JP2007155748A - クロマトグラフィ用カラム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】クロマトグラフィ用カラムは、クロマトグラフィ用収着床42と、収着床42の上流にある共通の入口流路50と、共通の入口流路50に接続するように構成された第1の入口流体接続ポート48と、共通の入口流路50に接続するように構成された第2の入口流体接続ポート49と、を含む。共通の入口流路50は、第1の入口流体接続ポート48からの第1の移動相と第2の入口流体接続ポート49からの第2の移動相とを混合して1つに組み合わせられた移動相を形成するための流体混合要素51を含む。
【選択図】図4
Description
実施例1:標準のクロマトグラフ法を使用して注入負荷を増大させたことによる分離品質の変化
サンプル溶媒としてジメチルスルホキシド(DMSO)を使用して、ジフェンヒドラミン、オキシブチニン、およびターフェナジンを各成分につきミリリットル当たり20ミリグラムの濃度で組み合わせることによりサンプル混合物を調製する。図1に示す標準のクロマトグラフィ用システムを使用してサンプルを分離するが、この場合カラム13は、従来デザインの内径19mm×長さ30mmのカラムに直列に接続された、従来デザインの内径19mm×長さ10mmの保護カラムからなる。クロマトグラフィ用カラムには、標準の逆相C18収着剤(WatersのXTerra MS−C18、5ミクロン粒子)が充填されている。開始時には移動相組成がアセトニトリル5%/水95%であってpH10の重炭酸アンモニウム緩衝液を含有するものと共に、また終了時には移動相の組成がアセトニトリル90%/水10%であってpH10の重炭酸アンモニウム緩衝液を含有するものと共に、線形勾配溶離プロフィルを使用する。時間に対する移動相組成プロフィルを以下の表1に示す。流量を、1分当たり30ミリリットルに設定し、従来デザインの紫外線検出器を使用して、カラム溶離液をモニタする。
図2に示すようにクロマトグラフィ用システムを使用するが、カラム25と検出器26は実施例1で述べたものと同一である。取付け具24(図3に示す)は、カラム25の前に配置する。線形勾配溶離プロフィルは、1分当たり28.5ミリリットルの流量で勾配ポンプ21から送出される。負荷ポンプ22を1分当たり1.5ミリリットルの流量に設定し、第1の実施例と同様に、組み合わせた後の全流量を1分当たり30ミリリットルにする。時間に対する勾配組成を表1に示す。実施例1と同じ勾配組成を使用するが、この勾配に初期延期を付加することによって、負荷ポンプ22から導入する溶媒をインジェクタ23を介してポンピングすることが可能になり、それによって、勾配開始前にカラムにサンプルを完全に移送することが確実になる。実施例1で使用したものと同じサンプル混合物をシステムに注入する。
図5に示すようにクロマトグラフィ用システムを配置する。図5の構成は、例示的な実施形態の移動相希釈スキームを設けるために保護カラム55が一体的な二重入口設計(図4に示す)を含むこと以外は、図2で使用したものと同一である。この二重入口設計は、実施例2の取付け具24の代わりに使用される。サンプル組成、勾配溶離プロフィル、および全ての移動相流量は、実施例2で使用したものと同一である。
Claims (46)
- クロマトグラフィシステムでサンプルを分離する強化型クロマトグラフ法であって、
サンプル溶液を強移動相に注入してサンプル含有強移動相を形成するステップと、
サンプル含有強移動相を希釈してサンプル含有弱移動相を形成するステップと、
サンプル含有強移動相をクロマトグラフィカラムに通すステップと
を含む、強化型クロマトグラフ法。 - カラムのローディング容量を増大させる、請求項1に記載の強化型クロマトグラフ法。
- カラムのローディング容量を少なくとも2倍増大させる、請求項2に記載の強化型クロマトグラフ法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも5倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも10倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも20倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも30倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも60倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- 強化型クロマトグラフ法が、カラムのローディング容量を少なくとも80倍増大させる、請求項2に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相中の有機溶媒のパーセンテージが、サンプル含有強移動相中の有機溶媒のパーセンテージとは異なる、請求項1に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相中の有機溶媒のパーセンテージが、サンプル含有強移動相中の有機溶媒のパーセンテージ未満である、請求項10に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相中の有機溶媒のパーセンテージが、サンプル含有強移動相中の有機溶媒のパーセンテージよりも高い、請求項10に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のpHが、サンプル含有強移動相のpHとは異なる、請求項1に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のpHが、サンプル含有強移動相のpH未満である、請求項13に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のpHが、サンプル含有強移動相のpHよりも高い、請求項13に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のイオン強度が、サンプル含有強移動相のイオン強度とは異なる、請求項1に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のイオン強度が、サンプル含有強移動相のイオン強度未満である、請求項16に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相のイオン強度が、サンプル含有強移動相のイオン強度よりも大きい、請求項16に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相の温度が、サンプル含有強移動相の温度とは異なる、請求項1に記載の強化型方法。
- サンプル含有弱移動相の温度が、サンプル含有強移動相の温度未満である、請求項19に記載の強化型方法。
- 所定の流量および組成で強移動相を供給するための第1の流体ポンプと、
強移動相にサンプル溶液を注入してサンプル含有強移動相を形成するためのインジェクタと、
所定の流量および組成でサンプル含有強移動相に弱移動相を供給して、サンプル含有弱移動相を形成するための第2の流体ポンプと、
サンプルを分離するためのクロマトグラフィ用収着剤が入っているクロマトグラフィ用カラムと、
サンプル含有強移動相と弱移動相を組み合わせて、クロマトグラフィ用収着剤の前にサンプル含有弱移動相を形成するためのカラム取付け具と
を含む、クロマトグラフィシステム。 - カラム取付け具がクロマトグラフィ用カラムの上流に位置決めされる、請求項21に記載のシステム。
- カラム取付け具がクロマトグラフィ用カラムの入口端部に一体化した、請求項21に記載のシステム。
- カラム取付け具が、第1の流体ポンプに接続された第1のコンジットと、第2の流体ポンプに接続された第2のコンジットと、クロマトグラフィ用カラムの入口端部に接続された第3のコンジトットを含む、請求項21に記載のシステム。
- 第1のコンジットが、流体取付け具を第1の流体ポンプに接続するための接続機構を含む、請求項24に記載のシステム。
- 第2のコンジットが、流体取付け具を第2の流体ポンプに接続するための接続機構を含む、請求項24に記載のシステム。
- 第3のコンジットが、流体取付け具をクロマトグラフィ用カラムの入口端部に接続する接続機構を含む、請求項24に記載のシステム。
- 弱移動相が第1の流量を有し、強移動相が第2の流量を有し、サンプルがカラムに到達した後、第1および第2の流量が変化する、請求項21に記載のシステム。
- 弱移動相の流路に接続するように構成された第1のコンジットと、
サンプル含有強移動相の流路に接続するように構成された第2のコンジットと、
クロマトグラフィ用カラムに接続するように構成された第3のコンジットとを含む、クロマトグラフィ用カラムのカラム取付け具であって、
サンプルおよび強移動相を含むサンプル含有強移動相と弱移動相とを混合してサンプル含有弱移動相を形成し、サンプル含有弱移動相をカラムに通す、カラム取付け具。 - 第1のコンジットと第2のコンジットと第3のコンジットとの接合点で形成されたキャビティをさらに含む、請求項29に記載のカラム取付け具。
- 弱移動相とサンプル含有強移動相を混合するために、キャビティ内に配置された混合要素をさらに含む、請求項30に記載のカラム取付け具。
- カラム取付け具を流体ポンプに接続するために、第1のコンジット上に接続機構をさらに含む、請求項29に記載のカラム取付け具。
- カラム取付け具を流体ポンプに接続するために、第2のコンジット上に接続機構をさらに含む、請求項29に記載のカラム取付け具。
- カラム取付け具をクロマトグラフィカラムに接続するために、第3のコンジット上に接続機構をさらに含む、請求項29に記載のカラム取付け具。
- カラム取付け具がクロマトグラフィカラムの入口端部に一体的に形成された、請求項29に記載のカラム取付け具。
- クロマトグラフィ用収着床と、
収着床の上流にある共通の入口流路と、
共通の入口流路に接続するように構成された第1の入口流体接続ポートと、
共通の入口流路に接続するように構成された第2の入口流体接続ポートと
を含む、クロマトグラフィ用カラム。 - 共通の入口流路が、第1の入口流体接続ポートからの第1の移動相と第2の入口流体接続ポートからの第2の移動相とを混合して1つに組み合わせられた移動相を形成するための流体混合要素を含む、請求項36に記載のクロマトグラフィ用カラム。
- 1つに組み合わせられた移動相が、共通の入口流路を通して収着床に導入される、請求項37に記載のクロマトグラフィ用カラム。
- 第1の入口流体接続ポートが、カラムと流体ポンプとを接続するための接続機構を含む、請求項36に記載のクロマトグラフィ用カラム。
- 第2の入口流体接続ポートが、カラムと流体ポンプとを接続するための接続機構を含む、請求項36に記載のクロマトグラフィ用カラム。
- クロマトグラフィシステムにおいて、
強移動相を供給するための第1のポンプと、
サンプルを強移動相に注入して、サンプル含有強移動相を形成するためのインジェクタと、
弱移動相を供給するための第2のポンプと、
弱移動相とサンプル含有強移動相を混合して、サンプル含有弱移動相を形成するためのカラム取付け具と
を含む、溶媒送出サブシステム。 - 弱移動相の流路に取着するように構成された第1のコンジットと、サンプル含有強移動相の流路に接続するように構成された第2のコンジットと、クロマトグラフィ用カラムに接続するように構成された第3のコンジットとを有する流体コンジットを含む、パッケージカラム取付け具であって、
クロマトグラフィシステムでサンプルを分離する強化型方法の使用上の説明と共にパッケージにされたカラム取付け具。 - 所定の流量で弱移動相をサンプル含有強移動相に供給して、サンプル含有強移動相を希釈するように構成されたクロマトグラフィシステム用のパッケージポンプであって、クロマトグラフィシステムでサンプルを分離する強化型方法の使用上の説明と共にパッケージにされたパッケージポンプ。
- 前記ポンプと共にパッケージにされた請求項42に記載のカラム取付け具をさらに含む、請求項43に記載のパッケージポンプ。
- 強移動相および弱移動相のそれぞれが初期流量を有し、弱移動相の初期流量が鏡移動相の初期流量よりも多い、請求項1に記載の強化型方法。
- 弱移動相の初期流量が、強移動相の初期流量よりも少なくとも20倍多い、請求項45に記載の強化型方法。
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