JP2000241428A - 抗原の測定方法及び測定装置 - Google Patents
抗原の測定方法及び測定装置Info
- Publication number
- JP2000241428A JP2000241428A JP11040812A JP4081299A JP2000241428A JP 2000241428 A JP2000241428 A JP 2000241428A JP 11040812 A JP11040812 A JP 11040812A JP 4081299 A JP4081299 A JP 4081299A JP 2000241428 A JP2000241428 A JP 2000241428A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- enzyme
- sample
- antigen
- capillary column
- antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 多数のサンプルを同時に処理する事が可能で
ある、高感度な抗原測定方法を開発する。 【解決手段】 微量のサンプルを酵素標識抗体とインキ
ュベートして抗原抗体反応を行い、反応生成物をキャピ
ラリー電気泳動によって高速に分離して、分離後に泳動
液中の蛍光基質と酵素反応させて蛍光色素を生成する事
により、目的抗原を高感度に検出する事を可能とした。
ある、高感度な抗原測定方法を開発する。 【解決手段】 微量のサンプルを酵素標識抗体とインキ
ュベートして抗原抗体反応を行い、反応生成物をキャピ
ラリー電気泳動によって高速に分離して、分離後に泳動
液中の蛍光基質と酵素反応させて蛍光色素を生成する事
により、目的抗原を高感度に検出する事を可能とした。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、高感度であって微
量分析が可能な、新規の抗原測定方法及び測定装置に関
する。
量分析が可能な、新規の抗原測定方法及び測定装置に関
する。
【０００２】
【従来の技術】近年の臨床生化学において、正確さだけ
でなく、高い処理能力、サイズの小型化、使い易さ、管
理費用の安さなどを備えた免疫測定装置が求められてい
る。従来免疫の測定方法として、抗体を固定化したプレ
ートに抗原を添加した後、標識抗体を更に反応させて、
標識を利用して検出するサンドイッチ法が用いられて来
た。更に、試料を標識した抗原と混合してから添加し
て、試料中の抗原と競争的に反応させて、固定化された
標識量から逆算する競合法もまた用いられてきた。
でなく、高い処理能力、サイズの小型化、使い易さ、管
理費用の安さなどを備えた免疫測定装置が求められてい
る。従来免疫の測定方法として、抗体を固定化したプレ
ートに抗原を添加した後、標識抗体を更に反応させて、
標識を利用して検出するサンドイッチ法が用いられて来
た。更に、試料を標識した抗原と混合してから添加し
て、試料中の抗原と競争的に反応させて、固定化された
標識量から逆算する競合法もまた用いられてきた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上述した方法におい
て、サンドイッチ法は二度の抗原抗体反応が必要であ
り、かつその反応が可能な量の抗体を用いなければなら
ない。競合法は試料と標識抗原の競合を検出する、とい
う原理より再現性の点で劣っている。又、いずれも数十
マイクロリットル以上のサンプル量が必要であり、かつ
溶液でバッチ方式の反応を繰り返さなければならない。
そのため測定装置の自動化には複雑な可動部を要するた
め、多数のサンプル中の抗原量を微量のサンプル量で測
定する目的には適さない。
て、サンドイッチ法は二度の抗原抗体反応が必要であ
り、かつその反応が可能な量の抗体を用いなければなら
ない。競合法は試料と標識抗原の競合を検出する、とい
う原理より再現性の点で劣っている。又、いずれも数十
マイクロリットル以上のサンプル量が必要であり、かつ
溶液でバッチ方式の反応を繰り返さなければならない。
そのため測定装置の自動化には複雑な可動部を要するた
め、多数のサンプル中の抗原量を微量のサンプル量で測
定する目的には適さない。
【０００４】
【課題を解決するための手段】そこで本発明において、
自動化の目的にも適しており、微量のタンパク質を高感
度で分離可能な、キャピラリー電気泳動の手段を用い
た。アルカリフォスファターゼで標識され、かつ抗原タ
ンパク質に対して特異的に結合する抗体とサンプルとを
インキュベーションして、反応生成物につきキャピラリ
ー電気泳動で分離を行った。分離バッファー中に、アル
カリフォスファターゼの基質となるフルオレセインジフ
ォスフェートを添加しておき、キャピラリー上で酵素反
応を行って、生成したフルオレセインを検出する事によ
り、単独の抗体及び抗原抗体複合体を分離分析する事が
可能となった。
自動化の目的にも適しており、微量のタンパク質を高感
度で分離可能な、キャピラリー電気泳動の手段を用い
た。アルカリフォスファターゼで標識され、かつ抗原タ
ンパク質に対して特異的に結合する抗体とサンプルとを
インキュベーションして、反応生成物につきキャピラリ
ー電気泳動で分離を行った。分離バッファー中に、アル
カリフォスファターゼの基質となるフルオレセインジフ
ォスフェートを添加しておき、キャピラリー上で酵素反
応を行って、生成したフルオレセインを検出する事によ
り、単独の抗体及び抗原抗体複合体を分離分析する事が
可能となった。
【０００５】
【実施例】本発明の測定装置の基本的な構成を図１に示
す。当該装置は、磁場の生成の為に用いる高電圧電源
（ａ）、試料を分離するためのポリイミドで被覆された
フューズトシリカキャピラリーカラム（ｂ）及びバッフ
ァーバイアル（ｃ）及び蛍光検出システムより構成さ
れ、キャピラリーの両端及びプラチナ電極を、バッファ
ーリザーバー中に浸した。蛍光検出システムは、集光レ
ンズ（ｄ）、ミラー（ｅ）、蛍光用フィルター（ｆ）光
電子増倍管（ｇ）及びアルゴンイオンレーザー（ｈ）
（４８８ｎｍ）を備えた倒立型落射蛍光顕微鏡を組み合
わせて構成した。
す。当該装置は、磁場の生成の為に用いる高電圧電源
（ａ）、試料を分離するためのポリイミドで被覆された
フューズトシリカキャピラリーカラム（ｂ）及びバッフ
ァーバイアル（ｃ）及び蛍光検出システムより構成さ
れ、キャピラリーの両端及びプラチナ電極を、バッファ
ーリザーバー中に浸した。蛍光検出システムは、集光レ
ンズ（ｄ）、ミラー（ｅ）、蛍光用フィルター（ｆ）光
電子増倍管（ｇ）及びアルゴンイオンレーザー（ｈ）
（４８８ｎｍ）を備えた倒立型落射蛍光顕微鏡を組み合
わせて構成した。
【０００６】本発明の測定方法において、アルカリフォ
スファターゼ（ＡＬＰ）でラベルした抗体を、キャピラ
リー電気泳動により分離を行い、フルオレセインジフォ
スフェート（ＦＤＰ）を加水分解して、生成物であるフ
ルオレセインを生成し、生成したフルオレセインをレー
ザー励起蛍光検出法（ＬＩＦ）により検出する。ＦＤＰ
は感度の高いフォスファターゼ基質であり、蛍光は検出
されない。ＦＤＰ及びフルオレセインは共にアルカリ性
条件下で水に可溶性であり、アルカリフォスファターゼ
活性の検出には高いｐＨが必要とされるが、高いｐＨは
生成物の蛍光の増強という点でも有利である。
スファターゼ（ＡＬＰ）でラベルした抗体を、キャピラ
リー電気泳動により分離を行い、フルオレセインジフォ
スフェート（ＦＤＰ）を加水分解して、生成物であるフ
ルオレセインを生成し、生成したフルオレセインをレー
ザー励起蛍光検出法（ＬＩＦ）により検出する。ＦＤＰ
は感度の高いフォスファターゼ基質であり、蛍光は検出
されない。ＦＤＰ及びフルオレセインは共にアルカリ性
条件下で水に可溶性であり、アルカリフォスファターゼ
活性の検出には高いｐＨが必要とされるが、高いｐＨは
生成物の蛍光の増強という点でも有利である。
【０００７】当該測定方法の概略を図２に示す。即ち、
当該測定方法は、（１）分離バッファーで平衡化を行い
（この間に抗原と抗体をインキュベートする）（図２−
１）、（２）落差法によりサンプルを注入し（図２−
２）、（３）キャピラリー電気泳動により分離を行い
（図２−３）、（４）アルカリフォスファターゼの反応
を行い（図２−４）、（５）反応生成物を移動してＬＩ
Ｆによる検出を行う（図２−５）、という過程より成
る。
当該測定方法は、（１）分離バッファーで平衡化を行い
（この間に抗原と抗体をインキュベートする）（図２−
１）、（２）落差法によりサンプルを注入し（図２−
２）、（３）キャピラリー電気泳動により分離を行い
（図２−３）、（４）アルカリフォスファターゼの反応
を行い（図２−４）、（５）反応生成物を移動してＬＩ
Ｆによる検出を行う（図２−５）、という過程より成
る。
【０００８】最初に、ＦＤＰを基質として含む分離バッ
ファー（５ｎＭＦＤＰを含有する２０ｍＭホウ酸バッフ
ァー、ｐＨ１０．０）で、キャピラリーを平衡化する。
その間に抗体を抗原とインキュベートして、抗原抗体反
応を行う。天然においてＦＤＰの加水分解量は少ないの
で、キャピラリー中においてこの段階で検出される蛍光
はバックグラウンドレベルである（図２−１）。次い
で、３秒間１０ｃｍの落差法により、サンプルを導入す
る（約０．９ｎｌ）。この時点において、サンプル中の
成分（成分ｉ：抗原抗体複合体、成分ｊ；抗体単独）は
分離されておらず、バッファー中にＦＤＰは存在してい
ないため、蛍光強度の変化は検出されない（図２−
２）。
ファー（５ｎＭＦＤＰを含有する２０ｍＭホウ酸バッフ
ァー、ｐＨ１０．０）で、キャピラリーを平衡化する。
その間に抗体を抗原とインキュベートして、抗原抗体反
応を行う。天然においてＦＤＰの加水分解量は少ないの
で、キャピラリー中においてこの段階で検出される蛍光
はバックグラウンドレベルである（図２−１）。次い
で、３秒間１０ｃｍの落差法により、サンプルを導入す
る（約０．９ｎｌ）。この時点において、サンプル中の
成分（成分ｉ：抗原抗体複合体、成分ｊ；抗体単独）は
分離されておらず、バッファー中にＦＤＰは存在してい
ないため、蛍光強度の変化は検出されない（図２−
２）。
【０００９】第３段階として、３０ｋＶの電圧を１分間
かけてサンプルを分離した。これにより成分は抗体単独
（成分ｊ）あるいは抗原抗体複合体（成分ｉ）等、それ
ぞれの成分の性質に応じて移動する（図２−３）。第４
段階として電圧印加を止めて泳動を中止して、酵素反応
を行った（２分間）。インキュベートする事によりバッ
ファー中のＦＤＰを基質としてサンプル中のＡＬＰが加
水分解されて、フルオレセインが生成する（図２−
４）。その際、抗原抗体複合体（成分ｉ）に対応する蛍
光（ピークｋ）、抗体単独（成分ｊ）に対応する蛍光
（ピークｌ）が発生する。最後に再び電圧をかけて（３
０ｋＶ、１０分間）、ピークｃ及びピークｄに対応する
フルオレセインの蛍光を検出する（図２−５）。この段
階において、再び泳動を開始した時間を０分として、蛍
光強度をモニタリングする。測定の後、０．１ＭのＮａ
ＯＨ溶液を５分間流して、付着したタンパク質を洗浄す
る。
かけてサンプルを分離した。これにより成分は抗体単独
（成分ｊ）あるいは抗原抗体複合体（成分ｉ）等、それ
ぞれの成分の性質に応じて移動する（図２−３）。第４
段階として電圧印加を止めて泳動を中止して、酵素反応
を行った（２分間）。インキュベートする事によりバッ
ファー中のＦＤＰを基質としてサンプル中のＡＬＰが加
水分解されて、フルオレセインが生成する（図２−
４）。その際、抗原抗体複合体（成分ｉ）に対応する蛍
光（ピークｋ）、抗体単独（成分ｊ）に対応する蛍光
（ピークｌ）が発生する。最後に再び電圧をかけて（３
０ｋＶ、１０分間）、ピークｃ及びピークｄに対応する
フルオレセインの蛍光を検出する（図２−５）。この段
階において、再び泳動を開始した時間を０分として、蛍
光強度をモニタリングする。測定の後、０．１ＭのＮａ
ＯＨ溶液を５分間流して、付着したタンパク質を洗浄す
る。
【００１０】当該装置を用いて、再泳動を開始した時間
を０分として蛍光強度の検出を行った。抗原抗体反応を
行わない未反応サンプル（アルカリフォスファターゼラ
ベルしたヤギ抗ラットイムノグロブリンＧ）を分析した
ところ、ただ一本のピークが検出された（図３）。ピー
クの同定を行うために、抗原と抗体の比率を変えてイン
キュベーションを行ったサンプルの分析を行った。抗原
抗体反応は、アルカリフォスファターゼラベルしたヤギ
抗ラットイムノグロブリンＧと、その抗原であるラット
イムノグロブリンＧを混合して、２０ｍＭホウ酸バッフ
ァー（ｐＨ１０．０）中において温室で３０分間反応さ
せる事により行った。抗体と抗原の比率はそれぞれ、
０．４：１（図４−１）、０．１：１（図４−２）、
０．０５：１（図４−３）とした。その結果、抗原を増
やして反応を行うと最初のピークが大きくなった事に対
して、二番目のピークが小さくなる現象が認められた。
よって最初のピークが抗原抗体複合体に、二番目のピー
クが抗体単独に、それぞれ相当すると考えられる。
を０分として蛍光強度の検出を行った。抗原抗体反応を
行わない未反応サンプル（アルカリフォスファターゼラ
ベルしたヤギ抗ラットイムノグロブリンＧ）を分析した
ところ、ただ一本のピークが検出された（図３）。ピー
クの同定を行うために、抗原と抗体の比率を変えてイン
キュベーションを行ったサンプルの分析を行った。抗原
抗体反応は、アルカリフォスファターゼラベルしたヤギ
抗ラットイムノグロブリンＧと、その抗原であるラット
イムノグロブリンＧを混合して、２０ｍＭホウ酸バッフ
ァー（ｐＨ１０．０）中において温室で３０分間反応さ
せる事により行った。抗体と抗原の比率はそれぞれ、
０．４：１（図４−１）、０．１：１（図４−２）、
０．０５：１（図４−３）とした。その結果、抗原を増
やして反応を行うと最初のピークが大きくなった事に対
して、二番目のピークが小さくなる現象が認められた。
よって最初のピークが抗原抗体複合体に、二番目のピー
クが抗体単独に、それぞれ相当すると考えられる。
【００１１】ところで、得られたクロマトグラムのピー
ク面積は、アルカリフォスファターゼの酵素活性と比例
している。そこで当該測定方法は、アルカリフォスファ
ターゼのアイソザイムを分離して酵素活性を測定する目
的にも直接に使用可能であると思われる。
ク面積は、アルカリフォスファターゼの酵素活性と比例
している。そこで当該測定方法は、アルカリフォスファ
ターゼのアイソザイムを分離して酵素活性を測定する目
的にも直接に使用可能であると思われる。
【００１２】
【発明の効果】本発明により、数ナノリットルという微
量のサンプルで、抗原量の高感度な測定を可能とする測
定方法及び測定装置が提供された。本測定方法は、アル
カリフォスファターゼのアイソザイムを分離してそれぞ
れの酵素活性を測定する目的にも有効である。
量のサンプルで、抗原量の高感度な測定を可能とする測
定方法及び測定装置が提供された。本測定方法は、アル
カリフォスファターゼのアイソザイムを分離してそれぞ
れの酵素活性を測定する目的にも有効である。
【図１】 本発明の測定装置の構成の模試図を示す。
【図２】 本発明の測定方法の概略。上のグラフはキャ
ピラリー中のフルオレセインの濃度、下の図はキャピラ
リー中におけるサンプル成分の位置を示す。
ピラリー中のフルオレセインの濃度、下の図はキャピラ
リー中におけるサンプル成分の位置を示す。
【図３】 本装置を用いて、抗原抗体反応を行わない未
反応サンプルを分析を行った結果を示す。
反応サンプルを分析を行った結果を示す。
【図４】 本装置を用いて、抗原と抗体の比率を変えて
反応を行ったサンプルを分析した結果を示す。
反応を行ったサンプルを分析した結果を示す。
ａ 高圧電源、ｂ キャピラリーカラム、ｃ バッファ
ーバイアル、ｄ 集光レンズ、ｅ ミラー、ｆ フィル
ター、ｇ 光電子増倍管、ｈ アルゴンイオンレーザ
ー、ｉ 酵素標識された抗原抗体複合体、ｊ 酵素標識
された抗体、ｋ 成分ｉに由来するフルオレセインの蛍
光、ｌ 成分ｊに由来するフルオレセインの蛍光
ーバイアル、ｄ 集光レンズ、ｅ ミラー、ｆ フィル
ター、ｇ 光電子増倍管、ｈ アルゴンイオンレーザ
ー、ｉ 酵素標識された抗原抗体複合体、ｊ 酵素標識
された抗体、ｋ 成分ｉに由来するフルオレセインの蛍
光、ｌ 成分ｊに由来するフルオレセインの蛍光
【手続補正書】
【提出日】平成１２年１月１１日（２０００．１．１
１）
１）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
【請求項３】 サンプル中のアルカリフォスファターゼ
の複数のアイソザイムを互いに分離して、各アイソザイ
ムの酵素活性を同時に測定する方法であり、（１）フル
オレセインジフォスフェートを含む分離バッファーによ
りキャピラリーカラムを充填し、（２）前記サンプルを
カラムに導入し、（３）キャピラリーカラムに電圧を印
加して泳動を行う事により前記アルカリフォスファター
ゼの複数のアイソザイムを互いに分離し、（４）泳動を
中止して、アルカリフォスファターゼの各アイソザイム
を、分離バッファー中のフルオレセインジフォスフェー
トとキャピラリーカラム中で反応させる事により、フル
オレセインを生成し、（５）生成したフルオレセインを
レーザー励起蛍光検出器により検出する過程より構成さ
れる、アルカリフォスファターゼの各アイソザイムの酵
素活性を同時に測定する方法。 ─────────────────────────────────────────────────────
の複数のアイソザイムを互いに分離して、各アイソザイ
ムの酵素活性を同時に測定する方法であり、（１）フル
オレセインジフォスフェートを含む分離バッファーによ
りキャピラリーカラムを充填し、（２）前記サンプルを
カラムに導入し、（３）キャピラリーカラムに電圧を印
加して泳動を行う事により前記アルカリフォスファター
ゼの複数のアイソザイムを互いに分離し、（４）泳動を
中止して、アルカリフォスファターゼの各アイソザイム
を、分離バッファー中のフルオレセインジフォスフェー
トとキャピラリーカラム中で反応させる事により、フル
オレセインを生成し、（５）生成したフルオレセインを
レーザー励起蛍光検出器により検出する過程より構成さ
れる、アルカリフォスファターゼの各アイソザイムの酵
素活性を同時に測定する方法。 ─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成１２年５月８日（２０００．５．８）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｇ０１Ｎ 27/26 ３１５Ｈ (72)発明者 村上 裕二 石川県能美郡辰口町旭台１−50 職員宿舎 Ｄ−33号室 (72)発明者 小泉 顕 石川県能美郡辰口町旭台１−50 学生宿舎 ３−414号室 Ｆターム(参考） 2G043 AA04 BA16 CA03 DA02 DA05 EA01 EA19 GA07 GB21 KA09
Claims (3)
- 【請求項１】 サンプル中の抗原の検出を行うための方
法であって、（１）蛍光基質を含む分離バッファーによ
りキャピラリーカラムを充填し、併せてサンプルと酵素
標識した抗体をインキュベートして、酵素標識した抗原
抗体複合体を形成し、（２）インキュベートしたサンプ
ルをカラムに導入し、（３）キャピラリーカラムに電圧
を印加して泳動を行う事により前記の酵素標識した抗体
及び前記の酵素標識した抗原抗体複合体を分離し、
（４）泳動を中止して、前記標識酵素と分離バッファー
中の前記蛍光基質をキャピラリーカラム中で反応させる
事により蛍光色素を生成して、（５）生成した蛍光色素
をレーザー励起蛍光検出器により検出する過程より構成
される、抗原測定方法。 - 【請求項２】 請求項１記載の測定方法に用いる測定装
置であって、カラムに電圧を印加するための高電圧電
源、分離のためのキャピラリーカラム、電極を固定して
分離バッファーを貯蔵しておくためのバッファーバイア
ル、及び生成した蛍光を検出するための蛍光検出器より
構成される、抗原測定装置。 - 【請求項３】 サンプル中のアルカリフォスファターゼ
の複数のアイソザイムを互いに分離して酵素活性を測定
する方法であり、（１）フルオレセインジフォスフェー
トを含む分離バッファーによりキャピラリーカラムを充
填し、（２）前記サンプルをカラムに導入し、（３）キ
ャピラリーカラムに電圧を印加して泳動を行う事により
前記アルカリフォスファターゼの複数のアイソザイムを
互いに分離し、（４）泳動を中止して、アルカリフォス
ファターゼの各アイソザイムを、分離バッファー中のフ
ルオレセインジフォスフェートとキャピラリーカラム中
で反応させる事により、フルオレセインを生成し、
（５）生成したフルオレセインをレーザー励起蛍光検出
器により検出する過程より構成される、アルカリフォス
ファターゼの酵素活性測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11040812A JP2000241428A (ja) | 1999-02-19 | 1999-02-19 | 抗原の測定方法及び測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11040812A JP2000241428A (ja) | 1999-02-19 | 1999-02-19 | 抗原の測定方法及び測定装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000241428A true JP2000241428A (ja) | 2000-09-08 |
Family
ID=12591073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11040812A Pending JP2000241428A (ja) | 1999-02-19 | 1999-02-19 | 抗原の測定方法及び測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000241428A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014021055A1 (ja) | 2012-08-02 | 2014-02-06 | ウシオ電機株式会社 | 光誘起蛍光測定器 |
| CN113063759A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-07-02 | 国科大杭州高等研究院 | 基于半球空间类复眼结构的体细胞激光诱导荧光探测方法 |
-
1999
- 1999-02-19 JP JP11040812A patent/JP2000241428A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014021055A1 (ja) | 2012-08-02 | 2014-02-06 | ウシオ電機株式会社 | 光誘起蛍光測定器 |
| JP2014032064A (ja) * | 2012-08-02 | 2014-02-20 | Kyushu Univ | 光誘起蛍光測定器 |
| US9683936B2 (en) | 2012-08-02 | 2017-06-20 | Ushio Denki Kabushiki Kaisha | Light-induced fluorescent measuring device |
| CN113063759A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-07-02 | 国科大杭州高等研究院 | 基于半球空间类复眼结构的体细胞激光诱导荧光探测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0624246B1 (en) | Differential separation assay | |
| Ruzicka et al. | Peer Reviewed: From Flow Injection to Bead Injection. | |
| JP3530914B2 (ja) | 親和結合毛細管電気泳動による微量分析物の定量 | |
| KR0143993B1 (ko) | 전기화학 발광성 분석 | |
| US6682648B1 (en) | Electrochemical reporter system for detecting analytical immunoassay and molecular biology procedures | |
| US7556932B2 (en) | Particle based homogeneous assays using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection | |
| Larou et al. | High throughput cellular biosensor for the ultra-sensitive, ultra-rapid detection of aflatoxin M1 | |
| US5221454A (en) | Differential separation assay | |
| Tayyab et al. | Potential microfluidic devices for COVID-19 antibody detection at point-of-care (POC): A review | |
| JP2902111B2 (ja) | 固相免疫検定のための使い捨て反応容器および免疫反応により検出可能な成分の測定方法 | |
| JP4972295B2 (ja) | 免疫分析方法及びバイオチップ | |
| US20090233805A1 (en) | Biochip and immunological analysis method | |
| Cousino et al. | Peer reviewed: pushing down the limits of detection: molecular needles in a haystack | |
| JPH05172815A (ja) | 免疫分析方法及びその分析装置 | |
| CA2300268A1 (en) | Electrochemical reporter system for detecting analytical immunoassay and molecular biology procedures | |
| EP0488152A2 (en) | Method for immunoassay and apparatus therefor | |
| US4824778A (en) | Immunoassay for measuring the concentration of antigen in a sample | |
| JPS63246671A (ja) | 免疫分析方法 | |
| Wise et al. | Argon-laser-induced fluorescence detection in sodium dodecyl sulfate-capillary gel electrophoretic separations of proteins | |
| CN106290320A (zh) | 一种基于无标记适体传感器的ota化学发光检测方法 | |
| US20040043398A1 (en) | Use of the multipin platform as anchor device | |
| JP2000241428A (ja) | 抗原の測定方法及び測定装置 | |
| US20090123962A1 (en) | Chemical Sensing Device | |
| AU676683B2 (en) | Chemiluminescent assay for dsDNA antibodies | |
| US4847194A (en) | Colorimetric detection of delta-5-3-ketosteroid isomerase and immunoassay based thereon |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20010213 |