JP2013543002A - トリプシン活性を阻害又は低減するための化粧品組成物及び方法 - Google Patents

Abstract

皮膚への局所適用のために配合された化粧品組成物が適用される。組成物は、安全かつ有効な量のシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールと、安全かつ有効な量のＮ−アシルアミノ酸化合物と、皮膚科学的に（dematologically）許容可能なビヒクルとを含む。

Description

本発明は、トリプシン活性を阻害又は低減するための化粧品組成物及び方法に関する。

ヒトの皮膚は、表皮、真皮及び皮下脂肪層の３つの主要な層を含む。表皮は、角質層、顆粒層、有棘層及び基底層の４つの層（上部から下部へ）を含む。角質層と顆粒層との間に、別個の５つめの層である透明層が存在する場合がある。基底層は、徐々に上方に移動して、他の表皮層を形成する細胞を生成する。これらの細胞は上方に移動するにつれて、それらの中心核を損失し、皮膚タンパク質（ケラチン）及び脂肪（脂質）の生成を開始する。これらの細胞は、表皮の上部層内に存在する場合、角化細胞として知られている。メラニン形成細胞は、表皮の基底層内に位置する別のクラスの細胞である。メラニン形成細胞は、皮膚の色調の外観の主な要因となる色素であるメラニンの生成に関与している。

図１、２、及び３を参照すると、メラニンは、基本的なレベルで、酵素チロシナーゼと基質としてのＬ−チロシンとが関与するメラニン形成細胞内の複雑な反応セットにより生成される。チロシナーゼは、Ｌ−チロシンのＤＯＰＡ（Ｌ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン）への変換と、ＤＯＰＡのドーパキノンへの変換とを触媒する。ドーパキノンは、更なる変換を受けてメラニンを形成する。メラニンは、樹状突起として知られるメラニン形成細胞の細長いフィラメントに沿って角化細胞へ移動されるメラノソームとして知られる細胞小器官内で凝集する。チロシナーゼの生成及びその活性は、産生されるメラニンの量を部分的に決定する。角化細胞へ移動されるメラニンの量及びタイプがヒトの皮膚の視認される色素沈着の程度を部分的に決定する。

メラニン生成サイクルにおける１つの機構は、食作用によるメラノソームのメラニン形成細胞から角化細胞への移動である。研究により、角化細胞上に発現されたプロテアーゼ活性化受容体２（ＰＡＲ−２）がメラノソーム移動に関与し、それにより色素沈着を調節する可能性があることが見出されている。例えば、Ｓｅｉｂｅｒｇ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅａｓｅ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｖｉａ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２５４，２５〜３２（２０００）を参照のこと。トリプシン（又はトリプトリプシン様プロテアーゼ）による（又はペプチド作動薬ＳＬＩＧＲＬによる）ＰＡＲ−２の活性化は、メラノソーム移動を惹起し、それによって角化細胞内でのメラニンの分布に寄与する。場合によっては、メラニンの分布は加齢によるシミ又は不均一な皮膚色調として現れる場合がある。ＰＡＲ−２のトリプシン（又はトリプシン様プロテアーゼ）活性化を阻害する化合物は、角化細胞によるメラニン形成細胞の食作用を破壊する又は低減すると思われる。トリプシン活性を阻害することにより又はＳＬＩＧＲＬペプチド結合を阻害することのいずれかでＰＡＲ−２を阻害する化合物は、色素沈着過度及びメラニンの過剰生産を調節することができる。例えば、Ｓｅｉｂｅｒｇ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅａｓｅ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｖｉａ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２５４，２５〜３２（２０００）を参照のこと。

Ｓｅｉｂｅｒｇ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅａｓｅ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｖｉａ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２５４，２５〜３２（２０００）

若年の皮膚では、メラニンは均一に分布され、メラニン形成細胞の活性は低く、構成的色素沈着の生成のみに制限される。年齢を重ねた皮膚では、過度なメラニン形成及びそれに続くメラニン輸送は、最終的に、加齢によるシミ（そばかす）又は拡散した色素沈着過度若しくは不均一な皮膚色調として見えるのに十分な寸法及びコントラストを有した、恒久的な局所的変色を生じさせる可能性がある。加齢によるシミの寸法及び／又はコントラストを最小限に抑える、低減する、改善する、若しくは治療する及び／又は全体的な皮膚色調を改善する組成物及び治療方法に対する要望が、化粧品分野において継続的に存在している。

皮膚への局所適用のために配合された化粧品組成物が提供される。該組成物は、安全かつ有効な量のシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールと、安全かつ有効な量のＮ−アシルアミノ酸化合物と、皮膚科学的に（dematologically）許容可能なビヒクルとを含む。

別の実施形態において、該化粧品組成物は、安全かつ有効な量のシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールと、安全かつ有効な量のＮ−アシルアミノ酸化合物と、安全かつ有効な量のビタミンＢ３化合物と、安全かつ有効な量の２−ヘキシルデカン−１−オールと、皮膚科学的に（dematologically）許容可能なビヒクルとを含む。

不均一な皮膚色調又は加齢によるシミを改善、低減、又は治療するための美容方法も提供される。該方法は、かかる治療が必要な皮膚表面を識別する工程と、安全かつ有効な量のシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールと、安全かつ有効な量のＮ−アシルアミノ酸化合物と、皮膚科学的に（dematologically）許容可能なビヒクルとを含む化粧品組成物を皮膚表面に局所的に塗布する工程と、を含む。該方法は、治療期間の間、皮膚表面の不均一な皮膚色調又は加齢によるシミを改善する、低減する、又は治療するのに十分な回数だけ繰り返される。

本発明は、背景技術にて特定された技術的問題に応答して、他の形態をとり得る。本発明の更なる形態は、以下の詳細な説明から認識されるであろう。

本発明は、添付図面と併せて以下の説明から、より良く理解されると考えられる。参照する図面は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
メラニン合成経路の概略図。 樹状突起に沿ってメラニン形成細胞から角化細胞へと輸送されるメラノソームの概略図。 ＰＡＲ−２経路の活性化を示す概略図。

別段の指定がない限り、本明細書において使用する全ての百分率及び比率は、組成物全体の重量によるものであり、また、全ての測定は２５℃でなされるものとする。全ての数範囲はより狭い範囲を包含し、表現された上方及び下方範囲の限界値は互換可能であって、明示されていない範囲を更に作り出す。

本発明の組成物及び方法は、本明細書に記載の必須構成成分並びに任意成分を含み、それらから本質的に成り、又はそれらから成ることができる。本明細書で使用するとき、「から本質的になる」とは、組成物又は構成成分は追加成分を包含してもよいが、それら追加成分が特許請求される組成物又は方法の基本的及び新規な特徴を実質的に変化させない場合に限ることを意味する。

組成物に関連して使用される用語「塗布する」又は「塗布」は、本発明の組成物を表皮等のヒト皮膚表面上に塗布し又拡げることを意味する。

本明細書で使用するとき、用語「皮膚科学的に許容可能な」は、記載される組成物又は構成成分が、過度の毒性、不適応性、不安定性、アレルギー反応等がなく、ヒトの皮膚組織と接触して使用するのに好適であることを意味する。

本明細書で使用するとき、用語「安全かつ有効な量」は、有益な利益を誘導するのに十分な化合物及び組成物の量を意味する。

本明細書で使用するとき、用語「加齢によるシミ」は、典型的には内因性老化及び／又は外因性老化によって引き起こされる、メラニンの局所的及び長期にわたる又は全身性の過剰生産／輸送により色素沈着が皮膚の隣接領域の色素沈着よりも程度が高い、皮膚の規定された領域を指す。加齢によるシミは一般に、直径約２ｍｍ〜約１０ｍｍであるが、より小さい又は大きいシミの可能性もある。加齢によるシミは、シミ、日焼けによるシミ（sun spot）、日光黒子（solar lentigo）、低メラニン性病変（hypo-melanotic lesion）、そばかす、及び黒皮症斑点によるシミのうちの１つ以上を含むことができる。

本明細書で使用するとき、用語「皮膚色調」は、一過性ではなく全身性のメラニン合成によリもたらされた皮膚におけるメラニンの全体的な外観を指す。皮膚色調は一般に、皮膚の広い範囲にわたり特徴付けられる。範囲は、理想的には１００ｍｍ²であってもよいが、顔の皮膚の全体、又は任意の顔の皮膚表面等のより広い範囲が想定される。皮膚色調は、画像分析により測定することができる。例えば、Ｍａｔｔｓ，Ｐ．，Ｎｅｗ Ｉｎｓｉｇｈｔｓ Ｉｎｔｏ Ｓｋｉｎ Ａｐｐｅａｒａｎｃｅ ａｎｄ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ（２００８），１３，６〜９を参照のこと。例えば、全体的な明るさは、Ｌ^*ａ^*ｂ^*色空間内のＬ^*座標により測定することができる（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ）。メラニンマッピング等の発色団マッピングは、全体的な皮膚色調の指標として使用することができる。発色団マップデータから平均メラニンを計算することができる。加えて、皮膚色調均一性はメラニンによって決定することがき、このメラニンも発色団マップデータから決定（計算）（determined calculated）することができる。例えば、Ｍａｔｔｓ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｉｎｔｒａｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ（ＳＩＡｓｃｏｐｙ），３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｐａｙｅ，Ｍ．，Ｂａｒｅｌ，Ａ．Ｎ．ａｎｄ Ｍａｉｂａｃｈ，Ｈ．Ｉ．（ｅｄｓ），Ｉｎｆｏｒｍａ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２７５〜２８３，２００８、欧州特許第１８１０６１４号、米国特許第７，０５４，６７４号、及び米国特許出願第２００６／００８９５５３号を参照のこと。

本明細書で使用するとき、用語「顔の皮膚表面」は、額、眼窩周囲、頬、口周囲、頤及び鼻の皮膚表面のうちの１つ以上を指す。

Ｉ．組成物
本発明の実施形態は、Ｎ−アシルアミノ酸化合物とシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールとの混合物を含み、任意に、ビタミンＢ３化合物又は２−ヘキシルデカン−１−オールの１つ以上を更に含み得る。本発明者らは、驚くべきことに、Ｎ−アシルアミノ酸化合物とシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールとの組み合わせが、予想外に有利である程度まで又は個々の化合物によるよりも優れた程度までトリプシン活性を阻害することを発見した。本発明者らは、更に驚くべきことに、Ｎ−アシルアミノ酸化合物、シクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール、ビタミンＢ３化合物、及び２−ヘキシルデカン−１−オールの組み合わせが、予想外に有利である程度まで又は個々の化合物によるよりも優れた程度までトリプシン活性を阻害することを発見した。

本発明の組成物は、溶液、懸濁液、ローション、クリーム、ゲル、トナー、スティック、ペンシル、スプレー、エアゾル、軟膏、ペースト、フォーム、パウダー、ムース、髭剃りクリーム、拭き取り用品、ストリップ、パッチ、ガーゼ付きばんそうこう、ヒドロゲル、フィルム形成製品、顔面及び皮膚マスク（不溶性シートを有する及び有さない）、ファンデーション、アイライナー及びアイシャドウ等の化粧品等が挙げられるが、これらに限定されない、多種多様な製品形態に製造されることができる。組成物の形態は、組成物中に存在する場合、選択された皮膚科学的に許容可能な特定のキャリアから得られる。

Ａ．Ｎ−アシルアミノ酸化合物
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の１種以上のＮ−アシルアミノ酸化合物を含む。アミノ酸は、当該技術分野において既知のいかなるアミノ酸の１つでもあることができる。本発明のＮ−アシルアミノ酸化合物は、次式の化合物に相当する。

式中、Ｒは、水素、アルキル（置換又は非置換、直鎖又は分岐鎖）、又はアルキルと芳香族基との組み合わせであり得る。当該技術分野で既知のアミノ酸の可能な側鎖のリストは、Ｓｔｒｙｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８１，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙに記載されている。Ｒ¹は、Ｃ₁〜Ｃ₃₀、飽和又は不飽和、直鎖状又は分岐鎖状、置換又は非置換のアルキル；置換又は非置換の芳香族基；あるいはそれらの混合物であることができる。

好ましくは、Ｎ−アシルアミノ酸化合物は、Ｎ−アシルフェニルアラニン、Ｎ−アシルチロシン、それらの異性体、それらの塩、及びそれらの誘導体からなる群から選択される。アミノ酸は、Ｄ異性体又はＬ異性体、あるいはそれらの混合物であることができる。Ｎ−アシルフェニルアラニンは次式に相当する。

式中、Ｒ¹は、Ｃ₁〜Ｃ₃₀、飽和又は不飽和、直鎖状又は分岐鎖状、置換又は非置換のアルキル；置換又は非置換の芳香族基；あるいはそれらの混合物であることができる。

Ｎ−アシルチロシンは次式に相当する。

式中、Ｒ¹は、Ｃ₁〜Ｃ₃₀、飽和又は不飽和、直鎖状又は分岐鎖状、置換又は非置換のアルキル；置換又は非置換の芳香族基；あるいははそれらの混合物であることができる。

本発明において特に有用な化合物は、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニンである。この薬剤は、広い分類のＮ−アシルフェニルアラニン誘導体に属し、そのアシル基はＣ１１モノ不飽和脂肪酸部分、及びアミノ酸はフェニルアラニンのＬ異性体である。Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニンは次式に相当する。

本明細書で使用するとき、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニンは、ＳＥＰＰＩＣ（Ｆｒａｎｃｅ）から商標名Ｓｅｐｉｗｈｉｔｅ（登録商標）で市販されている。

本発明の組成物では、Ｎ−アシルアミノ酸は、該組成物の約０．００１重量％、約０．０１重量％、若しくは約０．２重量％より大で、及び／又は約２％若しくは約１重量％未満で含まれる。

Ｂ．シクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール
本発明の組成物は、次式に対応するシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール化合物の１種以上を安全かつ有効な量で含む。

本発明において特に有用な化合物は、次式を有する、ビタミンＢ８と呼ばれることもあるｍｙｏ−イノシトールである。

ｍｙｏ−イノシトールは、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｓｓｏｕｒｉ，ＵＳＡ）から市販されている。

本発明の組成物では、シクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールは、該組成物の約０．００１％、約０．１％、若しくは約２％より大で、及び／又は約５％、若しくは約３重量％未満で含まれる。

Ｃ．ビタミンＢ３化合物
本発明の組成物は、任意に、次式を有するビタミンＢ３化合物の１種以上を安全かつ有効な量で含み得る。

（式中、Ｒは−−ＣＯＮＨ₂（即ち、ナイアシンアミド）、−−ＣＯＯＨ（即ち、ニコチン酸）又は−−ＣＨ₂ＯＨ（即ち、ニコチニルアルコール）、これらの誘導体、及び前述のいずれかの塩である）。

上述のビタミンＢ₃化合物の例示的な誘導体としては、ニコチン酸の非血管拡張性エステル（例えば、トコフェリルニコチネート、ミリスチルニコチネート）を含むニコチン酸エステルが挙げられる。好適なビタミンＢ₃化合物の例は、当該技術分野において周知であり、多数の販売元（例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＩＣＮ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、及びＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）から市販されている。

本発明の組成物では、ビタミンＢ３化合物は、該組成物の約０．００１％、約０．０１％、約１％、若しくは約３％より大で、及び／又は約１０％若しくは約５重量％未満で含まれる。

Ｄ．２−ヘキシルデカン−１−オール
本発明の組成物は、一般にヘキシルデカノール（hexyldcanol）と呼ばれる２−ヘキシルデカン−１−オールを安全かつ有効な量で含む。本発明の組成物では、２−ヘキシルデカン−１−オールは、該組成物の約０．００１％、約０．０１％、若しくは約２．５％より大で、及び／又は約１０％若しくは約５％未満で含まれる。

いくつかの実施形態において、化粧品混合物中のＮ−アシルアミノ酸化合物とシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール化合物との比は、約１：１００〜約１０：１、若しくは約１：６０〜約２：１、又は約１：３０〜約１：１、あるいは約１：３である。

いくつかの実施形態において、化粧品混合物中のＮ−アシルアミノ酸化合物とシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール化合物とビタミンＢ３化合物と２−ヘキシルデカン−１−オールとの比は、約０．２：２：５：５〜約１：３：５：５、若しくは約１：２：５：５〜約１：３：５：５、又は約０．２：３：５：５〜約１：３：５：５である。

Ｅ．皮膚科学的に許容可能なキャリア
本発明の組成物は、組成物に、皮膚科学的に許容可能なキャリア（「キャリア」）も含むことができる。本明細書で使用するとき、「皮膚科学的に許容可能なキャリア」という語句は、該キャリアがケラチン組織への局所塗布に好適であり、良好な審美特性を有し、本発明の活性物質と適合性があり、安全性又は毒性についていかなる問題も起こさないことを意味する。一実施形態において、キャリアは、組成物の約５０重量％〜約９９重量％、約６０重量％〜約９８重量％、約７０重量％〜約９８重量％、又は代替的に約８０重量％〜約９５重量％のレベルで存在する。

キャリアは多種多様な形態で提供され得る。非限定例には、単純な溶液（水性又は油ベースの）、乳濁液、及び固体形態（例えば、ゲル、スティック、流動性固体、無定形材料）が挙げられる。特定の実施形態において、皮膚科学的に許容可能な担体は、エマルションの形状である。エマルションは、一般に、連続水相（例えば、水中油型及び水中油中水型）、又は連続油相（例えば、油中水型及び油中水中油型）を有するものとして分類され得る。本発明の油相には、シリコーンオイル、非シリコーンオイル（炭化水素油、エステル類、エーテル類など）、及びこれらの混合物が含まれる。

水相は典型的に、水を含む。しかしながら、別の実施形態では、水相は、水溶性保湿剤、コンディショニング剤、抗菌剤、湿潤剤、及び／又は他の水溶性スキンケア活性物質が挙げられるが、これらに限定されない水以外の構成成分（非水構成成分）を含み得る。一実施形態では、組成物の非水構成成分は、グリセリン及び／又は他のポリオール等の湿潤剤を含む。しかしながら、組成物は、実質的に（即ち、１％未満の水）又は完全に無水であってもよいことを理解するべきである。

所望の製品形態を得るために、好適なキャリアが選択される。更に、組成物構成成分（例えば、Ｎ−アシルアミノ酸化合物、シクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソール、ビタミンＢ３化合物、及び２−ヘキシルデカン−１−オール）の溶解度又は分散性は、キャリアの形態及び組成物を決定し得る。一実施形態では、水中油又は油中水型の乳濁液が好ましい。

乳濁液は、更に乳化剤を含み得る。組成物は、キャリアを十分に乳化する任意の好適な百分率の乳化剤を含有してもよい。好適な重量範囲は、組成物の、約０．１重量％〜約１０重量％又は約０．２重量％〜約５重量％の乳化剤を含む。乳化剤は、非イオン性、アニオン性、又はカチオン性であり得る。好適な乳化剤は、例えば、米国特許第３，７５５，５６０号、同第４，４２１，７６９号、及びＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎのＤｅｔｅｒｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ，Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｅｄｉｔｉｏｎ、３１７〜３２４頁（１９８６）に開示されている。好適なエマルションは、所望の製品形態に応じて、幅広い粘度を有し得る。

キャリアは、当業者に周知であるように増粘剤を更に含有して、好適な粘度及び流動学的特性を有する組成物を提供してもよい。

ＩＩ．トリプシンアッセイ実験
以下の試験方法は、本発明の様々な実施形態の特定の特徴及び利点を説明するために提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

ウシ膵臓からのトリプシン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，ＵＳＡから入手可能、カタログ番号Ｔ８８０２）をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈して、約０．００１％のトリプシンのストックを調製する。底が透明な９６ウェルホワイトプレート（例えば、ＶＷＲ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ（Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）から入手可能なＣｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ ＃３９０４）の中で、約９０ｕＬの０．００１％トリプシンストックを試験化合物（例えば、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン）又はビヒクル対照（ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又は水）約１０ｕＬと混合する。典型的には、１プレート当たり８つの対照が存在する。１００ｕＬの基質、Ｚ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−７−アミド−４−メチルクマリン（例えば、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍカタログ番号０３−３２−１５０１、ＰＢＳ中１０ｍＬ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）より入手可能）を添加することによりアッセイを開始し、ウェルプレートを蛍光プレートリーダ（例えば、Ｇｅｍｉｎｉプレートリーダ）の中で励起波長３６０ｎｍ及び発光波長４６０ｎｍでモニタする。反応速度論モードで５分にわたって反応進行を測定する。ＳｏｆｔＭａｘＰｒｏデータ解析ソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．より入手可能）を用いて、各ウェル毎のデータ点に対して直線を適合させた後、直線の勾配を算出する。各試験化合物ウェルの勾配を、プレートのヒクル対照ウェルの勾配の平均と比較し、下の式（１）を用いてトリプシン活性の割合を決定する。トリプシンが基質を加水分解するにつれて、７−アミド−クマリン基の蛍光は増加し、それによりトリプシン活性レベルを反映するシグナルが増加する。阻害物質は蛍光増加を減少させ、その結果勾配が小さくなる。
パーセント（％）トリプシン活性＝［試験ウェルの勾配］／［ビヒクル対照ウェルの平均勾配］ （１）

上で概説された方法を一般に用いて、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン１％、ｍｙｏ−イノシトール３％、ナイアシンアミド５％、及びヘキシルデカノール５％の１：９００希釈に関して、各化合物毎にｎ＝８ウェルの試料寸法を用いてトリプシン活性の割合を測定した。得られたトリプシン活性の割合を下の表１に示す。

上で概説された方法を一般に用いて、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン１％、ｍｙｏ−イノシトール３％、ナイアシンアミド５％、及びヘキシルデカノール５％の４つの組み合わせの１：９００希釈に関して、各組み合わせ毎にｎ＝８ウェルの試料寸法を用いてトリプシン活性の割合を測定した。組み合わせは次の通りであった。

組み合わせ番号１＝Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン及びｍｙｏ−イノシトール。

組み合わせ番号２＝Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン、ｍｙｏ−イノシトール、及びナイアシンアミド。

組み合わせ番号３＝Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン、ｍｙｏ−イノシトール、及びヘキシルデカノール。

組み合わせ番号４＝Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン、ｍｙｏ−イノシトール、ナイアシンアミド、及びヘキシルデカノール。

得られたトリプシン活性の割合を下の表２に示す。

１００％を超える割合値は、トリプシン活性の発現上昇を表し、１００％未満の割合値は、トリプシン活性の発現減少（阻害）を表す。表１及び２から明らかなように、Ｎ−ウンデシレノイル−Ｌ−フェニルアラニン及びｍｙｏ−イノシトールの組み合わせ（組み合わせ番号１）は、個々の化合物（例えば、Ａ、Ｂ）と比べて、驚くほど予想外の又は優れたトリプシン阻害度を有した。組み合わせ番号１にナイアシンアミドを添加すると、組み合わせ番号１と比べてトリプシン活性が増加し、一方、組み合わせ番号１にヘキシルデカノールを添加すると、トリプシン活性は組み合わせ番号１と同様であった。しかしながら、驚くべきことに、組み合わせ番号１にナイアシンアミド及びヘキシルデカノール（hexydecanol）を添加すると（組み合わせ番号４）、トリプシン活性は最低レベルとなった（即ち、最大トリプシン阻害レベル）。

ＩＩＩ．例示的な組成物
以下は、本発明の組成物の非限定的な実施例である。これらの実施例は単に説明のために示すものであり、本発明を限定するものと解釈すべきでなく、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、多くの改変が可能であり、当業者にはこれらのことが理解されよう。実施例においては、特に指定のない限り、全ての濃度が重量％として列挙されており、希釈剤、充填剤などの微量物質は除外し得る。そのため、列挙した配合は、列挙した成分及びこのような成分に関連するいかなる微量物質をも含む。当業者にとって明白なように、このような微量物質の選択は、本明細書に記載したように本発明を作るために選択した特定成分の物理的及び化学的特質によって変わることになる。

いくつかの組成物の例を以下に提供する。

本発明の組成物は、一般に、組成物及び局所用組成物の製造分野において既知であるような従来の方法によって調製される。このような方法は、通常、加熱、冷却、真空の適用などを用いて又は用いずに、成分を１つ以上の工程で混合して比較的均一な状態にするものである。一般に、乳濁液は、最初に水相物質を脂肪相物質とは別個に混合し、その後２相を適宜組み合わせて、所望の連続層を得ることにより調製される。組成物は、好ましくは、安定性（物理的安定性、化学的安定性、光安定性）、及び／又は活性物質の送達を最適化するように調製される。この最適化には、適切なｐＨ（例えば７未満）、活性剤と錯体になり、ひいては安定性又は分配にマイナスの影響を与え得る物質の排除（例えば汚染鉄の排除）、錯体形成を防止する手法（例えば適切な分散剤又は二重区画包装）の使用、適切な光安定性の手法（例えば日焼け止め剤／日焼け防止剤の組み込み、不透明包装の使用）の使用などが含まれてもよい。

ＩＶ．治療方法
様々な治療方法が本発明の組成物を利用することができる。一実施形態において、該方法は、該組成物によって治療する１つ以上の加齢によるシミ又は不均一な皮膚色調を含む皮膚表面を識別する工程を含む。皮膚表面は、使用者、又は例えば皮膚科医、美容師、若しくは他の介護者等の第三者により識別されてもよい。識別は、寸法及び／又は色に基づいて、治療を必要とする皮膚表面の目視検査によって行われてもよい。識別はまた、ＳＩＡｓｃｏｐｅ Ｖ（Ａｓｔｒｏｎ Ｃｌｉｎｉｃａ，Ｌｔｄ．，ＵＫから入手可能）又はＶＩＳＩＡ（登録商標）Ｃｏｍｐｌｅｘｉｏｎ Ａｎａｌｙｓｉｓシステム（Ｃａｎｆｉｅｌｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．，Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ，ＮＪから入手可能）等の市販の画像化装置により行われてもよい。両方の装置は、皮膚の画像を収集し、加齢によるシミを識別することが可能である。

最も問題の皮膚表面は、顔の皮膚表面、手及び腕の皮膚表面、足及び脚の皮膚表面、並びに首及び胸の皮膚表面（例えば、デコルタージュ）等の、一般的に衣服で覆われない皮膚表面である傾向がある。特に、顔の皮膚表面の加齢によるシミ及び／又は不均一な皮膚色調の識別は、額、口の周囲、顎、眼窩周囲、鼻、及び／又は頬の皮膚表面を含む。

本方法は、前もって識別されていてもよい皮膚表面に組成物を塗布する工程を含み得る。本組成物を塗布するための多くの処方計画が存在する。本組成物は、治療期間中、少なくとも１日１回、１日２回、又は１日により頻繁に塗布されてもよい。治療期間は様々であり得る。一実施形態では、治療期間約１週間〜約１２週間である。別の実施形態では、治療期間約４週間〜約１２週間である。更に別の実施形態では、治療期間約４週間〜約８週間である。特定の実施形態では、治療期間は、数ヶ月（即ち３〜１２ヶ月）又は数年間にわたり延長するであろう。一実施形態において、組成物は少なくとも約４週間又は少なくとも約８週間の治療期間中、最小で１日に１回塗布される。別の実施形態では、組成物は少なくとも約４週間又は少なくとも約８週間の治療期間中、１日に２回塗布される。１日に２回塗布される場合、１回目及び２回目の塗布は、少なくとも１〜１２時間の間隔が空けられてもよい。一般に、組成物は、朝及び／又は就寝前の夜に塗布され得る。

本組成物は、治療期間にとって十分な量の組成物を保存するように寸法設定されたパッケージに入れられて提供されてもよい。パッケージの寸法、形状、及びデザインは幅広いものであり得る。いくつかのパッケージの例は、米国デザイン特許Ｄ５７０，７０７、同Ｄ３９１，１６２、同Ｄ５１６，４３６、同Ｄ５３５，１９１、同Ｄ５４２，６６０、同Ｄ５４７，１９３、同Ｄ５４７，６６１、同Ｄ５５８，５９１、同Ｄ５６３，２２１、米国特許公開２００９／００１７０８０、同２００７／０２０５２２６、及び同２００７／００４０３０６に記載されている。

治療期間は、皮膚表面の改善をもたらすのに十分な期間でなければならない。この改善は、加齢によるシミの寸法の検出可能な低減、加齢によるシミの美白（例えば、色が明るくなる）、メラニンの減少、又はメラニン均一性の改善であり得る。

本明細書に開示した寸法及び値は、記載された正確な数値に厳密に限定されるものとして理解されるべきでない。むしろ、特に断らない限り、そのような寸法はそれぞれ、記載された値及びその値周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味するものとする。例えば、「４０ｍｍ」として開示された寸法は、「約４０ｍｍ」を意味するものとする。

相互参照されるか又は関連する全ての特許又は特許出願を含む、本願に引用される全ての文書を、特に除外又は限定することを明言しない限りにおいて、その全容にわたって本願に援用するものである。いずれの文献の引用も、こうした文献が本願で開示又は特許請求される全ての発明に対する先行技術であることを容認するものではなく、あるいは、こうした文献が、単独で、又は他の全ての参照文献とのあらゆる組み合わせにおいて、こうした発明のいずれかを参照、教示、示唆又は開示していることを容認するものでもない。更に、本文書において、ある用語の任意の意味又は定義の範囲が、援用文献中の同じ用語の任意の意味又は定義と矛盾する場合には、本文書中でその用語に与えられる意味又は定義が優先するものとする。

以上、本発明の特定の実施形態を例示、記載したが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく他の様々な変更及び改変を行いうる点は、当業者には明らかであろう。したがって、本発明の範囲に含まれるそのような全ての変更及び改変を添付の特許請求の範囲において網羅するものとする。

Claims (10)

1. 皮膚への局所適用のために配合された化粧品組成物であって、
   安全かつ有効な量、好ましくは前記化粧品組成物の２重量％〜３重量％のシクロヘキサン−１，２，３，４，５，６−ヘキソールと、
   安全かつ有効な量の、Ｎ−アシルフェニルアラニン、Ｎ−アシルチロシン、それらの異性体、それらの塩、及びそれらの誘導体からなる群から選択されるＮ−アシルアミノ酸化合物、好ましくはウンデシレノイルフェニルアラニン、より好ましくはウンデシレノイルフェニルアラニンの濃度が前記化粧品組成物の０．２重量％〜１重量％であるウンデシレノイルフェニルアラニンと、
   皮膚科学的に（dematologically）許容可能なビヒクルと、を含む化粧品組成物。
2. ビタミンＢ３化合物、好ましくはナイアシンアミドを更に含み、より好ましくは、該ビタミンＢ３化合物の濃度が前記化粧品組成物の３重量％〜５重量％である、請求項１に記載の化粧品組成物。
3. ２−ヘキシルデカン−１−オールを更に含み、好ましくは、前記２−ヘキシルデカン−１−オールの濃度が前記化粧品組成物の２．５重量％〜５重量％である、請求項１又は２に記載の化粧品組成物。
4. 不均一な皮膚色調又は加齢によるシミを改善する、低減する、又は治療するための美容方法であって、
   ａ）かかる治療が必要な皮膚表面を識別する工程と、
   ｂ）請求項１〜３のいずれか一項に記載の化粧品組成物を前記皮膚表面に局所的に塗布する工程と、
   治療期間の間、前記皮膚表面の前記不均一な皮膚色調又は加齢によるシミを改善する、低減する、又は治療するのに十分な回数、工程ｂ）を繰り返す工程と、を含む美容方法。
5. 請求項１〜３のいずれか一項に記載の化粧品組成物を皮膚表面に局所的に塗布する工程を含む、皮膚表面におけるトリプシン活性を阻害又は低減するための美容方法。
6. 治療期間の間、前記皮膚表面に前記化粧品組成物を局所的に塗布する工程を繰り返すことを更に含む、請求項４又は５に記載の美容方法。
7. 前記治療期間が４〜１２週間、好ましくは４〜１０週間であり、かつ前記化粧品組成物を局所的に塗布する前記工程が、前記治療期間中少なくとも１日１回、好ましくは前記治療期間中少なくとも１日２回繰り返される、請求項４〜６のいずれか一項に記載の美容方法。
8. 前記化粧品組成物が、前記治療期間の間、十分な量の前記化粧品組成物を収容するように寸法設定されたパッケージで提供される、請求項４〜７のいずれか一項に記載の美容方法。
9. 前記化粧品組成物がローション又はクリームとして提供される、請求項４〜８のいずれか一項に記載の美容方法。
10. 前記皮膚表面が顔の皮膚表面である、請求項４〜９のいずれか一項に記載の美容方法。

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