JP2009501137A - 所望により放射性標識したイマチニブの製造のための方法および中間体 - Google Patents

Abstract

本発明はＮ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミン（式（Ｉ）
【化１】

の化合物）の新規製造法、温血動物に化合物を投与した後に観察されるＮ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンの代謝産物の新規製造法、ならびに当該方法に使用する中間体に関する。それらの製造のための新規出発物質および方法は、同様に本発明の対象である。本明細書に記載の方法は、アイソトープ標識を有する前記化合物を得るためにとりわけ適している。かくして得られる標識化合物は、Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンおよびその薬学的に許容される塩の代謝を臨床的および前臨床的研究において追跡および調査するためにとりわけ適している。

Description

Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミン（式Ｉの化合物、イマチニブ）のメシル酸塩は商品名Ｇｌｉｖｅｃ（登録商標）（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））で市販されている。Ｇｌｉｖｅｃ（登録商標）は慢性骨髄性白血病およびＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）の処置に適したチロシンキナーゼ阻害剤である。Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンは例えば、ＵＳ ５，５２１，１８４に記載のとおりに製造することができる。Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンのモノメシル酸塩を、例えばＷＯ ９９／０３８５４の実施例４および６に記載のとおりに、またはＷＯ０３／０９０７２０に記載のとおりに製造または製剤することができる。

本発明はＮ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミン（式Ｉの化合物、イマチニブ）の新規製造法、温血動物に化合物を投与した後に観察されるＮ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンの代謝産物の新規製造法、ならびに当該方法に使用する中間体に関する。それらの製造のための新規出発物質および方法は、同様に本発明の対象である。本明細書に記載の方法は、アイソトープ標識を有する前記化合物を得るためにとりわけ適している。かくして得られる標識化合物は、Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンおよびその薬学的に許容される塩の代謝を臨床的および前臨床的研究において追跡および調査するためにとりわけ適している。

本願明細書の記載に基づくと、当業者は具体的に記載されたもののＮ−オキシド、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々のアイソマーおよびアイソマーの混合物ならびにそれらの薬学的に許容される塩に加えて、本明細書に記載の化合物のＮ−オキシド誘導体を製造することができる。

第１の態様において、式Ｉ

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
の化合物のメシル酸塩を、１−メチルピペラジンを式ＩＩ

〔式中、Ｈａｌはハロゲン、好ましくはクロロを示し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物と反応させることによって製造する。

式ＩＩ〔式中、Ｈａｌはハロゲン、好ましくはクロロを示し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕の化合物を、第１に式ＩＩＩ

〔式中、Ｒ１は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の塩酸付加塩をＨ_２ＮＣ＊Ｎ
〔式中、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
と反応させて式ＩＶ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のグアニジニル置換ニトロフェニル誘導体を得ることができる。第２の工程において、式ＩＶのグアニジニル置換ニトロフェニル誘導体をさらに、式Ｖ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の対応するグアニジニル置換アミノフェニル誘導体に還元する。第３の工程において、かかる式Ｖのグアニジニル置換アミノフェニル誘導体を式ＶＩ

〔式中、Ｒ_３およびＲ_４は共にＣ_１−４アルキルである〕
のピリジル誘導体と反応させることによって、式ＶＩＩ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のピリジルピリミジンを得る。かかる式ＶＩＩのピリジルピリミジンを最後に４−ハロメチル−安息香酸と反応させて式ＩＩのアミドを得る。

式ＶＩＩ〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕のピリジルピリミジンを、下記経路によっても製造することができる。第１の工程において、式Ｉ〔基および記号は上記定義のとおりの意味を有する〕の化合物を窒素原子に結合した水素原子を保護基によって置換する試薬と反応させ、したがって式Ｉ

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に保護基であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
の化合物を得る。第２の工程において、分子の安息香酸単位を加水分解によって除去し、式ＸＩＩ

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に保護基であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
の遊離アミンを得て、その後保護基Ｒ_１およびＲ_２を水素で置換し、すなわち保護基を除去して、式ＩＩ〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕の化合物を得る。

第２の態様において、式ＶＩＩＩ

〔式中、Ｒ_５は水素またはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
の化合物を、式Ｘ

〔式中、Ｒ_５は保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
の化合物を式ＸＩ

の化合物と反応させ、その後Ｒ_５が保護基を形成する場合には保護基Ｒ_５を分離することによって得ることができる。

式Ｘ

〔式中、基および記号は上記のとおりの意味を有する〕
の化合物を、式ＩＸ

〔式中、Ｒ_５は保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはＣ_１−４アルキルである〕
の化合物を第１にｔ−ブチルリチウムと反応させて対応するリチオ誘導体を製造し、当該リチオ誘導体をＣ＊Ｏ_２〔式中、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープ、例えば^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕と反応させて得ることができる。

更なる局面において、本発明は式Ｉ〔式中、基および記号は上記のとおりの意味を有する〕の化合物の酸化による、式ＸＩＩＩ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物の製造に関する。

更なる局面において、本発明は式ＸＶＩ

〔Ｈａｌはハロゲン、好ましくはクロロを意味し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物を１−メチルピペラジンと反応させることによる式ＸＩＶ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物の製造に関する。

出発物質、式ＸＶＩ〔式中、Ｈａｌはハロゲンを意味し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕の化合物を、下記方法によって得ることができる。最初に、式ＶＩＩ〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素である〕の遊離アミンを２級アミノ基の存在下で１級アミンの１個の水素原子の選択的置換が起こる条件下で保護基を導入する試薬で反応させ、その後ピリジル窒素原子を例えばＭＣＰＢＡで導入し、式ＸＶ

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、ＰＧは保護基を意味し、他の記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のＮ−オキシドを得る。当該式ＸＶのＮ−オキシドを第１に、保護基ＰＧを除去する条件に供して遊離アミンを得て、その後４−ハロメチル安息香酸と反応させて式ＸＶＩ〔Ｈａｌはハロゲンを意味し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕の化合物を得る。

更なる態様において、本発明は式ＸＶＩＩＩ

〔式中、基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物を、式ＩＩ

〔式中、Ｈａｌはハロゲン、好ましくはクロロを意味し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
の化合物を式ＸＶＩＩ

のピペラジン誘導体と反応させることによって得る。

最後に、本発明は式ＸＸ

〔式中、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または炭素アイソトープ、例えば^１３Ｃの富化によって標識化されている炭素を示し、Ｎ＊はアイソトープの天然分布を有するか、あるいは窒素アイソトープ、例えば^１５Ｎの富化によって標識化されている窒素を示す〕
の化合物の製造法であって、式ＸＸＩ

〔式中、Ｒ_６およびＲ_７は共にＣ_１−４アルキルであり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のピリジン誘導体を式ＸＸＩＩ

〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に水素であり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のフェニルグアニジン誘導体と反応させることを含む方法に関する。

式ＸＸＩ〔式中、Ｒ_６およびＲ_７は共にＣ_１−４アルキルであり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕のピリジン誘導体を、３−トリメチルスタニルピリジンで出発し、当該化合物を式ＸＸＩＶ

〔式中、Ｈａｌはハロを意味し、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のアセチルハライドと反応させ、式ＸＸＩＩＩ

〔式中、記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のアセチルピリジンを得ることによって製造することができる。かかる式ＸＸＩＩＩのアセチルピリジンをさらに、ジ−Ｃ_１−４アルキルホルムアミドジ−Ｃ_１−４アルキルアセタールと反応させて所望のピリジン誘導体形の式ＸＸＩ〔式中、Ｒ_６およびＲ_７は共にＣ_１−４アルキルであり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕を得る。

式ＸＸＩＩ〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に水素であり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕アミノフェニルグアニジン誘導体を、式ＸＸＶ

〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に水素であり、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のチオウレア誘導体で出発し、かかる式ＸＸＶのチオウレア誘導体を、各アミノ基の１個の水素原子を保護基、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルと交換する試薬で反応させて、式ＸＸＶ〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に保護基を意味する〕のチオウレア誘導体を得ることによって製造することができる。かかる式ＸＸＶの保護チオウレア誘導体を、２−メチル−５−ニトロアニリンと反応させて式ＸＸＶＩ

〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に保護基を意味し、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
のニトロフェニルグアニジン誘導体を得る。両方の保護基を分離し、ニトロ基を還元して最終的に式ＸＸＩＩ〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に水素を意味し、他の記号は上記式ＸＸの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕のアミノフェニルグアニジン誘導体を得る。

他の全ての出発物質は既知であるか、既知の方法によって製造することができるか、または商業的に入手可能であり；とりわけそれらは実施例に記載の方法を使用して製造することができる。

本明細書に記載の全ての方法工程を既知の反応条件下で、好ましくは具体的に記載のもので、好ましくは使用する試薬に対して不活性であり、これらを溶解することができる溶媒または希釈剤なし、または通常は存在下で、触媒、縮合剤もしくは中和剤、イオン交換剤、例えばＨ＋形態の典型的なカチオン交換剤なし、または存在下で、反応および／または反応物のタイプに依存して低温、常温または高温で、例えば−１００℃〜約１９０℃、好ましくは約−８０℃〜約１５０℃で、例えば−８０〜−６０℃で、室温で、−２０〜４０℃で、もしくは使用する溶媒の沸点で、大気圧下または圧力下が適当な場合には密封容器中で、そして／あるいは不活性雰囲気中で、例えばアルゴンまたは窒素下で、行うことができる。問題の反応に適当であると選択可能な溶媒には、例えば水、エステル、典型的には低級アルキル−低級アルカノエート、例えばジ酢酸エチル、エーテル、典型的には脂肪族エーテル、例えばジエチルエーテル、例えば環状エーテル、例えばテトラヒドロフラン、液体芳香族性炭化水素、典型的にはベンゼンまたはトルエン、アルコール、典型的にはメタノール、エタノールまたは１−もしくは２−プロパノール、ニトリル、典型的にはアセトニトリル、ハロゲン化炭化水素、典型的にはジクロロメタン、酸アミド、典型的にはジメチルホルムアミド、塩基、典型的にはヘテロ環式窒素塩基、例えばピリジン、カルボン酸、典型的には低級アルカンカルボン酸、例えば酢酸、カルボン酸無水物、典型的には低級アルカン酸無水物、例えば無水酢酸、環状、直鎖状または分枝鎖状炭化水素、典型的にはシクロヘキサン、ヘキサンもしくはイソペンタン、またはこれらの溶媒の混合物、例えば水溶液を、方法の記載に特に記載がない限り、含む。かかる溶媒の混合物は方法において例えばクロマトグラフィーまたは分配にも使用することができる。

本発明の化合物を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機または有機酸と反応させることによって、薬学的に許容される酸付加塩として製造することができる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離酸形の化合物を薬学的に許容される無機または有機塩基と反応させることによって製造することができる。あるいは、塩形の本発明の化合物を、出発物質または中間体の塩を使用して製造することができる。

遊離酸または遊離塩基形の本発明の化合物を対応する塩基付加塩または酸付加塩からそれぞれ製造することができる。例えば、酸付加塩形の本発明の化合物を適当な塩基（例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウム等）で処理することによって対応する遊離塩基に変換することができる。塩基付加塩形の本発明の化合物を適当な酸（例えば塩酸等）で処理することによって対応する遊離酸に変換することができる。

未酸化形の本発明の化合物を本発明の化合物のＮ−オキシドから還元剤（例えば、硫黄、硫黄ジオキシド、トリフェニルホスフィン、ホウ化水素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、３塩化リン、３臭化物等）で適当な不活性有機溶媒（例えば、アセトニトリル、エタノール、ジオキサン水溶液等）中で０〜８０℃で処理することによって製造することができる。

本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を当業者に既知の方法によって製造することができる（例えば、さらに詳しくはSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照）。例えば適当なプロドラッグを未誘導体化本発明の化合物を適当なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカルボネート等）で反応させることによって製造することができる。

本発明の化合物の保護誘導体を当業者に既知の方法によって得ることができる。保護基の製造およびその除去について使用可能な技術の詳細な記載は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見出すことができる。

本発明の化合物を溶媒和物（例えば水和物）として便宜に製造あるいは本発明の方法によって形成することができる。本発明の化合物の水和物をジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールのような有機溶媒を使用して水／有機溶媒混合物から再結晶化することによって便宜に製造することができる。

本発明の化合物を、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割試薬と反応させることによってジアステレオマー化合物の対を形成し、ジアステレオマーを分割し、光学的に純粋なエナンチオマーを回収することによって、個々の立体異性体として製造することができる。エナンチオマーの分割を本発明の化合物の共有ジアステレオマー誘導体を使用して行うことができるが、解離性複合体が好ましい（例えば結晶性ジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは異なる物理的特徴（例えば融点、沸点、溶解度、反応性等）を有し、これらの不一致の利点を生かして容易に分割することができる。ジアステレオマーをクロマトグラフィーによって、または好ましくは溶解度の差に基づく分割／分解技術によって分割することができる。光学的に純粋なエナンチオマーを、分割試薬と共に、ラセミ化を起こさないあらゆる実用的な方法によって回収する。ラセミ混合物から立体異性体を分割するために使用することができる技術のより詳細な説明は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981に見出すことができる。

上記化合物の合成の詳細な例を実施例に見出すことができる。好ましい態様において、上記化合物を実施例に定義の方法および工程にしたがって、またはそれと同様に製造する。

実施例
本発明はこれに限定されないが、上記化合物の製造を説明する下記実施例によってさらに例示される。

略語
ＤＭＡＰ ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＭＣＰＢＡ ｍ−クロロペル安息香酸
ＭｅＯＨ メタノール
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ＲＴ 室温
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＬＣ 薄層クロマトグラフィー
ｗ／ｖ 体積あたりの重量

実施例１：４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミドメシレート
１−メチルピペラジン（３ｍｌ、２７ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍｌ）中４−クロロメチル−Ｎ−｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−ベンズアミドの塩酸塩（工程１．５、３３５ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）溶液に加え、得られた混合物を５時間４５℃で攪拌する。懸濁液をＲＴに冷却し、水（４．４ｍｌ）および２０％ｗ／ｖ水酸化ナトリウム（１３０μｌ）を加える。得られた懸濁液を３０分間９０℃で攪拌し、ＲＴに冷却し、遠心分離し、水性溶媒を除去する。ベージュ色結晶をさらに２回水で洗浄し、高真空下で乾燥する。最終的に、固体をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーでジクロロメタン：ＭｅＯＨ ９０：１０および１％アンモニアで溶出して精製し、中間体を黄色油状物として得る。最終的に、得られた中間体をＭｅＯＨ（４ｍｌ）に溶解し、メタンスルホン酸（２１μｌ）を加え、得られた溶液を攪拌する。得られた生成物を不活性標準生成物でシード添加して溶液から結晶化して、比放射能１．７３ＧＢｑ／ｍｍｏｌの表題化合物を得る。
¹ H-NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ: 2.21 (s, 3H); 2.3 (s, 3H); 2.8 (s, 3H); 2.85-3.1, m, 4H); 3.25-3.4 (m, 4H); 3.62 (br.s, 3H); 7.18 (d, J = 8Hz; 1H); 7.38-7.51 (m, 4H); 7.91 (d, 7.6 Hz, 1H); 8.5 (d, J = 1.4 Hz, 1H); 8.45 (d, J = 7.8, 1H); 8.49 (d, J = 5 Hz, 1H); 8.65 (dd, J = 1.5 and 4.6 Hz, 1H); 8.95 (s, 1H); 9.22 (d, J = 1.5 Hz, 1h); 9.29 (br.s, 1H), 10.12 (s, 1H); MS: (MH+, 496.4)

工程１．１：［ ^１４ Ｃ］シアンアミド
バリウム［^１４Ｃ］カルボネート（１．１８ｇ、６ｍｍｏｌ、１０．４ＧＢｑ、１．７９ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）を石英ガラス円柱管に入れ、アンモニアガスの緩気流下で８００℃に加熱する。３時間後、粗バリウム［^１４Ｃ］シアンアミド生成物をＲＴに冷却し、アンモニア気流を止める。粗バリウム［^１４Ｃ］シアンアミド（１．０６３ｇ、６ｍｍｏｌ）を水（１０ｍｌ）に懸濁し、超音波で溶解する。２Ｍ硫酸（２．６ｍｌ）を攪拌しながらｐＨ５．５まで注意深く滴下する。水を６０℃で２３Ｔｏｒｒで除去する。残渣をドライアイス／アセトンで冷却し、残部の水を凍結乾燥して結晶固体生成物を得る。これをジエチルエーテルにとり、ろ過して未溶解残渣を除去する。エーテルを除去し、得られた残渣をｔ−ブタノールに溶解する。

工程１．２：Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）−［ ^１４ Ｃ］グアニジン
ｔ−ブタノール中２−メチル−４−ニトロアニリン（１．５２ｇ、１９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に４０℃でジオキサン（５ｍｌ）中４Ｍ塩酸を加えて黄色懸濁液を得る。溶媒を除去し、乾燥残渣をｔ−ブタノール（５ｍｌ）中粗［^１４Ｃ］シアンアミド（工程１．２）溶液に加え、黄色懸濁液を得る。１００℃に１時間加熱した後、溶液を得る。さらに５時間後、溶媒を４５℃で除去し、残渣を３％ｗ／ｖ水酸化ナトリウム（１０ｍｌ）で処理し、ジクロロメタン（３×３０ｍｌ）で抽出する。有機相を合併し、蒸発し、シリカゲルクロマトグラフィーで７５：２５：０．５：０．５ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ：水：酢酸で溶出して、表題生成物、６．０７ＧＢｑを得る。

工程１．３：Ｎ−（５−アミノ−２−メチル−フェニル）−［ ^１４ Ｃ］グアニジン
１０％Ｐｄ／Ｃ（１２５ｍｇ）を含むｎ−ブタノール（２５ｍｌ）中Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）［^１４Ｃ］グアニジン（工程１．２）（７６０ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）の混合物を水素ガス１気圧下でＲＴで４．５時間攪拌する。混合物をＨｙｆｌｏ（Ｃｅｌｉｔｅ）でろ過し、さらなるｎ−ブタノール（３×１０ｍｌ）で洗浄し、合併し、ｎ−ブタノールをロータリーエバポレーターで４５℃で除去して、粗生成物を無色油状物として得る。放射性ＴＬＣ（８０：２５：０．５：０．５ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ：水：酢酸、シリカゲルＦ２５４）は、ＲＦ＝０．３４に位置する；全活性３．７ＧＢｑ。

工程１．４：４−メチル−Ｎ＊３＊−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン
ｎ−ブタノール（３０ｍｌ）中粗Ｎ−（５−アミノ−２−メチル−フェニル）−［^１４Ｃ］グアニジン（工程１．４、４７６ｍｇ、２．８９ｍｍｏｌ）および３−ジメチルアミノ−１−ピリジン−３−イル−プロペノン（５０９ｍｇ、２．８９ｍｍｏｌ）の溶液を還流温度（１３０℃）で３．５時間加熱する。溶媒を除去し、フラッシュクロマトグラフィー（２：９８ ペンタン：アセトンで溶出）で精製して、表題生成物を黄色泡状物として得る。放射性ＴＬＣ（２：９８ ペンタン：アセトン、シリカゲルＦ_２５４）はＲＦ＝０．５に位置する。全活性、２．３ＧＢｑ。

工程１．５：４−クロロメチル−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド
乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）中４−メチル−Ｎ＊３＊−（４−ピリジン−３−イル−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン（工程１．４、６５５ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下０℃で、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中４−（クロロメチル）−ベンゾイルクロライド（２．６４６ｇ、１４ｍｍｏｌ）溶液を滴下し、対応する混合物をＲＴで１６時間攪拌する。得られた懸濁液を遠心分離し、沈殿生成物をエーテルで洗浄し、再度遠心分離し、エーテルを除去し、固体を乾燥して表題化合物の塩酸塩を得る。

実施例２：４−（ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミドヒドロクロライド
４−｛４−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル［^１４Ｃ］カルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程２．３、２００．５ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ、４８６．８ＭＢｑ）にＭｅＯＨ（２０ｍｌ）中３Ｍ ＨＣｌを加える。３０分後、さらにＭｅＯＨ中１０ｍｌの３Ｍ ＨＣｌを加え、反応物をさらに６０分間攪拌する。生成物をガラス漏斗で吸引して濾取し、最初に冷ＭｅＯＨ（５ｍｌ）、次いで酢酸エチル（１００ｍｌ）で洗浄し、高真空下で乾燥させて表題化合物を橙色結晶として得る。

工程２．１：４−（４−ブロモ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＭｅＯＨ（５０ｍｌ）中Ｎ−ｂｏｃ−ピペラジン（４．９４ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）、ｐ−ブロモ−ベンジルブロマイド（５．５２ｇ、２２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（６．４ｇ、４６ｍｍｏｌ）の混合物を９０分間ＲＴで攪拌する。混合物をガラス漏斗でろ過し、溶媒を蒸発する。残渣をジクロロメタンにとり、ガラス漏斗で２回ろ過し、ジクロロメタンで洗浄する。ろ液を蒸発し、粗無色油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジエチルエーテル／ｎ−ヘキサン（１０：９０〜５０：５０）で溶出）に付して、表題生成物を白色固体として得る。

工程２．２：４−（４−［ ^１４ Ｃ］カルボキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ヘキサン（０．９７ｍｌ、１．４６ｍｍｏｌ）中ｔ−ブチルリチウム １．５Ｍ溶液を−７８℃で無水ＴＨＦ（５ｍｌ）中４−（４−ブロモ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程２．１、２８５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）溶液に加え、混合物を−７８℃で４分間攪拌する。得られたリチオ誘導体を−１９２℃に冷却し、濃硫酸をバリウム［^１４Ｃ］カルボネート（０．８５ｅｑ、１２２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、１３７８ＭＢｑ、Amersham Pharmacia Biotech）に加えて生成した［^１４Ｃ］二酸化炭素と反応させ、その後−７８℃に温め、３０分間攪拌する。反応をＭｅＯＨ（１ｍｌ）で−７８℃でクエンチし、ＲＴに温める。溶媒を真空下で除去し、飽和塩化アンモニウムを加える。混合物を酢酸エチル（３×１５ｍｌ）で抽出し、合併し、硫酸ナトリウムで乾燥する。ろ過し、溶媒を除去して粗白色固体を得る。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（第１にジエチルエーテルで、次に１０％ＭｅＯＨ ９０％ジエチルで溶出する）に付す。分画を合併し、ロータリーエバポレーターで、次いで高真空下で蒸発して、表題生成物を白色固体として得る。

工程２．３：４−｛４−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル［ ^１４ Ｃ］カルバモイル］−ベンジル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（５ｍｌ）中４−（４−［^１４Ｃ］カルボキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程２．２、１７１．５ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ、１１１４．２６ＭＢｑ）の攪拌溶液にＲＴでトリエチルアミン（３３２μｌ、２．４ｍｍｏｌ）を滴下し、その後ｉｓｏ−ブチルクロロホルメート（７８μｌ、１．０ｍｍｏｌ）を滴下する。混合物をさらに３分間攪拌し、４−メチル−Ｎ−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン（１６５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加える。１８時間後、溶液を蒸発し、残渣をシリカのフラッシュクロマトグラフィー（第１に酢酸エチル、次いで１０％ＭｅＯＨ／９０％酢酸エチル、次いで３５％ＭｅＯＨ／６５％酢酸エチル）に付して、表題化合物を明黄色固体として単離する。

実施例３：４−メチル−Ｎ＊３＊−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン
（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−フェニル）−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程３．２、８６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（４６３ｍｇ、３１０μｌ、４．０６ｍｍｏｌ）の溶液を一晩ＲＴで攪拌する。工程内分析（ＲＴＬＣ、シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ９５：５）によって、出発物質は消失している。溶媒を真空下で除去し、粗物質を１Ｎ ＨＣｌ水溶液とＣＨ_２Ｃｌ_２で分配する。有機相を再抽出した後、酸性水分画を合併し、２Ｎ ＮａＯＨ水溶液で塩基性にし、ＣＨ_２Ｃｌ_２で３回抽出する。有機相を塩水で洗浄した後、有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を蒸発する。粗物質（４８ｍｇ）をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ９８．５：１．５）で精製して表題生成物を得る。比放射能１．９３４ＧＢｑ／ｍｍｏｌ。 MS: + cESI: 279.89 M+. ¹H-NMR (500.1 MHz, d⁶-DMSO): 2.08 (s, 3H), 4.88 (s, 2H), 6.35 (dd, 1H, J = 2 Hz, J = 7.9 Hz), 6.8 (d, 1H, J = 1.7 Hz), 6.80 (d, 1H, 8.1 Hz), 7.37 (d, 1H, 5.3 Hz), 7.55 (dd, 1H, J = 4.8 Hz, J = 8 Hz), 8.41 (m, 1H), 8.47 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 8.67 (s, 1H), 8.70 (dd, 1H, J = 1.5 Hz, J = 4.9 Hz), 9.25 (d, 1H, J = 1.9 Hz).

工程３．１：（５−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイル］−アミノ｝−２−メチル−フェニル）−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−ジメチルアミノピリジン（３０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍｌ）中４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（実施例１、１２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２６５ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、アルゴン下でＲＴで加えた後、橙色溶液が形成され、これをＲＴで一晩攪拌する。溶媒を真空下で除去し、粗生成物をシリカでクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ９３：７で溶出する）に付す。分画を合併し、ロータリーエバポレーターで、次いで高真空下で蒸発して表題化合物を得る。

工程３．２：（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−フェニル）−（４−ピリジン−３−イル−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（０．８ｍｌ）中（５−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイル］−アミノ｝−２−メチル−フェニル）−（４−ピリジン−３−イル−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程３．１、１５３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）および２−ジエチルアミノエチルアミン（５３ｍｇ、６４μｌ、０．４５ｍｍｏｌ）の溶液を一晩ＲＴで攪拌する。工程内分析（ＲＴＬＣ、シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ９５：５）に従って、さらに２−ジエチルアミノエチルアミン（１５９ｍｇ、１９２μｌ、１．３５ｍｍｏｌ）をほぼ出発物質が検出されなくなるまで加える。溶媒を真空下で除去した後、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ９８：２）で精製して表題化合物を得る。

実施例４：４−（４−メチル−４−オキシ−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド
無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（実施例１、４１４ｍｇ、４３．４ｍＣｉ、１６０５．８ＭＢｑ）の溶液をＭＣＰＢＡ（２６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌｅ）でＲＴで２時間処理する。形成した沈殿を濾取し、ろ液を蒸発し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ ７０：３５で溶出）で精製して表題生成物を白色固体として得る。生成物をエタノール／酢酸エチルから結晶化する。
¹H-NMR 400MHz (DMSO-d₆) δ: 2.21 (s, 3H), 2.78-2.89 (m, 4H); 3.01 (s, 3H); 3.28-3.38 (m, 4H); 3.6 (s, 2H); 7.18 (d, J = 8.3 Hz, 1H); 7.38-7.51 (m, 5H); 7.89 (s, 1H); 7.91 (s, 1H); 8.03 (s, 1H); 8.45 (d, J = 7.9 Hz, 1H); 8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H); 8.66 (dd, J = 2, 4.2, 1H); 8.98 (s, 1H); 9.25 (d, J = 2; 1H); 10.2 (s, 1H); MS: (MH+ = 512)

実施例５：Ｎ−｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド
１−メチルピペラジン（２ｍｌ、１８ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍｌ）中４−クロロメチル−Ｎ−｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−ベンズアミド（工程５．２、１５１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌｅ）溶液に加え、得られた混合物を１時間６０℃で攪拌する。溶液を蒸発し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ ９０：１０および１％アンモニアで溶出する）で精製して、黄色油状物を得る。油状物をジクロロメタン：ＭｅＯＨから結晶化して、Ｎ−オキシド生成物を結晶固体として得る、１７５．３ＭＢｑ。 ¹ H-NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ: 2.15 (s, 3H); 2.21 (s, 3H); 2.25-2.42 (m, 4H); 3.28-3.34 (m, 4H); 3.52 (s, 2H); 7.19 (d, J = 9.1 Hz; 1H); 7.38-7.42 (m, 3H); 7.45-7.52 (m, 2H); 7.88 (s, 1H); 7.89 (s, 1H); 7.99-8.2 (m, 2H); 8.28 (d, J = 6.8 Hz, 1H); 8.5 (d, J = 5.4 Hz, 1H); 8.8 (2, 1H); 9.2 (s, 1H), 10.1 (s, 1H).

工程５．１：｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中４−メチル−Ｎ−３−（４−ピリジン−３−イル−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン（実施例３、２８６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌｅ、１８９０ＭＢｑ）の懸濁液をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（４６７ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌｅ）および触媒量のＤＭＡＰで処理し、還流温度で２時間加熱する。溶媒を真空下で除去し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ、９５：５で溶出する）で精製して、保護生成物を黄色泡状物として得る。化合物をジクロロメタンに溶解し、−１０℃に冷却し、ＭＣＰＢＡ（２８５ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）で処理し、０℃で４時間攪拌する。沈殿をろ過し、溶媒を蒸発し、粗生成物をさらにシリカのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ ９５：５で溶出する）で精製して、表題生成物を黄色泡状物として得る。

工程５．２：４−クロロメチル−Ｎ−｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２− ^１４ Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−ベンズアミド
塩酸（４ｍｌ、４Ｎ溶液）をＴＨＦ（１０ｍｌ）中｛４−メチル−３−［４−（１−オキシ−ピリジン−３−イル）−［２−^１４Ｃ］ピリミジン−２−イルアミノ］−フェニル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程５．１、１８７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加える。得られた混合物を７０℃に１時間加熱する。冷却した混合物を蒸発して黄色固体を得て、これをシリカのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ ７５：３５で溶出する）で精製して黄色結晶を得る。結晶をＴＨＦ（１０ｍｌ）中に懸濁し、水酸化アンモニウム２５％水溶液（１滴）で処理し、得られた混合物を超音波処理に供する。懸濁液をろ過し、溶媒を蒸発して黄色泡状物を得る。この泡状物をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解し、ＴＨＦ（２ｍｌ）中４−（クロロメチル）−ベンゾイルクロライド（１４９ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）溶液を滴下して処理し、対応する混合物をＲＴで２時間攪拌する。得られた懸濁液を遠心分離し、沈殿生成物をさらにエーテルで洗浄し、再度遠心分離し、エーテルを除去し、固体を乾燥して表題生成物を褐色結晶として得る。

実施例６：４−（４−メチル−［２，２，３，３，５，５，６，６−Ｄ８］ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド
４−クロロメチル−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（３．５７ｇ、８．３０ｍｍｏｌ；実施例１によって、非標識化出発物質を使用して得ることができる）をジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）に溶解する。この溶液に炭酸カリウム（５．７４ｇ、４１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルピペラジン−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８（８１５ｍｇ、７．５４ｍｍｏｌ、Isotec, Inc. of Miamisburg, OH）を加える。混合物を４５〜５０℃に約１２〜１４時間加熱する。反応をＴＬＣで、生成物のＲｆが約０．３０となるＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ（２５％）（６０／１０／１０／２）からなる溶媒系を使用してモニターする。ＤＭＦを真空下で除去し、残渣を水で粉砕する。この水を洗浄するとひどくゴム状の物質が生成し、これを酢酸エチルに溶解し、水相を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル中で溶解する。合併した物質をフラッシュクロマトグラフィー（上記と同じ溶媒系を使用する）で４回精製する。生成物をバイアルにとり、６５℃（メタノールが還流する）の乾燥温度で、真空下（０．０１ｍｍＨｇ）で乾燥する装置Ａｂｄｅｒｈａｌｄｅｎ中に置く。 MS ES + 502.4 (100%) [M+H]+, 503.5 (40%), 504.5 (4%); 1H NMR (d₆-DMSO) δ: 2.1 (3H, s), 2.4 (3H, s), 3.6 (2H, s), 7.2 (1H, d), 7.5 (3H, m), 7.8 (2H, d), 8.1 (1H, s), 8.5 (2H, m), 8.8 (1H, s), 9.0 (1H, s), 9.2 (1H, s), 10.1 (1H, s).

実施例７：４−メチル−Ｎ−（４−ピリジン−３−イル−［１，３− ^１５ Ｎ _２ , ２，４，５− ^１３ Ｃ _３ ］ピリミジン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジアミン
ｎ−ブタノール中粗Ｎ−（５−アミノ−２−メチル−フェニル）−［^１３Ｃ，^１５Ｎ_２］グアニジン（工程７．７、１５７ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）および３−ジメチルアミノ−１−ピリジン−３−イル−［１，２−^１３Ｃ_２］プロペノン（工程７．３，１６９ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液を還流温度（１３０^ｏＣ）で、５時間加熱する。溶媒を除去し、フラッシュクロマトグラフィー（５：９５ ペンタン：アセトンで溶出する）で精製して純粋な表題生成物を黄色固体として得る、¹H-NMR 400MHz (CDCl₃) δ:9.14 (1H, s, ArH), 8.73 (1H, d, J 4, ArH), 8.50 (1H, d octet, J 7,1.2, ArH), 8.37 (1H, m, ArH), 7.70 (1H, s, NH), 7.45 (1H, dd, J 8, 5), 7.17 (1H, dm, J 168, ArH), 7.03-6.99 (2H, m, ArH), 6.46 (1H, dd, J 8,1.2, ArH), 2.27 (3H, s, CH₃): MS (c+ESI): 283.3 (100%) [M+H]⁺, 284.4 (15%).

工程７．１：３−トリメチルスタニル−ピリジン
２首フラスコに３−ブロモピリジン（４ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）、次いでジエチルエーテル（４０ｍｌ）を窒素下で入れる。溶液を−７８℃に冷却し、その後ヘキサン（２０ｍｌ、３０．４ｍｍｏｌ）中ｎ−ブチルリチウム １．５Ｍを加える。得られた黄色溶液を１０分間攪拌し、その後ジエチルエーテル（２ｍｌ）中トリメチルチンクロライド（５．０４ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）溶液を加える。得られた溶液を−７８℃で２０分間攪拌し、ＲＴにゆっくり、１時間にわたって温める。溶液をヘキサン（５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）で分配し、振盪し、有機層を分離する。水相をヘキサン（５０ｍｌ）でさらに２回抽出し、有機相を合併し、水（１００ｍｌ）で洗浄する。ヘキサン相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、炉液を蒸発して粗油状物を得て、これをシリカゲルカラムに通して９：１ ヘキサン：酢酸エチルで溶出し、生成物の分画を回収する。分画を合併し、蒸発して明黄色油状物を得て、これをさらにＫｕｇｅｌｒｏｈｒオーブン中で蒸留して精製し、表題生成物を得てこれを無色油状物として５０ｍｂａｒ、１００℃で蒸留する。

工程７．２：１−ピリジン−３−イル−［ ^１３ Ｃ _２ ］エタノン
３０ｍｌアンプルに３−トリメチルスタニルピリジン（工程７．１、１．８３ｇ、７．５６ｍｍｏｌ）、新鮮な蒸留［^１３Ｃ_２］アセチルクロライド（０．６７ｇ、８．３２ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２（０．３ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および乾燥ベンゼン（２０ｍｌ）を入れる。アンプルを密封し、油槽に９５℃で一晩置く。アンプルを開き、内容物を取り出し、水（３０ｍｌ）と酢酸エチル（３０ｍｌ）で分配し、振盪する。有機相を分離し、水相を酢酸エチル（２×３０ｍｌ）でさらに２回再抽出する。有機相を合併し、水（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を注意深く蒸発する。粗油状物をシリカゲルで、ヘキサン：酢酸エチルで溶出して精製し、注意深く凍結乾燥して表題生成物を得る。

工程７．３：（Ｅ／Ｚ）−３−ジメチルアミノ−１−ピリジン−３−イル−［１，２− ^１３ Ｃ _２ ］プロペノン
密封アンプル中で１−ピリジン−３−イル−［^１３Ｃ_２］エタノン（工程７．２、５００ｍｇ、４．０６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（６２８ｍｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を１００℃に一晩加熱する。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで、９：１ ジクロロメタン：メタノールで溶出して精製し、表題生成物を黄色結晶として得る。

工程７．４：［ ^１３ Ｃ， ^１５ Ｎ _２ ］チオウレア−Ｎ，Ｎ’−ジカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
乾燥ＴＨＦ（５０ｍｌ）中水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散剤、１．１８ｇ、２９．６１ｍｍｏｌ）の懸濁液に０℃アルゴン下で、Aldrich Chem. Co.から得た乾燥ＴＨＦ（８２ｍｌ）中［^１３Ｃ，^１５Ｎ_２］チオウレア（５００ｍｇ、６．５８ｍｍｏｌ）溶液を滴下する。完全に加えた後、溶液を５分間攪拌し、その後ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３．１６ｇ、１４．４８ｍｍｏｌ）を加え、対応する溶液を１時間攪拌する。ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（１３ｍｌ）を、その後水（２３０ｍｌ）を滴下する。生成物を酢酸エチル（３×１５０ｍｌ）で抽出し、有機相を合併し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を蒸発して粗生成物を油状物として得る。

工程７．５：Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）−［ ^１３ Ｃ， ^１５ Ｎ _２ ］グアニジン−Ｎ，Ｎ’−酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＤＭＦ中粗［^１３Ｃ，^１５Ｎ_２］チオウレア−Ｎ，Ｎ’−ジカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程７．４、２．３５ｇ、６．５８ｍｍｏｌ）、２−メチル−５−ニトロアニリン（１．００ｇ、６．５８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．０ｍｌ、２１．７１ｍｍｏｌ）の攪拌橙色溶液に０℃で、固体塩化水銀ＩＩ（１．９７ｇ、７．２４ｍｍｏｌ）を加える。１５分間ＲＴで攪拌した後、酢酸エチル（５０ｍｌ）を加え、混合物をＨｙｆｌｏ（Ｃｅｌｉｔｅ）でろ過する。酢酸エチル溶液を水（５０ｍｌ）および塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥試薬を濾取し、炉液を蒸発して油状物を得て、これをシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（第１に１００％ヘキサン、次いで９０：１０ ヘキサン：酢酸エチル、その後８０：２０ ヘキサン：酢酸エチル）で精製して表題化合物を得る。

工程７．６：Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）−［ ^１５ Ｎ _２ ， ^１３ Ｃ］グアニジン
１：１ トリフルオロ酢酸（９ｍｌ）：ジクロロメタン（９ｍｌ）中Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）−［ ^１３ Ｃ， ^１５ Ｎ _２ ］グアニジン−Ｎ，Ｎ’−ａｃｉｄ ｔｅｒｔ−ブチルエステル（工程７．５、４４５ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）溶液をＲＴで１時間攪拌する。２Ｍ 水酸化ナトリウムを加え（５０ｍｌ）、黄色溶液を酢酸エチル（３×３０ｍｌ）で抽出し、合併し、水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を蒸発して黄色油状物を得て、これを通常シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで、９０：１０：０．５：０．５ ジクロロメタン：メタノール：水：酢酸の混合物で溶出して精製して、表題生成物を得る。

工程７．７：Ｎ−（５−アミノ−２−メチル−フェニル）−［ ^１５ Ｎ _２ ， ^１３ Ｃ］グアニジン
１０％Ｐｄ／Ｃ（１２ｍｇ）を含むｎ−ブタノール（３ｍｌ）中Ｎ−（２−メチル−５−ニトロ−フェニル）［^１３Ｃ，^１５Ｎ_２］グアニジン（工程７．６、１２１ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の混合物を１気圧の水素ガス下で、ＲＴで１６時間攪拌する。さらに１２ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物をさらに１６時間攪拌する。混合物をＨｙｆｌｏ（Ｃｅｌｉｔｅ）でろ過し、ｎ−ブタノール（３×２ｍｌ）でさらに洗浄し、合併し、ｎ−ブタノールをロータリーエバポレーターで除去して粗表題生成物を得る。

Claims (13)

1. 式Ｉ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊は１個の炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物。
2. 式Ｉ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物のメシル酸塩の製造法であって、１−メチルピペラジンを式ＩＩ
   

   

   〔式中、Ｈａｌはハロゲンを示し、他の基および記号は上記式Ｉの化合物についての定義のとおりの意味を有する〕
   の化合物と反応させることによって製造する方法。
3. 式ＶＩＩＩ
   

   

   〔式中、Ｒ_５は水素またはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊は炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物。
4. 式ＶＩＩＩ
   

   

   〔式中、Ｒ_５は水素またはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、あるいは炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物の製造法であって、式Ｘ
   

   

   〔式中、Ｒ_５は保護基またはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物を式ＸＩ
   

   

   の化合物と反応させ、その後Ｒ_５が保護基を形成する場合には保護基Ｒ_５を分離することによって得る方法。
5. 式ＸＩＩＩ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊は炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物。
6. 式Ｉ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物の酸化による、式ＸＩＩＩ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物の製造法。
7. 式ＸＩＶ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊は炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物。
8. 式ＸＶＩ
   

   

   〔式中、Ｈａｌはハロゲンを意味し、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物を１−メチルピペラジンと反応させることによる、式ＸＩＶ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物の製造法。
9. 式ＸＶＩＩＩ
   

   

   〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊は炭素アイソトープ^１４Ｃの富化によって標識化されている炭素を示す〕
   の化合物。
10. 式ＩＩ
    

    

    〔式中、Ｈａｌはハロゲンを意味し、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
    の化合物を式ＸＶＩＩ
    

    

    のピペラジン誘導体と反応させることによる、式ＸＶＩＩＩ
    

    

    〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
    の化合物の製造法。
11. 式ＸＸ
    

    

    〔式中、Ｃ＊は炭素アイソトープ^１３Ｃの富化によって標識化されている炭素を示し、Ｎ＊はアイソトープの天然分布を有するか、あるいは窒素アイソトープ^１５Ｎの富化によって標識化されている窒素を示す〕
    の化合物。
12. 式ＸＸ
    

    

    〔式中、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示し、Ｎ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の窒素アイソトープ^１５Ｎの富化によって標識化されている窒素を示す〕
    の化合物の製造法であって、式ＸＸＩ
    

    

    〔式中、Ｒ_６およびＲ_７は共にＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
    のピリジン誘導体を式ＸＸＩＩ
    

    

    〔式中、Ｒ_８およびＲ_９は共に水素であり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示し、Ｎ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の窒素アイソトープ^１５Ｎの富化によって標識化されている窒素を示す〕
    のフェニルグアニジン誘導体と反応させることを含む方法。
13. 式Ｘ
    

    

    〔式中、Ｒ_５は保護基またはＣ_１−４アルキルであり、Ｃ＊はアイソトープの天然分布を有するか、または１個の炭素アイソトープの富化によって標識化されている炭素を示す〕
    の化合物。