JP2006208384A - 光学的スキャナを補正するための装置、それを製造する方法及びそれを利用して光学的スキャナを補正する方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】エキシマ形成の可能な分子が固定化されている基板を含む、光学的スキャナを補正するための装置、該装置を製造する方法及び該装置を利用して光学的スキャナを補正する方法である。
【選択図】図1
Description
種々の光学的スキャナが当業界に知られており、特に、アレイをスキャニングするための光学的スキャナが当業界に知られている。「アレイ」とは、空間的に定義されており、物理的に接近可能な方式で、それぞれ配列している別個のプローブまたは結合因子の集合を意味する。言い換えれば、基板表面に固定化され、前記基板表面上に多様なパターンで空間的に位置しうる複数個のプローブを有する基板を意味する。前記プローブには、蛋白質、核酸及び多糖類が含まれる。
本発明の補正装置から得られる蛍光データは、光学的スキャナのスケールファクタ、すなわち前記光学的スキャナの検出器の感度を検証し、必要ならば、前記検出器の感度を補正したり、調整したりするのに使われる。
本発明は、光学的スキャナの一つ以上のスキャニングステージ(すなわち、スキャニングステージと光学的レンズとの間の距離)を補正または調整する方法を提供する。該方法によって検出される光の強度を最適化するために、スキャンされる客体の表面に対するレーザの焦点(フォーカス)位置を調整することができる。
本発明は、また、スキャニング中に、生物重合体アレイのようなスキャンされる客体が置かれる、光学的スキャナの光学的ステージ(スキャニングステージ)が移動する速度を調整する方法を提供する。前記ステージは、スキャニング光線束と対応する特定の位置でスキャンされる客体を整列する。すなわち、使用時に、前記ステージは移動し、基板上の特定の線形アレイ領域のような、スキャンされる客体の領域に対応するように光学的スキャナを整列する。スキャナの焦点は、ステージの移動速度のようなステージと関連した係数によって変わりうる。例えば、ステージが速く移動しすぎたり、整列からはずれたりする場合、スキャンは、焦点からはずれるのである。
本実施例では、アミノ基で活性化された基板上に、化学式1の化合物(1−ピレンブチル酸γ−ヒドロキシスクシンイミドエステル)を反応させ、ピレンをシリコン基板上に固定化し、ピレンが固定化された基板を製造した。
まず、表面処理前に基板を周到に洗浄した。洗浄は、純粋アセトンと水とで行い、次に過酸化水素及び硫酸(1:3)からなるピラニア(piranha)溶液を使用して有機汚染物を除去した。最後に、多量の水とアセトンとで洗った後、乾燥した。前記基板の洗浄過程は、半導体製造工程で利用されるウェットステーションを利用し、ピラニア溶液は、硫酸槽を利用し、水で洗浄する過程は、QDR工程を利用した。それぞれの基板をテフロン(登録商標)(ポリ四フッ化エチレン)材質のシリコンウェーハキャリアに固定して洗浄工程を行った。洗浄の終わった基板は、スピンドライを利用して乾燥した。
前記シラン化基板上に、化学式1の化合物、すなわち1−ピレンブチル酸γ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを浸漬方法でコーティングした。まず、塩化メチレン溶液に1−ピレンブチル酸γ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを溶かして、浸漬溶液(0.5g 1−ピレンブチル酸γ−ヒドロキシスクシンイミドエステル/200ml+0.1mlトリエチルアミン)を製造した。浸漬溶液と基板とを反応容器に入れ、室温で5時間反応させた。反応が完了した後、浸漬溶液から基板を取り出した後に洗浄した。洗浄は、塩化メチレンで三回、エタノールで三回行い、それぞれの一回の過程は、10分間行った。洗浄が終わった基板は、乾燥後、基板に反応させた1−ピレンブチル酸γ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの量をAxon社のGenePix4000B蛍光スキャナを利用して定量した。スキャニングは532nmの光を照射し、570nmで蛍光強度を測定して得た。
実施例1で得られたピレンの固定化された基板のさまざまな特性を調べた。
前記基板の経時的な蛍光発光度を測定した。
実施例1で製造された基板を補正標準(calibration standard)として、Axon1とAxon2(Axon社、Genepix 4000Bモデル)とを使用し、PMT200ないしPMT700領域でスキャンし、蛍光データを得た後、PMTによる実験的な蛍光強度値を求めた。スキャンに使われた波長は、532nmであり、スキャニングの最中にPMT数値を200から700まで上げてスキャンする。PMTを上げるほど蛍光数値は強く発現した。それぞれのスキャン面積は2〜5mm2程度に調節した。
Claims (19)
- エキシマ形成の可能な分子が固定化されてなる基板を含む、光学的スキャナを補正するための装置。
- 前記分子は、ピレン、2−フェニルインドール及びそれらの誘導体であって蛍光体である分子から構成される群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記基板は、シリコンウェーハ、ガラスまたはプラスチック物質であることを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 前記分子が固定化されてなる層の厚さは、1ないし100Åの範囲にあることを特徴とする請求項1に記載の装置。
- 作用基でコーティングされている基板と活性化されたエキシマ形成の可能な分子とを反応させ、前記分子を基板上に固定化するステップを含む、光学的スキャナを補正するための装置を製造する方法。
- 前記作用基は、プトレシン、スペルミジンまたはスペルミンから由来するアミノ基であることを特徴とする請求項5に記載の方法。
- 前記分子は、下記化学式1の化合物であることを特徴とする請求項5に記載の方法:
- (a)請求項1から請求項4のうちのいずれか1項に記載の補正装置の表面に一つ以上の光源から照射するステップと、
(b)前記補正装置の表面から蛍光データを得るステップと、
(c)前記蛍光データに基づいて光学的スキャナを補正するステップとを含む、光学的スキャナを補正する方法。 - 前記照射するステップは、前記光学的スキャナの光増幅管によって検出可能な電磁気的スペクトルの部分の光で前記補正装置の表面を照射するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記照射するステップは、紫外線、可視光線及び赤外線よりなる群から選択された波長領域で、前記補正装置の表面に照射するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記蛍光データを得るステップは、前記エキシマ形成の可能な分子から放射された光の強度と関連した信号を検出するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記補正するステップは、前記光学的スキャナのスケールファクタを補正するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記スケールファクタ補正は、前記光学的スキャナの光学検出器の感度を調整するステップを含むことを特徴とする請求項12に記載の方法。
- 前記補正するステップは、前記光学的スキャナの焦点位置を補正するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記焦点位置の補正は、前記光学的スキャナのスキャニングステージとレンズとの間の距離を調整するステップを含むことを特徴とする請求項14に記載の方法。
- 前記補正するステップは、前記光学的スキャナの動的焦点を補正するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記動的焦点の補正は、前記光学的スキャナのスキャニングステージが移動する速度を調整するステップを含むことを特徴とする請求項16に記載の方法。
- 前記補正するステップは、強度イメージの振動量を決定し、前記振動データによって前記スキャニングステージの速度を調整するステップを含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 得られた蛍光データからバックグラウンド信号を引き、バックグランド補正された値を得るステップをさらに含むことを特徴とする請求項8に記載の方法。
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