JP2013100530A - 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう - Google Patents
脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013100530A JP2013100530A JP2013007324A JP2013007324A JP2013100530A JP 2013100530 A JP2013100530 A JP 2013100530A JP 2013007324 A JP2013007324 A JP 2013007324A JP 2013007324 A JP2013007324 A JP 2013007324A JP 2013100530 A JP2013100530 A JP 2013100530A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lipid
- miscella
- lipid composition
- lcpufa
- solvent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 189
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims description 29
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title claims description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 199
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 128
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 81
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims abstract description 44
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical group CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 72
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 59
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 41
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 36
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 31
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 31
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 31
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 29
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 25
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 claims description 25
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 24
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 claims description 24
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 22
- 241000233671 Schizochytrium Species 0.000 claims description 16
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 claims description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 14
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 claims description 13
- -1 sterol esters Chemical class 0.000 claims description 13
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 12
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 9
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims description 9
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 7
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 7
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 claims description 7
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 claims description 7
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000199914 Dinophyceae Species 0.000 claims description 6
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 claims description 6
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004164 Wax ester Substances 0.000 claims description 6
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 6
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 claims description 6
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000019386 wax ester Nutrition 0.000 claims description 6
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 5
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 5
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims description 4
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000009991 scouring Methods 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 232Th Chemical compound [232Th] ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 0.000 claims description 2
- 241000321369 Cephalopholis fulva Species 0.000 claims description 2
- 229910052776 Thorium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- MAMJNXVNGGBHFN-UHFFFAOYSA-N docosa-1,3,5,7,9,11-hexaene Chemical compound CCCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=C MAMJNXVNGGBHFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims 1
- 235000020978 long-chain polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 abstract description 49
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 22
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 abstract 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract 1
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 98
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 50
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 49
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 24
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 24
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 21
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 21
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N palmitic acid group Chemical group C(CCCCCCCCCCCCCCC)(=O)O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 14
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 12
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 11
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 9
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 description 8
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 8
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 description 7
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 7
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 7
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 3
- HOBAELRKJCKHQD-UHFFFAOYSA-N (8Z,11Z,14Z)-8,11,14-eicosatrienoic acid Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCCCC(O)=O HOBAELRKJCKHQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKLJLHAPJBUBNL-UHFFFAOYSA-N 12-methyltetradecanoic acid Chemical compound CCC(C)CCCCCCCCCCC(O)=O XKLJLHAPJBUBNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 2-Methylpentane Chemical compound CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GJJVAFUKOBZPCB-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-2-(4,8,12-trimethyltrideca-3,7,11-trienyl)-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical compound OC1=CC=C2OC(CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)(C)CCC2=C1 GJJVAFUKOBZPCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021298 Dihomo-γ-linolenic acid Nutrition 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000598397 Schizochytrium sp. Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- 238000011021 bench scale process Methods 0.000 description 2
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 2
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 2
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 2
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 2
- FDSDTBUPSURDBL-LOFNIBRQSA-N canthaxanthin Chemical compound CC=1C(=O)CCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C(=O)CCC1(C)C FDSDTBUPSURDBL-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 2
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002781 deodorant agent Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- IIUXHTGBZYEGHI-UHFFFAOYSA-N isoheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCC(O)=O IIUXHTGBZYEGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 2
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 2
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 2
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 2
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 2
- 239000011731 tocotrienol Substances 0.000 description 2
- 229930003802 tocotrienol Natural products 0.000 description 2
- 235000019148 tocotrienols Nutrition 0.000 description 2
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 2
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N (3R,3'R)-beta,beta-carotene-3,3'-diol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N 0.000 description 1
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 9-cis,11-trans-octadecadienoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 0.000 description 1
- JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N Astaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C(=C/C=C/C1=C(C)C(=O)C(O)CC1(C)C)/C)C=CC=C(/C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)C(=O)C(O)CC2(C)C JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q10 Natural products COC1=C(OC)C(=O)C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000199912 Crypthecodinium cohnii Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- BDCFUHIWJODVNG-UHFFFAOYSA-N Desmosterol Natural products C1C=C2CC(O)C=CC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 BDCFUHIWJODVNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- OPGOLNDOMSBSCW-CLNHMMGSSA-N Fursultiamine hydrochloride Chemical compound Cl.C1CCOC1CSSC(\CCO)=C(/C)N(C=O)CC1=CN=C(C)N=C1N OPGOLNDOMSBSCW-CLNHMMGSSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- SSISHJJTAXXQAX-ZETCQYMHSA-N L-ergothioneine Chemical compound C[N+](C)(C)[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC(=S)N1 SSISHJJTAXXQAX-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N Lycophyll Natural products OC/C(=C/CC/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C(=C\C=C\C=C(/C=C/C=C(\C=C\C=C(/CC/C=C(/CO)\C)\C)/C)\C)/C)\C)/C)/C JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N 0.000 description 1
- OOUTWVMJGMVRQF-DOYZGLONSA-N Phoenicoxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)C(=O)C(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)C(=O)CCC2(C)C OOUTWVMJGMVRQF-DOYZGLONSA-N 0.000 description 1
- 241001467333 Thraustochytriaceae Species 0.000 description 1
- 241000233675 Thraustochytrium Species 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N Z-zeaxanthin Natural products C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1C=CC(C)=CC=CC(C)=CC=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N 0.000 description 1
- QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCC(O)C1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N all-trans-Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000013793 astaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001168 astaxanthin Substances 0.000 description 1
- 229940022405 astaxanthin Drugs 0.000 description 1
- MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N astaxanthin Chemical compound C([C@H](O)C(=O)C=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C(=O)[C@@H](O)CC1(C)C MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000012682 canthaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001659 canthaxanthin Substances 0.000 description 1
- 229940008033 canthaxanthin Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 description 1
- ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N coenzyme Q10 Chemical compound COC1=C(OC)C(=O)C(C\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N 0.000 description 1
- 229940108924 conjugated linoleic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001877 deodorizing effect Effects 0.000 description 1
- AVSXSVCZWQODGV-DPAQBDIFSA-N desmosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)[C@@]1(C)CC2 AVSXSVCZWQODGV-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- HOBAELRKJCKHQD-QNEBEIHSSA-N dihomo-γ-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCC(O)=O HOBAELRKJCKHQD-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 1
- 229960002733 gamolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 1
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 1
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 1
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 description 1
- 235000012661 lycopene Nutrition 0.000 description 1
- 239000001751 lycopene Substances 0.000 description 1
- OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N lycopene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)CCC=C(C)C OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N 0.000 description 1
- 229960004999 lycopene Drugs 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000021281 monounsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 1
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002943 palmitic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000007517 polishing process Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000007348 radical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- NPCOQXAVBJJZBQ-UHFFFAOYSA-N reduced coenzyme Q9 Natural products COC1=C(O)C(C)=C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)C(O)=C1OC NPCOQXAVBJJZBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229940092258 rosemary extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020748 rosemary extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000001233 rosmarinus officinalis l. extract Substances 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 235000021003 saturated fats Nutrition 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- JIWBIWFOSCKQMA-UHFFFAOYSA-N stearidonic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O JIWBIWFOSCKQMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N trans-isorenieratene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/c1c(C)ccc(C)c1C)C=CC=C(/C)C=Cc2c(C)ccc(C)c2C ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N 0.000 description 1
- 235000010692 trans-unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005457 triglyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 229940035936 ubiquinone Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
- 235000008210 xanthophylls Nutrition 0.000 description 1
- 150000003735 xanthophylls Chemical class 0.000 description 1
- 235000010930 zeaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001775 zeaxanthin Substances 0.000 description 1
- 229940043269 zeaxanthin Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B3/00—Refining fats or fatty oils
- C11B3/006—Refining fats or fatty oils by extraction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B7/00—Separation of mixtures of fats or fatty oils into their constituents, e.g. saturated oils from unsaturated oils
- C11B7/0008—Separation of mixtures of fats or fatty oils into their constituents, e.g. saturated oils from unsaturated oils by differences of solubilities, e.g. by extraction, by separation from a solution by means of anti-solvents
- C11B7/0025—Separation of mixtures of fats or fatty oils into their constituents, e.g. saturated oils from unsaturated oils by differences of solubilities, e.g. by extraction, by separation from a solution by means of anti-solvents in solvents containing oxygen in their molecule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Edible Oils And Fats (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
【課題】少なくとも一つの長鎖不飽和脂肪酸を有する中性脂質組成物を主に有する脂質組成物を精製するための方法の提供。
【解決手段】脂質組成物をアセトンなどの極性溶媒に接触させる。この溶媒は、混入物質が長鎖不飽和脂肪酸中よりもこの溶媒中において溶解性が低くなるように選択される。この接触方法は、典型的には約0℃を含む、より低い温度で実施される。脂質組成物から混入物質が沈殿するとすぐに沈殿物質を脂質組成物から取り除くために分離が行われる。長鎖不飽和脂肪酸はARA、DPA、EPA、および/またはDHAを含むことができる。この方法は効率的に脂質組成物を脱ろうし、その結果として組成物が濁る傾向を軽減させる。
【選択図】図3
【解決手段】脂質組成物をアセトンなどの極性溶媒に接触させる。この溶媒は、混入物質が長鎖不飽和脂肪酸中よりもこの溶媒中において溶解性が低くなるように選択される。この接触方法は、典型的には約0℃を含む、より低い温度で実施される。脂質組成物から混入物質が沈殿するとすぐに沈殿物質を脂質組成物から取り除くために分離が行われる。長鎖不飽和脂肪酸はARA、DPA、EPA、および/またはDHAを含むことができる。この方法は効率的に脂質組成物を脱ろうし、その結果として組成物が濁る傾向を軽減させる。
【選択図】図3
Description
発明の分野
本発明は脂質、特に長鎖不飽和脂肪酸(LCPUFA)を含む脂質、の抽出および精製に向けられる。特に、方法(process)は、所望のLCPUFAを高濃度で、かつ飽和トリグリセリドのような不要な化合物を低濃度で得るために提供される。
本発明は脂質、特に長鎖不飽和脂肪酸(LCPUFA)を含む脂質、の抽出および精製に向けられる。特に、方法(process)は、所望のLCPUFAを高濃度で、かつ飽和トリグリセリドのような不要な化合物を低濃度で得るために提供される。
発明の背景
一般に、脱ろう(winterization)とは低温において植物性油に存在する沈降物を取り除く方法につけられた名称である。それは、冷たい冬の数ヶ月間、綿実油を屋外で貯蔵したままにし、沈降物のない油をろ過して分ける昔の手順から始まった。乾燥分別結晶とは、冷却中に、融解温度の最も高いトリグリセリドをニート液(neat liquid)(たとえば液体脂質)から優先的に結晶化させる方法である。結晶化が完了した後、数種類の物理過程のうちの一つによって、固相を液相から分離する。あるいは、一般に低温下のトリグリセリドは、溶媒がないときより溶媒があるときの方がより安定した結晶を形成するため、溶媒結晶化を利用してトリグリセリドの結晶形成を促進する。
一般に、脱ろう(winterization)とは低温において植物性油に存在する沈降物を取り除く方法につけられた名称である。それは、冷たい冬の数ヶ月間、綿実油を屋外で貯蔵したままにし、沈降物のない油をろ過して分ける昔の手順から始まった。乾燥分別結晶とは、冷却中に、融解温度の最も高いトリグリセリドをニート液(neat liquid)(たとえば液体脂質)から優先的に結晶化させる方法である。結晶化が完了した後、数種類の物理過程のうちの一つによって、固相を液相から分離する。あるいは、一般に低温下のトリグリセリドは、溶媒がないときより溶媒があるときの方がより安定した結晶を形成するため、溶媒結晶化を利用してトリグリセリドの結晶形成を促進する。
ドコサヘキサエン酸(DHA)リッチな脂質を、従来の技術および発酵によって産生されたシゾチトリウム種(Schizochytrium sp.)バイオマス由来の溶媒(例えば、ヘキサン)を用いて抽出し、得られた抽出脂質を-2℃〜2℃に冷凍することによって脱ろうし、続いて遠心分離した。脂質をその後、洗練、漂白、および脱臭し、栄養補給剤として販売用にゼラチンカプセルに入れた。この産物では、時間がたつと産物中に濁りが生じるという問題が生じた。
バイオマスから脂質を回収する一つの方法においては、図1に示されるように、乾燥させた微細藻類を商用等級のn-ヘキサンに浮遊させ、湿式粉砕する。ヘキサンは、リン脂質、遊離ステロールおよびカルテノイドのような総脂質画分のうちの他の構成成分をより劣る程度に抽出することもできるが、主としてトリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリドおよびエステル化ステロールを抽出する。遠心分離によって脂質リッチなミセラから使用済みのバイオマスを分離する。得られた脂質と溶媒との混合物はミセラとみなされる。精製ミセラの脂質含有量をn-ヘキサンを使って約45重量%に調整する。ミセラは脱ろうされる、特に、ミセラを約-1℃まで冷却し、8時間〜12時間保持すると、いかなる飽和脂肪または高融点構成成分も結晶化される。次に、結晶化したステアリン相を取り除くために、ミセラをろ過する。ヘキサンをミセラから取り除き、脱ろう脂質を後に残す。
図2に示したように、脱ろう脂質を、脂質中に存在するすべてのホスファチドを水和させるために、加熱し、クエン酸またはリン酸で処理する。存在するいかなる遊離脂肪酸を中和させるために、水酸化ナトリウムを添加する。得られたゴム質(水和ホスファチド)およびソープストック(中和された脂肪酸)を遠心分離機を用いて取り除く。この脂質を水と混合し、再度遠心分離にかけ、残りのゴム質/ソープストックをすべて取り除く。この工程は最初の遠心分離で実行されうる。過酸化物、色素化合物、ならびに微量のソープストック、リン脂質、および金属を取り除くために、洗練された脂質をクエン酸で前処理した後、シリカおよび漂白土で漂白する。脂質から使用済みの漂白化合物をろ過によって容易に除去するために、ろ過助剤をサイクルの最後に添加する。
沈降物の層が静置させることで形成されることが明らかである場合、いかなる残留するステアリンまたはワックスも結晶化させるために、漂白した脂質を約5℃から約15℃まで冷却し、約6時間〜約8時間持続させるという追加の工程を実施することができる。この工程が実行される場合、ろ過によって結晶を容易に除去させるためにろ過助剤を使用することができる。
高真空下、上昇した温度で作用させる脱臭剤は、過酸化物を破壊するために使用するが、完全体が残った場合は、後で分解してフリーラジカル反応を起こすこともある。この工程もまた、不快臭および風味をもたらしうるいかなる残留低分子量化合物も除去する。脱臭剤への接触時間はトランス脂肪酸の形成を防ぐため最小限にする。安全で適切な食物承認酸化剤(food approved antioxidant)を添加する。安定化した脂質は、酸化防止のために窒素雰囲気下で、内側をフェノールで覆われた金属容器に詰められる。
脂質で満たしたゼラチンカプセル内で形成される濁りは分析され、ミリスチン(14:0)脂肪酸およびパルミチン (16:0)脂肪酸を含むトリグリセリドである、トリ飽和脂肪酸グリセリドの結晶からなることがわかった。これらの結晶の融点は約50℃〜55℃であった。このトリ飽和グリセリドは6〜8%の粗抽出された脂質を含んでいた。上記の脱ろう方法によってこれらのトリ飽和グリセリドの濃度は1%未満にまで低下したが、脂質中における濁りの形成を完全に取り除くためには十分な低さではなかった。さらに、その脂質の約30%が(対応するDHAの30%も)伝統的なヘキサン(55%ヘキサンおよび45%粗製油)の脱ろう方法において取り除かれる。もう一つの問題は、残っている1%未満の飽和トリグリセリドを結晶化させるために温度を低下させた場合、さらに多くの所望のLCPUFA、例えばあるDHA分子を含むジ飽和トリグリセリドをも結晶化させる、ということであった。このことは標的産物であるDHAの有意な損失を生じるものであった。脂質の8%〜10%をさらに損失する可能性があり、つまり、一つの問題を解決しようとすると、もう一つの問題が生じた。望ましく高いレベルでLCPUFAレベルが維持され、かつ濁りを減少させるかまたは除去することができうる方法を行うことは望ましいことであった。
概要
本発明は、主に中性脂質構成成分を有する脂質組成物を精製するための方法を含み、この組成物は少なくとも一つの長鎖ポリ不飽和脂肪酸(LCPUFA)および少なくとも一つの他の化合物を含む。方法は脂質組成物と極性溶媒を接触させる工程を含み、かつ他の化合物がLCPUFAよりもこの極性溶媒中において溶解性が低くなるように、極性溶媒を選択する。例えば極性溶媒は、アセトン、イソプロピルアルコール、メタノール、エタノール、酢酸エチルおよびそれらの混合物から選択することができる。方法は、少なくとも他の化合物の一部が沈殿するのに効果的な温度範囲で脂質組成物を維持する工程をさらに含む。例えば、温度範囲は約-20℃〜約50℃、約-5℃〜約20℃、約-5℃〜約5℃または約0度でありうる。次に方法は、脂質産物を形成するために少なくとも一部の他の化合物を脂質組成物から取り除く工程を含む。方法は、脂質組成物中における濁り形成を減少させるために特別なものであってもよく、脂質組成物中で取り除かれる化合物が濁り形成化合物である。
本発明は、主に中性脂質構成成分を有する脂質組成物を精製するための方法を含み、この組成物は少なくとも一つの長鎖ポリ不飽和脂肪酸(LCPUFA)および少なくとも一つの他の化合物を含む。方法は脂質組成物と極性溶媒を接触させる工程を含み、かつ他の化合物がLCPUFAよりもこの極性溶媒中において溶解性が低くなるように、極性溶媒を選択する。例えば極性溶媒は、アセトン、イソプロピルアルコール、メタノール、エタノール、酢酸エチルおよびそれらの混合物から選択することができる。方法は、少なくとも他の化合物の一部が沈殿するのに効果的な温度範囲で脂質組成物を維持する工程をさらに含む。例えば、温度範囲は約-20℃〜約50℃、約-5℃〜約20℃、約-5℃〜約5℃または約0度でありうる。次に方法は、脂質産物を形成するために少なくとも一部の他の化合物を脂質組成物から取り除く工程を含む。方法は、脂質組成物中における濁り形成を減少させるために特別なものであってもよく、脂質組成物中で取り除かれる化合物が濁り形成化合物である。
様々な態様において、脂質組成物は少なくとも50%もしくは85%の中性脂質または少なくとも50%のトリグリセリドを含むことができる。LCPUFA濃度は重量パーセント基準で、方法の前より後の方が高く、かつ他の化合物の濃度は重量パーセント基準で、方法の前より後の方が低くなりうる。例えば、脂質に存在する任意のリン含有化合物の総濃度は重量パーセント基準で、方法の前より後の方が低い。本発明の方法によって、例えば精練作業が軽減される、または精練が必要ないなど、後続処理工程がそれほど必要ない、許容される産物を得ることができる。
LCPUFAはアラキドン酸(ARA)、ω-6ドコサペンタエン酸(DPA(n-6))、ω-3ドコサペンタエン酸(DPA(n-3))、エイコサペンタエン酸(EPA)および/またはドコサヘキサエン酸(DHA)であってもよい。他の化合物はトリ飽和グリセリド、リン含有物質、ワックスエステル、ステロールエステルを含む飽和脂肪酸、ステロール、スクアレン、および/または炭化水素であってもよい。あるいは、他の化合物は、トリ飽和グリセリド、ホスファチド、およびワックスエステルであってもよい。あるいは、他の化合物はラウリン(C12:0)脂肪酸、ミリスチン(C14:0)脂肪酸、パルミチン(C16:0)脂肪酸およびステアリン(C18:0)脂肪酸ならびに/またはそれらが混合のトリ飽和グリセリドであってもよい。特定の態様において、脂質組成物は最初に少なくとも一つのLCPUFAと少なくとも一つの飽和トリグリセリドとを含む。LCPUFAはLCPUFA含有微生物バイオマスから選択されたLCPUFA含有生物材料(biomaterial)およびLCPUFA含有脂質を産生するよう遺伝子操作された植物由来の脂肪種子から得ることができる。また、LCPUFAは微生物由来のLCPUFA産生遺伝子を用いて遺伝子操作された植物から得ることもできる。別の態様において、LCPUFAはトローストチトリド(thraustochytrid)バイオマス、渦鞭毛藻バイオマス、モルティエラバイオマスおよび、トローストチトリド、渦鞭毛藻、またはモルティエラ由来の遺伝子を含む遺伝子操作された脂肪種子から選択される供給源から得ることができる。さらなる態様において、LCPUFAはシゾチトリウムバイオマス、トローストチトリウム(Thraustochytrium)バイオマス、クリプテコディニウム・コニー(Crypthecodinium cohnii)バイオマスまたは、シゾチトリウムもしくはトローストチトリウム由来の遺伝子を含む遺伝子操作された植物由来の脂肪種子からなる群より得られる。
本発明の様々な態様において、溶媒:脂質組成物の比は、約1:10 〜約20:1、約1:8〜約10:1、約1:5〜約5:1、約1:2〜約2.5:1または約1:1である。他の態様において、溶媒と脂質組成物を接触させる時間は約0.5時間〜約12時間、約2時間〜約6時間、または約4時間である。
本発明の別の態様において、脂質は、LCPUFAを含むトリグリセリド分子が選択的に抽出され、極性溶媒中では溶解しない他の化合物は抽出されないように、低温下で極性溶媒を用いて抽出される。さらなる態様において、脂質組成物をバイオマスから抽出し、細胞残屑および沈殿した他の化合物をLCPUFAと極性溶媒とを含むミセラから分離する。
本発明のさらなる態様は、すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、脂質を回収するために極性溶媒を用いる工程;脂質組成物および極性溶媒の混合物を含むミセラを形成する工程;不要な化合物を選択的に沈殿させるためにミセラを冷却する工程;ならびに沈殿する他の化合物をミセラから分離する工程、を含む。本態様においては、脂質組成物をバイオマスから抽出することができ、かつ細胞残屑および沈殿した他の化合物をLCPUFAと極性溶媒とを含むミセラから分離することができる。
本発明の別の態様は、すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、極性溶媒を用いてバイオマスから脂質を回収し、脂質組成物、極性溶媒および細胞残屑の混合物を含むミセラを形成させる工程を含む。方法はさらにミセラから細胞残屑を分離する工程、および不要な化合物を選択的に沈殿させるためにミセラを冷却する工程を含む。最終的に、沈殿した化合物はミセラから分離する。
本発明のさらなる態様は、すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、非極性溶媒を用いてバイオマスから脂質を回収し、脂質組成物および非極性溶媒の混合物を含むミセラを形成させる工程を含む。方法はさらにミセラから大部分の非極性溶媒を取り除く工程、ミセラに極性溶媒を添加する工程、および不要な化合物を選択的に沈殿させるためにミセラを冷却する工程をさらに含む。最終的に、沈殿した他の化合物はミセラから分離される。本発明のもっとさらなる対応は、すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、非極性溶媒を用いてバイオマスから脂質を回収し、脂質組成物および非極性溶媒の混合物を含むミセラを形成させ、そのミセラを脱ろうする工程を含む。大部分の非極性溶媒をミセラから取り除き、極性溶媒をそれに添加する。ミセラから分離する不要化合物を選択的に沈殿させるために、ミセラを冷却する。非極性溶媒がミセラから取り除かれる場合、除去後に残る非極性溶媒は約0重量%〜約4重量%または約1重量%〜約4重量%である。
非極性溶媒を用いた本発明の様々な態様において、非極性溶媒はヘキサンであってもよい。沈殿した他の化合物を分離または除去する工程を用いる本発明の様々な態様において、この工程は、遠心分離、ろ過、またはそれらを組合せたような液体/固体分離技術であってもよい。
発明の詳細な説明
本発明に従い、方法は、所望のLCPUFAの高いレベルを維持しながら、脂質中の不要な構成成分のレベルを優先的に減少させるために提供される。本明細書において用いられるように、LCPUFAは20またはそれ以上の炭素原子と2つ(好ましくは3つ)またはそれ以上の二重結合とを有する脂肪酸である。LCPUFAは、例えばリン脂質、遊離脂肪酸、および脂肪酸のトリグリセリドを含む脂肪酸エステルなどの様々な形であってもよい。当然のことながら、所望のLCPUFAを参照する場合、意味されるものは、脂質中に存在する形でのLCPUFA、最も典型的にはトリグリセリド、ならびにより少ない程度においてモノグリセリドおよびジグリセリドである。好ましくは、所望のLCPUFA濃度は重量パーセント基準で測定すると、結果として生じる脂質産物中の方が開始時の脂質組成物中のそれより高い。好ましくは、不要な構成成分は、ラウリン(Cl2:0)脂肪酸、ミリスチン(Cl4:0)脂肪酸、パルミチン(Cl6:0)脂肪酸、ステアリン(Cl8:0)脂肪酸およびこれらを混合したトリ飽和グリセリドのような飽和トリグリセリドである。他の不要な構成成分の例として、トリ飽和グリセリドの他に、リン含有化合物(たとえば、ホスファチド(phosphatide)またはリン脂質(phospholipid))、ワックスエステル、飽和脂肪酸含有ステロールエステル、ステロール、スクアレン、炭化水素などが含まれる。2つまたはそれ以上の不要な化合物は、重量パーセント基準で測定したとき、開始時の脂質と比較して、結果として生じる産物中において減少していることが好ましい。本明細書において使用される場合、他に指示がなければ、総量は通常、重量パーセント基準である。
本発明に従い、方法は、所望のLCPUFAの高いレベルを維持しながら、脂質中の不要な構成成分のレベルを優先的に減少させるために提供される。本明細書において用いられるように、LCPUFAは20またはそれ以上の炭素原子と2つ(好ましくは3つ)またはそれ以上の二重結合とを有する脂肪酸である。LCPUFAは、例えばリン脂質、遊離脂肪酸、および脂肪酸のトリグリセリドを含む脂肪酸エステルなどの様々な形であってもよい。当然のことながら、所望のLCPUFAを参照する場合、意味されるものは、脂質中に存在する形でのLCPUFA、最も典型的にはトリグリセリド、ならびにより少ない程度においてモノグリセリドおよびジグリセリドである。好ましくは、所望のLCPUFA濃度は重量パーセント基準で測定すると、結果として生じる脂質産物中の方が開始時の脂質組成物中のそれより高い。好ましくは、不要な構成成分は、ラウリン(Cl2:0)脂肪酸、ミリスチン(Cl4:0)脂肪酸、パルミチン(Cl6:0)脂肪酸、ステアリン(Cl8:0)脂肪酸およびこれらを混合したトリ飽和グリセリドのような飽和トリグリセリドである。他の不要な構成成分の例として、トリ飽和グリセリドの他に、リン含有化合物(たとえば、ホスファチド(phosphatide)またはリン脂質(phospholipid))、ワックスエステル、飽和脂肪酸含有ステロールエステル、ステロール、スクアレン、炭化水素などが含まれる。2つまたはそれ以上の不要な化合物は、重量パーセント基準で測定したとき、開始時の脂質と比較して、結果として生じる産物中において減少していることが好ましい。本明細書において使用される場合、他に指示がなければ、総量は通常、重量パーセント基準である。
本発明の好ましい態様において、開始時の脂質と比較したとき、結果として生じる産物はそれほど濁りまたはくもりがない。本発明の方法の結果として、洗練などの次の処理工程を軽減するまたは省くことができる。たとえば、漂白および/または脱臭のような次の処理工程は、洗練(または精練)工程を軽減するまたは省くことに役立ちうる。洗練の例として、漂白または脱臭方法を比較例2に記載している。洗練方法を省くことができない場合は、使用する腐食剤の量を減らすことによって軽減できる。いかなる理論にも制約されることを望まないが、濁りまたはくもりの主な原因はトリ飽和トリグリセリドに起因すると考えられる。モノ置換トリグリセリドおよびジ置換トリグリセリドを減らすことはそれほど重要ではないようである。
本明細書において使用される「脂質」という用語は、リン脂質(phospholipid);遊離脂肪酸;脂肪酸トリグリセリドを含む脂肪酸のエステル;ステロール;色素(例えば、カロチノイドおよびオキシカロチノイド)ならびに他の脂質のような様々な脂質と、フィトステロール、エルゴチオニン、リポ酸、ならびにβカロチン、トコトリエノールおよびトコフェロールを含む抗酸化剤のような脂質関連化合物とを一般に言及する。好ましい脂質および脂質関連化合物は、これらに限定するわけではないが、コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、カロチノイドおよびキサントフィル(例えば、βカロチン、ルテイン、リコペン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン)ならびに、脂肪酸(例えば、共役リノール酸、ω-3高度不飽和脂肪酸、ω-6高度不飽和脂肪酸(例えば、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、およびドコサヘキサエン酸)、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモγリノレン酸、およびγリノレン酸)またはこれらの混合物である。つまり、特に記載がなければ、「脂質」という用語は脂質および/または脂質関連化合物を言及する。
好ましくない構成成分は、冷アセトン中または類似の極性溶媒中では比較的溶解しにくいという共通の特徴を共有する。一方、アラキドン酸(ARA)、ω-6ドコサペンタエン酸(DPA(n-6))、ω-3ドコサペンタエン酸(DPA(n-3))、エイコサペンタエン酸(EPA)、またはドコサヘキサエン酸(DHA)などのLCPUFAは冷アセトン中または類似極性溶媒中で溶解する。この溶媒の重要な特徴は、それがアセトンまたは類似極性溶媒を問わず、好ましいLCPUFAは所望の温度でその溶媒中で溶解し、好ましくない化合物は同じ温度でその溶媒中で溶解しないということである。有用なガイドはアセトンまたは酢酸エチルの誘電率に近い誘電率を有する溶媒を選別することである。本発明に関連する利用に好ましい溶媒はアセトン、および例えばイソプロピルアルコール、メタノール、エタノール、酢酸エチル、またはこれら溶媒の混合物のような類似極性溶媒を含む。溶媒はすべて極性であり、かつ二重結合と長い炭素鎖とを有するLCPUFAも極性であるため、極性溶媒中で溶解する。しかし、溶媒の極性が強すぎる場合は、LCPUFAは溶けない可能性がある。溶媒は食物用途としても有用であることが好ましい。
粗製脂質からトリ飽和グリセリドを選択的に沈殿させるためにアセトンを利用できるということが思いがけず発見された。脱ろうしていないロットのシゾチトリウム種由来のDHAリッチな脂質をその5倍量のアセトンで処理し、冷却した場合、すべてのトリ飽和グリセリドを結晶化した後に遠心分離することによって本質的に除去した。この方法では、DHA含有トリグリセリドがほとんどまたは全く除去されなかった。結果として生じた脱ろう脂質は、脱ろうの標準方法によって生じる37%と比較して、41%のDHAを含んでいた。
トリ飽和グリセリドを犠牲にしてトリグリセリドを含む長鎖ポリ不飽和脂肪酸の回収効率をより改善するために、または2つの飽和脂肪酸と1つのモノ不飽和脂肪酸とを含むトリグリセリドを形成するために、アセトンまたは類似溶媒による抽出と「インサイチュ」脱ろうの考え方を組み合わせることによってこの発見をさらに役立たせる方法がある。本発明の方法の1つの利点は、所望のLCPUFAがほとんど失われないということである。例えば、従前の方法では、所望のLCPUFAを含む、抽出した脂質の約30%が脱ろうの間に失われた。それに対して、従前の方法ともっとも直接に比較できる本発明の方法の態様(つまり、ヘキサン抽出の後、アセトン脱ろう)では、アセトン脱ろうの結果、開始時の抽出した脂質のわずか約7%〜約10%の損失になる。結果、本発明のこの態様において、約40%またはそれ以上の収率損失の減少が実現される。このことは従前の方法(ヘキサン抽出ならびに脱ろうに加えて完全な洗練、漂白および脱臭(RBD))を超える顕著な改善である。DHAと脂質両方の最大なる損失は、従前の方法における脱ろう工程において招かれる。
第一に、優先される方法においては、アセトンまたは類似極性溶媒(ヘキサンを除く)を用いて、LCPUFAを含むトリグリセリド分子が選択的にシゾチトリウム種バイオマスから抽出されるような低い温度で脂質を抽出する。図3にこのような方法の工程系統図を図解している。低い温度(LCPUFA含有トリ飽和グリセリドは冷アセトン中で溶解するが、トリ飽和グリセリドは冷アセトン中で溶解しない)でアセトン選別するため、バイオマス由来のLCPUFA含有トリグリセリドを選択的に取り除き、その結果別個の脱ろう工程の必要性をなくすということが実現可能である。溶媒抽出は任意の適切な様式で実施することができる。例えば、乾燥バイオマスを冷溶媒存在下で機械的に(例えば、ミルまたはホモジナイザーで)または化学的に(酸、酵素、または塩基を用いて)溶解させることができる。細胞残屑および沈殿したトリ飽和グリセリドを1工程でミセラから分離する。洗練、漂白および脱臭による精製のような後の処理工程を必要ならば実施することができる。
第二の選択肢は、従来の抽出方法(任意の種類の溶媒粉砕技術を含む)においてバイオマス由来の脂質を量的に回収するためにアセトンまたは類似極性溶媒を利用することである。この抽出はすべてのトリグリセリド構成成分を可溶化する温度で実施する。ミセラ(溶媒中のトリグリセリドを含む脂質)から細胞残屑を取り除く前に、ミセラを冷却させて選択的にトリ飽和グリセリドを取り除く。冷却したミセラはその後、細胞残屑とトリ飽和グリセリド構成成分の両方を取り除くために他の技術を用いて遠心分離、ろ過または分離される。この選択肢は抽出の考え方と脱ろうを組み合わせて一つの工程にする。
第三の選択肢は、従来の抽出方法(任意の種類の溶媒粉砕技術を含む)においてバイオマス由来の脂質を量的に回収するためにアセトンまたは類似極性溶媒を利用することである。この抽出はすべてのトリグリセリド構成成分を可溶化する温度で実施する。ミセラ(溶媒中のトリグリセリドを含む脂質)由来の細胞残屑を従来の分離技術を用いて取り除く。ミセラをその後冷却し、トリ飽和グリセリドを結晶化させ、これを他の技術を用いて遠心分離、ろ過、または分離することにより取り除く。 この選択肢は2工程で、抽出と脱ろうを利用する。しかしながら、両方の課題を達成するためにアセトンまたは類似極性溶媒を利用する。図4にこのような方法の工程系統図を図解している。
第四の選択肢は抽出溶媒としてヘキサン(例えばn-ヘキサン、イソヘキサン、またはそれらの組み合わせ)のような非極性溶媒を利用し、脱ろう溶媒としてアセトンを利用することである。好ましくは少なくとも95%、さらに好ましくは少なくとも96%、さらに好ましくは少なくとも97%、さらに好ましくは少なくとも98%、さらに好ましくは少なくとも99%の非極性溶媒が脱ろうの前に取り除かれる。脱臭の前のいずれかの段階において、脱ろう工程をおこなうことができる。このような方法の工程系統図が図5に示される。
第五の選択肢は、大部分のトリ飽和グリセリド構成成分を取り除くために従来のヘキサン抽出およびヘキサンを基礎とした脱ろうを利用すること、ならびに脂質中の濁りの形成をもたらす少量のトリ飽和グリセリドを取り除くために脱臭の前に「研磨(polishing)」工程を行うことである。研磨工程はアセトンおよび/または類似溶媒を用いる。この選択肢は濁りによって生じる問題を取り除くが、脂質レベルもまた低下する。
脂質組成物は最初に、少なくとも一つのLCPUFAおよび少なくとも一つのトリ飽和グリセリドを含むことが好ましい。最初の脂質組成物における最初の濃度中に他の化合物または不要な化合物が存在する場合、それらによって濁りの形成を生じることが好ましい。脂質抽出のためのLCPUFA含有生物材料は、LCPUFA含有微生物バイオマス、またはLCPUFA含有脂質を産生するように遺伝子操作された植物、特に微生物(藻類、菌類、原生生物、または細菌)由来のLCPUFA産生遺伝子を用いて操作された植物由来の脂肪種子を含む群から選択されることが好ましい。さらに好ましくは、脂質抽出用のLCPUFA含有生物材料がトローストチトリドバイオマス、渦鞭毛藻バイオマス、および/もしくはモルティエラバイオマス、ならびに/またはトローストチトリド、渦鞭毛藻、および/もしくはモルティエラ由来の遺伝子を含む遺伝子操作された植物由来の脂肪種子を含む群より選択される。さらに好ましくは、脂質抽出用のLCPUFA含有生物材料がシゾチトリウムバイオマス、トローストチトリウムバイオマス、および/もしくはクリプテコディニウムバイオマス(好ましくはクリプテコディニウム・コニーバイオマス)、またはシゾチトリウム、トローストチトリウム、および/もしくはクリプテコディニウム(好ましくはクリプテコディニウム・コニー)由来の遺伝子を含む遺伝子操作された植物由来の脂肪種子を含む群より選択される。
好ましくは、最初の脂質組成物は主に中性脂質から構成される。好ましくは最初の脂質組成物は少なくとも50%の中性脂質、好ましくは少なくとも60%の中性脂質、好ましくは少なくとも75%の中性脂質、好ましくは少なくとも85%の中性脂質、ならびに好ましくは少なくとも90%の中性脂質を含む。好ましくは中性脂質は主にトリグリセリドを含む。好ましくは最初の脂質組成物は少なくとも50%トリグリセリド、好ましくは少なくとも60%のトリグリセリド、好ましくは少なくとも75%のトリグリセリド、および好ましくは少なくとも85%のトリグリセリドを含む。この段落における上記のパーセントは重量パーセントを言及している。好ましくは、所望のLCPUFAの濃度は、結果生じる産物中の濃度の方が最初の脂質組成物における濃度より高い。
抽出または脱ろう方法のための、好ましい極性溶媒:脂質の割合は、重量基準で、約1:10〜約20:1、さらに好ましくは約1:8〜約1:10、好ましくは約1:5〜約5:1、および好ましくは約1:2〜約2.5:1である。好ましくは、極性溶媒と脂質を接触させる時間は約0.5時間〜約12時間、好ましくは約2時間〜約6時間、および好ましくは約4時間である。好ましくは、非極性脂質が使われる場合、残留非極性溶媒は約0重量パーセント〜約4重量パーセント、および好ましくは約1重量パーセント〜約4重量パーセントである。
好ましくは、(i)冷抽出方法、(ii)抽出後続いて冷却およびろ過/遠心分離、(iii)抽出、細胞残屑のろ過/遠心分離、続いて冷却およびろ過/遠心分離、ならびに(iv)溶媒脱ろうまたは研磨工程での冷却状態、における温度は、脂質の凝固点〜好ましくない構成成分(例えばトリ飽和グリセリド)の融点、さらに好ましくは約-20℃〜約50℃、さらに好ましくは約-5℃〜約20℃、さらに好ましくは約-5℃〜約5℃、さらに好ましくは約0度である。
方法の他の好ましい特質は、トリ飽和グリセリドと、ホスファチド(phosphatides)、ワックスエステル、ステロールエステルを含む飽和脂肪酸、ステロール、スクアレン、炭化水素などを含む冷アセトン中で比較的溶けない他の構成成分とを犠牲にしたLCPUFA含有トリグリセリドのみの選択的な回収を含む。これら好ましくない構成成分を犠牲にしてLCPUFA含有トリグリセリドのみを選択的に回収することによって、追加の後続精製工程(例えば脱ろう、洗練、および漂白)を削除または軽減することができる。
実施例1
概要
シゾチトリウムから得られるDHAリッチな脂質の試料(試料1、脱ろうしていない脂質、別名「高融解」)およびシゾチトリウムから得られる別のDHAリッチな脂質から単離した沈降物(試料2)を分析して固相(試料1)および凝集物(floc)/沈降物(試料2)の性質を決定した。
概要
シゾチトリウムから得られるDHAリッチな脂質の試料(試料1、脱ろうしていない脂質、別名「高融解」)およびシゾチトリウムから得られる別のDHAリッチな脂質から単離した沈降物(試料2)を分析して固相(試料1)および凝集物(floc)/沈降物(試料2)の性質を決定した。
工場スケールで産生された脱ろうしていない脂質試料1(常温で半固体)を4倍量の冷アセトンで溶解し、混合した。固体白色粉末(およそ7重量%)をガラス繊維ろ紙を通してろ過し、単離した。固体白色粉末は52.4℃〜53.5℃の融解温度を有し、トリグリセリドであることを示し(薄層クロマトグラフィ(TLC)による単一スポットに基づいて)、GLCによる分析の場合、主にミリスチン酸(26%)およびパルミチン酸(66%)を含むことが示された。このような高融解のトリグリセリド画分はごくわずかなDHA/DPAとともに飽和脂肪酸を含む。単離した脂質画分(91重量%)は室温でオレンジ色の液体で、DHA41.0%およびDPA16.0%を含んでいた。DHAとDPAは試料1の開始時の脂肪酸の特性と比較しておよそ8%上昇していた、つまりこのことはDHAおよびDPAの真の「精製」である。
シゾチトリウム由来の別のDHAリッチな再加工脂質は、常温で一定の日数保存された場合、明らかな凝集物様物質(濁り)を含んでいた。この凝集物を遠心分離によって単離した。凝集物/沈殿物(「試料2沈殿物」)を10倍量の冷アセトンで溶解し、混合、ろ過した。固体白色粉末約15重量%をガラス繊維ろ紙を通してろ過することによって単離した。固体白色粉末は50.1℃〜51.4℃の融解温度を有し、主にミリスチン酸(29%)およびパルミチン酸(59%)を含むトリグリセリドであることを示した(TLCによる単一スポットに基づいて)。これはごくわずかなDHA/DPAとともに飽和脂肪酸を含む高融解トリグリセリド画分である。単離した脂質画分(85重量%)は室温で透明なオレンジ色の液体で、DHA 41.1%およびDPA 16.3%を含んでいた。シゾチトリウム由来の再加工脂質中における凝集物の形成は、ミリスチン酸およびパルミチン酸を含む高融解トリグリセリドに起因すると考えられ、この高融解トリグリセリドは静置させると脂質から結晶化する。
実験例
通常
試料1(250g ボトル)由来のDHAリッチな脂質の試料を冷凍保存から引きだした。これは脱ろうしていない脂質である。試料を常温まで温め、そのまま使用した。
通常
試料1(250g ボトル)由来のDHAリッチな脂質の試料を冷凍保存から引きだした。これは脱ろうしていない脂質である。試料を常温まで温め、そのまま使用した。
沈降物(試料2)を研究室の遠心分離機を用いてDHAリッチな脂質から単離した。DHAリッチな脂質は、常温で静置させたままにすると目にみえる凝集物を含む再加工されたロットの脂質であった。試料を遠心分離し、沈降物から液体化画分を移すことにより凝集物を単離した。脂質画分は常温で透明なままであった、そのため凝集物は、単離した沈降物中に存在すると考えられた。
アセトン脱ろう
脱ろうしていない脂質(試料1)および再加工された脂質から単離した沈降物(試料2)をアセトン脱ろう法を用いて分画した。脂質構成成分を溶解しけん濁するために、沈降物および脱ろうしていない試料を過剰な冷アセトン(氷/水浴温度)中で溶解し、混合した。溶液/けん濁液を直ちに真空下でガラス繊維ろ紙を通してろ過した。ガラス繊維ろ紙とそのろ紙の上に残っている内容物とを少量の冷アセトンで洗浄した。ろ紙の内容物を風乾し重量を測定した。真空下で脂質/アセトン画分を濃縮してニート脂質(neat lipid)を産生し、重量を測定した。
脱ろうしていない脂質(試料1)および再加工された脂質から単離した沈降物(試料2)をアセトン脱ろう法を用いて分画した。脂質構成成分を溶解しけん濁するために、沈降物および脱ろうしていない試料を過剰な冷アセトン(氷/水浴温度)中で溶解し、混合した。溶液/けん濁液を直ちに真空下でガラス繊維ろ紙を通してろ過した。ガラス繊維ろ紙とそのろ紙の上に残っている内容物とを少量の冷アセトンで洗浄した。ろ紙の内容物を風乾し重量を測定した。真空下で脂質/アセトン画分を濃縮してニート脂質(neat lipid)を産生し、重量を測定した。
TLC
脂質クラス組成物を決定するために、シリカゲル60のプレートを用いてTLCを実施した。展開溶媒系は石油エーテル:エチルエーテル:酢酸が90:10:1からなる混合物であった。スポットのRfをモリスケイト(Morris Kates)の「脂質代謝学の技術(Techniques in Lipidology)」に載っているRfと比較した。
脂質クラス組成物を決定するために、シリカゲル60のプレートを用いてTLCを実施した。展開溶媒系は石油エーテル:エチルエーテル:酢酸が90:10:1からなる混合物であった。スポットのRfをモリスケイト(Morris Kates)の「脂質代謝学の技術(Techniques in Lipidology)」に載っているRfと比較した。
融点の決定
融点を実験室で構築した融点装置を用いて決定した。
融点を実験室で構築した融点装置を用いて決定した。
赤外分光光度法
赤外線スペクトルをパーキンエルマー283B赤外分光計を用いて得た。液体画分はニート(neat)であると分析された。アセトン脱ろうからの固体画分はクロロホルム中で分析した。
赤外線スペクトルをパーキンエルマー283B赤外分光計を用いて得た。液体画分はニート(neat)であると分析された。アセトン脱ろうからの固体画分はクロロホルム中で分析した。
脂肪酸メチルエステル(FAME)
遊離脂肪酸の特性をC12からC22:6に決定する方法の直後に、メタノール中で無水HClを用いて、アセトン脱ろう画分と一緒に一定分量のDHAリッチな脂質試料1、試料2(再加工)をエステル交換した。FAME調製およびGLCの操作がすべて完了した。実験での(empirical)応答因子を決定するために、ニューチェックプレップ(NuChek Prep)分析照会基準502を用い、内部標準(C19:0)を使ってFAMEを同定し、定量した。
遊離脂肪酸の特性をC12からC22:6に決定する方法の直後に、メタノール中で無水HClを用いて、アセトン脱ろう画分と一緒に一定分量のDHAリッチな脂質試料1、試料2(再加工)をエステル交換した。FAME調製およびGLCの操作がすべて完了した。実験での(empirical)応答因子を決定するために、ニューチェックプレップ(NuChek Prep)分析照会基準502を用い、内部標準(C19:0)を使ってFAMEを同定し、定量した。
ガス液体クロマトグラフィ
メチルエステルのガス液体クロマトグラフィを、ヒューレットパッカードの自動試料採取器が備わったヒューレットパッカードモデル6890シリーズIIガス液体クロマトグラフィ、ケムステーションソフトウェア、30m x 0.32mm SP-2380キャピラリーカラム(スペルコ)および水素炎イオン化検出器(flame ionization detector)を用いて実施した。オーブン温度を120℃で3分保持、1分あたり5℃上昇させて190℃、190℃で1分保持、1分あたり20℃上昇させて260℃、そして260℃で3分保持した。インジェクターの温度を295℃に設定し、検出器の温度を280℃に設定した。ヘリウムを搬送ガスとして用い、スプリット注入法を採用した。
メチルエステルのガス液体クロマトグラフィを、ヒューレットパッカードの自動試料採取器が備わったヒューレットパッカードモデル6890シリーズIIガス液体クロマトグラフィ、ケムステーションソフトウェア、30m x 0.32mm SP-2380キャピラリーカラム(スペルコ)および水素炎イオン化検出器(flame ionization detector)を用いて実施した。オーブン温度を120℃で3分保持、1分あたり5℃上昇させて190℃、190℃で1分保持、1分あたり20℃上昇させて260℃、そして260℃で3分保持した。インジェクターの温度を295℃に設定し、検出器の温度を280℃に設定した。ヘリウムを搬送ガスとして用い、スプリット注入法を採用した。
結果
DHA-リッチ脂質試料1
脱ろうしていないDHAリッチ脂質の試料(250g ボトル)を冷凍保存の試料1から引き出した。この試料は常温で半固体のままであって、技術的に「油(oil)」でなく「脂肪(fat)」とみなすことができる。一定分量(14.44 g)の脂肪を三角フラスコに移し、冷アセトン(氷/水浴)60mlを加えた。 脂肪構成成分を溶解/けん濁させるためフラスコを回し、直ちに真空下でガラス繊維ろ紙に通しろ過した。白色固体の画分はろ紙の上に残り、これを冷アセトン数mlで洗浄し、乾燥させた。白色固体の画分は収率6.3%で分離された(14.44gの脂肪から始めて0.91g)。
DHA-リッチ脂質試料1
脱ろうしていないDHAリッチ脂質の試料(250g ボトル)を冷凍保存の試料1から引き出した。この試料は常温で半固体のままであって、技術的に「油(oil)」でなく「脂肪(fat)」とみなすことができる。一定分量(14.44 g)の脂肪を三角フラスコに移し、冷アセトン(氷/水浴)60mlを加えた。 脂肪構成成分を溶解/けん濁させるためフラスコを回し、直ちに真空下でガラス繊維ろ紙に通しろ過した。白色固体の画分はろ紙の上に残り、これを冷アセトン数mlで洗浄し、乾燥させた。白色固体の画分は収率6.3%で分離された(14.44gの脂肪から始めて0.91g)。
ろ過から得た脂質/アセトン画分をロータリーエバポレーションで濃縮し、13.13gのオレンジ色の液体物質(常温で液体)を産生した。このことは全回収率が91%ということになった、したがってベンチスケールで約2%の物質が失われた。
「アセトン脱ろう」の後分離された白色固体画分および液体画分について脂質組成物を調べるためにTLCによって分析した。白色固体画分はTLCに基づきトリグリセリドであることが示された(トリグリセリドに相当するRfを有するスポットが1つ観察された)。液体画分をスポットし、展開するとTLCによって多くのスポットが観察された。スポットのRfはスクアレン、ステリルエステル、トリグリセリドおよびステロール(すべて試験的な割当て)を含む脂質組成物と一致していた。脂質クラス組成物について更なる分析は行わなかった。
アセトン脱ろうの後分離した白色固体画分は融点の範囲が52.4℃〜53.5℃であった。
アセトン脱ろう後分離した固体画分および液体画分をメチルエステルにエステル交換し、このメチルエステルをガス液体クロマトグラフィで分析した。脱ろうしていないDHAリッチ脂肪(試料1)と一緒にアセトン脱ろうすることによって単離した固体画分と液体画分の両方についてのFAMEの完全な特性を表1に示す。はっきり判断されるように、固体画分は主な脂肪酸としてメチルミリスチン酸(26%)とメチルパルミチン酸(66%)とともにほんのわずかなDHA(2.4%)およびDPA(0.9%)を含んでいた。アセトン脱ろう後に単離した液体画分は他の微量の脂肪酸とともにミリスチン酸(8.3%)、パルミチン酸(23.1%)、DPA(16.0%)、DHA(41.0%)を含んでいた。この特性を開始時の脱ろうしていない脂質の特性と比較すると、約8%のDHAの濃縮が見られ、主要なトリ飽和グリセリド構成成分の除去と一致する。このことは精製工程を表している。
DHAリッチな脂質沈殿物(試料2)
再洗練された脂質から産生された沈降物は完全にヘキサンに混合性を有するが、メタノールには混合性を有しない。少量のアセトンを沈降物に添加したとき、黄色い脂質/アセトン相の液体から分離する白い沈殿物が形成された。これらの分解試験を基に、アセトン分画を白色粉末の単離に用いた。
再洗練された脂質から産生された沈降物は完全にヘキサンに混合性を有するが、メタノールには混合性を有しない。少量のアセトンを沈降物に添加したとき、黄色い脂質/アセトン相の液体から分離する白い沈殿物が形成された。これらの分解試験を基に、アセトン分画を白色粉末の単離に用いた。
一定分量(1.11g)の沈降物を三角フラスコに移し、冷アセトン(氷/水浴)10mlを添加した。フラスコを回して脂肪構成成分を溶解/けん濁させ、直ちに真空化でガラス繊維ろ紙に通してろ過した。固体の白い画分がろ紙に残り、数ミリリットルの冷アセトンで洗浄し乾燥させた。固体の白い画分は収率15%で単離された(沈降物1.11gから開始して0.17g)。
ろ過から得た液体/アセトン画分をロータリーエバポレーターで濃縮し、0.94gのオレンジ色の液体物質(常温で液体)を産生した。このことにより全回収率は85%であった。
アセトン分画後に単離された白色固体画分と脂質画分をTLCによって分析し、脂質組成物を決定した。白色固体画分はTLCを基にトリグリセリドであることが示された(トリグリセリドに相当するRfを有するスポットが1つ観察された)。液体画分をスポットし、展開するとTLCによって多くのスポットが観察された。スポットのRfはスクアレン、ステリルエステル、トリグリセリドおよびステロール(すべて試験的な割当て)を含む脂質組成物と一致していた。脂質クラス組成物について更なる分析は行わなかった。
アセトン脱ろう後に単離された白色固体画分は50.1℃〜51.4℃の融点範囲を有していた。
アセトン脱ろう後に単離された固体画分および液体画分からエステル交換によりメチルエステルを生成し、このメチルエステルをガス液体クロマトグラフィによリ分析した。試料2と一緒にアセトン脱ろうすることによって単離した固体画分と液体画分の両方についてのFAMEの完全な特性を表1に示す。はっきりわかるように、固体画分は主な脂肪酸としてメチルミリスチン酸(29%)とメチルパルミチン酸(59%)と一緒にほんのわずかなDHA(6.4%)およびDPA(2.6%)を含んでいた。アセトン脱ろう後に単離した液体画分は他の微量の脂肪酸と一緒にミリスチン酸(8.4%)、パルミチン酸(23.2%)、DPA(16.3%)、DHA(41.1%)を含んでいた。
比較例
次に示す表2は、比較図2へと続く比較図1に示された以前の方法を比較して表している。
次に示す表2は、比較図2へと続く比較図1に示された以前の方法を比較して表している。
次に示す表3は、比較図2の漂白、脱臭、および洗練へと続く図5に記載のような本発明の方法を表している。
実施例3
シゾチトリウム油の粗抽出物を、ヘキサンを使ってバイオマスから脂質組成物を抽出する様々な脱ろう法に供した。ヘキサンを取り除き、残留のヘキサン量を有する粗抽出油を産生した。抽出した油を次に特定のアセトン/油の割合でアセトンを使って抽出し、所定時間、特定の温度で脱ろうした。残留ヘキサンのパーセント、アセトン/油の割合、脱ろう温度および脱ろう時間を異なる実験において変化させた。これらの方法を2週間後に、ろ過時間、油回収、および濁りに関して評価した。実験の詳細とその結果を次の表4に示す。
シゾチトリウム油の粗抽出物を、ヘキサンを使ってバイオマスから脂質組成物を抽出する様々な脱ろう法に供した。ヘキサンを取り除き、残留のヘキサン量を有する粗抽出油を産生した。抽出した油を次に特定のアセトン/油の割合でアセトンを使って抽出し、所定時間、特定の温度で脱ろうした。残留ヘキサンのパーセント、アセトン/油の割合、脱ろう温度および脱ろう時間を異なる実験において変化させた。これらの方法を2週間後に、ろ過時間、油回収、および濁りに関して評価した。実験の詳細とその結果を次の表4に示す。
(表4)アセトン脱ろうしたシゾチトリウム油について検査した変数および観測のレベル
対照:ヘキサン脱ろう(45:55、油:ヘキサン)-3℃で5時間
PPT-回転試験のあと観察された沈殿物
* ろ過後にPPTを示すヘキサン脱ろうした試料(同日)、不完全な結晶化の表示。囲い込まれたフィルターを使ってケークの十分な乾燥を達成することができないので、研究室で得られる回収率は工場において同一ではなかった。工場での典型的な回収率はおよ70〜75%である。
対照:ヘキサン脱ろう(45:55、油:ヘキサン)-3℃で5時間
PPT-回転試験のあと観察された沈殿物
* ろ過後にPPTを示すヘキサン脱ろうした試料(同日)、不完全な結晶化の表示。囲い込まれたフィルターを使ってケークの十分な乾燥を達成することができないので、研究室で得られる回収率は工場において同一ではなかった。工場での典型的な回収率はおよ70〜75%である。
結論
試料2沈降物の分析を基に、凝集物は主にミリスチン酸とパルミチン酸とを含むトリグリセリドであると考えられる。このことはTLC、IR、および結果として得られるGLCによるFAME分析を基準にしている。凝集物を含むこのトリグリセリドは高い融解温度(50.1℃〜51.4℃)を有していた。
試料2沈降物の分析を基に、凝集物は主にミリスチン酸とパルミチン酸とを含むトリグリセリドであると考えられる。このことはTLC、IR、および結果として得られるGLCによるFAME分析を基準にしている。凝集物を含むこのトリグリセリドは高い融解温度(50.1℃〜51.4℃)を有していた。
単離した白色粉末の高い融解温度は、この画分のトリグリセリド脂質クラス組成物を持ち、標準的な処理の際に用いられる脱ろう工程は脂質から「高い融解」画分を定量的に取り除かないということを示している。したがって、追加の「研磨」工程は完成品産物における透明度を達成するために推奨される。
試料1における脱ろうしていない脂質の固体の寄与を推定するために、アセトン脱ろう手法が用いられた。収率6%〜7%の試料1から単離された白色固体画分は主にミリスチン酸とパルミチン酸を含むトリグリセリドであることが示された(このトリグリセリド構成成分における脂肪酸の>94%が飽和脂肪である)。パルミチン酸とミリスチン酸はおおよそ2:1の割合で存在しており、融解温度の範囲が狭く、このトリグリセリドと定義される構造を提示している。ほんのわずかなDPAおよびDHAが固体トリグリセリド画分に存在していた。アセトン脱ろう後の単離された液体画分は、開始時の37.7% DHAと比較して、41.0% DHA を含んでいた(総脂肪酸メチルエステルの割合として表す)。このことはDHAの約8%の濃縮であり、7%のトリ飽和脂肪酸グリセリドの除去と一致する。
ほんのわずかなDHAの損失がベンチスケールのアセトン脱ろう方法において示され、脱ろうの間ほぼ量的なDHAの回収が得られることを示唆した。
固体または溶媒を利用した脱ろう(本明細書において立証されるアセトン脱ろうであるが、他の溶媒代替物が存在する)は以下の可能性を提供し、処理工程の選択肢として考慮することができる。
(1)高融解の固体物質の真の除去を達成することができる。
(2)固体物質は主にほんのわずかなDHA(2.4%)とともにトリ飽和脂肪酸グリセリド(>94%飽和の脂肪酸)である。
(3)例示的な計算として、粗製脂質中のDHA 1,000kgから開始して、アセトン脱ろうの間、DHA 約2kgの損失を受けるだろう(1,000 x 0.07 x 0.024)。このことは絶対重量基準でDHAの約0.2%の回収損失である。
(4)透明な液体は、開始時の脱ろうしていない脂質脂肪酸特性と比較して、脱ろう後DHAが濃縮されたままである。
(5)溶媒を利用した脱ろうをDHA精製を達成するために利用することができる。
(6)トリ飽和脂肪酸グリセリド構成成分の高融解温度(>50℃)のために、伝統的な低温冷却状態が必要でない場合がある。
(1)高融解の固体物質の真の除去を達成することができる。
(2)固体物質は主にほんのわずかなDHA(2.4%)とともにトリ飽和脂肪酸グリセリド(>94%飽和の脂肪酸)である。
(3)例示的な計算として、粗製脂質中のDHA 1,000kgから開始して、アセトン脱ろうの間、DHA 約2kgの損失を受けるだろう(1,000 x 0.07 x 0.024)。このことは絶対重量基準でDHAの約0.2%の回収損失である。
(4)透明な液体は、開始時の脱ろうしていない脂質脂肪酸特性と比較して、脱ろう後DHAが濃縮されたままである。
(5)溶媒を利用した脱ろうをDHA精製を達成するために利用することができる。
(6)トリ飽和脂肪酸グリセリド構成成分の高融解温度(>50℃)のために、伝統的な低温冷却状態が必要でない場合がある。
本出願は、2001年12月12日に出願された米国仮出願特許第60/341,180号を参照として組み入れる。
本発明の様々な態様を詳細に説明したが、これらの態様の当技術分野への変更および適用が生じることは自明である。しかしながら、このような改変および適応は、添付の特許請求の範囲に記載の本発明の範囲内にあることをはっきりと理解されなくてはならない。
Claims (47)
- 以下の工程を含む、中性脂質組成物を主に含む脂質組成物を精製するための方法であって、該脂質組成物は少なくとも一つの長鎖不飽和脂肪酸(LCPUFA)および少なくとも一つの他の化合物を含む、方法:
(a)該脂質組成物を極性溶媒と接触させる工程であって、該他の化合物は該極性溶媒中において該LCPUFAよりも溶解性が低い、工程;
(b)少なくとも該他の化合物の一部を沈殿させるために効果的な温度範囲で、該脂質組成物を維持する工程;および
(c)脂質産物を形成するために、該脂質組成物から少なくとも該他の化合物の一部を取り除く工程。 - 脂質組成物が中性脂質を少なくとも50%含む、請求項1記載の方法。
- 脂質組成物が中性脂質を少なくとも85%含む、請求項1記載の方法。
- 中性脂質がトリグリセリドを含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の方法。
- 中性脂質がトリグリセリドを少なくとも50%含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の方法。
- 以下の工程を含む、脂質組成物における濁りの形成を軽減させるための方法であって、該脂質組成物が少なくとも1つの長鎖不飽和脂肪酸(LCPUFA)と少なくとも1つの濁り形成化合物とを含む、方法:
(a)該脂質組成物を極性溶媒と接触させる工程であって、該濁り形成化合物は該極性溶媒中において該LCPUFAよりも溶解性が低い、工程;
(b)少なくとも該濁り形成化合物の一部を沈殿させるために効果的な温度範囲で、該脂質組成物を維持する工程;および
(c)脂質産物を形成するために、少なくとも該濁り形成化合物の一部を該脂質組成物から取り除く工程。 - 方法の前よりも後の方が、重量パーセント基準で、LCPUFA濃度が高い、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
- 方法の前よりも後の方が、重量パーセント基準で、他の化合物の濃度が低い、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
- 方法の前よりも後の方が、重量パーセント基準で、脂質中に存在するいかなるリン含有化合物の総濃度が低い、請求項1〜8のいずれか一項記載の方法。
- 方法によって、後続処理工程の少ない、許容される産物が得られる、請求項1〜9のいずれか一項記載の方法。
- 方法によって、精練が軽減されたまたは精練が不要な、許容される産物が得られる、請求項1〜10のいずれか一項記載の方法。
- 極性溶媒が、アセトン、イソプロピルアルコール、メタノール、エタノール、エチルアセテート、およびこれらの混合物からなる群より選択される、請求項1〜11のいずれか一項記載の方法。
- 極性溶媒がアセトンを含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
- 温度範囲が約-20℃〜約50℃である、請求項1〜13のいずれか一項記載の方法。
- 温度範囲が約-5℃〜約20℃である、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
- 温度範囲が約-5℃〜約5℃である、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
- 温度が約0℃である、請求項1〜16のいずれか一項記載の方法。
- LCPUFAが、アラキドン酸(ARA)、ω-6ドコサペンタエン酸(DPA(n-6))、 ω-3ドコサペンタエン酸(DPA(n-3))、エイコサペンタエン酸(EPA)、およびドコサヘキサエン酸(DHA)からなる群より選択される、請求項1〜17のいずれか一項記載の方法。
- 他の化合物が、トリ飽和グリセリド、リン含有物質、ワックスエステル、ステロールエステルを含む飽和脂肪酸、ステロール、スクアレン、および炭化水素からなる群より選択される、請求項1〜18のいずれか一項記載の方法。
- 他の化合物が、トリ飽和グリセリド、ホスファチド、およびワックスエステルからなる群より選択される、請求項1〜19のいずれか一項記載の方法。
- 他の化合物が、ラウリン脂肪酸(C12:0)、ミリスチン脂肪酸(C14:0)、パルミチン脂肪酸(C16:0)、ステアリン脂肪酸(C18:0)、およびこれらの混合物からなる群より選択される、請求項1〜20のいずれか一項記載の方法。
- 脂質組成物が、少なくとも1つのLCPUFAと少なくとも1つのトリ飽和グリセリドとを最初に含む、請求項1〜21のいずれか一項記載の方法。
- 他の化合物が初めの脂質組成物における初期濃度に存在する場合、該他の化合物によって濁りが形成される、請求項1〜22のいずれか一項記載の方法。
- LCPUFAが、LCPUFA含有微生物バイオマスおよびLCPUFA含有脂質を産生させるために遺伝子操作された植物由来の脂肪種子からなる群より選択されるLCPUFA含有生物材料から得られる、請求項1〜23のいずれか一項記載の方法。
。 - LCPUFAが、微生物由来のLCPUFA産生遺伝子で操作された植物から得られる、請求項1〜24のいずれか一項記載の方法。
- LCPUFAが、トローストチトリドバイオマス、渦鞭毛藻バイオマス、モルティエラバイオマス、およびトローストチトリド、渦鞭毛藻、またはモルティエラ由来の遺伝子を含む遺伝子操作された植物由来の脂肪種子からなる群より選択される供給源から得られる、請求項1〜25のいずれか一項記載の方法。
- LCPUFAが、シゾチトリウムバイオマス、トローストチトリウムバイオマス、クリプテコディニウム・コニーバイオマス、またはシゾチトリウムもしくはトローストチトリウム由来の遺伝子を含む遺伝子操作された植物由来の脂肪種子からなる群より得られる、請求項1〜26のいずれか一項記載の方法。
- 溶媒:脂質組成物の比が約1:10〜約20:1である、請求項1〜27のいずれか一項記載の方法。
- 溶媒:脂質組成物の比が約1:8〜約10:1である、請求項1〜28のいずれか一項記載の方法。
- 溶媒:脂質組成物の比が約1:5〜約5:1である、請求項1〜29のいずれか一項記載の方法。
- 溶媒:脂質組成物の比が約1:2〜約2.5:1である、請求項1〜30のいずれか一項記載の方法。
- 溶媒:脂質組成物の比が約1:1である、請求項1〜31のいずれか一項記載の方法。
- LCPUFAを含むトリグリセリド分子が選択的に抽出され、かつ極性溶媒中では溶解しない他の化合物は抽出されないような低温において、該極性溶媒を用いて脂質を抽出する、請求項1〜32のいずれか一項記載の方法。
- 脂質組成物がバイオマスより抽出され、細胞残屑および沈殿した他の化合物が、LCPUFAと極性溶媒とを含むミセラから分離される、請求項1〜33のいずれか一項記載の方法。
- 極性溶媒と脂質組成物との接触時間が約0.5時間〜約12時間である、請求項1〜34のいずれか一項記載の方法。
- 極性溶媒と脂質組成物との接触時間が約2時間〜約6時間である、請求項1〜35のいずれか一項記載の方法。
- 極性溶媒と脂質組成物との接触時間が約4時間である、請求項1〜36のいずれか一項記載の方法。
- 以下の工程をさらに含む、請求項1〜37のいずれか一項記載の方法:
(a)すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、脂質を回収するために極性溶媒を使用する工程;
(b)不要化合物を選択的に沈殿させるためにミセラを冷却する工程;および
(c)沈殿した他の化合物を、該ミセラから分離する工程。 - 脂質組成物がバイオマスより抽出され、細胞残屑および沈殿した他の化合物が、LCPUFAと極性溶媒とを含むミセラから分離される、請求項38記載の方法。
- 以下の工程をさらに含む、請求項1〜37のいずれか一項記載の方法:
(a)すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、バイオマスから脂質を回収するために極性溶媒を使用し、脂質組成物、極性溶媒、および細胞残屑の混合物を含むミセラを形成させる工程;
(b)該ミセラから該細胞残屑を分離する工程;
(c)不要な化合物を選択的に沈殿させるために該ミセラを冷却する工程;ならびに
(d)沈殿した他の化合物を、該ミセラから分離する工程。 - 以下の工程をさらに含む、請求項1〜37のいずれか一項記載の方法:
(a)すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、脂質を回収するために非極性溶媒を使用し、脂質組成物および非極性溶媒の混合物を含むミセラを形成させる工程;
(b)該ミセラから大部分の該非極性溶媒を取り除く工程;
(c)該ミセラに極性溶媒を添加する工程;
(d)不要な化合物を選択的に沈殿させるために該ミセラを冷却する工程;ならびに
(e)沈殿した他の化合物を、該ミセラから分離する工程。 - 以下の工程をさらに含む、請求項1〜37のいずれか一項記載の方法:
(a)すべてのトリグリセリド構成成分を実質的に可溶化する温度で実施する抽出方法において、脂質を回収するために非極性溶媒を使用し、脂質組成物および非極性溶媒の混合物を含むミセラを形成させる工程;
(b)該ミセラを脱ろうする工程;
(c)該ミセラから大部分の該非極性溶媒を取り除く工程;
(d)該ミセラに極性溶媒を添加する工程;
(e)不要な化合物を選択的に沈殿させるために該ミセラを冷却する工程;ならびに
(f)沈殿した他の化合物を、該ミセラから分離する工程。 - ミセラから大部分の非極性溶媒を取り除いた後の残留非極性溶媒が、該ミセラの約0重量%〜約4重量%である、請求項40〜41のいずれか一項記載の方法。
- ミセラから大部分の非極性溶媒を取り除いた後の残留非極性溶媒が、該ミセラの約1重量%〜約4重量%である、請求項40〜41のいずれか一項記載の方法。
- 非極性溶媒がヘキサンである、請求項40〜43のいずれか一項記載の方法。
- 分離するまたは取り除く工程が、沈殿した他の化合物を、液体/固体分離技術によって分離するまたは取り除く工程を含む、請求項1〜45のいずれか一項記載の方法。
- 分離するまたは取り除く工程が、沈殿した他の化合物を、遠心分離、ろ過、もしくはそれらの組み合わせによって分離するまたは取り除く工程を含む、請求項1〜46のいずれか一項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US34118001P | 2001-12-12 | 2001-12-12 | |
US60/341,180 | 2001-12-12 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010058682A Division JP2010196060A (ja) | 2001-12-12 | 2010-03-16 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013100530A true JP2013100530A (ja) | 2013-05-23 |
Family
ID=23336542
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003550880A Expired - Fee Related JP4647212B2 (ja) | 2001-12-12 | 2002-12-12 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
JP2010058682A Pending JP2010196060A (ja) | 2001-12-12 | 2010-03-16 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
JP2013007324A Withdrawn JP2013100530A (ja) | 2001-12-12 | 2013-01-18 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003550880A Expired - Fee Related JP4647212B2 (ja) | 2001-12-12 | 2002-12-12 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
JP2010058682A Pending JP2010196060A (ja) | 2001-12-12 | 2010-03-16 | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US7419596B2 (ja) |
EP (3) | EP2239028A1 (ja) |
JP (3) | JP4647212B2 (ja) |
CN (1) | CN1267174C (ja) |
AT (1) | ATE522264T1 (ja) |
AU (3) | AU2002366642B2 (ja) |
CA (2) | CA2718374C (ja) |
NO (1) | NO20042929L (ja) |
WO (1) | WO2003049832A1 (ja) |
Families Citing this family (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK1252324T3 (da) | 2000-01-19 | 2010-12-20 | Martek Biosciences Corp | Solventfri ekstraktionsfremgangsmåde |
WO2010120939A2 (en) * | 2009-04-14 | 2010-10-21 | Solazyme, Inc. | Methods of microbial oil extraction and separation |
US7419596B2 (en) * | 2001-12-12 | 2008-09-02 | Martek Biosciences Corporation | Extraction and winterization of lipids from oilseed and microbial sources |
US7122216B2 (en) * | 2003-06-16 | 2006-10-17 | I.P. Holdings, L.L.C. | Vegetable oil extraction methods |
PT1656449E (pt) | 2003-08-21 | 2009-07-27 | Monsanto Technology Llc | Dessaturases dos ácidos gordos a partir de prímulas |
US20050215640A1 (en) | 2004-03-26 | 2005-09-29 | Baxter Jeffrey H | HMB compositions and uses thereof |
EP2902021B1 (en) | 2004-04-16 | 2018-11-14 | Monsanto Technology LLC | Expression of fatty acid desaturases in corn |
TWI397582B (zh) | 2004-11-04 | 2013-06-01 | Monsanto Technology Llc | 油組合物之製備方法 |
CN101098628B (zh) * | 2004-11-04 | 2010-09-01 | 孟山都技术公司 | 种子油组合物 |
DK2447356T3 (en) | 2005-06-07 | 2016-06-06 | Dsm Nutritional Products Ag | Eukaryotic MICROORGANISMS FOR PRODUCTION OF LIPIDS AND ANTIOXIDANTS |
AU2006265801B2 (en) * | 2005-07-01 | 2011-07-14 | Martek Biosciences Corporation | Polyunsaturated fatty acid-containing oil product and uses and production thereof |
RU2469719C2 (ru) | 2005-12-19 | 2012-12-20 | Абботт Лаборэтриз | СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АЛЛЕРГИИ, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АСТМЫ, СПОСОБ СНИЖЕНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ИНФЕКЦИИ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ СОСТОЯНИЯ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩЕГОСЯ ДИСБАЛАНСОМ СОДЕРЖАНИЯ ЦИТОКИНОВ ТИПОВ 1 И 2, ПОСРЕДСТВОМ β-ГИДРОКСИ-β-МЕТИЛБУТИРАТА |
CN105475116A (zh) | 2006-03-10 | 2016-04-13 | 孟山都技术有限公司 | 大豆种子和油的组成以及产生所述种子的方法 |
EP2049674A4 (en) | 2006-07-21 | 2010-08-11 | Xyleco Inc | BIOMASS CONVERSION SYSTEMS |
CN105154481A (zh) | 2006-08-01 | 2015-12-16 | 帝斯曼营养品股份公司 | 产油微生物及改良这些微生物的方法 |
DE102007037783A1 (de) * | 2007-08-10 | 2009-02-19 | Cognis Ip Management Gmbh | Lipophile Zubereitungen |
NO2262376T3 (ja) * | 2008-03-17 | 2018-01-06 | ||
US8043496B1 (en) | 2008-03-18 | 2011-10-25 | Peter Allen Schuh | System for extracting oil from algae |
US9896642B2 (en) | 2008-10-14 | 2018-02-20 | Corbion Biotech, Inc. | Methods of microbial oil extraction and separation |
US9480271B2 (en) | 2009-09-15 | 2016-11-01 | Monsanto Technology Llc | Soybean seed and oil compositions and methods of making same |
US8552098B2 (en) * | 2009-09-30 | 2013-10-08 | Dow Global Technologies Llc | Purified acetylated derivatives of castor oil and compositions including same |
CN102595918A (zh) * | 2009-11-03 | 2012-07-18 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 包含具有至少20个碳原子的多不饱和脂肪酸的植物油 |
BR122015020119B8 (pt) | 2010-01-19 | 2021-05-04 | Dsm Ip Assets Bv | óleo microbiano, produtos alimentícios para um animal não humano e biomassa isolada |
US8187861B1 (en) | 2010-01-26 | 2012-05-29 | Allen John Schuh | Phosphate removal-recovery and biofuel feedstock system |
CA2785523A1 (en) | 2010-01-29 | 2011-08-04 | Abbott Laboratories | Aseptically packaged nutritional liquids comprising hmb |
EP2528459B1 (en) | 2010-01-29 | 2014-06-11 | Abbott Laboratories | Nutritional emulsions comprising calcium hmb |
US9693577B2 (en) | 2010-01-29 | 2017-07-04 | Abbott Laboratories | Method of preparing a nutritional powder comprising spray dried HMB |
US8211309B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
US8202425B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-06-19 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
US20130217904A1 (en) * | 2010-04-06 | 2013-08-22 | Heliae Development, Llc | Method of extracting polar lipids and neutral lipids with two solvents |
US8211308B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
US8273248B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-09-25 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
US8475660B2 (en) | 2010-04-06 | 2013-07-02 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
WO2011127127A2 (en) | 2010-04-06 | 2011-10-13 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Extraction with fractionation of oil and co-products from oleaginous material |
US8115022B2 (en) * | 2010-04-06 | 2012-02-14 | Heliae Development, Llc | Methods of producing biofuels, chlorophylls and carotenoids |
US8308951B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-13 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
US20140005422A1 (en) * | 2010-04-06 | 2014-01-02 | Heliae Development, Llc | Method of extracting neutral lipids with two solvents |
US8313648B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-20 | Heliae Development, Llc | Methods of and systems for producing biofuels from algal oil |
CN102858988A (zh) * | 2010-04-06 | 2013-01-02 | 赫里开发公司 | 通过使用具有递减极性的溶剂从含油材料连续提取油和蛋白质材料 |
US10125331B2 (en) * | 2010-04-29 | 2018-11-13 | Advanced Energy Development | Renewable oil refining processes |
JP5911479B2 (ja) * | 2010-06-01 | 2016-04-27 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 細胞からの脂質の抽出およびそれに由来する生産物 |
TWI526161B (zh) | 2010-06-10 | 2016-03-21 | 亞培公司 | 包含鈣hmb及可溶性蛋白質之實質上透明營養液 |
US9023625B2 (en) | 2010-06-14 | 2015-05-05 | Io-Mega Holding Corporation | Methods for production of algae derived oils |
ES2490619T3 (es) * | 2010-11-08 | 2014-09-04 | Neste Oil Oyj | Método de extracción de lípidos a partir de biomasa |
EP2673063A1 (en) | 2011-02-11 | 2013-12-18 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Purification of triglyceride oil from microbial sources using short path distillation |
CA2825039C (en) | 2011-02-11 | 2020-04-28 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Method for obtaining a lipid-containing composition from microbial biomass |
US8365462B2 (en) | 2011-05-31 | 2013-02-05 | Heliae Development, Llc | V-Trough photobioreactor systems |
USD661164S1 (en) | 2011-06-10 | 2012-06-05 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
USD679965S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-04-16 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
USD682637S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-05-21 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
US10383839B2 (en) * | 2011-06-30 | 2019-08-20 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Esters for treatment of ocular inflammatory conditions |
AU2012285806B2 (en) | 2011-07-21 | 2017-09-14 | Dsm Ip Assets B.V. | Fatty acid compositions |
US9200236B2 (en) | 2011-11-17 | 2015-12-01 | Heliae Development, Llc | Omega 7 rich compositions and methods of isolating omega 7 fatty acids |
CN103156003B (zh) * | 2011-12-16 | 2015-04-29 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 一种调和油及其制备方法 |
WO2013172087A1 (ja) * | 2012-05-17 | 2013-11-21 | 株式会社竹田測量設計 | 一酸化窒素産生阻害活性を備える組成物 |
US9632797B2 (en) | 2013-01-31 | 2017-04-25 | Hewlett Packard Enterprise Development Lp | Updating a commit list to indicate data to be written to a firmware interface variable repository |
DK2970926T3 (en) | 2013-03-13 | 2018-04-16 | Dsm Nutritional Products Ag | GENMANIPULATION OF MICROorganisms |
AU2014369040B2 (en) | 2013-12-20 | 2019-12-05 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
AU2014369045B2 (en) | 2013-12-20 | 2020-02-27 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
ES2953836T3 (es) | 2013-12-20 | 2023-11-16 | Dsm Ip Assets Bv | Procedimiento para la obtención de aceite microbiano a partir de células microbianas |
WO2015095690A2 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
CN106459827B (zh) | 2014-05-30 | 2020-12-08 | 德雷伊利林Pvg有限责任两合公司 | 用于纯化精制的脂质相的方法 |
WO2016075313A1 (en) * | 2014-11-14 | 2016-05-19 | Basf Plant Science Company Gmbh | Materials and methods for increasing the tocopherol content in seed oil |
AR104042A1 (es) | 2015-03-26 | 2017-06-21 | Mara Renewables Corp | Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto |
KR20180027584A (ko) | 2015-07-13 | 2018-03-14 | 마라 리뉴어블즈 코퍼레이션 | 크실로오스의 미세조류 대사를 강화시키는 방법 |
US10851395B2 (en) | 2016-06-10 | 2020-12-01 | MARA Renewables Corporation | Method of making lipids with improved cold flow properties |
EP3485028A1 (en) | 2016-07-13 | 2019-05-22 | Evonik Degussa GmbH | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
CN106343045A (zh) * | 2016-08-11 | 2017-01-25 | 青岛俏宝食品有限公司 | 一种富含长碳链多不饱和脂肪酸类脂质的营养强化型功能低温食用调和油脂 |
CN110462014A (zh) | 2016-12-27 | 2019-11-15 | 赢创德固赛有限公司 | 从含有脂质的生物质中分离脂质的方法 |
CN110267654A (zh) * | 2017-02-22 | 2019-09-20 | 嘉吉公司 | 含dha的油的纯化 |
EP3470502A1 (en) * | 2017-10-13 | 2019-04-17 | Evonik Degussa GmbH | Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass |
WO2019048327A1 (en) * | 2017-09-05 | 2019-03-14 | Evonik Degussa Gmbh | METHOD FOR SEPARATING LIPIDS IN A BIOMASS CONTAINING LYDE LIPIDS |
EP3527664A1 (en) | 2018-02-15 | 2019-08-21 | Evonik Degussa GmbH | Method of isolating lipids from a lipids containing biomass |
JP2021521882A (ja) * | 2018-04-20 | 2021-08-30 | ナノ アルジー ソリューションズ アーゲー | エイコサペンタエン酸オイル組成物を提供するための新規なプロセス |
BR112020023211A2 (pt) | 2018-05-15 | 2021-02-23 | Evonik Operations Gmbh | método de isolamento de lipídios de uma biomassa contendo lipídios com auxílio de sílica hidrofóbica |
WO2019219396A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Evonik Operations Gmbh | Method of isolating lipids from a lysed lipids containing biomass by emulsion inversion |
EP3586640A1 (en) | 2018-06-21 | 2020-01-01 | Nuseed Pty Ltd | Dha enriched polyunsaturated fatty acid compositions |
FR3085825B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-07-16 | Fermentalg | Huile de microorganismes riche en acide docosahexaenoique |
FR3085962B1 (fr) | 2018-09-14 | 2021-06-18 | Fermentalg | Procede d'extracton d'une huile riche en pufa |
CN109731102B (zh) * | 2019-01-31 | 2022-05-17 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种降低橄榄油甲氧基苯胺值的方法 |
Family Cites Families (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3541123A (en) * | 1968-10-21 | 1970-11-17 | Kao Corp | Process for the fractionation of oils and fats |
US4205006A (en) * | 1973-03-05 | 1980-05-27 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Physiochemically designed fat compositions from tallow and process for making |
US3944585A (en) * | 1973-03-05 | 1976-03-16 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Multi-step crystallization and blending process for making physiochemically designed fat compositions from tallow |
JPS5959644A (ja) | 1982-09-29 | 1984-04-05 | Kureha Chem Ind Co Ltd | 魚油中のエイコサペンタエン酸を濃縮する方法 |
JPS5967241A (ja) | 1982-10-08 | 1984-04-16 | Kureha Chem Ind Co Ltd | 魚油中のエイコサペンタエン酸の濃縮方法 |
JPS60133094A (ja) * | 1983-12-21 | 1985-07-16 | 日清製油株式会社 | 高純度エイコサペンタエン酸の製造法 |
JPS61192292A (ja) * | 1985-02-21 | 1986-08-26 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含有グリセリドの濃縮方法 |
US4870011A (en) * | 1985-01-22 | 1989-09-26 | Director General Of Agency Of Industrial Science And Technology | Method for obtaining lipids from fungus bodies |
US4792418A (en) * | 1985-08-14 | 1988-12-20 | Century Laboratories, Inc. | Method of extraction and purification of polyunsaturated fatty acids from natural sources |
US5336792A (en) | 1990-03-12 | 1994-08-09 | Einar Sola | Process for enrichment of fat with regard to polyunsaturated fatty acids and phospholipids, and application of such enriched fat |
US5658767A (en) * | 1991-01-24 | 1997-08-19 | Martek Corporation | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
JP3354582B2 (ja) * | 1991-09-30 | 2002-12-09 | サントリー株式会社 | オメガ9系高度不飽和脂肪酸およびこれを含有する脂質の製造方法 |
DE4219360C2 (de) * | 1992-06-12 | 1994-07-28 | Milupa Ag | Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fettsäuren |
EP0862369B2 (en) * | 1995-11-24 | 2009-09-30 | Unilever N.V. | Composition based on fish oil |
US6255505B1 (en) * | 1996-03-28 | 2001-07-03 | Gist-Brocades, B.V. | Microbial polyunsaturated fatty acid containing oil from pasteurised biomass |
CN102304036A (zh) * | 1996-03-28 | 2012-01-04 | Dsmip资产有限公司 | 粒状微生物生物质的制备及其有价值的化合物的分离方法 |
DK0904339T4 (da) | 1996-05-15 | 2007-01-29 | Dsm Ip Assets Bv | Sterolekstraktion med et polært oplösningsmiddel til opnåelse af lavsterolholdig mikrobiel olie |
DK1785492T3 (da) | 1996-07-23 | 2010-07-26 | Nagase Chemtex Corp | Fremgangsmåde til fremstilling af docosahexaensyre og docosapentaensyre |
IN1998CH01219A (en) * | 1997-06-04 | 2005-03-04 | Calgene Llc | Production of polyunsaturated fatty acid by expression of polyketide-like synthesis genes in plants |
DK1252324T3 (da) * | 2000-01-19 | 2010-12-20 | Martek Biosciences Corp | Solventfri ekstraktionsfremgangsmåde |
JP3425622B2 (ja) * | 2000-03-30 | 2003-07-14 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | ラビリンチュラ属菌を用いた高度不飽和脂肪酸含有培養物および高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法 |
US6344574B1 (en) | 2000-07-20 | 2002-02-05 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Solvent fractionation of chicken fat for making lipid compositions enriched in unsaturated fatty acid-containing triacylglycerols |
EP1178103A1 (en) * | 2000-08-02 | 2002-02-06 | Dsm N.V. | Purifying crude pufa oils |
CN1109093C (zh) * | 2000-09-28 | 2003-05-21 | 中国科学院武汉病毒研究所 | 一种微生物油脂的制备方法 |
PT1322752E (pt) * | 2000-09-28 | 2010-05-06 | Bioriginal Food & Science Corp | Fad4, fad5, fad5-2 e fad6, novos membros da família de dessaturases de ácidos gordos e susas utilizações |
EP1215274A1 (en) * | 2000-12-15 | 2002-06-19 | Dsm N.V. | Enrichment of microbial oils |
US6492537B2 (en) | 2001-02-20 | 2002-12-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Solvent fractionation of menhaden oil and partially hydrogenated menhaden oil for making lipid compositions enriched in unsaturated fatty acid-containing triacylglycerols |
DE10151155A1 (de) | 2001-10-19 | 2003-05-08 | Nutrinova Gmbh | Native PUFA-Triglyceridmischungen mit einem hohen Gehalt an mehrfach ungesättigten Fettsäuren sowie Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
US7419596B2 (en) * | 2001-12-12 | 2008-09-02 | Martek Biosciences Corporation | Extraction and winterization of lipids from oilseed and microbial sources |
US20040209953A1 (en) * | 2002-12-06 | 2004-10-21 | Wai Lee Theresa Siu-Ling | Glyceride compositions and methods of making and using same |
US7561412B2 (en) * | 2006-09-29 | 2009-07-14 | Rockwell Automation Technologies, Inc. | System and method for automatically securing a motor control center |
US7528612B2 (en) * | 2006-09-29 | 2009-05-05 | Rockwell Automation Technologies, Inc. | System and method for monitoring a motor control center |
US8228067B2 (en) * | 2006-11-02 | 2012-07-24 | Production Resource Group, Llc | Load bank |
-
2002
- 2002-12-12 US US10/498,598 patent/US7419596B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-12 WO PCT/US2002/039930 patent/WO2003049832A1/en active Application Filing
- 2002-12-12 CA CA2718374A patent/CA2718374C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-12 CA CA2469647A patent/CA2469647C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-12 EP EP10166318A patent/EP2239028A1/en not_active Withdrawn
- 2002-12-12 CN CNB028280431A patent/CN1267174C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-12 JP JP2003550880A patent/JP4647212B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-12 EP EP02791414A patent/EP1453583B1/en not_active Revoked
- 2002-12-12 AU AU2002366642A patent/AU2002366642B2/en not_active Ceased
- 2002-12-12 AT AT02791414T patent/ATE522264T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-12-12 EP EP10176356A patent/EP2261312A1/en not_active Withdrawn
-
2004
- 2004-07-08 NO NO20042929A patent/NO20042929L/no unknown
-
2008
- 2008-08-01 US US12/184,974 patent/US7695626B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2009
- 2009-02-24 AU AU2009200718A patent/AU2009200718B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2010
- 2010-03-16 JP JP2010058682A patent/JP2010196060A/ja active Pending
- 2010-04-09 US US12/757,383 patent/US8012354B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-09-06 US US13/226,324 patent/US8480904B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2011-11-10 AU AU2011250697A patent/AU2011250697A1/en not_active Abandoned
-
2013
- 2013-01-18 JP JP2013007324A patent/JP2013100530A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20050115897A1 (en) | 2005-06-02 |
AU2002366642B2 (en) | 2008-12-11 |
US20100261919A1 (en) | 2010-10-14 |
JP2010196060A (ja) | 2010-09-09 |
EP1453583B1 (en) | 2011-08-31 |
US8012354B2 (en) | 2011-09-06 |
US8480904B2 (en) | 2013-07-09 |
CA2718374C (en) | 2013-05-07 |
CN1620330A (zh) | 2005-05-25 |
AU2009200718B2 (en) | 2011-08-11 |
AU2009200718A1 (en) | 2009-03-19 |
EP1453583A4 (en) | 2005-08-17 |
EP2239028A1 (en) | 2010-10-13 |
WO2003049832A1 (en) | 2003-06-19 |
EP2261312A1 (en) | 2010-12-15 |
CN1267174C (zh) | 2006-08-02 |
US20120059180A1 (en) | 2012-03-08 |
US7419596B2 (en) | 2008-09-02 |
JP4647212B2 (ja) | 2011-03-09 |
CA2718374A1 (en) | 2003-06-19 |
CA2469647A1 (en) | 2003-06-19 |
ATE522264T1 (de) | 2011-09-15 |
EP1453583A2 (en) | 2004-09-08 |
AU2011250697A1 (en) | 2011-12-01 |
US20090099379A1 (en) | 2009-04-16 |
JP2005513051A (ja) | 2005-05-12 |
US7695626B2 (en) | 2010-04-13 |
AU2002366642A1 (en) | 2003-06-23 |
CA2469647C (en) | 2011-02-15 |
WO2003049832A8 (en) | 2003-10-23 |
NO20042929L (no) | 2004-07-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4647212B2 (ja) | 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう | |
Peña et al. | Extraction of free fatty acids from wet Nannochloropsis gaditana biomass for biodiesel production | |
Chew et al. | Refining of edible oils | |
Fajardo et al. | Lipid extraction from the microalga Phaeodactylum tricornutum | |
Catchpole et al. | The extraction and fractionation of specialty lipids using near critical fluids | |
Létisse et al. | Enrichment of EPA and DHA from sardine by supercritical fluid extraction without organic modifier: I. Optimization of extraction conditions | |
JP6889700B2 (ja) | 天然油由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸 | |
JP2005278650A5 (ja) | ||
JP2003520046A (ja) | 無溶媒抽出プロセス | |
JPH09500916A (ja) | 不けん化物の濃度が高められた植物由来の脂肪画分の製造方法及びその画分の化粧用及び/又は薬剤組成物、特に皮膚用組成物製造に対する使用 | |
Chakrabarti et al. | Processing technology of rice bran oil | |
Mayamol et al. | Process technology for the production of micronutrient rich red palm olein | |
Sehl et al. | How do algae oils change the omega-3 polyunsaturated fatty acids market? | |
Alavi Talab et al. | Extraction and purification of omega‐3 fatty acids concentrate from Hypophthalmichthys molitrix oil | |
Kokkiligadda et al. | Concentration and Partial Purification of Essential fatty acids as Co-products of Biofuels from Microalgal Consortium | |
JPH06321970A (ja) | ドコサヘキサエン酸を含むリン脂質組成物の取得方法 | |
TWI322186B (en) | Solventless extraction process | |
JP2024038073A (ja) | 油脂中のワックスエステルの定量方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130215 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130215 |
|
A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20131015 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20140707 |