JP2009519790A - 生体人工神経ガイドおよび作製方法 - Google Patents

Abstract

【課題】本発明は、良好な生体適合性を有する生体神経ガイドを提供することを目的としている。
【解決手段】このため、人体内に移植するための生体神経ガイドを、天然の動物組織膜を提供するステップと、該膜を架橋かつ固定するステップと、該膜由来の抗原を最小化するステップと、該膜をなめすステップと、活性層を該膜の内表面にカップリングするステップと、該膜を所望の寸法と形状に切断するステップと、該膜の切片が円筒形状を呈するよう、該膜の切片をロッド状の鋳型上に配置するステップと、らせん状支持体（２）を該膜の該切片の外側表面に取り付けるステップと、を含む方法により作製する。
【選択図】図１

Description

本発明は、ヒトの移植のための医療用人工器官に関し、より詳細には、生体神経ガイドなどのニューロンの修復のための人工デバイスに関する。

神経組織は再生力を有し、近年、中枢神経系でさえも再生力を有することが発見された。
しかしながら、神経組織はもろく、その再生速度は遅いため、ニューロン（神経細胞）が損傷を受けると、成長速度が遅いために自然な再生と修復では神経の再結合が不可能な場合が多々ある。
また、その修復経路がより速く成長する周囲の再生した組織や傷ついた組織により妨害される場合が多々ある。

これらの問題に取り組むべく、科学者等は、経路が妨害されるのを防止するために欠損神経の両端をつなぐガイドを実現しようと試みており、このガイドは神経ガイドと呼ばれる。
従来の神経ガイドのいくつかは、非化学的分解性材料から作製されるため、外的物質由来の炎症が常に存在する一方、神経組織の再生もまた悪影響を受けるものであった。
これら従来の神経ガイドのいくつかはポリ酢酸またはポリグリコール酸などの化学的分解性材料から作製されるが、これらの分解生成物は局在化した酸性度を呈し、これは、神経細胞の成長、増殖および移動に悪影響を及ぼす。

他の従来の神経ガイドは、動物の血管などの天然材料から作製されており、通常のグルタルアルデヒドが治療方法において利用されているが、長期間毒性が残存し、これは相当強い細胞毒性であると同時に神経細胞の成長と増殖にも悪影響を及ぼす。
現在の神経ガイドの深刻な欠点の一つが栄養素を浸透させず、さらに血液供給を通過させない厚いガイド壁であり、それによりガイド内部の神経細胞が、損傷した組織を修復するために必要な分化と移動に十分な栄養素を得ることができない。

その他の従来の神経ガイドは、動物のコラーゲンなどの化学的分解性の天然材料から作製されるが、可撓性、靱性並びに耐キンク性などの機械特性が望ましくない。
注目すべき欠点とは分解速度を神経組織の再生速度に整合させるのが困難であることであり、そのため治療結果が不確実である場合が多々ある。

本発明の目的は、良好な生体適合性を有する生体神経ガイドを提供することである。

本発明の他の目的は、栄養素を浸透させることができ、かつ血液供給を効率的に流すと同時に吸収可能である生体神経ガイドを提供することである。

本発明の別の目的は、上述の目的に合致する一方、前述の不利点を克服する生体神経ガイドの作製方法を提供することである。

本発明の目的を達成するために、本発明は人体に移植するための生体神経ガイドを提供するものであり、該神経ガイドは以下の方法で作製される。
天然の動物組織膜を提供するステップと、
該膜を架橋かつ固定するステップと、
該膜由来の抗原を最小化するステップと、
該膜をなめすステップと、
活性層を該膜の内表面に結合するステップと、
該膜を所望の形状と寸法に切断するステップと、
該切断した膜をロッド型の鋳型上に配置することにより、該切断した膜が外表面を有する円筒形状を呈するようにするステップと、
該切断した膜の該外表面にらせん状支持体を取り付けるステップと、
を含んでなる。

この発明は、上記の記載によって、良好な生体適合性を有する生体神経ガイドを提供することができる。
また、本発明は、栄養素を浸透させることができ、かつ血液供給を効率的に流すと同時に吸収可能である生体神経ガイドを提供することができる。
更に、本発明は、前述の不利点を克服する生体神経ガイドの作製方法を提供することができる。

以下図面に基づいてこの発明の実施例を詳細に説明する。

以下の詳細な説明は、本発明を実施する現時点で意図される最良の形態に関するものである。
この説明は限定することを意図するものではなく、単に本発明の実施態様の概括的な原理を例示することを目的とするものである。
本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって最大限に定義されるものである。

本発明は、カップリングによって処理し、非アルデヒド固定剤で固定した動物膜で作製した、強力な水素結合を有する試薬で最小限にした抗原を有する、薄いガイド本体を有する生体神経ガイドを提供する。
前述の動物膜の細長い切片をガイド壁の周囲に巻き付けて固定することによってらせん状の支持体を形成する。

動物の組織は微生物によって簡単に劣化あるいは分解するため、カップリングして固定剤で固定することが必要である。
通常、グルタルアルデヒドが固定剤として利用されるが、グルタルアルデヒドは毒性のラジカルを生成する。
アルデヒドはアセタール反応によってタンパク質とカップリングして、そのカップリングした生成物が劣化すると毒性のアルデヒドが放出されるため、アルデヒドで固定した製品は長期間残存する毒性を有する。
アルデヒド系固定剤に代わる固定剤としてエポキシド、ジアシルジアミド、ジイソシアナート、ポリエチレングリコールまたはカルボジアミドなどの非アルデヒド系固定剤を利用すると、この毒性問題を最小限にするかあるいは排除することさえできる。
例えば、エポキシドをアルデヒド型の固定剤に代えて用いると、エポキシドが不安定なため開環／架橋反応が容易に起こるが、反応条件を制御することにより非常に安定で簡単には分解しない架橋生成物を生成することができる。
分解においてカリクレイン、フィブリノリジンおよびグルココルチコイドホルモンが分泌されてコラゲナーゼを助けることによって組織の成長と再生が開始して架橋生成物が滅ぶときにのみポリアルデヒドとアミノ酸とにゆっくりと分解し、吸収される。そのような種類の受動的な分解および組織再生は同期的に起こるものであり、組織再生による修復に有益であると同時にアルデヒドの残存毒性を有さない。
最新の免疫学的理論によれば、動物組織の抗原性は主として特定部位に局在化した特定の配座にある活性基由来であり、これら活性基には−ＯＨ、−ＮＨ_２ 、−ＳＨなどが含まれる。
特定の配座は、らせん状タンパク質鎖で形成された特定の水素結合のいくつかにより得られる。
特定の部位と配座は、抗原決定因子と呼ばれる。
これら基と容易に反応する一つまたはより多くの活性試薬（例えば、無水酸、塩化アシル、アミド、エポキシドなど）は、動物組織を処理する際にこれら基と結合してこれらを遮断するのに用いられるため、抗原を効果的に最小限または除去することができる。
同時に、強力な水素結合を有する試薬（例えば、グアニジン化合物）は、特定の配置を与える水素結合を置換するのに用いられるため、その配置は変化して抗原性が効果的に取り除かれる。

本発明の神経ガイドの壁は、栄養素と微小血管が容易に浸透し薄い透過性の半透明膜であるため、神経組織の再生に必要なものが提供される。
らせん状支持体を、ガイド壁に設けることにより、ガイド本体に十分な支持力が提供され、かつ、神経組織の再生に必要な経路のための空間が維持される。
さらに、らせん状支持体の巻き付き性、伸張性および機械的適合性により、運動器官における神経修復が促進される。
ガイド本体とらせん状支持体の両方は、開始材料として動物組織を用いて調製され、主要な構成要素は少量の糖タンパク質を含むコラーゲンであり、これら糖タンパク質は人体に吸収可能なアミノ酸とポリペプチドに分解可能である。

なめしステップ

本発明は、なめしステップとしてさらに架橋法とタンパク質グラフト法を用いることにより、組織の機械的強度と靱性とを向上させる。
これに関して、動物組織の切片は通常機械特性に乏しい（採取後）。
ここで用いる場合、「機械特性」とは機械的強度、靱性、剛性および係数（ｍｏｄｕｌｕｓ）を意味する。
架橋とタンパク質グラフトの両方により、組織コラーゲン（タンパク質）基質の機械特性を改質することができる。
架橋およびタンパク質グラフトは高分子の機械特性を改善するのに用いられる普通の方法であるが、タンパク質が変性する場合が多々あるため、試薬の選択並びに反応条件を慎重に決定することもまた重要である。
架橋の長さ、密度および分布は、組織材料の安定性と機械特性を確保するよう適切に設計される。

例えば、架橋剤の分子鎖の長さは架橋長さを決定する。
長い鎖長によってより良好な材料可撓性が得られる。
しかしながら、分子鎖が長ければ長いほどコラーゲン基質内への浸透がより困難になる。
例えば、エポキシ化合物を架橋剤として選択した場合、分子鎖は４〜８個の炭化水素であることが好ましい。
架橋密度は架橋度を決定する。
架橋密度が高いほど、より良好な材料安定性が得られるが、架橋密度が高いほど（特に短い分子鎖と結合する場合）、材料に高い局部的応力が生じ得る。
架橋分布は比較的均一であることが理想的であるが、通常そのような均一な分布を得ることは難しい。
より低い濃度の架橋剤溶液を用い、低温下で長い反応継続時間かつ同じ反応を数回以上繰り返すことにより、より良好な結果が得られる場合が多い。
例として、米国特許第６，１０６，５５５号公報に開示のエポキシ化合物を架橋剤として用いると、４〜８個の炭化水素原子鎖を取り入れることによって良好な材料安定性、良好な可撓性、靱性並びに強度を、濃度０．１〜２％、４〜２４℃、３〜１０日間の反応並びに該反応を２〜５回繰り返すことによって得ることができる。

化学試薬は、組織固定に用いるのに本明細書で説明したのと同じであってよい。
タンパク質グラフト法により、組織の機械的強度、靱性、剛性並びに係数をさらに改善することができる。
タンパク質グラフト法には、大量のポリマー鎖が必要であるため、タンパク質構造の性質を実質的に変化させることができる。
高分子ポリマーのいくつかは、重縮合プライマーを用いることにより、コラーゲン分子中にグラフトさせることができる。
危険材料が人体に導入されるのを避けるために、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリアセタール酸（ＰＬＡ）、その他などの生分解性の高分子ポリマーをグラフト剤として用いることが好ましい。
これらの生分解性ポリマーは、ちょうど炭水化物や脂肪の代謝のように、トリカルボン酸回路（ＴＣＡ回路）を介して宿主環境内で固定することができる。
そのような広範なタンパク質の改質後、組織材料の機械特性に悪影響を及ぼすことなく、２５ｋＧｙのガンマ線殺菌を適用することができる。
たんぱく質グラフトの総量は最適に制御することができる。

活性層

神経ガイドの表面はまた、活性層を備える。
この活性層は、ポリペプチドまたはグリコサミノグリカンを含み得る。
ポリペプチドの一例は、１６リジン（Ｋ１６）、グリシン（Ｇ）、アルギニン（Ｒ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）、システイン（Ｃ）の縮合から得られるポリペプチドであり、該グリコサミノグリカンはヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ヘパリン、アセチルヘパリン硫酸またはケラチン硫酸である。
これらポリペプチドまたはグリコサミノグリカンは、広範囲の接着性を呈し、増殖因子の活性効果を高め、あるいは未分化細胞を活性化して順応した分化をさせるため、器官組織の再生修復を誘導する機能を果たすことができる。

材料

神経ガイド本体、並びにらせん状支持体は、動物の腸管膜、心膜、肋膜、あるいは網を用いて作製することができる。

方法

本発明による生体神経ガイドの作製方法は、以下のステップを含んでなる。
（１）材料の選択と洗浄：新鮮な動物の膜組織を採取して、塩化ベンザルコニウムまたはクロルヘキシジンで殺菌し、過剰な不純物と不規則部分を除去するためにトリミングする。
必要な膜材料は、ニートで強靱な膜材料を採取して洗浄することによって得られる。
（２）脱脂：膜内の脂肪と脂溶性不純物を有機溶媒で抽出する。
（３）架橋固定：膜中のコラーゲン分子を非アルデヒド固定剤を用いて架橋して固定する。
（４）抗原の最小化：膜のタンパク質中の特定の活性基、すなわち−ＯＨまたは−ＮＨ_２ または−ＳＨを、活性剤で遮断し、膜中のタンパク質のらせん鎖中の特定の水素結合を、強力な水素結合を有する試薬を用いて置換する。
（５）なめし工程：第一に、予成形したポリマーを合成によりモノマーから作製する。
第二に、膜をアルコールで脱水する。
第三に予成形したポリマーを、重縮合プライマーを用いてコラーゲン分子中にグラフトする。
ＰＧＡをグラフト剤として用いた場合、少量のグリコシドを重縮合プライマーとして用いてもよい。
ＰＬＡをグラフト剤として用いる場合、少量のラクチドを重縮合プライマーとして用いてもよい。
例えば、ＰＬＡをタンパク質グラフト剤として用いる場合、３０〜５０ｍｇのラクチドを１０００ｍｌのクロロホルムに溶解して用いることができる。
２〜３ｇのトリイソブチルアルミニウムを合成触媒として添加することができ、この溶液は４０〜６０℃で１〜２時間撹拌混合することができる。
次いで、１００ｍｌの０．１ＮのＮａＯＨ溶液を添加し、３０〜６０分間撹拌混合し、触媒を破壊する。
その後、分離した水層（触媒を含む）を除去し、予成形ポリマーを準備する。
脱水した膜を予成形ポリマー溶液中に浸漬する。
０．１〜２ｇのラクチドと０．５〜５ｇの無水プロピオン酸を開始触媒として添加し、次いで３４〜４０℃で２〜４時間撹拌混合する。
膜を取り出して、クロロホルム中に入れて残存する予成形ポリマーを洗浄除去する。
生理的食塩水ですすいだ後、膜を食塩水中に１２〜２４時間浸漬して含水率を回復する。
これで膜を次の処理工程に進める準備ができる。
（６）活性層のカップリング：活性表面層を、カップリング剤を用いて神経ガイド本体にカップリングする。
活性表面層は、ポリペプチドやグリコサミノグリカンなどの活性成分を有する。具体的には、膜材料の表面を増殖因子に接着可能なポリペプチドやグリコサミノグリカンとカップリングして活性表面層を形成する。
（７）神経ガイドの作製：膜材料を、医療用ゲルでロッド形状の鋳型上に接合してガイド本体を形成する。
別途、同じ（あるいは別の）膜材料を特定の幅に切断して、これを所与の距離でらせん状に多層巻き付けて、特定の支持力を有するらせん状支持体を形成するようガイド本体の表面上に接合する。
次に鋳型を除去して最終生成物を得る。

固定

上記方法のステップ３において固定剤は、タンパク質分子と容易に架橋する試薬であってよく、エポキシド、ジアシルジアミド、ジイソシアナート、ポリエチレングリコールまたはカルボジイミドから選択される１つまたは２つの試薬であってよい。
この固定剤は、炭化水素のバックボーンを有するエポキシ化合物であってよく、これは水溶性であり、かつそのバックボーン中にエーテルあるいはエステル結合を含まないものである。
この固定剤は、米国特許第６，１０６，５５５号公報に開示されているものであり、その全開示がその全てが記載されているものとして、参照として本明細書に組み入れられる。
例にはエポキシド、ジアミド、ジイソシアナート、ポリエチレングリコールまたはカルボジイミドが包まれ、ここでエポキシドは単環式エポキシドまたは二環式エポキシドであるか、あるいは低級ポリ（エポキシド）（低級ポリ（エチレンオキシド）またはグリシジルエーテル）であってよい。
エポキシドは単環式エポキシドである、

または、二環式エポキシドである、

であってよく、また、ポリプロピレンオキシドなどの低級ポリエポキシドであってよい。
活性剤

上記方法のステップ４における活性剤は、低分子量の無水有機酸、塩化アシル、アシルアミド、単環式酸化物またはエポキシドであり、および強力な水素結合力を有する試薬はグアニジン化合物であってよい。

活性層用カップリング剤

上記方法のステップ６においてポリペプチドをカップリングするのに用いられるカップリング剤は、ジアシルジアミド、無水二酸、ジエポキシまたは−ＮＨ_２ 、−ＯＨおよび−ＣＯＯＨと縮合可能なその他の二官能試薬であってよい。

本発明は以下の利点を提供する。
最終生成物は、動物の組織などの天然の生体材料を開始材料として用いて作製されるため、免疫原生もなく、拒絶反応も最小限であると同時に、優れた組織適合性を有し、かつ、神経細胞の分裂、増殖並びに移動を誘導することができるため、神経組織の再生を促進することができる。
神経組織の成長に必要な経路空間を設けることにより、神経組織の成長に要求される栄養素が、栄養素の浸透および成長中の血管を介して供給されるため、神経組織の再生修復に対して優れた微環境を形成することができる。
神経組織の修復が完了した後、生体神経ガイドは分解されて異物として存在しないよう吸収可能である。

実施例１
図１と図２を参照すると、心膜、網、胸膜、横隔膜または小さい腸管膜などの新鮮なブタの膜材料を切開し、脂肪材料とゆるい繊維組織を注意深く取り除いて、可能な限り薄くなるよう靱性膜をトリミングする。
次いで、膜を洗浄し、清浄して水ですすぎ、その後油脂ですすぐ。膜材料中の可溶性の不純物を有機溶媒で抽出する。
膜は、図１と図２に示すように、ガイド本体１とらせん状支持体２とに用いられる。

次に、溶媒を除去して、炭素環式酸化物を用いて架橋固定を行う。

洗浄して乾燥凍結した後、無水酢酸または無水酪酸による反応を行い抗原基を遮断し、次いで膜をグアニジン塩酸塩のトリス緩衝液で処理して抗原の特定の配座を変性する。

その後、酸無水物を重縮合剤として用いてポリグリコール酸のプレポリマーを、コラーゲン分子にグラフトし、耐久性を強化する。

次いで分子内無水二酸を二官能カップリング剤として用い、１６リジン（Ｋ１６）、グリシン（Ｇ）、アルギニン（Ｒ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）およびシトシン（Ｃ）を縮合して得られたポリペプチドまたはグリコサミノグリカンを膜材料上にカップリングすることにより活性表面層３を形成し、該層は円筒状のガイド本体１の内表面となる。

この時点で、膜材料は所望する仕様に従って切断し、その後、医療用ゲルを用いて膜材料をロッド形状の鋳型上に接着してガイド本体１を形成する。
別途、膜材料を細長い切片（例えば、約０．５〜２．０ｍｍ幅）に切断し、ガイド本体１の周囲にらせん状に巻き付けその外表面上に接着することでらせん状支持体２を形成する。
神経ガイドの径を増大するか、別のらせん状要素片を追加することにより、必要な支持力が得られるまで、多層のらせん状支持体２を（接着により）設けることができる。
次いで神経ガイドを鋳型から取り外し、洗浄、殺菌してから保存溶液として用いられる生理的食塩水と共に密閉してパッケージする。

図３Ａから図３Ｃは、図１と図２の神経ガイドが損傷した神経Ｎの外科的修復においてどのように用いられるかを例示している。
図３Ａは、（例えば切断されて）損傷した神経Ｎを示している。
図３Ｂに示すように、損傷した神経Ｎの端部を、図１の神経ガイドの円筒状内径内に神経ガイドがコネクタとして作用して挿入することができる。
縫合糸４を適用して神経ガイドの端部を損傷した神経に１０針縫合または取り付ける。

上記説明は本発明の特定の実施態様に関するものであるが、本発明の趣旨から逸脱することなく、様々な修正を行うことができることは理解すべきである。
添付の特許請求の範囲はそのような修正を包括することを意図するものであり、本発明の真の範囲および趣旨内に包含されるものである。

本発明の一実施態様による人工生体神経ガイドの透視図である。 図１の人工生体神経ガイドの断面図である。 図１の神経ガイドを用いた、損傷神経の外科的修復を例示する図である。 図１の神経ガイドを用いた、損傷神経の外科的修復を例示する図である。 図１の神経ガイドを用いた、損傷神経の外科的修復を例示する図である。

符号の説明

１ ガイド本体
２ らせん状支持体

Claims (20)

1. 生体神経ガイドを作製する方法であって、
   天然の動物組織膜を提供するステップと、
   該膜を架橋かつ固定するステップと、
   該膜由来の抗原を最小化するステップと、
   該膜をなめすステップと、
   活性層を該膜の内表面にカップリングするステップと、
   該膜を所望の寸法と形状に切断するステップと、
   該膜の切片が円筒形状を呈するよう、該膜の切片をロッド状の鋳型上に配置するステップと、
   らせん状支持体（２）を該膜の該切片の外側表面に取り付けるステップと、
   を含むことを特徴とする生体人工神経ガイド作製方法。
2. 前記活性層がポリペプチドを含む、請求項１に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
3. 前記架橋かつ固定するステップが、水溶性の炭化水素バックボーンを有し、該バックボーンにエーテル結合またはエステル結合を含まないエポキシ化合物を用いて達成される、請求項１に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
4. 前記エポキシ化合物が、エポキシド、ジアミド、ジイソシアナート、またはカルボジイミドからなる群から選択される、請求項３に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
5. 前記膜由来の前記抗原を最小化するステップが、前記膜のタンパク質中の特定の活性基を遮断するために活性剤を用いることと、前記膜中のタンパク質分子のらせん鎖内の特定水素結合を置換してその特定の配座を変性するために強力な水素結合力を有する試薬を用いることと、を含む、請求項１に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
6. 前記膜をなめすステップが、モノマーからポリマーを作製することと、該ポリマーをコラーゲン分子中にグラフトすることと、を含む、請求項１に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
7. 前記らせん状支持体が前記膜と同じ材料から切断される、請求項１に記載の生体人工神経ガイド作製方法。
8. 人体に移植するための生体神経ガイドであって、
   架橋し、抗原を最小化した天然の動物組織膜から作製した円筒状本体であって、該円筒状本体は活性層がカップリングされた内表面と外表面とを有する円筒状本体と、
   該円筒状本体の外表面に取り付けられるらせん状支持体と、
   を含んでなることを特徴とする生体人工神経ガイド。
9. 前記活性層がポリペプチドを含む、請求項８に記載の生体人工神経ガイド。
10. 前記膜が、水溶性の炭化水素バックボーンを有し、該バックボーンにエーテル結合またはエステル結合を含まないエポキシ化合物で固定される、請求項８に記載の生体人工神経ガイド。
11. 前記エポキシ化合物が、エポキシド、ジアミド、ジイソシアナート、またはカルボジイミドからなる群から選択される、請求項１０に記載の生体人工神経ガイド。
12. 前記膜のタンパク質中の特定の活性基を遮断するために活性剤と、前記膜中のタンパク質分子のらせん鎖中の特定の水素結合を置換してその特定の配座を変性するために強力な水素結合力を有する試薬とにより、前記膜からの前記抗原が前記膜から最小化される、請求項８に記載の生体人工神経ガイド。
13. 前記らせん状支持体が前記膜と同じ材料から切断される、請求項８記載の生体人工神経ガイド。
14. 前記膜がなめされたものである、請求項８に記載の生体人工神経ガイド。
15. 人体への移植用生体神経ガイドであって、
    該神経ガイドが、
    天然の動物組織膜を提供するステップと、
    該膜を架橋かつ固定するステップと、
    該膜由来の抗原を最小化するステップと、
    該膜をなめすステップと、
    活性層を該膜の内表面にカップリングするステップと、
    該膜を所望の寸法と形状に切断するステップと、
    該膜の切片が円筒形状を呈するよう、該膜の切片をロッド状の鋳型上に配置するステップと、
    らせん状支持体を該膜の該切片の外側表面に取り付けるステップと、
    を含む方法によって作製されることを特徴とする生体人工神経ガイド。
16. 前記活性層がポリペプチドを含む、請求項１５に記載の生体人工神経ガイド。
17. 前記架橋かつ固定ステップが、水溶性の炭化水素バックボーンを有し、該バックボーンにエーテル結合またはエステル結合を含まないエポキシ化合物を用いて達成される、請求項１５に記載の生体人工神経ガイド。
18. 前記膜由来の前記抗原を最小化するステップが、前記膜のタンパク質中の特定の活性基を遮断するために活性剤を用いることと、前記膜中のタンパク質分子のらせん鎖内の特定水素結合を置換してその特定の配座を変性するために強力な水素結合力を有する試薬を用いることと、を含む、請求項１５に記載の生体人工神経ガイド。
19. 前記膜をなめすステップが、モノマーからポリマーを作製することと、該ポリマーをコラーゲン分子中にグラフトすることと、を含む、請求項１５に記載の生体人工神経ガイド。
20. 前記らせん状支持体が前記膜と同じ材料から切断される、請求項１５に記載の生体人工神経ガイド。

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