JP2013532992A - 植物をトランスフェクトする方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、アグロバクテリウム細胞を含有する水性懸濁液を植物に吹き付けることによる植物の一過性トランスフェクションのための方法に関する。本発明はまた、圃場で生育する植物における形質を発生又は変化させる方法を提供する。本発明はまた、圃場における複数の植物において目的のタンパク質を作製する方法に関する。本発明はまた、圃場における作物を害虫から保護する方法に関する。さらに、本発明は、本発明の方法について圃場で生育する植物の一過性トランスフェクションを大規模に行うのに適している、アグロバクテリウム株を含有する水性懸濁液に関する。本発明はまた、アグロバクテリウム細胞を含有する懸濁液を吹き付けることによる植物の一過性トランスフェクションのための特定の無機物質の使用及び当該特定の無機物質に関する。
現在の農業における遺伝子工学的方法は、作物種の安定な遺伝子改変に全て基づいており、1983年に初めて実証され(Fraley et al 1983; Barton et al 1983)、1996年より商業化されている。植物の安定な遺伝子形質転換に基づいた農業方法は今日において現実的なものであり、極めて上出来な新しい実践の基礎となっているが、制約されることが多く、その主なものは、トランスジェニック作物の成長のために非常に長い時間と高いコストが要求されることである。植物バイオテクノロジー関連の会社の間での一般的なコンセンサスは、R&Dの過程は作物種に応じて8〜16年を必要とすること、及び総平均コストは1〜1.5億ドルに見積もられることである。これらの制約のために、植物の遺伝子形質転換方法が発見されてから25年を超えた後でも、ごく少数の形質とわずかなGM作物種とがこれまでのところ市販化されているのみである。
従って、本発明は以下を提供する:
(1)核酸コンストラクト又は目的のDNA配列で植物をトランスフェクトする方法であって、該植物、例えば該植物の地上部に、懸濁液中にアグロバクテリウム株の細胞、及び好ましくは少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を吹き付けることを含み、該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含む、前記方法。該目的のDNA配列は、該植物内で発現されるべきタンパク質又はRNAをコードしていてもよい。
(2)植物における形質を発生又は変化させる方法であって、
該植物を準備し;
懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、該形質を発生又は変化させることの可能なタンパク質又はRNAを該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該タンパク質又は該RNAをコードする、
ことを含む、前記方法。
(3)植物における形質を発生又は変化させる方法であって、
(i)該植物を所望の生育状態まで生育させ;
(ii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、該形質を発生又は変化させることの可能なタンパク質又はRNAを該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該タンパク質又は該RNAをコードする、
ことを含む、前記方法。
(4)植物において目的のタンパク質を製造する方法であって、
(i)該植物を所望の生育状態まで生育させ;
(ii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、目的の該タンパク質を該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該目的のタンパク質をコードする、
ことを含む、前記方法。
(5)圃場における作物を害虫から保護する方法であって、
(i)該圃場の土壌で該植物を生育させ;
(ii)該植物の所望の生育状態において、害虫による該植物の少なくとも一つの侵入を決定し;
(iii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、前工程で決定された害虫に対して有害なタンパク質又はRNAを該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、プロモーターに作動可能に結合された目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該タンパク質又は該RNAをコードする、
ことを含む、前記方法。
(6)該水性懸濁液が、該懸濁液の最大2.2×107cfu/ml、好ましくは最大1.1×107cfu/ml、より好ましくは最大4.4×106cfu/ml、さらに好ましくは最大の1.1×106cfu/mlの濃度で該アグロバクテリウム株の細胞を含有する、(1)〜(5)のいずれか1つに記載の方法。
(7)該研磨剤が、水和剤用の特定の無機担体、例えばシリカ又はカーボランダムである、(1)〜(6)のいずれか1つに記載の方法。
(8)該水性懸濁液が、該懸濁液の0.02〜2重量%の間、好ましくは0.05〜1重量%の間、そしてより好ましくは0.1〜0.5重量%の間の量で該研磨剤を含有する、(7)に記載の方法。
(9)懸濁液に添加される研磨剤の平均粒子径が0.1〜30μmの間、好ましくは0.1〜10μmの間、より好ましくは0.5〜10μmの間、そして最も好ましくは0.5〜5μmの間である、(7)又は(8)に記載の方法。
(10)研磨剤が最大40μm、好ましくは最大30μmのD90値を有し;そして研磨剤が45μmを超える、好ましくは40μmを超える大きさを有する粒子を含有しない、(7)〜(9)のいずれか1つに記載の方法。
(11)該懸濁液が、農業用吹き付け補助剤、好ましくは非イオン性界面活性剤又は湿潤剤をさらに含む、(1)〜(10)のいずれか1つに記載の方法。
(12)吹き付け補助剤が、オルガノシリコン湿潤剤、例えばSilwet L-77である、(11)に記載の方法。
(13)該核酸コンストラクトがT-DNAボーダー配列の少なくとも一つの側の横に配置しており、該植物の細胞内に該核酸コンストラクトを送達させることができる、(1)〜(12)のいずれか1つに記載の方法。
(14)該核酸コンストラクトが、該目的のタンパク質をコードする複製ウイルスベクターをコードし、該ウイルスベクターが該植物において全身移行することができない、(1)〜(13)のいずれか1つに記載の方法。
(15)該目的のDNA配列が、植物細胞において活性的なプロモーターに作動可能に結合されている、(1)〜(13)のいずれか1つに記載の方法。
(16)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液であって、該水性懸濁液が、該懸濁液の最大4.4×107cfu/ml、好ましくは最大1.1×107cfu/ml、好ましくは最大4.4×106cfu/ml、より好ましくは最大1.1×106cfu/mlの濃度で該アグロバクテリウム株の細胞を含有し;該アグロバクテリウム株は、プロモーターに作動可能に連結されていてもよい異種の目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含む異種DNA分子を含み;該懸濁液は、好ましくは非イオン性湿潤剤、例えばオルガノシリコン界面活性剤を場合によりさらに含む、前記懸濁液。
(17)該植物が双子葉植物である、(1)〜(15)のいずれか1つに記載の方法。
(18)該植物が、タバコ若しくはタバコ(Nicotiana)属の他種、テンサイ若しくはベタ(Beta)属の他種、トマト、ジャガイモ、トウガラシ、ダイズ、アルファルファ、エンドウ、豆類、ナタネ若しくはアブラナ(Brassica)属の他種、ワタである、(17)に記載の方法。
(19)該植物が単子葉植物である、(1)〜(15)のいずれか1つに記載の方法。
(20)該植物が、イネ、トウモロコシ、コムギ、オオムギ、オーツ麦、キビ、ソルガムである、(19)に記載の方法。
(21)該タンパク質が、セルロース又はヘミセルロースポリマーの糖化に使用されるセルラーゼである、(4)に記載の方法。
(22)植物の一過性トランスフェクションのための特定の無機物質の使用。該使用において、植物は、アグロバクテリウム細胞及び特定の無機物質を含有する水性懸濁液を吹き付けられてもよい。
(23)懸濁液中に少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を植物の地上部に吹き付け、続けて、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含むアグロバクテリウム株の細胞を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含む、植物をトランスフェクトする方法。該目的のDNA配列は、該植物内で発現されるべきタンパク質又はRNAをコードしていてもよい。
(24)核酸コンストラクト又は目的のDNA配列で植物をトランスフェクトする方法であって、該植物、例えば該植物の地上部に、アグロバクテリウム株の細胞を含有する水性懸濁液を吹き付けることを含み、該アグロバクテリウム株が、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み;該水性懸濁液が、該懸濁液の最大2.2×107cfu/ml、好ましくは最大1.1×107cfu/ml、より好ましくは最大4.4×106cfu/ml、さらに好ましくは最大の1.1×106cfu/mlの濃度で該アグロバクテリウム株の細胞を含有し;該懸濁液が、農業用吹き付け補助剤、好ましくは非イオン性界面活性剤又は湿潤剤をさらに含む、前記方法。
本発明において、アグロバクテリウムは、アグロバクテリウム株の細胞を含有する水性懸濁液を吹き付けることにより目的の配列又はコンストラクトで植物をトランスフェクトするために用いられる。アグロバクテリウム株は、一般的に植物の形質転換及びトランスフェクションに用いられ、且つ一般的知識から当業者に公知であるアグロバクテリウム ツメファシエンス及びアグロバクテリウム リゾゲネスの種に属するものでもよい。アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含む。目的のDNA配列は、植物において発現されるべきタンパク質又はRNAをコードする。核酸コンストラクトは、アグロバクテリウム株の分泌系により植物細胞の中に核酸コンストラクトを導入するために、典型的にTiプラスミドのT-DNAに存在している。該目的のDNA配列での該植物のトランスフェクション及び該植物の細胞の導入を可能とするために、核酸コンストラクトは、少なくとも一方の側又は両側において、T-DNAボーダー配列の横に配置されている。核酸コンストラクトにおいて、目的のDNA配列は、例えば植物細胞内で発現可能であるように存在している。このため、目的のDNA配列は、該核酸コンストラクトにおいて、典型的に植物細胞で活動的なプロモーターの制御下にある。目的のDNA配列の例としては、DNAウイルスレプリコン又はRNAウイルスレプリコン又は発現されるべき遺伝子をコードするDNA配列である。遺伝子は、植物の細胞内で発現されるべき目的のRNA又は目的のタンパク質をコードしていてもよい。ウイルスレプリコンもまた、典型的に、植物において発現されるべきRNA又は目的のタンパク質をコードする。DNAコンストラクトは、目的のDNA配列に加えて、目的のDNA配列の発現のための調節配列等の他の配列を含んでいてもよい。アグロバクテリウムを媒介とした遺伝子送達及びそのためのベクターは、例えば、序論で引用された参考文献から、又は、Slater, Scott and Fowler, Plant Biotechnology, second edition, Oxford University Press, 2008等の植物バイオテクノロジーに関する教科書から、当業者に公知である。
(A-2)多価アルコール型界面活性剤:多価アルコール型界面活性剤の例としては、グリセロール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ソルビトール脂肪酸(C12-18)エステル、ソルビタン脂肪酸(C12-8)エステル、ショ糖脂肪酸エステル、多価アルコールアルキルエーテル、及び脂肪酸アルカノールアミドが含まれる。
(B-1)カルボン酸型界面活性剤:カルボン酸型界面活性剤の例としては、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリマレイン酸、マレイン酸及びオレフィン(例えば、イソブチレン及びジイソブチレン)のコポリマー、アクリル酸及びイタコン酸のコポリマー、メタクリル酸及びイタコン酸のコポリマー、マレイン酸及びスチレンのコポリマー、アクリル酸及びメタクリル酸のコポリマー、アクリル酸及びアクリル酸メチルのコポリマー、アクリル酸及び酢酸ビニルのコポリマー、アクリル酸及びマレイン酸のコポリマー、N-メチル-脂肪酸(C12-18)サルコシネート、樹脂酸及び脂肪酸(C12-18)等のカルボン酸等、並びにこれらのカルボン酸の塩が含まれる。
(B-3)スルホン酸型界面活性剤:スルホン酸型界面活性剤の例としては、パラフィン(C12-22)スルホン酸、アルキル(C8-12)ベンゼンスルホン酸、アルキル(C8-12)ベンゼンスルホン酸のホルムアルデヒド凝集物、クレゾールスルホン酸のホルムアルデヒド凝集物、オレフィン(C14-16)スルホン酸、ジアルキル(C8-12)スルホコハク酸、リグニンスルホン酸、ポリオキシエチレン(モノ又はジ)アルキル(C8-12)フェニルエーテルスルホン酸、ポリオキシエチレンアルキル(C12-18)エーテルスルホコハク酸ハーフエステル、ナフタレンスルホン酸、(モノ、又はジ)アルキル(C1-6)ナフタレンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸のホルムアルデヒド凝集物、(モノ、又はジ)アルキル(C1-6)ナフタレンスルホン酸のホルムアルデヒド凝集物、クレソオート油スルホン酸のホルムアルデヒド凝集物、アルキル(C8-12)ジフェニルエーテルジスルホン酸、イゲポンT(商品名)、ポリスチレンスルホン酸、スチレンスルホン酸−メタクリル酸コポリマーのスルホン酸等、及びこれらのスルホン酸の塩が含まれる。
ml当たりのコロニー形成単位(cfu/ml)を単位とする懸濁液中のアグロバクテリウム細胞の濃度は、以下のプロトコールを用いて決定することができる。コンストラクトpNMD620で形質転換されたアグロバクテリウム ツメファシエンスICF320株の細胞を、25mg/Lカナマイシン(AppliChem、A1493)及び50mg/Lリファンピシン(Carl Roth、4163.2)を含有する7.5mlの液体LBS培地の中で増殖させた。細菌培養物を、継続的に振盪しながら28℃でインキュベートした。吸光度単位(absorbance unit)(AU)で表される細菌培養物の吸光度又は光学密度を、培養物の1ml一定分量において分光光度計を用いて600nm波長(OD600)で観測した。多くの液体培養物のミリリットル当たりのコロニー形成単位(cfu/ml)として見積もられた細胞濃度は、OD600値1;1.3;1.5;1.7及び1.8で分析することができる。このため、250μl一定分量の液体培養物をLBS培地で希釈して、25mlの最終量を得た(1:100希釈物)。そのような1:100希釈物の2.5mlを22.5mlのLBSと混合して、1:1000希釈物を得た。1:100;1:1,000;1:10,000;1:100,000;1:1,000,000;1:10,000,000及び1:100,000,000希釈の液体培養物を同様に調製した。最後の3つの希釈物の一定分量を、25mg/Lカナマイシン及び50mg/Lリファンピシンが添加されたアガーで固化したLBS培地の上に塗布した(90mm直径のプレート当たり250μlの細菌培養物)。各希釈物についての一定分量の塗布は三重に実施した。28℃での2日間のインキュベーションの後、細菌コロニーを各プレートについて計測した。1:1,000,000及び1:10,000,000希釈物の塗布は、プレート当たりそれぞれ数百個及び数十個のコロニーという結果であった。1:100,000,000希釈物がプレート当たり数個のコロニーを提供する限り、この希釈は細胞濃度の計算について使用しなかった。細胞濃度は、式:cfu/ml=4×プレート当たりのコロニー数×希釈係数、に従って見積もった。
1%大豆ペプトン(大豆ミールのパパイン加水分解物;Duchefa、S1330)
0.5%酵母抽出物(Duchefa、Y1333)
1%塩化ナトリウム(Carl Roth、9265.2)
水に溶解させ、1M NaOH(Carl Roth、6771.2)でpH7.5に調整する。
本研究において、我々は、35S CaMVプロモーターに基づく標準的な転写ベクター、並びに細胞間移行能力を有する又は有さないTMV及びPVXに基づくウイルスレプリコンを使用した。
我々は、界面活性剤を含有する希釈されたアグロバクテリム培養物を植物に吹き付けることによって、ベンサミアナタバコ植物をトランスフェクトできることを示した(図6)。トランスフェクションに影響を及ぼすパラメーターを評価するため、そしてトランスフェクション効率を最適化するために、我々は、アグロバクテリウム懸濁液中にベンサミアナタバコの葉を浸漬することを利用した。このアプローチは、正確な測定と、複合的な実験バージョンを簡便に試験することとを可能にする。アグロバクテリウム一晩培養物(OD600=1.5)を、10mM硫酸マグネシウムを含有し、界面活性剤Silwet L-77が添加された10mM MESバッファー(pH5.5)において1:100及び1:1000希釈した(それぞれ、希釈係数10-2及び10-2)。GFP発現を提供する3つの型のコンストラクトを試験した:1)転写ベクター、2)TMVに基づくウイルスレプリコン、及び3)PVXに基づくウイルスレプリコン(図6)。これらの実験において使用されたウイルスベクターは、全身移行及び細胞間移行の両方とも不可能であった。それらは、T-DNAでトランスフェクトされた細胞においてのみレポーター遺伝子の発現を提供した。GFP発現細胞の百分率を、葉のプロトプラストを単離した後で計測した(図7)。アグロバクテリウム懸濁液濃度が依存し、そしてベクターの型に関わらず、体積当たり0.1%のSilwet-L77及び1分間の浸漬時間が使用された場合、合計の葉の細胞の2〜8%が、アグロバクテリウムを媒介したT-DNA送達の結果としてトランスフェクトされた。
我々は、吹き付け及び界面活性剤を伴うアグロバクテリウムのトランスフェクションを用いた植物の数を試験した。まず、我々は、最適な発現ベクターのためにそれぞれの種をスクリーニングした。このため、植物の葉を、GFP発現転写ベクター:1)転写ベクター35S-GFP+P19(pNMD293)、2)細胞間移行が可能なTMVに基づくウイルスベクターTMV(MP)-GFP(pNMD560)、3)細胞間移行が不可能なTMVに基づくウイルスベクターTMV(fsMP)-GFP(pNMD570)、4)全身移行及び細胞間移行の両方とも可能なPXVに基づくウイルスベクターPVX(CP)-GFP(pNMD630)及び5)全身移行及び細胞間移行の両方とも不可能なPVXに基づくウイルスベクターPVX(ΔCP)-GFP(pNMD620)、を有する5つのアグロバクテリウム培養物のOD=1.5の1:100希釈物で無針シリンジを用いて浸潤させた。いくつかの事例では減圧浸潤を実施した。
これらの実験で使用するカーボランダムを、Mineraliengrosshandel Hausen GmbH、テルフス、オーストリアからのカーボランダム(炭化ケイ素)F800、F1000及びF1200粒子の混合物とした。供給業者によると、F800、F1000及びF1200は、それぞれ6.5、4.5及び3μmの表面中位径(surface median diameter)を有する。F800、F1000及びF1200の粒子の97質量%は、それぞれ14、10及び7μmよりも小さい表面直径(surface diameter)を有する。粒子の94質量%は、それぞれ2、1、及び1μmよりも大きい表面直径を有する。F800、F1000及びF1200を等量の重量で混合した。0.3%(w/v)の混合カーボランダムを0.1% Silwet L-77が添加されたアグロバクテリウム懸濁液に加え、実施例3に記載された噴霧器を用いた植物の吹き付けのために使用した。
我々は、希釈されたアグロバクテリウムを用いたベンサミアナタバコ植物の複合的な連続処理を実施した。この目的のために、以下のコンストラクトを有するアグロバクテリウムの希釈懸濁液の中に葉を浸漬させた:pNMD570(細胞間移行能力を持たないTMV(fsMP)-GFP)、pNMD560(細胞間移行能力を持つTMV(MP)-GFP)、pNMD580(細胞間移行能力を持つTMV(MP)-DsRED)、pNMD620(細胞間移行能力を持たないPVX(ΔCP)-GFP)、pNMD600(細胞間移行能力及び全身移行能力を持つPVX(CP)-GFP)及びpNMD610(細胞間移行能力及び全身移行能力を持つPVX(CP)-dsRED)。トランスフェクション後、これらのベクターは、色及び大きさの異なる蛍光スポットを形成する(図24)。我々は、各試験葉の浸漬トランスフェクションを、3つの異なる培養物で、そしてトランスフェクションの間は7日間間隔で実施した。8通りの試験ベクターの組み合わせのそれぞれについてアグロバクテリウムでのトランスフェクションはいずれも成功し、特定のサイレンシング効果は観察されなかった(図24)。
我々は、アグロバクテリウム懸濁液の1:100及び1:1000希釈物のベンサミアナタバコ植物への吹き付けが、細胞間移行が可能なウイルスレプリコンの効果的な送達を提供し、それはアグロバクテリウムの浸潤を利用して達成された発現と比較して、目的の遺伝子の高発現を結果としてもたらすことを実証した。このことは、GFP(図25)、ヒトアルファ−aインターフェロン及びklip27−ミニインスリン(図26)、並びにサーモビフィダ フスカ由来のエキソ型セルラーゼE3、トリコデルマ リーゼイ由来のエキソグルカナーゼ1(CBH I)、フミコーラ グリセア由来のβ−グルコシダーゼBGL4及びサーモビフィダ フスカ由来のエキソ型セルラーゼE3を含むいくつかのセルラーゼ(図27)について実証された。
我々は、トマト由来のMYB転写因子アントシアニン1(ANT1)の発現を提供するPVXに基づくウイルスベクターを有するアグロバクテリウム懸濁液で浸潤されたタバコ葉におけるアントシアニン生合成の誘導を実証した(図28)。
我々は、アンチセンス方向でのPDSコーディング配列のフラグメントを含有するPVXに基づくウイルスベクターを有するアグロバクテリウム懸濁液を葉に吹き付けた後の、フィトエンデサチュラーゼ(PDS)遺伝子のサイレンシングにより引き起こされるベンサミアナタバコ葉の光退色を実証した(図37)。このコンストラクト(pNMD050)を作製するため、ベンサミアナタバコフィトエンデサチュラーゼ(PDS)cDNA(EU165355)を、pNMD640クローニングベクターの中にBsaI部位を用いてアンチセンス方向において挿入した。
我々は、シュードモナス由来のフラジェリン遺伝子の発現を提供するPVXに基づくベクター(pNMD1953)を有するアグロバクテリウム懸濁液を植物に予備的に吹き付けた後の、ベンサミアナタバコ葉におけるシュードモナス シリンゲ感染により引き起こされる壊死病斑の数の減少を実証した(図38)。pNMD1953プラスミドを作製するため、pNMD630コンストラクトの中で、GFPコーディング配列を、シュードモナス シリンゲ由来のフラジェリンをコードする配列(YP236536)がインフレームで融合されたオオムギ(Hordeum vulgare)アルファ−アミラーゼ(AMY3)遺伝子(FN179391)由来のアポプラストシグナルペプチドをコードするフラグメントを含む配列に置換した。4つのベンサミアナタバコ植物を、吹き付けによりアグロバクテリウム培養物(OD600=1.3)の1:1000希釈物で接種した。アグロバクテリウム培養物の6dpiで、吹き付けにより1×105cfu/mlのシュードモナス シリンゲB728で全ての植物を接種した。シュードモナスの7dpiで、各植物の2枚の葉の上の壊死スポットを計測することにより病徴を点数付した。葉1枚当たりのシュードモナス感染により引き起こされる壊死スポットの数を、4つの植物の各2枚の葉の平均として与えた。
配列番号1:pNMD280のT-DNA領域のTNA領域
配列番号2:pNMD033のT-DNA領域のTNA領域
配列番号3:pNMD035のT-DNA領域のTNA領域
配列番号4:pNMD661のT-DNA領域のTNA領域
配列番号5:pNMD670のT-DNA領域のTNA領域
配列番号6:pNMD694のT-DNA領域のTNA領域
配列番号7:pNMD1971のT-DNA領域のTNA領域
配列番号8:pNMD2210のT-DNA領域のTNA領域
配列番号9:pNMD050のT-DNA領域のTNA領域
配列番号10:pNMD1953のT-DNA領域のTNA領域
参考文献
Claims (15)
- 植物をトランスフェクトする方法であって、懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、該アグロバクテリウム株は、植物の細胞内にトランスフェクトされるべき目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含む、前記方法。
- 植物における形質を発生又は変化させる方法であって、
(i)該植物を所望の生育状態まで生育させ;
(ii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、該形質を発生又は変化させることの可能なタンパク質又はRNAを該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該タンパク質又は該RNAをコードする、
ことを含む、前記方法。 - 植物において目的のタンパク質を製造する方法であって、
(i)該植物を所望の生育状態まで生育させ;
(ii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、目的の該タンパク質を該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該目的のタンパク質をコードする、
ことを含む、前記方法。 - 圃場における作物を害虫から保護する方法であって、
(i)該圃場の土壌で該植物を生育させ;
(ii)該植物の所望の生育状態において、害虫による該植物の少なくとも一つの侵入を決定し;
(iii)懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液を該植物の地上部に吹き付けることを含み、前工程で決定された害虫に対して有害なタンパク質又はRNAを該植物内で発現させる、
該アグロバクテリウム株は、プロモーターに作動可能に結合された目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含むDNA分子を含み、該目的のDNA配列は該タンパク質又は該RNAをコードする、
ことを含む、前記方法。 - 該水性懸濁液が、該懸濁液の最大2.2×107cfu/ml、好ましくは最大1.1×107cfu/ml、より好ましくは最大4.4×106cfu/ml、さらに好ましくは最大1.1×106cfu/mlの濃度で該アグロバクテリウム株の細胞を含有する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 該研磨剤が、シリカ又はカーボランダム等の水和剤用の特定の無機担体である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 該水性懸濁液が、該懸濁液の0.02〜2重量%の間、好ましくは0.05〜1重量%の間、そしてより好ましくは0.1〜0.5重量%の間の量で該研磨剤を含有する、請求項6に記載の方法。
- 懸濁液に添加される研磨剤の平均粒子径が0.1〜30μmの間、好ましくは0.1〜10μmの間、より好ましくは0.5〜10μmの間、そして最も好ましくは0.5〜5μmの間である、請求項6又は7に記載の方法。
- 研磨剤が最大40μm、好ましくは最大30μmのD90値を有し;そして研磨剤が45μmを超える、好ましくは40μmを超える大きさを有する粒子を含有しない、請求項6〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 該懸濁液が、農業用吹き付け補助剤、好ましくは非イオン性界面活性剤又は湿潤剤をさらに含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 吹き付け補助剤が、オルガノシリコン湿潤剤、例えばSilwet L-77である、請求項10に記載の方法。
- 該核酸コンストラクトがT-DNAボーダー配列の少なくとも一つの側の横に配置しており、該植物の細胞内に該核酸コンストラクトを送達させることができる、請求項1〜11のいずれか1項に記載の方法。
- 該核酸コンストラクトが、該目的のタンパク質をコードする複製ウイルスベクターをコードし、該ウイルスベクターが該植物において全身移行することができない、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 該目的のDNA配列が、植物細胞において活性的なプロモーターに作動可能に結合されている、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 懸濁液中に懸濁されたアグロバクテリウム株の細胞及び少なくとも一つの研磨剤を含有する水性懸濁液であって、該水性懸濁液が、該懸濁液の最大4.4×107cfu/ml、好ましくは最大1.1×107cfu/ml、好ましくは最大4.4×106cfu/ml、より好ましくは最大1.1×106cfu/mlの濃度で該アグロバクテリウム株の細胞を含有し;該アグロバクテリウム株は、プロモーターに作動可能に連結されていてもよい異種の目的のDNA配列を含有する核酸コンストラクトを含む異種DNA分子を含み;該懸濁液は、好ましくは、オルガノシリコン界面活性剤等の非イオン性湿潤剤を場合によりさらに含む、前記懸濁液。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10125370B2 (en) | 2013-09-06 | 2018-11-13 | Mitsubishi Chemical Corporation | Method for producing protein in plants using lighting with at least 50% red light |
Families Citing this family (69)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-01-17 | Beelogics Inc. | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
US8962584B2 (en) | 2009-10-14 | 2015-02-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. | Compositions for controlling Varroa mites in bees |
EP2545182B1 (en) | 2010-03-08 | 2017-05-03 | Monsanto Technology LLC | Polynucleotide molecules for gene regulation in plants |
US10829828B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-11-10 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
CN104160028A (zh) | 2011-09-13 | 2014-11-19 | 孟山都技术公司 | 用于杂草控制的方法和组合物 |
US9840715B1 (en) | 2011-09-13 | 2017-12-12 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delaying senescence and improving disease tolerance and yield in plants |
US10760086B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-09-01 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
US10806146B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-10-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
AU2012308694B2 (en) | 2011-09-13 | 2018-06-14 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
MX342856B (es) | 2011-09-13 | 2016-10-13 | Monsanto Technology Llc | Metodos y composiciones para el control de malezas. |
MX362812B (es) | 2011-09-13 | 2019-02-13 | Monsanto Technology Llc | Metodos y composiciones para el control de malezas. |
US9920326B1 (en) | 2011-09-14 | 2018-03-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for increasing invertase activity in plants |
EP2647715A1 (en) | 2012-04-03 | 2013-10-09 | Nomad Bioscience GmbH | Agrobacterium for transient transfection of whole plants |
US10240161B2 (en) | 2012-05-24 | 2019-03-26 | A.B. Seeds Ltd. | Compositions and methods for silencing gene expression |
US9145340B2 (en) | 2012-08-13 | 2015-09-29 | Verdesian Life Sciences, Llc | Method of reducing atmospheric ammonia in livestock and poultry containment facilities |
TWI510617B (zh) * | 2012-08-15 | 2015-12-01 | Nat Univ Chung Hsing | 農桿菌Agrobacterium tumefaciens 1D1460菌株及其用於產生轉殖植物之用途 |
US9617297B2 (en) * | 2012-10-11 | 2017-04-11 | The Regents Of The University Of California | Apoplast wash fluid recovery for improved recombinant endoglucanase extraction in tabacco leaves |
US9961922B2 (en) | 2012-10-15 | 2018-05-08 | Verdesian Life Sciences, Llc | Animal feed and/or water amendments for lowering ammonia concentrations in animal excrement |
CA2888264A1 (en) | 2012-10-18 | 2014-04-24 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for plant pest control |
UY35251A (es) | 2013-01-01 | 2014-07-31 | Seeds Ltd Ab | MOLÉCULAS DE dsRNA AISLADAS Y MÉTODOS PARA USARLAS PARA SILENCIAR MOLÉCULAS DIANA DE INTERÉS |
US10683505B2 (en) | 2013-01-01 | 2020-06-16 | Monsanto Technology Llc | Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression |
US10000767B2 (en) | 2013-01-28 | 2018-06-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for plant pest control |
MX364458B (es) | 2013-03-13 | 2019-04-26 | Monsanto Technology Llc | Métodos y composiciones para el control de malezas. |
AR095233A1 (es) | 2013-03-13 | 2015-09-30 | Monsanto Technology Llc | Métodos y composiciones para el control de malezas |
US20140283211A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Monsanto Technology Llc | Methods and Compositions for Plant Pest Control |
US10568328B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-25 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
WO2014147235A1 (en) * | 2013-03-22 | 2014-09-25 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Kits comprising plus-sense single stranded rna viral vectors and methods for producing polypeptides using the kits |
CA2913068C (en) | 2013-05-23 | 2023-01-10 | Nomad Bioscience Gmbh | Process of providing plants with abiotic stress resistance |
US9850496B2 (en) | 2013-07-19 | 2017-12-26 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
WO2015010026A2 (en) | 2013-07-19 | 2015-01-22 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling leptinotarsa |
US11254620B2 (en) | 2013-08-05 | 2022-02-22 | Verdesian Life Sciences U.S., Llc | Micronutrient-enhanced polymeric seed coatings |
TW201522390A (zh) | 2013-08-27 | 2015-06-16 | 特級肥料產品公司 | 聚陰離子聚合物 |
WO2015035031A1 (en) | 2013-09-05 | 2015-03-12 | Verdesian Life Sciences, Llc | Polymer-boric acid compositions |
NZ719544A (en) | 2013-11-04 | 2022-09-30 | Beeologics Inc | Compositions and methods for controlling arthropod parasite and pest infestations |
UA119253C2 (uk) | 2013-12-10 | 2019-05-27 | Біолоджикс, Інк. | Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл |
BR112016016337A2 (pt) | 2014-01-15 | 2017-10-03 | Monsanto Technology Llc | Composição e métodos para controlar crescimento, desenvolvimento ou a capacidade de reprodução de uma planta, e para sensibilizar uma planta para um herbicida inibidor de epsps |
CN106413390B (zh) | 2014-04-01 | 2019-09-27 | 孟山都技术公司 | 用于控制虫害的组合物和方法 |
US10519070B2 (en) | 2014-05-21 | 2019-12-31 | Verdesian Life Sciences U.S., Llc | Polymer soil treatment compositions including humic acids |
US10822487B2 (en) | 2014-05-22 | 2020-11-03 | Verdesian Life Sciences Llc | Polymeric compositions |
AU2015280252A1 (en) | 2014-06-23 | 2017-01-12 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for regulating gene expression via RNA interference |
WO2015200539A1 (en) | 2014-06-25 | 2015-12-30 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression |
US10378012B2 (en) | 2014-07-29 | 2019-08-13 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling insect pests |
JP6942632B2 (ja) | 2015-01-22 | 2021-09-29 | モンサント テクノロジー エルエルシー | Leptinotarsa防除用組成物及びその方法 |
EP3097783B1 (en) | 2015-05-26 | 2019-11-13 | Nomad Bioscience GmbH | Colicin m for the control of ehec |
AU2016270870A1 (en) | 2015-06-02 | 2018-01-04 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant |
EP3302030A4 (en) * | 2015-06-03 | 2019-04-24 | Monsanto Technology LLC | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE INTRODUCTION OF NUCLEIC ACIDS IN PLANTS |
EP3178313A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-14 | Leibniz-Institut für Pflanzenbiochemie | Gene and protein for the synthesis of oxidized zingiberene derivatives |
CA3055389A1 (en) | 2017-03-07 | 2018-09-13 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Hppd variants and methods of use |
CA3055396A1 (en) | 2017-03-07 | 2018-09-13 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Hppd variants and methods of use |
EP3372091A1 (en) | 2017-03-07 | 2018-09-12 | Nomad Bioscience GmbH | Method of reducing contamination of an object with clostridium |
EP3378485A1 (en) | 2017-03-24 | 2018-09-26 | Nomad Bioscience GmbH | Bacteriocins for control of salmonella enterica |
ES2693895A1 (es) | 2017-06-12 | 2018-12-14 | Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) | Vectores binarios y usos de los mismos |
EP3456829A1 (en) | 2017-09-18 | 2019-03-20 | Nomad Bioscience GmbH | Method of improving potexviral vector stability |
JP2021514391A (ja) | 2018-02-15 | 2021-06-10 | アイコン ジェネティクス ゲーエムベーハー | ノロウイルスに対する免疫応答を生成するための免疫原性組成物及びワクチン |
EP3784022A4 (en) * | 2018-04-27 | 2022-01-19 | Monsanto Technology LLC | PLANT SURFACE ABRASION SYSTEM AND METHOD |
CN108513908B (zh) * | 2018-05-10 | 2021-09-14 | 南京农业大学 | 一种四倍体不结球白菜的培育方法 |
CN113302308A (zh) * | 2018-11-13 | 2021-08-24 | 马里兰大学派克分院 | 植物载体、组合物和与其相关的用途 |
US20220152186A1 (en) | 2019-03-12 | 2022-05-19 | Icon Genetics Gmbh | Norovirus-like particles with improved stability |
CN110117556B (zh) * | 2019-03-27 | 2022-05-13 | 海南大学 | 一种产脂肽类物质的生防菌hn-2及发酵工艺 |
AU2020278906A1 (en) | 2019-05-23 | 2021-11-25 | Nomad Bioscience Gmbh | RNA viral RNA molecule for gene editing |
CN114206371A (zh) | 2019-06-06 | 2022-03-18 | 诺麦生物科学有限公司 | 用于控制克雷伯氏菌属的克雷伯菌素 |
MX2023000708A (es) | 2020-07-16 | 2023-02-14 | Nomad Bioscience Gmbh | Productos para consumo oral con contenido reducido de azucar. |
EP4243608A1 (en) | 2020-11-11 | 2023-09-20 | Leibniz-Institut für Pflanzenbiochemie (IPB) | Fusion protein for editing endogenous dna of a eukaryotic cell |
CN112544440A (zh) * | 2020-12-23 | 2021-03-26 | 江苏师范大学 | 块根植物的转基因或基因编辑新苗的培育方法 |
CN112662599B (zh) * | 2021-01-27 | 2022-06-14 | 吉林省农业科学院 | 一株禽源贝莱斯芽孢杆菌cl-4及其应用 |
CN112795590B (zh) * | 2021-03-29 | 2022-11-01 | 兰州大学 | 一种草木樨毛状根转化方法 |
CN114736920A (zh) * | 2022-03-01 | 2022-07-12 | 中国计量大学 | 农杆菌侵染菜豆叶片实现目的基因瞬时过表达或瞬时沉默的方法 |
EP4248987A1 (en) | 2022-03-21 | 2023-09-27 | Nomad Bioscience GmbH | Chimeric bacteriocins and method for the control of pseudomonas |
CN114657207A (zh) * | 2022-03-25 | 2022-06-24 | 浙江农林大学 | 一种芸香科植物的遗传转化体系、遗传转化方法和应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006101827A (ja) * | 2004-10-08 | 2006-04-20 | Japan Science & Technology Agency | 雄性不稔形質転換植物体の生産方法およびこれを用いて得られる植物体、並びにその利用 |
JPWO2006038571A1 (ja) * | 2004-10-01 | 2008-05-15 | 独立行政法人農業生物資源研究所 | 減圧処理/加圧処理の使用を含む、アグロバクテリウムを用いる細胞への核酸導入方法 |
JPWO2007069643A1 (ja) * | 2005-12-13 | 2009-05-21 | 日本たばこ産業株式会社 | 粉体を用いて形質転換効率を向上させる方法 |
WO2010018693A1 (ja) * | 2008-08-15 | 2010-02-18 | 国立大学法人神戸大学 | PPRTp遺伝子を利用した植物脂質合成の促進法 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AUPM926794A0 (en) | 1994-11-04 | 1994-12-01 | Daratech Pty Ltd | Herbicidal formulations |
BR9815260A (pt) | 1997-10-24 | 2000-11-21 | Du Pont | Sistema de expressao viral transgenico binario, metodo de alteracao da expressa de gene vegetal endogeno ou transgene em uma planta, medoto de alteracao dos niveis de uma proteina codificada por um gene alvo em uma planta e sistema de replicacao viral. |
HUP0104697A3 (en) | 1998-09-23 | 2003-12-29 | Du Pont | Binary viral expression system in plants |
US6501009B1 (en) * | 1999-08-19 | 2002-12-31 | Monsanto Technology Llc | Expression of Cry3B insecticidal protein in plants |
US7838219B2 (en) * | 2001-02-02 | 2010-11-23 | Novici Biotech Llc | Method of increasing complementarity in a heteroduplex |
DE10109354A1 (de) | 2001-02-27 | 2002-09-05 | Icon Genetics Ag | Rekombinante virale Schaltersysteme |
JP4707254B2 (ja) | 2001-04-24 | 2011-06-22 | クミアイ化学工業株式会社 | 粒状組成物及びその製造方法 |
DE10121283B4 (de) | 2001-04-30 | 2011-08-11 | Icon Genetics GmbH, 80333 | Verfahren und Vektoren zur Amplifikation oder Expression von gewünschten Nucleinsäuresequenzen in Pflanzen |
JP4073001B2 (ja) | 2002-03-27 | 2008-04-09 | クミアイ化学工業株式会社 | 顆粒状水和剤 |
WO2002097080A2 (en) | 2002-04-30 | 2002-12-05 | Icon Genetics Ag | Amplification vectors based on trans-splicing |
WO2005049839A2 (en) | 2003-11-10 | 2005-06-02 | Icon Genetics Ag | Rna virus-derived plant expression system |
EP1564295A1 (en) | 2004-01-23 | 2005-08-17 | Icon Genetics AG | RNA virus-derived plant expression system |
EP1616959A1 (en) * | 2004-07-07 | 2006-01-18 | Icon Genetics AG | Biological safe transient protein expression in plants |
CA2611915C (en) | 2005-06-15 | 2013-02-19 | Nissan Chemical Industries, Ltd. | Water dispersible agricultural chemical granules and method of producing the same |
DE202005010848U1 (de) | 2005-06-27 | 2005-09-15 | Plasser Bahnbaumasch Franz | Fahrzeug mit einer Arbeitsbühne |
WO2007050715A2 (en) * | 2005-10-26 | 2007-05-03 | Integrated Plant Genetics, Inc. | Compositions and methods for safe delivery of biologically-active plant transformation agents using non-fibrous silicon carbide powder |
DE102006002765A1 (de) | 2006-01-20 | 2007-07-26 | Degussa Gmbh | Neue Pflanzenschutzmittelabsorbate und Erzeugnisse für den Pflanzenschutz |
CA2648886C (en) | 2006-05-29 | 2015-10-20 | Icon Genetics Gmbh | Plant virus-based inducible expression system |
EP1897953A1 (en) | 2006-09-06 | 2008-03-12 | Icon Genetics GmbH | Potexvirus-derived replicon |
-
2010
- 2010-08-11 EP EP10008393A patent/EP2418283A1/en not_active Withdrawn
-
2011
- 2011-05-06 US US13/814,544 patent/US20130212739A1/en not_active Abandoned
- 2011-05-06 WO PCT/EP2011/002279 patent/WO2012019660A1/en active Application Filing
- 2011-05-06 CN CN2011800481434A patent/CN103282499A/zh active Pending
- 2011-05-06 MX MX2013001459A patent/MX346926B/es active IP Right Grant
- 2011-05-06 EP EP11724948.2A patent/EP2601295B1/en active Active
- 2011-05-06 CA CA2807544A patent/CA2807544C/en active Active
- 2011-05-06 ES ES11724948.2T patent/ES2654583T3/es active Active
- 2011-05-06 AU AU2011288653A patent/AU2011288653B2/en active Active
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- 2011-05-06 JP JP2013523501A patent/JP5898681B2/ja active Active
- 2011-05-06 RU RU2013110019/10A patent/RU2013110019A/ru unknown
-
2018
- 2018-11-19 US US16/195,049 patent/US20190136260A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2006038571A1 (ja) * | 2004-10-01 | 2008-05-15 | 独立行政法人農業生物資源研究所 | 減圧処理/加圧処理の使用を含む、アグロバクテリウムを用いる細胞への核酸導入方法 |
JP2006101827A (ja) * | 2004-10-08 | 2006-04-20 | Japan Science & Technology Agency | 雄性不稔形質転換植物体の生産方法およびこれを用いて得られる植物体、並びにその利用 |
JPWO2007069643A1 (ja) * | 2005-12-13 | 2009-05-21 | 日本たばこ産業株式会社 | 粉体を用いて形質転換効率を向上させる方法 |
WO2010018693A1 (ja) * | 2008-08-15 | 2010-02-18 | 国立大学法人神戸大学 | PPRTp遺伝子を利用した植物脂質合成の促進法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6015026587; Plant Molecular Biology Vol. 63, No. 3, 200702, p. 393-404 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10125370B2 (en) | 2013-09-06 | 2018-11-13 | Mitsubishi Chemical Corporation | Method for producing protein in plants using lighting with at least 50% red light |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20130212739A1 (en) | 2013-08-15 |
CA2807544A1 (en) | 2012-02-16 |
CN103282499A (zh) | 2013-09-04 |
AU2011288653B2 (en) | 2014-10-09 |
EP2418283A1 (en) | 2012-02-15 |
CA2807544C (en) | 2020-03-24 |
EP2601295A1 (en) | 2013-06-12 |
US20190136260A1 (en) | 2019-05-09 |
BR112013002981B1 (pt) | 2019-07-09 |
ES2654583T3 (es) | 2018-02-14 |
MX2013001459A (es) | 2013-07-05 |
BR112013002981A2 (pt) | 2016-06-07 |
AU2011288653A1 (en) | 2013-02-28 |
WO2012019660A1 (en) | 2012-02-16 |
JP5898681B2 (ja) | 2016-04-06 |
MX346926B (es) | 2017-04-05 |
EP2601295B1 (en) | 2017-12-13 |
RU2013110019A (ru) | 2014-09-20 |
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