JP2010031032A - 抗cd−22抗体を使用したb細胞悪性疾患の免疫療法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 CD22抗原と結合する抗体の使用は、B細胞悪性疾患、たとえば、無痛形のB細胞リンパ腫、攻撃形B細胞リンパ腫と急性形および慢性形のリンパ性白血病を治療する有効な手段である。さらに、抗CD22抗体を用いた免疫療法は比較的低用量の抗体蛋白質を必要とし、複数の方式の治療方法で有効に使用される。
【選択図】 なし
Description
本発明のさらなる目的は、低用量の抗CD22抗体に免疫複合体や抗体融合蛋白質のような治療用蛋白質の投与を補足する複数の方式、または化学療法治療方式による、B細胞悪性疾患の治療方法を提供することである。
上述の通り、抗CD20抗体は、非複合体であろうと治療用放射性核種で標識されていようと、中間形または攻撃形のB細胞リンパ腫患者における客観的応答を提供することができなかった。意外なことに、ノンホジキンリンパ腫(無通形も攻撃形も)または急性リンパ性白血病を有する患者を対象とした臨床試験で、比較的低用量(すなわち、1回当たり蛋白質20〜100mg)の非複合ネズミ抗CD22抗体またはヒト化抗CD22抗体が最高24ヶ月持続する部分寛解または完全寛解を惹起することが証明された。この現象は、複数の攻撃的化学療法の連続投与後に、または骨髄移植後でさえも、再発する場合が多い患者にも拘わらずに観察することができる。非複合抗CD20抗体または放射標識抗CD20抗体は、特に低用量蛋白質で、このような効果を示すことができなかったため、非複合抗CD22抗体を用いた有望な結果は、進行した攻撃(中間)形ノンホジキンリンパ腫患者と慢性および急性のリンパ性白血病患者で、特に有効であった。さらに、B細胞型の慢性リンパ性白血病は、一般にCD22を発現しないというFreedmanのHematol. Onvol. Clin. North Am. 4:405 (1990)の説を考慮すると、抗CD22抗体を用いた有望な結果は予想外であった。
以下の説明において、多数の用語が頻繁に使用されているため、本発明を理解しやすくするために、それらを次の通りに定義する。
本明細書で使用される用語「抗体融合蛋白質」は、抗体成分と治療剤を含んでなるリコンビナント分子を指す。このような融合蛋白質に適した治療剤の例としては、免疫調節因子(「抗体−免疫調節因子融合蛋白質」)や毒素(「抗体−毒素融合蛋白質」)などがある。
当業者に周知の方法で、CD22に対する囓歯類モノクローナル抗体を得ることができる。たとえば、Kohler and MilsteinのNature 256:495 (1975)とColiganら(編)のCURRENT PROTOCOLS IN IMMUNOLOGY、第1巻、 2.5.1〜2.6.7ページ (John Wiley & Sons 1991)「”Coligan”」を参照されたい。簡単に記載すると、CD22を含む組成物をマウスに注射し、血清試料を採取して抗体産生の存在を確認し、脾臓を摘出してBリンパ球を獲得し、Bリンパ球を骨髄腫細胞と融合してハイブリドーマを作り、ハイブリドーマをクローニングし、抗CD22抗体を産生する陽性クローンを選択し、抗原に対する抗体を産生するクローンを培養し、ハイブリドーマ培養から抗体を単離することによって、モノクローナル抗体を得ることができる。
適当なネズミ抗CD22モノクローナル抗体の一例は、バーキット(Burkitt)リンパ腫由来のヒトラージ細胞(human Raji cell)に対して産生された、LL2(以前のEPB−2)モノクローナル抗体である。Pawlak-ByczkowskaらのCancer Res. 49: 4568 (1989)を参照されたい。このモノクローナル抗体はIgG2aアイソタイプを有し、且つこの抗体はリンパ腫細胞内に急速にインターナライズされる。ShihらのInt. J. Cancer 56: 538 (1994)を参照されたい。免疫染色試験とin vivo放射免疫検出試験で、B細胞リンパ腫の検出におけるLL2の優れた感度が証明された。Pawlak-ByczkowskaらのCancer Res. 49: 4568 (1989)、MurthyらのEur. J. Nucl. Med. 19: 394 (1992)を参照されたい。さらに、99mTc標識LL2Fab'フラグメントが、B細胞リンパ腫の治療に有用なことが証明されているが、131I標識された完全なLL2と標識されたLL2 F(ab')2フラグメントを使用して、リンパ腫部位を標的にして治療応答を惹起してきた。MurthyらのEur. J. Nucl. Med. 19: 394 (1992)、MillsらのProc. Am. Assoc.Cancer Res. 34: 479 (1993)[抄録2857]、BaumらのCancer 73 (Suppl. 3): 896 (1994)、GoldenbergらのJ. Clin. Oncol. 9:548 (1991)を参照されたい。さらに、シュードモナス(Pseudomonas)外毒素と連結したFab' LL2フラグメントは、ヌードマウスで成長している測定可能なヒトリンパ腫に関して、異種移植片完全寛解を惹起することが証明されている。KreitmanらのCancer Res. 53: 819 (1993)を参照されたい。
本発明は、抗CD22抗体または他の治療上有用な抗体のフラグメントの使用を考える。抗体フラグメントを作ることができる。抗体を蛋白質分解的に加水分解するか、またはフラグメントのDNAコーディングをE. coliに発現することによって、抗体フラグメントを作ることができる。
本発明は、B細胞悪性疾患の治療を遂行するために、「裸の」抗CD22抗体の使用ならびに免疫複合体の使用を考える。治療剤を抗体成分に間接的に連結することによって、このような免疫複合体を作ることができる。一般的な技術は、ShihらのInt. J. Cancer 41: 832-839 (1988)、ShihらのInt. J. Cancer 46:1101-1106 (1990)とShihらに与えられた米国特許第5,057,313号に記載されている。一般的な方法には、酸化された炭水化物部分を有する抗体成分を、少なくとも1つの遊離アミン官能基を有し且つ複数の薬剤、毒素、キレート化剤、ホウ素付加物、またはその他の治療剤を付加した担体ポリマーと反応させることを含む。この反応の結果として最初のシッフ(Schiff)塩基(イミン)結合を生じ、これを第二級アミンに還元することにより安定化させて最終複合体を形成することができる。
本発明は、B細胞悪性疾患を治療するための、一次治療用組成物として、裸の抗CD22抗体の使用を考える。このような組成物としては、ポリクローナル抗CD22抗体またはモノクローナル抗CD22抗体が挙げられる。
さらに、本発明の治療用組成物としては、異なる、非遮断CD22エピトープに向けた諸抗CD22モノクローナルの混合物などがある。モノクローナル抗体交差阻害試験で、CD22上の5つのエピトープが同定され、エピトープA〜Eと呼ばれている。たとえば、LEUKOCYTE TYPING IV. WHITE CELL DIFFERENTIATION ANTIGENS、Knappら(編)65ページ(Oxford University Press 1989)のSchwartz-Albiezらの”The Carbohydrate Moiety of the CD22 Antigen Can Be Modulated by Inhibitors of the Glycosylation Pathway”を参照されたい。具体例として、LL2抗体はエピトープBと結合する。SteinらのCancer Immunol. Immunother. 37: 293 (1993)を参照されたい。したがって、本発明は少なくとも2つのCD22エピトープを結合するモノクローナル抗CD22抗体の混合物を含む治療用組成物を考える。たとえば、このような混合物は、エピトープA、エピトープB、エピトープC、エピトープDとエピトープEからなる群から選択される少なくとも2つのCD22エピトープと結合するモノクローナル抗体を含む。
放射免疫複合体は、α放射放射性同位元素、β放射放射性同位元素、γ放射放射性元素、オージェ電子エミッタ、α粒子を放射する中性子捕捉剤または電子捕捉によって崩壊する放射性同位元素も含んでもよい。適当な放射性同位元素としては、198Au、32P、125I、131I、90Y、186Re、188Re、67Cu、211At等々が挙げられる。
中等度非ホジキンリンパ腫患者は、CHOP×6(5ヶ月間、完全寛解に導いた)、別のCHOP×6(進行した)、D−MOOP(6ヶ月間、安定した疾患)、CVBと抹消幹細胞移植(4ヶ月間、部分的寛解)からなる先の攻撃的化学療法は失敗であった患者は、胸部および頚部リンパ節に再発性リンパ腫を呈し、両者は、それぞれ、X線断層撮影および触診で測定可能である。
患者にヒト化LL2モノクローナル抗体50mgを、連続2週間の第2日、第5日、第9日、第12日に注入するが、有害作用は全く認められない。3週間後、頚部リンパ節拡張の触診は、約60%という測定可能な減少を示し、繰り返し胸部X線断層撮影は、70%という著明な腫瘍の減少を示す。治療の10週後に実施する追跡調査測定は、頚部または胸部の疾患の証拠を示さない。新しい疾患が他所で検出されないため、患者は完全寛解であると考えられる。10〜12週ごとの追跡調査で、治療後少なくとも16ヶ月間、完全寛解が確認される。
ある患者が拡散性大細胞攻撃形リンパ腫を呈し、予後が悪いと診断され、腹部に大きい疾患と、多数の他のextradnodal疾患部位と、高い血清乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)を有する。この患者をCHOPで治療し、3サイクル投与した後、腹部外の多数のextradnodal疾患部位が消散して、部分的反応が確認される。しかし、腹部の大きい疾患は体積が増えつづけ、血清LDHは高いままである。
第3サイクルのCHOを開始後間もなく、第2日、第5日、第9日、第12日に、ヒト化LL2モノクローナル抗体50mgを患者に注入する。さらに4サイクルのCHOPと同時に、このhLL2の治療方式を繰り返す。治療中に、血清LDHレベルは正常範囲内まで低下する。
CHOPとhLL2の第3サイクルの1ヶ月後に、腹部の大きい腫瘍のX線断層撮影は、塊の90%以上の縮小を示す。10〜12週ごとの追跡調査で9ヶ月以上、完全寛解が確認される。
B−細胞慢性大細胞攻撃形リンパ腫患者は第一線化学療法(CHOP)と第二線(m−BACOD)化学療法に応答したが、第三線化学療法(MACOP−Bは失敗である。第三線化学療法の完了後、患者は骨髄のび慢性疾患、充実性脾腫大、触診できない多数のリンパ節拡大を有する。次いで、第2日、第5日、第9日、第12日に、ヒト化LL2モノクローナル抗体50mgを患者に注入する。この治療方式を1週おきに4週間繰り返す。骨髄の疾患は次第にhLL2治療に応答し、節のサイズも減少する。しかし、多くの節が依然として触診され、脾のサイズはほとんど減少しない。
Claims (30)
- 薬学的に許容できる担体と少なくとも1種の裸の抗CD22抗体を含む治療用組成物を、B細胞悪性疾患を有する被験者に投与するステップを含んでなるB細胞悪性疾患の治療方法。
- 前記抗CD22抗体を、20〜100mg蛋白質/投与の投与量で非経口的に投与することを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記被験者が、抗CD22抗体を、20〜100mg蛋白質/投与の投与量で繰り返して非経口投与として摂取することを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記抗CD22抗体が、類人霊長類抗体、ネズミモノクローナル抗体、キメラ抗体とヒト化抗体からなる群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記抗CD22抗体がLL2抗体であることを特徴とする請求項4に記載の治療方法。
- 前記治療用組成物が、異なるCD22エピトープと結合する少なくとも2種のモノクローナル抗体を含み、前記CD22エピトープが、エピトープA、エピトープB、エピトープC、エピトープDとエピトープEからなる群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記B細胞悪性疾患が無痛形B細胞リンパ腫、攻撃形B細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病と急性リンパ性白血病からなる群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記B細胞リンパ腫が、ノンホジキンリンパ腫であること特徴とする請求項7に記載の方法。
- 治療用蛋白質を投与するまたは化学療法剤による治療を行うステップをさらに含み、前記治療用蛋白質が、抗体、免疫複合体、抗体−免疫調節因子融合蛋白質と抗体−毒素融合蛋白質からなる群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の治療方法。
- 前記抗CD22抗体の投与前に、前記治療用蛋白質が投与されるまたは前記化学療法剤による治療が行われることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記抗CD22抗体の投与と同時に、前記治療用蛋白質が投与されるまたは前記化学療法剤による治療が行われることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記抗CD22抗体の投与後に、前記治療用蛋白質が投与されるまたは前記化学療法剤による治療が行われることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記化学療法剤による治療が、シクロホスファミド、エトポシド、ビンクリスチン、プロカルバジン、プレドニゾン、カルムスチン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ブレオマイシン、デキサメタゾン、フェニルブチレート、ブロスタチン−1とロイコボリンからなる群から選択される少なくとも一つの薬剤の投与を含んでなることを特徴する請求項9に記載の治療方法。
- 前記治療用蛋白質が、裸の抗CD19抗体か裸の抗CD20のいずれかであることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記治療用蛋白質が、放射標識された免疫複合体である、請求項9に記載の治療方法。
- 前記放射標識された免疫複合体が、198Au、32P、125I、131I、90Y、186Re、188Re、67Cu、211Atからなる群から選択される放射性核種を含んでなることを特徴とする請求項15に記載の治療方法。
- 前記放射標識された免疫複合体が、CD19、CD20とCD22からなる群から選択される抗原と結合する抗体または抗体フラグメントを含んでなることを特徴とする請求項16に記載の治療方法。
- 前記放射標識された免疫複合体が、放射標識された抗CD22免疫複合体であることを特徴とする請求項17に記載の治療方法。
- 前記放射標識された免疫複合体がサイトカイン部分をさらに含み、前記サイトカイン部分がインターロイキン−1(IL−1)、IL−2、IL−3、IL−6、IL−10、IL−12、インターフェロン−α、インターフェロン−βとインターフェロン−γからなる群から選択されることを特徴とする請求項18に記載の治療方法。
- 前記治療用蛋白質が、リシン、アブリン、リボヌクレアーゼ、DNAアーゼI、ブドウ球菌(Staphylococcal)エンテロトキシン−A、ヤマゴボウ抗ウイルス蛋白質、ゲロニン、ジフテリア毒素、シュードモナス(Psedomonas)外毒素とシュードモナス内毒素からなる群から選択される毒素を含んでなる免疫複合体または抗体−毒素融合蛋白質であることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記免疫複合体または前記抗体−毒素融合蛋白質が、CD19、CD20とCD22からなる群から選択される抗原と結合する抗体または抗体フラグメントを含んでなることを特徴とする請求項20に記載の治療方法。
- 前記治療用蛋白質が免疫複合体または融合蛋白質であり、前記免疫複合体または融合蛋白質が、インターロイキン−1(IL−1)、IL−2、IL−3、IL−6、IL−10、IL−12、インターフェロン−α、インターフェロン−βとインターフェロン−γ、顆粒球−コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子とリンフォトキシンからなる群から選択される免疫調節因子を含んでなることを特徴とする請求項9に記載の治療方法。
- 前記免疫調節因子または前記抗体−免疫調節因子融合蛋白質が、CD19、CD20とCD22からなる群から選択される抗原と結合することを特徴とする請求項22に記載の治療方法。
- B細胞悪性疾患を治療する方法に使用するための医薬品の調製において少なくとも1種の裸の抗CD22抗体の使用であって、前記方法においてB細胞悪性疾患を患っている被験者に、治療的に有効な量の裸のCD22抗体を投与する使用。
- 前記抗CD22抗体がLL2抗体であることを特徴とする請求項24に記載の使用。
- 前記治療用組成物が、異なるCD22エピトープと結合する少なくとも2種のモノクローナル抗体を含み、前記CD22エピトープが、エピトープA、エピトープB、エピトープC、エピトープDとエピトープEからなる群から選択されることを特徴とする請求項24に記載の使用。
- 前記B細胞悪性疾患が無痛形B細胞リンパ腫、攻撃形B細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病と急性リンパ性白血病からなる群から選択されることを特徴とする請求項24に記載の使用。
- 治療用蛋白質を投与するまたは化学療法剤による治療を行うステップをさらに含み、前記治療用蛋白質が、抗体、免疫複合体、抗体−免疫調節因子融合蛋白質と抗体−毒素融合蛋白質からなる群から選択されることを特徴とする請求項24に記載の使用。
- 前記治療用蛋白質が、裸の抗CD19抗体か裸の抗CD20のいずれかであることを特徴とする請求項24に記載の使用。
- 前記治療用蛋白質が免疫複合体または融合蛋白質であり、前記免疫複合体または融合蛋白質が、インターロイキン−1(IL−1)、IL−2、IL−3、IL−6、IL−10、IL−12、インターフェロン−α、インターフェロン−βとインターフェロン−γ、顆粒球−コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子とリンフォトキシンからなる群から選択される免疫調節因子を含んでなることを特徴とする請求項28に記載の使用。
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