JP2009139371A - 血行促進作用の評価方法、血行促進物質のスクリーニング方法、および血行促進剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】次の工程を有する方法を用いて被験物質の血行促進作用を評価する:(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程、必要に応じてさらに、(2)被験物質を投与した非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動が、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動よりも低下する場合に、当該被験物質について血行促進作用があると判断する工程。かかる方法でリナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、テルピネン−4−オールおよび尿素について血行促進作用が認められた。
【選択図】なし
Description
(I-1)下記の工程を有することを特徴とする、被験物質の血行促進作用を評価する方法:
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程。
(I-2)さらに下記の工程を有する、(I-1)に記載する血行促進作用の評価方法:
(2)被験物質を投与した非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動が、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動よりも低下する場合に、当該被験物質について血行促進作用があると判断する工程。
(I-3)皮膚動脈交感神経活動の測定を、皮膚動脈交感神経の遠心枝の電気活動を測定することによって行う(I-1)または(I-2)に記載する血行促進作用の評価方法。
(II-1)下記の工程を有することを特徴とする、被験物質の中から血行促進作用を有する物質をスクリーニングする方法:
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程、および
(2)上記で得られた皮膚動脈交感神経の活動を、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動(コントロール)と対比し、上記活動がコントロールよりも低くなる被験物質を、血行促進作用を有する候補物質として選別する工程。
(II-2)皮膚動脈交感神経活動の測定を、皮膚動脈交感神経の遠心枝の電気活動を測定することによって行う、(II-1)に記載するスクリーニング方法。
(III-1)上記(I-1)乃至(I-3)のいずれかに記載する評価方法で血行促進作用があると評価される化合物であって、リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、テルピネン−4−オール、並びにこれらのエステルおよび塩からなる群から選択される少なくとも一つのモノテルペン化合物または尿素を有効成分とする、血行促進剤。
(III-2)上記モノテルペン化合物または尿素を、皮膚の血流を促進する有効量含有する、(III-1)に記載する血行促進剤。
本発明の血行促進作用の評価方法は、評価対象とする被験物質を非ヒト動物に経皮投与して、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定することによって実施することができる。
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程。
(2)上記工程(1)において、被験物質を投与した非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動が、被験物質を投与しない非ヒト動物(対照非ヒト動物)の皮膚交感神経の活動(コントロール)よりも低下する場合に、当該被験物質について血行促進作用があると判断する工程。
本発明はまた、血行促進作用を有する物質(血行促進物質)をスクリーニングする方法を提供する。当該方法は、多くの被験物質のなかから、非ヒト動物に投与した場合に、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を低下させる作用を有する物質を選別することによって実施することができる。
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与して、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程。
(2)上記工程(1)で得ら、被験物質を投与した非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動(コントロール)と対比し、上記活動がコントロールよりも低くなる被験物質を、血行促進作用を有する候補物質として選抜する工程。
本発明はまた、上記本発明の評価方法で血行促進作用が認められた血行促進物質を有効成分とする外用血行促進剤を提供する。
<被験試料>
各モノテルペン(リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、テルピネン−4−オール)を、基材クリーム(組成:ジプロピレングリコール、セタノール、1,3-ブチレングリコール、ステアリルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸、ポリエチレングルコール-75、ステアレス-20、セテス-20、ホホバ油、水添ポリイソブテン、ベヘン酸エトキシジグリコール、フェノキシエタノール、エチルパラベン、およびメチルパラベン)に混合して、下記に示す各種モノテルペンを含むクリーム(モノテルペン含有クリーム)を調製した。また、被験試料8においては、尿素を同量の水に溶解してから上記基材クリームに混合して、10%尿素配合クリームを調製した。
被験試料2:ゲラニオール含有クリーム
被験試料3:シトラール含有クリーム
被験試料4:シトラールジメチルアセタール含有クリーム
被験試料5:α-テルピネオール含有クリーム
被験試料6:テルピネン−4−オール含有クリーム
被験試料7:シトラールおよびゲラニオール含有クリーム
被験試料8:尿素含有クリーム。
上記被験試料1〜8(基材クリーム2gに、リナロール50μl, ゲラニオール5μl, シトラール5μl, シトラールジメチルアセタール5μl, α-テルピネオール5μl, テルピネン-4-オール50μl、シトラール5μl+ゲラニオール5μl、尿素0.2gをそれぞれ配合したもの)を用いて、リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、およびテルピネン−4−オールの各モノテルペン化合物、ならび尿素について、皮膚動脈交感神経(遠心枝)の電気活動を測定し、また各化合物の血行促進作用を調べた。
実験には、被験動物(非ヒト動物)として、予め1週間、24±1℃、12時間周期の明期(照明80lx、7:00-19:00)及び暗期(19:00-7:00)の環境下で飼育したラット(雄、Wistar rat、250〜300g)を用いた。なお、実験前、ラットには飼料(MF type; Oriental Yeast)と水を自由に摂取させた。
被験試料1〜8の測定結果を図2〜9にそれぞれ示す。なお、図2〜9の(A)は実測データであり、(B)はこの実測データを、塗布前の実測データ(スパイク数)を100%として、グラフ化したものである。なお、各図(A)の上段は基材クリーム(コントロール)を塗布したラットの実測データ〔図(B)では、―○―で示す〕、下段はモノテルペン含有クリームまたは尿素含有クリームを塗布したラットの実測データ〔図(B)では、―●―で示す〕を示す。
Wistar系雄ラット(体重約350g)の尻尾と両足の毛のない部分(足裏)に、被験試料1〜6(基材クリーム2gに、リナロール50 μl, ゲラニオール5μl, シトラール5μl, シトラールジメチルアセタール5μl, α-テルピネオール5μl, テルピネン-4-オール50μlをそれぞれ配合したもの)、被験試料8(基材クリーム2gに、尿素0.2gを配合したもの)、または基材クリーム2g(コントロール)をそれぞれ塗布した。尻尾の基部の定点に、レーザー血流計(ADVANCE LASER FLOWMETER ALF21, Advance社製)のレーザー先端を手術用テープ(サージカルテープ)にて固定し、血流を測定した。測定値はml/min/組織重量100gで得られたものを、最初の測定値を100%として百分率にて表した。実際の0分の測定値の絶対値は、3〜5ml/min/組織重量100gの間であった。
以下に、上記で血行促進効果が確認されたモノテルペン(リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、テルピネン−4−オール)を配合した血行促進剤の製剤例を記載する。なお、下記に記載するモノテルペンは、リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、およびテルピネン−4−オールのそれぞれを意味する。
モノテルペン 1.0g
イソプロパノール 2.0g
スクワラン 3.0g
セタノール 3.0g
セスキオレイン酸ソルビタン 0.5g
プロピレングリコール 5.0g
エタノール 60.0g
精製水 適 量
全 量 100.0g。
モノテルペン 1.0g
セバシン酸ジイソプロピル 2.0g
セタノール 9.0g
白色ワセリン 8.0g
ヘキシルデカノール 1.0g
ポリオキシエチレンラウリルエーテル 3.0g
プロピレングリコール 15.0g
メチルパラベン 0.1g
エチルパラベン 0.1g
精製水 適 量
全 量 100.0g。
(1)原液
モノテルペン 1.0(重量%)
酢酸トコフェロール 0.1
ニコチン酸ベンジル 0.1
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
メントール 0.1
ポリオキシエチレン(E.O.60)硬化ヒマシ油 0.1
1,3-ブチレングリコール 1.0
エタノール 65.0
香料 0.1
精製水 残 部
全 量 100.0(重量%)。
LPG(20℃、1.5kg/cm2) 86.2
窒素 13.8
全 量 100.0(重量%)
(3)原液と噴射剤との割合(原液/噴射剤:重量比)=97.11/2.89。
Claims (7)
- 下記の工程を有することを特徴とする、被験物質の血行促進作用を評価する方法:
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程。 - さらに下記の工程を有する、請求項1に記載する血行促進作用の評価方法:
(2)被験物質を投与した非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動が、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動よりも低下する場合に、当該被験物質について血行促進作用があると判断する工程。 - 皮膚動脈交感神経活動の測定を、皮膚動脈交感神経の遠心枝の電気活動を測定することによって行う、請求項1または2に記載する血行促進作用の評価方法。
- 下記の工程を有することを特徴とする、被験物質の中から血行促進作用を有する物質をスクリーニングする方法:
(1)被験物質を非ヒト動物に経皮投与し、当該非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動を測定する工程、および
(2)上記で得られた皮膚動脈交感神経の活動を、被験物質を投与しない非ヒト動物の皮膚動脈交感神経の活動(コントロール)と対比し、上記活動がコントロールよりも低くなる被験物質を、血行促進作用を有する候補物質として選別する工程。 - 皮膚動脈交感神経活動の測定を、皮膚動脈交感神経の遠心枝の電気活動を測定することによって行う、請求項4に記載するスクリーニング方法。
- 請求項1乃至3のいずれかに記載する方法によって血行促進作用があると評価される化合物であって、リナロール、ゲラニオール、シトラール、シトラールジメチルアセタール、α-テルピネオール、テルピネン−4−オール、並びにこれらのエステルおよび塩からなる群から選択される少なくとも一つのモノテルペン化合物または尿素を有効成分とする、血行促進剤。
- 上記モノテルペン化合物または尿素を、皮膚の血流を促進する有効量含有する、請求項6に記載する血行促進剤。
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