JP2007244313A - アブラナ科野菜のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高める方法 - Google Patents
アブラナ科野菜のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高める方法 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】 アブラナ科野菜を50〜80℃に加熱処理することによるアブラナ科野菜のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高める方法、該方法によりアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高めたアブラナ科野菜、並びに、それを含有する食品または飲料を提供する。
【選択図】 なし
Description
従って、本発明の目的は、アブラナ科野菜そのもののACE阻害活性を高める方法、この方法によりACE阻害活性を高めたアブラナ科野菜、並びに、当該アブラナ科野菜を含有する飲食品を提供することである。
請求項2に係る本発明は、加熱処理を、アブラナ科野菜のスラリー化物に対して15分間以上行う、請求項1に記載の方法である。
請求項3に係る本発明は、アブラナ科野菜が中島菜(Brassica campestris cultivar Nakajimana)である、請求項1又は2に記載の方法である。
請求項4に係る本発明は、請求項1〜3のいずれかに記載の方法により、アンジオテンシン変換酵素阻害活性を高めたアブラナ科野菜である。
請求項5に係る本発明は、請求項4に記載のアブラナ科野菜を含有する食品または飲料である。
また、この方法によってACE阻害活性を高めたアブラナ科野菜を原料として、ACE阻害活性の高い食品素材を得ることができる。
請求項1に係る本発明は、アブラナ科野菜を50〜80℃に加熱処理することによる、アブラナ科野菜のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高める方法である。
本発明において中島菜とは、能登半島の中央に位置する七尾市中島町を中心に栽培されているツケナ類を指す。中島菜の葉形はダイコンのような羽深裂で葉縁は粗い鋸歯状となり、やや硬く濃緑である。春先の3月から4月にかけて収穫され、主として漬物、他には和え物、煮物、炒め物として食されている。
なお、本発明においてアブラナ科野菜としては、その全体あるいは葉、茎、花などの一部の部位のみであってもよい。
また、本発明の方法においては、上記のアブラナ科野菜の生鮮物又は解凍物をそのままの形態で加熱処理に供することもでき、裁断やスラリー化したものを用いてもよいが、好ましくは、請求項2に記載の如く、スラリー化物として用いる。
上記のスラリー化処理は、適量の水を添加して行うことが好ましい。水の添加量は、アブラナ科野菜100重量部に対し、10重量部〜1000重量部程度、好ましくは50〜200重量部程度が好ましい。
上記加熱処理における温度条件は約50〜80℃が好ましく、55〜75℃がより好ましく、特に約60℃前後が好適である。温度条件が上記範囲外であると、ACE阻害活性を十分に高めることができない。
加熱処理後は、常温以下、好ましくは0℃以下に急冷することにより反応を停止させる。
なお、当該ACE阻害活性を高めたアブラナ科野菜は、必要に応じて、例えば気流殺菌、高圧殺菌、加熱殺菌などの常法により、殺菌してもよい。
当該ACE阻害活性を高めたアブラナ科野菜は、そのままの形態で食品素材とすることができるし、圧搾した搾汁又はその濃縮物の形態で食品素材とすることもできる。また、これらの乾燥物を食品素材としてもよい。
以下、請求項4に係る本発明のアブラナ科野菜としては、本発明の方法によりACE阻害活性を高めたアブラナ科野菜のそのままの形態のものだけでなく、その搾汁、濃縮物、及び、これらの乾燥物をも包含するものとする。
この粗精製物は、血圧上昇抑制剤として有効性が期待でき、しかも従来食品として利用されてきたアブラナ科野菜を原料としているため安全である。
上記飲食品におけるアブラナ科野菜の含有量は特に制限されない。
請求項4に記載のアブラナ科野菜を配合して各種飲食品を製造するときは、必要に応じて、賦形剤、増量剤、結合材、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、調味料等の食品添加物を使用することができる。
また、上記飲食品の種類には特に制限はなく、食品の場合は必要に応じて粉末、顆粒、錠剤等の形態に成形することもできる。
原料として中島菜を用いた。収穫した中島菜を水洗いして、付着した泥を洗い流し、3cm角程度に切断し、実験まで凍結保存した。
次いで、中島菜をスラリー化した。中島菜のスラリー化は、家庭用ジューサーに、凍結した中島菜100g、水100ml、砕氷50gを加え、約1分間処理することで行った。
スラリー化処理は、実験に必要な量のスラリー化物が得られるまで上記の配合で繰り返し行い、すべてのスラリー化物を一つの容器に回収し、よく混合した後、150mlずつ三角フラスコに分注した。
スラリー化処理から加熱処理までの間、中島菜のスラリー化物は、熱が加わらないように氷温中に保管した。
加熱処理後、直ちに三角フラスコを氷冷することで、反応を停止した。
その後、加熱処理後の中島菜を凍結乾燥し、粉砕することで乾燥粉末を製造した。
この加熱処理後の中島菜乾燥粉末について、下記の方法でACE阻害活性を測定した。結果を表1に示す。
リン酸バッファー:400mMリン酸一カリウム600mM塩化ナトリウム水溶液と、400mMリン酸ニカリウム600mM塩化ナトリウム水溶液とを混合し、pH8.5に調整した。
基質溶液:ヒプリル−L−ヒスチジル−L−ロイシン四水和物(和光純薬工業社製)10mgをリン酸バッファー10mlに溶解した。
酵素溶液:ウサギ肺由来アンジオテンシン変換酵素(シグマ社製)0.25Uをリン酸バッファー10mlにて溶解した。
抽出液:加熱処理後の中島菜乾燥粉末0.25gをリン酸バッファー10mlで振とう抽出し、濾過することにより、濾液を得た。この濾液をリン酸バッファーで適宜希釈して抽出液とし、以下のACE阻害活性試験に供した。
試験管に基質溶液50μl、抽出液100μlを加え混合し、37℃で5分間プレインキュベーションした。これに、酵素溶液200μlを添加し、37℃で1時間インキュベーションすることにより、酵素反応を行った。その後、3%メタリン酸を100μl添加し酵素反応を停止した。
本酵素反応溶液を下記に示す条件のHPLCに供し、得られた馬尿酸のピーク面積より、以下の数1を基にACE阻害活性(%)を求めた。
ACE阻害活性50%のときの、抽出液の濃度をIC50とした。抽出液の濃度(mg/ml)は、乾燥粉末換算である。
式中、Aは抽出液のかわりにリン酸バッファーを加えたときのピーク面積を、Bは抽出液を加えたときのピーク面積を、Cは酵素液のかわりにリン酸バッファーを加えたときのピーク面積を、それぞれ示す。
カラム:MightysilRP−18GP250×4.6mm(関東化学)
カラム温度:40℃
移動相A:0.01M リン酸カリウムバッファー(pH2.8)
移動相B:100%アセトニトリル
グラジエント:0分から15分までA液80%B液20%からA液75%B液25%のリニアグラジエント、15分から20分までA液80%B液20%で保持
流量:0.75ml/min
注入量:50μl
検出:UV226nm
実施例1と同様に調製した中島菜スラリー化物を恒温水槽にて60℃に保持しながら、表2に記載の種々の時間にて振とう(140回/分)することにより、加熱処理を行った。加熱処理後、直ちに氷冷することで、反応を停止した。その後、凍結乾燥し、粉砕することで、加熱処理後の中島菜乾燥粉末を製造した。
加熱処理後の中島菜乾燥粉末について、実施例1と同様にACE阻害活性を測定した。結果を表2に示す。
なお、実施例1における測定値(表1)と若干のズレが生じているが、これは中島菜のACE阻害活性の個体間差などに起因するものと考えられる。
アブラナ科野菜であるハクサイ、ブロッコリー、チンゲンサイから、実施例1と同様にスラリー化物を調製した。これらスラリー化物を60℃に設定した恒温水槽にて30分間振とう(140回/分)することにより、加熱処理を行った。加熱処理後、直ちに氷冷することで反応を停止した。その後、凍結乾燥し、粉砕することで加熱処理後の凍結乾燥粉末を調製した。
その後、加熱処理後の凍結乾燥粉末について、実施例1と同様にACE阻害活性を測定した。なお、対照として、加熱処理をしないスラリー化物の凍結乾燥粉末を用いた(無処理)。結果を表3に示す。
特に、一年中入手できるチンゲンサイを加熱処理することで、加熱処理しない中島菜と同等のACE阻害活性を保有させることができた。
Claims (5)
- アブラナ科野菜を50〜80℃に加熱処理することによる、アブラナ科野菜のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を高める方法。
- 加熱処理を、アブラナ科野菜のスラリー化物に対して15分間以上行う、請求項1に記載の方法。
- アブラナ科野菜が中島菜(Brassica campestris cultivar Nakajimana)である、請求項1又は2に記載の方法。
- 請求項1〜3のいずれかに記載の方法により、アンジオテンシン変換酵素阻害活性を高めたアブラナ科野菜。
- 請求項4に記載のアブラナ科野菜を含有する食品または飲料。
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