JP6905838B2 - 生体分子分析装置および生体分子分析方法 - Google Patents
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- 蛍光標識を含んだ抗原抗体複合体を含む試料溶液が注入されるフローセルを載置するステージと、
前記蛍光標識を励起させるための励起光を発生させる光源と、
前記試料溶液に焦点合わせ可能な対物レンズと、
前記対物レンズの瞳面に配置される位相板と、
前記励起光を前記試料溶液に照射することにより前記蛍光標識が発する蛍光による輝点像を撮像する撮像装置と、
画像処理を行う計算機とを有し、
前記蛍光を前記対物レンズ及び前記位相板を通して前記撮像装置の撮像素子に結像させて得られる中間画像は、前記位相板を挿入することなく前記撮像装置の撮像素子に結像させる画像よりも劣化するとともに、前記位相板の形状は前記劣化の仕方が焦点はずれ量を変えても変化しない形状とされており、
前記計算機は、前記中間画像をデコンボリューションして最終画像を生成し、
前記光源は、前記励起光が前記位相板及び前記対物レンズを通して前記試料溶液に照射されるよう配置される生体分子分析装置。 - 請求項1において、
前記位相板は、光軸に対して回転対称な輪帯構造をもつ位相板である生体分子分析装置。 - 請求項1において、
前記位相板は、三次位相関数を実現した位相板である生体分子分析装置。 - 請求項1において、
ダイクロイックミラーを有し、
前記ダイクロイックミラーは、前記光源からの前記励起光を前記対物レンズに向けて反射もしくは透過させて前記試料溶液に照射し、前記対物レンズ及び前記位相板を通った前記蛍光を透過または反射させて前記撮像装置の撮像素子に結像させるよう配置された生体分子分析装置。
- 請求項4において、
前記光源から発生される光の波長を所定の波長に制限する励起フィルタと、前記撮像装置に結像する前記蛍光以外の波長の光を除く吸収フィルタとを有する生体分子分析装置。 - 請求項1において、
前記フローセルは少なくとも前記試料溶液を注入する流路が形成される基板が樹脂である生体分子分析装置。 - 請求項6において、
前記フローセルの前記基板の表面に微細構造が形成されている生体分子分析装置。 - 瞳面に位相板が配置された対物レンズを有する光学系を有する生体分子分析装置を用いた生体分子分析方法であって、
蛍光標識を含んだ抗原抗体複合体を含む試料溶液が注入されるフローセルをステージに載置し、
第1の計測視野にて前記対物レンズの焦点合わせを行い、
前記位相板及び前記対物レンズを通して前記試料溶液に励起光を照射し、
前記励起光を前記試料溶液に照射することにより前記蛍光標識が発する蛍光を前記対物レンズ及び前記位相板を通して撮像素子に結像させて中間画像を得、
前記中間画像をデコンボリューションして最終画像を得、
前記中間画像は、前記位相板を挿入することなく前記撮像素子に結像させる画像よりも劣化するとともに、前記位相板の形状は前記劣化の仕方が焦点はずれ量を変えても変化しない形状とされている生体分子分析方法。 - 請求項8において、
前記第1の計測視野と異なる第2の計測視野にステージを移動させ、
前記対物レンズは前記第1の計測視野で行った焦点合わせによる設定のまま、前記位相板及び前記対物レンズを通して前記試料溶液に前記励起光を照射し、前記励起光を前記試料溶液に照射することにより前記蛍光標識が発する前記蛍光を前記対物レンズ及び前記位相板を通して前記撮像素子に結像させることによりスキャニング撮影を行う生体分子分析方法。 - 請求項8において、
前記フローセルとして、少なくとも前記試料溶液を注入する流路が形成される基板が樹脂であるフローセルを用いる生体分子分析方法。 - 請求項10において、
前記フローセルとして、前記基板の表面に微細構造が形成されているフローセルを用いる生体分子分析方法。 - 請求項10〜11のいずれか一項において、
前記試料溶液は、抗体標識磁気微粒子と蛍光標識抗体と抗原とが結合した抗原抗体複合体を含み、
前記抗原抗体複合体は磁石により前記フローセルの流路の底面に固定される生体分子分析方法。 - 請求項10〜11のいずれか一項において、
前記試料溶液は、前記フローセルの流路の底面に固定された抗体と蛍光標識抗体と抗原とが結合した抗原抗体複合体を含む生体分子分析方法。 - 請求項13において、
前記フローセルの流路の底面に抗体固定反応の起点となる官能基を含んだ分子からなるゲルが塗布された生体分子分析方法。
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