JP2009131161A - チャフロサイド高含有茶葉およびその製造方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】本発明は、抗酸化作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、発癌抑制作用をあることが知れているチャフロサイド（フラボンＣ配糖体）を極めて高い割合で含有している茶葉（特に、緑茶）またはその茶葉（特に、緑茶）の粉末もしくは茶渋を提供し、そして、チャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋を容易に製造する方法を提供することを目的とするものである。
【解決手段】チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉または茶渋に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋中に含有されていることを特徴とするチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋、特に、茶葉が緑茶用茶葉または紅茶用茶葉であり、茶渋が緑茶から得られる茶渋であるチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋である。
【選択図】なし
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【選択図】なし
Description
本発明は、チャフロサイドを高い割合で含有しているチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末または茶渋に係わるものであり、また、チャフロサイドが微量しか含有していない乾燥された茶葉（例えば、通常の緑茶、ほうじ茶、紅茶、ウーロン茶など各種の茶葉製品）からチャフロサイドを高い割合で含有している茶葉またはその茶葉の粉末を生成する、チャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末または茶渋の製造方法に係わる。
チャフロサイドは、フラボン誘導体の一種であるフラボンＣ配糖体であり、ウーロン茶から単離され、次に示す構造式の物質として知られており、医薬品としてはチャフロサイドＡと命名されている。
上記の化合物の正式名称は、ＯＴＡＣ：
(2R,3S,4S,4aS,11bS)-3,4,11-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)-8-(4-hydroxyphenyl)-3.4.4a.11b-tetrahydro-2H,10H-pyrano[2'3':4.5]furo[3.2-g]chromen-10-one である。
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チャフロサイドは、抗酸化作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、発癌抑制作用を示すことが知れているが、通常の茶葉製品（例えば、緑茶、ほうじ茶、紅茶、ウーロン茶など）には、チャフロサイドが極めて微量しか含有しておらず、その作用の有効な利用のために、茶葉中にチャフロサイドを高い割合で含有している茶葉を容易に製造できる方法、並びに、チャフロサイド高含有茶葉が提供されることが期待されている。
チャフロサイドは、ウーロン茶から抽出などで微量単離されているが、そのチャフロサイドの含有率を高い精度で測定することが困難であり、具体的に正確な含有率を定量的に分析する方法が明らかになっておらず、一般にかなり微量な含有量であるとされていた。
例えば、緑茶、ほうじ茶、ウーロン茶、紅茶などの茶葉製品中に、チャフロサイドがどの程度の割合で含有されているかについて、正確に明らかになっていなかった。
最近、特許文献２の実施例１において、茶葉中の茶葉抽出物（Oolong tea active compound：ＯＴＡＣ）の含有率について、ＨＰＬＣ分析法、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析法などの定量分析方法によるデータが開示されている。
そのＨＰＬＣ分析法によれば、緑茶で８０ｎｇ／ｇ（茶葉）、焙じ茶で２．４μｇ／ｇ（茶葉）、ウーロン茶で２５μｇ／ｇ（茶葉）、紅茶で８０ｎｇ／ｇ（茶葉）程度であった。
特許文献２の実施例１によれば、「焙じ茶は、緑茶を１８０℃以上の高温で処理したものであるが、同一茶葉を熱処理することによって、ＯＴＡＣの含量が数倍増加するという結果が得られた。」と記載されている。
しかし、特許文献２の実施例１においては、この実験で最初に用いられた各種の茶葉がどのような量であるか、どのような履歴の茶葉であるかが具体的に示されておらず、表１に記載された『ＯＴＡＣであるチャフロサイドの含量』が本当に適正な含量であるかどうか明確でない。
一般的に、緑茶を１８０℃以上の高温で加熱処理すると、茶葉中のチャフロサイドがかなり熱分解してしまうということが起こることが知られている。
特許文献２と同じ発明者が含まれている先願の特許文献１における実施例１によれば、ウーロン茶５．０ｋｇから、９８０μｇの前記式（１）の化合物（フラボンＣ配糖体）およびその異性体（下記式（２））１４７μｇが得られたことが記載されている。
特許文献２の実施例１においても、特許文献１の実施例と同じように『ウーロン茶５．０ｋｇ』を用いてチャフロサイドの定量分析が行われたとすれば、チャフロサイドの含量が１２５ｎｇ／ｇ（茶葉）程度の割合であったと推測され、特許文献１の実施例におけるチャフロサイドの含量割合『１９１ｎｇ／ｇ（茶葉）』とかなり近い値となる。
従って、特許文献２の実施例１におけるウーロン茶の定量分析で測定されたと記述されているチャフロサイドの含量（６２０μｇ／２５ｇ茶葉）が正しい含有割合を示しているものではないと考えられる。
なお、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７などには、茶葉の製茶工程において、かなり高温の熱風を製茶機内へ供給して乾燥しながら、茶葉の揉みこみが行われていることが知られているが、その乾燥工程においては、茶葉中にかなり多量の水分が含有されているので、茶葉からの水分の蒸発によって、茶葉自体が１００℃以上の高温になることが実質的になかったのである。
特許文献５には、杜仲茶用の茶葉の製造は、産地で収穫した茶葉を天日で乾燥し、この乾燥品を通常１００〜１４０℃で３０〜５０分間焙煎し、さらに適当な大きさに切断することにより行われていることが記載されているが、この場合における杜仲茶用の茶葉の乾燥とは、生茶に付着していた水分の一部を蒸発させることであり、その乾燥された生茶中にはかなり多量の水分を含有していて通常１００〜１４０℃（熱風温度）で３０〜５０分間焙煎しても生茶葉中にかなりの水分を含んでいるものである。
特許文献５の発明における杜仲茶用の茶葉の製造では、杜仲茶生茶を蒸熱する工程、杜仲葉（水分を多量に含んでいる）を攪拌および揉圧しながら乾燥する工程、杜仲葉を粉砕する工程、および杜仲葉に対して遠赤外線を照射することにより、杜仲葉を乾燥する工程によって行われている。
さらに特許文献５の発明における杜仲茶用の茶葉の製造では、前述の製法で得られた杜仲茶葉を７０〜１５０℃の圧縮空気（熱風）を用いてジェットミルにより平均径が３〜１４μｍの粉末に粉砕して杜仲葉緑色粉末が製造される。この公知の杜仲葉緑色粉末は、水分含有率が２％であった。
しかし、特許文献５には、本発明におけるように、十分に乾燥された茶葉自体を１１５〜１５０℃に加熱する加熱処理について開示されておらず、前記の杜仲葉緑色粉末中にチャフロサイドがどの程度含有されているかどうかについて全く開示されていない。
すなわち、従来、茶葉中のチャフロサイドを高い精度で定量的に測定する分析法が明らかになっていなかったと共に、茶葉中にチャフロサイドを高い含有率で含有する茶葉を再現性よく製造する方法は具体的に明らかになっていなかったのである。
緑茶の製造工程において、茶葉の主に芽の部分などの比較的もろい部分から出る粉茶あるいはこれが固まったものを、茶業界では茶渋と称し、茶渋自体が茶の品質を低下させ、また細菌の汚染源になることから、茶渋の処理は大きな問題となっている。このため、茶渋を有効に利用する方法の開発が望まれている。
本発明は、抗酸化作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、発癌抑制作用をあることが知れているチャフロサイド（フラボンＣ配糖体）を極めて高い割合で含有している茶葉（特に、緑茶）またはその茶葉（特に、緑茶）の粉末もしくは茶渋を提供し、そして、チャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋を容易に製造する方法を提供することを目的とするものである。
さらに本発明は、茶葉中のチャフロサイドを高い精度で定量的に測定する定量分析法を提供することを目的とするものである。
この出願において、第１の発明は、チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋中に含有されていることを特徴とするチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋に関する。
前記の第１の発明において、茶葉またはその茶葉の粉末が、例えば、緑茶用茶葉またはその緑茶用粉末または紅茶用茶葉またはその紅茶用粉末であり、また、茶渋が緑茶から得られる茶渋であって、チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉または茶葉の粉末もしくは茶渋に対して、５〜５０μｇ（好ましくは５〜３０μｇ）の割合で含有されていることが好ましい。
第２の発明は、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末中に、チャフロサイドを微量含有していて、水分含有率が０〜５ｗｔ％（好ましくは０．０５〜３ｗｔ％）である乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末を、１１５〜１２５℃で１００〜３５０分間（好ましくは１３０〜３００分間）、あるいは１２５〜１５０℃で１０〜２４０分間（好ましくは１０〜１２０分間、さらに好ましくは２０〜１００分間）加熱処理して、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末が加熱処理前に含有していたチャフロサイドの含有割合に対して、１０〜１０００倍（好ましくは１５〜８００倍）の含有割合でチャフロサイドを含有している茶葉またはその茶葉の粉末を生成させるチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末の製造方法に関する。
本発明において、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末とは、その水分含有率が０〜５ｗｔ％であり、好ましくは０．０５〜３ｗｔ％であり、さらに好ましくは０．１〜２ｗｔ％である乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末である。
本発明においては、たとえば、１０５℃で５〜１０時間乾燥させて得られる乾燥状態の高い乾燥茶葉またはその粉末であって、水分含有率が０．１〜２．０ｗｔ％である乾燥茶葉またはその粉末は、１１５〜１５０℃の温度で比較的短時間、加熱処理することによって、茶葉の品質（茶の味、風味など）が高いレベルに維持され、かつ、茶葉中のチャフロサイドの生成が好適に行なわれるので、チャフロサイド高含有茶葉またはその粉末が再現性よく得られ、特に好ましい。
前記の乾燥茶葉の水分含有率の測定については、茶業研究報告 第７１号、４３〜４７頁（１９９０）（文献Ａ）における『茶の分析法』の記載、および、茶業技術研究 第４３号，４１〜４４頁（１９７１）における『乾燥法による茶の水分の定量』の記載を参照することができる。文献Ａによれば、茶の水分含有量（含有率）は、荒茶の段階で６〜７ｗｔ％であり、仕上げ茶で４〜５ｗｔ％であることが記載されている。茶の水分含有量（ｗｔ％）については、一般に、秤量容器に均質にした試料Ａ（ｇ）（一般に、Ａ＝３ｇ）を採取し、９８〜１０５℃の温度で恒量Ｂ（ｇ）となるまで、約５〜１０時間乾燥し、乾燥減量Ａ−Ｂ（ｇ）を水分とすることで、下記の計算式により算出される。本発明においても、茶葉の水分含有率は下記計算式により算出した。
茶の水分含有量（含有率 ｗｔ％）＝〔（Ａ−Ｂ）／Ａ〕×１００
茶の水分含有量（含有率 ｗｔ％）＝〔（Ａ−Ｂ）／Ａ〕×１００
前記の第２の発明のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末の製造方法において、前記の加熱処理によって得られた茶葉中のチャフロサイドの含有率の定量分析は、
（ａ）チャフロサイドを含有している茶葉を粉砕して（さらに必要であれば、その茶葉粉末を水に分散させ）、その茶葉粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃（好ましくは１５〜６０℃）で５〜３０分間（好ましくは１５〜２０分間）の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で十分に加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールを用いて液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によるチャフロサイドの定量分析、を含む茶葉中のチャフロサイドの定量分析法で行うことが好ましい。
（ａ）チャフロサイドを含有している茶葉を粉砕して（さらに必要であれば、その茶葉粉末を水に分散させ）、その茶葉粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃（好ましくは１５〜６０℃）で５〜３０分間（好ましくは１５〜２０分間）の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で十分に加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールを用いて液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によるチャフロサイドの定量分析、を含む茶葉中のチャフロサイドの定量分析法で行うことが好ましい。
茶葉の抽出液を用いる本発明に係るＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法においては、チャフロサイドＡおよびＢの標品を、報文（Bioorganic ＆ Medicinal Chemistry Letters、２００４年、Vol.１４、ｐ.３２０１−３２０３）の記載に従って、イソビテキシン（isovitexin）とビテキシン（vitexin）を原料として用いてそれぞれ合成し、その標品より定量用の標準溶液を調製した。具体的には、１０００、１００、１０、１および０．１ｎｇ／ミリリットルの濃度の溶液を調製して、それらの標準溶液を用いて測定された標準データと、前記の茶葉の抽出液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法のデータとを比較することによって、定量分析が行われる。当該定量分析法によって、茶葉中のチャフロサイド（チャフロサイドＡおよびＢ）含有割合を高い精度で測定することができる。
第３の発明は、水分含有率が０〜５ｗｔ％である乾燥状態の茶渋を１２５〜１５０℃で１０〜１２０分間加熱処理することにより、チャフロサイドを茶渋１ｇあたり５〜５０μｇ含有するチャフロサイド高含有茶渋の製造方法に関する。
前記の第３の発明のチャフロサイド高含有茶渋の製造方法において、前記の加熱処理によって得られた茶渋中のチャフロサイドの含有率の定量分析は、
（ａ）チャフロサイドを含有している茶渋を粉砕して、その茶葉粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で、その沸点まで加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールを用いて液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によってチャフロサイドを定量分析する工程、
を含む茶渋中のチャフロサイドの定量分析法で行うことが好ましい。
（ａ）チャフロサイドを含有している茶渋を粉砕して、その茶葉粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で、その沸点まで加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールを用いて液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によってチャフロサイドを定量分析する工程、
を含む茶渋中のチャフロサイドの定量分析法で行うことが好ましい。
第４の発明は、チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末中に含有されているチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末を含むチャフロサイド高含有茶葉組成物に関する。
第５の発明は、チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末中に含有されているチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末を含むチャフロサイド高含有茶葉組成物からなる健康食品に関する。
第６の発明は、
（ａ）チャフロサイドを含有している茶葉または茶渋を粉砕して（さらに必要であれば、その茶葉粉末または茶渋粉末を水に分散させ）、その茶葉粉末または茶渋粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下でその沸点より４０℃高い温度で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程、および、
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、ｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法を用いたチャフロサイドの定量分析工程、
を含むことを特徴とするチャフロサイドの定量分析法に関する。
（ａ）チャフロサイドを含有している茶葉または茶渋を粉砕して（さらに必要であれば、その茶葉粉末または茶渋粉末を水に分散させ）、その茶葉粉末または茶渋粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下でその沸点より４０℃高い温度で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程、および、
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、ｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法を用いたチャフロサイドの定量分析工程、
を含むことを特徴とするチャフロサイドの定量分析法に関する。
本発明のチャフロサイド高含有茶葉または茶渋は、抗酸化作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、発癌抑制作用を有することが知られているチャフロサイド（フラボンＣ配糖体）を極めて高い割合で含有している茶葉（特に、緑茶）またはその茶葉（特に、緑茶）の粉末もしくは茶渋を提供することができる。
本発明のチャフロサイド高含有茶葉は、チャフロイドの含有量が極めて高い割合で含有されているので、チャフロサイドに基づく、健康を維持するための種々の効果（予防的な効果）を有する茶葉製品が得られ、健康食品として利用することができる。
本発明のチャフロサイド高含有茶葉の製造方法は、チャフロサイドを高い含有率で含有する茶葉を容易に製造する方法を提供することができ、しかも、カフェインの含有量が低下し、タンニン成分が変化して、さらにシュウ酸の含有量が減少して、茶葉を飲料として飲んだ場合に、渋味が消えて、甘味をより感じるようになり、茶葉本来の好ましい味を維持し、より良い味になり、茶葉製品として高い品質を与えることができる。
さらに、本発明のチャフロサイド高含有茶渋の製造方法は、チャフロサイドを高い含有率で含有する茶渋を容易に製造する方法を提供することができ、茶渋を有効に利用することができる。
本発明におけるチャフロサイドの定量分析法は、従来の茶葉中のチャフロサイドを定量分析する方法に対して、茶葉または茶渋中のチャフロサイドを高い精度で容易に測定することができる。
本願の第１の発明のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末において、茶葉としては、例えば、緑茶用茶葉、焙じ茶用茶葉、紅茶用茶葉、ウーロン茶などを挙げることができるが、特に、緑茶用茶葉、紅茶用茶葉が好ましい。
本発明のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末においては、チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの緑茶用茶葉に対して５〜５０μｇ（好ましくは５〜３０μｇ）の割合で緑茶用茶葉またはその緑茶用茶葉の粉末中に含有されているチャフロサイド高含有緑茶用茶葉またはその緑茶用茶葉の粉末が最適である。
本願の第１の発明のチャフロサイド高含有茶渋において、渋茶としては、緑茶の製造工程において、茶葉の主に芽の部分などの比較的もろい部分から出る粉茶あるいはこれが固まったものを使用することができる。
本願の第１〜第６の発明におけるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法は、茶葉中のチャフロサイドの定量分析法であって、茶葉または茶葉の粉末の抽出工程で得た抽出液を濃縮・乾固し、かかる濃縮・乾個工程で得られたチャフロサイドを含有する固化物を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液溶媒によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析工程によりチャフロサイドを定量分析することを含み、茶葉中のチャフロサイドを高い精度で定量分析することができるので好ましい。
本願の第１〜第６の発明におけるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法は、すくなくとも、（ａ）抽出工程、（ｂ）濃縮・乾固工程、および（ｃ）チャフロサイドの定量分析工程を含む定量分析法であることが、茶葉中のチャフロサイドを高い精度で定量分析することができるので好ましい。
前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法では、たとえば、インタクト株式会社製のＣ１８カラムを用い、特定の溶媒を用いる、「Ｃａｄｅｎｎｚａ ＣＤ Ｃ１８のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法」を用いることができる。
前記（ａ）抽出工程では、チャフロサイドを含有している茶葉または茶渋を粉砕して（さらに必要であれば、その茶葉粉末または茶渋粉末を水中に十分に分散させ）、その茶葉粉末または茶渋粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％（好ましくは４５〜５５ｗｔ％）メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃（特に好ましくは１５〜６０℃）で５〜３０分間（特に好ましくは１０〜２５分間）の抽出操作を行うことが特に好ましい。
前記（ａ）抽出工程において、茶葉粉末または茶渋粉末を水に分散する場合には、その茶葉粉末または茶渋粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルのメタノール水溶液を抽出液として用い、該抽出液を、前記茶葉粉末または茶渋粉末を分散した水に加えた後のメタノール濃度が４０〜６０ｗｔ％（好ましくは４５〜５５ｗｔ％）であることが好ましい。
前記（ｂ）濃縮・乾固工程においては、前記（ａ）抽出工程で得られた抽出液を減圧下（好ましくは１０〜５００ｍｍＨｇの減圧下）で十分な温度にまで加熱して、抽出液の溶媒を蒸発させて濃縮し、さらにその濃縮温度でその加熱を続けて溶媒を実質的に除去して、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得ることが特に好ましい。
前記（ｃ）チャフロサイドの定量分析工程においては、前記（ｂ）濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を水とｎ−ブタノールで液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によりチャフロサイドの定量分析を行なうことが特に好ましい。
前記のメタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液は、２０〜８０ｗｔ％のメタノール水溶液、または、１０〜６０ｗｔ％のアセトニトリル水溶液であることが、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法において特に高い精度で茶葉中のチャフロサイドを定量分析することができるので、さらに好ましい。
本願の第２の発明（製造方法）においては、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末は、一般に、乾燥された緑茶製品、焙じ茶製品、ウーロン茶製品、紅茶製品や、一般の製茶工程において、水分含有率が０〜５ｗｔ％（好ましくは０．０５〜３ｗｔ％、さらに好ましくは０．１〜２ｗｔ％）である乾燥茶葉をあげることができ、さらに、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉１ｇあたりチャフロサイドが０．５〜３００ｎｇ（好ましくは１〜２００ｎｇ）の含有割合で乾燥茶葉中に含有されているものを用いることが好ましい。
本願の第２の発明（製造方法）において用いられる乾燥茶葉としては、前記乾燥状態にある緑茶用茶葉、ウーロン茶用茶葉または紅茶用茶葉が好ましく、特に、緑茶用茶葉が最適である。
本願の第２の発明では、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末中に、チャフロサイドを微量含有していて、水分含有率が０〜５ｗｔ％（好ましくは０．０５〜３ｗｔ％、さらに好ましくは０．１〜２ｗｔ％）である乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末を、１１５〜１２５℃で１００〜３５０分間（好ましくは１３０〜３００分間）、あるいは１２５〜１５０℃で１０〜２４０分間（好ましくは１０〜１２０分間、さらに好ましくは２０〜１００分間）加熱処理して、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末が加熱処理前に含有していたチャフロサイドの含有割合に対して１０〜１０００倍（好ましくは１５〜８００倍）の含有割合でチャフロサイドを含有している茶葉またはその茶葉の粉末を生成させるチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末の製造方法が好ましい。
本願の第２の発明では、低い加熱温度では、加熱時間が十分に長い加熱処理をする必要があり、たとえば、１２０℃の加熱温度では３００〜３５０分間程度の加熱処理を行い、一方、高い加熱温度では短い加熱時間であればよく、たとえば、１３５℃では２０〜４０分間程度の加熱処理を行えばよい。
前記加熱処理は、加熱処理を行っている間、茶葉中のチャフロキサイドの含有率を前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で測定しながら行うことが好ましい。
本願の第２の発明では、加熱処理装置として、茶葉の加熱温度の測定と調節ができるものであればよく、一般の電熱装置を用いることが好ましい。
本願の第３の発明では、水分含有率が０〜５ｗｔ％（好ましくは０．０５〜３ｗｔ％、さらに好ましくは０．１〜２ｗｔ％）である乾燥茶渋の粉末を、１２５〜１５０℃で１０〜２４０分間（好ましくは１０〜１２０分間、さらに好ましくは２０〜１００分間）加熱処理して、チャフロサイド高含有茶渋を製造する方法が好ましい。
本願の第４の発明（組成物）および第５の発明（健康食品）では、チャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末中に含まれているチャフロサイドが、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して８〜５０μｇ（好ましくは１０〜３０μｇ）の割合で含有されており、そのチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末が５〜９５ｗｔ％（特に１０〜９０ｗｔ％）の割合で含まれていることが適当である。
つぎに本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明は、かかる実施例のみに限定されるものではない。
実施例１
（市販緑茶：品種オクムサシのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種オクムサシの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（１００ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、この１０マイクロリットルについて、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販緑茶：品種オクムサシのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種オクムサシの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（１００ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、この１０マイクロリットルについて、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法には、ＨＰＬＣとして、定量用カラムのＣａｄｅｎｚａ ＣＤ Ｃ１８（内径３ｍｍ、カラム長１５０ｍｍ）を装着したＡｇｅｌｌｅｎｔ １１００を用い、ＭＳ装置としてＡＰＩ２０００またはＡＰＩ３０００（アプライドバイオシステムズ社（製））を用いた。なお、展開溶媒として４０ｗｔ％メタノールを使用した。チャフロサイドＡおよびＢの保持時間は、カラム流速０．２ミリリットル／分で、それぞれ１４．８分および１５．６分であった。ＭＳ／ＭＳの測定は、エレクトロスプレーイオン化法により行った。
チャフロサイドＡのＭＳ／ＭＳによる測定は、下記条件で行なった。
前駆体／生成物（ｍ／ｚ、イオンと極性） ４１３．０（Ｍ−Ｈ）-／２９３．０
衝突エネルギー（ｅＶ） ３６
キャピラリー電圧（ｋＶ） ４
温度（℃） ５００
前駆体／生成物（ｍ／ｚ、イオンと極性） ４１３．０（Ｍ−Ｈ）-／２９３．０
衝突エネルギー（ｅＶ） ３６
キャピラリー電圧（ｋＶ） ４
温度（℃） ５００
チャフロサイドＢのＭＳ／ＭＳによる測定は、下記条件で行なった。
前駆体／生成物（ｍ／ｚ、イオンと極性） ４１３．０（Ｍ−Ｈ）-／２９２．８
衝突エネルギー（ｅＶ） ３６
キャピラリー電圧（ｋＶ） ４
温度（℃） ５００
前駆体／生成物（ｍ／ｚ、イオンと極性） ４１３．０（Ｍ−Ｈ）-／２９２．８
衝突エネルギー（ｅＶ） ３６
キャピラリー電圧（ｋＶ） ４
温度（℃） ５００
上記の定量分析の結果、この市販緑茶（オクムサシ）は、チャフロサイドが５５ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（乾燥状態にある茶葉の製造）
オクムサシの茶葉から作られた市販緑茶１１０ｇ（水分含有率５ｗｔ％）を、１０５℃で１時間乾燥させて、乾燥状態にある茶葉（乾燥茶葉）を得た。得られた乾燥茶葉は、１０５℃で５時間乾燥することによって、乾燥茶葉から減量した水分量を測定し、前記計算式により乾燥茶葉の水分含有率を算出した。その結果、得られた乾燥茶葉の水分含有率は２ｗｔ％であった。
オクムサシの茶葉から作られた市販緑茶１１０ｇ（水分含有率５ｗｔ％）を、１０５℃で１時間乾燥させて、乾燥状態にある茶葉（乾燥茶葉）を得た。得られた乾燥茶葉は、１０５℃で５時間乾燥することによって、乾燥茶葉から減量した水分量を測定し、前記計算式により乾燥茶葉の水分含有率を算出した。その結果、得られた乾燥茶葉の水分含有率は２ｗｔ％であった。
（市販緑茶：品種オクムサシからチャフロサイド高含有茶葉の製造）
上記のごとく得られた乾燥茶葉１００ｇ（水分含有率２ｗｔ％）を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で３０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
上記のごとく得られた乾燥茶葉１００ｇ（水分含有率２ｗｔ％）を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で３０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
（市販緑茶：品種オクムサシ由来のチャフロサイド高含有茶葉の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質０．９ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出し、得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質０．９ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出し、得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
その定量分析の結果、前述のように市販緑茶（オクムサシ）の加熱処理で得られた茶葉は、チャフロサイドが１１μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含有されていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は２００倍となった。
実施例２
（市販緑茶：品種静７３１２のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種静７３１２の茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末３ｇについて、３６ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．６ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．６ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、６０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販緑茶：品種静７３１２のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種静７３１２の茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末３ｇについて、３６ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．６ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．６ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、６０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販茶葉（静７３１２）は、チャフロサイドが８０ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販緑茶：品種静７３１２からチャフロサイド高含有茶葉の製造）
品種静７３１２の茶葉から作られた市販緑茶１１０ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
品種静７３１２の茶葉から作られた市販緑茶１１０ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
（市販緑茶：品種静７３１２由来のチャフロサイド高含有茶葉の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末３ｇについて、３６ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．７ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．７ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。そのｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、６０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末３ｇについて、３６ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．７ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．７ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。そのｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、６０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販緑茶（静７３１２）由来の茶葉は、チャフロサイドが１８μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は２２５倍となった。
実施例３
（市販緑茶：品種静サヤマカリオのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：種静サヤマカオリの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末４ｇについて、３２ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．１ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．１ｇを１５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、８０ミリリットルの３０％アセトニトリル水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販緑茶：品種静サヤマカリオのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：種静サヤマカオリの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末４ｇについて、３２ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．１ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．１ｇを１５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、８０ミリリットルの３０％アセトニトリル水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販緑茶は、チャフロサイドが６３ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販緑茶：品種静サヤマカリオからチャフロサイド高含有緑茶の製造）
品種静サヤマカオリの茶葉から作られた市販緑茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１５０℃で１０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
品種静サヤマカオリの茶葉から作られた市販緑茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１５０℃で１０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
（市販緑茶：品種静サヤマカリオ由来のチャフロサイド高含有茶葉の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末４ｇについて、３２ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．８ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．８ｇを１５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、８０ミリリットルの３０％アセトニトリル水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末４ｇについて、３２ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．８ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．８ｇを１５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、８０ミリリットルの３０％アセトニトリル水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販茶葉（静サヤマカリオ）由来の茶葉は、チャフロサイドが１８μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は２８６倍となった。
実施例４
（市販緑茶：品種ヤブキタのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末５ｇを１２ミリリットルの水に分散させ、そこへ３８ミリリットルの７０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（５３ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．５ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．５ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１００ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販緑茶：品種ヤブキタのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶葉から作られた市販緑茶をコーヒーミルで粉末化し、その緑茶粉末５ｇを１２ミリリットルの水に分散させ、そこへ３８ミリリットルの７０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（５３ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．５ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．５ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１００ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販緑茶は、チャフロサイドが７４ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販緑茶：品種ヤブキタからチャフロサイド高含有緑茶の製造）
品種ヤブキタの茶葉から作られた市販緑茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で５０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有緑茶を製造した。
品種ヤブキタの茶葉から作られた市販緑茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で５０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有緑茶を製造した。
（市販緑茶：品種ヤブキタ由来のチャフロサイド高含有緑茶の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末５ｇを１２ミリリットルの水に分散させ、そこへ３８ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．３ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．３ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１００ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末５ｇを１２ミリリットルの水に分散させ、そこへ３８ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質２．３ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質２．３ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１００ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、５０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販緑茶（ヤブキタ）由来茶葉は、チャフロサイドが１３μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は１７６倍となった。
実施例５
（市販ウーロン茶：品種静７３１２のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種静７３１２の茶葉から作られた市販ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末２ｇについて、３０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．６ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．６ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販ウーロン茶：品種静７３１２のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種静７３１２の茶葉から作られた市販ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末２ｇについて、３０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．６ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．６ｇを１２ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販ウーロン茶（静７３１２）は、チャフロサイドが１１２ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販ウーロン茶：品種静７３１２からチャフロサイド高含有ウーロン茶の製造）
品種静７３１２の茶葉から作られた市販ウーロン茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有ウーロン茶を製造した。
品種静７３１２の茶葉から作られた市販ウーロン茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有ウーロン茶を製造した。
（市販ウーロン茶：品種静７３１２由来のチャフロサイド高含有ウーロン茶の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末２ｇを１０ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４３ｗｔ％メタノール水溶液）とし、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質０．９ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有茶葉をコーヒーミルで粉末化し、その茶葉粉末２ｇを１０ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４３ｗｔ％メタノール水溶液）とし、５０℃で２０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質０．９ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０％メタノール水溶液に溶解し、３０％アセトニトリル水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販ウーロン茶（静７３１２）由来の茶葉は、チャフロサイドが２２μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は１９６倍となった。
実施例６
（市販ウーロン茶：品種オクムサシのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種オクムサシの茶葉から作られた市販ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、そのウーロン茶粉末２ｇを８ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１５分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．１ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．１ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０％メタノール水溶液に溶解し、４０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販ウーロン茶：品種オクムサシのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種オクムサシの茶葉から作られた市販ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、そのウーロン茶粉末２ｇを８ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１５分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．１ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．１ｇを１０ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０％メタノール水溶液に溶解し、４０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販ウーロン茶（オクムサシ）は、チャフロサイドが７２ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販ウーロン茶：品種オクムサシからチャフロサイド高含有ウーロン茶の製造）
品種オクムサシの茶葉から作られた市販ウーロン茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有ウーロン茶を製造した。
品種オクムサシの茶葉から作られた市販ウーロン茶１００ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１３０℃で２４０分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有ウーロン茶を製造した。
（市販ウーロン茶：品種オクムサシ由来のチャフロサイド高含有ウーロン茶の定量分析）
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、そのウーロン茶粉末２ｇを８ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１５分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０％メタノール水溶液に溶解し、４０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：加熱処理して製造された前記チャフロサイド高含有ウーロン茶をコーヒーミルで粉末化し、そのウーロン茶粉末２ｇを８ミリリットルの水に分散させ、そこへ２５ミリリットルの６０ｗｔ％メタノール水溶液を加えて抽出液（４６ｗｔ％メタノール水溶液）とし、６０℃で１５分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを５ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０％メタノール水溶液に溶解し、４０％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販ウーロン茶（オクムサシ）由来の茶葉は、チャフロサイドが１４μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は１９４倍となった。
実施例７
（市販紅茶：品種キーモンのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種キーモンの茶葉から作られた市販紅茶をコーヒーミルで粉末化し、その紅茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．１グラムを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ/ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（市販紅茶：品種キーモンのチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種キーモンの茶葉から作られた市販紅茶をコーヒーミルで粉末化し、その紅茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．１グラムを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ/ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販紅茶（キーモン）は、チャフロサイドが７２ｎｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含まれていた。
（市販紅茶：品種キーモンからチャフロサイド高含有紅茶の製造）
品種キーモンの茶葉から作られた市販紅茶１２０ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で４５分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
品種キーモンの茶葉から作られた市販紅茶１２０ｇを、実施例１と同様にして加熱、乾燥し、乾燥茶葉（水分含有率２ｗｔ％）を得た。その乾燥茶葉を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で４５分間加熱して、チャフロサイドが増量して高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶葉を製造した。
（市販紅茶：品種キーモン由来のチャフロサイド高含有紅茶の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種キーモンの市販紅茶から加熱処理して製造された前記のチャフロサイド高含有紅茶をコーヒーミルで粉末化し、その紅茶粉末１ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、２０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：品種キーモンの市販紅茶から加熱処理して製造された前記のチャフロサイド高含有紅茶をコーヒーミルで粉末化し、その紅茶粉末１ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．９ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、２０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この市販紅茶（キーモン）の加熱処理で得られた茶葉は、チャフロサイドが１５μｇ／ｇ（茶葉）の含有割合で含有されていた。茶葉のチャフロサイド含有量は、加熱処理前に比較して、加熱処理後は２０８倍となった。
実施例８
（茶渋：品種ヤブキタの茶渋のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶葉から作られた茶渋を凍結乾燥後、コーヒーミルで粉末化し、その渋茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ/ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
（茶渋：品種ヤブキタの茶渋のチャフロサイド含有率の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶葉から作られた茶渋を凍結乾燥後、コーヒーミルで粉末化し、その渋茶粉末２ｇについて、２０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）で加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質１．０ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：前記の濃縮・固化工程で得られた乾固物質１．０ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出した。ｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、１０ミリリットルの３０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ/ＭＳ分析法でチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、この茶渋（ヤブキタ）は、チャフロサイドが検出されなかった。
（茶渋：品種ヤブキタからチャフロサイド高含有茶渋の製造）
品種ヤブキタの茶葉から作られた茶渋の粉末１２０ｇを凍結乾燥して、その乾燥された茶渋（水分含有率は３ｗｔ％：実施例１と同様にして算出した）を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で４５分間加熱して、チャフロサイドを高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶渋を製造した。
品種ヤブキタの茶葉から作られた茶渋の粉末１２０ｇを凍結乾燥して、その乾燥された茶渋（水分含有率は３ｗｔ％：実施例１と同様にして算出した）を、宮村鉄工所（株）製のミニ火入れ機を用いて、１４０℃で４５分間加熱して、チャフロサイドを高い含有率で含有しているチャフロサイド高含有茶渋を製造した。
（茶渋：品種ヤブキタ由来のチャフロサイド高含有茶渋の定量分析）
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶渋から加熱処理して製造された前記のチャフロサイド高含有茶渋を凍結乾燥後コーヒーミルで粉末化し、その渋茶粉末１ｇについて、１０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質０．８ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．８ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出し、得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
（ａ）抽出工程：品種ヤブキタの茶渋から加熱処理して製造された前記のチャフロサイド高含有茶渋を凍結乾燥後コーヒーミルで粉末化し、その渋茶粉末１ｇについて、１０ミリリットルの５０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５０℃で１０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得た。
（ｂ）濃縮・固化工程：前記の抽出工程で得られた抽出液を減圧下（３０ｍｍＨｇ）加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を加熱・乾固させて、乾固物質０．８ｇを得た。
（ｃ）定量分析工程：濃縮・固化工程で得られた乾固物質０．８ｇを４ミリリットルの水に懸濁化し、同量のｎ−ブタノールで抽出し、得られたｎ−ブタノール抽出液を濃縮乾固後、４０ミリリットルの４０ｗｔ％メタノール水溶液に溶解し、４０ｗｔ％メタノール水溶液を展開溶媒として用いて、前記のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法で茶葉中のチャフロサイドの定量分析を行った。
この定量分析の結果、前述のように茶渋（ヤブキタ）の凍結乾燥品の加熱処理で得られた茶渋は、チャフロサイドが２２μｇ／ｇ（茶渋）の含有割合で含有されていた。
Claims (13)
- チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉または茶渋に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋中に含有されていることを特徴とするチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋。
- 茶葉が緑茶用茶葉または紅茶用茶葉である請求項１記載のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末。
- 茶渋が緑茶から得られる茶渋である請求項１記載のチャフロサイド高含有茶渋。
- ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法が、茶葉または茶葉の粉末もしくは茶渋を抽出工程で得た抽出液を濃縮・乾固する濃縮・乾個工程で得られたチャフロサイドを含有する固化物を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、ｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析工程によるチャフロサイドの定量分析することを含む茶葉または茶渋中のチャフロサイドの定量分析法である請求項１記載のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末もしくは茶渋。
- 乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末１ｇあたりチャフロサイドを０．５〜３００ｎｇ含有していて、水分含有率が０〜５ｗｔ％である乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末を、１１５〜１２５℃で１００〜３５０分間、あるいは１２５〜１５０℃で１０〜２４０分間加熱処理して、乾燥茶葉またはその乾燥茶葉の粉末の加熱処理前に含有していたチャフロサイドの含有割合に対して１０〜１０００倍の含有割合でチャフロサイドを含有している茶葉またはその茶葉の粉末を生成させることを特徴とするチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末の製造方法。
- （ａ）チャフロサイドを含有している茶葉を粉砕して、その茶葉粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で、その沸点まで加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、ｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によってチャフロサイドを定量分析する工程
を含む茶葉中のチャフロサイドの定量分析法によって、得られた茶葉中のチャフロサイドの含有率を定量することからなる請求項５記載のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末を製造する方法。 - 茶葉が緑茶用茶葉または紅茶用茶葉である請求項５または６記載のチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末の製造方法。
- 水分含有率が０〜５ｗｔ％である乾燥状態の茶渋を１２５〜１５０℃で１０〜２４０分間加熱処理することにより、チャフロサイドを茶渋１ｇあたり５〜５０μｇ含有するチャフロサイド高含有茶渋の製造方法。
- （ａ）チャフロサイドを含有している茶渋を粉砕して、その茶渋粉末１ｇに対して５〜２０ミリリットルの４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を抽出液として用い、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で、その沸点まで加熱して濃縮し、さらに、その濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、ｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法によってチャフロサイドを定量分析する工程
を含む茶渋中のチャフロサイドの定量分析法によって得られた茶渋中のチャフロサイドの含有率を定量することからなる請求項８記載のチャフロサイド高含有茶渋の製造方法。 - 茶渋が緑茶から得られる茶渋である請求項８または９記載のチャフロサイド含有茶渋の製造方法。
- チャフロサイドがＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末中に含有されているチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末を含むことを特徴とするチャフロサイド高含有茶葉組成物。
- チャフロサイドが、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法により測定して１ｇの茶葉に対して５〜５０μｇの割合で茶葉またはその茶葉の粉末中に含有されているチャフロサイド高含有茶葉またはその茶葉の粉末を含んでいるチャフロサイド高含有緑茶用茶葉組成物からなる健康食品。
- （ａ）チャフロサイドを含有している茶葉または茶渋を粉砕して水に分散させ、その茶葉または茶渋粉末を前記水の５〜２０倍容量の４０〜６０ｗｔ％メタノール水溶液を用いて、５〜７０℃で５〜３０分間の抽出操作を行って、チャフロサイドを含有する抽出液を得る抽出工程、
（ｂ）（ａ）の抽出工程で得られた抽出液を減圧下で、該抽出液の沸点より４０℃高い温度で加熱して濃縮し、さらにその濃縮温度で加熱を続けて、抽出液中に溶解している物質を乾固させて乾固物質を得る濃縮・乾固工程および
（ｃ）（ｂ）の濃縮・乾固工程で得られたチャフロサイドを含有する乾固物質を、水とｎ−ブタノールで液液分配し、そのｎ−ブタノール層部を用いて、メタノール水溶液またはアセトニトリル水溶液によるＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析法を用いたチャフロサイドの定量分析工程、
を含むことを特徴とするチャフロサイドの定量分析法。
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