JP2011522544A - バシルススブチリス(B.subtilis)由来アルファ‐アミラーゼを用いるデンプンからのグルコースの生産 - Google Patents
バシルススブチリス(B.subtilis)由来アルファ‐アミラーゼを用いるデンプンからのグルコースの生産 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011522544A JP2011522544A JP2011512655A JP2011512655A JP2011522544A JP 2011522544 A JP2011522544 A JP 2011522544A JP 2011512655 A JP2011512655 A JP 2011512655A JP 2011512655 A JP2011512655 A JP 2011512655A JP 2011522544 A JP2011522544 A JP 2011522544A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amye
- amylase
- alpha
- seq
- glucose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/02—Monosaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
- C11D3/22—Carbohydrates or derivatives thereof
- C11D3/221—Mono, di- or trisaccharides or derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2411—Amylases
- C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
- C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
-
- D—TEXTILES; PAPER
- D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- D06L—DRY-CLEANING, WASHING OR BLEACHING FIBRES, FILAMENTS, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR MADE-UP FIBROUS GOODS; BLEACHING LEATHER OR FURS
- D06L1/00—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods
- D06L1/12—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods using aqueous solvents
- D06L1/14—De-sizing
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Textile Engineering (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
Abstract
【選択図】図5
Description
本出願は2008年6月6日提出の米国仮出願番号61/059,535に基づいて優先権を主張する。この米国仮出願は、ここに参照することにより本明細書に取り込まれる。
配列番号1から24を含む配列表を添付する。ここに、その全体を参照することにより本明細書に取り込む。
野菜デンプン、例えば、トウモロコシデンプンはシロップ及びバイオ燃料など工業製造製品に広く用いられる。例えば、高フルクトーストウモロコシシロップ(HFCS)は高いフルクトース含有量を有するトウモロコシシロップの処理された形態であり、糖に匹敵する甘味料であり、HFCSはソフトドリンク及び他の加工食品における糖の代替品として有用になっている。現在、HFCS生産は10億ドル産業となっている。また、バイオ燃料としてのエタノールの生産も成長中の産業である。
(i)AmyE又はその変異体をマルトース、マルトヘプタオース、又はマルトトリオースを含む基質溶液と接触させること、及び
(ii)基質溶液をかなりの量のグルコースへ転換させること、
を含む、
バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)アルファ‐アミラーゼ(AmyE)又はその変異体を用いるかなりの量のグルコースを含む溶液を生成する方法であり、
ここで、AmyE又はその変異体が配列番号1のアミノ酸配列を有し、又は配列番号1と少なくとも約85%の配列同一性であるアミノ酸配列を有し、及びアルファ‐アミラーゼ活性を有する方法に関する。溶液中のグルコースの最終濃度は20% w/w以上であり得る。基質溶液はグルコアミラーゼを添加しないで、AmyE又はその変異体と有利に接触させてよい。ある実施態様においては、基質溶液をグルコアミラーゼ存在下AmyE又はその変異体と接触させてよい。ここで、溶液のpHは約pH4.0からpH4.5であり、任意にCa2+非添加としてよい。
(i)織物をAmyEと接触させること、及び
(ii)織物を湯通しすることを
含み、
ここで、AmyEは、配列番号1のAmyEと少なくとも約85%の配列同一性であるアミノ酸配列を含む。
(i)洗浄すべき物をAmyEを含む洗剤組成物と接触させること、及び
(ii)物を洗浄すること
を含み、
ここで、AmyEは配列番号1のAmyEと少なくとも約85%の配列同一性であるアミノ酸配列を含む。
バシルス スブチリス(Bacillus subtilis)由来アルファ‐アミラーゼ(AmyE)は多様な炭水化物基質であって、野菜デンプン、マルトヘプタオース、及びマルトトリオースを含む炭水化物基質から大量のグルコースを生成する。とりわけ、この有利な特性はAmyE又はその変異体をグルコアミラーゼを低減する又は除く必要性を有する糖化反応において用いることができる。グルコアミラーゼの必要性を低減又は除去することにより、例えば、エタノール又は高フルクトーストウモロコシシロップの生産の効率性を顕著に改善する。
本明細書の詳細な説明に従って、次の略語及び定義を適用する。本明細書にて使用する単数形「a」「an」及び「the」は、内容が明らかに他の事を指し示していない限り、複数の指示対象を含む。すなわち、例えば、「酵素」の意味は該当酵素の複数を含み、「製剤(the formulation)」の意味は一以上の製剤及び当業者に公知のこれらに均等な製剤を含む。
本明細書にて用いる「アミノ酸配列」は用語「ポリペプチド」及び/又は用語「タンパク質」と同義語である。ある場合は、用語「アミノ酸配列」は用語「ペプチド」と同義語である。ある場合は、用語「アミノ酸配列」は用語「酵素」と同義語である。
1.2.略語
次の略語は、他に示していない限り、以下の意味を有する。
AE アルコール エトキシレート(alcohol ethoxylate)
AEO アルコール エトキシレート(alcohol ethoxylate)
AEOS アルコール エトキシ硫酸塩(alcohol ethoxysulfate)
AES アルコール エトキシ硫酸塩(alcohol ethoxysulfate)
AGU グルコアミラーゼ活性単位(glucoamylase activity unit)
AkAA アスペルギルス カワチ(Aspergillus kawachii)アルファ‐アミラーゼ
AmyE バシルス スブチリス(B. subtilis)アルファ‐アミラーゼ
AmyR スペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼ
AmyS ゲオバシルス ステアロテルモフィルス(Geobacillus stearothermophilus)アルファ‐アミラーゼ
AS アルコール硫酸塩(alcohol sulfate)
BAA 細菌のアルファ‐アミラーゼ(bacterial α-amylase)
cDNA 相補的DNA(complementary DNA)
CMC カルボキシメチルセルロース(carboxymethylcellulose)
DE デキストロース等量(Dextrose Equivalent)
DI 蒸留された、脱イオンされた(distilled, deionized)
DNA デオキシリボ核酸(deoxyribonucleic acid)
DP3 3つのサブユニットを有する重合度(degree of polymerization with three subunits)
DPn n個のサブユニットを有する重合度(degree of polymerization with n subunits)
DS 又は ds 乾燥固体(dry solid)
DTMPA ジエチルトリアミンペンタ酢酸(diethyltriaminepentaacetic acid)
EC 酵素委員会(enzyme commission for enzyme classification)
EDTA エチレンジアミンテトラ酢酸(ethylenediaminetetraacetic acid)
EDTMPA エチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸(ethylenediaminetetramethylene phosphonic acid)
EO エチレンオキシド(ethylene oxide)
F&HC 繊維及び家庭用ケア(fabric and household care)
GAU グルコアミラーゼ単位(glucoamylase units)
HFCS 高いフルクトーストウモロコシシロップ(high fructose corn syrup)
HFSS 高フルクトースデンプンベースシロップ(high fructose starch based syrup)
IPTG イソプロピル ベータ‐D‐チオガラクトシド(isopropyl β-D-thiogalactoside)
LA ラウリア寒天(Lauria agar)
LB ラウリア培養液(Lauria broth)
LU リパーゼ単位(Lipase Units)
L1T 1位にてロイシン(L)残基がトレオニン(T)残基で置換され、アミノ酸は、当分野で通常知られている1文字の略語により記される。
MW 分子量(molecular weight)
NCBI ナショナルセンターフォーバイオテクノロジーインフォメーション(National Center for Biotechnology Information)
nm ナノメーター(nanometer)
NOBS ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸塩nonanoyloxybenzenesulfonate
NTA ニトリロ三酢酸(nitrilotriacetic acid)
OD 吸光度(optical density)
PCR ポリメラーゼチェーン反応polymerase chain reaction
PEG ポリエチレングリコール(polyethylene glycol)
pI 等電点(isoelectric point)
ppm 百万分の一(parts per million)
PVA ポリ(ビニル アルコール)(poly(vinyl alcohol))
PVP ポリ(ビニルピロリドン)(poly(vinylpyrrolidone))
RAU リファレンスアミラーゼ単位(Reference Amylase Units)
RNA リボ核酸(ribonucleic acid)
SAS 第二級アルカンスルホン酸塩(secondary alkane sulfonates)
1X SSC 0.15 M NaCl, 0.015 M クエン酸ナトリウム, pH 7.0
SSF 同時糖化発酵(simultaneous saccharification and fermentation)
SSU 可溶性デンプン単位、1分あたり放出される1mgのグルコースの還元パウダーに相当
TAED テトラアセチルエチレンジアミン(tetraacetylethylenediamine)
TNBS トリニトロベンゼンスルホン酸(trinitrobenzenesulfonic acid)
TrGA トリコデルマ レーシ(Trichoderma reesei)グルコアミラーゼ
w/v 質量/体積(weight/volume)
w/w 質量/質量(weight/weight)
wt 野生型(wild-type)
μL マイクロリットル(microliter)
μNm マイクロニュートンxメーター(microNewton × meter)
本明細書に記載の方法を実施するのに有用なAmy酵素及びその変異体を提供する。AmyE及びその変異体をコードする核酸も提供し、その核酸を含むベクター及び宿主細胞を提供する。
MFAKRFKTSLLPLFAGFLLLFHLVLAGPAAASAETANKSNE (配列番号17)
の配列を有する追加的N末端アミノ酸とともに自然に発現される。代替的にシグナル配列は異なるAmyE由来バシルス スブチリス種(B. subtilis sp.)シグナル配列でもよく又は異なるタンパク質でもよい。さらに、シグナル配列は異なる種、例えばバシルス リチェニフォルミス(B. licheniformis)由来でもよい。例えば、シグナル配列を特定の宿主細胞においてAmyE又はその変異体の最適な発現を提供するために選択してよい。成熟AmyEはシグナル配列ではないN末端由来追加的な配列がタンパク質分解される結果として生成してよい。例えば、バシルス リチェニフォルミス(B. licheniformis)(「LATリーダー配列」)由来31のアミノ酸残基シグナル配列をAmyE配列とフレームにおいて結合してよい。
AmyE変異体をそれらの核酸及び一次ポリペプチド配列により、3D構造モデリングにより、及び/又はそれらの特異的活性により特徴づけできる。AmyE変異体のさらなる特徴は安定性、Ca2+依存性、pH範囲、酸化安定性、及び熱安定性を含む。ある態様においては、野生型AmyEの性能特徴を維持しながらAmyE変異体は野生型AmyEより高いレベルで発現される。発現及び酵素活性のレベルを当業者に周知の標準試験を用いて評価できる。別の態様においては、変異体は、高温での改善された安定性又は例えば、pH4.0から6.0又はpH8.0から11.0のような多様なpH値での改善された活性のような野生型酵素と比較して改善された性能特徴をあきらかとする。
本明細書に記載の方法により又は当分野にて知られる任意の代替的方法により生成される酵素変異体をコードするDNA配列は、適切なプロモーター、オペレーター、リボゾーム結合部位、翻訳開始シグナル、及び任意にリプレッサー遺伝子又は多様なアクティベーター遺伝子をコードする制御配列を一般的に含む発現ベクターを用いて、酵素の形態で発現できる。
AmyE又はその変異体をコードするDNA配列を保持する組み換え発現ベクターは、便宜的に組み換えDNA手法の施される任意のベクターでよく、ベクターの選択は、しばしば、それが導入される宿主細胞で決まる。つまり、ベクターは自律的に複製するベクターでもよく、即ち、染色体外に存在するベクターでもよく、その複製はプラスミド、バクテリオファージ、又は染色体外因子、小染色体、又は人工染色体のような染色体複製から独立した複製であるものでもよい。あるいは、ベクターは、宿主細胞に導入される場合、宿主細胞染色体に組み込まれ、及び組み込まれてしまった染色体とともに複製されるベクターでもよい。また、組み込まれた遺伝子を抗体の選択又は必須調節遺伝子など他の選択圧により又は必須代謝経路遺伝子の補完により働く増幅可能な構築体の使用により染色体において遺伝子の複数コピーを創製するために増幅できる。
一般的にAmyE又はその変異体が培養培地へ分泌されるならば、宿主細胞において発現する場合有利である。この目的を達成するために、AmyE又はその変異体は発現酵素を培養培地へ分泌させるシグナル配列を含んでよい。所望ならば、このオリジナルシグナル配列を異なるシグナル配列により置換してよく、これは便宜的に個々のシグナル配列をコードするDNA配列の置換により達成される。例えば、AmyEをコードする核酸は図2に示す発現ベクターにおいてバシルス リチェニフォルミス(B. licheniformis)シグナル配列に作動可能に結合する。シグナル配列はすでに詳しく述べている。
ストレプトミセス ムリナス(Streptomyces murinus)のようなストレプトミセス属(Streptomyces)、
ラクトコッカス ラクティス(L. lactis)のようなラクトコッカス種(Lactococcus sp.)を含む乳酸菌種
ラクトバシラス ロイテリ(L. reuteri)を含むラクトバシラス種(Lactobacillus sp.)
リューコノストック種(Leuconostoc sp.)
ペディオコッカス種(Pediococcus sp.)、及び
ストレプトコッカス種(Streptococcus sp.)である。さらに他の有用な宿主は、例えば、バシルス種(Bacillus sp.)A7−7である。あるいは、例えば、シュードモナス科(Pseudomonadaceae)又は大腸菌(E. coli)を含むエンテロバクター科(Enterobacteriaceae)に属するグラム陰性菌を宿主生物体に選択できる。
精製AmyE又はその変異体を調製するために従来の方法を用いてよい。発酵後、発酵培地を得て、原発酵材料残渣を含む微生物細胞及び種々の懸濁した固体物は、アミラーゼ溶液を得るために従来の分離方法によって除かれる。ろ過、遠心分離、マイクロろ過、回転式ドラム真空ろ過、引き続き、限外ろ過、抽出、又はクロマトグラフィー等、一般的に用いられる。
5.1. デンプンプロセス組成物及び使用
ある態様においては、AmyE又はその変異体はデンプン液化及び/又は糖化に用いてよい。プロセスはゼラチン化又は粒状デンプンのスラリーの加水分解、特に粒状デンプンの初期のゼラチン化温度未満の温度で粒状デンプンを可溶性デンプン加水分解物へ加水分解することを含んでよい。デンプンプロセスは甘味料を生産する、燃料用又は飲料用(即ち、飲料用アルコール)アルコールの生産、飲料水の生産、サトウキビの処理、又は所望の有機化合物、例えば、クエン酸、イタコン酸、乳酸、グルコン酸、ケトン、アミノ酸、抗体、酵素、ビタミン、及びホルモンの生産に有用である。デンプンのフルクトースシロップへの転換は通常三つの連続的な酵素的プロセス、液化プロセス、糖化プロセス、及び異性化プロセスからなる。
G137A及びG139A(Chen他、(1996) Prot. Eng. 9: 499-505)、
D257E及びD293E/Q (Chen他、 (1995)Prot. Eng. 8: 575-582)、
N182(Chen他、 (1994) Biochem. J. 301: 275-281)、
ジスルフィド結合、A246C(Fierobe他、 (1996)Biochemistry, 35: 8698-8704)及び
A435及びS436位へのPro残基の導入(Li他、 (1997)Protein Eng. 10: 1199-1204)である。他の考えられるグルコアミラーゼはタラロミセス(Talaromyces)グルコアミラーゼ、特に、
タラロミセス エマーソニー(Talaromyces emersonii)(WO 99/28448)、
タラロミセス レイセタヌス(Talaromyces leycettanus) (U.S. Patent No. RE 32,153)、
タラロミセス デュポンチ(Talaromyces duponti)、又は
タラロミセス サーモフィリス(Talaromyces thermophilus)(U.S. Patent No. 4,587,215)
由来のものである。考えられる細菌由来グルコアミラーゼはクロストリジウム(Clostridium)属由来のグルコアミラーゼであり、特に、
クロストリジウム サーモアミロリティカム(C. thermoamylolyticum)(EP 135138)及び
クロストリジウム サーモヒドロスルフリカム(C. thermohydrosulfuricum)(WO 86/01831)
である。適切なグルコアミラーゼはアスペルギルス オリザエ(Aspergillus oryzae)由来グルコアミラーゼを含み、WO 00/04136中配列番号2に示されるアミノ酸配列と50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、又は90%の相同性を有するグルコアミラーゼなどである。また、適切なグルコアミラーゼは、AMG 200L、AMG 300L、SAN(商標)SUPER及びAMG(商標)E(Novozymes)、OPTIDEX(商標)300(Genencor Division, Danisco US Inc.製)、 AMIGASE(商標)及びAMIGASE(商標)PLUS (DSM製)、G‐ZYME(商標)G900(Enzyme Bio‐Systems製)、G‐ZYME(商標)G990 ZR(アスペルギルス ニガー(A. niger)グルコアミラーゼ及び低プロテアーゼ含有量)など、商業的に入手可能なグルコアミラーゼである。
i)AmyE又はその変異体とデンプン含有材料を液化させる、
ii)得られる液化マッシュを糖化させる、及び
iii)発酵生物存在下(ii)段階で得られる材料を発酵する
ことを含む。さらに、プロセスは任意にエタノールを回収することを含む。発酵の間、エタノール含有量は少なくとも約7%、少なくとも約8%、少なくとも約9%、少なくとも約10%、少なくとも約11%、少なくとも約12%、少なくとも約13%、少なくとも約14%、少なくとも約15%、又は少なくとも約16%のエタノールに達する。
例えば、本明細書に記載のAmyE又はその変異体は、食器を洗浄する際に使用するための洗剤組成物又は他の洗浄組成物中に製剤設計されてよい。これらはゲル、粉、又は液体でよい。組成物はアルファ‐アミラーゼ変異体単独、他のデンプン分解酵素、他の洗浄酵素、及び他の洗浄組成物に共通する成分を含んでよい。
実施態様によれば、AmyE又はその変異体の一以上を洗剤組成物の成分としてよい。そのような場合、非粉塵化(dusting)粒質物、安定化した液体、又は保護された酵素の形態での洗浄組成物を含んでもよい。非粉塵化(dusting)粒質物は例えば米国特許第4,106,991、及び4,661,452に記載されるように生産されてよく、任意的に周知の方法で表面を覆ってもよい。ワックスのコーティング原料の例は、ポリ(エチレンオキシド)産物、平均分子量1、000から20、000である(ポリエチレングリコール、PEG)、16から50のエチレンオキシドの単位を有するエトキシ化ノニルフェノール、12から20炭素原子を含むアルコール及び15から80のエチレンオキシド単位が存在するエトキシ化脂肪アルコール、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪酸のモノ‐、ジ‐、トリグリセリドである。流動層技術による適用に有用なフィルムコーティング材料の例は、例えばGB特許第1483591に記載される。例えば、液体酵素の調製物は、確立した方法に従って、プロピレングリコールのようなポリオール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を添加することにより安定化される。他の酵素の安定化剤は周知の技術である。被保護酵素を例えば、US 5,879,920(Danisco A/S)又はEP 238216に記載される方法に従って調製してよい。ポリオールはタンパク質の安定化剤としても、タンパク質溶解性の改善としても長い間認められている。例えば、 Kaushik他、J. Biol. Chem. 278: 26458−65 (2003)及び そこに引用されている文献Monica Conti他、J.Chromatography 757: 237−245 (1997)を参照願いたい。
また、本発明は、一以上のAmyE又はその変異体を用いる布地を処理する(例えば、織物を湯通しする)組成物及び方法を含む。AmyE又はその変異体は、任意の布地処理方法を用いてよく、それは周知技術である(例えば、米国特許第6,077,316を参照願いたい)。例えば、ある態様においては、布地の手触り及び外観が、溶液中布地を酵素変異体と接触することを含む方法により改善される。ある態様においては、布地を加圧下その溶液で処理する。
また、本明細書に記載のAmyE又はその変異体を焼成及び食品調製のための組成物及び方法に用いてよい。焼成及び食品生産ための商業用及び家庭用の使用には、穀粉中のアルファ‐アミラーゼ活性の適切なレベルを維持することが重要である。あまりに高い活性のレベルは粘性が高く及び/又はたるんだ及び商品にならない製品をもたらすが、不十分なアルファ‐アミラーゼ活性を有する穀粉は適切な酵母機能のための十分な糖を含有せず、その結果乾燥したもろいパンとなる。従って、AmyE又はその変異体は、それ自身又は他のアルファ‐アミラーゼと組み合わせて、穀粉中内因性アルファ‐アミラーゼ活性のレベルを増大するために穀粉に添加してよい。AmyE又はその変異体は、デンプン存在下、例えば30−90℃、50−80℃、55−75℃、又は60−70℃の範囲の最適温度を有する。最適温度はpH5.5にて可溶性デンプン1%溶液中で測定できる。
アスペルギルス(Aspergillus)属又はその種のアスペルギルス ニガー(A. niger)のような、
タマホコリカビ(Dictyostelium)属又はその種のキイロタマホコリカビ(D. discoideum)のような、
ムコール(Mucor)属又はその種のムコール ジャバニカス(M. javanicus)、ムコール ムセド(M. mucedo)、ムコール サブチリシムス(M. subtilissimus)のような、
ニューロスポラ(Neurospora)属又はその種のニューロスポラ クラッサ(N. crassa)のような、
リゾムコール(Rhizomucor)属又はその種のリゾムコール プシラス(R. pusillus)、
リゾプス(Rhizopus)属又はその種のリゾプス アルヒズス(R. arrhizus)、リゾプス ジャポニカス(R. japonicus)、リゾプス ストロニファー(R. stolonifer)のような、
スクレロティニア(Sclerotinia)属又はその種のスクレロティニア リベルチアナ(S. libertiana)のような、
トリコフィトン(Trichophyton)属又はその種のトリコフィトン ルブルム(T. rubrum)のような、
ウェトゼリニア(Whetzelinia)属又はその種のウェトゼリニア スクレロチニア(W.sclerotiorum)のような、
バシルス(Bacillus)属又はその種のバシルス メガトリウム(B. megaterium)、バシルス スブチリス(B. subtilis)のような、
サイトロバクター(Citrobacter)属又はその種のサイトロバクター フレウンディイ(C. freundii)のような、
エンテロバクター(Enterobacter)属又はその種のエンテロバクター アエロゲネス(E. aerogenes)、エンテロバクター クロアカエ(E. cloacae)のような、
エドワージエラ(Edwardsiella)属又はその種のエドワージエラ タルダ(E. tarda)のような、
エルウィニア(Erwinia)属又はその種のエルウィニア ヘルビコラ(E. herbicola)のような、
エシェリキア(Escherichia)属又はその種の大腸菌(E. coli)のような、
クレブシエラ(Klebsiella)属又はその種のクレブシエラニューモニアエ(K. pneumoniae)のような、
プロテウス(Proteus)属又はその種のプロテウス ブルガリス(P. vulgaris)のような、
プロビデンシア(Providencia)属又はその種のプロビデンシア スチュアーティイ(P. stuartii)のような、
サルモネラ(Salmonella)属又はその種のサルモネラティフィムリウム(S. typhimurium)のような、
セラチア(Serratia)属又はその種のセラチア リクファシエンス(S. liquefasciens)、セラチア マルセッセンス(S. marcescens)のような、
シゲラ(Shigella)属又はその種のシゲラ フレクスネリ(S. flexneri)のような、
ストレプトミセス(Streptomyces)属又はその種のストレプトミセス バイオラセオルバー(S. violeceoruber)のような、
エルシニア(Yersinia)属又はその種のエルシニアエンテロコリティカ(Y. enterocolitica)のような、
フザリウム(Fusarium)属又はその種のフザリウム オキシスポラム(Fusarium oxysporum)(例えば、DSM2672菌株)のようなものでよい。
a)脂質でコートされるアルファ‐アミラーゼ粒子の調製であって、実質的にアルファ‐アミラーゼ粒子の100%がコーティングされ、
b)穀粉を含むパン生地を混合し、
c)混合が完全になる前に脂質コーティングアルファ‐アミラーゼをパン生地に添加し、及び脂質膜がアルファ‐アミラーゼを放出する前に混合を終了し、
d)パン生地をプルーフィングし、e)パン生地を焼いて焼成品を提供することであって、アルファ‐アミラーゼは混合、プルーフィング、及び焼成段階では不活性であり、焼成品中にて活性である。
配列番号1のAmyE又はC末端欠失のAmyE変異体、AmyE‐tr(配列番号2)、をコードする核酸を米国特許第5,024,943に記載のように、バシルス スブチリス(B. subtilis)pHPLT発現ベクターへクローン化する。図2はAmyE‐trをコードする核酸を含むベクターを示す。
「ori−pUB」はpUB110由来複製のオリジンである。
「reppUB」はpUB110由来レプリカーゼ遺伝子である。
「neo」はpUB110由来ネオマイシン/カナマイシン耐性遺伝子である。
「bleo」はブレオマイシン耐性マーカーである。
「Tlat」はバシルス リチェニフォルミス(B. licheniformis)アミラーゼ由来転写ターミネーターである。
配列番号: 18: プライマーPSTAMYE-F'
CTTCTTGCTGCCTCATTCTGCAGCTTCAGCACTTACAGCACCGTCGATCAAAAGCGGAAC 3'
配列番号: 19: プライマー AMYENOPST-R'
CTGGAGGCACTATCCTGAAGGATTTCTCCGTATTGGAACTCTGCTGATGTATTTGTG
配列番号: 20: プライマー AMYENOPST-F'
CACAAATACATCAGCAGAGTTCCAATACGGAGAAATCCTTCAGGATAGTGCCTCCAG
配列番号: 21: プライマーHPAIAMYE-R'
CAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTCAATGGGGAAGAGAACCGCTTAAGCCCGAGTC
配列番号: 22: プライマー HPAIAMYE-R'
CAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTCAATCAGGATAAAGCACAGCTACAGACCTGG
配列番号: 23: プライマー AMYE SEQ-F'
TACACAAGTACAGTCCTATCTG 3'
配列番号: 24: プライマー AMYE SEQ-F'
CATCCTCTGTCTCTATCAATAC 3'
AmyE完全長及び欠失クローンに対する形質転換体を10μg/mLネオマイシン、1%不溶性デンプン含有LA上で選別し、37℃にて終夜インキュベートした。コロニーの周りのクリアリング(又はハロー)を示す形質転換体を選別し、バイアルを更なる研究のために作成した。形質転換体の前培養を10μg/mLネオマイシン含有LBにて8時間行った。それから30μLのこの前培養物を10μg/mLのネオマイシン及び5mMCaCl2を補給した30mLの培養培地(下記に記載)を満たした250mLのフラスコに添加した。培養培地は主要な窒素源として尿素、主な炭素源としてグルコース、及び活発な細胞増殖のために1%ソイトンを補給したMOPs緩衝液に基づく富栄養半規定培地であった。振盪フラスコを250rpmにて撹拌しながら37℃にて60−65時間インキュベートした。培養物を円錐管中5000rpmにて20分間遠心分離により採取した。AmyE完全長及びAmyE欠失タンパク質両方とも高いレベルにて発現したので、培養上清をさらなる精製をせずに試験ように用いた。
次の試験を下記に示すように実施例中にもちいた。下記に与えられる手順からのずれはいずれも実施例に示される。これらの実験において、分光光度計を反応終了後形成される生成物の吸光度を測定するために用いた。
サンプルの上清におけるタンパク質濃度をブラッドフォードクイック スタート(商標)染色試薬(Bio-Rad、California)を用いて測定した。サンプルを280rpm及び加湿空気で振盪しながら37℃にて3日間マイクロタイタープレート(MTPs)中で培養した培養物から培地をろ過することにより得た。10μLのろ過ずみ培地を第二のMTPのウェルにおいて200μLのブラッドフォードクイック スタート(商標)染色試薬に混合した。混合後、MTPsを室温にて少なくとも10分間インキュベートした。気泡を除き、吸光度(OD)を595nmで測定した。タンパク質濃度を決定するために、バックグラウンド値(つまり、イノキュレートしていないウェルから)をサンプル値から差し引いた。
400ppmの尿素を含むIllinois River Energyから入手した液化物(31%DS)の二つのバッチをpH4.3及びpH5.8(5N H2SO4を用いて)に調整した。100gの基質を125mLの三角フラスコに添加した。AmyE‐tr及びスペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼを0.20mg/g DSにて投与した。発酵をDI水中45分まで前もって水を補給した0.2mlの10%(w/v)レッドスターエタノールレッド酵母で植菌した。フラスコを48時間の発酵で320rpmにて撹拌棒を用いて32℃にてインキュベートした。
400ppmの尿素を含む32%DSトウモロコシ粉基質の二つのバッチをpH4.3及びpH5.8(5N H2SO4を用いて)にて調製した。100gの基質を125mL三角フラスコに添加した。完全長AmyE(配列番号1)及びAmyE‐tr(配列番号2)を0.20mg/g DSにて投与し、アスペルギルス カワチ(Aspergillus kawachii)アルファ‐アミラーゼ(AkAA、配列番号6)を1.5SSU/g DSにて投与した。AkAAのアミノ酸配列は米国特許第7,332,319の配列番号4に記載されている。また、全粒トウモロコシを加水分解するAmyE及びAmyE‐trの能力を0.5GAU/gのトリコデルマ レーシ(T. reesei)グルコアミラーゼ(TrGA、配列番号7)と1.5SSU/gDSアスペルギルス カワチ(A. kawachii)の混合物と比較した。TrGAのアミノ酸配列はWO 2006/060062の配列番号3に記載されている。発酵をDI水中45分まで前もって水を補給した0.2mlの10%(w/v)レッドスターエタノールレッド酵母で植菌した。フラスコを72時間の発酵で300rpmにて撹拌棒を用いて32℃にてインキュベートした。
マルトース及びマルトヘプタオースの加水分解
0.5%マルトース又はマルトヘプタオース溶液を各実験で特定するように、50mM酢酸ナトリウム、pH4.5又は5.6又は50mMマレイン酸pH5.6で調製した。すべての酵素サンプルを1mg/mLに最初に希釈した。反応混合物を最終酵素濃度が1ppmになるように適切な基質溶液を用いて酵素を希釈することにより調製し、それから200μLのアリコートを滅菌スクリュー管に移し、37℃インキュベーターに置いた。反応を10mM水酸化ナトリウムへ10倍希釈することにより示した時間にて停止した。
不溶性顆粒デンプンの加水分解を測定するために精製AmyE(24.5g/L)を最終濃度が20.4ppmになるようにマレイン酸緩衝液pH5.6に希釈した。それからタンパク質を最終濃度が1ppmになるようにマレイン酸緩衝液pH5.6に調製した5%トウモロコシ粉溶液に添加し、混合物を32℃にてシェーカーでインキュベートした。サンプルを定期的に採取し、50mMNaOHへ10倍希釈し、反応を止めた。
グルコース及び基質の他の分解産物の生成をDionex PA-1カラム及び電気化学的検出器を備えるAgilent 1100 LCシステムを用いてHPLCにより分析した。10μLのサンプルを注入し、NaOH及び酢酸ナトリウムの勾配を1.0mL/分及び25℃にて適用した。サッカライドの分布をすでに実施したスタンダードから測定した。溶出プロファイルを45分にわたって得た。生成されたグルコースの定量(g/Lとして述べる)を確認されたグルコース標準スタンダード(Sigma, MO)を用いて得、糖のピーク面積を実際の糖濃度へ変換した。
従来のエタノール発酵における欠失AmyEの性能を実施例2.2に記載の従来のエタノール発酵試験を用いてIllinois River Energy液化物(31%DS)で試験した。AmyE‐tr(配列番号2)の性能をpH4.3及びpH5.8にてスペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼ(AmyR、配列番号5)と比較した。発酵を48時間行った。AmyE‐tr及びスペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼを0.2mg/g DSで投与した。図3に示すように、pH5.8にてAmyE‐trにより生成された最終エタノール収率は12.0%(v/v)である。pH4.3でのAmyE‐trは7.3%(v/v)の最終エタノール収率であった。スペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼ存在下最終エタノール収率はpH4.3にて2.7%(v/v)及びpH5.8にて3.9%(v/v)であった。すなわち、AmyE‐trはスペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼより従来のエタノール発酵の液化物においてエタノールを顕著に生成する。また、この実施例はAmyE‐trがpH4.3よりpH5.8にてより多くのエタノールを生成することも証明する。
pH4.3及びpH5.8にて不溶性顆粒状(未処理)デンプンのエタノールへの加水分解を触媒するAmyE(配列番号1)及びAmyE‐tr(配列番号2)の能力を実施例2.3に記載の全粒トウモロコシ試験でのエタノール発酵を用いて比較した。AmyE及びAmyE‐trのエタノール生成性能をアスペルギルス カワチ(A. kawachii)アルファ‐アミラーゼ(AkAA、配列番号6)を1.5SSU/g用量にて、0.5GAU/g用量のトリコデルマ レーシ(T. reesei)グルコアミラーゼ(TrGA、配列番号7)と1.5SSU/gDS用量のアスペルギルス カワチ(A. kawachii)アルファ‐アミラーゼの混合物と比較した。AmyE完全長及び欠失AmyE両方とも0.2mg/g DSの投与量であった。
pH4.5及びpH5.6(酢酸ナトリウム緩衝液を用いて)にてマルトースをグルコースへ転換するAmyEの能力を実施例2.4に記載のグルコース発酵試験を用いて試験した。反応を2、5、及び8日後分析した。図5に示すように、AmyE(配列番号1)、AmyE‐tr(配列番号2)、及びAmy31A(配列番号3)はマルトースをグルコースへ効率的に転換し、ゲオバシルス ステアロテルモフィルス(Geobacillus stearothermophilus)アルファ‐アミラーゼ、AmyS(配列番号4、34アミノ酸リーダー配列を用いて示される)がこれらの条件下にて最少量のグルコース形成を示した。
DP7又は不溶性、未処理顆粒状デンプンの加水分解を触媒するAmyE(配列番号1)及びAmyE‐tr(配列番号2)の能力を試験した。不溶性デンプンから生成されるサッカライドの検出のために用いるHPLC法は実施例2.4に記載する。分解産物を反応を開始後多様な時間にてHPLC分析により定量した。
配列リスト
配列番号1:完全長バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)AmyEアミノ酸配列。天然シグナル配列を示していない。
配列番号2:欠失バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)AmyE(AmyE−tr)アミノ酸配列。天然シグナル配列を示していない。
配列番号3: バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)アルファ‐アミラーゼ変異体Amy31Aアミノ酸配列。(UniProtKB/TrEMBLアクセション番号O82953)天然シグナル配列を太字で示す。
配列番号4:欠失ゲオバシルス ステアロテルモフィルス(Geobacillus stearothermophilus)アルファ‐アミラーゼ(AmyS, a/k/a 「エチル3(Ethyl3)」) タンパク質配列。シグナル配列を太字で示す。
配列番号5:ゲオバシルス ステアロテルモフィルス(Geobacillus stearothermophilus)アルファ‐アミラーゼ (AmyR、スペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼ) アミノ酸配列。
配列番号 6:アスペルギルス カワチ(Aspergillus kawachii)アルファ‐アミラーゼ (AkAA)アミノ酸配列。
配列番号7:トリコデルマ レーシ(Trichoderma reesei)グルコアミラーゼ(TrGA)アミノ酸配列(WO 2006/060062の配列番号3)。プロ配列をイタリック体で示す。
配列番号8:スペザイム(商標)フレッド(SPEZYME(商標)FRED)アルファ‐アミラーゼアミノ酸配列。
配列番号9: 配列番号1のAmyEをコードするヌクレオチド配列。
配列番号10: AmyE-tr (配列番号2)をコードするヌクレオチド配列。
配列番号 11:バシルス スブチリス(B. subtilis)Amy31A (配列番号3)をコードするヌクレオチド配列。
配列番号12:ゲオバシルス ステアロテルモフィルス(Geobacillus stearothermophilus)AmyS (配列番号4)をコードするヌクレオチド配列。
配列番号13:スペザイム(商標)エクストラ(Spezyme(商標)Xtra)アミラーゼ遺伝子(配列番号5)のヌクレオチド配列。
配列番号: 14:アスペルギルス カワチ(Aspergillus kawachii)アルファ‐アミラーゼ(AkAA)遺伝子(配列番号:6)のヌクレオチド配列。
配列番号15:トリコデルマ レーシ(Trichoderma reesei)グルコアミラーゼ遺伝子(配列番号: 7)のヌクレオチド配列。
配列番号16: AmyL遺伝子のヌクレオチド配列(配列番号8)。
配列番号17:配列番号1のAmyEの天然シグナル配列。
MFAKRFKTSLLPLFAGFLLLFHLVLAGPAAASAETANKSNE
配列番号18: プライマー PSTAMYE-F'
CTTCTTGCTGCCTCATTCTGCAGCTTCAGCACTTACAGCACCGTCGATCAAAAGCGGAAC'
配列番号19:プライマー AMYENOPST-R'
CTGGAGGCACTATCCTGAAGGATTTCTCCGTATTGGAACTCTGCTGATGTATTTGTG'
配列番号20:プライマー AMYENOPST-F'
CACAAATACATCAGCAGAGTTCCAATACGGAGAAATCCTTCAGGATAGTGCCTCCAG'
配列番号21:プライマー HPAIAMYE-R'
CAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTCAATGGGGAAGAGAACCGCTTAAGCCCGAGTC'
配列番号 22:プライマー HPAIAMYE-R'
CAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTCAATCAGGATAAAGCACAGCTACAGACCTGG'
配列番号23:プライマー AMYE SEQ-F'
TACACAAGTACAGTCCTATCTG'
配列番号24:プライマー AMYE SEQ-F'
CATCCTCTGTCTCTATCAATAC
Claims (25)
- (i)バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)アルファ‐アミラーゼ(AmyE)をオリゴサッカロイド又はポリサッカロイド基質と接触させること、及び
(ii)基質溶液をグルコースを含む溶液へ転換させること、
を含む、
バシルス スブチリス(Bacillus. subtilis)アルファ‐アミラーゼ(AmyE)を用い、オリゴサッカロイド又はデンプン基質溶液からグルコースを生成する方法であり、
ここで、AmyEが配列番号1のAmyEに少なくとも約85%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む方法。 - オリゴサッカロイド溶液が主にマルトヘプタオース(DP7)又は高級オリゴサッカロイドを含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- デンプン溶液が未処理のトウモロコシデンプンであることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 転換させる間に基質溶液のpHが約pH5.6から約pH5.8であることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 転換させることが基質溶液をグルコアミラーゼと接触させることを含まないことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 工程(i)がデンプン基質をグルコアミラーゼと接触させることをさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- グルコアミラーゼを約0.5GAU/g ds未満の濃度で添加することを特徴とする請求項6に記載の方法。
- グルコアミラーゼを約0.02GAU/g ds未満の濃度で添加することを特徴とする請求項7に記載の方法。
- グルコースを含む溶液が少なくとも約0.2g/Lのグルコースを含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- グルコースを含む溶液が少なくとも約0.4g/Lのグルコースを含むことを特徴とする請求項9に記載の方法。
- グルコースを含む溶液が少なくとも約1.4g/Lのグルコースを含むことを特徴とする請求項10に記載の方法。
- AmyEが配列番号1、配列番号2、配列番号3、NCBI アクセション番号 ABW75769、NCBI アクセション番号 ABK54355、NCBI アクセション番号 AAF14358、NCBI アクセション番号 AAT01440、NCBI アクセション番号 AAZ30064、NCBI アクセション番号 NP_388186、NCBI アクセション番号 AAQ83841、及びNCBI アクセション番号BAA31528に記載のアミノ酸配列を含むAmyEからなる群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- (iii)グルコースを含む溶液を発酵させて、エタノールを生成することをさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- エタノール濃度が少なくとも約6%v/vのエタノールであることを特徴とする請求項13に記載の方法。
- エタノール濃度が少なくとも約14%v/vのエタノールであることを特徴とする請求項14に記載の方法。
- (iii)グルコースを含む溶液をグルコース イソメラーゼと接触させて、高フルクトーストウモロコシシロップを生成することをさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- (i)織物をAmyEに接触させること、及び
(ii)織物を湯通しすること
を含む、
織物を湯通しする方法であり、
ここで、AmyEが配列番号1のAmyEと少なくとも約85%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む方法。 - (i)洗浄すべき物をAmyEを含む洗剤組成物に接触させること、及び
(ii)洗浄すべき物を洗浄させること
を含む、
物を洗浄する方法であり、
ここで、AmyEが配列番号1のAmyEと少なくとも約85%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む方法。 - 洗浄すべき物が、食器又は衣料であることを特徴とする請求項18に記載の方法。
- 洗剤組成物が非粉塵粒質物又は安定化液体であることを特徴とする請求項18に記載の方法。
- 洗剤組成物がセルラーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼ、又はそれらの組み合わせを含むことを特徴とする請求項18に記載の方法。
- アミラーゼがアルファ‐アミラーゼ、ベータ‐アミラーゼ、又はグルコアミラーゼであることを特徴とする請求項21に記載の方法。
- 洗剤組成物がリパーゼ、ペルオキシダーゼ、マンナナーゼ、ぺクチン リアーゼ、又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴とする請求項18に記載の方法。
- 洗剤組成物が手作業又は自動食器洗浄洗剤組成物であることを特徴とする請求項18に記載の方法。
- 洗剤組成物がプロテアーゼ、リパーゼ、ペルオキシダーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、マンナナーゼ、ペクチン リアーゼ、又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴とする請求項24に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US5953508P | 2008-06-06 | 2008-06-06 | |
US61/059,535 | 2008-06-06 | ||
PCT/US2009/046279 WO2009149271A2 (en) | 2008-06-06 | 2009-06-04 | Production of glucose from starch using alpha-amylases from bacillus subtilis |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011522544A true JP2011522544A (ja) | 2011-08-04 |
JP5560266B2 JP5560266B2 (ja) | 2014-07-23 |
Family
ID=41397484
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011512655A Expired - Fee Related JP5560266B2 (ja) | 2008-06-06 | 2009-06-04 | バシルススブチリス(B.subtilis)由来アルファ‐アミラーゼを用いるデンプンからのグルコースの生産 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9040278B2 (ja) |
EP (2) | EP2310521A2 (ja) |
JP (1) | JP5560266B2 (ja) |
CN (1) | CN102112621A (ja) |
BR (1) | BRPI0913378A2 (ja) |
CA (1) | CA2726630A1 (ja) |
MX (1) | MX2010013108A (ja) |
WO (1) | WO2009149271A2 (ja) |
Families Citing this family (94)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BRPI0906449A2 (pt) | 2008-01-04 | 2015-07-14 | Univ Toledo | Métodos para fermentação de açúcar xilose e hexose. |
WO2009149283A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Danisco Us Inc. | Saccharification enzyme composition |
CN102112621A (zh) | 2008-06-06 | 2011-06-29 | 丹尼斯科美国公司 | 用来自枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶从淀粉产生葡萄糖 |
BRPI0915606A2 (pt) * | 2008-06-06 | 2021-03-09 | Danisco Us Inc. | Alfa-amilases variantes de bacillus subtilis e métodos de uso das mesmas |
CA2778471A1 (en) * | 2009-10-23 | 2011-04-28 | Danisco Us Inc. | Methods for reducing blue saccharide |
WO2011133536A1 (en) * | 2010-04-19 | 2011-10-27 | The University Of Toledo | Aldose-ketose transformation for separation and/or chemical conversion of c6 and c5 sugars from biomass materials |
GB201011513D0 (en) | 2010-07-08 | 2010-08-25 | Danisco | Method |
BR112013027170A2 (pt) | 2011-04-29 | 2017-06-20 | Danisco Us Inc | processo em ph único para liquefação e sacarificação de amido para xaropes de glicose de densidade alta |
US8951764B2 (en) | 2011-08-05 | 2015-02-10 | Danisco Us Inc. | Production of isoprenoids under neutral pH conditions |
EP2831258A2 (en) | 2012-03-30 | 2015-02-04 | Danisco US Inc. | Methods of making fermentable sugar |
US9315831B2 (en) | 2012-03-30 | 2016-04-19 | Danisco Us Inc. | Direct starch to fermentable sugar as feedstock for the production of isoprene, isoprenoid precursor molecules, and/or isoprenoids |
CN104321437A (zh) * | 2012-05-11 | 2015-01-28 | 丹尼斯科美国公司 | 使用来自棒曲霉(ASPERGILLUS CLAVATUS)的α-淀粉酶进行糖化 |
CN104870637A (zh) | 2012-12-07 | 2015-08-26 | 丹尼斯科美国公司 | 组合物及使用方法 |
WO2014164800A1 (en) * | 2013-03-11 | 2014-10-09 | Danisco Us Inc. | Alpha-amylase combinatorial variants |
WO2014159929A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abengoa Bioenergy New Technologies, Llc | Method for adding enzymes to obtain high ethanol yield from cereal mash |
WO2015021601A1 (en) * | 2013-08-13 | 2015-02-19 | Danisco Us Inc. | Simultanenous liquifaction and malto-saccharification |
EP3390626A4 (en) * | 2015-12-18 | 2019-08-14 | BASF Enzymes, LLC | LIQUID FORMULATION OF ALPHA-AMYLASE |
EP3275987A1 (en) | 2016-07-26 | 2018-01-31 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3275986B1 (en) | 2016-07-26 | 2020-07-08 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3275989A1 (en) | 2016-07-26 | 2018-01-31 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3275985A1 (en) | 2016-07-26 | 2018-01-31 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3275988B1 (en) | 2016-07-26 | 2020-07-08 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
MX2019006421A (es) | 2016-12-02 | 2019-08-01 | Procter & Gamble | Composiciones de limpieza que incluyen enzimas. |
WO2018102479A1 (en) | 2016-12-02 | 2018-06-07 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions including enzymes |
EP3339423A1 (en) | 2016-12-22 | 2018-06-27 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
FI3357994T3 (fi) | 2017-02-01 | 2023-11-22 | Procter & Gamble | Amylaasivariantteja käsittäviä puhdistuskoostumuksia |
EP3502227B1 (en) | 2017-12-19 | 2024-09-04 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3502244A1 (en) | 2017-12-19 | 2019-06-26 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3502246A1 (en) | 2017-12-19 | 2019-06-26 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3502245A1 (en) | 2017-12-19 | 2019-06-26 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3530743A1 (en) | 2018-02-21 | 2019-08-28 | Cambridge Glycoscience Ltd | Method of production |
JP2021512986A (ja) | 2018-02-28 | 2021-05-20 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーThe Procter & Gamble Company | 洗浄方法 |
US20190264139A1 (en) | 2018-02-28 | 2019-08-29 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions |
EP3810769A1 (en) | 2018-06-19 | 2021-04-28 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
EP3810768A1 (en) | 2018-06-19 | 2021-04-28 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
MX2021001716A (es) | 2018-08-15 | 2021-05-31 | Cambridge Glycoscience Ltd | Composiciones novedosas, su uso y metodos para su formacion. |
CN109022520B (zh) * | 2018-09-18 | 2023-05-05 | 上海立足生物科技有限公司 | 一种阿洛酮糖的生产工艺 |
CN109022521B (zh) * | 2018-09-18 | 2023-05-05 | 上海立足生物科技有限公司 | 一种由淀粉制备d-阿洛酮糖的方法 |
US20220259528A1 (en) * | 2018-10-22 | 2022-08-18 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Enzymes for infusion mashing in adjunct brewing technical field |
CN109735480B (zh) * | 2019-02-27 | 2021-11-12 | 光明乳业股份有限公司 | 一种合成乳酰-n-新四糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用 |
JP7275297B2 (ja) | 2019-03-14 | 2023-05-17 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー | 酵素を含むクリーニング組成物 |
CA3127169A1 (en) | 2019-03-14 | 2020-09-17 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising enzymes |
CA3127171A1 (en) | 2019-03-14 | 2020-09-17 | The Procter & Gamble Company | Method for treating cotton |
EP3741283A1 (en) | 2019-05-22 | 2020-11-25 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing method |
EP3976775A1 (en) | 2019-05-24 | 2022-04-06 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
BR112021024243A2 (pt) * | 2019-06-05 | 2022-04-12 | Danisco Us Inc | Métodos para melhorar o teor de aminoácido de produtos de alimentação animal |
JP7326497B2 (ja) | 2019-06-24 | 2023-08-15 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー | アミラーゼバリアントを含む洗浄組成物 |
CN114727642A (zh) | 2019-08-16 | 2022-07-08 | 剑桥糖质科学有限公司 | 处理生物质以生产寡糖的方法和相关组合物 |
US20210122998A1 (en) | 2019-10-24 | 2021-04-29 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition comprising an amylase |
US11492571B2 (en) | 2019-10-24 | 2022-11-08 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition comprising a protease |
CN111220604B (zh) * | 2019-12-06 | 2022-03-15 | 东北农业大学 | 一种肉制品中总淀粉含量的测定方法 |
EP3835396A1 (en) | 2019-12-09 | 2021-06-16 | The Procter & Gamble Company | A detergent composition comprising a polymer |
CN111057688B (zh) * | 2019-12-11 | 2022-09-23 | 上海交通大学 | 一种制备n-乙酰氨基半乳糖转移酶的方法 |
JP2023506464A (ja) | 2019-12-12 | 2023-02-16 | ケンブリッジ グリコサイエンス エルティーディー | 低糖の多相食料品 |
EP3862412A1 (en) | 2020-02-04 | 2021-08-11 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition |
CN111718921B (zh) * | 2020-06-05 | 2022-03-25 | 江南大学 | 麦芽三糖淀粉酶突变体 |
WO2021247801A1 (en) | 2020-06-05 | 2021-12-09 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing a branched surfactant |
WO2022031310A1 (en) | 2020-08-04 | 2022-02-10 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing method |
WO2022031312A1 (en) | 2020-08-04 | 2022-02-10 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing method and pack |
CN116096846A (zh) | 2020-08-04 | 2023-05-09 | 宝洁公司 | 自动盘碟洗涤方法 |
WO2022031309A1 (en) | 2020-08-04 | 2022-02-10 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing method |
CN112156719B (zh) * | 2020-08-26 | 2022-02-22 | 夏文杰 | 一种两性糖脂生物表面活性剂及其制备方法 |
CA3196363A1 (en) | 2020-10-29 | 2022-05-05 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions containing alginate lyase enzymes |
EP4001388A1 (en) | 2020-11-17 | 2022-05-25 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing method with amphiphilic graft polymer in the rinse |
US20220169952A1 (en) | 2020-11-17 | 2022-06-02 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing composition comprising amphiphilic graft polymer |
CA3197110A1 (en) | 2020-11-17 | 2022-05-27 | Patrick Firmin August Delplancke | Automatic dishwashing method with alkaline rinse |
EP4006131A1 (en) | 2020-11-30 | 2022-06-01 | The Procter & Gamble Company | Method of laundering fabric |
WO2023225459A2 (en) | 2022-05-14 | 2023-11-23 | Novozymes A/S | Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections |
JP2023551014A (ja) | 2020-12-23 | 2023-12-06 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 両親媒性アルコキシル化ポリアミン及びそれらの使用 |
CA3199985A1 (en) | 2021-03-15 | 2022-09-22 | Lars Lehmann Hylling Christensen | Cleaning compositions containing polypeptide variants |
CA3211422A1 (en) | 2021-05-05 | 2022-11-10 | Neil Joseph Lant | Methods for making cleaning compositions and detecting soils |
EP4086330A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-09 | The Procter & Gamble Company | Surface treatment |
EP4108767A1 (en) | 2021-06-22 | 2022-12-28 | The Procter & Gamble Company | Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes |
EP4123007A1 (en) | 2021-07-19 | 2023-01-25 | The Procter & Gamble Company | Fabric treatment using bacterial spores |
EP4123006A1 (en) | 2021-07-19 | 2023-01-25 | The Procter & Gamble Company | Composition comprising spores and pro-perfume materials |
WO2023064749A1 (en) | 2021-10-14 | 2023-04-20 | The Procter & Gamble Company | A fabric and home care product comprising cationic soil release polymer and lipase enzyme |
EP4194537A1 (en) | 2021-12-08 | 2023-06-14 | The Procter & Gamble Company | Laundry treatment cartridge |
EP4194536A1 (en) | 2021-12-08 | 2023-06-14 | The Procter & Gamble Company | Laundry treatment cartridge |
CA3238839A1 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | The Procter & Gamble Company | Home care composition |
WO2023114794A1 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition comprising a protease |
CN118369413A (zh) | 2021-12-16 | 2024-07-19 | 宝洁公司 | 包含淀粉酶的家庭护理组合物 |
US20240166973A1 (en) | 2021-12-16 | 2024-05-23 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing composition comprising a protease |
EP4273209A1 (en) | 2022-05-04 | 2023-11-08 | The Procter & Gamble Company | Machine-cleaning compositions containing enzymes |
EP4273210A1 (en) | 2022-05-04 | 2023-11-08 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing enzymes |
EP4279571A1 (en) | 2022-05-19 | 2023-11-22 | The Procter & Gamble Company | Laundry composition comprising spores |
EP4321604A1 (en) | 2022-08-08 | 2024-02-14 | The Procter & Gamble Company | A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester |
WO2024094800A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
WO2024094802A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
WO2024094785A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Clariant International Ltd | Polyesters |
WO2024119298A1 (en) | 2022-12-05 | 2024-06-13 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound |
WO2024129520A1 (en) | 2022-12-12 | 2024-06-20 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
EP4386074A1 (en) | 2022-12-16 | 2024-06-19 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
EP4388967A1 (en) | 2022-12-19 | 2024-06-26 | The Procter & Gamble Company | Dishwashing method |
US20240263162A1 (en) | 2023-02-01 | 2024-08-08 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing enzymes |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007145912A1 (en) * | 2006-06-06 | 2007-12-21 | Genencor International, Inc. | Process for conversion of granular starch to ethanol |
Family Cites Families (139)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1372034A (en) | 1970-12-31 | 1974-10-30 | Unilever Ltd | Detergent compositions |
GB1483591A (en) | 1973-07-23 | 1977-08-24 | Novo Industri As | Process for coating water soluble or water dispersible particles by means of the fluid bed technique |
GB1590432A (en) * | 1976-07-07 | 1981-06-03 | Novo Industri As | Process for the production of an enzyme granulate and the enzyme granuate thus produced |
JPS5534046A (en) * | 1978-09-01 | 1980-03-10 | Cpc International Inc | Novel glucoamyrase having excellent heat resistance and production |
DK187280A (da) * | 1980-04-30 | 1981-10-31 | Novo Industri As | Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode |
NO840200L (no) | 1983-01-28 | 1984-07-30 | Cefus Corp | Glukoamylase cdna. |
US4536477A (en) | 1983-08-17 | 1985-08-20 | Cpc International Inc. | Thermostable glucoamylase and method for its production |
DK263584D0 (da) * | 1984-05-29 | 1984-05-29 | Novo Industri As | Enzymholdige granulater anvendt som detergentadditiver |
US4587215A (en) * | 1984-06-25 | 1986-05-06 | Uop Inc. | Highly thermostable amyloglucosidase |
US4628031A (en) | 1984-09-18 | 1986-12-09 | Michigan Biotechnology Institute | Thermostable starch converting enzymes |
DE3500526A1 (de) * | 1985-01-09 | 1986-07-10 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Spezifisch hemmender s-amylase-mak |
US4717662A (en) * | 1985-01-31 | 1988-01-05 | Miles Laboratories, Inc. | Thermal stabilization of alpha-amylase |
DK154572C (da) | 1985-08-07 | 1989-04-24 | Novo Industri As | Enzymatisk detergentadditiv, detergent og fremgangsmaade til vask af tekstiler |
JPH0697997B2 (ja) | 1985-08-09 | 1994-12-07 | ギスト ブロカデス ナ−ムロ−ゼ フエンノ−トチヤツプ | 新規の酵素的洗浄剤添加物 |
US5024943A (en) * | 1985-11-07 | 1991-06-18 | Gist-Brocades | Regulatory region cloning and analysis plasmid for bacillus |
EG18543A (en) | 1986-02-20 | 1993-07-30 | Albright & Wilson | Protected enzyme systems |
DK122686D0 (da) | 1986-03-17 | 1986-03-17 | Novo Industri As | Fremstilling af proteiner |
US5240632A (en) * | 1986-03-26 | 1993-08-31 | Amway Corporation | Machine dishwasher water spot control composition |
US4753748A (en) | 1986-08-28 | 1988-06-28 | Colgate-Palmolive Company | Nonaqueous liquid automatic dishwashing detergent composition with improved rinse properties and method of use |
ES2058119T3 (es) | 1986-08-29 | 1994-11-01 | Novo Nordisk As | Aditivo detergente enzimatico. |
NZ221627A (en) | 1986-09-09 | 1993-04-28 | Genencor Inc | Preparation of enzymes, modifications, catalytic triads to alter ratios or transesterification/hydrolysis ratios |
WO1988002775A1 (en) | 1986-10-17 | 1988-04-21 | Novo Industri A/S | Positionally non-specific lipase from candida sp, a method for producing it, its use and a recombinant dna process for producing it |
GB8629538D0 (en) | 1986-12-10 | 1987-01-21 | Unilever Plc | Enzymatic dishwashing & rinsing composition |
GB8629537D0 (en) | 1986-12-10 | 1987-01-21 | Unilever Plc | Enzymatic dishwashing composition |
GB2200132B (en) | 1986-12-15 | 1991-09-18 | Colgate Palmolive Co | Stabilised enzyme systems and compositions containing them |
DK399387D0 (da) | 1987-07-31 | 1987-07-31 | Novo Industri As | Immobiliseret lipase og dennes anvendelse |
EP0305216B1 (en) | 1987-08-28 | 1995-08-02 | Novo Nordisk A/S | Recombinant Humicola lipase and process for the production of recombinant humicola lipases |
JPS6474992A (en) | 1987-09-16 | 1989-03-20 | Fuji Oil Co Ltd | Dna sequence, plasmid and production of lipase |
GB8727135D0 (en) | 1987-11-19 | 1987-12-23 | Unilever Plc | Machine dishwashing composition |
GB8727659D0 (en) | 1987-11-26 | 1987-12-31 | Unilever Plc | Machine dishwashing compositions |
US5141664A (en) * | 1987-12-30 | 1992-08-25 | Lever Brothers Company, A Division Of Conopco, Inc. | Clear detergent gel compositions having opaque particles dispersed therein |
DK6488D0 (da) | 1988-01-07 | 1988-01-07 | Novo Industri As | Enzymer |
EP0394352B1 (en) | 1988-01-07 | 1992-03-11 | Novo Nordisk A/S | Enzymatic detergent |
US6287841B1 (en) * | 1988-02-11 | 2001-09-11 | Genencor International, Inc. | High alkaline serine protease |
JP3079276B2 (ja) | 1988-02-28 | 2000-08-21 | 天野製薬株式会社 | 組換え体dna、それを含むシュードモナス属菌及びそれを用いたリパーゼの製造法 |
EP0406314B1 (en) * | 1988-03-24 | 1993-12-01 | Novo Nordisk A/S | A cellulase preparation |
US5648263A (en) * | 1988-03-24 | 1997-07-15 | Novo Nordisk A/S | Methods for reducing the harshness of a cotton-containing fabric |
GB8813688D0 (en) * | 1988-06-09 | 1988-07-13 | Unilever Plc | Enzymatic dishwashing composition |
GB8813687D0 (en) | 1988-06-09 | 1988-07-13 | Unilever Plc | Enzymatic dishwashing & rinsing composition |
DE3833047C2 (de) | 1988-09-29 | 1993-12-16 | Henkel Kgaa | Saure, maschinell anwendbare Geschirreinigungsmittel |
US4973419A (en) | 1988-12-30 | 1990-11-27 | Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. | Hydrated alkali metal phosphate and silicated salt compositions |
GB8905439D0 (en) | 1989-03-09 | 1989-04-19 | Unilever Plc | Enzymatic dishwashing compositions |
GB8915658D0 (en) | 1989-07-07 | 1989-08-23 | Unilever Plc | Enzymes,their production and use |
GB2234980A (en) | 1989-07-25 | 1991-02-20 | Unilever Plc | Detergent composition for machine dishwashers |
CA2023529A1 (en) | 1989-08-22 | 1991-02-23 | Guido Waschenbach | Dish-washer detergent composition |
EP0429124A1 (en) | 1989-11-21 | 1991-05-29 | The Procter & Gamble Company | Chlorine-free liquid automatic dishwashing compositions |
ES2055601T3 (es) | 1990-04-14 | 1994-08-16 | Kali Chemie Ag | Lipasas alcalinas de bacillus, secuencias de adn que las codifican, asi como bacilli que producen estas lipasas. |
WO1991017243A1 (en) | 1990-05-09 | 1991-11-14 | Novo Nordisk A/S | A cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme |
DK115890D0 (da) * | 1990-05-09 | 1990-05-09 | Novo Nordisk As | Enzym |
DE4017150A1 (de) | 1990-05-28 | 1991-12-05 | Henkel Kgaa | Verfahren zur herstellung eines backaktiven pentosanase-praeparates |
NL9001388A (nl) | 1990-06-19 | 1992-01-16 | Unilever Nv | Recombinant dna, cel die daarvan afgeleid dna bevat, enzym waarvoor het recombinant dna codeert en toepassingen daarvan. |
US5162210A (en) | 1990-06-29 | 1992-11-10 | Iowa State University Research Foundation | Process for enzymatic hydrolysis of starch to glucose |
PT98419B (pt) | 1990-07-24 | 1999-01-29 | Gist Brocades Nv | Processo para a preparacao de sequencias de adn que codificam para xilanases, de construcoes de adn que contem essas sequencias, paraa transformacao de hospedeiros microbianos com essas construcoes, para a preparacao de xilanases por expressao nesses hospedeiros e para a degradacao de xilano por accao dessas xilanases |
WO1992005249A1 (en) | 1990-09-13 | 1992-04-02 | Novo Nordisk A/S | Lipase variants |
DK0550652T3 (da) | 1990-09-28 | 1994-10-10 | Procter & Gamble | Detergentsammensætninger indeholdende alkylethoxy-carboxylater og polyhydroxyfedtsyreamider |
SK21093A3 (en) | 1990-09-28 | 1993-10-06 | Procter & Gamble | Polyhydroxy fatty acid amide surfactants to enhace enzyme performance |
US5133892A (en) | 1990-10-17 | 1992-07-28 | Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. | Machine dishwashing detergent tablets |
CZ87393A3 (en) | 1990-11-16 | 1994-07-13 | Procter & Gamble | Light-type agents for dish washing, which contain alkyl-ethoxy-carboxylate surface-active agent and calcium or magnesium ions |
SG52693A1 (en) | 1991-01-16 | 1998-09-28 | Procter & Gamble | Detergent compositions with high activity cellulase and softening clays |
US5610048A (en) | 1991-04-02 | 1997-03-11 | Novo Nordisk A/S | Xylanase, DNA sequences, coding for the xylanases and methods of use thereof |
EP0511456A1 (en) | 1991-04-30 | 1992-11-04 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents with aromatic borate ester to inhibit proteolytic enzyme |
HU213044B (en) | 1991-04-30 | 1997-01-28 | Procter & Gamble | Built liquid detergents with boric-polyol complex to inhibit proteolytic enzyme with additives improving detergent effect |
US5858757A (en) | 1991-05-01 | 1999-01-12 | Novo Nordisk A/S | Stabilized enzymes and detergent compositions |
AU656375B2 (en) | 1991-05-31 | 1995-02-02 | Colgate-Palmolive Company, The | Powdered automatic dishwashing composition containing enzymes |
AU654184B2 (en) | 1991-05-31 | 1994-10-27 | Colgate-Palmolive Company, The | Improved phosphate-containing powder automatic dishwashing composition with enzymes |
US5240633A (en) | 1991-05-31 | 1993-08-31 | Colgate-Palmolive Company | Liquid automatic dishwashing composition containing enzymes |
AU655274B2 (en) | 1991-05-31 | 1994-12-15 | Colgate-Palmolive Company, The | Nonaqueous liquid, phosphate-free, improved automatic dishwashing composition containing enzymes |
EP0518720B1 (en) | 1991-05-31 | 1995-09-06 | Colgate-Palmolive Company | Nonaqueous liquid automatic dishwashing composition containing enzymes |
AU654009B2 (en) | 1991-05-31 | 1994-10-20 | Colgate-Palmolive Company, The | Phosphate-containing powder automatic dishwashing composition with enzymes |
ATE131862T1 (de) | 1991-08-13 | 1996-01-15 | Procter & Gamble | Verfahren zur herstellung eines granularen maschinengeschirrspuelmittels |
GB9118242D0 (en) | 1991-08-23 | 1991-10-09 | Unilever Plc | Machine dishwashing composition |
DE59208478D1 (de) | 1991-08-29 | 1997-06-19 | Benckiser Gmbh Joh A | Neutrales maschinelles Geschirrspülmittel |
GB9119936D0 (en) | 1991-09-17 | 1991-10-30 | Unilever Plc | Aqueous liquid cleaning compositions |
US5879920A (en) * | 1991-10-07 | 1999-03-09 | Genencor International, Inc. | Coated enzyme-containing granule |
DE4137470A1 (de) | 1991-11-14 | 1993-05-19 | Henkel Kgaa | Verfahren zur herstellung niederalkalischer, aktivchlor- und phosphatfreier maschinengeschirrspuelmittel in form von schwergranulaten |
CA2088230A1 (en) | 1992-02-03 | 1993-08-04 | James Gordon | Detergent composition |
WO1993017089A1 (de) | 1992-02-20 | 1993-09-02 | Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien | Verfahren zur herstellung niederalkalischer, aktivchlor-, silikat-, und phosphatfreier maschinengeschirrspülmittel in form von schwergranulaten |
DE4205071A1 (de) | 1992-02-20 | 1993-08-26 | Henkel Kgaa | Verfahren zur herstellung niederalkalischer, aktivchlor-, silikat- und phosphatfreier maschinengeschirrspuelmittel in form von schwergranulaten |
CA2130465C (en) | 1992-03-12 | 1998-08-11 | Frederick A. Hartman | Low-dosage automatic dishwashing detergent with monopersulfate and enzymes |
GB9205894D0 (en) | 1992-03-17 | 1992-04-29 | Unilever Plc | Detergent compositions |
EP0561452A1 (en) | 1992-03-20 | 1993-09-22 | Unilever N.V. | Machine dishwashing composition containing polyaminoacids as builders |
DE4212166A1 (de) | 1992-04-10 | 1993-10-14 | Henkel Kgaa | Verfahren zur Herstellung perborathaltiger Reinigergranulate |
CA2133446A1 (en) | 1992-04-13 | 1993-10-28 | Janet L. Marshall | Thixotropic liquid automatic dishwashing composition with enzyme |
DK72992D0 (da) | 1992-06-01 | 1992-06-01 | Novo Nordisk As | Enzym |
WO1993025651A1 (en) | 1992-06-18 | 1993-12-23 | Unilever N.V. | Machine dishwashing composition |
DK88892D0 (da) | 1992-07-06 | 1992-07-06 | Novo Nordisk As | Forbindelse |
KR100303619B1 (ko) | 1992-10-06 | 2001-11-22 | 피아 스타르 | 셀룰라제변이체 |
US5281526A (en) * | 1992-10-20 | 1994-01-25 | Solvay Enzymes, Inc. | Method of purification of amylase by precipitation with a metal halide and 4-hydroxybenzic acid or a derivative thereof |
PL306812A1 (en) | 1993-04-27 | 1995-04-18 | Gist Brocades Nv | Novel lipase variants suitable for use in detergents |
DK52393D0 (ja) | 1993-05-05 | 1993-05-05 | Novo Nordisk As | |
DK76893D0 (ja) | 1993-06-28 | 1993-06-28 | Novo Nordisk As | |
JP2859520B2 (ja) | 1993-08-30 | 1999-02-17 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | リパーゼ及びそれを生産する微生物及びリパーゼ製造方法及びリパーゼ含有洗剤組成物 |
BR9407808A (pt) | 1993-10-13 | 1997-05-06 | Novo Nordisk As | Variante de peroxidase com melhorada estabilidade para peróxido de hidrogenio em condições alcalinas composição de alvejamento e composição detergente |
JPH07143883A (ja) | 1993-11-24 | 1995-06-06 | Showa Denko Kk | リパーゼ遺伝子及び変異体リパーゼ |
CA2183431A1 (en) | 1994-02-22 | 1995-08-24 | Allan Svendsen | A method of preparing a variant of a lipolytic enzyme |
DE69534513T2 (de) | 1994-03-08 | 2006-07-27 | Novozymes A/S | Neuartige alkalische zellulasen |
CN1326994C (zh) | 1994-03-29 | 2007-07-18 | 诺沃奇梅兹有限公司 | 碱性芽孢杆菌淀粉酶 |
DE69528524T2 (de) | 1994-05-04 | 2003-06-26 | Genencor International, Inc. | Lipasen mit verbesserten tensiostabilitaet |
WO1995035381A1 (en) | 1994-06-20 | 1995-12-28 | Unilever N.V. | Modified pseudomonas lipases and their use |
AU2884695A (en) | 1994-06-23 | 1996-01-19 | Unilever Plc | Modified pseudomonas lipases and their use |
US5919691A (en) | 1994-10-06 | 1999-07-06 | Novo Nordisk A/S | Enzyme and enzyme preparation with endoglucanase activity |
BE1008998A3 (fr) | 1994-10-14 | 1996-10-01 | Solvay | Lipase, microorganisme la produisant, procede de preparation de cette lipase et utilisations de celle-ci. |
US5827719A (en) | 1994-10-26 | 1998-10-27 | Novo Nordisk A/S | Enzyme with lipolytic activity |
US6440716B1 (en) * | 1995-02-03 | 2002-08-27 | Novozymes A/S | α-amylase mutants |
JPH08228778A (ja) * | 1995-02-27 | 1996-09-10 | Showa Denko Kk | 新規なリパーゼ遺伝子及びそれを用いたリパーゼの製造方法 |
AU715423B2 (en) | 1995-03-17 | 2000-02-03 | Novozymes A/S | Novel endoglucanases |
US6313081B1 (en) | 1995-04-28 | 2001-11-06 | Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien (Kgaa) | Detergents comprising cellulases |
WO1997004078A1 (en) | 1995-07-14 | 1997-02-06 | Novo Nordisk A/S | A modified enzyme with lipolytic activity |
WO1997004160A1 (en) * | 1995-07-19 | 1997-02-06 | Novo Nordisk A/S | Treatment of fabrics |
ES2221934T3 (es) | 1995-08-11 | 2005-01-16 | Novozymes A/S | Nuevas enzimas lipoliticas. |
AU3938997A (en) | 1996-08-26 | 1998-03-19 | Novo Nordisk A/S | A novel endoglucanase |
ATE324437T1 (de) | 1996-09-17 | 2006-05-15 | Novozymes As | Cellulasevarianten |
EP0963192B1 (en) | 1996-10-08 | 2003-01-08 | Novozymes A/S | Diaminobenzoic acid derivatives as dye precursors |
ATE510910T1 (de) | 1996-11-04 | 2011-06-15 | Novozymes As | Subtilase-varianten und verbindungen |
AU4941997A (en) | 1996-11-21 | 1998-06-10 | Novo Nordisk A/S | Use of carbohydrate-binding domain in starch processing |
WO1999001544A1 (en) | 1997-07-04 | 1999-01-14 | Novo Nordisk A/S | FAMILY 6 ENDO-1,4-β-GLUCANASE VARIANTS AND CLEANING COMPOSIT IONS CONTAINING THEM |
DK1032686T3 (da) | 1997-11-19 | 2005-06-27 | Genencor Int | Cellulase dannet af Actinomyceter og fremgangsmåde til frembringelse heraf |
WO1999028448A1 (en) | 1997-11-26 | 1999-06-10 | Novo Nordisk A/S | Thermostable glucoamylase |
WO1999049740A1 (en) | 1998-04-01 | 1999-10-07 | Dsm N.V. | Application of phytase in feed having low content of phytate |
MXPA01000352A (es) | 1998-07-15 | 2002-06-04 | Novozymes As | Varientes de glucoamilasa. |
EP1210413B1 (en) * | 1999-08-13 | 2009-12-02 | The University of Manchester | Phytase enzymes, nucleic acids encoding phytase enzymes and vectors and host cells incorporating same |
US6254645B1 (en) | 1999-08-20 | 2001-07-03 | Genencor International, Inc. | Enzymatic modification of the surface of a polyester fiber or article |
US6933140B1 (en) | 1999-11-05 | 2005-08-23 | Genencor International, Inc. | Enzymes useful for changing the properties of polyester |
US7560126B2 (en) * | 2001-02-21 | 2009-07-14 | Verenium Corporation | Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
BRPI0207770A8 (pt) | 2001-02-21 | 2017-12-12 | Basf Enzymes Llc | Enzimas tendo atividade de alfa amilase, preparação compreendendo as mesmas, polinucleotídeos codificando as referidas enzimas, vetores, células hospedeiras, métodos de produção das referidas enizimas, método de hidrolisar uma ligação de amido, produzir um xarope, liquefação do amido, tratamento de fibras lignocelulósicas, para desengomar o tecido, lavar um objeto, detergente aditivo |
CN111484996A (zh) | 2003-03-06 | 2020-08-04 | 巴斯夫酶有限责任公司 | 淀粉酶、编码它们的核酸及其制备和应用方法 |
WO2005056783A1 (en) | 2003-12-05 | 2005-06-23 | Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Catalytic domains of beta(1,4)-galactosyltransferase i having altered metal ion specificity |
CN101517072A (zh) | 2004-01-16 | 2009-08-26 | 诺维信北美公司 | 生产发酵产物的方法 |
EP1733032A2 (en) | 2004-04-08 | 2006-12-20 | Genencor International, Inc. | Mutant alpha mylases |
US7332319B2 (en) * | 2004-05-27 | 2008-02-19 | Genencor International, Inc. | Heterologous alpha amylase expression in Aspergillus |
WO2005118800A1 (en) * | 2004-05-27 | 2005-12-15 | Genencor International, Inc. | Heterologous expression of an aspergillus kawachi acid-stable alpha amylase and applications in granular starch hydrolysis |
GB0423139D0 (en) | 2004-10-18 | 2004-11-17 | Danisco | Enzymes |
DK1824970T3 (da) | 2004-11-30 | 2011-10-31 | Genencor Int | Thricoderma reesei-glycoamylase og homologer heraf |
US20080220498A1 (en) * | 2007-03-06 | 2008-09-11 | Cervin Marguerite A | Variant Buttiauxella sp. phytases having altered properties |
US10676751B2 (en) | 2008-02-29 | 2020-06-09 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Production and use of plant degrading materials |
CN102112621A (zh) | 2008-06-06 | 2011-06-29 | 丹尼斯科美国公司 | 用来自枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶从淀粉产生葡萄糖 |
BRPI0915606A2 (pt) | 2008-06-06 | 2021-03-09 | Danisco Us Inc. | Alfa-amilases variantes de bacillus subtilis e métodos de uso das mesmas |
WO2009149283A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Danisco Us Inc. | Saccharification enzyme composition |
US20100001568A1 (en) * | 2008-07-03 | 2010-01-07 | Dalton Trybus | Vehicle seat with cushion carrier |
-
2009
- 2009-06-04 CN CN2009801303155A patent/CN102112621A/zh active Pending
- 2009-06-04 MX MX2010013108A patent/MX2010013108A/es active IP Right Grant
- 2009-06-04 BR BRPI0913378-0A patent/BRPI0913378A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2009-06-04 CA CA2726630A patent/CA2726630A1/en not_active Abandoned
- 2009-06-04 JP JP2011512655A patent/JP5560266B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-06-04 US US12/478,266 patent/US9040278B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-06-04 WO PCT/US2009/046279 patent/WO2009149271A2/en active Application Filing
- 2009-06-04 EP EP09759430A patent/EP2310521A2/en not_active Withdrawn
- 2009-06-04 EP EP13166532.5A patent/EP2698434A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007145912A1 (en) * | 2006-06-06 | 2007-12-21 | Genencor International, Inc. | Process for conversion of granular starch to ethanol |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
JPN5012011449; CHO: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA V1478, 2000, P333-340 * |
JPN5012011449; CHO: 'MOLECULAR CHARACTERIZATION OF A DIMERIC INTRACELLULAR MALTOGENIC AMYLASE OF BACILLUS SUBTILIS SUH4-2' BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA V1478, 2000, P333-340 * |
JPN5012011451; DE MORALES: 'DEVELOPMENT OF YEAST STRAINS FOR THE EFFICIENT UTILISATION OF STARCH:EVALUATION 以下備考' APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY V43, 1995, P1067-1076 * |
JPN5012011452; HAYASHIDA: 'PRODUCTION AND CHARACTERISTICS OF RAW-POTATO-STARCH-DIGESTING ALPHA-AMYLASE 以下備考' APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY V54, 1988, P1516-1522 * |
JPN6013002645; Nucleic Acids Res Vol.11, No.2, 1983, p.237-249 * |
JPN6013020213; J. Mol. Biol. 277, 1998, p.393-407 * |
JPN6013020214; APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY 65 (10), 1999, p.4652-4658 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2009149271A8 (en) | 2013-11-14 |
EP2310521A2 (en) | 2011-04-20 |
US20090305935A1 (en) | 2009-12-10 |
CN102112621A (zh) | 2011-06-29 |
MX2010013108A (es) | 2010-12-21 |
WO2009149271A3 (en) | 2010-03-25 |
JP5560266B2 (ja) | 2014-07-23 |
CA2726630A1 (en) | 2009-12-10 |
EP2698434A1 (en) | 2014-02-19 |
BRPI0913378A2 (pt) | 2015-09-01 |
WO2009149271A2 (en) | 2009-12-10 |
US9040278B2 (en) | 2015-05-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5560266B2 (ja) | バシルススブチリス(B.subtilis)由来アルファ‐アミラーゼを用いるデンプンからのグルコースの生産 | |
EP2297312B1 (en) | Variant alpha-amylases from bacillus subtilis and methods of use, thereof | |
CA2689635C (en) | Variants of an alpha-amylase with improved production levels in fermentation processes | |
JP5599113B2 (ja) | 糖化酵素組成物及びその糖化方法 | |
US20110033882A1 (en) | Variants of the bacillus licheniformis alpha-amylase | |
JP2015518707A (ja) | 糖化のための、aspergillusclavatus由来アルファアミラーゼの使用 | |
JP6499081B2 (ja) | アスペルギルス・フミガタス(Aspergillusfumigatus)由来のグルコアミラーゼを発現するトリコデルマ・レーシ(Trichodermareesei)宿主細胞、及びその使用方法 | |
CA2681621A1 (en) | Enhanced amylase production by n-terminal addition to mature amylase protein | |
JP2016501512A (ja) | 糖化のためにタラロミセス・エメルソニ(TALAROMYCESEMERSONII)由来のα−アミラーゼを使用する方法 | |
JP2015534456A (ja) | アスペルギルス・クラバタス(Aspergillusclavatus)由来のαアミラーゼ及びイソアミラーゼを糖化に使用する方法 | |
EP3052622B1 (en) | Alpha-amylases from a subset of exiguobacterium, and methods of use, thereof | |
WO2014200656A1 (en) | Alpha-amylase from streptomyces umbrinus | |
WO2014200658A1 (en) | Alpha-amylase from promicromonospora vindobonensis | |
WO2014200657A1 (en) | Alpha-amylase from streptomyces xiamenensis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110126 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130430 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130726 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130812 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131018 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140513 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140609 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5560266 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |