JP2011525897A - 新しい治療用作用物質 - Google Patents

Abstract

式（I）の化合物又は式（II）の化合物或いは医薬として許容可能なその塩、ここで、R¹〜R⁷及びXは明細書中で定義され、及び治療、特に癌の治療におけるこれらの化合物の使用又はMDM2タンパク質とp53の相互作用の阻害剤としてのこれらの化合物の使用。

Description

新しい治療用作用物質
本発明は、医薬、特別には癌の治療における医薬として特別に有用な、一連のイソインドリン−１−オン誘導体に関する。

低酸素症及びDNA損傷などのストレスの状態においては、p53タンパク質の細胞レベルが増加することが知られている。P53は、細胞周期全体の進行、DNA修復及びプログラムされた細胞死に影響を与える多数の遺伝子の転写を開始することが知られている。したがって、p53は腫瘍抑制遺伝子である。

P53の活性は、その転写自体がp53によって制御されるMDM2タンパク質によって厳重に制御される。P53は、それがMDM2タンパク質のp53トランス活性化ドメインに結合すると不活性化される。いったん不活性化されると、p53の機能は抑制され、そしてp53−MDM2複合体はユビキチン化の標的となる。

正常な細胞においては、活性p53と不活性MDM2−結合p53の間のバランスは、自己制御的なネガティブフィードバックループにおいて維持される。つまり、p53はMDM2の発現を活性化することができ、これが次にp53の抑制に導く。

突然変異によるp53の不活性化は、すべての腫瘍のおよそ半分においてよく見られるということがわかっている。さらに、腫瘍の約７％においては、MDM2の過剰発現は、機能的p53の喪失を引き起こし、それによって悪性転換及び制御されない腫瘍増殖を可能とする。

MDM2−p53複合体のＸ線結晶解析が行われ、p53上のPhe19、Trp23及びLeu26の側鎖がその中に結合するMDM2の表面上の疎水性ポケットを明らかにした。したがって、MDM2−p53結合相互作用の阻害は、MDM2を過剰発現している細胞において正常なp53活性を回復しそれによって抗腫瘍効果を発揮する手段として、癌の治療法を開発する研究者たちにとっての魅力的な標的である。

ペプチド阻害剤、天然産物クロロフュージョン（chlorofusion）、及びＰＣＴ国際出願公開第WO03/051359号に記載されたイミダゾリン類を含む、多くのMDM2−p53相互作用阻害剤が発見されてきた。

本発明は、MDM2−p53相互作用を阻害し、エキサイティングなインビトロ活性を有する、新規な一連の化合物を記載する。

本発明の第一の側面によれば、以下の式I：

により表わされる化合物、又は以下の式II：

により表わされる化合物、或いは医薬として許容可能なその塩が提供され、ここで、式I及びIIの両方において、
Xは、O、N又はSから選ばれ；
R¹は、水素、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル、及び置換又は非置換ヘテロアラルキルから選ばれ；
R²は、水素、置換又は非置換アルケニル又はアルキニル、置換又は非置換分岐鎖ヒドロキシアルキル、置換又は非置換の６個以上の環炭素原子を有するシクロアルキル、置換又は非置換シクロアルケニル、ヒドロキシアルキルアラルキル、ヒドロキシアルキルヘテロアラルキル、及びカルボン酸含有基から選ばれ；
R³は、水素、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル、及び置換又は非置換ヘテロアラルキルから選ばれ；そして、
R⁴−R⁷は、水素、ハロ、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルケニル、置換又は非置換アルキニル、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換ヘテロアラルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、トリフルオロメチル、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボニル、メチルスルホン、トリフルオロメチルスルホン、シアノ及び置換又は非置換スルホンアミドから独立して選ばれる、R⁴、R⁵、R⁶及びR⁷基を表し；
ここで、R²が、置換又は非置換分岐鎖ヒドロキシアルキルである場合、XはO又はSであり；そして
R²が、水素である場合、R⁴−R⁷のうちの少なくとも１つは、水素ではなく、そして、R³はベンズイミダゾール誘導体ではなく、そして、
式IIにおいては、６員環は、０、１又は２個のC=C二重結合を有してよい。

本発明の第２の側面によれば、式I又は式IIにより表わされる化合物、或いは医薬として許容可能なその塩が提供され、ここで、
Xは、O、N又はSから選ばれ；
R¹は、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アラルキル、及び置換ヘテロアラルキルから選ばれ；
R²は、ハロ、アセチル、置換又は非置換の非環式アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシアルキル、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル及び置換又は非置換ヘテロアルキルから選ばれ；
R³は、水素、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、置換又は非置換アリール又はヘテロアリール、及び置換又は非置換アラルキル又はヘテロアルキルから選ばれ；
R⁴−R⁷は、水素、ハロ、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルケニル、置換又は非置換アルキニル、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換ヘテロアラルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、トリフルオロメチル、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボニル、メチルスルホン、トリフルオロメチルスルホン、シアノ及び置換又は非置換スルホンアミドから独立して選ばれる、R⁴、R⁵、R⁶及びR⁷基を表し；
ここで、
R²が直鎖ヒドロキシアルキルである場合、R¹は４−ニトロベンジル又は４−クロロベンジルからは選ばれず；
そして、R²が水素である場合、R⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つは水素ではなく、かつ、R³はベンズイミダゾール誘導体又はベンズイミダゾリン誘導体ではなく；
そして、R³がフェニル基である場合、R¹は４−メトキシベンジル又は４−ヒドロキシベンジル基であることはできず、
そして、式IIにおいては、６員環は、０、１又は２つのC=C二重結合を有してよい。
式IIの化合物においては、６員芳香環は、完全に飽和してよく、又は炭素−炭素二重結合を有してよく、或いはその代わりに、２つの炭素−炭素二重結合を有してよい。これらの変化のすべては本発明の範囲内において個々に想定される。

本発明の第３の側面においては、治療における使用のための第１又は第２の側面で定義された化合物が提供される。さらに、本発明の第４の側面においては、癌の治療における使用のための第１又は第２の側面で定義された化合物が提供される。

本発明の第５の側面においては、第１又は第２の側面で定義された化合物が提供され、ここで、該化合物はMDM2タンパク質とp53との相互作用を阻害する。

本発明の第６の側面においては、癌の治療のための医薬用活性活性を有する活性を有する原料として使用される、第１又は第２の側面で定義された化合物が提供される。

本発明の第７の側面においては、第１又は第２の側面の化合物が薬剤の製造において使用されることができ、そして、第８の側面においては、第１又は第２の側面の化合物が癌の治療のための薬剤の製造において使用されることができる。

さらに、本発明の第９の側面として開示されるのは、本発明の第１又は第２の側面において定義された少なくとも１つの化合物の有効量及び医薬として許容可能な担体を含む医薬組成物である。

本発明の第１０の側面においては、本発明の第１又は第２の側面において定義された少なくとも１つの化合物を含む薬剤を投与するステップを含む、哺乳動物の治療方法が提供される。

本発明の第１１の側面においては、本発明の第１又は第２の側面において定義された少なくとも１つの化合物を含むキット；及び使用のための指示書が提供される。該キットはさらに、本発明の第１又は第２の側面において定義された第二の化合物、或いは本分野において知られた別の癌治療用化合物を含んでよい。

有利には、本発明の化合物はMDM2‐p53複合体の形成の良好な阻害剤であることが示されている。

「ハロ」という用語は、典型的にはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素から選ばれるハロゲン原子を意味するために本明細書において使用される。

「アルキル」という用語は、特別には、低級アルキル基、すなわち１〜８個の炭素原子を有する、環状、（同じ炭素原子における２つの分枝の連結を介して形成される環構造を含む）分岐鎖又は直鎖の炭化水素、例えばプロピルを意味するために本明細書において使用される。環状アルキル又はシクロアルキルは、少なくとも１つの（典型的には６〜１０個の環炭素原子を有する）炭素原子環を有する非芳香族飽和炭化水素であると本明細書中で定義される。

「アルケニル」という用語は、１つ以上の炭素−炭素二重結合を含むアルキル基、例えばブテニル又はシクロペンテニルを意味するために本明細書において使用される。

「アルキニル」という用語は、１つ以上の炭素−炭素三重結合を含むアルキル基、例えばブチニルを意味するために本明細書において使用される。

「アリール」という用語は、少なくとも１つの芳香環を有する炭素環基又は構造を意味するために本明細書において使用される。前記環は、複数の縮合環構造、例えばフェニル、ナフタレン又はアンスラセンの一部であってよい。

「アラルキル」という用語は、本明細書中の以上において定義されたアルキル鎖であって、それに結合したアリール基、本明細書中の以上において定義された例えばベンジル、が存在するものを意味するために本明細書において使用される。

「ヘテロアリール」という用語は、本明細書中の以上において定義されたアリール基であって、その基が例えば、N、O又はSから選ばれる少なくとも１つのヘテロ原子を前記少なくとも１つの芳香環中に含むものを意味するために本明細書において使用される。本発明にしたがって使用されることのできるヘテロアリール基の例は、ピリジン、ピロール、フラン、チオフェン、及びイミダゾールを含むがこれらに限定されない。

「ヘテロアラルキル」という用語は、本明細書中の以上において定義されたアラルキル基であって、その基が例えば、N、O又はSから選ばれる少なくとも１つのヘテロ原子を前記少なくとも１つの芳香環中に含むものを意味するために本明細書において使用される。本発明にしたがって使用されることのできるヘテロアラルキル基の例は、メチルピリジン及びメチルフランを含むがこれらに限定されない。

「置換アルキル」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたアルキル置換基を意味するために本明細書において使用される。

「置換アルケニル」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたアルケニル置換基を意味するために本明細書において使用される。

「置換アルキニル」という用語は、１つ以上の置換基で置換された、本明細書中の以上において定義されたアルキニル置換基を意味するために本明細書中において使用される。

「置換アリール」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたアリール置換基を意味するために本明細書中において使用される。本発明にしたがって使用されることのできる置換アリール基の例は、ハロフェニル、メチルフェニル、ニトロフェニル又はシアノフェニルを含むがこれらに限定されない。

「置換ヘテロアリール」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたヘテロアリール置換基を意味するために本明細書中において使用される。

「置換アラルキル」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたアラルキル置換基を意味するために本明細書中において使用される。、本発明にしたがって使用されうる置換アラルキル基の例は、ハロベンジル、ベンゾニトリル、アセチルベンジル、ベンゾイルベンジル、ニトロベンジル、シアノベンジル、メトキシベンジル、カルボキサミドベンジル、又はメチルベンジルを含むがこれらに限定されない。

「置換ヘテロアラルキル」という用語は、１つ以上の官能基で置換された、本明細書中の以上において定義されたヘテロアラルキル置換基を意味するために本明細書中で使用される。

「アルコキシ」という用語は、上記のいずれかであってよい第二の化学構造に酸素原子によって連結された、本明細書中の以上において定義されたアルキル基を意味するために本明細書中で使用される。該アルキル基の炭素鎖は、１つ以上の官能基で置換されて「置換アルコキシ」を提供することができる。本発明に従って使用されることのできるアルコキシ基の例は、エトキシ、メトキシ及びプロポキシを含むが、これらに限定されない。

「アルキルアミン」という用語は、少なくとも１つのアミン官能基を含む、本明細書中の以上において定義されたアルキル基を意味するために本明細書中で使用される。アルキル基の炭素鎖は、1つ以上の官能基で置換されることができる。アミン官能基は、一級、二級又は三級であることができる。本発明にしたがって使用されることのできるアルキルアミン基の例は、エチルアミン及びジエチルアミンを含むがこれらに限定されない。アミン官能基は、環状又はヘテロ芳香構造または他の官能基の一部、例えばアミドを形成することができる。

本明細書中に示されるとおり、上記の置換のための好適な官能基は、単独又は組み合わせて使用されることのできる以下の：ハロ、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アシル、アセタミド、カルボキシル、シアノ、カルボキサミド（カルバモイル）、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、アミノ、アルコキシ又はシリコリガンドのいずれかを含むが、これらに限定されない。

着目の化合物は、本発明の第一の側面において定義された式I又は式IIを有するものを含み、ここで、R¹は、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換アラルキルから選ばれ；R²は、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシアルキニル、分岐５炭素ヒドロキシアルキル、ヒドロキシシクロアルキル、ヒドロキシシクロアルケニル、ヒドロキシメチルシクロアルキル、ヒドロキシメチルシクロアルキルメチレン、及びヒドロキシアルキルベンジルから選ばれ；そして、R³は、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換アラルキルから選ばれる。

R¹が置換又は非置換アリール及び置換又は非置換アラルキルから選ばれる場合、それは、典型的には置換アラルキル、特別には置換ベンジルである。置換ベンジルは、例えば、ベンゾニトリル、クロロベンジル、ブロモベンジル、ヨードベンジル、メチルベンジル、アセチルベンジル、ベンゾイルベンジル、シアノベンジル、メトキシベンジル、カルボキサミドベンジル、又はニトロベンジルであることができる。典型的には、置換ベンジルは、ニトロベンジルであるが、ベンゾイル、ベンジルカルボキシレート、ベンジルカルボキシレートアルキルエステル、ベンジルスルホキシド又はベンジルスルホンなどのこの官能基の同配体も有利に使用されることができる。ブロモベンジル、ヨードベンジル、アゾベンジル、アミノベンジル又はチオエーテルベンジルなどの他の置換ベンジル基も使用されることができる。

置換ベンジルは、２−位から６−位のいずれかにおいて１つ以上の官能基で置換されることができるが、典型的には、３−、４−又は５−位、典型的には４−位に単一の置換基が存在する。或いは、R¹はプロピル基又は非置換ベンジルであることができる。

R¹が置換又は非置換ヘテロアリールから選ばれる場合、窒素は典型的に環中のヘテロ原子であり、該ヘテロアリールは典型的には非置換ピリジルである。或いは、ヘテロアリールはN-ピリジンオキサイドであることができる。どちらの実施態様においても、窒素原子は２−、３−又は４−位にあることができる。

R¹のさらなる実施態様においては、イソインドリノンのベンジル部分と窒素原子の間にさらなるアルキレン基があってよい。或いは、ベンジルのアルキル炭素原子は、メチル基などのアルキル基でさらに置換されることができる。

典型的には、R²がアルケニル置換基である場合、それは、ヒドロキシブテニル、ヒドロキシシクロヘキセニル、又はヒドロキシシクロペンテニル、もっとも頻繁には４−ヒドロキリブタ−２−エニル、４−ヒドロキシシクロヘキサ−２−エニル、又は４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルから選ばれるであろう。しかしながら、R²がヒドロキシアルキニルである場合、それは典型的には、ヒドロキシブチニル、典型的には４−ヒドロキシブタ−２−イニルである。

R²が分岐５炭素ヒドロキシアルキルである場合、それは典型的には、ヒドロキシ−２，２−ジメチルプロピル又はヒドロキシ−２，２−シクロプロピルプロピルなどの分岐プロピル鎖である。ヒドロキシル基は典型的には３−ヒドロキシ−２，２−ジメチルプロピル又は１−ヒドロキシ−２，２−シクロプロピルプロピル中に見出されるような末端ヒドロキシであるだろう。

R²が、６個以上の環炭素原子を有する置換又は非置換シクロアルキルである実施態様においては、それは典型的には、ヒドロキシシクロオクチル、ヒドロキシメチルシクロヘキシルメチレン、及びヒドロキシシクロヘキシルから選ばれるであろう。典型的には、５−ヒドロキシシクロオクチル、２−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメチレン、４−ヒドロキシシクロヘキシル及び４−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメチレンから選択されるであろう。

他の実施態様においては、R²はヒドロキシアルキルベンジルであることができ、これらの実施態様においては、典型的にはR²が４−ヒドロキシメチルベンジル又は３−ヒドロキシメチルベンジルなどのヒドロキシメチルベンジルである。或いは、R²は、アルキルが本明細書中の上記において与えられたと同じ意味を有する、アルキルアミンなどの直鎖アルコキシ又はアミノ基を含むことができる。典型的なアミンはn−プロピルアミンを含む。

本発明のさらなる実施態様によれば、R²がカルボン酸含有基である場合、それは、サクシニックアシッドメチルシクロプロピルメチル基などのコハク酸含有基であることができる。

本発明のさらなる実施態様によれば、R²は２−ヒドロキシメチルアリル基であることができる。

本発明のさらなる実施態様によれば、R²は水素であることができ、ここで、R⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つは水素でなく、かつR³はベンズイミダゾール誘導体でない。

典型的には、R³は、（何であるかにかかわらず）置換基は２−から６−位のいずれにあることもできるが、一置換されたフェニルから選ばれ、典型的にはハロフェニル、しばしばクロロフェニル又はブロモフェニル、最もしばしば４−クロロフェニルである。

さらなる着目の化合物は、本発明の第２の側面において定義された式I又は式IIのものを含み、ここで、R¹は置換アラルキルであり、R²は非環式ヒドロキシアルキルであり、そしてR³は置換アリールである。これらの実施態様において、R¹は本発明の第１の側面に関して上記した置換基のいずれであってもよいが、典型的にはR¹は置換１−エチルフェニル又は置換ベンジルである。包含されるフェニル基上の２−〜６−位のいずれにおいて置換されることもできる１以上の置換基があってよいが、典型的には、単一の置換基のみが存在し、しばしばハロ基が、典型的には４−位に存在する。該ハロフェニルはしばしばクロロフェニルであり、現在、典型的にはR¹が置換１−エチルフェニルである場合、R¹は１−（４−クロロフェニル）−エチルである。この置換１−エチルフェニル置換基のR-又はS-エナンチオマーのいずれも使用されることができるが、S-エナンチオマーが典型的である。

R¹が置換ベンジルである場合、それは典型的にはニトロベンジルであり、より典型的には４−ニトロベンジル、４−シアノベンジル、４−クロロベンジル、４−ブロモベンジル、又は４−ヨードベンジルである。もっとも典型的にはR¹は４−ニトロベンジルである。

R²が非環式ヒロドキシアルキルである場合、典型的には該アルキルはｎ−アルキル鎖である。典型的には、その鎖長は、２〜６炭素、典型的には４炭素である。もっとも典型的な非環式ヒドロキシアルキルは、４−ヒドロキシ−ｎ−ブチル又はヒドロキシプロピルである。

本発明の第１の側面では、R³は、単置換フェニルから選ばれ、（何であるかにかかわらず）典型的にはハロフェニル、しばしばクロロフェニル又はブロモフェニル、置換基は２−〜６−位のいずれにあることもできるが、最もしばしば４−クロロフェニルである。

本発明の第１及び第２の側面の化合物の典型的な実施態様においては、R⁴、R⁵、R⁶及びR⁷はそれぞれ水素であり、Xは独立してOである。しかしながら、いくつかの化合物においては、R⁴〜R⁷のうちの１以上はHであり、残りのR基のうちの２つが５−〜７−員環構造を形成するように連結されている。該環構造は典型的には飽和しており、そしてN、O又はSから選ばれるヘテロ原子を少なくとも１つ含んでよい。或いは、R⁴〜R⁷は、それぞれ独立してメチル、ｔ−ブチル、塩素、臭素、及びフッ素から選ばれることができる。本発明のいくつかの側面においては、R⁴〜R⁷の１つ（又はそれを超えるもの）が独立して塩素であることができるか、又はR⁴〜R⁷のうちの１つが塩素であって他がフッ素であることができる。

式I又はIIの化合物について本明細書中で言及される場合、そのような言及は関連するそれらの医薬として許容可能な塩及び他の医薬として許容可能な生物学的前駆体(例えば、プロドラッグ、化学的に保護された又は溶媒和された形態)についても拡張されるものと解釈されるべきであると理解されるであろう。

塩
「塩」という用語は、本明細書中において、化合物の荷電形態と逆荷電したイオンとの組み合わせであって中性の生成物を生成するものを意味する。医薬として許容可能な塩の例は、Berge et al., 1977, “Pharmaceutically Acceptable Salts.” J. Pharm.ScL. Vol. 66, pp.1-19中で検討されている。

特記されない限り、特定の化合物についての言及はその塩の形態も含む。

例えば、化合物が陰イオン性、又は陰イオン性であることのできる官能基（例えば、−COOHは−COO⁻であることができる）の場合、塩は好適な陽イオンとともに形成されることができる。好適な無機陽イオンの例は、Na^＋及びK^＋などのアルカリ金属イオン、Ca²⁺及びMg^2＋などのアルカリ土類金属イオン、及びAl³⁺などの他の陽イオンを含むがこれらに限定されない。好適な有機陽イオンは、アンモニウムイオン（すなわち、NH₄ ⁺）及び置換アンモニウムイオン（例えば、NH₃R⁺、NH₂R₂ ⁺、NHR₃ ⁺、NR₄ ⁺）を含むがこれらに限定されない。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンは、以下の：エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン及びトロメタミン、並びにリジン及びアルギニンなどのアミノ酸に由来する。一般的な４級アンモニウムイオンの例は、N(CH₃)₄ ⁺である。

化合物が陽イオン性であるか、又は（−NH₂が−NH₃ ^＋であることができるなどの）陽イオン性であることのできる官能基を有する場合、好適な陰イオンとともに塩が形成されることができる。好適な無機陰イオンの例は、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、及び亜リン酸に由来するものを含むが、これらに限定されない。

好適な有機陰イオンの例は、以下の有機酸：２−アセトキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルセプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレン酸、カルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、及び吉草酸を含むが、これらに限定されない。好適なポリマー有機陰イオンの例は、以下のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースに由来するものを含むが、これらに限定されない。

プロドラッグ
「プロドラッグ」という用語は、本明細書中において、哺乳動物の治療処置の過程での投与後、特に静脈内投与後に上記活性化合物に変換するように、インビボで生物分解されるか又は修飾される、薬理学的に活性な化合物の修飾形態又は誘導体を意味するために使用される。典型的には、プロドラッグは不活性又は活性化合物よりも活性が低いが、有利な取り扱い、投与又は代謝上の性質を有することができる。かかるプロドラッグは、製剤の問題を解消することを助ける水性媒体への溶解性が亢進されるという理由で、そしていくつかの場合には活性剤の放出を比較的遅くするか又は制御するために、一般的に選ばれる。

特記されない限り、特別な化合物への言及はそのプロドラッグも含む。

例えば、いくつかのプロドラッグは活性化合物のエステルである（例えば、生理学的に許容可能で代謝不安定なエステル）。代謝の間、エステル基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ）は切断されて活性薬物を得る。かかるエステルはエステル化、例えば親化合物のいずれかのカルボン酸基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）のエステル化することと、適宜、親化合物中に存在するいずれかの他の反応性基を先に保護し、必要に応じてその後に脱保護することによって形成されることができる。

また、いくつかのプロドラッグは酵素的に活性化されて活性化合物を得るか、又は（例えば、ADEPT、GDEPT、LIDEPTにおけるように）さらなる化学反応により活性化合物を生じる化合物を得る。例えば、プロドラッグは糖誘導体又は他のグリコシドコンジュゲートであることができ、或いは、アミノ酸エステル誘導体であることができる。

溶媒和物
「溶媒和物」という用語は、本明細書において、（例えば、活性化合物又は活性化合物の塩などの）溶質と溶媒の複合体を意味するために使用される。溶媒が水である場合、溶媒和物は、例えば、一水和物、二水和物、三水和物などの水和物と便宜的に称されることができる。

特記されない限り、特別な化合物への言及はその溶媒和物形態も含む。

化学的に保護された形態
「化学的に保護された形態」という用語は、本明細書において、（例えば、pH、温度、放射線、溶媒などの）特定の条件下での望ましくない化学反応から１つ以上の反応性官能基が保護されている化合物を意味するために使用される。実際には、周知の化学的方法が採用されて、官能基を可逆的に非反応性とし、そうでなければこれは特定の条件下では反応性となる。化学的に保護された形態においては、１つ以上の反応性官能基が（マスクされた又はマスキング基、或いはブロックされた又はブロック基としても知られている）保護された又は保護基の形態にある。反応性官能基を保護することによって、保護された基に影響を及ぼすことなく、他の保護されない反応性官能基を含む反応が実施されることができ；保護基は、通常は次のステップにおいて分子の残りの部分に実質的に影響を及ぼすことなく除去されることができる。

特記されない限り、特別な化合物への言及はその化学的に保護された形態も含む。

かかる広く多様な「保護」、「ブロッキング」又は「マスキング」法が使用され、有機合成において周知である。例えば、特定の条件下でそのどちらもが反応性である2つの等価でない反応性官能基を有する化合物は、特定の条件下で官能基のうちの一つを「保護された」ものとして非反応性とし；そうして保護されて該化合物は、効果的にただ一つの反応性官能基を有する反応物として使用されることができる。（他の官能基を含む）所望の反応が完結した後、保護された基が「脱保護」されてその本来の官能性に復帰することができる。

たとえば、ヒドロキシ基は、エーテル（−OR）又はエステル（−OC(=O)R）；たとえば、ｔ−ブチルエーテル；ベンジル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）又はトリチル（トリフェニルメチル）エーテル；トリメチルシリル又はｔ−ブチルジメチルシリルエーテル；或いはアセチルエステル（−OC(=O)CH₃、−OAc）として保護されることができる。

上記のすべての妥当かつ適合する実施態様の組み合わせが明確に本明細書中に記載されることは理解されるべきである。これらの各組み合わせは、個々の組み合わせが特別にそして個別に記載されたと同程度に本明細書中に開示される。言及されたいかなる化合物も、シス−及びトランス−形態、E-及びZ-形態；c-、t-及びr-形態；エンド−及びエキソ−形態；R-、S−及びメソ−形態；D−及びL−形態；ｄ−及びｌ−形態；（＋）及び（−）形態；ケト−、エノール−及びエノレート形態；syn-及びanti-形態；シンクリナル−及びアンチクリナル−形態；α−及びβ−形態；アキシアル−及びエクアトリアル−形態；ボート−、チェアー−、ツイスト−、エンベロープ−、及びハーフチェアー−形態；並びにそれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない、１以上の特別な幾何学的、光学的、エナンチオマーとしての、ジアステレオマーとしての、エピマーとしての、アトロピックな、立体異性体としての、互変異性体としての、立体配座的、又はアノマーとしての形態において存在することができ、これらは以下において、総称して「異性体」（又は「異性形態」）と呼ばれ、かかるすべての形態、それらの混合物、そしてそれらの調製、及び使用は本発明の範囲内にある。

しかしながら、立体化学を考慮することは重要である可能性が高く、そして異なるエナンチオマー又はジアステレオマーが著しく異なる阻害活性を有するようなかなりの選択性がありうることは留意すべきである。

現在、本発明を実施するにおいて特別に着目すべき又は典型的に使用されるイソインドリン−１−オンの例は、以下のものを含む。

本発明を実施するにおいて特別に有用なイソインドリン−１−オンの例であって、特別に強力な活性を有するのは以下のものを含む。

本発明の実施における使用のためのイソインドリン−１−オンのさらに典型的な例であって、特別に強力な活性を有することが発見されたのは以下のものを含む。

上記の表５中の化合物のうち、R²が水素であって、R⁴〜R⁷のすべてがHであるものは、本発明の化合物の調製における中間体化合物として使用される。

MDM2タンパク質上のp53結合ポケットの研究は、合成された分子の性質を導いた。したがって、本発明は、イソインドリノン足場に基づくMDM2-p53相互作用の小分子阻害剤を提供する。インビトロのMDM2-p53結合アッセイを用いた予備的スクリーニング試験は、特別に有用なイソインドリン−１−オン化合物（表２〜４）を、１００〜１０００nMのIC₅₀を有するMDM2-p53相互作用の阻害剤として同定した（IC₅₀は、測定された比活性度の５０％の阻害、この場合、MDM2-p53相互作用の阻害、に必要な特別な化合物の濃度である）。イソインドリン−１−オン類は、MDM2-p53相互作用の阻害において活性を有することが発見された。

疑念を避けるためのELISAアッセイを用いて測定された本発明の化合物の阻害効率が以下に記載される。

本明細書において「癌」又は「腫瘍」呼ばれるものは、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃腸癌、胃癌、大腸癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、甲状腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、前立腺癌、精巣癌、肝臓癌、腎臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、膵臓癌、脳腫瘍、神経膠腫、肉腫、骨肉腫、骨癌、皮膚癌、扁平上皮癌、カポシ肉腫、メラノーマ、悪性メラノーマ、リンパ腫、又は白血病を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物は、MDM2とp53の相互作用を阻害することが示された。かかる阻害は細胞停止とアポトーシスに導く。

したがって、本発明の化合物は、広範囲の選択された癌腫瘍の治療のために特別に興味深いものであり、本発明はさらに、癌に罹った患者の治療のための方法を提供する。したがって、治療的に有効な非毒性量の、本発明の第１及び第２の側面の化合物は、好適に経口で、（皮下、筋肉内、及び静脈内又は局所的を含む）非経口で投与されることができる。投与は一般に、間隔をおいて繰り返し、例えば、一日一回又は数回実施されるであろう。

哺乳動物を治療するための抗腫瘍剤として有効であるために必要とされる化合物の量は、もちろん多様であり、究極的には特別なケースのそれぞれにおいて哺乳動物を治療する医療従事者又は獣医の判断による。かかる従事者によって考慮されるべき因子は、投与経路及び医薬製剤；哺乳動物の体重、表面積、年齢及び一般的状態；並びに投与される化合物の化学的形態を含む。しかしながら、好適な有効抗腫瘍用量は、約１．０〜約７５mg/kg体重、典型的には約５〜４０mg/kg体重であり、最も好適な用量は例えば、１０〜３０mg/kg体重の範囲内にあることができる。例えば毎日の治療においては、総日用量は、単回用量、１日あたり２〜６回などの複数回用量として、又は任意の選択された持続時間のための静脈内輸注によって与えられることができる。例えば、７５kgの哺乳動物の場合、用量範囲は１日あたり約７５〜５００mgであることができ、そして典型的な用量は、一般的に１日あたり約１００mgであるだろう。別個の複数回用量が示された場合、典型的には治療は、錠剤、カプセル、（シロップなどの）液剤又は注射の形態で１日４回与えられる処方箋の化合物の５０mgであるだろう。

投薬は、脊索動物、脊椎動物、哺乳動物、胎盤哺乳動物、有袋動物、（カモノハシなどの）単孔類、げっ歯動物、（マウスなどの）ネズミ科の動物、（ウサギなどの）ウサギ目の動物、鳥類、イヌ科の動物、ネコ科の動物、ウマ科の動物、ブタ、（ヒツジなどの）ヒツジ、ウシ、霊長類、（サル又は類人猿などの）類人猿、（マーモセット、ヒヒなどの）サル、（ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザルなどの）類人猿又はヒトであることのできる対象又は患者に依存するであろう。さらに、対象／患者は例えば胎児などのその発達の形態のいずれであることもできる。典型的には、対象はヒトである。

本発明の第１又は第２の側面の化合物が化学原料として単独で投与されることが可能である一方、化合物を医薬組成物中で提示することが好ましい。したがって、本発明は、活性治療成分を形成する、本明細書の上記において定義された化合物の有効量を含む医薬組成物も提供する。かかる医療用途のための医薬組成物は、任意の便利なやり方での投与のために薬剤学の分野における周知の任意の方法にしたがって製剤化されるであろう。化合物は通常、適合性のある医薬として許容可能な付加剤、担体、希釈剤又は賦形剤を提供する少なくとも１つの他の成分と混合され、単位剤形中で提示されることができる。

担体は、製剤の他の成分と適合性であって受容者自身に有害でないという意味において医薬として許容可能でなければならない。

可能な製剤は、経口、直腸、局所及び（皮下、筋肉内及び静脈内を含む）非経口投与又は肺若しくは鼻腔などの他の吸収部位への投与に好適なものを含む。

かかる医薬組成物の製造におけるすべての製剤方法は、一般に本発明の第１〜第３の側面において定義された化合物を１以上の付属成分を構成する担体と会合させるステップを含む。通常、製剤は、化合物を液体担体又は細分化された固体担体又はその両方と均一かつ密接に会合させ、そして必要に応じて生成物を所望の製剤に形作ることによって調製される。

経口投与に好適な本発明の製剤は、それぞれが所定量の化合物を含む、カプセル、カシェー、錠剤又はロゼンジなどの個別の単位として；散剤又は顆粒剤として；或いはシロップ、エリキシル、エマルジョン又はドラフトなどの水性の液体又は非水性の液体中の懸濁剤として提示されることができる。化合物は、ボーラス、舐剤、又はペーストとしても提示されることもできる。

錠剤は、場合により１以上の付属成分とともに圧縮又はモールディングによって作製されることができる。圧縮された錠剤は、好適な機械中で圧縮されることによって調製されることができ、散剤又は顆粒剤などの自由流動形態にある化合物は場合により結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤又は分散剤と混合される。成形錠剤は、好適な機械中で粉末化された化合物と任意の好適な担体との混合物を成形することによって作製される。

シロップは、化合物を、ショ糖などの糖の濃縮された水性溶液に添加し、それに任意の所望の付属成分を加えることによって作製されることができる。かかる付属成分は、風味剤、糖の結晶化を抑制するための１以上の剤、或いは任意の他の成分の溶解性を増加させるための、例えばグリセロール又はソルビトールである多価アルコールなどの１以上の剤を含むことができる。

直腸投与のための製剤は、ココアバターなどの担体と一緒に座剤として提示されることができる。

非経口投与のために好適な製剤は、本発明の第１又は第２の側面の化合物の滅菌された水性調製物を便利に含み、これは、典型的には受容者の血液と等張である。

上記の成分に加えて、軟膏、クリームなどの本発明の製剤は、希釈剤、緩衝剤、風味剤、結合剤、表面活性剤、増粘剤、潤滑剤及び／又は（抗酸化剤を含む）保存剤或いは他の医薬として不活性な賦形剤などの１以上の付属成分を含むことができる。

本発明の化合物は、リポソーム製剤中での投与のために作製されることもでき、これは本分野で周知の方法によって調製されることができる。

化合物がキットの一部として提供される場合、典型的には、キットが本発明の第１又は第２の側面において定義された化合物又は（典型的には、好適な容器中及び／又は好適な包装とともに提供される）本明細書中に記載された化合物を含む組成物；及び（活性化合物又は組成物の投与の仕方についての書面の指示書などの）使用のための指示書を含む。指示は、活性成分がそのための好適な治療である適応症のリストも含むことができる。

本発明のイソインドリジン化合物は、単独で又は併用療法として投与されることができる。例えば、本明細書中に記載の化合物は、お互いに又は細胞毒性剤又は抗がん剤などの他の剤とともに組み合わせて使用されることもできる。治療及び療法の例は、薬物、（免疫療法における）抗体、（光力学治療，GDEPT，ADEPTなどにおける）プロドラッグなどを含む活性剤の投与である）化学療法；手術；放射線療法；光力学治療；遺伝子治療；及び食事制限などを含むが、これらに限定されない。特別な組み合わせは、その一般的知識及び熟練した従事者に知られた投薬レジメンを用いて投与量を選択する医師の判断に従うであろう。

分析技術
ELISAアッセイ
ビオチンで標識されたIP3p53由来ペプチド（MPRFMDYWEGLN）を固定化するためにストレプトアビジンでコートした９６ウエルプレートを使用する。該ペプチドは、MDM2へのp53結合部位（QETFSDLWKLLP）に由来するペプチドアナログである。IP3は天然ペプチドよりもMDM2への親和性が高く、そしてMDM2とp53の間の結合のアンタゴニストを同定するために他で使用されてきた（Stoll et al, 2001）。インビトロでの翻訳によって生成されたMDM2のアリコートは、IP3でコーティングした９６ウエルプレート中に移す前に被検化合物及び対照とともに室温で（すなわち、２０〜２５℃）２０分プレインキュベートする。４℃での９０分間のさらなるインキュベーションに続いて、未結合のMDM2を除去するためにプレートを洗浄し、そして一次モノクローナル抗体（MDM2Ab-1、クローンIF2、Oncogene ResearchProducts）及びHRP‐結合二次抗体（抗マウスヤギ抗体、DakoPO447）を用いて残った結合MDM2を検出する。HRP（ホースラディッシュペルオキシダーゼ）は、標準試薬（Amersham Pharmacia （商標）RPN2106）及び自動注入９６ウエルプレートイルミノメーター（EG & G Berthold Microplate LB96V）を用いてケミルミネッセンス反応によって測定する。

妥当性確認のために及び次に陽性対照として、IP3及びAPペプチドを、その時に最も高い程度のアンタゴニスト活性を示すイソインドリジン−１−オンのリード化合物とともに使用する。現在、３−（４−クロロ−フェニル）−３−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ−ベンジルオキシ）−２−プロピル−２，３−ジヒドロ−イソインドリン−１−オン（NU8231）が標準的な「リード化合物」陽性対照として含まれる。APはp53-MDM2相互作用を高力価（IC50＝5.0nM）で阻害し、無傷の腫瘍細胞株中でp53及び下流のアポトーシス経路を刺激することが報告された、オクトマー合成ペプチドである（Chene et al 2000）。APペプチドは、細胞のない結合アッセイにおけるイソインドリノンの生物学的評価のための陽性対照として含まれる。

すべての化合物をDMSOに溶解し、固定化された最終濃度の５％DMSOの存在下で様々な濃度において試験される。複合体形成の阻害パーセントは、DMSOのみの対照に対して表わされ、MDM2-p53複合体形成の５０％阻害に必要な濃度として定義されるIC₅₀は補間法によって決定される。

ELISAアッセイは、ｎ＝３の独立したIC₅₀測定について、平均値の１０~１５％の標準誤差を示した。したがって、個々の化合物についてのIC₅₀測定における変動は、これまで評価された化合物についての値の範囲よりもかなり低かった（２６．７＞５００μM）。

ウエスタンブロット法
骨肉腫細胞株SJSA-1を、５％のCO₂濃度の３７℃の加湿インキュベーター（Sanyo、MCO20 AIC）中で４８時間、１０％ウシ胎仔血清（FBS、Gibco）、1%(v/v)HEPES（Gibco）、１％（v/v）ピルビン酸ナトリウム（Gibco）及び１．２５ｇ／５００ｍｌグルコース（Sigma）を補充した３mLのPRMI1640培地（Sigma）中、２．５×１０^５細胞の密度で５５ｍの皿に播いた。

皿を、１％のDMSOと一緒に最終濃度５、１０及び２０μM（１％DMSOにて）の３−（４−クロロ−フェニル）−３−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ−ベンジルオキシ）−２−プロピル−２，３−ジヒドロ−イソインドリン−１−オン（NU8231）、及び未処理対照サンプルで６時間処理した。そして、培地を吸引し、皿を３mLの冷PBSで洗浄した。そして、細胞を４０μLのドデシル硫酸ナトリウム（SDS、Sigma）溶解バッファー中で溶解し、２０ミクロンで５秒間、3回超音波処理する前に１００℃で１０分間沸騰させた。

その後、各サンプルについてのタンパク質濃度をBCAタンパクアッセイキット（Pierce）を用いて測定し、そして、β‐メルカプトエタノール（Sigma）及び０．５％ブロモフェノールブルー（Sigma）からなる１：１のローディングバッファーを４０μｇのタンパク質に加え、そして最終体積３０μLとし、１００℃で５分間沸騰させた。

そして、サンプルをあらかじめ染色されたマーカータンパク(SeeBlue、Invitrogen)とともにあらかじめ成型された４〜２０％グラジエントポリアクリルアミドトリス−グリシンゲル（１５ウエル、１．５ｍｍ厚さ、Invitrogen Life Technologies）に負荷した。ゲルをNovexXCell（Invitrogen）中、１８０Vで処理し、そしてHigh Bond Cメンブレン（Amersham Life Scinece）上に３０Vで一夜ブロッティングした。

そして、５％の無脂肪乳を含むTBS-Tween（TBST-M）中、室温で1時間ブロッキングし、次にMDM2（MDM2-Ab1、1:500、Oncogene）、p53（p53-D7 1:1000 Novacastra）、p21（p21 Ab1, 1:100,Oncogene）、及びアクチン（Actin AC40、 1:1000、Sigma）に対する１次抗体とともにPBST-M中で１時間インキュベーションした。

そして、メンブレンをTBST中で３回洗浄し（１回の洗浄あたり１５分）、その後、抗マウス又はウサギホースラディッシュペルオキシダーゼ（HRP）二次抗体（Dako、 1:1000）とともにPBST-M中でさらに１時間インキュベーションし、次に、TBSTで６回洗浄することからなる最終洗浄を１回５分間で行った。エンハンストケミルミネッセンス（ECL、 Amersham）検出試薬を青色光感受性Ｘ線フィルム（Fuji Photo Film Co Ltd）に露出したメンブレン上に加え、自動Ｘ線フィルムプロセッサー（Mediphot 937）中で現像した。

結果
本発明は、添付の図面を参照することによって例示のみによってここに記載される。

図１は、NU8293、 NU8295、NU8296及びNU8297のSJSA-1細胞株中での効果を示すウエスタンブロットアッセイである。 図２は、SJSA-1細胞株におけるNutlin-3の効果と比較したNU8352、NU8353及びNU8354の効果を示すウエスタンブロットアッセイである。 図３は、ルシフェラーゼに基づくレポーター遺伝子アッセイにより測定した、NU8293、NU8296及びNU8297イソインドリノンのp53-依存性転写活性に対する効果を示すグラフである。 図４は、NU8296及びNutlin-3（及び本発明の一部ではないNU8291）の、SJSA-1細胞株におけるPARPとカスパーゼ３の切断に対する用量応答効果を示すウエスタンブロットである。 図５は、HCT116細胞株のp53野生型及びp53除去型における、Niutlin-3の増殖阻害効果を５０％増殖阻害濃j℃で示すグラフである。 図６は、HCT116細胞株のp53野生型及びp53突然変異型における増殖阻害剤としてのNU8354の効果を５０％増殖阻害濃度で示すグラフである。 図７は、SJSA-1細胞株におけるNU8354によるカスパーゼ3及び７酵素活性の誘導を示すグラフである。 図８は、SJSA-1細胞株におけるNutlin-3及びNU8354の露出に対する増殖阻害用量応答を示すグラフである。 図９は、LS細胞株におけるNutlin-3及びNU8354の露出に対する増殖阻害用量応答を示すグラフである。 図１０は、JAR細胞株におけるNutlin-3及びNU8354の薬物露出に対する増殖阻害用量応答を示すグラフである。 図１１は、定組成モードの溶出液としての４０％EtOH、ペンタンを伴う、Chiracel ADカラム（４．６ｍｍ×２５ｃｍ）上のNU8354の分析クロマトグラムである。 図１２は、ウエスタンブロッティングにより、SJSA-1細胞における、Nutlin-3、NU8354並びにエナンチオマーであるNU8354A及びNU8354Bの細胞活性を示す。

NU8296は、イソインドリン−１シリーズにおけるさらなる化合物、３−（４−クロロフェニル）−３−（（１S，３R）−３−ヒドロキシシクロペンチルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オンにあたり、その構造を以下に示す。

Nutlin-3は、以下にその構造を示す、（±）−４−［４，５−ビス−（４−クロロフェニル）−２−（２−イソプロポキシ−４−メトキシフェニル）−４，５−ジヒドロイミダゾール−１−カルボニル］−ピペラジン−２−オンの商標名である。Nutlin-3は、４５±４nMのIC₅₀を有することが発見され、そして本発明の化合物と既知のMDM2-p53相互作用阻害剤との効力の比較を提供するために試験に含まれる。

図１は、１〜２０μMの濃度範囲のNU8293、NU8295及びNU8291によるMDM2増幅SJSA-1細胞の処理による、p53、p21及びMDM2タンパク質レベルの増加の誘導を示す。これは、これらの細胞におけるMDM2による負の調節による、MDM2-p53結合阻害及びp53活性の放出と一致し、MDM2及びp21タンパク質の発現増加及び蓄積を引き起こす。NU8297はこの実験において活性の証拠は何も示さなかった。

図２は、陽性対照であるNutlin-3と比較したときに、NU8354処理がMDM2、p53及びp21の強力な誘導を引き起こしたことを示し；これは、例えば、１０μMの濃度における効果の比較から明らかである。これらの結果は、MDM2阻害によるその放出に起因するp53の転写活性化と一致する。

図３は、ルシフェラーゼに基づくp53依存性のレポーター遺伝子アッセイによって測定した、NU8293、NU8296及びNU8297によるp53依存性転写活性の活性化の例を示す。これは、無傷の細胞におけるMDM2-p53結合の阻害による活性p53の放出と一致して、このシリーズの化合物が特異的にp53依存性の転写活性を誘導することのさらなる証拠を提供する。活性化の時間経過は、nutlin-3で見られたものに類似し、必要とされる濃度範囲は同程度である。

図４は、nutlin-3に比較した、NU8296による処理の４８時間後に検出されたSJSA-1細胞におけるPARPとカスパーゼ−３の切断の用量依存性を示す。PARPとカスパーゼ−３の切断のレベルは、同じ用量範囲のnutlin-3において観察されたものと同程度であった。

図５及び６は、Nutlin-3と同様に、NU8534がp53野生型 HCT116細胞において増殖阻害性であることを示す。これらの効果は、p53の転写活性化及び続くp21^WAF1サイクリン依存性キナーゼ阻害剤の誘導、したがって増殖停止と一致する。さらに、NU8354はNutlin-3と同様に、p53野生型HCT116細胞株においてp53-/-HCT116細胞よりも大きな増殖阻害を示す。これらの効果は、圧倒的にp53依存性の増殖阻害活性のメカニズムを実証する。さらに、NU8354は、MDM2増幅及びp53野生型細胞株において最も大きな増殖阻害活性を示す。

図７は、NU8354が、２４及び４８時間のSJSA細胞における露出によってカスパーゼ３及び７酵素活性を誘導することを示し；これは、アポトーシスの誘導を示すものであり、PARPとカスパーゼ−３の切断のウエスタンブロットによる証拠と一致する。

図８〜１０は、MDM2増幅細胞株のパネルに対する、５〜２０μM濃度範囲のNU8354による増殖阻害を示し、これは、一般的にMDM2について増幅されていない細胞株よりもより感受性であることが見出される。

図１１は、定組成モードの溶出液としての４０％EtOH、ペンタンを伴う、Chiracel ADカラム（４．６ｍｍ×２５ｃｍ）上のNU8354の分析クロマトグラムである。（＋）−エナンチオマーNU8354Aは、９．８分の保持時間を有するが、（−）−エンチオマーNU8354Bは１２．４分で溶出する。エナンチオマーの絶対配置は決定されていない。

図１２は、ウエスタンブロッティングによる、SJSA-1細胞中でのNutlin-3、NU8354並びにエナンチオマーNU8354A及びNU8354Bの細胞活性を示す。Nutlin-3は、１〜２０μMでMDM2、p53、及びp21レベルの強力な用量依存性の増加を示す。類似するがより弱い効果がNU8354について観察され、１０μMで最大効果が観察される。NU8354Aの活性は、２０μMの用量でNutlinよりもわずかに弱く、より低い用量では顕著に弱い。NU8354Bエンチオマーは、２０μM用量でp21及びMDM2の弱い誘導を伴うわずかな細胞活性を示す。これらの結果は、NU8354がラセミ体の生理活性の大半を与えるエナンチオマーであることとインビトロのELISAアッセイにおいて観察されたIC₅₀と一致する。

要約すると、NU8354は、提案された作用メカニズムであるMDM2-p53結合の破壊と一致する様々な細胞効果を示す。陽性対照Nutlin-3との比較においては、p53活性化、増殖阻害及びアポトーシスに関して、p53及びMDM2の状態が異なる細胞株のパネルにわたって類似している。

合成データ
本発明は、ここに実施例のみによってさらに記載されるであろう。以下の実施例及び様々な着目の化合物の合成経路の段階の記載は、本発明をさらに説明する役割を果たす。

３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−プロピル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン

THF（２５mL）を２−（４−フルオロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（５ｇ、２０．４ミリモル）に加え、続いて、塩化チオニル（２．９７mL、４０．９ミリモル）及び触媒量のDMF（３滴）を加えた。系を窒素下、室温で４時間攪拌した。溶媒を除去すると、３−クロロ−３−（４−フルオロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オンを無色の油として得た（５．３５ｇ、２０．４ミリモル、１００％）。

蒸留THF（２５mL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（５．３５ｇ、２０．４ミリモル）に加え、続いてｎ−プロピルアミン（１．８５mL、２２．５ミリモル）、トリエチルアミン（２．８５mL、２６．５ミリモル）を加えると、クリーミーな白色／黄色の沈殿が生成した。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（３０mL）中に溶解し、水（３×２０mL）、塩水（１０mL）で洗浄し、脱水し（MgSO₄）、そして蒸発させた。再結晶化（酢酸エチル）すると、白色固体として標題の化合物を得た（４．３５ｇ、１５．２ミリモル、７５％）。

３−（４−フルオロフェニル）−３−（３−ヒドロキシシクロペンチルオキシ）−２−プロピル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン

蒸留THF（２０mL）を３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−プロピル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（２００ｍｇ、０．７ミリモル）に加え、続いて塩化チオニル（０．０６ｍL、０．８４ミリモル）及び触媒量のDMF（３滴）を加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、そしてTLCでモニターした。真空下で溶媒を除去すると、３−クロロ−３−（４−フルオロフェニル）−２−プロピル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オンを無色の油として得て（２１２ｍｇ、０．６９ミリモル、１００％）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。

蒸留THFを３−クロロ−３−（４−フルオロフェニル）−２−プロピル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（２１２ｍｇ、０．６９ミリモル）に加え、続いて、１，３−シクロペンタンジオール（０．６５ｍL、６．９ミリモル）を加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、ＴＬＣでモニターした。完結後、溶媒を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解し、水（３×２０ｍＬ）、塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、脱水した（MgSO₄）。溶媒を除去すると、粗生成物が得られた。HPLC（H₂O:MeOH、２７０nm）により、NU8279を透明なガラス物質として得た（１２６ｍｇ、０．３４ミリモル、４９％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン

THF（２５ｍL）を２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（１ｇ、３．８ミリモル）に加え、続いて塩化チオニル（０．５５ｍL、７．６ミリモル）及び触媒量のDMF（３滴）を加えた。系を窒素下、室温で４時間攪拌し、そしてTLCでモニターした。溶媒を除去すると、３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オンを無色の油として得た（１．０６ｇ、３．８ミリモル、１００％）。

蒸留THF（２５ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（３．２ｇ、１１．５ミリモル）、４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（２．３ｇ、１２．６ミリモル）、及びトリエチルアミン（４．８ｍL、３４．５ミリモル）に加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、TLCでモニターした。完結後、溶媒を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル（３０ｍL）に溶解し、水（３×２０ｍL）、塩水（１０ｍL）で洗浄し、脱水した（MgSO₄）。溶媒を真空下で除去した。再結晶により（酢酸エチル）、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オンが薄黄色の固体として得られた（２．９５ｇ、７．４７ミリモル、６５％）。

３−（４−クロロフェニル）−２−［１−（４−クロロフェニル）−エチル］−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン

無水THF（２０ｍL）中の２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（５ｇ、１９．２ミリモル、１当量）に窒素雰囲気下で塩化チオニル（３．０ｍL、３８．３ミリモル、２当量）及び３滴の無水DHFを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水THF（２０ｍL）に溶解し、（S）−４−クロロ−α−メチルベンジルアミン（２．４３ｇ、１５．６ミリモル、１．１当量）及びDIPEA（３．４９ｍL、２１．１ミリモル、１．１当量）を窒素雰囲気中で加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（１００ｍL）に溶解し、ろ過し、そしてろ液を水（３×５０ｍL）及び塩水（１×５０ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮して固体を得て、これを再結晶させて（EtOAc／ペトロール）、白色の結晶粉末とした（３．１０ｇ、５５％）。

一般的手順Ａ
無水THF（１０ｍL）中の対応するイソインドロン（１．３７ミリモル、１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で塩化チオニル（２１４μL、２．７５ミリモル、２当量）及び３滴のDMFを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水THF（１０ｍL）に溶解し、そしてアルコール（２．７５ミリモル、２当量）及び炭酸カリウム（３８０ｍｇ、２．７５ミリモル、２当量）を加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（５０ｍL）中に溶解し、そして水（３×２５ｍL）及び塩水（１×２５ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO4で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮して、油を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（silica；EtOAc／ペトロール）で精製した。

一般的手順Ｂ：３−アルコキシ−３−（４−クロロフェニル）イソインドリン−１−オンの合成
適切な３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）イソインドリン−１−オンの溶液にTHF、適切なアルコール（特記されない限り、５．０モル当量）及びK₂CO₃（特記されない限り、５．０モル当量）を加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、そしてTLCでモニターした。完結後、混合物をEtAOc（１５ｍL）で抽出し、飽和食塩水（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄して、脱水した（MgSO₄）。減圧下で溶媒を除去すると、粗３−アルコキシ−２，３−ジヒドロイソインドリン−１−オンを得た。

一般的手順Ｂ１：３−アルコキシ−２，３−ジヒドロイソインドリン−１−オンの合成
シス−シクロペンタン又はシス−シクロペンテンジオール（２．５当量）及びK₂CO₃（２．５当量）のTHF（３ｍL）溶液に、THF（３ｍL）中の適切な３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）イソインドリン−１−オン（１当量）を３時間にわたって窒素下、室温で攪拌しながら滴下して加えた。溶液をさらに１時間攪拌してTLCでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍL）で抽出し、飽和食塩水（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、そして脱水した（MgSO₄）。溶媒を減圧下で除去して、粗３−アルコキシ−２，３−ジヒドロイソインドリン−１−オンを得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−クロロベンジル）−イソインドリン−１−オン

蒸留THF（２５ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（１．０７１ｇ、３．８４ミリモル）に加え、続いて、トリエチルアミン（８５５．１ｍｇ、８．４５ミリモル、１．１７８ｍL）及びパラ−クロロベンジルアミン（５４３．３６ｍｇ、３．８４ミリモル、０．４６７ｍL）を加え、白色沈殿が生成した。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、TLCでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍL）で抽出し、飽和重炭酸ナトリウム（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、脱水した（Na₂SO₄）。溶媒を減圧下で除去し、そして得られた沈殿を再結晶化して（EtOAc、ペトロール）、標題生成物を細かい白色結晶固体（１．１９１ｇ、３．２０ミリモル、８３％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−プロピルイソインドリン−１−オン

蒸留THF（２０ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（５３５．４ｍｇ、１．９１ミリモル）、続いてトリエチルアミン（３９８．９ｍｇ、０．５４９ｍL、３．９４ミリモル）及びｎ−プロピルアミン（１５９．８ｍｇ、０．２２ｍＬ、１．７９２ミリモル）を加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、ＴＬＣでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍＬ）で抽出し、そして飽和重炭酸ナトリウム（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、そして脱水した（Na₂SO₄）。沸騰酢酸エチルの最小限量及び無水（Na2SO₄）及び過剰のペトロールからの再結晶により、標題生成物を白色結晶固体（４２５ｍｇ、１．４０９ミリモル、７７%）として得た。

２−ベンジル−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドリン−１−オン

蒸留THF（２５ｍL）を、３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（１．０４２ｇ、３．８４ミリモル）に加え、続いてトリエチルアミン（７７７．１ｍｇ、７．６８ミリモル、１．０６ｍL）及びベンジルアミン（６１６ｍｇ、５．７６ミリモル、０．７９ｍL）を加えて、黄色／クリーム色の沈殿の形成を得た。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、そしてTLCでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍL）で抽出し、飽和重炭酸ナトリウム（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、続いて脱水した（Na₂SO₄）。最小限量の沸騰酢酸ンエチル及び過剰のペトロールからのクリーム色の沈殿の再結晶は、標題生成物を白色結晶固体（１．０３７８ｇ、２．９６ミリモル、収率７７％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メチルベンジル）−イソインドリン−１−オン

蒸留THF（２５ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（１．０７１ｇ、３，８４ミリモル）に加え、続いてトリエチルアミン（８５５．１ｍｇ、８．４５ミリモル、１．１７８ｍL）及びパラ−メチルベンジルアミン（４６５．３ｍｇ、３．８４ミリモル、０．４８９ｍL）を加え、明るい黄色の沈殿が生成した。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、そして、TLCでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍL）で抽出し、そして飽和重炭酸ナトリウム（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、そして脱水した（Na₂SO₄）。最小限量の沸騰酢酸エチル及び過剰のペトロールからのクリーム色／黄色の残渣の再結晶は、標題生成物を細かい薄い黄色の結晶固体として得た（１．０９０ｇ、３．１０ミリモル、８１％）。

２−（４−（アミノメチル）ベンゾニトリル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オン

蒸留THF（２５ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３H−イソベンゾフラン−１−オン（１．０７１ｇ、３．８４ミリモル）に加え、続いて、トリエチルアミン（７７７．１４ｍｇ、７．６８ミリモル、１．０７ｍL）及び４−（アミノメチル）ベンゾニトリル（５０７．６ｍｇ、３．８４ミリモル）を加えた。混合物を窒素下、室温で４時間攪拌し、TLCでモニターした。完結後、混合物をEtOAc（１５ｍL）で抽出し、そして飽和重炭酸ナトリウム（３×１０ｍL）、水（３×１０ｍL）で洗浄し、脱水した（Na₂SO₄）。洗浄後に溶媒を除去すると、粘ちょうなオレンジの油を得た。ペトロール下での粉砕により、黄色／オレンジの固体を得て、これは最少量の沸騰酢酸エチルと過剰のペトロールからの再結晶で標題生成物を細かい薄い黄色の結晶固体として得た（６６５ｍｇ、１．８３ミリモル、５０％）。

４−（（１−（４−クロロフェニル）−１−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）−３−オキソイソインドリン−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（NU8292）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（１０ｍL）を２−（４−アミノメチル）ベンゾニトリル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オン（４００ｍｇ、１．１０ミリモル）、塩化チオニル（２８８．９ｍｇ、２．４２ミリモル、０．１８ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−（アミノメチル）ベンゾニトリル）イソインドリン−１−オンが粘ちょうな透明の油として生成し（４１９ｍｇ、１．１０ミリモル）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。蒸留THF（３ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−（アミノメチル）ベンゾニトリル）イソインドリン−１−オン（４１９ｍｇ、１．１０ミリモル）に加え、そして一般的手順Ｂ１に関しては得られた溶液を蒸留THF（３ｍL）中シス−シクロペンテンジオール（２７５ｍｇ、２．７５ミリモル）及び無水K₂CO₃（３８０．０５ｍｇ、２．７５ミリモル）に滴下して加えた。溶媒を除去すると、粗生成物を黄色の油として得た（３６４ｍｇ）。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる生成によって、標題生成物を黄色の油性の固体として得た（１０５．４ｍｇ、０．２３ミリモル、２１％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）−２−（４−クロロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8293）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（１０ｍL）を３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−クロロベンジル）−イソインドリン−１−オン（２００ｍｇ、０．５４ミリモル）、塩化チオニル（１４１．３７ｍｇ、１．１８ミリモル、０．０９ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−クロロベンジル）イソインドリン−１−オンを粘ちょうな無色の油（２１０ｍｇ、０．５４ミリモル）として生成し、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−クロロベンジル）イソインドリン−１−オン（２１０．８ｍｇ、０．５４ミリモル）に蒸留ＴＨＦ（３ｍＬ）を加え、そして一般的手順Ｂ１に関しては、得られた溶液を蒸留ＴＨＦ（３ｍＬ）中のシス−シクロペンテンジオール（１３５ｍｇ、１．３５ミリモル）及び無水炭酸カリウム（１８６．６ｍｇ、１．３５ミリモル）に滴下して加えた。溶媒を除去すると、粗生成物を黄色の油として得た（２２４ｍｇ）。サンプルをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して（EtAOc：ペトロール、４０：６０）、標題生成物を黄色の粘ちょうな油として得た（１０３．９ｍｇ、０．２３ミリモル、４３％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）−２−プロピルイソインドリン−１−オン（NU8294）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（５ｍL）を３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−プロピルイソインドリン−１−オン（１０４ｍｇ、０．３３ミリモル）、塩化チオニル（８６．８３ｍｇ、０．７３ミリモル、０．０５ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−プロピルイソインドリン−１−オンがオレンジの油として生成して（１０５ｍｇ、０．３３ミリモル）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。一般的手順Ｂに関しては、蒸留THF（６ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−プロピルイソインドリン−１−オン（２１１．２、０．６６ミリモル）、シス−シクロペンテンジオール（３３０ｍｇ、３．３ミリモル）及び炭酸カリウム（４５６ｍｇ、３．３ミリモル）に加えた。溶媒を除去すると、粗生成物を無色の油（１６０．２ｍｇ）として得た。サンプルをフラッシュカラムクロマトグラフィー（EtAOc：ペトロール、４０：６０）によって精製して、標題生成物を無色の粘ちょうな油として得た（１２９ｍｇ、０．４３ミリモル、収率５１％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8295）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（１０ｍL）を３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メチルベンジル）−イソインドリン−１−オン（４００ｍｇ、１．１３ミリモル）、塩化チオニル（２９５．８ｍｇ、２．４８ミリモル、０．１８ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オンを粘ちょうな黄色の油として得て（４１８ｍｇ、１．１３ミリモル）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（３ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オン（４１８．１ｍｇ、１．１３ミリモル）に加え、得られた溶液を蒸留THF（３ｍL）中のシス−シクロペンテンジオール（２８５ｍｇ、２．８５ミリモル）及び無水炭酸カリウム（３９０．４１ｍｇ、２．８５ミリモル）に加えた。溶媒を除去すると、粗生成物を緑色の油（３５９ｍｇ）として得た。フラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、標題生成物を無色の粘ちょうな油として得た（２４２．１ｍｇ、０．５５ミリモル、５０％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8297）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（１０ｍL）を３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−イソインドリン−１−オン（２００ｍｇ、０．５２ミリモル）、塩化チオニル（１３６．８ｍｇ、１．１５ミリモル、０．０８ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オンが粘ちょうな黄色の油として生成し（２０８．５ｍｇ、０．５２ミリモル）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（３ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（２０８．５ｍｇ、０．５２ミリモル）に加え、得られた溶液を蒸留THF（３ｍL）中のシス−シクロペンテンジオール（２６０ｍｇ、２．６ミリモル）及び無水炭酸カリウム（３５９ｍｇ、２．６ミリモル）に加えた。溶媒を除去すると、粗生成物を黄色の油（２６２ｍｇ）として得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー（EtOAc:ペトロール、４０：６０）によって精製して、標題生成物を黄色の粘ちょうな油として得た（２１１ｍｇ、４４．４ミリモル、収率８５％）。

２−ベンジル−３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロペンタ−２−エニルオキシ）イソインドリン−１−オン（NU8298）

一般的手順Ｂ１に関しては、蒸留THF（２５ｍL）を２−ベンジル−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドリン−１−オン（４００ｍｇ、１．１４５ミリモル）、塩化チオニル（２９９．６ｍｇ、２．５１ミリモル、０．１８ｍL）及び触媒量のDMF（３滴）に加えた。３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−ベンジルイソインドリン−１−オンが無色の油として生成して（４２１ｍｇ、１．１４５ミリモル）、これをさらなる精製をせずに直ちに使用した。一般的手順Ｂに関しては、蒸留THF（２５ｍL）を３−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−２−ベンジルイソインドリン−１−オン（４２１ｍｇ、１．１４５ミリモル）に加え、シス−シクロペンテンジオール（５７２ｍｇ、５．７２５ミリモル）及び炭酸カリウム（７９２．９ｍｇ、５．７２５ミリモル）に加えた。溶媒を除去すると、粗生成物をピンク色の油（３５４ｍｇ）として得た。サンプルをフラッシュカラムクロマトグラフィー（EtOAc：ペトロール、４０：６０）によって精製して、標題生成物をクリーム色の油性の固体として得た（２７７．５ｍｇ、０．６４３ミリモル、収率５６％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシブタ−２−エニルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8350）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシス−ブテンジオール（４４５ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の油として得た（２７２ｍｇ、５８％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシブタ−２−エニルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8351）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシス／トランス−ブテンジオール（４４５ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の油として得た（２９１ｍｇ、６２％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（５−ヒドロキシシクロオクチルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8352）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシス−１，５−シクロオクタンジオール（７２８ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の固体として得た（３４２ｍｇ、６５％）。

３−（４−クロロ−フェニル）−３−（３−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−プロポキシ）−２−（４−ニトロ−ベンジル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（NU8353）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びネオペンチルグリコール（５２６ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、オフホワイトの固体として得た（２６７ｍｇ、５５％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8354）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシクロプロパンジメタノール（５１６ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、オフホワイトの固体として得た（３０５ｍｇ、６３％）。

ラセミ体NU8354をキラルHPLC（Chiracel ADカラム；１ｃｍ×２５ｃｍ；４０％EtOH、ペンタン）によって２つのエナンチオマーに分離した：
NU8354A、RT＝９．８分；α＝＋２２．６６°、０．４０６ｇ／１００ｍｌ
及びNU8354B、RT=１２．４分；α＝−２０．１０°、０．３９８ｇ／１００ｍｌ

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシブタ−２−イニルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8357）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びブチンジオール（４３５ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の固体として得た（２７１ｍｇ、５８％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8358）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びトランス−シクロヘキサン−１，４−ジメタノール（７２８ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の固体として得た（３７４ｍｇ、７１％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8359）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシス−１，２−シクロヘキサン−ジメタノール（７２８ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、黄色の固体として得た（３３７ｍｇ、６４％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8360）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びシス／トランス−１，４−シクロヘキサンジオール（５８６ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、白色の固体として得た（３３８ｍｇ、６８％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキサ−２−エニルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8361）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４００ｍｇ、１．０１ミリモル、１当量）及びトランス−１，４−シクロヘクキサ−２−エンジオール（５７６ｍｇ、５．０５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、白色の固体として得た（２６３ｍｇ、５３％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン

無水THF（２０ｍL）中の２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（５ｇ、１９．２ミリモル、１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で塩化チオニル（３．０ｍL、３８．３ミリモル、２当量）及び３滴の無水DMFを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水THF（２０ｍL）中に溶解し、そしてアミン２−（４−ニトロフェニル）エチルアミン塩酸塩（４．３０ｇ、２１．１ミリモル、１．１当量）及びDIPEA（３．４９ｍL、２１．１ミリモル、１．１当量）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（１００ｍL）中に溶かし、ろ過し、そしてろ液を水（３×５０ｍL）、及び塩水（１×５０ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過し、そして真空中で濃縮して、薄黄色の固体を得て、これをEtOAc／ペトロールエーテル（４．４７ｇ、５７％）から再結晶化した。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシブトキシ）−２−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8362）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（５６２ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，４−ブタンジオール（６１６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、白色の固体として得た（３０６ｍｇ、６３％）。

３−（４−クロロフェニル）−２−［１−（４−クロロフェニル）−エチル］−３−（４−ヒドロキシブトキシ）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（ＮＵ８３６５）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−２−［１−（４−クロロフェニル）−エチル］−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（４９８ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，４−ブタンジオール（６１６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、薄い黄色の油として得た（２４２ｍｇ、５１％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシメチルベンジルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（ＮＵ８３６６）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（５４１ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，４−ベンゼンジメタノール（９４６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、白色の固体として得た（４０５ｍｇ、７８％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（３−ヒドロキシメチルベンジルオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（ＮＵ８３６７）

命名された化合物を、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（５４１ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，３−ベンゼンジメタノール（９４６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ａを用いて合成し、白色の固体として得た（３９０ｍｇ、７５％）。

３−（４−クロロ−フェニル）−２−［１−（４−クロロ−フェニル）−エチル］−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン

無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（Ｒ）−４−クロロ−α−メチルベンジルアミン塩酸塩（２．９５ｍＬ、２１．１ミリモル、１．１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で塩化チオニル（３．０ｍＬ、３８．３ミリモル、２当量）及び３滴の無水ＤＭＦを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、そして真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、そしてアミン２−（４−ニトロフェニル）エチルアミン塩酸塩（４．３０ｇ、２１．１ミリモル、１．１当量）及びＤＩＰＥＡ（３．４９ｍＬ，２１．１ミリモル、１．１当量）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（１００ｍＬ）に溶解し、ろ過し、そしてろ液を水（３×５０ｍL）及び塩水（１×５０ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過し、そして真空中で濃縮して白色の結晶粉末を得て、これをEtOAc／ペトロールエーテル（４．９８ｇ、６５％）から再結晶化した。

３−（４−クロロ−フェニル）−２−［１−（４−クロロ−フェニル）−エチル］−３−（４−ヒドロキシ−ブトキシ）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NU8368）

命名された化合物を、３−（４−クロロ−フェニル）−２−［１−（４−クロロ−フェニル）−エチル］−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（４９８ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，４−ブタンジオール（６１６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ｂを用いて合成し、透明の油として得た（３０４ｍｇ、６４％）。

４−［１−（４−クロロ−フェニル）−１−（４−ヒドロキシ−ブトキシ）−３−オキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イルメチル］−ベンゾニトリル（NU8370）

命名された化合物を、２−（４−（アミノメチル）ベンゾニトリル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オン（５１３ｍｇ、１．３７ミリモル、１当量）及び１，４−ブタンジオール（６１６ｍｇ、６．８５ミリモル、５当量）から一般的手順Ｂを用いて合成し、白色の固体として得た（３０２ｍｇ、６７％）。

以下における一般的手順Ａ〜Ｆについてのすべての言及は、このすぐ後に概説する一般的手順Ａ〜Ｆについての言及であり、上述の一般的手順Ａ〜Ｃに言及するものではない。

一般的手順Ａ
クロロベンゼン（８当量）中の対応する無水フタル酸（１当量）の懸濁液に塩化アルミニウム（２．４当量）を加えた。混合物を９０℃で２時間加熱し、そして室温に冷却した。氷、続いて濃塩酸（５ｍL）を加え、混合物をジクロロメタン（DCM）（３×５０ｍL）中に抽出し、そして１０％Na₂CO₃溶液（２×５０ｍL）で洗浄した。Na₂CO₃溶液（２×５０ｍL）による洗液を合わせ、そして濃塩酸でｐH３まで酸性化した。得られた沈殿をろ過して集め、真空オーブン中で乾燥させた。

一般的手順Ｂ
無水THF（１０ｍL）中の対応する安息香酸（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で塩化チオニル（２当量）及び３滴の無水DMFを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水THF（１０ｍL）中に溶解し、そして、アミン（１．１当量）及びDIPEA（１．１当量）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（５０ｍL）中に溶解し、ろ過して、ろ液を水（３×２５ｍL）及び塩水（１×２５ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過して真空中で濃縮して固体を得て、これをEtOAc／ペトロールエーテルから再結晶化するか、フラッシュクロマトグラフィー（Biotage SP4）で精製した。

一般的手順Ｃ
無水THF（１０ｍL）中の対応するイソインドリノン（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で塩化チオニル（２当量）及び３滴の無水DMFを加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、そして真空中で濃縮した。得られた薄い黄色の油を無水THF（１０ｍL）中に溶解し、そしてアルコール（２当量）及び炭酸カリウム（２当量）を加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣をEtOAc（５０ｍL）中に溶解し、そして水（３×５０ｍL）及び塩水（１×２５ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過し、そして真空中で濃縮して油を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（Biotage SP4）で精製した。

一般的手順Ｄ
無水DCM（５ｍL）中の対応するイソインドリノン（１当量）の溶液に、ｍCPBA （１．１当量）を加えた。反応混合物を４時間、３０℃で攪拌し、そしてDCM（３０ｍL）で希釈し、飽和NaHCO₃溶液（３０ｍL）、水（３０ｍL）及び塩水（３０ｍL）で洗浄した。有機層をMgSO₄で脱水し、ろ過し、そして真空中で濃縮して油を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（Biotage SP4）で精製した。

一般的手順Ｅ
無水THF中の対応するエステル（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下でポタシウムトリメチルシラノレート（１．１当量）を加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌した。さらに、ポタシウムトリメチルシラノレート（１．１当量）を加え、そして混合物を再び室温で一夜攪拌した。真空中で溶媒を濃縮して、固体を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（Biotage SP4）で精製した。

一般的手順Ｆ
THF（１０ｍL）中の対応するイソインドリノン（１当量）にピリジン（２当量）、４−ジメチルアミノピリジン（触媒）及びコハク酸無水物（２当量）を加えた。反応混合物を還流しながら４８時間加熱して、室温まで冷却し、そして溶媒を真空中で濃縮した。残渣をEtOAc（５０ｍL）中に溶解し、そして、水（２×２０ｍL）、塩水（２０ｍL）で洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、真空中で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。

中間体
２−（４−ブロモベンゾイル）ベンゾイックアシッドの合成

ブロモベンゼン（１１．３８ｍL、１０８ミリモル）中のフタル酸無水物（２ｇ、１３．５０ミリモル）の懸濁液に、塩化アルミニウム（３．６０ｇ、２７．００ミリモル）を加えた。混合物を２時間、９０℃に加熱して、室温に冷却した。氷、そして濃塩酸（５ｍL）を加え、混合物をDCM（３×５０ｍL）中に抽出し、そして１０％Na₂CO₃溶液（２×５０ｍL）で洗浄した。Na₂CO₃による洗液を合わせ、そして濃塩酸でｐH3に酸性化した。得られた沈殿をろ過によって集めて、真空オーブン中で乾燥させた。命名された化合物を白色固体（３．４１ｇ、８３％）として得た。

２−（４−クロロベンゾイル）−３−メチルベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−６−メチルベンゾイックアシッドの混合物の合成

命名された化合物を、３−メチルフタル酸無水物（３ｇ、１８．５０ミリモル）から、一般的手順Ａを用いて合成し、白色固体（２．９８ｇ、５９％、３−及び６−異性体の比は２０：１）として得て、これをさらに精製せずに使用した。

２−（４−クロロベンゾイル）−４−メチルベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−５−メチルベンゾイックアシッドの混合物の合成

命名された化合物を、４−メチルフタル酸無水物（３ｇ、１８．５０ミリモル）から、一般的手順Ａを用いて合成し、白色固体（４．６０ｇ、９０％、４−及び５−異性体の比は２：１）として得て、これをさらに精製せずに使用した。

４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッドの混合物の合成

命名された化合物を、４−ｔｅｒｔブチルフタル酸無水物（２．５ｇ、１２．２４ミリモル）から、一般的手順Ａを用いて合成し、クリーム色の固体（３．５６ｇ、９２％、４−及び５−異性体の比は１．３：１）として得て、これをさらに精製せずに使用した。

３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び６−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッドの合成

命名された化合物を、３−クロロフタル酸無水物（５ｇ、２７．３９ミリモル）から、一般的手順Ａを用いて合成し、黄色固体（６．７１ｇ、８３％、３−及び６−異性体の比は９９：１）として得て、これをさらに精製せずに使用した。

４−ブロモ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び５−ブロモ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッドの合成

命名された化合物を、４−ｔｅｒｔ−ブチルフタル酸無水物（２．５ｇ、１２．２４ミリモル）から、一般的手順Ａを用いて合成し、クリーム色固体（３．４７ｇ、６６％、４−及び５−異性体の比は約１：１）として得て、これをさらに精製せずに使用した。

４，５−ジクロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッドの合成

命名された化合物を、一般的手順Ａを用いて４，５−ジクロロフタル酸無水物（２．５ｇ、１１．５２ミリモル）から合成し、黄色の固体（１．９８ｇ、５２％）として得た。

２−（４−クロロベンゾイル）−４−フルオロベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−５−フルオロベンゾイックアシッドの混合物の合成

命名された化合物を、一般的手順Ａを用いて４−フルオロフタル酸無水物（２．５ｇ、１５．０５ミリモル）から合成し、クリーム色の固体（３．５１ｇ、８４％、４−及び５−異性体の比率は、３：２）として得た。混合物をさらに精製することなく使用した。

２−（４−クロロベンゾイル）シクロヘキサ−１−エンカルボキシリックアシッドの合成

命名された化合物を、一般的手順Ａを用いて３、４，５、６−テトラヒドロフタル酸無水物（２．０８ｇ、１３．６９ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4、２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の油（２．６９ｇ、７４％）として得た。

最終化合物
３−（４−ブロモフェニル）−３−（４−ヒドロキシブトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8390）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｃを用いてNU8389（０．５０ｇ、１．１４ミリモル）及び１，４−ブタンジオール（０．２０ｍL、２．２８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（０．５０ｇ、８５％）として得た。

３−（４−ブロモフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロべンジル）イソインドリン−１−オン（NU8391）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｃを用いてNU8389（０．５０ｇ、１．１４ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．２２ｍL、２．２８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（０．４７ｇ、７８％）として得た。

３−（４−ブロモフェニル）−３−（３−ヒドロキシプロポキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8392）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｃを用いてNU8389（０．５０ｇ、１．１４ミリモル）及び１，３−プロパンジオール（０．１６ｍL、２．２８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（０．４０ｇ、７０％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−４−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8393）及び３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−７−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU839４）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）−３−メチルベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−６−メチルベンゾイックアシッド（２ｇ、７．２８ミリモル）及び４―ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜２０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の固体（ＮＵ８３９３）及びクリーム色の固体（ＮＵ８３９４）（１．４５ｇ、４９％、４−及び７−異性体の比は、２０：１）として得た。

３−（４−クロロ−フェニル）−３−（１−ヒドロキシメチル−シクロプロピルメトキシ−２−（４−ニトロ−ベンジル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（NU8354）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8260（４００ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そしてクリーム色の固体（４４２ｍｇ、９２％）として得た。

エナンチオマーの分離は、キラル調製用HPLC（Daicel Chiralpak AD-H 250×10mm；ヘキサン／エタノール（４：１））によって達成される。

NU8354A（黄色の固体）
旋光度：比旋光度［α］＝＋２２．６６°（２４．８°において、波長＝５８９ｎｍ、管の長さ＝０．２５ｄｍ、濃度＝０．４０６ｇ／１００ｍｌ）

NU8354B（オフホワイトの固体）
旋光度：比旋光度［α］＝−２０．１０°（２４．８°において、波長＝５８９ｎｍ、管の長さ＝０．２５ｄｍ、濃度＝０．３９８ｇ／１００ｍｌ）

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−５−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8395）及び３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−６−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8412）の合成

命名された化合物は、一般的方法Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）−４−メチルベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−５−メチルベンゾイックアシッド（２ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体（NU8395）及び白色固体（NU8412）として得た（１．２５ｇ、４２％、５−及び６−異性体の比は２：１）。

５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8396）及び６−ｔｅｒｔ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8397）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び５−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．３１ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体（NU8396）及び白色固体（NU8397）として得た（２．４３ｇ、７４％、５−及び６−異性体の比は１．３：１）。

４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−イソインドリン−１−オン（NU8398）の合成

命名された化合物は、一般的方法Ｂを用いて、３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び６−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．１５ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体として得た（１．９６ｇ、６３％）。

６−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8399）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8397（２００ｍｇ，０．４４ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０９ｍＬ、０．８９ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（１８２ｍｇ、７５％）として得た。

５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8400）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8396（２００ｍｇ，０．４４ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０９ｍＬ、０．８９ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（４３ｍｇ、１８％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−５−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8401）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8395及びNU8412の混合物（２００ｍｇ，０．４９ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１０ｍＬ、０．９８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜３０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色固体（１１６ｍｇ、４８％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−４−メチル−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8405）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8393（４１３ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の固体（２５２ｍｇ、５０％）として得た。

４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8406）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8398（４３３ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色結晶（３２１ｍｇ、６２％）として得た。

５−ブロモ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8414）及び６−ブロモ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8413）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、４−ブロモ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び５−ブロモ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．４８ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そしてクリーム色の固体（NU8414）及びクリーム色の固体（NU8413）として得た（１．８３ｇ、５３％、５−及び６−異性体の比は約１：１）。

４−（（１−（４−クロロフェニル）−１−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−３−オキソイソインドリン−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（NU8415）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8306（３７９ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（２２１ｍｇ、５１％）として得た。

２−（４−クロロベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）イソインドリン−１−オン（NU8416）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8314（２００ｍｇ，０．５２ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１０ｍＬ、１．０４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（１９２ｍｇ、７９％）として得た。

２−（４−ブロモベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）イソインドリン−１−オン（NU8417）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8315（４３３ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（３３３ｍｇ、６４％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−２−（（R）−１−（４−クロロフェニル）エチル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）イソインドリン−１−オン（NU8418）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8301（４０１ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（１４６ｍｇ、３０％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−２−（（S）−１−（４−クロロフェニル）エチル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）イソインドリン−１−オン（NU8419）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8347（４０１ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜３０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（６０ｍｇ、１２％）として得た。

５−ブロモ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8424）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8414（２００ｍｇ，０．４２ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０８ｍＬ、０．８４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の油（２０４ｍｇ、８７％）として得た。

６−ブロモ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8425）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8413（２００ｍｇ，０．４２ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０８ｍＬ、０．８４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そしてオレンジ色の固体（１５４ｍｇ、６６％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（ピリジン−２−イルメチル）イソインドリン−１−オン（NU8429）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8423（３５４ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；５０％EtOAc／ペトロール−EtOAc）で精製し、そして黄色結晶（３８３ｍｇ、８７％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−５−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL‐00010485）及び３−（４−クロロフェニル）−６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL‐00010486）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）−４−フルオロベンゾイックアシッド及び２−（４−クロロベンゾイル）−５−フルオロベンゾイックアシッド（２．３９ｇ、８．５８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．７８ｇ、９．４４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２５％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そしてクリーム色の固体（NCL‐00010485）及び黄色の固体（NCL‐00010486）として得た（２．５６ｇ、７２％、５−及び６−異性体の比は３：２）。

５，６−ジクロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソンインドリン−１−オン（NCL−00010487）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NU8432（３５０ｍｇ，０．７５ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１６ｍＬ、１．６７ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の油（３０２ｍｇ、７３％）として得た。

４−（（７−クロロ−１−（４−クロロフェニル）−１−ヒドロキシ−３−オキソイソインドリン−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（NCL−00010488）及び４−（（４−クロロ−１−（４−クロロフェニル）−１−ヒドロキシ−３−オキソイソインドリン−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（７３／NCL−00010489）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び６−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．１５ｇ、７．２８ミリモル）及び４−シアノベンジルアミン塩酸塩（１．３５ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体（NCL‐00010488）及び茶色の結晶（NCL‐00010489）として得た（１．９８ｇ、６６％、７−及び４−異性体の比は９９：１）。

２−（４−ブロモベンジル）−４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オン（NCL−00010490）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び６−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッドの混合物（２．１５ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン（１．４９ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体として得た（１．５７ｇ、４７％）。

４−（（７−クロロ−１−（４−クロロフェニル）−１−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−３−オキソイソインドリン−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（NCL−00010492）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00010488（４１３ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜６０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（３０５ｍｇ、６１％）として得た。

２−（４−ブロモベンジル）−４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）イソインドリン−１−オン（NCL‐00010493）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL‐00010490（４６８ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（３０４ｍｇ、５５％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロイソインドール−１−オン（NCL‐00010494）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）シクロヘキサ−１−エンカルボキシリックアシッド（１．００ｇ、３．７８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（０．７８ｇ、４．１６ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；３０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして黄色固体として得た（０．６７ｇ、４４％）。

３−（４−クロロフェニル）−５−フルオロ−３−（（１−（ヒドロメチル（シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL‐00010495）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL‐00010485（１５０ｍｇ，０．３６ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０７ｍＬ、０．７２ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（８５ｍｇ、４７％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−６−フルオロ−３−（（１−ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL‐00010496）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL‐00010486（１５０ｍｇ，０．３６ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０７ｍＬ、０．７２ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；２０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（１１５ｍｇ、６４％）として得た。

４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8398）及び７−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW379B、NCL‐00016654）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド及び６−クロロ−２−（４−クロロベンソイル）ベンゾイックアシッドの混合物（２．１５ｇ、７．２８ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．５１ｇ、８．０１ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica; １０％〜２０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体（NU8398）及び白色固体（NCL‐00016654）（１．９６ｇ、６３％、異性体NU8398：NCL‐00016654の比は９９：１）として得た。

２−（４−アセチルベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（NCL‐00016045／AW344）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（６８７ｍｇ、２．６３ミリモル）及び４−アセチルベンジルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩（６３０ｍｇ、２．４０ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica; １０％〜５０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色結晶（５５２ｍｇ、５４％）として得た。

２−（４−ベンゾイルベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW357,NCL-00014532）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（７９１ｍｇ、３．０３ミリモル）及び４−アセチルベンジルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩（６４０ｍｇ、１．９７ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica; １０％〜３０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色結晶（４１４ｍｇ、４６％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ヨードベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW345、NCL‐00014527）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（１．７６ｇ、６．７５ミリモル）及び４−ヨードベンジルアミン塩酸塩（２ｇ、７．４２ミリモル）から合成し、EtOAcから再結晶化し、クロマトグラフィー（Silica; ６％〜５０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色固体（１．７２ｇ、５２％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２−（４−ヨードベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW350、NCL‐00014529）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00014527（４９９ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica; １０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして白色結晶（４８７ｍｇ、８３％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−２−（４−フルオロベンジル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（AW351、NCL‐00014530）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、３−（４−クロロ−フェニル）−２−（４−フルオロ−ベンジル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（３７２ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica；１０％〜４０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の結晶（２３８ｍｇ、５２％）として得た。

２−（４−アセチルベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW354、NCL‐00014531）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00016045（２７０ｍｇ，０．６９ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１３ｍＬ、１．３８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica；２０％〜７０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の油（１０８ｍｇ、３３％）として得た。

２−（４−ベンゾイルベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW360、NCL‐00014533）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00014532（１４２ｍｇ，０．３１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．０６ｍＬ、０．６３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして黄色の結晶（１２４ｍｇ、７４％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−ナフタレン−１−イルメチル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW364、NCL‐00016046）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．２４ｇ、８．５９ミリモル）及び１−ナフチルメチルアミン（１．３６ｇ、９．４４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Silica；６％〜５０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして黄色の結晶として得た（０．３５ｇ、１０％）。

２−（３−ブロモベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW365、NCL‐00016047）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．２４ｇ、８．５９ミリモル）及び３−ブロモベンジルアミン塩酸塩（２．１０ｇ、９．４４ミリモル）から合成し、EtOAc／ペトロールから再結晶させ、そしてオレンジ色の結晶として得た（２．１２ｇ、５８％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２−ナフタレン−１−イルメチル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW366、NCL‐00016106）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00016046（２７０ｍｇ，０．６９ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１３ｍＬ、１．３８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；６％〜２５％EtOAc／ペトロール）で精製し、そしてクリ−ム色の結晶（１５３ｍｇ、４７％）として得た。

２−（３−ブロモベンジル）−３−（４−クロロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（AW367、NCL‐00016107）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00016047（２９２ｍｇ，０．６８ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１３ｍＬ、１．３５ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；６％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（２５３ｍｇ、７３％）として得た。

３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−３−フェニル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW403／NCL‐00016655）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−ベンゾイル−ベンゾイックアシッド（０．５ｇ、２．２１ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（０．４６ｇ、２．４３ミリモル）から合成し、EtOAc／ペトロールから再結晶させ、そして黄色の固体として得た（０．５６ｇ、７０％）。

３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−３−フェニル−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW405／NCL‐00016656）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00016655（３００ｍｇ，０．８３ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１６ｍＬ、１．６７ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；１０％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の結晶（２９８ｍｇ、８１％）として得た。

モノ−｛１−［７−クロロ−１−（４−クロロ−フェニル）−２−（４−ニトロベンジル）−３−オキソ−２，３−ジヒドロ−１H−イソインドール−１−イルオキシメチル］シクロプロピルメチル｝エステル（AW393／NCL‐00016149）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｆを用いて、無水THF（１０ｍL）中、NU8406（１００ｍｇ、０．１９ミリモル）、ピリジン（０．０３ｍL、０．３９ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（５ｍｇ、０．０４ミリモル）及びコハク酸無水物（３９ｍｇ、０．３９ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；５０％EtOAc／ペトロール〜２０％MeOH／EtOAc）によって精製し、そして白色結晶（６０ｍｇ、５０％）として得た。

サクシニックアシッドモノ−｛１−［７−クロロ−１−（４−クロロフェニル）−２−（４−シアノベンジル）−３−オキソ−２，３−ジヒドロ−１H−イソインドール−１−イルオキシメチル］シクロプロピルメチル｝エステル（AW417／NCL−00016659）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｆを用いて、無水THF（１０ｍL）中、NCL−00010492（１１０ｍｇ、０．２２ミリモル）、ピリジン（３６μL、０．４５ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（５ｍｇ、０．０４ミリモル）及びコハク酸無水物（４５ｍｇ、０．４５ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；５０％EtOAc／ペトロール〜２０％MeOH／EtOAc）によって精製し、そして白色結晶（２０ｍｇ、１５％）として得た。

サクシニックアシッドモノ−｛１−［２−（４−ブロモベンジル）−７−クロロ−１−（４−クロロフェニル）−３−オキソ−２，３−ジヒドロ１H−イソインドール−１−イルオキシメチル］シクロプロピルメチル｝エステル（AW436／NCL−00016653）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｉを用いて、無水THF（１０ｍL）中、NCL-00010493（１５０ｍｇ、０．２７ミリモル）、ピリジン（４４μL、０．５５ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（７ｍｇ、０．０５ミリモル）及びコハク酸無水物（５５ｍｇ、０．５５ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；５０％EtOAc／ペトロール〜EtOAc）によって精製し、そして茶色の油（９３ｍｇ、５３％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オン（tjb 14/02）

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）−ベンゾイックアシッド（２．０ｇ、７．６ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン（１．０７ｇ、８．４ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；１０〜８０％ EtOAc／ヘキサン）によって精製し、そして白色固体として得た（２．０４５ｇ、７２％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メトキシベンジル）イソインドリン−１−オン（tjb １６／０２）

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．０ｇ、７．６ミリモル）及び４−メトキシベンジルアミン（０．５４２ｇ、４．１８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；１０〜８０％EtOAc／ヘキサン）によって精製し、そして白色固体として得た（０．８３０ｇ、５７％）。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１‘−ヒドロキシ−２’−クロロプロピル−３‘−メトキシ）−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL‐00016865）

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メチルベンジル）イソインドリン−１−オン（３００ｍｇ，０．８３ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１６ｍＬ、１．６７ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜８０％EtOAc／ｎ−ヘキサン）で精製し、そしてガラス様の固体（１８７ｍｇ、５４％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１‘‐ヒドロキシ−２’−シクロプロピル−３‘−メトキシ）−２−（４−メトキシベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL-00016866）

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−メトキシベンジル）イソインドリン−オン（３００ｍｇ，０．７９ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１２ｍＬ、１．５８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；１０％〜８０％EtOAc／ｎ−ヘキサン）で精製し、そしてガラス様の固体（１８１ｍｇ、５３％）として得た。

３−（４−クロロフェニル）−３−（１‘−ヒドロキシ−２’−シクロプロピル−３‘−メトキシ）−２−（４−カルボキサミドベンジル）イソインドリン−１−オン（NCL-00016867）

５０℃のｔ−BuOH（８．４８ｍL）中のNCL-00010492（２００ｍｇ、０．４３６ミリモル）の溶液に、微細粉末のKOH（６４７ｍｇ）を加えた。得られた懸濁液をTLC（１０％、MeOH／DCM）が出発物質の完全な消費を示すまでこの温度で攪拌した（３時間）。熱い反応混合物をCelite（登録商標）を通してろ過し、そしてパッドをTHFで数回すすいだ。ろ液をEtOAc（１０ｍL）及びH₂O（１０ｍL）の間で分画し、そして有機層を分離し；水層をEtOAcで抽出した（２×１０ｍL）。併合した有機層を塩水（１５ｍL）で洗浄して脱水し（Na₂SO₄）、ろ過して、真空中で濃縮した。残渣を最少量のシリカを加える前にTHFに溶解し、そして得られた懸濁液を真空中で濃縮した。シリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、DCM中２〜１０％のMeOHで溶出すると、標題化合物をガラス状の固体として得た（６２ｍｇ、３０％）。

３−（４−クロロフェニル）−２−（４−フルオロベンジル）−３−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW349、NCL−0014528）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−クロロベンゾイル）ベンゾイックアシッド（２．２４ｇ、８．５９ミリモル）及び４−フルオロベンジルアミン（１．０８ｍL、９．４４ミリモル）から合成し、EtOAc／ペトロールから再結晶化し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；Silica；１０〜３０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして白色結晶として得た（１．５７ｇ、５０％）。

３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW408／NCL-00016657）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｂを用いて、２−（４−フルオロベンゾイル）−ベンゾイックアシッド（２．１０ｇ、８．６０ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１．７８ｇ、９．４６ミリモル）から合成し、EtOAc／ペトロールから再結晶化し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；１０〜４０％ EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして黄色固体として得た（１．０１ｇ、３１％）。

３−（４−フルオロフェニル）−３−（１−ヒドロキシメチルシクロプロピルメトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オン（AW413／NCL-00016896）の合成

命名された化合物は、一般的手順Ｃを用いて、NCL-00016657（３８０ｍｇ，１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍＬ、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP４；silica；２５％〜５０％EtOAc／ペトロール）で精製し、そして薄い黄色の油（３２７ｍｇ、７０％）として得た。

３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）−４−フルオロベンゾイックアシッド（AW442）の合成

ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ溶液、５．２７ｍＬ、１３．１８ミリモル）を、無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（１．９３ｍＬ、１３．７５ミリモル）の溶液に、７５℃、窒素雰囲気下で攪拌しながら加え、さらに１時間、−３０℃に維持してリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）を生成させた。−７５℃まで再冷却後、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中３−クロロ−４−フルオロベンゾイックアシッド（１ｇ、５．７３ミリモル）の溶液を１時間にわたって加え、−７５℃、窒素下で一夜攪拌を続けた。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、メチル４−クロロベンゾエート（１．９５ｇ、１１．４６ミリモル）の溶液を１０分にわたって加え、−７０℃で２時間そして室温で４時間攪拌を続けた。水（３０ｍＬ）を加え、そして水層をエーテル（３×５０ｍＬ）で洗浄し、１Ｍ ＨＣｌで酸性化し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、MgSO₄で脱水し、そして真空中で濃縮して黄色の固体を得た。部分的精製をクロマトグラフィー（Biotage、silica、５０％EtOAc／ペトロール〜２０％MeOH／EtOAc）で試した。粗生成物（０．６０ｇ、３４％）をさらに精製することなく次のステップで使用した。

４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−５−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW448／NCL-00016897）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｂを用いて、粗３−クロロ−２−（４−クロロベンゾイル）−４−フルオロベンゾイックアシッド（１５０ｍｇ、０．４７９ミリモル）及び４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１８１ｍｇ、０．９５８ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；silica；１０〜４０％ EtOAc／ペトロール）によって精製し、EtOAc／ペトロールから再結晶化し、白色固体（０．０４ｍｇ、２％）として得た。

４−クロロ−３−（４−クロロフェニル）−３−（（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メトキシ）−２−（４−ニトロベンジル）イソインドリン−１−オン（NU8406A／NCL-00013774及びNU8406B／NCL-00013775）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｃを用いて、NU8398（４３３ｍｇ、１．０１ミリモル）及び１，１−ビス（ヒドロキシメチル）シクロプロパン（０．１９ｍL、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；silica；２０％〜５０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして黄色の結晶（３２１ｍｇ、６２％）として得た。

エナンチオマーの分離は、キラル調製用HPLC（Daicel Chiralpak AD-H２５０×１０ｍｍ；ヘキサン／エタノール（４：１））によって達成した。

NU8406A／NCL-00013774（白色結晶）
旋光度：比旋光度［α］＝−４．９８°（２２．４℃において、波長＝５８９ｎｍ、管の長さ＝０．２５ｄｍ、濃度＝０．４０２ｇ／１００ｍL）

NU8406B／NCL-00013775（白色結晶）
旋光度：比旋光度［α］＝＋４．８５°（２２．６°において、波長＝５８９ｎｍ、管の長さ＝０．２５ｄｍ、濃度＝０．４１２ｇ／１００ｍｌ）

３−（４−クロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシメチルアリールオキシ）−２−（４−ニトロベンジル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン（AW468／NCL-00016895）の合成

命名された化合物を、一般的手順Ｃを用いて、NU8260（４００ｍｇ、１．０１ミリモル）及び２−メチレン−１，３−プロパンジオール（０．１７ｍL、２．０３ミリモル）から合成し、クロマトグラフィー（Biotage SP4；silica；１０％〜４０％EtOAc／ペトロール）によって精製し、そして黄色の油（３４２ｍｇ、７３％）として得た。

もちろん、本発明が例示のみによって記載された上記の実施態様の詳細に限定されることを意図されるものでないことは理解されるべきである。

Claims (29)

1. 以下の式I：
   

   

   又は
   以下の式II：
   

   

   ｛式I及びII中、
   XはO、N又はSから選ばれ；
   R¹は、水素、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル、及び置換又は非置換ヘテロアラルキルから選ばれ；
   R²は、水素、置換又は非置換アルケニル、置換又は非置換アルキニル、置換又は非置換分枝鎖ヒドロキシアルキル、置換又は非置換の６個以上の環炭素原子を有するシクロアルキル、置換又は非置換シクロアルケニル、ヒドロキシアルキルアラルキル、ヒドロキシアルキルヘテロアラルキル、及びカルボン酸含有基から選ばれ；
   R³は、水素、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル及び置換又は非置換ヘテロアラルキルから選ばれ、そして、
   R⁴〜R⁷は、水素、ハロ、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルケニル、置換又は非置換アルキニル、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換ヘテロアラルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、トリフルオロメチル、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボニルメチルスルホン、トリフルオロメチルスルホン、シアノ、及び置換又は非置換スルホンアミドから独立して選ばれる、R⁴、R⁵、R⁶及びR⁷を表し、
   ここで、R²は、置換又は非置換の分枝鎖ヒドロキシアルキルであり、XはO又はSであり、
   さらにここで、R²が水素であるとき、R⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つは水素ではなく、かつR³はベンズイミダゾール誘導体又はベンズイミダゾリン誘導体ではなく；
   そして、式IIにおいては、６員環は０、１又は２のC＝C二重結合を有することができる。｝
   により表わされる化合物、或いは医薬として許容可能なその塩。
2. R¹が置換又は非置換アリール及び置換又は非置換アラルキルから選ばれ；及び／又はR²が水素、アセチル、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシアルキニル、分枝鎖5炭素ヒドロキシアルキル、ヒドロキシシクロアルキル、ヒドロキシシクロアルケニル、ヒドロキシメチルシクロアルキル、ヒドロキシメチルシクロアルキルメチレン、及びヒドロキシアルキルベンジルから選ばれ；及び／又はR³が置換又は非置換アリール及び置換又は非置換アラルキルから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
3. R²がヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチル、ヒドロキシブテニル、ヒドロキシシクロペンテニル、ヒドロキシシクロヘキセニル及びｎ−プロピルアミンから選ばれる、請求項１又は２に記載の化合物。
4. R²がヒドロキシ−２，２−ジメチルプロピル、ヒドロキシ−２，２−シクロプロピルプロピル、２−ヒドロキシメチルアリル、又はコハク酸誘導体から選ばれる請求項１又は２に記載の化合物。
5. R²がヒドロキシシクロオクチル、ヒドロキシメチルシクロヘキシルメチレン、及びヒドロキシシクロヘキシルから選ばれる、請求項１又は２に記載の化合物。
6. R²がヒドロキシメチルベンジルである、請求項１又は２に記載の化合物。
7. R¹が置換ベンジルである、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
8. R¹が４−ニトロベンジル、４−クロロベンジル、４−ブロモベンジル、シアノベンジル、又は４−ヨードベンジルである、請求項７に記載の化合物。
9. R³が置換又は非置換フェニルである、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
10. R³が４−クロロフェニル又は４−フルオロフェニルである、請求項９に記載の化合物。
11. R⁴〜R⁷がすべて水素であるか又はR⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つが塩素原子である、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
12. 以下の式I：
    

    

    又は、以下の式II：
    

    

    ｛式I及び式II中、
    Xは、O、N又はSから選ばれ；
    R¹は、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アラルキル、及び置換ヘテロアラルキルから選ばれ；
    R²は、水素、ハロ、置換又は非置換の非環式アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシアルキル、置換又は非置換アリール、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換アラルキル及び置換又は非置換ヘテロアルキルから選ばれ；
    R³は、水素、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、置換又は非置換アリール又はヘテロアリール、及び置換又は非置換アラルキル又はヘテロアルキルから選ばれ；そして、
    R⁴〜R⁷は、水素、ハロ、ヒドロキシ、置換又は非置換アルキル、置換又は非置換ヒドロキシアルキル、置換又は非置換アルケニル、置換又は非置換アルキニル、置換又は非置換ヘテロアリール、置換又は非置換ヘテロアラルキル、置換又は非置換アルキルアミン、置換又は非置換アルコキシ、トリフルオロメチル、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボニルメチルスルホン、トリフルオロメチルスルホン、シアノ及び置換又は非置換スルホンアミドから独立して選ばれる、R⁴、R⁵、R⁶及びR⁷を表し；
    ここで、
    R²が直鎖ヒドロキシアルキルである場合、R¹は４−ニトロベンジル又は４−クロロベンジルからは選ばれず；
    そして、R²が水素である場合、R⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つは水素ではなく、かつ、R³はベンズイミダゾール誘導体ではなく；
    そして、R³がフェニル基である場合、R¹は４−メトキシベンジル又は４−ヒドロキシベンジル基であることはできず、
    そして、式IIにおいては、６員環は、０、１又は２つのC=C二重結合を有してよい。｝
    により表わされる化合物、或いは医薬として許容可能なその塩。
13. R¹が置換アラルキルであり、R²が非環式ヒドロキシアルキルであり、R³が置換アリールである、請求項１２に記載の化合物。
14. R¹が置換１−エチルフェニル、４−ニトロベンジル、４−シアノベンジル、４−クロロベンジル、４−ブロモベンジル又は４−ヨードベンジルである、請求項１２又は１３に記載の化合物。
15. 前記置換１−エチルフェニルがS-エナンチオマーである、請求項１４に記載の化合物。
16. R³が置換フェニルである、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
17. R³が４−クロロフェニル又は４−フルオロフェニルである、請求項１６に記載の化合物。
18. R⁴〜R⁷が、すべて水素であるか、又はR⁴〜R⁷のうちの少なくとも１つが塩素原子である、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
19. XがOである、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
20. 治療における使用のための、先の請求項のいずれか１項に記載の化合物。
21. 癌の治療において使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物。
22. 前記化合物がMDM2タンパク質とp53の相互作用を阻害する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物。
23. 癌の治療のための活性医薬物質として使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物。
24. 医薬の製造における、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物の使用。
25. 癌の治療のための医薬の製造における、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物の使用。
26. 請求項１〜１９のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量及び医薬として許容可能な担体を含む、医薬組成物。
27. 請求項１〜１９のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物を含む医薬を投与するステップを含む、哺乳動物の治療方法。
28. 請求項１〜１９のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物；及び使用指示書を含む、キット。
29. 請求項１〜１４のいずれか１項に記載の第二の化合物をさらに含む、請求項２８に記載のキット。

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