JP2012522513A5

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Publication number: JP2012522513A5
Application number: JP2012503682A
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Filing date: 2010-03-31
Publication date: 2013-05-16
Anticipated expiration: 2030-03-31

Description

キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５７Ｄ１１軽鎖（ＤＮＡ）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５７Ｄ１１軽鎖（アミノ酸）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５７Ｄ１１重鎖（ＤＮＡ）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５７Ｄ１１重鎖（アミノ酸）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５（ｍＡｂ１３Ｇ９）軽鎖（ＤＮＡ）（配列番号５２）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５（ｍＡｂ１３Ｇ９）軽鎖（アミノ酸）（配列番号５３）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５（ｍＡｂ１３Ｇ９）重鎖（ＤＮＡ）（配列番号５４）を示す。キメラ抗ヒトＦｃＲＨ５（ｍＡｂ１３Ｇ９）重鎖（アミノ酸）（配列番号５５）を示す。ネズミ１３Ｇ９（配列番号１８）およびヒト化１３Ｇ９ｖ１（配列番号１９）に関する可変軽鎖のアラインメントを示す。図９は、配列番号５６として「ｈｕｍＩＩＩ」配列を開示する。ネズミ１３Ｇ９（配列番号２０）およびヒト化１３Ｇ９ｖ１（配列番号５７）に関する可変重鎖のアラインメントを示す。図１０は、配列番号５８として「ｈｕｍＩＩＩ」配列を開示する。ヒト化１３Ｇ９（配列番号２１）およびヒト化１３Ｇ９ｖ３（配列番号２２）およびヒト化１３Ｇ９ｖ８（配列番号２３）に関する可変重鎖のアラインメントを示す。本発明の抗体のアミノ酸配列（ｈｕ１３Ｇ９ｖ１）を示す。図１２は、出現順に、それぞれ、配列番号２４〜４２を開示する。本発明のチオ−Ｍａｂのシステイン操作操作されたポリペプチド鎖のアミノ酸配列を示す。図１３は、出現順に、それぞれ、配列番号５９および６０を開示する。本発明のチオ−Ｍａｂのシステイン操作操作されたポリペプチド鎖のアミノ酸配列を示す。図１４は、出現順に、それぞれ、配列番号６１および６２を開示する。ＦｃＲＨ５抗体の交差反応性を示す。ＦｃＲＨ５抗体の交差反応性を示す。ＦｃＲＨ５抗体の交差反応性を示す。ＦｃＲＨ５抗体滴定を示す。ＦｃＲＨ５抗体滴定を示す。平均腫瘍体積に及ぼす本発明の抗体の作用を示す。平均体重に及ぼす本発明の抗体の作用を示す。平均腫瘍体積に及ぼす本発明の抗体の作用を示す。平均体重に及ぼす本発明の抗体の作用を示す。単一化合物用量応答分析を示す。単一化合物用量応答分析を示す。ＰＲＯ８２０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６３）を示す。この場合、配列番号６３は、「ＤＮＡ５６０４１−１４１６」（本明細書中では「ＦｃＲＨ５」とも呼ばれる）と本明細書中で呼ばれるクローンである。ヌクレオチド配列は、太字で示され、下線を付された開始および停止コドンを有するＦｃＲＨ５をコードする（米国特許第７４９１５２９号（Goddard等）参照）。図２６で示される配列番号６３のコード配列由来のアミノ酸配列（配列番号６４）を示す（米国特許第７４９１５２９号（Goddard等）参照）。ＰＲＯ５２３８７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６５）を示す。この場合、配列番号６５は、「ＤＮＡ２５７８４５」（本明細書中では「ＦｃＲＨ５」とも呼ばれる）と本明細書中で呼ばれるクローンである。ヌクレオチド配列は、太字で示され、下線を付された開始および停止コドンを有するＦｃＲＨ５をコードする（米国公開特許出願番号２００６０２５１６６２（Chang等）参照）。ＰＲＯ５２３８７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６５）を示す。この場合、配列番号６５は、「ＤＮＡ２５７８４５」（本明細書中では「ＦｃＲＨ５」とも呼ばれる）と本明細書中で呼ばれるクローンである。ヌクレオチド配列は、太字で示され、下線を付された開始および停止コドンを有するＦｃＲＨ５をコードする（米国公開特許出願番号２００６０２５１６６２（Chang等）参照）。図２８Ａ〜Ｂで示される配列番号６５のコード配列由来のアミノ酸配列（配列番号６６）を示す（米国公開特許出願番号２００６０２５１６６２（Chang等）参照）。ＰＲＯ３１４９９２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６７）を示す。この場合、配列番号６７は、カニクイザルからの「ＤＮＡ６７６９６９」（本明細書中では「ｃｙｎｏＦｃＲＨ５」とも呼ばれる）と本明細書中で呼ばれるクローンである。図３０に示される配列番号６７のコード配列由来のアミノ酸配列（配列番号６８）を示す。

Claims

以下の（ａ）および（ｂ）を含む単離された抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体：
（ａ）（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）を含む軽鎖可変領域：
（ｉ）配列番号２８の配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｉｉ）配列番号２９の配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；
（ｉｉｉ）配列番号３０の配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；
（ｂ）（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）を含む重鎖可変領域：
（ｉ）配列番号３７の配列または配列番号２２のアミノ酸残基２６−３５を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｉｉ）配列番号３８の配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｉｉｉ）配列番号３９の配列を含むＨＶＲ−Ｈ３。
ＨＶＲ−Ｈ１が配列番号２２のアミノ酸残基２６−３５を含む請求項１記載の抗体。
ＨＶＲ−Ｈ１が配列番号３７の配列を含む請求項１記載の抗体。
Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖまたは（Ｆａｂ’）_２断片から選択される請求項１記載の抗体。
ヒト化されている請求項１−４のいずれかに記載の抗体。
キメラ抗体である請求項１記載の抗体。
抗体がフレームワーク配列を含み、前記フレームワーク配列の少なくとも一部がヒト共通フレームワーク配列である請求項１記載の抗体。
ヒトκ亜群１共通フレームワーク配列を含む請求項１記載の抗体。
重鎖ヒト亜群ＩＩＩ共通フレームワーク配列を含む請求項１記載の抗体。
重鎖可変領域が配列番号４２のアミノ酸配列を含む請求項１記載の抗体。
軽鎖可変領域が配列番号３２のアミノ酸配列を含む請求項１記載の抗体。
重鎖可変領域が配列番号４２のアミノ酸配列を含む請求項１１記載の抗体。
Ｆｃ領域に連結される単一Ｆａｂ領域を含む請求項１記載の抗体。
抗体が配列番号４０のアミノ酸配列を含むＣＨ１、および／または配列番号４１のアミノ酸配列を含むＦｃ配列を含む請求項１２記載の抗体。
抗体が配列番号３１のアミノ酸配列を含むＣＬ１配列を含む請求項１４記載の抗体。
（ａ）抗体の重鎖可変ドメインおよび請求項１の抗体の軽鎖可変ドメインを含む抗体を発現する細胞を培養するプロセス；ならびに
（ｂ）前記培養細胞から抗体を単離するプロセス
により製造される、抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体。
１つ以上の遊離システインアミノ酸を含む請求項１記載の抗体。
１つ以上の遊離システインアミノ酸が、０．６〜１．０の範囲のチオ反応性値を有する請求項１７記載の抗体。
１つ以上の遊離システインアミノ酸残基が軽鎖中に位置する請求項１７記載の抗体。
重鎖配列が配列番号６０のアミノ酸配列を含む請求項１７記載の抗体。
軽鎖配列が配列番号５９または６１のアミノ酸配列を含む請求項２０記載の抗体。
重鎖配列が配列番号６２のアミノ酸配列を含む請求項１７記載の抗体。
軽鎖配列が配列番号５９または６１のアミノ酸配列を含む請求項２２記載の抗体。
遊離システインアミノ酸が、カバット番号付け規約による軽鎖の位置２０５、ＥＵ番号付け規約による重鎖の位置１１８および／または４００にある請求項１８記載の抗体。
請求項１記載の抗体と同一のエピトープに結合する単離された抗体。
抗体が一価であり、Ｆｃ領域を含む請求項１記載の抗体。
二重特異性抗体である請求項１記載の抗体。
ＣＤ３に特異的に結合する請求項２７記載の抗体。
請求項１−２８のいずれかに記載の抗体をコードするポリヌクレオチド。
請求項２９記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
請求項３０記載のベクターを含む宿主細胞。
細胞傷害性物質と共有結合される請求項１−２８のいずれかに記載の抗体を含む免疫接合体。
細胞傷害性物質が、毒素、化学療法薬、薬剤部分、抗生物質、放射性同位体および核酸分解酵素から選択される請求項３２記載の免疫接合体。
捕捉標識、検出標識または固体支持体に共有結合される請求項１−２８のいずれかに記載の抗体を含む免疫接合体。
抗体がビオチン捕捉標識に共有結合される請求項３４記載の免疫接合体。
抗体が蛍光染料検出標識に共有結合される請求項３４記載の免疫接合体。
蛍光染料が、フルオレセイン型、ローダミン型、ダンシル、リサミン、シアニン、フィコエリトリン、テキサスレッドおよびその類似体から選択される請求項３６記載の免疫接合体。
抗体が、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１８Ｆ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^６４Ｃｕ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９９Ｔｃ、^１１１Ｉｎ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１３３Ｘｅ、^１７７Ｌｕ、^２１１Ａｔおよび^２１３Ｂｉから選択される放射性核種検出標識に共有結合される請求項３４記載の免疫接合体。
式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）_ｐを有する免疫接合体であって：
（ａ）Ａｂは請求項１記載の抗体であり；
（ｂ）Ｌはリンカーであり；
（ｃ）Ｄは薬剤部分であり；及び
（ｄ）ｐは１から８である、
免疫接合体。
Ｌが、６−マレイミドカプロイル（ＭＣ）、マレイミドプロパノイル（ＭＰ）、バリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ）、アラニン−フェニルアラニン（ａｌａ−ｐｈｅ）、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、４−（２−ピリジルジチオ）酪酸−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）およびＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）から選択される請求項３９記載の免疫接合体。
Ｄが、アウリスタチンまたはドロスタチンであり、Ｄは以下の式Ｄ _ＥまたはＤ _Ｆの薬剤部分である請求項３９記載の免疫接合体：

（式中、Ｒ ^２およびＲ ^６は各々メチルであり、Ｒ ^３およびＲ ^４は各々イソプロピルであり、Ｒ ^７はｓｅｃ−ブチルであり、Ｒ ^８の各存在は独立して−ＣＨ _３、−Ｏ−ＣＨ _３、−ＯＨおよびＨであり、Ｒ ^９はＨであり、Ｒ ^１０はアリールであり、Ｚは−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｒ ^１１はＨ、Ｃ _１ −Ｃ _８アルキルまたは−（ＣＨ _２） _２ −Ｏ−（ＣＨ _２） _２ −Ｏ−（ＣＨ _２） _２ −Ｏ−ＣＨ _３であり、Ｒ ^１８は−Ｃ（Ｒ ^８） _２ −Ｃ（Ｒ ^８） _２ −アリールである。）
ＤがＭＭＡＥおよびＭＭＡＦから選択される請求項３９記載の免疫接合体。
免疫接合体が式Ａｂ−（Ｌ−ＭＭＡＥ） _ｐを有する請求項３９記載の免疫接合体（式中、ｐは２から５である）。
免疫接合体が式Ａｂ−（Ｌ−ＭＭＡＦ） _ｐを有する請求項３９記載の免疫接合体（式中、ｐは２から５である）。
Ｌがｖａｌ−ｃｉｔ、ＭＣ、ＰＡＢおよび／またはＭＣ−ＰＡＢを含む請求項４３記載の免疫接合体。
Ｌがｖａｌ−ｃｉｔ、ＭＣ、ＰＡＢおよび／またはＭＣ−ＰＡＢを含む請求項４４記載の免疫接合体。
Ｄがメイタンシノイドであり、メイタンシノイドがＤＭ１、ＤＭ３およびＤＭ４から選択される請求項３９記載の免疫接合体。
以下の構造式から選択される請求項３９記載の免疫接合体：

（式中、Ｖａｌはバリンであり；Ｃｉｔはシトルリンである。）
請求項１−２８のいずれかに記載の抗体または請求項３９−４８のいずれかに記載の免疫接合体、および製薬上許容可能な担体を含む薬学的組成物。
ＦｃＲＨ５を発現する細胞の増殖の抑制するための医薬剤の調整における請求項１−２８のいずれかに記載の抗体または請求項３９−４８のいずれかに記載の免疫接合体の使用。
抗体が細胞障害性物質に接合している請求項５０記載の使用。
医薬剤がさらに有効量の別の治療薬を含む請求項５０記載の使用。
増殖性障害を治療するための医薬剤の調整における請求項１−２８のいずれかに記載の抗体または請求項３９−４８のいずれかに記載の免疫接合体の使用。
前記増殖性障害が癌である請求項５３記載の使用。
前記癌が、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、攻撃性ＮＨＬ、再発性攻撃性ＮＨＬ、再発性無痛性ＮＨＬ、難治性ＮＨＬ、難治性無痛性ＮＨＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫、白血病、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される請求項５４記載の使用。
抗体が細胞障害性物質に接合している請求項５３記載の使用。
医薬剤がさらに有効量の別の治療薬を含む請求項５３記載の使用。
治療薬が、抗体、化学療法薬、細胞傷害性物質、抗血管新生剤、免疫抑制剤、プロドラッグ、サイトカイン、サイトカインアンタゴニスト、細胞傷害性放射線療法、コルチコステロイド、抗嘔吐薬、癌ワクチン、鎮痛薬または増殖阻害剤からなる群から選択される請求項５７記載の使用。
治療薬が、ベルケード、レブリミド、タモキシフェン、レトロゾール、エキセメスタン、アナストロゾール、イリノテカン、セツキシマブ、フルベストラント、ビノレルビン、エルロチニブ、ベカシズマブ、ビンクリスチン、イマチニブ、ソラフェニブ、ラパチニブまたはトラスツズマブ、シスプラチン、ゲムシタビン、メトトレキセート、ビンブラスチン、カルボプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ボルテゾミブ、レナリドミド、メルファラン、プレドニソン、デキサメタゾンまたはドセタキセルからなる群から選択される請求項５８記載の使用。
ＦｃＲＨ５を含有することが推測される生物学的試料中のＦｃＲＨ５の存在の確定するためのin vitroでの方法であって、前記試料を請求項１−２８のいずれかに記載の抗体にin vitroで曝露すること、ならびに前記抗体と前記試料中のＦｃＲＨ５との結合を確定することを包含し、ここで、前記抗体の前記試料中のＦｃＲＨ５への結合が前記試料中の前記タンパク質の存在を示す方法。
請求項１−２８のいずれかに記載の抗ＦｃＲＨ５抗体（Ａｂ）、およびアウリスタチンまたはマイタンシノイド薬剤部分（Ｄ）を含む抗体−薬剤接合体であって、抗体が１つ以上のシステインアミノ酸を介して、リンカー部分（Ｌ）によりＤに結合され；当該化合物が式Ｉ：
Ａｂ−（Ｌ−Ｄ）_ｐＩ
（式中、ｐは１、２、３または４である）
を有する抗体−薬剤接合体の製造方法であって、
（ａ）抗体の操作されたシステイン基をリンカー試薬と反応させて抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成することと；
（ｂ）Ａｂ−Ｌを活性化薬剤部分Ｄと反応させて、それにより抗体−薬剤接合体が形成されるステップ
を包含するか、あるいは
（ｃ）薬剤部分の求核性基をリンカー試薬と反応させて、薬剤−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成することと；
（ｄ）Ｄ−Ｌを抗体の操作されたシステイン基と反応させて、それにより抗体−薬剤接合体を形成するステップ
を包含する方法。
式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ） _ｐを有する免疫接合体であって、
（ａ）Ａｂは以下を含む単離された抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体である抗体であり：
（ｉ）（ａ）ないし（ｃ）を含む軽鎖可変領域：
（ａ）配列ＫＡＳＱＮＶＧＳＮＶＡ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｂ）配列ＳＡＳＹＲＹＳ（配列番号２９）を含むＨＶＲ−Ｌ２；
（ｃ）配列ＱＱＹＫＴＷＴ（配列番号３０）を含むＨＶＲ−Ｌ３；
（ｉｉ）（ａ）ないし（ｃ）を含む重鎖可変領域：
（ａ）配列ＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮ（配列番号３７）を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列ＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号３８）を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列ＡＲＲＳＩＰＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号３９）を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｂ）ＬはＭＣ−ＶＣ−ＰＡＢであるリンカーであり；
（ｃ）ＤはＭＭＡＥである薬剤部分であり；および
（ｄ）ｐは１から８である
免疫接合体。
式Ａｂ−（Ｌ−Ｄ） _ｐを有する免疫接合体であって、
（ａ）Ａｂは以下を含む単離された抗ＦｃＲＨ５モノクローナル抗体である抗体であり：
（ｉ）（ａ）ないし（ｃ）を含む軽鎖可変領域：
（ａ）配列ＫＡＳＱＮＶＧＳＮＶＡ（配列番号２８）を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｂ）配列ＳＡＳＹＲＹＳ（配列番号２９）を含むＨＶＲ−Ｌ２；
（ｃ）配列ＱＱＹＫＴＷＴ（配列番号３０）を含むＨＶＲ−Ｌ３；
（ｉｉ）（ａ）ないし（ｃ）を含む重鎖可変領域：
（ａ）配列ＧＹＴＦＴＮＹＧＩＮ（配列番号２２のアミノ酸残基２６−３５）を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列ＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号３８）を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列ＡＲＲＳＩＰＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号３９）を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｂ）ＬはＭＣ−ＶＣ−ＰＡＢであるリンカーであり；
（ｃ）ＤはＭＭＡＥである薬剤部分であり；および
（ｄ）ｐは１から８である
免疫接合体。