3)上記(2)において、蛍光収集光学系に2個のレンズを設け、該2個のレンズが対向する空間を、上記樹脂が充填されていない空洞とし、該空洞と該樹脂との境界面をレンズ形状に形成し、該樹脂の一部により上記レンズを構成する。
(4)上記(2)(3)において、上記蛍光収集光学系を、上記励起光および試料から放出される蛍光を含む光が入射する側から順に、上記固体光源から出射する励起光の波長の光を反射する第1のノッチフィルタと、上記励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光を平行光にする第1のレンズと、上記励起光の波長の光を反射する第2のノッチフィルタと、試料から放出される蛍光以外の光を吸収する第1の色ガラスフィルタと、上記蛍光を含む光を集光する第2のレンズと、第2のレンズの光軸上であって、蛍光の集光位置近傍に配置されるアパーチャとから構成する。
(5)上記(1)(2)(3)(4)において、上記試料保持部材に保持される試料は、抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドとを備え、前記抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドのいずれか一方が蛍光色素により標識されたキットを含む。
(1)固体光源、被測定試料を保持する試料保持部材、レンズや光学フィルタ等からなる蛍光収集光学系、蛍光測定器が上記固体光源から出射する励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光に対して透明な樹脂内に埋設された構造を有するので、光誘起蛍光測定器に振動や衝撃が加えられたとしても光学素子等の位置の変動が起こりにくく、その結果、蛍光収集光学系のアライメントずれが抑制される。
また、樹脂と光学素子の密着性は良好であり、両者の接触部分に空気が存在する場合に発生する不所望な光の反射や散乱も殆ど発生しない。
(2)固体光源から出射する励起光および試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を包囲する樹脂領域に、上記励起光、上記試料保持部材に上記励起光が照射される際に発生する自家蛍光、上記樹脂から発生するラマン光等を吸収する波長特性を有する顔料を含有させ、この顔料の含有量を、上記励起光および試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を含む空間において発生し、該光路外へ進行する光を全て吸収する量に設定することにより、装置外部に励起光や測定光である蛍光を放出することはない。また、外部からの光が蛍光収集光学系等の内部に入ることもなく、高精度な測定が可能となる。
特に、顔料を含有する樹脂(顔料含有樹脂)と、上記固体光源、試料保持部材、蛍光収集光学系等を埋設した透明な樹脂を同じ材質とすることにより、両者の屈折率は同じであるので、上記透明な樹脂が占める領域と上記顔料含有樹脂が占める領域との間には屈折率境界がない。
このため、上記透明な樹脂が占める領域を通過した光が、上記顔料含有樹脂が占める領域に入射する場合、両樹脂が接触する界面において光の反射や散乱は抑制される。また、上記励起光やその反射光・散乱光等が上記顔料含有樹脂の占める領域に入射しても、当該顔料含有樹脂に含有される顔料により吸収され、上記反射光・散乱光等の迷光が、再び、レーザ照射空間や蛍光収集光学系が構成される空間内に戻ることは殆どない。
また、レーザ光を利用する場合には人体(特に目)に対する安全性確保が一般機器仕様では重要になるが、本発明では原則光が外部に漏れないこと、ガラス製の分光光学系と異なり破損により光が外部に漏洩する危険がないこと、光が導光する領域がほとんど固体であるために人の覗き込みや鏡の挿入で光の漏洩が起きにくいこと、の3点からその危険性を著しく減じることができる。
また、迷光の複雑な多重反射は殆ど発生せず、蛍光収集光学系は、複雑な多重反射に対応する必要がない。このため、蛍光収集光学系の構成は簡便化され、結果的に本発明のレーザ誘起蛍光測定器を小型化することが可能となる。
(3)蛍光収集光学系に設けられた2個のレンズが対向する空間を、透明な樹脂が充填されていない空洞とし、該空洞と樹脂との境界面をレンズ形状に形成することにより、該樹脂の一部でレンズを構成することができ、ガラス等のレンズを別途設ける必要がなく、部品点数を少なくすることができる。
(4)励起光および試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を包囲する樹脂領域を顔料含有樹脂とし、蛍光収集光学系を、固体光源から出射する励起光の波長の光を反射する第1のノッチフィルタと、上記励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光を平行光にする第1のレンズと、上記励起光の波長の光を反射する第2のノッチフィルタと、試料から放出される蛍光以外の光を吸収する第1の色ガラスフィルタと、上記蛍光を含む光を集光する第2のレンズと、蛍光の集光位置近傍に配置されるアパーチャとから構成することにより、測定対象蛍光のみを効果的に集光して、蛍光測定器に導光することができ、また、測定対象蛍光以外の光を光路の途中でほぼ吸収して測定対象蛍光以外の光が蛍光測定器に到達するのを防ぐことができる。
(5)上記試料保持部材に保持される試料として、抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドとを備え、前記抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドのいずれか一方が蛍光色素により標識されたキットを用い、蛍光物質で標識された抗体に抗原を注入して混合し、この混合液体に励起光を照射し発生する蛍光を測定することで、簡便に抗原と抗体の結合状態を測定することが可能となる。
本発明の実施例の光誘起蛍光測定器は、図1に示すように、固体光源(例えばレーザ光源1)、被測定試料Sを保持する試料保持部材(試料ケース2)、レンズや光学フィルタ等からなる蛍光収集光学系3、蛍光測定器(例えば光電子増倍管4)を含み、これらが樹脂6内に埋設された構造を有する。また、この樹脂6内に、必要に応じて上記固体光源および蛍光測定器に電力を供給する電力源5が埋設される。上記樹脂6は、上記試料保持部材、蛍光測定器、及び、蛍光収集光学系等を保持する筐体を構成する。
上記樹脂6は、レーザ光源1から試料に照射される励起光(以下ではレーザビームLともいう)の波長、励起光が照射された試料Sから放出される蛍光を含む光の波長に対して、透明な特性を有するものが採用される。
樹脂6としては、シリコーン、アクリル、ポリカーボネート、環状オレフィン樹脂(COC(Cyclic Olefin Copolymer)、COP(Cyclic Olefin Polymer)等を用いることができる。以下に説明する実施例では樹脂6としてシリコーンを用いた場合について説明する。
なお、レーザ照射空間7および蛍光収集光学系3内の空間全部にシリコーン樹脂6が充填されていてもよく、また、レーザ照射空間7、および/または、蛍光収集光学系3の第1のノッチフィルタ31aと第2のレンズ32bの間の空間をシリコーン樹脂が充填されていない空間としてもよい。
図1に示すようにレンズ32a,32bの間の空間にシリコーン樹脂6を充填しないように構成し、該空間と該シリコーン樹脂6との境界面をレンズ形状に形成すれば、該樹脂の一部を上記レンズとして利用することができ、ガラス等で形成されたレンズを別途設ける必要がなく、部品点数を少なくすることができる。
なお、上記励起光及び上記試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を含む空間において発生し該光路外へ進行する光を全て吸収可能であれば、上記樹脂領域に含有される顔料はほぼ一様でなくてもよく、例えば、濃度分布を伴って上記樹脂領域中に含有されていてもよい。また、上記樹脂領域中に部分的に含有されていてもよい。
すなわち、光学素子全体が樹脂6に包囲されているので、レーザ誘起蛍光測定器に振動や衝撃が加えられたとしても光学素子自体の位置の変動が起こりにくく、その結果、蛍光収集光学系3のアライメントずれが抑制される。
本構成により、従来、レーザ誘起蛍光測定器に加えられる振動や衝撃に対応するために用いざるを得なかった頑丈で大掛かりな光学素子ホルダーも不要となり、装置自体をコンパクトに構成することが可能となる。
また、シリコーン樹脂6に光学素子を埋設する際、樹脂6と光学素子との接触面から空気をパージしながら両者を接触させることが可能であるので、両者の密着性は良好であり、両者の接触部分に空気が存在する場合に発生する不所望な光の反射や散乱も殆ど発生しない。
レーザ照射空間7、蛍光収集光学系3が構成される空間を構成するシリコーン樹脂6と、当該樹脂6を包囲するように構成される顔料が包含されているシリコーン樹脂61(以下、顔料含有シリコーン樹脂61ともいう)とは、樹脂自体は同じ材質であるので、両者の屈折率は同じである。すなわち、上記シリコーン樹脂6が占める領域と上記顔料含有シリコーン樹脂61が占める領域との間には屈折率境界がない。よって、上記シリコーン樹脂6が占める領域を通過した光が、上記顔料含有シリコーン樹脂61が占める領域に入射する場合、両シリコーン樹脂6が接触する界面において光の反射や散乱は抑制される。
また、顔料含有樹脂61が他の部材と接する境界、顔料含有樹脂61の端面(空気と接する面)の近傍においても、実際には上記と同様に顔料の含有量は傾斜状に増加すると考えられ、顔料含有樹脂61の表面での反射は比較的少ないと考えられる。
よって、励起光であるレーザビームLが進行する空間(レーザ照射空間7)や試料Sから放出された蛍光が蛍光測定器に入射するまでの光路を含む空間(蛍光収集光学系3が構成される空間)と、迷光を吸収するための空間との界面を安定に維持するには、迷光を吸収するための空間領域を顔料含有シリコーン樹脂61により構成することが好ましい。
(1)シリコーン樹脂
シリコーン樹脂6としては、信越化学社製のSIM−360を使用した。このシリコーン樹脂は、室温にて固化する特性を有するポリジメチルシロキサン(Polydimethylsiloxane :PDMS)であり、レーザ光源1、被測定試料S、レンズや光学フィルタ等からなる蛍光収集光学系3、蛍光測定器である光電子増倍管4、レーザ光源1および蛍光測定器に電力を供給する電力源5といったレーザ誘起蛍光測定器の構成要素に対してパテ状に盛ることにより、当該構成要素をシリコーン樹脂6内に埋設した。
なお、シリコーン樹脂6としては上記のものに限るものではなく、別途金型を用いて上記以外のPDMSを成形して、上記構成要素を成形したPDMSに埋設するようにしてもよい。
励起光であるレーザビームLを放出するレーザ光源1としては、レーザポインター等で使用されるバッテリー駆動の半導体励起固体レーザ(Diode-pumped solid-state (DPSS) lasers)を使用した。詳細には、半導体励起のNd:YVO4レーザ(波長1064nm)の第2高調波である波長532nmのレーザビームを放出するグリーンレーザ装置を用いた。
電力源5としては、外部でのポイントオブケア検査(POCT)の要請に臨機応変に対応可能なように、バッテリーを使用した。バッテリーはシリコーン樹脂6に埋設されるバッテリーボックスに設置される。なお、前記したように、上記したレーザ光源1(DPSSレーザ)はバッテリーボックスに設置されるバッテリーにより駆動し、DPSSレーザのレーザヘッド部分のみ、試料SにレーザビームLを照射するための所定の場所に位置する。なお、DPSSレーザのレーザヘッドと電力源5とは給電線により接続され、当該給電線もシリコーン樹脂6内に埋設される。なお、給電線の図示は省略する。
本実施例においては、測定用試料Sとして、抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドとを備え、前記抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドのいずれか一方が蛍光色素により標識されたキット(以下、このキットのことを便宜上、「蛍光物質で標識された抗体」と呼ぶことにする)を使用した。
この「蛍光物質で標識された抗体」は、抗体の末端近傍を色素で蛍光標識した組替抗体断片であり、単体では抗体内のアミノ酸により色素の蛍光は消光された状態にある。これに試料Sとなる抗原を結合させると、消光が解除され色素の蛍光強度が顕著に増大する。
すなわち、抗原と反応する前の蛍光物質で標識された抗体にレーザビームLを照射しても色素の蛍光は発生しないが、当該蛍光物質で標識された抗体と抗原とを反応させたあとにレーザビームLを抗原と結合した「蛍光物質で標識された抗体」に照射すると、色素からの蛍光の量が増大する。
図2は、試料Sを含有する試料ケースの設置を説明する図である。「蛍光物質で標識された抗体」や抗原を含む溶液を投入する試料ケース2としては、例えば、直径5mmのポリスチレン製PCRチューブを使用した。
図2に示す試料ケース2(PCRチューブ)は先端がテーパ状になっており、液体状の「蛍光物質で標識された抗体」や抗原を含む溶液を投入しても、PCRチューブ2の先端側で気泡が出来にくい。この先端側が図1に示すDPSSレーザから放出されるレーザビームLが照射される位置となるように、試料溶液が導入されたPCRチューブ2はレーザ誘起蛍光測定器本体10にセッティングされる。
仮に、シリコーン樹脂6と試料ケース2との間に空気層が存在すると、空気層において光散乱が発生する。すなわち、空気層が試料ケース2のレーザ入射側に存在すると、励起光の一部が空気層により散乱され、試料ケース2内部の試料Sに照射されるレーザビームの損失が発生する。同様に、空気層が試料ケース2の蛍光放出側に存在すると、蛍光の一部が空気層により散乱され、試料ケース2から放出される蛍光の損失が発生する。
また、試料ケース2の材質はポリスチレンに限るものではなく、例えば、環状オレフィンコポリマー(Cyclic Olefin Copolymer:COC)で構成してもよい。COCの場合、ポリスチレンに比べて光照射時に発生する自家蛍光の強度が小さくなる。
上記したように顔料含有シリコーン樹脂61は、レーザビームLや蛍光の光路空間である、レーザ照射空間7(レーザビームLが照射される試料Sが保持される空間)および蛍光収集光学系3が構成される空間を包囲するように構成される。また、この顔料含有シリコーン樹脂61内には、レーザ光源1、被測定試料S、蛍光測定器である光電子増倍管4、レーザ光源1および蛍光測定器に電力を供給する電力源5が埋設される。
よって、顔料含有シリコーン樹脂61は、本発明に係るレーザ誘起蛍光測定器において、直方体である樹脂から形成される筐体を構成する。
なお、上記迷光やラマン光を全て吸収可能であれば、上記シリコーン樹脂領域に含有される顔料はほぼ一様に分布していなくてもよく、例えば、濃度分布を伴って上記樹脂領域中に含有されていてもよい。また、上記シリコーン樹脂領域中に部分的に含有されていてもよい。
図4にレーザ照射空間7ならびに蛍光収集光学系3の構成例を示す。上記したように、レーザ照射空間7は、外部より「蛍光物質で標識された抗体」と抗原が混合されて抗体抗原反応により結合してなる試料Sを内部に有する試料ケース2が挿入されている。試料ケース2中の試料Sの上下方向の位置(図4の紙面に垂直方向の位置)は、レーザ光源1(DPSSレーザヘッド)から放出される波長532nmのレーザビームLが照射される位置に設定されている。
レーザ照射空間7は、レーザビームLの波長、および試料Sから放出される蛍光波長等に透明なPDMS製シリコーン樹脂6が充填された空間であり、当該空間は、顔料含有シリコーン樹脂61、および、蛍光収集光学系3を構成する第1のノッチフィルタ31aから包囲されている。
ここで、試料ケース2内の試料Sに照射され「蛍光物質で標識された抗体」の色素の励起に寄与せず、試料ケース2を通過した通過励起光は、PDMS製シリコーン樹脂6内を通過して、顔料含有シリコーン樹脂61内に入射する。上記したように、顔料含有シリコーン樹脂61内に入射した励起光(レーザビームL)は、シリコーン樹脂6と顔料含有シリコーン樹脂61との界面では殆ど反射されず、顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。従って、上記した透過励起光は、迷光(反射光、散乱光)として、蛍光収集光学系3に入射することはない。
なお、励起光がPDMS製シリコーン樹脂6内を進行する際、シリコーン樹脂6(PDMS)からのラマン光も発生する。しかしながら、PDMSから放出されるラマン光の強度は著しく小さく、仮に蛍光測定器である光電子増倍管4に入射したとしても測定結果には殆ど影響を及ぼさないレベルである。
また、励起光による迷光、および、試料ケース2からの自家蛍光の迷光のうち、レーザ照射空間7を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射しなかったものは、蛍光収集光学系3を構成する第1のノッチフィルタ31aに入射する。また、上記したシリコーン樹脂6(PDMS)からのラマン光も第1のノッチフィルタ31aに入射する。
図4に示すように、蛍光収集光学系3は、試料側から順に、第1のノッチフィルタ31a、第1のレンズ32a、第2のノッチフィルタ31b、第1の色ガラスフィルタ33a、第2の色ガラスフィルタ33b、第2のレンズ32b、アパーチャ34、第3の色ガラスフィルタ33cから構成される。
レーザ照射空間7から生じた励起光による迷光、試料ケース2からの自家蛍光の迷光、およびPDMSからのラマン光の一部が第1のノッチフィルタ31aに入射すると、波長532nmの励起光による迷光は第1のノッチフィルタ31aにより反射され、試料ケース2からの自家蛍光の迷光はそのまま第1のノッチフィルタ31aを透過する。
また、測定対象である、抗原との結合により消光が解除されている「蛍光物質で標識された抗体」の色素から蛍光(波長570nm〜580nm)もそのまま第1のノッチフィルタ31aを透過する。以下、この波長570nm〜580nmの蛍光を測定対象蛍光と呼ぶことにする。
上記したように、励起光による迷光は様々な方向に進行するので、第1のノッチフィルタ31aに入射する迷光の一部の入射角は必ずしも0°ではない。よって、第1のノッチフィルタ31aに入射する迷光は、減衰するものの第1のノッチフィルタ31aを透過する。
なお、第1のノッチフィルタ31aにより一部反射された励起光による迷光はレーザ照射空間7に戻り、レーザ照射空間7を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射し、当該顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。
前記したように本実施例においては、第1のレンズ32aと第2のレンズ32bの間には透明なシリコーン樹脂6は充填されておらず空洞となっており、この空洞となっている空間と第1のノッチフィルタ31aとの間に充填された透明なシリコーン樹脂6の該空間側の端面がレンズ形状をしている。すなわち、上記透明なシリコーン樹脂6の端面が第1のレンズ32aを構成している。
第1のノッチフィルタ31aを透過した励起光による迷光、試料ケース2からの自家蛍光の迷光、シリコーン樹脂6(PDMS)からのラマン光、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光は、上記第1のレンズ32aに入射する。また、第1のノッチフィルタ31aと第1のレンズ32aとの間の空間に充填されているPDMS製シリコーン樹脂6中を上記励起光による迷光が通過する際にラマン光が発生する可能性がある。
しかしながら、仮にラマン光が発生したとしても、このラマン光は上記励起光による迷光により発生したものであるので、その強度は著しく小さい。仮にラマン光が生じた場合は、このラマン光も第1のレンズ32aに入射する。
第1のレンズ32aを透過した励起光による迷光、試料ケース2からの自家蛍光の迷光、PDMSからのラマン光、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光は、第2のノッチフィルタ31bに入射する。第2のノッチフィルタ31bは、第1のレンズ32aの近傍に配置される。
第2のノッチフィルタ31bに入射する光はいずれも平行光であるので、第2のノッチフィルタ31bに入射する励起光による迷光の入射角は0°である。よって、第2のノッチフィルタ31bに入射する励起光による迷光の殆どは、第2のノッチフィルタ31bにより、第1のレンズ32a側へ反射される。なお、第1のノッチフィルタ31aでは、シリコーン樹脂(PDMS)により発生するラマン散乱光を削除するノッチフィルタを重ねることも適宜必要である。具体的には、532nmの波長に対して、545,550,627,630nmを選択的に反射する設計にすることが望ましい。
励起光による迷光の波長532nmとは異なる波長の試料ケース2からの自家蛍光の迷光、PDMSからのラマン光、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光は、第2のノッチフィルタ31bを通過する。
第2のノッチフィルタ31bによって著しく減衰させられた励起光による迷光、および第2のノッチフィルタ31bを通過した試料ケース2からの自家蛍光の迷光、PDMSからのラマン光、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光は、第1および第2の色ガラスフィルタ33a,33bに入射する。
第1の色ガラスフィルタ33aに入射したこれらの一部は、第1の色ガラスフィルタ33a表面において反射され、その一部は第1の色ガラスフィルタ33aと第2のノッチフィルタ31bとの間の空間を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射し、当該顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。
これらの光の一部は、第1および第2の色ガラスフィルタ33a,33bで吸収され、残りの光が第2のレンズ32bを介して、第2のレンズ32bと第3の色ガラスフィルタ33cの間の透明なシリコーン樹脂6が充填された空間に入射するが、その空間を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射して当該顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。
なお、上記顔料含有シリコーン樹脂61内に入射せず、第2のノッチフィルタ31bに再入射したこれらの光は、第2のノッチフィルタ31bの表面にて反射されたり、第2のノッチフィルタ31bを通過したりするが、これらの光の強度は著しく小さく、仮に蛍光受光器である電子増倍管4に入射したとしても、測定結果にはほとんど影響を及ぼさないレベルである。
ここで、第1の色ガラスフィルタ33aの光入射側に放射された2次蛍光の一部は、第1の色ガラスフィルタ33aと第2のノッチフィルタ31bとの間の空間を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射し、当該顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。
また、上記顔料含有シリコーン樹脂61に入射しようとする光の一部は、樹脂表面で反射し、これらの光の一部は、第1および第2の色ガラスフィルタ33a,33b、第2のレンズ32bを介して、第2のレンズ32bと第3の色ガラスフィルタ33cの間の透明なシリコーン樹脂6が充填された空間に入射するが、その空間を包囲する顔料含有シリコーン樹脂61内に入射して当該顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により吸収される。
なお、上記顔料含有シリコーン樹脂61内に入射せず、第2のノッチフィルタ31bに再入射したこれらの光は、第2のノッチフィルタ31b表面において反射されたり、第2のノッチフィルタ31bを通過したりするが、これらの光の強度は著しく小さく、仮に蛍光測定器である光電子増倍管4に入射したとしても測定結果には殆ど影響を及ぼさないレベルであるので、ここでは考慮しない。
第2の色ガラスフィルタ33bを通過した波長570nm〜580nmの測定対象蛍光、ならびに、第1および第2の色ガラスフィルタ33a,33bから放出される2次蛍光は、第2のレンズ32bに入射する。
前記したように本実施例においては、第1のレンズ32aと第2のレンズ32bの間の空間は空洞となっており、この空間とアパーチャ34との間に充填された透明なシリコーン樹脂6の該空間側の端面がレンズ形状をしている。すなわち、上記透明なシリコーン樹脂6の端面が第2のレンズ32bを構成している。第2のレンズ32bは、第2の色ガラスフィルタ33bの近傍に配置される。
第2のレンズ32bは集光レンズであり、平行光である波長570nm〜580nmの測定対象蛍光の集光位置近傍であって、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光の光軸上にピンホール形状のアパーチャ34が設けられる。
図4に示すように、本蛍光収集光学系3においては、アパーチャ34の開口領域はPDMS製シリコーン樹脂6が占有し、アパーチャ34の遮光領域は顔料含有シリコーン樹脂61が占有する。
なお、僅かながら、2次蛍光の一部も開口を通過するが、その光量は蛍光測定器である光電子増倍管4に入射したとしても測定結果には殆ど影響を及ぼさないくらいに小さい。
アパーチャ34を通過した波長570nm〜580nmの測定対象蛍光、および2次蛍光は、アパーチャ34の光出射側に配置された第3の色ガラスフィルタ33cに入射する。第3の色ガラスフィルタ33cの光出射側は、蛍光測定器である光電子増倍管4の受光部分と近接している。
第3の色ガラスフィルタ33cは、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光を透過し、その他の波長域の光は吸収するように設計されている。
第3の色ガラスフィルタ33cは光電子増倍管4の保護フィルタとして機能し、波長570nm〜580nmの測定対象蛍光以外は殆ど透過しない。
励起光による迷光、試料ケースからの自家蛍光の迷光、PDMSから発生するラマン光等がシリコーン樹脂6占有領域から顔料含有シリコーン樹脂61占有領域に入射すると、これらの光は、前記したように顔料含有シリコーン樹脂61に含有される顔料により急激に吸収される。ここで、シリコーン樹脂6と顔料含有シリコーン樹脂61とは屈折率自体は同一であるものの、急激に上記光が吸収される領域の近傍では屈折率分散の状態が複雑に変化すると、その境界面近傍での屈折率分散の状態の複雑な変化により、ごく僅かではあるが上記境界面もしくは境界面近傍において光の反射が発生する場合がある。
しかし、実際には、前記したように、上記樹脂6と顔料含有樹脂61の境界においては、樹脂に対して顔料の含有量が傾斜状に増加するようになると考えられ、上記光の反射は極めて少なくなる。
この場合、シリコーン樹脂6に対する顔料含有シリコーン樹脂61aの顔料含有量の差、顔料含有シリコーン樹脂61aの顔料含有量と顔料含有シリコーン樹脂61bの顔料含有量との差、顔料含有シリコーン樹脂61bの顔料含有量と顔料含有シリコーン樹脂61cの顔料含有量との差、顔料含有シリコーン樹脂61cの顔料含有量と顔料含有シリコーン樹脂61dの顔料含有量との差は、いずれもシリコーン樹脂6に対する顔料含有シリコーン樹脂61dの顔料含有量の差よりも小さい。
従って、シリコーン樹脂6と顔料含有シリコーン樹脂61aとの境界面近傍における上記光の吸収状態の変化は、シリコーン樹脂6から顔料含有シリコーン樹脂61dに直接入射する場合より小さくなるので、上記光が吸収される領域の近傍での屈折率分散の状態の変化も小さくなる。
すなわち、シリコーン樹脂6と顔料含有シリコーン樹脂61aとの境界面もしくは境界面近傍において光の反射が発生した場合、その強度は比較的小さくなる。
すなわち、顔料含有シリコーン樹脂61aと顔料含有シリコーン樹脂61bとの境界面もしくは境界面近傍において光の反射が発生した場合、その強度はシリコーン樹脂6から顔料含有シリコーン樹脂61dに直接入射する場合より小さくなる。なお、この反射光は顔料含有シリコーン樹脂61aを再度通過することになるので、当該顔料含有シリコーン樹脂61aにより吸収され、シリコーン樹脂6占有領域には殆ど進入しない。
従って、顔料含有シリコーン樹脂61bと顔料含有シリコーン樹脂61cとの境界面近傍における上記光の吸収状態の変化は、シリコーン樹脂6から顔料含有シリコーン樹脂61dに直接入射する場合より小さくなるので、上記光が吸収される領域の近傍での屈折率分散の状態の変化も小さくなる。
なお、顔料含有シリコーン樹脂61dに入射する光の強度は、著しく小さくなっているので、上記反射光が発生したとしても、顔料含有シリコーン樹脂61c内でほぼ全て吸収されるものと考えられる。よって、この反射光は、シリコーン樹脂6占有領域には再進入しない。
2 試料ケース
2a 試料ケース挿入部
2b 遮光キャップ
2c 遮光部
3 蛍光収集光学系
4 光電子増倍管
5 電力源
6 シリコーン樹脂
7 レーザ照射空間
10 レーザ誘起蛍光測定器本体
2b 遮光キャップ
2c 遮光部
31a 第1のノッチフィルタ
31b 第2のノッチフィルタ
32a 第1のレンズ
32b 第2のレンズ
33a 第1の色ガラスフィルタ
33b 第2の色ガラスフィルタ
33c 第3の色ガラスフィルタ
34 アパーチャ
61 顔料含有シリコーン樹脂
L レーザビーム
S 被測定試料
Claims (5)
- 固体光源と、試料を保持する試料保持部材と、上記試料保持部材に保持された試料から放出される蛍光を検出する蛍光測定器と、上記試料から放出される蛍光を収集し上記蛍光測定器まで導光する蛍光収集光学系とからなる光誘起蛍光測定器であって、
上記試料保持部材は、励起光である該固体光源から出射する光及び上記試料から放出される蛍光に対して透明であり、
上記固体光源、試料保持部材、蛍光測定器、及び蛍光収集光学系は、上記固体光源から出射する励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光に対して透明な樹脂内に埋設されているとともに、上記蛍光収集光学系の上記蛍光を導光する光路の少なくとも一部に上記樹脂が充填され、上記樹脂が、上記試料保持部材、蛍光測定器、及び、蛍光収集光学系を保持する筐体を構成しており、
上記励起光および試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を包囲する樹脂領域には、上記励起光、上記試料保持部材に上記励起光が照射される際に発生する自家蛍光、及び上記励起光が上記樹脂内を進行する際、上記樹脂から発生するラマン光を吸収する波長特性を有する顔料が含有されていて、
上記顔料の含有量が、上記励起光及び上記試料から放出される蛍光を含む光が通過する光路を含む空間において発生し該光路外へ進行する光を全て吸収する量に設定されている
ことを特徴とする光誘起蛍光測定器。 - 上記蛍光収集光学系は、少なくとも、レンズ、ノッチフィルタ、色ガラスフィルタを含むことを特徴とする請求項1に記載の光誘起蛍光測定器。
- 上記蛍光収集光学系には2個のレンズが設けられ、該2個のレンズが対向する空間は、上記樹脂が充填されていない空洞となっており、該空洞と該樹脂との境界面はレンズ形状に形成され、該樹脂の一部が上記レンズを構成している
ことを特徴とする請求項2に記載の光誘起蛍光測定器。 - 上記蛍光収集光学系が、上記励起光および試料から放出される蛍光を含む光が入射する側から順に、上記固体光源から出射する励起光の波長の光を反射する第1のノッチフィルタと、上記励起光および上記試料から放出される蛍光を含む光を平行光にする第1のレンズと、上記励起光の波長の光を反射する第2のノッチフィルタと、試料から放出される蛍光以外の光を吸収する第1の色ガラスフィルタと、上記蛍光を含む光を集光する第2のレンズと、第2のレンズの光軸上であって、蛍光の集光位置近傍に配置されるアパーチャとから構成される
ことを特徴とする請求項2もしくは請求項3のいずれか一項に記載の光誘起蛍光測定器。 - 上記試料保持部材に保持される試料は、
抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドとを備え、前記抗体軽鎖可変領域ポリペプチドと抗体重鎖可変領域ポリペプチドのいずれか一方が蛍光色素により標識されたキットを含む
ことを特徴とする請求項1、請求項2、請求項3もしくは請求項4のいずれか一項に記載の光誘起蛍光測定器。
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012171825A JP5665811B2 (ja) | 2012-08-02 | 2012-08-02 | 光誘起蛍光測定器 |
US14/417,905 US9683936B2 (en) | 2012-08-02 | 2013-07-05 | Light-induced fluorescent measuring device |
EP13825500.5A EP2881726B1 (en) | 2012-08-02 | 2013-07-05 | Light-induced fluorescent measuring device |
PCT/JP2013/068477 WO2014021055A1 (ja) | 2012-08-02 | 2013-07-05 | 光誘起蛍光測定器 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012171825A JP5665811B2 (ja) | 2012-08-02 | 2012-08-02 | 光誘起蛍光測定器 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014032064A true JP2014032064A (ja) | 2014-02-20 |
JP5665811B2 JP5665811B2 (ja) | 2015-02-04 |
Family
ID=50027742
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012171825A Active JP5665811B2 (ja) | 2012-08-02 | 2012-08-02 | 光誘起蛍光測定器 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9683936B2 (ja) |
EP (1) | EP2881726B1 (ja) |
JP (1) | JP5665811B2 (ja) |
WO (1) | WO2014021055A1 (ja) |
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016088760A1 (ja) * | 2014-12-05 | 2016-06-09 | 国立大学法人九州大学 | 光測定装置及び光測定方法 |
US9448169B2 (en) | 2013-09-20 | 2016-09-20 | Kyushu University, National University Corporation | Light measuring apparatus, light measuring method, filter member, and method of making filter member |
WO2016175262A1 (ja) * | 2015-04-28 | 2016-11-03 | 国立大学法人九州大学 | 光学フィルタ部材を生産する方法、光学フィルタ部材及び光測定装置 |
JP2017067719A (ja) * | 2015-10-02 | 2017-04-06 | ウシオ電機株式会社 | 光学測定器 |
JP2017078653A (ja) * | 2015-10-21 | 2017-04-27 | 国立大学法人九州大学 | 光分析方法、プログラム、光分析システム及び導光路内蔵チップ |
WO2017073196A1 (ja) * | 2015-10-27 | 2017-05-04 | ウシオ電機株式会社 | 光測定装置 |
JP2017138245A (ja) * | 2016-02-05 | 2017-08-10 | 国立大学法人九州大学 | 観測光導光システム、観測光導光部材及び導光方法 |
JP2017156331A (ja) * | 2016-03-04 | 2017-09-07 | 国立大学法人九州大学 | 光学系構造体、光学測定装置及び光学測定方法 |
JP2018089910A (ja) * | 2016-12-06 | 2018-06-14 | 国立大学法人九州大学 | 空洞包含樹脂の製造方法及び型枠 |
WO2018159149A1 (ja) * | 2017-03-03 | 2018-09-07 | 国立大学法人熊本大学 | 光学測定システム、光学セル及び光学測定方法 |
JP2019179046A (ja) * | 2017-09-01 | 2019-10-17 | ウシオ電機株式会社 | マイクロプレートリーダーユニット |
JP2020064000A (ja) * | 2018-10-18 | 2020-04-23 | シチズン時計株式会社 | 蛍光検出装置 |
US10739506B2 (en) | 2015-05-27 | 2020-08-11 | Kyushu University, National University Corporation | Optical member, light guiding member, and method for producing optical member |
WO2022185130A1 (en) * | 2021-03-05 | 2022-09-09 | 3M Innovative Properties Company | Optical stack, optical system, optical detection system, and optical imaging system |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6410194B2 (ja) * | 2014-07-24 | 2018-10-24 | 国立大学法人九州大学 | 温度制御モジュールおよび光測定装置 |
JP6399520B2 (ja) * | 2015-03-16 | 2018-10-03 | 国立大学法人九州大学 | 光測定装置及び光測定方法 |
CN105444785B (zh) * | 2015-12-25 | 2018-01-30 | 中国科学院光电研究院 | 一种扫描平面激光的光程补偿装置及其方法 |
US20200064262A1 (en) * | 2016-12-06 | 2020-02-27 | Kyushu University, National University Corporation | Optical member, light measuring device, sample holding member, light measuring system and specific wavelength light gathering member |
WO2019009209A1 (ja) | 2017-07-04 | 2019-01-10 | 国立大学法人九州大学 | 光測定装置、導光部材及び光測定方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1062349A (ja) * | 1996-08-23 | 1998-03-06 | Kdk Corp | 温度センサ付き光学系 |
JPH11271217A (ja) * | 1998-03-20 | 1999-10-05 | Hoechst Reseach & Technology Kk | 光学的センサ |
JP2000241428A (ja) * | 1999-02-19 | 2000-09-08 | Japan Advanced Inst Of Science & Technology Hokuriku | 抗原の測定方法及び測定装置 |
JP2012208134A (ja) * | 2007-06-08 | 2012-10-25 | Hamamatsu Photonics Kk | 分光器 |
JP2013518270A (ja) * | 2010-01-28 | 2013-05-20 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 特に、血中グルコースを測定するための、測定装置および測定方法 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0244394B1 (de) * | 1986-04-23 | 1992-06-17 | AVL Medical Instruments AG | Sensorelement zur Bestimmung von Stoffkonzentrationen |
JPH0778564B2 (ja) * | 1988-03-09 | 1995-08-23 | 日立電線株式会社 | プラスチック光ファイバの製造方法 |
US5006210A (en) * | 1989-02-06 | 1991-04-09 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Means and method for capillary zone electrophoresis with laser-induced indirect fluorescence detection |
US5360739A (en) * | 1991-12-05 | 1994-11-01 | Miles Inc. | Methods for the identification and characterization of reticulocytes in whole blood |
JP3985454B2 (ja) * | 2001-01-19 | 2007-10-03 | 株式会社日立製作所 | 電気泳動装置 |
US6867420B2 (en) | 2002-06-03 | 2005-03-15 | The Regents Of The University Of California | Solid-state detector and optical system for microchip analyzers |
US20040120667A1 (en) * | 2002-12-23 | 2004-06-24 | Eastman Kodak Company | Walled network optical component |
JP5112312B2 (ja) | 2005-07-15 | 2013-01-09 | バイオヴィジラント システムズ インコーポレイテッド | 病原体及び微粒子検出システム並びに検出法 |
WO2007054710A2 (en) * | 2005-11-11 | 2007-05-18 | Molecular Vision Limited | Microfluidic device |
JP4734273B2 (ja) | 2007-02-28 | 2011-07-27 | 新日本製鐵株式会社 | レーザ誘起蛍光分析装置 |
JP4953074B2 (ja) | 2007-05-23 | 2012-06-13 | 公立大学法人首都大学東京 | レーザ誘起蛍光法による大気中の窒素酸化物濃度測定方法及び装置 |
WO2010009543A1 (en) * | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Valorbec S.E.C. | A microfluidic device and method for fabricating the microfluidic device |
EP2515110B1 (en) | 2009-11-19 | 2015-03-25 | Ushio Denki Kabushiki Kaisha | Fluoroimmunoassay method |
US20140030800A1 (en) * | 2010-04-04 | 2014-01-30 | Jonas Moses | Methods and compositions for a multipurpose, lab-on-chip device |
-
2012
- 2012-08-02 JP JP2012171825A patent/JP5665811B2/ja active Active
-
2013
- 2013-07-05 US US14/417,905 patent/US9683936B2/en active Active
- 2013-07-05 EP EP13825500.5A patent/EP2881726B1/en not_active Not-in-force
- 2013-07-05 WO PCT/JP2013/068477 patent/WO2014021055A1/ja active Application Filing
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1062349A (ja) * | 1996-08-23 | 1998-03-06 | Kdk Corp | 温度センサ付き光学系 |
JPH11271217A (ja) * | 1998-03-20 | 1999-10-05 | Hoechst Reseach & Technology Kk | 光学的センサ |
JP2000241428A (ja) * | 1999-02-19 | 2000-09-08 | Japan Advanced Inst Of Science & Technology Hokuriku | 抗原の測定方法及び測定装置 |
JP2012208134A (ja) * | 2007-06-08 | 2012-10-25 | Hamamatsu Photonics Kk | 分光器 |
JP2013518270A (ja) * | 2010-01-28 | 2013-05-20 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 特に、血中グルコースを測定するための、測定装置および測定方法 |
Cited By (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9448169B2 (en) | 2013-09-20 | 2016-09-20 | Kyushu University, National University Corporation | Light measuring apparatus, light measuring method, filter member, and method of making filter member |
WO2016088760A1 (ja) * | 2014-12-05 | 2016-06-09 | 国立大学法人九州大学 | 光測定装置及び光測定方法 |
JP2016109564A (ja) * | 2014-12-05 | 2016-06-20 | 国立大学法人九州大学 | 光測定装置及び光測定方法 |
WO2016175262A1 (ja) * | 2015-04-28 | 2016-11-03 | 国立大学法人九州大学 | 光学フィルタ部材を生産する方法、光学フィルタ部材及び光測定装置 |
US10739506B2 (en) | 2015-05-27 | 2020-08-11 | Kyushu University, National University Corporation | Optical member, light guiding member, and method for producing optical member |
JP2017067719A (ja) * | 2015-10-02 | 2017-04-06 | ウシオ電機株式会社 | 光学測定器 |
JP2017078653A (ja) * | 2015-10-21 | 2017-04-27 | 国立大学法人九州大学 | 光分析方法、プログラム、光分析システム及び導光路内蔵チップ |
WO2017073196A1 (ja) * | 2015-10-27 | 2017-05-04 | ウシオ電機株式会社 | 光測定装置 |
JP2017083244A (ja) * | 2015-10-27 | 2017-05-18 | ウシオ電機株式会社 | 光測定装置 |
TWI671518B (zh) * | 2015-10-27 | 2019-09-11 | 日商牛尾電機股份有限公司 | 光測定裝置 |
JP2017138245A (ja) * | 2016-02-05 | 2017-08-10 | 国立大学法人九州大学 | 観測光導光システム、観測光導光部材及び導光方法 |
JP2017156331A (ja) * | 2016-03-04 | 2017-09-07 | 国立大学法人九州大学 | 光学系構造体、光学測定装置及び光学測定方法 |
WO2017150369A1 (ja) * | 2016-03-04 | 2017-09-08 | 国立大学法人九州大学 | 光学系構造体、光学測定装置及び光学測定方法 |
KR102150577B1 (ko) * | 2016-03-04 | 2020-09-01 | 우시오덴키 가부시키가이샤 | 광학계 구조체, 광학 측정 장치 및 광학 측정 방법 |
KR20180113609A (ko) * | 2016-03-04 | 2018-10-16 | 고쿠리쓰다이가쿠호진 규슈다이가쿠 | 광학계 구조체, 광학 측정 장치 및 광학 측정 방법 |
JP2018089910A (ja) * | 2016-12-06 | 2018-06-14 | 国立大学法人九州大学 | 空洞包含樹脂の製造方法及び型枠 |
WO2018159149A1 (ja) * | 2017-03-03 | 2018-09-07 | 国立大学法人熊本大学 | 光学測定システム、光学セル及び光学測定方法 |
CN110383041A (zh) * | 2017-03-03 | 2019-10-25 | 国立大学法人熊本大学 | 光学测定系统、光学单元以及光学测定方法 |
JP2018146366A (ja) * | 2017-03-03 | 2018-09-20 | 国立大学法人 熊本大学 | 光学測定システム、光学セル及び光学測定方法 |
CN110383041B (zh) * | 2017-03-03 | 2021-12-21 | 国立大学法人熊本大学 | 光学测定系统、光学单元以及光学测定方法 |
JP2019179046A (ja) * | 2017-09-01 | 2019-10-17 | ウシオ電機株式会社 | マイクロプレートリーダーユニット |
US11009457B2 (en) | 2017-09-01 | 2021-05-18 | Ushio Denki Kabushiki Kaisha | Microplate reader |
JP2020064000A (ja) * | 2018-10-18 | 2020-04-23 | シチズン時計株式会社 | 蛍光検出装置 |
JP7094195B2 (ja) | 2018-10-18 | 2022-07-01 | シチズン時計株式会社 | 蛍光検出装置 |
WO2022185130A1 (en) * | 2021-03-05 | 2022-09-09 | 3M Innovative Properties Company | Optical stack, optical system, optical detection system, and optical imaging system |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5665811B2 (ja) | 2015-02-04 |
EP2881726A4 (en) | 2016-01-20 |
EP2881726A1 (en) | 2015-06-10 |
US20150153279A1 (en) | 2015-06-04 |
US9683936B2 (en) | 2017-06-20 |
EP2881726B1 (en) | 2017-03-08 |
WO2014021055A1 (ja) | 2014-02-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5665811B2 (ja) | 光誘起蛍光測定器 | |
ES2365649T3 (es) | Dispositivo de espectrometría para el análisis de fluidos. | |
ES2589958T3 (es) | Detector químico óptico y método asociado | |
US20180038798A1 (en) | Portable raman device | |
JP6399520B2 (ja) | 光測定装置及び光測定方法 | |
EP1865305A1 (en) | Fluorescent measuring device, fluorescent measuring method, container for fluorescent measurement, and method for manufacturing the container for fluorescent measurement | |
US8455845B2 (en) | Method for detecting drag reducer additives in gasoline | |
US8759789B2 (en) | Body module for an optical measurement instrument | |
EP3673256B1 (en) | A fluorescence measurement apparatus, a system and a method for determining composition of a sample | |
US9448169B2 (en) | Light measuring apparatus, light measuring method, filter member, and method of making filter member | |
US11313798B2 (en) | Optical measuring device, light guide member, and optical measuring method | |
CN206270247U (zh) | 一种微型毛细管荧光仪 | |
CN106404741B (zh) | 基于双空芯光纤的增强拉曼光谱液体探测方法 | |
JP2008512666A (ja) | 増幅発光近接均質解析(AmplifiedLuminescentProximityHomogeneousAssay)の光学的測定に適合する器具類および方法 | |
CN110892249B (zh) | 光测定装置、导光部件以及光测定方法 | |
WO2016088760A1 (ja) | 光測定装置及び光測定方法 | |
JP2020085615A (ja) | 光学測定器 | |
CN106353294A (zh) | 一种微型毛细管荧光仪 | |
KR102150577B1 (ko) | 광학계 구조체, 광학 측정 장치 및 광학 측정 방법 | |
Kist | Fluorescent Dye Labels and Stains: A Database of Photophysical Properties | |
US20240230589A1 (en) | Capillary electrophoresis device | |
WO2013136891A1 (ja) | 光分析装置、光分析用レンズおよび光分析用容器 | |
CN106645080A (zh) | 基于激光倍频及双空芯光纤的拉曼光谱液体探测方法 | |
Melikechi et al. | Laser‐induced breakdown spectroscopy of alcohols and protein solutions | |
WO2018159149A1 (ja) | 光学測定システム、光学セル及び光学測定方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20141003 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20141003 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20141201 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20141209 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20141209 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5665811 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |